Práctica No.

7 Cromatografía en Columna

Ramos Mendoza Gilberto Alexis

1. En cuatro renglones fundamenta con bases científicas la técnica de

Cromatografía en columna.
Método de separación de mezclas y/o purificación de sustancias en cantidades
mayores a 100 mg. Basada en las solubilidades relativas del compuesto en una fase
con respeto a otro, como también en la polaridad del compuesto, del eluyente y del
adsorbente, presentado así diferentes velocidades de descenso, característica que
permite la separación de estas.

2. ¿Cuáles son las diferencias entre la cromatografía en columna y la

cromatografía en capa fina?
Que en la cromatografía de capa fina se puede hacer un seguimiento de reacción y
en la cromatografía en columna no, en la cromatografía en columna se pueden
separar grandes cantidades de muestra comparado con la de capa fina, como
también que en la cromatografía de capa fina se presenta mayor eficiencia en la
purificación de sustancias, otra diferencia es que en la cromatografía de capa fina
ocurre gracias a la capilaridad del eluyente y en la de columna ocurre gracias a la
presión de la gravedad.
3. ¿Cuál es la utilidad de la cromatografía en columna?
Separación y purificación de mezclas de sustancias
4. ¿Cómo se llaman las fracciones colectadas de la columna?
Eluatos
5. ¿Cuál es objetivo de realizar CCF en la técnica de Cromatografía en
columna?
La CCF se utiliza para determinar y elegir el sistema solvente adecuado para cada
separación.
¿Cuál es el objetivo de colocar una Referencia al inicio de cada cromatoplaca?
Es para poder diferenciar en que fracción de eluato empieza a aparecer nuestra
sustancia y en que cantidad se encuentra la composición de cada fracción y así poder
diferencia en que fracción se presentó mayor composición en base a la referencia.
 6. Realiza un Mapa mental de una Cromatografía en columna.

Las sustancias apolares presentaran

mayor velocidad de descenso
Retenidas en la fase que
presenten mayor afinidad

Inversamente proporcional a su
Solubilidades relativas del grado de adsorción sobre el Solubilidad
compuesto con respecto a adsorbente Adsorción
otra

Velocidad de descenso
Fundamentada en Fenómenos
físicos

Cromatografía en
columna
Factores que la afectan

Basado en la afinidad Utilizado para

diferencial de los distintos
compuestos por la fase Polaridad de compuesto
móvil o la fase estacionaria. Pureza de disolvente
Separación de mezclas y/o Polaridad de eluyente
purificación de sustancias Temperatura
en cantidades mayores. Polaridad de adsorbente
Presión
Presenta dos fases
Utilizando una

Tubo de vidrio, relleno

Fase móvil Fase estacionaria Columna de cromatografía con una sustancia solida
de propiedades
adsorbentes.

Eluyente
Adsorbente:
El disolvente pasa a través de
la columna por efecto de la
gravedad.
7. Con base en los datos reportados del proveedor y de la cantidad empleada para
purificar, calcula el % de purificación de paracetamol. Concuerdan la cantidad teórica
y experimental ¿Apariencia física antes y después de purificación
8. Dibuja la serie de cromatoplacas que realizaste y comenta cuales fueron las que
juntaste y evaporaste, valor del Rf y que compuesto tenían.

9. Añade los espectros de infrarrojo (IR) de paracetamol y de cafeína y señala las

 bandas características para cada uno de los compuestos.
Espectro IR paracetamol

Espectro IR cafeína

br
 Caso práctico.
10. Se realizó la purificación por cromatografía de columna de una mezcla de reacción la
cual duró 48 horas de reacción y se obtuvieron las siguientes fracciones. Indica lo que
se te pregunta a continuación:
a) ¿Cuál fue el compuesto que eluyó primero de la columna y el último (A, B, C)?
b) ¿Cuáles fracciones son las que debes de juntar de cada uno de los productos?
¿Cuáles deben ser desechadas?
c) La purificación se llevó a cabo con una fase móvil (mezcla Hexano:Acetato de
etilo 7:3) ¿Qué sugieres modificar experimentalmente para minimizar que los
compuestos se mezclen entre ellos (eluyan juntos)?
d) ¿Podrías decir cuál de los compuestos se encuentra en mayor proporción? ¿Cuál
en menor proporción? ¿Cómo presupondrías saberlo?