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Manualdepracticas9 1508 PDF
Manualdepracticas9 1508 PDF
• Está prohibido comer, fumar, beber o masticar chicle dentro del laboratorio.
• Antes de retirarse del laboratorio los alumnos deberán dejar limpio su lugar de
trabajo.
CARRERA:
SEMESTRE:
MAESTRO:
INTRODUCCION:
OBJETIVOS:
MATERIAL:
Durante hace muchas generaciones las ratas de laboratorio se han habituado a ser
manejadas por el hombre. Recuerde pues, que si éste es su primer contacto con la rata
albina, el novicio es usted. Las ratas muerden, sin embargo, las criadas en el laboratorio
raramente lo hacen mientras no se les trate mal. Las siguientes maniobras le permitirán
manejar las ratas sin riesgo. La cola es un apéndice muy conveniente para el manejo del
animal y permite levantarlo sin hacerle daño. Incluso, cuando se sujeta de la cola, la rata
trata de alejarse; en este estado inmóvil y ocupada en otra cosa, se sujeta poniendo el dedo
índice y el dedo medio de la otra mano alrededor de la cabeza y extendiéndolos por debajo
de la mandíbula inferior y no sobre la garganta, pues la rata no suele comprender por qué
debería cooperar con quien intenta estrangularla.
Es aconsejable no levantar las ratas por la cola, pues son bastante ágiles para girar
en el aire y trepar por su propia cola. No es muy sorprendente, que una rata en estas
condiciones se sienta inclinada a morder. Doblando un poco la mano que sujeta a la cabeza,
el cuerpo de la rata queda acostado sobre la palma de la mano. No debe agarrarse o
apretarse el cuerpo del animal con los otros dedos, pues esta presión resulta molesta y
puede desencadenar movimientos de defensa. No es tiempo perdido, sino muy bien
invertido, aquel que se gasta en manejar a la rata, pasándola de una jaula a otra, o de ahí a
la mesa, acostumbrándose tanto el animal como el estudiante al conocimiento mutuo.
ANESTESIA
INYECCIONES
c) Inyección intraperitoneal: Sujete al animal con una mano y con la otra tómela
de las patas posteriores y extiéndalas de tal manera que el abdomen del animal quede tenso
y expuesto al compañero que realizará la inyección. El compañero que inyecta deberá
identificar el cuadrante inferior izquierdo del abdomen, ya que en esta zona no hay órganos
vitales, excepto el intestino delgado. Aplique la punta de la aguja en el sitio escogido y con
un movimiento rápido introduzca la aguja con la jeringa, previamente preparada, a través
de la pared abdominal, al hacerlo se percibe claramente cuando la pared cede al empuje de
la aguja. Tenga cuidado de introducir solamente la punta de la aguja en la cavidad
peritoneal, ya que existe el riesgo de perforar el intestino. Una vez en el peritoneo, inyecte
la solución y saque la aguja en la misma dirección en la cual entró. Los líquidos inyectados
en el peritoneo no tienen que estar a la temperatura del cuerpo, pero es mejor calentarlos.
Cada integrante del grupo debe practicar cada tipo de inyección sobre la rata
anestesiada y luego cuando menos una en una rata despierta.
SISTEMAS DE ÓRGANOS
Continuando con la anestesia es la misma rata, extiéndala boca arriba sobre la mesa
de disecciones, amarre las patas con hilos del doble cero y sujételas a los lados de la mesa.
Disección de la rata: Con la rata aún anestesiada, se hace una incisión en la línea
media a través de la piel de la superficie ventral, desde el ángulo anterior del maxilar
inferior hasta la sínfisis del pubis. Se separan los bordes de la piel y se retraen hacia los
lados. A continuación se introduce la punta de las tijeras directamente en la línea media en
el extremo inferior de la caja torácica a un lado del apéndice xifoides. Al abrir la cavidad
torácica los pulmones ya no pueden funcionar, por lo que debe suspenderse la anestesia. El
efecto del éter residual en la rata, bastará para mantener un nivel aceptable de anestesia y
evitará que la rata perciba los estímulos dolorosos. El sistema nervioso central pronto deja
de funcionar en condiciones de anoxia y la muerte se produce rápidamente.
Sistema respiratorio y sistema cardiovascular. Apoyándose en el esquema de las
figura 39, abra la cavidad torácica. Para esto, use como referencia el orificio hecho a nivel
del apéndice xifoideo y pegándose lo más posible a la pared costal, córtela hacia arriba
siguiendo primero una de las líneas mamarias (a un lado del esternón), hasta la clavícula del
mismo lado. Repita la maniobra en el lado opuesto. Levante y separe la parrilla costo-
esternal. Esta maniobra deja expuesta toda la cavidad torácica. Observe los pulmones que
se han retraído y el corazón que continúa latiendo. El animal hace algunos intentos por
respirar. Observe la contracción de los músculos respiratorios, en especial el abombamiento
y aplanamiento del diafragma que separa el tórax del abdomen.
Identifique el timo sobre el corazón y la cara anterior de la parte baja del cuello.
Sepárelo y comente con sus compañeros las funciones de este órgano.
Siguiendo la línea media extienda hacia arriba la incisión, desde la cavidad torácica
hasta el maxilar inferior. Identifique en el cuello las glándulas salivales submaxilares y
sublinguales y los ganglios linfáticos. Extírpelos. Localice la tráquea y sígala hacia abajo
desde la laringe hasta su división en bronquio derecho e izquierdo y continúe, si es posible,
hasta los bronquiolos pequeños, que corresponden a cada segmento grande del pulmón.
Evite cortar los grandes vasos cardiacos. Una vez expuestos los lóbulos pulmonares, corte
un fragmento pequeño del pulmón y exprímalo fuertemente entre los dedos. Perciba la
sensación táctil de crepitación. Corte otro fragmento pequeño y junto con el anterior
póngalos en un vaso con agua. Observe si flotan o se hunden.
Identifique la glándula tiroides (Fig. 45), localizada por abajo de la laringe delante
de la tráquea. Corte la traquea transversalmente un poco por debajo de la glándula tiroides y
ábrala longitudinalmente hacia arriba incluyendo la laringe. Obsérvela cuidadosamente e
identifique la epiglotis y las cuerdas vocales. Con una tijera fuertes corte por el centro la
mandíbula inferior.
Identifique el nacimiento de la aorta y los vasos que emergen del cayado; diseque la
aorta torácica hasta el diafragma (figuras 45 y 41).
Extirpe el corazón, los pulmones y los grandes vasos (Fig. 45), lávelos con agua y
colóquelos sobre la tabla de disecciones.
Extirpe uno de los ojos del animal, abra la esclerótica y con cuidado extraiga el
cristalino. Mire a través de él y vea como las imágenes se observan invertidas.
RESULTADOS:
En el dorso de cada hoja, haga un esquema de cada uno de los siguientes sistemas
de órganos: cardiovascular, respiratorio, digestivo, excretor, reproductor, nervioso,
endocrino e inmune), Identifique a cada uno con los nombres de los respectivos órganos
que los conforman.
De una breve explicación de la función de cada uno de los sistemas.
BIBLIOGRAFÍA
Chiasson R.B. Laboratory Anatomy of the White Rat. WM. C. Brown Company
Publishers. Iowa. 1978.
Hebel R, and Stromberg M.W. Anatomy of the Laboratory Rat. Williams and Wilkins Co.
Baltimore. 1976.
Olds R.J. and Olds J.R. A Colour Atlas of the Rat. Dissection Guide. Wolfe Medical
Publications Ltd (Ed). 1979.
Quintanar Stephano J.L. Anatomía Macroscópica de los Sistemas de Órganos. En: Manual
de Prácticas de Laboratorio. Universidad Autónoma de Aguascalientes (Ed). pp 5-10. 1989.
Sharp P.E. and LaRegina M.C. Experimental Methodology. In: The Laboratory Rat.
Suckow M.A. (Ed). CRC Press Boca Raton. 1998.
van Dongen J.J., Remie R., Rensema J.W. and van Wunnik G.H.J. Anesthesia of the
labotarory rat and General techniques. In: Manual of Microsurgery on the Laboratory Rats.
Techniques in the Behavioral and Neural Sciences Vol. 4.. Huston J.P. (Ed). Elsevier.
Amsterdam. pp 61-95. 1990.
Waynforth H.B. and Flecknell P.A. Administration of Substances. In: Experimental and
Surgical Techniques in the Rat. Academic Press. London. pp 1-67. 1992.
Wells T.A.G. The Rat. A dissection manual. Dover Publication, Inc. New York. 1964.
OBJETIVOS:
INTRODUCCIÓN
ELEMENTOS DE UN CANAL:
PROCEDIMIENTO
NOTA: El registro de una señal conocida se llama calibración del registro. Ningún registro
puede considerarse completo sin que la calibración de amplitud y tiempo.
CALIBRACIÓN DE UN REGISTRO
ESTIMULADOR S1-10
OPERANDO EL ESTIMULADOR S1-10
Peso Desplazamiento
(g) vertical del registro (g)
x y
0
________________________________
5
________________________________
10
________________________________
20
________________________________
40
________________________________
50
________________________________
100
Con los datos obtenidos haga una gráfica en papel cuadriculado, en
la que al eje de las x correspondan los valores crecientes de las
pesas y al eje de las y a los valores verticales máximos del registro.
Una los puntos y observe la recta que se forma.
POTENCIAL DE ACCION COMPUESTO
INTRODUCCIÓN
OBJETIVOS
MATERIAL Y METODOS
Material y equipo
Material biológico: Rana (aunque también pueden emplearse otras especies como la rata o
el gato
Soluciones. 1) Ringer rana. (puede ser suficiente solución salina isotónica) 2) Solución de
Xilocaína al 2%.
A B C
D E F G
Figura 1. Secuencia de fotografías que ilustra la obtención del nervio ciático de la rana. A:
vista de la parte inferior del cuerpo de la rana después de haber retirado las vísceras
abdominales; B: Acercamiento que ilustra las últimas raíces nerviosas, donde se origina el
nervio ciático; C: lustración de la manera como se refiere el nervio ciático para su
disección; D: ilustración de la pared posterior de la cavidad abdominal con el nervio ciático
referido; E: ilustración del nervio ciático disecado hasta la altura de la rodilla; F: en este
caso se ha seleccionado el nervio tibial, cuya disección se continúa hasta el tobillo (G).
A B
C D u
o
e
REGISTRO DE DATOS
RESULTADOS
1) Guyton, A.C. and Hall, J.E. Membrane Potentials and Action Potentials. In Textbook of
Medical Physiology. 10a ed., Saunders. Philadelphia. pp 52-66. 2000.
2) Ganong, W.F. Excitable tissue: Nerve. In: Review of Medical Physiology. 20a edition.
Lange Medical Books/McGraw-Hill. New York. pp 49-61. 2001
3) McCormick, D.A. Membrane Potential and Action Potential. In Fundamental
Neuroscience. (Zigmond, M., Bloom, F., Landis, S., Robertis, J. and Squire, L. eds). Ist.
ed. Pp. 129-154. Academic Press, London UK.
4) Koester, J. and Siegelbaum, S.A. Propagated Signaling: The Action Potential. In
Principles of Neural Science.(Kandel, E., Schwartz, J. and Jessell, T. eds.). 4th. ed., pp.
150-170. Mc Graw Hill.
PROPIEDADES DEL MUSCULO ESQUELETICO
INTRODUCCIÓN
Cuando una fibra muscular es activada por un impulso nervioso proveniente de una
motoneurona, la fibra se contrae completamente (RESPUESTA TODO O NADA). La
graduación de la contracción tan característica del músculo completo, está determinada por
variaciones en el número de fibras musculares que participan en la contracción. Bajo
circunstancias normales, la fuerza de la contracción se lleva a cabo dependiendo del
número de fibras que se activan. Siempre debe tenerse en mente que la relación entre fibras
musculares que inerva una neurona motora es mayor que la unidad; es decir, una
motoneurona inerva siempre más de una fibra muscular, la relación de inervación varía para
cada unidad motora desde 1/100 hasta 1/600 en el músculo esquelético.
OBJETIVOS
Examinar las propiedades del músculo esquelético cuando se estimula directamente. Para
llevar a cabo lo anterior se deberán realizar las siguientes mediciones:
MATERIAL Y EQUIPO
1) Fisiografo (un canal) 2) Miógrafo tipo “C” 3) Tornillo de tensión 4) Juego de pesas
esas 5) Electrodos de estímulo de tipo alfiler 6) Cable estimulador 7) Tabla para rana 8)
Soporte universal 9) Regla 10) Estilete 11) Disectores de vidrio 12) Hilo cáñamo doble
cero 13) Canalizador de pulsos 14) Ringer rana y 15) Estuche de disecciones.
PROCEDIMIENTO
Calibre un canal del Fisiógrafo utilizando un transductor miógrafo tipo “C”, de tal
manera que 2.5 cm = 100 g.
Preparación muscular (Fig. 2). Destruya el cerebro y la médula espinal de una rana.
Colóquela sobre la tabla para rana y proceda a retirar la piel de la pata izquierda. Con los
disectores de vidrio diseque el músculo gastrocnemio en toda su longitud. Amarre el
tendón de aquiles (porción distal) con un hilo doble cero de unos 15 cm de longitud, deje
un pequeño espacio entre el hilo y el tendón para que el hilo no se resbale durante las
maniobras experimentales. Con la solución de Ringer rana mantenga húmedo el músculo a
lo largo del experimento. Corte el tendón entre el nudo del hilo y su inserción en el hueso
calcáneo y eleve el músculo gastrocnemio. Antes de fijar la rana a la tabla, pase un hilo
doble por cada uno de los orificios que la atraviesan. Tome a la rana y pase la pata por las
asas dejadas por los hilos dobles hasta llegar a la porción proximal de la tibia (rodilla). Jale
los hilos fuertemente para que la rodilla y los huesos de la pierna queden firmemente
apretados a la superficie de la tabla. Fije los hilos a los sujetadores que se encuentran a los
lados de la misma. Tome el cabo suelto del hilo amarrado al tendón y haga un nudo
dejando una pequeña asa e introdúzcala en la palanca del transductor. Inserte los electrodos
de estímulo de alfiler en los extremos distal y proximal de la masa muscular.
MANIOBRAS EXPERIMENTALES
Estímulo umbral para la contracción. Conecte los electrodos de alfiler al estimulador,
vía cables del estimulador. Ajuste la sensibilidad a aproximadamente 2.5 cm de amplitud
del registro = 100 g. Aplique una ligera tensión al músculo con el tornillo de tensión. Ponga
el deslizamiento del papel a una velocidad de 2.5 mm/seg, comience a estimular con pulsos
de 2 mseg. de duración. Utilizando estímulos aislados, incremente lentamente la intensidad
de los estímulos iniciando con 0 voltios hasta observar la primera contracción (sacudida
simple). Este es el estímulo umbral.
Ajuste la velocidad del papel a 0.10 cm/seg. Aplique al músculo una tensión de reposo
adecuada, seleccione el estímulo máximo de 2 ms de duración y aplique un estímulo cada 2
segundos hasta que se aprecie una disminución clara de la fuerza de contracción. Grafique
la altura de la contracción versus al tiempo como una medición de fatiga(*).
de reposo adecuada.
Ajuste la sensibilidad para poder registrar sacudidas musculares con una amplitud
adecuada. Ajuste la tensión de reposo al punto donde obtuvo la máxima contracción en el
punto anterior. Seleccione el voltaje del estímulo máximo. Con la velocidad del papel a 0.1
cm/seg estimule al músculo con varias frecuencias iniciando con 2 estímulos/seg durante 3
seg. Detenga el papel, seleccione 5 estímulos/seg, ponga en marcha el papel y estimule
durante 3 seg. Pare el papel y repita las maniobras con frecuencias de 7.5, 10, 20, 25 y 50
estímulos/seg. Observe como las sacudidas no regresan al nivel de reposo, aumentan de
intensidad y se van fundiendo en una sola contracción cuando aumenta la frecuencia de
estimulación. Determine la frecuencia con la que se alcanza la contracción tetánica.
Calibre el registro usando una pesa adecuada y determine la relación en gramos entre una
sacudida simple y la contracción tetánica. Determine si el músculo presenta signos de
fatiga (*).
Ajuste el desplazamiento del papel a 0.1 cm/seg. Seleccione el estímulo máximo. Ponga
la perilla de frecuencia del estimulador en 25 pulsos/seg y estimule el músculo nuevamente
durante dos minutos. Repita el procedimiento una vez más para observar la fatiga de las
fibras musculares.
(*)Aunque es difícil definir la fatiga, suponemos que esta existe cuando la tensión ha caído
un 37% de su valor inicial.
RESULTADOS:
CUESTIONARIO
BIBLIOGRAFÍA
INTRODUCCIÓN
OBJETIVOS
1. Estimular al nervio ciático con estímulos aislados para encontrar los estímulos
subumbral, umbral, máximo y supramáximos capaces de provocar la contracción
mínima y máxima respectivamente del músculo gastrocnemio.
2. Estimular al músculo directamente con estímulos aislados para encontrar los
estímulos subumbral, umbral, máximo y supramáximo.
3. Caracterizar las contracciones musculares al estimular repetitivamente al nervio.
4. Comparar el tiempo de fatiga de la unión neuromuscular y el tiempo de fatiga del
músculo.
5. Observar el efecto del bloqueo de la unión neuromuscular sobre la actividad
muscular.
MATERIAL Y REACTIVOS
Biológico: Rana
Equipo: 1) Fisiografo (un canal) 2) Transductor miógrafo tipo “C” 3) Estimulador eléctrico
4) Canalizador de pulsos 5) Electrodos de estímulo de ganchillo y de alfiler 6) Juego de
pesas 7) Estativo 8) Tornillo de tensión 9) Estuche de disecciones 10) Disectores de vidrio
11) Estilete 12) Hilo fuerte 13) Jeringa de 3 ml.
Calibre el canal del fisiógrafo con un transductor miógrafo tipo “C”. Utilizando una
pesa adecuada, calibre la amplitud del registro a 2.5 cm = 50 g.
Preparación neuromuscular
Establezca la velocidad del papel a 0.25 cm/seg y realice las siguientes maniobras:
Con el tornillo de tensión ajuste la tensión del músculo y estimule el nervio con
estímulos únicos de 2 mseg de duración y con voltaje creciente, desde cero hasta
observar las respuestas mínima y máxima del músculo. Anote la intensidad de los
diferentes estímulos aplicados y la magnitud de las contracciones. Con los datos
llene la Tabla 1 e identifique los voltajes de los estímulos; umbral, máximo y
supramáximos.
Con el estímulo máximo del nervio, estimule al nervio con frecuencias de 3, 5, 7.5,
10, 15, 20 y 25 pulsos/seg durante 3 seg en cada punto. Permita que la preparación
descanse 5 seg entre cada tren de estímulos. Note la suma de las contracciones y
determine si se han presentado el tétanos y la fatiga.
Antes de continuar ajuste la tensión de reposo del músculo y encuentre el estímulo máximo
del nervio y del músculo capaces de provocar una contracción muscular máxima. Calibre el
registro de tal manera que 2.5 cm de amplitud = 50 gr. Ajuste la velocidad del papel a 0.1
cm/seg.
RESULTADOS:
Con los datos de la Tabla 1, haga una gráfica con el voltaje en las abscisas y la
amplitud de las contracciones en las ordenadas. Exprese la amplitud en gramos. Señale en
la curva los estímulos subumbrales, umbral, máximo y supramáximos.
Con los datos de la Tabla 2, haga una gráfica con el voltaje en las abscisas y la
amplitud de las contracciones en las ordenadas. Exprese la amplitud en gramos. Señale en
la curva los estímulos subumbrales, umbral, máximo y supramáximos.
CUESTIONARIO
BIBLIOGRAFÍA
INTRODUCCIÓN
El músculo liso intestinal está ricamente inervado por plexos nerviosos que rodean
las capas longitudinal y circular. Una parte de este tejido exhibe contracciones circulares y
longitudinales, en adición a las contracciones peristálticas. El músculo responde al
estiramiento incrementando su longitud pero tendiendo siempre a mantener el contenido
bajo presión constante o en un estado de contracción isotónica (tono basal). El músculo liso
también responde a cambios en la temperatura, cuando esta aumenta, disminuye el umbral
eléctrico para la contracción muscular e incrementa la frecuencia (ritmicidad) y amplitud de
las contracciones. La estimulación eléctrica intensa a menudo da lugar a contracciones
sostenidas.
OBJETIVOS
1) Observar y registrar las contracciones rítmicas espontáneas del músculo liso
intestinal aislado de conejo y b) estudiar los cambios en el tono, frecuencia y
amplitud de las contracciones rítmicas en respuesta a las siguientes condiciones:
2) Efecto de drogas que mimetizan y bloquean las acciones del sistema nervioso
parasimpático y simpático.
3) Efectos de cambiar la temperatura del medio
4) Efectos de la hipoxia
MATERIAL Y MÉTODOSUIPO
1) Fisiógrafo (un canal), 2) miógrafo tipo “B”, 3) Pesa de 5 gr, 4) estativo y tornillo de
tensión 5) hilo y estuche de disecciones, 6) llaves de paso, 7) caja de Petri, 8) solución de
ACh (1 mg/ml), 9) solución de adrenalina (1 mg/ml), 10) solución de prostigmina (0.5
mg/ml) 11) solución de atropina (1 mg/ml), 12) Sistema de perfusión para órgano aislado
de mamífero (Fig. 1) conformado por:
a) Baño María a 38º C con bomba de perfusión y mangueras de conexión
b) Termómetro
c) Refrigerante
d) Solución Ringer para mamífero a 38º C con recipiente de reserva
e) Solución de Ringer para mamífero a 4º C
f) Solución de Ringer para mamífero a 40º C
g) Sistema de oxigenación (aireación) (bomba de aire para pecera)
h) Cámara para músculo liso con tapón y tubo en Y con mangueras y pinzas
i) Recipiente para solución de desecho
PROCEDIMIENTO
Analice, identifique y estudie en la Figura 1 cada una de las partes que componen el
sistema para mantener vivo el intestino aislado de conejo (in Vitro).
Encienda y calibre un canal del Fisiógrafo con un miógrafo tipo “B”, de tal manera que
5 gr desplacen la plumilla 4 cm. Ajuste la velocidad del papel a 0.5 cm/seg. Cheque la
plumilla de tiempo y seleccione una marca por segundo. Levante la palanca de las
plumillas, pare el desplazamiento del papel y proceda o obtener el intestino delgado de
un conejo. Disponga adecuadamente del cadáver del conejo.
*Nota: Llamaremos llave (1) a la que une al recipiente de Ringer con la cámara de
intestino y llave (2) a la que drena el paso de la cámara de intestino con el recipiente de
desecho. Con la llave 2 cerrada, abra la llave 1 y llene la cámara para músculo hasta la
marca de 50 ml. El Ringer fluirá por gravedad. Asegúrese que el sistema de aireación esté
burbujeando en el Ringer de la cámara. Proceda a montar el fragmento de intestino según se
explica en el párrafo anterior.
Con una velocidad del papel de 0.1 cm/seg y la plumilla de tiempo a una marca por
cada 30 segundos obtenga el registro de la actividad contráctil espontánea del músculo liso.
1) RITMICIDAD INHERENTE
Continuando con las condiciones anteriores, con el tornillo de tensión incremente
gradualmente la tensión sobre el músculo y obtenga un registro adecuado. A las
contracciones y relajaciones regulares se les llama movimientos pendulares y son
producidos por las fibras musculares mismas (miogénicos). Estos movimientos son
diferentes de los movimientos peristálticos, los cuales dependen de la inervación de la
pared intestinal (neurogénicos). Aplique tensión suficiente hasta observar contracciones de
algunos centímetros de amplitud. Centre el registro sobre el papel. Una vez estabilizado el
registro, obtenga un registro control durante 4 minutos. Determine la amplitud y la
frecuencia de las contracciones. Cheque la temperatura y la oxigenación (puede ser
necesario esperar algunos minutos para que las contracciones se estabilicen).
2) EFECTO DE LAS DROGAS SIMPATICAS Y PARASIMPATICAS:
b) Efectos de la adrenalina
Con la velocidad del papel a 0.1 cm/seg y la plumilla de tiempo en 1 cada 30
segundos, obtenga un registro control de 2-3 minutos. Incremente la velocidad del papel a 1
cm/seg y ponga la plumilla de tiempo en 1/segundo y vierta en la cámara de intestino 0.1
mg de la solución de adrenalina. Registre los cambios en el tono basal, amplitud y
frecuencia de las contracciones. No olvide señalar simultáneamente con el botón marcador
de eventos para determinar el período de latencia. Observe el efecto durante 6-8 minutos,
pare el fisiógrafo, proceda a lavar la preparación dos veces según se describió y cuantifique
las variables sobre el registro. Espere a que la preparación recupere la ritmicidad basal.
c) Efectos de la prostigmina
Obtenga un registro control de 2 minutos y vierta 0.05 mg de la solución de
prostigmina en la cámara de intestino y registre los cambios en el tono basal, amplitud y
frecuencia de las contracciones durante 3-4 minutos. Sin lavar el músculo agregue 0.1 mg
de la solución de Ach a la cámara de intestino. No olvide señalar simultáneamente con el
botón marcador de eventos para determinar los periodos de latencia. Determine si ocurre un
mayor incremento en el tono basal, intensidad y frecuencia de las contracciones. Lave el
músculo 3-4 veces y espere hasta que se recupere la ritmicidad basal.
d) Efectos de la atropina
Obtenga un registro control de 2 minutos y vierta en la cámara 0.05 mg de la
solución de atropina. Registre los cambios en el tono basal, amplitud y frecuencia de las
contracciones durante unos 5-8 minutos. Sin lavar el músculo agregue 0.5 mg de la
solución de Ach a la cámara de intestino. No olvide señalar simultáneamente con el botón
marcador de eventos para determinar los periodos de latencia. Registre los cambios en el
tono basal, amplitud y frecuencia de las contracciones durante unos 4-5 minutos. Lave 2-3
veces y espere a que se recupere la ritmicidad basal. Observe: a) el efecto bloqueador de la
atropina sobre la actividad muscular y b) si el efecto de la atropina es más duradero que el
de los demás fármacos.
3) EFECTO DE LA TEMPERATURA:
Obtenga un registro control de 2 minutos y anote la temperatura en la cámara para
músculo liso. Apague la bomba de perfusión, vacíe la cámara del músculo y vierta Ringer a
4º C. Anote la temperatura y registre los cambio en el tono basal, amplitud y frecuencia de
las contracciones durante unos minutos. Vacíe la cámara y llénela con Ringer a 40º C.
Anote la temperatura en la cámara y registre los cambios en el tono basal, amplitud y
frecuencia de las contracciones durante 1 minuto. Encienda la bomba de perfusión, lave la
preparación dos veces y espere a que la ritmicidad basal se restablezca.
EFECTO DE LA HIPOXIA:
Obtenga un registro control de 2 minutos y desconecte la bomba de aireación.
Observe el efecto de la hipoxia sobre el tono basal, amplitud y frecuencia de las
contracciones. Cuando el efecto se haya hecho aparente, conecte nuevamente el sistema de
oxigenación y vea si se recupera la ritmicidad basal.
BASAL
ACETILCOLINA
BASAL
ADRENALINA
BASAL
PROSTIGMINA
BASAL
ATROPINA
BASAL
ATROPINA+Ach
BASAL (38oC)
TEMPERATURA
BASAL
HIPOXIA
CUESTIONARIO
BIBLIOGRAFÍA
1) Andrew B.L. Mammalian Intestinal Muscle in Vitro. In: Experimental Physiology.
Alimentary Canal and Kidney. Churchill Livingstone. Edinburgh. pp 249-250.
1972.
2) Armstrong G.G. Características del músculo liso. En: Manual de Prácticas de
Fisiología. Editorial Interamericana. México. pp 37-39. 1970.
3) Ganong F.W. Smooth Muscle. In: Review of Medical Physiology. Lange Medical
Books/McGraw-Hill. New York. pp 78-80. 2001.
4) Guyton C.A. and Hall J.E. Contraction and Excitation of Smooth Muscle. In:
Textbook of Medical Physiology. Saunders. Philadelphia. pp 87-94. 2000.
5) Guyton C.A. and Hall J.E. General Principles of Gastrointestinal Function-Motility,
Nervous Control, and Blood Circulation In: Textbook of Medical Physiology.
Saunders. Philadelphia. pp 718-723. 2000.
6) Hoff H.E. Geddes L.A. Properties of Smooth Muscle. In: Experimental Physiology.
Baylor University (Ed). Houston. USA. pp V-1 to V-8. 1971.
7) Martin D.E. Neuromuscular Physiology. Motility of Isolated Intestinal Smooth
Muscle. In: Laboratory Experiments in Human Physiology. Narco Bio System Inc.
(Ed). Huston. pp 61-65. 1975.
8) Quintanar Stephano J.L. Propiedades del Músculo Liso. En: Manual de Prácticas de
Fisiología General. Universidad Autónoma de Aguascalientes (Ed). México. pp
123-126. 1989.
9) Sherwood L. Muscle Physiology. Smooth and Cardiac Muscle In: Human
Physiology; From Cells to System. Brooks/Cole. USA. pp 270-278. 2001.
PROPIEDADES DEL MUSCULO CARDIACO
CONOCIMIENTOS PREVIOS:
INTRODUCCIÓN:
El tejido marcapaso se comporta de esta manera debido a que sus fibras presentan
un potencial de membrana inestable, originada por las propiedades del sarcolema para la
conductancia iónica.
Cambios en las características físicas del medio extracelular, producen los siguientes
efectos:
A diferencia del músculo esquelético, las fibras cardiacas son incapaces de sufrir
tetanización; esto se debe a que los cardiocitos poseen un período refractario prolongado,
lo que constituye un factor de seguridad que protege al corazón contra la aparición de focos
ectópicos, fibrilación y tetanización.
OBJETIVOS:
MATERIALES Y REACTIVOS:
Biológico: Tortuga
Equipo:
Soluciones:
Cristalería:
MÉTODOS:
Calibre un canal del Fisiografo con un acoplador 7173. Con el sistema de pesas
calibre la amplitud del registro de tal manera que 10 g = 1 cm. Recuerde que dependiendo
de las características contráctiles del corazón, se puede cambiar la sensibilidad del registro.
Si esto es necesario, no olvide volver a calibrar la amplitud del registro.
Destruya el encéfalo y la médula espinal de una tortuga con el estilete. Una vez
sacrificado el animal, serruche los istmos que unen el plastrón con el caparazón. Coloque la
tortuga en decúbito dorsal y con los hilos de cáñamo doble cero fije las patas a los extremos
de la tabla de disecciones. Utilizando tijeras, bisturí y pinza de disección con dientes, con
cuidado desprenda el plastrón a partir del cuello, teniendo cuidado de no lastimar al
corazón. Una vez que ha descubierto el tórax, observe el corazón latiendo por debajo del
pericardio. Con cuidado corte el pericardio y exponga al corazón teniendo cuidado de
respetar el frenulum (ligamento que une la punta del corazón con el pericardio). Con el
corazón expuesto, observe e identifique la sístole (contracción) y la diástole (relajación) y
con su reloj cuente la frecuencia cardiaca. Anote el resultado en la hoja de respuestas.
Pase un hilo delgado de unos 20 cm de longitud por abajo del corazón y amarre
fuertemente el frenulum (deje una pequeña masa de pericardio para evitar que el hilo se
resbale cuando se aplique tensión al órgano). Corte el frenulum separándolo del pericardio
y jale el hilo hacia arriba. Sujete el otro extremo del hilo al ganchillo del miógrafo e inicie
el registro de la actividad contráctil del corazón.
Con una velocidad del papel a 0.25 cm/seg inicie el registro de la actividad
contráctil del corazón. Presione el botón de Record del amplificador del canal y con el
tornillo de tensión aplique una tensión suficiente al corazón de modo que obtenga registros
de 3–5 cm de amplitud.
Disminuya la tensión sobre el corazón de tal manera que la amplitud de los registros
sean ahora de aproximadamente de 5 mm. Baje la línea basal lo más que pueda; ponga la
unidad del desplazamiento del papel a 0.2 cm/seg. Después de tomar 3 o 4 registros
empiece a incrementar la tensión sobre el corazón dando media vuelta al tornillo de tensión
entre cada latido. Observe cómo aumenta la fuerza de contracción conforme aumenta la
tensión. Invierta el proceso cuando obtenga una contracción de amplitud máxima,
disminuyendo la tensión del tornillo poco a poco hasta alcanzar la línea basal y una
amplitud de las contracciones semejantes a las primeras. Con los datos obtenidos llene la
Tabla 1 de la hoja de resultados.
Para exponer el nervio vago derecho, haga una incisión a lo largo de la línea media
del cuello. Esta maniobra expondrá la tráquea y por abajo de ella el esófago. En paralelo
con estas estructuras, corre el nervio vago y la arteria carótida primitiva. Localice la arteria
carótida derecha y el nervio vago sin tratar de separarlos, ya que esto puede dañar el nervio.
Diseque una porción del paquete vasculo-nervioso de aproximadamente 2 cm y móntelo
sobre los electrodos de ganchillo. Con el cable estimulador conecte los electrodos al
estimulador, cuidando de que el electrodo catódico (rojo) quede hacia el corazón.
Del registro anterior, seleccione el tren de estímulos que haya tenido un efecto
importante sobre la frecuencia cardiaca y antes de estimular, vierta sobre el corazón unas
gotas de sulfato de atropina y espere unos minutos para que la droga bloquee los
receptores de ACh. Ponga la velocidad del papel a 0.5 cm/ seg, estimule nuevamente al
nervio y observe el efecto sobre la frecuencia cardiaca.
Anote los datos en la hoja de resultados
Periodo refractario:
Inserte los electrodos de alfiler en el corazón; uno un poco por arriba del centro del
corazón y el otro cerca del ápex. Por el otro extremo conéctelos al canalizador de pulsos de
la manera apropiada (asegúrese que el estimulador no esté mandando estímulos). Cheque
que la amplitud de los registros sea adecuada. Ponga la velocidad del papel a 5 cm/ seg.
Seleccione en el estimulador estímulos a 10 voltios y 2 ms de duración. Utilizando
estímulos únicos y un desplazamiento del papel a 5 cm/seg, proceda a estimular el corazón
de tal manera que un estímulo coincida con el inicio de la sístole, otros a la mitad y otros al
final de la misma, y otros más al inicio de la diástole, a la mitad y al final. Observe las
extrasístoles (latidos adicionales) y determine en que momento del ciclo cardiaco se
presentaron. Determine el periodo refractario, el cual puede ubicarse en el registro en el
momento que se logre la primera extrasístole al inicio de la diástole. Pase los datos
pertinentes a la hoja de respuestas.
Efecto de la temperatura:
Describa los efectos de cada maniobra sobre las características contráctiles del corazón y
pase los datos a la hoja de resultados.
Una vez que el corazón se ha recuperado, retire el hilo del transductor y con tijeras
finas diseque el corazón. Ya que el la tortuga el marcapaso cardiaco se encuentra en el seno
venoso, cuando extirpe el corazón respete los grandes vasos que llegan y salen del órgano.
Coloque el corazón en una caja de Petri con Ringer a temperatura ambiente y observe los
latidos cardiacos, luego con las tijeras corte un segmento auricular con el seno venoso
incluido, un segmento auricular solo y un segmento ventricular. Observe las contracciones
espontáneas y cuantifique la frecuencia cardiaca de cada segmento. Estimule
mecánicamente a los segmentos y observe si se pueden inducir extrasístoles.
RESULTADOS:
Mm g mm g
Con los datos de la Tabla, haga dos gráficas. En la primera grafique los gramos de tensión
en el eje de las abscisas y en el de las ordenadas la fuerza de contracción en gramos. En la
segunda, grafique en las abscisas número de veces que cambió de tensión y en las
ordenadas la tensión de reposo y la fuerza de contracción en cada punto. Haga las
operaciones correspondientes para convertir mm de amplitud a g de fuerza.
Periodo refractario:
Efecto de la temperatura:
INTRODUCCION
Ruidos cardiacos. Normalmente en cada latido del corazón se pueden distinguir dos
sonidos o ruidos cardiacos distintos. El primero es de tono bajo y de relativa larga duración.
El segundo es de un tono más agudo y de menor duración. Usualmente ambos se pueden
distinguir claramente con un estetoscopio o un recolector de sonidos adecuado (micrófono
de contacto), colocado en el quinto espacio intercostal izquierdo. Estos ruidos se escuchan
de manera parecida a lo siguiente: “pon” y “tac”. El primer sonido (pon) se debe
principalmente a las vibraciones que resultan del cierre de las válvulas aurículo-
ventriculares (A-V). Se cree que este ruido también se debe la contracción muscular. El
segundo ruido (tac) esta dado principalmente por las vibraciones que resultan del cierre
súbito de las válvulas aórtica y pulmonar.
Los ruidos cardiacos están directamente relacionados con la acción de bomba del
corazón. Con una frecuencia cardiaca lenta, se puede mostrar que el segundo ruido es
coincidente con la muesca dicrótica de la curva de presión aórtica. La onda “c” del registro
de la presión auricular nos permite demostrar que el primer ruido cardiaco se asocia
primeramente con el cierre de las válvulas A-V. También, el ECG nos permite relacionar
más fácilmente el momento del primer ruido cardiaco durante el ciclo cardiaco. Debe
recordarse que los eventos eléctricos del corazón preceden a los eventos mecánicos. Así, la
onda P precede a la sístole auricular dando lugar a la onda “a” de la curva de presión
auricular, mientras que el complejo QRS, es inmediatamente seguido de la sístole
ventricular y la onda T ocurre justo antes de la diástole ventricular. Resumiendo; El
complejo QRS coincide con la sístole ventricular y el cierre de las válvulas A-V con la
contracción temprana ventricular. Por lo tanto, el primer ruido cardiaco se asocia con la
onda R del ECG. Al final de la sístole las válvulas aórtica y pulmonar se cierran dando
lugar al segundo ruido cardiaco. Ya que la onda T precede a la diástole ventricular el
segundo ruido se asocia con la onda T. De esta manera, el registro de la muesca dicrótica de
una arteria cercana al corazón, estará cronológicamente relacionada con el segundo ruido
cardiaco y la onda T.
OBJETIVOS
General:
Establecer las relaciones más importantes entre el ECG, la presión arterial, la
presión auricular derecha y los ruidos cardiacos durante el ciclo cardiaco.
Particulares:
1. Registrar la actividad eléctrica del corazón (electrocardiograma) reconocer las
diferentes ondas electrocardiográficas, medir los intervalos indicados y establecer
las relaciones que hay entre las ondas del ECG con las otras variables durante el
ciclo cardíaco.
2. Registrar la presión arterial directamente de la aorta, medir la presión sistólica y
diastólica, reconocer la muesca dicrótica y relacionar los cambios de la curva de
presión con el resto de las variables durante el ciclo cardíaco.
3. Registrar y medir directamente la presión auricular derecha, reconocer las ondas a, c
y v y relacionarlos con las otras variables del ciclo cardíaco.
4. Registrar los ruidos cardíacos (fonocardiograma), reconocer el 1º y 2º ruido y
establecer su relación con el cierre de las valvulas A-V, la muesca dicrótica y las
demás variables registradas.
5. Observar y palpar los latidos cardíacos directamente del corazón (tórax abierto).
6. Inducir y observar directamente el aleteo y fibrilación cardiaca
MATERIAL Y EQUIPO
Biológico: Perro
Equipo:
1. Fisiógrafo (4 canales)
2. 2 transductores de presión P 1000 A
3. 2 cables conectores # 9
4. 2 acopladores 7173
5. 2 acopladores DC-AC
6. Estimulador con electrodos de ganchillo
7. Ventilador pulmonar
8. Cable para ECG
9. Selector de derivadas
10. Micrófono para ruidos cardíacos
11. Mesa de cirugía para perro
12. Estetoscopio
13. Pentobarbital sódico
14. Solución salina isotónica heparinizada
15. 2 catéteres
16. 3 Jeringas de 10 ml
17. Cánula traqueal
18. Hilo cáñamo del cero
19. Gasa
20. Instrumental cirugía
21. Segueta
22. Tijera para costillas
23. Solución de KCI 0.5 M.
NOTA: Conforme vaya obteniendo el registro calibrado de cada canal, apague el botón de
RECORD y no lo encienda hasta que tome el registro de todas las variables
simultáneamente.
PROCEDIMIENTO
1. De su práctica del ECG prepare el canal 1 del fisiógrafo y conecte los cables para
obtener un registro electrocardiográfico en DII. Utilice electrodos de aguja. Una vez
logrado el registro apague el botón de RECORD.
Calibre el canal 2 del Fisiógrafo (ver práctica del Fisiógrafo). Una vez calibrado el
acoplador con el amplificador y el reproductor, gire la perilla de MV/CM del amplificador
a 20 MV/CM, apague el botón de RECORD del amplificador y proceda a calibrar el canal
con el traductor de presión P100A.
NOTA: El transductor es muy sensible por lo que hay que asegurarse de que el
transductor esté sobre una superficie firme y así evitar las vibraciones que puedan
modificar la señal.
1. Una vez disecada y expuesta la arteria carótida izquierda, coloque tres ligaduras sin
anudar alrededor de la misma. Cuide de no lesionar la arteria. La ligadura cefálica
(distal), se anuda fuertemente para ocluir la arteria completamente. Las ligaduras
media y proximal, se anudan sin apretar y servirán para fijar el catéter intra arterial
una vez que se haya insertado.
2. La longitud del catéter debe ser del tamaño suficiente para que al desplazarlo por la
arteria la punta quede a nivel del cayado de la aorta.
3. El ayudante aplica tracción a las ligaduras cefálicas y proximal para ocluir el flujo
de sangre en el pequeño segmento de carótida que queda entre las ligaduras. Con
unas tijeras pequeñas, el cirujano hace una pequeña incisión en la arteria, apenas
suficiente para introducir en dirección del corazón el catéter.
4. Una vez que la punta del catéter ha quedado en el cayado de la aorta, amarre las
ligaduras central y proximal. Lo apretado de los nudos no deben ocluir ni
parcialmente el catéter ya que si esto ocurre el registro de la presión no se podrá
realizar adecuadamente. Cuide que no haya escurrimiento de sangre. Si esto ocurre
apriete un poco más las ligaduras.
5. Antes de conectar el catéter con el transductor, inyecte un poco de solución salina
heparinizada al animal para remover cualquier coágulo que se haya formado en el
catéter. Esta maniobra se repite cuantas veces sea necesario para desprender y evitar
la formación de coágulos.
6. Gire la llave de la válvula A para conectar el catéter con el transductor y encienda el
borón de RECORD del amplificador para iniciar el registro de la presión arterial.
7. Ajuste la perilla de FILTER del amplificador si la plumilla no está registrado con un
trazo claro.
NOTA: Cuando no este haciendo registro eleve las plumillas y la palanca del motor del
papel.
8. Apague el botón de RECORD del amplificador.
Una vez que ha calibrado el canal 3 del Fisiógrafo, proceda a calibrar el transductor
de presión P1000A siguiendo las indicaciones anteriores.
Para cateterizar la aurícula derecha se procede a localizar la vena yugular externa derecha.
1. Tomando como referencia el borde derecho de la herida del cuello, con una tijera
fuerte separe los músculos adheridos a la piel del cuello. Haciendo esto llegará a la
vena yugular externa adherida a la cara interna de la piel.
2. Diséquela en una longitud de unos 4-5 cm y pase dos ligaduras por debajo.
3. Una vez anudada la ligadura cefálica, haga un orificio en la vena y pase el catéter en
dirección del corazón.
4. Anude el hilo para fijar el catéter a la vena.
5. Asegúrese de que la longitud del catéter sea el adecuado para que la punta del
mismo quede justo en la luz de la aurícula derecha.
6. Proceda a registrar la presión auricular encendiendo el botón de RECORD del
amplificador.
7. Si es necesario reajuste la sensibilidad del amplificador para observar mejor el
registro.
Fonocardiograma
Una vez calibrado el canal 4 del Fisiógrafo proceda a colocar al sujeto el micrófono para
los ruidos cardiacos de la siguiente manera:
1. Pase una banda de hule (perforada) alrededor del tórax del animal
2. Identifique la proyección del corazón sobre el tórax y coloque el micrófono sobre el
área de la pared que corresponde al ápex del corazón.
3. Teniendo cuidado de no apretar excesivamete el micrófono (se puede romper o bien
no se podrán captar los ruidos cariacos), proceda a fijarlo con la banda de hule.
4. Conecte el enchufe del micrófono a la entrada del preamplificador DC-AC 7170.
También se puede utilizar el preamplificador Hi-Gain Coupler 7171. Para cualquier
preamplificador que se use, deberá ponerse la ganancia en X10 y la constante de
tiempo en 0.3.
5. Mueva la palanca de ON OFF/CAL del preamplificador a la posición ON
6. Antes de encender el amplificador ponga la perilla de sensibilidad en 100 MV/CM y
el FILTER en 100Hz.
7. Encienda el botón de RECORD del amplificador y proceda a registrar los ruidos
cardiacos.
1. Con la ligadura de referencia del nervio vago jale al nervio y coloque sobre el los
electrodos de estímulo de ganchillo cuidando que el electrodo negativo quede hacia
el corazón.
2. Conecte los cables de los electrodos al estimulador respetando su polaridad.
3. Con la ayuda del ECG, seleccione en el estimulador pulsos de 0.2 ms de duración y
un voltaje y frecuencia tales que solo induzcan bradicardia.
PROCEDIMIENTO
Ponga el papel a 0.25 cm/seg y encienda el botón de RECORD del canal 2 para
registrar la presión arterial. Observe la subida y la caída de la presión sanguínea. Con una
velocidad de papel de 2.5 cm/seg tome otro registro. Identifique la muesca dicrótica y mida
las presiones sistólica y diastólica.
Registro simultáneo del ECG, presión arterial, presión auricular derecha y ruidos cardiacos
durante el ciclo cardiaco
RESULTADOS
Una. vez calibrado el canal 2 del fisiógrafo y dispuestos los cables para registrar el
EKG, obtenga 10 registros en la derivación II y proceda a identificar las ondas P, Q, R, S y
T, mida los voltajes de cada una y los intervalos antes mencionados. Establezca las
relaciones que hay entre las ondas electrocardiográficas y las variables de los objetivos
anteriores durante el cielo cardíaco.
OBJETIVO 3
OBJETIVO 4
RESULTADOS:
PRESION AORTICA:
Calibración cm mm/Hg.
Presión sistólica mm/Hg.
Presión diastólica mm/Hg.
Presión media mm/Hg.
Presión diferencial mm/Hg.
Presión sistólica:
Presión distólica:
EKG.
Onda P
Onda Q
Onda R
Onda S
Onda T
Establezca la relación de la onda "a" de la presión auricular, con la onda P del EKG.
El complejo QRS con la sístole aórtica.
Mida los intervalos PQ QRS, y QT y diga qué significa cada uno de ellos.
FONOCARDIOGRAMA:
En el registro de los ruidos cardíacos identifique el lo. y 2o. ruidos, ayudándose con
el estetoscopio. Ahora relacione el primer ruido, con la sístole aórtica y la muesca dicrótica
con el 2o. ruido. Asimismo, identifique el primer ruido con la onda C auricular.
PRESIÓN SANGUÍNEA Y SU CONTROL SIMPÁTICO Y PARASIMPÁTICO
INTRODUCCIÓN
La presión sanguínea (PS) es la fuerza que la sangre ejerce contra las paredes de los
vasos sanguíneos, y resulta de la acción de bomba del corazón contra una resistencia
periférica variable así como de un reservorio elástico. La PS varía en relación con el
volumen sanguíneo relativo, la elasticidad del sistema arterial, la resistencia periférica, la
frecuencia cardiaca y el volumen sistólico, siempre y cuando el volumen sanguíneo relativo
permanezca constante. La importancia del reservorio elástico radica en que cierta cantidad
de la energía de la contracción cardiaca se convierte en energía almacenada cuando parte de
la sangre expulsada durante la sístole es retenida bajo presión en el reservorio arterial
expandido. Durante la diástole, la sangre es impulsada a través de las arterias para mantener
el flujo capilar durante todo el ciclo cardiaco. A causa de esto, la presión en el árbol arterial
es máxima durante la sístole, pero no caerá a cero durante la diástole debido al rebote
elástico de los vasos y al cierre de la válvula aórtica. La magnitud de la caída en la presión,
dependerá de la diferencia entre la oposición al flujo (resistencia periférica), el volumen de
sangre bombeado al sistema arterial cada latido y la frecuencia cardiaca. Si la presión
arterial se está registrando, el final de la eyección sanguínea al sistema arterial, queda
señalada por una muesca pasajera en la curva de presión producido por el cierre súbito de la
válvula aórtica. A esta muesca se le llama muesca dicrótica.
La PS esta bajo el control del sistema nervioso autónomo. La activación de la
división parasimpática, reduce la presión sanguínea por disminución de la frecuencia
cardiaca. Por otro lado, la activación de la división simpática aumenta la presión sanguínea
al incrementar: a) la fuerza de contracción, b) la frecuencia cardiaca y c) la resistencia
periférica. Aunque existen otros factores humorales (hormonales) que participan en la
regulación de la PS, el sistema nervioso autónomo es el más importante.
El centro nervioso más importante para el control de la PS se localiza en la
protuberancia y el bulbo raquídeo y se le denomina centro vasomotor o cardiorregulador.
Aquí se integran los reflejos cardiovasculares más importantes como el reflejo del seno
carotídeo en el que impulsos aferentes desde los presorreceptores (receptores de presión)
del seno carotídeo y del arco aórtico, mandan en cada sístole impulsos por los nervios
glosofaríngeos y nervios vagos respectivamente, hasta el bulbo. Después de ser integrados,
los impulsos son trasmitidos desde el centro vasomotor por las ramas cardiacas del sistema
parasimpático (nervios vagos) o simpático al corazón, al que inhibirán o excitarán
respectivamente. Al estimular mecánicamente al seno carotídeo se mimetiza un incremento
de la presión sanguínea, la señal nerviosa viaja por los nervios correspondientes hasta el
centro cardiorregulador el cual responde por un lado, activando al sistema nervioso
parasimpático, que disminuye de la frecuencia cardiaca, y por el otro inhibiendo el tono
simpático, que disminuye la resistencia periférica.
Cuando el nervio vago es estimulado directamente la frecuencia cardiaca disminuye
y si la intensidad del estímulo es lo suficientemente grande puede producir paro cardíaco.
Cuando esto ocurre, la presión sanguínea comenzará a caer. La rapidez con la que la
presión sanguínea cae refleja el grado de la resistencia periférica. Por otro lado, si la
frecuencia cardiaca disminuye, la fuerza de contracción en cada latido será mayor debido al
mayor volumen diastólico final (Ley de Starling). Con una frecuencia cardiaca disminuida,
la muesca dicrótica es más claramente visible.
Ya que el sistema parasimpático es colinérgico, sus efectos pueden ser mimetizados
por drogas que inhiben a la enzima acetilcolinesterasa, permitiendo que la acetilcolina
(ACh) permanezca actuando por más tiempo, prolongando así, sus efectos en el sitio de
liberación. Por lo tanto, la administración de prostigmina (un inactivador de la enzima
acetilcolinesterasa), remedará un incremento de la actividad vagal, lo que se traduce en una
disminución de la frecuencia cardiaca y caída de la presión arterial. La administración de la
ACh u otras drogas colinérgicas producirán efectos similares. Por otro lado, también
existen drogas que pueden bloquear las acciones de la ACh, como la atropina, alcaloide
derivado de la planta llamada bella dona, la cual tiene una gran afinidad por los receptores
colinérgicos post ganglionares, localizados en los órganos efectores de la división
parasimática del sistema nervioso autónomo. De esta manera, se dice que la atropina es un
bloqueador por competencia de la ACh.
La actividad periférica del sistema nervioso simpático es mediada por los
neurotransmisores noradrenalina (norepinefrina) y adrenalina (epinefrina), de tal manera
que drogas que alteren su síntesis, secreción, recaptura, o bien, compitan con los receptores
simpáticos correspondientes, alterarán los efectos de este sistema sobre la presión arterial.
Efectos muscarínicos y nicotínicos de la ACh. Históricamente se observó que la
administración de muscarina (extraída del hongo amanita muscaria) a un sujeto de
experimentación, mimetiza las acciones del sistema nervioso parasimpático a nivel de sus
efectores periféricos (efectos colinérgicos). Por otro lado, también se sabe que la nicotina
mimetiza los efectos de la ACh al actuar específicamente a nivel de los receptores
colinérgicos de las neuronas post ganglionares simpáticas y parasimpáticas del sistema
nervioso autónomo. En base a lo anterior, los efectos de muchas drogas se clasificaron
como muscarínicos o nicotínicos. Actualmente estos términos se utilizan poco, pero una
demostración de la acción muscarínica y nicotínica de la ACh es de interés fisiológico
debido a que pone en evidencia el papel de la ACh en el mecanismo de la transmisión
sináptica de la neurona pre a la post ganglionar en ambas divisiones del sistema nervioso
autónomo (la división simpática como parasimpática) y del nervio post ganglionar
parasimpático al efector.
Hay que recordar que el sistema nervioso parasimático es totalmente colinérgico, es
decir la ACh es el neurotransmisor tanto a nivel ganglionar como periférico, mientras que
el simpático es colinérgico en la sinápsis de la neurona pre a la post ganglionar, y
noradrenérgico (adrenérgico) en las terminales post ganglionares (periferia). Si la ACh se
administra a un animal normal, la PS sanguínea cae. Sin embargo si el animal es
previamente atropinizado, bloqueando así el efecto periférico de la ACh, esta no tendrá
efecto a nivel de los efectores post ganglionares parasimpáticos. Así, poco efecto se
observará en la presión arterial (PA) y en la frecuencia cardiaca, es decir, los efectos
muscarínicos de la ACh se han bloqueado.
Si se utilizan grandes dosis de ACh en un animal atropinizado, las sinápsis de las
neuronas ganglionares de ambos sistemas seguirán siendo sensibles a la ACh. Sin embargo,
ya que los receptores colinérgicos de los efectores de la división parasimpática han sido
bloqueados con la atropina, el efecto de la ACh se observará solo en la división simpática,
es decir un incremento de la PA y de la frecuencia cardiaca, provocada por la activación de
los ganglios simpáticos, que a su vez inducen libración de noradrenalina y adrenalina a
nivel de las terminales nerviosas post ganglionares. Esta respuesta demuestra los efectos
nicotínicos (ganglionares) de la acetilcolina.
OBJETIVOS
MATERIAL Y EQUIPO
Equipo:
1) Fisiógrafo (1 canal), 2) Transductor de presión P 1000-A con llaves de 3 vías, 3)
Cable conector # 9, 4) Acoplador 7173, 5) Estimulador con electrodos de estímulo de
ganchillo, 6) Mesa de cirugía para perro, 7) Pentobarbital sódico, 8) Solución salina
isotónica heparinizada, 9) Dos catéteres (para arteria y vena), 10) Jeringas de 10 y 3 ml, 11)
Cánula traqueal, 12) Hilo cáñamo del cero, 13) Gasa, 14) Instrumental cirugía, 15)
Solución ACh (1 mg/ml), 16) Adrenalina (1 mg/ml), 17) Prostigmina (1 mg/ml), 18)
Atropina (1mg/ml), 19) Solución de KCI 0.5 M.
PROCEDIMIENTO
Antes de pasar al procedimiento quirúrgico calibre un canal del Fisiógrafo (ver práctica
del Fisiógrafo). Una vez calibrado el acoplador, con el amplificador y el reproductor,
gire la perilla de MV/CM del amplificador a 20 MV/CM, apague el botón de RECORD
del amplificador y proceda a calibrar el canal con el traductor de presión P1000-A.
Calibración del transductor P1000-A
NOTA: El transductor es muy sensible por lo que hay que asegurarse de que el
transductor esté sobre una superficie firme y así evitar las vibraciones que puedan
modificar la señal.
1. Una vez disecada y expuesta la arteria carótida izquierda, coloque tres ligaduras sin
anudar alrededor de la misma. Cuide de no lesionar la arteria. La ligadura cefálica
(distal), se anuda fuertemente para ocluir la arteria completamente. Las ligaduras
media y proximal, se anudan sin apretar y servirán para fijar el catéter arterial una
vez que este se haya insertado en la carótida.
2. La longitud del catéter debe ser del tamaño suficiente para que al desplazarlo por la
arteria la punta quede a nivel del cayado de la aorta.
3. El ayudante aplica tracción a las ligaduras cefálica y proximal para ocluir el flujo de
sangre en el pequeño segmento de carótida que queda entre las ligaduras. Con unas
tijeras pequeñas, el cirujano hace una pequeña incisión en la arteria, apenas
suficiente para introducir en dirección del corazón el catéter.
4. Una vez que la punta del catéter ha quedado en el cayado de la aorta, amarre las
ligaduras central y proximal. Lo apretado de los nudos no deben ocluir ni
parcialmente el catéter ya que si esto ocurre el registro de la presión no se podrá
realizar adecuadamente. Cuide que no haya escurrimiento de sangre. Si esto ocurre
apriete un poco más las ligaduras.
5. Antes de conectar el catéter con el transductor, inyecte un poco de solución salina
heparinizada al animal para remover cualquier coágulo que se haya formado en el
catéter. Esta maniobra se repite cuantas veces sea necesario para desprender y evitar
la formación de coágulos en el sistema.
6. Gire la llave de la válvula A para conectar el catéter con el transductor y encienda el
botón de RECORD del amplificador para iniciar el registro de la PA.
7. Ajuste la perilla de FILTER del amplificador si la plumilla no está registrando con
un trazo claro.
NOTA: Cuando no este haciendo registro eleve las plumillas y pare el movimiento
del papel.
a) Ponga el papel a 0.25 cm/seg. Observe la subida y la caída de la presión. Con una
velocidad de papel de 5 cm/seg, tome unos 10 registros y determine la frecuencia
cardiaca. Tomando coma base la calibración de 3 cm de desplazamiento de la
plumilla=100 mmHg, determine las presiones sistólica, diastólica y del pulso. Si es
necesario ajuste los controles de AMPLITUD y POSITION para obtener un mejor
registro. Si hacen ajustes, la recalibración es necesaria.
b) Identifique en el registro la muesca dicrótica. Con una pinza hemostática haga
presión gradual sobre el catéter que conduce el transductor. Note la disminución en el
tamaño de la muesca dicrótica, luego una disminución en la amplitud del pulso.
Utilizando la fórmula para la presión arterial media (PAM) determínela y pase sus
resultados a la hoja de respuestas (PAM= presión diastólica +1/3 de la presión del
pulso).
c) Mueva en el transductor la palanca a la posición MEAN y mida la presión arterial
media. Compare y diga si hay diferencias en las mediciones calculada y registrada.
Regrese la palanca a la posición de PULSATILE. Pase sus resultados a la hoja de
respuestas
El reflejo del seno carotídeo generalmente se deprime por las sustancias anestésicas y
en ocasiones es difícil observarlo en la anestesia profunda.
a) Con la velocidad del papel 0.25 cm/seg tome un registro control. Un compañero
indicará con el botón marcador de eventos el momento en que inicia la inducción del
reflejo.
b) Para inducir el reflejo, aplique presión a ambos senos carotídeos del perro
presionando fuertemente con los dedos índice y medio hacia dentro y hacia arriba y
abajo en el punto del cuello donde se juntan la rama horizontal y vertical del hueso
mandibular inferior. Simultáneamente, con los dedos pulgares presione fuertemente
hacia adentro los glóbulos oculares para obtener acción vagal adicional (reflejo
óculo–vagal). Si no se obtuvo el reflejo, repita el procedimiento después de la
administración de prostigmina.
c) Mida la frecuencia cardiaca y las presiones sistólica, diastólica y media antes y
después de la estimulación de los senos. Identifique las características de la muesca
dicrótica. Pase sus resultados a la hoja de respuestas.
6) Efectos de la atropina
a) Con la velocidad del papel a 0.5 cm/seg, inyecte 500 µg de acetilcolina por vía
endovenosa y registre los cambios sobre la PA y FC (note que esta dosis de
acetilcolina es 100 veces mayor que la empleada para inducir bradicardia e
hipotensión).
RESULTADOS
INTRODUCCIÓN
Los riñones regulan la composición de los líquidos corporales por los siguientes
procesos: a) filtración, b) reabsorción y c) secreción y excreción. Muchos factores afectan
el volumen y la composición de la orina. El flujo sanguíneo arterial entra a los glomérulos
bajo presión haciendo que el agua y ciertos solutos sean filtrados hacia el espacio de
Bowman (filtrado glomerular) y al sistema tubular de la nefrona, en donde ocurren los
procesos mencionados. Así, el filtrado experimenta cambios conforme fluye por el sistema
tubular. Cambios en la presión arterial y en la cantidad de líquido y concentración de los
solutos en la sangre modifican la cantidad y concentración de solutos de la orina formada a
través del tiempo. Algunas de estos cambios ocurren en respuesta a la presencia de
hormonas, tales como la aldosterona, encargada de reabsorber de Na+ y secretar K+ y la
hormona antidiurética (también llamada vasopresina) encargada de reabsorber el agua de
los túbulos colectores.
Se entiende por excreción a la eliminación de una sustancia del cuerpo, en este caso,
en la orina. Una sustancia es excretada si pasa al sistema tubular formando parte del filtrado
glomerular y no es reabsorbida, o bien, es excretada por secreción activa del espacio
peritubular a la luz tubular.
Entre los factores que determinan la tasa de filtración glomerular está la presión
arterial, que aumenta la presión de filtración, con el consecuente aumento del filtrado
glomerular y del volumen líquido eliminado. Por otro lado, un aumento en la presión
coloidosmótica del plasma disminuirá la presión de filtración, lo que a su vez producirá una
disminución del filtrado glomerular y una disminución del volumen líquido eliminado.
Por otro lado, cambios en la capacidad del epitelio tubular para reabsorber
sustancias desde el líquido tubular, también afectará el volumen de orina formado. Así, en
condiciones normales toda la glucosa es reabsorbida, por lo que no se detectará en la orina;
sin embargo, cuando la carga tubular de glucosa aumenta más allá de cierto límite
(transporte máximo), esta aparecerá en la orina (glucosuria), además, al aumentar su
concentración en el sistema tabular ejercerá presión osmótica, lo que retiene agua en el
sistema tubular, teniendo como resultado final un aumento en la excreción de agua (diuresis
osmótica).
OBJETIVOS:
MATERIAL:
Biológico: Perra
PROCEDIMIENTO:
Calibre un canal del Fisiógrafo (ver práctica del Fisiógrafo). Una vez calibrado gire
la perilla de MV/CM del amplificador a 20 MV/CM, apague el botón de RECORD del
amplificador y proceda a calibrar el canal con el traductor de presión P1000-A.
NOTA: El transductor es muy sensible por lo que hay que asegurarse de que el
transductor esté sobre una superficie firme y así evitar las vibraciones que puedan
modificar la señal.
1. Una vez disecada y expuesta la arteria carótida izquierda, coloque tres ligaduras sin
anudar alrededor de la misma. Cuide de no lesionar la arteria. La ligadura cefálica
(distal), se anuda fuertemente para ocluir la arteria completamente. Las ligaduras
media y proximal, se anudan sin apretar y servirán para fijar el catéter intra arterial
una vez que se haya insertado.
2. La longitud del catéter debe ser del tamaño suficiente para que al desplazarlo por la
arteria la punta quede a nivel del cayado de la aorta.
3. El ayudante aplica tracción a las ligaduras cefálicas y proximal para ocluir el flujo
de sangre en el pequeño segmento de carótida que queda entre las ligaduras. Con
unas tijeras pequeñas, el cirujano hace una pequeña incisión en la arteria, apenas
suficiente para introducir en dirección del corazón el catéter.
4. Una vez que la punta del catéter ha quedado en el cayado de la aorta, amarre las
ligaduras central y proximal. Lo apretado de los nudos no deben ocluir ni
parcialmente el catéter ya que si esto ocurre el registro de la presión no se podrá
realizar adecuadamente. Cuide que no haya escurrimiento de sangre. Si esto ocurre
apriete un poco más las ligaduras.
5. Antes de conectar el catéter con el transductor, inyecte un poco de solución salina
heparinizada al animal para remover cualquier coágulo que se haya formado en el
catéter. Esta maniobra se repite cuantas veces sea necesario para desprender y evitar
la formación de coágulos.
6. Gire la llave de la válvula A para conectar el catéter con el transductor y encienda el
botón de RECORD del amplificador para iniciar el registro de la presión arterial.
7. Ajuste la perilla de FILTER del amplificador si la plumilla no está registrado con un
trazo claro.
NOTA: Cuando no este haciendo registro eleve las plumillas y la palanca del motor
del papel.
Abra la cavidad abdominal desde el apéndice xifoides hasta la sínfisis del pubis,
rechace las visceras con una gasa e identifique la vejiga, riñones y ureteros. Aísle uno de
los ureteros y pase dos ligaduras por debajo. Anude la ligadura más distal del uretero y
proceda ha hacer una pequeña incisión en el uterero e inserte un catéter en dirección del
riñón. Una vez que el catéter ha sido introducido, sujételo con la ligadura proximal. Repita
la maniobra en el uretero opuesto. Disponga los catéteres ureterales de tal manera que
desemboquen en un tubo en Y (Fig. 1) y colecte la orina en un vaso de precipitado de 500
ml. Interponga la malla del transductor cuentagotas entre el tubo en Y y el vaso de
precipitado y proceda a registrar en el Fisiógrafo el flujo urinario midiendo el número de
gotas de orina por minuto
Si el flujo de orina es muy lento o no hay, inyecte lentamente solución salina al
0.9% a través de la vena, para estabilizar el flujo urinario.
MANIOBRAS EXPERIMENTALES:
NOTA. Dado que lo que en esta práctica lo que importa son los cambios en la presión
arterial media, mueva la palanca del transductor para medir la presión media
Cada gota de nitrato de plata que tuvo que añadir equivale aproximadamente a 1 g
de NaCl por litro de orina. La cantidad total de NaCl en una muestra de orina se calcula de
la siguiente manera:
4. Diuresis osmótica
Una vez restablecido el flujo urinario basal, determine la presión arterial y el flujo
urinario y proceda a inyectar por el catéter venoso 20 mg de furosemide. Determine los
cambios en la presión sanguínea y el flujo urinario. Pase los resultados a la hoja de
respuestas.
Sacrifique al animal con una sobredosis de pentobarbital sódico, y disponga de el
adecuadamente. Recoja, lave y limpie el material utilizado y la superficie de trabajo.
RESULTADOS:
Observaciones
CONTROL ADRENALINA
Observaciones
Observaciones
5. Diuresis osmótica
________________mg ______________mg
Observaciones
CONTROL ADH
Observaciones
CONTROL FUROSEMIDE
Observaciones
8. Conteste lo siguiente:
INTRODUCCIÓN
MATERIAL
MANIOBRAS EXPERIMENTALES
Calibre dos canales del fisiógrafo con sendos transductores de presión (P-1000-A),
de tal manera que 1 cm = 10 mm de Hg. Conecte uno de los transductores con una de las
mangueras del tubo en Y que corresponde a la vía aérea. El otro transductor se conecta con
el tubo en Y del espacio intrapleural. Identifique sobre el papel a que presión corresponde
cada uno de los registros.
Abra la pinza del tubo que va al espacio intrapleural y aspire el aire, esto hará que el
globo se infle. Ínflelo hasta que llene la cuarta parte de la cavidad torácica. Cierre la pinza
para separar el espacio intrapleural de la atmósfera. Lea y anote la presión intrapleural en
reposo. Observe el tamaño del globo y la posición que ha adoptado el diafragma.
Lentamente proceda a jalar (inspiración) y a empujar (espiración) el diafragma hacia
fuera y hacia adentro del tórax. Observe los cambios de volumen del globo durante la
inspiración y la espiración. Lea y anote los cambios en las presiones intrapulmonar e
intrapleural. Mueva el diafragma en ambos sentidos, un poco más rápido que antes. Anote
los cambios de presión intrapulmonar e intrapleural a esta nueva velocidad. Explique las
diferencias que se observan en las presiones intrapulmonares e intrapleural cuando se
respira con una frecuencia frecuencia.
RESULTADOS
MECÁNICA DE LA REPIRACIÓN
ESTADO DEL MODELO PRESIÓN PRESIÓN
DEL PULMÓN INTRAPULMONAR INTRAPLEURAL
Reposo (pulmón distendido)
Inspiración lenta
Espiración lenta
Inspiración rápida
Espiración rápida
Comparación de las presiones intrapulmonar e intrapleural del modelo con las del humano
(compare con los datos del libro de texto)
EXPERIMENTAL TEXTO
CUESTIONARIO
BIBLIOGRAFÍA