Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
PROYECTO DE TESIS:
“ACTIVIDAD PREBIOTICA DE INULINA OBTENIDA DEL Allium
sativum (AJO) EN LA MICROBIOTA INTESTINAL”
Presentado por:
PEDRO MICHAEL MACOTELA, SABOYA
ASESOR:
Mg. Cecilia Ignacio Punín
Lima, Perú
Abril 2019
1
ÍNDICE
Índice general i
Índice de figuras iv
Índice de tablas v
Introducción vi
2
2.2.1.6 Otros componentes 14
2.2.2 Tropaeolum majus (mastuerzo) 15
2.2.2.1 Taxonomía 15
2.2.2.2 Hábitat y distribución 16
2.2.2.3 Partes utilizadas 16
2.2.2.4 Morfología de la flor 16
2.2.2.5 Aplicaciones 18
2.2.2.6 Composición química 18
2.2.2.7 Flavonoides: propiedades 18
2.2.2.8 Quercetina 20
2.3 Definición de términos básicos 21
3
4.4.3 Procedimientos 27
4.5 Aspectos éticos 28
FUENTES DE INFORMACIÓN 33
ANEXOS 36
4
INDICE DE FIGUAS
5
INDICE DE TABLAS
6
INTRODUCCION
7
consideran como fibras fermentables, solubles y no viscosas. La inulina de
alto rendimiento (HP) es un prebiótico de larga cadena y alto peso
molecular, mezcla de inulina tipo fructano con un grado de polimerización
menor de 10 (13). Los prebióticos pueden restaurar la Akkermansia
muciniphila en personas obesas y con diabetes. Estos cambios se
relacionan con el mejoramiento de la homeostasis de la glucosa y la
reducción de la endotoxemia. (14, 15).
8
CAPÍTULO I
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
9
1.3 OBJETIVOS.
10
1.4.2 Viabilidad de la investigación
11
CAPÍTULO II
BASES TEORICAS
12
MAZA P. OBTENCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE INULINA A PARTIR DE
RAÍZ DE DABLIA (Dahlia sp.), OBTENIDA DE LA CIUDAD DE AYABACA,
PIURA. Para Obtener El Grado Académico De Ingenieria Agroindustrial e
Industrias Alimentarias. Ayabaca: Universidad Nacional de Piura; 2015
[citado 07 de junio 2019]. Disponible en
http://repositorio.unp.edu.pe/bitstream/handle/UNP/670/IND-MAZ-
PE%C3%91-15.pdf?sequence=1&isAllowed=y
13
Resultado:las ratas diabéticas sin tratamiento, mostraron
nivelesde glucosa y MDA significativamente elevados en
comparación con el grupo no diabético. Se observó, también
una disminución significativa en los niveles de glucosa
(39.1%) en el tratamiento con dosis más elevada (1100
mg/kg, CDI3), con respecto al grupo control positivo.
Conclusiones: a mayor consumo de Inulina los niveles de
glucosa bajan significativamente, con la dosis mayor
reducimos la glucosa un 39.1% (2).
REFERENCIA
14
Hurtado D. DETERMINACIÓN DE LA COMPOSICIÓN
QUÍMICA PROXIMAL, CARBOHIDRATOS TOTALES,
AZÚCARES LIBRES Y FRUCTANOS DEL TIPO INULINA –
FRUCTOOLIGOSACÁRIDOS DEL YACÓN (Smallanthus
sonchifolius (Poepp. et Endl.) H. Robinson). Para obtener el
Titulo Profecional Licenciado en química. En la Universidad
Peruana Cayetano Heredia. Perú, 2015. Objetivo: analizar
la composición química proximal,carbohidratos totales,
azucares libres como los fructanos encontrados y extraidos
del Yacon. Metodologia: esta sustancia fue extraida
despues de 3 dias de recoleccion de Cajamarca – San
Miguel. Resultados: humedad (83,53%), carbohidratos
(88,55) estos carboidrados fueron extraidos con la tecnica
fenol-sulfurico, Proteínas (2,94), grasas (0,4%),
cenizas(2,03), fibras (6,08), PH (6,14), solidos solubles
(15,3), acidez (0,206%) y estos minerales fueron
determinadas por fluoresencia con una mayor proporción:
potacio(554 mg/100g), fósforo(270mg/100g),
calcio(144mg/100g). Conclusion: analizando a la fructuosa
de tipo inulina fructooligosacarido obtubimos 65,33%, en
comparación con el estandar 95,62% demostando asi que la
fructuosa del yacon amarillo contine un buen porcentaje de
inulina que asu ves es veneficiosa para el tracto digestivo (3)
15
http://repositorio.upch.edu.pe/bitstream/handle/upch/668/D
eterminaci%F3n+de+la+composici%F3n+qu%EDmica+prox
imal,+carbohidratos+totales,+az%FAcares+libres+y+fructan
os+del+tipo+inulina+-
+fructooligosac%E1ridos+del+yac%F3n+(Smallenthus+son
chifolius+(Poepp.+et+Endl.)+H.+Robinson).pdf?sequence=
1
16
papel en la fisiología del ser humano, tanto en sus estados de
salud y de enfermedad, como muy probablemente en su
evolución como especie. Como consecuencia la visión que
tenemos de los microorganismos está cambiando ()
17
2.2.1 BASES TEORICAS
18
2.2.1.2 Taxonomía
Tabla N° 1
La categorización taxonómica
Reino: Plantae
División: Magnoliophyta
Clase: Liliopsida
Orden: Asparagales
Familia: Amaryllidaceae
Subfamilia: Allioideae
Tribu: Allieae
Género: Allium
REFERECIA BIBILIOO:
19
Cultivo: El ajo es una planta muy rústica ya que se desarrolla en
casi todas las zonas de clima templado del mundo. No requiere
condiciones climatológicas especiales, aunque sí suele ser un
poco más picante en climas fríos. Al principio de su desarrollo
soporta bien las bajas temperaturas, pero para un correcto
desarrollo requiere temperaturas nocturnas por debajo de los
16° C. Sin embargo, en pleno desarrollo vegetativo soporta
temperaturas elevadas, siempre que haya humedad en el suelo
(18).
Referencia 18:
20
2.2.1.5 Morfología
21
2.2.1.6 Propiedades
Antibiótico y antimicótico.
Antifebril, estimulante, diurético y expectorante.
Antioxidante.
Previene la hipertensión y la mala circulación.
Disminuye el colesterol y las grasas y favorece la salud
del aparato digestivo.
Es una ayuda en casos de encefalitis.
Recomendado en casos de diabetes.
Colabora en la prevención de algunos casos de
meningitis.
Es un aliado contra los parásitos intestinales.
Antibacteriano natural.
22
en el ajo se encuentran: alixina, alicina, aliina, ajo en, adenosina,
alil metano tiosulfinato, dialil disulfuro, dialil trisulfuro, alil metil
triosulfinato, S-alil mercaptocisteína, 2-vinil-4H-1,2-ditiina y 5-
alilcisteína (Figura 3); En el ajo también se encuentran hormonas
que actúan de manera similar a las hormonas sexuales
masculinas y femeninas, otras sustancias como fermentos,
colina, ácido hidrorodánico y yodo, además se han aislado hasta
17 aminoácidos entere los cuales se encuentran: ácido
aspártico, asparagina, alanina, arginina, histidina, metionina,
fenilalanina, leucina, serina, treonina, prolina, triptófano y
valina.(20)
Referencia 20
Tabla N°2.
Composición química en 100 g de Allium sativum (Ajo).
ANÁLISIS PROXIMAL CANTIDAD
AGUA 58.58 G
PROTEÍNA 6.36 G
CARBOHIDRATOS 33.06 G
(POR DIFERENCIA)
AZÚCARES TOTALES 1G
23
Tabla N° 3.
Contenido de vitaminas en 100 g de Allium sativum (Ajo)
VITAMINA CANTIDAD
Vitamina C 31.2 mg
Tiamina 0.2 mg
Riboflabina 0.11 mg
Niacina 0.7 mg
Vitamina b6 1.235
Folato 3 µg
Vitamina A 9 UI
Vitamina E 0.08 mg
Vitamina K 1.7 µg
Tabla N°4
Contenido de minerales en 100 g de Allium sativum (Ajo)
MINERAL CANTIDAD
Calcio 181 mg
Hierro 1.7 mg
Magnesio 25 mg
24
Fósforo 153 mg
Potasio 401 mg
Sodio 17 mg
Zinc 1.16 mg
Figura N°3
Estructuras químicas de los compuestos azufrados del Allium
sativum (Ajo)
Fuente:http://www.unsis.edu.mx/revista/doc/vol3num8/A4_Efectos_Terapeut
icos_Ajo.pdf
25
2.2.2 Prebióticos
26
compuestos que inhiben a los potenciales patógenos,
reduciendo los niveles de amoníaco, y produciendo vitaminas y
enzimas digestivas (22).
REFERENCIA 21
REFERENCIA 22
La oligofructosa
Inulina
Galacto oligosacáridos
Lactulosa
Oligosacáridos de la leche materna
27
2.2.3 Inulina
Referencia 23
28
REFERENCIA 24
Tabla N°5
Características fisicoquímicas de la inulina
29
Referencia
Tabla N°6
Características físicas de la inulina
Referencia:
30
Tabla N°6
Características químicas de la inulina
Tabla N°7
Porcentaje de inulina en peso fresco desde algunas fuentes
importantes
31
Referencia:
Fuente: Traducido al español de: KAUR, Narinder and GUPTA, Anil K. Applications
of inulin and oligofructose in health and nutrition. J. Biosci. 27(7): 703-714,
december 2002.
Tabla N°8
Contenido de inulina (% en peso fresco) de plantas que son
comúnmente usadas en la nutrición humana.
REFERENCIA:
32
2.2.3.3 Estructura química
33
2.2.3.4 Propiedades biológicas
Referencias 25
Gibson, G.R., Roberfroid, M.B. 1995. Dietary modulation
of the human colonie microbiota: Introducing the concept
of prebiotics. Journal of Nutrition. 125: 1401-1412.
34
hidrolizados en su totalidad por las bifidobacterias
constituyentes del 25% de las bacterias del colon en el
intestino grueso, lo que significa que la inulina tiene
efecto bifidogénico. Estudios han demostrado que la
inulina una vez ingerida entra al colon en una cantidad
mayor al 90 %, donde posteriormente son
metabolizadas por la microbiota en 55 % de ácidos
orgánicos como el ácido láctico y ácidos grasos de
cadena corta (el ácido acético, propiónico y butírico),
35% de biomasa bacteriana, y 10 % de gases (CO2, H2,
CH4). Los ácidos y el lactato contribuyen a la energía del
metabolismo humano, además son utilizados en parte
por las propias bacterias. Estos factores en conjunto
explican el bajo valor calórico de la inulina. Al estimular
el crecimiento de las bacterias benéficas, con la
producción de ácidos grasos de cadena corta
disminuyen el pH intestinal permitiendo que sea un lugar
no apto para bacterias patógenas, disminuyendo
paralelamente sus posibilidades de colonización y
translocación, así como algunas enzimas que generan
problemas de salud (25).
Referencias 25
35
La inulina es un integrante de la fibra alimentaria,
en particular de la llamada fibra soluble. Al ser
moderadamente soluble en agua, tiene además la
propiedad de formar gelatinas o geles que atrapan
gran cantidad de agua. Los subproductos de
metabolización de la inulina parece que aumentan
el peristaltismo intestinal y facilitan la absorción de
algunos elementos minerales calcio, magnesio y
fósforo), pero esta absorción mejorada disminuye
con el tiempo.
36
Referencia 26
37
2.2.3.6 Aplicaciones
38
cuarto de las calorías del azúcar y entre un sexto y
un noveno de las calorías de las grasas.
Referencia 27
39
a la secreción de ácido gástrico, únicamente se desarrollan
especies resistentes a pH ácido como estreptococos y
lactobacilos (30). En el intestino delgado los niveles aumentan
progresivamente, desde 104 unidades formadoras de colonia
(ufc) por gramo de contenido en la parte superior (duodeno),
donde son mayoritarios nuevamente los lactobacilos y los
estreptococos (31), hasta 108 ufc/g en la región distal del íleon.
Las especies cultivables más numerosas en esta región son las
bifidobacterias, enterobacterias y bacteroides (32). Los
principales factores limitantes para el establecimiento de los
microorganismos en el intestino delgado son los movimientos
peristálticos y la secreción de jugos pancreáticos y biliares.
40
habituales en heces humanas, los cuales se consideran un
reflejo de la microbiota del colon.
Referencias 28
Referencia 29
Referencia 30
Referencias 31
Referencia 32
Referencia 33
Referencia 34
41
Tannock GW. 1995. Normal microflora: an introduction to
microbes inhabiting the human body. Chapman and Hall,
Londres.
Referencia 35
Referencia 36
Tabla N°9
Microorganismos detectados comúnmente en heces humanas y su
concentración.
42
2.2.4.1 Efectos fisiológicos de los productos de
fermentación de inulina en el tracto gastrointestinal
Referencia 37
43
2.2.4.2 Implicaciones de la microbiota intestinal en la
salud
Referencia 38
44
2.2.4.2.1 Infecciones gastrointestinales.
Referencia 39
REFERENCIAS 40
45
Infecciones por Helicobacter pylori. Es una
bacteria espiral Gram-negativa que coloniza
la mucosa gástrica humana. Este
microorganismo se ha asociado con el
desarrollo de gastritis crónicas, úlceras
pépticas y cáncer gástrico. Uno de sus
principales factores de patogenicidad es la
presencia de la enzima ureasa que hidroliza
la urea generando amonio, de forma que el
pH local aumenta y se favorece la
colonización y la proliferación del
microorganismo (41).
REFERENCIAS 41
46
En la actualidad numerosos estudios tratan
de clarificar y establecer las posibles
relaciones de los microorganismos o sus
productos con los trastornos
gastrointestinales no infecciosos.
Referencia 42
Referencia 43
47
defectos en neurotransmisores han sido
propuestos también como posibles factores
que favorecerían su desarrollo o su
sintomatología (44).
Referencia 44
48
Referencia 45
Referencia 46
49
Moore WE, Moore LV. 1995. Intestinal flora of population that
have a high risk of colon cancer. Appl Environ Microbiol 61:
3202-3207.
Referencia 47
Referencia 48
2.2.5 Bacterias
50
En este sentido, este microorganismo generalmente
resiste la acidez gástrica y las sales biliares. Su tasa
de supervivencia en el tracto gastrointestinal oscila
entre un 2 y 5% y logra concentraciones suficientes
en el colon (106-108 UFC/mL).
2.2.5.1.1 Caracteristicas
51
2.2.5.1.2 Morfología
52
posee un efecto sinérgico entre la proteína
S&layer y la nisina que inhibe el crecimiento y
genera lisis de bacterias patógenas, tanto
Gram positivas como Gram negativas.
2.2.5.1.3 Taxonomía
Tabla N° 10
La categorización taxonómica
Fuente:https://www.lifeder.com/lactobacillus-
acidophilus/#Morfologia
2.2.5.1.4 Beneficios
53
Los nutricionales se refieren a la propiedad que
posee esta especie de aumentar la
biodisponibilidad de ciertos metabolitos en el
intestino para que estos sean absorbidos. De
esta manera se favorece el estado nutricional
del individuo.
54
digestiva normal. Tiene beneficios para los pacientes
con síndrome de intestino irritable, incluyendo la
reducción de la hinchazón, gases, diarrea,
estreñimiento y dolor abdominal.
2.2.5.2.1 Propiedades
2.2.5.1.4 Beneficios
55
respuesta de los síntomas de las tasas de
citoquinas en 77 pacientes con síndrome de
intestino irritable. Los B. infantis proporciona
una mayor reducción de los síntomas (dolor,
malestar abdominal, distensión abdominal,
distensión intestinal y dificultad de
movimientos). Al inicio del estudio, los
pacientes con síndrome intestino irritable
mostraron una relación anormal de IL-10 / IL-
12, lo que indica un estado pro-inflamatorio.
2.2.5.3.1 Características
56
pueden producir ATP a través de la
fermentación. Como características bioquímica
presenta una prueba de Voges-Proskauer
positiva y no fermenta la arginina, el manitol ni
el sorbitol. No soportan altas concentraciones
de NaCl, lo que lo diferencia de los géneros
Enterococcus y Lactococcus.
57
2.2.5.3.2 Taxonomía
Tabla N° 11
La categorización taxonómica
Dominio Bacteria
Phylum Firmicutes
Clase Bacilli
Orden Lactobacillales
Familia Streptococaceae
Género Streptococcus
Especie thermophylus
Fuente: https://www.lifeder.com/streptococcus-thermophilus/
2.2.5.3.2 Morfología
58
no formadora de esporas que carece de
enzimas citocromo oxidasa y catalasa.
2.2.5.3.3 Beneficios
59
2.3 DEFINICIONES DE TERMINOS BASICOS
60
- Endotoxina: es un componente mayoritario de la membrana
externa de las bacterias Gram negativas; está compuesto por una
parte lipídica y cadenas características de oligosacáridos y
polisacáridos.
61
CAPÍTULO III: HIPÓTESIS Y VARIABLES
Formulación de hipótesis
3.1.1 Hipótesis general
La Inulina obtenida del Allium sativum (Ajo) presenta actividad
prebiótica en la Microbiota intestinal.
62
UNIDAD DE
VARIABLES DEFINICIÓN
DIMENSIONES INDICADORES MEDIDA/PUNTO
INDEPENDIENTE CONCEPTUAL
DE CORTE
La inulina es
un tipo de
fibra
3/200g
prebiótica mL/g
soluble en
INULINA agua que
OBTENIDA sirve como CONCENTRACION
DEL Allium alimento DE INULINA
sativum (AJO) para los
probioticos mL/g
4/200g
aumentado
la población
microbiana.
UNIDAD DE
VARIABLES DEFINICIÓN
DIMENSIONES INDICADORES MEDIDA/PUNTO
DEPENDIENTE CONCEPTUAL
DE CORTE
Compuestos
PROLIFERACION
no digeribles,
presentes en DE BACTERIAS:
la dieta, que CRECIMIENTO
-Lactobacillus
estimulan el EN MEDIO DE
EFECTO crecimiento acidophilus >=1
de bacterias CULTIVO
PREBIOTICO -Bifidobacterium
no patógenas UFC/g
resultando en infantis
un beneficio
-Streptococcus
para la salud.
thermophilus
63
CAPÍTULO IV: METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN
64
Experimental, porque habrá intervención del investigador.
4.3.1 Población
4.3.2 Muestra
500 gramos de Allium Sativum (Ajo) seleccionadas de manera
aleatoria y certificado por la Universidad Agraria.
4.4.1 Técnicas
Extracción sólido-líquido
65
Consiste en hacer diluciones de la muestra o del
inoculo de cultivo, para que en condiciones óptimas de
temperatura y tiempo de incubación pueda
desarrollarse y multiplicarse in vitro, partiendo de una
concentración mayor a menor.
Reactivación de la cepa
66
CAPÍTULO V: ADMINISTRACIÓN DEL PROYECTO DE TESIS
● Papel periódico
● Tijeras
● Fundas plásticas herméticas
● Espátula de plástico
● Algodón
● Bata de laboratorio
● Guantes de látex
● Mascarilla
67
● Embudos
● Picnómetros
● Balón de 500 mL PYREX
● Pipetas graduadas y volumétricas 5-10 mL
4.1.2.4. EQUIPOS
● Estufa.
● Picatodo
● Balanza Analitica
● Mufla
● pH-metro digital
● Cromatografía Líquido de Alta resolución (HPLC)
5.2 Presupuesto
COSTO
COSTO
DESCRIPCIÓN CANTIDAD UNITARIO
TOTAL (S/.)
(S/.)
MATERIALES DE ESCRITORIO
68
SUBTOTAL 1200.00
MATERIAL BIOLÓGICO
L. acidophylus 1 cepa 200.00 200.00
B. infantis 1 cepa 200.00 200.00
S. thermophilus 1 cepa 200.00 200.00
Recursos naturales vegetales 5 kilo 5.00 25.00
SUBTOTAL 625.00
TOTAL 2502.00
5.3 Cronograma
MESES
FASE MARZO ABRIL MAYO JUNIO JULIO
1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
Recolección de la Información x
Informe preliminar x
Sustentación x
69
FUENTES DE INFORMACION
70
promoters in rabbit feeding: A review. World Rabbit Science.
2007; 15:127-140. doi: http://dx.doi.org/10.4995/wrs.2007.597
14) DEWULF, E. M., et al., “Insight into the prebiotic concept: lessons
from an exploratory, double blind intervention study with inulin-
type fructans in obese women”, Gut, 2013, 62, 112-1121.
71
15) BURCELIN, R., et al., “Gut microbiota and diabetes: from
pathogenesis to therapeutic perspective”, Acta Diabetol., 2011,
48, 257-273.
72
18) Olmedo P. Estudio de diferentes fracciones y extractos de
Allium sativum sobre la reactividad vascular, niveles de
colesterol y cultivos celulares. Revista Eureka. 2010; 1(1): 08-14.
73
74