BLOQUE III.

- Metabolismo

Tema 13.-
13.- Glucolisis y destino del piruvato

1. Papel central de la glucosa en el metabolismo.

•Degradació
Degradación de glucosa por GLUCOLISIS:
• Caracterí
Características y reacciones
Balance quí
químico y energé
energético ATP
Regulació
Regulación de la glucolisis
• Degradació
Degradación del piruvato en diferentes condiciones
• Descarboxilació
Descarboxilación oxidativa
• Fermentaciones lá
láctica y etanó
etanólica

Lanzaderas para equilibrar el poder reductor generado en el citoplasma

citoplasma

PAPEL CENTRAL DE LA GLUCOSA EN EL METABOLISMO:

- La glucosa es el principal combustible para la mayoría de organismos, ocupando una
posición central en el metabolismo.
- Su oxidación completa a CO2 y H2O produce gran cantidad de energía (2.840 kJ/mol). Se
almacena en forma de polímeros (glucógeno, almidón, )

- Es un precursor extremadamente versatil, capaz de suministrar una gran cantidad de

intermedios metabólicos, que son material de partida de muchos procesos biosintéticos
DIGESTIÓN DE GLÚCIDOS Desde los ALIMENTOS

Tanto el almidón ( mecla de amilosa y de amilopectina.) como el glucógeno

son hidrolizados por las enzimas α-amilasa (1→
→4) y glucosidasas (1→ →6).

La α-amilasa (salivar y pancreática) y la glucosidasa (intestinal)

Los monosacáridos son los únicos

glúcidos que se absorben a través de la
mucosa intestinal con transporte activo

intracelular
ESQUEMA QUE RELACIONA TODAS LAS VÍAS METABÓLICAS

Glucógeno

Glucogenogénesis Glucogenolisis
Ruta pentosas-P
Pentosas y Glucosa Cierto
Otros azúcares
s
Gluconeogénesis Glucolisis
Glucolisis amino
ácidos
Piruvato

Lactato Ácidos
Degradación grasos
piruvato Ciclo ácido
cítrico
LAS VÍAS METABÓLICAS
Transporte
PARA LOS Electrónico
GLÚCIDOS O CARBOHIDRATOS mitocondrial
 GLUCOLISIS:
Ruta CATABÓLICA para la degradación de la glucosa a 2 piruvatos
- Características generales:

GLUCOSA

• Glucolisis o glicolisis es una ruta catabólica de 10 reacciones

enzimáticas: TRES IRREVERSIBLES
• Su función es la degradación de glucosa para la obtención de
energía: 2 ATP y 2 NADH
• Se degrada una molécula de glucosa (C6) hasta dos moléculas de
piruvato (C3).
•Es una ruta metabólica universalmente distribuida en todas las
células.
2 PIRUVATOS
 GLUCOLISIS
Las moléculas con
carga
• 2 Fases y 10 Reacciones no atraviesan la
• Sustratos : Hexosas-P y triosas-P membrana
plasmática
• Enzimas: deshidrogenasas
kinasas, isomerasas y mutasas
• Cofactores: NAD+ / NADH
• ATP / ADP

El producto de una reacción

es el sustrato de la siguiente

EL ATP es el cofactor DADOR de

GRUPOS FOSFATO Y
el ADP es el RECEPTOR de GRUPOS
FOSFATO

EL NAD+ acepta electrones

procedentes de
los sustratos que se oxidan
y él se reduce a NADH
 GLUCOLISIS: reacciones
FASE 1: fase de inversión de energía

hexoquinasa

1.-Fosforilación de la glucosa

El ATP transfiere un Pi al OH del

C6. de la glucosa.. Las moléculas con Glucosa (G) Glucosa 6-P (G6P)
carga no atraviesan las membranas.
La G6P no sale de las células.

Fosfoglucosa
2.-Isomerización de la G-6-P isomerasa

La aldosa (C1=O) se transforma

en cetosa (C2 =O )
Glucosa 6-P (G6P) Fructosa 6-P
(F6P)
 GLUCOLISIS: reacciones

Fosfofructoquinasa 1

3.-Fosforilación de la F-6-P

El nuevo OH del C1 es
fosforilado por ATP. Fructosa 6-P (F6P) Fructosa 1, 6-P (FBP)

4.-Ruptura aldólica de la F-B-P

Aldolasa
Se forman dos triosas, isómeros:

-gliceraldehido3-fosfato (G3P) y Dihidroxi

-dihidroxiacetona-fosfato (DHAP). Fructosa 1, 6-P (FBP) Acetona
Fosfato Gliceraldehido
(DHAP) 3-fosfato (G3P)
 GLUCOLISIS: reacciones
La segunda fase de la glucolisis parte desde el Gal-3-P

Triosa fosfato
isomerasa

5.-Isomerización del DHAP a G3P

La dihidroxiacetona-fosfato (DHAP)
se isomeriza a
gliceraldehido3-fosfato (G-3P). Dihidroxiacetona Gliceraldehido
Solo el G-3P sigue la glicolisis. -fosfato (DHAP) 3-fosfato (G3P)

FASE 2: fase de obtención de beneficios

Gliceraldehido 3-P
deshidrogenasa

6.-Oxidación y fosforilación
Se genera NADH y un enlace
fosfato de alta energía Gliceraldehido 1,3-bisfosfo
3-fosfato (G3P) glicerato (BPG)

El aldehido se oxida y se fija el grupo fosfato, formando un

enlace de alta energía: enlace ACIL-FOSFATO
 GLUCOLISIS: reacciones para recoger energía

El enlace ACIL-FOSFATO es de alta energía y

ésta se conserva en forma de ATP

Fosfoglicerato
7.-Fosforilación a nivel de sustrato quinasa

Se transfiere un Pi desde el 1,3-

BPG, con un enlace de alta
energía, al ADP. 1,3-bisfosfo 3-fosfoglicerato
glicerato (BPG) (BPG)

1ª reacción de conservación de la energía

8.-Isomerización Fosfoglicerato
mutasa
El Pi del C3, de no muy alta energía,
se traslada al C2, a través de un
intermedio bisfosforilado (2,3-BPG) 3-fosfoglicerato 2-fosfoglicerato
(3PG) (2PG)
 GLUCOLISIS: reacciones para recoger energía

Enolasa

9.-Deshidratación

Se separa una mol. de H2O y se

2-fosfoglicerato Fosfoenol
genera un enlace enol-fosfato
(2PG) piruvato
de alta energía
(PEP)

El enlace ENOL-FOSFATO es de alta energía

Piruvato
quinasa
10.-Fosforilación a nivel de sustrato
DG’ = -31.4kJ/mol
Se transfiere un Pi desde el PEP, con
un enlace de alta energía, al Fosfoenol piruvato
piruvato (PIR)
ADP.
(PEP)
2ª reacción de conservación de la energía en forma de ATP
 GLUCOLISIS: balance de la ruta

RESULTADO DE LA GLUCOLISIS

Además se forman 2 moléculas de ATP

glucosa y 2 moléculas de NADH 2 moléculas
de piruvato

BALANCE químico y energético de la glucolisis:

Glucosa + 2 ADP + 2Pi + 2 NAD+ ------> 2 piruvato + 2 ATP + 2 NADH + 2H+

La glucolisis se produce en el citoplasma y los NADH formados no pueden descargar sus e-

 LANZADERAS o FERMENTACIÓN
en el T.E.M. que actúa en el interior mitocondrial.
 REGULACIÓN de la GLUCOLISIS

La regulación
de la ruta recae
sobre las tres hexokinasa
enzimas que
catalizan las
tres reacciones
irreversibles.
Son tres Fosfofructo
kinasas:
kinasa 1
Son moduladas
por el nivel de
ciertos
metabolitos y
por
modificación
covalente
(fosforilación) piruvatokinasa
REGULACIÓN GLUCOLISIS:
(1) Hexokinasa y características de la glucokinasa Activa
inhibe

G-6-P Producto de la reacción

hexokinasa
Glucosa glucosa-6-P
glucokinasa

• GLUCOKINASA
• Isoenzima en hígado,
• + Específica para glucosa
• KM mayor para la glucosa y
• No inhibida por G6P

•Su existencia permite al

hígado retirar glucosa de la
sangre cuando su
glucosa
concentración es muy alta
La PFK-1 se activa con F-2,6-BP, el producto de la PFK-2

ENZIMA BIFUNCIONAL
Fructosa-6-
PFK-2 F2,6-BP fosfato

Fructosa-2,6-bisfosfato
(F-2,6-BP) Fructosa-2,6-
bisfosfato

La actividad de la enzima bifuncional

Fructosa-1,6-
PFK-2/F2,6-BF está controlada por bisfosfato
la acción hormonal, que desencadena
la fosforilación y la defosforilación de
la enzima, alterando la actividad de la
enzima con ello.
 T 13.- METABOLISMO DEL PIRUVATO
Resumen de la
degradación del Glucosa
Pivuvato
Glucolisis
10 reacciones
consecutivas

Condiciones Condiciones
anaeróbicas 2 piruvato anaeróbicas

Condiciones
aeróbicas 2 lactato
2 etanol + 2 CO2
Fermentación a alcohol Fermentación a lactato
en levaduras en músculo en
contracción vigorosa,
2 Actil-CoA eritrocitos, otras células
y en algunos
Ciclo microorganismos
del
ácido
cítrico

En células tumorales:
http://sebbm.es/BioROM/cont 4 CO2 + H2O
enido/UCM/sit_fisiopat/glucol Animales, plantas, y muchas
isis-cancer/index.htm células microbianas bajo
condiciones aeróbicas
El piruvato formado en la GLUCOLISIS se
degrada en función de las condiciones:
ANAEROBIAS: Fermentaciones (1,2)
AEROBICAS: Descarboxilación oxidativa (3)

piruvato

Piruvato
O2 O2
O2
3
2 1

Acetaldehido Lactato
Lactato Acetil-CoA

O2

Etanol Posterior
Oxidación
en el C.A.T.
Las 2 reacciones de reducción del Piruvato en los procesos
fermentativos

FERMENTACIÓN
LÁCTICA

Lactato
deshidrogenasa

Piruvato Lactato
FERMENTACIÓN
ALCOHÓLICA

Piruvato Alcohol
descarboxilasa deshidrogenasa
Piruvato Acetaldehido Etanol
 1.-FERMENTACIÓN LACTICA
en condiciones anaeróbicas (músculo y microorganismos).

glucosa

Acoplamiento de la

glicolisis
oxidación del NADH
hasta NAD+ con la
reducción del
Piruvato a lactato;
2 piruvato
la glicolisis necesita Regeneracion
NAD+ disponible para NAD+
la Gal-3-P
deshidrogenasa
regeneración
NAD+ 2 lactato
lactato

Resumen de la fermentación El ácido láctico es producido en

láctica los músculos con el ejercicio y
Lactato por bacterias
deshidrogenasa
Piruvato + NADH Lactato + NAD+
 2.-FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA
microorganismos fermentativos en condiciones anaeróbicas

glucosa
Acoplamiento de la
oxidación del
NADH a NAD+ con
la reducción del
acetaldehido a
etanol;
2 piruvato
la glicolisis
necesita NAD+
Regeneracion
Disponible para la
NAD+
Gal-3-P
deshidrogenasa

acetaldehido

etanol
 3.- Descarboxilación oxidativa del Piruvato
en condiciones aerobias ------- Acetil-CoA

Glucosa
REACCIÓN COMPLEJA:
Descarboxilación oxidativa del piruvato
Enzima: PIRUVATO DESHIDROGENASA
Coenzimas solubles: NAD+ se reduce a NADH
CoA-SH se lleva el acetilo
Piruvato

Complejo
Piruvato
deshidrogenasa

Acetil-CoA

Lípidos
PIRUVATO DESHIDROGENASA
Componentes del complejo: 3 enzimas y 5 coenzimas

E1- piruvato deshidrogenasa - -TPP Descarboxilación oxidativa

E2- Lipoil-transacetilasa - -Lipoamida Trans-acetilación
E3- Dihidrolipoamida deshidrogenasa - - FAD Oxidación H2-lipoamida

Coenzimas unidos a Enzimas Modelo de la estructura del complejo PDH, donde se recogen
(GRUPOS PROSTÉTICOS) los 3 tipos de subunidades, cada una con su coenzima
E1- TPP
E2- Lipoamida
E3 - FAD Cristales de PDH
Coenzimas solubles
CoA-SH
NAD+

La E1-TPP cataliza la
descarboxilación del piruvato y
el OH-etil queda unido a la TPP

Microfotografía al M.E. del complejo PDH procedente de músculo

PIRUVATO DESHIDROGENASA: mecanismo de actuación

Toda la
reacción se
produce en
el entorno Hidroxi-etil-TPP
del
complejo
Lipoamida
PDH,
actuando
en cada
paso una
de las
enzimas

Dihidrolipoamida
piruvato

Acetil-CoA

Acetil hidro
lipoamida

E1 = Piruvato deshidrogenasa - TPP CoE. solubles

E2 = Dihidrolipoil transacetilasa - Lipoamida •CoA-SH
E3 = Dihidrolipoil deshidrogenasa - FAD •NAD+
 Descripción del mecanismo de acción de la PIRUVATO DH

1º.- Actuación de la E1-TPP (La E1 es Piruvato deshidrogenasa)

El piruvato se descarboxila y el fragmento de 2 carbonos (carbanión) se transfiere al
anillo de tiofeno (TPP), formándose el hidroxi-etil-TPP.

2º.- Transferencia del hidroxietilo de la E1-TPP a la E2-Lipoamida

La E2 es Dihidrolipoil-transacetilasa y tiene unida la Lipoamida
En la transferencia desde E1 a E2, el hidroxi-etilo se oxida a acetilo, a la par que el
puente disulfuro de la lipoamida se reduce a dihidro-lipoamida, aunque como ésta
resulta acetilada, el producto es acetil-hidro-lipoamida

3º.- Transferencia del acetilo desde la E2-hidro-Lipoamida a la CoA-SH

El grupo acetilo de la acetil-lipoamida (enlace tio-acilo) se transfiere a la CoA-SH, para
formar Acetil-S-CoA (enlace tio-acilo).
La Lipoamida queda reducida como Dihidro-lipoamida.

4º.- Oxidación de la H2-lipoamida por E3-FAD ( Coenzima de la E3)

La E3 (Dihidrolipoil-deshidrogenasa) es una flavoenzima, cuyo FADH2 se oxidará después
por el NAD+ (coenzima soluble) que se reduce a NADH + H+
Nombre de la COMPUESTO PATOLOGÍA
Forma de COENZIMA
VITAMINA QUÍMICO (por carencia)
Beriberi
B1 Tiamina Tiamina-PP
(cascara arroz)
Glositis, Queilitis
angular y
B2 Riboflavina FMN, FAD
Dermatitis
seborreica
Niacina o Ac.
B3 NADH, NADPH Pelagra (3D)
Nicotínico
Neurodegeneración
B5 Pantotenato Coenzima A (pantotenato kinasa)

Anemia
B6 Piridoxina Piridoxal-P
(Isoniacina)

B7 o H Biotina Biotina

Anemia
B12 Cobalamina Cianocobalamina
perniciosa

C Ascorbato Escorbuto

B9 Folato THF Espina bífida

PIRUVATO DESHIDROGENASA
Regulación alostérica y por fosforilación/defosforilación

PDH
El complejo está Piruvato
regulado de dos
maneras:

• inhibición alostérica por

metabolitos:
Acetil-CoA
Inhibido por ATP, Acetil-
CoA y NADH y Citrato
Activado por AMP, CoA y
NAD+, cuando las
Oxalacetato Isocitrato
necesidades energéticas
son elevadas

• Modificación covalente: Malato Cetoglutarato

Inhibido por fosforilación
en E1 y activado por
defosforilación. Succinil-
 PIRUVATO DESHIDROGENASA
Regulación covalente por fosforilación/defosforilación, en mamíferos

La PDH
fosforilada
(PDH-P) es
inactiva y la
defosforilación
la activa de
nuevo.

La PDH es
estimulada (PDH a)
por la insulina,
piruvato y
AMP/ADP, que
inhiben a la PDH-
kinasa,

pero es inhibida (no

se forma PDH b)
por el ATP, NADH y
acetil-CoA, que
activan a la PDH-
kinasa.
Lanzadera del glicerol-P

Glicerol-3-fosfato
Deshidrogenasa
citoplasmática

Dihidroxiacetona Glicerol
fosfato 3-fosfato

Glicerol-3-fosfato
Deshidrogenasa
Citoplasma mitocondrial

Matriz
Por cada NADH citoplásm. que se oxida por esta vía se obtienen 1,5
ATP.
Lanzadera del malato-aspartato

Por cada NADH citoplásm. que se oxida por esta vía se obtienen 2,5
ATP.

Oxalacetato Glutamato
Malato
deshidorgenasa transaminasa
Malato α-cetoglutarato Aspartato

Citoplasma

Matriz α-cetoglutarato Aspartato

Malato Malato
deshidorgenasa transaminasa
Oxalacetato Glutamato