Cuestionario previo. Esterilización y medios de cultivo.

I. Proceso de esterilización.

Definición de esterilización y desinfección. Señalar la diferencia entre estos dos

términos.
- Esterilización: Proceso que destruye toda forma de vida microbiana. Un objeto estéril
(en sentido microbiológico) está libre de microorganismos vivos.

- Desinfección La destrucción, inactivación o remoción de aquellos microorganismos

que pueden causar infección u ocasionar otros efectos indeseables; la desinfección no
implica necesariamente esterilización.

Cuadro con los métodos de esterilización.

Método Uso Limitaciones

Calor La esterilización en autoclave emplea No es efectivo en medios
húmedo vapor saturado a 15 lbs. de presión cuya impermeables al agua, ni en
temperatura es de 121ºC, por 15 minutos materiales sensibles al calor
contados a partir del momento en que el o a la humedad.
material alcance los 121ºC.
Calor seco Deshidrata las células y destruye los Destruye materiales que no
microorganismos por oxidación de sus soportan temperaturas
constituyentes. elevadas por largos
períodos
Radiaciones - No ionizantes → Escaso poder de
Radiación ultravioleta penetración, sus efectos
-Luz visible. pueden ser revertidos,
-Radiación ionizante. puede causar quemaduras
en la piel y en los ojos.
Agentes -Filtración El material debe estar
mecánicos - Ondas sónicas y ultrasónicas relativamente libre de
material particulado
suspendido.
Agentes -Gaseosos -
químicos - No gaseosos

¿Puede un agente, por ejemplo, el calor húmedo, ser desinfectante y esterilizante?

Si, dependiendo de la manera en que se utilice, por ejemplo:

- Agua hirviente: Consiste en poner el contacto el material con agua hirviendo por un
periodo no menor a 10 minutos. Se usa para la destrucción de microorganismos
patógenos no formadores de esporas en ropas, platos, etc. También se puede emplear
en el control de microorganismos presentes en el agua de consumo.

Existen bioindicadores del proceso de esterilización ¿Por qué en la mayoría de los casos
se utilizan esporas bacterianas?

Por qué cumplen con lo siguiente:

Ser abundante y estar dispersa a lo largo y ancho del territorio estudiado.
 - Debe tolerar las variaciones climáticas de su entorno, así como la concentración de
contaminantes.
- Ser sedentario, ya que una especie sedentaria refleja con mayor exactitud las
condiciones medioambientales de su entorno.
- Tener un tamaño adecuado que permita el estudio y análisis de sus tejidos y
componentes.
- Debe soportar las condiciones variables del laboratorio.

II. Medios de cultivo.

¿Cuáles son los constituyentes principales que debe tener un medio de cultivo?
Fuentes de energía como carbono,nitrogeno,fosforo,azufre y varios minerales.

Clasificación de los medios de cultivo de acuerdo a:

a) Estado físico.

A. Liquido: Se emplean fundamentalmente para:

- Cultivar los microorganismos y obtener grandes cantidades de los mismos o bien la
producción de metabolitos específicos.
- Estimular y promover la selección de algún o algunos microorganismos e impedir que
otros se multipliquen.
- Identificar al microorganismo estudiado mediante pruebas bioquímicas
B. semisólido: Se utilizan para identificaciones bioquímicas y averiguar si el
germen estudiado es móvil. Los medios semisólidos tienen una
consistencia blanda.
C. sólido: Se utilizan para obtener colonias aisladas de microorganismos

b) Aplicación:

I.selectivos: Son medios que contienen sustancias que impiden el desarrollo de algunos
microorganismos, pero en una flora mixta permiten el aislamiento y recuperación del
germen o grupo de gérmenes de interés.

II. diferenciales: Son aquellos que contienen indicadores de ácido base, redox o
sustancias que detectan cambios en el medio o en las características típicas de las
colonias.
III. generales:
IV. enriquecidos: están compuestos de un medio base como apoyo del crecimiento al cual
se le puede agregar un gran exceso de nutrientes como suplementos nutritivos, por
ejemplo: sangre, suero, líquido ascítico, etc. Se utiliza para microorganismos que tienen
grandes exigencias nutricionales.
V. De enriquecimiento: Son medios líquidos que estimulan la multiplicación de algún
germen determinado e impiden o inhiben la reproducción de otros.
VI. de transporte y conservación: Sirven para transportar los especímenes que contienen
a los microorganismos, del sitio de la toma del producto hasta el laboratorio donde va a
efectuarse el estudio.

¿Cuál es la función de un indicador de pH en un medio de cultivo?

Permiten distinguir entre varios géneros y especies de microorganismos. Por ejemplo,
si al medio se le ha añadido un carbohidrato y un indicador y la bacteria que se cultiva
es capaz de fermentar dicho carbohidrato, se produce una acidificación del medio con
el consiguiente viraje de color del indicador por el cambio de pH.
En algunos medios de cultivo se adicionan sustancias o elementos que pueden utilizarse
como inhibidores del crecimiento microbiano. Investiga cuáles pueden ser estos
compuestos y su acción sobre el microorganismo.

-Cristal violeta
-sales biliares

¿Cómo podrías convertir un medio general en selectivo?

Se coloca algún inhibidor en el medio o alguna fuente de carbono que solamente pueda
metabolizar la bacteria que se quiera aislar.

¿Qué factores se deben considerar para diseñar un medio de cultivo?

Qué es lo que se pretende observar en el cultivo, para elegir un cultivo solido o liquido,
etc. El tipo de nutrientes para que crezca el microorganismo deseado.