ECOTOXICOLOGIA

DEFINICIONES:
 Es la ciencia que estudia los efectos tóxicos de
sustancias químicas y agentes físicos sobre los
organismos vivos, especialmente sobre poblaciones
y comunidades dentro de ecosistemas definidos.
Incluye el estudio de los caminos de transferencia de
estos agentes y sus interacciones con el ambiente
(TRUHAUT, 1977; BUTLER, 1978)

 Es la ciencia que investiga los efectos de sustancias

sobre los organismos. El peligro sobre las
poblaciones de animales y plantas puede ser
determinado mediante el uso de datos existentes,
tomados del ambiente (Ecotoxicología retrospectiva)
o mediante el desarrollo de ensayos específicos
(Ecotoxicología prospectiva) (RUDOLPH and BOJE,
1986)

 Es la ciencia que se propone la la evaluación, el

monitoreo y la predicción del destino y efectos de
xenobióticos en el ambiente (MORIARTY, 1988)

 Es la ciencia que intenta predecir los impactos de las

sustancias químicas sobre los ecosistemas (LEVIN et
al., 1989)

 Es el estudio de los efectos adversos o dañinos

sobre los ecosistemas (WALKER et al., 1996)
 ECOTOXICOLOGIA

OBJETIVOS:

 Se propone la evaluación, monitoreo y predicción del

destino y los efectos de xenobióticos en el ambiente
(MORIARTY, 1988)

 Está motivada por el deseo de mantener las

estructura y función naturales de los ecosistemas
INTEGRIDAD DEL ECOSISTEMA (HARRIS et al., 1990)
[Los ecosistemas son dinámicos; luego, puede resultar no
natural mantener el “status quo”]

 La investigación ecotoxicológica resulta ser también

la investigación del ecosistema (MATHES et al.,
1991)

 Se propone proveer una base científica que permitirá

que las sustancias sean evaluadas con una cantidad
razonable de esfuerzo y costo. La información
obtenida provee la base para evaluaciones que
permitan determinar qué sustancias podrán ser
liberadas al ambiente, cuáles de ellas serán
ambientalmente tolerables y n qué cantidades
(RÖMBKE and MOLTMANN, 1997)
 ECOTOXICOLOGIA

Es el estudio de la relación dosis o concentración

/ efecto de tóxicos liberados al ambiente sobre los
sistemas bióticos incluyendo los niveles de
organización inferiores y superiores al nivel de
organismos

DAÑO AL ECOSISTEMA

 Involucra tanto la estructura como la función del

sistema
 La función sólo es posible si se considera la
estructura
 La estructura y la función no pueden ser
consideradas aisladamente
 Importancia de las relaciones tróficas (transferencia
de energía y nutrientes)

TOXICOLOGIA Y
ECOTOXICOLOGIA
TOXICOLOGIA:

 Introducción directa del tóxico en el organismo

 Focaliza su atención sobre una única especie,
el hombre
 Dosis (DL, DE - tiempo)

ECOTOXICOLOGIA:

 Introducción del tóxico en el medio

 Focaliza su atención sobre toda la biota
(estructura y función del ecosistema)
 Considera los procesos de:
 Transformación
 Degradación
 Secuestración
 Redistribución
 Bioacumulación
 Concentración (CL, CE - tiempo)

TOXICOLOGIA ECOTOXICOLOGIA
COMPUESTO A SER ENSAYADO

ADMINISTRACION

A través del ALIMENTO, INYECCION Introducción en el MEDIO

INHALACION (DOSIS) DE ENSAYO
(CONCENTRACION)

PARTICION
TRANSFORMACION
DEGRADACION en el medio

CAPTURA por organismos

TRANSPORTE - METABOLISMO
dentro de organismos

REACCION CON EL SITIO SENSIBLE O BLANCO

en organismos

EFECTOS

expresados por el ORGANISMO expresados por

ORGANISMOS

expresados por

POBLACION

expresados por
COMUNIDAD

expresados por
ECOSISTEMA

QUIMICA AMBIENTAL

La detección de una sustancia no es evidencia de sus

efectos potenciales. Su relevancia ecotoxicológica es
sujeto de controversia.

 Aporta evidencia cuantitativa de la presencia de la

sustancia potencialmente tóxica = ANALISIS DE
RESIDUOS
 Estudia los mecanismos y modelos de transporte, el
destino final y el impacto de los xenobióticos en el
ambiente abiótico (KORTE, 1980, 1987)

Centra su atención en la sustancia química, su

ingreso, presencia (concentración), transporte, destino
y procesos de transformación en el medio abiótico
(BOURDEAU et al., 1989)

Se centra más directamente en el destino de los

productos químicos desde el momento de su
aplicación hasta que alcanzan a su receptor biológico
(STEINEMANN et al., 1990)

ECOTOXICOLOGIA (en sentido técnico):

 Estudia los efectos (a nivel infraindividual, individual,

supraindividual), mecanismos de acción y
transporte, metabolismo y mecanismos de
detoxificación de los xenobióticos sobre el medio
biótico

DEFINICIONES

ECOTOXICOLOGIA ACUATICA:
  Es el estudio cuali y cuantitativo de los
efectos adversos de xenobióticos sobre los
ecosistemas acuáticos

CONTAMINANTE:

 Sustancia introducida en el ambiente como

resultado, por lo menos en forma parcial, de
la actividad humana y que produce efectos
adversos no deseados sobre los organismos
individuales y sobre el ecosistema

ECOTOXICOLOGIA

 ECOTOXICOLOGIA PROSPECTIVA O PREDICTIVA:

 Evaluación de la toxicidad antes de la producción y
comercialización del producto

 ECOTOXICOLOGIA RETROSPECTIVA:
  Evaluación de la toxicidad ante la indicación cierta o
sospecha de que el xenobiótico produce efectos adversos
sobre el ecosistema

 OBJETIVOS DEL ENSAYO DE TOXICIDAD:

 Investigación básica
 Criterio de calidad de agua
 Evaluación del impacto ecotoxicológico o del riesgo
 Monitoreo de un cuerpo de agua

 IMPACTO ECOTOXICOLOGICO:
 Interacción entre el agente tóxico y el sistema biótico que
conduce a la interrupción de la función armónica del
sistema
 Cadena causal: agente - receptor - efecto
 Se manifiesta cuando se exceden las variaciones normales
de las funciones del sistema

DEFINICIONES
TOXICIDAD:
 Es la capacidad de una sustancia de causar algún
efecto nocivo sobre organismos vivos

 Depende de:
  Cantidad administrada o absorbida
 Vía de ingreso al organismo
 Distribución a lo largo del tiempo después de su
administración
 Naturaleza y severidad del daño producido
 Tiempo necesario para producir el efecto

RIESGO:
 Es la frecuencia esperable de efectos adversos
como consecuencia de la exposición al xenobiótico

SEGURIDAD:
 Se establece sobre la base del riesgo socialmente
“aceptable”, considerando las frecuencias
esperadas de los efectos adversos y de su severidad
sobre el hombre y el ecosistema

Ecosistemas

Composición de la comunidad

Cambios en la población

Respuestas a nivel de organismo individual

 Cambios fisiológicos

Cambios bioquímicos

Contaminante

Aumento del tiempo de respuesta

Aumento de la dificultad de vinculación a productos químicos

específicos

Aumento de la importancia ecológica

Relaciones de vinculación entre respuestas de diferentes niveles de

organización

NIVELES DE ORGANIZACION BIOLOGICOS
Características Estructurales y Funcionales

NIVEL ESTRUCTURA FUNCION

Descripción de formas en ciertos Evaluación durante un

segmentos de tiempo prolongado período de tiempo
CELULAS / Moléculas, membranas, tejidos, Crecimiento, metabolismo,
ORGANOS caminos metabólicos, tipos de conversión energética,
células, tipo de órganos detoxificación

Especie, habitat, edad, estadío, sexo Metabolismo, crecimiento y

ORGANISMO
desarrollo, reproducción, salud,
mortalidad, concentración en
tejidos, comportamiento

POBLACION Presencia, número de individuos, Fertilidad, reproducción,

densidad, dispersión, pirámide de eficiencia / producción
edades, relación de sexos

COMUNIDAD Número y composición de especies, Regulación, función

relaciones de dominancia

ECOSISTEMA Ubicación geográfica, clima, tipo, Resiliencia, estabilidad.

sucesión, equilibrio Degradación,, filtración,
producción primaria,
bioretención

TOXICO

 Es el agente que puede producir un efecto

adverso
 Daño referido a la estructura y función del
sistema
 La introducción puede ser:
  deliberada (efluentes)
 accidental (derrames)
 El sitio de liberación es:
 no puntual
 puntual
 La cantidad liberada debe superar un nivel
umbral para que se manifieste el efecto
 Se establece la relación concentración /
respuesta
 Duración de la exposición
 Ensayos de toxicidad

TIPOS DE TOXICOS

 Según su modo de acción:

 No selectivos

 Selectivos
 Dificultad para establecer
interpolaciones entre especies
 Mecanismos:
  Presencia o ausencia de sitios
receptores
 Alteración en los procesos de
distribución del tóxico

 Relaciones estructura / actividad (QSAR)

TIPOS DE CONTAMINANTES

● IONES INORGANICOS
● Metales pesados : no biodegradables
● Aniones: nitratos
● Fosfatos

● COMPUESTOS ORGANICOS
● Hidrocarburos
● Alcanos, alquenos, alquinos

● Aromáticos

● Bifenilos policlorados (PCBs)

● Dibenzodioxinas policloradas (PCDDs)
● Dibenzofuranos policlorados (PCDFs)
 ● Bifenilos polibrominados (PBBs)
● Plaguicidas
● Detergentes
● Clorofenoles

● COMPUESTOS ORGANOMETALICOS

● ISOTOPOS RADIOACTIVOS

● GASES
● Ozono
● Clorofluorocarbonos (CFCs)
● Oxidos de carbono: CO2
● Oxidos de nitrógeno: NO, NO2, NOX
● Oxidos de azufre: SO2
CLASIFICACION DE PLAGUICIDAS

● Según organismo blanco

 PLAGUICIDA ORGANISMO BLANCO

Acaricidas Acaros y termitas

Algicidas Algas

Bactericidas Bacterias

Fungicidas Hongos

Herbicidas Plantas, usualmente malezas terrestres o

acuáticas

Insecticidas Insectos

Molusquicidas Moluscos (caracoles y babosas)

Nematicidas Nematodes (parásitos externos)

Rodenticidas Roedores

Termiticidas Termitas

● Según tipo de formulación

 PLAGUICIDA CARACTERISTICAS

Sprays Insecticidas, herbicidas o fungicidas como

concentrados emulsificables, líquidos miscibles en
agua, polvos solubles en agua (mojables), soluciones
oleosas

Polvos Insecticidas y fungicidas como agentes no diluídos,

aerosoles de polvos

Granulados Insecticidas, herbicidas y algicidas bajo la forma de un

“carrier” (transportador) inerte impregnado con el
plaguicida

Coatings Insecticidas y fungicidas para tratamiento de semillas

Aerosoles Insecticidas. Repelentes y desinfectantes bajo la forma

de spray, para aplicación en interiores

Fumigantes Líquidos evaporables o gases para tratamiento de

suelos y control de plagas en almacenajes con efecto
nematicida e insecticida

Cebos Prácticamente, sin liberación del i.a. en el ambiente; el

tóxico es ingerido por el organismo blanco (insectos,
moluscos y roedores) atraído por el señuelo

Formulaciones Insecticidas microencapsulados, lacas para pinturas y

de liberación bandas de resina para uso en interiores
lenta

● Según estructura química

INSECTICIDAS HERBICIDAS FUNGICIDAS

● Organoclorados Algunos criterios usados para ● Inorgánicos

 (hidrocarburos la clasificación: (Sulfuro, cobre o
clorados) mercurio)
● En relación a la época de
● Organofosforados siembra del vegetal a ser ● Orgánicos
(ésteres de ácido protegido (ditiocarbamatos)
fosfórico)
● En relación al mecanismo ● Sistémicos
● Carbamatos de exposición (vía suelo u (bencimidazoles)
hojas)
● Piretroides naturales ● Antibióticos
y sintéticos ● En relación al modo de
acción (herbicidas de (Existe gran
● Dinitrofenoles contacto, sistémicos) heterogeneidad
química)
● Organotinas ● En relación a la estructura
química:
● Microbianos
● Acidos fenoxialifáticos

● Nitroanilinas

● Ureas sustituídas

● Carbamatos y
tiocarbamatos

● Triazinas (heterocíclicos
nitrogenados)

● Derivados del fenol y

dinitrofenoles

BIODISPONIBILIDAD DE TOXICOS

 En solución
 Adsorbidos sobre:

 Sólidos en suspensión
 Sedimentos
 Biota

 Incorporados a la biota

CONCENTRACION DE TOXICOS
EN EL AMBIENTE

Concentración TOXICO
Propiedades físicas
 Transporte Propiedades
químicas
Fuentes
Tasa de ingreso

Transformación ECOSISTEMAS
Propiedades físicas
Destino Propiedades
químicas

TRANSPORTE

 Involucra, generalmente, múltiples medios:

aire, agua, suelo
 Numerosos modelos, desde difusión simple
a ecuaciones multidimensionales complejas

 AGUA:
  Varios modelos distintos: físiscos,
matemáticos, etc.
 Caracterizados por:
 Simulación de movimientos del agua,
 Concentración o tasa de carga del
contaminante
 Dimensionalidad:
 una (mayoría)
 dos (algunos)
 tres o más (muy pocos)

MEDIOS Y COMPARTIMIENTOS AMBIENTALES

MEDIO COMPARTIMIENTOS

AIRE ● Atmósfera
● Partículas en aire
● Aerosoles
● Nubes (vapor)
● Biota
 AGUA ● Aguas superficiales
(MEDIO ACUATICO) ● Sedimentos
● Sólidos en suspensión
● Agua subterránea
● Biota

● Ambiente marino
● Ambiente dulceacuícola
● Ambientes salobres

TIERRA ● Suelo
(MEDIO TERRESTRE) ● Agua retenida entre los poros del
suelo
● Atmósfera del suelo
● Vegetación superficial
● Biota del suelo

PRINCIPALES RUTAS DE INGRESO DE CONTAMINANTES

ORGANICOS EN LOS ORGANISMOS

TIPO DE RUTA DE INGRESO FUENTE DE CONTAMINANTES

ORGANISMO
Sistema digestivo Alimento y agua ingeridos
Vertebrados
Terrestres Piel Superficies contaminadas

Pulmones Aerosoles y partículas en aire

Vapor; gotas y partículas en aire
Invertebrados Tracto alimentario Alimento y agua
terrestres
Cutícula (insectos) Superficies contaminadas
Paredes del cuerpo (lombrices) Ambiente contaminado (suelo)

Tráqueas (artrópodos), vías aéreas Gotas y partículas en aire

Peces Branquias Contaminantes disueltos o

suspendidos en agua y
sedimentos

Sistema digestivo Alimento

Mamíferos Sistema digestivo Alimento
acuáticos y Cantidades pequeñas de agua
aves ambiental o agua ingerida (aves)

Anfibios Sistema digestivo Alimento

Cantidades pequeñas de agua
ingerida

Piel Contaminantes disueltos o

suspendidos en agua y
sedimentos
Invertebrados Tracto alimentario Alimento
acuáticos Agua ingerida

Superficies respiratorias Contaminantes disueltos o

suspendidos en agua y
sedimentos
Plantas Hojas Contaminantes en gotas o
partículas
Vapores

Raíces Contaminantes disueltos en agua

del suelo

CRITERIOS PARA EL ESTABLECIMIENTO

DE PRIORIDADES EN LA EVALUACION
DE TOXICOS

TIPOS DE XENOBIOTICOS:
 Consumidos directamente por el hombre
 Liberados directamente al ambiente
  Contaminantes de otros productos

CARACTERISTICAS:
 Indicación cierta o sospecha de alta
toxicidad
 Alta persistencia en el ambiente
 Capacidad para inhibir mecanismos de
detoxificación de organismos vivos
 Acumulación potencial en la biota y en el
ambiente
Tipo y tamaño de las poblaciones potencialmente

DEFINICIONES
 DOSIS: Es la cantidad de sustancia administrada a un
organismos, expresada como unidad / peso corporal

 CONCENTRACION: Es la cantidad de sustancia

aplicada en el medio, expresada como unidad de
peso o volumen / volumen del medio

 EFECTO: Es el cambio biológico producido tanto en

el nivel de organismo individual como en niveles de
 organización inferiores o superiores al individuo,
asociado a la exposición al tóxico

 RESPUESTA: Proporción de la población expuesta al

tóxico que manifiesta el efecto definido

 EFECTO CUANTAL: No medible mediante una escala

de intensidad o severidad graduada; se expresa
como “presente” o “no presente”

EFECTO NO CUANTAL: Medible mediante una escala de

intensidad graduable

EFECTOS
AGUDO:
 Corto tiempo de exposición (horas, días)
 Severidad (mortalidad)
 Determinación de la concentración que causa la mortalidad del 50%
de la población expuesta (CL50)

CRONICO, SUBCRONICO:
 Exposición simple o exposiciones repetidas de largo tiempo de
duración
 Tiempo de aparición de los efectos
 Efectos seleccionados:
 Letal o subletal
 Cambios en el comportamiento
 Cambios fisiológicos
  Cambios bioquímicos
 Cambios histológicos
 Reversible - irreversible (ensayos de recuperación)

 INTERACCION por exposición a mezclas de tóxicos

 EFECTO LETAL:
 Causa la muerte por acción directa como consecuencia de la
exposición a una determinada concentración del agente tóxico

 EFECTO SUBLETAL:
 Se produce por debajo del nivel que causa la muerte directamente,
como resultado de la exposición a una determinada concentración
del agente tóxico

EFECTOS
 CURVA CONCENTRACION-EFECTO:
 Expresa la relación entre concentración y magnitud de un efecto
determinado, tanto a nivel individual como poblacional

 CURVA CONCENTRACION-RESPUESTA:
 Expresa la relación entre concentración y proporción de individuos
que responden a un efecto determinado

MEZCLA DE AGENTES TOXICOS

La acción conjunta puede ser:
 ADITIVA:
Magnitud del efecto o respuesta numéricamente igual a la
suma de los efectos o respuestas de tóxicos individuales
 COMBINADA:
 Los tóxicos producen efectos diferentes o tienen distintos
modos de acción
 MAYOR QUE LA ADITIVA - SINERGISMO:
La toxicidad de la mezcla es mayor que la esperada por la
simple suma de la toxicidad de los tóxicos individuales
 MENOR QUE LA ADITIVA - ANTAGONISMO:
 La toxicidad de la mezcla es menor que la esperada por la
simple suma de la toxicidad de los tóxicos individuales

CRITERIO PARA LA SELECCION DE

EFECTOS

 Inequívoco
 Relevante
 Rápidamente observable
 De fácil descripción
 Mensurable
 Biológicamente significativo
 Reproducible
 “Screening tests”: mortalidad
 Subletalidad:
 Crecimiento
 Reproducción
 Cualitativo
 Cuantitativo
 Se establecen como índices de toxicidad:
 CL50,CE50 - tiempo
TEMPORAL SCALE

100000 years CAMBIO

CLIMATIC
O
10000 years

1000 years ROUTINE ACID

EFFLUENT DEPOSITION
S
100 years

10 years

1 year PESTICIDE
USE
1 month SPILLS

1 day PESTICIDE APPLICATION

1 second 1 μm 1 mm 1m 1 km 1000 km 10000 km

SPATIAL SCALE

ARRANGEMENT OF A VARIETY OF ANTHROPOGENIC HAZARDS ON SPATIAL AND TEMPORAL SCALES (Suter, 1994)
TEMPORAL SCALE

100000 years REGIONAL

DYNAMICS
10000 years ECOSYSTEM
DYNAMICS

1000 years MICRO-

ORGANISM
POPULATION
100 years

10 years

1 year POPULATION
DYNAMICS

1 month MACRO-
ORGANISM
PHYSIOLOGY
1 day MICRO-
ORGANISM
PHYSIOLOGY
1 second 1 μm 1 mm 1m 1 km 1000 km 10000 km

SPATIAL SCALE

ARRANGEMENT OF LEVELS OF BIOLOGICAL ORGANIZATION ON SPATIAL AND TEMPORAL SCALES (Suter, 1994)
 DEFINICIONES

BIOENSAYO: Método para evaluar la potencia relativa

de un agente sobre organismos vivos, mediante la
comparación del efecto del agente con el de una
solución patrón o “standard”

ENSAYO DE TOXICIDAD: Permite la detección y

evaluación de la capacidad de un agente de producir
efectos tóxicos adversos sobre organismos vivos
 ENSAYOS DE ECOTOXICIDAD

CARACTERISTICAS COMUNES:

 Exposición de grupos de organismos

 misma población
 en buenas condiciones de salud
 con aclimatación previa
 Mantenimiento de condiciones ambientales
constantes y estandarizadas
 Exposición a concentraciones graduadas del
agente
 Grupos control adecuados
 Observación de signos del efecto presentes
 Medición y registro detallado de efectos
biológicos en grupos control y tratados
 Observación patológica de grupos control y
tratados
 Análisis estadístico de resultados

TIPOS DE ENSAYOS
  DE LABORATORIO: Reproducción parcial de
las condiciones reales del ambiente

 DE CAMPO: Organismos mantenidos en

contenedores adecuados (limnocorrales)
sometidos a las condiciones del medio

Según sea la renovación del medio:

 ESTATICO: Se establece la concentración del

tóxico al principio del ensayo; el medio no se
renueva

 SEMIESTATICO: Renovación periódica del medio

de ensayo y del tóxico

 FLUJO CONTINUO: Renovación contínua del

medio de ensayo y tóxico

TIPOS DE ENSAYOS

Según el tiempo de exposición:

 AGUDO: Período de exposición corto en
relación al tiempo de generación del organismo
de prueba

 SUBCRONICO: El período de exposición cubre,

al menos, el 10% del tiempo de generación del
organismo de prueba

 CRONICO: El período de exposición cubre, al

menos, una generación del organismo de
prueba

 DE REPRODUCCION: El período de exposición

cubre, al menos, tres generaciones del
organismo de prueba

 DE RECUPERACION: El período de exposición

es seguido por la transferencia y observación en
un medio no tóxico

METODOS DE ENSAYO (1)

 Concentración de efecto no observado (NOEC)
 Mínima concentración de observación de efecto
(LOEC)
ENSAYOS DE TOXICIDAD AGUDA

 Peces: mortalidad
 Invertebrados: inmovilidad
 Microalgas: crecimiento
 Indices: CL50 - CE50 - tiempo
 Ensayo independiente del tiempo (TI) (CL50 - CE50
incipiente)

ENSAYOS DE TOXICIDAD CRONICA

 Ciclo de vida completo

 Ciclo de vida parcial
 Concentración máxima aceptable de tóxico (MATC)
 Valor crónico (VC)
 NOEC < VC < LOEC

METODOS DE ENSAYO (2)

ENSAYOS CON ESTADIOS TEMPRANOS DE VIDA

  Huevo - embrión - larva - alevino
 Duración: 1 ó 2 meses

ENSAYOS DE BIOACUMULACION

 Compuestos polares (hidrofílicos)

 Compuestos no polares (hidrofóbicos)
 Factor de bioacumulación (BCF)
 Coeficiente de partición n-octanol - agua
 Bioconcentración - biacumulación -
biomagnificación
 INCERTEZAS EN DISTINTOS NIVELES DE INVESTIGACION
TIPO DE ENSAYO / INCERTEZAS POSIBLES EN EXTRAPOLACION
FUENTE DE DATOS
ENSAYOS Influencia de condiciones ambientales sobre la función concentración - respuesta y el régimen de exposición
MONOESPECIFICOSDE Un cierto estadío del ciclo de vida como representativo del ciclo completo
LABORATORIO Pocas especies seleccionadas por su facilidad de mantenimiento como representativas de la comunidad natural
No se considera la relación con otras especies
Los efectos a nivel individual son aplicados a nivel poblacional sin mecanismos de compensación o ajustes por
comportamiento
MICROCOSMOS Relaciones artificiales entre especies
Se excluyen importantes relaciones tróficas
Los efectos de borde pueden causar alteraciones en resultados
No se considera la heterogeneidad espacial de los ecosistemas naturales en los que se toman las muestras
El enfoque y la metodología se modifican sobre la base de su aplicabilidad y replicabilidad más que en relación
con su acercamiento a los efectos reales
Se excluyen factores climáticos naturales
MESOCOSMOS O Se considera un ecosistema específico como representativo de un tipo general de ecosistema
MANIPULACION DE El "stress" generado por la aplicación de una sustancia química determinada se supone representativo del
ECOSISTEMAS "stress" generado por sustancias no ensayadas
NATURALES No se consideran los efectos de condiciones físicas ambientales y climáticas ni de eventos históricos sobre el
comportamiento del ecosistema
Replicabilidad insuficiente
Dificultad en recopilar datos relevantes para la determinación de la relación concentración - respuesta en el
ecosistema
Prolongada duración del experimento, relacionado con el tiempo requerido por el ecosistema para manifestar una
reacción adecuada, medible y recuperable
MODELOS Formulaciones matemáticas imprecisas o incorrectas
Efectos basados en una poco uniforme distribución de los organismos en el campo (agregación)
Insuficientes bases de datos para la verificación del modelo
El modelo es aplicado a un nivel que excede el alcance de su capacidad a fin de obtener una evaluación relevante
Sensibilidad de los resultados frente a la variación de los parámetros seleccionados o del diseño del modelo.
 DISEÑO DE ENSAYOS

 Acercamiento por fases (TIER)

 Ensayos simples de corto tiempo de

exposición
 Ensayos más complejos

 Controles concurrentes

 Control de agua no tratada

 Ensayo de control de solventes
 Ensayo de referencia (producto químico de
referencia)
 CRITERIOS PARA LA SELECCION DE
PROTOCOLOS DE ENSAYO

 Aceptación de la comunidad científica

 Capacidad de predicción de los efectos de un
amplio rango de tóxicos sobre diferentes
organismos
 Base estadística - reproducibilidad
 Rango de concentración - duración de la
exposición
 Datos obtenidos utilizables para la evaluación
de riesgo
 Costo - eficiencia
 Sensibilidad - realismo
 Ensayos uniespecíficos
 Ensayos multiespecíficos
 Experimentos de laboratorio en condiciones
controladas
 Experimentos de campo con un alto número de
variables
 Validación
 ESCALAS DE OBSERVACION EN
ENSAYOS DE TOXICIDAD

Espacial Temporal Organizacional

Estructural Funcional

Ensayo de Horas - días Organismo Crecimiento

laboratorio Reproducción
uniespecífico
(cc - m2)

Microcosmos Días - meses Organismo Producción

(cc-m³) Población Ciclo de vida
Comunidad Cadena trófica

Ensayos de Días - años Idem Idem

campo

Monitoreo Años ídem Ídem

ambiental

MEDIO TERRESTRE - ENSAYOS

EXPOSI- ORGANISMO DE EFECTOS OBSERVADOS
CION PRUEBA
Lombriz de tierra Mortalidad (CL50)
AGUDA
Ave (dosis oral única) Mortalidad (CL50)

Ave (dietaria) Mortalidad, peso corporal,

comportamiento, tasa de
alimentación

Abejas (por contacto) Mortalidad (CL50)

Abejas (oral) Mortalidad (CL50)

Organismos benéficos Mortalidad, tasa de alimentación

Ave (reproducción) Mortalidad, tamaño al alcanzar el

CRONICA acoplamiento, cambios
morfológicos de huevos, efectos
sobre crías

Microflora Actividad deshidrogenasa,

respiración a corto plazo, ciclo
del nitrógeno

Lombriz de tierra Reproducción (NOEC)

Organismos benéficos Reproducción (NOEC)

 MEDIO ACUATICO - ENSAYOS

EXPOSI- ORGANISMO DE PRUEBA EFECTOS OBSERVADOS

CION

Dos especies diferentes de peces Mortalidad (CL50 – 96 hs)

dulceacuícolas,
Cnesterodon decemmaculatus,
Poecilia reticulata

AGUDA Microcrustáceo del zooplancton Inmovilidad (CE50 – 48 hs)

(Daphnia sp.), Daphnia magna,
Daphnia spinulata

Alga dulceacuícola, Scenedesmus Inhibición del crecimiento (CI50 – 96 hs)

acutus, S. quadricauda,
Selenastrum capricornutum

Crustáceo bentónico, Hyalella Mortalidad o inmovilidad (CL50 – 10, 14 días,

curvispina, Hyalella azteca CE50)
 Pez dulceacuícola Mortalidad de alevinos y juveniles, peso corporal, longitud
(estadíos tempranos del cuerpo, tasa de crecimiento
del ciclo de vida)

Pez dulceacuícola Mortalidad de adultos, mortalidad de alevinos, tiempo de

(reproducción) puesta, éxito en la eclosión, peso y longitud del cuerpo de
adultos y alevinos, tasa de crecimiento, comportamiento
CRONICA

Microcrustáceo del Inmovilidad de adultos, número de huevos / hembra,

zooplancton (ciclo de número de efipios / hembra, éxito en la eclosión, tiempo de
vida completo) eclosión, inmovilidad de nuevos ejemplares, tasa de
reproducción, tasa de crecimiento, comportamiento

Crustáceo bentónico Inmovilidad de adultos, número de huevos / hembra, éxito

(ciclo de vida en la eclosión, tiempo de eclosión, inmovilidad de nuevos
completo) ejemplares, tasa de reproducción, tasa de crecimiento,
comportamiento
 CALCULATION METHODS

GRAPHICAL METHOD
LC50
Can be performed with 0 or 1 partial kill(s)
Subjective

BINOMIAL METHOD
LC50 (= 95% confidence intervals)
Can be performed with 0 or 1 partial kill(s)

MOVING AVERAGE ANGLE METHOD

LC50 + 95% confidence intervals
Can be performed with 0 or 1 partial kill(s)
Can be performed manually, but labor intensive

MODIFIED SPEARMAN-KARBER METHOD

LC50 + 95% confidence intervals
Can be performed with 0 or 1 partial kill(s)
The concentrations tested must cover the range 0% - 100% response

LICHFIELD AND WILCOXON METHOD

LC50 + 95% confidence intervals
At least 2 partial kills required
Can easily be performed manually
Subjective to a certain extend

PROBIT ANALYSIS
LC50 + 95% confidence intervals
At least 2 partial kills required
Is difficult to be performed manually
 METODOS ESTADISTICOS RECOMENDADOS
PARA ENSAYOS DE TOXICIDAD CRONICA

DATOS OBSERVADOS

ESTIMACION DE CE50 NORMALIDAD DE DATOS

Análisis Probit Test de Shapiro-Wilks

DISTRIBUCION NORMAL DISTRIBUCION NO NORMAL

HOMOGEINEIDAD DE VARIANZAS
Test de Bartlett

HOMOGENEIDAD HETEROGENEIDAD

IGUAL NUMERO DE IGUAL NUMERO DE

REPLICAS REPLICAS

NO SI SI NO

Test de t con Test de Dunnett Test de Steel Test de Wil--

ajuste de con ajuste (ranks) coxon (ranks)
Bonferroni de Bonferroni
 FACTORES A CONSIDERAR EN EL
DISEÑO DE ENSAYOS DE
TOXICIDAD

 Propiedades físico-químicas del producto

 Pureza química
 Presencia de impurezas
 Selección del organismo de prueba
 Variables ambientales

PROPIEDADES FISICO-QUIMICAS DEL

PRODUCTO

 Estructura química: grupos funcionales

 Estabilidad frente a distintos valores de pH
 Propiedades fotoquímicas
 Coeficiente de partición n-octanol/agua
 Naturaleza lipofílica
 Potencial de ionización
 Tamaño y forma de las partículas
 Densidad

EL ORGANISMO DE PRUEBA
 Diferencias en la sensibilidad entre las distintas
especies
 Accesibilidad al tóxico
 Tasa y modelo de metabolismo y excreción
 Mayor sensibilidad de los individuos juveniles
 Influencia del estado salud / “stress” sobre la
sensibilidad

CRITERIOS PARA LA SELECCION DEL

ORGANISMO DE PRUEBA
 Amplio rango de sensibilidad (batería de ensayos con distintos organismos)
 Sensibilidad constante de la población utilizada
 Alta disponibilidad y abundancia (amplia distribución geográfica)
 Estabilidad genética y uniformidad de las poblaciones usadas en los
ensayos
 Organismos autóctonos o representativos del ecosistema que se evalúa
 Conocimiento de su biología, fisiología y hábitos nutricionales
 Preferencia por especies de importancia recreacional, comercial o
ecológica
 Disponibilidad de ejemplares a lo largo de todo el año
 Sencillo mantenimiento y cultivo en condiciones de laboratorio
 Preferencia por especies de tamaño reducido para facilitar la obtención de
gran número de datos
 Existe un limitado número de especies “standard”:
 algas fitoplanctónicas
 crustáceos: Daphnia, camarones, Artemia
 peces
 rotíferos
 anfípodos
 En ensayos de campo pueden utilizarse especies no estandarizadas
 PROCEDIMIENTOS Y CONDICIONES PARA
UNA BUENA PRACTICA DE LABORATORIO

PERSONAL INSTALACIONES
-Calificación -Mantenimiento y manipu-
-Responsabilidades lación de organismos de
-Dirección prueba
-Funciones para garantizar -Manipulación y almacena-
la calidad miento de reactivos
-Espacio para el desarrollo
de los ensayos

EQUIPAMIENTO OPERACIONES TOXICO

DE LABORATORIO
-Localización -Procedimientos operacio- -Manipulación
-Mantenimiento nales para ensayos, man- y almacena-
-Calibración tenimiento de organismos miento
y preparación de solucio- -Caracteriza-
nes ción

REGISTRO DE DATOS

INFORME DE RESULTADOS
-Localización
-Recuperación
 GOOD LABORATORY PRACTICE

OECD : Organisation for Economic Cooperation and Development,

ISBN 92-64-12367-9, Paris 1982.

U.S.A.: United States Environmental Protection Agency, Title

40 Code of Federal Regulations Part 160 (FIFRA)
Federal Register, 29 November 1983, and
Subsequent Amendment Federal
Register 17 August 1989.

United States Environmental Protection Agency, U.S. EPA

2185, Good Automated Laboratory Practices, 8 October 1995

Japan: Japan Ministry of Agriculture, Forestry and Fisheries, 59

NohSan, Notification N 3850, Agricultural Production
Bureau, 10 August 1984.

U.K.: Good Laboratory Practice, the United Kingdom

Compliance Program, Department of Health and
Social Security 1986 and Subsequent Revision,
Department of Health 1989.

INTERRELACIONES ENTRE LOS FACTORES QUE

DETERMINAN LA SELECCION DE UN PROTOCOLO
DE ENSAYO
Mínimo
VALOR ECONOMICO

Costo

Duración

Equipamiento Entrenamiento del

personal
Costo, representa-
tividad, sensibili- Captura y mante-
dad nimiento de orga-
nismos.

PROTOCOLO DE ENSAYO

Elección del organismo Elección del criterio

Representatividad Sensibilidad
ecológica

Máximo VALOR BIOLOGICO

 SECTION 12

REPORT PREPARATION
(Adapted from USEPA, 1989c)

The following general format and content are recommended for the report:

12.1 INTRODUCTION
1. Permit number
2. Toxicity testing requirements of permit
3. Plant location
4. Name of receiving water body
5. Contractor (if contracted)
a. Name of firm
b. Phone number
c. Adress

12.2 PLANT OPERATIONS

1. Product(s)
2. Raw materials
3. Operating schedule
4. Description of waste treatment
5. Schematic of waste treatment
6. Retention time (if applicable)
7. Volume of discharge (MGD, CFS, GPM)
8. Design flow of treatment facility at time of sampling

12.3 SOURCE OF EFFLUENT, RECEIVING WATER AND DILUTION

WATER
1. Effluent samples
a. Sampling point
b. Sample collection method
c. Collection dates and times
d. Mean daily discharge on sample collection date
e. Lapsed time from sample collection to delivery
f. Sample temperature when received at the laboratory
g. Physical and chemical data

2. Receiving Water Samples

a. Sampling point
b. Sample collection method
c. Collection dates and times
d. Streamflow at time of sampling and 7Q10
 e. Lapsed time from sample collection to delivery
f. Sample temperature when received at the laboratory
g. Physical and chemical data

3. Dilution Water Samples

a. Source
b. Collection date(s) and time(s) (when applicable)
c. Pretreatment
d. Physical and chemical characteristics (pH, hardness,
salinity, etc.)

12.4 TEST CONDITIONS

1. Toxicity test method used (title, number, source)
2. Endpoint(s) of test
3. Deviations from reference method, if any, and reason(s)
4. Date and time test started
5. Date and time test terminated
6. Type and volume of test chambers
7. Volume of solution used per chamber
8. Number of organisms per test chamber
9. Number of replicate test chambers per treatment
10. Feeding frequency, and amount and type of food
11. Acclimation temperature of test organisms (mean and range)
12. Test temperature (mean and range)

12. 5 TEST ORGANISMS

1. Scientific name
2. Age
3. Life stage
4. Mean lenght and weight (where applicable)
5. Source
6. Diseases and treatment (where applicable)

12.6 QUALITY ASSURANCE

1. Reference toxicant used routinely, source
2. Date and time of most recent reference toxicant test; test results and
current cusum chart
3. Dilution water used in reference toxicant test
4. Physical and chemical methods used

12.7 RESULTS
 1. Provide raw toxicity data in tabular form, including daily records of
affected organisms in each concentration ( including controls)
2. Provide table of endpoints: LC50, NOEC, LOEC, etc.
3. Indicate statistical methods used to calculate endpoints
4. Provide summary table of physical and chemical data
5. Tabulate QA data

12.8 CONCLUSIONS AND RECOMMENDATIONS

1. Relationship between test endpoints and permit limits
2. Action to be taken

BIOMARCADOR

● Son las respuestas biológicas a los tóxicos ambientales los

que dan una medida de la exposición y, a veces, del efecto
tóxico (WALKER et al., 1997)
● Pueden ser respuestas a nivel molecular, celular o del
organismo entero.

● Representan una medida del efecto relacionado con la

presencia de niveles particulares de un contaminante.
Proveen un medio de interpretar niveles ambientales de
contaminantes en términos biológicos.

BIOMARCADORES A DIFERENTES
NIVELES DE ORGANIZACIÓN

NIVEL DE ORGANIZACIÓN EJEMPLO DE BIOMARCADOR

 Molécula unida a un  TCDD unido a un receptor
receptor acetilcolina
 Nonilfenoles unidos a un
receptor de estrógeno

Respuesta bioquímica  Inducción de monooxigenasas

 Inhibición de
acetilcolinesterasas

Alteraciones fisiológicas  Grosor de la cáscara de huevo

(aves)
 Feminización de embriones

Efectos a nivel del individuo  Cambios de comportamiento

 Crecimiento

EVALUACION DEL RIESGO

Proceso de estimación de la probabilidad de que ciertas actividades

produzcan determinados efectos adversos

SEGURIDAD Y SALUD HUMANAS ECOSISTEMAS

EVALUACION DEL RIESGO EVALUACION DEL RIESGO
HUMANO ECOLOGICO

EVALUACION DEL RIESGO GLOBAL

INVOLUCRA

EVALUACION DE LA EVALUACION DE LOS

EXPOSICION EFECTOS
Define el movimiento del agente Define el impacto asociado a
desde la fuente hasta su destino distintos niveles de “stress”.
final último.
Origen o fuente
Transporte
Destino final

EVALUACION DEL RIESGO RELATIVO

OBJETIVO: Desarrollo de indicadores del riesgo total, los que pueden

ser utilizados en el proceso de toma de decisiones.

 Es el paso más difícil en el proceso de Evaluación del riesgo

 Existe carencia de una metodología de evaluación sólida, ampliamente

aceptada
 Integración de los factores de riesgo con el costo económico y social
de la toma de decisión

 El apropiado balance entre estas dos clases de factores conduce a

acuerdos entre la comunidad científica y los organismos políticos
encargados de la toma de decisiones

EVALUACION DE EFECTOS ECOLOGICOS

Sobre la base de:

1. CLASIFICACION AMBIENTAL
 Ambiente urbano
 Ambiente productivo
 Ambiente natural
 Ambiente de uso múltiple

2. DESARROLLO DE FACTORES DE PESO

3. EVALUACION DE RECEPTOR/ES REPRESENTA-TIVOS

  Selección de especies representativas a nivel poblacional, de
comunidad y de procesos ecológicos

 Selección de indicadores apropiados de los efectos que se

manifiestan sobre los receptores representativos

4. EVALUACION DE LA FUNCION CONCENTRACION-

RESPUESTA
 Recolección de datos, teniendo en cuenta:
 Tipo de efecto medido
 Condiciones de exposición
 Forma de experimentación

 Determinación de la potencial recuperación de poblaciones y

procesos expuestos

EL PROBLEMA DE LA EVALUACION DE LA RELACION

CONCENTRACION - RESPUESTA

1. ENFOQUE DIRECTO

 Completa batería de ensayos

 Implementación simultánea
 Resultados altamente confiables
 Alto consumo de tiempo y elevado costo

2. ENFOQUE EN FASES O ETAPAS

 Secuencia de actividades de ensayo

 Utilización de los resultados de las etapas precedentes para el
diseño de cada fase subsiguiente

 FASE 1
 Exposición aguda
 Ensayos monoespecíficos
 Evaluación rápida y grosera del riesgo relativo
  FASE 2 Y SUBSIGUIENTES
 Exposiciones de mayor duración
 Ensayos multiespecíficos
 Mejor utilización de los recursos disponibles
 Rápido acercamiento a los problemas prioritarios
 Optima relación costo - efectividad
Potencialmente, resulta posible omitir aspectos importantes
del riesgo ecológico durante la FASE 1

3. ENFOQUE INTERMEDIO

 Acercamiento en FASES, incluyendo ensayos de mayor tiempo

de exposición durante la FASE 1
 Puede existir redundancia de información en la FASE 1

LEGISLACION NACIONAL Y PROVINCIAL

NACIONAL:

 Resolución   No.   440/98   y   modificación

2000  ­  Secretaría   de   Agricultura,
Ganadería, Pesca y Alimentación

 Ley     24051/92   ­   Decreto

Reglamentario   No.   831/93   ­     Residuos
Peligrosos

 Ley     17319/67   ­   Decretos   y

Disposiciones   modificatorias   ­
Disposición   52/97  ­   Hidrocarburos,
Exploración,   extracción,   refinerías,
construcción,   operación   y   abandono   de
 oleoductos   y   poliductos   ­   Protección
ambiental.

PROVINCIA DE BUENOS AIRES:

 Ley 11720 y Decreto Reglamentario No.
806/97 ­ Residuos Especiales

 Resolución   No.   601/98  ­   Secretaría   de

Política Ambiental     ­  Residuos tóxicos con
prohibición   de   ingreso   al   territorio   de   la
Provincia de Buenos Aires.  
CLASE DE No. DE CODIGO CARACTERISTICAS
NACIONES (LEY 11720)
UNIDAS

6.1
H6.1 Tóxicos   (venenos)   agudos:  Sustancias   o   desechos   que   pueden
causar la muerte o lesiones graves o daños a la salud humana,
si se ingieren o inhalan o entran en contacto con la piel.

9
H10 Liberación de gases tóxicos en contacto con el aire o el agua:
Sustancia o desechos que, por reacción con el aire o el agua,
pueden emitir gases tóxicos en cantidades peligrosas.­

9
H11 Sustancias   tóxicas   (con   efectos   retardados   o   crónicos):
Sustancias   o   desechos   que,   de   ser   aspirados   o   ingeridos   o  de
penetrar   en   la   piel   pueden   entrañar   efectos   retardados   o
crónicos, incluso la carcinogenia.­

9
H12 Ecotóxicos: Sustancias o desechos que, si se liberan, tienen o
pueden   tener   efectos   adversos   inmediatos   o   retardados   en   el
ambiente   debido   a   la   bioacumulación   o   los   efectos   tóxicos   en
los sistemas bióticos.­