Ingeniería ecológica 109 (2017) 57-64

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Biorremediación de residuos mineros contaminados con plomo por Pararhodobacter sp. basado en la técnica de
precipitación de carbonato de calcio microbianamente inducida y su correo ff ECTS sobre la fuerza de grueso y fi arena
de grano ne

Wilson Mwandira una , Kazunori Nakashima segundo , • , Satoru Kawasaki segundo

una Facultad de Ingeniería de la Universidad de Hokkaido, Kita 13, Nishi 8, Kita-ku, Sapporo 060-8628, Japón
segundo Facultad de Ingeniería de la Universidad de Hokkaido, Sapporo 060-8628, Japón

INFORMACIÓN DEL ARTÍCULO RESUMEN

palabras clave: El plomo (Pb 2+) es un metal pesado tóxico que tiene un grave e negativo ff efecto sobre la salud humana y el medio ambiente. técnicas de remediación
La biorremediación biológicos física, química y han sido utilizados para remediar la contaminación por plomo. Sin embargo, debido al gran peligro que representa la
bIOMINERAL contaminación por plomo, hay un creciente interés a aplicar métodos respetuoso del medio ambiente y sostenibles para eliminar el plomo. Por lo tanto,
Microbiológicamente de calcio inducida por la precipitación de
este estudio se realizó para utilizar el microbianamente inducida por la precipitación de carbonato de calcio técnica (MICP) en conjunción con la bacteria Pararhodobacter
carbonato de plomo

sp. biorremediar a plomo. experimentos a escala de laboratorio se llevaron a cabo y la eliminación completa de 1.036 mg / L de Pb 2+ fue logrado. Estos
resultados fueron aún más con fi confirmada por microscopio electrónico de barrido (SEM) y X ray-di ff raction análisis (XRD), lo que indica coprecipitación
de carbonato de calcio (CaCO 3) y conducir. el incond fi resistencia a la compresión definida aumentó con un aumento en intervalo de inyección con la
máxima incond fi resistencia a la compresión Ned de 1,33 MPa para fi arena ne, 2,87 MPa para la arena gruesa y 2,80 MPa para la arena mezclada. por

Pararhodobacter sp. ae FFI cientemente inducir inmovilización plomo el intervalo bacteriana requerida es cuatro veces con una concentración de calcio y de urea de
0,5 M y la concentración bacteriana de 10 9 UFC / ml. Muy pocos de bajo coste en procesos de tratamiento de metales pesados ​in situ para la biorremediación de
plomo están disponibles; por lo tanto, bioimmobilization de plomo por MICP tiene el potencial para la aplicación como un bajo costo y un método ecológico para la
remediación de metales pesados.

1. Introducción respectivamente ( ZCCM-IH, Zambia cobre y cobalto-Minería Investment Holding Plc., 2002 ). En el
pasado, se utilizó una porción de la escoria de horno gruesa para cubrir el fi ne residuos de plantas
El plomo (Pb 2+) se ha estudiado ampliamente en todo el mundo debido a su correo ff refleja en la lixiviado para prevenir la erosión del agua y el polvo arrastrado por el viento.
salud humana y el medio ambiente ( Yabe et al, 2015.; Lin et al., 2009 ). Las principales características
de plomo son que persiste en todas las partes del medio ambiente, no puede ser degradado o técnicas Varios de remediación biológica físicas, químicas y se han utilizado durante muchos
destruido y entra en el cuerpo a través de alimentos, agua potable, y el aire. resultados de la años para remediar la contaminación por plomo. Sin embargo, el principal reto de las tecnologías de
intoxicación por plomo en el cerebro y al sistema nervioso central, coma, convulsiones e incluso la remediación de plomo físico-químicas implica un costo enorme para completar la eliminación o
muerte, sobre todo en los niños, ya que absorben 4 - 5 veces más plomo como adultos ( Lanphear, contención de contaminantes para evitar que la migración a las zonas circundantes. En este estudio,
2005 ). Una de esas áreas que está fuertemente contaminada con plomo debido a la minería y la buscamos investigar la posibilidad de biorremediación de residuos de la mina contaminado con
fundición es Kabwe mina, Zambia ( Nyambe et al., 2013 ), Que fue seleccionado como el área de plomo en Kabwe basado en microbianamente inducida por la precipitación de carbonato de calcio
estudio para esta investigación. (MICP). Esta técnica consiste en la hidrólisis de la urea en amonio y carbamato mediante catálisis
ureasa (Eq. (1) ), Resultando en CaCO 3 formación en presencia de Ca 2+ iones (Ecs. (2) - ( 3) ) ( WHI FFI n
et al., 2007 ).
La mina Kabwe era una mina Pb-Zn que operó de 1902 a
1994, tiempo durante el cual causó una intoxicación por plomo ff eja cerca
300.000 personas. A pesar del cierre de la mina, sus residuos han seguido contaminar el suelo y el
agua. lixiviado residuos de la planta de residuos de colas y espesantes y escoria de horno son las CO (NH) 22 +•→
HO•••••
2 La ureasa H NCOO
2 NH- + 4
+
(1)
principales fuentes de plomo, que cubren un área de aproximadamente 86,600 m 2 y 164.800 m 2,
-
H NCOO
2 HO- HCO
+ NH
2 → 3
+ 3 (2)

• Autor correspondiente.

Dirección de correo electrónico: nakashima@geo-er.eng.hokudai.ac.jp (K. Nakashima).

http://dx.doi.org/10.1016/j.ecoleng.2017.09.011
Recibido el 20 de de julio de 2017. Recibido en revisado Formulario 8 de septiembre de 2017. Aceptó 16 de septiembre de 2017

0925-8574 / © 2017 Elsevier BV Todos los derechos reservados.

W. Mwandira et al.
California 2 ++ HCO 3 - + NUEVA HAMPSHIRE 3 → CaCO 3 + NUEVA HAMPSHIRE 4+ (3)
El papel de los iones de calcio en la biorremediación mediante la técnica de MICP se aprovecha
de la incorporación de la Pb 2+ sobre sus superficies a través de la sustitución en la retícula calcita
(Ec. (4) ), Después de lo cual Pb 2+ se cambian de forma soluble a formas insolubles por lo tanto
desintoxicantes los iones tóxicos de plomo ( Anbu et al., 2016 ). El carbonato de calcio formado o bien
se puede inmovilizar o formar sustancias no disueltas, con los iones libres estando fijado sobre las
superficies de carbonato de calcio para producir una forma químicamente estable y no tóxico ( Volodymyr
y Viktor, 2017 ). Pb 2 ++ CO 32 - → PbCO 3
(4)
La biorremediación usando esta técnica es prometedor para metales pesados ​(Cd 2+, Ni 2+, Pb 2+ etc.)
contaminado suelos, sedimentos y agua y se ha aplicado con éxito en estudios recientes ( Kang et al,
2014.; Zhu et al, 2016.; Achal et al., 2012 ). En este estudio, determinamos para los muy
fi tiempo primero el uso de Pararhodobacter sp. para la biorremediación escala de laboratorio de
plomo. Pararhodobacter sp. fue seleccionado para la investigación, ya que ha demostrado una alta
actividad de la ureasa y puede mantener la actividad de la enzima por un largo tiempo ( Fujita et al.,
2017 ). Esta característica es útil en la biorremediación como la bacteria es resistente cuando se
inyecta en el suelo y su actividad enzimática sostenida durante un período más largo para llevar a
cabo biocementation y la inmovilización de los iones tóxicos. Los investigadores anteriores llevaron a
cabo solidi fi catiónico usando Pararhodobacter sp. para los métodos de mejora del suelo para marina
( Danjo y Kawasaki, 2016 ) y los propósitos de uso de la tierra (no publicadas). Sin embargo, en este
estudio, Pararhodobacter sp. se investigó tanto para la inmovilización residuos de la mina y para
determinar si exhibe cualquier Pb 2+ resistencia y su aplicabilidad para la biorremediación. La
investigación adicional sobre las bacterias sería necesario antes posible aplicación de esta bacteria
in- fi vejez.
Una mejor comprensión de este proceso y mecanismo proporcionará un científico fi c base para
el desarrollo de estrategias adecuadas para el suministro y el uso sostenible de bacterias ureolíticas
para la biorremediación de sitios contaminados con plomo, como el área de Kabwe en Zambia. La
justificación de la elección de esta técnica para la biorremediación de residuos mineros es evitar que
el polvo arrastrado por el viento de los vertederos de residuos no cubiertas, así como para prevenir la
erosión que conduce al transporte de sedimentos aguas abajo. Para lograr esto, se determinó la
solidificación fi condiciones de cationes y de biorremediación necesarias para la remediación usando
experimentos in vitro por bioaumentación, a continuación, se escala éstos para fi aplicación de campo
a través de la bioestimulación ( Figura 1 ). Los estudios realizados por Gómez et al., 2017 y Gat et al.,
2016 informó que la bioestimulación o ff ERS importante beneficio económico y medioambiental fi ct a
través de la eliminación de costoso cultivo bacteriano monoclonal no nativo, así como evitar los
cambios en la población microbiana indígena que puede ser una ff ejada en un grado desconocido.
Por lo tanto, la especificidad fi Objetivos C del presente estudio (pasos 1 y 2) eran: investigar el correo ff
ECTS de plomo sobre la actividad de la ureasa y el crecimiento microbiano; determinar el correo ff cacia
de eliminación de plomo por Pararhodobacter
sp .; determinar el correo ff ECTS de variar el intervalo de inyección de la
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bacterias en incond fi resistencia a la compresión Ned (UCS) para fi arena ne y de grano grueso; y
evaluar la utilidad de Pararhodobacter sp. para la biorremediación de plomo. Los resultados de este
estudio se utilizarán en futuros estudios como se indica en Figura 1 .
2. Materiales y métodos
2.1. Las bacterias, los medios de comunicación, y Pb 2+ preparación de la solución de stock
Pararhodobacter sp., una bacteria ureolítica aislado del suelo cerca de beachrock en Okinawa,
Japón, se utilizó en este estudio ( Danjo y Kawasaki, 2013 ). Las células se cultivaron en medio
ZoBell2216, que contenía 5,0 g / L hipolypeptone (Nihon Seiyaku Co., Ltd., Tokio, Japón), 1,0 g / L de
extracto de levadura (BD Biosciences avanzada bioprocesamiento, Miami, FL, EE.UU.), y 0,1 g / L
Fepo 4 ( Junsei Chemical Co., Ltd., Tokio, Japón) preparado con arti fi el agua de mar cial con el fi solución
nal pH se ajustó a 7,6 - 7,8 usando NaOH 1 M ( Fujita et al., 2017 ). solución madre de plomo se
preparó utilizando PBCL 2 ( Wako Pure Chemical Industries Ltd., Tokio, Japón), que se disolvió en
agua destilada, esterilizada con una
0.22 μ metro fi filtro y se conservó a 4 ° C. di ff concentraciones de trabajo Erent de plomo Después se
obtuvieron por dilución en serie.
2.2. mi ff ect de plomo en el crecimiento microbiano y la actividad ureasa
La tolerancia de Pararhodobacter sp. a plomo se evaluó para dilucidar su utilidad en la
biorremediación. di ff concentraciones Erent de Pb 2 + ( 0 mM, 0,01 mM, y 0,5 mM) se prepararon en 100
ml Erlenmeyer Florida pide que contiene Pararhodobacter sp. y medio de cultivo ZoBell2216 y el
curso temporal de crecimiento de las células se determinó basándose en la densidad óptica (OD)
valores en 600 nm por UV - Vis (V-730, Jasco International Co., Ltd., Tokio, Japón) durante 14 días en
presencia de Pb 2+.
La actividad ureasa de células bacterianas se determinó mediante el control de los iones de
amonio generado en la hidrólisis de urea utilizando el método de azul de indofenol basado en la
reacción de Berthelot en un baño de agua mantenido a 30 ° C ( Weatherburn, 1967; Natarajan, 1995 ).
Después de un cultivo bacteriano durante 48 h, una suspensión bacteriana (1 ml) (OD 600 = 1,0) se
añadió a
0.1 M de fosfato bu ff er (100 ml) que contiene 0,1 M urea. Para determinar la dirección ff ECTS del
plomo sobre la actividad ureasa, di ff concentraciones Erent de plomo (0 - se añadieron 0,5 mM). Las
muestras se recogieron a continuación a intervalos de 5 min (0, 5, 10 y 15 min) y se pasó a través de
un 0,22 μ metro fi filtro para eliminar las células. A continuación, una ml alícuota de la 2 fi muestra
filtrada se mezcló con reactivo de fenol nitroprusiato (4 ml) (0,25 M fenol en 100 ml de agua
desionizada que contiene 23 μ M de nitroprusiato de sodio) y el reactivo de hipoclorito (4 ml)
(hidróxido de sodio 0,05 M en 100 ml de agua desionizada que contiene 7,5 ml de lejía (5% NaOCl)).
Cada mezcla de reacción se agitó con vórtex y después se incubó a 50 ° C - 60 ° C durante 10 min. La
cantidad de ion de amonio liberado debido a la hidrólisis de urea se determinó por referencia a una
curva estándar preparada anteriormente que relaciona la absorbancia a 630 nm con la concentración
de ion amonio
Figura 1. Diagrama de flujo del estudio. Los pasos descritos en este
estudio se resaltan en gris.
W. Mwandira et al.
(0 - 10 mg / L). Utilizando esta curva, una unidad de actividad de la ureasa (U) fue de-
fi define como la cantidad de enzima que hidroliza 1 μ mol de urea por minuto. La liberación de 2 μ mol
de amoníaco es equivalente a la hidrólisis de 1 μ mol de urea.
2.3. Bioprecipitación de carbonato de calcio y plomo
Para dilucidar el mecanismo de co-precipitación de plomo y calcio, Pb 2+ experimentos
bioprecipitación se llevaron a cabo. especí fi camente,
Pararhodobacter sp. fue precultivadas durante 24 h en 5 ml de medio ZoBell2216, después de lo cual
1 ml de precultivo se inoculó en 100 ml del cultivo principal a 30 ° C durante 48 h con aireación
continua a 160 rpm. La suspensión bacteriana (5 ml) se añadió después a 2 ml de cloruro de calcio
(0,5 M) y 2 ml de urea (0,5 M), después de lo cual di ff plomo Erent fi Se añadieron concentraciones
NaI (0 mM, 0,01 mM y 5 mM). La mezcla se incubó posteriormente durante 6 horas a 30 ° C con
agitación (160 rpm) y
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Figura 2. ( a) la configuración conceptual y (b) las imágenes de la solidificación de
la jeringa fi cación de coarse- y fi de grano fino de arena.
luego se centrifuga adicionalmente (15.000 rpm durante 5 min) para recoger el precipitado. La
concentración de plomo en el sobrenadante se determinó por espectroscopia de emisión atómica de
plasma acoplado inductivamente (ICP-AES; ICPE-9000, Shimadzu Corporation, Tokio, Japón),
mientras que el precipitado se analizó por XRD / SEM como se describe en la sección 2.5 .
experimentos de precipitación se realizaron por triplicado.
2.4. solidi jeringa fi cación de coarse- y fi arena de grano fino
La forma más práctica de remediación de un sitio contaminado es a través de tratamiento in situ
de un material contaminado facilitado por la inyección de microorganismos y nutrientes. Para
entender el intervalo de inyección óptima de las bacterias, cuatro di ff intervalos de inyección de Erent
se ensayaron en solidi jeringa fi experimentos de cationes. Todo solidi jeringa fi experimentos de
cationes se llevaron a cabo en una incubadora a 30 ° C. Un método descrito por Danjo y Kawasaki se
adoptó para la solidi jeringa fi catión
W. Mwandira et al.
Fig. 3. mi ff ect de plomo en Pararhodobacter sp. curva de crecimiento. Los valores son las medias de dos experimentos
independientes.
(experimentos Danjo y Kawasaki, 2016 ). queso Brie Florida Y, 40 g de fi arena ne (diámetro medio, D 50
= 170 μ m) y / o arena gruesa (diámetro medio, D 50 = 1,2 mm) se secó en estufa a 105 ° C durante 48 h
y luego se coloca en un ml de la jeringa 35 (diámetro medio, D 50 = 2.5 cm y la altura, h = 7 cm) ( Figura
2 ). El experimento de laboratorio fue diseñado para imitar la fi condiciones de campo en mina Kabwe
lo más cerca posible sobre la base de tamaño de grano, con el muy fi arena ne y grueso representa el
residuo de la planta y el horno de escoria, respectivamente. El sistema mixto se seleccionó para
imitar escoria utilizada para cubrir residuos de plantas lixiviada para evitar que el agua y el viento la
erosión en el sitio. Cultivo bacteriano (16 ml) (OD 600 = 1,0 = 10 9 ufc / ml) y 20 ml de solidi fi solución de
cationes (0,5 M urea; 0,5 M de cloruro de calcio;
carbonato de hidrógeno de sodio 0,02 M; y 0,2 M cloruro de amonio y de nutrientes de caldo de 3 g /
L) se añadieron secuencialmente a la jeringa y se drena, dejando alrededor de 2 ml de solución por
encima de la superficie de la arena para mantener las condiciones húmedas como en
conceptualizado Figura 2 a. La solución de salida de la jeringa se midió para pH y Ca 2+. Después de 14
días de
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de curado, el UCS se estimó utilizando un dispositivo de penetración de la aguja (SH-
70, Maruto Testing Machine Company, Tokio, Japón).
2.5. XRD y SEM análisis
De rayos X de di ff raction (XRD; MiniFlex de ™, Rigaku Co., Ltd., Tokio, Japón) y un microscopio
electrónico de barrido (SEM; Miniscope TM3000, Hitachi, de Tokio, Japón) se utilizaron para analizar
cualitativamente el precipitado MICP. La muestra para XRD se secó a 105 ° C y se muele en polvo
utilizando un Shocker Multi-perlas (Yasui Kikai, Tokio, Japón). De rayos X de di ff raction se realizó
bajo Ni- fi la radiación filtrada Cu1.5406A. Scans se registraron de 5 a 80 ° 2 θ, a una velocidad de 20 °
/ min. Las fases cristalinas se identificaron fi ed con el Centro Internacional de Di ff Los datos (ICDD) y
la base de datos PARTIDO 3.4 raction ( Klaus y Putz, 2017 ). Las imágenes SEM fueron tomadas con
el microscopio después de montar en una cinta de carbono.
3. Resultados y discusión
3.1. mi ff ect de plomo en el crecimiento microbiano
Pararhodobacter sp. claramente exhibió un aumento de crecimiento después de las fases de
latencia, logarítmica, estacionarias y retraso en medios libres de plomo ( Fig. 3 ). En la presencia de
plomo, la fase logarítmica fue ligeramente retardado y se observó una disminución general en el
crecimiento. El e ff ECTS de plomo en el crecimiento microbiano fueron insignificantes, mientras que
no se observó crecimiento para concentraciones mayores de 1 mM (datos no mostrados). Estos
resultados indican que Pararhodobacter sp. puede ser utilizado para la biorremediación de plomo, a
pesar de que no fue aislado de un sitio contaminado con plomo ( Kang et al., 2015 ). El pH medido de
la solución disminuyó durante la fase logarítmica, a continuación, aumenta de forma coherente. No
está claro por qué un pH alto se mantuvo durante la incubación; sin embargo, esto podría haber
ocurrido debido a la liberación de metabolitos en la solución, tales como amoníaco, por las células
vivas. La generación de amoniaco podría haberse originado a partir de aminoácidos contenidos en el
extracto de levadura. En muchos estudios, el aumento de pH solamente se registró cuando se añadió
urea al medio de crecimiento. Estas fi hallazgos están a la par con los de estudios anteriores, aunque
el correo ff ECTS de plomo iones di ff er para di ff microorganismos Erent porque de di ff concentraciones
inhibitorias Erent entre organismos ( Govarthanan et al, 2013.; Naik y Dubey, 2013 ).
3.2. mi ff ect de plomo sobre la actividad ureasa
Se estudió la actividad ureasa de las células bacterianas, ya que sirve como una
Fig. 4. mi ff ect de plomo sobre la actividad ureasa basa en el diámetro exterior 600 de
Pararhodobacter sp. Los valores son las medias de dos experimentos
independientes.
W. Mwandira et al.
Fig. 5. imágenes de SEM (a, b) y los datos de XRD (c, d) de los precipitados formados por Pararhodobacter sp. en ausencia (a, c) y la presencia de Pb 5 mM 2 + ( b, d). (C = Calcita (CaCO 3); V = vaterita (CaCO 3); L = óxido de plomo (PbO)).
buen bioindicador de la actividad enzimática en la técnica de biorremediación MICP y se utiliza para
evaluar los cambios de salud ambiental que se producen en el medio ambiente. Como se muestra en Fig.
4 , La actividad de la ureasa no era signi fi cativamente una ff ected por el plomo. Este patrón, que era
probablemente debido a la e ff ECTS de plomo sobre la actividad enzimática, refuerza la fi hallazgos
reportados por Fujita et al. (2017) , Quienes encontraron que la ureasa acumulado en / sobre las células
de Pararhodobacter sp. Sin embargo, varios autores han informado de un signi fi disminución no puede
en la actividad enzimática y la actividad microbiana debido a la contaminación de metales pesados ​de
los ecosistemas acuáticos y de suelo ( Sadler y Trudinger, 1967; Nwuche y Ugoji, 2008; Begum et al.,
2009 ). El presente estudio reveló una insignificante disminuido en ureasa y la actividad microbiana.
Estos resultados fueron probablemente debido a otros factores como la sinergia de metales pesados
​según lo informado por Nwuche y Ugoji (2008) , Que observó la inhibición de las actividades microbianas
del suelo en respuesta a una combinación de Cu y Zn.
3.3. bioprecipitación plomo
Pararhodobacter sp. era correo ff caz en la eliminación completa de Pb 2+.
Comparación del porcentaje de eliminación de plomo durante bioprecipitación entre este estudio y
estudios previos muestra comparable fi cifras a otras bacterias ureolíticas aisladas a partir de varios
sitios tales como spharoides Rhodobacter aislado de un aceite fi ELD logra 90,31% ( Li et al., 2016 );
Enterobacter cloacae aislado de una mina abandonada logra 68,1% ( Kang et al., 2015 ); Sporosarcina
pasteurii alcanzado el 100% ( Mugwar y Harbottle, 2016 ); y tumescens Terrabacter alcanzado el 100%
( Li et al.,
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Ingeniería ecológica 109 (2017) 57-64
2015 ). La capacidad de Pararhodobacter para eliminar por completo el plomo reside en su capacidad
de correo FFI cientemente hidrolizar urea para generar iones de carbonato y elevar el pH a
condiciones alcalinas (8,0 - 9.1), que promueve la precipitación de plomo y carbonato de calcio.
Fig. 5 muestra imágenes de SEM y los patrones de XRD de la control (a, c) y bioremediated (b,
d) precipitados. Fig. 6 A muestra las partículas esféricas de carbonato de calcio precipitado en
ausencia de plomo y con fi confirmada por análisis XRD en Fig. 6 do. Esta fi hallazgo se ha observado
en estudios previos que informaron di ff polimorfos Erent de carbonato de calcio en forma de vaterita y
calcita que se forman cuando la biomineralización se produce a través de la mediación por bacterias
( Park et al., 2010; González-Muñoz et al., 2010 ). Vaterita no se produce en abundancia en el medio
ambiente natural, pero es un precursor importante en la formación de calcita de una forma más
estable de carbonato de calcio ( Nehrke y Van Cappellen de 2006 ). Además, Fig. 6 b muestra la
imagen SEM de precipitado en presencia de plomo. En el fi figura, los agregados framboidal se
identificaron fi ed como vaterita, mientras que los precipitados de forma esférica y romboédricos se
identificaron fi ed como calcita. En el proceso de MICP, carbonato de calcio puede adsorber o
incorporar iones tóxicos libres Pb 2+ mediante la sustitución del ión de calcio divalente en el CaCO 3 celosía
( Fig. 6 re). Detoxi fi catión del plomo a la forma insoluble se produce cuando el ion libre tóxico se
transforma en una forma químicamente estable y no tóxico de plomo como fue esclarecido en otro
estudio de Li et al. (2013) .
W. Mwandira et al. Ingeniería ecológica 109 (2017) 57-64

Fig. 6. imágenes pictóricas de los resultados de todas las pruebas de la

jeringa después de 14 días mientras se varía el intervalo de inyección

bacteriana a (a) una (b) (c) dos cuatro y (d) siete veces. Izquierda, fi arena

ne; centro, arena gruesa; derecha, mezcla de golf y fi ne arena.

tabla 1
solidi fi condiciones de cationes de los intervalos de inyección.

tamaño de partícula de tiempos de inyección de solidi fi inyección de la solución de bacteriana Temperatura. (° C) Timing Condición de barras oblicuas fi catión

la arena bacterias cationes OD 600 (Día)

Parte superior Medio Fondo

Caso 1 170 μ metro Una vez Diario 1.0 30 14 moderadamente no solidi fi Ed no solidi fi ed
solidi fi ed

Caso 2 1.2 mm Una vez Diario 1.00 30 14 solidi fi ed no solidi fi Ed no solidi fi ed

Caso 3 170 μ m / 1,2 mm Una vez Diario 1.00 30 14 solidi fi ed no solidi fi Ed no solidi fi ed
Caso 1 170 μ metro Dos veces Diario 1.00 30 14 moderadamente no solidi fi Ed no solidi fi ed
solidi fi ed

Caso 2 1.2 mm Dos veces Diario 1.00 30 14 no solidi fi ed no solidi fi Ed no solidi fi ed

Caso 3 170 μ m / 1,2 mm Dos veces Diario 1.00 30 14 débilmente solidi fi ed no solidi fi Ed no solidi fi ed
Caso 4 170 μ metro Cuatro veces Diario 1.00 30 14 solidi fi ed solidi fi ed solidi fi ed
Caso 5 1.2 mm Cuatro veces Diario 1.00 30 14 solidi fi ed no solidi fi Ed no solidi fi ed
Caso 6 170 μ m / 1,2 mm Cuatro veces Diario 1.00 30 14 moderadamente solidi fi ed solidi fi ed
Solidi fi ed

Caso 4 170 μ metro Siete veces Diario 1.00 30 14 solidi fi ed solidi fi ed solidi fi ed
Caso 5 1.2 mm Siete veces Diario 1.00 30 14 solidi fi ed solidi fi ed solidi fi ed
Caso 6 170 μ m / 1,2 mm Siete veces Diario 1.00 30 14 solidi fi ed solidi fi ed solidi fi ed

3.4. solidi jeringa fi experimento catión resultados obtenidos después de la variación de la intervalo de inyección (una, dos, cuatro y siete
veces) se resume en tabla 1 y gráficamente se muestra en la
imágenes pictóricas de muestras de arena de todo solidi jeringa fi experimentos de cationes después Fig. 7 . la clasificación fi cación esquema adoptado en este trabajo se basa en la desarrollada por Sha fi i
de 14 días se muestran en la Fig. 6 . La comparación de la UCS y Clough (1982) , En la que cementado débilmente

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arena fue dE fi Ned como teniendo un UCS de menos de 0,3 MPa, arena moderadamente cementado
se De fi Ned como teniendo un UCS entre 0,4 MPa y 1 MPa y solidi fi arena ed fue que con mayor que
1 MPa ( Sha fi i y Clough, 1982 ). Generalmente, UCS aumentó con el aumento intervalo de inyección,
así como la parte superior de la muestra era solidi fi ed más de la parte inferior. Este aumento de la
UCS en la parte superior puede ser atribuido a cristales de calcita formar enlaces de cohesión entre
los granos de arena mediadas por
Pararhodobacter, que acumuló en la parte superior de la muestra.
El aumento de uniones cohesivas resultan en la cementación que conduce a la permeabilidad
disminuida, como se observó durante la investigación. Por lo tanto, MICP puede tanto inmovilizar el
plomo e inducir alta resistencia de los materiales contaminados a la erosión. También se observó
este fenómeno cuando se realiza un experimento usando pendiente pronunciada
pasteurii Sporosarcina ( Salifu et al., 2016 ). En general, los datos obtenidos mediante la prueba
demostraron que la jeringa MICP es una opción viable para su uso en coarse- y fi de grano fino de
arena. En experimentos de jeringa, el valor pH varió de 8.0 a 9.5, que es similar a lo que se ha
observado en otros estudios ( Stocks-Fischer et al., 1999 ). La concentración de iones de calcio fue
inferior en el fi rst 7 días del experimento, lo que indica la deposición de calcita en la columna y una
disminución en la deposición en la segunda mitad. Obstrucción de los medios porosos fue mayor en
arena gruesa que en fi finamente graduada arena. Esta obstrucción era debido a la formación de
carbonato de crecimiento celular y de calcio que acompañan el proceso de MICP.
4. Conclusión
En este estudio, hemos demostrado por fi tiempo primero que el plomo (Pb) se puede
bioremediated por Pararhodobacter sp. y que el microorganismo fue capaz de la eliminación
completa de 1036 mg / L Pb 2+ durante 6 h de incubación a través de la elevación del pH a
condiciones alcalinas (8,0 - 9.1). SEM y XRD más con fi transformación rma de tóxico libre de Pb 2+ iones
a una forma más estable de plomo que bioprecipitated junto con calcita o vaterita, que eran
predominante. Además, los experimentos de jeringa revelaron que UCS fue mayor cuando se
realizaron siete inyección en oposición a menos intervalo de inyección de bacterias. el incond fi resistencia
Klaus, Putz, HB, 2017. Partido! - fase Identi fi de cationes a partir de polvo Di ff raction, Crystal
a la compresión definida aumentó con un aumento en intervalo de inyección con la máxima incond fi resistencia
a la compresión Ned de 1,33 MPa para fi arena ne,
2,87 MPa para la arena gruesa y 2,80 MPa para la arena mezclada. por
Pararhodobacter ae FFI cientemente inducir inmovilización plomo el intervalo bacteriana requerida es
cuatro veces con una concentración de calcio y urea de
0,5 M y la concentración bacteriana de 10 9 UFC / ml. Estos resultados facilitarán la biorremediación
de plomo en tanto fi ne materiales y gruesos como un método ecológico y sostenible de remediación
de metales pesados.
Expresiones de gratitud
Este trabajo fue patrocinado por la JSPS KAKENHI la subvención Número JP16H04404 y JST /
JICA, SATREPS (Ciencia y Tecnología
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Fig. 7. comparación UCS de los resultados obtenidos cuando la variación de
la inyección de bacterias para fi ne, arena gruesa y mixta.
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