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Organización
de
Transfusión de Sangre
Servicios
segundo
Lood Los servicios de transfusión (BTS) es la parte vital del sistema de salud moderno sin la cual la atención médica eficiente es imposible. El
objetivo de los servicios de transfusión de sangre debe ser proporcionar eficaz de la sangre y los productos sanguíneos, que son tan seguros
como sea posible y adecuado para satisfacer las necesidades del paciente. Una sangre Servicio de Transfusión es una organización compleja,
que requiere el diseño y la gestión cuidadosa.
Directrices básicas para el ORGANIZACIÓN DE BTS
El desarrollo del servicio de transfusión sanguínea debe basarse en las siguientes recomendaciones de la Sociedad
Internacional de Transfusión de Sangre y Inmunohematología (ISBTI), y la Organización Mundial de la Salud (OMS),
• El desarrollo del servicio de transfusión sanguínea debe basar en las donaciones de sangre voluntarias y no remuneradas.
La dependencia de donantes familiares / reemplazo debe ser eliminado.
• El desarrollo y la aplicación de la estrategia nacional para el tamizaje de toda la sangre donada para infecciones
transmitidas por transfusión, usando los ensayos más apropiados y eficaces para la prueba de VIH 1 y 2, hepatitis B
y virus C. la sífilis y la malaria.
medicina transfusional Manual técnico
• Promulgar legislación vigente que regula el funcionamiento del servicio de transfusión sanguínea para que cumpla con las
normas prescritas.
• Desarrollar buenas prácticas de fabricación y de laboratorio en los bancos de sangre con el fin de proteger la salud de los
donantes y receptores de sangre de la sangre y sus productos.
• Para proporcionar sangre segura y adecuada, y sus componentes para satisfacer los pacientes necesitan. Un servicio adecuado
incluye disponibilidad de al menos sangre entera, los glóbulos rojos, plaquetas, plasma fresco congelado (FFP), crioprecipitado
(Factor VIII) y plasma.
• El mantenimiento de un registro de donantes de sangre voluntarios no remunerados.
• Para establecer una unidad de donación voluntaria de sangre dentro del servicio de transfusión de sangre, con un oficial responsable
del programa de donación de sangre y designado como oficial de reclutamiento de donantes.
• La formación del personal responsable de la educación de los donantes, la motivación, reclutamiento y selección.
• La formación del personal del servicio de transfusión de sangre para los procedimientos de extracción de sangre seguras,
incluyendo la selección del donante y el cuidado de los donantes.
• Para capacitar al personal técnico de laboratorio en todos los aspectos de la investigación de la sangre, determinación del grupo
sanguíneo, pruebas de compatibilidad, preparación de componentes y la cuestión de la sangre y sus productos para la transfusión.
• Para desarrollar buenas prácticas de laboratorio, incluyendo el uso de procedimientos operatorios estándar,; en todos los aspectos de la
investigación de la sangre, la extracción de sangre y processin.
• El seguimiento y evaluación del uso clínico de la sangre.
• Para promover la cooperación entre los servicios de transfusión sanguínea, servicios de salud y hospitales, instituciones educativas,
organizaciones religiosas, sociales e industriales, los medios de comunicación
y el público en general.
• Para garantizar un presupuesto adecuado y separada para los servicios de transfusión de sangre.
• Servicio de Transfusión Sanguínea en un país puede estar centralizada, regionalizado, basada en el hospital o alguna combinación
de ellos. Una vez que un sistema ha sido establecido en una región que es difícil de cambiar. El tamaño, la historia, la cultura, la
estructura política, el nivel de desarrollo económico y efecto de control administrativo de la evolución de los servicios de transfusión
de sangre. Así que en un país en desarrollo de gran tamaño el desarrollo de los servicios de transfusión de sangre o regionalizados
centralizados a nivel de las ciudades metropolitanas y grandes, estados y / o niveles de distrito es más práctico.
• Estimación de las necesidades de los donantes es esencial para el desarrollo de los servicios de transfusión de sangre. Las
estimaciones de necesidad se pueden basar en porcentaje fijo (5% recomendado por la OMS) de la población. Pero esta suposición
ignora la disparidad entre el tamaño de la población y el número de camas de hospital en un área. Estimación de las necesidades de
sangre en el número de camas hospitalarias agudas es más realista. La cifra puede variar de 5-15 unidades por cama por año. Las
proporciones más bajas se aplican a los hospitales donde se necesita la sangre en el manejo de la hemorragia como complicación del
embarazo o trauma o cirugía simple. Las proporciones más altas se aplican a los hospitales con instalaciones más especializadas como
la oncología, la cirugía a corazón abierto,
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Organización de los servicios de transfusión sanguínea
renal diálisis / trasplante o terapia de reemplazo en thalasseamia, hemofilia, leucemia y otros trastornos de la
sangre.
DONANTES Estrategias de reclutamiento
el reclutamiento de donantes es fundamental para el éxito del suministro de sangre segura y adecuada, y sus productos a las pacientes necesitan.
Reclutamiento donantes estrategias son:

• contratación pura basada en voluntaria.
• el reclutamiento social basada en la persuasión.
• donaciones remunerado en base.
Los dos primeros tipos de estrategias resultan en la donación de sangre voluntaria, ya que no dependen de la remuneración monitorizada y la
información de su salud proporcionada por estos donantes se puede confiar. la donación de sangre a base remunerado es realizado por los
vendedores de sangre, que ocultan los hechos acerca de su salud y de las enfermedades que pueden llevar, sobre su última donación y su
identidad. Su sangre no es seguro.
Pura estrategia de reclutamiento voluntario: Se depende de la seguridad generada internamente de altruismo o la responsabilidad de
la comunidad. Un donante voluntario dona la sangre en su / su propia voluntad, sin distinción de casta, credo, religión, color y estado del
destinatario y no espera ningún beneficio monitorizada desde las instalaciones de recolección u otras fuentes en el momento de la
donación o en el futuro.
Sin embargo, la mayoría de los donantes no donan sangre tan a menudo como pueden, pero pequeños incentivos como alfileres, insignias y
placas dadas a los donantes que han donado sangre a un número especificado expresan su reconocimiento a los donantes habituales y mejorar sus
sentimientos de altruismo y fomentar las donaciones más frecuentes.
La persuasión social basada en la estrategia de contratación: Se se asocia con la persuasión y la presión de amigos y colegas, jefes de
organizaciones religiosas y líderes políticos para donar sangre. Tales donaciones son a menudo asociados con las unidades exteriores
(móvil) Donación de sangre en el lugar de trabajo como colegios, escuelas, fábricas, oficinas, o en algún otro lugar en el que un grupo de
individuos recoger como unidad social, política o religiosa. En muchos casos, el grupo o el organizador promete el reclutador un número
mínimo de unidades de donaciones de sangre y la presión social sobre los miembros individuales del grupo es muy eficaz para fomentar las
donaciones y para cumplir con el objetivo prometido.
En la segunda forma de estrategia basada en la persuasión social son donantes de reposición también que donan sangre para pacientes
específicos, por lo general amigos cercanos o familiares sin ningún tipo de recompensa monitorizada. Estos donantes pueden sentir una expresión
de su interés y preocupación para los destinatarios. Los donantes de reposición pueden ser motivados con facilidad y persuadidos para convertirse
en donantes voluntarios regulares. A menudo existe una presión indebida (coerción) a los familiares / amigos de los pacientes, que obligan a que
paguen los donantes pagados profesional para servir como sustitutos de la familia y donar sangre que resulta en el suministro inseguro de la sangre.
La dependencia de las donaciones de reemplazo puede ser eliminado.
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Las donaciones basadas remunerado:
donaciones basadas remunerados son realizados por los vendedores de sangre (donantes profesionales pagados) que son pobres y donan
sangre por dinero. Se reconoce en todo el mundo que su sangre es sobre todo de mala calidad y puede llevar a la infección de muchas
enfermedades como el virus de la hepatitis B (VHB), el virus de inmunodeficiencia humana (VHB), el virus de la hepatitis C (VHC) y la sífilis,
etc Es la sangre no segura y puede ser peligrosa para los destinatarios. Este sistema sobrevive debido a la ineficiencia de los servicios de
transfusión de sangre voluntaria y la apatía del público en general. No debe alentarse y se detuvo.
MOTIVACIÓN Y PROPAGANDA
propaganda eficaz y amplia es imprescindible para el reclutamiento de donantes de sangre voluntarios. Los siguientes medios y
métodos de comunicación para la donación de sangre voluntaria disponibles enumeradas se deben seguir
Comunicación oral
Este es el método más eficaz de reclutamiento de donantes. Hablar de la necesidad de la sangre, la escasez de sangre, la facilidad de la
donación y el mito sobre la donación de sangre, posiblemente ilustrado por películas es muy eficaz. Los altavoces / reclutadores deben tener la
capacidad de persuasión de apelar a los sentimientos humanitarios de la audiencia. El tiempo debe estar disponible en el final de la charla para
el público para hacer preguntas y dar respuestas precisas.
Comunicación personalizada
comunicación personalizada se consigue a través de circulares de las asociaciones profesionales y religiosas, clubes,
boletines y revistas de la escuela o por correo directo.
La comunicación impresa
Folletos, carteles y folletos informativos son valiosas formas de comunicación. El material debe coger el 'ojo', y ser
fácil de entender.
materiales de publicidad, por ejemplo, carteles, anuncios de televisión, jingles, dibujos animados, etc. deben ser preparados por
profesionales. Las tarjetas de felicitación de cumpleaños, aniversarios de matrimonio, Día de Año Nuevo o de otros días propicios que llevan lemas
de motivación para las donaciones voluntarias también son eficaces.
Medios nacional o local de masas

La conciencia de la necesidad de la sangre y la donación de sangre voluntaria y llamamiento urgente puede ser hecha por los anuncios
en la radio, la televisión ya través de periódicos, revistas y otros materiales de lectura influyentes.
Instituciones educacionales
La educación entre los jóvenes es útil para eliminar la superstición y el mito relacionado con la donación de sangre. Es importante introducir
el tema de la donación de sangre en las escuelas como parte de la ciencia y los estudios cívicos. Los jóvenes son potenciales donantes.
reclutadores
La importancia de la contribución de los oficiales de reclutamiento, que pueden ser trabajadores sociales o, a menudo los donantes de sangre
en sí, no debe ser subestimada en donantes de reclutamiento. Su entusiasmo y empatía con los nuevos donantes es muy valiosa.
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Organización de los servicios de transfusión sanguínea
Los reclutadores son los conductos para el público en general y que debe tener toda la información sobre la donación voluntaria de
sangre, los avances científicos y técnicos relacionados con la medicina de transfusión, de modo que puedan dar respuestas precisas a los
donantes. No debe haber reuniones para los reclutadores a la que pueden expresar e intercambiar puntos de vista sobre su trabajo.
Motivar a los familiares y amigos de los pacientes

El personal del hospital, especialmente los médicos pueden contribuir de manera activa en la motivación de los familiares y amigos de los pacientes,
que tenían o necesitarán transfusiones de sangre, donar sangre. familiares y amigos de los pacientes que han donado sangre pueden ser fácilmente
motivados a convertirse en donantes voluntarios de sangre regulares.
Estrategias de retención DONANTES
Instalaciones de extracción de sangre

construcción de la imagen pública y la retención de los donantes tienen más éxito si los centros de recolección de sangre estáticos y móviles
son atractivos y todas las facilidades para la comodidad y conveniencia a los donantes están disponibles. La donación debe hacerse una
experiencia agradable y gratificante para los donantes.
centros de acopio estáticas

No debe haber área de recepción atractiva y adecuada disposición de los asientos en el centro de recogida. El tiempo de espera
probablemente se debe indicar a los donantes. Los donantes deben ser cómodos durante la donación de sangre.
lugares de recogida de móviles

lugares de recogida de móviles son muy convenientes para muchos donantes de sangre, y también atraen a la gente a donar primera vez por
impulso. Alrededor del 80% de la donación voluntaria de sangre (excluyendo donaciones de reposición) se recibe en los teléfonos (fuera de la
puerta) campamentos de donación de sangre y tienen algunas ventajas.
• Campamentos se organizan en lugares convenientes para los donantes, por ejemplo, centros comerciales, estadios deportivos,
bancos, fábricas, colegios, escuelas, oficinas o cualquier lugar público abierto.
• Tiene un ambiente muy agradable y ofrece un aspecto festivo.
• Los donantes de sangre y organizadores pueden interactuar con los demás y el público.
• Atrae a las personas que quieren ayudar a los demás o hacer algún servicio social.
ORGANIZACIÓN DE OUT-PUERTA CAMPS BLOOD donación:

• organizador de donantes de sangre identifica a una persona 'clave' entre el grupo objetivo que pueda actuar como reclutador jefe de
donantes dentro de ese grupo.
• En consulta con la persona 'clave' el contacto, una charla en una fecha conveniente para el organizador puede disponer, si así se
desea por el organizador.
• La fecha, hora y lugar de campamento de la donación de sangre conveniente para el organizador son fijos.
• carteles informativos, folletos, etc. se dan a la persona de contacto para que aparezca en el lugar del campo de la donación de
sangre.
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• equipo de recogida de sangre debe llegar en el lugar de campamento a cabo la donación de sangre de la puerta en el tiempo y debe
mantenerse hasta que el organizador quiere.
Relaciones con los donantes
Es de primordial importancia para disipar el miedo del donante. Si un nuevo donante es convencido por experiencia personal que la donación de
sangre es indoloro e inocuo, él o ella generalmente volverá a donar sangre de nuevo. Éstos son eficaces para motivar pública para ser donantes de
sangre regulares.
Personal
El personal del personal deben ser corteses interesados, alegre y amable, así como profesional y eficiente. Si los donantes encuentran
los centros de recolección sucios malos templado o en el personal civil, y mal gestionado, desorganizado, o, no es probable que volver
a donar sangre otra vez.
incentivos
Incentivos como alfileres, insignias y placas de un número específico de donaciones ayudan en donaciones de repetición. Otros incentivos o
premios, simple y atractivo de escaso valor comercial, son útiles en la retención de los donantes.
estrategias después de la donación
Se extrae sangre de donantes con habilidad, bien tratados, teniendo en cuenta los refrescos y los donantes de luz tarjetas. Los donantes deben
ser agradecidos por la contribución y les anima a donar de nuevo. letras simples agradeciendo a los donantes / organizadores por sus donaciones
son importantes.
ceremonias especiales
ceremonias de premios anuales deben mantenerse a reconocer y felicitar a las personas que han donado sangre muchas veces o
asistidos en la promoción de las donaciones voluntarias. Estas ocasiones dar una amplia publicidad y los ciudadanos prominentes
deben ser invitados a abordar los donantes y las organizaciones / instituciones para su servicio valioso y excepcional a la
comunidad. Los donantes, los reclutadores, instituciones y organizaciones deben recibir copas, trofeos y escudos por sus
contribuciones en las donaciones de sangre voluntarias.
Saludos
Saludos en ocasiones especiales como cumpleaños, matrimonio aniversario, el día de Año Nuevo, etc a los donantes voluntarios
aumentan las donaciones de repetición.
CONCLUSIONES
No hay atajos para la programación eficaz de reclutamiento. La única manera de lograr buenos resultados es acercarse a la
tarea sistemática y profesionalmente. El trabajo de reclutamiento de donantes voluntarios de sangre es esencialmente
progresiva y activa. El reto está siempre presente.
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Los donantes
La selección y la Sangre
Colección
T que paso primero y más importante, para garantizar que la sangre y sus productos para la transfusión no tienen ningún virus / acteria
patógeno, es la adecuada selección de los donantes de sangre. Debe hacerse con cuidado. El donante debe estar en buen estado de
salud con el fin de evitar cualquier efecto adverso para el donante o el receptor.
La sangre recogida de donantes voluntarios y relaciones / amigos de los pacientes sin ningún tipo de coacción sobre ellos es seguro.
la selección de donantes
El proceso de selección de donantes tiene cuatro aspectos principales:
(1) El registro, el consentimiento del donante, y la información demográfica. Demográfico

la información debe ser completa y correcta para que el donante puede ser informado de cualquier anormalidad pruebas
de laboratorio o él / ella puede ser llamado para la donación de futuro. (2) historial médico (3) examen físico Limited (4) Las
pruebas simples de laboratorio
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La información demográfica destacadas incluyen:

1. El nombre completo del donador
2. Padre / nombre del marido
3. Fecha de nacimiento / Edad
4. Género Masculino Femenino
6. direcciones residenciales y oficiales con números de teléfono
Información proporcionada a la DONANTES relación con el VIH / SIDA
Todos los donantes deben recibir materiales educativos para informarles de las actividades de alto riesgo de transmisión del VIH, de
los signos y síntomas clínicos de la infección por el VIH y el SIDA y de la importancia de abstenerse de donación de sangre si han
participado en estas actividades o signos experimentado y síntomas.
Grupo de Alto Riesgo de Donantes para la transmisión del VIH son
1. homosexual masculino o bisexuales
2. hombres o mujeres promiscuas
3. animadores sexuales masculinos o femeninos
4. abusadores drogas intravenosas
5. Las personas que han tenido relaciones sexuales con cualquiera en cualquiera de estos grupos.
6. vendedores de sangre (Profesional donantes remunerados)
Los síntomas de la relacionado con el SIDA (ARC):
Dentro de los 6 meses cualquiera de los siguientes:

1. pérdida de peso inesperada
2. Sudores nocturnos
3. Fiebre inexplicable por encima de 99 ° C durante más de 10 días
4. Ganglios linfáticos inflamados por más de 1 mes
5. La diarrea persistente
6. tos persistente con falta de aliento
7. manchas de color azul o púrpura típica de Sarcoma de Kaposi en, debajo de la piel, o en el moco
del membrance.
8. manchas blancas o manchas persistentes inusual en la boca
Historial médico
Se evalúa la historia clínica del donante. El donante es aceptada por una persona debidamente cualificada capacitado para seguir las
pautas prescritas para la selección de donantes de sangre. Esta persona trabaja
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Selección de donantes y extracción de sangre
bajo las instrucciones de un médico del banco de sangre. Un donante con cualquier condición anormal se conoce el
médico del banco de sangre, que toma la decisión final sobre si se debe recoger la sangre de un donante o no tales. En
caso de duda, el donante debe ser diferida.
Los donantes de sangre CUESTIONARIO:

• ¿Está actualmente en buen estado de salud?
• ¿Cuándo fue la última vez este?
• ¿Está tomando alguna medicina?
• ¿Ha sido vacunados o inmunizados recientemente?
• ¿Alguna vez ha sufrido una crisis de epilepsia, convulsiones o trastorno mental?
• ¿Alguna vez ha tenido ictericia o hepatitis?
• ¿Alguna vez ha sido positivo para VHB o VHC?
• ¿Ha estado en contacto con una persona que sufre de ictericia (hepatitis) durante los últimos 6 meses?
• ¿Usted sabe sobre el SIDA?

• ¿Usted (si es hombre) tenido relaciones sexuales con otro hombre?
• ¿Ha tenido relaciones sexuales sin protección con una persona en mayor riesgo para el SIDA?
• ¿Ha perdido peso significativa en los últimos 6 meses?
• ¿Alguna vez ha sido positivo para el VIH?
Los riesgos laborales:

Los equipos de aire, se recomienda a los conductores de vehículos pesados de larga distancia y trabajadores de la construcción de edificios altos no
dar la sangre dentro de las 12 horas de irse de guardia.
Infecciones respiratorias
• Resfriado, gripe, tos, dolor Aplazar hasta que todos los síntomas desaparecen
garganta o sinusitis aguda y temperatura normales
• Sinusitis crónica Sin aplazamiento menos que el uso de antibióticos
• ataque asmático 1 semana después del último ataque si el pecho está claro
• Los asmáticos en los esteroides Aplazar
Embarazo y Aborto
• Embarazadas o recientemente entregado Aplazar durante 6 meses después de la entrega
• Aborto Aplazar 6 meses después del aborto
• La lactancia materna Después destetados bebé (aplazar hasta el bebé está en
periodo de lactancia)
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Procedimientos quirúrgicos:
• Cirujía importante 6 meses después de la recuperación
• Cirugía menor 3 meses después de la recuperación
• Cirugía a corazón abierto- Permanentemente aplazar ..

incluyendo By-pass cirugía
• cirugía de cáncer aplazar de forma permanente
• cáncer de piel localizado que 6 meses después de la eliminación

fue removido
• la extracción del diente o la

manipulación dental Aplazar durante 3 días
• Cirugía dental Aplazar durante 1 mes

bajo anestesia
Enfermedades cardíacas
• Tiene cualquier síntoma activa aplazar de forma permanente

(Dolor en el pecho, dificultad para
respirar, hinchazón de los pies)
• actividad restringida aplazar de forma permanente
• Medicamentos cardíacos
(digitalis.nitroglycerine) aplazar de forma permanente
• La presión arterial alta controlada

con la medicina Aceptable si PA normal
Enfermedades cardiovasculares
• infarto de miocardio aplazar de forma permanente
• Enfermedad de la arteria coronaria aplazar de forma permanente
• Angina de pecho aplazar de forma permanente
• La cardiopatía reumática con

daño residual aplazar de forma permanente
convulsiones
Desmayos, convulsiones y Defer, si no tomar medicamentos o libre de convulsiones
Epilepsia durante> 2 años pueden ser aceptados después de la evaluación.
Trastornos Endorcranial aplazar de forma permanente
Enfermedades infecciosas
Los donantes deben estar libres de enfermedades infecciosas se sabe que son transmisibles por la sangre, por lo que se
puede determinar mediante el examen y la historia de siempre.
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Hepatitis viral
• Ha tenido hepatitis (ictericia) aplazar de forma permanente

aparte de la hepatitis A, Prueba positiva
para la hepatitis B aplazar de forma permanente
(HBsAg), Hepatitis C (HCV)
• La exposición a la hepatitis por los tatuajes, Aplazar durante 12 meses

acupuntura o perforación corporal
• Se teje en la diálisis renal Aplazar durante 12 meses
• transfusión Recibido de sangre Aplazar durante 12 meses

y sus componentes
• El contacto cercano con persona Aplazar durante 12 meses

sufrimiento con hepatitis
Ictericia
Haya tenido alguna vez ictericia asociada a:

• Recién nacido sin aplazamiento
• enfermedad Rh sin aplazamiento
• cálculos biliares sin aplazamiento
• Mononucleosis sin aplazamiento
Infección por VIH / SIDA
donantes de grupos de alto riesgo para la infección por VIH

donante anti-VIH positivo aplazar de forma permanente
Los donantes que tienen síntomas de SIDA
MALARIA:
Los viajeros que han estado en una zona considerada endémica para la malaria pueden ser aceptados como donantes habituales de un año
después de regresar de la zona endémica -independientemente de la recepción de la profilaxis contra la malaria, siempre que hayan estado libres
de enfermedad febril de origen desconocido. Inmigrantes, refugiados o ciudadanos procedentes de un país endémico para la malaria pueden ser
aceptados como donantes de sangre tres años después de la salida de la zona endémica, si han estado asintomático en el ínterin. En una región
endémica para la malaria, que no es factible para rechazar los donantes que tienen antecedentes de infección por malaria o que han tomado la
droga (s) contra la malaria. Los pacientes se pueden administrar medicamentos contra la malaria. Historia de la malaria en zonas endémicas, pero
Aceptadas 3 meses después

debidamente tratada y libre de cualquier síntoma tratamiento
Sífilis
dolor genital o erupciones cutáneas generalizadas Aplazar por 12 mes después de erupciones
desaparecen y la finalización de la terapia
Tuberculosis Aplazar durante 5 años después del cese de los síntomas y el tratamiento
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Fiebre
fiebre prolongada tenido o Aplazar hasta totalmente recuperado y fuera

Fiebre reumática medicación
enfermedades renales
• La infección aguda de riñón

(pylonephritis) o aguda Aplazar durante 6 meses después de la interrupción
infección de la vejiga (cistitis) del tratamiento y los síntomas gratuitas
• enfermedades renales crónicas / fracaso aplazar de forma permanente
Sistema digestivo
• úlcera de estómago con síntomas aplazar de forma permanente
o con hemorragias recurrentes
• enfermedades hepáticas crónicas con

órgano deteriorada aplazar de forma permanente
La vacunación e inoculación
1. No hay período de espera antes de la donación si los síntomas gratis
La inoculación con toxoide del tétanos o una vacuna muerta viral / bacteriana
Influenza
Difteria pertusis
Tifoidea La poliomielitis (vacuna Salk, inyección)
Paratifoidea La rabia como profiláctico
Cólera Plaga
Profiláctica contra la hepatitis B
2. y dos semanas diferimiento del momento de la vacunación.

La viruela (dos semanas después de la costra se cae)
(vacuna Sabin, oral) oral de polio Sarampión Fiebre amarilla
(rubéola) Paperas
3. Cuatro semanas diferimiento del momento de la vacunación

El suero anti-tétanos suero
anti-veneno de suero anti-difteria
suero gangrena Anti-gas de la
rubéola (sarampión alemán)
4. Doce meses de diferimiento del momento de la vacunación

vacunación Anti-rabic como resultado de animales mordedura HBIG
(inmunoglobulina de hepatitis B) globulina Gamma
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MEDICACIÓN
Si un donante está tomando algún medicamento que no sea en su / su propio interés para donar sangre y también puede afectar al
paciente que recibiría la sangre.
medicamentos
Aceptado / diferido
• Anticonceptivos orales
• analgésicos Aceptado
• vitaminas Aceptado
• sedantes suaves y
transquillisers
• Salicilatos (aspirina) tomadas en No se aceptan si se utiliza sangre
últimos tres días para la preparación de plaquetas
• La isotretinoína (Accutane) Aplazar durante 1 mes después de la última dosis
utilizado para el acné
• Finasteride (por ejemplo Proscar) utilizado Aplazar porque yo mes después de la
para el tratamiento de la hiperplasia benigna de próstata última dosis
• fármacos orales antidiabéticos Aceptable
sin complicación vascular
• . Los diabéticos que usan insulina Defer mientras toma el medicamento
• Los antibióticos (oral) Aplazar durante 3 días y hasta síntomas gratuitas
• Antibióticos (inyección) Aplazar durante 4 días y hasta síntomas libre después de la última inyección /
• Cortisona Aplazar durante 7 días después de la última dosis
• Medicamentos para tratar las Aceptado
hipercolesterolemia
Los donantes que toman medicamentos siguientes son rechazadas de forma permanente:
Antiarrítmicos inmunosupresor
Anticonvulsions harmones crecimiento de la pituitaria de origen humano
anticoagulantes Sedantes o tranquilizantes en dosis altas
Los fármacos antitiroideos vasodilatadores
Los fármacos citotóxicos El etretinato (egTegison) para tratar
psoriasis. Es teratogénico.
Digital vasodilatadores
Dilantin Medicamentos para la enfermedad de Parkinson
Otras afecciones que requieren de exclusión permanentes
tendencia a la hemorragia anormal o trastorno de la coagulación sanguínea, tales como trastorno alérgica grave
hemofilia
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Los donantes con Cell relativamente menor Anomalías Talasemia Trait Se se asocia con poca o ninguna reducción en la vida de los glóbulos
rojos y la concentración de Hb es generalmente normal. Las personas con talasemia pueden ser aceptados como donantes, siempre que tengan
una concentración normal de hemoglobina y recuento de reticulocitos normal.
Policitemia vera
La sangre de personas que sufren de la policitemia vera no se utiliza para transfusión, ya que es una condición precancerosa
y su receptor a veces se desarrolla la leucemia u otras células malignas, aunque es raro.
La glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (-6-PD G) deficiencia

El uso de sangre del donante con esta anormalidad impone una pequeña pero definida riesgo para el receptor. Aunque la supervivencia de las
células rojas con deficiencia de G-6-PD es casi normal durante aproximadamente 80-90 días., Pero si el receptor ingiere drogas como
fenacetina, sulfonamidas, vitamina K, primaquina etc. puede haber una rápida destrucción de la G-6 -PD células deficientes.
En el almacenamiento, la viabilidad de las células rojas de G-6-PD donante deficiente es menor que la de los glóbulos rojos normales.
Examen físico: Aspecto general:
Un posible donante debe estar en buen estado de salud.
Edad: 18-60 años
Peso:
Un donante de pesaje 45 kg puede dar 350 ml de sangre (8-9 ml / kg de peso corporal) además de las muestras piloto para su
procesamiento. Aquellos que pesa 60 kg o más pueden dar sangre 450 ml, así como muestras piloto.
Presión sanguínea:
La presión arterial sistólica debe estar entre 100 y 180 mm de Hg y la presión diastólica entre 50 a 100 mm
de Hg.
Pulso:
El pulso debe ser de entre 80 a 100 latidos por minuto y regular.
Temperatura:
Temperatura oral no debe exceder de 37,5 ° C.
donación de intervalo
El intervalo entre la donación de una unidad de sangre debe ser de al menos 12 semanas, excepto en circunstancias poco usual.
donación de sangre se debe aplazarse por al menos 72 horas después de plasma o plaquetas de aféresis.
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Donantes de la piel:
La piel en el sitio de la punción venosa debe estar libre de cualquier lesión o cicatriz de punciones con agujas indicativas de la adicción a los
narcóticos o donación de sangre frecuente como en el caso de los vendedores de sangre.
El examen sistémico:
Clínicamente corazón, los pulmones y el abdomen deben ser normales. Hígado y el bazo no deben ser palpable.
PRUEBAS DE LABORATORIO:
La hemoglobina (o hematocrito):
La hemoglobina (Hb) o el hematocrito (Hct) debe determinarse cada vez que el donante de presentarse a sí mismo / ella misma. La Hb
no debe ser inferior a 12,5 g / dl (o 38% Hct) La Hb se puede medir mediante los métodos siguientes:
(una) método Peso específico usando una solución de sulfato de cobre de la gravedad específica 1,053. (Ver
capítulo "Preparación de soluciones y métodos") (B) método
Sahlis
(do) método cianometahemoglobina utilizando espectrofotómetro o colorímetro fotoeléctrico. (Véase el capítulo "Preparación de
soluciones y métodos") (d) método Hemo-Cue (Véase el capítulo "Preparación de soluciones y métodos") La prueba de la gravedad
específica de sulfato de cobre se utiliza generalmente como un procedimiento de detección de Hb. Es prueba simple, rápida y barata.
ABO y Rh (D) Agrupación de sangre:

Donantes se tamiza para el grupo ABO ad Rh (D) por la diapositiva / baldosa o método de tubo. se registra
Hb g / dl y ABO y el grupo Rh (D) en la forma de donantes.
Recogida de sangre: Donación
Local
Debe ser atractivo, bien iluminado, limpio y para que los donantes se sientan cómodos y relajados con aire acondicionado.
la extracción de sangre fuera de la puerta

Fuera de la puerta sitios de extracción de sangre pueden presentar problemas especiales. Un individuo entrenado en los principios de
seguridad debería realizar una visita con antelación para el lugar de recogida para asegurar que los riesgos se reducen al mínimo. Todo el personal
de fuera de la puerta campos de extracción de sangre deben ser entrenados para reconocer las condiciones inseguras y entender las políticas y
procedimientos de control de infecciones. La responsabilidad de la seguridad del sitio debe ser asignado a un empleado de alto nivel.
Acceso El lavado de manos es esencial en todos los sitios de recolección. Moqueta o superficies difíciles de limpiar se pueden proteger con
un recubrimiento adecuado limpio. pantallas portátiles son útiles para proteger y mantener las áreas de trabajo seguras. áreas de servicio Refresco
deben ser separados de las áreas de recogida de sangre y almacenamiento. residuos de la sangre contaminada debe ser empaquetado y regresó a
una ubicación central para su eliminación usando térmica (autoclave, incinerador) o desinfectante químico de acuerdo con las regulaciones locales
para desechos médicos.
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Personal
El personal debe estar interesado, amable, así como profesional y bien entrenado. Se extrae sangre del donante por un
médico cualificado o bajo su / su supervisión por parte de técnicos entrenados en el procedimiento. Un médico debe estar
presente en las instalaciones cuando se recoge sangre. Equipos y Materiales
una) Contenedores de sangre
contenedores de sangre son de polivinilo bolsas de plástico de cloruro (PVC), que son sistema cerrado de bolsas
individuales, dobles o triples para la recogida de 350 ml o 450 ml de sangre. Las soluciones anticoagulantes
citrato-fosfato-dextrosa (CPD) o citrato-fosfato-dextrosa-adenina (CPDA-1) se utilizan en el volumen de 49 ml para 350 ml o
63 ml por 450 ml de sangre (14 ml CPD o CPDA- 1 para la sangre 100 ml). Actualmente CPDA-1 solución anticoagulante se
utiliza sobre todo. Debe ser estéril, libre de pirógenos. (segundo) Esfigmomanómetro, mezcla automática de la sangre y un
peso de la máquina de bolsa de sangre
(Blood Collection monitor-Scale / Mixer como Combimix-X3, Baxter; Biomixer-321, Lungberg y Kogel AB etc.)
(c) clips de plástico, separador, sellador de tubo-di eléctrico o de aluminio clips, sellador, cortador. (re) hisopos
estériles de algodón y tiritas / vendas (e) alcohol metilado, tintura de yodo, solución de povidona-iodo (1%) y alcohol
(f) medicamentos de emergencia y otros artículos: alcohol aromático de amoníaco; Intravenoso
solución salina normal cristaloide (cloruro de sodio 0,9%); Inyecciones: fosfato sódico de dexametasona; Gluconato de
calcio; Mephantine; Perinorm; Cilindro de oxígeno con el regulador y la máscara; documentos de bolsas para respirar;
papeles tisú; toallas; cuencas.
Identificación
Bolso de la sangre y el tubo (s) piloto se identifican mediante un número donación en el momento de la recogida de sangre, de modo que se
remonta al donante. Las fechas de recolección y de caducidad, y, grupo ABO Rh (D) se escriben en la etiqueta de la bolsa para la recogida de
sangre.
Volumen de sangre
Un donante de pesaje 45 kg puede dar 350 ml (369 octies) de sangre y los que pesan 60 kg o más puede dar 450 ml (474 g) de la sangre y
la muestra de sangre en el tubo piloto (8-9 ml de sangre por kg de peso corporal o 12 % de volumen de sangre)
El volumen de sangre: solución anticoagulante.

Volumen de sangre recogida deberá ser proporcional al volumen de anticoagulante con ± 10%, es decir 350 a 385 ml de sangre en
la bolsa de 350 ml de sangre y 450 a 495 ml de sangre en la bolsa de 450 ml de sangre. Si menos sangre se debe desechar. la
cantidad del anticoagulante debe reducirse proporcionalmente.
14 ml de CPD o solución CPDA-1 se utiliza para 100 ml de sangre. Si menos cantidad de sangre debe ser dibujado dos factores
deben ser calculados:
dieciséis
(1) ¿Cuánta sangre se puede extraer de forma segura desde el donante. (2) Se necesita una solución la
cantidad de anticoagulante para preservar la sangre.

Los cálculos cuando menos cantidad de sangre es que se pueden extraer en una bolsa de 450 ml de sangre:
una) En primer lugar, la cantidad de sangre que se elaborará está determinada por el peso del donante utilizando la
siguiente fórmula:
(Peso del donante en Kg 55) x 450 = cantidad (ml) que se elaborará
segundo) A continuación, la cantidad correcta de anticoagulante requerida se determina:

(Cantidad de sangre que se puede extraer 100) x 14 = cantidad (ml) de anticoagulante
necesario.
do) La cantidad de anticoagulante que ser eliminado se calcula:

63 ml-cantidad de anticoagulante necesaria = cantidad de anticoagulante eliminar de
bolso.
Por ejemplo, si la sangre entera es que puede extraerse de un donante que pesa 48 kg, el cálculo
sería: (48 55) x 450
= 392,72 dicen 390 ml de sangre que se pueden extraer
(390 100) x 14 = 54,6 ml anticoagulante necesario
63-54.6 ml = 8,4 ml de anticoagulante para ser retirado de la bolsa para el
almacenamiento adecuado de sangre.
MÉTODO DE flebotomía:
1. El flebotomista debe lavarse las manos con / agua y jabón y debe usar guantes estériles.
2. Inspeccionar la bolsa de fugas o cualquier otro defecto. La solución anticoagulante debe ser clara. Compruebe el nombre del
donante, el número de donaciones en la forma y la bolsa. Número de donación en la bolsa y la forma debe ser el mismo. Coloque
la bolsa en una balanza y asegúrese de que está por debajo del nivel del brazo.
3. Elija el sitio de la punción venosa antecubital en la zona de la presión arterial arm.Apply

manguito, se inflan a 50-60 mm de Hg y seleccionar una vena prominente y firme en la zona que está libre de cualquier marca de la
lesión de la piel / de agujas. Preguntar al donante para cerrar el puño por lo general ayuda a traer la vena en la prominencia.
4. Suelte el manguito de presión arterial y limpiar a fondo el sitio propuesto para la punción venosa
con una loción antiséptica de la siguiente manera: (a)
Clean área de 4-5 cm comenzando en el sitio de la punción venosa y en movimiento hacia el exterior de una manera
espiral concéntrica con metilado espíritu / alcohol. (segundo) Aplicar 10% de solución de povidona-iodo (betadine) o tintura de
yodo en la misma
así como el espíritu. Deje que se seque. (do) Limpiar con alcohol metílico o alcohol permitir que la
solución se seque. (re) El área limpiada está listo para la venopunción y no debe ser tocado.
17
5. Inflar manguito de presión arterial para mantener la presión de 50-60 mm de Hg. Pedir al donante para cerrar el puño. Destapar la
aguja estéril y realizar la punción venosa inmediatamente, utilizando el procedimiento aséptico.
6. Pedir al donante para abrir y cerrar la mano o de apretar una pelota de goma.
7. El donante debe estar bajo observación constante a lo largo de la flebotomía y nunca deberá dejarse
desatendida.
8. Mezclar la sangre y anticoagulante suavemente y periódicamente durante la recogida de la sangre. Mezcla

se puede hacer mediante la extracción de sangre la mano o el monitor -Balanza / mezclador.
9. El flujo de sangre debe ser ininterrumpida y constante, de lo contrario, no será adecuado para la preparación de
concentrado de plaquetas, plasma fresco congelado o crioprecipitado.
10. Controlar el volumen de sangre que se extrae usando una balanza de recogida de sangre o Monitor con
Escala / mezclador. Un ml de sangre pesa 1,05 g. Por lo tanto, a 350 ml de sangre pesa 367 g. y 450 ml
pesa 472 g. El peso inicial de la bolsa y la solución anticoagulante debe ser tomado en cuenta al medir el
peso total.
11. Tan pronto como se recoge la cantidad necesaria de sangre, sujetar el tubo de la bolsa con
clip de plástico. Desinflar el manguito o liberar el torniquete. Coloque el hisopo estéril en el sitio de la punción
venosa, aplicar una ligera presión y retirar la aguja.
12. Retire manguito de presión arterial o el torniquete.
13. Pedir al donante para poner los dedos de la otra mano sobre el hisopo en el sitio de la punción venosa y
para elevar el brazo.
14. Tome la bolsa a la mesa de procesamiento.
15. Aflojar el pinzas arteriales / clip de plástico y aplicar una ligera presión sobre la bolsa para transferir 5-6
ml de sangre en el tubo (s) piloto con mismo número que en la bolsa de sangre.
dieciséis. Sellar el tubo con sellador de tubo-di eléctrico y separar la aguja.
17. Franja de tubo de la bolsa de sangre, a partir de sello, empujando la sangre en la bolsa. Hacerlo con rapidez, para evitar
permitiendo que la sangre se coagule en el tubo. Invertir bolsa varias veces para mezclar a fondo la sangre; luego permitir que la tubería
se vuelva a llenar con sangre anticoagulada de la bolsa. Repetir el proceso una segunda vez.
18. Sellar el tubo conectado a la bolsa en segmentos (2-3) con sellador de di-electrictube.
19. Mantenga la bolsa de sangre a 2-6 ° C en el refrigerador inmediatamente después de la recogida. Si las plaquetas
son para ser cosechadas, bolsa de sangre debe mantenerse a 20-24 ° C hasta que las plaquetas se separan. Las plaquetas
deben ser separados dentro de 6-8 horas después de la recogida de la sangre entera.
20. El donante debe permanecer en el sofá sangrado durante 8-10 minutos bajo la observación
del personal. A continuación, se permite que el donante de sentarse e ir para el refresco.
21. Compruebe el brazo y aplicar tirita después de que deje de sangrar.
22. refresco ligero como las galletas y té / café / bebida suave se les da a los donantes.
18
23. El donante debe dar la tarjeta de donación y dio las gracias por la contribución y alentó
donar de nuevo.
REACCIÓN ADVERSA DONANTE
Aunque el proceso de donación de sangre es generalmente seguro y sin complicaciones, de vez en cuando los donantes experimentan reacciones
adversas durante o después de la donación; pero por lo general son inofensivas. Personal en el área de flebotomía deben estar formados y
preparados para responder con rapidez a esas reacciones. En general, si se producen reacciones adversas:
1) Eliminar / desinflar el torniquete y retirar la aguja de la vena del donante a la primera señal de una reacción.
Poner el hisopo estéril en el lugar venipumcture y aplicar presión con el pulgar.
(2) Solicitud de ayuda de otros miembros del personal o el director médico, si es necesario. (3) Si es posible, retire el donante a
una zona en la que él / ella puede ser atendido en la intimidad.
Donantes reacciones adversas son:
Síncope (desmayo o síndrome vasovagal):
Los síntomas pueden incluir sudoración, debilidad, mareo, palidez, pérdida de conciencia, convulsiones, y el paso involuntario
de orina y heces. La piel es generalmente frío, la presión arterial disminuye y el pulso se vuelve filiforme.
administración
[una] Coloque el donante en su / su espalda y elevar las piernas por encima del nivel de la cabeza del donante. [segundo] Aflojar las ropas
apretadas. [do] Asegurar una adecuada forma de aire. [re] Administrar la inhalación de espíritu aromático de amoniaco. [mi] Aplicar
compresas frías en la cabeza del donante. [F] Controlar la presión arterial, el pulso y la respiración hasta donante recuperarse.
La tetania (Contracciones o espasmo muscular)
La ansiedad y la respiración profunda pueden hacer que el donante excitado a perder el exceso de dióxido de carbono, que puede causar tetania se
caracteriza por contracciones o espasmos musculares debido a la hiperventilación.
administración
El donante se le pide a respirar en una bolsa de papel que trae alivio rápido. No le dé
oxígeno. Náusea y vómitos.
Administración:
una) | Hacer que el donante lo más cómoda posible. b [Preguntar al
donante a respirar lenta y profundamente.
19
do) Girar la cabeza del donante a un lado para evitar la aspiración de vómitos.
re) Si donante vomita, proporcionar receptáculo adecuado y toalla o tejidos de limpieza.
Gestión de
hematoma
una) Desinflar el manguito de presión arterial. Pedir al donante para abrir el puño y retire la aguja de la vena.
segundo) Coloque 3 o 4 piezas de gasa estéril o hisopos de algodón sobre el hematoma y aplicar presión digital para 7-10 min con los
donantes brazo en por encima del nivel del corazón.
do) Aplicar hielo en el área durante 5 min. Si es deseado.
convulsiones
convulsiones verdaderas son raras
En la gestión caso de que se
produzcan:
[una] Evitar que el donante se dañe a sí mismo / a sí misma [b] Coloque dorso de la lengua entre los dientes para evitar que
él / ella se muerda la lengua [c] Asegurar la vía aérea adecuada.
Los problemas cardíacos
problemas cardiacos graves son extremadamente raros en la donación de sangre. Si el donante está en paro cardíaco, comience la resucitación
cardiopulmonar y continuar hasta que llegue la ayuda médica. La naturaleza y el tratamiento de todas las reacciones adversas deben tenerse en
cuenta en el registro del donante.
Instrucciones a los donantes (después de la donación)

1. Beba más líquidos de lo habitual en los siguientes 4 horas. No se quede con hambre.
2. No fume durante media hora.
3. No tome bebidas alcohólicas durante por lo menos 6 horas.
4. Si hay sangrado del sitio de flebotomía, levantar el brazo y aplicar presión.
5. Si hay sensación de desmayo o mareo, o bien acostarse o sentarse con la cabeza entre las rodillas. Si los síntomas
persisten, pedir ayuda, volver al banco de sangre o consultar a un médico.
6. Quitar el vendaje / tirita después de 5-6 horas.
Procesamiento de la sangre DONANTE
Las consideraciones generales en la sangre de los donantes de procesamiento son:

1. Número de donación en la bolsa de sangre. el procesamiento de tubo piloto y registro de donante debe ser
revisado de nuevo antes del procesamiento.
20
2. grupo ABO se determina por ensayo de las células rojas con anti-A, anti-B y anti-AB sueros y probando el suero con las células A, B y
O conocidos. Prueba con anti-suero AB es opcional si se utilizan monoclonal anti-A y anti-B. La sangre no debe ser liberado para su
uso hasta que las discrepancias, en su caso, el arco no se ha resuelto.
3. grupo Rh debe ser probado para Rh (D), sólo con suero anti-D. Rh (D) negativas unidades debe ser probado para débil Rh
(D), es decir D u por el suero antiglobulina humana (AHG). Las unidades son aquellos Rh (D) negativo y D u positivo debe etiquetarse
Rh (D) positivo y las que son Rh (D) negativo y D 11 negativo debe etiquetarse Rh (D) negativo. No se recomienda realizar pruebas
de rutina para otros antígenos de sistema Rh.
4. sangre del donante debe ser probado para anticuerpos inesperados por solución salina, albúmina / enzima y pruebas de antiglobulina
humana con panel de células de detección, o con 3 células rojas de grupo O frescas agrupados. Véase el capítulo sobre 'Detección e
identificación de anticuerpos'
5. Las pruebas de enfermedades transmisibles por la sangre: (a) antígeno de superficie de Hepatitis B y anti-HCV mediante el
método de ELISA. (segundo) Prueba para anti-VIH 1 y 2 por ELISA para eliminar el riesgo de transmisión de la infección por VIH.
(do) Prueba para la sífilis - prueba de floculación, Laboratorio de Investigación de Enfermedades Veneral (VDRL) de ensayo o un
ensayo rápido de plasma Regin (RPR). (D) Ensayo de parásitos de la malaria.
• La sangre puede ser probado para parásitos de la malaria por frotis de sangre, pero es difícil de encontrar parásitos en frotis
de sangre en corto tiempo, especialmente si el número de parásitos es menos del 100 por l de sangre. .
• Prueba para anticuerpo malaria basa en prueba de inmunofluorescencia indirecta o ELISA.

• prueba de antígeno de la malaria.
Las pruebas que utilizan anticuerpos monoclonales para la detección de antígenos de la malaria están disponibles, pero son costosos.
Como no hay una prueba adecuada que se puede hacer fácilmente en el cribado de donantes de sangre para la malaria, se ha sugerido que
los fármacos contra la malaria pueden ser administrados para los receptores de sangre en áreas altamente endémicas.
21
Preservación
y
almacenamiento
de sangre
T él primero conservante anticoagulante fue introducido por Rous y Turner en 1916. Consistía en una solución de citrato-glucosa en la que la sangre
de los conejos se almacenó durante dos semanas, lo que impidió la anemia cuando se transfunden en otro conejo que había sufrido la pérdida de
sangre. La solución de Rous Turner se utiliza para el almacenamiento de la sangre humana durante la Primera Guerra Mundial (Mollison, 1987).
El siguiente desarrollo importante se produjo en 1943 durante la Segunda Guerra Mundial, cuando se introdujo la solución de
dextrosa citrato (ACD) acidificado para uso clínico por Loutit y Mollison.
En 1957 Gibson et al desarrollado un conservante mejorado de citrato-fosfato-dextrosa (CPD), que era menos ácido que el ACD y se
mantiene 2,3-difosfoglicerato (2,3-DPG) nivelar mejor que en solución ACD. CPD finalmente sustituido ACD y se convirtió utiliza comúnmente
conservante para el almacenamiento de células de la sangre / rojo en forma líquida. Periodo de validez de la sangre almacenada en CPD a
2-4 ° C fue de 21 días.
En 1978 citrato-fosfato-dextrosa con adenina (CPDA-1) conservante fue desarrollado. La adición de adenina mejoró la
síntesis de trifosfato de adenosina (ATP) en la sangre almacenada, lo que prolonga el almacenamiento de las células rojas de la
sangre / a 2-4 ° C a 35 días.
23
SOLUCIONES CONSERVACIÓN APROBADO tabla. 3.1 composiciones de
Conservantes / Anticoagulantes
ACD CPD CP2D CPDA-1
citrato trisódico (g) 22.0 26.30 26.35 26.35
El ácido cítrico (g) 8.0 3.27 3.27 3.27
Dextrosa (g) 24.5 25.50 51.10 31.90
fosfato de sodio monobásico (g) - 2.22 2.22 2.22
Adenina (g) - - - 0.27
El agua destilada (ml) 1000 1000 1000 1000
Conservante (ml) / sangre 100ml 15 14 14 14
Conservante (ml) / 450 ml de sangre 67.5 63 63 63
pH inicial del conservante 5.0 5.6 5.6 5.6
En el primer día pH de la sangre en la bolsa 7.0 7.2 7.4 7.3
Tiempo de almacenamiento (días) a 2-6 ° C 21 21 21 35
Acción de los ingredientes de la glucosa solución anticoagulante
_ Soporta la generación de ATP a través de vías glucolíticas.

adenina _ Sintetiza ATP, aumenta el nivel de ATP, se extiende la vida útil de los
glóbulos rojos a 42 días.
Citrato _ Impide la coagulación mediante la quelación de calcio.
Sodio preventsfall di-fosfato en pH
Los glóbulos rojos CONSERVACIÓN
El objetivo de la preservación de la sangre es proporcionar componentes sanguíneos viables y funcionales para los pacientes que requieren
transfusión de sangre. Más de 70% de células rojas debe permanecer viable en circulación de 24 horas después de la transfusión de sangre
almacenada en CPDA-1 durante 35 días. La sangre se almacenó a 2-6 ° C para mantener la viabilidad óptima.
La pérdida de células de viabilidad de rojo se correlaciona con la "lesión de almacenamiento", debido a diversos cambios bioquímicos:
Disminución en el pH acumulación de Disminución

de ácido láctico en disminuir el consumo de
glucosa en Low niveles de 2,3-DPG nivel de ATP
Disminución en el pH
Cuando la sangre se almacena a 2-6 ° C, glycosis se reduce, pero no se detiene. Giycosis resulta en la producción de lactato, con la
consiguiente disminución en el pH. La sangre entera recogida en CPD tiene un pH
7,20 en el día 0 y 6,84 en el día 21. soluciones Conservante proporcionan una capacidad de tamponamiento para minimizar los cambios de pH y
optimizar el período de almacenamiento.
24
Conservación y almacenamiento de sangre
Pérdida de Trifosfato de adenosina ( ATP)
ATP se asocia con las células de viabilidad de rojo. La pérdida de ATP provoca aumento de la rigidez celular y disminución de la integridad de la
membrana de glóbulos rojos y deformabilidad. Una disminución de ATP permite la filtración de Na + y K + a través de la membrana de glóbulos
rojos en niveles superiores a los que normalmente se ve en vivo. El nivel de ATP en CPDA-1 en las células rojas en día 35 es 45% (± 12) del nivel
inicial.
Disminución de 2, 3-Dipnosphoglycerate (2,3-DPG)
Una caída en el pH en los resultados de sangre almacenadas en una disminución en el nivel de célula de 2,3-DPG rojo, lo que resulta en aumento
de la afinidad de la hemoglobina-oxígeno. células rojas DPG-empobrecido han deteriorado capacidad para suministrar oxígeno a los tejidos. El
grado de reducción de los niveles de 2,3-DPG depende de la solución conservante utilizado. solución ACD tiene un pH más bajo que el de la
solución de CPD. Por lo tanto 2,3-DPG cae dentro de los primeros pocos días en ACD donde como sangre almacenada en CPD / CPDA-1 mantiene
niveles adecuados de
2,3-DPG durante 10-14 días.
Los efectos patológicos de la transfusión de glóbulos rojos con bajos niveles de 2,3-DPG y aumento de la afinidad con el oxígeno
incluyen aumento del gasto cardíaco y una disminución en PO venosa mixta 2 tensión.
2,3-DPG niveles en sangre transfundida son importantes en ciertas condiciones clínicas. funciones miocárdicas mejoran después de la
transfusión de la sangre con altos niveles de 2,3-DPG durante la cirugía cardiovascular. En los pacientes con shock de la transfusión de
glóbulos rojos agotados-DPG hace una diferencia significativa en la recuperación.
Después de la transfusión, los glóbulos rojos siguen sintetizar 2,3-DPG y los niveles regresan a los valores normales esperados
dentro de las 24 horas. El estado ácido-base del recipiente, el metabolismo de fósforo y el grado de metabolismo de influir en la tasa de
recuperación de 2,3-DPG.
adenina
Simon (1962) mostró que en CPD solución suplementado con 17 mg (0,25 mM) adenina por 63 ml de anticoagulante y 25% más de
dextrosa, la supervivencia de las células rojas 24 horas después de la transfusión de sangre almacenada durante 35 días fue de 80 ± 6,5%.
Adenina sintetiza ATP y su nivel es 56,4 ± 15,9% del nivel inicial en la sangre almacenada durante cinco semanas.
nefrotoxicidad adenina debido a su producto sin metabolizar, 2,8-dioxyadenine, es insignificante a un nivel de peso corporal de 15 mg / kg.
Esta cantidad está presente en 30 unidades de adenina CPD fresco (0,5 mM / unidad) en la sangre o en 60 unidades de cada una adenina que
tiene 0,25 mM La cantidad de adenina es menor si se usan células rojas.
Los cambios Inna + y K + niveles
Durante el almacenamiento refrigerado, Na + y K + se escapan a través de la membrana de glóbulos rojos rápidamente. Las células pierden K + y la
ganancia de Na +, sin embargo, la pérdida de K + es mayor que la ganancia de Na + durante el almacenamiento.
Temperatura
La temperatura más baja mantiene la tasa de glucólisis en el límite inferior y reduce al mínimo la proliferación de bacterias que podría haber
entrado en la unidad de sangre durante la punción venosa o de la atmósfera. La velocidad de difusión de electrolitos (Na * y K +) a través de
la membrana celular también es menos a la temperatura más baja.
25
medicina transfusional Manua técnico
l Tabla 3.2 cambios bioquímicos en la sangre almacenada
CPD CPDA-1
Características sangre entera Sangre entera Todo rojo Glóbulos

Sangre entera Sangre Células rojos
Días de almacenamiento 0 21 0 35 0 35
% de células viables 100 80 100 79 100 71

(24 horas después de la transfusión)
pH (medido a 37 ° C) 7,20 6,84 7,55 6.98 7.60 6.71
ATP (% del valor inicial) 100 86 100 (± 56.0 100 (± 45

16) 12)
2,3-DPG (% del valor inicial) 100 44 100 <10 100 <10
Plasma K + (mmol / L) 3,9 21 5.10 27.30 4.20 78.5
Plasma Na + (mmol / L) 156 169 155,0 - 111,0
Plasma Hb (mg / L) 17 191 78 461 82 658,0
Soluciones addtive
Los conservantes tradicionales se pusieron en uso cuando la sangre entera fue el producto principal. Con el advenimiento del uso de la terapia
componente de los glóbulos rojos aumentado. Esto dio lugar a varios problemas en su conservación. En la preparación de glóbulos rojos
concentrados 40% de adenina y la glucosa presente en la solución CPDA-1 se elimina con plasma y no hay disminución de la viabilidad de las
células rojas, particularmente en las últimas dos semanas de almacenamiento. concentrados de hematíes relativamente vacío de plasma son
más viscoso y difícil para infundir en situaciones de emergencia. Para superar este problema concentrados de glóbulos rojos se preparan con
hematocritos de menos de 80%. Esto permite plasma adecuada para permanecer para las células rojas alimento y para mejorar las propiedades
de flujo. Esto se traduce en rendimientos más bajos de plasma, afectando plasma fresco congelado y la producción de crioprecipitado.
El uso de soluciones de aditivo permite la recuperación de cantidad máxima de plasma y la preparación de la unidad de glóbulos rojos con un
hematocrito final de aproximadamente 60%. Este nuevo sistema de recogida de sangre tiene una bolsa primaria que contiene un anticoagulante
estándar (CPD) y una bolsa satélite que contiene una solución aditiva. La sangre se recoge en la bolsa primaria que contiene la solución
anticoagulante. Después de que el plasma se elimina de la sangre entera en otra bolsa satélite vacía, se añade la solución de aditivo a los glóbulos
rojos, lo que proporciona nutrientes a las células rojas para la mejora de la viabilidad. Los glóbulos rojos se pueden almacenar durante seis semanas
a 2-6 ° C. La solución de aditivo debe ser añadido a los glóbulos rojos dentro de las 72 horas desde la flebotomía.
Tres soluciones aditivas están disponibles (1) Adsol (AS-1) [Baxter Laboratorios], (2) Nutricel (AS-3) [Medsep
Corporation, anteriormente cortador Biológicos] y Optisol (AS-5) [Terumo Corporation |.
26
Tabla 3.3 Composición de aditivos Soluciones
Como-1 AS-3 AS-5
Citrato de sodio - 588 mg -
fosfato de sodio monobásico - 276 mg -
Ácido cítrico - 42 mg -
Dextrosa 2,20 g l.l0 g 900 mg
adenina 27 mg 30 mg 30 mg
manitol 750 mg 525 mg
Cloruro de sodio 900 mg 410 mg 877 mg
Volumen 100 ml 100 ml 100 ml

anticoagulante bolsa primaria CPD CP2D CPD
Una ventaja importante del sistema de aditivo es aumento en el nivel de ATP, y células rojas viabilidad es mayor, se extiende la vida útil de
los glóbulos rojos a 42 días. Esto facilita un mejor control de inventario de sangre, así como un mayor uso de las donaciones autólogas depositar
previamente. Más de 80% de células rojas sobreviven en circulación de 24 horas después de la transfusión de sangre almacenada durante 42 días.
Las soluciones aditivas no aumentan los niveles de 2,3-DPG. Aditivo solución con manitol no se utilizan habitualmente para el intercambio o la
transfusión neonatal. No hay ninguna restricción en el uso de soluciones de aditivos en cualquier otro tipo de receptores de transfusiones. Además,
el uso de soluciones de aditivo permite la extracción de más plasma rico en plasma / plaquetas para la producción óptima de las plaquetas, los
rendimientos de factor VIII y plasma fresco congelado.
Tabla 3.4 cambios bioquímicos en las células almacenados Aditivo rojas
Como-3! AS-5
Días de almacenamiento 42 42 42
% De células viables 76 (64-83) 83 ± 10 80.0

(24 horas después de la transfusión) pH
(medido a 37 ° C) 6.6 6.5 6.5
2,3, DPG (% del nivel inicial) <5,0 <10.0 <5,0

ATP (% del nivel inicial) 60.0 58.0 68.5
Plasma K + (mmol / L) 50 N/A 45.6

Plasma Na + (mmol / L) 117 121 N/A
% de hemólisis 0.5 0.7 0.6
La heparina
La heparina impide la coagulación mediante la inactivación de la actividad profiláctica de la trombina después de complejación con AT 111 y la
trombina.
1.000 UI de heparina es igual a 10 mg de heparina pero IU y mg no son estrictamente intercambiables ya que las preparaciones
comerciales de heparina varían en composición.
Dosis de heparina para la anticoagulación es 0,5-2,0 UI / ml. de, por ejemplo sangre de aproximadamente 500 UI de heparina por 500
ml de sangre.
27
l
La sangre heparinizada se debe utilizar con en 24 horas. Se usó la sangre heparinizada antes en la cirugía a corazón abierto,
pero ahora no se suele utilizar como bombas extracorpóreas están generalmente preparados con cristaloides y no con sangre.
El efecto de la heparina se puede neutralizar con sulfato de protamina. 1 mg de sulfato de protamina neutraliza 1 mg de heparina
por ejemplo, para neutralizar 5000 unidades de heparina (50 mg), se necesitarán 5 ml de solución al 1% de sulfato de protamina.
rejuvenecer Soluciones
Rejuvenezca soluciones que tienen fosfato, inosina, glucosa, piruvato y adenina aumentan los niveles de 2,3-DPG y ATP en los glóbulos rojos
almacenados. Estas soluciones se pueden añadir en cualquier momento entre 3 días posteriores a la recogida y 3 días después de la expiración de
los glóbulos rojos. La solución se añadió directamente a las células rojas, mezclaron e incubaron a 37 ° C durante una hora.
Los glóbulos rojos rejuvenecidas se lavan bien con solución salina (2 litros de no tamponada 0,9% de NaCl) y se pueden mantener a 2-6 °
C, sin embargo, debe ser transfundido con en 24 horas después del lavado o que se glycerolized para mantener las células rojas en estado
congelado para mejorar la calidad de los glóbulos rojos.
solución de rejuvenecimiento células de la sangre roja, 50 ml vial estéril (Rejuvesol, citosol Laboratories, Braintree, MA) está
disponible comercialmente. El proceso de rejuvenecimiento es caro y lleva mucho tiempo y es poco utilizado.
Bolsas de plástico
Muchos otros factores pueden limitar la viabilidad de glóbulos rojos transfundidos. Uno de los factores es también el material plástico que se
utiliza para las bolsas. El material plástico debe ser suficientemente permeable para CO2 con el fin de mantener el pH más alto durante el
almacenamiento. Actualmente la sangre se almacena en bolsas de plástico hechas de cloruro de polivinilo (PVC) con plastificante, di- (2-etilhexil)
ftalato (DEHP). Se sabe que DEHP lixivia de plástico en plasma y la membrana celular durante el almacenamiento y puede ser perjudicial para el
paciente. La acumulación de una cantidad excesiva de ácido debido a glycosis incluso a baja temperatura de almacenamiento es también un problema
importante en la preservación de líquido de las células rojas. Por lo tanto existe la necesidad de desarrollar mejores bolsas de sangre de plástico, así
como para su conservación.
Congelación de células RED
Smith en 1950 informó que el glicerol podría evitar lesiones congelación en las células rojas humanas y que las células rojas, mezcladas con
glicerol podrían ser congelados sin daño.
Efecto de la congelación
Se cree que la congelación de daños glóbulos rojos debido a la formación de hielo intracelular y, probablemente, en cierta medida debido a la
hipertonicidad. Si glicerol (agente crioprotector) se añadió a las células que pueden ser congeladas y descongeladas sin daño (Polge et al. 1949). El
efecto de la glicerina es probablemente debido al hecho de que limita la formación de hielo y proporciona fase líquida en la que se distribuyen sales;
como enfriamiento procede hipertonicidad excesiva se evita también (Lovelock, 1953). El glicerol que impregna las células rojas con bastante
rapidez durante la congelación es más eficaz en la protección de las células rojas humanas. glóbulos rojos congelados se utilizan principalmente
para transfusión autóloga y el almacenamiento de sangre grupo raro. Para congelar las células rojas se añade un agente crioprotector a los
glóbulos rojos que son menos de 6 días de edad. El glicerol se usa más comúnmente y se añade a las células rojas lentamente con agitación
vigorosa por lo que el glicerol penetra en las células rojas. Las células son rápidamente congelado y almacenado en un congelador. La temperatura
de congelación y de almacenamiento depende de la concentración de glicerol. Dos concentraciones se utilizan para congelar células rojas, un
glicerol alta concentración | 40% de peso en volumen (w / v) y una baja
28
concentración de glicerol [peso 20% en volumen (w / v)] en la concentración final de crioconservante. La mayoría de los bancos de sangre
utilizan la técnica de alta glicerol.
Tabla 3.5 ventajas de la alta concentración de glicerol TECNICA SOBRE baja concentración Ventajas GLYCEROL
tehnique
alta glicerol El glicerol baja
temperatura de congelación inicial - 80 ° C - 196 ° C
La necesidad de controlar la congelación No Sí

Tipo de congelador Mecánico Nitrógeno líquido
La temperatura máxima de almacenamiento - 65 ° C - 120 ° C
requisito de envío Hielo seco Nitrógeno líquido
Las células congeladas se desglicerolizados antes de la transfusión. La eliminación del glicerol se consigue mediante la sustitución
sistemática el crioprotector con concentraciones decrecientes de solución salina. Las células se lavan con 12% de solución salina, seguido de
1,6% de solución salina, con un lavado final con 0,2% de dextrosa en solución salina normal. La vida útil de los glóbulos rojos descongeladas
almacenados a 2-6 ° C es de 24 horas. Comercialmente disponible Sistema Celular de lavado fabricado por varias compañías se puede
utilizar.
Generalmente las células se glycerolized y se congelaron con en 6 días de recogida de sangre en CPD o CPDA-1. Los glóbulos rojos
almacenados en soluciones aditivas se pueden congelar hasta por 42 días.
Los glóbulos rojos congelados se pueden almacenar durante 10 años. El período de desactualización de los glóbulos rojos descongeladas
almacenados a 2-6 ° C es de 24 horas.
Método de congelación y conservación de células rojas en estado congelado: 1 células rojas Glycerolized que tienen concentración final de 40%
W / V de glicerol pueden ser congelados en
- 80 ° C durante un período de 30 min usando refrigeración mecánica, a continuación, puede conservarse a -60 a
- 65 ° C durante 10 años. 2 células rojas Glycerolized que tienen concentración final de 20% W / V de glicerol pueden ser congelados en
- 196 ° C usando nitrógeno líquido durante 2-3 minutos y puede ser conservado en la fase gaseosa de nitrógeno líquido a -120 ° C
durante 3 años.
solución de glicerol de alta (40% de concentración W / V). La solución glycerolizing consta de solución 6,2 M de glicerol que
contiene 57 g de glicerol%, 1,6 gm% Na lactato, 0.03% gm KCl y un total de 25 mEq / 1 de fosfatos monobásicos y disodio
para producir un pH de aproximadamente 6,8 (Meryman et al . 1972)
Antes de glicerolización, sangre entera en solución CPD, fresco o almacenado a 4 ° C durante no más de 3-4 días, se centrifuga a 3000x
g durante 7 min; plasma sobrenadante se expresa en la bolsa satélite y se utiliza para la preparación de componentes o congelado. se añade
un volumen apropiado de solución 6,2 M de glicerol en dos etapas, por ejemplo, 300 ml cuando el peso de los glóbulos rojos empaquetados es
150-230 g. primero se añade 100 ml de solución glycerolizing a las células en la bolsa de recogida con agitación vigorosa. Después de al menos
dos minutos de equilibrado, la solución resto de glicerol y las células parcialmente glycerolized se transfieren a una bolsa de 850 ml de
poliolefina (bolsa de sangre Hebia). La bolsa se centrifugó, el sobrenadante se expresa y las células rojas se congelan a -80 ° C utilizando un
congelador. A continuación, pueden ser almacenados de -60 a -65 ( 'C.
29
Solución de bajo glicerol (20% W / V cencentration)
La solución glycerolizing consta de 35,0 g de glicerol%, 2,88% de manitol, y cloruro de 0,65 g de sodio.
La sangre entera en CPD se centrifuga a 3000x g durante siete minutos. El plasma se retira y congela. Solución de bajo glicerol igual en
volumen a las células rojas (por ejemplo 250 ml de solución de 250 ml de glóbulos rojos) se añade con agitación vigorosa. Las células rojas de la
sangre glycerolized se transfieren a una bolsa de plástico de poliolefina y se mantienen en recipiente de aluminio que después se coloca en
posición vertical en un baño de nitrógeno líquido a -196 ° C y después se almacenó a -120 ° C en vapor de nitrógeno líquido.
Descongelación y Deglycerolizing
glóbulos rojos congelados se descongelan en un baño de agua a 37 ° C durante aproximadamente 10 min. El glicerol se debe retirar
correctamente a partir de la célula descongelado para evitar hemólisis in vivo y / o in vitro. El entorno intracelular de las células glycerolized
es hipertónico con respecto al plasma y la primera solución utilizada para deglycerolization debe ser también algo hipertónico. Esto permite
que el glicerol para comenzar la difusión de los glóbulos rojos, mientras que el medio intracelular permanece hipertónica. Posteriormente
seguido de lavado con solución progresivamente menos hipertónica y finalmente con solución electrolítica isotónica que contiene glucosa.
contenido de glicerol deben reducirse al 1-2% de lo contrario se hemolizar en contacto con plasma.
El 40% W / V glycerolized glóbulos rojos se diluyen con 150 ml de cloruro de 12 g% de sodio tamponada a aproximadamente pH 7,2
con 0,15% de fosfato disódico y se dejaron equilibrar durante 5 minutos. A continuación, lavar con uno a dos litros de solución% de cloruro de
sodio 1,6 g tamponadas a pH 7,2 con 0,03 g% de fosfato disódico y finalmente con un litro de solución de cloruro de 0,9 g% de sodio que
contiene 0,2 g% de glucosa tamponada con fosfato 0,065 g% disódico a un pH de aproximadamente 6,8 (solución isotónica de glucosa). Las
células lavadas se suspendieron finalmente en solución isotónica de glucosa y listo para la transfusión. La vida útil de la unidad de procesado
es 24h.
El 20% W / V glycerolized glóbulos rojos se diluyen con 500 ml de solución% de cloruro de sodio 3,2 g tamponada a aproximadamente pH
7,2 y después se lavaron con 1-2 litros de solución de cloruro de 0,9 g% de sodio que contienen 0,2 g% de glucosa tamponadas con 0,065 g % de
fosfato disódico a pH 6,8. Las células lavadas se suspendieron finalmente en solución salina isotónica de glucosa y listo para la transfusión.
Periodo de validez de la unidad de procesado es de 24 h.
El lavado puede llevarse a cabo ya sea por lavado de flujo continuo en el procesador de sangre Haemonetic o por lavado de
flujo continuo en el sistema de Elutramatic Fenwal o centrifugación de serie en el procesador de sangre IBM. Los protocolos para cada
instrumento se deben seguir según las indicaciones de los fabricantes.
La consideración clínica
1. células rojas desglicerolizados son comparables en volumen y de Hct a la unidad estándar de glóbulos rojos.
2. células rojas desglicerolizados consisten de glóbulos rojos en la solución de electrolito. Prácticamente todo el plasma,
anti-coagulantes y la mayor parte de los leucocitos y las plaquetas se han eliminado.
3. En la supervivencia y funciones de las células rojas vivo son comparables a las células rojas líquido almacenado dibujadas frescas
porque las curvas de disociación de oxígeno de 2,3-DPG y son normales.
30
Las indicaciones para el uso de glóbulos rojos congelados 1

La congelación de los grupos sanguíneos raros permite el almacenamiento y suministro a largo plazo a nivel regional y nacional. 2 Almacenamiento
de la sangre para los pacientes con anticuerpos contra antígenos de alta frecuencia. 3 Almacenamiento de sangre para autotransfusión,
especialmente en pacientes con grupo sanguíneo poco común. 4
Prevención de la reacción a la transfusión febril no hemolítica en pacientes sensibilizados a leucocitos, plaquetas o proteína de
plasma. 5 Prevención de la sensibilización contra antígenos HLA en potenciales receptores de trasplantes de tejido.
La congelación y descongelación de los glóbulos rojos (células de reactivo)

USO DE ALTA CONCENTRACIÓN GLICÉRIDOS SOLUTIONS Soluciones
requeridos
1. 5% de citrato trisódico (Na 3 C6H 5 0 7)
YO. pesan 100 g de citrato trisódico
II. lugar en matraz aforado de 2 litros
III. medio llenar con agua destilada y mezclar hasta que se disuelven los cristales.
IV. hacer hasta 2 litros con agua destilada y mezclar
2. solución de glicerol al 12%
Disolver 120 ml de glicerol de grado analítico en 880 ml de solución de citrato trisódico 5%
3. solución de glicerol al 60%

Disolver 600 ml de glicerol de grado analítico en 400 ml de solución de citrato trisódico 5%
Procedimiento de congelación:
1 La sangre se recoge en CPDA-1 paquete doble. El paquete se centrifugó a 3000 X g durante 7 min y
se retira el plasma. 2
Se añade 12% de solución de glicerol igual a la mitad del volumen de las células empaquetadas a las células empaquetadas, se mezcló
y se dejó equilibrar a temperatura ambiente durante 10 min. 3 Se añade 60% de solución de glicerol igual a la mitad del volumen de las
células empaquetadas al paquete y
mezcló y se dejó equilibrar durante 10 min. 4 Dispense en etiquetados 10 ml de plástico estéril
/ tubos de vidrio (15x100 mm) 5
Congelar a -40 ° C, mantenerlo en la parte más baja de congelador y cambiar congelador para congelación rápida o lugar en la parte
superior de tanque de nitrógeno líquido, es decir, en fase de vapor durante 5-10 min.
Nota: Los tubos deben ser colocados en una rejilla de metal para la congelación rápida. 6 Cuando
congelado, los tubos se pueden almacenar a -20 ° C.
Procedimiento para la descongelación y deglycerolization: 1 células rojas deshielo en baño de agua a 37 ° C. 2 Preparar 25 cm tiras de diálisis tubo
por inmersión en 0,9% de solución salina. Sellar un extremo por plegado. 3
Transferencia descongelado células rojas para diálisis tubo. Sellar ambos extremos por plegado y la abrazadera con el clip de papel. 4 Suspender
la tubería por medio de clip de papel soportados por un aplicador en un gran vaso de precipitados
teniendo 0.99c solución salina (aproximadamente 2 L).

Nota: Las células en 4 tubos de diálisis se pueden sumergir en el mismo vaso de precipitados para diálisis.
31
5 Dializar durante al menos 1 -2 h a TA o durante la noche a 4 ° C. 6 La transferencia de células a partir de tubo a tubos etiquetados, giro y
lavar las células con 0,9% de solución salina hasta
sobrenadante es claro.
7. Añadir un volumen igual de suero AB a células empaquetadas.
8. lubricantes tapón y se almacenan a 4" C.
PLATELETPRESERVATION
La preservación de las plaquetas viables y funcionales depende de los siguientes factores:
Temperatura
Las plaquetas deben almacenarse a 22-24 ° C (temperatura controlada) con agitación suave continua en la incubadora de plaquetas
y agitador.
pH
pH debe estar por encima de 6,0.
Bolsa de plastico
Mantenimiento del pH y la función de las plaquetas depende de la permeabilidad de la bolsa de almacenamiento de oxígeno y dióxido de
carbono. Las plaquetas almacenadas en bolsas de cloruro de polivinilo (PVC) con plastificante di- (2-etilhexil) ftalato (DEHP) tienen vida útil
de 3 días. Nuevas bolsas de plástico de poliolefina sin plastificante (de Baxter PL 732) y delgado PVC amurallado con tri- (2-etilhexilo)
plastificante trimellate (PDM) [PL de Baxter 1240 y el cortador CLX] mantener el pH y las funciones de hasta aproximadamente 7 días. Sin
embargo, se recomienda almacenar plaquetas en sacos nuevos durante 5 días solamente a partir de la fecha de recogida de la sangre
Las plaquetas agrupados se pueden almacenar durante 4 horas a 22-24 ° C antes de que se transfunden.
FRESCO CONGELADO plasma (FFP)

La vida útil de FFP es de 12 meses a - 18 ° C o inferior. Después de deshielo FFP se puede almacenar a 2-6 ° C durante 12 horas antes de la
transfusión. Si FFP no se puede utilizar con en 1 año o plasma descongelado no se usa dentro de las 12 horas se re-designado como plasma de
donantes individuales que se pueden almacenar más de 4 años a -18 ° C o inferior.
PLASMA donante individual

Período de validez del plasma solo donante es de 5 años a -18 ° C o inferior. plasma descongelado se puede almacenar a 2-6 ° C durante 5
días antes de la transfusión
CRIOPRECIPITADO (Factor VIII)

Croprecipitate se puede almacenar durante 12 meses a -18 ° C o inferior. Thawed crioprecipitado se puede almacenar durante 6 horas a
2-6 ° C y crioprecipitado agrupado mantiene a 2-6 ° C se debe utilizar dentro de las 4 horas
GRANULOCITOS
La vida útil de los granulocitos es de 24 horas a 22-24 ( 1 C. Ellos no necesitan agitación. recuperación transfusión mensaje de granulocitos
en circulación y la migración en loci inflamatorio es mejor si transfundido con en 8 horas de almacenamiento que eso si granulocitos
almacenados durante 24 horas.
32
ENVÍO de productos sanguíneos

La temperatura de la sangre y productos sanguíneos debe ser monitoreado durante el transporte de un lugar a otro. sangre recién
extraída, que no será utilizado para las plaquetas que se preparan, debe ser transportado a una temperatura entre 2-10 ° C.
Unidades de la que las plaquetas deben ser hechos deben ser transportados a temperatura 20-24 ° C.
Transportar células rojas / sangre entera

El transporte de los glóbulos rojos o la sangre completa de un centro a otro requiere que la temperatura de la sangre durante el envío
mantenerse entre 2-10 ° C. se utilizan robustas, portadores bien aisladas con algún tipo de refrigerante. hielo húmedo es un buen refrigerante
para el envío de glóbulos rojos. El hielo se debe poner en la parte superior dentro del recipiente para que el fresco se mueve hacia abajo a
través de la caja de envío. En climas que son extremadamente cálido o si el viaje será largo del envío, se puede colocar hielo en la parte
inferior del contenedor también. El hielo no debe entrar en contacto directo con la sangre en cualquier momento, ya que puede causar
hemólisis de los glóbulos rojos o sangre.
Transportar células / sangre entera rojo con en el hospital La sangre y células rojas deben ser transportados dentro del hospital
en el portador aislado o en cajas aisladas frío si la temperatura ambiente es más de 25 ° C. Instrucciones deben administrarse para
mantener en el refrigerador si hay posibilidad de que las células de sangre / rojo no se transfunden inmediatamente .
Envío de plaquetas
Envío de las plaquetas almacenadas a la instalación de transfusión debe utilizar un recipiente bien aislado, sin hielo, para mantener
la temperatura entre 20-24 ° C.
El envío de componentes congelados

El plasma fresco congelado y crioprecipitado deben ser enviados a -18 ° C o por debajo. El hielo seco se utiliza para mantener el estado congelado.
El hielo seco se debe mantener en la parte inferior y en la parte superior dentro del recipiente bien aislado. Estos productos congelados son frágiles,
aislar el producto por el material de embalaje seco o burbujas de aire de plástico para comprobar la rotura durante el transporte.
Requisitos generales para el almacenamiento de productos sanguíneos

El anticoagulante / soluciones conservantes no son las únicas variables en el mantenimiento de la viabilidad y estabilidad de la sangre y sus
productos. condiciones de almacenamiento físico más adecuado para los productos de la máxima supervivencia también son importantes.
Todos los equipos de almacenamiento, ya sea un frigorífico, un congelador o una cámara ambiental de plaquetas debe tener las siguientes
instalaciones:
• Los refrigeradores para el almacenamiento de las células rojas de la sangre / deberían tener un ventilador para hacer circular aire
para garantizar la adecuada temperatura de 2-4 ° C en todos los compartimentos.
• Refrigeradores, congeladores y plaquetas incubadoras deben tener un sistema para controlar y registrar la temperatura de forma
continua. tablas de registro de la temperatura deben cambiarse con regularidad. También deben tener sistemas de alarma con señales
audibles. Estas instalaciones deben tener una copia de seguridad de la batería.
• Las áreas separadas deben reservarse para el almacenamiento de productos no probados, probados y puestos en cuarentena.
Ningún alimento debe ser almacenada en los refrigeradores y congeladores.
33
Tabla 3.6 los componentes de almacenamiento de sangre Resumen
Producto Descripción Almacenamiento ° C Vencimiento
Sangre total Todos los componentes de la sangre del 2-6 ml CPD - 21 días CPDA-1 -
Glóbulos rojos donante más anticoagulante 2-6 sistema de 35 días Closed -
CPD, CPDA-1 de sangre entera con 200-250 plasma ver sangre entera abiertos del
eliminado; finales VOLUME- 300 ml, de Hct <80% sistema - 24 hr. AS aditivo -
42 días
AS: con la mayoría plasma retirado y 100 ml
aditivo soln. adicional; El volumen final - 350 ml
de Hct 55-65%
Las células rojas - RC modificado por centrifugación la eliminación de 2-6 Sistema cerrado - ver células
Los leucocitos la capa o filtración para eliminar buffy> 70% enteras sangre / rojo abierto del
reducido leucocitos al tiempo que conserva> 70% de RC sistema - 24 horas.
originales
Las células RC lavó con solución salina normal; 2-6 24 hr

rojos lavados
Las células rojas RC congelada con glicerol, congelado a 10 yr 3

Frozen- - 65 (alto glicerol) yr 24 hr
Deglycerol - 120 (bajo glicerol)
desglicerolizados-a 2-6
Las plaquetas > 5,5 x l0 10 en 40-70 ml de plasma 20-24 con 3 o 5 días dependiendo de la
agitación bolsa de almacenamiento de 4
horas después de la puesta en común
Plaquetas, aféresis > 3.0x 10" en aproximadamente 200 ml 20-24 con 5 dias
de plasma agitación
granulocitos Aproximadamente 1 x l0 10 en 200-250 ml de 20-24 sin 24 horas

plasma agitación
FFP 200-250 ml con anticoagulante Congelado -18 o por debajo l yr 12

Thawed 2-6 hr
Plasma 200-250 ml con plasma líquido Congelado -18 o por debajo 5yr 5 días después de la
anticoagulante Thawed 2-6 expiración de sangre entera
crioprecipitado AHF 80-120 unidades de Factor VIII 40-70% de Frozen <-18 Thawed l yr 6
factor de von Willebrand 2-6 Después de hr 4
agrupar hr
INSPECCIÓN DE SANGRE
La sangre debe ser inspeccionado antes de la transferencia de las unidades de una instalación a otra o la emisión para el uso del paciente. La
sangre debe ser inspeccionado para comprobar la posible contaminación bacteriana, que puede producir un color anormal en las células rojas o
plasma. Las unidades son inspeccionadas para la hemólisis, coágulos visibles, o púrpura, marrón y plasma rojo. anormales unidades no deben ser
emitidos y la causa deberían hacerlo
34
ser investigado. Plasma con una tonalidad verde no tiene por que ser rechazada porque esto es causado por la exposición de los pigmentos de
bilirrubina a la luz.
Antes de emitir plasma tanto en la bolsa principal y los segmentos debe inspeccionarse visualmente para la hemólisis o decoloración.
Yercinia enterocolitica, una bacteria, puede crecer a 4 ° C, la PO de la unidad disminuye y se hemolizados la sangre. Esta actividad
metabólica en la unidad no se duplica en los segmentos sellados. Cuando los segmentos de las unidades contaminadas son
cultivadas, que se encuentran para ser estéril, mientras que la sangre de la unidad puede crecer entrocolitica yercinia. Esto provoca
cambio de color en la unidad, pero no el color del segmento.
En caso de la sangre hemolizada el color de la sangre tanto en la bolsa y el tubo se cambia a púrpura.
35
4
Principios de
Inmunohematología
Los conceptos de la inmunología se derivan del estudio de la resistencia a las infecciones. Contribución a la inmunología
proviene tanto de las ciencias básicas (bioquímica, genética, y hematología) y el estudio de las entidades clínicas (alergias,
enfermedades infecciosas, trasplante de órganos, enfermedades de inmunodeficiencia y oncología).
Función del sistema inmune

El sistema inmune desempeña dos funciones importantes en el cuerpo humano. En primer lugar, proporciona el mecanismo inmune que
protege al cuerpo contra sustancias extrañas externas, y segundo, que desempeña un papel importante en la identificación y la destrucción
de células anormales. Estas células anormales pueden ser células malignas, células infectadas con micro-organismo o las células recubiertas
con anticuerpos.
Componentes de las células del sistema inmune y

tejidos del inmune sistema
sistema inmunológico humano consta de una serie de órganos y células que reconocen los antígenos no propios con exactitud y
específicamente. células pluripotenciales, cuyos descendientes, las células madre hematopoyéticas y linfopoyéticas las células madre se
encuentra dentro de la médula ósea, hígado fetal, y saco vitelino del feto, dan lugar a las dos líneas celulares inflamatorias e inmunes.
Off-manantiales de estas células madre, diferenciarse en células rojas de la sangre, plaquetas, leucocitos y células fagocíticas.
37
, Células madre multipotenciales
Las células madre hematopoyéticas células madre linfopoyético
Eritroide plaquetas de granulocitos / monocitos precursor células B de células T

precursor precursor precursoras precursor
Los glóbulos rojos eritrocitos Megakeryocyte de granulocitos monocitos Células B de células T

progenitor progenitor progenitor progenitoras de plaquetas de progenitoras células progenitoras
neutrófilos de monocitos eosinófilos macrofase basófilos de células B de células T Null
NKcell
células del sistema inmune se encuentran en sangre, timo, bazo, hígado, ganglios linfáticos y tejidos.
Cell monocitos macrofase sangre productos de sistema óseo de células madre de médula monocitos, que circulan a los sitios
de inflamación o
migrar a diversos tejidos. Los monocitos en el tejido se diferencian en macrófagos tisulares, y se encuentran en todo el cuerpo,
pero especialmente prominente en los nodos de hígado, bazo y ganglios.
Los diferentes tipos de receptores y antígenos de histocompatibilidad están presentes en la superficie de los macrófagos y que son
importantes en los bancos de sangre.
Un receptor de superficie celular importante en los macrófagos es el receptor para la porción Fc de inmunoglobulina. Las células
recubiertas con anticuerpo se puede unir a los macrófagos cuando la porción Fc de la inmunoglobulina entra en contacto con el receptor
de Fc en macrófagos. De esta manera muchos tipos de células anormales - microbiana plantado, autólogas o células transfundidas se
pueden retirar de la circulación por los macrófagos.
macrófagos tisulares también poseen receptor para el componente C3b del complemento. Las células o microorganismos a la que se adjunta
complemento pueden ser eliminados por los macrófagos fagocíticas. Algunos anticuerpos de grupo sanguíneo son capaces de la activación del
complemento, dando como resultado glóbulos rojos recubiertos del complemento. Estas células son susceptibles a receptor C3b sobre los
macrófagos y que son eliminados por los macrófagos.
Un segundo grupo de proteína de superficie celular que se encuentra en los macrófagos son los de mayor de
histocompatibilidad. Los macrófagos expresan tanto de clase 1 (HLA-A, -B, -C) y la clase 11 (HLA -D, - DR, DQ, -DC) antígenos. 11 Los
antígenos de clase que son importantes para la inmunidad trasplante. Los macrófagos participan en la fagocitosis, la inflamación y la
inmunidad.
LINFOCITOS
Lymhocytes se diferencian en células T, células B y células nulas. Ellos pueden ser similares en apariencia, pero que se pueden
distinguir por la presencia de marcadores de células distintivas.
Linfocitos T (células T)
Los linfocitos T se originan en las células madre linfopoyéticas en la médula ósea. Las células precursoras dejan la médula ósea
y los viajes a la glándula timo donde Devel P y se liberan en la circulación como células T maduras. Aproximadamente 75 a 80in
la sangre son células-T. células T
38
Principios de Immunohcmatology
circular de la sangre a los órganos linfáticos y volver al torrente sanguíneo a través de los conductos linfáticos. Los diferentes tipos de células
T se nombran de acuerdo a sus respectivas funciones: las células T auxiliares, células T, de supresión de células T citotóxicas y otros.
Muchas proteínas en las células T son identificados por anticuerpos monoclonales, y se han clasificado como grupos de (CD)
antígenos de diferenciación. Fuera de estos antígenos, el CD4 y CD8 son significativos porque su detección e identificación es útil en
algunas condiciones clínicas. células CD4 mejorar y promover la acción de otras células inmunes y se llaman células T auxiliares;
células CD8 tienen efectos supresores o citotóxicos y se llaman células T supresoras.
marcadores CD4 reconocen el antígeno junto con un máximo de complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) de clase 11 moléculas.
marcadores CD8 interactúan con MHC de clase 1 moléculas.
La células T auxiliares: supresor de relación de células T en un individuo sano e inmune-competente es aproximadamente 2: 1. En
el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), el virus destruye las células CD4, y su número en la disminución cuerpo y hay una
disminución en la relación CD4: CD8. Las células T participan en la regularización de la respuesta humoral (anticuerpo) y la respuesta
celular.
Linfocitos B (células B)
Los linfocitos B se derivan de células madre linfopoyéticas y se desarrollan en la médula ósea en los seres humanos. Al igual que las células T,
las células B circulan por la sangre a los órganos linfáticos y vuelven al torrente sanguíneo a través de los conductos linfáticos. Alrededor del 15%
de los linfocitos son las células B.
Las células B son las células más importantes del sistema inmune humoral. Las células B son los precursores de las células plasmáticas
productoras de anticuerpos. Células B, al igual que otras células inmunes, existen en una forma de reposo y una forma activada. Si se activan las
células B se someten a un proceso llamado expansión clonal producción de un tipo de anticuerpo y la proliferación de la línea celular particular. Sin
embargo, en la mayoría de los casos, el gatillo para la producción de anticuerpos de células B también requiere la presencia de células T auxiliares.
Estas células helper T- secretan productos químicos (linfocinas), conocidos como factores de crecimiento de células B, que se unen a receptores
específicos de células B e inducen la expansión clonal y la producción de anticuerpos.
Muchas proteínas de la superficie han sido reconocidos en las células B y se agrupan en tres categorías: marcadores de superficie
celular, antígenos de histocompatibilidad principales (CLAS MHC 11), inmunoglobulina de superficie y receptores. Cada célula B expresa
solamente un tipo de inmunoglobulina de superficie y cuando se activa sólo producen un tipo de anticuerpo. Por lo tanto, la immunoglbulin
superficie en células B sirve como el receptor para el antígeno particular a la que reacciona que de células B.
La mayoría de las células B activadas se diferencian en células plasmáticas secretoras de IgM-. Tras la estimulación continua, las células
B con frecuencia cambian la expresión de su cadena pesada, conocida como cambio de isotipo. Esto implica generalmente un interruptor de IgM a
IgG. Esto también resulta en la generación de células B de memoria con inmunoglobulina de superficie IgG y los resultados de respuesta de
anticuerpos secundarios en la producción de anticuerpos IgG.
células nulas
Algunos linfocitos que no llevan marcadores de células T o B se encuentran en la sangre y se denominan células asesinas naturales NK. Estas
células tienen la capacidad de lisar o destruir una amplia variedad de células infectadas y células tumorales sin ningún estímulo antigénico
aparente.
RESPUESTA INMUNE
La respuesta inmune puede ser:
una) respuesta inmune innata (no específica)

segundo) respuesta inmune adaptativa (específica)
39
Inmunidad innata
La inmunidad innata o natural es la primera línea de defensa. La primera línea de este mecanismo de defensa es siempre presente desde
el nacimiento y proteger al individuo de los invasores extraños y no cambia en repetidas exposiciones al mismo antígeno, por lo que se
considera como no específica. Este mecanismo consta de las barreras físicas y bioquímicas que impiden la entrada de agentes
patógenos en el cuerpo.
El exterior del cuerpo humano (piel) y las membranas mucosas son impermeables a la mayoría de las infecciones. defensas bioquímicas que
inhiben o destruyen el crecimiento bacteriano son el ácido láctico y el ácido graso en el sudor, secreciones sebáceas. Muchas secreciones corporales
como lágrimas, las secreciones nasales, y la saliva tienen lisozima (enzima de proteína de suero) tiene la capacidad de destruir la pared celular
bacteriana. defensas bioquímicas también están presentes en otras partes del cuerpo.
segunda línea de defensa del sistema innato es interno. Si un organismo penetra en la superficie epitelial,
leucocitos y células fagocitarias reconocen agentes extraños o no autónomos que los unen, internalizar y destruirlos.
Inmunidad adaptativa
La inmunidad adaptativa tiene la capacidad de especificidad, el reconocimiento, la memoria y la reactividad específica. La capacidad de
reconocer 'auto y' no-yo se establece en la vida fetal, pero la respuesta inmune se desarrollan más tarde después del contacto inicial
con la sustancia extraña. La inmunidad adquirida es específica y el anticuerpo reconoce al antígeno que inicializa su producción. La
inmunidad adquirida tiene memoria, la capacidad de recordar el antígeno y para mejorar el proceso de defensa inmunitaria tras la
exposición sucesiva.
No auto o material extraño inicia los cambios adaptativos que resultan ya sea en la producción de anticuerpos llamado respuesta
humoral o una respuesta mediada por células
La inmunidad celular
Inmunidad mediada por células o la inmunidad celular, se localiza reacción a organismo, patógenos normalmente intracelulares, mediadas por
linfocitos y fagocitos en lugar de por la producción de anticuerpos. Células T y macrófagos juegan importante papel en la inmunidad mediada
por células, ya sea como resultado de la citotoxicidad directa o por medio de la liberación de linfoquinas. Cell citotoxicidad mediada es
importante en la lisis de las células infectadas por virus y el rechazo de las células alo-injerto y tumorales.
Otras células citotóxicas que participan en la respuesta inmune mediada por células son células nulas (NK). Estas células NK son capaces
de atacar a las células diana y los matará.
Inmunidad humoral
La inmunidad humoral está mediada por los anticuerpos producidos por los linfocitos (células B). Anticuerpo tiene la capacidad de
reaccionar con el antígeno específico responsable de su producción.
La producción de anticuerpos consiste en dos tipos de células macrófagos, células B y células T. Mayormente antígenos que estimulan esta
respuesta son antígenos T-dependientes, sin embargo, algunos antígenos, en particular los polisacáridos, activan las células B para producir
anticuerpos independiente de células-T. En anticuerpo general producida por el antígeno T-independiente es IgM ..
Citoquinas producidas por células T activadas son importantes para muchas fases de la respuesta de las células B, y son esenciales
para el cambio de isotipo de IgM a IgG y para la generación de células de memoria.
40
Principios de Inmunohematología
CYTOKINES
Citocinas son polipéptidos que actúan como mediadores biológicos de las células inmunes y tejidos. Citoquinas se dividen en linfocinas, que
son producidas por los linfocitos, monocitos y macrófagos. Las citoquinas modulan la respuesta del huésped a los antígenos mediante la
regulación de crecimiento, la movilidad y la diferenciación de leucocitos.
Una variedad de lymphokins son secretadas por un número de diferentes tipos de células:
linfocinas Actividad
• La interleucina (IL-2) Estimular la proliferación de células T
• Interferon-y Mejora la actividad de los macrófagos citotóxicos
• factor de crecimiento de células B (IL-9) Estimula la división celular
• factor de diferenciación de células B (IL-6) Estimula la diferenciación de células B en células plasmáticas
• La interleucina (IL-3) Estimula la proliferación de células T
• Interleukin -4 diferenciación (IL-4) Promueve de células T y el crecimiento de células B y
• factores estimulantes de colonias (CSF) El crecimiento de diversas líneas celulares
Los pirógenos endógenos
pirógenos endógenos son proteínas de bajo peso molecular que se liberan por diversos leucocitos en particular monocitos,
granulocitos y macrófagos tisulares, Tres pirógenos endógenos han sido reconocidos: interleucina-1 (IL-1), el interferón (INFS) y el
factor de necrosis tumoral (TNFS). Todos estos factores estimulan directamente la síntesis de la prostaglandina en el hipotálamo, el
efecto es elevar el nivel en el que se establece la temperatura del cuerpo. Presumiblemente, en las reacciones febriles debido a los
anticuerpos de leucocitos en el receptor, IL-1 se libera a partir de leucocitos de donantes y causa fiebre.
PRIMARIA Y SECUNDARIA LA RESPUESTA INMUNE
Las respuestas inmunes, que se producen al individuo inmunocompetente se encuentra con un antígeno no propio por
primera vez son respuestas inmunes primarias. Además de la respuesta inmune, la respuesta inmune primaria genera células de
memoria. Estas células de memoria contribuyen a la respuesta inmune en segunda o subsiguiente exposición al mismo antígeno -
la respuesta inmune secundaria o anamnésica
Fig. 4.1 Primaria y respuestas anticuerpo secundario
41
la producción de anticuerpos detectable se produce después de unos pocos días a unos pocos meses después de un primer encuentro
antígeno. Durante este período de latencia, células T y células B respuesta está ocurriendo y se forman las células de memoria. La respuesta
secundaria se hace evidente más rápidamente, con el aumento de nivel de anticuerpos detectable en pocas horas.
clase de anticuerpo: Dos clases de anticuerpos se realizan en la respuesta inmune primaria. Los primeros anticuerpos son IgM.
Con en 2-3 semanas anticuerpos IgM disminución nivel y se forman anticuerpos IgG. Este cambio de isotipo de la producción de
anticuerpos IgM a IgG es causada por lymhokines de células T y las mutaciones del ADN en la división de células B.
En la respuesta inmune secundaria, la celda de memoria responde a la estimulación antigénica posterior, formando anticuerpos
mayoría de IgG. anticuerpos IgM, también forman en el comienzo de la respuesta, rápidamente disminuir a medida que se sustituyen
por antibdies IgG (ver Fig. 4.1)
Los anticuerpos respuesta secundaria tienen una mayor avidez por el antígeno, son producidos por dosis más bajas de antígeno que
los anticuerpos formados durante la respuesta primaria, y por lo general se forman rápidamente en 1-2 días.
hibridomas
La técnica de anticuerpo monoclonal ideado por Kohler y Milsten ha demostrado ser útil en la producción de alto título y anticuerpos específicos.
Los animales de laboratorio, por lo general se inmunizan ratones para la producción de anticuerpo monoclonal. Después de la respuesta inmune
adecuada, las células de bazo de ratón que contienen los linfocitos que secretan anticuerpos se fusionan con células plasmáticas neoplásicas de la
capacidad reproductiva infinita de un ratón (es decir, células de mieloma). Los hibridomas resultantes se criban para el anticuerpo con la
especificidad y la afinidad requerida. Los clones que secretan anticuerpo pueden ser entonces propagadas en cultivo de tejidos o por inoculación
en ratones, en cuyo caso el anticuerpo se recoge como ascitis. La línea clonal produce un único anticuerpo, no hay necesidad de absorción o para
eliminar los anticuerpos heteroespecíficos. Todas las moléculas de anticuerpo producidas por un clon de células de hibridoma son idénticos en
términos de estructura y especificidad del anticuerpo antígeno. Una vez se ha establecido un clon secretora de anticuerpos de las células, el
anticuerpo con las mismas características de especificidad y de reacción estará disponible indefinidamente.
El papel del banquero sangre es predominantemente preocupados con las pruebas dirigidas a la detección de antígenos de
grupo sanguíneo y anticuerpos, sus acciones y su interacción con otro sistema, el sistema de componentes. Como este papel se ha
ampliado, especialmente en la médula ósea y células madre del trasplante, un conocimiento básico de la respuesta inmune en general
es necesario
ANTÍGENOS
Un antígeno es una sustancia, generalmente una proteína compleja o polisacárido en la naturaleza, que cuando se introduce
parenteralmente en un individuo cuyos tejidos no poseen esa sustancia en particular, es capaz de instituir la producción de anticuerpo
específico a sí mismo.
ESSENTIALS de antígenos
Las sustancias deben tener un peso molecular suficientemente alto (más de 40.000-50.000 MW) para actuar como antígenos. Sustancias
por debajo de 40.000 MV se denominan haptenos. Por lo general, no actúan como antígenos y producir ningún anticuerpo a menos
acoplado a una proteína vehículo de un tamaño de aproximadamente más de 10.000 MW
42
En la superficie de los glóbulos rojos son glicoproteínas y glicolípidos hora, que están bajo control genético. Estas sustancias son de peso
molecular suficientemente alto como para actuar como antígenos y se conocen como antígenos de grupo sanguíneo. Los antígenos en las células
rojas pueden estar en, por debajo o que sobresale de la superficie de la membrana de glóbulos rojos. Por lo tanto, en algunos casos, las moléculas
de IgG son capaces de causar la aglutinación de glóbulos rojos si el antígeno correspondiente está encendido o que sobresale de la membrana
celular, pero no pueden aglutinar cuando el antígeno correspondiente está enterrado dentro de la membrana celular.
La especificidad de los antígenos de grupo sanguíneo se ha demostrado que será determinado por la adición secuencial de
residuos de azúcar a una sustancia precursor común como resultado de la acción de los genes. La sustancia precursor, que se
encuentra en o dentro de la membrana de glóbulos rojos, se compone de cuatro moléculas de tres azúcares diferentes, a saber.
D-galactosa (2 moléculas), galactosamina (lmolecule) y N-acetil glucosamina (una molécula). Hay dos tipos de sustancias precursoras
conocidos como Tipo 1 y Tipo 2, que se diferencian en enlace terminal (Ver Figs. 5.2,5.3 y 5.4 en el capítulo sobre el sistema ABO). La
acción del gen causa la producción de una enzima que a su vez hace que la adición de otro azúcar a la sustancia precursora de base,
que determina la especificidad del antígeno. Para más detalles ver el sistema del grupo sanguíneo ABO (Capítulo 5).
los número de sitios de antígeno en las células rojas varía en función de la especificidad. Por lo tanto hay aproximadamente lmillion sitios
de antígeno ABO y sitios de antígeno 25.000 Rh (D) sobre las células rojas. antígenos de células rojas están presentes no sólo en las células rojas
pero algunos también se han detectado en los leucocitos, plaquetas, en los fluidos corporales, saliva, leche, fluidos seminales, plasma (antígenos
Lewis) y en la mayoría de los tejidos del cuerpo. Antígenos de algunas especificidades están confinados enteramente en la membrana de glóbulos
rojos (por ejemplo, antígenos Rh).
Los antígenos de los glóbulos rojos no siempre son constantes durante toda la vida, algunos antígenos están poco desarrollados al nacer (por
ejemplo 1, Lewis). Algunos pueden ser alterados en ciertos estados de enfermedad, por ejemplo, antígeno Adquirida B en A, individuos generalmente
como resultado de la acción de un organismo gram-negativa. antígenos A o B pueden ser debilitados en pacientes con leucemia. Los cambios en
antígenos de grupos sanguíneos también se han observado durante el embarazo (por ejemplo, Lewis).
Grupos Genética de sangre

Los antígenos de grupo sanguíneo son los productos de genes específicos. Cada gen ocupa una posición
específica (locus) en el ADN del cromosoma. El locus particular puede estar ocupada por uno o más diferentes
formas del gen, y estas alternativas son conocidos como alelos. Cuando estos genes alélicos en un par de
cromosomas son idénticos (es decir, el individuo haya heredado el gen de misma característica tanto de los
padres), se dice que el individuo es homocigoto para que el factor o característica, cuando los alelos son
diferentes, se dice que el individuo ser heterocigotos. Un individuo que es homocigótico para un gen particular
tendrá producto antígeno del gen respectivo en dosis doble (homocigoto) y un individuo que es heterocigótico
para un gen tendrá producto antígeno de genes respectivos en dosis única (heterocigotos).
Un gen puede ser un gen dominante; esto se expresa siempre como antígeno producto, independientemente de si se produce en el estado
homocigótico o heterocigótico (por ejemplo, antígenos A, B, M y N). Un gen puede ser gen recesivo; esto puede producir antígeno producto
solamente cuando está en estado homocigótico (por ejemplo, A 2).
Si tanto los genes heredados son dominantes, los productos de ambos genes son detectables y se
43
son llamados co-dominante, genes (por ejemplo M y N; A y B). Ciertos genes de grupos sanguíneos parecen producir ningún producto incluso
cuando está presente en un estado homocigoto; éstos se conocen como genes amorfas o amorfas (por ejemplo O).
Genotipo y fenotipo
El término genotipo se refiere a la suma total de los genes presentes en los cromosomas independientemente de si o no que
producen productos detectables. El genotipo se determina a través de pruebas directa de productos génicos (antígenos) y estudio
de la familia.
El fenotipo términos se refiere a los productos detectables (antígenos) demostrado por medio de pruebas directas solamente.
El concepto de genotipo y fenotipo se explica a continuación
fenotipo Genotipo
A1 A1A1
A1O
\ A2A2
A2O
segundo BB
BO
0 00
K kk
kk
Anticuerpos (inmunoglobulina)
Los anticuerpos pertenecen a un grupo de proteínas conocidas como inmunoglobulinas (Igs) en el plasma / suero. Estos Igs constituyen
aproximadamente el 20% de proteínas totales de suero / plasma. Hay cinco formas diferentes de anticuerpos de grupo sanguíneo (IgM, IgG,
IgA, IgD e IgE). Todos los anticuerpos tienen dos características principales en común.
1. La estructura básica de la molécula

2. La función de la molécula, es decir, la capacidad de combinar específicamente con un antígeno correspondiente.
anticuerpos de grupos sanguíneos IgM, IgG o IgA son significativas en los bancos de sangre y que se tratan en detalle.
La producción de anticuerpos
La introducción de antígeno de glóbulos rojos en la circulación de un individuo (que carece de ese antígeno) puede estimular la
producción de un anticuerpo correspondiente. Esto puede ocurrir como resultado de la terapia de transfusión de sangre o incompatibilidad de
grupo sanguíneo materno-fetal en el embarazo. Estos se llaman
44
anticuerpos incompletos o adquiridas (IgG). Mayormente anticuerpos inmunes son IgG que reacciona mejor a 37 ° C y requieren el uso de
suero de la globulina anti-humano para la detección. anticuerpos inmunes comunes reaccionan con Rh, Kell, Duffy, Kidd y sistema de grupo
sanguíneo Ss.
Ciertos anticuerpos se producen sin estímulo antigénico conocido. Estos son conocidos como anticuerpos completos o naturales
(IgM, IgA). Teóricamente, estos anticuerpos se producen en respuesta a las sustancias en el ambiente que genéticamente son idénticos o
similares a antígenos de células rojas. La ocurrencia frecuente de anticuerpos de origen natural sugiere que sus antígenos se encuentran
ampliamente en la naturaleza - es decir, en animales, bacterias y polen. La mayoría de ellos son IgM aglutininas frías, que reaccionan
mejor a temperatura ambiente o por debajo, y activan los componentes del complemento. anticuerpos de origen natural comunes
reaccionan con los sistemas de grupos sanguíneos ABO, HH, II, Lewis, Mn y P. Las personas generalmente no producen anticuerpos
cuando las células rojas poseen el antígeno correspondiente.
La estructura de las moléculas de inmunoglobulina. (Fig 4.2)
La unidad de inmunoglobulina básico (1 g) se compone de dos cadenas polipeptídicas idénticas pesadas (H) que tienen cada uno de
mayor peso molecular (55,000-75,000 MW) y dos cadenas ligeras polipéptido (L) idénticas cadenas que tienen cada uno de peso molecular más
bajo (22,500 MW).
Las inmunoglobulinas se denominan de

acuerdo a la estructura de las cadenas pesadas (H).
Los cinco tipos de cadenas pesadas se designan
como alfa (LGA), delta (IgD), épsilon (IgE), gamma
(IgG) y mu (1 g). Sólo dos tipos de luz (L) cadenas
Kappa y Lambda se encuentran en todas las clases
de
inmunoglobulinas y dos cadenas ligeras de

cualquier Ig están siendo idéntica kappa o
lambda.
cadenas (H) polipeptídicas pesadas se unen
mediante enlaces covalentes (disulfuro) y enlaces no
covalentes entre sí y a una cadena de par ligeras idénticas
(L), El covalentes son principalmente en la región bisagra.
Fig. 4.2
estructura química básica de La estructura básica de Immuno globulina (Ig)
antibodyMolecule
Cada cadena ligera contiene 220 aminoácidos y cada cadena pesada tiene 440 aminoácidos. Los primeros 110-120 aminoácidos de
ambas cadenas pesadas y ligeras tienen una secuencia variable y forman la región variable, que se considera para determinar la
especificidad del anticuerpo. El resto de las cadenas ligeras y pesadas representan regiones con secuencia de aminoácidos constante.
La cadena pesada tiene una región de bisagra en espiral que da la flexibilidad molécula y es en esta región que enzimas o
acto albúmina.
45
Se cree que los sitios de unión de antígeno que se encuentra en el extremo de las cadenas pesada y ligera de la región variable de la
molécula. Las actividades biológicas distintas de antígeno reacciones de unión son responsabilidad de la parte constante de las cadenas
pesadas.
Funciones de varias partes de las moléculas de LG.
enzima papaína divide la inmunoglobulina en la región bisagra en tres fragmentos. Una cristalizable (Fc) fragmento y dos
fragmentos idénticos (FB). El fragmento Fc se compone de dos mitades de dos cadenas pesadas unidas por enlaces
co-valentes y es responsable de la fijación del complemento y la transferencia placentaria.
Cada fragmento Fb se compone de una cadena ligera y la mitad de una cadena pesada unida por enlaces covalentes disulfuro. Se cree
que los sitios de unión de antígeno que se encuentra en el extremo de las cadenas pesada y ligera de la región variable de la molécula de Ig.
IgG inmunoglobulina
La molécula de IgG consiste en una unidad estructural básica conocida como un monómero, que posee dos cadenas pesadas (cadenas gamma) y
dos cadenas ligeras (kappa o lambda). Ver Fig-4.3. Libre de IgG es por lo general Y- forma pero es capaz de cambiar su forma para combinar con
antígeno o para otras funciones, es decir, la fijación del complemento. El cambio de forma se facilita en la región bisagra, donde las cadenas se
desenrollan, lo que permite una flexibilidad considerable. IgG inmuno globulina puede ser transferido de la madre al feto causando la enfermedad
hemolítica del recién nacido.
inmunoglobulinas IgG son anticuerpos frente a Rh, Kell, Duffy, Kidd y otros antígenos de
sistemas. Estos anticuerpos son detectados por pruebas serológicas en base a sus características,
tales como la reactividad a 37 ° C, la activación del complemento, y la prueba de globulina indirecta.
IgG constituye aproximadamente el 80% de la inmunoglobulina en el suero / plasma y también está

presente en el fluido extravascular.
Hay cuatro subclases de IgG conocidas sobre la base de estructural y morfológica
diferencias. Estos son IgG 1, IgG2, IgG3 e IgG4. IgG1 e IgG3 activan el complemento, pero fuertemente IgG2 e IgG4 débilmente
activa en absoluto. IgG en el plasma tiene vida media de 23 días. Más detalles están más allá del alcance de este libro.
La inmunoglobulina IgM
La gM molécula 1 se compone de cinco unidades estructurales básicas en una disposición

circular conocido como pentámero. Tiene enlaces disulfuro adicionales que unen las
porciones Fc de las cadenas pesadas alternativos con el fin de producir una molécula con la
porción circular central y cinco brazos radiantes (como una araña de cinco patas). ver Fig-
4.4. La molécula típica IgM pentámero tiene 10 sitios de antígeno-anticuerpo, sin embargo,
debido a la restricción estérica, sólo el 5 son funcionales en cualquier momento. A pesar de
esta limitación, IgM son anticuerpos aglutinantes potentes y activar cumplidos. IgM es más
eficaz que la IgG en la activación del complemento.
46
IgM constituye normalmente el 10% de la inmunoglobulina en el suero / plasma, muy pocas de estas moléculas se
difunden en el líquido intersticial. IgM en el plasma tiene vida media de 5 días. IgM, anticuerpos naturales, son en el sistema ABO
y en otros grupos como Lewis, Ii, P y MNS. IgM no atraviesa la placenta humana.
Si ambos anticuerpos IgM e IgG están presentes en cualquier suero, IgM puede interferir con la detección de anticuerpos IgG clínicamente
significativas enmascarando su actividad. IgM puede disociarse a través de la escisión de enlaces covalentes que interconectan las subunidades
por el uso de 2-mercaptoetanol (2-ME) o ditiotreitol (DTT). Este tratamiento destruye tanto de hemólisis y las actividades aglutinantes de
anticuerpos IgM y los anticuerpos IgG pueden ser identificados en una mezcla de anticuerpos IgM e IgG.
La inmunoglobulina (IgA)
IgA suele estar presente como monómero en plasma IgA es la única Ig presente en las secreciones epiteliales. En las secreciones IgA se produce como una
pequeña glicoproteína lo dimmer, dos unidades de IgA están vinculados conocido como pieza secretora o T-componentes, lo que hace IgA más resistente a
la enzima proteolítica. (Ver Fig-4.5). La presencia de IgA en las secreciones se cree que es debido a la producción local en lugar de transporte a partir de
plasma.
IgA no fijar el complemento y no se transporta a través de la placenta. A pesar de IgA

no tiene efecto bactericida, se cree que desempeñan un papel importante en la localización de
ciertos agentes infecciosos.
IgA inmunoglobulina es importante en inmunohematología. Aproximadamente un tercio de anti-A y
anti-B son de clase IgA (de dos tercero son IgM y ocasionalmente IgG). A veces anti-IgA se forman
después de la transfusión de productos derivados del plasma en pacientes que no tienen IgA. La
transfusión de incluso unos pocos mililitros de sangre o de sus productos que tienen IgA puede causar una
reacción anafiláctica en pacientes que tienen anti-IgA.
La inmunoglobulina (IgE)
Las inmunoglobulinas IgE son normalmente monomoric y se encuentran en una concentración muy baja en suero o plasma y tiene el lapso
de vida media más corta. antbodies de IgE en la sangre del paciente pueden reaccionar con la proteína extraña (alérgeno) en productos de sangre
o plasma transfundidos y se libera histamina que causa reacciones alérgicas o alergeno en la sangre del paciente y el anticuerpo IgE en plasma
transfundido también puede reaccionar y causa una reacción alérgica.
No hay anticuerpos de grupo sanguíneo se ha informado que pertenecen a esta clase.
Propiedades principales de inmunoglobulinas en el suero
características IgG IGM IgA
araña Monómero en forma de Y 2 Pentámero de cinco patas de Monómero Yshaped 2

estructura unidades en Dimer araña unidades en Dimer
dimensión Molecular 12.5x3nm 35x4.7nm 12,5 x 3 nm
Cadenas pesadas Gamma (y) Mu (μ) Alfa (a)
Las cadenas ligeras Kappa o lambda Kappa o lambda Kappa o lambda
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Propiedades principales de inmunoglobulinas en el suero (Continuación)
■ Mol.weight. \ 150.000 900.000 160.000

330000 (en dímero)
Coeficiente de 7S 19S 7S 105 S (en dímero)

sedimentación
Cone, en el suero (mg 800-1680 50-190 140-420

/ l00ml)
cruza la placenta Sí No No
el comportamiento serológico Incompleto Completar Completar
Temperatura de reacción 37 ° C. 20 ° C. 37 ° C
comportamiento serológico Después de Inafectado Reducido Inafectado

calentar a 56 ° C durante 3 h
Fijación del complemento Sí Sí No
estímulo antigénico Transfusión o A menudo ocurre -

Usual embarazo naturalmente
secreciones externas No No Sí
Efecto de 2-ME y DTT No afectado inactivada parcialmente inactivada
Valencia (antígeno sitios Bivalente multivalente -

de unión)
Los anticuerpos en los recién nacidos
En circunstancias normales, el feto humano no comienza a sintetizar anticuerpos en un grado significativo hasta después del
nacimiento.
IgM es el único tipo de inmunoglobulina producida por el feto antes y en el momento del nacimiento. Desde IgM no se transfiere a través
de la placenta, todos los anticuerpos de IgM en suero de cordón son de origen fetal. En general, la concentración de IgM en suero de cordón es
de entre 5-10% de la encontrada en el suero de adultos. Varios anticuerpos IgM se pueden encontrar en el suero del cordón, a saber. Anti-I,
anti-A y anti-B. La concentración de IgM comienza a subir dentro de los 2-3 días después del nacimiento, llega a 50% de la del nivel adulto en 2-3
meses y 100% en aproximadamente 9 meses después del nacimiento.
En el nacimiento, la pequeña cantidad de IgG en el suero del cordón es principalmente materna, que es la IgG derivada de la madre por
transferencia placentaria.
IgA no se puede detectar en el suero del cordón. A la edad de 2 años, la cantidad de IgA en el suero alcanza a aproximadamente el
20% de la del nivel adulto.
SISTEMA COMPLEMENTARIO
Las proteínas del sistema del complemento son el componente principal de la respuesta inmune innata humoral. La función
del sistema de complemento es la lisis de las células mediante la interacción con anticuerpos, la mediación de la fagocitosis a
través de la opsonización, y el control de la inflamación.
El sistema del complemento se compone de un grupo de proteínas de suero que circulan en un estado pro-enzima
inactiva y se activan en una secuencia bioquímica muy precisa. Las proteínas en
48
sistema del complemento se dan ya sea designaciones numéricas o de letras. En muchos casos la activación de las proteínas se
asocia con la escisión del componente de proteína. El fragmento mayor producido por el corte de la proteína es responsable de la
continuación de la secuencia de la activación del complemento. El fragmento más pequeño a menudo tiene la función de promover la
respuesta inflamatoria. Estas proteínas pueden ser activados por dos vías principales utilizando mecanismo inmune específica y no
específica que convierten las proenzimas inactivas en enzimas activas. Estas dos formas son:
1) La vía clásica: - complejos antígeno-anticuerpo eritrocitos activan las proteínas del complemento C1-C9 por la
respuesta inmune específica.
2) El camino alternativo: - Las proteínas del complemento son activados por no específica innata,
reacciones inmunes con polisacárido y lipopolisacáridos encontrados en la superficie de muchos, células de
microorganismos tumorales y agregados de IgA y IgG4 que no activan el complemento componente C1.
Secuencia de reacciones de la vía clásica

Esta vía es la principal responsable de la lisis de las células rojas de anticuerpos sensibilizados. La activación de la vía clásica
del complemento se inicia por la interacción del antígeno con el anticuerpo de fijación del complemento. No todos los immunoglobulns
(Ig) activan la vía clásica. IgM y subclases de IgG IgGI, IgG2 e IgG3 son las inmunoglobulinas que se unen y activan CI. CI es un
compuesto complejo de proteínas de tres subunidades, Clq, Clr, Cls y, que se mantienen juntos en la presencia de calcio. La
naturaleza de la interacción antígeno-anticuerpo-C1 no está clara, pero se sabe que C1 se une al fragmento Fc de anticuerpo en el
complejo antígeno-anticuerpo mediante un enlace no covalente.
La unión de CI al anticuerpo conduce a la activación de CI. Esta activación provoca la escisión de CI en Clq, Clr, Cls y. El
activado antígeno-anticuerpo-C 1 complejo ahora es capaz de interactuar con el siguiente componente del complemento C4 en
secuencia. C4 se escinde por C1, que actúa como una enzima, y se forman dos fragmentos de escisión de C4 y C4b. C4a flota
libre en el medio circundante, y tiene actividad anafilatóxicos. Las moléculas C4b activados en la superficie celular ataca las
moléculas de proenzima C2. Esta reacción implica la escisión del componente C2 en un pequeño fragmento de libre flotación C2b
y no tiene actividad biológica. Cuanto más grande C2 un fragmento se une a la superficie celular que conduce a la formación de
complejo C4b2a activado unido a la superficie celular. Después de este Clqrs e inmunoglobulina ya no son necesarios, si el
anticuerpo se disocia, el proceso todavía puede continuar. El complejo C4b2a activado se llama C3 convertasa y cleave C3 en
dos fragmentos C3a y C3b. C3a se libera en el medio circundante y tiene anafilotoxinas actividad. C3b se une a la membrana de
los eritrocitos y forma activada complejo C4b2a3b.
El C14b2a3b puede unirse y cleave C5 en dos fragmentos, C5a y C5b. C5a se libera en el medio circundante y
tiene anafilotoxinas actividad. Activado C5b se une a la membrana celular y es el núcleo para la formación de
membrana adjuntar complejo.
Membrana adjuntar complejo unido a la membrana C5b se une C6, y C7 por adsorción. Este complejo se une a la
membrana celular y se une C8, y moléculas C9. En el complejo de ataque de membrana terminal de extremo está formado
C5b6789 que de lisis de la célula.
49
vía clásica
Fig. 4.6
Camino alternativo
Figura-4,6 diagrama esquemático que ilustra la activación secuencial del sistema de complemento a través de las vías clásicas y
alternativas. El complejo complemento activado se indica en la barra encima de las letras y los números. La vía clásica utiliza C1,
C4, C2, la vía alternativa utiliza factores D, B y C3.
Vía alternativa del complemento
La vía alternativa no utilizar los componentes del complemento clásico, C1, C4 y C2 y también no tiene un requisito
absoluto de anticuerpo. Cuatro proteínas participan en la vía alternativa: factor B, el factor D, properdinCfactor P), y C3.
que son análogas a los componentes de la ruta del complemento clásica y que funcionan para formar una enzima C3 de
escisión. Factor D es análogo al CI de la vía clásica. Factor B es análoga a C2 y es importante en la escisión de C3.
Pequeña cantidad de C3b se genera debido continuamente a la escisión hidrolítica espontánea de moléculas de C3.
moléculas C3b unidos a la superficie de las células diana. C3b en combinación con factores B y D forma una enzima
C3bBb que es capaz de escindir C3. Esta enzima activada C3bBb interactuar con C3 de la vía clásica y formar C3Bb3b
que activan
C5 como en la vía clásica y la cascada del complemento continúa. Véase la Fig. 4.6.
50
8
El
antiglobulina
Prueba
Antiglobulina suero (Coombs'Serum) fue descubierto por Coombs et al en 1945. La prueba de antiglobulina se puede utilizar para detectar
glóbulos rojos sensibilizados con aloanticuerpos IgG, autoanticuerpos IgG o componentes del complemento. Sensibilización de los glóbulos rojos
puede ocurrir in vivo o in vitro. El uso de suero AHG para detectar sensibilización de las células rojas in vitro es una técnica en dos etapas
conocido como prueba de antiglobulina indirecta (IAT). La sensibilización de las células rojas in vivo se detecta mediante una técnica etapa de la
prueba de antiglobulina directa (DAT).
ANTICUERPOS requerida en GLOBULINA antihumano SUERO (AHG)

reactivo antiglobulina humana (AHG) se prepara por animales inmunizantes, normalmente conejo, con suero humano entero o con
fracciones específicas de globulinas humanas.
suero humano entero se utiliza para la preparación de poliespecífica (amplio espectro) sueros que contiene anticuerpos
antiglobulina (IgG) y los anticuerpos anti-complemento como C3b, C3d, el producto descomposición de C3; y puede contener también
C4d, romper producto de C4.
Monoclonal de ratón anti-IgG han sido evaluadas para su uso en reactivos AHG y ha sido
101
demostrado que no tienen ninguna ventaja sobre el reactivo anti-IgG preparado en conejos. Sin embargo monoclonales
descomponer productos anti-C3b, anti-C3d y C4d de C3 y C4 complementos son útiles en la producción de reactivo AHG.
Se ha observado que monoclonal anti-C3b y antiC3d en concentraciones apropiadas, mezclado con conejo anti-IgG producir
mejores suero AHG. Para PREPARACIÓN de monoclonal sueros AHG,
ver hibridoma en el capítulo 4 de los Principios de
Inmunohematología.
Anti-IgG
suero AHG debe contener actividad de anticuerpos a los anticuerpos de grupo sanguíneo no aglutinantes. La mayoría de estos son IgG. Rara
vez no aglutinantes IgM puede ser hallado, que fijan el complemento en la membrana de glóbulos rojos y pueden detectarse por la actividad
anti-complemento de poliespecífica AHG. Así presencia de anti-IgM no es necesario en AHG.
anticuerpos IgA nunca se han encontrado sin la presencia de IgG y / o anticuerpos IgM de la misma especificidad. Por lo tanto
tampoco se requiere la presencia de anti-IgA en el reactivo. Por lo tanto antiIgG es el único anticuerpo antiglobulina esencial en
reactivo AHG.
Anti-Complemento
Algunos anticuerpos fijan los componentes del complemento C3b y C3d a la membrana las células de color rojo después de complejos del
anticuerpo con sus correspondientes antígenos. Estos componentes del complemento unidas a la membrana pueden ser detectados por la actividad
anti-complemento en AHG.
Un suero de antiglobulina para el uso en la prueba de antiglobulina directa (DAT) contiene anti-IgG, anti-C3d, y posiblemente
anti-C4d. Un suero de antiglobulina para el uso en la prueba de antiglobulina indirecta (IAT) contiene anticuerpos anti-C3b y C3d.
reactivo de antiglobulina para ser utilizado tanto para DAT y IAT deben contener anti-IgG, anti-C3b, antiC3d y pueden contener
anticuerpos anti-C4d.
FUNDAMENTO DEL ANTIGLOBULINA TEST
glóbulos rojos lavados recubiertas con IgG y / o componentes del complemento C3b o C3d mostrarán aglutinación con amplio
espectro suero AHG. El recubrimiento (sensibilización) de los glóbulos rojos puede ocurrir in vivo o in vitro tras la incubación a 37 ° C con
suero que contiene anticuerpo.
Los anticuerpos incompletos (IgG) se unen a la membrana de glóbulos rojos por la porción Fab de la molécula de inmunoglobulina
(IgG). Las moléculas de IgG unidas a las células rojas son incapaces de cerrar la brecha entre los glóbulos rojos sensibilizados que están
separados unos de otros por la carga negativa en su superficie y los glóbulos rojos sensibilizados no aglutinan. Cuando se añade suero
AHG a las células sensibilizadas lavados, la porción Fab de la molécula de AHG (anti-IgG) reacciona con las porciones Fc de dos
moléculas de IgG adyacentes unidas a células rojas de este modo cerrar la brecha entre los glóbulos rojos sensibilizados y causa la
aglutinación (Fig . 8.1) 102

La prueba de antiglobulina
La aglutinación de la sensibilizado rojo células de anti-humana
ANTI HUMANOS globulina reactivos Reactivos
Contenido
poliespecıfico
Contiene anti-IgG, anti-C3b y anti-C3d [puede contener otro anticuerpo (s)
policlonal de conejo anti-cumplido por ejemplo C4dj.

Contiene policlonal de conejo anti-IgG y mezclar murino monoclonal anti-C3b y
anti-C3d.
Conejo + monoclonal murino
monoclonal murino Contiene monoclonal murino anti-IgG, anti-C3b y ant-C3d.
Monoespecífico anti-IgG
policlonal de conejo Contiene anti-IgG sin actividad anti-complemento

monoclonal IgG sólo contiene monoclonal anti-IgG
Anti-Complemento
policlonal de conejo Contiene anticuerpos contra componentes cumplido Anti- C3d y

anti-C3b designados, no anti-IgG
monoclonal murino anti-C3d Contiene anticuerpos contra C3d
Murino anti-C3b y C3d Contiene anticuerpos contra C3b y C3d
103
Células de control para las pruebas de AHG
Células de control positivo IgG sensibilizado O Rh (D) células positivas
Células de control negativo No sensibilizada O Rh (D) células positivas
sensibilizados O Rh (D) células negativas
Los controles positivos y negativos se ponen junto con la prueba.
El mejor control de la DAT y AT es la adición de IgG sensibilizado O Rh (D) células positivas a cualquier prueba AHG que es no
reactivo. Si hay aglutinación el resultado es válido.
Preparación de O RH (D) POSITIVO SENSIBILIZADAS glóbulos rojos reactivos
necesarios:
1. poliespecífica humano anti-D o IgG humano + IgM monoclonal o IgG monoclonal + IgM anti-D Serum
2. O Rh (D) células positivas
Procedimiento:
1. Seleccionar una dilución de polyspecfic suero anti-D que cubre la O Rh (D) de glóbulos rojos lavados positivos a 37
° C in vitro pero que no se aglutinan ellos. Uno tiene que determinar por experiencia en qué medida el suero anti-D
debe diluirse para dar células sensibilizadas (sin aglutinación).
2. Añadir 3-5% lavó células rojas suspensión de O Rh (D) células positivas igual al volumen de
diluido anti-D en suero.
3. Mix, se incuba a 37 ° C durante 30-45 minutos.
4. Busque aglutinación. Si hay aglutinación, el procedimiento se repite mediante la adopción de suero anti-D más diluida.
5. Si no hay aglutinación, lavar las células tres veces con un gran volumen de solución salina normal manualmente o por lavador de
células automático. Hacer una suspensión al 5% de las células sensibilizadas en solución salina.
6. Añadir 2 gotas de poliespecífica suero AHG a 1 gota de las células rojas 3-5% sensibilizados y lavados.
7. Mix, girar inmediatamente a 1000 rpm durante 1 minuto.
8. Las células deben mostrar aglutinación 2, si no hay aglutinación de todo el procedimiento es

repetido mediante la adopción de suero anti-D menos diluido.
Antiglobulina directa TEST (DAT)
La prueba de antiglobulina directa (DAT) detecta sensibilizados glóbulos rojos con IgG y / o componentes del complemento C3b y C3d
in vivo.
En el revestimiento vivo de células rojas con IgG y / o puede ocurrir en complemento:
(1) enfermedad hemolítica del recién nacido (HDN) (2) ancmias
hemolítica autoinmune (AIHA) (3) ancmias inducida por fármacos
hemolíticas (AIHA) (4) reacción a la transfusión hemolítica (HTR)
104
Procedimiento de DAT
Muestra de sangre - Debe ser lo más fresco posible no más de 24 horas de edad, de lo contrario, la muestra debe tomarse en
EDTA (1,5 mg EDTA para I ml de sangre) para proteger la absorción del complemento.
1. Tome 2-3 gotas de sangre a ensayar en un tubo etiquetado limpio.
2. Lavar las células rojas de 3-4 veces en un gran volumen de solución salina para eliminar las moléculas de globulina libres.
Retire todo el sobrenadante después de cada lavado. Completamente decantar el sobrenadante de lavado final.
3. Añadir 2 gotas de suero AHG poliespecífica en 1 gota de glóbulos rojos sensibilizados lavado o en 1 gota de 3-5% de suspensión de
células sensibilizadas inmediatamente.

4. Mix, Centrifugar a 1000 rpm durante 1 minuto inmediatamente.
5. Agitar suavemente el tubo para desalojar el botón de células y ver por aglutinación, utilizar la ayuda óptica si es necesario. Grabar el
resultado.
6. Agregar I gota de células rojas recubiertas de IgG a una prueba negativa. Mezclar, centrifugar a 1000 rpm durante 1 min.
Inmediatamente busque aglutinación. Si se obtiene un resultado negativo (sin aglutinación) el resultado de la prueba no es válida y
prueba de conjunto debe ser repetido. Si se obtiene la aglutinación, el resultado es válido.
Caracterización de anemias hemolíticas autoinmunes requiere la detección de IgG o C3d o ambos. La detección de C3d sobre la
membrana de glóbulos rojos es importante en la investigación de anemias hemolíticas autoinmunes calientes y fríos. Muchos casos de
cálidos anemias hemolíticas autoinmunes, incluyendo la anemia hemolítica arrastre inducido están asociados con IgG o C3d o ambos.
Mientras que en la anemia hemolítica autoinmune frío, C3d puede ser la única globulina detectable en las células rojas. En la
investigación de anemias hemolíticas autoinmunes, initialy una DCT se realiza con posteriormente suero AHG poliespecífica pruebas
con monoespecífico AHG sueros anti-IgG y anti-C3d se realiza para identificar la globulina de recubrimiento. En la investigación de los
componentes de la prueba del complemento HDN no es necesario ya que las células recién nacidos se sensibilizan con IgG materna.
Tabla-2 Los patrones de reactividad en anemia hemolítica autoinmune

Anti-IgG Anti-C3d tipo de AIHA
+ + WAIHA (67%)
+ - WAIHA (20%)
- + CHD, PCH, WAIHA (13%)

WAIHA - cálido anemia hemolítica autoinmune, enfermedades del corazón - frío enfermedad hemaglutinina, PCH - Paropxysmal criohemoglobinuria.
INDIRECTA prueba de antiglobulina (IAT) Indicaciones
El IAT se hace para determinar la presencia de sensibilización de las células rojas con IgG y / o complementar in vitro en las siguientes
condiciones.
105
1. La prueba de compatibilidad.
2. La detección y la detección de anticuerpos inesperados en suero.
3. La determinación de células rojas fenotipo K, Le una, Fy una Fy segundo, jk una, jk segundo y sub-grupo de Rh etc mediante el uso de sueros conocido.
Procedimiento:
YO. Coloque 2-3 gotas de suero de ensayo en un tubo. El suero debe ser fresco para la detección de componentes del complemento y
complemento anticuerpos de unión, de lo contrario, el suero AB fresco debe añadirse a la misma.
2. Añadir 1 gota de 3-5% de suspensión de (D) células rojas positivos O Rh lavan para el suero en el tubo,
3. Mezclar e incubar a 37 ° C durante 30-40 minutos.

4. Centrifugar a 1000 rpm durante 1 minuto.
5. Examine para la hemólisis y / o aglutinación. Utilizar la ayuda óptica, si es necesario. La aglutinación en esta etapa indica la
presencia de solución salina anticuerpos (completos).
6. Si no se observa aglutinación, lavar las células 3-4 veces en el gran volumen de solución salina. Decantar el sobrenadante
en cada lavado lo más completamente posible.
7. Añadir 2 gotas de suero GAH a las células.

8. Mezclar y centrifugar a 1.000 rpm durante 1 minuto inmediatamente.
9. Agitar suavemente el tubo para desalojar el botón y examinar para la aglutinación, usando ayuda óptica. Grabar el resultado.
10. Añadir 1 gota de células rojas recubiertas de IgG a cualquier prueba que es negativo. Mezclar y centrifugar a
1000 rpm durante 1 minuto. Busque aglutinación. Si no hay aglutinación, el resultado de la prueba no es válida y
todo se repite la prueba. Si se obtiene de aglutinación, el resultado es válido.
I1. control automático debe mantenerse con IAT.

Para la detección de antígenos LEWIS, Kell, Duffy, Kidd, etc.
1. Tome conocido suero reactivo correspondiente al antígeno como en el paso (1) en lugar de suero de ensayo.
2. Añadir 1 gota de 3-5% de suspensión de células de ensayo se lavaron como en la etapa (2) en lugar de ORh (D) células
positivas.
3. Siga todos los pasos (3-10) como en el TAI.
Albúmina bovina (22%) - IAT Un método
Stage - Procedimiento método aditivo:
1. Dos gotas de albúmina 22,5% se añaden en la etapa (2) de solución salina-IAT
2. Mezclar e incubar durante 20-30 minutos a 37 ° C
3. Seguir adelante como en el procedimiento de solución salina-IAT.
106
Procedimiento
ENZIMA-IAT
Mayormente un método escenario con solución de papaína de cisteína se utiliza en Enzyme-IAT
1. Añadir dejo caer de solución de papaína cisteína en el paso (2) de solución salina-IAT
2. Incubar durante 20-30 minutos a 37 ° C
3. Seguir adelante como en el procedimiento -IAT solución salina.
BAJA fuerza iónica de la solución (LISS) - Procedimiento IAT
1. Los glóbulos rojos se lavan dos veces en solución salina normal y una vez en LISS. Hacer suspensión celular de 2% en LISS
2. Tomar un volumen igual de suero y suspensión celular 2% en LISS
3. Incubar a 37 ° C enemigo 10-15 minutos
4. Proseguir como en el paso 4 en solución salina-IAT
Para la preparación de cisteína papaína y solución de baja fuerza iónica (LISS) véase el capítulo 21 sobre la preparación de soluciones y
métodos especiales.
Factores que afectan la sensibilidad de IAT
1. Ratio de suero a células
El aumento de la relación de suero a las células rojas aumenta el grado de recubrimiento de anticuerpo en las células rojas de esta manera la
sensibilidad de la prueba es mayor. Una proporción comúnmente utilizado es 2 gotas de suero a 1 gota de 3-5% de suspensión de células rojas. Un
volumen igual de suero y 2-3% de suspensión de glóbulos rojos en LISS debe ser utilizado.
2. medio de suspensión
La sensibilidad de IAT puede aumentarse con la adición de solución de albúmina o enzima bovina 22% o LISS. La albúmina y las enzimas
permite a las células recubiertas de anticuerpo a aproximarse entre sí y de aglutinación es mejor. Solución baja fuerza iónica (LISS)
mejora la absorción de anticuerpos y la disminución en el tiempo de incubación.
Sensibilidad de IAT se incrementa si la albúmina se incorpora en el medio de reacción. La mezcla de reacción se compone de 2
gota de suero, 2 gotas de albúmina bovina 22% y 1 gota de glóbulos rojos 3-5%. Se muestra la misma sensibilidad a los 30 minutos de
incubación como una prueba de solución salina 60 minutos. El uso de albúmina no parece ofrecer ninguna ventaja sobre la técnica de
LISS y no aumentan el costo de la prueba.
soluciones de fuerza iónica baja potenciar la captación de anticuerpos y el tiempo de incubación se reduce a 10-15 minutos. La
mezcla de reacción consta de 2 gotas de suero y 2 gotas de suspensión celular 3% en LISS. Si el suero a la proporción de células que
se aumenta la fuerza iónica de la mezcla se aumenta, lo que lleva
a una disminución en la sensibilidad.
Para más detalles, véase el capítulo 21 sobre la preparación de soluciones y métodos especiales.
3. Temperatura
La velocidad de reacción de la mayoría de los anticuerpos IgG y la activación del complemento es óptima a 37 ° C. Así que esta es la
temperatura de incubación habitual de IAT.
107
4. Tiempo de incubación
El tiempo de incubación habitual de células suspendidas en solución salina es de 30-60 minutos en IAT. La mayoría de los anticuerpos significativos
clínicos pueden ser detectados después de 30 minutos de incubación. Si la técnica de LISS se utiliza tiempo de incubación es de 10-15 minutos.
5. Lavado de células
Los glóbulos rojos tienen que ser solución salina-lavado al menos 3 veces antes de la adición de reactivo de AHG. El lavado de las células elimina
globulina de suero no unido libre. lavado inadecuada e impropia puede resultar en reacción falsa negativa debido a la neutralización del suero AHG
por globulina no unido residual. El lavado debe ser ininterrumpida y realizado en tan corto tiempo como sea posible para minimizar la elución de los
anticuerpos de baja afinidad. El botón de células debe ser completamente re-suspendido en solución salina adecuada. Todo solución salina debe
ser desechada después del lavado final como solución salina residual puede diluir el suero AHG y disminuir la sensibilidad de la prueba. El lavado
puede ser realizado por lavador de células automatizado.
6. Además de Antihunan globulina Reactivo

reactivo AHG debe ser añadido a las células rojas inmediatamente después de lavar para minimizar la posibilidad de la elución de los anticuerpos
de las células y, posteriormente neutralizando el suero AHG.

Fuentes de errores
Fuentes de resultados falsos negativos en las pruebas AHG:
1. lavado insuficiente o inadecuado de células
2. suero AHG puede ser no reactivo debido a un almacenamiento inadecuado
3. suero AHG no añadió
4. condiciones de incubación inadecuadas en IAT
5. suspensión celular ya sea demasiado débil o fuerte
6. bajo centrifugación
7. técnica de resultado de lectura pobre.
Fuentes de resultados falsos positivos en las pruebas AHG:
1. muestra de sangre inadecuado (refrigerado o coagulada) pueden causar fijación de complemento a las células rojas en vitro
2. La contaminación bacteriana de células
3. Las células aglutinadas en solución salina utilizados para IAT
4. Saline almacenado en botella de vidrio puede contener sílice coloidal
5. Saline almacenada en recipiente de plástico por un largo período puede tener disminución del pH
6. cristalería sucias
7. Durante la centrifugación
8. Anticuerpos contaminantes en el suero AHG.

GEL DE VIDRIO Y MÉTODO microperlas
Gel y vidrio microperlas Métodos véase el capítulo sobre la preparación de soluciones y métodos especiales.
108
9
La detección e
identificación de
anticuerpos
El propósito de la revisión anticuerpo es para detectar anticuerpos de células rojas otros de lo esperado anti-A y anti-B. Estos se
denominan anticuerpos 'inesperada'. Sólo 0,3 a 2,0% de la población en general tienen anticuerpos inesperados y la incidencia es mayor en
las mujeres debido a la embarazo. Estos anticuerpos inesperados son generalmente allo (dirigido contra un antígeno de RBC que falta en
los glóbulos rojos del productor de anticuerpos), pero puede ser auto (dirigido contra un antígeno en los glóbulos rojos del productor de
anticuerpos). Además, estos alo- inesperado y auto-anticuerpos se pueden subclasificar adicionalmente por su temperatura de reactividad
en reactivo fría o caliente. Los aloanticuerpos inesperados son generalmente células rojas inmune y formado por la exposición a las células
rojos debido a la transfusión de sangre o el embarazo.
anticuerpos inesperados se puede sospechar / detectados durante:
anticuerpo inesperada generalmente se sospecha durante las pruebas serológicas de rutina:
1. En la celda ABO y la agrupación de suero.
2. En la detección de anticuerpos
3. Positivo de control automático
4. DAT positivo
5. En los principales de coincidencia de cruz
109
Efectos de anticuerpos inesperados clínicamente significativos:
1. Acorta la supervivencia de los glóbulos rojos transfundidos
2. reacción a la transfusión hemolítica (HTR)
3. enfermedad hemolítica del recién nacido (HDN)
detección adecuada y la identificación de anticuerpos es importante para:
1. La selección de la sangre adecuada para la transfusión
2. En la investigación de las anemias hemolíticas
3. En la investigación de HDN
4. reacción a la transfusión
5. cambios serológicos en período prenatal

Panel de glóbulos rojos para la detección de anticuerpos
pruebas de detección de anticuerpos implican probar sueros de donantes y de los pacientes contra 2-3 glóbulos rojos reactivos
llamadas células de detección. Grupo O glóbulos rojos se utilizan para que natural esperado anti-A y anti-B no pueden interferir. Dos grupo
especialmente seleccionado OR 1 R 1 y OR 2 R 2 se utilizan células rojas. Estas células deben llevar los antígenos más comúnmente encontrados y
clínicamente significativos de Rh, Kell. Duffy, Kidd, MNSs, P y Lewis (y Lutheran si es posible) sistemas de grupos sanguíneos. Muchos
anticuerpos pueden ser detectados más fácilmente si los antígenos son homocigotos en los glóbulos rojos, en particular de grupos comunes.
Tabla 9.1 Panel típico de cribado células
DonorGeno rh. MNSs PAG Kell Duffy Ametralladora Kidd luterano
Sin tipo C c DE e MNS s Pi KK el año fiscal una el año mi

fiscal yo mi segundoJK una JK una
una segundo LU una LU segundo
1 R1 R1 + - + - + + + -+ + + + + - -+ -+ -+
2 R2 R2 - + ++ - + - +- + -+ + + + - + - -+
Para mantener la resistencia óptima del antígeno, las dos células rojas o J R J y OR ^, se debe utilizar por separado (en
combinación con cada otro) y no se agrupan. Esto aumentará la probabilidad de detectar los anticuerpos débiles.
paneles de células están disponibles comercialmente en los países desarrollados, sin embargo, también se pueden preparar por el
laboratorio individual. La institución que prefieren prepararse su propio panel, debe determinar el fenotipo completo de los individuos en el personal
y los sangrados regularmente, o congelar las células rojas de grandes donaciones de estos individuos en glicerol. Para la congelación de células
rojas en glicerol véase el capítulo sobre 'Conservación y almacenamiento de sangre.'.
Si el panel de células de detección no está disponible células reunidas frescas de sangre 2-3 grupo O pueden ser utilizados. El segundo
supuesto es mucho menos deseable que la primera y debe tomarse si panel de células de detección no está disponible. 110
La detección e identificación de anticuerpos
MÉTODOS DE DETECCIÓN DE ANTICUERPOS PARA
Las técnicas utilizadas comúnmente son:
1. prueba de solución salina a temperatura ambiente durante IgM
2. método albúmina para IgG
3. método Enzyme - cisteína papaína, o enzimas células pretratadas para IgG
4. IAT para IgG y los anticuerpos anti-complemento
Para los detalles de las técnicas 1,2,3 ver capítulo sobre 'Preparación de soluciones y métodos' y para IAT ver capítulo sobre 'antihumano
de prueba Globulina.' En prueba de detección si se detecta el anticuerpo debe ser identificado.
IDENTIFICACIÓN DE ANTICUERPOS
Antes de comenzar la identificación de anticuerpos, es útil a revisión:
1. Historial médico - diagnóstico
2. Antecedentes de transfusión
3. Antecedentes de embarazo
4. La terapia con medicamentos (incluyendo Rh inmunoglobulina)
5. Revisión de los resultados de pruebas anteriores
Las pruebas preliminares de repetición
1. célula ABO y agrupación de suero
2. Si el paciente es un grupo A, realizar una subtipificación utilizando anti-A, (lectina)
3. Realizar Rh (D) escribiendo
4. DAT para IgG y los anticuerpos anti-complemento
REQUISITOS DE LA MUESTRA
Cualquiera de suero o plasma se pueden utilizar para la identificación de anticuerpos pero se utiliza sobre todo suero. El plasma no es adecuado
para la detección de la activación del complemento. A 10 ml de sangre completa en tubo liso por lo general contienen suero suficiente para la
identificación de anticuerpos.
Cuando se estudian las células rojas autólogas, el uso de células anticoagulada con EDTA evita los problemas asociados con la
absorción in vitro de componentes del complemento por las células rojas.
Selección de panel de células para la identificación de anticuerpos
Estas células del panel están disponibles comercialmente, pero se pueden preparar en el laboratorio individual. Por lo general
son de 8-10 grupos células S de diferentes donantes. Estas células deben carryD,
C, E, C, E, M, N, S, s, Fy una, Fy segundo; jk una, jk segundo; K, k; Lu a. lu segundo; Le una, Le segundo; PAG 1 antígenos, a identifyclinicallysignificant aloanticuerpos. Debe
haber un número suficiente de células ese ausencia, y suficiente rojo
muestras de células que transportan, MO, st de los reactivos.
111
Tabla 9.3 del panel típico de las células para la detección de anticuerpos
rh. MNS PAG Lu Le K Fy jk
No. Cell C C D Ee C w MNS s P1 Lu una Lu segundo Le una Le segundo KK Kp una kp segundo Fy una Fy segundo jk una jk segundo
1 R1 R1 + -+ - + - -+ -+ - -+ -+ + +- + -+ -+
2 R1 R1 + - + - + + + - + + + -+ -+ -+ -+ + + + +
3 R2 R2 -+ + + -- + + + - + -+ -- -+ -+ + - + +
4 Ror -+ + - + - -+ + + + -+ -+ -+ -+ + + + -
r 5 r' + + - - - + - - +w - + - - - + - + - + + -
6 r”r + + - - -+ + + - + + -+ + + - + + + + +
7 r”r -+ -+ + - + + + + + -+ + - + - - + + + + -
8 rr -+ --+ - + + + + + + -+ -- -+ -+ + - -+
9 rr -+ --+ - + + - + - -+ + - -+ + + + + + -
10 rr -+ --+ - + + - +w -+ -+ -+
112
La detección e identificación de anticuerpos
control de autóloga
Es importante saber cómo reacciona un suero con eritrocitos autólogos. Esto ayuda a determinar si alo-anticuerpo,
autoanticuerpos, o ambos están presentes. Serum que sólo reacciona con las células de reactivos generalmente contiene sólo
aloanticuerpos, mientras que la reactividad con tanto reactivo y células rojas autólogas sugiere la presencia de autoanticuerpos, y
aloanticuerpos *. Si el control autólogo es positivo, se debe realizar DAT. En caso de DTA es positivo, técnica de elución se lleva a
cabo, y los estudios de adsorción puede ser necesario establecer si no está enmascarando aloanticuerpos.
Cable de células rojas
Dos células de cordón grupo O uno Rh (D) positivo y uno Rh (D) negativo también pueden ser incluidos. células de cordón tienen i
antígeno y I antígeno es ausente.
Métodos de identificación de anticuerpos
El suero debe ser probado contra el panel de celdas (8-10), las propias células (autocontrol) y dos células de cordón. Tres técnicas
se utilizan comúnmente:
1. prueba de solución salina a temperatura ambiente durante IgM
2. Enzyme (una técnica de etapa) o albúmina (aditivo técnica) para IgG
3. I AT para IgG y los anticuerpos anti-complemento
Para los detalles de las técnicas 1 y 2 en el capítulo sobre la preparación de soluciones y métodos y para 3 Véase el capítulo sobre
antihumano de prueba globulina.
Interpretación de resultados
resultados panel incluir una gama de reacciones positivas y negativas, y ayudar a llegar a una conclusión final. el panel no reactivo
primer lugar de las células se examina y la posibilidad de anticuerpos correspondientes a los antígenos presentes en las células puede
ser excluido y los antígenos correspondientes puede ser tachado. Luego se evalúan las células reactivas con el suero. anticuerpos
concluyentes (es) identificados se confirman por la ausencia de los antígenos presentes en los glóbulos rojos de la muestra de ensayo.
113
Ejemplo 1
rh. MNS; PAG Lu Le K py jk paciente

Las células
panel de
sueros
No Cell C c DE e Cw MNS 8 PI Lu una Lu segundo Le una Le segundo K k Kp una kp segundo fya Fyb Jk' jk segundo JCT
PAP /
SAL
ALB
1 R1 R1+-+- - - - + - + - - + - + + + - + - + - + +3--
2 R1 R1 - + + - + + - + + + - + - + - + + + + + + + +44
-
3 R2 R2 - + + + - - + + + - + - + - - - + + + - + + +44
-
4 Ror - + + + - - - + + + + - + - + - + + + + + - +44
-
5 R'R + + - + - - + - +w - + - - - + + - + + - -
6 R'R + + - + - + + + + + + + + + + - -
7 R'R - + - + + - + + + + + - + + + - + + - + + + + + +3
+31
8 rr - + - - + + + + + + + + - + + + + + + - -
- +
+
9 rr - + - + - + + + - + + - - + + + + - + - -
10 ESO - + - + - + + - +W+ - + - + + - + + - - -
+
Auto - + - + - -
1 cable - -
2 cable
Cell No. 5 elimina C, C, E, M, s, P, Lu segundo, k, Kp segundo, Fy segundo, jk una, dejando D, E, C w, N, S, Lu una, Le una, Le segundo, K, Kp una, Fy una, y Jk segundo.
Cell no. 6 elimina N, Lu una, Le segundo, Fy una, dejando D, E, C w, S, Le una, K, Kp una, JK segundo.
La celda No. 7 elimina E, S, Le una, K, JK segundo dejando D, C w, y Kp a.
Cell No. 10 elimina Kp una dejando D, C w.
Grotesco w puede ser eliminado en base estática y sólo anti-D puede estar presente.
Ejemplo 2
Cell No. 10 elimina Kp una dejando D, C W
Grotesco w puede ser eliminado en forma estática y sólo-D hormigas puedan presentar.
Ejemplo 2
rh. MNS PAG Lu una Lu K Leb Fy jk Las células

panel de
segundo sueros del
paciente
No. Cell C C D E c Cw MNS s PI Lu una Lu segundo Le una Le segundo K k Kp

un Fy Kpun TIC Fy Jk' JkaPAPAL
1 + - + - + - - + - + - - + + + + + - + - + +3- -
2 Rw, R, + - + - + + + - + + + - + + - + + + + + + - - -
3 R1R1 - + + + - - + + + - + - + - - + + + - + + - +42
+
4 ROR - + + + + - - + + + + - + + + - + + + + + - - - -
5 R'R + + - + + - + - - + w++- - - + + - + + - - - -
6 R'R + + - + + - - + - + - + + + + - + + + + + - - - -
+
7 r”r - + - + + - + + + + + + + + - + + + + + + + +3 +31
+1
8 rr - + - + - - + + + + + + - + + - + + - + - +44 -
9 rr - + - - + - - + + + - + + + + - + + + + - + - - -
+
10 rr - + - - + - + + - +w - + - + - + + - + + - - - -
+
O aut - + + + + - - - -
d cor 1 - - -
d cor 2
Cell No. 2 elimina C, D, E C w, M, S, S, P 1, Lu segundo, Le segundo, k, Kp segundo, Fy una, Fy segundo, jk una Lc segundo y dejando c, E, N, Lu una, Le una, K, Kp a.
Cell No. 4 elimina c, N, dejando E, Lu una, Le una, K, y Kp a.

Cell No. 6 elimina Lu una dejando E, Le una, K, Kp una
La celda No. 9 elimina Le una, dejando E, K, y Kp una
Cell No. 10 elimina Kp una dejando E y K Así los
anticuerpos en el suero son E y K
Como prueba adicional, el paciente debe ser escrito para los antígenos a los que se han detectado los anticuerpos. El paciente
debe ser negativo para los antígenos a los correspondientes anticuerpos detectados.
115
Pretranfusion
pruebas de
compatibilidad
El propósito de las pruebas pretranfusion es seleccionar componentes de la sangre que tendrán la supervivencia aceptable cuando son
transfundidos y no causará daño al recepient. Las pruebas de compatibilidad (transfusión previa) se hace para asegurar la terapia de transfusión
segura.
Pruebas de compatibilidad Involucra
• Identificación de muestra de la sangre del receptor.
• Comprobación de los registros anteriores de receptores en caso de que haya antecedentes de transfusión de sangre, si es posible-
• ABO y Rh (D) agrupación del receptor.
• detección de anticuerpos del suero del receptor para los anticuerpos comúnmente encontradas y su identificación, si es
necesario.
• La selección de ABO y Rh en la sangre del donante (D) compatible libre de cualquier anticuerpo irregular y enfermedades
infecciosas que pueden transmitirse a través de su transfusión.
• Pruebas cruzadas de suero del receptor contra células del donante para confirmar la compatibilidad
donorrecipients.
• El etiquetado apropiado de la sangre del donante antes de la emisión.
117
Identificación de la muestra de sangre del Receptor
Las etapas implicadas en la identificación de muestra de sangre del receptor son como sigue:
• muestra de sangre del destinatario correcto debe ser tomado en un tubo de ensayo limpio y seco etiquetados antes
venopunción. Es responsabilidad del médico del paciente para recoger esta muestra de sangre.
• El personal del laboratorio del banco de sangre debe asegurarse de que la muestra de sangre esté adecuadamente etiquetado e
información como del nombre del paciente, la admisión / número de registro, sala y cama número y fecha de recogida son los mismos
en la muestra de sangre como en el formulario de solicitud.
• muestras sin etiqueta o hemolizadas nunca deben aceptarse.
• El formulario de solicitud de sangre debe dar detalles, como el nombre completo del paciente, ingreso en el hospital /
número de registro, edad, sexo, barrio y número de cama, diagnóstico clínico y serológico historia relevante (es decir, en
caso de transfusiones previas o embarazos).
• Se requiere una nueva muestra de sangre si la transfusión anterior se haya dictado más de tres días de nuevo, con el fin de detectar
anticuerpos de anticuerpos que pueden haber sido producidos recientemente.
Comprobación de los registros anteriores del destinatario si es posible
Si el paciente tiene una historia de transfusión de sangre, su / sus registros anteriores de transfusión deben estar
comprobar (si es posible) para:
• ABO y Rh (D) grupo

• Antibody / inesperados
• cualquier problema en pruebas cruzadas
• cualquier reacción a la transfusión
ABO y Rh (D) Agrupación de Beneficiario ABO
Agrupación
Los glóbulos rojos del paciente deben ser probados con anti-A, anti-B, anti-AB y el suero se prueba con células rojas A, B y S. Para las técnicas de
interpretación y ver capítulo sobre ABO de grupos sanguíneos del sistema., Cualquier descrepancy en las pruebas ABO debe ser resuelto antes de la
donación de sangre. Si el problema no se puede resolver y el paciente necesita sangre, los glóbulos rojos grupo 'O' pueden ser emitidos después de un
centro-fósforo.
Rh (D) Agrupación
glóbulos rojos del paciente se ensayaron para Rh antígeno (D) con anti-D. No se recomienda realizar pruebas de rutina para otros antígenos
Rh. No es necesario poner a prueba las células rojas de receptores de D débil (D u ),
porque no hay daños causen si D débil (D u) individuo se da Rh (D) de sangre negativo. Véase el capítulo sobre el sistema Rh.
Detección de anticuerpos en la sangre del destinatario
• El suero del paciente se analiza para detectar anticuerpos irregulares comúnmente encontrados con OR 1 R 1 y OR 2 R 2 células
del panel de cribado que tienen una doble dosis del antígeno correspondiente (homocigoto), ya que reaccionan mejor con los anticuerpos
de ciertos sistemas de grupos sanguíneos en particular Rh. Kell, Duffy y Kidd. Si las células de panel de proyección no están disponibles
tres grupo agrupada células 'O' se puede utilizar para la detección de anticuerpos. Los anticuerpos pruebas de detección se llevan a cabo
utilizando la técnica de solución salina a temperatura ambiente y albúmina / enzima 118

Pretransfusional pruebas de compatibilidad
y métodos indirectos globulina antihumanos a 37 ° C. Para más detalles véase el capítulo sobre el cribado
y la identificación de anticuerpos.
• Si los anticuerpos de detección pruebas muestran que algunos Antibody / es / están presentes, son detectados por un panel de células que
tiene 8 o 10 células del grupo O con como muchos antígenos como sea posible. Si anticuerpo (s) es (son) identificaron, seleccione la sangre
cuyas células rojos carecen del antígeno correspondiente. Para más detalles véase el capítulo sobre detección e identificación de
anticuerpos.
• Si no es posible determinar la especificidad de un anticuerpo irregular, ya sea debido a la falta de un panel de células o
porque no es un requisito de emergencia para la transfusión, el suero del paciente debe ser transversal emparejado con
varias unidades de la misma ABO y Rh ( D) tipo que el paciente para seleccionar la sangre compatible con el anticuerpo no
identificados / anticuerpos.
La selección de Sangre
la sangre del donante debe ser ya procesada para ABO y el grupo Rh (D), proyectado para el anticuerpo / anticuerpos irregulares y para
la enfermedad transfusión transmitida como el VIH 1 y 2, HBs Ag, HCV, pallidem treponema
y formalaria.
Para la selección de sangre segura, los criterios seguidos son:
Sistema ABO
sistema de grupos sanguíneos ABO sigue siendo el más peligroso porque todos los destinatarios tienen anticuerpos anti-A y / o anti-B en
su suero (excepto los del grupo AB) y incompatiblity en el grupo ABO entre el paciente y la sangre del donante causará reacción a la
transfusión hemolítica severa .
Sistema Rh
La (D) antígeno Rh es muy inmunogénica y es importante para evitar la inmunización de pacientes con Rh negativo, en particular cojinete de
niño pacientes de sexo femenino, a causa de la probabilidad de Rh enfermedad hemolítica del recién nacido en la posterior Rh (D) positivos
bebés.
Otros sistemas de grupos sanguíneos
de anticuerpos atípicos (es) de activos a 37 ° C de otros sistemas es (son) serológicamente significativo. En caso de que el paciente tiene anticuerpos
atípicos (s) activo a 37 ° C, la supervivencia del donante los glóbulos rojos no puede ser normal o el paciente puede tener reacciones de transfusión
hemolíticas.
Elección de la sangre en el sistema ABO
• se prefiere el grupo ABO mismo que el de la paciente.
• Si anti-A, en A., o A 2 paciente grupo B es activo a 30 ° C y por encima o muy activo a temperatura ambiente el grupo A 2 la
sangre se selecciona para la transfusión; de lo contrario anti-A, en A 2

o A 2 B grupo de pacientes reactiva a TA no tiene ninguna significación clínica.
• En muy raras ocasiones anticuerpo anti HI (O) puede estar presente en A 1 paciente grupo, que no está inhibida por la sustancia H y es
activa a temperaturas superiores a 30 ° C. En tal caso, A, se selecciona de sangre grupo para transfusión.
• grupo sanguíneo del paciente (Oh) Bombay debe ser administrado sólo sangre Oh.
• A, individuo con adquirido B como antígeno se dan A 1 sangre.

• Si mismo grupo sanguíneo ABO no está disponible, transfundir glóbulos rojos empaquetados de diferente grupo ABO siempre que
sean compatibles. Véase la tabla 10.1
119
Manual Transfusion Medicine Técnica elección de los grupos
sanguíneos alternativo Tabla 10.1
El grupo sanguíneo del paciente Blood alternativa Grupo (Rojo
Primera opción C)
Segundo
UNA O Ninguna
UNA 2 sin anti-A 1 o con anti-A 1 reaccionar O Ninguna
a TA o
UNA 2 con anticuerpos O Ninguna
anti-A, la reacción de
UNA 1 con anti-HI (O) Ninguna Ninguna
segundo 0 Ninguna
AB AoB O
UNA 2 B sin anti-A 1 o con anti-A, AoB 0
reaccionando a RT o
UNA 2 B con anti-A, la UNA 2 o B o

reacción de al
DO
UNA segundo
1 Bwithanti-HI (O) Ninguna Ninguna
• En los pacientes del grupo AB, si la sangre grupo AB no está disponible, el grupo es preferible a la sangre del grupo B A sangre
como en A sangre grupo anti-B es más débil que anti-A en el grupo B. No es aconsejable cambiar entre el Grupo A de sangre B
Grupo o viceversa, cuando más de una unidad se dan como una transfusión continua. Si el paciente ha recibido más de una unidad
de cualquiera de estos dos grupos y se necesita más sangre, lo mejor es utilizar la sangre del grupo O (libre de hemolisinas) o células
rojas.
• Si se ha dado más de una unidad de transfusión de grupo sanguíneo alternativo. La decisión de cambiar de nuevo a la sangre
específico grupo debe basarse en la presencia o ausencia de anticuerpos anti-A o anti-B en la muestra posterior del paciente. Si la
muestra de sangre del paciente recién extraída es compatible con la sangre específico del grupo, la sangre específico del grupo se
puede utilizar.
Elección de la sangre en el sistema Rh
La sangre del mismo grupo Rh (D) se debe utilizar como el de la paciente. Cuando Rh (D) negativo sangre no está disponible, Rh (D)
positivo de sangre puede ser dada a Rh (D) negativo paciente en lugar de con la sangre de retención de un paciente cuya necesidad
es crítico:
Cuando Rh (D) negativo no está disponible, los criterios o prioridades son:
1 se selecciona paciente que ya tiene anticuerpos Rh (IES), que carecen de la sangre antígeno Rh correspondiente (s). 2 Rh (D)
negati cinco mujeres que no han pasado la edad fértil, para evitar la reacción a la transfusión
en el futuro y HDN en posteriores bebé Rh positivo (D), Rh (D) negativo de sangre debe ser administrada. 3
sufrimiento infantil de HDN se les da la transfusión de Rh (D) negativo de sangre.
120
Pretransfusional Pruebas de compatibilidad,
4 En Rh (D) macho negativo o Rh (D) negativo hembra después de la edad fértil: Rh (D) positivo se puede dar en lugar de con el
asimiento para un paciente cuya necesidad es crítica, siempre. (yo) Los anticuerpos anti-Rh (D), nunca se han detectado en el
suero del receptor y no anticuerpo (s) se encuentra en el suero de prueba en el cribado con el panel de glóbulos rojos por AHG
y técnicas enzimáticas. (Ii) La sangre es compatible
WeakD (D u)
• D u sangre del donante se toma como Rh (D) de sangre positivo.
• La débil D (D u) destinatario se trata como una Rh (D) negativo individuo, aunque la transfusión de Rh (D) de sangre
positivo en D u positiva del paciente implica muy poco riesgo de inmunización Rh (D).
Elección de la sangre en el sistema de otro grupo
• Si el anticuerpo irregular (es) de otros sistemas en el suero del paciente son activos a 37 ° C, deben tenerse en cuenta, ya que pueden
provocar una reacción de transfusión hemolítica o la supervivencia de donante células rojas pueden no ser óptima. En tales casos, se
selecciona la sangre apropiado que carece del antígeno correspondiente para la transfusión, por ejemplo K sangre negativo para
paciente con anti-K; y Fy una de sangre negativo para aquellos con anti-Fy una
• Si no es posible identificar la especificidad para un anticuerpo irregular ya sea por la falta de un panel de células o
porque hay una necesidad de transfusión de emergencia, el suero del paciente debe corresponder cruz con varias
unidades de la misma ABO y Rh (D) tipo de sangre que la de la paciente con el fin de seleccionar las unidades
compatibles de sangre.
• En algunos casos, cuando no es posible encontrar unidades compatibles de sangre, los familiares del paciente, especialmente
los hermanos; pueden ser compatibles.
• Si el paciente se sabe que tiene anticuerpos irregulares (es), la transfusión autóloga se puede considerar en caso de
que sea posible.
SELECCIÓN DE SANGRE en la enfermedad Hamolytic condiciones
especiales de New Born (HDN) ABOHDN
En ABO HDN, deben utilizarse grupo O glóbulos rojos del mismo tipo Rh como la de bebé.
RhHDN
• En Rh HDN, Rh (D) negativo de sangre del mismo grupo ABO como el de bebé se utiliza si es el mismo que el de la
madre o si es compatible con la sangre de la madre.
• Cuando el grupo ABO de bebé no es compatible con el grupo ABO de la madre o si la unidad de donante se prepara antes de la
entrega, debe ser O Rh (D) negativo y que debe estar libre de hemolisinas, anti-A y anti-B.
• En caso de que la exanguinotransfusión se requiere más de una vez, la sangre posterior debe ser de la misma ABO y el
tipo de Rh que el utilizado durante la primera transfusión.
121
• Cuando se da la sangre del grupo O a un bebé que es un grupo A, B o AB, deben utilizarse los concentrados de glóbulos rojos. Es una buena
práctica utilizar células empaquetadas se resuspenden en el volumen de un tercio de un plasma AB fresco (o A plasma plasma o B según el
caso).
• La sangre debe ser tan frescos como sea posible y no debe ser más de cinco días de edad, para evitar alto nivel de potasio en el plasma en
la sangre transfundida y para asegurar una larga supervivencia de glóbulos rojos transfundidos en infantil.
COMPATIBILIDAD DE PRUEBA (Cross Match)

Compatibility tests se realizan para asegurarse de que la unidad particular de sangre puede ser transfundido con seguridad a un paciente. sanguíneo
específico, ABO y Rh (D), que el de la paciente se selecciona del grupo normalmente. Sin embargo, en cierta situación, debido a la no disponibilidad de la
sangre específico del grupo, se selecciona de sangre grupo O (glóbulos rojos) para una o paciente B y A o B de sangre para un paciente AB como se explicó
anteriormente.
La prueba de compatibilidad (prueba cruzada) incluye
• Major partido cruz - suero del destinatario es transversal emparejado con células rojas 's donantes para IgM e IgG compatibilidad
anticuerpos.
• suero cruz Minor de match-donantes es transversal emparejado con células rojas de receptores para IgM e IgG compatibilidad
anticuerpos. Si el suero del donante ha sido filtrado para anticuerpos irregulares con OR 1 R 1, y OR 2 R 2 células del panel de selección de
anticuerpos y encontraron negativa, menor de compatibilidad cruzada puede ser evitado.
• Si incompatibilidad no se detecta en pruebas cruzadas entonces, es probable que la sangre del donante transfundida en
paciente sobrevivirá normalmente.
• Dictamen de incompatibilidad indica que la transfusión de sangre tal es potencialmente peligroso y se debe tomar medidas
adicionales para identificar el anticuerpo.

Las pruebas de compatibilidad Las
principales pruebas de compatibilidad

Se realiza tanto para anticuerpos IgM e IgG
Requisito:
1. el suero del receptor.
2. los glóbulos rojos del donante tomadas del tubo conectado a la bolsa.
técnica de solución salina
técnica Saline está diseñado para detectar la compatibilidad de anticuerpo IgM (es) en el suero del paciente contra los antígenos en las células rojas de
donantes.
Método
1. Label 1 tubo para cada muestra donante a ensayar.
2. Ponga 2 gota de suero del paciente en tubo etiquetado.
3. Añadir 1 gota de 2-4% de solución salina suspendida glóbulos rojos de donante
122
4. Mezclar e incubar durante 5-10 min. (Método de centrifugado) o incubar durante 30-60 min (sedimentación
método) a TA.
5. Centrifugar a 1000 rpm durante 1 min. en el método de centrifugado (después de 5-10 minutos de incubación.);
centrifugación es opcional en el método de sedimentación.
6. Leer el resultado, observar por la hemólisis y agglulination.

7. Resultado negativo debe ser confirmada bajo el microscopio.
Interpretación
La aglutinación o hemólisis indica un resultado positivo (incompatible)
Nota: En emergencia técnica de la vuelta es aceptable.
técnica Saline es inadecuada como una prueba de compatibilidad completa debido a que es inadecuado para detectar anticuerpos IgG
clínicamente significativas.
Prueba de compatibilidad para IgG anticuerpo (s) Anti
-Human Globulina Test (IAT)
prueba globulina humanos anti indirecta (IAT) es el procedimiento serológico más importante y ampliamente utilizado en la moderna bancos de sangre
para probar la compatibilidad IgG entre el suero del receptor y las células del donante. La mayoría de los anticuerpos incompletos son IgG y se
detectan mediante la prueba de AHG.

Método:
1. Ponga 2 gotas de suero del paciente en un tubo etiquetado.
2. Añadir 1 gota de 2-4% de células rojas solución salina suspendidos de donante.
3. Incubar durante 30-60 min a 37 ° C
4. Centrifugar a 1000 rpm durante 1 min, comprobar para la hemólisis / aglutinación
5. Si no hay hemólisis / aglutinación, se lavan las células tres veces con solución salina normal.
6. Realizar la prueba de IAT
- Añadir 2 gotas de suero AHG poliespecífica a células lavadas

- Centrifugar a 1000 rpm durante 1 minuto
- Véase, por aglutinación
7. Añadir células rojas recubiertas de IgG a prueba AHG negativo.
8. Centrífuga y comprobar si se produce aglutinación - si no hay una prueba de aglutinación no es válido.
Interpretación
Hemeolysis o aglutinación en cualquier etapa indica incompatibilidad.
Nota: Cross-fósforo se puede hacer por dos tubos técnica para IgM amd IgG por separado como se describe anteriormente o por uno tubos en
los que después se incuba el paso 5 en la técnica de solución salina 'célula donante y el suero del paciente a 37 ° C durante 20-30 minutos y
luego hacer IAT. En la principal-cruz por IgG anticuerpos albúmina o enzima o LISS se puede utilizar con IAT para aumentar la sensibilidad. Para
las técnicas ver capítulo de prueba de antiglobulina.
123
Pruebas de compatibilidad en situaciones de emergencia
• En la solicitud de la sangre clínico puede ser emitido en caso de emergencia después de ABO y Rh (D) escribiendo seguidas por
prueba cruzada por la técnica de tubo de Centrifugación Inmediata para la compatibilidad IgM.
• En casos extremos, donde no hay tiempo para tomar la muestra y para probarlo, O, Rh (D) negativo sangre,
preferiblemente células rojas, se puede dar en la solicitud del clínico.
• unidad de donantes que no ha sido probado o parcialmente probado para la compatibilidad para los anticuerpos IgM e IgG contra el
suero del paciente, debe estar claramente etiquetado 'sin cruzar-fósforo Blood'.
• Es recomendable completar la rutina de compatibilidad cruzada tanto para la compatibilidad IgM y IgG, después de la emisión de la sangre con
prueba de compatibilidad incompleta o sin.
Menor-Cross Match
• Si el suero del donante no ha sido filtrado para anticuerpos irregulares con OR 1 R l y OR 2
células del grupo de selección, con resultados negativos, es recomendable hacer pruebas cruzadas de menor importancia.
• En el suero menor transversal partido del donante se transversal emparejado con células rojas de receptores tanto para IgM e IgG
compatibilidad anticuerpos.
Método
Método es el mismo que el de mayor compatibilidad cruzada excepto en suero menor de compatibilidad cruzada de donante se prueba
contra las células del paciente, tanto para IgM e IgG compatibilidad antibdies.
La transfusión masiva
• Cuando se dan transfusiones masivas, que es cuando el número de unidades transfundidas en un período de 24 horas excede del
destinatario volumen de sangre s, pruebas de compatibilidad se puede reducir a la comprobación de los tipos ABO y Rh (D) de las
unidades transfundidas. Si el paciente ha conocido allo-anticuerpo reactivo a 37 ° C, la sangre debe ser negativo para el antígeno
relevante, tanto como sea posible,
• Después de la situación de emergencia haya sido tratado, si se detectan anticuerpos en la muestra de pre-transfusión, y en caso
es necesario además transfusión se selecciona de sangre compatible.
• unidades de donantes que no han sido probados o se han probado parcialmente contra el suero del paciente, deben estar claramente
etiquetados “sangre emparejado uncross”.
Para más detalles ver la transfusión masiva en el capítulo sobre Tansfusion práctica en la medicina clínica.
PRUEBAS la transfusión de neonatos (en menos de 4 meses de
edad infantiles) Procedimiento - PRE:
• (D) Grupo ABO y Rh grupo de células infantiles debe ser determinado por célula única agrupación.
• AHG prueba directa sobre las células del bebé se lleva a cabo.
• suero materno debe ser examinado para cualquier anticuerpo irregular, si la muestra de sangre de la madre está disponible.
124
• Si la detección de anticuerpos y DAT es negativo en la sangre de la madre, y no hay evidencia de HDN, cruzan -match
sangre de la misma ABO y Rh (D) tipo que el del bebé usando suero de la madre (si ABO compatible y la muestra está
disponible) o suero del bebé. Se trata de excluir la posibilidad de que el anticuerpo incompleto de la madre puede estar
en el suero del bebé en la ausencia del antígeno en las células rojas de la bebé. ese anticuerpo.
• Si la detección de anticuerpos es positivo, el directo AHG es positivo o HDN está presente; la sangre del donante debe coincidir
cruzada contra el suero materno. El suero del neonato también se puede utilizar (si la muestra de sangre de la madre no está
disponible),
• Cuando la sangre del grupo O necesita ser dada a un bebé que es el grupo A y / o B, a continuación, los glóbulos rojos concentrados
de unidades con títulos bajos anti-A o anti-B debe ser utilizado. Es una buena práctica utilizar células empaquetadas se resuspenden
en un tercio del volumen de plasma AB (o A plasma plasma o B según el caso).
Flujo de sangre / componentes para transfusión.
1. informe de compatibilidad cruzada debe ser enviado junto con la sangre que se emitan. El formulario de
informe -match cruz debe incluir:
• número de identificación de la sangre del donante
• grupos Rh (D) ABO donantes y
• Colección y fecha de caducidad del producto sanguíneo.
• nombre e identificación del paciente número etc.
• ABO del paciente y el grupo Rh (D)
• Interpretación de las pruebas con las características determinadas cruzadas
• Fecha y hora de emisión, y
• La identificación de la persona que realiza las pruebas
2. Etiqueta o etiqueta está unido de forma segura a ser unidad de sangre que debe contener:
• número de identificación de la sangre del donante
• ABO del donante y el grupo Rh (D)
• la sangre del donante no reactivo para VIH y anticuerpos del VHC, HB s Ag, VDRL
• nombre e identificación 's Paciente número
• grupos Rh (D) ABO y del paciente
• Interpretación de prueba cruzada
• Recogida y expirry fecha de producto sanguíneo

3. En el momento del flujo de sangre en cuenta lo siguiente:
• Vuelva a verificar la identificación de la sangre del paciente y el donante
• Compruebe la fecha de caducidad de la sangre para evitar la emisión de la sangre hacia fuera de fecha
• Inspeccionar la unidad para asegurarse de que es no tiene color o apariencia anormal
125
CRUZ REGISTROS
Nombre del paciente ................................................ ........................................ Admisión No ......... ..... ..
GRUPO DEL PACIENTE
Agrupación de células suero Agrupación Grupo
Un Un Un Un segundo O AB Rh
(D)
• cribado _______________________________________________________Antibody en el suero del paciente: en solución salina

___________________________________________ en Alb / Enz / AHGS ____________ con OR 1 R 1, O 2 R 2 células o 3 células grupo O
agrupados para IgM y IgG.
• DAT en la celda de paciente si está indicado.
• Control autólogo
PRUEBAS CRUZADAS
hacer Los anticuerpos IgM

Licenciado en Derecho Los anticuerpos IgG Compatible
Nati (YO EN)
Majo mi jor Mi Sí No
ni ma
Observaciones si alguno)_______________________________________________________________________
Firma del tecnólogo
Nota: Un resultado positivo (aglutinación y / o hemólisis) indica incompatibilidad.
126
11
Los efectos adversos de la
transfusión sanguínea
La transfusión de sangre y su producto es, normalmente, de una manera segura y eficaz de corregir defectos hematológicos pero los
efectos adversos no ocurrir durante o después de la transfusión y se les llama comúnmente reacciones de transfusión de sangre. Estos
efectos adversos varían de ser relativamente leves a mortales y algunos de ellos se pueden prevenir, mientras que otros no pueden.
El tiempo entre la sospecha de una reacción a la transfusión y la investigación y la iniciación de un tratamiento adecuado
debe ser tan corto como sea posible. Las enfermeras transfusionist / clínicos en las salas, los funcionarios médicos y los técnicos
en los bancos de sangre deben tener el conocimiento acerca de las reacciones transfusionales y su gestión.
Categorías de reacciones transfusionales
Reacción Aguda (aparición dentro de Retardada (ONSEC en cuestión
<24 horas) de días o meses)
Inmune mediada no hemolítica febril Aloinmunización

hemolítica hemolítica
Alérgico 'Púrpura postransfusional
Anafiláctico TR- injerto contra huésped enfermedad
lesión pulmonar TR-aguda inmunomodulación
127
Categorías de reacciones transfusionales (Continuación): No inmune mediada
Contaminación bacteriana EJÉRCITO DE RESERVA-
Circulatorio sobre carga Hepatitis B &

C
Físico o químico - VIH 1 y 2
daño a los glóbulos rojos Sífilis
La hiperpotasemia Hierro sobre la
malaria
Inmediata Inmune - Las reacciones transfusionales hemolíticas (IHTRs)
IHTRs se producen muy poco después de la transfusión de glóbulos rojos de la sangre total o incompatibles immunologocal a un
destinatario. Los anticuerpos células comúnmente rojos, por ejemplo anti-A, anti-B, anti-Kell, anti Jk una y Fy segundo causar reacciones transfusionales
hemolíticas inmediatas. Estos anticuerpos se unen complemento en la superficie de los glóbulos rojos, causando la lisis de las células rojas.
reacciones de transfusión hemolíticas mediadas inmunes pueden destruir las células rojas por uno de dos mecanismos: (1) la hemólisis
intravascular o (2) la hemólisis extravascular. Tanto en el evento inicial es la unión del anticuerpo del paciente al antígeno en la superficie de los
glóbulos rojos incompatibles transfundidos que forman complejo antígeno-anticuerpo.
En hemólisis intravascular complejo Ag-Ab activar el complemento que hemolysesred células y hemoglobina y el
estroma de glóbulos rojos son liberados en la circulación.
En las reacciones de transfusión hemolítica inmune mediada extravasculares complejo Ag-Ab causa incompleta o
no activación del complemento. Así RBC lisis no ocurre en la circulación intravascular y no hay liberación de hemoglobina y
glóbulos rojos estroma.
Las causas de las reacciones transfusionales inmediata Inmune-hemolítico (IHTRs)
1. los errores materiales
(yo) etiquetado inadecuado o incorrecto de la bolsa de sangre, muestra de sangre del receptor.
(Ii) Confusión en la identidad del paciente en el momento de la recogida de la muestra o en el momento

de la transfusión
(Iii) identificación inadecuada de muestra de sangre del paciente por el técnico banco de sangre
(Iv) Incorrecto sangre emitida
2. Error tecnico
(yo) Error en determinación del grupo sanguíneo y pruebas cruzadas.
(Ii) Incompatibilidad no se detectó en pruebas cruzadas debido al método inadecuado.
(Iii) anticuerpos débiles no son detectados por pruebas de rutina.
(Iv) Destrucción de las células rojas receptores por los anticuerpos de los donantes.
Puede ocurrir cuando la sangre donante tiene anticuerpo (s) contra el antígeno (s) en los receptores. Puede que no sea grave
como anticuerpo donante (s) se diluye en la sangre del paciente. En su mayoría se produce en la transfusión de sangre grupo O al
grupo A, grupo B o receptores AB grupo. Esto por lo general resulta de la utilización indiscriminada de grupo O toda la sangre, que
no ha sido filtrado para determinar los anticuerpos anti-A y el título de anti-B y hemolisinas.
128
Los efectos adversos de Transfttssion Sangre
(V) interpretación errónea de los resultados de las pruebas.
La interacción de anticuerpo con el antígeno en una membrana de glóbulos rojos puede iniciar una secuencia de respuestas neuroendocrinas, la
activación del complemento, los efectos de la coagulación y el efecto de citoquinas, ese

dar lugar a la manifestación clínica de una HTR aguda.
Inmediata con el sistema inmunitario reacciones transfusionales hemolíticas.
Signos y síntomas
Signos y síntomas que pueden ocurrir con las reacciones transfusionales establecidos o inminente incluyen:
• Fiebre> 1 ° C o 2 ° C, con o sin escalofríos
• Escalofríos (rigores), con o sin fiebre

• Dolor en el lugar de infusión, o en el pecho o la espalda (flancos)
• cambios en la presión arterial, por lo general hipotensión
• dificultad respiratoria, incluyendo disnea, taquipnea o hipoxemia
• Exudación desde el sitio línea intravenosa
• En el paciente anestesiado durante la cirugía hay exudación difusa desde el sitio quirúrgico, hypotesion,
hemoglobinuria, rosa o rojo orina puede verse cuando el paciente tiene catéter urinario
• hemoglobinuria
• oliguria
• anuria
• Choque
Inmediato no inmunes mediadas reacciones hemolíticas (IHTRs) Signos y

síntomas
No inmunes mediadas reacciones hemolíticas causan la destrucción de los glóbulos rojos y producen signos y síntomas como aquellas
reacciones de transfusión hemolítica inmune mediada. Ellos deben ser consideradas en el diagnóstico diferencial de las reacciones
transfusionales hemolíticas. reacciones transfusionales hemolíticas no inmunes inmediatos pueden deberse a:
• Sangre infectada con bacterias
• la exposición térmica de glóbulos rojos transfundidos
• Mecánicamente hemolizada glóbulos rojos
• células rojas Químicamente efectúa
• La hiperpotasemia
Bacteriana de la sangre contaminada:
La contaminación bacteriana de la sangre refrigerada es raro ahora porque la sangre se recoge en bolsas de plástico desechables.
reacciones de transfusión debido a la contaminación bacteriana son causadas comúnmente por endotoxinas producidas por las bacterias
capaces de crecer en temperatura fría tales como las especies Pseudomonos. Escherichia coli y Y.enterocolitica. Ellos se atribuyen
comúnmente para plaquetas
transfusión porque las plaquetas se almacenan a
20-24 0 DO.
129
Manual de Medicina de Transfusión técnicas causas:
• La contaminación puede ocurrir en el momento de la flebotomía y por ello es importante limpiar el sitio de la punción venosa
con mucho cuidado y todas las precauciones asépticas debe tomarse en flebotomía.
La unidad mecánicamente hemolizada: Causas
• bomba de rodillo como se utiliza en la cirugía cardíaca
• Infusión bajo presión a través de pequeñas agujas de ánima
• bombas de sangre
Térmicamente hemolíticas Las causas
de la unidad
• Blood enfrió a -3 ° C o se calentó a> 42 ° C puede ser hemoliza.

Las causas de la unidad químicamente
hemolizadas
• solución salina hipotónica o 5% de glucosa puede hemolizan la sangre
• La administración concomitante de sangre y medicamentos a través de un equipo de administración común o incorporación de
fármacos en la bolsa de sangre.
Hiperpotasemia en la transfusión masiva
Después de la transfusión masiva, una carga que amenaza la vida de potasio puede ser liberado en el plasma y causa signos de
hiperpotasemia particularmente arryhthmias.
Los signos y síntomas de productos contaminados o unidades hemolizadas:
Aparecen rápidamente durante la transfusión o dentro de los 30 minutos después de la transfusión. Clínicamente este tipo de reacción se denomina
caliente y caracterizado por:
• Sequedad y enrojecimiento de la piel
• Sever hipotensión
• Fiebre y escalofríos
• Dolor muscular
• vómitos
• Calambres abdominales
• Hemoglbinuria
• Choque
• Insuficiencia renal
• DIC
Medidas preventivas :
En el momento de emisión del cheque sangre evidencia de contaminación, que incluyen hemólisis bruto o cambio en el color de la
sangre, en particular en comparación con el color de la tubería segmentada adjunta o la presencia de materia particulada o coágulos.
130
Los efectos adversos de Transfussion Sangre
En caso de hemólisis de los glóbulos rojos no puede ser cambio de color (púrpura), tanto en la bolsa y los segmentos de tubo
adjuntos.
En caso de contaminación bacteriana puede haber cambio en el color de la sangre en la bolsa y el color de la sangre en el
tubo de la bolsa no se cambia y puede haber coágulos en la sangre.

Gestión de inmediato inmune y no inmune HTR
El tratamiento de HTR depende de la cantidad de sangre incompatible / hemolizada / contaminada transfundida, la
especificidad del anticuerpo infractor, y la gravedad clínica de la reacción.
1. Siempre detener la transfusión y desconecte todo el equipo de infusión de la aguja / catéter.
2. El uso de un nuevo equipo de infusión, mantener la línea intravenosa (IV) abierta con un goteo de solución salina normal.
3. Compruebe la etiqueta de la bolsa de sangre, informe de pruebas cruzadas e identificar al paciente para confirmar que el paciente
recibió la unidad correcta de sangre o componente ..
4. El médico del paciente debe ser informado de inmediato.

5. Notificar al banco de sangre y describir los signos y síntomas.
6. Un post-transfusión muestra fresca de sangre (10 ml de sangre en tubo de ensayo llanura y 2 ml de EDTA), tomado de otro
orden de cosas, debe ser enviada al banco de sangre junto con la bolsa de sangre y de transfusión y reacciones transfusionales
informe.
7. En primer lugar la orina evacuada debe ser enviada por al laboratorio para el análisis de hemoglobina libre
Las investigaciones de laboratorio
1. Comprobar la identidad del paciente, la sangre de los donantes y todos los documentos pertinentes para asegurarse de que no había
ningún error de transcripción.
2. Compara el color de plasma de muestras de sangre pre y post-transfusión del paciente. (yo) Rosa decoloración roja
en la muestra después de la transfusión indica la presencia de libre
la hemoglobina debido a la destrucción de los glóbulos rojos. (Ii) decoloración amarilla o marrón en las muestras del
paciente dibujado 4-10 horas después de la
transfusión indica un aumento de la bilirrubina.
3. Compruebe el color de la bolsa (i) púrpura y de coágulos en la bolsa de sangre (sin cambio de color en los segmentos de tubo
de
la bolsa) puede ser debido a la contaminación bacteriana (ii) El cambio de color tanto en la bolsa y el tubo de la
bolsa puede debido a hemolizada
sangre.
4. Repetir ABO, Rh (D), las pruebas en muestras de sangre antes y después de la transfusión del paciente, y la sangre de la bolsa o
de un segmento de los tubos todavía unido a la unidad para comprobar cualquier error en ABO y Rh (D)
5. Realizar la prueba de antiglobulina directa en la sangre del paciente. (yo) Si DCT es negativo, los glóbulos rojos no se recubren
con anticuerpos IgG y no hay incompatibilidad. (Ii) Si las células incompatibles donantes recubierta con anticuerpo no se destruyen
inmediatamente, la DCT en la muestra de sangre de reacción posterior será positiva.
131
(Iii) Si la muestra de pacientes se extrae sangre varias horas después de la reacción se sospecha, los glóbulos rojos del donante
recubierta con anticuerpo se destruyen y la DCT serán negativos. (Iv) En la reacción no inmunológica DCT será negativo.
6. frotis bacteriológico y la cultura de la sangre del donante se realiza para descartar la contaminación bacteriana.
Interpretación de los hallazgos de laboratorio
1. Si nada anormal se encuentra en las conclusiones anteriores, se indica que no ha habido una reacción hemolítica
aguda.
2. Si cualquier hallazgo es positivo o dudoso o condiciones clínicas del paciente sugieren fuertemente una reacción hemolítica,
las siguientes investigaciones están garantizados: (i) Repita la cruz-partido, las pruebas de pre y post muestra de transfusión
del paciente
contra la muestra de sangre de la bolsa o un segmento de tubo todavía unido a la unidad por una solución salina, enzima /
albúmina e indirectos técnicas de pruebas de antiglobulina. (Ii) detección de anticuerpos en muestras de repetición de transfusión antes
y después de los pacientes y en la sangre
de la bolsa o segmento del tubo todavía unido a la unidad con OR 1 R 1, y OR 2 R 2

cribado de las células por solución salina, enzima y IAT. (Iii) Si se
detecta anticuerpos irregulares en el cribado.
(una) Identificar anticuerpo (s) por el panel de células por solución salina, enzima y IAT. Auto-control y dos células de cordón
(uno ORh (D) positivo, uno ORh (D) negativo) también se incluyen; [Véase el capítulo 9 de selección e identificación de
anticuerpos anti cuerpo (s)] (b)
Identificar el antígeno (s) en las células rojas de donantes correspondientes al anticuerpo implicado (s).
Las pruebas opcionales para la evaluación clínica de los pacientes:
1. bilirrubina no conjugada en suero se prueba en muestras de sangre de transfusión pre y post de los pacientes. Los niveles
máximos de bilirrubina se producen 5 a 7 horas después de la transfusión y desaparecen en 24 horas si la función renal es
normal.
2. Mida haptoglobina en muestras de sangre antes y después de transfusión del receptor. Si
muestra de los receptores de sangre se toma después de 1 -2 días, su valor está disminuida en la muestra de sangre de transfusión
posterior. hemoglobinemia resultados visibles sólo cuando las reservas de haptoglobina se agotan, por lo que no hay ningún punto en la
medición de nivel de haptoglobina. La haptoglobina puede regenerar rápidamente cuando empobrecido, por lo que si las mediciones se
realizan varios días después de la reacción hemolítica, los niveles normales pueden ya sido restaurada.
3. Methemalbumin prueba se realiza en muestras pre y post-transfusión de los destinatarios de Schumm
prueba.
4. Estimación de la hemoglobina libre se hace en la muestra de sangre post-reacción. Si la muestra se toma después de algún tiempo,
el plasma puede ser clara de la hemoglobina y puede que no sea visible. hemoglobina plasma normal es 10-40 mg / litro
En un paciente con hemoiysis asociada a transfusiones para las que se han eliminado las causas tanto inmunes y no
inmunes, la posibilidad podría considerarse que el paciente o el donante tiene un glóbulos rojos intrínseca defecto.
132
Tratamiento
Si el paciente desarrolla una reacción grave con hipotensión, shock y disfunción renal manejo clínico intensivo es necesario
incluso antes de que se investigó la causa de la reacción.
El tratamiento de la hipotensión
0,9% intra-intravenosa solución salina normal, para hidratar riñones
Bajas dosis de dopamina <5 mg / kg / min. producir vasodilution renal selectiva, se evitan otros fármacos vasopresores
Terapia de la insuficiencia renal
El tratamiento debe ser prevenir la hipotensión sistémica y el mantenimiento del flujo sanguíneo cortical renal. se dan - (100 mg, por vía
intravenosa 20) o manitol para mejorar la perfusión cortical renal y redistribución del flujo sanguíneo renal, produciendo diuresis cuando
la hidratación es adecuada dosis bajas a moderadas de furosemida. En adultos, la producción de orina de 100 ml / hora durante 24
horas debe mantenerse.
La terapia de hiperpotasemia
Después de la carga que amenaza la vida hemólisis masiva de potasio puede ser liberado en el plasma. Es importante controlar el nivel de
potasio en el plasma y debe ser tratada con prontitud. La hipercalemia es uno de la indicación para la diálisis después de una reacción de
transfusión masiva hemolítica.
La terapia de coagulación diseminada lntravascular: Véase el capítulo 16 sobre Transfution práctica de la medicina clínica.
La terapia para la Gestión de la contaminación

bacteriana
Como las reacciones son potencialmente fatal, que deben ser reconocidas y tratadas de inmediato si se sospecha una transfusión contaminada
bacteriana. No hay que esperar a que las pruebas de laboratorio confirmatorias.
Inicia la terapia con antibióticos de amplio espectro agresivo y cuidados de apoyo, los corticosteroides se dan a menudo
empíricamente. volumen intravascular del paciente debe ser mantenido con una solución cristaloide y posibles fármacos vasopresores
como la dopamina.
Prevención
Deben existir procedimiento escrito para todos los aspectos de la adquisición, la emisión, y la administración de
transfusión. Todo el personal debe estar entrenado en el uso adecuado de los equipos, soluciones intravenosas, y los medicamentos utilizados
durante la administración de la sangre y de componentes sanguíneos. El equipo debe ser mantenido y mantienen registros de cómo y cuando se
utilizan elementos. Los medicamentos que pueden ser administrados por vía intravenosa nunca deben ser inyectados en bolsas de sangre, y se
debe tener cuidado en la selección y uso de dispositivos de acceso intravenosos.
1. Reacciones febriles no hemolíticas de transfusión (FNHTR)

Se describe a menudo como en incremento de 1 ° C o más la temperatura, por encima de temperatura de la línea de base del paciente, durante
o dentro de las 24 horas de la transfusión sin ninguna otra explicación médica. reacción febril a menudo están acompañados por escalofríos y
rigores.
133
Estos son autolimitados y normalmente se observan en pacientes con múltiples transfusiones o mujeres multíparas que tienen un
anticuerpo dirigido contra leucocitos del donante. Tal reacción antígeno-anticuerpo puede activar el complemento y estimular la producción de
citocinas, lo que resulta en la liberación de pirógenos endógenos. En algunos casos, las citoquinas se acumulan en la sangre almacenada
pueden activar directamente los pirógenos endógenos.
Signos y síntomas
Generalmente los síntomas son leves y benignas
• Temperatura I ° C o más con o sin rigor
• La hipotensión es raro.
A veces los síntomas pueden ser graves e incluyen
• hipotensión
• Cianosis
• Taquicardia
• taquipnea
• disnea
• Tos
• leucopenia
administración
Una vez que la hemólisis aguda se descarta, la atención de apoyo incluye:
• Antipiréticos por ejemplo, paracetamol, aspirina (la aspirina puede ser evitado en paciente trombocitopénica).
• por vía intramuscular antihistamínicos (por ejemplo, clorfeniramina)
• Si una segunda reacción ocurre, se debe dar componentes de la sangre reducida de leucocitos.
• El uso rutinario de antipiréticos profilácticos no es recomendable, ya que pueden enmascarar los síntomas de
hemólisis aguda.
Reacción alérgica
• Estos se atribuyen a proteína extraña (alérgeno) en el plasma de donantes que reaccionan con la
inmunoglobulina IgE en el paciente unido a mastocitos y basófilos.
• El plasma de donantes que tienen Reagins (IgE) se combinan con alérgenos en el plasma del paciente. La reacción
antígeno anticuerpo iniciar la liberación de histamina que causa urticaria, picazón y edema laríngeo rearly. Signos y síntomas
Sobre todo las reacciones alérgicas son leves y no en peligro la vida. Los signos y síntomas más comunes son:
• eritema local (enrojecimiento)
• prurito
• La urticaria (urticaria)
• La fiebre puede o no puede estar presente
134
administración
El paciente debe ser monitoreado con cuidado porque la urticaria puede ser el único signo de una reacción alérgica más grave.
• El paciente debe ser tratado con un antihistamínico para aliviar el malestar. Si los únicos síntomas es erupción cutánea o
urticarias, y si los síntomas se resuelven con 30 minutos del tratamiento de la transfusión puede ser reiniciado.
• Los pacientes que han tenido dos o más reacciones alérgicas pueden beneficiarse de antihistamínicos por vía oral o parenteral
profilaxis de una hora antes de la transfusión y en el inicio de la transfusión.
• La transfusión de glóbulos rojos lavados con solución salina puede ayudar a los pacientes con reations alérgicas graves frecuentes.
• Los corticosteroides están indicados sólo en casos graves repetitivas.

Las reacciones anafilácticas
Anafilácticas y anafilactoides son debidas a hipersensibilidad inmediata del sistema inmunológico. Ellos pueden comenzar después de la infusión
de sólo unos pocos ml de plasma o productos de la sangre que contiene plasma. Por lo general son leves al principio, pero puede progresar a la
pérdida de la conciencia, el choque y en raros casos la muerte.
Sysmptoms pueden implicar uno o varios sistemas
• tracto respiratpory (tos, bronchopasm, disnea)

• tracto gastrointestinal (náuseas, vómitos, diarrea)
• sistema circulatorio (arritmias, hipotensión, síncope)
• piel (enrojecimiento generalizado, utricaria)
Las reacciones generalizadas no pueden comenzar de inmediato; algunos desarrollan tanto tiempo como una hora después de la transfusión es la
práctica requiere transfusión de completed.Good para la observación cercana durante el primer cuarto de hora de la infusión y la vigilancia después,
pero, no obstante, continuar menor intensidad se mantiene throughtout y después de la transfusión. causas
Anafilácticas y anafilactoides son causadas generalmente en pacientes que son congénitamente deficiencia de IgA y que
han desarrollado anticuerpos anti-IgA por la sensibilización de transfusión o embarazo.
deficiencia de IgA es la deficiencia inmune cogenital más común, afectando a una de cada 700-800 personas, de los cuales hasta un
30% han circulantes anticuerpos anti-IgA. reacciones transfusionales anafiláctico, sin embargo, son bastante raros.
administración
• Detener la transfusión. Mantener la línea intravenosa abierta con solución salina normal
• Inyectar epinefrina (adrenalina) subcutaneousIy / IM (por lo general aproximadamente 0,5 ml de solución 1: 1000)
• Inyectar antihistamínicos (también se puede administrar parenteralmente).
• Si la hipoxia desarrolla, dar oxígeno por catéter nasal o una máscara. La intubación endotraqueal puede ser necesario.
• Para aquellos pacientes raros con una historia de una reacción anafiláctica a la sangre / plasma y que tienen deficiencia
congénita IgA y tienen anticuerpos anti-IgA, componente de la sangre, representada de plasma debe ser utilizado.
135
• Para transfusión de glóbulos rojos, esto se puede lograr mediante el uso de solución salina-lavado o glóbulos rojos
congelados-descongelados.
• Si se necesita el plasma, que debería ser de un donante con deficiencia de IgA conocida.
relacionada con la transfusión lesión pulmonar aguda: (TRALI)
También conocido como edema pulmonar no cardiogénico, esto, complicación en peligro la vida inusual se asocia con la
permeabilidad alterada de la cama capilar pulmonar de la activación del complemento, eventos mediados por la histamina, o las
prostaglandinas, lo que conduce a la acumulación fliuds, oxigenación inadecuada, y la reducción cardiaca regreso. La reacción también
se atribuye a los anticuerpos anti-leucocitos del donante o el plasma del paciente que reaccionan con leucocitos en el sistema
microvascular pulmonar, dando como resultado émbolos de leucocitos de agregación en las capllaries pulmones. Otra causa sugerido
incluye citocinas en las unidades de donantes.
Manifestación
lesión pulmonar aguda relacionada con la transfusión (TRALI) se manifiesta por un inicio agudo de dificultad respiratoria, disnea, cianosis,
fiebre y escalofríos. Una radiografía de tórax mostrará infilterates pulmonares bilaterales, pero no se observan otros signos de insuficiencia
cardíaca izquierda. Potencialmente fatal hipoxia puede ocurrir y persistir durante 24-28 horas.
Tratamiento
• La piedra angular de la terapia es la atención de apoyo eficaz para la insuficiencia respiratoria. La terapia de
oxígeno y, a veces ieintubation ventilatoria assitance puede ser necesaria
• esteroides intravenosos se utilizan imparically, pero su eficacia no se ha demostrado.
• Si TRALI es causada por paciente anti-leucocitos anticuerpos Los componentes de leucocitos de los pobres deben ser utilizados.
Normalmente returnes suficiencia pulmonares a menos de 10 - 12 horas.
Donante que se han implicado en un caso de TRALI y que posee potentes leuco-aglutininas pueden desencadenar reacciones en
otros pacientes y deben ser diferidos de la donación de sangre.

La sobrecarga circulatoria
Los pacientes que son muy jóvenes o muy viejos, y que tienen insuficiencia cardíaca congestiva subyacente o tiene anemia crónica
normovolumic y un volumen de sangre expandida están en mayor riesgo de sobrecarga circulatoria. Cuando demasiada sangre se transfunde
demasiado rápidamente, estos pacientes no pueden tolerar el aumento de volumen y por consiguiente desarrollar insuficiencia cardíaca
congestiva y edema pulmonar agudo, manifestada por
• Cianosis
• disnea
• Taquicardia
• Edema periférico
• Hipertensión
• Insuficiencia cardíaca congestiva
136
administración
Cuando se sospecha de insuficiencia cardíaca inducida por transfusión:
• La transfusión puede ser detenido o continuó muy lentamente
• diuréticos intravenosos
• El paciente puede ser puesto en posición vertical
• El oxígeno está dada por la máscara con el fin de facilitar la respiración
• Si los síntomas no se alivian o si persiste el edema pulmonar, flebotomía se puede hacer.
• La hipertensión puede necesitar tratment
Prevención
insuficiencia cardíaca congestiva asociada transfusión se puede prevenir mediante la identificación de pacientes susceptibles y tomar medidas
preventivas como:
• Transfundir glóbulos rojos en vez de sangre entera o dar pequeñas alícuotas de los productos concentrados durante un largo
período.
• La velocidad de infusión debe ser I ml / kg de peso corporal / hora, La transfusión debe sobre el plazo de 4 horas.
• diuréticos intravenosos pueden administrarse antes de la transfusión
Reacciones hemolíticas retardada (DHTRs)

Hay dos tipos de reacciones transfusionales hemolíticas retardadas.
Aloinmunización primaria
Esta reacción se produce varias semanas después de la transfusión y es en su mayoría leves. Es el resultado de la primaria alo-inmunización
debido a la incompatibilidad de Rh, Kell, Duffy, Kidd, y otros sistemas. Puede ser debido a la transfusión de sangre, trasplante de tejido o el
embarazo. Los anticuerpos se forman muchas semanas después de la transfusión los signos y síntomas pueden ser leves:
• Fiebre leve
• Descenso de la hemoglobina
• anticuerpo irregular (es) pueden estar presentes
• DAT puede ser positivo
Respuesta anamnésica o secundaria
Es debido a la transfusión de glóbulos rojos incompatibles en un paciente que ya está inmunizado por transfusión anterior. También se
debe a la de incompatibilidad de Rh, Kell, Duffy, Kidd y otros sistemas de grupos sanguíneos. Pocos días después de la transfusión,
los anticuerpo (s) aumenta la concentración y se
destruir los glóbulos rojos causando reacciones hemolíticas retardadas.
No hay reacción en el momento de la transfusión .Afterwards puede haber.
• Caída de la hemoglobina;
• Aumentando en bilirrubina e ictericia leve ocurren 5-7 días después de la transfusión
• La insuficiencia renal es muy raro.
137
administración
• La transfusión de sangre compatible si es necesario.
• Es imposible evitar todos los DHTRs. Cuando los anticuerpos GR se identifican por el banco de sangre, los médicos deben
informar a sus pacientes y aconsejarlos para proporcionar esta información cuando hospitalizado en otro lugar.
• Una tarjeta de alerta transfusión se debe realizar por parte del paciente.
PLAQUETARIA INCOMPATIBILIDAD
Una complicación poco común de la sangre transfusión, generalmente plaquetaria implica concentrado, es
púrpura trombocitopénica como resultado de la producción anamnésica de anticuerpos plaquetarios. La púrpura post-transfusión ocurre en
los casos que ya están inmunizados por transfusiones de plaquetas anteriores. Después de la transfusión púrpura trombocitopénica es un
evento raro que ocurren generalmente en las mujeres multíparas. Algunos pacientes desarrollan una plaqueta alo-específica de anticuerpos
anti-Pl Alabama. El anticuerpo destruye no sólo el P1 transfundida A1 plaquetas positivas, pero también causa la destrucción no específica de los
pacientes P1 A1 plaquetas negativos
Los anticuerpos frente a plaquetas en pacientes con múltiples transfusiones pueden causar reacción, tal como: escalofríos, fiebre y disnea etc. similar a la
incompatibilidad de leucocitos.
• reacciones febriles chils
FEVR Dyspea
• La trombocitopenia es generalmente severa y produce la púrpura generalizada alrededor de una semana después de la transfusión
de sangre.
administración
El thrombocytepenia es generalmente autolimitante y la transfusión de plaquetas por lo general no es beneficioso. El tratamiento incluye:
• Los corticosteroides
• El intercambio de plasma (plasmaféresis)
• La inmunoglobulina intravenosa.
Enfermedad huésped (EICH) - injerto contra
enfermedad de injerto contra huésped asociada transfusión es una complicación de la terapia de componentes sanguíneos o trasplante de
médula ósea. enfermedad GVH se produce si los linfocitos de donantes funcional se injertan y se multiplican en un destinatario inmunodeficiente
severamente. Estas células injertadas del donante reaccionan contra el tejido extraño del huésped (receptor).
GVHD es una complicación poco frecuente y los pacientes en situación de riesgo son:
• pacientes lymphopenic
• La médula ósea casos suprimida
• Feto recibir transfusiones intrauterinas
• Nuevos bebés bom que reciben transfusiones de intercambio
• Los individuos con síndrome de inmunodeficiencia congénita
138
• Los pacientes con trastornos hematológicos y oncológicos
• Los pacientes que reciben componentes de sangre de familiares de sangre
La tasa de mortalidad con TA-GVHD es de aproximadamente 84% con una supervivencia media de 21 días después de la transfusión. La muerte es causada
generalmente por infección o Hemmorhage secundaria a la aplasia de la médula ósea. Los sysmptoms de la enfermedad GVH pueden incluir:
• Fiebre
• Erupciones en la piel
• Hepatitis
• Diarrea
• supresión de la médula ósea
• Infecciones.
Administración:
• irradiación Pre-transfusión de todos los componentes de la sangre que contienen linfocitos evitará funciones GVH
diseases.The de glóbulos rojos, granulocitos y plaquetas no están afectadas por dicha irradiación.
• Los corticosteroides
• ciclosporina
• Metotrexato, etc.
La eficacia clínica de estos fármacos no se han demostrado ser adecuados en TA-GVHD.
Efectos inmunomoduladores de Transfusión
Transfusión ha sido conocido para modular la respuesta inmune dado que las observaciones de mejora de la supervivencia del injerto
renal en pacientes transfundidos en la década de 1970. Transfusion se thuoght tener otros efectos, menos benificial en otros entornos
clínicos, incluyendo tasas de aumento de la recurrencia del tumor sólido y el aumento de las tasas de infecciones bacterianas
postoperatorias. Estos efectos son controvertidos, pero sugieren que la relación entre la transfusión y el sistema inmune es más complejo
de lo considerado anteriormente.
No existe ningún mecanismo específico se ha demostrado definitivamente para immunodulation poste transfusión
(inmunosupresión)
Sin régimen de terapia específica disponible. Se aconseja La transfusión de componente sanguíneo apropiado (s) para tener efectos beneficiosos.
No inmune complicaciones tardías hemosiderosis

(sobrecarga de hierro)
Cada unidad de glóbulos rojos contiene aproximadamente 200 mgm de hierro. Crónicamente transfundidos pacientes, especialmente aquellos
con hemoglobinopatías como el beta-talasemia mayor, hemolítica congénita
anemias, o anemia aplásica tienen acumulación progresiva de hierro y no hay medios fisiológicos de la excreción. Almacenamiento se produce
inicialmente en los sitios endoteliales retículo, pero cuando éstos están saturados hay deposición en las células del parénquima. El depósito de
hierro interfiere con las funciones de las glándulas del corazón, el hígado y el endocrinas. insuficiencia hepática y la causa toxicidad cardiaca
mayor parte de la morbilidad
139
Tratamiento está dirigido a la eliminación de hierro sin reducir la hemoglobina circulatorio del paciente. infusión subcutánea dosificada
de la deferoxamina, un agente quelante de hierro es valioso para reducir los depósitos de hierro en estos pacientes.
La desferrioxamina se prescribe generalmente en una dosis diaria de 20-40 mg / kg de peso corporal, administrada por vía subcutánea en 8-12 horas
(normalmente durante la noche) mediante una bomba de infusión portátil.
Las transfusiones de neocitos (células rojas jóvenes) han sido eficaces en la supervivencia más larga de neocitos, causando intervalo de transfusión
más tiempo, y menor cantidad de acumulación de hierro.
Enfermedades transmitidas TRANSMITIDO
Un riesgo importante de transfusión de sangre es la transmisión de enfermedades infecciosas, algunas de las cuales tienen importancia clínica. La sangre
debe ser examinado para enfermedades transmisibles por transfusión como el VIH 1 y 2, Hepatitis B y C, la sífilis y la malaria para asegurar la transfusión
de sangre segura.
Tiempo medio entre la infección y la seroconversión:
Infección Tiempo medio Distancia
VIH 22 días 6 a 38 días
VHC 98 días 56 a 189 días
HBsAg 56 días 24 a 128 días
HILV 51 días 37 a 72 las DAV
Treponema pallidum:
• El período de incubación en la sífilis transfusión varía de 4 semanas a 4,5 semanas.
• En la sangre citrada almacenado durante más de 72 horas a 2-6 ° C, espiroquetas son pocas probabilidades de sobrevivir.
Malaria
El período de incubación para la transmisión de la malaria depende del número y de las cepas de plasmodios transfundidos.
Las cepas de Plasmodium Tiempo de incubación
• P. falciparum y P. Vivus Entre 1 semana y 1 mes
• P. Malaria Puede ser de muchos meses
Para detalles, véase el capítulo 12, sobre "Enfermedades transmitidas por transfusión y su programación.
140
TRANSFUSION INVESTIGACIONES DE REACCIÓN DE REGISTRO

Nombre del paciente _______________________________________ __Age ________ ________ Sexo hospital
_________________________________ Adm. / Reg. Nº _______________________ Bolsa Nº ________________ Fecha y
hora de suministro ________
La recepción del informe de reacción con la bolsa y la sangre de la muestra del paciente en fecha __________Time____ Aprox. producto que
queda en la bolsa No ._____________ Cualquier error de transcripción, Sí / No ______________
Color de la sangre en la bolsa _________________ en tubo unido a bag___________ Color de la muestra de sangre
del paciente Pre-transfusión Después de la transfusión
hemólisis La
ictericia
Reagrupación
agrupación celular / typing agrupación suero ABOGr. Rh (D)

Muestras de sangre
UNA -B - AB - D A Cells Las células B
Pre-transfusión de
post-transfusión de
Donantes de bolsa / tubo
DAT: muestra de pre-transfusión _________________ muestra de post-transfusión _______________________ juego Re-cruz
Los donantes de Para para IgM

sangre con Menor
Mayor Menor Mayor
Salina Alb / Enz YO EN Alb / Enz YO EN
Pre-transfusión
postransfusional
De glóbulos rojos de la detección de anticuerpos
Pre-transtrans. Células RT 37 ° AHG z / Alb Post-trans. Células RT 37 ° AHG nz / Alb

Muestra Muestra
Las células O PooledO

cells1 *
agrupados 1
O agrupada células
células 2 ** sanguíneas O agrupados 2 **
Auto Auto
* O 1 R 1 Células; **O 2 R 2 Células
anticuerpos irregulares detectado en el cribado ___________________ Sí / No ___________________ La identificación de anticuerpos, Si
anticuerpo que se encuentra en el cribado (si es posible) ____________________
# muestra de sangre después de transfusión del paciente Hb libre ______________________________________
Bilirrubina Total __________Direct Bilirrubina ______Indirect Bilirubin_____
# Muestra de orina vacío después de HTR gratis Hb ___________________________________________
# Frotis de sangre del donante (patógena organismo) _____________________________. ________
# Cultura sangre del donante _________________________________________________________ Interpretación
__________________________________________________________________
Contador de cuadros Sr. Tech. Oficial
(JfGencraly hecho en Patología Lab) Firma del Técnico con fecha
141
12
Transfusión de sangre
transmitida
enfermedades
Introducción
Florence Nightingale, hace más de 100 años, dijo “No se condena más fuerte de cualquier hospital o sala podría ser pronunciado
que el solo hecho de que zymotic enfermedades (infecciosas) se ha originado en ella, o que tal enfermedad ha atacado a otros
pacientes que los trajo con ellos".
Debe, por lo tanto, será obligatorio para aquellos que están involucrados en la transfusión de sangre a un paciente por salvar su
vida, que la transfusión de sangre hace, no hay daño para el paciente. Nada podría ser peor que el hecho de que en un intento de salvar a
los productos de vida, la sangre y la sangre que tienen los agentes infecciosos transmisibles se han dado. Muchos de estos agentes
infecciosos pueden causar la muerte o una enfermedad prolongada. Por lo tanto es necesario entender los organismos que podrían
transmitirse por transfusión de sangre y medio por el cual esto podría ser prevenido.
Agentes infecciosos
Hay cuatro grupos principales de microorganismos que se sabe causan infecciones a saber, virus, bacterias, protozoos y hongos
Se han reportado a transmitir por transfusión de sangre - sólo los primeros tres grupos de microbios - virus, bacterias y protozoos. Las
personas con infecciones por hongos son por lo general demasiado enfermo para ser aceptados como donantes de sangre. Los virus se transmiten
con mayor frecuencia por transfusión.
Recientemente, una nueva forma de agente infeccioso - el prión - ha sido identificado. En este momento, no hay evidencia para sugerir
que podían ser transmitidas por transfusión de sangre.
143
Los virus
Los virus son las formas más simples de la vida. Se infiltran en todas las formas de vida, carecen de ciertos componentes que se necesitan
para vivir y, por tanto, su crecimiento dependerá de la célula huésped al que infectan a proporcionar estos componentes que faltan.
Los siguientes son algunos de los virus que se sabe que ser transmitida a través de la sangre:
1. virus de la inmunodeficiencia humana (VIH)
2. virus de la hepatitis B
3. virus de la hepatitis C
4. virus de la hepatitis A
5. virus de la hepatitis G
6. No - A, no - B de la hepatitis
7. Virus de Epstein Barr
8. citomegalovirus (CMV)
9. virus T linfocítica humana (HTLV - 1 y HTLV - 2)
Algunos virus tienen la propiedad de latencia. Esta es la capacidad de un virus para unirse a su propio ácido nucleico con el ácido
nucleico de la célula huésped, sin tener el control completo de la célula huésped como un virus normalmente hacer. Latencia ocurre
generalmente después de una infección activa cuando el individuo se ha recuperado y la inmunidad se está acumulando. existe El ácido
nucleico viral en una forma inactiva que no parece hacer daño a la célula huésped. Cuando la célula huésped divide, el ácido nucleico de la
célula se copia, junto con el ácido nucleico viral. De esta manera, el ácido nucleico viral se convierte en parte del ácido nucleico de la célula y
se copia cada vez que la célula se divide.
La latencia es por lo general indefinida y sin efectos nocivos sobre la célula huésped. Sin embargo, en cualquier momento, el ácido
nucleico latente podría convertirse en activa y hacerse cargo de las funciones de las células, lo que resulta en una infección activa. Esto se
llama una reactivación de la infección (recrudescencia), que es causada por la reactivación del virus ya presentes en el individuo.
Transmisión de agentes infecciosos por transfusión de sangre.

Con el fin de ser transmitida por transfusión de sangre, un agente infeccioso debe estar presente en la sangre donada. Cada
servicio de transfusión de sangre o banco de sangre o de laboratorio deben, por lo tanto, la pantalla para la evidencia de los
microbios que se sabe que causan infecciones con esta vía de transmisión.
Hay tres condiciones básicas que determinan si un agente infeccioso es susceptible de transmitirse por transfusión:
1. El agente debe ser capaz de utilizar la corriente de la sangre como una vía de entrada en host.
2. El donante infectado debe ser esencialmente libre de cualquier signo o síntoma de la enfermedad notables, de lo
contrario, habrían sido identificados durante la selección de donantes y el donante hubieran sido excluidos o diferida.
3. El agente debe existir de forma natural por un período de tiempo, ya sea libre en el plasma o presente en un componente celular en
la corriente de sangre de un donante infectado.
Cualquier agente infeccioso satisfacer todas estas condiciones se puede transmitir por transfusión de sangre. Sin embargo, si
la transmisión se produce o no en realidad depende de una serie de otros factores, en particular en el estado inmune del paciente y la
cantidad de agente infeccioso transfundida.
144
Transfussion Blood enfermedades de transmisión
Se sabe que puede, y no se produce la transmisión de ciertos agentes infecciosos a través de transfusiones de sangre, y puede
ser una vía importante de infección, sin embargo, el punto clave a recordar aquí es que hay un número de maneras en que el riesgo se
puede reducido.
Las estrategias para reducir el riesgo de infecciones transmitidas por transfusión.
• La cuidadosa selección de los donantes para asegurar que, en la medida de lo posible, la sangre no se recoge de las personas que
tienen probabilidades de ser portadores de agentes infecciosos. donación de sangre segura depende, la construcción de un panel de
regulares, voluntarios y no - donantes remunerados como el primer paso para garantizar un suministro seguro y adecuado de sangre. En
nuestro país, donde la mayor parte de la sangre se obtiene de donantes familiares / allegados, el riesgo de infección transmisible
transfusión es mayor.
• La proyección directa de la sangre para la evidencia de la presencia de agentes infecciosos o marcadores producidos por
ellos ..
• La eliminación de componentes específicos de pensamiento sangre al puerto agentes infecciosos, por ejemplo, por la filtración
de la sangre para eliminar las células blancas de la sangre.
• La inactivación física / química de cualquier agente contaminante que pueda estar presente, por ejemplo, tratamiento térmico
de 5% de albúmina durante la producción.
No todos los agentes infecciosos pueden ser detectados directamente en la sangre donada. La sangre se suele evaluar la evidencia de
infección previa mediante la búsqueda de la presencia de anticuerpos específicos dirigidos contra el agente infeccioso.
Claramente, es sólo mediante la comprensión de lo que los marcadores de la infección son producidos por el agente infeccioso que el cribado para el
marcador correcto puede ser introducido.

Agentes infecciosos transmisibles por la sangre:
Cualquier agentes virales pueden ser transmitidas por la sangre, sin embargo, importante entre ellos son el VIH, HB V, HCV, CMV, y
el HTLV-I y HTLV-2 (Tabla 12 -1)

TRANSFUSION mediada por infecciones (viral) (Tabla 12-1.) Agentes de infección
Enfermedad
VIH-1 SIDA
VIH-2 Enfermedad similar al sida
VHB Viral Hepatitis B
VHC La cirrosis hepática - Late Hígado
Carcinoma - Sequelace
citomegalovirus Hepatitis, linfadenopatía, erupciones cutáneas, infección
intrauterina de los recién nacidos.
HTLV-1, HTLV-II La leucemia de células adultas
HUMAN virus de inmunodeficiencia (VIH)

El VIH causa el SIDA. Este síndrome fue reconocida en 1981, mucho antes del descubrimiento del virus causante. implicaciones
más amplias de trastorno inmunológico se observaron cuando, en 1982, el SIDA era
145
reportado en tres hemofílicos y en un lactante de 17 meses de edad, cuyo transfusiones múltiples en el nacimiento incluido una unidad de
plaquetas de un donante que posteriormente desarrollaron el SIDA. En pocos años, más del 50% de los hemofílicos que reciben factor de
coagulación desarrolló la infección por VIH-1.
VIH se aisló primero a partir de las células de un paciente infectado en 1983 (VIH-1). El virus fue identificado posteriormente como
el agente causante del SIDA. En 1986, un segundo tipo de VIH, VIH-2, fue identificada en ciertas áreas de África Occidental. VIH-2 parece
causar las mismas enfermedades como el VIH-1, pero puede ser menos patógeno. Es morfológicamente similares a VIH-1. Los dos tipos
se pueden distinguir por la presencia de proteínas y glico-proteínas específicas para ellos. Aunque la reactividad cruzada se produce entre
la proteína núcleo de ambos virus, las proteínas de la envoltura son diferentes.
Componentes del virus VIH (Tabla 12-2).

Observado bandas
Gene VIH-1 VIH2 proteínas
Mordaza PL8, p24, pl5 PL6, p26, p55 Núcleo
Pol p31 endonucleasa
p55, p65 p68 La transcriptasa inversa
env gp41 gp36 proteínas

transmembrana
gpl20, gpl60 GPL40, gpl25 Sobre
p = Protein, gp = proteína de Glyco,

número indica moléculas
La reactividad cruzada
La reactividad cruzada se produce cuando un anticuerpo reconoce no sólo su propio antígeno sino también otros antígenos que tienen
ciertas similitudes. En el caso del VIH, esto significa que un individuo infectado con HTV-1 sería producir anticuerpos que reconocen tanto el
núcleo como la envoltura proteínas de VIH-1 y las proteínas del núcleo del VIH-2. Del mismo modo, un individuo infectado con el VIH-2
produciría anticuerpos que reconocen tanto el núcleo como la envoltura proteínas de VIH-2 y proteínas del núcleo de VIH-1.
LA ESTRUCTURA DEL VIH

Hay dos tipos de ácido nucleico:
• ácido ribonucleico (ARN)
• ácido desoxirribonucleico (ADN)
ADN es generalmente de doble cadena. Es el material genético transmitido a las células hijas cuando una célula se divide. Es
de ADN que es responsable de la transmisión de las características hereditarias de padres a hijos.
El ácido nucleico en el virus VIH es ARN. No hay ADN presente. En cambio, el virus utiliza la maquinaria de las células
humanas que entra a convertir su ARN a ADN de manera que el virus puede replicarse o integrarse en el ADN de la célula.
El ARN viral se condensa en un núcleo cilíndrico junto con dos proteínas estructurales estrechamente asociados-y una
importante enzima llamada ARN dependiente de ADN polimerasa. Esto es
146
más comúnmente conocida como transcriptasa inversa. Esta enzima se encuentra en todos los retrovirus, ya que se necesita para copiar
el ARN viral en ADN.
La forma en que se describen virales y otras tales proteínas se basa en su peso molecular (medido en Daltons) y de
si son proteínas o glicoproteínas. Las dos proteínas asociadas con el ARN del VIH son 7000 daltons (7kDa) y 9000
daltons (9kDa). Estos se abrevian a P7 y P9 respectivamente. La enzima transcriptasa inversa es una proteína de 66 kDa,
que se abrevia a p66. Glicoproteínas se abrevian de manera similar a “GP”.
El núcleo está totalmente encerrado en una cáscara en forma de cono de la proteína p24. Esto se llama la proteína principal del
núcleo y parece ser la misma en ambos VIH-1 y VIH-2. Todo el conjunto se llama la cápside viral. (Fig 12.1)
Fig. 12.1
La estructura de VIH
La cápside en sí está cubierto por dos capas. El primero de estos es una cáscara de proteína de la matriz PL7 al que están unidos
proteínas que se proyectan desde la superficie de la partícula de virus. Esto está cubierto por una bicapa lipídica. Se proyecta a través del
lípido son muchas proteínas transmembrana. Estas proteínas, gp41, están unidos a la matriz de p17 y ellos mismos se unen las proteínas
de la envoltura gpl20. Estos aparecen como pequeños salientes en la superficie de la partícula de virus. Es la estructura de estos pequeños
proyección y sus proteínas de fijación que parece ser la principal diferencia entre el VIH-1 y VIH-2. Los correspondientes HFV-2 proteínas
se GPL 10/130 y GP 36 respectivamente. Los anticuerpos contra estos dos conjuntos específicos de proteínas no reaccionan de forma
cruzada.
Toda la partícula de virus se llama el virión. Esta es la partícula infecciosa que se secreta y se transmite entre los
individuos. El virión completo es 100 -120 pm de diámetro.
Todos retrovineses contienen tres principales genes Estructurales de gen gag que codifica para el gen de proteínas del núcleo, pol
(polimerasa) y env (sobre) que codifica para las glicoproteínas de la envoltura.
147
Fig. 12.2
Estructura genética del VIH incluye los nueve genes, pero su son tres principales genes - gag, pol y env y son antigénica, otros
genes que sirven para regular la expresión de estos genes de viriones. Los productos génicos marcados con asterisco no se
usuallay visible en un Western Blot.
La entrada del VIH en las células
VIH entra en células susceptibles por unión a un receptor - una proteína llamada CD4 - en la superficie celular. CD4 se encuentra en la
superficie de un número de diferentes células dentro del sistema inmune:
• las células T que ayudan a estimular la respuesta inmune
• las células T auxiliares (células Th)
• los macrófagos que engullen partículas de virus en muchas partes del cuerpo. Después de la fusión del virión a la
membrana celular, la cápside descubierta pasa en el citoplasma de la célula. Dentro del citoplasma, el RNA se copia en DNA
de doble cadena por la enzima transcriptasa inversa presente en la cápside utilizando materias primas desde dentro del
citoplasma. El ADN pasa entonces en el núcleo de la célula y se integra en el ADN celular. Una vez en la célula, el ADN
permanece latente.
La etapa final de la infección se produce cuando el virus comienza a replicarse. Grandes cantidades de virus infecciosos
(viriones) se producen. A medida que el virus emerge (brotes) de la célula, que se envasa en la membrana celular para producir las
partículas de virus completos. Estos viriones se liberan y pueden infectar a otras células.
La presentación clínica de infección por VIH y SIDA

Inicialmente se pensó que la infección con el VIH sólo produce el SIDA. A continuación, se hizo evidente que la infección por VIH podría dar
lugar a una serie de diferentes condiciones de gravedad variable, aunque por lo general los resultados (y finalmente) en el SIDA.
VIH tiene una predilección por la infección y destrucción de CD o células T helper, produciendo de esta manera immundeficiency
grave y enfermedades asociadas.
En individuos que sufren de SIDA, la principal causa de la enfermedad es la aparición de enfermedades infecciosas secundarias,
las infecciones oportunistas. Estas infecciones oportunistas son causados por
agentes infecciosos que no producen enfermedad en individuo normal.
148
Blood Transmisión enfermedades de transmisión
Los siguientes son infecciones comunes asociadas con el VIH / SIDA:
• La neumonía causada por Pneumocystis carinnii
• Tuberculosis producida por Mycobacterium tuberculosis
• Micobacteriosis causada por Mycobacterium avium / intracellulais
• criptosporidiosis crónica
• toxoplasmosis
• La infección viral, tal como citomegalovirus
Los cánceres secundarios como el sarcoma de Kaposi y no-Hodgkins' linfoma son otra
condiciones que se encuentran a veces en pacientes con SIDA. Estos cánceres suelen ser agresivos y no responden muy bien a la quimioterapia
estándar. El sarcoma de Kaposi, como se describió originalmente, era un tumor maligno benigna que se encuentra en los hombres de edad avanzada
que no tiene ningún efecto adverso en la individual.However, el sarcoma de Kaposi encuentra principalmente en pacientes con SIDA en África es un
tumor maligno de rápido crecimiento, y generalmente fatal.
En muchas partes del mundo, los pacientes con complejo relacionado con SIDA (ARC) o el SIDA presente simplemente con diarrea
severa. La presencia de infecciones oportunistas o cánceres secundarios solamente se determina siguiendo la investigación clínica y de
laboratorio.
LABORATORIO diagnóstico de infección por VIH
Poco después de la exposición, la proteína del núcleo, p24, se ha encontrado en algunos individuos. Dentro de pocas
semanas anticuerpos contra envoltura (gp41) y el núcleo (p24), las proteínas aparecen en casi todos los individuos
infectados. Durante la fase temprana de la infección por una aguda no específica “enfermedad viral” puede ocurrir. Una
vez que aparezca anticuerpos, que aumentan en el título a pesar de que el anfitrión es asintomática. Durante esta fase de
la infección cultivos virales de linfocitos aislados demuestran la presencia de virus. Como el progreso de la infección, los
cambios en la proporción de linfocitos T con marcadores de superficie específicos, CD4 (helper) para células CD8
(supresor), se observan. La relación de CD4 a CD8 en persona competente saludable y inmune es aproximadamente 2: 1.
En el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), el virus destruye las células CD4 y su número en la disminución
cuerpo y hay disminución de la relación CD4: CD8.
Antes de que se identificó el VIH, el SIDA fue diagnosticado por su apariencia clínica. Cualquier pruebas de laboratorio que se utilizaron
fueron pruebas sustitutas. Todas estas pruebas iniciales medidas de los resultados de la infección por VIH en lugar de detectar específicamente ya
sea antígeno viral o anticuerpo contra el virus.
La producción de pruebas específicas para HTV ayudó a entender tanto la infección por el VIH y el SIDA. El hallazgo de
anticuerpos anti-VIH en pacientes con inmunodeficiencia previamente explicada es diagnóstico de SIDA.
La presencia de anti-VIH en un individuo asintomático significa que el individuo ha estado expuesto al virus. Se acepta
que, en casi todos los casos, el virus estará presente en el individuo. La seroconversión en muestras secuenciales significa
que la infección ha sido reciente.
Algunos trabajos de investigación indican que anticuerpos están presentes tan pronto como 14 días después de la infección, mientras que
otros indican que no pueden estar presentes hasta 28 días o más después de la infección. Los anticuerpos producidos se dirigen contra ambas
proteínas del núcleo y de la envoltura. Los anticuerpos más importantes son específicamente anti-p24 (núcleo) y anti-gp41 (sobre). Aunque se
producen anticuerpos frente a otras proteínas del virión, la presencia de estos dos anticuerpos se ha encontrado para proporcionar el
149
mejor confirmación de la infección. También se ha encontrado que la mejor manera de monitorear el progreso de la infección.
Después de la infección y antes de la producción de anticuerpos, hay 'período de ventana' de longitud variable durante el cual la
infección establece. Durante este periodo cuando no se detecta anticuerpos, el antígeno viral (p24, gp41) podía ser detectado. El
período de tiempo se puede detectar que el antígeno es muy corto, a menudo no más de 1-2 semanas. Aunque la detección de
antígeno de VIH proporcionaría teóricamente evidencia de infección en una etapa anterior, hay muy pocos ensayos de antígeno
comercial y también no son muy sensibles. Sin embargo, en algún caso en que se han utilizado ensayos de antígeno, antígeno de VIH
se ha detectado en una etapa cuando los anticuerpos anti-VIH no habían aparecido o simplemente aparecido. En la actualidad, por lo
tanto, parece que los ensayos de antígeno de VIH pueden tener un valor limitado en servicio de transfusión sanguínea. Sin embargo,
es posible que su valor puede crecer con un aumento de la prevalencia del VIH en la población de donantes.
Fig. 12.3
eventos serológicos después de la infección por VIH
La figura 12.3 muestra las actividades después de la infección por el VIH. Poco después de antígeno ha aparecido, el anticuerpo
correspondiente emerge con una disminución de antígeno libre. Los niveles de anticuerpos frente a p-24 y gp-41 de pico y permanecen
constantes a lo largo de las etapas de la infección asintomática persistente. No está claro si la producción de antígeno p24 se detiene por
completo. El uso de tratamiento con detergente de muestras de suero, antígeno p24 complejado con antobody anti-p24 se ha detectado en
algunos pacientes considerados previamente poseer único anticuerpo anti-p24. Es posible que la producción de antígeno p24 no cesa por
completo, pero que el antígeno circulante - se forman complejos de anticuerpos, por lo tanto, no se pudo detectar el antígeno.
Como se desarrolla ARC, el nivel de anticuerpos anti-p24 se cae y aparece antígeno p24 detectable. En esta etapa, los
anticuerpos anti-gp41 y antígeno p24 son detectables. Esta situación es el preludio del desarrollo del SIDA en toda regla.
Puede observarse que la viremia es máximo durante el periodo de ventana y después de ARC y SIDA se desarrolla.
Transmisión de la infección por VIH

están ahora bien establecidos los modos de transmisión de la infección por VIH. Mientras que el virus se puede aislar de muchas secreciones del
cuerpo, la infección se transmite sólo en un número limitado de formas.
150
Hay tres modos principales de transmisión de la infección por VIH:

1. contacto sin protección con penetración sexual con una persona infectada, ya sea entre hombres o entre hombre y
mujer.
2. La inoculación de sangre infectada, o bien por transfusión de sangre o como resultado del uso de agujas contaminadas,
jeringas o cuchillos utilizados, por ejemplo, en la inyección de drogas, escarificación ritual o tatuaje.
3. De una madre infectada a su hijo, en el útero, durante el parto o la lactancia. La transfusión de sangre
puede ser una importante vía de infección. La eficiencia de la transmisión de VIH a través de transfusión de
sangre se estima en más de 90%. La OMS informa que la dosis viral en la transmisión del VIH a través de sangre
es tan grande que la transfusión de un VIH-positivo conduce a la muerte, por término medio, después de dos
años en los niños y después de tres a cinco años en los adultos. Sin embargo, el grado en que la transfusión de
sangre es una vía real de transmisión depende de la prevalencia de individuos infectados en la población y sobre
la eficacia del programa de detección utilizado. En una población con una baja prevalencia de individuos
infectados y un buen programa de detección, transmisión por transfusión de sangre puede ser extremadamente
rara.
La transfusión de sangre, por lo tanto, se puede propagar la infección por VIH muy ampliamente si la sangre no se tamiza
sistemáticamente.
La transmisión de la infección por transfusión de sangre

La transmisión de la infección por transfusión de sangre, o la infusión de productos sanguíneos, también se puede evitar. El primer enfoque a la
prevención de la transmisión por transfusión es la selección de donantes que están en bajo riesgo de infecciones transmisibles por transfusión.
Recuerde que un donante de seguridad hace una donación segura. Los siguientes son puntos importantes a tener en cuenta durante la
selección de un donante:
• la identificación de los grupos donantes de bajo riesgo
• evitando los donantes de sangre inadecuadas
• reclutamiento de donantes voluntarios no remunerados de sangre
• promoción de la auto-exclusión de los individuos en situación de riesgo a través de un programa de educación eficaz de los
donantes
• asesoramiento predonación, incluida una evaluación de los factores de riesgo y una oportunidad para la auto-exclusión o
exclusión unidad confidencial
• una breve historia médica, incluidos los posibles signos y síntomas relacionados con infecciones transmisibles por
transfusión
• un chequeo de salud básica, incluyendo un breve examen del brazo de marcas de agujas
• la promoción de la donación de sangre auto-exclusión voluntaria no remunerada regular es probablemente el método más
eficaz para prevenir la transmisión, sino que depende de la educación de los potenciales donantes sobre el comportamiento de riesgo. Es
particularmente importante para fomentar la auto-exclusión por personas como prostitutas, homosexuales y bisexuales, usuarios de drogas
inyectables, los que tienen contacto sexual sin protección que no sea con una pareja estable, y los contactos sexuales de cualquiera de
estas personas.
151
Manual Técnico Transfusion Medicine
Por último, se necesitan pruebas de detección de la infección por VIH a permitir que los donantes infectados que ser excluidos y la sangre
donada para ser desechados. Las pruebas para detectar el VIH viral Marcadores
La detección de anti-VIH es el enfoque más adecuado para la identificación de las donaciones de sangre infectados por el VIH. Los tres
principales tipos de ensayos de cribado para detectar anti-VIH disponibles son:
• Inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA / EIA)
• ensayos de aglutinación de partículas
• ensayos rápidos Specialized
Durante la selección de ensayos para ensayos de anti-VIH siguientes características pueden tenerse en cuenta:
• alta especificidad
• Alta sensibilidad
• La simplicidad de la prueba
• Tiempo de incubación
• Costo
Análisis de inmunoabsorción enzimática (ELISA)

Es el ensayo usado más común y se basa en el uso de antígeno viral inmovilizado que captura anticuerpos anti-VIH
presentes en la muestra de ensayo.
Los fabricantes suelen utilizar los términos de la primera generación, segunda generación y ensayo de tercera generación.
• ensayos de primera generación son purificadas o no purificadas de virus nativo o células infectadas por virus lisados preparados a partir
de cultivo celular.
• Los ensayos de segunda generación utilizan antígeno recombinante producido por clonación de fragmentos de ácido nucleico viral en
levadura, creciendo gran cantidad de la levadura manipulada en cultivo en masa y purificación de las proteínas virales producidas.
• ensayos de tercera generación son polipéptidos virales sintéticos producidos artificialmente por síntesis química.
Los ensayos se basan en los mismos principios pero difieren en la forma en que se inmoviliza el antígeno viral:
• En los lados de los pocillos de una microplaca de poliestireno
• En pequeñas perlas de poliestireno. Este método requiere equipo especializado. Hay tres
tipos de ELISA:
(1) Antiglobulina tipo ELISA: (2) anticuerpo viral presente en la muestra de ensayo se une al antígeno viral inmovilizado y se
detecta
por marcado con enzima anticuerpo anti-humano. (3) ELISA competitivo: (4) Es ampliamente utilizado ensayo, en el que el anticuerpo
presente en la muestra de ensayo compite con enzima
vinculada anticuerpo específico para los sitios de unión a antígeno inmovilizado. (5) Sandwich ELISA: (6) Este es de tipo muy
específico de ELISA en el que el anticuerpo viral en la muestra de ensayo se une a
inmovilizado antígeno y entonces detectado por el antígeno viral libre marcado con enzima.
152
Antiglobulina los métodos del tipo ELISA (o EIA)

Es inmunoensayo enzimático en fase sólida utilizando pocillos de poliestireno de microplacas o perlas recubiertas con proteínas específicas del
VIH que representan antígenos del núcleo y la envoltura del VIH. Véase la figura 12-4.
(1) Suero o suero diluido se añade a los pocillos recubiertos con proteínas específicas del VIH (p24 y gp 41). Los controles
positivos y negativos se añaden a una serie de pozos en cada ejecución placa. (2)
Ellos se incuban durante el período de tiempo definido y a la temperatura correcta. (3) Durante la incubación, cualquier
anticuerpo específico presente en el suero de ensayo se une a la viral
antígeno. (4) Al final de la incubación, los pocillos
se
lavaron al menos tres veces con fluido de lavado para
eliminar el suero no unido y para prepararlos para la
siguiente etapa, (lavado manual se realiza mediante la
arandela de múltiples canales para llenar y luego vaciar los
pocillos con fluido de lavado o por lavado mecánico usando
un lavador de placas automatizado ). (5) Después del
lavado final, el fluido de lavado es
remoto. Es muy importante que también son lo más

seco posible. La placa puede girarse al revés y se
golpeó suavemente seca en algún tejido absorbente si
los pozos están todavía húmedas. (6)
solución de conjugado se añade a todos los

pocillos y se incuban en el período de tiempo
definido y a temperatura correcta.
solución de conjugado contiene anticuerpo globulina

humana anti- que se ha relacionado químicamente a
una enzima por lo general peroxidasa de rábano
picante o fosfatasa alcalina. Conjugado se une sólo a
anticuerpos humanos que se unen al antígeno
inmovilizado en los pocillos. Conjugado no ligado en
aquellos pocillos que no contenían antisueros VIH
unido a antígeno. (7) Al final de la incubación, los
pocillos son
de nuevo se lavaron tres veces para eliminar el exceso,

el conjugado no unido y se preparan para la siguiente
etapa del ensayo como se describe anteriormente en el
paso 4 y 5.
Conjugado
anticuerpo globulina humana marcado Enzyme
Fig 12-4. Antiglobulina los métodos del
tipo ELISA
153
se añade (8) Solución de sustrato inmediatamente a todos los

pocillos y se incubó en la oscuridad durante el período de tiempo
definido a la temperatura correcta.
Cuando se añade la solución de sustrato, se desarrolla
color en los pocillos que contienen conjugado unido por la
activación de sustrato por la enzima. Wells no tener conjugado
unido no cambian el color del sustrato. Así pozos reactivos que
tienen anti-VIH sueros positivos son de color, y los pocillos que no
contienen anti-VIH sueros son incoloros. Los controles muestran
cambios de color apropiados. (9) Al final de la incubación, se diluyó
ácido (1 N H 2 ASI QUE 4) solución se añade a todos los pocillos para
detener la reacción. El ácido inactiva la enzima y fija el color. La
intensidad del cambio de color es directamente proporcional al
concentrado anticuerpo presente en las muestras / los controles.
El cambio de color se puede leer visualmente. (10) Las densidades
ópticas (valores de DO) de las soluciones en los pocillos se miden
por lector de ELISA a la longitud de onda específica después de
determinar el valor de corte y los resultados se determinan.
Método competitiva ELISA Los principios de la prueba ELISA
competitiva son los mismos que el de ensayo de antiglobulina
pero
Fig 12-5.
Método ELISA competitivo
difiere ligeramente en la forma en que se detecta anti-VIH.

• El conjugado y los sueros de prueba se añaden al mismo tiempo en los pocillos y se incubaron juntos.
• El conjugado se marcado con enzima anti-VIH de anticuerpos en ELISA competitivo, más bien, de anticuerpo marcado no
específico como en antiglobulina de tipo ELISA.
• El conjugado anti-VIH compite con anti-VIH en el suero de prueba para el sitio de unión de antígeno. A smaple de ensayo
que contiene anti-VIH bloquear la unión del conjugado al antígeno mientras que la muestra no contiene anti-VIH se permitir la
unión del conjugado al antígeno. Método: (Véase la figura 12-5)
1. sueros sin diluir y el conjugado se añaden en pocillos al mismo tiempo. Los controles positivos y negativos también se ponen.
2. Los pocillos se incubaron durante el período definido y a temperatura correcta. Durante esto
154
período anti-VIH presente en el suero de ensayo

compite con el conjugado anti-VIH para los sitios
de unión en el antígeno viral.
3. Al final del período de incubación, la

pocillos se lavan con el fluido de lavado para eliminar
el exceso de suero y el conjugado y preparado para
el siguiente paso, como se describe en el ensayo
tipo antiglobulin-.
4. La solución de sustrato se añade inmediatamente a

todos los pocillos y se incubó en la oscuridad durante
el período definido y a temperatura correcta.
5. Al final del periodo de incubación,

ácido diluido (1 NH 2 ASI QUE 4) se añade a todos los
pocillos para detener la reacción.
6. Un color intenso no significa una
muestra reactiva, mientras que falta de color significa
un espécimen de reactivos.
7. Las densidades ópticas (valores de DO) de la
solución en los pocillos son leídos por el lector de
ELISA después de determinar el valor de corte, y los
resultados se determinan.
Fig 12-6 Sandwich

Método ELISA
Sandwich ELISA Método:

El principio básico del sandwich ELISA es de nuevo el mismo que el de tipo de antiglobulina ELISA, pero se diferencia en la
forma en que se detecta el anti-VIH.
• Antígeno, péptidos generalmente sintéticos están unidos a la superficie de los pozos en microplacas.
• El conjugado es el antígeno sintético marcado con enzima en sándwich ELISA, en lugar de enzima ligada inmunoglobulina
anti-humana en el ensayo de tipo de antiglobulina.
• Durante el período de incubación, el antígeno conjugado se une el anticuerpo anti-VIH unido al antígeno
inmovilizado en los micropocillos.
• Un sándwich está construido de antígeno-anticuerpo-antígeno.
• Al final del periodo de incubación, ácido (1 H diluir 2 ASI QUE 4) se añade a todos los pocillos para detener la reacción.
• Un color intenso significa una muestra de reactivo que tiene el VIH, mientras que falta de color significa un espécimen no reactivos
que no tienen el VIH.
• Las densidades ópticas (valores de DO) de la solución en los pocillos son leídos por el lector de ELISA después de
determinar el valor de corte, y los resultados se determinan. Método: (Véase la figura 12-6)
1. Sera o sueros diluidos se añadieron a pocillos unido a antígeno. Los controles positivos y negativos
155
También se ponen. Los pocillos se incubaron durante el período de tiempo definido y a la temperatura correcta.
Durante este período anti-VIH presente en el bind sueros al antígeno.
2. Al final del período de incubación, los pocillos se lavaron con solución de lavado para eliminar
el exceso de suero y los pocillos se preparan para el siguiente paso como se describió anteriormente.
3. El conjugado se añadió a los pocillos. Los pocillos se incubaron durante el período de tiempo definido y a la
temperatura correcta. Durante este periodo, el conjugado se une al anticuerpo unido al antígeno inmovilizado. Un
sándwich está constituido por antígeno-anticuerpo-antígeno.
4. Al final del periodo de incubación, los pocillos se lavan con líquido de lavado para eliminar
conjugado no unido y el pozo se preparan para el siguiente paso, como se describió anteriormente.
5. La solución de sustrato se añade inmediatamente a todos los pocillos y se incuban en el período de tiempo definido y a
temperatura correcta.
6. Al final del período de incubación, ácido (1 NH diluido 2 ASI QUE 4) se añade a todos los pocillos para detener la
reacción.
7. Se desarrolla color en los pocillos que tienen sueros que contienen anti-VIH y no voluntad el color se desarrolla en
los pocillos que tiene sueros sin anti-VIH.
8. Las densidades ópticas (valores de DO) de las soluciones son leídos por el lector de ELISA después de calcular el valor
de corte, y los resultados se registran. Precauciones en ELISA
• Hemolizadas, lipémicas o contaminado sueros de la muestra no debe ser utilizado.

• Se añaden volúmenes correctos de las muestras de ensayo, el conjugado y sustrato.
• Instrucciones dadas por los fabricantes de kits deben seguirse estrictamente. Los ensayos de aglutinación
de partículas
ensayo de aglutinación de partículas detecta la presencia de anti-VIH por la aglutinación de partículas recubiertas con antígenos
del VIH. Las partículas están hechas de gelatina o látex. El ensayo se realiza en microplacas. Método:
1. antígeno del VIH se inmoviliza sobre partículas hechas de gelatina o látex.

2. Las muestras de ensayo y los controles se diluyeron en micropocillos con diluyente de ensayo que se proporciona con los ensayos.
Fig ensayos de aglutinación de

partículas 12,7
156
3. Las partículas de VIH recubiertas se añaden a las muestras y los controles diluidos. Luego se incuban, por lo general a
temperatura ambiente (20-24 ° C) durante el período definido. Durante la incubación, las partículas son aglutinadas por
anti-VIH presente en el suero.
4. Al final del período de incubación, el resultado de las pruebas se puede leer a simple vista. Si se utilizan partículas de
gelatina, en que aparecen en color azulado. Si se utilizan partículas de látex, que aparecen de color blanco que se
puede ver sobre un fondo negro.
5. Un resultado reactivo aparece como una estera uniforme de partículas aglutinadas a través de la parte inferior de los pocillos. Un
resultado no reactivo aparece como un botón o un anillo de partículas no aglutinado, que se instalan en el centro de bien. Véase la figura
12-7. Ventajas de ensayo de aglutinación de partículas:
• No se necesitan equipos costosos.

• No tener diferentes etapas de reacciones.
• No se necesita equipo de lavado.
• Los resultados pueden ser leídos visualmente
Desventajas de ensayo de aglutinación de partículas:

• error subjetivo en la reacción débil
• suero de ensayo que tiene aglutininas no específicas, puede aglutinar ambas partículas sensibilizados y no
sensibilizados. Especializada prueba de la mancha rápido
Detecta anti-HTV. Es rápido y sencillo y se basa en la técnica de ELISA / EIA. El antígeno del VIH, el péptido por lo general recombinante o
sintético, se inmoviliza en bien de membrana porosa o semi-porosa normalmente se establece en un pozo, en un casete de plástico que contiene la
almohadilla absorbente. La mayoría de los ensayos rápidos son especializados en la forma de un kit que tiene todo lo necesario para la prueba.
Método;
1. La solución de muestra de ensayo y tampón (proporcionado con el kit) se ponen en la membrana porosa y se dejó en remojo en.
Puede ser necesario pre-dilución de la muestra de ensayo. Esto se logra mediante la adición de gotas de diluyente y la muestra en
un vial adecuado. La muestra diluida es entonces directamente poner en la membrana porosa.
2. Se incuba durante 10-15 minutos. Durante este período la muestra pasa a través de la membrana y si
contiene anticuerpos anti-VIH, que se unirá al antígeno del VIH en la membrana.
3. La membrana se enjuaga con la solución tampón para eliminar los anticuerpos no unidos.
4. A continuación, se añade conjugado. La composición del conjugado varía entre ensayos. Algunos ensayos utilizan una
enzima conjugada anti-inmunoglobulina humana como en antiglobulina de tipo ELISA. Cuando se utiliza tal conjugado, una
etapa de lavado adicional y la adición de cromógeno se requiere para visualizar los resultados. Algunos ensayos utilizan
proteína A marcada con oro coloidal como el conjugado. Se unirá al anti-VIH presente y da un color rojo / púrpura.
5. El resultado final se lee visualmente y se compara con los resultados esperados descritos por el fabricante.
6. Aunque no es necesario un control, es una buena práctica para establecer un control negativo y un control positivo
débil.
157
Nota: Las instrucciones proporcionadas por los fabricantes de kits de detección deben seguir estrictamente
para obtener resultados fiables.
Especializada méritos de Prueba Rápida

• Muy sensible
• Tiene la ventaja de la velocidad y la sensibilidad
• Útil en los bancos de sangre pequeños.
• Útil en emergencia
• Los resultados se pueden leer visualmente
• Ningún cálculo se requiere deméritos
de Specialized método rápido

• Costoso
• Los resultados falsos positivos debido a las partículas en las muestras de ensayo (Ghost Dot)
• Los resultados no pueden ser conservados.
Ensayo de confirmación / suplementario

De Western Blot confirmatorio es prueba muy específica / suplementario y al mismo tiempo se consideró como 'patrón oro'. La técnica es
útil para determinar con qué componentes virales los anticuerpos reaccionan. Es relativamente especializado y prueba costosa y no es
apropiado para el cribado de las donaciones de sangre. Ya no se recomienda como prueba confirmatoria de rutina. Western blot o
inmunotransferencia
Esta es la técnica ligado a enzimas immunoelectro de transferencia de blot (inmunotransferencia) y se utiliza para detectar humano
anti-VIH. Es la prueba de confirmación de elección. Detergente interrumpida viriones de VIH purificados se separan en varias proteínas
(antígenos) de acuerdo con su peso molecular relativo por electroforesis en un gel de poliacrilamida losa en presencia de dodecilsulfato de
sodio (SDS). Las proteínas del VIH separadas se transfirieron a una membrana de nitrocelulosa. Ellos conservan sus posiciones relativas
alcanzadas en la separación. La membrana de nitrocelulosa antígeno impregnado se corta a continuación en tiras, teniendo cada tira la
gama completa de las proteínas virales que fueron separados en el gel (figura
12.8)
Método:
• tiras de nitrocelulosa individuales se incuban con muestras de suero o plasma en los pocillos de la bandeja de incubación.
Los controles no reactivos y débilmente reactivos se incluyen con cada serie, sin importar el número de muestras de
ensayo.
• El fuerte control reactivo se utiliza para establecer criterios de reactividad de bandas y se incluye con la primera ejecución para
cada kit y no está incluido en ejecución posterior a menos que la tira está fuera de lugar. La figura 12.9 muestra bandas
VlH-específicas para el control fuertemente reactiva.
• Durante la incubación, si los anticuerpos del VIH están presentes en la muestra, que se unen con antígenos virales
unidos a la tira de nitrocelulosa.
• Al final de la incubación, los pocillos de la bandeja de plástico se aspiran y las tiras se lavan para eliminar el material
no unido.
• Anti-VIH unido a los antígenos del VIH en tiras se detecta por el anticuerpo de inmunoglobulina antihumana al
que la biotina se ha unido. La unión de este anticuerpo trazador a la
158
inmunoglobulina humana se detecta por la adición de un conjugado enzima-avidina, seguido por la aplicación de
sustrato. Este sustrato cambia de color en presencia de enzima y permanentemente las manchas de las tiras.
Ubicación o posición en la que los anticuerpos en la muestra se unen a antígeno viral en tiras indican si el anticuerpo es
específico para el antígeno viral o no.
Fig. 12.8 Fig. 12.9

VIH-1 antígenos en tira de nitrocelulosa H1V-1 patrón de transferencia de Western de control reactivo
interpretación de resultados
La presencia o ausencia de anticuerpos anti-VIH en una muestra se determina por comparación de cada tira de nitrocelulosa de la
muestra de ensayo con las tiras utilizadas para los controles no reactivos y débilmente reactivos probados con la carrera, y la tira
utilizada para el control fuertemente reactivos probados una vez con el kit. Figura 12-9, indica las bandas en la tira se usa con el control
fuertemente positivo.
159
• Un donante es considerado positivo para anti-VIH si bandas a la proteína p24 gag; proteína pol p 31 y env glicoproteína
gp 41 y gpl 60/120 están presentes.
• Recientemente criterio menos estricto pero igualmente específica están surgiendo, lo que requiere la presencia de
anticuerpos a al menos una de las proteínas gag (p 17, p 24, y p 55), una de las proteínas pol (p 31, p 51, p 66) y uno de
los glcoproteins env (gp 41, gp 120, y gp 160).
• Otras bandas que no cumplen con los criterios de resultados positivos se evalúan como "indeterminado" y son una nueva investigación en
una fecha posterior después de 3 a 6 meses.
• Si hay información de diagnóstico indicativos de la infección por VIH, el patrón blot puede interpretarse más liberalmente,
y se requieren bandas que representan sólo dos genes estructurales para una interpretación positiva.
• Un patrón blot sin líneas se interpreta como "negativo"

• Uno de los patrones difíciles de interpretar es el hallazgo de los anticuerpos reactivos a una de las proteínas gag. Este patrón se
encuentra durante la seroconversión en las personas expuestas a la infección por el VIH y desarrollar una respuesta inmunitaria
completa más adelante. Este patrón también se puede encontrar entre las personas que no tienen riesgo de infección por el VIH y no
desarrollan respuesta inmune completa con otros productos de genes de VIH después. Recomendaciones para el VIH 1 y 2 pruebas
Sera de todas las donaciones de sangre se analizan para determinar anti-HIV 1 & 2 por ELISA / EIA. Sera no reactivo en la primera
proyección se consideran como VIH negativo y se recomiendan para transfusión, mientras que un suero reactivo en la primera proyección
se considera VIH positivo y no se utiliza para la transfusión y se descarta.
Las pruebas confirmatorias son importantes para determinar cómo aconsejar a un donante de sangre saludable y si es o no puede ser notificado.
El esquema general es el siguiente:
ELISA de detección
reactiva Repetir ELISA por duplicado Si uno No reactivo, donación es segura
o ambos Postive Si ambas negativas, para transfusión
VIH negativo
De Western Blot se hace
El abogado Revaluar negativo

positivo o Notify (si así lo después de 3 meses
requiere (Notificará-opcional)
ley)
En la selección de las pruebas de anticuerpos del VIH para su uso, la primera kit ELISA debe tener la más alta sensibilidad, en tanto que para las
pruebas de repetición de kits de ELISA deben tener especificidad más alta que la primera. La OMS ha recomendado anti-HIV 1 & 2 de ensayo con
ELISA o ensayo de punto rápido.
160
Antigen ensayos de detección del VIH

Estos son pruebas sensibles y específicos dirigidos a antígenos virales o ácidos nucleicos y su disponibilidad ha llevado a propuestas para el uso
de estos ensayos en el cribado de la sangre donada para detectar sangre infectada por VIH antes que con ensayos de anticuerpos actuales.
La detección de antígeno de VIH ha muy limitado valor en servicios de transfusión de sangre, sin embargo, puede ser útil en las
siguientes condiciones:
• La detección de la infección por VIH durante el período de ventana antes de la seroconversión.
• La confirmación de la infección por VIH en niños nacidos de madres infectadas por el VIH.
• Puede ayudar a resolver los resultados indeterminados prueba de Western Blot.
• Para controlar a los pacientes infectados por el VIH en tratamiento antiviral.
Métodos para las pruebas de antígeno de VIH.

• ELISA para el antígeno p24 del VIH pruebas
• Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR).
• 'El aislamiento del virus
La detección de VIH antígeno (ELISA): Investigación para el antígeno

del VIH (por lo general p 24) se realiza utilizando ELISA de tipo
sándwich. La diferencia entre el VIH-antígeno y detección de
anticuerpos anti-VIH es que la prueba del VIH-antígeno utiliza un
sándwich de anticuerpo anticuerpo-antígeno, a diferencia de
detección de anticuerpos VIH que comprende un sándwich de
anticuerpo-antígeno antígeno.
• Anticuerpo (generalmente mono-clonal) se une a

la superficie de los pocillos de micro.
• suero de prueba y los controles positivos y

negativos se añaden a los pocillos y se
incubaron. Al final del período de incubación, el
exceso de suero se lava.
• se añade conjugado y se incuba. El conjugado es

un anticuerpo específico marcado con enzima
(generalmente monoclonales).
• Durante la incubación, el conjugado se une Fig 12.10 VIH Antígeno ELISA

VIH-antígeno unido al anti-
VIH inmovilizado en la microplaca. Un sándwich está formado de anticuerpo-antígeno-anticuerpo.
• El exceso de conjugado se elimina por lavado y el sustrato (cromógeno) se añade en la misma forma que en el ensayo de
antiglobulina y se incubaron.
161
• Al final del periodo de incubación, ácido diluido (1 H 2 SO4) se añade a todos los pocillos para detener la reacción.
• Un color intenso significa una muestra de reactivo que tiene el VIH, mientras que falta de color significa un espécimen no reactivos
que no tienen el VIH.
• Los densites ópticas (valores de DO) de la solución en los pocillos son leídos por el lector de ELISA después de determinar
el valor de corte, y los resultados se determinan (Fig. 12,10). Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) para el VIH
PCR es el ensayo más sensible para la detección de la infección por VIH. PCR detecta la infección por VIH antes de las pruebas para el
antígeno o anticuerpo por otros métodos y período de ventana así aún más acorta (tiempo entre la infección y la conversión sero). Esta prueba
depende de la amplificación del VIH integrado en el ADN de células infectadas. sistemas de reacción en cadena de polimerasa requieren varios
ciclos con una polimerasa termoestable a temperaturas cuidadosamente controladas y necesitan cebadores específicos presentes en las
plantillas para el ADN amplificado. La detección del producto de amplificación es por una sonda marcada en un ensayo de
inmunotransferencia. Este método requiere un control muy cuidadoso para asegurar que las reacciones positivas son específicos.
Las pruebas de PCR de rutina pueden tener sólo un pequeño impacto sobre la seguridad de la sangre con respecto al VIH, sin
embargo, el potencial para el cierre del período de ventana para la infección por VIH es significativo. La aplicación de la prueba de PCR de
rutina de sangre de los donantes requerirá desarrollo de sistemas automatizados que eliminarán el consumo de pasos necesarios para extraer
el ADN y para preparar muestras de tiempo.
Asociada a la transfusión HEPATITIS

Al menos cuatro virus se han asociado hepatitis post-transfusión:
1. Hepatitis A (VHA)
2. virus de la hepatitis B (HBV)
3. virus de la hepatitis C (HCV)
4. Virus de la hepatitis D (VHD)
Se han reportado varios otros virus que causan la hepatitis. virus de la hepatitis E se ha reportado que causa la hepatitis
epidemia asociada con el agua contaminada. La mayoría de transfusión asociada hepatitis son debidos a HBV o HCV. Virus de la
hepatitis A
La infección es generalmente el resultado de la propagación viral por alimentos o agua contaminados debido a modo fecal-oral de transmisión.
HAV está presente en la sangre durante un corto período de tiempo y no hay estado de portador crónico en seres humanos. El período de
incubación es de 15-40 días.
infección por el VHA transmitida por la transfusión ha ocurrido, pero es muy raro. Un brote de infección por VHA se ha informado en los
receptores de factor de coagulación disolvente tratada con detergente. La infección por transfusión de requerir que los donantes tiene la viremia y
el destinatario sea susceptible al virus. La viremia, si se produce, por lo general es BERIEF y en el momento de la enfermedad, cuando nadie va a
donar sangre. Anticuerpos contra el VHA regularmente aparece después de la infección y por lo tanto gran número de la población tiene
inmunidad. La rareza de la infección por el VHA después de la transfusión no quiere pruebas de rutina de los donantes.
162
Virus de la Hepatitis B
virus de la hepatitis B es en la familia de Hepadnaviridae. En 1945, era aficionado a los seres humanos por Blumberg y compañeros de
trabajo en el suero de un aborigen australiano, que llamaron antígeno Australia.
En humanos el virus es de 42 nm de diámetro que consiste en un núcleo de 28 nm con ADN circular de doble cadena y la ADN
polimerasa. El núcleo está rodeado por una proteína de recubrimiento HBsAg, que también se produce libre en el suero como 22 esferas
nm y 22 nm a 200 filamentos nm. El virión contiene otras dos proteínas; hepatitis Sé antígeno (HBeAg) y el antígeno del núcleo (HBcAg).
Tanto estos antígenos (proteínas) están asociados con el núcleo de la cápside del virión (Fig. 12-11).
antígeno HBc
soluble
Figura 12.11 Representación esquemática de HBV
La transmisión de la infección por VHB:

La transmisión de VHB es principalmente por vía parenteral que implica el contacto directo con el fluido corporal. La ruta más
común de infección son:
• Contacto con sangre infectada, ya sea por la exposición de las heridas a la sangre infectada o a las agujas y jeringas
contaminadas utilizadas en la inyección de drogas, el tatuaje, la perforación del oído, o la acupuntura.
• El contacto sexual
• transmisión neonatal o perinatal
• La transfusión de sangre o productos sanguíneos infectados. Los
hallazgos serológicos (Figura 12-12)

El período de incubación de la infección por VHB es de aproximadamente 30 a 150 días durante el cual el paciente no tiene signo y síntoma pero
el virus puede ser detectado.
• Cuando un individuo está infectado por HBV varios de antígenos y anticuerpos se pueden detectar mediante pruebas serológicas. Por lo
general, el primer marcador de VHB en aparecer es HBsAg. Sigue siendo detectable desde unos pocos días hasta varios meses. Este
marcador también se encuentra en algunos (5% - 10%) infectados por personas que se convierten en portadores crónicos del VHB.
• Anti-HBs se hace detectable después de HBsAg desaparecer lo que indica la recuperación de la enfermedad aguda. A veces
aparición de anti-HBs se retrasa por semanas y meses después de HBsAg se convierte en indetectable. Durante este período,
llamado 'ventana núcleo anticuerpo', anti-HBc puede ser el único marcador detectable de infección reciente HBV.
163
Manual técnico Transfusion Medicine
Semanas después de la exposición Figura

12.12 Marcadores en la infección por el VHB
• Poco después de la infección y antes de los signos y síntomas clínicos o cambios bioquímicos en las funciones del hígado
produce, otros dos marcadores - HBeAg y anti-HBc son detectables en el suero de la persona infectada.
• Inicialmente, el anti-HBc IgM es, sin embargo, como aparece el progreso infección IgG anti-HBc y la posterior persiste en
las personas que se recuperan de la infección.
• HBeAg generalmente desaparece cuando el paciente entra en la fase convaleciente.
• En otras personas con infección crónica (persistencia de HBsAg durante más de 6 meses), se borra HBeAg y anti-HBe se
encuentra.
• En las personas que no desarrollan inmunidad al VHB, HBsAg, HBeAg y anti-HBc puede estar presente.
• Los individuos, que se recuperan de la infección, tendrán anti-HBs y / o anti-HBc en el suero. marcadores serológicos
de infección por hepatitis B y su importancia diagnóstica. Marcador
Significado
HBsAg La infección activa, aguda o crónica
Anti-HBs La recuperación clínica, infección resuelta, la inmunidad a desarrollar
Anti HBc (IgM) infección aguda temprana
Anti- HBc (IgG) La infección activa o pasada (estado de portador)
HBeAg infección crónica o aguda grave
anti-HBe Resolución de la infección aguda, puede ser señal de secuelas tardías
Prueba de detección para el VHB

Una variedad de marcadores serológicos aparecer después de la infección con HBV, y uno de éstos es HBsAg. Este antígeno aparece
antes de evidencia biológica de la enfermedad hepática o ictericia. Esta persiste durante toda la fase aguda de la enfermedad y
disminuye durante la convalecencia.
Procedimientos para la detección de HBsAg han evolucionado desde el método de agar insensible relativa difusión en gel a
las técnicas sensibles y fiables de radioinmunoensayo e inmunoensayo enzimático. Ambos son pruebas de tercera generación y
son igualmente sensibles. procedimiento ELISA tiene una amplia aplicación en la detección de HBsAg y anticuerpos anti-HBs.
164
El desarrollo del color (slopped

mediante la adición de H 2 ASI QUE 4)
Figura 12,13 secuencia esquemática para la detección de HBsAg por ELISA.
Inmunoensayo enzimático (ELISA / EIA)

Se basa en un principio de un paso 'sandwich'. Esto implica el uso de soporte sólido (pocillos de microplaca o perlas), recubierta
con no marcado antobody anti-HBs. Número de kits comerciales están disponibles y el procedimiento recomendado por el
fabricante deben ser seguidas. Los pasos generales de la técnica de la prueba en microplaca se dan a continuación. Véase la
figura 12-13.
1. Ponga volumen apropiado de la muestra de prueba y un volumen igual de controles positivos y negativos en los pocillos
de microplacas recubiertas con anti-HBs.
2. Incubar durante el período de tiempo correcto a temperatura definida.
3. Al final del periodo de incubación, los pocillos se lavan para eliminar el exceso de suero y secar los pozos tanto como sea
posible antes de la siguiente etapa del ensayo.
4. A continuación, añadir volumen apropiado de conjugado (unido a enzima anti-HBs anti-cuerpo) a cada pocillo. marcador de enzima
es por lo general peroxidasa de rábano picante.
5. Incubar durante el período de tiempo correcto a temperatura definida.
6. Después de la incubación, los pocillos se lavan y se preparan para el siguiente paso.
7. Añadir un volumen apropiado de sustrato cromógeno en los pozos.
8. Se incuba la placa en la oscuridad durante correcto periodo de tiempo, el desarrollo del color sugiere la presencia de
HBsAg, y no o poco color sugiere ausencia de HBsAg.
9. Los resultados se pueden leer visualmente o por lector de ELISA. Radio
Inmuno ensayo (RIA)

El método de RIA es similar a ELISA. También es prueba de sándwich en fase sólida. Plastic perlas, tubos o pocillos de microtitulación se
recubren con anticuerpo anti-HBs. Los principios generales y las etapas de la técnica se describen a continuación: (Fig. 12-14).
1. En la primera etapa de HBsAg en el suero de ensayo se une al anticuerpo en fase sólida. Después de incubación las
proteínas no unidas extraños y tluid en la prueba se retira por aspiración y lavado.
2. En el segundo yodo radioactivo etapa (1 l25) - Se añade anticuerpo anti-HBs vinculado. Después de la incubación, el
anticuerpo yodo ligado no unido se elimina por aspiración y lavado.
165
3. Medir la cantidad de la envolvente de yodo ligado anti-HBs con contador gamma. Calcula el
media de los controles negativos.
Un resultado positivo es por lo general cualquier valor más de 2 a 2,5 veces del recuento medio de control negativo.
reacciones falsos positivos para HBsAg pueden ocurrir con EIA o RIA. Los resultados pueden ser confirmados por repetición o prueba de
neutralización de confirmación.
Figura 12.14: secuencia esquemática para la detección de HBsAg por RIA. Medidas de seguridad
para el personal que trabaja en el laboratorio.

• Comer, beber y fumar están prohibidos en el laboratorio.
• pipetear con la boca está prohibido.
• El personal debe usar guantes desechables durante la manipulación de la muestra.
• Las manos deben lavarse antes de salir del laboratorio.
• El personal del laboratorio debe tener batas de laboratorio para proteger su ropa.
• HBsAg material positivo y desechable utilizado en la prueba se deben poner en contenedores a prueba de fugas. Ellos deben ser
etiquetados como infecciosos y esterilizarse en autoclave antes de deshacerse de ellos o se incineran.
• Mesa de trabajo debe limpiarse después de la prueba. Eliminar derrames con hisopos empapadas en 1,0 solución de hipoclorito por
ciento inmediatamente.
• En el caso de la inoculación accidental de sangre positivo HBsAg o la secreción en los individuos, la inyección
profiláctico de HBIG debe ser dada.
El tipo VHC, VHD, VHE y VHG se han identificado, de entre los no - A, no B (NANB) grupo de virus de la hepatitis, sin
embargo, todavía hay algunos tipos de hepatitis que no presentan anticuerpos frente a cualquiera de estos tipos
conocidos y de ahí el término no-a, no-B (NANB) todavía está en uso. Buscar aún más y nuevos virus hepatotropos
continúa. Hepatitis C (VHC)
Hepatitis C (VHC) es la causa más común de poste transfusión no A, hepatitis no-B en todo el mundo. La
prevalencia de anticuerpos de HCV en donantes de sangre de 166

países desarrollados rangos de 0,4 a 2%. Sin embargo, en Egipto es tan alta como 14%. La prevalencia de HCV en donantes
de sangre de la India no ha habido estudios ampliamente pero según algunos informes disponibles la prevalencia de anti VHC
varía forma 0,6% a 5,2% en donantes voluntarios / recambio.
75% - 80% de la infección por VHC se informa de progresar a una infección crónica de los cuales 10% - 20% puede progresar a
cirrosis y carcinoma hepatocelular.
El período de incubación promedio es de 6 - 7 semanas, puede ser tan menos como 2 semanas o tanto como 26 semanas, la enfermedad aguda
(ictericia) es leve.
acciones VHC relación con los flavivirus. Estructura del virus de la hepatitis C (HCV) ha sido recientemente identificado por
técnicas de clonación. El virus es un solo virus ARN con envuelta Standed, 50-60 mm de diámetro con un genoma que
contiene aproximadamente 9500 bases que codifican para aproximadamente 3000 aminoácidos. El genoma consta de un
muy conservadas región no codificante 5' (NCR), que se utiliza generalmente para la amplificación PCR y tienen funciones
reguladoras. Downsteam a la región no codificante son las regiones que codifican para los elementos estructurales,
incluyendo el núcleo o de la nucleocápside (C) y la envoltura (El, E2 / NSI), es actualmente claro si NS1 es aparte de la
región de la cubierta o el primer gen no estructural . El extremo 5' de E2 / NSI contiene una región hipervariable (HV) que
muta rápidamente y probablemente juega un papel clave en la capacidad del virus para escapar de la neutralización.
El clon inicial descubierto era de la región NS 4, la proteína derivada fue designado 5-1-1. Esto se expande para
formar el antígeno cl00-3, la base del ensayo EIA anti-HCV primera generación.
ensayo de segunda generación EIA añadió el antígeno y antígeno de núcleo de c33c c22 de la región NS3. Estos antígenos
aumentaron la sensibilidad del segundo ensayo de generación en alrededor de 20% en el
ensayo de primera generación.
Figura 12.15: genoma propuesta de HCV: equivalentes funcionales y los principales antígenos
utilizado en el ensayo de detección de anticuerpos.
167
ensayo de tercera generación EIA añade una proteína NS5 y reconifigures algunos de los antígenos anteriores. Ahora tiene péptidos
sintéticos que ofrecen la ventaja de minimizar la incidencia de reacciones no específicas. Los EIA de tercera generación sólo tienen
beneficios adicionales en la prevención de enfermedades.
Instrucciones dadas para los métodos por los fabricantes de los kits deben ser estrictamente. Debido al problema de no especificidad,
es importante confirmar la reactividad EIA con un ensayo suplementario, un ensayo de inmunotransferencia recombinante (RIBA) que
muestra los epítopos clave en una forma lineal sobre una tira de nitrocelulosa. Ahora en RIBA las proteínas recombinantes C22-3 y
cl00-3 se sustituyen con péptidos sintéticos que representan sólo una parte de las respectivas regiones de codificación y sustituyendo
5-1-1 antígeno con NS5 recombinante. Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) para el VHC
La detección de la infección por VHC durante la fase temprana de la infección es posible por la detección de ARN-VHC por diversas técnicas
de amplificación de ácidos nucleicos técnicas de biología molecular. la amplificación por PCR puede detectar bajo nivel de ARN de VHC en el
suero. Ensayo de ARN de VHC es una manera fiable de lo que demuestra que la infección de hepatitis C está presente y es la test.Testing
más spefific de ARN de VHC por PCR es útil en:
• En el paciente imunodepressed.
• En los pacientes que tienen trasplante de órganos recientemente.
• En ensayo de inmunotransferencia recombinante indeterminado.
• En la infección aguda como viremia VHC ocurre mucho antes del desarrollo de anti-HCV. Ciertas técnicas de detección
rápida de anticuerpos tales como prueba immunochromatic (ITC) están también disponibles.
Antes del desarrollo de marcadores específicos determinados marcadores indirectos, es decir, determinación de aminotransferasa en
suero de alanina (ALT) y los anticuerpos contra el antígeno central de la hepatitis (anti-HBc) se han utilizado para identificar los
donantes de alto riesgo para la transmisión de la hepatitis NANB (VHC). Aunque los marcadores sustitutos jugaron un papel
importante en la prevención de la hepatitis C antes de la introducción de ensayos específicos de HCV pero actualmente el valor de
estas pruebas no son concluyentes y controvertido. En un estudio publicado de la India se encontró muy poca correlación entre los
marcadores indirectos es decir (anti-HBc y ALT) y anti - VHC donantes reactivos. Es demasiado pronto para comentar si la hepatitis
C (VHC) es la única causa de hepatitis NANB parenteral como el ensayo de anticuerpos de HCV actual no puede detectar el 100%
de la hepatitis NANB.
comunidad esporádica o adquirida hepatitis NANB debido a virus de la hepatitis C (HCV), sin antecedentes de exposición
parenteral ha sido identificado. La hepatitis D (virus delta)
También se conoce como hepatitis delta. Es causada por virus ARN defectuoso que es incapaz de producir su propia capa de proteína y por lo
tanto a sí mismo abrigos con antígeno de superficie de HBV. El virus delta es dependiente preexistente o concomitante infección por el VHB para
su propagación. Co-infección causa la hepatitis viral aguda, que a menudo se convierte fulminante y es normalmente fatal, mientras que la
superinfección causa la hepatitis aguda progresa a hepatitis activa crónica y cirrosis en 75% de los portadores.
168
Delta hepatitis tiene modo parenteral de transmisión y por lo general sigue la infección por VHB. Aunque las pruebas para el antígeno delta
y el anticuerpo existen, pero no se deben utilizar en el cribado de donantes de sangre como todas las infecciones con virus delta son positivos
para HBsAg. Por lo tanto las pruebas de rutina para HBsAg eliminará el riesgo de su transmisión. HEPATITIS G VIRUS (HGV)
virus de la hepatitis G es un virus de ARN con envoltura y pertenece a la familia flavivridae. El virus fue descubierto en 1995. El
genoma del virus es similar a la de HCV con el que comparte una homología del 25% a nivel de nucleótidos. El Permiso aparece
menos variable aunque se han descrito variantes. HGV se replica en células de sangre periférica, pero su replicación en el hígado es
todavía cuestionable. El modo de propagación de HGV es casi igual que el VHC. El HGV se puede detectar en el suero por la
tecnología de ácidos nucleicos (PCR). Recientemente un inmuno-ensayo ha sido desarrollado para detectar anticuerpos contra HGV.
La prevalencia de HGV en la población de donantes de sangre haciendo prueba de anticuerpos en los países desarrollados
oscila entre 1 a 5%, pero la detección de anticuerpos en general indica la recuperación de una infección y, probablemente, la
inmunidad al agente de HGV. VIRUS CYTOMEGALOUS (CMV), la infección
CMV es conocida por estar realizado en los leucocitos, por lo tanto, componentes de la sangre que contienen células blancas de la sangre son
más propensos a transmitir la infección por CMV. componentes derivados de plasma y derivados no son probablemente infecciosa para CMV.
Transmitida por la transfusión CMV puede causar una enfermedad grave en el bebé prematuro seronegativos de bajo peso al nacer y los
pacientes inmunodeprimidos seronegativos
por ejemplo, los receptores de trasplante de médula ósea o pacientes con infction VIH. Desde hace más de un 50-80% de los adultos en los países
desarrollados y más del 90% en los países subdesarrollados tienen anticuerpos frente al CMV, por lo que no es práctico o conveniente examinar a
los donantes de sangre para la infección por CMV. Sin embargo, los servicios de transfusión de sangre deben tener el panel de donantes
negativos CMV. En los pacientes seronegativos grupo de alto riesgo, es aconsejable utilizar la sangre negativo de CMV o utilizar leucocitos de la
sangre empobrecido. Las pruebas de detección de CMV
• aglutinación de látex
• inmunoensayo enzimático
• Fijación del complemento
La prueba de aglutinación de látex se utiliza sobre todo en los centros de transfusión de sangre debido a que es simple y rápida.
virus linfotrópico de células T humanas I y II

HTLV I y II son retroviuses. Ambos son celda asociada y no están presentes en el plasma. HTLV-1 ha demostrado estar asociado con células
T del adulto leucemia-linfoma y diversas condiciones neurológicas originalmente llamado paraparesia espástica tropical pero ahora a menudo
llamado mielopatía por HTLV-asociado (HAM). El período de incubación para la infección por HTLV-1 es muy largo y 2-4% de las personas
seropositivas desarrollan la enfermedad.
La importancia de HTLV-11 no está claro. Por lo general se asocia con el abuso de drogas por vía intravenosa y se ha encontrado en algunos
casos de leucemia de células pilosas.
la infección por HTLV-1 puede transmitirse por la sangre, lo que ha causado preocupación en aquellas partes del mundo donde el
virus es frecuente, sobre todo en algunos países en el Pacífico occidental y el
169
cuenca del Caribe. Las encuestas realizadas en Europa y América del Norte indican que HTLA-1 infección es muy rara.
Transmisión
• Se transmite con la transfusión de componentes celulares de la sangre. Después de un almacenamiento refrigerado durante 10 días
o más, los glóbulos rojos de un donante infectado son mucho menos propensos a causar sero-conversión
• La transmisión por contacto sexual (predominantemente macho a hembra)
• La transmisión de madre a hijo a través de la leche materna
la selección de donantes debe considerarse en aquellos países en los que el HTLV-1 es endémica. estudios epidemiológicos preliminares
son por lo tanto es necesario (OMS, 1992, Directrices para la organización de un Servicio de Transfusión de Sangre).
técnicas de ELISA se utilizan para las técnicas de precipitación radioinmunes cribado HTLV-1 anticuerpos, y Western blot,
inmunofluorescencia, o se utilizan para pruebas de confirmación. Es difícil diferenciar entre HTLV-1 y HTLV-11 a menos técnicas
avanzadas tales como la reacción en cadena de la polimerasa están disponibles. BACTERIAS
Las bacterias consisten en células distintas que poseen paredes celulares, y tienen una estructura muy simple y carecen de un núcleo verdadero.
Las bacterias pueden tener cápsulas que a menudo son importantes en la respuesta inmune. Ejemplo de bacterias comunes que son conocidos
para ser transmitida a través de la sangre es Treponema pallidum. Sífilis
agente etiológico de la sífilis es Treponema pallidum. La sangre y sus componentes pueden transmitir la sífilis. El período de
incubación para la sífilis transmitida transfusión es de 1 a 4 meses, el destinatario de la sangre que presenta los signos y
síntomas de la sífilis secundaria.
la sífilis transmitida por la transfusión no es un peligro importante de la terapia de transfusión moderna, sus principales razones son:
• Las espiroquetas no sobreviven en la sangre tratada con citrato se almacena a 4 ° C durante 72 horas.
• Ahora se recoge la sangre en su mayoría de los donantes voluntarios y las personas sexualmente promiscuas están excluidos
de la donación de sangre.
• La mayoría de los pacientes que necesitan transfusiones de sangre o de sus componentes reciben antibióticos terapia debido a su
condición clínica.
• El uso generalizado de la penicilina y otros antibióticos para el tratamiento de la sífilis y su portador podría explicar la rareza de los
casos infectados. El papel de la sífilis en la prevención de la sífilis después de la transfusión:
Espiroquetemia por lo general es común en las primeras etapas durante la invasión de los ganglios linfáticos. Las pruebas de detección utilizados
para los donantes de sangre a menudo son negativos en la sífilis temprana, cuando las espiroquetas pueden transmitirse por transfusión de
sangre. Sólo el 25% de los pacientes con sífilis primaria tiene una prueba serológica reactiva para sífilis (STS). y el resto no se conviertan en
positivo hasta la semana 4" los' después de la
170
aparición de la sífilis primaria. En el momento en que la persona desarrolla un STS positivos, el espiroquetemia normalmente ha despejado.
Además, una gran proporción de las personas sanas tienen reacciones positivas falsas biológicos aún no tienen espiroquetas
circulantes. Puede ser debido a las infecciones virales, la inmunización, lupus eritematoso y disproteinemias.
La prevención de la transmisión espiroqueta no está bien logra mediante la prueba STS. En cualquier caso se considera seguro para probar
la donación de sangre para la sífilis debido a las siguientes razones:
• Hay posibilidad de transmisión de la sífilis.
• La demanda de la sangre fresca de transfusión de intercambio, y plaquetas.
• La detección de espiroquetas ayuda a excluir a los donantes que están en el grupo de alto riesgo de infecciones por VIH y VHB.
• El costo de STS es baja.
pruebas
Las pruebas serológicas son de dos tipos:

• Las pruebas no específicas
• Prueba específica
de prueba no específico:
La prueba más comúnmente utilizada en la selección de donantes de sangre son pruebas no específicas debido a que son simple, rápida
y económica, son:
• Laboratorio de Investigación de Enfermedades venéreas (VDRL)
• VDRL (RPR) Las pruebas
específicas:
Estas pruebas son principalmente pruebas confirmatorias y tienen largos procedimientos. Ellos no son adecuados para la detección rutinaria de
los donantes de sangre. Las pruebas son:
• Treponema pallidum prueba de hemaglutinación (TPHA)
• prueba de absorción de anticuerpos treponémicos fluorescentes (FTA-ABS)
• Treponema pallidum prueba de inmovilización (TPI)
• Inmunoensayo enzimático
PROTOZOARIOS
Los protozoos son organismos unicelulares. Tienen una estructura celular bien definida con un núcleo claro y otros orgánulos. Una célula
típica está encerrado por una membrana citoplasmática. Esto puede ser cubierto en una capa citoplasmática exterior. Las proteínas presentes
en las membranas son importantes en la respuesta inmune.
Los ejemplos de infecciones por protozoos comunes, que se pueden transmitir debido a la transfusión de sangre son especies de Plasmodium.
Malaria
La malaria es causada por parásitos protozoarios intra-eritrocítica. Plasmodium vivax, P. falciparum,

P. ovale o P.malariac. El modo habitual de transmisión es a través de la picadura del mosquito Anopheles.
171
Sangre infectada con parásitos de la malaria también puede transmitir la infección. la malaria transmitida por la transfusión puede llegar a ser
evidente una semana a varios meses después de la transfusión de sangre infectada. El período de incubación de Plasmodium vivax y P.
falciparum es más corto por ejemplo, una semana a un mes, mientras que la de P. malariae es la más larga por ejemplo, muchos meses.
parásitos de la malaria sobrevive durante al menos una semana a 4 ° C en enteros concentrados sanguíneos y las células
rojas, y al menos durante una semana a temperatura ambiente en plaquetas. Las pruebas de detección para la malaria
(1) El examen microscópico de grueso y delgado frotis de sangre.

Es difícil encontrar parásitos en frotis de sangre en poco tiempo, especialmente si la densidad de parásitos es menor de 100
por microlitro de sangre. Sin embargo, es mejor método práctico para las pruebas de parásitos de la malaria
(2) Las pruebas de anticuerpo para parásitos de la malaria son:
• Prueba de inmunofluorescencia indirecta (IFA)

• ELISA (3) pruebas de Immuno-diagnóstico, incluyendo metodología de EIA (4) metodología sonda de ácido nucleico,
incluyendo la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Ninguno de los métodos anteriores, excepto el examen microscópico
de frotis de sangre es práctica y posible.
Dado que no existe un método apropiado para la detección de parásitos de la malaria en la donación de sangre, se ha sugerido
que la terapia de la quimioprofilaxis para la malaria se debe dar a todos los receptores de sangre en áreas altamente endimic.
inactivación viral
Con la aparición del VIH / SIDA hay una gran demanda de sangre y productos sanguíneos seguros garantizados. Hoy en día existe rigurosa
selección de sangre para prevenir la transmisión de la infección transmitida por la sangre, la transfusión de productos sanguíneos ya han
logrado un alto nivel de seguridad. La viremia "período ventana" puede reducirse aún más mediante el cribado de la sangre donada para
métodos de prueba de ácidos nucleicos. De este modo reducir aún más el riesgo y aumentar el ya elevado costo de las pruebas. MÉTODOS
DE aclaramiento viral
están siendo probado varios métodos para eliminar o inactivar virus que pueden estar presentes en las mezclas de plasma de la fuente o
donaciones de plasma recuperadas. Estos pasos podrían dividirse en dos grandes categorías: la eliminación, o de partición, es la
separación física de los virus o partículas virales de la sangre y los productos sanguíneos; y la inactivación, que destruye el virus de manera
que los fragmentos virales restantes carecen de la estructura y los componentes necesarios para infectar a un individuo que recibe el
producto de sangre o sangre.
procesos de eliminación incluyen la filtración, cromatografía de afinidad, cromatografía de intercambio iónico, y fraccionamiento
polietilenglicol. La inactivación de virus se ha intentado por calentamiento.
Además, algunos procesos, como los resultados de fraccionamiento de etanol, tanto en la eliminación e inactivación de los virus. Por
último, una serie de nuevos métodos están en desarrollo, tales como la irradiación, fotoinactivación y el tratamiento con una variedad de
productos químicos. Varias de estas nuevas técnicas
172
han sido incorporados en la producción de productos de investigación. Con el fin de ser eficaz, las técnicas de inactivación viral deben
destruir al menos un elemento viral esencial para la replicación. técnicas Fotosensibilizados utilizar la luz - colorantes activado que son
irradiados, haciendo que los tintes para convertir a las moléculas que pueden alterar de ADN o de membrana lipoproteínas. El tratamiento
con calor desnaturaliza las proteínas virales y ácidos nucleicos, representación virus incapaz de replicación. procesos de irradiación pueden
destruir los ácidos nucleicos virales mediante la inducción de roturas y vínculos. técnicas de detergentes solventes destruyen la envoltura
viral en lípidos - virus envueltos.
Ultra Violeta (UV) inactivación era uno de los método pensado para ser útil para este propósito, como la mayoría de los virus son muy
sensibles a los rayos UV, sin embargo, la corriente de opinión de los expertos es que la inactivación viral suficiente para que el propósito no es
factible sin nivel intolerable de dañar los diferentes componentes de la sangre.
la inactivación fotoquímica de los virus en los concentrados de plaquetas mediante el uso de novela psoraleno y largo - longitud
luz UV de onda, reduce significativamente la carga viral, pero no puede ser invocado por la eliminación total. Este proceso se basa en la
reacción fotoquímica de novela psoraleno (S - 59) con ácido nucleico, tras la iluminación con luz de onda larga longitud UV (UVA, 320 -
400 nm).
Recientemente (Nov. 2000) Gambro BCT anunció la inactivación de patógenos en productos sanguíneos, tales como glóbulos rojos
empaquetados por riboflavina y luz UV. La riboflavina puede inactivar patógenos en todos los tres principales componentes de la sangre que
corresponde a glóbulos rojos, plaquetas y plasma fresco congelado.
173
13
La enfermedad
hemolítica del recién
nacido (HDN)
Introducción
enfermedad hemolítica del recién nacido y el feto se debe a la destrucción prematura de los glóbulos rojos del feto en el útero y los recién
nacidos en el período neonatal temprana después del parto. La destrucción de glóbulos rojos se provoca más comúnmente por los
anticuerpos IgG producidos por la madre debido a la incompatibilidad de grupo sanguíneo entre la madre y el feto. La madre puede ser
estimulado para formar anticuerpos IgG por el embarazo anterior o transfusión, y en pequeño número durante el embarazo en sí.
Las causas menos comunes de la enfermedad hemolítica del recién nacido se deben a alteraciones de color rojo células como en la talasemia,
la deficiencia de las enzimas glucolíticas y esferocitosis hereditaria, o infecciones neonatales.
HDN también puede ser debido a la prematuridad y la ictericia fisiológica debido a insuficiente producción de transferasas glucuronil.
Servicio de Transfusión Sanguínea se refiere principalmente a la HDN causada por los anticuerpos maternos y que se discutirá en
detalle.
La causa más común de HDN suficientemente grave como para requerir tratamiento es la incompatibilidad de sistema Rh y en el 95%
de estos casos el antígeno D es responsable. Raramente c. antígenos C y E han sido implicados.
HDN debido a la incompatibilidad ABO es generalmente leve.

Otros antígenos como Kelt. Kiddand Duffv también han sido implicados raramente.
175
Mecanismo de la enfermedad
enfermedad hemolítica del recién nacido y el feto es causada por la destrucción de los glóbulos rojos del feto o recién nacido por anticuerpos
IgG producidos por la madre. Solamente los anticuerpos de la clase IgG immunoglbulin transferir activamente a través de la placenta, otras
clases como IgA e IgM no lo hacen. En HDN, los anticuerpos de la madre actúan contra los antígenos de las células rojas fetales que se
heredan de la padre Patología (fig. 13.1)
Las tres características más importantes de la patología de HDN son:

1. La anemia debido a la destrucción de los glóbulos rojos del bebé.
2. Hyperbiliribinemia resultante de la catabolismo de la hemoglobina liberada de los glóbulos rojos destruidos.
3. Los cambios en los tejidos.
Fig. 13.1 secuencia esquemática de eventos en HDN
Anemia
La destrucción de los glóbulos rojos fetales y los anemia resultantes estimulan la médula ósea fetal t producir glóbulos rojos a un ritmo
acelerado, incluso hasta el punto de que immature glóbulos rojos (eritroblastos se liberan en la circulación. El fetal término eritroblastosis
se utiliza en este hallazgo. Cuando la médula ósea no puede producir suficientes glóbulos rojos para mantenerse al día con la tasa de
glóbulos rojos destrucción eritropoyesis fuera de la médula ósea se incrementa en el bazo y el hígado. el hígado y splee se agrandan, lo
que resulta en la hipertensión portal y daño hepatocelular. la anemia severa a lo largo de con hipoalbuminemia causar insuficiencia
cardíaca con efusiones edem generalizadas, y ascitis conocida como hidropesía foetalis.
El proceso de destrucción de los glóbulos rojos que pasa en el recién nacido. siempre y cuando los anticuerpos maternos permanecen en la
circulación del bebé durante varios días a semanas después del parto. hiperbilirrubinemia
La continua destrucción de los glóbulos rojos del feto y para niños libera grandes cantidades de bilirrubina para su eliminación durante tanto
intrauterino y período neonatal. Esta bilirrubina es la bilirrubina indirecta
176
La enfermedad hemolítica del recién nacido (HDN)
Esta bilirrubina indirecta atraviesa la placenta y conjugados en el hígado materno para dirigir la bilirrubina, la bilirrubina conjugada
se excreta por la madre. Los niveles de bilirrubina total pueden ser elevados en el líquido amniótico. Al nacer, los bebés son
anémicos, pero no pueden ictericia.
Sin embargo después de su nacimiento, el niño no es capaz de conjugar la bilirrubina de manera eficiente especialmente en bebés
prematuros debido a la falta de glucuronil transferasa para convertir indirecta para dirigir la bilirrubina, y se desarrolla ictericia (ictericia neonatal
grave). Cuando el nivel de bilirrubina excede a la capacidad de unión de la albúmina, la bilirrubina no conjugada puede llegar a niveles tóxicos
(más de 18 g / dl) al cerebro del lactante. Si no se trata, puede causar ictericia nuclear o un daño permanente en el cerebro. Los cambios
tisulares
La destrucción de glóbulos rojos en el bazo y el aumento de la actividad eritropoyética en el hígado y el bazo causa el
agrandamiento del hígado y el bazo en HDN. RH (D) la enfermedad hemolítica del recién nacido
Anti-Rh (D) anticuerpos IgG son la causa principal de graves HDN. Iso-inmunización de Rh (D) negativo madre puede ser el resultado de
Rh (D) positivo de embarazo o transfusión de Rh (D) positivo de sangre. Factores que influyen en la producción de Rh-anticuerpos son:
1. Tamaño de foeto materna hemorragia / fuga
La cantidad de células rojas fetales que atraviesan la placenta en la circulación materna en el tercer trimestre del embarazo es generalmente
pequeña e insuficiente para provocar la producción de anticuerpos. Además, los niveles de esteroides elevados y otros factores, asociados con
el embarazo pueden suprimir la respuesta primaria de la madre. Por lo general, el primer feto Rh incompatible no se ve afectada.
En el parto, una hemorragia transplacentaria no es infrecuente. La cantidad de sangre fetal de entrar en la circulación
materna varía desde menos de 1 ml a 10 ml o más. El Rh (D) de glóbulos rojos fetales positivos estimular la producción de anti-Rh
(D) en aproximadamente 5-9% de estos Rh (D) negativas madres. El anticuerpo aparece en la sangre de la madre dentro de los 6
meses de la entrega y 7-12% de las madres sensibilizarse pero no tienen niveles demostrables de anticuerpos hasta que tienen
estímulo secundario durante un embarazo posterior.
Cuando se produce embarazo con un Rh segunda (D) feto positivo, las células rojas fetales de cruzar la placenta de
aproximadamente el 24 º semana de gestación o bien estimular la madre sensibilizada para producir anticuerpos o estimular el anticuerpo
existente a un título mayor. Esta es la respuesta secundaria y por lo tanto, sólo una pequeña cantidad de glóbulos rojos son capaces de
producir anticuerpo suficiente para causar HDN. El anti-Rh (D) formado es IgG, por lo que es capaz de atravesar la placenta en la
circulación fetal, donde se combina con Rh fetal (D) células rojas positivos, lo que conduce a su destrucción.
2. paridad
Incidencia de sensibilizado
1 Para II Para III Para Para IV V Para y por encima de media
- 1:50 1:29 1:20 1: 9 01:33
Alrededor del 70% de los casos se enfrentan a HDN en el embarazo II y III. Por lo general, el primer embarazo no se ve afectada.
177
3. Efecto de la incompatibilidad ABO entre la madre y el feto:
La incompatibilidad ABO entre la madre y el feto ofrece cierta protección al feto con Rh-HDN. Se cree que los anticuerpos de la
ABO materna existente alo destruyen los Rh (D) las células rojas fetales positivos de inmediato al entrar en la circulación
materna antes de que puedan sensibilizar a la madre. Una vez que la madre se inmunizan contra el antígeno Rh, se pierde este
efecto protector. (Ver tabla 13.1).
Tabla: 13.1: grupo ABO de la madre y el bebé que son incompatibles. Madre
Bebé
O A o B (el bebé no puede ser AB si la madre es del grupo O)
UNA BorAB
segundo AorAB
4. Zigosidad del padre

Si el padre es heterocigoto para el anticuerpo implicados hay un 50% de probabilidades de que el niño sea efectuada por Rh-HDN.
No es posible determinar el genotipo del padre para el antígeno Rh (D) con centainty a menos que el padre tiene un hijo vivo D-
negativo. Sin embargo, para los antígenos C y E cierto genotipo puede determinarse.
5. Historia de Transfusión de Sangre

A Rh (D) negativo madre que ha sido inmunizado por Rh (D) transfusión de sangre positivo tiene un riesgo de tener un bebé con
Rh-HDN incluso en el primer embarazo. El riesgo de la vacunación es mayor con Rh (D) positivo que la transfusión de sangre con
Rh (D) positivo de embarazo en una mujer ya que la carga antígenos es mucho mayor en la transfusión.
5. la interrupción médica del embarazo (MTP) o Aborto Involuntario también pueden inmunizar a la madre Rh negativo.
Evaluación prenatal de Rh-HDN

El objetivo de la evaluación prenatal es identificar a las mujeres con un alto riesgo de que sus bebés efectuadas con HDN para
que puedan ser investigadas durante el embarazo para estimar el grado de implicación de una gestión adecuada. Investigación
debe iniciarse aproximadamente al 12 º semana de embarazo o en la primera visita obstétrica.
(I) la historia obstétrica detallada

Las mujeres con mala historia obstétrica (es decir, hidropesía foetalis, muerte fetal o HDN) o evidencia de inmunización Rh debe
realizar un seguimiento estrecho. (II) Historia de Transfusión de Sangre
Rh positivo transfusión de sangre puede inmunizar a una mujer Rh negativa; su significado se ha discutido anteriormente.
178
Enfermedades Hemotyac del recién nacido (HDN)
Agrupación (III)
ABO y agrupación Rh incluyendo D u agrupamiento
(IV) de detección de anticuerpos

Los sueros de ambos Rh (D) positivo y Rh (D) mujeres negativos deben ser examinados para anticuerpos de células rojas en la primera
visita ya que algunos anticuerpos IgG (es decir, Kell, Duffy, Kidd, Ss) que pueden causar HDN se pueden encontrar en Rh (D) positivas. Un
régimen de muestreo se da a continuación: Etapa del Embarazo El embarazo precoz 28 º 34-36 semanas º semana
Las muestras que se recogieron de todos los

casos de Rh (D) negativo madre Todos los
casos
prueba de detección de anticuerpos IgG (es) debe hacerse con al menos dos panel de células de detección grupo O individuo (véase el
capítulo 9 sobre el cribado e identificación de anticuerpos) por prueba de antiglobulina indirecta, utilizando el suero poliespecífico antiglobulina
y la técnica enzimática de dos etapas. Este último tiene una mayor sensibilidad para la detección de anticuerpos Rh.
(V) si se se detectan anticuerpo (s) / en cualquier etapa entonces ser hecho lo siguiente:
(una) Repetir título de cada mes: La gravedad de la enfermedad es generalmente, aunque no siempre,
correlacionado con el título de los anticuerpos. A título de 1:32 o superior y un título ascendente en pruebas repetidas es
significativa y es una indicación para aminocentesis. Para la técnica de titeration de anticuerpo ver capítulo de métodos
especiales. (segundo)
Identificar el anticuerpo (s) con 8-10 panel de células (véase el capítulo 9) (c) Llevar
a cabo Rh fenotipo confirmar el anticuerpo implicado. (Vi) Posible genotipo Rh del padre
los glóbulos rojos del padre se prueban con anti-D, -C, -E, -c y -e para determinar Rh fenotipo. A partir de estos datos, el
genotipo probable puede ser estimado. Si el padre es homocigoto o heterocigoto para D no se puede determinar con certeza si
no tiene un hijo vivo negativo Rh (D). Sin embargo, para los antígenos C y E, el verdadero genotipo puede ser determined.If el
padre es heterocigoto existe una probabilidad del 50% de los niños no se ven afectados con Rh-HDN. (Vii) medicado
anticuerpo-célula citotoxicidad dependiente (ADCC) Prueba
El resultado de ADCC se correlaciona bien con la gravedad de HDN. Un alto ADCC indica seria HDN mientras que si el resultado
sigue siendo baja hasta el final del embarazo, el bebé está ligeramente afectada o no se ve afectada (para más información se
remite al lector a grandes libros de texto). (Viii) Aminocentesis
El líquido amniótico es casi incoloro, pero en caso de que el bebé tiene un proceso hemolítico grave es de color amarillo brillante
debido a la bilirrubina. la concentración de bilirrubina amniótico se puede estimar mediante la prueba espectrofotométrica y es
extremadamente valiosa para predecir el grado del proceso hemolítico en el embarazo y la severidad de HDN. Las principales
indicaciones de la amniocentesis son:
179
(una) El litro de anticuerpos IgG maternas por IAT es 01:32 o superior o un título ascendente en
repetir la prueba por cerca de 28 semanas de gestación; (segundo) antecedentes obstétricos de nacimiento, aún foetalis
hydrop o muerte neonatal en Rh (D)
madres negativas.
La amniocentesis se realiza generalmente entre el 28 lh - 32 Dakota del Norte semana de embarazo. También se puede hacer antes. La
amniocentesis se puede repetir después de 2 semanas. Dos muestras de líquido amniótico son útiles para verificar los resultados y establecer si la
densidad óptica es constante, creciente o decreciente. La densidad óptica de líquido amniótico (a 450-460 nm) en el embarazo normal es de
aproximadamente 0,05 en el 30 lh semana, cayendo a alrededor de 0,02 a término. La caída se debe probablemente a la disminución de la
concentración de albúmina en el líquido amniótico. La caída también está presente en los lactantes que tienen HDN. La densidad óptica a 450 nm
varía de acuerdo con el período de gestación. Si la densidad óptica a 450 nm se encuentra en la zona inferior, el bebé no se verá afectada o
puede tener una enfermedad leve. Un patrón-zona media sugiere que el bebé probablemente se efectuará moderadamente, y uno debe estar
preparado para una transfusión de intercambio después de la entrega.
Si la densidad óptica es en la zona de la parte superior antes de las 32

semanas de gestación, la transfusión intrauterina debe hacerse.
La interrupción del embarazo se puede realizar a las 34 semanas o
antes, dependiendo de los estudios de la madurez del feto (véase

Curvas que muestran tres zonas que indican el
la figura 13.2) Precauciones:
aproximada
severidad de HDN de lectura de la DO del líquido
1. La primera la amniocentesis no suele ser amniótico
hecho antes de las 26 semanas, ya que el feto es
demasiado pequeño para cualquier tipo de intervención.
2. La amniocentesis no debe ser
realizado sin una indicación clara debido a
complicaciones como la infección y la
mejora de la inmunización materna.
3. Las muestras deben ser protegidos, de la luz,

que oxida los pigmentos de bilirrubina.
4. Las muestras deben estar libres de muconium y

sangre materna fetal, ya que aumentan la
densidad óptica
.
patrón Spectrophotomerric- del líquido amniótico

en una facilidad de <w> afectados bebé erthyroblastic
Fig. 13.3
Enfermedades Hemotyac del recién nacido <w>
Procedimiento
La amniocentesis se realiza bajo ultrasonido para encontrar una ventana libre de la placenta para la inserción de la aguja a través de la pared
abdominal y el útero en la cavidad uterina. Por lo general se realiza en 28" 1 a 32 Dakota del Norte semana de embarazo; También se puede hacer antes.
El líquido amniótico de aspiración se analiza espectrofotométricamente, y la densidad óptica (DO) se midió a longitud de onda
diferente en un intervalo de 400-600 nm. En la normal, se obtiene una curva suave mientras que en HDN un pico a 450-460 nm
sugiere aumento en los niveles de bilirrubina de líquidos amnióticos. (Fig 13.3) madurez fetal
Una determinación de lecitina / esfingomielina (L / S) relación en el líquido amniótico puede ser valiosa en la predicción de la madurez de los
pulmones fetales y por tanto la capacidad del feto para sobrevivir después de un parto prematuro. Una relación L / S de menos de 2,0 / 1,0 indica
pueden ser necesarios la inmadurez pulmonar y transfusión intrauterina.
La condición fetal puede ser evaluado por ecografía. Esto ha reemplazado aminography. Investigación de
nuevos BORN
Las investigaciones de muestras de sangre del cordón umbilical de la madre Rh negativo juegan un papel importante en la gestión de HDN. Una
muestra de sangre venosa tomada del bebé después del nacimiento (incluso 30 min) es mucho menos valioso que las muestras de sangre de
cordón en la evaluación de la gravedad de HDN. muestras de sangre de cordón umbilical deben ser obtenidos desde el lado materno del cable
umblical después de que se divide, mediante la inserción de una aguja unida a una jeringa en la vena umbilical. Uno muestras deben tenerse en
anti-coagulante, EDTA (EDTA LMG en lml). Se utiliza para pruebas ABO y Rh, prueba de antiglobulina y para medir el valor de hemoglobina. La
segunda muestra se toma en un tubo de llanura seca; y el suero se separa que se utiliza para la determinación de bilirrubina y para el cribado
de los anticuerpos.
Las investigaciones sobre el recién nacido incluyen:

1. agrupamiento ABO
2. Rh agrupación (D) incluyendo D u
3. prueba de antiglobulina directa (PAD)
4. La detección e identificación de anticuerpos en el suero del cordón (eluyen si es necesario)
5. la estimación de la hemoglobina en la sangre del cordón umbilical
6. la estimación de la bilirrubina sangre del cordón umbilical
7. Los parámetros hematológicos de la sangre del cordón. Número de células nucleadas y recuento de reticulocitos se
incrementa. De todos modos no son específicos para la HDN. ABO
ABO del recién nacido se realiza sólo por las células de agrupación porque aloanticuerpos en la sangre del cordón umbilical son de origen
materno. Los glóbulos rojos se deben lavar 4-5 veces para evitar resultados falsos positivos debido a la gelatina de Wharton. Agrupación Rh
Accurate agrupación Rh puede ser difícil si los glóbulos rojos están fuertemente recubiertas con anticuerpos IgG. Cualquiera de resultados falsos
positivos o falsos negativos puede que se produce.
181
Los falsos Rh (D) Los resultados positivos pueden se produce si;

(yo) Las células están contaminados con gelatina de Wharton (ii) Rh (D) células negativas están fuertemente recubiertas con anticuerpo (s)
distintos de anti-Rh (D) (iii) Reactivo de suero anti-D puede contener potenciador de la aglutinación que puede causar no específica
reacción.
El problema puede ser resuelto por
• utilizando células se lavaron 4-5 veces en solución salina
• elución suave de anticuerpo seguido de agrupación (D) de repetición Rh.
• utilizando reactivos diluyente como control. Si hay aglutinación en el tubo de control, solución salina o suero anti-D modificados
químicamente se pueden utilizar para determinar el grupo Rh (D). resultados falsos negativos o débiles-positivos: resultados positivos
negativos o débiles veces falsas se producen con solución salina anti-D cuando el recién nacido es Rh positivo y las células rojas están
totalmente recubiertas con maternal anti-D que no hay sitios D están disponibles para reaccionar con el suero reactivo. Esto se debe
sospechar cuando la madre es Rh negativo inmunizado y células del bebé dan un fuerte DAT positivo. Maternal anti-D se puede retirar de
estas células por elución de calor (véase el capítulo sobre Métodos especiales) y la prueba de Rh se repite. Directa prueba de antiglobulina
(DAT)
DAT generalmente da buenos resultados positivos en HDN debido a anti-D o anticuerpos para otros antígenos de células rojas; Las reacciones son
mucho más débil o negativo en HDN debido a la ABO. Si la DAT es positivo y el suero materno tiene una prueba de detección de anticuerpos
negativo, la sospecha cae sobre ABO-HDN o HDN debido a anticuerpo contra un antígeno de baja incidencia no está presente en el cribado panel
de células. La identificación de anticuerpos en la sangre del cordón
El anticuerpo Rh materna puede o no puede ser encontrado en el suero del bebé, sin embargo, la identificación de anticuerpo puede también ser
realizada en el eluido de células de cordón. Cable de hemoglobina Valor
hemoglobina sangre del cordón umbilical se correlaciona bien con la gravedad clínica de HDN. El nivel de hemoglobina espinal (Tablel3.2) sirve
como una guía para evaluar la gravedad de HDN. la sangre del cordón normal Hb es 18.6-
19,6 g / dl)
Tabla 13.2 espinal Mostrando Hb. Los niveles y la severidad de HDN
| Nivel de Hb (g / dl) La severidad de la HDN
Más de 14 uneffected
11-14 leve a moderada

8-11 moderado a severo
por debajo del 8 grave
182
Cord Blood Bilirrubina
(Bilirrubina espinal normal es 0,7 a 3,1 mg / dl)
También hay una correlación entre la concentración de bilirrubina sangre del cordón umbilical y la gravedad de HDN pero es menos cerca de la
hemoglobina espinal. La concentración cable de bilirrubina en sangre es valiosa para evaluar la gravedad de la enfermedad cuando el valor de Hb
está dentro de límites normales. Cable de bilirrubina en sangre por encima de 4 mg / dl es generalmente sugestivo de enfermedad muy grave. los
niveles de bilirrubina pico suele llegar en el tercer o cuarto día de vida.
GESTIÓN prenatal de la inmunización Rh

Si después de tomar en cuenta los antecedentes obstétricos de la madre, los niveles de resultados contra -D y la amniocentesis, si el
obstetra está convencido de que el feto podría no sobrevivir a un embarazo a término, las siguientes opciones están disponibles en la
actualidad:
1. transfusión intrauterina: transfusión intrauterina puede ser (a)

Intraperitoneal (b)
intravascular
(una) Transfusión intraperitoneal (IPT): El procedimiento es preformada bajo localización de ultrasonido y el seguimiento después de
aproximadamente 24-26 semanas de gestación y por lo general se repite después de cada dos a tres semanas hasta el parto a las 34-35 semanas
cuando el bebé es lo suficientemente maduro.
Los glóbulos rojos empaquetados de grupo O Rh (D) negativo se dan y que debe ser menos de cinco días de edad, de leucocitos agota y
se irradiaron (preferiblemente) y compatible con la sangre de la madre. El volumen de glóbulos rojos para la transfusión se calcula
utilizando la fórmula: (edad de gestación en semanas -
20) xl0ml. Leucocitos hematíes pobres que han sido irradiados reducirá la posibilidad de que la madre el desarrollo de glóbulos
blancos o plaquetas anticuerpos, e incluso enfermedad injerto contra huésped en el feto.
(B) la transfusión intravascular (TIV): transfusión intravascular directa de compatibles irradiadas, leucocitos hematíes pobres a través
de la vena del cordón umblical bajo foetescopic o un control de ultrasonido es un procedimiento mejor que IPT en los bebés que
necesitan transfusiones antes-25 semanas de gestación y se anemia severa.
Los glóbulos rojos suspendidos en Adsol o SAGM no deben utilizarse para la transfusión para el feto en el útero.
2. inducción prematura del trabajo: La mayoría de los pregnacies de alto riesgo se terminan de forma selectiva después de 34 semanas de
gestación para reducir la incidencia de mortinatos y reducir la severidad de HDN en bebés nacidos vivos. La decisión de inducir el trabajo
de parto prematuro depende de análisis del líquido amniótico, la historia obstétrica previa, título de anticuerpos y estudios de ultrasonido
fetal para la madurez. inducción prematura del parto a 30-32 semanas es posible con un mejor cuidado médico y de enfermería.
3. La plasmaféresis: Intensivo plasmaféresis ha sido eficaz en la reducción de nivel de anticuerpos en el suero materno y la mejora de las
posibilidades de supervivencia fetal. volumen óptimo de plasma que se plasmapherized aún no ha sido determinada. resultados
prometedores se han obtenido en algunos casos con el intercambio de pequeño volumen de 250 ml a 600 ml de plasma cada semana a
partir de las 10-20 semanas de embarazo hasta que el bebé se entrega a las 34-35 semanas de gestación. El fluido de sustitución más
segura es la solución de albúmina humana 4-5% y pequeño suplemento de plasma fresco congelado (de donantes Rh negativo) es
necesario para mantener los niveles normales de IgG, factores de coagulación, etc. 183TRANSFUSION MEDICINE Manual Técnico
No hay consenso sobre el valor terapéutico de la plasmaféresis en mujeres embarazadas inmunizadas-Rh y esto sigue
siendo un enfoque experimental del valor comprobado. Post - Natal TRATAMIENTO DE INFANTIL
Alrededor del 40% de los bebés que nacen con DAT positivo, no requieren tratamiento, mientras que otros, si no se trata, mueren a las pocas horas
debido a una insuficiencia cardíaca o se vuelven profundamente ictericia y pueden desarrollar ictericia nuclear
en cualquier etapa después de la edad de alrededor de 36 horas. Es deseable seleccionar como muy pronto, los casos de HDN que requieren
tratamiento. Transfusión de sangre
Los bebés con HDN leve (menos de una semana de edad) que exhiben solamente anemia pueden ser transfundidos con glóbulos rojos se
concentran para corregir la anemia. De vez en cuando una transfusión de intercambio parcial puede ser necesario.
exanguinotransfusión
En los lactantes con moderada a severa HDN, una transfusión de intercambio se realiza con los siguientes objetivos:
(una) La corrección de anemia proporcionando glóbulos rojos compatibles con O adecuada 2 capacidad de carga. (segundo) La eliminación de la
bilirrubina no conjugada. (do) La eliminación de las células rojas recubiertas de anticuerpo del bebé. (re) La eliminación de la Indicación anticuerpo
infractor (s) de la exanguinotransfusión
Hay poco acuerdo sobre los criterios para la exanguinotransfusión. Sin embargo, la hemoglobina de la sangre del cordón, bilirrubina y el peso al nacer
son los principales determinantes de la exanguinotransfusión. Todos los recién nacidos en riesgo, deben ser controlados de cerca por la
determinación de bilirrubina en intervalos de 4-8 horas, con el objetivo de mantener el nivel de bilirrubina en suero por debajo de 20 mg / dl en recién
nacidos a término y 15 mg / dl en la tabla infants.See prematura 13,3 .
Tabla 13.3: Parámetro de la transfusión de intercambio en Rh-HDN Parámetro
Observar Considerar hacer intercambio
intercambiar cuando
La hemoglobina al
nacer sangre del
cordón umbilical > 14 g / dl 12-14 g / dl <12 mg / dl
La bilirrubina sérica <4 mg / dl 4-5 mg / dl > 5 mg / dl
Después del nacimiento
de sangre capilar > 12 g / di <12 g / dl <12 g / dl y la caída en
hemoglobina primero 24 h
bilirrubina sérica <18 mg / dl 18-20 mg / dl 20 mg / dl en primera 48 h *
* Si el nivel de bilirrubina se eleva a una velocidad que indica que va a llegar a 20 mg / dl antes de que el niño es de 48 horas de edad.
La selección de sangre para la transfusión del intercambio de Rh-HDN

1. La sangre debe ser lo más fresco posible (48 h de edad), pero no debe ser más de 5 días de edad
184
para transfusión de intercambio para asegurar una larga supervivencia de glóbulos rojos en el bebé y para evitar alto nivel de
potasio en el plasma en la sangre transfundida.
2. Rh (D) negativo de sangre del mismo grupo ABO como la de la del bebé se utiliza si el grupo ABO del bebé es el
mismo que el de la madre o es compatible con la sangre de la madre. Tabla 13.4: Selección de grupo sanguíneo ABO de
exsanguinotransfusión en Rh -HDN
el grupo sanguíneo del bebé La sangre de la madre Blood seleccionado por
Grupo exanguinotransfusión
UNA AB AB AOR OOA
oO
OAB AB OOB o
segundo
OB o O
OOAB AB OOA o OB o O
O AB AB, A, B, O
OAB AB OOOOO
O
3. Cuando el grupo ABO del bebé no es compatible con el grupo ABO de la madre o si la unidad de donante es
preparado antes de la entrega, debe ser O Rh (D) negativo sangre y debe ser de forma hemolisinas libres anti-A
y anti-B.
4. En la transfusión de intercambio caso se requiere más de una vez, la sangre posterior debe ser de la misma ABO y el tipo
de Rh que la de la primera vez.
5. Si anticuerpos de la madre es reactivo frente a un antígeno de alta frecuencia y la sangre no compatible está disponible: (a) los
hermanos de la madre pueden ser probados para la sangre compatible. (segundo) Una unidad de sangre se puede recoger de la madre, si
el obstetra está de acuerdo en que es seguro.
las células rojas de la madre se constituyen en el plasma AB. (do)
Si la sangre no compatible está disponible y la situación clínica es urgente, cambio de transfusión con sangre incompatible
(para el antígeno de alta frecuencia) se prefiere sin transfusión en absoluto, ya que ayuda a eliminar el anticuerpo (s) y
bilirrubina. Retención en la sangre puede causar la muerte del bebé.
6. En las zonas donde la anemia llamada falciformes es prevalente, la sangre del donante debe ser examinado para el rasgo de
células falciformes antes de que se utilizó la sangre para transfusión de intercambio.
185
El volumen y el hematocrito de la sangre para transfusión de intercambio

Lo ideal sería que se recomienda una exanguinotransfusión igual a dos veces el volumen de sangre del recién nacido. El volumen de la sangre de un
recién nacido a término es de aproximadamente 85 ml / kg. exanguinotransfusión con células rojas parcialmente concentrado que tiene hematrocrit de
55-65% es preferible a la sangre entera. Algunos clínicos como para intercambiar volumen relativamente grande de sangre, por ejemplo, 200 ml / kg
en 60-90 min. una consideración especial en las pruebas de compatibilidad para la exanguinotransfusión
1. Si el grupo ABO de la madre y el niño son compatibles, es conveniente obtener el suero de la madre que del bebé
para la prueba de compatibilidad.
2. Si la sangre de la madre no está disponible o el grupo ABO de la madre no es conocido o el grupo ABO de la madre y el niño son
incompatibles, el suero del bebé o la elución a partir de células del cordón umbilical se utilizan para la coincidencia cruzada.
3. La sangre debe ser cruzada emparejado contra el suero de la madre por IAT y el método enzimático. Procedimiento
exanguinotransfusión se logra generalmente a través de un único acceso vascular (vena umblical). Una de tres vías-de grifo de cierre se une a la
unidad de sangre, el tubo de bebé y de extensión que conduce a un recipiente de descarte graduado. Un máximo de 5 ml / kg se utiliza para
cada sorteo y sangre infusión .La donante se deben mezclar adecuadamente durante el intercambio; el intercambio se completa en
aproximadamente 90 min. Un calentador de sangre en línea, si es posible, y un filtro de sangre estándar deben ser incorporados en el conjunto
de administración. Las siguientes consideraciones pueden aplicarse a exanguinotransfusión en recién nacidos:
1. Oxigenación y ácido - base de equilibrio debe ser monitoreado; a menudo es necesario aumentar la concentración de oxígeno
inspirado durante el procedimiento.
2. Si el recuento de plaquetas post-intercambio es inferior a 25.000 / mm 3, puede ser necesaria la administración de plaquetas.
3. La hipoglucemia puede ocurrir como un fenómeno de rebote después del intercambio o un fenómeno secundario al aumento de insulina
en plasma que puede acompañar a la enfermedad hemolítica severa. puede ser necesaria la infusión de solución de glucosa al 10%
después de la transfusión de intercambio.
4. 1 ml de gluconato de calcio al 10% después de la infusión de 100 ml de sangre se pueden administrar para evitar la toxicidad del
citrato.
PREVENCIÓN DE HDN
La dosis habitual de 250-300 (ig de hiperinmune anti-D inmunoglobulina (RhIg) es suficiente para contrarrestar el efecto de 15
ml de Rh (D) - glóbulos rojos positivos que corresponden a 30 ml de sangre fetal.
Si se detectan más número de células fetales en la circualtion materanal por la prueba Kleiharu Betke Acid elución, la dosis se
debe aumentar proporcionalmente.
1. RhIg (300 (g) se administra por vía intramuscular dentro de las 72 hrs a Rh (D) negativas mujeres que tienen (i) Emitido
Rh (D) - infantil positiva y no han desarrollado anti-D en el suero. Es

no es útil una vez que se ha producido la inmunización, (ii) aborto sufrido
o la interrupción médica del embarazo (iii) aminocentesis sufrido: o (iv) Han tenido
hemorragia antipartum 186
2. Se ha defendido que el riesgo de la inmunización se reduce aún más si 300 ug RhIg se da antipartum a 28
semanas de gestación y una segunda dosis de 300 ug RhIg se repite dentro de 72 h de la entrega.
ABO enfermedad hemolítica del recién nacido

La incompatibilidad ABO es la forma más común de incompatibilidad de grupo sanguíneo entre la madre y el feto. Sin embargo, por lo
general resulta en una forma leve de HDN. ABO-HDN se produce principalmente en el grupo O madre con A o B feto y se debe a anti-A
IgG materna o anti-B. Antes de la inmunización con células A o B no es esencial para la formación de IgG anti-A y anti-B, por lo tanto,
ABO-HDN puede ocurrir en cualquier embarazo incluyendo la primera. ABO-HDN es generalmente leve, porque
(yo) antígenos A y B no están completamente desarrollados en RBC del lactante; (Ii) Tissue A y antígenos B de la
infante neutralizan el anti-A y anti-B de la madre,
disminuyendo de ese modo el número de moléculas de anticuerpo que pueden unirse a la RBC (Mollison)
Los siguientes criterios se utilizan para el diagnóstico de HDN (Bhatia, 1977)

1. Excluye la presencia de anticuerpos frente a otros antígenos de grupo sanguíneo mediante la comprobación de suero materno con
un panel de células de reactivos.
2. La madre es generalmente de Grupo O con el niño del grupo A o B, aunque en raras heterospecific embarazo en una o
madre grupo B puede resultar en ABO-HDN ocasiones.
3. Anti-A y o el título de Anti-B mayor que 1: 128 y la presencia de hemolisinas en la madre pueden apoyar aún más el
diagnóstico.
4. Desde incompleta (IgG) anti-A y anti-B título de hasta 32 se encuentran normalmente en las madres de grupo O indias (Gupte
et.al 1972) un título superior es una características de diagnóstico.
5. prueba de Coombs directa es a menudo negativo o positivo débil de vez en cuando.
6. cambios hematológicos como el aumento de la fragilidad y la esferocitosis en el lactante ictérico con las características
anteriores apoyan aún más el diagnóstico de la ABO-HDN Investigación en pruebas ABO-HDN en la madre
Las siguientes pruebas se llevan a cabo:

1. ABO y Rh (D) de agrupación.
2. Estimación de IgG anti-A y anti-B en el suero materno. Titer encima de 32 se considera significativa.
3. Prueba de anticuerpos dependientes de la citotoxicidad medicada por células (ADCC) en relación con la gravedad. Una
buena correlación se ha observado entre los resultados de ADCC utilizando suero de la madre, y la gravedad de HDN (Mollison
1987) Las pruebas en el Infant
Las siguientes pruebas se llevan a cabo:

1. ABO y Rh (D) de agrupación.
2. Tesst directa de antiglobulina (DAT) usando poliespecífica y suero AHG monoespecífico (IgG; C3d). DAT suele
ser negativo o positivo débil.
187
3. los niveles de bilirrubina en suero se incrementaron moderadamente y pueden ser controlados por la fototerapia, pero, muy a
menudo pueden necesitar transfusión de intercambio.
4. Nivel de hemoglobina puede reducirse ligeramente en la sangre del cordón en moderadamente grave ABO HDN.
5. Los parámetros hematológicos: (a) Reticulocitosis

5% (b)
Aumento de la fragilidad osmótica (c)
Esferocitos en frotis de sangre
Gestión de ABO HDN

La anemia severa es muy poco común y la terapia, cuando sea necesario, se relaciona con el control de la hiperbilirrubinemia.
1. Fototerapia
2. Transfusión de sangre: Niño con leves ABO-HDN que exhiben solamente la anemia puede ser transfundido con las células rojas de la
sangre se concentran .El debe ser lo más frescos posible, pero no debe ser más de 5 días de edad, en cualquier caso.
3. Transfusión de intercambio con sangre entera debe llevarse a cabo cuando el nivel de bilibrubin amenaza con exceder de 20 mg /
dl. sanguíneo O Rh grupo de tipo de los recién nacidos se debe utilizar. La sangre debe tiene títulos bajos de anti-A y anti-B y también
debe estar libre de hemolisinas. Cuando se da la sangre del grupo O a un bebé que es un grupo A, B o AB, deben utilizarse los
concentrados de glóbulos rojos. Es una buena práctica utilizar células empaquetadas se resuspenden a un volumen de un tercio de
plasma AB fresco (o A plasma plasma o B según el caso) de volumen y el Hct de la transfusión de sangre for.exchange es misma que
la de Rh HDN. Estimación de IgG anti-A y anti-B
de origen natural IgM anti-A o anti-B complican la determinación precisa de IgG anti-A o anti-B. Estimación de IgG anti-A
o anti-B se realiza después de la neutralización parcial o inactivación de IgM anti-A o anti-B por los siguientes métodos:
1. La neutralización parcial de IgM anti-A o anti-B según el grupo sanguíneo sustancia A o B (prueba de Witebsky)
2. La inactivación de anticuerpo IgM por reactivos tiol, (i)

2- mercaptoetanol (2-ME) (ii) Dithiothereitol
(DTT)
Estos reactivos escinden enlace intercadena disulfuro de anticuerpos IgM y destruir sus Acitivity. No tienen ningún efecto en
anticuerpos IgG.
prueba de neutralización parcial de Witebsky para determinar reactivos anti-A y anti-B IgG requeridos
son los siguientes;

saliva Reactivo con una sustancia y la sustancia B. células del reactivo: 2-5%
suspensiones salinas de células A y B. (de ensayo) Métodos de suero del
paciente:
Prueba de neutralización parcial de Witebsky

1. Determinar la solución salina (IgM) anti-A y anti-B título del suero de la madre, (véase el capítulo 21 sobre
Preparación de la solución y Métodos)
188
2. Sobre la base del título de anticuerpos solución salina, añadir una cantidad adecuada de A y B específico del grupo
saliva para neutralizar y-A y anti-B, respectivamente. Cantidad de saliva generalmente necesaria para la neutralización
parcial es el siguiente: IgM Titre en suero
Volumen de suero Volumen de saliva
hasta 32 2 vol. 1 vol.
64-128 1 vol. 1 vol.

256-512 1 vol. 2 vol.
512 o más 1 vol. 3 vol.
Preparación de saliva se describe en el capítulo sobre métodos especiales
3. La mezcla se mantiene a temperatura ambiente durante 20 min y se ensayó para solución salina anti-A y anti
B. Si la reacción es débil o 1, continúa para incompleta (IgG) el título de anticuerpos. Si la mezcla neutralizada da 2
a 3 reacciones, añadir más grupo saliva sustancia específica y repetir la prueba hasta que se da reacciones débiles
o +1.
Si la mezcla neutralizada da reacciones negativas, procedimiento de neutralización se repite usando menor cantidad
de sustancia (saliva)
4. Hacer doble dilución en serie del suero parcialmente neutralizado en dos filas A o B. En la fila A hacer la valoración de solución
salina (IgM) anti-A o anti-B. En la fila B hacer la valoración de incompleto (IgG) de anticuerpos anti-A o anti-B usando
albúmina o enzima o de la técnica de ensayo AHG indirecta.
Un ejemplo típico de incompleta anti-A en un caso de HDN debido a anti-A se da a continuación: Anti-A título de
ABO-HDN prueba antes y después de la neutralización del suero con sustancia grupo (Test de Witebsky) Titre
Antes de neutralización Después de la neutralización
Salina Incompleto Salina Incompleto
ordenado H H +2 +4
1: 2 H H + +4
1: 4 H H + +4
1: 8 +4 +4 - +4
uno y dieciséis +4 +4 - +3
01:32 +4 +4 - +2
1:64 +3 +4 - +2
1: 128 +3 +3 - +
1: 256 +3 +3 - +
1: 512 +2 +2 - -
1: 1024 +2 +2 -
1: 2048 + +2 - -
1: 4096 + + - -
1: 8192 - +/- - -
189
mezcla de suero Dextron -AB de Aderson también se puede utilizar en hacer título de IgG anti-A y anti-B (Gupte et.al. 1972)
Dextron-AB composición de suero de Aderson:

suero AB neutral 25 ml
NaCl 1,3 g,
Dextrano (p.mol 100.000 a 150.000) 3,0 g
Completar el volumen a 100 ml con agua destilada.

Método; Añadir 1 volumen de cada uno de mezcla de suero de dextrano AB de Aderson y 2-5% de células suspensiosn de células reactivos A
o B para cada dilución. Incubar durante 1 hora antes de leer los resultados. INACTIVACIÓN DE ANTICUERPOS IgM POR
2. Mercaptoetanol (2ME) reactivos

necesarios son los siguientes:
1. Tampón fosfato pH 7,4 (a) M / 15 Na 2 HPO 4 - disolver 9,47 g Na anhidro 2 HPO 4 en 1000 ml de agua destilada. (segundo) M / 15
KH 2 correos 4- disolver 9,08 g KH cristalino 2 correos 4 en 1000 ml de agua destilada. (do) Para hacer tampón de fosfato pH
7,4 - Mezclar 80,8 ml de Na 2 HPO 4 solución (a) con 19,2
ml de KH 2 correos 4 solución (b) a temperatura ambiente.

2. 0,2 M 2- mercapatoethanol, preparado por la adición de 100 ml de tampón de fosfato de pH 7,4 a
1,56 ml 2- mercapatoethanol. Esta solución no debe ser almacenado durante más de un mes a 4 ° C.
3. Salina tamponada con fosfato pH 7,4 (a) 0,15 M NaH 2 correos 4 . 2 H 2 O - disolver 23,4 g de NaH 2 correos 4 2 H 2 O - en
1000 ml de
agua destilada. (segundo) 0,15 M NaH 2 correos 4- disolver 21,3 g NaH 2 correos 4- en 1000 ml de agua destilada. (do) Hacer
tampón de fosfato de iso-osmótica pH 7,4 - mediante la mezcla de 18 ml. NaH 2 correos 4. 2H 2 O
Solución con 82 ml de Na 2 HPO 4 solución. (re) Para hacer una solución salina tampón fosfato - mezclar un volumen igual
de iso - osmótica de fosfato
tampón de pH 7,4 y 9 g / L de NaCl.
4. 0,2 M yodoacetamida, preparada por disolución de 0,37 g yodoacetamida en 100 ml de solución salina tamponada con fosfato pH
7,4 Método
1. Mezclar 1 ml de solución de 2- ME con 1 ml de suero de ensayo.

2. Hacer un control que consiste en un volumen igual de PBS isotónico pH 7,4 y la prueba de suero.
3. Incubar 2- ME mezcla de suero y la mezcla de suero PBS a 37 ° C durante 15 minutos.
4. Añadir 1 ml de yodoacetamida para el suero y control de prueba y mantenerlo durante la noche (14-16h) a 4 ° C o dializar mezclas
durante la noche (16 h) contra PBS a 4 ° C. Para pequeño volumen utilizar 1 cm de tubo de celofán de ancho.
5. Hacer dos veces la dilución en serie de la mezcla de mezcla de ensayo y control en solución salina isotónica en
duplicate.Titer ellos con las células adecuadas para IgM anti-A y / o anti-B mediante la técnica de solución salina y para IgG anti-A y /
o anti-B por la albúmina o enzima o de la técnica de ensayo AHG indirecta.
190
Enfermedad hemolítica del Nuevo Bom (HDN)
Interpretación
1. Si no se observa reactividad en el control, indica la dilución del cuerpo contra e invalida los resultados.
2. Igualdad reactividad tanto en la mezcla de mezcla de ensayo y de control indica que sólo IgG
anticuerpos están presentes.
3. Si no reactividad se ve en la mezcla de ensayo y la reactividad se ve en la mezcla de control, esto indica solamente
anticuerpo presente IgM.
4. A cuatro veces (diferencia de dos tubos) o más de reducción de Acitivity cuando se compara con el tubo de control
indica la presencia de ambos anticuerpos IgM e IgG. Nota: 2-ME tiene olor nocivo y debería por lo tanto, ser utilizado bajo una
capucha. Más reciente
investigaciones muestran 2-ME es más eficaz que el ditiotreitol. La adición de iodoaceetamide es
necesario para evitar falsas - resultados positivos. La inactivación de anticuerpos IgM por Dithiotheritol Reactivos
(DTI) requeridos son los siguientes;
1. ditiotreitol 0,01 M se prepara disolviendo 0,154 g (DTT) en 100 ml de PBS pH 7,4. La solución de DTT es estable a -20
° C durante hasta 6 meses. Cuando se almacena en el refrigerador a 4 ° C se deteriora en menos de una semana.
2. Tamponada con fosfato solución pH 7.4.

3. 2 ml de suero a ensayar.
Método
1. Dispensar 1 ml de suero en cada uno de los dos tubos.
2. A un tubo, etiquetado como control de añadir 1 ml de PBS pH 7,4
3. Para otro tubo, prueba etiquetado, añadir 1 ml de 0,01 M de DTT
4. Mezclar e incubar a 37 ° C durante 2 h
5. Hacer una dilución en serie de dos veces de la mezcla de ensayo y mezcla de control en solución salina isotónica
en duplicado. Título de ellos con las células adecuadas para IgM anti-A o anti-B mediante la técnica de solución salina y para IgG anti-A
o anti-B por la albúmina o enzima o de la técnica de ensayo AHG indirecta. Interpretación
Efecto de la TDT en anticuerpos de grupos sanguíneos

DILUCIÓN INFERENCIA
Muestras de prueba 1: 2 1: 4 1: 8 1:62 01:32
Serum + TDT +3 +2 +2 +1 IgG

00
Serum + PBS +3 +2 +2 +1
Serum + TDT 03 02 02 0+1 IgM

Serum + PBS 00
Serum + TDT +2 +1 02 0+t 00 IgM, IgG

Serum + PBS +3 +2
191
1. Si no se observa reactividad en el control, indica la dilución del anticuerpo e invalida los resultados.
2. Igualdad de reactividad, tanto en la mezcla de ensayo y control, indica que los anticuerpos IgG sólo están presentes.
3. Si no reactividad se ve en la mezcla de ensayo y la reactividad se ve en la mezcla de control, esto indica solamente

anticuerpos IgM están presentes.
4. A cuatro veces (diferencia de dos tubos) o más de reducción de Acitivity cuando se compara con el tubo controlado
después de la neutralización parcial indica la presencia de ambos anticuerpos IgM e IgG.
Nota: la TDT no es tan oloroso como el 2-ME y proporciona una prueba más rápida. Sin embargo, puede no ser tan sensible como 2- ME
192
14
componentes de la sangre
Preparación y
sus usos
Estos terapia de transfusión sanguínea efectiva días depende de la disponibilidad de los diferentes componentes de la sangre. Estos
componentes, utilizados por separado o en combinaciones, pueden cumplir la mayoría necesidad de transfusión de pacientes y mantener el riesgo
de transfusión a un mínimo. Un donante de sangre dona el producto conocido como sangre entera, a partir del cual se preparan los componentes.
La capacidad para separar los diversos componentes de la sangre entera es deseable por las razones siguientes:
1. Separación de sangre en componentes permite una supervivencia óptima de cada componente de. Por ejemplo después de 24 horas
de almacenamiento de sangre entera a 2-6 ° C, tiene pocas plaquetas viables y niveles de factores lábil V y VIII disminución, mientras
que después de las plaquetas de separación pueden ser almacenados durante 5 días a 22 ° C y los factores V y VIII puede ser
almacenado como FFP por 1 año en- 30 ° C o por debajo.
2. preparación componente permite la transfusión de único componente de sangre específico que el paciente requiere.
3. La transfusión de sólo el componente específico de la sangre necesaria evita el uso de componente innecesario, lo que podría estar
contraindicado en un paciente. Por ejemplo, debido al riesgo de hipervolemia, un paciente anémico ancianos en la insuficiencia
cardíaca congestiva puede no tolerar fácilmente la transfusión de dos unidades de sangre entera, mientras que el mismo paciente
puede ser transfundida dos unidades de células rojas de la sangre fácilmente.
193
4. Mediante el uso de componentes de la sangre, varios pacientes pueden ser tratados con la sangre de un donante, dando un
uso óptimo de cada unidad de sangre donada.
5. El uso de componentes de la sangre, complementa el suministro de sangre - se suma al inventario de sangre. componentes de
sangre tales como glóbulos rojos, plaquetas y plasma se preparan a partir de una sola donaciones de sangre entera. Componentes han
estrechamente regulado requisitos de preparación y almacenamiento. la compatibilidad del grupo sanguíneo entre el componente y el paciente
es considerado durante la selección del producto. Cada componente lleva el mismo riesgo de hepatitis, virus de la inmunodeficiencia humana
(VIH) de transmisión como la unidad original de la sangre entera.
En contraste, los derivados de plasma (fracciones) tales como albúmina, inmunoglobulinas séricas y factores de coagulación concentrados etc.
se preparan a partir de grandes reservas de plasma de donantes. Tienen requisitos de almacenamiento más flexibles y se dan sin tener en
cuenta la compatibilidad ABO. Dependiendo del proceso de fabricación, derivados pueden llevar a una disminución del riesgo de la hepatitis y la
transmisión del VIH, en comparación con los componentes.
Los componentes del plasma de la sangre se indican a continuación se pueden preparar de banco de sangre por métodos convencionales
(por ejemplo, la centrifugación, la congelación y descongelación) para uso terapéutico. La gravedad específica de los glóbulos rojos y los granulocitos
es muy similar por lo que la centrifugación no es método eficiente de separación de ellos. Mientras que los derivados del plasma (fracciones) se
preparan por el proceso de fabricación bioquímica o sí en condiciones de fabricación farmacéutica en un laboratorio de Fraccionamiento de Plasma
bien equipado.
Componentes de sangre (celulares y plasma) y los derivados del plasma (fracciones): Los componentes
celulares componentes del plasma deruivatives plasmáticas

concentrado de glóbulos rojos plasma congelado fresco Albúmina 5% y 25% de plasma
Los glóbulos rojos Leucocitos-Reducción de individual plasma del donante Protien fracciones Factor VIII
concentrado de plaquetas Crioprecipitado Cryo-plasma concentrado de inmunoglobulinas
Los leucocitos-reducido de plaquetas concentrado de pobre fibrinógeno Otros factores de
plaquetas de aféresis granulocitos, Aféresis coagulación
Preparación de componentes de la sangre es posible debido a:
• sistema de paquetes de plástico de múltiples

• centrífuga refrigerada
• Different gravedad específica de los componentes celulares
Los glóbulos rojos gravedad específica 01.08 a 01.09
gravedad específica de plaquetas 01.03 a 01.04
Plasma gravedad específica 01.02 a 01.03
Debido a diferente peso específico de los componentes celulares, se pueden separar por centrifugación a diferente fuerza
centrífuga en g de tiempo diferente.
La centrifugación para la preparación de componente de la sangre:
Refrigerada velocidad del rotor de centrífuga y la duración de giro son críticos en la preparación de los componentes por centrifugación.
Cada centrífuga debe ser calibrado para velocidades y tiempos de giro para la preparación de cada componente óptimas, tiempos dados
en este manual incluyen sólo el tiempo de aceleración y su velocidad, no el tiempo de deceleración.
194
Componentes preparación de sangre y sus usos
Los componentes de la sangre se preparan por centrifugación a diferente fuerza centrífuga relativa en g en un momento diferente.
La conversión de la fuerza centrífuga relativa (RCF) de rpm depende de la radio del rotor de la centrifugadora. Puede ser calculado por:
1. Nomograma se ilustra en la figura (14.1)

2. Por cualquiera de las fórmulas -
2
••• • rpm
•
yo) fuerza centrífuga relativa en g = 28,38 R
1000 •••
R = radio del rotor de la centrifugadora en pulgadas

ii) fuerza centrífuga relativa en g = 118 X 10- 7 xr XN 2
r =: radio del rotor de la centrifugadora en cm N =
velocidad de rotación (rpm)
fuerza centrífuga relativa en g (xg RCF) para la preparación de componentes:

componentes Girar (RCF) y hora
Los glóbulos
rojos del plasma Girar pesada
Concentrado de plaquetas 5000 xg durante 5 minutos
Croprecipitate plasma rico en
plaquetas Girar la luz 2.000 xg durante 3
minutos
Equipo
• Congelador - 40 ° C y - 70 ° C
• refrigerador de banco de sangre 2-6 ° C
• centrífuga refrigerada con swing a cabo la cabeza y tazas ovales
• Flujo laminar
• Báscula
• Dieléctricas sellador o de aluminio clips y sellador
• Estriptista
• Baño de agua 37 ° C o Plasma desempañador (microvave)
• reciprocador plaquetas (incubadora de plaquetas con agitador)
• baño de crioprecipitado 4 ° C
• dispositivo de conexión estéril (dispositivo de acoplamiento estéril)
Este dispositivo permite que el tubo a partir de dos bolsas separadas a soldar juntos sin perder la esterilidad de ambos. El
diámetro y el material de los tubos a conectar deberán ser similares. Este dispositivo es útil en la fabricación de unidades pediátricas
de una bolsa primaria que no tiene bolsas satélites.
Artículos consumibles
• 450 ml bolsas dobles y triples CPDA bolsas
• 450 ml bolsas dobles y triples con solución de CPD y aditivo (Adsol / SAG-M)
• cajas de cartón fino para almacenar el plasma en el congelador
195
Fig. 14.1 normograma para el cálculo de la fuerza centrífuga relativa y velocidad.

Ejemplo:
Para encontrar la fuerza centrífuga relativa a una distancia radial de 11 cm desde el centro de rotación cuando se opera el certrifuge a
una velocidad de 4000 r / min, coloque una regla en el gráfico que conecta el punto cm 11 sobre el radio Escala de rotación (A) con el
punto / min 4000 r en la escala de velocidad (B). Leer el punto en el que la regla interscts la escala relativa de la fuerza centrífuga (C) -
en este caso, 2.000 x gravedad.
Similarmente, si se conoce la fuerza centrifual relativa deseada, la velocidad necesaria para un radio de rotación dada puede ser
determinada por la conexión de los dos puntos conocidos y leyendo la intersección de la regla con la escala de velocidad.
196
• Plástico sobre raps para bolsas de sangre (preferiblemente)

• Los marcadores apropiados (etiqueta adhesiva) y las instrucciones para cada componente
• Traslado opcional paquetes de
bolsa de conector de la bolsa
Precauciones que deben observarse en los componentes de la preparación: En la recogida
de sangre (véase el Capítulo 2 en la recogida de sangre)
• La selección adecuada de los donantes

• sitio venipunture limpio y aséptico para minimizar la contaminación bacteriana
• venipunture limpia con mínimo trauma del tejido y el libre flujo de la sangre
• El flujo de sangre debe ser ininterrumpida y continua. Si cualquier unidad toma más de 8 minutos a dibujar, que no es
adecuado para la preparación de plaquetas concentrado, plasma fresco congelado o crioprecipitado.
• Una cantidad correcta de sangre proporcional a anticoagulante debe ser recogida en la bolsa primaria que tiene bolsas
satélites conectados con tubos integrales.
• Monitorear la recogida de sangre con el mezclador / Escala automático que se utiliza para la recogida de la cantidad deseada
de la sangre y mezclando la sangre con el anticoagulante.
• Si las plaquetas son para ser cosechado la bolsa de sangre debe mantenerse a emperatura ambiente 20- 24 ° C hasta que las
plaquetas se separan. Las plaquetas deben ser separados dentro de 6-8 horas desde el momento de la recogida de sangre.
• sistema de paquetes de Triple con dos bolsas unidas hace que sea posible hacer que las células rojas, concentrado de plaquetas y
plasma fresco congelado. Si bien el sistema paquetes cuádruples con tres bolsas adjuntas se utiliza para la preparación de glóbulos
rojos, concentrados de plaquetas, crioprecipitado (factor VIII) y plasma pobre en crio. bolsas dobles se utilizan para la fabricación de
glóbulos rojos, y sólo el plasma. en centrifugación
• Oponerse tazas con bolsa de sangre y bolsas satélite debe ser igual en peso excesivas cargas excéntricas de lo contrario
colocados en el rotor de desgaste irregular centrífuga causa y el desgarro y la eventual rotura.
• Las bolsas deben ser colocados de tal manera que su lado ancho se enfrenta a la pared lateral de la copa.
• Disco de goma deben ser usados para equilibrar.
• Plástico sobre viste para las bolsas puede ser utilizado (opcional).
• velocidad correcta de la centrifugación y el tiempo se debe mantener, ya que son los factores más críticos en la preparación de
componentes.
• Observe si hay vibración anormal hasta la velocidad requerida se alcanza, si hay alguna, detenga la centrífuga y comprobar el
peso de las copas opuestas con bolsas. Centrífugas utilizados para la separación se calibran para producir más alto rendimiento de
producto en el menor tiempo en el más bajo de giro posible a fin de causar el menor trauma a cada producto y, al mismo me
mantenimiento de la temperatura óptima para la viabilidad de los componentes. En una unidad de sangre, el centrifugado
197
productos se depositan en capas, comenzando desde la parte inferior: las células rojas de la sangre, células blancas de la sangre, y el plasma rico
en plaquetas. Después de separar el plasma rico en plaquetas (PRP) de los glóbulos rojos, el PRP se centrifuga a una pesada giro para un tiempo
más largo. Esta vez las plaquetas se depositan en el fondo de la bolsa. El plasma se transfiere a otra bolsa satélite.
SANGRE PURA
La sangre entera contiene 450 ± 45 ml o 350 ± 35 ml de sangre del donante más solución anticoagulante. El nombre del anticoagulante se
utiliza con el nombre del producto, por ejemplo CPDA-1 de sangre entera. La sangre entera tiene un hematocrito de 30-40 por ciento.
Mínimo 70% de los glóbulos rojos transfundidos debe sobrevivir en la circulación del receptor 24 horas después de la transfusión. La
sangre almacenada no tiene plaquetas funcionales y no lábil factores de coagulación V y VIII.
Preparación de concentrados de glóbulos rojos (glóbulos rojos empaquetados)

Los glóbulos rojos (glóbulos rojos empaquetados) se preparan mediante la eliminación de la mayor parte del plasma de una unidad de sangre
entera. Los glóbulos rojos tienen una mayor gravedad específica que el plasma, los glóbulos rojos se asientan en la porción inferior de la bolsa
debido a la sedimentación gravitacional (sedimentación) o centrifugación. El plasma se transfiere a una bolsa satélite.
Rojas preparaciones células sanguíneas son: sedimentaron glóbulos rojos: Tienen un PCV de 60-70 por ciento, 30 por ciento de plasma y
todos los leucocitos y las plaquetas originales.
glóbulos rojos centrifugados: Tienen un PCV de 70 a 80 por ciento, 15 por ciento de plasma y todos los leucocitos y las plaquetas originales,
células rojas con aditivo (Adsol o SAG-M): Tienen PCV de 50-60 por ciento, plasma mínimo y todos los leucocitos y las
plaquetas.
Sedimentación:
La sangre después de la recogida se mantiene en posición vertical en

refrigerador a 2-6 ° C, las células rojas se establecen y el plasma
sobrenadante transparente se transfiere a una bolsa satélite.
centrifugación:
1. Recoger volumen apropiado de sangre del donante
en CPDA bolsa doble o triple.
2. Almacenar a 2-6 o C hasta procesada.
3. Coloque las bolsas en los cubos de centrífuga refrigerada
1.Primary 2.100 ml 3. Vaciar
y equilibrar las bolsas opuestas con precisión.
Envase solución ción en transferir
(CPD paquete contenedor de 400 ml
4. Centrifugar a efectos pesados (5000 xg) durante 5 minutos a solución
2-6 o DO. anticoagulante)
Tripa packssystem Blood, con Adsol additivesolution
(Fig. 14-2).
198
5. Expresar aproximadamente 3/4 del plasma en la bolsa satélite.

6. sello doble el tubo entre las bolsas primaria y satélite con plasma. Se separa la bolsa satélite con plasma y mantener
a -30 ° C o por debajo.
7. Mantener las células rojas a 2-6 ° C.
Glóbulos rojos en solución de aditivo (Adsol, SAG-M)

1. Recoger el volumen apropiado de sangre del donante en la bolsa principal de aditivo del sistema, que consiste en una bolsa
primaria que contiene CPD solución anticoagulante o CP2D unido con al menos dos bolsas satélites, uno de los cuales está
vacío y otro contiene 100 ml de solución de aditivos
por ejemplo Adsol o SAG-M. Fig. 14.2
2. Almacenar a 2-6 o C hasta procesada.
3. Centrifugar a efectos pesados que el anterior.
4. Eliminar la mayor parte del plasma sobrenadante en la bolsa satélite vacía.
5. Añadir la solución de aditivos a los glóbulos rojos con en 72 horas de la extracción.
6. Mantener las células rojas a 2-4 ° C y el plasma a -30 ° C o por debajo.
Componentes de la sangre de leucocitos reducido

Los leucocitos en componentes de la sangre pueden causar:
• No hemolítica reacción a la transfusión febril (NHFTR)
• antígeno leucocitario humano (HLA) alloimmunizaion
• virus La transmisión de virus leukotropic (citomegalovirus (CMV), virus de Epstein-Barr (EBV) y linfotrópico de
células T humano tipo 1 (HTLV-1)
• Transfusion relacionada La enfermedad injerto contra huésped
• Transfusión de lesión pulmonar aguda relacionada (TRALI)
• Transfusion inmunosupresión relacionada La reducción del contenido de leucocitos a menos de 5 x 10 8 en una unidad de glóbulos
rojos impide que la mayoría de las reacciones transfusionales febriles no hemolíticas. Para otras complicaciones como la prevención de la
transmisión de CM V o aloinmunización a los antígenos HLA, el contenido de leucocitos debe reducirse a menos de 5 x 10 6 C en una unidad de
glóbulos rojos.
reducción de leucocitos se ha usado con un éxito considerable para evitar FNHTR pero a veces publicar almacenamiento leuco-reducción
no es mucho eficaz como citocinas generadas por los leucocitos durante el almacenamiento pueden causar FNHTR.
Las citoquinas son generados por leucocitos, incluso a 2-6 ° C, pero a un grado mucho mayor a 20- 24 ° C. Los niveles de interleucina una
alfa más beta (1L- la e IL-IB), la interleucina 6 (IL-6) y factor de necrosis tumoral alfa (TNF-a) aumentar bruscamente en unidades almacenadas con
los leucocitos en comparación con unidades similares almacenados después de leuco-reducción (pre acopio leuco-redction). los niveles de
citoquinas aumentan en proporción directa con el número de leucocitos. Por lo tanto leuco-reducción antes (reducción leuko- pre-almacenamiento)
de almacenamiento en el banco de sangre es mucho mejor que el leuco-reducción después (reducción leuko- post-almacenamiento) de
almacenamiento en el lado de la cama del paciente para eliminar FNHTR.
Los donantes de linfocitos de injerto en el receptor y reaccionar contra antígenos del huésped puede causar GVHD.
La reacción entre los antígenos de leucocitos y anticuerpos puede resultar en leuco-aglutinación, agregados de células blancas de
ser atrapado en la microcirculación de los pulmones, causando edema pulmonar, que es relacionada con la transfusión lesión pulmonar
aguda (TRALI). En la mayoría de los casos de TRALI.
199
anticuerpos leucocitos en receptor de la transfusión previamente sensibilizadas reaccionan con los leucocitos en la sangre o plasma
transfundida o revertir a ella, es decir, anticuerpos de leucocitos en la sangre o plasma reaccionan con los leucocitos del receptor de formación
de leucocitos agregados que están atrapados en la microcirculación de los pulmones, causando TRALI.
Leucocitos residuales aproximadas en los componentes sanguíneos celulares
sangre entera fresca de glóbulos rojos concentrar glóbulos 10 9

rojos de la capa empobrecida en Buffy Red células, de células 10 8.- 10 9
rojas por filtración reducida de leucocitos-lavado se concentran 10 8
desglicerolizados concetrate plaquetas rojo <10 7
10 7
10 6- 10 7
<10 7
Los métodos de la preparación de células rojas de leucocitos reducido

• La centrifugación y la eliminación de la capa leucocitaria
• Filtración
• El lavado de las células rojas con solución salina
• Congelación y descongelación de las células rojas
La centrifugación y la eliminación de la capa leucocitaria:

En el método de centrifugación para la reducción de leuokocyte, la capa de la capa leucocitaria entre los glóbulos rojos y el plasma que aparecen
después de la centrifugación se extrae junto con el plasma y algunas células rojas en una bolsa satélite. Una variación de este método es para
hacer girar los glóbulos rojos en una posición invertida para que las células rojas pueden ser transferidos a una bolsa satélite, dejando la capa
leucocitaria, algunos glóbulos rojos y plasma detrás en la bolsa primaria.
Método
1. La unidad de sangre completa se centrifuga en una posición vertical a 5000 xg durante 5 minutos a 4 ° C.
2. El plasma sobrenadante, capa leucocitaria y algunas células rojas se transfieren a una bolsa satélite.
3. Doble cierre del tubo entre la bolsa primaria y la bolsa satélite, separarlos.
4. Mantener las células rojas a 4 ° C.
Este es uno de los método más fácil y menos costoso y se puede hacer en el sistema cercano, pero es el menos eficiente.
Reduce el nivel de leucocitos en un 70-80% (menos de 1 log) y se sacrifica 20% de las células rojas. Que no cumple las normas mínimas
para la reducción del CMB. Además de su hematocrito es más de> 80%, que es difícil de transfundir a menos algo de plasma se
devuelve de nuevo o se añade solución de aditivos. También es el método laborioso. Hoy en día este método ha sido reemplazado por
otras técnicas más eficientes.
filtración:
Existen muchos tipos de filtros están disponibles en la actualidad que pueden producir un producto reducido de leucocitos aceptable dependiendo de
la exigencia.
200
Los componentes sanguíneos preparación y su usuario
filtros de microagregados son filtros de poliéster o de pantalla de plástico con un tamaño de poro de 20-40 micras., que atrapan la
mayoría de los microagregados compuestas de glóbulos blancos, plaquetas, y los hilos de fibrina que se forman en la sangre después de 5-6
días de almacenamiento refrigerado. Estos microagregados pasan a través de filtros de sangre estándar y se encuentran atrapados en
micro-circulación de pulmón causando TRALI. La eficacia de los filtros de microagregados de leuco-reducción se incrementa por enfriamiento de
la unidad en 4 0 C durante 3-4 horas después de la centrifugación y antes de la filtración. La filtración de este tipo suelen dar una reducción de 1 -2
log (90-92%) de los leucocitos en la unidad (<5 x 10 8) y recuperar la mayor parte de los glóbulos rojos. Tales células LR-rojos reducen la
incidencia de NHFTRs única pero no alcanzar otros objetivos de leuco-reducción.
filtros de leucocitos reductor más reciente (tercera generación) utilizan absorción selectiva de leucocitos o leucocitos y
plaquetas. Están hechas de acetato de poliéster o celulosa y producirán una reducción de 2 a 4 log (99-99,9%) de los glóbulos
blancos (<5 x 10 6). Hay muy poca pérdida de glóbulos rojos y el proceso es bastante fácil. Evitan allommunization a los antígenos
HLA, la transmisión de CMV, y NHFTRs.
Leucorreducción puede hacerse en tres puntos diferentes.
(1) Pre acopio leuco-reducción (2) Después de leuco-reducción de almacenamiento en el banco
de sangre, antes de la emisión (3) Bed filtración lado
Pre acopio leuco-reducción:

Los leucocitos comienzan a desintegrarse rápidamente cuando se almacena a 1-6 ° C. Estos fragmentos de glóbulos blancos pueden iniciar una
respuesta inmune a antígenos HLA y llevar a la actividad viral. células blancas en la sangre almacenada también pueden producir citoquinas que
pueden causar NHFTRs. Con el fin de prevenir estos efectos puede ser deseable para eliminar las células blancas antes de su almacenamiento. Esto
se puede hacer mediante el uso de una de las dos tecnologías, el dispositivo de conexión tubo estéril o el filtro en línea.
Utilizando el dispositivo de tubo estéril de conexión, un LR-filtro de cabecera se puede conectar a una unidad de sangre antes de
su almacenamiento y para otra bolsa estéril. Las células se pueden filtrar de la bolsa primaria a través de filtro unido en la bolsa adjunto.
Esto conserva la fecha de caducidad original del producto inicial y todo rojo células, plaquetas y plasma.
La segunda tecnología es posible con un sistema de bolsas de recogida de sangre diseñado especialmente con filtros
integral (en línea) incorporados entre la bolsa de recogida principal y una bolsa satélite (fig, 14.3).
Fig. 14.3
Paquete de sangre con filtro integrado para Leucorreducción de sangre entera
201
Dentro de las 8 horas después de la flebotomía, la sangre se hace pasar a través de este filtro en un adjunto
bolsa de recolección. Los glóbulos rojos filtrados en la bolsa se reducen de leucocitos y retienen la fecha de caducidad originales.
eliminación de leucocitos con este sistema es 99 a 99,9 por ciento (3 log), con> 90 por ciento de las células rojas restante.
Impacto de almacenamiento previo Leucorreducción
Los resultados de almacenamiento previo Leucoreducción beneficios potenciales del paciente
Citoquinas poroduction se reduce o * Disminución de febril no hemolítica

elimina reacciones transfusionales
Los glóbulos blancos se eliminan antes de la * aloinmunización disminución

fragmentación * Reducir la exposición a los virus intracelulares
(Por ejemplo CMV)
metástasis tumorales se reducen en animales * Prevenir la inmunomodulación
* Reducir la propagación del tumor (Blajcman et al.
Blood, 82 (suppl.392a, 1993)
Después leukoredction de almacenamiento:

La sangre o las células rojas se filtran para reducir los leucocitos en el banco de sangre antes de la emisión. En la filtración de laboratorio de células de sangre / rojo
puede ser adecuadamente estandarizar y adaptado al programa de control de calidad. Sin embargo las células rojas pueden tener leucocitos desintegrado y citoquinas.
Cabecera de filtración:
filtración de noche comúnmente se practica ha demostrado ser muy eficaz para prevenir NHFTRs sino que también puede haber desintegrado
leucocitos y citoquinas que pueden causar FNHTRs. Ellos no son muy eficaces para la prevención de la aloinmunización HLA.
Lavado de los glóbulos rojos para la reducción de leucocitos:
El lavado de glóbulos rojos elimina leucocitos, plaquetas y plasma, Se puede hacer manualmente o mediante máquina por ejemplo la máquina de lavado de
células Haemonetic.
Método manual
(1) Recoger la sangre en una doble bolsa y almacenar a 2-4 ° C, hasta que se procesa. (2) Centrifugar la bolsa a 5.000 xg (SPIN pesado) durante 5 minutos a 2-6 °
C. (3) Separar el plasma, junto con la capa leucocitaria en una bolsa de bolsa satélite / transferencia. (4) Junta doble tubo entre las bolsas primaria y satélite. (5) Conectar
la bolsa con los glóbulos rojos a IV botella de solución salina con la bolsa para embotellar conector de bajo flujo laminar.
Transferir aproximadamente 250 ml de solución salina en la bolsa de glóbulos rojos. (6) Sujetar el tubo de conector de botella (conjunto de transferencia) y
sellar el tubo de la bolsa distal a
la espiga o aguja del conjunto de transferencia por sellador-di eléctrico. Retire la aguja del tubo de la bolsa y para abarcar la espiga
/ aguja con su cubierta de plástico. 202

(7) Mezclar bien las células rojas y solución salina. Centrifugar la bolsa a efectos pesados (5000 xg durante 5
minutos). (8) Coloque la bolsa en el exprimidor y retire la solución salina en el recipiente de residuos.
(9) Repetir el lavado tres veces (pasos 5 a 8). (10) Después del lavado final añadir 60-70 ml de solución salina
en las células rojas y mezclar. (11) Sellar el tubo cerca de la bolsa y separar el conector. (12) Mantener células
rojos lavados a 2-6 ° C.
• Todo el proceso se realiza bajo un flujo laminar.
• Período de validez de los glóbulos rojos lavados es de 24 horas.
• se deben tomar todas las precauciones asépticas.
Extracción de los leucocitos por congelación y DEGLYCEROROLIZATION.

Véase el capítulo 3 sobre 'Conservación y almacenamiento de sangre'.
PREPARACIÓN DE PLASMA RICO EN PLAQUETAS (PRP) y

plaquetas RICH concetrate (PC)
El concentrado de plaquetas se puede preparar a partir de:
1. de plaquetas de donantes aleatorios (preparado a partir de 450 ml de sangre entera)
2. plaquetas del donante individual preparado por aféresis.
Plaquetas de donantes aleatorios
Se prepara a partir de 450 ml de sangre entera se mantuvo a temperatura ambiente (22-22 ° C) y dentro de 6 a 8 horas de la recogida.
Procedimiento:
1. Recoger 450 ml de sangre por una limpia, solo venipunctuer en 450 ml CPDA o sistema triple bolsas Adsol / SAGM.
2. Mantenga la bolsa de sangre a temperatura ambiente (20-22 ° C) antes de plaquetas que se preparan, por no más de 6 horas. No relajarse en
cualquier momento antes o durante la separación de plaquetas.
3. Mantenga las bolsas en los cubos de centrífuga refrigerada y equilibrarlas curately. Centrifugar las bolsas de sangre
a 20-24 ° C en Spin luz para el tiempo apropiado (2000 xg durante 3 minutos).
4. Separada 4/5 del plasma rico en plaquetas (PRP) en una bolsa satélite si se utilizan sistemas de CPDA triples bolsas. Doble
cierre del tubo entre la bolsa primaria y las bolsas satélite. Separar la bolsa primaria con eritrocitos. Una de la bolsa satélite
contienen PRP. Si se utiliza el sistema de bolsas triples Adsol / SAG-M, transfere todo PRP en la bolsa satélite vacía y
añadir la solución de aditivos a los glóbulos rojos. Doble cierre el tubo de la bolsa con las células rojas y separarla de las
bolsas satélites. Una de las bolsas satélites contiene PRP. PRP se puede usar como tal o se procesa adicionalmente para
preparar concentrado de plaquetas (PC).
5. Centrifugar la bolsa con PRP y otra bolsa satélite a 20-40 ° C en 'giro pesado' para el tiempo apropiado, por ejemplo 5000xg
durante 5 minutos.
6. Expresar sobrenadante de plaquetas - plasma pobre en otra bolsa satélite vacía.
203
7. Deje aproximadamente 50 ml de plasma con las plaquetas y la etiqueta.
8. Deja concentrado de plaquetas (PC) no alterados a 20-22 ° C durante 1 hora, a continuación, volver a suspender las plaquetas en el plasma mediante la
mezcla suavemente durante l0 min.
9. plaquetas tienda a 20-22 ° C con agitación constante en la incubadora de plaquetas con agitador hasta que se utiliza. La vida útil es de 3-5
días, dependiendo del tipo de bolsas de plástico utilizado (véase el capítulo 3 en la conservación y almacenamiento de sangre)
UNA unidad de plaquetas concentrado preparado a partir de 450 ml de sangre contiene:
El volumen plasmático 40-70 ml
Rendimiento de plaquetas 5,5 x 10 10
CMB ≥10 8
RBC Traces a 0,5 ml
pH 6,0 o más
Cálculo de plaquetas Rendimiento
Número de plaquetas en sangre entera = Plaquetas por mm 3 x 1,000 x volumen de sangre total (ml)
Número de plaquetas en PRP = Plaquetas por mm 3 x 1,000 x volumen de PRP (ml)
Número de plaquetas en la PC = Plaquetas por mm 3 x 1,000 x volumen de PC (ml)
Cálculo
% De las plaquetas en PRP dió Número de plaquetas en el PRP X 100 = erofplateletin
Numb que leblo desde
Número de plaquetas en PC X 100

% De Plaquetas dió en PC = ______________________________
Número de plaquetas en PRP
Precaución y almacenamiento:
pH no debe descender por debajo de 6. Una disminución en las causas de pH:
• Cambio en la forma de las plaquetas de disco a esfera.
• formación de pseudópodos.
• La liberación de gránulos de plaquetas.
Los cambios anteriores son responsables de la baja recuperación y pobres supervivencia de las plaquetas in vivo.
Mantenimiento del pH y la función de las plaquetas durante el almacenamiento depende de la permeabilidad de la bolsa de almacenamiento
para el oxígeno y el dióxido de carbono. Las plaquetas se almacenan en bolsas hechas de plyvinylchloride estándar (PVC) con Di- (2-ethylhexyle)
ftalato (DEHP) plastificante hasta 72 horas a temperatura ambiente
(20-24 ° C). Nuevas bolsas de plástico de poliolefina sin plastificante, o PVC de pared delgada con tri (2-etilhexil)
trimelitato (PDM) plastificante mantener el nivel de pH y de plaquetas función hasta aproximadamente
7 días, pero se recomienda utilizarlos dentro de los 5 días siguientes a la fecha de recogida de la sangre.
La agitación durante el almacenamiento ayuda el intercambio de gases, el mantenimiento del pH, y reducir
formación de plaquetas agregados. Agitador (cama plana) con 1” a 1.5” trazos en 70 ciclos por minuto a 20-24 ° C, da buenos
resultados. 204
concetrate GRANULOCITOS
concentrado de granulocitos puede ser preparado por:
1. unidad de donante único
2. Leucaféresis por los glóbulos separador
Como la gravedad específica de los glóbulos rojos y los granulocitos es muy similar, la separación de
granulocitos por centrifugación no es satisfactoria. La leucaféresis es un método mejor.
Procedimiento: (Preparación de los granulocitos de la sangre donante único).
1. Recoger 450 ml de sangre del donante en 450 ml de CPD A o triple sistema de paquetes de Adsol SAGM y mantener a 20-24 ° C antes
de separar la capa leucocitaria, pero en ningún caso más de 6 hr después de la recogida de sangre.
2. Mantener el bolsas en los cubos de productos refrigerados, se centrifugan y equilibrar con precisión. Se centrifuga la las bolsas de sangre a
20-24 ° C en Spin luz para el tiempo apropiado, por ejemplo 2000x g durante 3 minutos.
3. expresar la plasma sobrenadante en primera bolsa satélite. Deje aproximadamente 20 ml de plasma por encima de la capa celular (Capa
leucocitaria) en la bolsa primaria. doble junta el tubo entre primaria

bolsa y bolsa con satélite plasma y separarlo.
4. expresar la 20 ml de plasma y los superiores 20-25 ml de la capa celular, rica en glóbulos blancos, en otro paquete de satélite. sello doble tubo
y separada. El rendimiento de las células blancas por este método es de aproximadamente 1 x 10 9, de los cuales alrededor de la mitad es decir,
0,5-0,6 x 10 9
son los granulocitos por 450 ml unidad de sangre. Eso está fuertemente contaminada con las plaquetas y otros
leucocitos. Los granulocitos pueden almacenarse a 20-24 ° C, pero que deben utilizarse tan pronto como sea posible
y no más tarde de 24 horas desde la recogida de sangre. Para los detalles de la
leucaféresis ver el capítulo sobre 'La aféresis'.
FRESH forzen PLASAMA (FFP)
FFP es plasma obtenido a partir de un solo donante, ya sea por donación normal o por plasmaféresis y se congeló rápidamente dentro de
las 6-8 horas de ser recogido. Contiene todos los factores de coagulación y gran
se debe tener cuidado durante la recopilación de la sangre, la congelación y descongelación de preservar su actividad.
Acumulación de sangre
1. La sangre debe ser recogida por un limpio, sola punción venosa.
2. Fila de sangre debe ser rápida y constante.
3. El tiempo total tomado para recoger 450 ml de sangre no debe ser más de 8 minutos.
procedimiento:
1. Recoger volumen apropiado de sangre en 350-450 ml sistemas de bolsas dobles CPDA o sistema triple bolsas SAGM /
Adsol 450 ml.
2. Almacenar a 4 ° C o en la sala de aire -conditioned hasta procesa pero no para más de 6-8 horas.
3. Coloque las bolsas en el cubo de la centrífuga refrigerada, equilibrar con precisión y

centrifugar a giro pesada (5.000 xg durante 5 minutos) a 4 ° C.
4. Expresar aproximadamente cuatro quintas partes del plasma en una bolsa satélite, si se recogió sangre
en el sistema de bolsas CPDA doble / triple. sello doble el tubo entre la bolsa principal y el
205
medicina transfusional Manual técnico satélite
bolsa satélite que tiene de plasma con clips metálicos o sellador dieléctrico. Separar el plasma bolsa satélite que tiene. Si la sangre
se recoge en triple sistema de bolsa de SAGM o Adsol, expresar todo el plasma en la bolsa satélite.
5. Etiqueta de la bolsa de plasma y se congela rápidamente. Esto debe hacerse tan pronto como sea posible después de la recolección,
en cualquier caso dentro de las 6-8 horas. El proceso de congelación completa debe ser tan corto como sea posible y
preferiblemente no deben tomar más de una hora. La congelación rápida se puede lograr mediante la difusión del plasma en una capa
delgada (bolsas coloca plana y no vertical) en congelador a - 70 ° C o la colocación de las bolsas protegidas por un plástico sobre
envoltura a - 70 ° C en etanol baño de hielo seco.
6. Se ha demostrado que los factores de coagulación más lábiles se conservan para un año si FFP se mantiene a -30 ° C o por debajo.
Si FFP no se utiliza dentro de un año, se designó de nuevo como un plasma de un donante individual que se puede mantener más de
4 años a -30 ° C o menos.
7. La formación de crioprecipitados (Que contiene VIIIC factor de, fibrinógeno y fibronectina)

debe evitarse durante la descongelación ya que reduciría las propiedades de coagulación esperados. Descongelarlo en un Defroster
plasma (microondas) o colocar la bolsa en un plástico sobre envoltura y poner en un baño de agua circulante 37 ° C (los puertos de
entrada de la bolsa deben permanecer por encima del agua).
El FFP debe administrarse tan pronto como sea posible después de la descongelación, y en cualquier caso dentro de las 12 horas si se mantiene a 2-6 ° C.
CRYO PRECIPITADO
El crioprecipitado se precipitan las proteínas de plasma, rico en Factor VIII y de fibrinógeno, obtenidos
a partir de una sola unidad de plasma fresco (aproximadamente 200 ml) por congelación rápida dentro de las 6 horas de la recogida.
Eso es rico en factor VIII, factor de von-Willebrand, fibrinógeno (XIII Factor) y fibronectina.
Varios factores que mejoran el rendimiento de los factores VIII en crioprecipitado son:
1. Limpia, única punción venosa en el primer intento.
2. flujo rápido de sangre, donación de sangre (450 ml) obtenido en menos de 8-10 minutos se debe utilizar.
3. una mezcla adecuada de la sangre y anticoagulante.
4. La congelación rápida de plasma tan pronto como sea posible después de la recogida en cualquier caso dentro de las 6-8 horas después de la recogida
como se hizo para la preparación de FFP.
5. descongelación rápida a 4 ° C en baño de agua circulante.
6. El uso de la técnica de sifón que evita inContact restante plasma descongelado con el crioprecipitado.
Procedimiento
1. Preparar plasma fresco congelado (FFP), como se describe en FFP, para la transformación en
crioprecipitado.
2. Congelar el plasma a -70 ° C en el congelador o en el baño seco de etanol.
3. plasma congelado deshielo ya sea a 4 ° C en una habitación fría (deshielo aire) o a 4 ° C en baño de agua circulante.
• Si FFP se descongela en una habitación fría, colgar la bolsa en una posición invertida con los puertos más inferior y coloque la segunda
bolsa satélite en un estante inferior. Observar el paquete con frecuencia para asegurarse de que el plasma descongelado está fluyendo
en la bolsa satélite y no acumular
206
en la bolsa primaria. Cuando 10-15 ml de plasma permanecen con el sello de crioprecipitado la

tubos y bolsas separadas.
• Si FFP se descongela en 4 ° C baño de agua, se centrifuga la bolsa cuando el plasma es fangosa a 5000 xg durante 5 minutos a 4 °
C. A continuación, el plasma desprovisto de crioprecipitado sobrenadante se desvía en la bolsa satélite,
dejando 10-15 ml de plasma con crioprecipitado. Sello el tubo
y separar las bolsas. bolsas etiqueta.
4. Guarde la bolsa con croprecipitate a -30 ° C o inferior y bolsa con plasma Cryo-pobres en el segundo
satélite bolso es almacenado a - 20 ° C o abajo.
El almacenamiento y la vida útil de croprecipitate: Un año a -30 ° C o menos.
crioprecipitado reconstituir
(Descongelación y tema de crioprecipitado) Reconstituir crioprecipitado antes de la emisión mediante la colocación en una envoltura en un baño de agua C
30 ° hasta la
crioprecipitado se haya disuelto. Crioprecipitado debe volvió a suspender a fondo por amasado suave. Después de la descongelación de la piscina
la crioprecipitado de todo bolsas descongeladas en una bolsa bajo flujo laminar por
los medios de bolsa para conector de la bolsa. Lavar las bolsas vacías con 10 ml de solución salina normal para disolver residual
crioprecipitado y añadir a crioprecipitado agrupado. Una vez descongelado, crioprecipitado debe
mantenerse a 2-6 ° C y se administra con en 4 horas No debe congelarse. Uno bolsa de crioprecipitado contiene en un promedio de
80-120 unidades de factor VIII en 15-20 ml de plasma.
PLASMA donante individual
plasma solo donante se puede preparar por lo separa de las células rojas cualquier momento hasta 5 días después de la expiración de toda la unidad de
sangre. Cuando se almacena a -20 ° C o inferior, plasma donante individual puede mantenerse hasta 5 años.
Un periodo de almacenamiento pre-separación prolongada aumenta su contenido de potasio y amoníaco y en

tiempos de hemoglobina libre. Generalmente, que no tiene actividad de coagulación responsable. A causa de estos
desventajas, plasma separado de fuera de fecha se evitan para perfusión.
CRIOPRECIPITADO plasma pobre
Es un subproducto de la preparación del crioprecipitado. Carece lábil factores de coagulación V y VI11 y fibrinógeno. Contiene niveles
adecuados de la coagulación estable factores II, VII, IX y X. Es congelados y almacenados a -20 ° C o más baja temperatura durante 5
años.
Reparación de los componentes de sangre reducido-LEUKO
(Semi-automatizado Método)
Leuco-reducción en el componente de la sangre mediante la eliminación de la capa leucocitaria de la sangre entera por el manual
procedimiento es laborioso. Esta conducido a la necesidad de automatizar la preparación de leuco-agotado
componentes de la sangre entera para lograr consistencia en la calidad y reproducibilidad. M / s Baxter ha desarrollado sistema Opti
con Optipacs especialmente configurados para producir leuco reducido
componentes de la sangre y para cosechar concentrado leuco-plaquetaria reducida de la capa leucocitaria.
En más nueva técnica denominada método de 'parte superior e inferior', desarrollado por M / S Baxter, sangre completa se centrifuga a una velocidad relativamente
alta. Después de giro dura, la capa leucocitaria contiene glóbulos blancos y ambos
207
plaquetas. De hecho, la ley de la física dictan que no sólo las plaquetas en la parte superior de la bolsa caerá a la capa leucocitaria, sino también que
las plaquetas en la parte inferior de las bolsas subirán a la capa leucocitaria. Por lo que la capa leucocitaria es una buena fuente de plaquetas
también. El plasma se transfiere a una bolsa satélite y glóbulos rojos se separan en la bolsa en la parte inferior que tiene solución de aditivo SAGM.
La bolsa primaria, que contiene la suspensión de 10-20 ml de glóbulos rojos, la capa leucocitaria y algo de plasma,
se centrifuga a giro suave y
plaquetas suspendidas en plasma se expresan en la bolsa satélite vacía lentamente y con cuidado.
OPTIPRESS ( Fig 14.4)
Este es un extractor automático usando dos placas de presión paralelos, uno es estacionaria y otra es accionado neumáticamente que
simultáneamente expulsar plasma en una bolsa satélite vacía y células rojas en otra bolsa que contiene SAG-M una solución aditiva.
El sistema está diseñado para dejar un volumen específico de la capa leucocitaria con plasma en el paquete de colección original. Una luz
transmisor y dos fotocélulas de control el flujo de glóbulos rojos y plasma
en bolsas separadas por los medios de dos dispositivos de sujeción automatizados en el OPTIPRESS.
OPTIPACKS
El sistema optipacs consiste en una bolsa de 600 ml hecho de PVC plastificado con DEPH tener solución CPD 63 ml con dos salida en el fondo
y uno en la parte superior. Una de la parte inferior hacia fuera let tiene un tubo de conexión con la aguja para la flebotomía, mientras que el
otro está conectado a una bolsa de 400 ml hecho de PVC plastificado con DEPH que contiene 100 ml de solución de aditivo SAG-M. La salida
superior
Fie. 14.4 OPTIPRESS
Fig. 14.4 OPTIPRESS
208
está conectado a través de un tubo de V-pieza a dos vacíos 400 ml bolsas hechas de PVC plastificado con PDM, uno para la recogida de plasma y el
otro para la recogida de las plaquetas a almacenar durante 5 días.
Fig. 14.5
Configuración de la unidad de bolsa de sangre OPTIAC cuádruple
Preparación de células LR-rojo Concentrado Método:
1. 450 ± 10% se recoge la sangre en la bolsa principal de sistema Optipac tener CPD
anticoagulante. La sangre anticoagulada se almacena a temperatura ambiente (22 ° C) durante aproximadamente 4 horas antes del procesamiento
adicional.
2. La sangre se centrifuga a efectos pesados durante 8 minutos.
3. La unidad de centrífuga se pone en el OPTIPRESS y se pulsa un botón para activar la placa de presión.
4. Abrir el tubo de conexión entre la bolsa y la transferencia de plasma envase primario para permitir el flujo de plasma a una de la
bolsa satélite. A continuación, abra la conexión del tubo entre la bolsa primaria y la bolsa con SAG-M para permitir el flujo de
sangre.
5. Cuando el proceso se ha completado ambos tubos superior e inferior sujetan automáticamente y el

flujo de glóbulos rojos y parada de plasma.
6. Las bolsas que contienen glóbulos rojos y plasma se sellan con sellador-di eléctrico y se separó.
7. Los glóbulos rojos en solución de aditivos se mantiene a 2-6 ° C y el plasma a -30 ° C o menos.
Preparación de concentrado de plaquetas a partir de la capa Buffy:
YO. La bolsa primaria con la capa leucocitaria y el plasma con bolsa satélite se deja colgando durante aproximadamente 2 horas a temperatura
ambiente (22 ° C), después se centrifugó a giro luz a 22 ° C.
209
2. El plasma sobrenadante con plaquetas se transfiere lentamente en la bolsa vacía usando extractor convencional.
Para más detalles consulte las instrucciones en el manual suministrado con el equipo.
Conclusión
• El proceso se semi-automatizado.
• La consistencia en la calidad de los productos y la reproducibilidad es mejor.
• Todo el proceso dura aproximadamente 6-8 horas por lo que la calidad y la vida útil de las plaquetas no se efectúa y los niveles de
los factores VIII y V en FFP no deje caer.
• concentrados de hematíes tienen en promedio 10 8 leucocitos por ejemplo, reducción de leucocitos de un log, la incidencia de FNHTR se
redujo significativamente en comparación con las células rojas en solución aditiva preparada sin la eliminación de la capa leucocitaria.
Además se proporciona una buena base para más leucorreducción en los glóbulos rojos que tiene menos de 5,5 x 10 6 el uso de filtros de
reducción de leuco laterales de la cama e incluso reduce las posibilidades de HLA de sensibilización de antígeno.
• El rendimiento de plaquetas en concentrados de plaquetas preparado a partir de buffy es en promedio de 6-9 x 10 10 y leuco-reducción es de
aproximadamente 90%, lo que es significativamente más que eso preparado a partir de PRP. Los concentrados de plaquetas tienen en
promedio 10 7 leucocitos.
• Los leucocitos se eliminan antes de su almacenamiento, se forman menos cantidad de citoquinas, y el número de células blancas de
la degenerados es menor en las células rojas y concentrado de plaquetas. Incidencia de FNHTRs se reduce además por su
transfusión.
• espín duro inicial causa más rendimiento de plasma dejando muy poca cantidad de plasma en los glóbulos rojos, esto reduce la
incidencia de reacciones alérgicas y anafilácticas después de las células rojas de la transfusión. Además, el rendimiento de FFP
es más y allí por un mejor rendimiento de croprecipitate (factores V y VIII).
desventajas:
• Hay pérdida de glóbulos rojos alrededor del 20%.
• Es más costoso.
TERAPÉUTICO USOS De los componentes sanguíneos Funciones de
sangre completa de sangre entera
• Los glóbulos rojos en toda la sangre carry O 2 a los tejidos
• Plasma en la sangre entera es expansor del volumen de sangre
• La sangre entera es una fuente de proteínas con propiedades oncótica
• Es una fuente de factores de la coagulación no lábiles
Indicaciones para el uso :
La sangre entera está indicado para aquellos pacientes que tienen una disminución en los síntomas la capacidad de transporte de oxígeno combinado
con hipovolemia de suficiente grado asociada con shock. Pocos pacientes entran en esta categoría. Los pacientes de trauma y de cirugía mayor
o exanguinotransfusión pueden ser considerados para toda la transfusión de sangre.
Incluso en un traumatismo importante o intervención quirúrgica, una pérdida de sangre hasta el 30% puede ser corregido por el uso de soluciones
crytstalloid solo. Si la pérdida de sangre es más de un 30% y el paciente está en riesgo de shock hemorrágico transfusión de sangre completa es el
componente de elección para restaurar el volumen sanguíneo y la capacidad de transporte de oxígeno. Incluso en la mayoría de estos casos, la transfusión
de combinación de 210
células cristaloides y rojos o glóbulos rojos y plasma fresco congelado proporciona tanto la expansión de volumen y capacidad de transporte de oxígeno.
SANGRE FRESCA
La sangre entera o los glóbulos rojos concentrados de menos de 12-24 horas de edad desde el momento de la recogida se consideran fresco. El
procesamiento de sangre de donantes que incluye la detección de los marcadores de
enfermedades transmitidas por transfusión por ejemplo, VIH, HBsAg, HCV, Treponema pallidum, etc., ABO y Rh a escribir y de detección de
anticuerpos, raramente se completa en 24 horas. Es difícil proporcionar sangre fresca garantizar la seguridad de la sangre.
Acerca de 80-90% de las plaquetas en una unidad de sangre se convierten en no funcionales y aproximadamente 30-40% de lábil factores de coagulación
V y VIII se pierden en 24 horas en el almacenamiento a 2-6 ° C. Además de una o dos unidades de sangre fresca no ayudará a un paciente con una deficiencia
específica de componentes.
La sangre fresca podría justificarse antes, cuando estaban disponibles y las pruebas para no hay instalaciones para la separación de
componentes la enfermedad transmitida por transfusión no fuera obligatorio. Ahi esta
creencia de que tiene algunas propiedades humorales místicas. Pero es mito.
No hay indicaciones válidas para la transfusión de sangre fresca antes de completar todas las pruebas necesarias. Antes de que se
requisado sangre fresca, eso Es conveniente establecer el diagnóstico y planificar
componente (s) terapia específica.
Aunque la justificación de sangre fresca es a menudo difícil, puede tener una sangría en la creencia de que
sangre fresca proporciona la mayor capacidad de oxígeno portadora, ya que tiene el nivel máximo de
2, 3 - di-fosfoglicerato (2, 3-DPG) y la cantidad mínima de potasio en comparación con sangre más antigua. Los niveles de 2, 3-DPG
retorno a la normalidad con en 12 a 24 horas después de la transfusión en los receptores, para que esto no presentar un problema
para la transfusión de rutina. 2, 3-DPG y potasio pueden ser importantes
en los recién nacidos prematuros y otros pacientes con deterioro de la función cardíaca,
choque hemorrágico, o cortar la enfermedad pulmonar.
Los recién nacidos a veces necesitan sangre fresca porque que tienen un alto porcentaje de fetal
hemoglobina, que no libera oxígeno a los tejidos, así como la hemoglobina adulta. Su
2, los niveles de 3-DPG pueden verse gravemente disminuyeron en condiciones como síndrome de dificultad respiratoria, y la sangre
transfundida representa una gran proporción de su volumen de sangre total. En esos casos,
la sangre de menos de 7 días de edad, con niveles casi completos de 2, 3 - DPG es de importancia clínica. En transfusión de intercambio y en la sangre
cirugía a corazón abierto menos de 7 días de edad es apropiado.
Preocupación el alto nivel de potasio y hipercalemia causada por potasio en almacena

la sangre rara vez se justifica. Las posibles excepciones son pacientes que están persistentemente hipotensor, mala perfusión, y acidosis y
que necesitan gran cantidad de sangre.
La sangre que es menos de 7 días de edad después de la flebotomía es más práctico y puede ser fácilmente disponible para algunos pacientes
especiales.
Una unidad de sangre total de 350 ml de sangre aumentará la hemoglobina en alrededor de 0,75 g / dl mientras que una unidad de 450 ml
aumentará Hb en alrededor de 1 g / dl en un paciente adulto de aproximadamente 70 kg de peso corporal que no está sangrando. En los pacientes
pediátricos de la transfusión de 8 ml / Kg de glóbulos rojos aumentará la Hb aproximadamente por 1 g / dl.
Glóbulos rojos (glóbulos rojos empaquetados)

Los glóbulos rojos están indicados para el aumento de glóbulos rojos en masa en la anemia sintomática que requieren una mayor capacidad de transporte
de oxígeno. En los pacientes con anemia sintomática tener la frecuencia del pulso más de
100 / minuto, la tasa de respiración más de 30 respiraciones / minuto, mareos, debilidad, angina, y la dificultad
211
en el pensamiento. Las indicaciones de transfusión de células son:
• En condiciones de producción de la médula ósea disminución
La anemia
aplásica leucemia
• En las células rojas condiciones de supervivencia disminuyó
La talasemia anemia
Hemolyic
• En pacientes sangrantes
hemorragia traumática
sangrado quirúrgico
No hay niveles establecidos de la hemoglobina que indican la necesidad de transfusión. Sin embargo, se sugiere que los valores de tigre de
hemoglobina de menos de 6,0 g / dl en la ausencia de enfermedad y entre 8 y 10 g / dl con la enfermedad necesitan la transfusión de glóbulos rojos.
Se espera que cada unidad de glóbulos rojos transfundidos preparados a partir de 450 ml de sangre entera para aumentar la hemoglobina por
aproximadamente 1 g / dl (el Hct 3 por ciento) en un paciente de 70 Kg de peso corporal y que no está sangrando como con todo una unidad de toda
sangre. El aumento de la hemoglobina y el hematocrito es evidente más rápidamente con la transfusión de 1 unidad de glóbulos rojos que con 1 unidad de
sangre entera.
Glóbulos rojos empaquetados
Razones indicaciones
Cirugía • El paciente necesita urgente de la operación y tiene Hb <10 g / dl

• pérdida quirúrgica de sangre Prever> 1000 ml
otro aguda • La pérdida de sangre El fluido de reemplazo
pérdida de sangre <20% de vol sangre. Ninguna
20-30% de vol sangre. Cristaloides / coloides

30-40% de vol sangre. Los glóbulos rojos y cristaloides
> 40% de vol sangre. La sangre entera o los glóbulos rojos y cristaloides
Otros
• Anemia asociada con insuficiencia cardíaca incipiente / establecido
• valor Hb <6 g / dl
• Los pacientes se acercan a la entrega y tiene un valor Hb <7 g / dl
• En anemias hemolíticas hereditarias y beta talasemia mayor. Directrices son más liberales
Ventajas de la transfusión de glóbulos rojos
• Reduce el riesgo de sobrecarga circulatoria debido a la menor volumen de anticoagulante y plasma
• gravedad disminuye y la incidencia de reacciones alérgicas
• anticuerpos ABO se reducen, los glóbulos rojos no ABO idéntico al grupo de paciente se puede dar,
si son compatibles.
• plasma eliminado se puede utilizar para la preparación de FFP y cryoprocipitate (factores VIII y V).
Las contraindicaciones de la transfusión de glóbulos rojos en:
• Bien compensado pacientes anémicos como la insuficiencia renal crónica. 212

• anemia nutricional, tales como la deficiencia de hierro o anemia perniciosa sensibles al hierro, fólico
ácido, eritropoyetina recombinante etc. menos que el paciente muestra signos de descompensación (necesidad
para una mayor capacidad de transporte de oxígeno).
• Para corregir proteínas y factores de coagulación deficiencia
• transfusión preoperatoria para elevar Hb por encima de 10 g / dl
• Para mejorar el bienestar general, promover la cicatrización de heridas, prevenir infección, expanda sangre
volumen cuando la capacidad de oxígeno de carga es adecuada.
Leucocitos REDUCIDOS glóbulos rojos

las células rojas de la sangre reducida Leucocitos-se indican en las siguientes condiciones:
• pacientes con talasemia como múltiples transfusiones
• Leucemia
• Anemia aplásica
• inmunosuprimidos
• inmunodeficiente
• mujeres multíparas
• Prevención de FNHTRs recurrentes
• La prevención o retraso de la aloinmunización primaria al antígeno HLA
• Prevención de la transmisión del CMV en el nivel individual de riesgo
Indicaciones objeto de investigación:
• Prevención de la refractariedad plaquetaria debido a la aloinmunización
• Prevención de FNHTRs recurrentes a las plaquetas
• Prevención de la reactivación del CMV latente o infección por VIH
glóbulos rojos reducido leuco-no están indicados
• Para prevenir la EICH relacionada con la transfusión
Los glóbulos rojos LAVADAS
El lavado de glóbulos rojos elimina 70 - 95% de leucocitos y no hay pérdida concomitante de 15 - 20 ml de células rojas de la sangre, pero es eficaz en
la eliminación de proteínas de plasma y microagregados.
indicaciones
• Los pacientes que tienen ataques recurrentes FNHTRs y reacciones de urticaria.
• Los pacientes que han desarrollado anticuerpos a las proteínas plasmáticas.
• IgA deficientes paciente que ha desarrollado anti-IgA (incidencia de deficiencia de IgA es de 1 de cada 700 personas).
• hemglobiuria noctural Paraoxymal (PNH), sensible a complementar.
CONGELADO / desglicerolizados glóbulos rojos Indicaciones
• El suministro de sangre raro que carecen de antígenos comunes para los pacientes con anticuerpos correspondientes.
213
• unidades autólogas de pacientes con múltiples células aloanticuerpos rojos almacenados para una futura cirugía.
• IgA paciente deficiente con anticuerpos contra IgA
• Su uso para prevenir FNHTRs ha sido suplantada por el uso de células LR-rojas.
PLAQUETAS
Funciones de las plaquetas:
■ Formación del tapón hemosttic primaria

■ Mantener la hemostasis normal,
Plaquetas forma el tapón hemostático y proporcionar la superficie sobre la que las formas de fibrina en un paciente trombocitopénica
sangrado resultante en:

• Cese de la hemorragia
• Corrección del tiempo de sangrado prolongado
• Aumento en el recuento de plaquetas
Productos y sus méritos relativos diferentes preparaciones de
plaquetas
■ de plaquetas de donantes aleatorios preparados a partir de sangre 450 ml
■ Plaquetas - Aféresis (preparado por Cell separador)
Méritos relativos de las plaquetas de aféresis de plaquetas de donantes aleatorios y
Plaquetas, Aféresis de plaquetas de donantes aleatorios preparados a partir de sangre entera
• Media> 3 x 10 11 plaquetas 5,5 x 10 10 plaquetas
(Igual a las plaquetas obtenidos a partir de 5 a 6
donaciones de sangre entera)
• volumen de plasma 200 ml 50-60 ml

• Los leucocitos <5,5 x 10 6 10 8 en cada unidad
Obviar la necesidad de filtración se requiere la filtración para reducir los leucocitos
• Los glóbulos rojos - Las huellas Más

• pH - 6,0 o más pH - 6,0 o más
• Expone al paciente a un donante Expone al paciente a múltiples donantes
• Una menor exposición a las infecciones Más exposición a infecciones

• Bajo riesgo de aloinmunización Relativamente más riesgo de aloinmunización
• HLA - o plaquetas donante compatible Imposible

producto se puede preparar para los pacientes
que se han vuelto refractarios a las plaquetas
• disminución en el riesgo de infecciones bacterianas Más riesgo de contaminación bacteriana
contaminación y handlingas fáciles plaquetas se agruparon
• Donación por aféresis requiere donación de rutina, se puede hacer de
gran compromiso Sangre pura

214
• sofisticados equipos requeridos No requerido

• personas altamente capacitados necesarios No mucho
trombocitopenia
La producción de plaquetas en una persona sana es de aproximadamente 40.000 plaquetas / l por día. Esta producción saldos con tasas de eliminación de
plaquetas y mantiene un recuento de plaquetas normal, siempre y cuando se mantengan las condiciones de estado estacionario. Sin embargo,
si las condiciones alteradas a cualquiera menor producción o incrementar
destrucción de las plaquetas, el equilibrio puede ser perturbado para producir trombocitopenia.
La trombocitopenia debido a disminución de la tasa de producción de plaquetas
• Leucemia
• Quimioterapia
• Trasplante de médula ósea

• Marrow enfermedades infiltrantes (egcarcinoma, leucemia)
• la supresión inducida por fármacos
• hipoplasia inducida por radiación
En estas condiciones endógeno y exógeno de plaquetas supervivencia es normal y plaquetas

terapia de apoyo es útil.
Trombocitopenia debido a una mayor destrucción de las plaquetas
■ destrucción de las plaquetas inmunológico o pérdida:
• Idiopática pupura trombocitopénica (ITP)
• Aloinmune trombocitopenia aloinmune neonatal

trombocitopenia púrpura después de transfusión
• trombocitopenia inducida por fármacos (por ejemplo, quinidina, heparina)
• La septicemia (infección severa debido a los gramnegativos)
■ destrucción de las plaquetas no inmune o pérdida
• La coagulación intravascular diseminada (DIC)
• La púrpura trombótica thrombocytopemic
• Síndrome urémico hemolítico
■ el secuestro de plaquetas
• hiperesplenismo
• Hipotermia
supervivencia de las plaquetas endógeno y exógeno se acorta. Beneficio de plaquetas transfusión es baja.
Plaqueta La terapia se da en peligro la vida de sangrado en mayor recuento de plaquetas> 20 x 10 9 / L.
La dosis es ligeramente más alta, 1,50 unidades / 10 Kg de peso corporal.
indicaciones de transfusión de plaquetas cuando
■ recuento de plaquetas es <5.000 / l, independientemente de la condición clínica
215
compatibilidad ABO entre donante y receptor es de menor importanciaimportancia en plaquetas transfusión

en la mayoría de los adultos. La administración de ABO plaquetas incompatibles es una práctica transfusión aceptable. La posibilidad de
inmunización Rh por las células rojas contenida en concentrados de plaquetas debe ser considerado en pacientes de sexo femenino. Rh (D)
negativo paciente femenina en edad fértil se debe dar plaquetas de Rh (D) negativas plaquetas, de lo contrario Rh (D) globulina inmune
Rhlg debe administrarse en dosis de 20 mg por cada unidad de plaquetas.
Los riesgos asociados con la transfusión de plaquetas:
aloinmunización
Cuando plaquetas reactiva y HLA-anticuerpos son Inducido por transfusión, plaquetas después
administrada a menudo no logran para producir un beneficio terapéutico. Aloinmunización a los antígenos de plaquetas es
común en pacientes que han recibido repetidas de plaquetas transfusiones. Sin embargo, un apreciable
número de pacientes no responde para formar anticuerpos de plaquetas reactiva para razones que no están claras.
leucocitos presentes en plaquetas preparado rutinariamente concentrados, provocar la formación de HLA-anticuerpo
más fácilmente que las plaquetas.
estado refractario de plaquetas
Paciente se vuelve refractaria a plaquetas transfusión, Si incremento en el recuento de plaquetas una hora después
transfusión es inferior al 20% del aumento esperado del valor en dos ocasiones.
refractariedad plaquetaria puede ser debido a:
• Los anticuerpos refractariedad de plaquetas mediada inmune
contra HLA antígeno Los anticuerpos para antígeno de
plaquetas específica
• No inmune refractariedad basado sepsis
DIC Fiebre alta
Hyperspleenism
Diversas técnicas se han utilizado para mejorar la eficacia de las plaquetas en pacientes aloinmunizados.
• HLA emparejado las plaquetas de los miembros de la familia o personas no relacionadas.
• transfusión de plaquetas-Matched
• Plaquetas de donante único (preparado por aféresis)
• plaquetas reducida de leucocitos
Nuevos enfoques a este problema, todavía en fase experimental, están
• El tratamiento de las plaquetas con ultravioleta ligero abolir la inmunogenicidad de

leucocitos contaminantes.
• La transfusión de, antígenos de clase 1 HLA solubles para inducir tolerancia activa.
• esplenectomía
• La eliminación de anticuerpos mediante plasmaféresis
• terapia de inmunoglobulina intavenous de alta dosis
Infección
Infecciones transmitidas por plaquetas transfusiones son similares a los asociados con otra sangre
217
productos. Un inusual pero a veces mortal, complicación de plaquetas transfusión es infusión de

bacterias que han proliferado en los concentrados almacenados a 20 - 24 ° C. Enfermedad de injerto contra
huésped: - Esta es una complicación rara de plaquetas transfusiones que pueden ser
impedido por irradiación gamma de concentrados antes de la transfusión a pacientes que han sido sometidos a trasplante de médula ósea o
tienen otra forma de inmunodeficiencia.
Las terapias adyuvantes
Varios agentes se han utilizado en adición a, o en lugar de las plaquetas en el tratamiento de

trombocitopenia resultante de la producción deteriorada o plaqueta disfunción. épsilon
ácido aminocaproico (EACA) y prednisona se ha considerado útil en estas condiciones por
algunos médicos, pero no existen estudios que apoyan satisfactorios su uso regular. En la uremia,
responde sangrado en muchos casos a tratamiento con crioprecipitado o desmopresina (DDAVP 0,3 mg / Kg), y la transfusión de plaquetas
puede ser evitado.
Contraindicaciones para transfusiones de plaquetas en:
1. trombótica púrpura trombocitopénica (TTP), idiopática La púrpura thrombocytopemia

(ITP), trombocitopenia inducida por heparina, a menos que exista una hemorragia potencialmente mortal.
2. No hay un papel para la transfusión profiláctica de plaquetas en la cirugía a corazón abierto primaria habitual a menos que haya:
a. sangrado microvascular y recuento de plaquetas 50.000 / μ l
segundo. Microvascular sangrado (por ejemplo post-operatorio tubo de drenaje torácico mayor de 500 ml a menos de 6 horas) y la
anormalidad de la coagulación no diagnóstico
do. sangrado microvascular y el defecto de la función plaquetaria
3. La cirugía o procedimientos invasivos en los que el recuento de plaquetas es de más de 50,000 / l, no se indica la transfusión de plaquetas
profiláctico.
Conclusión
Indicaciones de plaquetas Las transfusiones no pueden ser rígidos y tienen que ser individualizado, dependiendo
el recuento de plaquetas y la condición clínica del paciente.
GRANULOCITOS
El papel de los granulocitos transfusión ha disminuido con

• La disponibilidad de nuevos y mejores antibióticos
• los adviento de recombinante granulopoyéticas crecimiento factores por ejemplo granulocitos
factor estimulante (rhG-CSF).

• Los efectos adversos de la transfusión de granulocitos Sin
embargo los granulocyres trasfusion todavía se utilizan en veces con éxito en el siguiente
condiciones:
• La septicemia no respondiendo a los antibióticos. Las infecciones en los pacientes sometidos a quimioterapia /
radio terapia para enfermedades neoplásicas
• Recuento de neutrófilos inferior a 0,50 x 10 9 / L (500 / mm 3), tener infección por bacterias gram-negativas, que no responden a los
antibióticos
• depresión temporal de la médula ósea para 1 - 2 semanas. 218
productos de granulocitos disponibles:
• capa leucocitaria
• Granulocitos, Aféresis
Buffy Coat prepara a partir de 450 ml de sangre contiene:
• 0,60 x 10 9 granulocitos
• Contaminados con glóbulos rojos, plaquetas, otros leucocitos
• plasma 15-20 ml
Contenido de los granulocitos, Aféresis
• granulocitos 1 x 10 10
• otros leucocitos 1 x 10 8
• Los glóbulos rojos 5 - 10 ml
Plasma 200 - 400 ml
HES, si se usa 6- 12%
Dosis y Administración de granulocitos
• En lxl0 adultos 10 granulocitos diario por ejemplo, 1 unidad de granulocitos preparados por aféresis (equivalente a 18 - 20 unidades de la
capa leucocitaria)
• neonatos infectados necesitan 0,5-0,6 x 10 9 granulocitos diarias
granulocitos transfusión debe interrumpirse cuando el paciente se vuelve afebril, o cuando

recuento granuolcyte excede de 1,0 x 10 9 / L.
Contraindicaciones para la transfusión de granulocitos:
• Infecciones que responden a los antibióticos
El plasma fresco congelado
El plasma fresco congelado (FFP) es plasma que está separada de la sangre total y se congela dentro de 6-8 horas de la recogida. FFP
contiene proteínas de plasma y todos los factores de coagulación, incluyendo la lábil
Factores V y VIII si se almacena a - 30 ° C o por debajo.
Contenido de 1 unidad de FFP preparan a partir de 450 ml de sangre entera
Plasma 175 - 230 ml

Todos los factores de coagulación 1 UI / ml de cada factor
(Incluyendo los factores V y VIII)
Fibrinógeno 200-400 mgm
Las indicaciones de plasma fresco congelado
Activamente hemorragia y coagulación múltiples factores deficiencias en
• Enfermedades del HIGADO
219
• La coagulación intravascular diseminada (D1C)
• Coagulopatía en la transfusión masiva
• TTP
• Cuando el trastorno específico no puede ser o que aún no ha sido identificado
■ deficiencia familiar Factor V

Si Factor concentrado V no está disponible, FFP se puede utilizar como una fuente de Factor V.
■ La deficiencia de los factores II, VII, IX y X ,,
Es debido a la ausencia de vitamina K o el uso de drogas como la cumarina, como warfarina sódica y dicumarol
ese interferir con el metabolismo de la vitamina K. La administración de vitamina
K se prefiere FFP con el fin de corregir la deficiencia de vitamina K o cumarina sobre dosis. Debido a que se requieren
varias horas para la vitamina K eficacia, signos de hemorragia
puede requerir una transfusión de PFC en caso de emergencia.
■ antitrombina III deficiencia

■ La deficiencia de factor de coagulación congénitos o adquiridos
■ El uso de FFP en conjunción con células rojas ha sustituido en gran medida la transfusión de sangre fresca.
■ plasma pobre en crioprecipitado contiene 80% de la cantidad de Factor V en FFP y se puede utilizar como una alternativa a
FFP.
La dosificación de FFP: Alrededor de 10 ml / Kg de peso corporal. evaluación posterior a la transfusión de niveles de aPTT, PT y fibonogen se
realiza para monitorizar el efecto de PFC. FFP debe descongeló a 30-37 ° C en baño de agua circulante.
plasma descongelado debe ser transfundida tan pronto como sea posible, o dentro de 12 horas, si se almacena at2-4 ° C.
prueba de compatibilidad antes de la transfusión no es necesario. Plasma debe ser ABO compatible con la sangre del receptor, pero no
necesariamente grupo específico. Sin embargo se prefiere plasma del mismo grupo ABO que la del receptor. plasma del donante no
debe contener anticuerpos ABO que podrían interactuar con un antígeno o B en las células rojas de la sangre del receptor.
Gráfico de plasma ABO Compatibilidad
grupo blodd del destinatario Plasma, el grupo sanguíneo del donante

O O, A, B, AB
UNA A, AB
segundo B, AB
AB AB
Rh (D) positivo de plasma no debe administrarse a Rh (D) negativas las mujeres en edad de procrear.
Las contraindicaciones para el uso de plasma fresco congelado
• expansor del volumen de sangre
• hipoproteinemia
• Fuente de las inmunoglobulinas
• Cuando el tiempo de protrombina es <18 segundos
220
Solvente / detergente plasma
Plasma se trata con el disolvente tri (n-butil) fosfato (TNPB) y el detergente Triton X-100
para inactivar los virus de envoltura lipídica como la hepatitis B y C y VIH. El disolvente - detergente de tratamiento no tiene ningún
efecto sobre los virus-no lipídicos envuelto, como la hepatitis A o parvovirus B19. la coagulación
factores de disolvente / detergente plasma son comparable a FFP.
Las indicaciones para su uso son los mismos que el de FFP.
Contraindicaciones:
• Las mujeres embarazadas, excepto en el momento de la entrega
• Los recién nacidos
• anemia hemolítica crónica
• Enfermedad de célula falciforme
• Los pacientes bajo tratamiento con ir médula ósea quimioterapia o radiación perjudicial
• pacientes con trasplante de médula ósea
Fecha de salida: 12 horas a temperatura ambiente después de la descongelación, no refrigerar.
Dosis y Administración es el mismo que el de FFP.
Donante y el plasma pobre en crioprecipitado
Plasma separado de una unidad de la sangre completa en o antes del quinto día de la fecha de caducidad que se llama como una sola plasma de
donantes. plasma pobre en crioprecipitado es un subproducto de la preparación del crioprecipitado. Ambos estos productos carecen de los factores de
coagulación lábiles V y VIII, pero contienen factores de coagulación estable II, VII, IX plasma, y X. Cryo-pobre carece de fibrinógeno también.
indicaciones
• En la deficiencia de factores de coagulación estables (por ejemplo, coagulopatías debido a las drogas warfarina)
• Quemar
Dosis: son los mismos que el de FFP.
Descripción CRIOPRECIPITADO: Cryo se crioprecipitado proteínas derivadas del plasma fresco

congelado.
Cada bolsa tiene aproximadamente:
Plasma 10- 15 ml
El factor VIII 80-100 UI
fibrinógeno 150 - 250 mg
von Willebrand Factor 40 - 70%
fibronectina 55 mgm
El factor XIII 20 - 30% del original
indicaciones:
• la hemofilia A
• enfermedad de von Willebrand
• La deficiencia congénita o adquirida fibrinógeno
221
• Adquirida Factor VIII deficiencia (por ejemplo, DIC, transfusión masiva)
• La deficiencia de factor XIII
• Fuente de cola de fibrina utilizada como agente hemostático tópico en procedimientos quirúrgicos y para
eliminar cálculos renales fragmentado.
Concentrado de factor VIII, 500 botella iu, disponible como producto farmacéutico, es el producto de
opción para la mayoría de los hemofílicos.
Dosis y Administración de concentrados de factor VIII
Croprecipitate puede no ser idéntica ABO se prefiere compatible ABO sin embargo croprecipitate. La prueba de compatibilidad no es
necesario, el tipo de Rh No es necesario considerar cuando se utiliza este componente.
En el cálculo de la dosis, se puede suponer que 1 UI de peso corporal de factor VIII / Kg aumentará el factor del paciente por 2%
(0,02 UI / ml). Por lo tanto, si el nivel de factor VIII línea de base del paciente es 0,01
iu / ml, una dosis de 20 UI / sería de esperar Kg de peso corporal para elevar el nivel de 40% (0,4 UI / ml). La vida media del factor VIII es de
10-12 horas.
Si se requieren 20 unidades / kg de peso corporal, una persona de 70 kg de peso requerirá 1.400 UI de factor
VIII.
CRYO podría ser utilizado para suministrar 1.400 UI de factor VIII, pero a 80 UI por bolsa esto requeriría al menos 17-18 bolsas de crio.
La cantidad de factor VIII requerido también puede calcularse como sigue:
1. Peso (Kg) x 70 ml / kg = Volumen de la sangre (ml).
2. El volumen de sangre (ml) x (1,0-Hct) = Volumen de plasma (ml)
3. Unidades de factor VIII requerido = (Nivel de factor VIII deseado en unidades / ml
- nivel inicial de factor VIII / ml de volumen x plasma) en (ml)
Ejemplo:
A 70 Kg hemofílico severo con hematocrito del 40% tiene un nivel de factor VIII inicial de 2 UI por dl (0,02 UI / ml, 2% de actividad).,
¿Cómo se debe dar muchas unidades de concentrado de factor VIII para elevar su nivel de factor VIII al 50 UI / dl?
70 Kg x 70 ml / kg = 4900 ml (volumen de sangre)
4900 x (1,0 - 0,40) = 2940 ml (volumen de plasma)
2940 x (0,50 - 0,02) = 1411 UI de factor VIII requerido

Esta dosis se incrementará el nivel a 50 UI / dl.
222
La hemofilia A - Recomendado Las dosis de factor VIII
Tipo de sangrado Las dosis (Factor VIII Frecuencia
iu / k
• Acut hemarthosis
temprana 10 Pocas veces se requiere
Tarde 20 20 UI cada 12 horas

• hemorragia intramuscular 20-30 20 UI cada 12 horas
Vida - situación que amenaza la 50 25-30 UI cada 8-12 horas
hemorragia intracraneal Cirugía
mayor trauma mayor
• Dolor abdominal severo 20 20-25 iu cada 12 horas

20 20 UI cada 12 horas menudo
no es necesario
• La extracción de permanente dientes
20
• Lengua o la boca laceración 20 UI cada 12 horas
La duración del tratamiento con factor VIII depende del tipo y la ubicación de la hemorragia. Después de la cirugía importante, el nivel de
factor VIII debería mantenerse por encima de 40-50 UI / dl durante al menos 10 días.
ensayo de factor VIII debe ser hecho para servir como una guía para la terapia. En caso de emergencia el aPTT se puede utilizar como una guía aproximada al
factor VIII actividad.
En la hemofilia leve o moderada A, Desmopression (DDAVP) 0,3 g / kg por vía intravenosa, es la

tratamiento de elección.
agentes antifibrinolíticos (ácido aminocaproico y ácido tranexámico) son útiles en el sangrado controlando
en la cavidad oral. La dosis recomendada de ácido amincaproic es 75 mg / kg de peso corporal cada 4-6 horas,
la del ácido tranexámico es 25 mg / kg de peso cada 6-8 horas. Los agentes antifibrinolíticos se dan 1 día preoperatorio y
continuó durante 7-10 días. La terapia de elección para sever hemofilia A es Factor VIII concentrado.
La puesta en común de crioprecipitado:
Cryo se descongela a 30 - 37 ° C en baño de agua circulante y todas las bolsas son reunidas en una bolsa por medio de la bolsa de
conector de la bolsa bajo flujo laminar. Lavar cada bolsa vacía con 10 ml de solución salina normal estéril para disolver crioprecipitado
residual y añadir a la crioprecipitado agrupado. Se debe utilizar
preferiblemente inmediatamente después descongelación y puesta en común.
outdate: 6 horas después de la descongelación: y 4 horas después de la puesta en común.
223
Componentes de la sangre y sus usos Componentes
(Resumen) Composición Aprox. volumen indicaciones
Sangre pura RBC (aprox. De Hct 40%) 500 ml Aumentar los glóbulos rojos y
CMB y algunos volumen de plasma
plaquetas; Plasma deficiente en

factores V, VIII
las células rojas de la sangre RBC (aprox. De Hct 75%), 250 ml Aumentar la masa de glóbulos rojos en
CMB y algunos anemia sintomática

plaquetas, plasma reducida
células rojas + Aditivo RBC (aprox. De Hct 60%) 330 ml Aumento de los glóbulos rojos
Solución CMB y algunos masiva en sintomática
plaquetas, plasma reducida, anemia
100 ml de solución de aditivo
Los leucocitos reducido RBC> 85% de volumen original 225 ml Aumentar la masa de glóbulos rojos,
Los glóbulos rojos WBC <5x 10 8 a <5x 10 6 reducir FNHTR, WBC <5 x 10 6
Pocas plaquetas y mínimo disminución HLA Inmunización
Plasma zación y la transmisión de CMV
RBC lavados RBC (aprox. 75%) 180 ml Aumentar la masa de glóbulos rojos,
WBC <5 x 10 8 reducir el riesgo de alérgica
sin plasmática reacción a las proteínas plasmáticas
Los glóbulos rojos congelados / RBC (aprox. De Hct 75%) 180 ml Aumento de la masa de glóbulos rojos,
desglicerolizados WBC <5x10 6 minimizar febril o

no hay plaquetas y plasma reacciones alérgicas; utilizado para el
almacenamiento de glóbulos rojos prolongada
Plaquetas, concentrado de plaquetas 5.5xl0' ° / unidad 50 ml Sangrado debido a trombocitopenia

(Donante aleatorio) pocos glóbulos rojos, WBC, plasma o thromocytopathy
plaquetoaféresis Plaquetas> 3 x 1011 / unidad 300 ml Igual que el concentrado de plaquetas,
WBC <5,5 x 10 6, plasma a veces HLA emparejado o

y los glóbulos rojos mínimos plaquetas transversales con ajuste de plaquetas
se preparan
granulocitos, Granulocitos> LX10 10 220 ml Se utiliza en casos seleccionados
pheresis Linfocitos: algunos glóbulos rojos con sepsis y sever

y plaquetas neutropenia (500 / l)
Plasma fresco congelado que tiene todo el plasma 220 ml trastornos de la coagulación, si
factores de coagulación PT> 18 seg, aPTT> 60 segundos (> 1.5-1.8

veces de los controles)
Plasma Plasma, coagulación estables 220 ml factor de coagulación estables

factores, no hay plaquetas deficiencias (II, VII, IX, X, XI)
Cryoprecpitated Factor VIII, von- 15 ml La hemofilia A, von-

AHF (Factor VIII) el factor de Willebrand XIII, la enfermedad, la deficiencia de Willebrand
fibrinógeno de fibrinógeno y factor XIII
224
Productos farmacológicos como alternativas a los productos sanguíneos
La conciencia de los médicos con respecto a los problemas de los productos de sangre / sangre seguridad, la conservación de la sangre, un gran énfasis se ha
puesto en alternativas a los productos sanguíneos alogénicos. Estas alternativas son las intervenciones farmacológicas pocos de ellos muestran prometedor
resultado en la reducción de la transfusión de sangre.
Las intervenciones farmacológicas SON:

1. Factores de crecimiento hematopoyéticos recombinantes
Estimular la producción de la sangre, preparado por tecnología de ADN recombinante
• La eritropoyetina humana recombinante (EPO)
• Granulocitos factor estimulante de colonias (G-CSF)
• Granulocitos macrofase factor estimulante de colonias (GM-CSF)
• Thrombpoietin
Existen datos suficientes para EPO, G-CSF y GM-CSF para su uso clínico.
2. Reducir la pérdida de sangre:
• La desmopresina
• Los agentes tópicos - cola de fibrina, gel de fibrina
3. Los agentes que conservan la función plaquetaria
• dipiridamol
• prostaciclina
• La heparina
4. Los agentes antifibrinolíticos
• ácido Epsilon-Aminocorproic
• Ácido tranexámico
• Aptotinin
5. Sustitutos de la sangre o vehículos de oxígeno
• Perfluocarbons
• solución de hemoglobina
• Liposoma hemoglobina encapsulada
La eritropoyetina humana recombinante (EPO)
EPO es producida por el riñón. En condiciones normales, la EPO asegura la supervivencia de las células progenitoras eritroides
para reemplazar las células rojas. Cuando el nivel de EPO disminuye, algunos de dependiente de EPO
células progenitoras mueren, y la producción de glóbulos rojos disminuye. La vida media de la EPO es de 4-13 horas.
eritropoyetina Reombinant (EPO) se prepara por tecnología de ADN recombinante.
Las indicaciones de la terapia de EPO
• Anemia en la insuficiencia renal (creatinina cuando> 1,8 mgm%)
• diálisis de recepción de paciente
225
• Anemia con infección por VIH sometidos a tratamiento con zidovudina (AZT) (eficaz cuando el nivel de eritropoyetina
<500 u / L)
• La anemia en paciente con cáncer sometidos a quimioterapia (nivel de eritropoyetina <200 u / L)
• La anemia en las enfermedades crónicas (por ejemplo, reumatoide arthirits)
• Pre-depósito de donación de sangre autóloga
• anemia preoperatoria
Indicaciones bajo investigación
• la anemia quirúrgica
• Trasplante de médula ósea
• La anemia de la prematuridad
• síndrome mielodisplásico
• Anemia falciforme
Las dosis:
En insuficiencia renal - 50-100 U / Kg de peso corporal, por vía intravenosa, o subcutánea,
Tres veces a la semana con la dosis reducción de una vez la Hematocrito del paciente. alcances
0,30-0,34.
Paciente se someten a diálisis - 34 U / Kg, tres veces por semana
Granulocitos y granulocitos macrofase de colonias factores estimulantes
G-CSF y GM-CSF estimulan la proliferación de las células progenitoras de neutrófilos y movilizan granulocitos de la médula.
GM-CSF si se administra repetidamente, también aumentará eosinófilos y monocitos. Se utilizan clínicamente en:
• Neutropenia inducida por quimioterapia, provoca:
Disminuir la duración de la neutropenia aumentar la tolerancia a
los fármacos citotóxicos Reducir necesidad de granulocitos
transfusiones
• GM-CSF para el uso en pacientes que tienen trasplante de médula autólogo
• Ambos se utilizan en pacientes sometidos a trasplante alogénico de médula
• Paciente que tiene supresión de la médula ósea debido a los agentes anti-virales
• Estimular y aumentar el rendimiento de las células madre de sangre periférica (PBSC)
• Ambos pueden ser agentes eficaces para aumentar la recaudación resultados rendimiento granulocitos, G-CSF hasta 10 x 10 10 rapheresis
Las dosis:
Para aumentar los granulocitos:
G-CSF - <5 ug / kg de peso corporal por día dosis GM-CSF puede estar limitado debido a efectos
secundarios. G-CSF - 10 - 16 <s> g / kg de peso corporal por día para movilizar PBSC 226
componentes sanguíneos Preparación ana Sus usos
TERAPIA adyuvante para reducir la pérdida de sangre:
acetato de desmopresina (DDAVP) - [1-desamino, 8-D arginina, vasopressine] es un análogo sintético de harmone antidiurética
(vasopresina)
DDVAP aumenta los niveles de factor VIII y factor de von Willebrand (vWF)
Dosis: 0.3 mgm / Kg de peso corporal, por vía intravenosa. Utilizado
en : • Leve Hemofilia A
• enfermedad de von Willebrand
• Para mejorar o tiempo de hemorragia correcta en pacientes con defectos plaquetarios adquiridos como en la uremia, la cirrosis, la ingestión de
aspirina
• Los agentes tópicos
La cola de fibrina y gel de fibrina son derivados de la sangre, más agentes farmacológicos, y se utilizan como la intervención en la hemostasis
quirúrgica. Los agentes se aplican directamente a las heridas sangrado se presentan o se pueden utilizar para sellar injertos.
La cola de fibrina se deriva de una fuente de fibrinógeno y Factor XIII (factor de estabilización de fibrina), en el que una solución de fibrinógeno
se mezcla con una solución de albúmina bovina y se aplicó a campo quirúrgico. Alternativamente plasma autólogo puede ser utilizado como una
fuente de fibrinógeno y factor XIII. gel de fibrina consiste en rico en plaquetas-plasma, que se mezcla con una solución de albúmina bovina y se
aplicó a campo quirúrgico. plasma rico en plaquetas puede ser autólogo.
Anti-coagulación de la circulación extracorpórea

activación de la coagulación en la circulación extracorpórea en coronaria-derivación (CBP) se puede reducir usando inhibición de la trombina
(por ejemplo, hirulog y hirudina), trombina péptido inhibidor y factor Xa
inhibición con heparina de bajo peso molecular.
Agentes que conservan las funciones plaquetarias

La infusión de la dipiridamol agente antiplaquetario se ha informado para reducir la activación y el agotamiento de las plaquetas durante la CPB
causar reducción significativa en la pérdida de sangre postoperatoria y la necesidad de transfusión.
Prostaciclina tiene un efecto de ahorro de plaquetas durante la CEC, presumiblemente debido a la inhibición de la agregación plaquetaria.
No hay estudios satisfactorios que apoyan su uso regular.
antifibrinolíticos TERAPIA
Tres agentes antifibrinolíticos disponibles en el mercado son:
• Epsilon - ácido aminocarporic (EACA)
• Ácido tranexámico
• aprotinina
Son particularmente útiles en el control de la hemorragia en la cavidad oral por ejemplo, extracción de los dientes permanentes, la lengua y la boca
laceración y cirugía oral.
Las dosis: ácido E-aminocarporic - 75 mgm / Kg cada 4-6 horas por vía oral
ácido Tranexaminc - 25 mgm / Kg cada 6-8 horas
227
No hay estudios que apoyan satisfactorios el uso regular de agente farmacológico para anti-
coagulación de la circulación extacoporeal, la preservación de las plaquetas y la terapia anti-fibrinolítico.
Sustitutos de la sangre o vehículos de oxígeno
Muchas soluciones sustituto de la sangre de llevar el oxígeno como perfluocarbons emulsiones, libre de células
soluciones de hemoglobina y la hemoglobina en liposomas encapsulted, se han intentado, pero ninguno está disponible para uso clínico satisfactorio. La investigación
en los sustitutos de la sangre tiene un largo camino por recorrer.
Los compuestos perfluorados
Los perfluorocarbonos (PFCs) son relativamente simples, material inerte (por ejemplo, Teflón) que tiene la capacidad de
disolver gran cantidad de oxígeno. La mayoría de ellos causan efectos secundarios desagradables. Sin embargo, una
emulsión (Flusol-DA) se ha autorizado para uso limitado en precutaneous coronaria transluminal

angioplastia (ACTP). emulsiones más recientes que contienen más PFC (y por lo tanto más oxígeno) se encuentran ahora en pruebas clínicas
humano. Una limitación significativa a la emulsión de PFC es que con el fin de llevar a cantidad de oxígeno similar a la hemoglobina, un paciente
tiene que respirar alta concentración de oxígeno. Recientemente, un número de muy mejorada emulsión estable de una variedad de compuesto
perfluoro han sido desarrollados con la capacidad de carga más alta de oxígeno. Sin embargo, ninguno de estos son actualmente disponibles para
uso clínico.
Las soluciones de hemoglobina
En Se han hecho los últimos esfuerzos para desarrollar soluciones de hemoglobina libre de células. Tales soluciones de Hb eliminarán la
dependencia de la respiración de oxígeno como en emulsiones de PFC porque Hb se une al oxígeno químicamente. Sin embargo, la
solución de Hb en sí no es adecuado para la infusión directa, ya que se elimina rápidamente de la circulación, y su afinidad por el oxígeno
es demasiado alto cuando despojado de su membrana celular protectora. Se han hecho esfuerzos mediante la modificación de Hb por
piridoxilación que reduce su afinidad por el oxígeno y por subsiguiente conjunción de la Hb con diversos polímeros biocompatibles o
mediante polimerización de por sí Hb que aumentar el tamaño del complejo de molécula de Hb a un punto que no va a filtrar en glomérulos
renales .
Alternativamente se han realizado esfuerzos para separar resto hemo de la hemoglobina y adjuntar a polímero de tamaño apropiado. Esto
permite el uso de hemo de origen animal y preparar hemes sintéticos. Sin embargo, hasta ahora no existe un informe del uso de la Hb
modificada en humanos.
La hemoglobina encapsulada
La hemoglobina se puede encerrar en artificial liposomas. Tal Hb encapsulado se ha demostrado en

ratas tan eficaz como glóbulos rojos en el transporte de oxígeno. Sin embargo, la vida media de los liposomas en la circulación es corta.
hemoglobina encapsulada nunca ha sido administrado en el ser humano y su futuro como un sustituto de la sangre depende del desarrollo de una
membrana de composición superior. Por lo tanto, en la actualidad,
el concepto que uno podría elegir simplemente “artificial” sobre la sangre real para
transfusiones en ser humano es ingenuo. Es probable que los servicios de transfusión de sangre de futuro pueden proporcionar una serie de productos - algunos
naturales, algunos sintética - para ser utilizado para el transporte de oxígeno.
228
15 aféresis
INTRODUCCIÓN
Aféresis (o aféresis) es una palabra griega que significa separar o eliminar. En la aféresis de sangre es extraída de un
donante o paciente en solución anticoagulante y se separa en componentes.
Uno (o más) componente es retenida y los constituyentes restantes se devuelven al individuo.
Cualquiera de los componentes de la sangre se puede quitar y los procedimientos se indique para el componente seleccionado. El
proceso de eliminación del plasma de los glóbulos rojos se denomina plasmaféresis. Del mismo modo términos se dan a la eliminación de
otros componentes, incluyendo plaquetas (plaquetoféresis),
glóbulos rojos (Erythrocytapheresis) o leucocitos (Leucoféresis). La aféresis puede ser no terapéutico
o terapéutico. Se puede hacer manualmente o usando un equipo automatizado.
máquinas célula-separador automatizadas se utilizan tanto para la preparación de componentes y aplicaciones terapéuticas.
En la aféresis manual de sangre completa se recoge en el sistema de múltiples bolsas y se centrifugó
desconectado. Se trata de un gran cuidado de que las bolsas están correctamente etiquetados y su contenido se devuelven al donante IHE
correcta. Con la actual tecnología automática disponibles ahora el proceso manual se utiliza raramente.
Las cuestiones de seguridad y calidad, que son el requisito básico en los bancos de sangre, se cumplen mediante el uso de componentes de aféresis de
un solo donante. Las ventajas de los componentes de un solo donante son:
Reducción de la exposición de múltiples donantes - Reducción del riesgo de aloinmunización
- menor incidencia de enfermedades transmitidas por transfusión
2. dosis completa y eficaz transfusión
3. producto de mayor calidad
4. producto más puro productos reducido leucocitos-
5. Capacidad de igualar donante al paciente De plaquetas con o HLA emparejado
6. reacción donante Menos debido a - Cristaloides y anticoagulantes

retorno de fluido - período más largo de aféresis ayuda rellenado de intravascular
compartimento, con el líquido de intersticial
espacios
7. tecnología aguja más pequeña lesiones de acceso venoso son menos
Técnicas de Separación automatizados por centrifugación

En la mayoría de los instrumentos de aféresis, centrífuga fuerza separa la sangre en sus componentes sobre la base de
las diferencias en la gravedad específica. La sangre se extrae de individuo con la ayuda de una bomba. se añade anticoagulante (ACD) a la
tubería para prevenir la coagulación. sangre anticoagulada a partir de un donante o paciente se bombea en un recipiente, cámara, o rotor
tubular giratorio en el que la estratificación de los componentes se produce basa en la densidad. El componente deseado
se conserva y se devuelven los elementos restantes
al donante o paciente por el flujo intermitente o continua.
Todos los sistemas tienen conjuntos desechables preenvasados de bolsas estériles, Tubo de ensayo, y centrífugas dispositivos
única para el instrumento. Cada uno tiene un mecanismo para girar y dispositivo de separación sin retortijón
el tubo adjunto. En el método de flujo intermitente, el recipiente de centrífuga se llena alternativamente

y vaciado. La mayoría del equipo en uso ahora tiene un flujo continuo de sangre a través de la cámara de separación. Con ambos
métodos, técnicas de acceso simple o doble vena son posibles. Dependiendo de
el tiempo de proceso procedimiento y dispositivo que se utiliza varía.
cada fabricante suministra información detallada y protocolos operativos. Eso debiera ser
a disposición de enfermería y personal técnico.
La separación por filtración de membrana
La filtración de plasma a través de una membrana permite la recogida de plasma de donantes sanos o eliminación terapéutica de
constituyentes del plasma anormales. La mayoría de Los instrumentos tienen la membrana
dispuestos como fibras huecas, pero algunos tienen placas planas. superficie de la membrana interior repeler elementos celulares en el flujo de sangre para que las
plaquetas no se activan y la supervivencia de glóbulos rojos no se acorta.

El más comúnmente disponible Aféresis dispositivos y sus funciones: Fabricante
Nombre de la ecuación. Método productos
Haemonetic - Haemonetic MCS CFI PI, P, L, PBSC
Sociedad - Haemonetic MCS Plus CFI PI, P, L, PBSC, RC.

- PCS / PCS 2 IFC, MF Plasma
Baxter (Fenwal) - Autopheresis C IFC, SM Plasma
“ - CS-3000PIus CFC P1, P, L, PBSC
“ - CS-3000 + AMS CFC P1, P, L, PBSC,
“ - Amicus CFC P1, P, PBSC, RC
Gambro (Cobe) - Spectra CFC PI, P, L, PBSC, RC
“ - Tipo CF, MF Plasma
Fresenius AS-104 CFC PI, P. L, PBSC
230
aféresis
CFC-continuo centrifugación de flujo; IFC-intermitente de flujo
centrifugación; MF-membrana filtración; membrana SM-hilado;

Pl-plaquetaria; P-plasma; células madre de la sangre periférica de PBSC-; células RC-rojo;
L-leucocitos.
Tecnología Haemonetic
Intermitente-flujo-centrifugación célula separadores, principalmente
producido por Haemonetic Corporation, utilizar una velocidad fija, separando

los componentes conforme a su específico
gravedad (Fig. 15.1). La sangre anticoagulada se bombea en un recipiente giratorio,

la separación de la sangre entrante de tal manera que las células rojas se mueven a
la periferia y el plasma al interior de
cuenco giratorio, y glóbulos blancos y plaquetas capas
entre los glóbulos rojos y el plasma (Fig, 15.2). El uso de detectores ópticos y un
proceso de elutriación oleada de líquido, deseado
componente de la sangre se retiene y los constituyentes restantes

de la sangre se devuelve al donante o paciente. Un procedimiento
plaquetoféresis generalmente tarda 6-8 ciclos a
recoger una dosis terapéutica.
Intermitente-flujo-centrifugación (IFC) célula separador

Fig.15.1 Haemonetic Cell Separador
(MCS), fabricado por Haemonetic Corp. tiene un sello rotatorio y es un sistema (MCS)
cerrado. IFC procedimiento se realiza como
un procedimiento -arm y es conveniente para el donante. En proceso de IFC, el volumen de sangre extracorporal es más y se
tarda más tiempo en comparación con el proceso de centrifugación de flujo continuo
debido al acceso venoso de un solo brazo, tanto para extracción de sangre y el retorno.
MCS Plus de Haemonetic es nuevo separador de células de la tecnología de flujo intermitente (Fig. 15.1). ENTRADA
PUERTO
PUERTO DE SALIDA
plasma a la bolsa externa
Red Cell
Interface capa / Buffy
Glóbulos
rojos
(Todo Sangre)
Fig.15.2
Sección transversal de la taza de la centrifugadora Haemonetics (Procedimiento CFI)
231
Es muy ligero. MCS Plus se ha desarrollado para la recogida de glóbulos rojos automatizado también y tiene la capacidad de utilizar más
pequeña aguja de extracción y un anticoagulante dosificada para la recogida de glóbulos rojos.
Ambas máquinas MCS y MCS Plus son capaces de recopilar las plaquetas de un solo donante con o sin plasma adicional que puede ser
utilizado como plasma dulce o fresco congelado para transfusión.
El sistema de recolección de plasma (PCS / PCS2) de Haemonetic está diseñado de centrifugación

y la tecnología de filtración de membrana para recoger plasma para transfusión o plasma de origen. Tiene
tazón desechable especialmente diseñado para recoger
plasma y 500-600 ml de plasma pueden ser recogidos. Puede ser utilizado para el
intercambio de plasma terapéutico también.
Gambro (Cobe) Tecnología
Cobe tecnología usos flujo continuo

centrifugación tecnología y venosa dos brazos
acceso para la extracción de sangre y el retorno. Originalmente
tecnología fue desarrollada por IBM (IBM 2997 separador de células) y se
utiliza una junta giratoria y un canal de rotación
se asemeja a una correa como la cámara de separación
inicial. Un canal dual mejorado sistema permitió
un glóbulos blancos y glóbulos rojos menor contaminación en las

plaquetas. El Cobe Spectra ha logrado el IBM-2997 e incorporado un
canal similar diseñado como Cobe-2997. Eso
es sello menos sistema con
la separación las interfaces revisado automáticamente.
Permite su utilización como procedimiento de dos brazos.
Cobe tiene celda de membrana también desarrollado
separador, llamada Cobe TPE. Esta es continua-

dispositivo de flujo usando una membrana plana para separar las células
de sangre del plasma. Se utiliza para hacer el intercambio plasmático
terapéutico (TPE) o para recoger
plasma del donante.
Baxter (Fenwal) Tecnología
Fenwal utiliza tecnología de flujo continuo y un sistema de sello

menos. El dispositivo está totalmente automatizado e informatizado
como en MCS o Cobe. Una mejora de
el CS 3000 tiene contenedor de dos separación
soportes (1) TNX - 6 ™ separación soporte del contenedor tiene
colección permitido de leucocitos reducido
plaquetas y (2) otro separación envase Fig.15.3 CS-3000 Plus
poseedor etiquetado gránulo usado para blanco Células Separador
colección. Esto se llama CS 3000 Plus. 232

Apphresis
Nota: los segmentos de tubo identificados con guiones (......)
Abrazadera
Fig.15.4
Diagrama de flujo del separador de células sanguíneas CS-3000 Plus
CS-3000 Plus tiene micro-procesado controlado y el sistema de flujo continuo (Fig. 15.3). Eso
utiliza detector de interfaz, que detecta la densidad óptica de limitar la contaminación cruzada. Siempre hay bajo volumen extracoporeal y
el proceso toma menos tiempo en comparación con el procedimiento de un solo brazo. Es totalmente sistema cerrado.
Durante el funcionamiento de la sangre anticoagulada se bombea en el recipiente de separación de hilado. Los glóbulos rojos se embalan por la
fuerza centrífuga hacia los bordes exteriores del contenedor. A continuación, la salida de glóbulos rojos
el recipiente de separación. El componente de densidad inferior, tal como plasma, plaquetas o glóbulos blancos se elimina mediante
bomba de plasma y entra en el recipiente de recogida de hilatura donde plaquetas o glóbulos blancos se embalan por la fuerza centrífuga hacia
los bordes exteriores del contenedor. El componente separado sigue siendo embalado en el contenedor, mientras que otros constituyentes de
la sangre son devueltos al donante / paciente (Fig. 15.4).
Es capaz de colección de plaquetas de donantes individuales sin o con plasma adicional para transfusión como plasma fresco o plasma fresco
congelado.
233
TRANSUFUSION MDlCINE T Manual técnicaLista
CS 3000 Plus tiene adicional facilidad de acceso

Sistema de gestión (AMS) Panel de control que tiene una pantalla de control e
indicador para el control de la auto-manguito, la bomba y la bomba de ACD
reinfusión. Puede ser utilizado para la aféresis terapéutica también.
nuevo separador de células automatizado Recientemente Baxter ha introducido
llamado Amicus (Fig. 15.5). En Amicus procedimientos de separación cortos
veces, procedimiento aguja única / doble,

el control anti-coagulante individual y varias características de seguridad contribuyen a
una comodidad global de los donantes y la seguridad. Es a la vez una o dos
procedimiento brazo. separador de células Amicus tiene un canal giratorio se asemeja a
una correa como la cámara de separación inicial Tiene una tranquila alta centrífuga, la
eficiencia que proporcionan volúmenes de producto de acuerdo con en más corto tiempo
de recogida. Fig. 15.6.
Baxter ha desarrollado una máquina para la recogida de plasma llamado

Autopheresis-C (Fig. 15.8). Utiliza la hilatura
membrana, así incorporando tanto membrana y
tecnología de centrifugación. Puede ser utilizado para la recogida de 500 a 990 ml de
plasma. Este sistema es el sistema de flujo intermitente y generalmente procedimiento
de un solo brazo. Este recoge la sangre en un pequeño cilindro giratorio, forzando
plasma a través de una membrana polycorbonate.
Componentes de la sangre de aféresis-Drived: Productos
cantidades recogidas
Las plaquetas 3,0-8,0 x 10 1 1 en 180-200 El separador
Amicus
ml de plasma
Fig.15.5
Plasma 400 - 600 ml BAXTER
Los glóbulos rojos 180 - 200 ml RBCs absolutos
granulocitos Cercanos 1.0 - 3.0 x 10! 0 en 200-300 plasma
PBSC variable
Donantes Reacciones
Reacción WB Plasma
vasovagal Ocasional Raro
Hypvolemia Ocasional Raro
citrato de efecto * Raro
la toxicidad del citrato - Muy raro
* efecto citrato - entumecimiento y hormigueo alrededor de la boca.

** la toxicidad del citrato - calambres musculares, escalofríos, náuseas, vómitos y el BM tetania - sangre
entera 234
aféresis
Kit de Amicus sola aguja cerrada Sistema de Aféresis
Diagrama de Flujo de Fluido Diagrama de Flujo de Fluido
Fig. 15.6
Diagrama de flujo de AMICUS Separador individual de agujas
Requisitos generales para la aféresis
1. Un médico idóneo, debidamente calificado es responsable de todos los aspectos del programa de aféresis.
2. El equipo debe ser bueno, fiable y en buenas condiciones de funcionamiento.
3. El personal bien entrenado y motivado es esencial para un programa de aféresis eficaz.
4. Operador (de enfermería o personal técnico) de la máquina de aféresis deben conocer todos los aspectos de sus disparos de operación y de
problemas.
5. Un operador de aféresis debe ser amable y debe ser capaz de aliviar la ansiedad del donante / paciente.
6. Debe haber un manual a disposición del personal de enfermería y técnicos, dando descripción detallada de cada tipo de
procedimiento, y disparos de problema específico de la máquina.
7. Los registros de los resultados de laboratorio y los datos para cada procedimiento de aféresis deben mantenerse.
Criterios generales para la selección de aféresis de donantes
1. Donador de someterse a un procedimiento de aféresis de vez en cuando (no realizado frecuencia de una vez cada 4 semanas) debe cumplir
con los mismos criterios que una donación de sangre total.
235
236
2. Donante debe ser preferentemente de donantes de repetición - podría haber donado sangre 1-2 veces antes.
3. consentimiento por escrito del donante se toma después de explicar el procedimiento en detalle, el tiempo
tomado, y acerca de los posibles riesgos y beneficios.
4. El acceso venoso es una consideración importante en la aféresis de donantes y las venas debe ser examinada en el momento de la
selección de un donante como:
yo). aguja en largo y tiempos de aguja de salida
ii). caudal prolongada

iii). frecuente necesidad de dos punciones en vena con el equipo de flujo continuo
5. Donantes debe ser examinado antes de la aféresis para los marcadores de las enfermedades infecciosas transmitidas por la
transfusión de sangre y sus componentes en la misma manera que para la sangre entera. Cada donante debe ser probado antes de
cada aféresis menos que el donante en someterse a procedimientos repetidos, en tales pruebas de casos para los marcadores de
enfermedades es necesario repetir a los 30 días de intervalo.
6. Las pruebas para la hemoglobina, grupo ABO, el tipo de Rh, y la detección de anticuerpo inesperado se hacen.
7. regulaciones más estrictas gobiernan el donante que participan en el programa de aféresis en serie
(Procedimiento realizado con más frecuencia que cada 4 semanas).
i) Intervalo entre dos procedimientos debe ser de al menos 48 horas y la pérdida de glóbulos rojos no debe exceder de 25
ml por semana,
ii) Si los glóbulos rojos del donante no se podían vuelven a infundir durante un procedimiento, o si el participante dona una unidad
de sangre total, 12 semanas deben transcurrir antes de que la posterior procedimiento de aféresis,
iii) el monitoreo cuidadoso de peso, contar las células de la sangre, los niveles de proteína de suero y la cuantificación de las
inmunoglobulinas se requiere.
• Edad debería ser entre 18-50 años.
• Peso sea de 60 kg o más.
• La hemoglobina - 12,5 g / dl o más

plaquetoaféresis
En un procedimiento de plaquetoféresis, una porción de plaquetas del donante y algo de plasma se retira con el retorno de
Los glóbulos rojos del donante, WBCs, y el plasma restante. Una rutina de pletletpheresis
procedimiento por lo general tarda de 1 a 1,5 horas. El producto se prepara en un sistema cerrado y se puede almacenar durante 5 días. Las
plaquetas se pueden preparar sin o con plasma extra en una bolsa separada que puede ser transfundida o
almacenado como plasma fresco congelado (FFP). Si el plasma adicional se recoge durante
plaquetoaféresis, todas las precauciones se toman como en la plasmaféresis. De forma rutinaria, el número de
plaquetas en un producto de aféresis es equivalente a 6 a 8 concentrados de plaquetas aleatorias.
Los criterios específicos para la selección de donantes para plateletpharesis:
1. Los donantes que han tomado aspirina que contiene la medicación dentro de las 36 horas son generalmente diferido.
2. De plaquetas puede ser recogida a partir de donantes que no cumplan con el requisito si el componente es de particular valor para el
paciente - HLA emparejado donantes.
3. El intervalo entre los procedimientos debe ser de al menos 48 horas. Un donante no deberá someterse al procedimiento de más de 2
veces en una semana o 24 veces en un año. 236

aféresis
4. Un recuento de plaquetas no se requiere antes de la primera procedimiento o si el intervalo entre

procedimientos de citaféresis es al menos 4 semanas.
5. Si plaquetoaféresis se realiza con mayor frecuencia que cada 4 semanas, un recuento de plaquetas se debe hacer y
debe ser más de 150.000 / l antes de realizar subsiguiente
plaquetoaféresis.
6. Algunos abogan por el recuento de plaquetas se puede hacer antes de que todo plateletapheresis de manera que no se comprometa la salud de los donantes.
7. Si se recoge plasma extra y si el procedimiento se lleva a cabo más de una vez cada 4 semanas, el procedimiento no se
debe hacer si la proteína sérica total es de menos de 6,0 g / dl o si ha habido una pérdida de peso sin explicación.
leucoféresis
De vez en cuando se necesitan granulocitos en neonatos y adultos con neutropenia y sepsis (infección gramnegativos), no
respondiendo a los antibióticos. Para recoger número adecuado de granulocitos -
generalmente cercanos 1.0 - 3.0 x 10 10, se aplica la técnica de aféresis.
Un diario dosis de al menos I x 10 10 granulocitos y compatibilidad HLA es necesario para alcanzar terapéutico
efecto. granulocitos concentrados puede inducir HLA inmunización, pueden transmitir
citomegalovirus infección, y si no irradiado puede causar la enfermedad de injerto contra huésped en susceptibles
destinatarios. HLA-incompatible granulocitos pueden causar dificultad respiratoria.
Hay un renovado interés en la terapia de transfusión de granulocitos en los recién nacidos y adultos con sepsis
y neutropenia que no responden a los antibióticos ya que las dosis de células mucho más grandes pueden ser obtenidos cuando las células se
recogen de donantes estimulados con factores o corticosteroides estimulantes de colonias de granulocitos.
Colección de dosis adecuada de granulocitos necesita la administración de fármacos o infusión de

ciertos medicamentos durante el col proceso lection. El donante se estimula pre-donación con esteroides a
aumentar el número de granulocitos circulantes. Un protocolo utilizando 20 mg de prednisona oral a los 17,
12 y 2 horas antes de la donación da mejores granulocitos producen con la actividad esteroide sistémica mínima. Antes de la administración
de eorticosteroids, los donantes se les debe preguntar acerca de la historia de
la hipertensión, la diabetes y úlcera péptica.
almidón Hydroxlethyl (HES), en forma de bajo o de alto peso molecular, se infunde durante el
procedimiento de recogida de RBC para aumentar la sedimentación y para facilitar la separación y recogida de los granulocitos.
recombinante hematopoyético crecimiento factores, especialmente granulocitos estimulante de colonias factor

(G-CSF) eficazmente aumentar el rendimiento de granulocitos. factores de crecimiento hematopoyéticos pueden resultar en
colección de hasta 10 x 10 10 granulocitos por procedimiento de aféresis.
Todos pruebas de laboratorio, ABO y Rh, detección de anticuerpos y de enfermedades infecciones marcadores son probados antes de la
flebotomía. glóbulos rojos en granulocitos concentrados están siempre presentes, glóbulos rojos
deben ser compatibles con el plasma del receptor, y si más de 2 ml de glóbulos rojos están presentes en concentración de granulocitos
se debe ser transversal coincidente. destinatario Idealmente D-negativo deben recibir
concentración de granulocitos del donante D-negativo.
ERYTHROCYTAPHERESIS
avance reciente en aféresis implica la recogida de glóbulos rojos por aféresis automatizado. Muchos
las máquinas de aféresis automatizados se han mejorado y permitir la recogida de cualquiera de dos
237
puede ocurrir. En tales casos, la plasmaféresis en serie se diferirá durante 12 semanas. glóbulos rojos
pérdida debe no ser Más que 25 ml por semana.
4. Se tarda más tiempo que la plasmaféresis automatizada.
La plasmaféresis Utilizar equipo automatizado
La plasmaféresis con equipo automatizado se basa en los principios de separación de plasma a partir de
otros componentes de la sangre mediante técnicas de centrifugación y filtración por membrana. Existen
varios máquinas automáticas diseñadas para plasmaféresis en los principios de

centrifugación y filtración. estas máquinas requieren especial estéril desechable tubos y
contenedores. el anticoagulante se añade en una forma controlada. Trabajan en intermitente o continuo
sistema de flujo.
Las máquinas para la plasmaféresis que trabaja en el principio de la técnica de centrifugación son el sistema de recogida de
plasma (PCS / PCS 2) ambos fabricados por M / S Haemonetics Corporación Haemonetics MCS Plus y. Autopheresis C (APC),
fabricado por Fenwal (Baxter), trabaja en
el principio de tanto de filtración de membrana y centrifugación. Todos estas máquinas tienen intermittent-
sistema de flujo. Otro TPE máquina fabricada por Cobe trabaja en la filtración de membrana y el sistema de flujo continuo.
Autopheresis C es máquina de flujo intermitente en la que se recoge la sangre en un pequeño cilindro que está girando y
forzando plasma a través de una membrana de policarbonato (Fig. 15- 8). Hay tanto de filtración de membrana y la tecnología
centrifugación en Autopheresis C. La filtración tiene la ventaja sobre la
centrifugación que recoge el plasma libre de células.
Ventajas de plasmaféresis automatizada son:

1. Los donantes no están desconectados de sus propios glóbulos rojos, por lo que elimina el riesgo de transfusión de los
glóbulos rojos de otro donante.
2. La velocidad de colección es considerablemente más rápido que

W
en el manual plasmaféresis 500-600 ml plasma puede ORIFICIO
DE
ser recogidos dentro de los 30 minutos.
ENTRADA DE SANGRE
3. Los donantes preferir automatizado procedimiento el manual
plasmaféresis
4. Total racorporeal ext volumen a alguna hora,
MEMBRANA
en particular en lo filtración plasapheresis, es Menos
que en plasmpheresis manual de doble

5. acceso venoso sola
Desventajas de plasmaféresis automatizada
1. Es más caro que el procedimiento manual.
2. Plasma apartado a partir de células Los separadores pueden Contiene
las plaquetas que son menor que la media habitual

CONC
tamaño y que Si no remoto, detraer la calidad ENTRATED
de plasma destinado a para fraccionamiento. A la mismo
Celda
de salida Fig-
tiempo estas pequeñas plaquetas dan una mala respuesta a la
15.8 El
agregación y no arco adecuado para preparando Autopheresis-C
plaquetas se concentra. 240
aféresis
3. Los filtros de membrana tienen problemas potenciales tales como fugas o daño a las células. los
complementar pueden activar.
Cuidado de los donantes de plasmaféresis
1. Los criterios para la aceptación de donantes de plasmaféresis son ligeramente adhesivo que el de los donantes de sangre de rutina.
2. Los donantes son informados acerca el procedimiento en detalle, acerca de los posibles peligros, y escrito
consentimiento se toma.
3. Edad debería ser entre 18- 50 años

4. El peso debe ser de 60 kg o más.
5. Preferiblemente donante debería haber dado sangre entera 1 -2 veces antes.
6. Recuento total de sangre y suero proteínas deben ser con en condiciones normales limitado, y probado
periódicamente.
Si la plasmaféresis se realiza no más de una vez cada 4 semanas, se siguen los criterios de selección que se aplican a las
donaciones de sangre total. sin embargo si los donantes está participando en una serie
programa de plasmaféresis (por ejemplo, plasma es donado con más frecuencia que una vez cada 4 semanas), el procedimiento no debe realizarse
si la proteína total es menos de 6,0 g / dl o se ha producido la pérdida de sangre sin explicación. Cada 4 meses, todos los registros y pruebas de
laboratorio deben ser revisados, y los niveles de electroforesis de proteínas séricas o de inmunoglobulina (IgM e IgG) debe ser determinado.
Es seguro para aceptar 600 ml de plasma por sesión con un intervalo de dos semanas entre las donaciones o 24 veces en un año. Es
mejor tener un mayor número de donantes que someter a un pequeño número de donantes a las donaciones más frecuentes.
La plasmaféresis no terapéutico
1. Para aumentar el inventario de plasma de FFP para la transfusión
2. Para recoger el plasma de donante negativo IgA para transfusión.
3. Para obtener plasma para preparar inmunoglobulinas a Rh, el tétanos o HBsAg etc.
4. Para recoger plasma para la preparación de la albúmina, factor de proteína de plasma (PPF) y otros componentes del plasma.
5. Para preparar factores de coagulación como el factor VIII, factor IX complejo etc.
Aféresis FFP (AFFP) difiere significativamente de FFP derivado de sangre completa (WBD-FFP).
AFFP WBD-FFP
Volumen total 540 ml 200 ml
plasma Absolute * 486 ml 160 ml
Anticoagulante CPD / CPDA1 4% de citrato de sodio citrato de sodio 3%
Anticoagulante/ 1:10 1: 5
Anticoagulante plasma 0,4 g

0,6 g
Citrato / 100 ml de plasma
Glucosa l00mg / dl 400-715 mg / dl
crioprecipitado Más Menos
plaquetas residuales y WBCs ** menos de WBD-FFP
* dosis adecuada que afecta a la coagulación en adultos.
* * Reacciones causadas por la liberación de citoquinas por leucocitos son menos en los receptores por la transfusión de AFFP en
comparación con WBD-FFP.
241
procedimientos terapéuticos
aféresis terapéutica no cura una enfermedad, pero puede ser muy eficaz en el alivio de los síntomas de la enfermedad subyacente. La
eficacia del procedimiento se ve reforzada por la terapia de fármaco concomitante, en particular
immunosoppresive terapia en problemas inmune-mediada. La aféresis se clasifican
por el componente eliminado - citaféresis si el componente de cambio iscellular y plasma si se retira la sustancia nociva en el
plasma.
TERAPÉUTICA Citaféresis terapéutica
Plaquetoféresis
Puede ser utilizado para el tratamiento de pacientes que tienen el recuento de plaquetas anormalmente elevada con síntomas relacionados. Esta
condición ha sido reportada en pacientes con trastornos mieloproliferativos como polcythemia
vera. Los pacientes con conteo de más de 1, 000,000 / l pueden desarrollar complicaciones trombóticas o hemorrágicas. Durante procedimiento de
aféresis el recuento de plaquetas se puede disminuir tanto como un tercio a la mitad del valor inicial. El procedimiento se puede repetir con tanta
frecuencia como sea necesario hasta que la terapia con medicamentos se haga efectiva y los síntomas desaparecen.
Leucaféresis terapéutica
Eso se ha utilizado para tratar a los pacientes de leucemia, en particular con leucostasis inminente, en el cual
agregado leucocitos y trombos pueden interferir con el flujo sanguíneo pulmonar y cerebral. Leucoféresis se indica si el recuento de
leucocitos es más de 100.000 / ul. Sin embargo la eficacia
de tal leucorreducción es no probada. El recuento de glóbulos blancos se eleva durante semanas, y leukoreduction puede efectuarse con la
quimioterapia.
Eythrocytapheresis terapéutica
plaquetas terapéutica y Leuka-aféresis implicar el agotamiento de celular sin constituyentes

reemplazo. Erythrocytapheresis se considera un procedimiento de intercambio. Una cantidad predeterminada
de la sangre es retirada del paciente y se sustituye por la sangre homóloga. Es útil para tratar las complicaciones de la enfermedad de
células falciformes. Eso también es útil en pacientes con infección parasitaria Sever
de malaria.
La plasmaféresis terapéutica (Intercambio de plasma)
plasmaféresis terapéutica no es una cura para la enfermedad subyacente, sino más bien una forma de proporcionar corta
alivio plazo. El proceso de la plasmaféresis terapéutica es en realidad un intercambio de plasma en lugar de aféresis. Durante el
intercambio terapéutico de plasma, lo patológico sustancias en el plasma se
eliminado y reemplazado con un fluido. El fluido de sustitución puede ser plasma, albúmina, solución salina o una combinación de albúmina y
solución salina. El plasma está constantemente reemplaza con el fluido de modo volumen de sangre del paciente no cambia.
La eficiencia de un intercambio de plasma está relacionado con se elimina la cantidad de plasma. Un procedimiento que elimina el plasma
igual a volumen de plasma del paciente se llama intercambio de plasma en un solo volumen. Un intercambio de plasma en un volumen reduce
30% de constituyentes no deseados de plasma. El segundo intercambio de plasma, como una parte del mismo procedimiento, reducir sólo el 10% de
constituyentes no deseados de plasma. Se recomienda que aproximadamente 1 a 1,5 L de plasma puede ser intercambiado por procedimiento.
constituyentes patológicos presente
en intravascular y espacios extravasclar, efecto el cabo de venir
el intercambio de plasma. Si el anticuerpo, que es la causa de la enfermedad es la IgM, aféresis es eficaz como IgM es principalmente en intravascular. Donde
como IgG está igualmente presente en los espacios intravascular y extravascular 242
aféresis
y aféresis es menos eficaz y IgG sintetizar y reaparecen rápidamente. La eliminación de anticuerpos IgG es más eficaz cuando se combina
con fármacos inmunosupresores.
La plasmaféresis es indica en las condiciones mediadas por factores de plasma tales como
autoanticuerpos, complejo inmune, drogas o toxinas unidas a proteínas, colesterol alto o
triglicéridos.
El intercambio de plasma se realiza a petición del médico del paciente.
Condiciones comunes La plasmaféresis terapéutica para y Patológica sustancias

Remoto
condiciones sustancias eliminadas
macroglobinaemia de Waldenstrom Ig hyperviscocity causando
Miastenia gravis autoanticuerpos
El síndrome de Goodposture autoanticuerpos
hipercolesterolemia Las lipoproteínas
Después de transfusión púrpura debido a la anti-PI A1 anticuerpos de plaquetas
síndrome agudo de Guillain-Barré Incierto
Lupus eritematoso complejos inmunes
inhibidor del Factor VIII Auto-o aloanticuerpos
PROPINA factores plaquetarios agregadores
la intoxicación por barbitúricos toxinas unidas a proteínas
Fluidos utilizados en AFÉRESIS
Todos los procedimientos de aféresis utilizan anticoagulante para prevenir la coagulación de la sangre a medida que entra la separación
máquina. anticoagulante utilizado más comúnmente es ACD. La solución salina normal se usa para cebar el sistema de
para mantener la línea abierta y para ayudar a mantener el volumen de líquido.
En la plasmaféresis terapéutica (intercambio de plasma) Procedimiento de gran volumen de plasma del paciente se mantiene y tiene
que ser reemplazado con fluidos para mantener el volumen intravascular adecuado y la presión oncótica.
La comparación de los fluidos de reemplazo más comúnmente utilizados:
El fluido de reemplazo ventajas desventajas
Cristaloides - Normal Menos caro 2-3 volúmenes requeridos
Salina Hipoalergénicos Hipo-oncótica

No hay riesgo de hepatitis y VIH No hay factores de coagulación
La albúmina en solución al 5% Leve hiper-oncótica Alto costo

(NSA) Se utiliza en proporción 1: 1 No hay factores de coagulación
del plasma eliminado. No hay riesgo
de hepatitis y VIH No hay inmunoglobulinas
243
5% de albúmina con solución salina normal se prefiere generalmente como reemplazo fluido. 5% de albúmina es
ligeramente hiper-oncótica y puede diluirse con solución salina a 4,0-4,5% para el intercambio de plasma.
El plasma fresco congelado (FFP)
FFP contiene todos los constituyentes del plasma eliminado y esto es fluido de sustitución óptima. FFP tiene
la desventaja ese puede transmitir enfermedades transmitidas por transfusión, puede causar alérgica
reacciones, la incompatibilidad ABO o sensibilización a las proteínas plasmáticas. Eso es el líquido de elección solamente
cuando se desea reemplazar los factores de coagulación o para dar un poco de proteína. FFP se recomienda en el recambio plasmático
en pacientes con citopenia trombótica tromboplastina (TTP) o urinario hemolítica
síndrome (SUH). FFP puede proporcionar algunos de los factores que faltan en pacientes con TTP o SUH como precursor de la prostaciclina u
otros factores anti-trombóticos.
244
Transfusión
en la práctica
Medicina CLINICA
la práctica componentes de la sangre de transfusión requiere el uso constante de clínica crítica juicio.
El médico indicaciones para cada transfusión deben ser cuidadosamente evaluados, y cada transufion
debe ser para monitered la eficacia terapéutica. Los resultados adversos pueden seguir hemoterapia,
incluso cuando esa terapia está indicada, transfusión debe llevarse a cabo sólo si el beneficio esperado
supera los riesgos potenciales.
Principios del uso clínico de la sangre / productos sanguíneos
1. El paciente con pérdida de sangre aguda debe recibir reanimación efectiva (fluidos de reemplazo intravenosa, oxígeno, etc ..),
mientras que la necesidad de transfusión se evalúa.
2. Las indicaciones clínicas o de laboratorio específicas para la transfusión deben ser considerados.
3. vlaue hemoglobina del paciente, aunque es importante, no debe ser el único factor decisivo en el inicio de la transfusión. La
decisión de transfundir debe ser apoyada por la necesidad de aliviar los signos y síntomas clínicos y prevenir la morbilidad y
mortalidad significativas.
4. Transfusion debe ser prescrito sólo cuando los beneficios para los pacientes son propensos a ser mayores que los riesgos de
transmisión de VIH, hepatitis B y C, u otros agentes infecciosos a través de productos sanguíneos.
5. El consentimiento informado para la transfusión de sangre y sus productos se deben tomar. El médico debe explicar los riesgos y
alternativas de transfuion al destinatario o familiar responsable
245
y miembro documento en el médico constancia de que se ha hecho. consentimiento una vez para
transfusiones repetidas será suficiente.
TRANSFUSION MÚLTIPLE
transfusión múltiple es la transfusión repetida de sangre total o glóbulos rojos durante un largo período de tiempo (meses o años).
indicaciones:
■ la anemia hipoproliferativa:
• Hipoplasia o aplasia de las anemias
• Los fármacos o productos químicos hipo inducido o anemias aplásticas
• depresión de la médula inducida por radiación
■ anemias Hemoiytic
• talasemia mayor
• Anemia falciforme
• La anemia hemolítica autoinmune (AIHA)
• anemia paroxística nocturna (PNH)
■ La anemia asociada con enfermedades crónicas:

• inflamación crónica
• Falla hepática
• Malingnancy
Directrices para la transfusión múltiple:
• De glóbulos rojos empaquetados de transfusión se prefiere a toda transfusión de sangre.
• glóbulos rojos leucocitos pobres deben utilizarse en pacientes que tienen reacciones transfusionales febriles no hemolíticas.
• Los glóbulos rojos deben ser del mismo grupo ABO y Rh (D) como la del paciente y deben ser cruzada emparejado mediante la prueba de
antiglobulina humana.
• Los pacientes que reciben múltiples transfusiones regulares deben administrarse agentes quelantes del hierro para prevenir la hemosiderosis.
ANEMIAS CONGENITIAL HEMOLÍTICO

Las anemias congénitas hemoiytic se deben a anomalías hereditarias que implican uno de los tres componentes principales de los
eritrocitos - las enzimas de la membrana, hemoglobina e intracelulares . Más
anemias hemolíticas congénitas comunes correspondientes a la práctica clínica de medicina transfusional
se deben a defectos de hemogloublin
Los defectos de la hemoglobina son:
• anomalías estructurales - HBSS, HbS (células falciformes)
• anomalías sintéticos -Incumplimiento para sintetizar Hb adecuadamente β -
talasemia α-talasemia otra Syndrone thalassemie
246
Práctica transfusión en Medicina Clínica
ANEMIA FALCIFORME
Oxygen afinidad de los glóbulos rojos de la enfermedad falciforme se reduce y 2, 3 - niveles de DPG son elevados. Los síntomas de la anemia son por lo
general menos.
Las indicaciones para la terapia de transfusión en la enfermedad falciforme son:
• Severe Vaso-occlussive o crisis dolorosa refractaria al tratamiento médico.

• Las infecciones graves
• secuestro esplénico agudo

• Carrera
• infarto de hígado
• úlcera crónica de la pierna
• El priapismo
crisis vaso-occlussive graves (crisis dolorosas)
Transfusión se da por dolorosa crisis o no responde refractario al médico conservador

tratamiento. No se da para tratar la anemia, pero para reducir la proporción y el número de células falciformes en circulación que mejorar el
dolor; la resistencia al flujo de la sangre con las células falciformes se reduce cuando una mezcla de células de HbA y HbS contiene menos de
40% de células falciformes. Clínicamente cuando vasoocculusion se produce el nivel para HbS generalmente excede 50%.
Cuando al menos 60% de los glóbulos rojos se sustituyen por HbA normales que contienen células, el progreso de
Los síntomas por lo general cesa. Dos métodos terapéuticos están disponibles para lograr este objetivo:
Transfusión de eritrocitos frescos
• Los glóbulos rojos frescos a partir de células donantes no falciformes, se da 10-15 ml / kg de peso cada 12
hora hasta que los niveles de hemoglobina aumentan a 12-13 g / dl.
• Las células falciformes, a causa de la supervivencia se acortan, desaparecerán rápidamente de la circulación. A partir de entonces, los
pequeños glóbulos rojos transfusión dan cada 2-3weeks mantendrá el nivel de HbS por debajo de 40%, suprimir la síntesis de HbS y
asegurar que la mayoría de los glóbulos rojos que circulan será normal
Exanguinotransfusión:
■ transfusión simple es mucho tiempo y aumenta el riesgo de sobrecarga de líquidos y la insuficiencia cardíaca congestiva.
■ Así parcial - exanguinotransfusión se recomienda como una alternativa que es más rápida y eficiente método para
disminuir el nivel de Hb
■ De intercambio parcial transfusión en anemia de células falciformes se indica en
• crisis dolorosas
• Enfermedad del corazón
• accidentes cerebrovasculares (ictus)
procedimientos
• transfusión de intercambio parcial se realiza por los glóbulos rojos que transfundieron, 15 ml / kg de peso corporal, mediante
una vena antecubital y retirando simultáneamente. 20 ml de sangre / kg de peso corporal, por gravedad desde la vena
anticubital opuesto.
247
• exanguinotransfusión se puede repetir después de 24 horas.
indicaciones
• Transfusion se indica en la anemia de células falciformes con pneumococol fatal infecciones, tales
como sepsis, neumonía y meningitis, además de anticuerpos.
• exanguinotransfusión puede reducir immoglobulins, bacterias y endotoxinas.
Crisis de secuestro esplénico
• En niños con anemia de células falciformes homocigóticos y con anemia de células falciformes - talasemia B asociada con esplenomegalia
están en riesgo de repentinas crisis de secuestro esplénico agudas.
• Durante las crisis el bazo se agranda masivamente, Hb cae desde un nivel estable de 7-8 g / dl a 2 g / dl o menos y
shock hipovolémico y puede ocurrir la muerte.
Tratamiento
• toda pronta transfusión de sangre va a corregir la hipovolemia y revertir el shock. Se retrae el bazo agrandado.
• La esplenectomía se debe tener en cuenta para evitar nuevas crisis.

Carrera
• Transfusion se da a disminuir el nivel de HbS a 20% o menos por simples transfusiones de glóbulos rojos o de cambio.
• Clínico la mejora se produce en los casos en cuyo programa de transfusiones mantiene la Hb por encima de 10 g / dl y el nivel de Hb por
debajo de 20-30% durante 2 años.
El embarazo
• Embarazo con anemia de células falciformes es también en peligro la vida
• programa de transfusión crónica durante el segundo o tercer trimister puede reducir la insuficiencia placentaria, menor tasa de
nacimiento prematuro o todavía
• Resultados de la transfusión de intercambio parcial manual o usando automatizado flujo erythrocytapheresis continua-
también son alentadores. Nivel de HbA se mantiene a o mayor que 40%. El procedimiento se repite si el nivel de HbA
está por debajo de 20% y la hematorcrit debajo del 25%.
Úlceras de la pierna y priapismo
Los síntomas dolorosos de úlceras en las piernas y sequely devastador del priapismo pueden ser disminuidos por transfusión.
TALASEMIA
se ha hecho un progreso considerable en la terapia de transfusión para pacientes con talasemia homocigótica β- (talasemia mayor)
• El tratamiento ha consistido principalmente de apoyo y constaba de transfusión de glóbulos rojos intermitentes para controlar la anemia
severa. Tres programas de transfusión se han defendido.
1. programa de Transfusión de corrección de la anemia severa a un nivel de Hb segura de 7 a 9 g / dl para evitar los síntomas de la anemia.
248
2. programa de transfusión de Hyper para mantener el nivel de Hb entre 10-12 g / dl es probable

adecuado. Disminuye el efecto de la anemia crónica e impide el crecimiento y desarrollo anormal.
3. programa Super-transfusión en el que el nivel de Hb se mantiene a 12 g / dl está diseñado para suprimir completamente la
hematopoyesis. Si este programa se inicia desde la infancia, sus
ventajas son:
• crecimiento y desarrollo normales
• Normal de la función diaria y el bienestar psicológico
• la necesidad de transfusión es menor
• Hierro sobre la carga es también menos
• cambios óseos patológicos son menos

• Menos cardiomegalia e hiperesplenismo
Los productos sanguíneos utilizados en los talasémicos
■ RBC debe ser de 6 días de edad.

■ Se prefieren las células rojas de leucocitos -reducido.
• Lavado rojo células-lavado de glóbulos rojos es un proceso engorroso, y tiene riesgo de contaminación.
• Congelado - descongelado y se lavó las células rojas - es un proceso costoso.

• La transfusión de filtros de reducción de leucocitos - rentable pero muy eficiente
Dosis
• 10-20 ml / kg de peso corporal cada 3-4 semanas
• A medida que aumentan el tamaño del cuerpo, 1 -2 unidades cada 3 semanas
• Pre-transfusión nivel de Hb se debe mantener 10 g / dl
Sobrecarga de hierro
Como resultado de múltiples transfusiones, hemosiderosis transfusional desarrolla. Alrededor de 200 mgm de hierro se acumula con cada
unidad de sangre transfundida.
la acumulación de hierro continua conduce a:
• hiperpigmentación
• La deposición de hierro en el corazón, hígado, páncreas y otras glándulas endocrinas, los resultados en la fibrosis y disfunción de órganos
• ferintin suero es alta.
La quelación del hierro en la talasemia
• La deferoxamina es actualmente el agente quelante de hierro más eficaz

• Se inicia tan pronto como sea posible
• 8 horas diarias de infusión subcutánea de desferrioxamina 20-40 mg / kg de peso durante el sueño con pilas portable
bomba de infusión, 5 días en una semana es la terapia suficiente para lograr un equilibrio negativo de hierro.
249
Vitamina C
Convierte forma férrica de hierro a la forma ferrosa y también facilita la movilización de las reservas de hierro a hierro libre. forma ferrosa del
hierro y el hierro libre consigue atado con deferoxamina fácilmente. La vitamina C hasta 200 mgm / día se administra junto con
desferrioxamina.
esplenectomía
Esplenectomía debe realizarse cuando la necesidad de transfusión anual excede de 200-250 ml / kg /

año. Siguiendo splencetomy todos los pacientes deben recibir un régimen antibiótico proplylactic de penicilina (250 mgm dos veces
al día), así vacunar aganist penumococcus 2-4 semanas esplenectomía previa.
neocitos
Los pacientes jóvenes con ciertos trastornos hematológicos especialmente la talasemia, a menudo requieren
continua terapia de células rojas. Cada mililitro de RBCs contiene aproximadamente 1 mg de hierro, que se acumula en los tejidos y
causa hemosidrosis, su tradicional terapia es un quelante de hierro
agente.
Otro enfoque es la transfusión de glóbulos rojos más pequeños (neocitos). La preparación de neocitos implica la eliminación selectiva de
neocitos del donante o células rojas más jóvenes que se encuentran en la parte superior de la capa de glóbulos rojos después de la centrifugación o
neocytapheresis.
La vida media de los glóbulos rojos jóvenes, es decir, neocitos es de 90 - 100 días, mientras que los glóbulos rojos es de 60 días. Por lo tanto
algunos trabajadores han intentado utilizar neocitos a (1) reducir el requerimiento de la sangre (2) para aumentar intervalos de transfusión y (3) para
reducir la sobrecarga de hierro. Pero la terapia neocitos no tuvo mayor aceptación debido a que la preparación de neocitos mediante la eliminación
de la capa superior de las células después de la centrifugación o neocytapheresis es largo y costoso.
Neonatales y pediátricos práctica de transfusión

la práctica de transfusión en neonatos y lactantes necesitan comprensión especial debido a su fisiología única. anemia pediátrica es debido a la
reducción de la concentración de hemoglobina o de la masa de glóbulos rojos por debajo de los valores normales para los niños / los niños
normales.
Hemoglobina:
• concentración media de Hb de recién nacidos a término al nacer es de aproximadamente 18,0 g / dl. Todos los bebés tienen una disminución fisiológica
normal de la Hb durante los primeros 3 meses.
• la concentración de Hb promedio en niño normal de 3 meses a 6 años es 11,0 a 12,0 g / dl. De 7 a 13 años de edad es
de Hb 13,0 g / dl.
• La mayor parte de la Hb en neo-nacido es hemoglobina fetal (Hb F) que proporciona menos oxígeno que HbA.
• nivel de Hb de los niños sanos mayores de 14 años es la misma que las de un adulto.
Volumen de sangre :
• El volumen de sangre de recién nacidos a término es el peso 85 ml / Kg / cuerpo, mientras que la de los recién nacidos prematuros son 100 - 105 ml /
kg / peso corporal.
250
Transfusión
Las transfusiones se dan en volúmenes pequeños (10-20 ml RBCs / kg de peso corporal), lo que aumenta el riesgo de exposición múltiples
donantes. Por lo tanto, una sola unidad de donante asignado a un individuo recién nacido y el uso de dispositivo de sellado tubo estéril para la
adquisición de pequeños volúmenes de transfusiones de más de la vida útil de la unidad de donante o la técnica de división de una sola unidad
multipack puede disminuir el número de múltiples donantes exposición.
La sangre debe ser lo más frescos posible y no más de 6 días de edad a la lección el riesgo de hiperpotasemia y para maximizar los niveles
de 2,3-diphophoglcerate (2,3-DPG). Se prefieren las transfusiones de glóbulos rojos. Sin embargo, para los glóbulos rojos de exposición limitada de
los donantes almacenados hasta 42 días es aceptable a no ser que la hiperpotasemia es un problema conocido.
Directrices de transfusión de glóbulos rojos de la sangre neonatal
Transfundir glóbulos rojos ≤ 20 ml / kg de peso corporal, que no exceda de Hct. de 0,45 o Hb de 15 g / 1.
1. HCT. ≤ 0,20 o Hb ≤ 7 g / dl y el recuento de reticulocitos <4%

2. HCT. ≤ 0,25 o Hb ≤ 8 g / dl con cualquiera de las siguientes condiciones:
yo) Los episodios de apnea / bradicardia ≥ 10 episodios / 24 horas o ≥ 2 episodios que requieren ventilación
bolsa-mascarilla,
ii) Sostenida taquicardia> 180 corazón late / min.
tachpynea sostenida> 80 respiraciones por min.
iii) Cese de la ganancia de peso adecuada x 4 días (≤ 10 g / día)

iv) síndrome de dificultad respiratoria leve
3. HCT. ≤ 3,0 (Hb ≤ 10 g / dl con el síndrome de dificultad respiratoria moderada.

4. HCT. ≤ 0,35 (Hb ≤ 12 g / dl) con el síndrome de dificultad respiratoria grave o cardíaca congénita
enfermedad asociada con cianosis o insuficiencia cardíaca.
5. la pérdida de sangre aguda con shock: reemplazo de sangre para establecer el volumen de sangre adecuado y
HCT. 0.40.
Blood Modificado / células rojas se prefiere
• Citomegalovirus seronegativos o leucocitos reducido de sangre deben ser administrados para disminuir el riesgo de
transmisión de citomegalovirus en recién nacidos prematuros y inmunodeficientes.
• Unidades de sangre pueden ser irradiados para disminuir el riesgo de enfermedad de injerto contra huésped, sobre todo en
los recién nacidos prematuros con sospecha de inmunodeficiencia o para los recién nacidos que son potenciales
candidatos a trasplante. Transfusiones en un plazo completo de los recién nacidos no requieren irradiación.
• La irradiación se recomienda para los hematíes para transfusión intrauterina.
Glóbulos rojos TRANSFUSION en células Transfusion ANEMIA Red
Blood en aguda Anemia / Blood Pérdida.

La concentración de Hb antes de la hemorragia, la extensión de la hemorragia, y la existencia de otras condiciones que alteran la
respuesta fisiológica a la pérdida de sangre aguda pueden afectar la decisión de transfundir glóbulos rojos.
Los pacientes casi siempre requieren transfusión de glóbulos rojos perioperatorias cuando su Hb es de menos de 6 g / dl. y rara
vez cuando su Hb es mayor que 10 g / dl. Entre 6 y 10 g / dl de Hb, la transfusión
251
requisitos dependen de la extensión de la pérdida de sangre, enfermedad cardíaca subyacente, y el estado clínico general.
En general, la pérdida de menos del 15% de resultados voloume sangre en síntomas mínimos; 15% a 30% taquicardia; 30% a
40% aumentó signos de shock, y mayor que 40% en estado de shock severo.
Anteriormente pacientes sanos pueden ser tratados con cristaloide solo para la pérdida de volumen de sangre de menos de 30%. Los
pacientes con enfermedad de base pueden necesitar transfusiones de sangre en la pérdida de 30%, dependiendo del grado de anemia y la
naturaleza de la enfermedad.
Directrices rojos transfusión de glóbulos (Excluyendo los recién nacidos) - Resumen pérdida de
sangre aguda:
1. Evaluar los efectos de la pérdida de sangre y las enfermedades subyacentes.
2. Estimación y / o anticipar el grado de pérdida de sangre:
La pérdida de sangre El fluido de reemplazo
<20% del volumen sanguíneo Ninguna
20 - 30% del volumen sanguíneo Crysralloids / Coloides

30 - 40% del volumen sanguíneo Los glóbulos rojos y cristaloides
> 40% del volumen sanguíneo La sangre entera o células rojas y cristaloides
Nivel de Hb
. > 10 g / dl, los glóbulos rojos rara vez es necesaria

. </ Dl, RBCs generalmente necesaria 6 g
. 6-10 g / dl, RBCs necesidad depende de otros factores
Medir los signos vitales y la oxigenación del tejido (útil cuando Hb está en el intervalo de 6-10 g / dl y el alcance de la pérdida de
sangre es desconocido)
Taquicardia, hipotensión no se puede corregir mediante la reposición de volumen solo, glóbulos rojos necesaria cuando Pvo 2 < torr,
relación de extracción> 50% Vo 2 < 50% de la línea de base
Mote - PVO 2 - la tensión de oxígeno de la sangre arterial pulmunary en la terminación de la descarga de oxígeno.
Vo 2 - consumo de oxigeno
La anemia crónica
1. Tratar con agentes farmacológicos específicos como vitmain B 12, ácido fólico, hierro, recombinante
eritropoyetina humana. si el diagnóstico indica
2. Utilizar estrategias específicas para la enfermedad de células falciformes y la talasemia
3. Transfundir para minimizar los síntomas y el riesgo de anemia en el nivel de Hb de 5,8 g / dl
TRANSFUSION masiva de sangre

Se han propuesto varias definiciones de la transfusión masiva:
• transfusión masiva de sangre se define generalmente como la sustitución de uno o más volumen (s) en la sangre dentro de las 24
horas.
• La transfusión de unos diez unidades de sangre entera de cada uno de 450 ml de sangre o 20units de glóbulos rojos, dentro de las
24 horas. 252
• La sustitución de más de 50% del volumen de sangre en 3 horas en un adulto .. volumen de sangre normal
generalmente ser aproximadamente:

• En adultos sobre 70 ml por kg de peso corporal o el 7% del peso corporal
• En los niños de unos 80 ml por kg. peso corporal o 8% del peso corporal
• En los recién nacidos 85-90 ml por kg de peso corporal o 8,5 a 9,0% del peso corporal. La transfusión
masiva puede ser necesaria debido a la hemorragia aguda en:
• emergencias quirúrgicas o médicas (por ejemplo gastro-intestinal de sangrado especialmente de varices.)

• Cardiaca y cirugía vascular
• exanguinotransfusión en recién nacidos
• casos obstétricos.
• En trauma múltiple
• Trasplante de hígado
La estrategia de transfusión de sangre debe ser mantener el volumen de sangre y su composición con en límites que sean seguros
con respecto a la hemostasia, la sangre oxígeno-capacidad, y la presión oncótica y bioquímica plasma (Tabla 16.1). Muestra de sangre
debe ser enviada al laboratorio en la oportunidad más temprana posible para determinación del grupo sanguíneo, rastreo de anticuerpos,
pruebas de compatibilidad, así como hematología línea de base, la detección de la coagulación, incluida la estimación de fibrinógeno y la
investigación bioquímica.
Tabla 16.1 Límites de seguridad de Hb y los factores de coagulación
Investigación Valor objetivo
Hemoglobina; (Hematocrito) L0G / dl (0,33)

Recuento de plaquetas > 50 x 10 9 / L
Tiempo de protrombina <1,5 x control
tiempo de tromboplastina parcial <1,5 x control
fibrinógeno > 0,8 g / 1
estrategia de gestión de la transfusión masiva
1. Restaurar el volumen de sangre para mantener la perfusión tisular y la presión arterial
2. Mantener la capacidad portadora de oxígeno
3. Tratar cualquier fuente quirúrgico de sangrado
4. coagulopatía correcta mediante el uso juicioso de
• El plasma fresco congelado
• La transfusión de plaquetas
• El crioprecipitado (si fibrinógeno es baja)

5. prevenir la hipotermia
Restauración de volumen de sangre para mantener la perfusión tisular y la presión arterial
Restauración de volumen de sangre es sumamente importante para mantener la perfusión de tejidos, la presión sanguínea y shock
hipovolémico, prevenir el daño tisular, y el empeoramiento de la trombocitopenia y coagulopatía.
253
Restauración de volumen circulante se logra inicialmente por la infusión rápida de cristaloides como solución de lactato de
Ringer y solución salina o coloides normal a través de gran calibre (calibre 14 o más grande) cánulas periféricas. El uso de
albúmina y albúmina no coloides frente cristaloides para la sustitución de volumen han sido recientemente objeto de debate. El
uso de coloides no se recomienda en el Colegio Americano de Cirujanos Advanced Trauma directrices de soporte vital.
solución de lactato de Ringer se rcommended como terapia inicial y la solución salina normal es una alternativa aceptable a la
solución de lactato de Ringer. solución de lactato de Ringer contiene calcio, y si se mezcla inadvertidamente con una unidad de sangre, la
sangre puede coagularse en la línea o la bolsa.
Cristaloides se infunde en proporción de 3: 1 por cada unidad de sangre perdida. Terapia se controla por la respuesta hemodinámica
y el retorno de la perfusión tisular (medido por el estado mental, la producción de orina, de llenado capilar y ausencia de acidosis).
Reanimación procede entonces por el uso de componentes de la sangre, dependiendo de la respuesta del paciente. Los pacientes que
responden a unos 2000 ml de cristaloides con el regreso de los signos vitales estables y la perfusión tisular por lo general no requieren
transfusión de sangre. Los pacientes que no responden a esta, por lo general tienen gran pérdida de sangre y requieren glóbulos rojos o toda
la transfusión de sangre y aún más la reposición de líquidos emergentes.
Transfusión de glóbulos rojos es probable que se requiera junto con la reposición de líquidos cuando se pierde un 30-40% de volumen de
sangre. La pérdida de más del 40% del volumen sanguíneo también es posible que se requiera la vida mortal y la sangre entera.
La pérdida de sangre es generalmente subestimada y no hay que olvidar que los valores de hemoglobina y hematocrito no se caigan
durante varias horas después de la hemorragia aguda. La determinación de si las concentraciones de hemoglobina intermedios justifican la
transfusión de glóbulos rojos se debe basar en los factores de riesgo del paciente de desarrollar complicaciones de la oxigenación inadecuada,
tales como:
• Tasa de pérdida de sangre
• reserva cardiorrespiratoria
• Consumo de oxigeno
• las variables cardiológicas medidos, tales como el gasto
cardíaco del pulso de presión arterial de la frecuencia cardíaca
Estas señales pueden ayudar en el proceso de toma de decisiones, pero debe hacerse hincapié en que la isquemia silenciosa puede
ocurrir incluso en la presencia de signos vitales estables.
Prevención de la hipotermia
La hipotermia aumenta el riesgo de coagulación intravascular diseminada y otras complicaciones y puede ser impedido por precalentar los
fluidos de resucitación, los dispositivos de paciente-calentamiento tales como mantas de aire caliente y el uso de calentadores de
temperatura controlada de sangre.
La transfusión masiva de 100 ml / min o 1 unidad de sangre cada 3 minutos requiere el calentamiento de la sangre de otro modo
receptor puede desarrollar hipotermia y arritmias.
arreglos banco de sangre:

El grado de urgencia para la transfusión se debe transmitir con precisión al banco de sangre.
1. ABO de rutina y agrupación, detección de anticuerpos Rh (D) y de compatibilidad cruzada por solución salina y
técnica de Coombs toma aproximadamente 3
horas. 254
2. Si se requiere con urgencia la sangre, el tiempo de requisito debe ser mencionado en el formulario de solicitud. ABO y Rh
tipificación se realiza mediante la técnica del tubo de centrifugado y de compatibilidad cruzada se realiza por la técnica de
centrifugado solución salina o método LISS.
3. En casos muy urgentes uncorss-emparejado glóbulos rojos del mismo grupo que el de la paciente, después de hacer ABO y Rh (D)
tipificación del paciente se suministran con la concurrencia de los clínicos. Posteriormente, la compatibilidad cruzada se realiza
mediante un tubo de centrífuga de solución salina o por la técnica de LISS.
4. En situación de urgencia extrema puede ser necesario para suministrar glóbulos rojos grupo -matched O descruzar si el
grupo del paciente no se conoce o no hay tiempo para hacer ABO y Rh (D) agrupación del receptor.
En una emergencia, mujeres premenopáusicas, cuya ABO y Rh (D) del grupo sanguíneo no se conoce, O Rh (D)
engative glóbulos rojos se deben dar a evitar Rh (D) la sensibilización y el riesgo de enfermedades hemolíticas de
nuevo nacidos en embarazo posterior. O Rh (D) glóbulos rojos positivos se pueden dar a Rh (D) negativas machos y
hembras pacientes postmenopáusicas si no tienen anticuerpos anti-Rh en la sangre y Rh (D) negativo de sangre no
está disponible.
En el caso de (3) o (4) la sangre se suministra con el consentimiento de los clínicos, y "Blood
emparejado-Uncross" se escribe en el informe compatible y en la etiqueta de la bolsa de sangre.
Monitorización hematológica:
La investigación se muestra en la Tabla 16.1 se debe realizar cuando la pérdida de sangre se reduce sustancialmente a la orden de (<0,5 L /
h) y después de la hemorragia está bajo control. Sobre la base de los hallazgos de laboratorio anormalidades hemostáticas correctas.
1. concentrados de plaquetas:
Los concentrados de plaquetas se dan para mantener recuentos plaquetarios 50 x 10 9 / L o superior, el nivel mínimo necesario
para lograr la hemostasia eficaz cuando la función plaquetaria es normal. Consenso de expertos sostiene que las plaquetas no
se debe permitir que caiga por debajo del nivel crítico de 50x 10 9 / litros en pacientes gravemente la coagulación. A nivel objetivo
más alto de l00x 10 9 / litros ha sido recomendado para las personas con traumatismos de alta energía múltiple o lesión del
sistema nervioso central.
Durante cardiaca sangrado cirugía de derivación puede ocurrir en los recuentos de plaquetas más alto que este, probablemente a
causa de un defecto funcional adquirida en plaquetas. transfuion plaquetas empírica puede ser necesaria cuando la función
plaquetaria es anormal, como se encuentra durante o después de un bypass cardiopulmonar.
2. La deficiencia de factor de coagulación es la causa principal de coagulopatía.
• transfusión de volumen masivo o grande puede dar lugar a trastornos de co-agulation debido a la dilución de factores de
coagulación y plaquetas.
• La prolongación del tiempo de tromboplastina parcial activada (aPTT) y tiempo de protrombina (PT) a 1,5 a
1,8 veces de los valores de control se correlaciona con un mayor riesgo de coagulopatía clínico y requiere
corrección.
El plasma fresco congelado (15 ml / kg de peso corporal) se da para corregir anomalías de la coagulación.
255
• Sangrado continuo junto con la coagulación gravemente perturbado, necesita un tratamiento más
enérgico. Concentrados de plaquetas, FFP o crioprecipitado se dan particularmente cuando hay evidencia
de coagulopatía intravascular diseminada (DIC). Cyoprecipitate reemplazará el fibrinógeno y el factor VIII.
La infusión de FFP debe considerarse después de un volumen de sangre se ha perdido. FFP solo, si se administra en
calidad suficiente corregirá fibrinógeno y la mayoría de las deficiencias de factores de coagulación, pero puede ser
necesaria gran volumen si el volumen de fibrinógeno permanece críticamente baja (<10 g / litro), y la terapia de
crioprecipitado debe ser considerado.
Los problemas de la transfusión de gran volumen o grande:
• Acidosis
Durante el almacenamiento de la sangre, el metabolismo de las células rojas genera ácidos que resultan en la reducción de su pH. La
acidosis en un paciente es más probable debido al tratamiento inadecuado de la hipovolemia que debido a los efectos de la
transfusión.
Por lo general, el cuerpo puede neutralizar esta carga de ácido de transfusión y el uso de agente alcalinizante bicarbonato u otra
no es necesario.
• La hiperpotasemia
En la sangre almacenada hay un pequeño aumento en el potasio extracelular. Este aumento no suele ser clínico significativo.
Como medida preventiva utilizar sangre fresca preferiblemente que es menos de 7 días de edad.
• toxicidad del citrato y la hipocalcemia

Toxicidad El citrato es un problema raro en la transfusión de gran volumen de sangre entera. Citrato en anticoagulantes
se une al calcio en suero que reduce el nivel de calcio ionizado en el cuerpo. La hipocalcemia con acidosis e hipotermia
puede causar una reducción en el gasto cardíaco, bradicardia y arrythymias.
La mayoría de los pacientes que se someten a la transfusión masiva no requieren suplementos de calcio. En algunos casos, si los
niveles de calcio se vuelven excesivamente baja, gluconato de calcio o cloruro de calcio se pueden dar.
• El agotamiento de los factores de coagulación y plaquetas: Su gestión ya se ha explicado anteriormente.
DISEMINADA COAGUALTION INTRAVASCULAR

La coagulación intravascular diseminada (DIC) es una coagulopatía adquirida. DIC es causada por la activación y el consumo de
proteínas de coagulación, el fibrinógeno y las plaquetas anormal y descontrolado, provocando pequeños trombos con en los sistemas
vasculares a través del cuerpo. trombos libre en los sistemas vasculares son la causa de DIC. Hay más de producción de enzimas
fibrinolíticas que descomponen los coágulos formados, lo que lleva a un aumento en productos de degradación de fibrina. Todos los
factores de coagulación plaquetas y el fibrinógeno se consumen más rápido de lo que se sustituyen, resultando en sangrado
generalizada.
Las causas de la DIC:

■ Septicemia
■ neoplasia diseminada
■ Las complicaciones obstétricas
• separación prematura de la placenta
256
Causas de DIC ( Cont ...)

• productos de la concepción retenidos
• Feto muerto retenido
• embolia de líquido amniótico
■ Trauma
■ reacción a la transfusión hemolítica
■ Neonatal DIC secundaria a sepsis y necrotizante entrocollitis
■ hipoxia prolongada o hipovolemia incluyendo shock.
síntomas:
■ Las hemorragias graves de muchos sitios en el cuerpo.
■ La aparición súbita de sangre de hematomas
■ Rezuma desde el sitio venipunture.
■ trombos microvasculares pueden causar disfunción órganos:
• Dificultad respiratoria.
• Ictericia
• Coma
Investigación de laboratorio: DIC es caracterizado
por;
recuento de plaquetas reducida (thromboycytopenia)
tiempo propthrombin prolongada (PT) - (. normal de 10-14 seg) de 1,5 a 1,8 veces del control prolongado activa
tiempo de tromboplastina parcial aPTT -1,5 a 1,8 veces del control (normal 25-35 seg.)
tiempo de trombina prolongado - 1,5 veces de control (normales 10 ± LSEC) Disminución de la concentración de
fibrinógeno - <1,0 g / L sugestivo de DIC (normal 2-4 g / L) productos de degradación de fibrinógeno elevados (normal
<l0mg / L)
Administración:
El tratamiento inmediato y apropiado o eliminación de la enfermedad subyacente es esencial para prevenir la isquemia de tejidos y
shock.
■ Identificar y tratar o eliminar la causa de la DIC
■ Mantener el volumen sanguíneo
257
■ Si el paciente está anémico dar sangre entera fresca disponible, ya que contiene fibrinógeno y otros factores de
coagulación.
■ Mantener las funciones hemostáticas
• Si PT y aPTT se prolongan y el paciente está sangrando, dar FFP (15 a 20 ml / kg de peso corporal).
• Si el fibrinógeno es baja (< 80 mg / dl), crioprecipitado (de 6 a 12 unidades / kg de peso corporal.) Se puede dar.
• Si el recuento de plaquetas es inferior al 50 x 10 9 / L, y el paciente está sangrando, dar concentrados de plaquetas 4-6
unidades o una unidad de aféresis de plaquetas.
■ exanguinotransfusión puede ser una terapia eficaz para los bebés que sufren CID severa sintomática después de la asfixia del
nacimiento.
■ Intravenosa Heparina: La heparina inhibe la formación de fibrina y puede resultar en la concentración de fibrinógeno aumento
plasma pero que no inhiba el efecto de los productos de degradación de la fibrina. La heparina no es eficaz en gramo -
septicemia negativo y en algunos otros casos, la heparina está indicada en los casos de trombosis persistente. El papel de la
heparina es dudosa. En algunos casos la heparina puede ser útil anterior a la transfusión de FFP. El recomendado hace de
heparina para un adulto es una dosis de carga de 5000 unidades IV seguido de 1500 unidades / por hora durante 6-12 horas. Si
se produce el sangrado debido a la heparina dar sulfato de protamina (reversión de heparina).
La heparina está contraindicada en casos de cirugía o ya hemorragia activa.
Monitoreo de la caja se realiza mediante la estimación:
• El tiempo de protrombina (PT)

• Activado tiempo de tromboplastina parcial (aPTT)
• El nivel de fibrinógeno
• Hb y Hto.
IRRADIACIÓN
Desde hace varios años el uso de productos sanguíneos irradiados (glóbulos rojos y plaquetas primalary) ha aumentado de forma
espectacular. Durante mucho tiempo se ha sabido que la irradiación gamma inactiva los linfocitos en la sangre.
linfocitos viables en la sangre pueden ser responsables de la enfermedad de injerto contra huésped (GVHD) en el receptor-host. La
enfermedad resultante tiene consecuencias graves como fiebre, erupciones en la piel, hepatitis, diarrea, depresión de la médula ósea y la
infección, todos ellos pueden progresar a la mortalidad.
Los receptores en alto riesgo de esta enfermedad son aquellos que están inmunocomprometidos o severamente immunsuppressed,
como los pacientes con trasplante de médula ósea, los recién nacidos que han recibido una transfusión intrauterina y la
exanguinotransfusión, y las personas que están receptor de sangre de familiares de primer grado.
Las indicaciones para la transfusión de sangre irradiada indicaciones
generalmente aceptados:
• células de trasplante de médula ósea o madre de sangre periférica destinatarios
• Neonatos receptores de transfusiones intrauterinas
• receptores de transfusiones de intercambio neonatal
• Prematuros nacidos s nuevos (menos de 1.200 g)
• receptores inmunocomprometidos o inmunosuprimidos 258
La práctica de transfusión en la medicina clínica
• Receptores de sangre donantes relativa de primer grado

• Los receptores de plaquetas o plaquetas seleccionado HLA-se sabe que son HLA homocigótico
• Los pacientes con enfermedad de Hodgkin o linfoma no Hodgkin de
• Receptores de transfusiones de granulocitos
Las indicaciones que se examinan
• Los pacientes con tumores malignos hematológicos tales como leucemia aguda
• recién nacidos a término en la membrana extracorpórea oxi-generadores
• los receptores de trasplantes de órganos
• Los pacientes que recibieron plaquetas compatibles realizan pruebas cruzadas
No indicaciones de la empresa:
• Los pacientes con infección por VIH o SIDA
• La mayoría de los pacientes que reciben quimioterapia
• Los pacientes con anemia aplástica no reciben terapia inmunosupresora
• los recién nacidos a término sin otros riesgos Parcialmente cualquiera de cesio-137 ( 137 Cs) o cobalto-60 ( 60 Co) se
utiliza como la fuente de rayos gamma. La dosis habitual es de 25 Gray (Gy) a 35 Gy (1 Gray = 100 rads), Esta dosis inactiva 85
a 95% de los linfocitos en los componentes de la sangre sin ningún efecto adverso sobre otros componentes celulares (glóbulos
rojos, plaquetas y granulocitos) de la sangre,
La vida de almacenamiento de sangre irradiada (RBCs) es de 28 días desde la fecha de la irradiación o la fecha original de expiración de la
unidad, lo que ocurra primero. Los estudios han demostrado que la irradiación provoca una fuga modesta de potasio, reduciendo su supervivencia
después de la transfusión. Por lo tanto las células rojas de la sangre irradiados se dan en un tiempo de almacenamiento reducida. Algunos
médicos creen que las células rojas de la sangre irradiados para transfusión de intercambio deben lavarse para eliminar potasio, este paso no es
considerado como habitualmente necesario y debe realizarse sólo en los pacientes con problemas seleccionados - por ejemplo, los recién nacidos
que recibieron transfusión de intercambio con pre-existente hiperpotasemia o renal fracaso. Otras preocupaciones sobre el efecto de la irradiación
se mantienen teórico.
Los productos tales como FFP y crioprecipitados no requieren la irradiación, ya que no llevan linfocitos
viables.
La irradiación no se debe realizar en la médula ósea o células progenitoras de sangre periférica antes de su infusión.
TRANSFUSION EN cirugía a corazón abierto

La transfusión de sangre y sus componentes es una terapia de apoyo importante para los pacientes sometidos a cirugía a corazón
abierto requiere de derivación cardiopulmonar. La demanda de la sangre y sus componentes varía con cada paciente y depende de:
■ Los pacientes de estado hematológico perioperatoria, tales como anemia, trombocitopenia, o trastorno de la coagulación.
■ El cebado de la bomba de oxigenadores con electrolitos o sangre depende de la condición del paciente y la preferencia
personal de cirujanos y anestesista. Generalmente el cebado de bombas de oxigenadores ahora se hace con soluciones de
electrolitos (por ejemplo, lactato de Ringer o solución de Hartman). Sin embargo, puede ser necesario cebar la
bomba-oxigenador de sangre en circumctances excepcionales, por ejemplo en pacientes con insuficiencia renal sever o en
recién nacidos y niños pequeños.
259
Horario máximo quirúrgica Orden de Sangre [MSBOS] (Continuación ...)
vascular Cardíacos
resección de aneurisma aórtico 6
de derivación aórtica con injerto 4
bypass de la arteria coronaria, adulto 4 (2)
derivación de la arteria coronaria, los niños 2
Endarterectomía carotídea 2
de derivación femoral-poplítea con injerto 4
Urología
Vejiga, la resección transuretral T&S
nefrectomía radical 3
Prostatectomía perineal 2
Prostatectomía, transuretral T&S
trasplante renal 2 (2)
Obstétrico y Ginecología
Aborto, terapéutico T&S
Cesárea T&S
CORRIENTE CONTINUA T&S
Hystrectomy, abdominal / vaginal T&S
Hystrectomy, radical 3
Trabajo / entrega, sin complicaciones T&S
laparoscopia T&S
Ligadura de trompas T&S
Tuboplasty T&S
reparación vaginal 1
reparación de la fístula vesico-vaginal o
recto-vaginal- T&S
Nota: Las cifras pueden variar con la práctica institucional T & S = Tipo
de cribado y el anticuerpo
Las prácticas de transfusión GENERALES

Filtros para componentes de la sangre
En general dos tipos de filtros se utilizan para la transfusión de sangre: un filtro de 170-mm o un filtro de supresión leukocyte-. El filtro de 170-mm
elimina coágulos o restos celulares se desarrollan durante el almacenamiento de cualquiera de los productos de la sangre y se utiliza en equipos
de administración de rutina. Un filtro de la administración de sangre estándar debe ser utilizado para la transfusión de todos los componentes de la
sangre.
filtros de leucocitos-agotamiento están diseñados para eliminar los glóbulos blancos (GB). Este filtro está diseñado para
prevenir reacciones de transfusión hemolíticas febriles, para prevenir o retrasar el desarrollo de anticuerpos HLA, y para reducir el
riesgo de CMV. Filtración en el banco de sangre de decantación. en lugar de en la cabecera, es más fiable y mejor para la
reducción de leucocitos. La administración de los productos sanguíneos
Un médico o una enfermera calificada deben administrar sangre y productos sanguíneos.

261
2. Antes de iniciar la transfusión, verificación de la identidad del paciente debe hacerse al lado de la cama del paciente:
■ A partir de los registros de los pacientes

■ Preguntar al paciente a sí mismo / a sí misma el nombre, si el paciente está inconsciente identificar al paciente con pulsera.
3. Verificar los siguientes detalles en el informe de compatibilidad, y la etiqueta de compatibilidad unido al producto de la sangre:
■ Nombre del paciente

■ La admisión no.
■ Grupo sanguíneo
■ Donación no.
■ Recogida y fechas de expiración No
debería haber ninguna discrepancia
4. Compruebe la bolsa de sangre:

■ Cualquier signo de daño o fuga de la / su producto sanguíneo.
■ Recogida y fecha de caducidad en bolsa de sangre
■ La hemólisis en el plasma
■ Señal de contaminación, tales como el cambio de color en los glóbulos rojos, que a menudo se ven de color púrpura / negro
cuando están contaminados.
■ cualquier coágulo
Si el paquete de apariencia anormal de ninguna manera, la unidad no debe ser transfundida y el banco de sangre debe ser informado
inmediatamente.
Los límites de tiempo para la infusión
de sangre entera o los glóbulos rojos
1. La administración de células de la sangre o rojos enteros debe iniciarse dentro de los 30 minutos de la emisión del banco
de sangre. Si no se requiere para la transfusión debe ser devuelto inmediatamente al banco de sangre con razones.
Después de 30 minutos de la emisión desde el banco de sangre, no se toma de nuevo en el banco de sangre.
2. Transfusion debe ser completado dentro de las 4 horas de iniciar la transfusión. Estos límites de tiempo se han determinado
para los climas templados donde la temperatura en el edificio del hospital están generalmente entre 22 ° Cand 25 ° C. Si la
temperatura ambiente (ambiente) es muy alta, más corto 'veces fuera de la nevera' debe ser utilizado.
3. Cambiar el conjunto de administración de sangre después de 12 horas, si el paciente requiere soporte de transfusión en curso.
Los concentrados de plaquetas
1. El concentrado de plaquetas se debe administrar tan pronto como se hayan recibido.

2. Perfusión debe compelted con en unos 15-20 minutos.
3. Debe mantenerse a temperatura ambiente 22 ° C a 24 ° C. No ponga en el refrigerador.
4. Debe administrarse con la transfusión de conjunto con filtro
5. Las plaquetas una vez emitidos no se toman de nuevo en el banco de sangre.
El plasma fresco congelado
1. FFP debe infundirse tan pronto como sea posible después de la descongelación para evitar la pérdida de factores de coagulación lábiles o
plasma descongelado se almacena a 2-4 o C debe utilizarse dentro de las 12 horas. 262
2. En adultos, I unidad de plasma generalmente debe infundirse con en unos 15-20 minutos.
3. Thawed o plasma parcialmente descongelado no se toma de nuevo en el banco de sangre.
Desechable equipos de transfusión
1. Debe ser estéril y nunca deben ser reutilizados.
2. La sangre entera, los glóbulos rojos, concentrados de plaquetas, plasma y crioprecipitado se infunden aunque
conjunto de administración de sangre estéril que contiene 170-200 filtro de micra.
3. Utilizar cánulas de plástico flexible, si es posible, ya que son más seguros y preservar las venas.
4. filtros de leucocitos de ozono son caros, pero son eficaces en la reducción de las reacciones hemolíticas no fibrile
transfuion y el desarrollo de anticuerpos anti-leucocitos en pacientes iransfused múltiple.
El seguimiento de los pacientes transfundidos
Un médico o una enfermera calificada y entrenado debe suministrar sangre y hemoderivados

1. Para cada unidad de sangre transfundida, controlar al paciente en las siguientes etapas:
■ Antes de iniciar la transfusión
■ Tan pronto como se inicia la transfusión
■ Durante 15 minutos después de iniciar la transfusión
■ Al menos cada hora durante la transfusión
■ Al término de la transfusión
■ 4 horas después de completar la transfusión
2. En cada una de estas etapas, registre la siguiente información:
■ aspecto general del paciente
■ Temperatura
■ Presión sanguínea
■ La frecuencia respiratoria
■ Señal de cualquier reacción adversa - estos signos son fiebre con dolor de espalda (reacción hemolítica transfusional
aguda), anafilaxia, urticaria o prurito (urticaria reacción!). La insuficiencia cardíaca congestiva (volumen sobre carga) y la
fiebre solo (reacción a la transfusión no hemolítica febril).
3. Vigilar cuidadosamente al paciente durante los primeros 15 minutos de la transfusión para detectar cualquier temprana
signos y síntomas de efectos adversos. Los efectos adversos de la transfusión son por lo general la dosis realted. Por lo tanto, cada
tasas transfuion lentas se utilizan en la salida, se dan de 15 a 50 ml durante los primeros 15 minutos. Una vez que la transfusión está
progresando de manera satisfactoria, la velocidad de infusión se puede aumentar de manera que el producto se transfunde dentro de
un tiempo razonable dependiendo de la condición clínica del paciente.
4. Sólo isotónica (0,9 por ciento) de solución salina o 5% de albúmina se deben utilizar para diluir componentes de la sangre
o puede ser infundido con el sistema de transfusión de sangre utilizado para los productos de transfusión, porque otra
soluciones IV como soluciones de dextrosa tal como 5% dextrosa en agua destilada puede dañar los glóbulos rojos y causar hemólisis
soluciones o de calcio que contiene, como la solución de Ringer lactato iniciar la coagulación en el equipo de infusión. Además,
muchos fármacos provocan hemólisis si se inyecta a través del equipo de infusión de sangre.
El calentamiento de la sangre
no es necesario el calentamiento de rutina de sangre; la infusión de 2-4 unidades de sangre refrigrated durante varias horas no causa ningún
daño. Los pacientes que pueden necesitar beneficio de la sangre calentada incluyen: adultos que reciben múltiples transfuin a tasas mayores
de 50 ml / kg / hr
263
2. Los niños que reciben transfusiones en tasas mayores de 15 ml / kg / hr.

3. Los niños que recibieron transfusión de intercambio
4. Los pacientes que reciben transfusión rápida a través de un catéter venoso central
5. Los pacientes con crioaglutininas
La transfusión rápida y masiva de sangre fría (2-6 o C) está asociada con un mayor riesgo de fibrilación ventricular
y paro cardíaco.
procedimiento de calentamiento de sangre
■ Eso se lleva a nuestros utilizando dispositivos más calientes de sangre aprobados, tales como la línea caliente Nivel 1.
■ La sangre no se calienta por encima de 37 ° C. El calentamiento excesivo puede cuase hemólisis y poner en peligro al paciente. Si se
utilizan calentadores de sangre que deben ser probados antes de su uso para asegurarse de que los reguladores de temperatura están
funcionando correctamente. La temperatura de la sangre también debe ser monitoreada.
■ No sumerja unidad entera de los glóbulos rojos o en un baño de agua, o ejecutar la sangre a través de un tubo extendido o bobina
en baño de agua.
Dispositivos de presión para infusión rápida
dispositivos de presión o bombas son algunas veces usados para alcanzar velocidades de flujo muy rápidos en rápida transfusión:
1. Se recomienda Transfusion con aguja de calibre 18 o cánula

2. Se requiere un dispositivo de una bolsa de presión con un esfigmomanómetro en situación de emergencia
cuando sangre tiene que ser transfundidos rápidamente (aproximadamente 5 minutos por unidad). La bolsa debe ser inflado a
aproximadamente 200 mm Hg hasta que el flujo de sangre a través de la cámara de goteo es continuo. Presión de 300 mm Hg puede
hacer que las células rojas para hemolizan y las costuras de bolsas de sangre para dividir.
Las reacciones de transfusión

Cualquier efecto adverso causado por la transfusión puede ser considerada como una reacción a la transfusión. Algunos son leves, otros están
en peligro la vida. Todas las reacciones deben ser documentadas e informadas. Directrices para el reconocimiento de las reacciones
transfusionales son:
Categoría 1 - de reacción suaves
Firmar Los síntomas Causa posible

localizada Comezón hipersensibilidad
- Urticaria (templado)
- erupciones
Categoría 2 - moderadamente grave
Firmar Los síntomas Causa posible

corriendo Ansiedad Hipersensibilidad (moderadamente severa)
Urticaria El prurito (picazón) Febril no hemolítica

Rigor palpitaciones reations transfusión:
Fiebre disnea leve - Anticuerpos para mientras que las células de la sangre,
Inquietud Dolor de cabeza plaquetas.
Taquicardia - Los anticuerpos frente a proteínas, incluyendo IgA
Posible contaminación con pirógenos y / o bacterias.
264
Categoría 3 - amenaza vital sesión
Los síntomas Causa posible
rigores Ansiedad hemólisis intravascular aguda

Fiebre Dolor de pecho La contaminación bacteriana y
Inquietud El dolor cerca del sitio de la infusión shock séptico.
- Hipotensión (caída de Respiratorio La sobrecarga de líquidos
> 20% en la presión arterial sistólica) angustia / dificultad Anafilaxia.
Taquicardia (aumento de de aliento. Transfusión - asociado
> ,cardíaca)
20% de la frecuencia Lomo / dolor de espalda La lesión pulmonar.
hemoglobinuria Dolor de cabeza
(Orina de color rojo) Disnea
> Inexplicable sangrado (DIC) Nota: Si se produce una reacción de transfusión aguda, comprobar primero las etiquetas de paquete de
sangre y el paciente de
identidad. Si hay alguna discrepancia, detener la transfusión inmediatamente y consultar el banco de sangre.
En un paciente inconsciente o anestesiado, la hipotensión y la hemorragia no controlada pueden ser los únicos síntomas de una
transfusión incompatible.
En un paciente consciente experimentar una reacción de transfusión hemolítica severa, signos y síntomas pueden aparecer
rápidamente - a pocos minutos de la infusión de sólo 5-10 ml de sangre. La observación detallada en el inicio de la infusión de
cada unidad es esencial.
Gestión de Adversos Categoría reacciones transfusionales I:
Leve
1. Slow la transfusión.
2. Administrar IM antihistamínico (por ejemplo, clorfeniramina 0,01 mg / kg o equivalente)
3. Si no hay mejoría clínica dentro de 30 minutos o si los signos y los síntomas empeoran, trate como Categoría 2.
Categoría 2: moderadamente grave.
1. Detener la transfusión, vuelva a colocar el conjunto de dar y mantener la línea IV abierta con solución salina normal.
2. Notificar al médico responsable del paciente y banco de sangre.

3. Enviar unidad de sangre con dar set, muestras de sangre fresca (1 coagulada y 1 en EDTA) de la vena sitio de infusión opuesto con
forma de reacción apropiada al banco de sangre para las investigaciones.
4. Administrar IM antihistamínico (por ejemplo, clorfeniramina 0,01 mg / kg o equivalente) y oral o
antipirético rectal (. ej paracetamole 10 gm / kg; 500 mg - lg en adultos). Evitar la aspirina en pacientes con
trombocitopenia.
5. Dar corticosteroides y broncodilatadores IV si hay características anafilactoides (por ejemplo.
broneospasm. estridor).
6. Recoger la orina para los próximos 24 hrs para evidencia de hemólisis y enviado al laboratorio.
7. En imporvement clínica, reinicie la transfusión lentamente con la nueva unidad de sangre si es necesario y observar cuidadosamente.
265
8. Si no hay mejoría clínica con 15 en mintes o si los signos y los síntomas empeoran, trate como Categoría 3.
Categoría: 3 que amenaza la vida
1. Detener la transfusión, sustituir la entrega -set y mantener abierta la línea IV con solución salina normal.
2. Infundir solución salina normal (inicialmente 20-30 ml / kg) para mantener la BP sistólica.
3. Mantener las vías respiratorias y dar alto flujo de oxígeno por máscara.
4. Dar la adrenalina (como 1: 1000 de solución) 0,01 mg / kg de peso corporal mediante inyección intramuscular en
reacción alérgica grave.
5. Dar IV corticosteroides y broncodilatadores si hay características anafilactoides (por ejemplo,
broncoespasmo, estridor)
6. Dar diurético: por ejemplo, furosemida 1 mg / kg IV o equivalente (inicialmente 40 iv mgm, hasta 250 mgm
más de 4 horas)
7. Notificar al médico responsable del paciente y al banco de sangre.

8. Enviar unidad de sangre con-set dar, muestras de sangre fresca (1 coagulada y 1 en EDTA) forma vena opuesta al sitio de infusión,
con la forma de reacción apropiada al banco de sangre para su investigación.
9. Disponibilidad de una muestra de orina fresca visualmente en busca de signos de hemoglobinuria (orina de color rosa roja ro).
10. Comience en orina de 24 horas y el gráfico equilibrio de líquidos y registrar todas las entradas y salidas.
Mantener el equilibrio de líquidos.
11. Valorar la presencia de sangrado sitios de forma punción o heridas. Si hay evidencia clínica o de laboratorio
de DIC, dar plaquetas (adultos 5-6 unidades) y ya sea crioprecipitado (adultos de 12 unidades) o plasma fresco congelado (para
adultos: 3 unidades)
12. Revalorar. Si la hipotensión persiste:

■ Dar más solución salina 20-30 ml / kg.
■ Dar inotrópico (dopamina, la infusión IV, 1 gm / kg / min.)
13. Si la producción de orina caída o evidencia de laboratorio de fialure renal aguda (aumento de K +, urea, creatinina):
■ Mantener el equilibrio de líquidos con precisión

■ Dar más furosemida.
■ Considere la infusión de dopamina.
■ Buscar ayuda experta: el paciente puede necesitar diálisis renal.
13. Si se sospecha bacteriemia (escalofríos, fiebre, colapso, no hay evidencia de una reacción hemolítica),
iniciar un amplio espectro de antibióticos IV para cubrir Pseudomonas gram positivos y organismos.
266
17
autoinmune
Anemia
hemolítica
anemia hemolítica inmune es una condición en la que la vida útil de los glóbulos rojos se acorta debido a la presencia de un anticuerpo
humoral en la circulación que es reactivo con un antígeno en la célula roja. En términos generales la anemia hemolítica inmune se
pueden clasificar en:
1) aloinmune
2) autoinmune
Este capítulo se centra en la anemia hemolítica autoinmune.
La anemia hemolítica autoinmune (AIHA)

Normalmente una persona no forma anticuerpos contra 'self es decir, contra las propias células de uno. En la anemia hemolítica
autoinmune debido a algún fallo del mecanismo regulación del sistema inmune del individuo produce anticuerpos humorales reactivos
con antígenos en las propias células rojas de uno. Estos se denominan autoanticuerpos y pueden ser provocados por la prueba de
antiglobulina directa positiva (DAT). En AIHA se acorta la supervivencia de glóbulos rojos. Dependiendo del equilibrio entre la gravedad
de la destrucción de los glóbulos rojos y la capacidad del individuo para aumentar la producción de glóbulos rojos, el paciente puede
tener una anemia leve o grave o incluso puede ser no anémicos. Los glóbulos rojos se recubren con anticuerpo IgG con o sin anticuerpos
anti-complemento. macrófagos esplénicos y en menor medida las células de Kupfer del hígado tienen receptores para el fragmento Fc de
IgG y de C3b / C3bi y C4b. células La IgG-recubierto junto con C3b / C3bi actuar como opsoninas y aumentar la fagocitosis, que puede
ser completa o parcial. Cuando parcial que causa la pérdida de la membrana celular y por lo tanto esferocitosis. Esferocitos son células
rígidas y carecen de deformibility. Ellos quedan atrapados y fagocitados en los sinusoides del bazo.
267
En el tipo de calentamiento anticuerpo de la anemia hemolítica hemólisis directa mediada por el complemento es raro. En AIHA-en frío de
reactivo, sin embargo, la hemólisis directa mediada por el complemento puede ocurrir que conduce a intravascular hemólisis - hemoglobinemia
y hemoglobinuria.
Clasificación: (Tabla: 17-1)

Los AIHAs se clasifican en dos grupos principales, dependiendo de la temperatura óptima de reactividad. Acerca de 48-70% de los casos de
AIHA son aquellos que reaccionan a temperatura caliente (37 ° C) y son llamados caliente AIHA (WAIHA); mientras que aproximadamente el
16-32% de los casos de AIHA reaccionar a temperatura fría (4-24 ° C) y se denomina como síndrome de frío-aglutinina (CAS). De tipo mixto
anemia hemolítica autoinmune, que tiene las características de ambos WAIHA y CAS es poco frecuente (7-8%). La frecuencia de la
hemoglobinuria paroxística al frío es de aproximadamente 2% y el de AIHA inducida por medicamentos es de aproximadamente 12-18%. AIHA
puede ser primaria o idiopática y secundaria. Aproximadamente la mitad de los casos son primarios y otros secundaria.
Tabla: 17-1 incidencia de diversos tipos de AIHA

Tipo de AIHA Incidencia (%)
anemia hemolítica autoinmune Warm 48-70

síndrome de crioaglutininas 16 a 32
De tipo mixto anemia hemolítica autoinmune 7a8
hemoglobinuria fría paroxística Rara en adultos en
niños de 2
Inducido por drogas 12 a 18
Descubrimientos de laboratorio:
En la anemia hemolítica se acelera la hemólisis (es decir, la duración de la vida de las células rojas se acorta). La hemólisis puede ser
intravascular o extravascular.
en AIHA hemólisis es predominantemente extravascular. hemólisis acelerada se caracteriza por la presencia de
reticulocitosis, esferocitosis, hiperbilirrubinemia no conjugada, elevado de lactato deshidrogenasa en suero (LDH), el agotamiento
de la haptoglobina en suero y la hiperplasia eritroide.
En hemólisis intravascular, hemoglobinemia, pueden producirse hemoglobinuria y el agotamiento de hemopexina suero.
prueba de antiglobulina directa (PAD): (Tabla: 17-2)

DAT es positivo en prácticamente todos los pacientes con AHA. Limitaciones de la prueba deben, sin embargo, ser entendidos:
1. La incidencia de la DAT positivo ha sido informado de que 1 de cada 10.000 en la sangre saludable
donantes sin evidencia de hemólisis acelerada; mientras que en los pacientes hospitalizados la incidencia de DAT
positivo es de 0,3 a 1% con el reactivo de antiglobulina IgG y 1,5% con poliespecífica reactivo ( 'amplio espectro').
La mayor frecuencia de reacción con el reactivo poliespecífica es probablemente debido a la unión de anticuerpos
anti-complemento de las células rojas. Por lo tanto, un DAT positivo es diagnóstico de AIHA sólo si hay evidencia
de hemólisis acelerada.
Cuando la DAT es positiva con el reactivo poliespecífico, reactivos monoespecíficos, tales como IgG. anti-complemento, y rara
vez IgA o IgM se utilizan para determinar la naturaleza de autoanticuerpos. 268
La anemia hemolítica autoinmune
2. En raras ocasiones la DAT puede ser negativo en AIHA. técnicas más sensibles han demostrado que la
los glóbulos rojos se recubren con un menor número de anticuerpos, que están por debajo del límite detectable de la prueba,
pero son capaces de causar hemólisis acelerada.
3. Cuando los glóbulos rojos están fuertemente recubiertas con autoanticuerpos la misma puede eluir en plasma.
La mayoría de estos autoanticuerpos son contra antígenos de células rojas comunes y dar una prueba positiva indirecto de
antiglobulina (prueba de Coombs indirecto) con células del donante durante la prueba de compatibilidad.
4. Autoanticuerpos se adsorbe en los glóbulos rojos y puede estar en pequeña cantidad en el suero,
mientras aloanticuerpos, puede o no puede ser adsorbido en los glóbulos rojos, pero siempre presente en el suero, por lo tanto:
• DAT es más fuertemente positiva de lo que AT si autoanticuerpos está presente.
• IAT es más fuertemente positiva que DAT si está presente aloanticuerpos
Tabla 17- 2 Características de DAT en IHA inducida por fármacos AIHA y
IgG C3 Serum Eluir especificidad
WAIHA
24 a 76% + + IgG tibia IgG, y reactiva Parcialmente anti-Rh, otros

20 al 66% +0 autoanticuerpos con normalidad incluyen anti - LW, U,
Células wr segundo, en una, Kidd,
7 a 13% 0 + Kell, Ge.

crioaglutininas 0 + autoanticuerpos IgM No reactivo Sobre todo anti-I
puede ser un ti-i-Pr
Rara vez contra
De tipo mixto + + IgG y IgM IgG y reactiva poco claro, pueden ser anti-I, -i
AIHA autoanticuerpos o un otro crioaglutininas
hemoglobinuria fría 0 + IgGbiphasic hemolisina No reactivo Anti-P
paroxística (Donath- Landsteiner
anticuerpo), anticuerpo
reacciona en frío
y la hemólisis se produce, a
37 ° C en presencia de
complemento
Inducida por + + autoanticuerpos IgG No reactivo a menudo relacionada Rh
medicamentos AIHA
Naturaleza de autoanticuerpos:
Mayormente los autoanticuerpos formados son contra los antígenos de alta incidencia y por lo tanto, reaccionan con las células rojas de donantes
más aleatoria sangre que causa problemas en la selección de una muestra de sangre adecuado para transfusión. La capa de autoanticuerpos
glóbulos rojos del paciente y también están presentes en el suero. Por consiguiente, la interpretación de la tipificación celular, pruebas de
compatibilidad, detección de anticuerpos y "identificación anticuerpo puede ser difícil por los procedimientos de rutina.
269
2. En raras ocasiones la DAT puede ser negativo en AIHA. técnicas más sensibles han demostrado que la
los glóbulos rojos se recubren con un menor número de anticuerpos, que están por debajo del límite detectable de la prueba,
pero son capaces de causar hemólisis acelerada.
3. Cuando los glóbulos rojos están fuertemente recubiertas con autoanticuerpos la misma puede eluir en plasma.
La mayoría de estos autoanticuerpos son contra antígenos de células rojas comunes y dar una prueba positiva indirecto de
antiglobulina (prueba de Coombs indirecto) con células del donante durante la prueba de compatibilidad.
4. Autoanticuerpos se adsorbe en los glóbulos rojos y puede estar en pequeña cantidad en el suero,
mientras aloanticuerpos, puede o no puede ser adsorbido en los glóbulos rojos, pero siempre presente en el suero, por lo tanto:
• DAT es más fuertemente positiva que IAT si autoanticuerpos está presente.
• IAT es más fuertemente positiva que DAT si está presente aloanticuerpos
Tabla 17- 2 Características de DAT en AIHA y alfombra-inducida por medicamentos IHA
IgG C3 Serum Eluir especificidad
WAIHA
24 a 76% + + IgG tibia IgG, y reactiva Parcialmente anti-Rh, otros
20 al 66% + 0 autoanticuerpos con las células incluyen anti - LW, U, Wr segundo, en

normales una, Kidd,
7 a 13% 0 + Kell, Ge.
crioaglutininas 0 + IgMautoantibodies No reactivo Sobre todo anti-i puede
ser anti-i-Pr Rara vez
contra
De tipo mixto + + IgG y IgM IgG y reactiva poco claro, pueden ser anti-I, -i
AIHA autoanticuerpos o un otro crioaglutininas
hemoglobinuria fría 0 + IgGbiphasic hemolisina No reactivo Anti-P
paroxística (anticuerpo Landsteiner
Donath-), anticuerpo reacciona
en frío y la hemólisis se produce,
a 37 ° C en presencia de
complemento
Inducido por drogas + + autoanticuerpos IgG No reactivo A menudo relacionados con Rh
AIHA
Naturaleza de autoanticuerpos:
Mayormente autoanticuerpos RHE formados son contra los antígenos de alta incidencia y por lo tanto, reaccionan con las células rojas de donantes
más aleatoria sangre que causa problemas en la selección de una muestra de sangre adecuado para transfusión. La capa de autoanticuerpos
glóbulos rojos del paciente y también están presentes en el suero. Por consiguiente, la interpretación de la tipificación celular, pruebas de
compatibilidad, la detección de anticuerpos e identificación de anticuerpos puede ser difícil por los procedimientos de rutina.
269
2. Si el resultado es D-negativo, las pruebas de D parcial o débil no es necesario ya que el paciente puede recibir con seguridad
compatibles con la sangre ABO-D negativo.
El pulsar para otros antígenos de las células de color rojo:
Esto está más allá del alcance de este libro. centros de transfusión interesados en el desarrollo de estas técnicas deben referirse a
la AABB manuales técnicos y Práctica Clínica de Medicina de Transfusión, Tercera Edición, por Lawrence D. Petz, Scott N.
Swisher, Steven Kleinman. Richard K. Spence y Ronauld
G. Strauss. Churchill Livinstone, Nueva York, 1 996.
Estudios de suero:
Detección e identificación de autoanticuerpos y / o aloanticuerpos en WAIHA:

En el caso de que se-necesita terapia de transfusión o se necesita autoanticuerpos y / o aloanticuerpos identificación en un
paciente con WAIHA, evaluación adecuada de suero del paciente para la presencia y tipo de anticuerpo es esencial. Pueden surgir
dificultades debido a las siguientes posibilidades:
• Además de autoanticuerpos el paciente puede haber formado aloanticuerpos de transfusión o embarazo anterior. Una
DAT positivo puede resultar de recubrimiento de los glóbulos rojos por un autoanticuerpo o un aloanticuerpo.
• Suero puede contener autoanticuerpos por debajo del límite detectable. La cantidad formada puede ser pequeño y se
absorbe a los eritrocitos in vitro.
• Clínicamente significativos aloanticuerpos pueden estar enmascarados por el autoanticuerpo. Una aproximación a la evaluación
de suero del paciente para la presencia de tipo de anticuerpo se da en la Figura 17.1A / B.
1. Si la detección de anticuerpos es negativa, no se indican estudios adicionales con el suero del paciente.
2. Si la detección de anticuerpos es positivo, estudios de identificación de anticuerpos para determinar la presencia de

autoanticuerpos y / o aloanticuerpos se realiza. El curso de acción más apropiado es llevar a cabo estudios de
adsorción.
3. Si el paciente no ha sido transfundidos con en 2-3 meses y si el volumen de los glóbulos rojos del paciente es suficiente, el
cribado de anticuerpos después de autoadsorption es el método de elección. Fig 17-1 / A. (una) Inicialmente autoanticuerpos
unido a las células rojas se eliminan de los pacientes glóbulos rojos en
a fin de optimizar el procedimiento autoadsorption. (segundo) Diferentes métodos para eliminar los aoutoantibodies son (i)
de elución a 56 ° C con la enzima
células pretratadas (ii) Zzap (ditiotreitol y papaína de cisteína-activado) (iii) difosfato de cloroquina. Para más detalles
véase el capítulo sobre la preparación de soluciones y métodos especiales. Es eficaz para pretratar dos alícuotas de las
células del paciente y autoadsorb el suero dos veces. (do) Siguiendo autoadsorption una detección de anticuerpos se
debe realizar con el adsorbida
suero, si no se observa reactividad, unidades de sangre debe ser seleccionado y pruebas pretransfusional está hecho. Si no se
observa reactividad en la detección de anticuerpos, identificación de anticuerpos se realiza. Si se detecta de aloanticuerpos,
unidades negativas de antígeno se seleccionan y pruebas pretransfusional se hace para transfusión.
4. Si el paciente ha sido transfundidos con en 2-3 meses o el volumen suficiente de la

271
las células del paciente no está disponible, la adsorción alogénico se hace para determinar si aloanticuerpos significativos
están presentes con autoanticuerpos calientes Fig. 17.1 / B.
Fig. 17.1 / Screening un anticuerpo después de Autoadsorption
Fig. 17.1 / Screening B de anticuerpos después de alogénico Adsorción
Detección de anticuerpos después de trasplante alogénico de adsorción (figura 17.1 / B)
13 Determinar el fenotipo del paciente para anigens comunes (Rh, Kell, Duffy. Kidd, MNSs). Absorber
anticuerpo ción con células alogénicas emparejaron con células del paciente. 252
, Si es negativo se necesitan estudios de detección de anticuerpos pies de repetición no hay más estudios. Seleccione las unidades
de la sangre y hacer pruebas de pre-transfusión. Si no se observa reactividad en la detección de anticuerpos, identificación de
anticuerpos se realiza. Si se detecta anticuerpo, unidades negativas de antígeno se seleccionan y pruebas pretransfusional se hace.
Nota: Para la detección e identificación de anticuerpos véase el Capítulo 9. Tratamiento:
• Transfusión en pacientes con WAIHA se evita siempre que sea posible ya que la mayoría de los pacientes pueden ser
controlados con éxito sin células transfusión de rojo, con prednisona, 60 mg por día administrados en tres dosis durante 10-14
días. La mayoría de los pacientes tendrán una marcada mejoría, con disminución de la hemólisis y la estabilización seguida por
aumento de hematocrito. A continuación, la prednisona se reduce gradualmente.
• La esplenectomía se considera cuando el paciente no responde al tratamiento con prednisona y posteriormente prednisona
dosis de más de 15-20 mg / día también se utilizan utilizado en mantener la remisión.
• Blood transfusión transfusión de glóbulos rojos es dada para aumentar la capacidad de transporte de oxígeno de la sangre.
Transfusión se reserva para los pacientes con enfermedad cardíaca subyacente, isquemia cerebrovascular o anemia que
amenaza la vida.
Los glóbulos rojos más compatibles deben administrarse y el paciente se vigila de cerca para cualquier signo de reacción a la
transfusión adverso. Los glóbulos rojos transfundidos suelen ser destruidos tan rápidamente como propios glóbulos rojos del paciente,
a menos que el paciente ha respondido al tratamiento con prednisona.
AIRA debida a autoanticuerpos reactivos en frío:
AIHA debido a autoanticuerpos en frío de reactivo son de dos tipos:
1. Mediada por aglutininas frías:

a. enfermedad por crioaglutininas idiopática o primaria (trastorno crónico)
segundo. Secondary anemia hemolítica por crioaglutininas
yo. Postinfecciosa por ejemplo, Mycoplasma pneumoniae y mononucleosis infecciosa

(Trastorno transitorio)
ii. trastorno linfoproliferativo maligno
2. Mediada por hemolisinas frías de tipo Donath-Landsteiner
a. Idiopática o primaria hemoglobinuria paroxística fría (muy raro)

segundo. Secundario
yo. anemia hemolítica frecuente en los niños debido a las infecciones virales
ii. La sífilis congénita o terciario
Patogenesia:
Mos vendidos anticuerpos no aglutinan RBC por encima de 30 ° C y son inofensivos; más alto es el ampitude térmica de su
mayor acción es el grado de patogenicidad (Tabla 17.3).
273
Tabla 17.3 Características de los autoanticuerpos en frío reactiva benignos y patológicos:
Parámetro autoanticuerpos benignos autoanticuerpos patológicos
amplitud térmica 4 o C (reacción raramente débil hasta amplitud de amplio 30 - 37 ° C

24 ° C)
título <16 (a veces hasta 32) > 1000at4 ° CinCAS. En de tipo

mixto AIHA, el título a 4 ° C
puede ser <64
Reacción mejorada por Ninguna Albúmina
prueba de antiglobulina directa Neg. o débil + ve con Positivo

poliespecıfico AHG
clonalidad policlonal Monoclonal cuando idiopática, cuando

policlonal secundaria a la infección
clase de inmunoglobulina IgM IgM y IgA o IgG raramente
la especificidad del Anti-me Anti-I, raramente anti-i, anti-IH o

anticuerpo común anti-Pr
La clase de inmunoglobulina de autoanticuerpo frío es principalmente IgM, se han reportado sin embargo IgA e IgG autoanibodies
fríos. El autoanticuerpo causante de la PCH es siempre IgG y se caracteriza por hemólisis bifásica o bitérmico. Autoanticuerpos une
a las células rojas a baja temperatura en las extremidades y, a continuación provoca hemólisis a través de la activación del
complemento como la sangre se calienta a 37 ° C, y provoca hemólisis y hemogloninuria.
autoanticuerpos benignos están presentes sobre todo en individuos sanos y son clínicamente silente. autoanticuerpos patológicos están
asociados anemia hemolítica autoinmune.
Los problemas encontrados en los procedimientos de los bancos de sangre debido a autoanticuerpos reactivos con el frío: la
tipificación ABO:
El autoaglutinación es visible en el examen a simple vista de la muestra de sangre recogidas en el tubo de EDTA a TA. Es más evidente en el
enfriamiento a 4 ° C. Autoaglutinación desaparece cuando las células rojas se calentaron a 37 ° C. Autoaglutinación puede ser visto en las
películas de sangre periférica también. Los glóbulos rojos que están fuertemente recubiertas con autoanticuerpos fríos aglutinan
espontáneamente dar resultados falsos positivos con anti-A y anti-B y anti-D sueros. Estas discrepancias se pueden eliminar con los glóbulos
rojos del paciente se lavaron dos veces con solución salina normal calentada a 37 ° C o mediante la recopilación y mantenimiento de muestra
de sangre del paciente a 37 ° C 274
Ejemplo: Paciente grupo sanguíneo% O
Agrupación hacia adelante:
Aglutinación con
Anti-A Anti-B
las células del paciente en el suero propia + +
Las células lavadas con solución 0 0

salina se calentaron a 37 ° C
agrupación inversa:
A, Células Las células B O Células células autólogas

el suero del paciente + + + +
suero precalentado a 37 ° C + + 0 0
Si la elución de los anticuerpos no se produce por las células de lavado con solución salina se calienta a 37 ° C, lavado con solución salina
se calienta a 45 ° C puede ser un éxito. A veces puede ser necesario elución con reactivo de tiol. El calentamiento del suero o auto
absorción resuelve discrepancias de la agrupación de suero.
Rh (D) escribiendo:
Rh (D) escribiendo en general dio reacciones positivas falsas cuando mejorada anti-D (alto contenido en proteínas) los reactivos estaban en uso. El
control de Rh puede ser positivo, lo que hace la prueba no válida. La mayoría de los reactivos en estos días son monoclonal anti-D (baja en
proteínas), que normalmente dan resultados válidos; un resultado negativo con cualquiera de los reactivos ABO sirve como control para la
tipificación D. Los glóbulos rojos se lavaron con solución salina caliente se utilizan si una discrepancia en ABO Se observa a escribir. Si el lavado de
las células dan resultados insatisfactorios, reactivos de tiol se utilizan para eliminar los autoanticuerpos.
aglutininas frías activan el complemento in vitro que se adhiere a las células rojas. Cuando prueba para D débil se lleva a
cabo usando un reactivo de antiglobulina poliespecífica se obtiene una reacción positiva. El Para que no es negativo con
monoespecífico anti-IgG o cuando la muestra se recoge en EDTA, que interfiere con la unión in vitro del complemento.
Problemas similares se producen con las pruebas de otros fenotipos (por ejemplo, K, Fy una) donde se utiliza el reactivo de antiglobulina. Esto
también se resuelve mediante el uso de anti-IgG reactivo antiglobulina o muestra EDTA recogido.
prueba de antiglobulina directa:
Es positivo cuando las células se obtienen a partir de sangre coagulada o se utiliza un reactivo poliespecífica o anti-C3.
Este problema puede ser resuelto por:
• Lavar las células con solución salina normal calentada a 37 ° C.
• Al recoger la muestra en EDTA, que interfiere de unión del complemento in vitro.
• Usando-mono IgG específica AHGS
• Si las células se lavaron con solución salina se calentaron a 37 ° C da resultado negativo, reactivos de tiol se utilizan para eliminar
autoantobodies.
275
Transfusion Medicine t Manual técnicaLista
Estudios de suero:
• A diferencia de autoanticuerpos calientes, fríos autoanticuerpos casi siempre son demostrables en el suero.
• Los autoanticuerpos en CAS comúnmente incluyen anti-I, seguido de anti-i y anti-IH.

• En PCH,, I, I y Pr También se ha informado autoanticuerpos frente a P. Al igual que con autoanticuerpos cálidos, los
autoanticuerpos fríos pueden presentar problemas serológicos si la terapia de transfusión se indica: Las razones son:
• autoanticuerpos fríos pueden enmascarar la presencia de aloanticuerpos clínicamente significativos.
• De autoanticuerpos es capaz de activar el complemento in vitro.
• suero antiglobulina que contiene tanto anti-IgG y anti-C3 puede dar resultado falso. Los problemas pueden
ser resueltos por:
• Precalentamiento de suero y células rojas a 37 ° C, seguido con un procedimiento de antiglobulina que evita temperatura por
debajo de 37 ° C, puede aliviar estos problemas.
• En otros pacientes se necesitan procedimientos de adsorción antes de los estudios de suero.
• El uso de suero globulina anti-IgG humana.
Los estudios de adsorción:
estudios de adsorción con células autólogas y alogénicas se llevan a cabo en la misma forma que en WIHA.
Autólogo de adsorción -
• Si el paciente no ha sido transfundido dentro de 2-3 meses, autoadsorption es el método de elección.
• La adsorción a 4 ° C es mejor si se utilizan los glóbulos rojos del paciente pretratadas con enzima, pero ciertos autoanticuerpos,
por ejemplo, anti-P son desnaturalizados, y no puede ser adsorbido. En tales casos, la adsorción se repite con las células no
tratadas.
• Después de la adsorción. estudios de detección de anticuerpos se realizan para evaluar la presencia de cualquier aloanticuerpos.
• Si las pruebas de detección de anticuerpos son positivos, se deben realizar estudios de identificación de anticuerpos.
• Las pruebas con suero autoadsorbed también pueden resolver ABO agrupación inversa.
Alogénico de adsorción -
• Si el paciente ha sido dado transfusión recientemente con en 2-3 meses, adsorción alogénico puede ser hecho.
• Las células alogénicas se deben seleccionar como se describe en la sección de autoanticuerpos calientes
• células tratadas con enzimas facilitan el proceso.

• Después de la adsorción, se deben realizar estudios de detección de anticuerpos.
• Seleccione la sangre de antígeno negativo para las pruebas previas a la transfusión y la transfusión.
Tratamiento
• En general, la anemia es leve y se le da un tratamiento sintomático.

• Se aconseja a los pacientes a mantenerse calientes, especialmente las extremidades. 276
• se da ácido fólico 1 mg / día.

• En los pacientes con anemia grave (a) se da clorambucil o ciclofosfamida. Este resultado en el título de la
disminución de frío
aglutininas y menos hemólisis. (segundo) Prednisona y la esplenectomía en general no es eficaz con algunas
excepciones.
La prednisona es beneficiosa en pacientes con títulos bajos de aglutininas frías IgM que tienen altas amplitudes
térmicas y en pacientes con IgG aglutinina fría. En la esplenectomía grupo más adelante también es eficaz.
• Transfusion: (a) Rara vez se requiere. Los pacientes cuyos cardiovascular o cerebro-vascular sistemas se
significativamente comprometida por anemia pueden requerir transfusión de sangre. (segundo) ells rojos
lavados se dan para evitar la transfusión de componentes del complemento.
Paroxística Hemoglobinuria fría (PCH):

• PCH se asoció con la sífilis, pero debido a un tratamiento eficaz de la sífilis se ha marcado descenso de la
incidencia de la PCH.
• Ahora es un trastorno poco común y generalmente se presenta en niños con infecciones virales.
• hemólisis intravascular aguda se produce en la exposición al frío y se caracteriza por la aparición de fiebre, escalofríos,
malestar, calambres abdominales y el dolor de espalda. Todos los signos de hemólisis intravascular son evidentes, junto con
hemoglobinuria, hemoglobinemia, bilirrubinemia dependiendo de la gravedad y la frecuencia de los ataques y el agotamiento
de los niveles de haptoglobina sérica.
• El diagnóstico se confirma mediante la prueba positiva Donath-Landsteiner (DL). El anticuerpo DL es un anticuerpo IgG.
Recoger dos sepcimens sangre del paciente, un espécimen, el control, se mantiene a 37 ° C durante 60 minutos después de
la recogida. La segunda muestra se colled a 4 ° C durante 30 minutos y después se incubó a 37 ° C durante 30 mintes
adicionales. Ambas muestras se centrifugan a continuación y o dedos para la hemólisis. En una prueba de
Donath-Landsteiner positivo, la hemólisis se ve en la muestra colocada a 4 ° C y luego a 37 ° C, mientras que no se observa
hemólisis en la muestra de control.
• DAT es positivo para C3d.
Tratamiento
• PCH es generalmente una enfermedad autolimitante, con una recuperación en pocos días o una semana.
• Los pacientes reciben tratamiento sintomático.

• Los pacientes se mantienen calientes.
• Prednisona y la esplenectomía no son eficaces.

• La sífilis deben ser excluidos.
Provocada por medicamentos anemias hemolíticas inmunes
autoanticuerpos inmunitaria inducida por medicamentos pueden resultar en disminución de la supervivencia de glóbulos rojos y pueden
complicar las pruebas de pre-transfusión.
Se han descrito tres mecanismos, que causan las drogas inducida por IHA: (Tabla 17-4)
• Drogas o adsorción hapteno
• complejo inmune entre el fármaco, membrana de células rojas y el anticuerpo
• La inducción de autoanticuerpos
277
Un cuarto mecanismo de adsorción no inmunológica de las proteínas a las células rojas (modificación de la membrana) puede
producir DAT positivo, pero no causa anemia hemolítica por ejemplo, con cefalotina (Keflin).
Tabla: 17,4 hemolítica inducida por fármacos Anemia
La proteína Detección de
Mecanismo desertado por anticuerpos Características clínicas

DAT
Hapteno o adsorción IgG Ab reacciona con drogas grado moderado de hemólisis generalmente
del fármaco (por C3d * - glóbulos rojos recubiertos extravascular
ejemplo, penicilina)
tipo complejo inmune (células de c3d Ab + droga + sensibilización de aparición brusca de la hemólisis
Drogas-anticuerpo objetivo células rojas, nación aggluti- o intravascular grave, insuficiencia
complejo) hemólisis de glóbulos rojos. Ab es renal
por ejemplo, quinina, quinidina IgG o IgM: eluyen es negativo
fenacetina
inducción IgG rara vez se Los autoanticuerpos contra las Mild grado de hemólisis
Autoimmune- (por complementan células rojas; eluyen reacciona extravascular a moderada
ejemplo, metildopa) con células rojas
* presente en aproximadamente el 40% de penicilina - inducida IHA.
Tratamiento:
• El grado de hemólisis es generalmente leve a moderada, y la anemia se desarrolla gradualmente. Hemólisis generalmente una
regresión a los pocos días después de suspender el medicamento, pero puede continuar durante períodos más largos.
• En la mayoría de los pacientes no se requiere tratamiento
• Prednisona puede acortar el período de recuperación, pero por lo general no es necesario.
278
18
autólogo
Transfusión
de sangre
Sangre recogida de un paciente para volver a transfusión en un momento posterior en el mismo individuo se llama "sangre
autóloga". El paciente que recibe su propia sangre puede llegar a la sangre más segura posible, porque no hay antígenos extraños
infundidas, no hay enfermedades infecciosas que no sea el paciente pueden ya han se transmiten. Su uso ha aumentado con la
conciencia de las infecciones de virus de inmuno-deficiencia particularmente humana (VIH) transmitidas a través de transfusión
alogénica (homólogo).
los categorías generales de transfusiones autólogas son:
(1) donación preoperatoria de sangre - 2 o más unidades de sangre se extrae y se almacena antes de la
necesidad anticipada.
(2) Intra-operatorio de recogida de sangre - se recoge la sangre Teatro en funcionamiento antes de la

cirugía o durante la cirugía e incluyen:
a) hemodilución perioperatoria - 1 o 2 unidades de sangre se extrae antes

(Volémica normo aguda cirugía y concomitantemente sustituido con
hemodilución) solución cristaloide o coloide.
b) de sangre intraoperatoria - se recogió sangre (de rescate) del campo quirúrgico, a

continuación, procesa y devuelto.
(3) Publicación de recogida de sangre operatoria
279
ventajas y desventajas generales de transfusiones autólogas se resumen a continuación:

ventajas
• Previene la posibilidad de infecciones transmitidas por transfusión como el VIH, HBsAg, HCV y Treponema
pallidum (sífilis).
• Previene alloiminimization a los glóbulos rojos, leucocitos, plaquetas y proteínas de plasma.
• Suplementos de suministro de sangre - se suma al inventario de sangre.
• Previene reacciones reacciones transfusionales adversas especialmente alérgicas y febriles.
• Proporcionar sangre a pacientes que tienen anticuerpos contra antígenos comunes.

• Proporciona la sangre a pacientes que rechazan la transfusión de sangre homóloga debido a las creencias religiosas.
• donación autóloga preoperatoria estimula la médula ósea para aumentar la producción de células.
desventajas
• Preoperatorias sujetos donación de sangre autóloga a paciente a la anemia y la hipovolemia.
• Consecuencias de la transfusión de unidad incorrecto debido a este error material.
• El manejo cuidadoso de etiquetado, almacenamiento y reinfusión de sangre / sus productos es necesario.
• Aumentar la complejidad de proporcionar transfusión.
• la donación de sangre autóloga preoperatoria es inconveniente para el paciente donante.
• Puede haber una pérdida innecesaria de sangre si se pospone la operación o no se necesita la transfusión.
• Más costosa que la sangre alogénica.

• El riesgo de reacciones adversas durante la donación.
DONACIONES PREOPERATORIO AUTÓLOGAS

Preoperatorias donaciones de sangre autóloga es más factible para pacientes con probabilidad de requerir transfusión
durante la cirugía electiva que tendrá lugar con en 35 - 42 días (la vida útil de la sangre almacenada en estado líquido).
almacenamiento a largo plazo en estado de congelación es caro e ineficaz. Cada paciente para la donación autóloga
preoperatoria debe ser evaluada cuidadosamente por su médico y el consultor del banco de sangre. donación autóloga
requiere el asesoramiento por escrito del médico del paciente. Los pacientes deben firmar un consentimiento reconociendo
que han sido informados y entender los riesgos y ventajas de la donación autóloga. Ver adjunten en el final del capítulo.
Cada unidad extraído de la paciente se le asigna un número que se coloca en los registros de la bolsa y donantes- pacientes en el
banco de sangre. Esto permite a la unidad ser rastreado a su disposición final. Una etiqueta
indicando "Para uso autólogo Sólo" debe ser colocado en el bolso.
unidades de sangre autóloga deben ser almacenados en un estante separado del refrigerador banco de sangre.
Las indicaciones para donaciones depósito previo autólogo:
donación autóloga depósito previo se indica en los procedimientos quirúrgicos electivos con una probabilidad razonable para la
transfusión y para los que existe tiempo suficiente para obtener una o más unidades de sangre con el mínimo riesgo y sin crear
déficit hemoglobina significativo en el paciente donante. Ejemplos son la cirugía ortopédica (reemplazo de la articulación), cirugía
plástica y reconstructiva, cirugía cardiovascular, cirugía abdominal mayor (esplenectomía), y en obstetricia y condiciones
ginecológicas - en particular las mujeres que tienen múltiples anticuerpos o anticuerpos frente a antígenos de alta frecuencia. 280
Transfusión de sangre autóloga
Las contraindicaciones para donaciones depósito previo autólogo:

1. La bacteriemia y la infección localizada aguda
2. El infarto de miocardio en los últimos 6 meses
3. La angina inestable
4. Estenosis aórtica
5. Insuficiencia cardíaca congestiva
6. arritmias ventriculares significativas
7. hipertensión no controlada Marcado
8. accidente cerebrovascular con en 6 meses
La elegibilidad de la donación autóloga depósito previo
Paciente-donante, para la donación autóloga no tiene que cumplir con todos los criterios de donación de sangre homóloga. Siempre que los
requisitos para la selección de donantes o de recogida de sangre de las donaciones de sangre homóloga no se pueden aplicar, directrices
adecuadas para el paciente-donante individual deberían establecerse en consulta con el médico / cirujano del paciente-donante y deben ser
registrados. Las principales directrices son:
Hemoglobina: Aceptable en 11 gm / dl o 33 por ciento (0,33) hematocrito o superior. Por debajo de este nivel de la flebotomía no se
debe hacer, excepto en circunstancias especiales con la aprobación del médico del paciente, pero no debe hacerse si la hemoglobina
es inferior a 10 g / dl.
Años: No hay límite superior o inferior de edad. Los pacientes pediátricos sometidos a cirugía electiva se pueden beneficiar de la sangre
autlogous.
Peso y volumen de sangre extraída: Los donantes que pesan 60 kg o más pueden donar 450 ml de sangre y los donantes que
pesan menos de 60 kg pueden donar volumen proporcionalmente menor de la sangre pero no más de 8-9 ml / kg peso corporal.
En paciente pediátrico de 8 años de edad, el peso debe ser de 27 kg y no más de 10% del volumen de sangre de los pacientes
debe ser dibujado en cada flebotomía.
Frecuencia de la donación: Las donaciones a menudo se programan semanalmente o incluso a los 4 días intervalos con la última
flebotomía realizaron 72 horas o más antes de la operación. Esto permite que el plasma del paciente donante para volver a la
normalidad antes de la cirugía. El hierro oral (325 mgm de sulfato ferroso tres veces al día) se da para acelerar la restauración de la
hemoglobina a los niveles de predonación. El uso de eritropoyetinas, junto con el hierro es la forma más eficaz para mejorar las
posibilidades de éxito del programa de predonación, pero es caro.
El uso de donación autóloga para uso homóloga

Una política se debe hacer para la disposición final de las donaciones autólogas predepósito y permitiendo que se cruce para
alogénico (homólogo) de uso. La unidad no utilizada de la donación de sangre autóloga preoperatoria puede ser transferida
(cruzar) para alogénico (homólogo) utiliza únicamente si cumple todos los criterios estándar de donantes de sangre como la Hb
12,5 g / dl y negativo para diversos transmisibles - infecciones como el VIH 1 y 2 , hepatitis B y C y Treponema pallidum. Hower,
la política de permitir que la sangre autóloga a cruzar para uso alogénico es controlversial y ahora no es permisible becuase de
Doner - enfermedad médica asociada del paciente, la medicación y la bacteriemia intermitente y otras condiciones.
281
Laboratorio de Ensayo mínimo requisitos de las pruebas de laboratorio, para la unidad autólogo son el grupo ABO y la tipificación Rh.
Verificación de las donaciones de sangre autóloga para los marcadores de enfermedades infecciosas es objeto de controversia. Lo racional para el
ensayo de marcadores de enfermedades es la de proteger al personal del hospital en lugar de su destinatario. Algunos abogan por que la primera
unidad de sangre autóloga debe ser probado para los marcadores de las enfermedades transmitidas por transfusión. Si cualquier ensayo de
enfermedad por infección es positivo, una etiqueta de riesgo biológico se debe aplicar a la unidad (s) y el médico del paciente debe ser informado.
PERIOPERATORIA AUTÓLOGO DONACIÓN DE SANGRE

hemodilución PERIOPRATIVE
hemodilución normovolémica o isovolémica aguda implica la eliminación de un volumen predeterminado de sangre del paciente,
ya sea inmediatamente antes o poco después de la inducción de la anestesia Teatro en funcionamiento, y su sustitución
simultánea con expansores de volumen de sangre (coloide 1 ml o cristaloides 3 ml por cada 1 ml de sangre recogida).
hematocrito del paciente se reduce a aproximadamente 20% (1-3 g / dl).
El volumen de sangre que se recoge para un hematocrito dada puede determinarse por la siguiente fórmula:
Estimado vol (
× inicial. sangre HCT - deseadaHCT )
sangre puede de Vol.remved ser =
deseada y media inicial HCTS
de
volumen de sangre estimado = Peso corporal (kg) x 70 en adultos = peso

corporal (kg) x 80 en niños
Ejemplo:
Peso del paciente - 70kg
Estimado vol sangre. - 5000 ml aprox. Inicial
HCT-45%; deseado HCT-30%
Vol. de la sangre puede ser retirado = 5000X ([0,45-0,30]) / 0,0375
= 2000 ml
El volumen total de sangre recogida no debe exceder el 40% del estimado del paciente volumen de sangre.
Las ventajas del procedimiento incluyen:
1. sangrado quirúrgico se produce a menor de Hct., y por lo tanto la pérdida de glóbulos rojos es menor.
2. El flujo de sangre a través de la microcirculación se mejora debido a la reducida de Hct.

3. La sangre donada que se puede utilizar durante o inmediatamente después de la cirugía es muy fresco y
contiene plaquetas viables, los niveles de proteína adecuados y buenos niveles de todos los factores de coagulación de plasma.
La sangre recogida por lo general no sale de la sala de operaciones. Se puede almacenar a temperatura condicionada Teatro en
funcionamiento o en el refrigerador a 2-6 ° C durante hasta 24 horas. Todos los procedimientos y políticas deben garantizar la adecuada
recogida, manipulación, almacenamiento, identificación, y la transfusión o disposición.
Las indicaciones para la hemodilución perioperatoria

procedimientos quirúrgicos en los que la pérdida esperada de la sangre es más de 1 L.
1. Cirugía Cardiovascular
2. Cirugía vascular
3. Cirugía de la columna para la escoliosis
4. el reemplazo total de cadera o rodilla 282

transfusión de sangre autóloga
Contraindicaciones para hemodilución perioperatoria

1. Por lo general, no es apropiado para hacer hemodilución cuando la hemoglobina es inferior a 11 g / dl ya que disminuir
inmediatamente 1 g / dl por cada unidad de sangre extraída.
2. Los pacientes con insuficiencia renal que no pueden excretar el gran volumen de infusión
fluido.
3. Los pacientes que tienen deficiencias de factores de coagulación preoperatorios como hemodilución más
los reduce.
4. Sever enfermedad pulmonar obstructiva y / o restrictiva es una contraindicación como casi normal
el transporte de oxígeno es esencial. La función pulmonar debe ser cuidadosamente evaluado.
5. infarto de miocardio alterada como resultado de miocardio previo o terapia con los canales de calcio o agentes de bloqueo
B-adrenérgico puede limitar la capacidad del corazón para responder a la hemodilución con incremento habitual en hacia
fuera puesto. Lo mismo es aplicable en la estenosis aórtica severa.
6. bacteriemia
7. Embarazo con anemia
COLECCIÓN de sangre intraoperatoria (Salvage)

intraoperatoria recuperación de sangre es la colección de sangre sheded de una herida cerrada o cavidad corporal durante la cirugía y
su posterior transfusión en el mismo paciente. Las indicaciones quirúrgicas para recuperación de sangre intraoperatoria incluyen
cualquier procedimiento quirúrgico en el que se prevé la pérdida de sangre más de IL y si no hay contaminación (sepsis o herida
penetrante) del sitio quirúrgico o la contaminación con células tumorales malignas. autotransfusión Intaoperative puede disminuir la
necesidad de transfusiones homólogas.
El procedimiento puede ser usado en muchos procedimientos quirúrgicos:

• Cardiovascular
• Vascular
• procedimientos ortopédicos (especialmente de reemplazo total de la cadera y la cirugía de la columna)
• Trasplante de hígado
• embarazo ectópico roto
• Trauma
Contraindicaciones de recuperación de sangre intraoperatoria

• Infección - reinfusión de contaminada, incluso lavado, la sangre puede conducir a la bacteriemia.
• Malignidad (células malignas) - reinfusión de las células malignas pueden conducir a la diseminación metastásica.
• La contaminación fecal.
Procedimiento
Muchos dispositivos de autotransfusión intraoperatoria están disponibles. Los principios básicos involucrados son de succión del aspirador
accionado, que recoge sheded sangre de la herida o cavidad del cuerpo durante la cirugía, la anticoagulación; filtración para eliminar los
residuos, y la fibrina; centrifugación y lavado de las células rojas con solución salina y transferencia normal en un paquete separado para
reinfusión.
Los dispositivos más nuevos (por ejemplo, Sorenson autotransfusión Systems, Cell de Haemonetic de ahorro) que transfundir
rescatado sangre entera o lavó los glóbulos rojos han demostrado ser más seguro y sin mayores complicaciones desarrollar. embolia aérea
nunca ha sido reportado con un dispositivo de autotransfusión más reciente. Los dispositivos son costosos y el proceso es rentable.
283
Transfusion Medicine T Manual técnicaLista
Todas las técnicas de salvamento intaoperative deben confirmar a los requisitos de seguridad. sangre recuperada debe estar claramente
marcado que tiene el nombre del paciente, número de identificación, la fecha y hora de la recogida. La sangre debe infundirse el plazo de seis
horas desde el inicio de la recogida y debe permanecer con el paciente hasta que vuelven a infundir.
anticoagulantes
Sangre rescatado de una cavidad serosa es con frecuencia deficiente en fibrinógeno y las plaquetas y no coágulo. Es factible transfundir
tales sangre con mínima o ninguna anticoagulante añadido. Para la mayoría de situaciones quirúrgicas, sin embargo el paciente es o bien
sistémicamente anticoagulada (por ejemplo, en la cirugía cardíaca), o se añade anticoagulante a la sangre recuperada. En el último caso,
los anticoagulantes citrato son preferibles a la heparina, que a dosis bajas, puede causar la activación de plaquetas y la coagulación
paradójico.
Las complicaciones de la utilización de sangre intraoperatoria recuperadas son:

• hemólisis
• La coagulación intravascular diseminada (DIC)
• Septicemia
• Embolia gaseosa
Recuperación de sangre POSTOPERATORIA
Técnicas disponibles para la recogida del drenaje postoperatorio son por lo general de valor dentro de 24 a 48 horas después de la cirugía en
pacientes con hemorragia activa en un sitio cerrado (por ejemplo, después de derivación cardiopulmonar, la sangre del pecho siguiendo
hemotórax traumático, drenaje cavidad de la articulación). Este procedimiento también está contraindicado cuando hay evidencia de
infección, las células o tumores malignos en el sitio desde el que está siendo rescatado sangre o cuando la tasa de pérdida de sangre es
inferior a 50 ml por hora. La sangre recogida de postoperatorio drenaje es estéril y defibrinogenated. No va a coagular.
Utiliza el mismo dispositivos para recoger y procesar la sangre que se utilizan en la autotransfusión intraoperatoria. Debe ser
filtrada (Lavado es opcional) antes de ser devuelta al paciente. La sangre debe ser reinfundida con en seis horas desde el inicio de
la recogida con el fin de minimizar la proliferación de las bacterias. La bolsa de sangre debe ser etiquetado con el nombre del
paciente y un número de identificación.
conclusiones
La sangre autóloga es generalmente aceptado ser el tipo más seguro de la sangre para transfusión. Se disminuye la demanda de sangre
almacenada. Los problemas logísticos pueden minimizarse mediante protocolos desarrollados en los hospitales para los programas de transfusión
autóloga exitosas.
adjunten
CONSENTIMIENTO PARA LA DONACIÓN DE SANGRE depósito previo autólogo
1. YO, Mr./Mrs./Miss................son/daughter/wife de .............................. .have ha explicado completamente el

propósito y el procedimiento de la transfusión autóloga, y la posibilidad y la naturaleza de sus
complicaciones.
2. Doy mi consentimiento para la abstinencia de mi sangre por un miembro autorizado del personal del banco de sangre
para transfusión autóloga. Si no requerir transfusión de la sangre extraída de transfusión autóloga, puede desecharse de
acuerdo con la política del hospital. Fecha:
la firma de los donantes en el Paciente
Firma de testigo
Firma del padre / tutor
(Si el paciente es menor de edad)
284
19
madre hematopoyéticas
Las células y
las células progenitoras
Hay ciertas células en la médula ósea y sangre periférica, cuya única función es la de producir diferentes tipos de células en la
sangre. Estas células se llaman células madre hematopoyéticas y cuando se dividen, que producen células hijas llamadas células
progenitoras. Tanto las células madre y células progenitoras son igualmente importantes en el proceso de recuperación del paciente
después de un trasplante de células madre.
El trasplante de células madre hematopoyéticas regenera la médula ósea del paciente y inmune
sistemas que han sido destruidos por el tratamiento de quimioterapia y / o radiación para destruir las células cancerosas. Las células
madre también tienen la capacidad de regenerarse y convertirse en funcionales sangre población células hecha de ocho tipos de
células distintas - eritrocitos, granulocitos (neutrófilos, eosinófilos, basófilos), macrófagos, megakarocyte (plaquetas), y linfocitos T y
B. Ver figura 19-1. Las fuentes de células madre hematopoyéticas.
Hay tres fuentes principales de células madre.

• Médula ósea
• Sangre periférica
• La sangre en el cordón umbilical y la placenta
A partir de estos sitios las células madre pueden ser recogidos para el trasplante hematopoyético.
Las indicaciones de las células madre hematopoyéticas:
enfermedades hematológicas malignas

• Leucemia
285
Fig. 19-1
HEMATOPOYESIS (El desarrollo de la sangre)
• enfermedad de Hodgkin
• Los linfomas no Hodgkin de
• Mieloma múltiple
hemoglobinopatías
• talasemia
• Enfermedad de célula falciforme
tumores sólidos seleccionados
• Cáncer de mama
• neuroblastoma
enfermedades hematológicas no malignas
• inmunodeficiencia congénita
Tipos de células madre Trasplante
Hay tres tipos de células hematopoyéticas progenitoras trasplantes;
• autólogo
• alogénico
• singénico
Trasplante autólogo
En el trasplante autólogo, los pacientes propia médula ósea o células madre de sangre periférica (PBSC) son recogidas y después
transfunden en su propia circulación para restaurar la función hematopoyética después de quimioterapia y / o radiación de terapia para
curar trastornos malignos. 286

Células madre hematopoyéticas y células progenitoras
El trasplante alogénico
En el trasplante alogénico de las células madre hematopoyéticas procedentes de individuos (generalmente hermanos), que son
antígenos de leucocitos humanos (HLA) idénticos en los loci A, B, y DR, se utilizan para el trasplante. Cuando tal partido no se pudo
encontrar, los donantes relacionados no concordantes en I o 2 loci HLA se han utilizado.
El trasplante singénico
En este las células madre hematopoyéticas de gemelo idéntico se utilizan para el trasplante.
COLECCIÓN DE MÉDULA ÓSEA

La médula ósea se recoge generalmente, durante el período de recuperación de quimioterapia y / o radiación, bajo anestesia espinal o general.
Las crestas ilíacas (hueso pélvico) se perforan y aspirados varias veces con el fin de recoger entre 0,4 y 1,0 litros de fluido que contiene la médula
ósea y las células sanguíneas. Las alícuotas de la médula se mezclan inmediatamente con anticoagulante generalmente heparina y medio de
cultivo tisular. Las alícuotas de la médula ósea se agrupan en un vaso de precipitados estéril o matraz y después se filtró a través de series de
filtros o tamices de acero inoxidable de 300 y 200- tamaño <W> m de malla, para filtrar la mayor parte del astillas de hueso, la formación de
coágulos, y fibrina. La colección se transfiere a continuación a uno o más estériles bolsas de transferencia. La médula ósea recogida puede ser
infundida directamente en el paciente o adicionalmente procesada para el almacenamiento congelado. En el hueso ósea las células que conducen
a la reconstitución hematopoyética se encuentran entre las células mononucleares (CMN). Otros población de células en el injerto es superfluo.
los procesamiento puede requerir la separación de células, la eliminación de RBC, la concentración de la capa leucocitaria, y la purificación de
células mononucleares. Además, las células malignas en la médula ósea pueden ser purgados por los anticuerpos monoclonales. La médula ósea
se procesa mediante el uso de separador de células para eliminar el 95% de las células rojas, mientras que la recuperación de más del 75% de
unidad formadora de colonias de granulocitos-macrófagos (CFU GM) o células CD34 + en el producto final que contiene más de 80% de las
células mononucleares (MNC). La concentración de células nucleadas normalmente se ajusta antes de la crioconservación a 3-4 x 10 7 Células/
ml.
El objetivo usual de células nucleadas es de 1-2 x 10 8 células nucleadas / kg de peso corporal del receptor o 1.000 unidad de
granulocitos-macrófagos de formación de colonias (CFU-GM). Estos niveles se alcanzan habitualmente mediante la recopilación de 10-20 ml
de médula ósea por kg de peso corporal del donante. Sin embargo más cantidad puede ser necesario si se requiere la purga de células
tumorales de la médula.
La médula ósea se cryopreserved generalmente en 20 sulfóxido% de dimetilo (DMSO) [concentración final 10%] y se almacena en nitrógeno
líquido hasta su uso. Congelación y almacenamiento de la médula ósea se da en detalle más adelante.
Después de la ablación de la médula con quimioterapia y / o radiación, la médula ósea se descongela rápidamente y se infunde en
la corriente sanguínea del paciente para repoblar la médula. La médula ósea se puede obtener ya sea desde un HLA compatible o
donante parcialmente emparejado (alogénico) o del propio paciente (autólogo).
Procedimiento para el procesamiento de médula ósea

• Harvest 2 x 10 8 células nucleadas por kg de peso corporal
• Se filtra para separar astillas de hueso y coágulos
• Reducción de la contaminación de glóbulos rojos y la concentración de las células nucleadas por preparación de la capa
leucocitaria o centrifugación de densidad Ficoll-Hypaque
• La adición de plasma autólogo y crioprotector (DMSO) a la suspensión ósea
287
Transfusion Medicine Técnica Manual
• congelación a velocidad controlada

• Almacenamiento en nitrógeno líquido
Glóbulos STEM PE.RAL

Las células madre de células progenitoras y tienen la capacidad de migrar de la circulación periférica a la médula ósea y viceversa. Las
células primitivas que se podrían utilizar para el trasplante circulan en la sangre periférica a una concentración de aproximadamente 2% de
los de la médula ósea. células madre de sangre periférica trasplantes fueron utilizados inicialmente como una alternativa a la médula ósea en
pacientes que han tenido la irradiación en el área pélvica, donde la médula ósea es normalmente cosechado o tienen la contaminación de
células de cáncer extensa de la médula ósea. PBSC se recogen usando una máquina de procesamiento de sangre (separador de células)
mediante un proceso conocido como aféresis. Como gran volumen de sangre se procesa por colección, se requiere el acceso venoso a largo
plazo a través de un catéter.
Más tarde se descubrió que, por mecanismo desconocido, las células madre y los contenidos de células progenitoras de la sangre
periférica se incrementan notablemente durante la recuperación de la quimioterapia mielosupresora (particularmente ciclofosfamida), y / o
después de la administración de factores de crecimiento hematopoyéticos recombinantes particularmente G-CSF y GM -CSF). células
madre de sangre periférica son ahora rutinariamente movilizadas por factores de crecimiento hematopoyéticos (con o sin quimioterapia),
que incluyen el G-CSF y GM-CSF o una combinación de los dos. G-CSF se administra en las dosis de 10-22 ug / kg / día durante 5-7 días.
Esta práctica requiere un menor número de sesiones de aféresis (1-3 vs 7-10) para recoger suficientes para el trasplante de PBSC.
La mayoría de los centros de trasplante recogen mínimo de 1-2 x 10 6 CD34 + células / kg o 10 x 10 4 CFU-GM / kg. o células mononucleares de
2xl0 8 / kg de peso corporal. Inmediatamente después de la recogida, las células mononucleares, con o sin Percoll o sedimentación
Ficoll-Hypaque, se suspenden en plasma autólogo, mezclado con sulfóxido diméthyle (DMSO) y se almacenaron congeladas en nitrógeno
líquido.
CD34 + de selección de celda se lleva a cabo mediante la separación de perlas inmunomagnéticas o columna de inmunoafinidad de avidina-biotina o el
uso de una máquina llamada de flujo - citómetro.
El uso de PBSC movilizadas condujo a la recuperación significativa de los niveles de neutrófilos y plaquetas tras el trasplante. Con PBSC
trasplante, la recuperación de neutrófilos se produce dentro de 8-12 días, mientras que las plaquetas recuperar promedios 8-15 días.
PBSC movilizadas trasplantes se realizan predominantemente en la configuración autólogo debido a la preocupación inicial de que
el aumento del número de linfocitos T podrían aumentar la frecuencia y la gravedad de GVHD. alogénico con éxito Sin embargo,
numerosos informes recientes han demostrado movilizó PBSC trasplantes sin aumentar las tasas de EICH.
Abreviatura:
G-CSF - Granulocitos - factor estimulante de colonias
GM-CSF - macrofase de granulocitos - colonia factor de simulación de CFU-GM - unidad
formadora de colonias - macrofase de granulocitos
Procedimiento para el procesamiento de células progenitoras de sangre periférica
• Colección de 10 x 10 4 CFU-GM / kg o 2 x 10 6 células CD34 + células / kg o mononucleares 2x 10 8 / kg por aféresis
• La adición de plasma autólogo y cryprotactant (DMSO)

• congelación a velocidad controlada
• Almacenamiento en nitrógeno líquido
288
Ventajas de PBSC trasplante en comparación con el trasplante de médula ósea son:

Comodidad y conveniencia para el donante / paciente
• Procedimiento es menos compleja, tiene menores riesgos, es menos doloroso y se puede hacer sobre una base en exteriores
• Donador no se somete a la anestesia o la hospitalización

• Libre de los efectos de la quimioterapia previa / radioterapia
• Procedimiento tomar tan poco como 3 horas
• Cosecha y el trasplante se pueden realizar como procedimiento ambulatorio.
células madre de sangre periférica son más limpios
• Un injerto está libre de células cancerosas
• Hueso y tejido restos de la cosecha de médula ósea se elimina
Los pacientes se recuperan más rápidamente
• Tasa de recuperación post-tratamiento de la médula ósea se acelera
• puede ser necesaria menor número de transfusiones de glóbulos rojos y plaquetas
• la susceptibilidad del paciente a la infección se reduce
• La incidencia de GVHD con HLA emparejado PBSC trasplante es casi la misma que con la transfusión de médula
ósea autólogo.
ENSAYO STEM CELL
Hay dos métodos que se pueden utilizar para determinar la idoneidad de la colección de células madre para trasplante. Estos ensayos son la
unidad de formación de colonias (CFU) y análisis de CD34 +.
Unidades formadoras de colonias (UFC) Ensayo
El ensayo CFU implica el cultivo de una pequeña porción de recolección de células madre en un cultivo. Una célula de células madre o progenitoras
sola formará un grupo de células sanguíneas maduras y estos grupos pueden ser contados usando microscopio. El ensayo CFU es el mejor
indicador de la capacidad de las células madre para crecer en el paciente después del trasplante, pero inconveniente principal de este ensayo es que
los resultados no están disponibles para 2 semanas. La prueba de UFC no se puede utilizar para determinar el día a día.
Ensayo de células CD34 +
La prueba de CD34 + es la prueba más prominente para la medición de los contenidos madre y células progenitoras de la colección. Las
células madre se distinguen de la mayoría de las células en la médula ósea o de la sangre debido a que las células madre muestran una
proteína en su superficie designada como CD34 +. Esta exclusividad permite contar las células CD34 +, utilizando una máquina
técnicamente complejo llamado un citómetro de Flow.
• La principal ventaja de CD34 + pruebas durante la prueba CFU es que CD34 + resultados pueden estar disponibles dentro de las 24 horas.
• Este rápido CD34 + pruebas pueden ayudar a evitar que el paciente / donante de someterse a una segunda recolección de
células madre innecesario en los casos en que la primera colección contenía células madre suficientes necesarias para el
trasplante. Un número de estudios han reportado una dosis adecuada trasplante consiste en el 2-5 millones de células CD34 + /
kg de peso del paciente.
289
• El análisis CD34 + también se puede utilizar para comprobar la disposición del donante del paciente o de comenzar la recogida de aféresis de
células madre.
SELECCIÓN STEM CELL

Las células avanzar tecnología de selección para el aislamiento de células CD34 +
Las células de selección es un proceso de laboratorio especializado que se utiliza para reducir los contaminantes de células no madre, incluyendo células
tumorales, a partir de productos de trasplante a yeild células madre CD34 + en una forma purificada y concentrada.
Durante la terapia de trasplante, tallo producto trasplante de células (llamada injerto), derivada de médula ósea o sangre
periférica, se cosecha y procesado en el laboratorio y después re- infundido en el paciente por vía intravenosa después de la
quimioterapia y / o radioterapia.
Este trasplante es esencial para regenerar la médula ósea destruida a partir de los efectos de los fármacos tóxicos y
radiación. Las células que son necesarios para regenerar la médula ósea son células madre CD34 + (células que expresan el
marcador CD34 Ag en la superficie). Por lo tanto es necesario recoger su dosis óptima y pura de un trasplante exitoso.
Sin embargo, el producto de células madre recolectadas contiene un número significativo de las células tumorales, células T y otros
contaminantes a lo largo con las células CD34 +. Las células tumorales presentes en el trasplante pueden aumentar la carga tumoral en el
paciente la reducción de la eficacia del trasplante con un mayor riesgo de recaída y las células T presentes en el producto puede aumentar la
incidencia de GVHD. Por lo tanto es extremadamente importante para purgar o eliminar las células tumorales, y las células no madre de
trasplante.
Las células de selección realiza esta función de las células tumorales de purga, así como la eliminación de las células T y otros contaminantes.
Aplicaciones células de selección:
Hay varios procesos de selección de célula tal como centrifugación, Ficoll separación por densidad y mediada por
anticuerpos o selección inmuno. Entre estos, mediada por la selección de anticuerpos (Immuno) se utiliza comúnmente
debido a su alta especificidad y eficacia. Se trata de la selección física real de células.
Las aplicaciones de anticuerpos mediada por la selección de celda son:
1. La selección de células con la ayuda de las Columnas.
2. La selección celular inmunomagnética (selección celular con imanes).
3. Selección de células con gradiente de densidad de centrifugación (células se aíslan directamente de Whole
Sangre).
4. Sistema de enriquecimiento basado en anticuerpos con centrifugación de densidad boyante. (Densidad de

células no deseadas se incrementa y se quitan, enriqueciendo de este modo el producto de células madre). En la selección
inmunomagnética de células madre hay selección positiva y negativa simultánea en un único paso automatizado.
1. Selección positiva: ( Passive agotamiento) Aquí, las células CD34 + se retienen magnéticamente
y se eliminan las células no deseadas.
2. La selección negativa: ( Agotamiento) Las células tumorales activas están magnéticamente retenidas y los deseados
las células se liberan y se recogieron.
Algunas de las máquinas avanzadas que proporcionan la selección de celda Inmunomagnética disponibles son Isolex, CliniMACs, Seprate.
290
El agotamiento pasiva El agotamiento activa
Las células CD34 + madre son magnéticamente retenidas. La Las células tumorales restantes se magneti- camente
mayoría de las otras células, incluyendo células tumorales, se retenidos mientras se recogen las células CD34 +
eliminan. liberados.
Sistema de Selección de células magnéticas Isolex de Baxter:
Un avanzada, totalmente automatizado, el dispositivo de selección de celda sistema cerrado usado para aislar específicamente o seleccionar células
madre de la trasplante obtenida del paciente. A través de un proceso inmunomagnética, contaminantes no deseados, incluyendo células tumorales, se
retiran dejando las células madre enriquecidas.
Kit de reactivos para Isolex 300 i contiene:
• Un velo de Anti-CD34 Anticuerpo Monoclonal

• Un velo de Dynabeads M-450 de oveja anti-ratón IgG
• Un velo de PR 34 + Stem Cell La liberación del agente
Mecanismo: El anticuerpo mediada por la tecnología inmunomagnética de Isolex 300i Selector de células magnético reconoce
específicamente y las células madre de captura. En la selección positiva (agotamiento pasivo),
la selección se realiza usando anticuerpos de células madre (moléculas de proteínas que se unen sólo a las células madre), mientras que la mayoría de
las otras células (células T y células tumorales) se eliminan. El agotamiento pasiva se combina simultáneamente con la selección negativa
(agotamiento activo) en la que las células tumorales restantes son retenidos magnéticamente mientras que las células CD34 purificadas se liberan y se
recogieron.
Los pasos clave en el proceso de selección son:
1. Sensibilización: anticuerpo monoclonal anti-CD34 se mezcla con las células para unirse a células CD34 +.
2. Roseta / Captura: Después del lavado, se añaden perlas magnéticas (Dynabeads) recubiertos con oveja anti-IgG de ratón
para eliminar el anticuerpo no unido. Reconocen el anticuerpo anti-CD34 murino derivado, que conduce a la formación de
complejos de roseta celular bead-diana.
3. separación: Un campo magnético se aplica permitiendo a los complejos de perlas de células CD34 + para separar magnéticamente
desde el resto de la suspensión celular.
4. Lanzamiento: Después de retirar las células no diana mediante lavado, el tallo se añade célula agente de liberación para separar el grano /
anticuerpo a partir de las células CD34 +.
Después, las células CD34 + separadas se lavan para eliminar los reactivos residuales y se recogieron.
291
TRANSFUSION MBDICINE Manual técnico
Características sobresalientes de Isolex 300i selector de celdas magnética:
1. Isolex de Baxter es la única CE (Europa) marcada y la FDA (EE.UU.) aprobó CD34

sistema de
selección.
2. El único sistema para proporcionar selección positiva y negativa simultánea de las células
en una soltero
paso.
3. Proporciona más de 90% de pureza de células CD34 + y más de 60% de rendimiento de células CD34 +.
4. Los altos niveles de células tumorales y la depleción de células T (4,2 log).
5. Es un procedimiento costoso.
Indicaciones y uso
1. Indicado para tratamiento
autólogo periférico sangre
progenitor célula (PBPC)
productos para obtener una célula CD34 +
enriquecido población destinado a para
hematopoyético reconstitución
después de la terapia mieloablativa.
2. Isolex tratamiento reduce la

número deno CD34 + (no-
objetivo) Células, incluso tumor
Células, en el injerto autólogo como
comparado con un no seleccionado
CMSP.
3. Consecuentemente reduce tumor

Células en CMSP colección
cosechado de los pacientes con
leucemia, múltiple mieloma,
cáncer de mama, etc.
4. No CD34 + seleccionado productos

son contaminado con tumor
Células y se asocia con un mal resultado
clínico
ISOLEX 300 yo Sistema
5. El uso de células seleccionadas con Isolex
Fig. 19.3
haría servir a reducir la
incidencia de EICH
6. Los pacientes muestran el injerto con una rápida
células seleccionadas
7. Papel de CD34 + seleccionadas células en terapia génica:
• Reemplazar genes que faltan o defectuosos en las células madre para expresar la proteína normal (Hb)
• Introducir genes terapéuticos en las células madre 292

Células madre del cordón SANGRE

La sangre del cordón se define como la sangre contenida dentro de cordón umbilical y en la circulación placentaria. Al igual que los
embriones, células de sangre del cordón contiene células madre primitivas que dan lugar a glóbulos rojos, glóbulos blancos, plaquetas y
el sistema inmunológico. Recogida de sangre del cordón para las células madre de recolección debe llevarse a cabo de una manera que
no alteraría la entrega del bebé y no sería perjudicial para el niño y la madre.
evaluación de los donantes
Consentimiento informado
El consentimiento informado para la recolección de sangre del cordón umbilical antes de la entrega se debe tener preferiblemente de ambos
padres o al menos un padre o tutor legal después de explicar el propósito y el proceso de recogida de sangre de cordón.
la idoneidad del donante
• Una historia clínica personal y familiar de la madre; y el padre también si está disponible, debe ser obtenido y documentado
antes o dentro de las 48 horas de la extracción de sangre. Tal historial médico debe incluir una evaluación del trastorno
genético que afecta la madre, el padre y los hermanos de la nueva lista de materiales.
• Una muestra de sangre de la madre debe ser recogida 48 a 72 horas antes de la entrega para las pruebas para
anti-HIV 1 & 2, HBsAg, anti-HCV, sífilis; y anti-HBc.
• Si alguna de la prueba es positivo para cualquiera de estos marcadores, la sangre del cordón debe estar preparado tras el
consentimiento de los padres y el médico de trasplante que si se podría utilizar para el trasplante autólogo en el bebé si es
necesario. De lo contrario, la sangre del cordón no debe ser recogida para transplante alogénico.
Las pruebas de la sangre del cordón umbilical
Una muestra de sangre del cordón umbilical debe mantenerse separado en el momento de la recolección y la prueba de:
• células de sangre de cordón deben ser probados para grupo ABO y Rh.
• Para las colecciones espinal comunidad de sangre (trasplante alogénico), Clase 1 tipificación de HLA y preferiblemente Clase
11 tipificación de HLA también debe ser realizado poco después de la recolección. Será necesario para determinar la
compatibilidad HLA con receptor relacionado alogénico para reducir las posibilidades de la enfermedad GVH. No es necesario
para el trasplante autólogo.
• Un análisis de CD 34 + células o CFU-MG o células mononucleares se realiza para evaluar los contenidos células progenitoras.
Las células mononucleares se pueden contar en frotis de sangre periférica.
Facilidad de notificación y autorización

Un acuerdo / reconocimiento entre la administración del hospital y de la facultad de toma deberán ser establecida. El banco de sangre
debe tener licencia de la autoridad de concesión de licencias para el procesamiento de la sangre del cordón umbilical.
Colección de sangre de cordón; Método de procesamiento y Procedimientos
Cable de personal de recogida de sangre:
• colección sangre del cordón umbilical debe ser realizado por el ginecólogo / obstetra capacitado o enfermera entrenada, la
realización de la entrega, en la recogida de la sangre del cordón umbilical.
• Deben tener experiencia en la punción venosa. control de la infección, la manipulación de material bio-peligrosos.
293
método de recogida
• Procedimiento utilizado debe ser documentado para dar lugar a la retención de la esterilidad adecuada y células madre viabilidad.
• La colección de la sangre del cordón no debe dar lugar a cualquier desviación de los procedimientos obstétricos normales (por
ejemplo, tiempo de sujeción del cable).
• Tanto en el útero (antes de la expulsión de la placenta) y ex-utero (después de la entrega de la placenta) métodos de
recolección son aceptables y tienen una eficacia comparable. Se recomienda el uso de un sistema de semi-cerrado o
cerrado (jeringa heparinizada o bolsa con ACD / CPD anticoagulante) por punción venosa de la vena umbilical en
condiciones asépticas.
• El uso de recipientes abiertos para la recolección es inaceptable.
• El procedimiento de recogida no debe ser perjudicial ya sea para la madre o el bebé o poner en peligro la extracción de sangre del
cordón umbilical.
• Acerca de 80-120 ml de sangre de cordón se pueden recoger.
Procedimiento:
• El cordón umbilical se pinza y se corta como en forma rutinaria.
• sitio de inserción en la vena umbilical se prepara mediante la limpieza con betadine y alcohol.
• aguja estéril de bolsa de recogida se inserta en la vena umbilical que señala hacia placenta permitiendo que la sangre del cordón
fluya dentro de la bolsa de recogida por gravedad. Una vez que la vena se colapsa o la sangre deja de fluir, el procedimiento de
recogida se ha completado.
• En promedio 60-120 ml de sangre del cordón anti-coagulada puede ser recogida.
• Alternativamente jeringa heparinizada se puede utilizar para la recogida de sangre de cordón. Cerca de 85 ml de sangre pueden ser
recogidos con el método de la jeringa y la tasa de contaminación es menor que 1%.
• El procedimiento se puede realizar en los partos vaginales o cesárea incluyendo nacimientos múltiples.
Método de procesamiento y almacenamiento

Recogida y almacenamiento vasos: La sangre del cordón debe ser recogida y almacenada en viales, bolsas, u otros contenedores aprobados
para la crioconservación de células progenitoras hematopoyéticas o validados por el banco de sangre del cordón umbilical.
pruebas de esterilidad: El ensayo de esterilidad para la contaminación bacteriana y fúngica se debe realizar en una muestra recogida después de
la adición de la mezcla de crioprotector y los resultados evaluados como un procedimiento de control de calidad.
criopreservación: Las células deben ser crioconservadas en un 20% de sulfóxido de dimetilo (DMSO) [10% de concentración final].
etiquetado: El producto final debe ser etiquetado y / o etiquetado y debe contener el número de identificación del
donante y fecha de recogida. La etiqueta debe ser legible, indeleble.
Usos de la sangre del cordón:
• Los tallos células se utilizan principalmente en la medicina de trasplantes para regenerar la médula ósea de un paciente y el
sistema inmune después de que han sido tratados con quimioterapia y / o radiación para destruir las células cancerosas. Estas
células madre también migrar a la médula ósea del paciente y tienen la capacidad de regenerarse donde se reproducen,
creando un nuevo sangre y el sistema inmune para el paciente. 294

• En el tratamiento de una variedad de cánceres y enfermedades de la sangre.
• Las células madre se utilizan para uso propio (antologous), en caso de necesidad futura.
• Bajo rendimiento de 4xl0 6 células progenitoras hematopoyéticas, actualmente restringe el uso de las células madre del cordón umbilical
en niños.
• Recientemente se ha informado de injerto con éxito de las células madre de sangre de cordón de donantes no relacionados en los
receptores de un peso de 45 kg.
Ventajas de células sanguíneas del cordón más de médula ósea
• La médula ósea es difícil hacer coincidir entre donante y receptor. Las posibilidades de partido de la médula ósea dentro de la familia
son 25%, mientras que en las células de sangre de cordón posibilidades son hasta un 50%.
• Recogida de médula ósea es invasiva y puede ser doloroso, ya que requiere muchas inserciones para extraer la médula
ósea de la médula del donante con una aguja y una jeringa. Este es un proceso largo que requiere anestesia general.
También es un procedimiento caro.
• trasplante de sangre del cordón umbilical puede tener una mayor tasa de supervivencia, una mayor calidad de vida después del
trasplante y la hospitalización de menos frecuentes debido a un menor número de complicaciones tales como Injerto contra Huésped
(GVHD), debido a la incapacidad de las células de sangre de cordón juveniles para montar un ataque contra el beneficiario.
• Se ha encontrado sangre del cordón umbilical para contener menos virus que en la médula ósea de edad de los donantes.
• Esto hace que el costo total del cable de trasplante de sangre de menos de trasplantes de médula ósea tradicionales.
Congelación de progenitoras hematopoyéticas (STEM) CELLS

Congelación de progenitoras hematopoyéticas (tallo) células recogidas de la médula ósea, la sangre circulante periférica y el cordón
umbilical se diferencia de la congelación de las células rojas con glicerol. Dimetil sulfóxido (DMSO) se ha encontrado para ser valiosa
crioprotector para muchos tejidos y células madre. DMSO atraviesa rápidamente la membrana celular con un mínimo de estrés
osmótico y no necesita su retirada antes de la transfusión. La concentración de 1,5 M (DMSO) o menos parece ser relativamente no
tóxico. La temperatura de almacenamiento debe ser lo suficientemente baja para evitar la formación de hielo extracelular, lo que puede
conducir a lesiones deshidratación.
La mezcla estándar contiene 20% de DMSO [concentración final 10%], una solución salina o electrolito isotónica, y una fuente de
proteína, por lo general de plasma autólogo o albúmina de suero humano. Stiff et al modificarse la técnica de congelación estándar
para incorporar una fracción de bajo peso molecular de almidón de hidroxietilo (pentastarch, McGaw chemical co., Irvine CA) como
un crioprotector adicional. Esta modificación hace que sea posible el uso de la mitad de la cantidad de DMSO (concentración final
5%) con recuperación comparable y la viabilidad con el método estándar. A menor concentración de DMSO reduce los efectos
secundarios desagradables de DMSO que son de vez en cuando con experiencia, cuando se infunden gran volumen de células
descongeladas.
A temperatura ambiente 10% de DMSO puede ser tóxica para las células progenitoras, por lo que el proceso de congelación no debe ser
retrasada. Cada bolsa se coloca en un recipiente metálico o entre placas de metal y se pone en el congelador programable enfriar a la tasa de
control de -1 a-5 ° C por minuto a-80 a-100 ° C o en vapor de nitrógeno. Entonces se transfirió a congelador de nitrógeno líquido para
almacenamiento a-196 ° C.
295
CONGELACIÓN DE MÉDULA ÓSEA-velocidad controlada
Congelación de médula ósea
Después de la cosecha, la médula ósea es extensamente procesada antes de la congelación. La médula ósea se puso en vasos de
precipitados de acero inoxidable con medio de cultivo tisular y heparina para la dilución y la anticoagulación. Los diversos medios de
cultivo utilizados para la crioconservación, MEM, RPMI, HBBS y TC199. A continuación, la médula se presiona a través de tamices de
malla de acero inoxidable, de tamaño de malla 300 y 200 m, para filtrar la mayor parte del astillas de hueso, la formación de coágulos,
la grasa y la fibrina. La colección se transfiere entonces a paquete de transferencia de sangre estéril y se transfiere a laboratorio. En el
laboratorio la médula ósea se procesa mediante el uso de separador de células para eliminar el 95% de las células rojas, mientras que
la recuperación de más del 75% de formación de colonias de células en unidades de granulocitos macrofase (CFU-GM) o CD34 + en
el producto final que contiene más de 80% de células mononucleares (CMN). 7 células / ml.
Un volumen igual de 20% de DMSO y células en suspensión se mezcló vigorosamente a 0-4 ° C y se transfiere en 50-100 ml alícuotas a las
bolsas de poliolefina e inmediatamente se congeló a una velocidad controlada de 1 a 5 ° C por minuto a -80 hasta 100 ° C en un congelador
mecánico o en el vapor de nitrógeno y se almacenan a -196 ° C en nitrógeno líquido.
Congelación de células de la sangre madre periféricas (PBSC)

células madre de sangre periférica se cosechan con separador de células automático. Las concentraciones de PBSC que tiene de 3 x 10 8 células /
ml en plasma autólogo pueden ser congelados y almacenados como células madre de médula ósea.
CONGELACIÓN de sangre de cordón
sangre de cordón 50 ml se toma en la congelación de la bolsa y se enfrió a 4 ° C. Una solución al 20% de DMSO en solución salina es llevado a 4 °
C en un recipiente separado y se mantuvo en baño de hielo. La sangre del cordón umbilical se mezcla vigorosamente con un volumen igual de la
solución de DMSO 20% y las bolsas se congelan como se describe para la médula ósea y PBSC.
Incontrolada-velocidad de congelación de células madre de médula ósea
Se añade una mezcla de 10% de DMSO y 12% HES a un volumen igual de la suspensión de células en albúmina de suero humano. Las células
madre preparación que tiene DMSO a una concentración de 5%, almidón de hidroxietilo (HES) en el 6% y albúmina de suero humano al 4% en
solución salina de glucosa se puede congelar directamente a -70 hasta -80ºC sin temperatura controlada y no causa daños durante período corto.
Sin embargo, para un almacenamiento más prolongado que se haya informado a almacenar en -135 ° C.
Descongelación y Transfusión
células progenitoras crioconservadas pueden ser descongelados por inmersión de la bolsa en un baño de agua bien agitada en 30-37 ° C. Esto se
hace en o cerca de lado de la cama del paciente, y las células descongeladas debe ser transfundida inmediatamente para evitar la formación de
grumos en el material.
296
20
Transfusión en el
trasplante
La importancia de los trasplantes de órganos como una actividad clínica ha aumentado en los últimos años. El trasplante de riñón
todavía representa la gran mayoría de operaciones de trasplante, además de médula ósea autólogo y alogénico y sangre periférica
células madre trasplante ahora están bien procedimientos en el tratamiento de ciertos tumores malignos hematológicos establecida.
Además, el trasplante de hígado se hace ahora con éxito cada vez mayor y la de otros órganos sólidos, incluyendo, corazón, pulmón
y páncreas se lleva a cabo, al menos en forma experimental.
El banco de sangre juega un papel vital en los programas de trasplante en la transfusión de sangre y productos sanguíneos en el
trasplante.
TRASPLANTE DE MÉDULA ÓSEA

El trasplante de médula ósea se utiliza para tratar pacientes con diversos trastornos hematológicos como:
• varios leucemias
• Hemoglobulinopathies como la talasemia mayor
• el síndrome de inmunodeficiencia
• enfermedades malignas
los receptores de trasplante de médula ósea presentan diferentes tipos de problemas que los receptores de trasplante de órganos sólidos:
• El receptor de trasplante de médula ósea está totalmente ablación antes de recibir un ósea alogénica, debido a que el
receptor está en riesgo de infecciones oportunistas.
297
• injerto de médula ósea alogénico tiene linfocitos inmunológicamente potentes, y los linfocitos del donante puede
reconocer y responder a la antígenos HLA en el receptor, lo que resulta en la enfermedad de injerto contra huésped
(EICH). El rechazo del injerto y la enfermedad son más graves con los antígenos HLA no coincidentes. HLA-A, HLA-B,
HLA-C y HLA-DR a juego de donante y receptor es importante.
• Otra diferencia es que los antígenos ABO no sirven como una barrera de trasplante para los receptores de médula. La
incompatibilidad ABO donante-receptor no aumenta la incidencia de rechazo del injerto o GVHD. Los datos muestran que los
antígenos ABO no están presentes en células madre
Las células rojas de la sangre Transfusión en BMT
• Los principales receptores de trasplante ABO compatible requieren pocos glóbulos rojos transfusión de que en el trasplante ABO
incompatibles. anticuerpos ABO pueden causar retraso en donantes de producción de glóbulos rojos, lo que exige más transfusión de
glóbulos rojos. La mediana del tiempo para la desaparición de anticuerpos incompatible en ABO - trasplante incompatible es de
alrededor de 38,5 días (rango de 0 -116 días).
• Durante el trasplante, las células de médula ósea madre hematopoyéticas del receptor y el sistema inmunológico se
extirpan y se reconstituyeron con células del donante. Esto causa problemas en los bancos de sangre relacionada con
soporte transfusional y la selección de sangre durante el injerto. Se hace difícil decidir si utilizar componentes de la sangre
del grupo sanguíneo ABO del donante o receptor de.
• Para grandes receptores de médula ABO-incompatible, de tipo receptor RBCs se proporcionan hasta que no hay
anticuerpos detectables en plasma incompatibles y la prueba de DCT es negativo. Cualquier producto que contenga plasma
deben ser de tipo donante, para evitar la transferencia pasiva de anticuerpos incompatibles A y B.
Por ejemplo, en el grupo O paciente que recibió el grupo A trasplante de médula ósea, el paciente continúa para
producir anti-A y anti-B. En este grupo situación se da O glóbulos rojos transfusión hasta que ya no se detecta anti-A.
Componentes que contienen una cantidad significativa de plasma, tales como plaquetas y FFP deben ser compatibles
con los grupos donantes de sangre. En este grupo de casos se deben utilizar A plaquetas o FFP.
• Para los trasplantes menores ABO-incompatible ósea, (grupo sanguíneo receptor A / B y de los donantes O grupo ósea)
RBC debe ser de tipo donantes, y productos de plasma deben ser de tipo receptor hasta RBCs receptores ya no se
detectan.
• Para el trasplante que son a la vez mayor y menor ABO incompatible, glóbulos rojos deben ser grupo O y productos de
plasma deben ser de grupo AB.
Por ejemplo, en caso de que el grupo B ósea es trasplantado en un receptor de grupo o inversa, a continuación, se utilizan grupo O
glóbulos rojos y plasma de grupo AB o plaquetas.
Las transfusiones de granulocitos en BMT
transfusiones de granulocitos son beneficiosos en pacientes granulocitopénicos (<0,2 x 10 9 granulocitos /

L) que tienen la infección no responde a los antibióticos. Sin embargo, ciertos problemas están asociados con las transfusiones de
granulocitos como:
• colección granulocitos insuficiente para la dosis efectiva transfusión.

• Corto tiempo de supervivencia intravascular de granulocitos (aproximadamente 6 horas), lo que sugiere la administración diaria de
granulocitos es demasiado frecuente.
• Los anticuerpos de transfusiones de eritrocitos anteriores pueden limitar las transfusiones de granulocitos eficaces incluso de HLA
emparejado o donantes parciales HLA compatibles. 298

Transfusión en el trasplante
• Incrementar incidencia de la infección por CMV después granulocitos transfusiones.

transfusiones de granulocitos se debe continuar hasta que el recuento de los granulocitos es de más de 0,2 x 10 9 / L. Sin embargo
las tasas de injerto WBC más rápida con el uso de GM-CSF y G-CSF reducir el período de granulocitopenia; transfusiones de
granulocitos tienen un uso limitado.
Plaquetas transfusiones en BMT Indicaciones de
plaquetas transfusiones son:

• Cuando las plaquetas recuento cae a <15 a 20 x l0 9 / litros (sangrado espontáneo generalmente no se produce hasta que los
recuentos de plaquetas son <5 a 10 x 10 9 / litro).
• Cuando las plaquetas se cuentan> 20 x l0 9 / litros con sangrado o asociada con GVHD o infección viral.
La dosis para adultos de las plaquetas es 2.4-3x10 11 plaquetas. Esto puede ser proporcionado mediante la infusión de las plaquetas
separadas de 5 a 6 unidades de sangre entera (450 ml) u obtenidos de un donante por plaquetoféresis. Aloinmunización se retrasa y / o
disminuye por el uso de plaquetas de un solo Dolor. Leucocitos - productos de la sangre pobre puede disminuir la incidencia de
aloinmunización y la refractariedad a la transfusión de plaquetas.
Complicaciones y su gestión:
• BMT los pacientes son a menudo immnuosuppressed y pueden estar en el riesgo de enfermedad de injerto contra
huésped (EICH), que es una complicación potencialmente fatal por linfocitos transfundidos. El tratamiento de células
rojas y plaquetas por irradiación gamma en condiciones controladas inactiva los linfocitos y reduce el riesgo de GVHD.
• Algunos pacientes inmunodeprimidos corren el riesgo de infección por el virus de cytomegalous (CMV) transmitida por la
transfusión de sangre. Esto puede evitarse o reducirse por la transfusión de sangre que se prueba y no contiene anticuerpos
CMV o por el uso de componentes de la sangre leucocitos-agotados.
conclusiones
Antes de transfusiones de BMT
• La transfusión de sangre o componentes antes de trasplante de médula ósea disminuye el éxito del injerto a largo plazo.
• Transfusión de sangre relativo, especialmente pariente que sirva como donante de médula, es probable que inmunizar al
receptor.
• Menor riesgo de inmunización con la sangre del donante al azar.
Para eliminar dar la inmunización:

• componentes celulares Leucocitos-agotado (glóbulos rojos / plaquetas)
• componente único donante (por ejemplo, plaquetas preparado a partir de aféresis)
• componentes celulares sanguíneos irradiados con radiación gamma
• componentes celulares de la sangre HLA compatibles
Sangre autóloga para Ósea Beneficiario

• Autólogo antes de la donación para el reemplazo de la sangre después de la cosecha ósea es un procedimiento muy útil y seguro y
reduce significativamente las enfermedades de transmisión de sangre y la inmunización.
• Aspirado de médula ósea y la pérdida de sangre es 300-1800 ml (promedio 1.000 ml). donante de médula ósea sufre una pérdida de
20 - el volumen de sangre 30%.
• La hemoglobina después de la donación debe ser 12,5 g / dl. El hierro se da si es necesario.
299
Esquema de autólogo Pre-depósito por Morrow Donor
Pre-dohation Días antes de

Donación Hb.g / dl Cirugía Vol. de donación
primero > 13 14 (9-27) 300 (200-350)

Segundo > 12 8 (4-20) 340 (200-450)
Transfusiones después de trasplante de médula ósea
■ Se requiere apoyo transfusión de glóbulos rojos hasta

• El injerto se produce
• la producción de células de la sangre es adecuada
• Para mantener la Hb 9-10 g / dl
■ Para prevenir la EICH:
componentes celulares de sangre (excepto sangre autóloga) deben ser irradiados.
■ Para prevenir el CMV:
Si el destinatario es negativa para CMV

• Utilizar componentes de CMV donantes seronegativos
• O utilizar filtros de alta eficiencia de reducción de leucocitos
Las plaquetas Transfusión:
• Las plaquetas se dan cada 2-3 días para mantener el recuento de plaquetas> 10.000 / ul
• Si el paciente se vuelve refractaria a los donantes de plaquetas aleatorias, HLA emparejado plaquetas, preparados a partir de
aféresis, se les da.
Granulocitos Transfusión:
• granulocitos profilácticos transfusión no se da.
• granulocitos terapéuticos rara vez son necesarios.
TRANSFUSION EN órganos sólidos TRANPLANTATION

trasplante de órganos sólidos es la terapia ideal para fallo del sistema de órganos en algunas enfermedades. El trasplante alogénico de tejido
extraño puede inducir una respuesta celular y humoral que a menudo conduce a rechazo del injerto. La gravedad del rechazo a menudo se
puede reducir mediante la selección de órganos con HLA compatible para el destinatario
Los antígenos del sistema ABO son también una barrera a la selección de órganos para el trasplante. Todos los individuos normales poseen
isoaglutininas a aquellos antígenos que carecen. Por lo tanto, las mismas reglas que rigen la selección de sangre para transfusiones se aplican a la
selección de la mayoría de trasplante renal y cardíaca.
Además de las pruebas de laboratorio, rechazo de injerto se puede minimizar con la terapia inmunosupresora. Los
esteroides disminuyen la respuesta humoral y la respuesta celular puede ser inhibida con ciclosporina y azatioprina.
El tercer mecanismo que influyen se basa en la inducción de tolerancia a los antígenos específicos del donante. La transfusión de
sangre de un donante potencial promover la aceptación de injerto a través de la inducción de tolerancia si el paciente no está sensibilizado
después de transfusiones específicos del donante.
La transfusión de sangre en el trasplante hepático

El trasplante de hígado es una operación larga y compleja. Se realiza en pacientes que se encuentran generalmente en la etapa terminal de
insuficiencia hepática y con frecuencia tienen deficiencias de coagulación y trombocitopenia. 300

Las necesidades de transfusión de estos pacientes son más que cualquier otro trasplante debido a:
• Riesgo de sangrado excesivo debido a la presencia de trastornos hemorrágicos pre-existentes, tales como varices
esofágicas.
• Los factores técnicos asociados con la cirugía largo y complicado.

• Enfermedad asociada disfunciones hemostáticos (deficiencia múltiple coagulación y trombocitopenia).
• La eliminación del hígado durante la cirugía abandonan el ahepatic paciente durante algún tiempo, lo que complica aún
más la coagulación. Esta fase se asocia con:
Disminución de los factores VIII y V

Disminución de Aumento de fibrinógeno en la
fibrinólisis
Este período continúa hasta aproximadamente 30-60 minutos después de la revascularización de hígado de
donante y durante este período es muy difícil mantener la hemostasia.
• El período post operatorio se asocia a menudo con estado de hipercoagulabilidad, tal vez debido a la lenta recuperación de los
niveles normales de proteínas anticoagulantes tales como la antitrombina III y la proteína C y S después de la cirugía.
Requisito de la sangre y sus derivados:

• En hígado promedio los pacientes de trasplante requieren de 15 a 30 unidades de sangre entera o glóbulos rojos, de 20 a 30
unidades de plasma fresco congelado (FFP), de 10 a 20 unidades de plaquetas de donantes al azar (o equivalente por
plaquetoféresis) y de 8 a 10 unidades de crioprecipitado durante la operación y en el período post operatorio inmediato.
• salvamento intraoperatoria puede reducir la necesidad de unidades de sangre durante la operación.
• En la fase temprana de la operación, el uso de sangre entera puede ser estrategia óptima, ya que proporciona soporte volumen
necesario, la capacidad de transporte de oxígeno y factores de coagulación estables.
• Durante la fase ahepatic ya que hay cese de la producción de factores de coagulación y fibrinólisis mejorada.
se requieren FFP y crioprecipitado (factor VIII) junto con las células rojas.
• trasplante de hígado niños pueden requerir una media de 4 unidades de glóbulos rojos (0,6 unidades de glóbulos rojos / Kg de
peso corporal), de 7 a 8 unidades de FFP, de 3 a 4 unidades de plaquetas, y de 1 a 2 unidades de crioprecipitado.
Monitoreo de la coagulación:
• La coagulación se controló cada hora con el tiempo rápidamente ensayadas de protrombina, tiempo de tromboplastina parcial, el
nivel de fibrinógeno, recuento de plaquetas y otros factores clave de la coagulación (por ejemplo, V y VII) si está indicado.
• La aprotinina es serina bovina inhibidor de la proteasa, lo que reduce la fibrinolisis y protege la función plaquetaria durante
la cirugía. Sin embargo, su régimen de dosificación no se ha normalizado, reacciones anafilácticas y la trombosis se han
reportado durante el trasplante de hígado.
Consideraciones de ABO y Rh:

Excepto en casos de emergencia, los donantes hígados deben ser compatibles-ABO con el receptor y ABO se utiliza glóbulos rojos idcntical
y plasma forzen fresco. En el caso de los receptores de masivas grupo de transfusión A / B puede ser sitched al grupo O glóbulos rojos y de
grupo destinatarios AB se pueden conmutar al grupo A
301
Los glóbulos rojos. Si el suministro de AB FFP es insuficiente, el uso temprano de un grupo de glóbulos rojos seguido de un interruptor para el
grupo A FFP es apropiado. Una regla gneral para transfusión masiva es cambiar glóbulos rojos primero, luego cambiar plasma, y revertir el
orden al volver a tipo de sangre original del paciente. soporte transfusional de RH (D) de los pacientes negativos al no immunizd al antígeno D
no está estandarizado. Sobre todo se prefiere proporcionar sangre D-negativa a las mujeres premenopáusicas D-negativo, si se exceptúan las
necesidades a ser moderados. Si se produce pérdida masiva de sangre, el paciente podría entonces ser cambiado intra-operativamente a
sangre D-positivo, si es necesario. La producción de anti-D se produce con menor frecuencia en los pacientes con trasplante de hígado
D-negativo. D-machos y hembras negativo posmenopáusicas D-negativos sin anti-D en la sangre pueden ser transfundidos con sangre
D-positivo.
Consideraciones de la coagulación:
Durante la cirugía, la hemodilución, el consumo de plaquetas, la regulación de trombina desordenada, y la fibrinólisis trastornar el
proceso hemostático. La coagulopatía es especialmente grave durante la fase de reperfusión anhepática y principios. Hematocrito
guía el uso de glóbulos rojos, coloides y cristaloides; el recuento de plaquetas guía a la transfusión de plaquetas; el tiempo de
protrombina y tiempo de tromboplastina activada uso guía parcial de FFP; determinaciones de fibrinógeno guiar el uso de
crioprecipitado AHF y agentes atifibrinolytic.
problemas serológicos en el trasplante de hígado:

• DAT positivo y aloanticuerpos antes de la cirugía, ya que muchos pacientes de trasplante de hígado Ya ha recibido
muchas transfusiones de sangre, pueden causar problemas en la evaluación serológica pre-transfusión.
• lympocytes donantes de órganos trasplantados con el pueden continuar para sobrevivir y funcionar en los receptores.
linfocitos B trasplantadas pueden continuar para producir anticuerpo (s) que pueden producir en el donante.
La producción de células rojas derivadas del donante anticuerpo (s) se producen con mayor frecuencia en el receptor que reciben ABO hígado
incompatible. En tales casos anticuerpo derivado donador (es) de desarrollar en 1 a 2 semanas y puede persiste durante 6 meses.
Donantes de derivados de anticuerpo (s) puede resultar en DAT positivo. Durante este período de sangre seleccionado para la
transfusión debe ser compatible tanto con el receptor y el anticuerpo derivado del donante (es).
• Gran cantidad de transfusión de sangre puede causar irnmunosuppression en el paciente.
• Los pacientes que reciben gran volumen de sangre pueden tener una mayor tasa de infección bacteriana y la transmisión del
CMV.
Transfusión de sangre en el trasplante renal

El trasplante renal es el procedimiento más simple y más rápido quirúrgico que otros trasplantes de órganos sólidos. Las mejores tasas de
supervivencia del injerto se obtienen cuando los riñones se obtienen de HLA idéntico, hermanos compatibles ABO pero tales donantes están
disponibles para sólo unos pocos casos. Tres estrategias generales son considerados por los cirujanos de trasplantes y los inmunólogos antes
del trasplante para minimizar el rechazo del injerto;
(1) El uso de agentes inmunosupresores como la azatioprina, prednisona y ciclosporina.

(2) El juego de antígenos donantes y receptores para minimizar injerto 'extrañeza'. Antígeno
disparidades que el rechazo del injerto efecto incluyen los antígenos de los grupos sanguíneos ABO y antígenos HLA. No
está claro qué combinación de HLA productos génicos a juego promueve 302
Transfusión en el trasplante
la supervivencia del injerto óptimo. HLA-DR es el más crítico para una buena supervivencia del injerto. En los receptores
altamente sensibilizados, es necesario para que coincida para HLA-A y HLA-B debido a la presencia de anticuerpos de clase 1.
En los receptores altamente sensibilizados, la identificación de anticuerpos séricos HLA también es importante.
(3) La inducción de tolerancia a los antígenos específicos del donante: Varios estudios han demostrado que
específica del donante transfusiones de sangre y trasplantes de individuos que viven relacionados tienen beneficios potenciales.
Los efectos de la transfusión de sangre en el éxito del trasplante renal son complejos y paradójica. La transfusión de sangre
puede conducir a la inmunización anticuerpo HLA. Sin embargo, las tasas de supervivencia de injerto se mejoran con la sangre
pre-trasplante que no resulta en la formación de anticuerpos HLA. Se ha observado que el efecto de la transfusión se pierde con los
nuevos agentes inmunosupresores. Preferiblemente transfusión de glóbulos rojos reducido de leucocitos con filtros de
leucocitos-deplated se debe dar a reducir las posibilidades de la inmunización.
Los datos para re-combinant Epo, G-CSF y GM-CSF llevaron su uso rutinario en pacientes con insuficiencia renal. Terapéuticamente
niveles efectivos se mantienen después de la inyección intravenosa o subcutánea única durante 24 horas. Un aumento en los recuentos de
reticulocitos se produce en 10 días si no se da todos los días de EPO. Epo evita la exposición viral y reduce la sensibilización HLA asociado
con la transfusión de sangre.
La transfusión perioperatoria
Con el cambio general en la práctica quirúrgica intraoperatoria, los niveles de hematocrito inferiores (30%) se aceptan sin transfusión. Algunos
investigadores han encontrado una mayor incidencia de la función retardada del injerto cuando el nivel de hematocrito del paciente es superior
al 30%. Esto se ha atribuido a la formación de sedimentos de la sangre en la microcirculación. Las cantidades mínimas de células rojas se
utilizan durante trasplante de riñón, y rara vez se requieren otros componentes. Mayormente dos unidades transversales emparejados se
mantienen para el trasplante de riñón. Muchos institución sólo tiene que utilizar procedimiento de recepción y de pantalla.
TRANSFUSION EN trasplante de corazón:

El trasplante de corazón se realiza para tratar cardiopatías y la etapa final de la enfermedad isquémica del corazón. Como corazón tiene
tiempo de isquemia total de extremadamente corto (3 horas para el corazón, en comparación con 72 horas para los riñones) acorde con
HLA no es factible. tiempo de isquemia total es la duración durante la cual no hay flujo de sangre a través de órganos. La prueba de HLA
más importante a cabo antes del trasplante es la HLA anticuerpos de detección. Recipientes sin anticuerpos HLA reciben trasplantes sin
HLA - coincidente. Aquellos con anticuerpos HLA Require-partidos transversales pretrasplante para la clase 1 y partido 11 HLA para
determinar la compatibilidad donante-receptor.
Los trasplantes de corazón necesitan un promedio de 5 a 6 unidades de glóbulos rojos, 4 unidades de FFP e Ito 2 unidades de
plaquetas.
TRANSFUSION EN PULMÓN TRASPLANTE:
Mayoría de los casos con enfisema y la fibrosis quística necesitan trasplantes bilaterales. Las indicaciones para el trasplante de un solo
pulmón son fibrosis pulmonar y enfisema. Además, más pacientes ahora sometidos a un trasplante de un solo pulmón para la
hipertensión primaria, previamente tratados por el trasplante de corazón-pulmón.
tiempo de isquemia corto como el corazón, la compatibilidad HLA no es posible. Sin embargo, la compatibilidad HLA entre el receptor y el
donante jugar un papel importante en el trasplante de donante vivo en la tasa de supervivencia del injerto.
El requisito de la sangre y sus componentes es similar a la de trasplante de corazón. 303
TRANSFUSION EN trasplante de páncreas:

La principal indicación de trasplante de páncreas es la diabetes. La mayoría de los trasplantes de páncreas son simultáneo de páncreas /
trasplantes de riñón, el mismo número de trasplantes de páncreas después del trasplante de riñón y algunos trasplantes de páncreas solo. El
aumento de las tasas de supervivencia a largo de trasplante se han reportado con el HLA-DR juego.
Los trasplantes de páncreas solo necesitan aproximadamente 2 unidades de glóbulos rojos y los trasplantes de riñón y páncreas receptores
necesitan un promedio de 3-4 unidades de glóbulos rojos.
Debido a los riesgos de complicaciones cardíacas con el trasplante de páncreas, el trasplante de células de los islotes se ha
perseguido activamente.
304
21
Preparación de la
solución Y
Métodos
T que definiciones, cálculos dados a continuación servirán como principios simples necesarios para la preparación de soluciones.
definiciones:
Mole, peso molecular-gramo
Peso, en gramos, de una sustancia es igual al peso molecular de la sustancia.
Solución molar
Una solución uno molar (IM) contiene un mol de soluto en un litro de solución. El disolvente es generalmente agua destilada a menos que
se indique lo contrario.
Equivalente gramo de peso:

Peso en gramos de una sustancia, que producirá o reaccionar con un mol de ion hidrógeno.
Solución normal:
A una solución normal (IN) contiene un gramo de peso equivalente de soluto en un litro de solución.
Porcentaje solución:
El porcentaje de solución da el peso o el volumen de soluto presentes en 100 unidades de solución total. Porcentaje se puede
experessed como:
• Peso / peso (w / w) - gramos de soluto en 100 g de solución de

305
• Volumen / volumen (v / v) - mililitros de soluto en 100 ml de solución

• Peso / volumen (w / v) - gramos de soluto en 100 ml de solución
pesos atómicos (redondeado a números enteros):

• H = L; 0 = 16; Na = 23; Cl = 35; K = 39; P = 31; S = 32
Los pesos moleculares:
• NaH 2 correos 4 = 23 + 2 + 31 + 64 = 120 g
• KH 2 correos 4 = 39 + 2 + 31 + 64 = 136 g
soluciones molares:
• 1MKH 2 correos 4
• El peso molecular de KH 2 correos 4 = 39 + 2 + 31 +64 = 136 g
• 1 M KH 2 correos 4 requiere 1 x 136 = 136 g de soluto KH 2 correos 4 hecho hasta 1000 ml de agua destilada.
• 0.15MNaH 2 correos 4. 2H 2 O
• El peso molecular de NaH 2 correos 4. 2H 2 O = 23 + 2 + 31 + 64 + 36 = 156 g
• 0,15 M NaH 2 correos 4. 2H 2 O requiere 0,15 x 156 = 23,4 g de soluto

• NaH 2 correos 4. 2H 2 O hecho hasta 1000 ml de agua destilada
soluciones normales:
• EN NaOH
• El peso molecular de NaOH = 23 + 16 + 1 = 40 g
• IN NaOH requiere 1x40 = 40 g de soluto (NaOH) hecha hasta 1000 ml de agua destilada.
Un mol de NaOH se disocia en un mol de H +, por lo gram-equivalentweight y el peso

gramo-molecular son los mismos.
• HCl 1N
El peso molecular de HCL = 36g
En HCl requiere 36 g de soluto hecho hasta 1000 ml de agua destilada. Un mol HCL se disocia en un mol H +,
por lo que el peso equivalente gramo y el peso molecular gramo son los mismos.
• 1NH 2 ASI QUE 4
El peso molecular del H 2 ASI QUE 4 = 98g 1 NH 2 ASI QUE 4 = ( 98 ± 2) = saludo 49g compone de agua destilada 1 L. Un mol
H 2 ASI QUE 4
se disocia para dar 2 moles de H +, por lo que el peso equivalente gramo es la mitad del peso molecular gramo
es decir, 49 g.
Porcentaje Solución:
0,9% de NaCl es solución salina normal
solución salina normal requiere 0,9 g de soluto (NaCl) hecha hasta 100 ml de agua destilada, pH
07.02 a 07.04
306
Preparación de la solución Y Métodos
tampón fosfato, Iso-osmótica

Preparar dos soluciones stock (A) 0.15MNaH
2 correos 4. 2H 2 O 23,4 g / L
(SEGUNDO) 0.I5MNa 2 HPO 4 21,3 g / L
Preparar soluciones de tampón de trabajo de la pH deseado mediante la mezcla de volúmenes apropiados de las dos soluciones. Algunos
ejemplos son:
pH Una solución de solución B
7.0 32,0 ml 68,0 ml

7.2 24.0 ml 76,0 ml
7.4 18.0 ml 82.00 ml
7.6 13.0 ml 87.0 ml
7.7 9,5 ml 90,5 ml
suero humano normal tiene una osmolaridad de 289 ± 4 mM. Hendry (1961) recomienda ligeramente diferentes concentraciones
de la solución madre, es decir, 25,05 g / L NaH 2 correos 4. 2H2O y 17.92g / L Na2HPO4, por un tampón iso-osmótica.
solución salina tamponada con fosfato
• Tomar un volumen igual de tampón iso-osmótica, pH 7,4 y 9 g / L de solución salina normal. solución salina tamponada es ciertamente
mejor que la solución salina normal para la suspensión de los glóbulos rojos para su uso durante el período de almacenamiento y 12-24
horas a 4 ° C.
HEMOGLOBINA ESTIMACIÓN de Donantes de Sangre sulfato de cobre

SOLUCIÓN MÉTODO GRAVEDAD ESPECÍFICA
El método se basa en la gravedad específica y es razonablemente método fiable para la determinación de la hemoglobina de los
donantes de sangre. Es medida indirecta de la Hb.
Preparación de solución de sulfato de cobre
CuSO 4 solución del sp. gramo. 1053 se utiliza para la estimación de la Hb.
Método -1 Preparación de CuSO 4 Solución

Preparar solución madre de sulfato de cobre (sp.gravity 1.100)
• Disolver 159.63 de cristales secados al aire puro de sulfato de cobre (CuSO 4 5H 2 O) en agua destilada y hacer hasta
exactamente 1000 ml a 25 ° C. El peso específico de la solución debe ser 1.100.
Preparación de CuSO 4 solución de 1,052 a 1,055 gravedad específica
Sp.gr Solución de reserva Agua destilada hb equivalente

1,052 51 ml 100 ml 12.0
1,053 52 ml 100 ml 12,5 g
1.054 53ml 100 ml 13,0 g
1.055 54 ml 100 ml 13,4 g
La solución debe ser almacenado a temperatura ambiente en recipientes herméticamente cerrados para evitar la evaporación.
307
MEDICINA transfusión Manual técnico
Método-2
Disolver 8,33 g de cristales secados al aire puro de sulfato de cobre (CuSO 4 5H 2 O) en 100 ml de agua destilada. El peso
específico de la solución debe ser 1.053.
Control de calidad
validación funcional de Procedimiento solución de sulfato de cobre:
1. Cada lote de CuSO 4 se debe comprobar con muestras de sangre de la hemoglobina conocido en una
oscilar alrededor de 12,5 g / dl, (por ejemplo, 12 g / dl; 12,5 g / dl; 13,0 g / dl y 13,5 g / dl)
2. colocar suavemente una gota de cada muestra de sangre en CuSO 4 solución del sp. gramo. 1.053.
3. Gotas de todas las muestras de sangre con hemoglobina de 12,5 g / dl o superior se hundirá y aquellos
con el nivel de Hb por debajo de 12,5 g / dl flotará.

Medición de la gravedad específica de CuSO 4 solución
La gravedad específica de la CuSO se puede medir directamente con un hidrómetro calibrado, una gravedad específica 1,053 + 0,0003 g /
ml hace que la solución de CuSO4 aceptable para uso en la selección de donantes.
Procedimiento
Un CuSO 4 solución de gravedad específica 1,053 se utiliza para determinar el nivel de hemoglobina de
12,5 g / dl.
1. Dispensar 30 ml de solución de sulfato de cobre (sp.gr 1,053) en debidamente etiquetado limpio,

seco, tubo o botella. Cambie la solución diariamente o después de 25 pruebas y asegúrese de que la solución se mezcla
adecuadamente antes de su uso.
2. El sitio de la punción de la piel es decir, la punta del dedo se limpia con una solución antiséptica y se dejó
seco.
3. lanceta estéril desechable se utiliza para el pinchazo y no debe haber libre circulación de la sangre.
4. La gota de sangre se recoge ya sea en tubo capilar o una pipeta y se dejó caer
suavemente desde una altura de lcm encima de la superficie de la solución de sulfato de cobre.
5. La caída se encapsulado en un saco de proteinato de cobre, lo que impide cualquier cambio en concreto
gravedad durante unos 15 segundos. Si la gota de sangre se mantiene en la superficie, o se eleva desde la parte inferior de la
solución, la caída es más ligero que la solución de CuSO4 y el contenido de hemoglobina de la sangre es inferior a 12,5 g / dl. Sin
embargo, si la gota se hunde dentro de los 15 segundos, Hb de la sangre es 12,5 g / dl + 0,19 o más.
Nota: Si el nivel de proteína del plasma de donantes es el límite inferior de la normalidad, es posible un donante puede ser rechazada si él /
ella puede haber requerido Hb.
fuente correctores de errores en Hb estimación por el método de sulfato de cobre;
• Tomando primera gota de sangre de pinchazo en el dedo.
• Exprimir el dedo debido a que la sangre no fluye libremente.
• pipeta sucia (pipeta no purgada adecuadamente cada vez).

• Viruta de la entrega final de la pipeta. 308
Cianmetahemoglobina (HICN) Método Principio
La base del método es la dilución de la sangre en una solución que contiene cianuro de potasio y ferricianuro de potasio.
Hb, Hola y COHb (pero no SHb) están convertidos en HiCN.
La absorbancia de la solución se mide a continuación, en colorímetro fotoeléctrico a una longitud de onda de 540 nm o con un
filtro verde.
reactivos necesarios
• reactivo de modificación de Drabkin (diluyente)
• Cianmetahemoglobina (HiCN) solución estándar.
Modificado solución de Drabkin para la estimación de la Hb por el método (HiCN):
Ferricianuro de potasio 200 mg

Cianuro de potasio 50 mg
Dihidrógeno fosfato de potasio 140 mg
Nomidet P40 (Shell Chemical Co.) 1 ml
Agua destilada 1L
Otros detergentes no iónicos que pueden ser utilizados en lugar de Nomidet incluyen Sterox SE (Harleco)
0,5 ml, Triton X - 100 (Rohm y Hass) 1 ml o Saponic 218 (Alcoac Inc.) de 1 ml. El reactivo debe ser clara y de color
amarillo pálido y el pH debe ser 7,0 a 7,4.
Cuando se mide contra agua como blanco en un colorímetro fotoeléctrico a una longitud de onda de 540 nm. La absorbancia debe
leer cero. La solución de Drabkin está disponible comercialmente.
Cianmetahemoglobina (HiCN) solución patrón

• Estándar solución está disponible comercialmente.
• los solución no utilizada debe desecharse al final del día en el que se abre la ampolla, para evitar la
contaminación.
• La solución estándar HiCN se utiliza para la comparación directa con la sangre, que también se convierte en HiCN en
solución de Drabkin.
Muestra de sangre
• La medición puede llevarse a cabo en la sangre que se ha almacenado en EDTA (1,5 mgm EDTA / ml) AT4 ° C.
• sangre capilar fresca de pinchazo en el dedo también se puede utilizar si se añade inmediatamente a la solución de reactivo.
Método
1. Encender el colorímetro fotoeléctrico y esperar 15-20 minutos para calentarse antes de su uso.
2. Añadir 20 | il de sangre a 4 ml de diluyente. Tapar el tubo que contiene la solución y invertido
varias veces. Dejar reposar a temperatura ambiente durante 5-10 min para garantizar la finalización de la reacción.
Esta solución de HiCN está listo para ser comparado con la norma.
3. Seleccionar filtro de longitud de onda 540 nm.
4. Ajuste el colorímetro en cero frente al blanco (Sol de Drabkin.).

309
5. Medir la absorbancia de la solución estándar HiCN (llevó a temperatura ambiente si

previamente almacenado en el refrigerador) en el colorímetro frente al blanco.
6. Observe el valor de la absorbancia de la solución de ensayo preparada como en el paso 2.
Interpretación
• Registre el valor de absorbancia (A) directamente en el colorímetro calibrado para lectura directa de Hb en g / dl.
• Si el colorímetro no es para tomar la lectura directa de la hemoglobina ficha g / dl las lecturas de la observancia y
la hemoglobina se pueden calcular a partir de la siguiente fórmula: -
tes tde dilución Std. Conc.of×std el de A ( p.ej 201 )

540
la de A dl g / Hb Factor
=
540
×
1000
Nota: Absorbancia, antes llamada densidad óptica
precauciones
• La sangre no debe ser coagulada.
• El reactivo debe desecharse, si se vuelve turbia.

• La mezcla de la sangre y el reactivo debe ser clara. La turbidez es debido a la contaminación y dar resultado falso.
• Pipeta debe ser precisa para tomar 20 ul de sangre.
• Solución estándar debe ser desechado al final del día en que se abre la ampolla.
SISTEMA DE HEMOGLOBINA HEMOCUE
sistema de hemoglobina Hemocue es método preciso, exacto para medir la hemoglobina. Consiste en:
1. Auto -Llenado microcubeta desechable con el reactivo en forma seca. Que sirva como una pipeta, prueba
tubo de medición cubeta todo en uno.
2. cubeta de control se suministra con cada fotómetro para la verificación de la calibración de la
fotómetro.
3. Fotómetro calibrado en la fábrica contra el cianmetahemoglobina método (HiCN)
• Medición a 570 nm y 880 nm
• pone a cero automáticamente después de las mediciones
• Comprueba automáticamente la intensidad de la luz y el funcionamiento de las fotocélulas
• La reacción química tiene lugar en la cubeta y el fotómetro muestra automáticamente el resultado en menos de
60 segundos.
• rango de medición de hemoglobina 0-25,6 g / dl
ventajas:
• manejo seguro e higiénico rápida
• La exactitud es de ± 1,5%
• Microcubeta dibuja automáticamente volumen preciso de sangre

• No dispensación sangre, pipeteado, o mezcla de sangre con el reactivo 310
LECTINAS
Son extractos salinos de semillas que tienen la propiedad aglutinando con antígenos específicos y son útiles como reactivos de grupo de
escritura.
Extracto de Dolichos biflorus → Lectina Anti-A 1 Un aglutina 1, células pero no una 2 células Extracto de Ulex europaeus →
Anti-H. Reacciona con células que tienen actividad de antígeno H Vicia graminia → Anti- N. Se reacciona con células que
tienen N antígeno anti-A 1, y anti-H están disponibles comercialmente.
POLYAGGLUTIEVATION
Parcialmente polyagglutination está asociada con infecciones bacterianas o virales y desaparece cuando se elimina la infección. enzimas
microbianas altera la estructura normal de la membrana de glóbulos rojos y expone a los receptores ocultos tales como T, Tk, Th y VA. Todo
normal de sueros humano adulto contiene anti- T y reacciona con el cryptantigen T expuesta. La mayoría cable de falta sueros anti-T. Por lo
tanto, los sueros cable de ABO compatible puede utilizarse como reactivo de escribir. Monoclonal anti-A y anti-B también pueden ser utilizados
para obtener resultados válidos con células polyagglutinable. Las lectinas (extractos semillas) también se pueden utilizar para detectar
polyagglutination. (Véase la tabla 19.2)
Una mutación somática (Tn) es persistente y las formas heredadas (por ejemplo, CAD) son permanentes.
Tabla 19.2: Reacción (polyagglutination) de las células rojas con lectinas
Las lectinas T tk Th Tennesse Canalla
Archis hypogaea (tuerca guisante) + + + - -
Dolicus - - - + +
Glicina Soja (soja) + - - - +
Salviasclarea
- - - + -
MÉTODO salinas para anticuerpos IgM PRUEBAS

método Saline es la técnica serológica más simple para la determinación de la reacción de los anticuerpos IgM contra ABO, H, Ii, MN,
Lewis (Le una, Le segundo), Lutheran (Lu), y P grupos sanguíneos antígenos. Los anticuerpos IgM son aproximadamente 750 veces más eficiente
que la IgG en la reacción de aglutinación. El pentámero de IgM, con un diámetro de 1,000 A, tiene la capacidad de cerrar fácilmente la
distancia entre las células rojas y causa la aglutinación. Los anticuerpos IgM reaccionan a temperatura inferior (4-27 ° C). Los anticuerpos
IgM son capaces de células rojas de aglutinación en suspensión en solución salina 0,85%.
Método
1. Ponga 2 gotas de suero de ensayo o suero conocido en tubo debidamente etiquetado.
2. Añadir 1 gota de 2-4% de suspensión de glóbulos rojos apropiadas en solución salina y mezclar.
3. Incubar a temperatura ambiente durante 30-45 min. En caso de urgencia, centrifugar los tubos a 1000 rpm durante 1 min.
Después de 5-10 min. incubación a temperatura ambiente (método de la vuelta)
4. Observe el líquido sobrenadante para la presencia de hemólisis contra un bien iluminado

fondo.
5. dispersar suavemente el botón de células y detectar aglutinación contra un bien iluminado
fondo.
311
6. Cuando no se observa aglutinación visualmente, examinar el contenido bajo el microscopio.
7. Registre el resultado inmediatamente.
Interpretación
La aglutinación o hemólisis es un resultado positivo.
Métodos para las pruebas de anticuerpos IgG

anticuerpos IgG se adquieren anticuerpos (inmunes) y son clínicamente significativos. Ellos son responsables de las reacciones transfusionales
hemolíticas y enfermedades hemolíticas del recién nacido. Para detectar la presencia de anticuerpos IgG varios medios de comunicación se
utilizan para mejorar y potenciar la reacción antígeno-anticuerpo. Varios medios de mejora / reactivos están dirigidos a la reducción de la carga
neta negativa (potencial zeta) en la superficie de los glóbulos rojos, para más detalles, véase el capítulo sobre los principios fundamentales de la
inmunología. La mejora media / reactivo utilizado generalmente para la detección de anticuerpos IgG son 22% de albúmina, enzimas, bajo
solución de fuerza iónica (LISS), y los sueros globulina antihumana.
PRUEBAS albúminas para IgG
La albúmina se utiliza en serología de grupos sanguíneos como
(yo) concentración 22% para mejorar la aglutinación de glóbulos rojos recubiertos con anticuerpos IgG (ii) concentración de 1-7% como
estabilizador en otros reactivos, especialmente aquellos que deben almacenarse a

4 ° C.
Mayormente 22% de albúmina bovina se utiliza para mejorar la aglutinación de células rojas recubiertas con anticuerpos de IgG para la
detección e identificación de anticuerpos IgG, a juego transversal y tipificación celular.
Método
Un método de una etapa (albúmina se utiliza como aditivo)
1. Añadir dos gotas de suero de prueba o suero conocido a un tubo etiquetado
2. Añadir una gota de 2-4% de suspensión de glóbulos rojos apropiados en solución salina
3. Añadir dos gotas de albúmina bovina 22%
4. Mezclar e incubar a 37 ° C durante 30-60 min
5. Centrifugar a 1000 rpm durante Lmin
6. resuspender suavemente el botón de células y observar la aglutinación / hemólisis
7. Confirmar todos los resultados negativos bajo el microscopio
8. La aglutinación o hemólisis es un resultado positivo

Dos Método Etapa albúmina (albúmina de estratificación)
1. Añadir 2-3 gotas de suero a un tubo etiquetado
2. Añadir 1 gota de suspensión de eritrocitos al 2-4% en solución salina en el tubo
3. Mezclar e incubar a 37 ° C durante 30 minutos

4. Centrifugar a 1000 rpm durante 1-2 minutos
5. Sin perturbar el botón de células, añadir suavemente dos gotas de 22% de albúmina a correr por la
interior del tubo. La albúmina se forma una capa en la parte superior de las células. Hacer la mezcla en caliente
6. Se incuba a 37 ° C durante 10-20 minutos
7. resuspender suavemente las células y observar la aglutinación / hemólisis

8. Confirmar todos los resultados negativos bajo el microscopio 312
técnica de una sola etapa (método aditivo) toma menos tiempo y se utiliza con más frecuencia, pero la técnica de dos etapas (método de
estratificación) es más sensible.
Nota: Las instrucciones del fabricante deben ser seguidas: La aglutinación
o hemólisis es un resultado positivo.
ENZIMAS
La reacción de cierto antígeno de grupo sanguíneo y anticuerpos se han mejorado de forma selectiva por el uso de enzimas. Las enzimas
mejoran la reactividad del anticuerpo a Rh. Kidd, P, Lewis y I antígenos y destruir o deprimir la reactividad a las células rojas antígenos Fy una, Fy segundo
M, N, S. Algunos de los enzimas utilizados en la detección de anticuerpos son los siguientes:
• La papaína (de papaya),

• La ficina (de las figuras),
• Bromelina (de piña)
• La tripsina (de estómago de cerdo).
Las enzimas reducen rojo carga negativa de la superficie celular y el potencial zeta. Para más detalles, véase 'Factores que afectan reacciones
antígeno-anticuerpo' en el capítulo sobre principios básicos o Inmunología. La papaína, ficina o bromelina se utilizan por lo general como solución
al 0,5% en solución salina tamponada con fosfato.
Hay dos técnicas de enzimas:

• técnica de enzima de una sola etapa: enzima se añade directamente a la mezcla de suero y células rojas.
• técnica de enzima en dos etapas: los glóbulos rojos se tratan previamente con las enzimas antes de la adición de suero.
Preparación de solución de papaína cisteína para 1- Escenario tecnica

La concentración de papaína en solución de papaína de baja es 1% en tampón fosfato pH 6,2, acompañado de hidrocloruro de
L-cisteína como un activador.
A. Preparación de tampón de fosfato (pH 6,2)
1. solución tampón madre de fosfato (a) M / 15

Na 2 HP0 4. 2H 2 0 11.866 gm + 1,000 ml DW
(segundo) M / 15 KH 2 P0 4 9.066 gm + 1,000 ml DW
Filtrar y mantenerlos por separado en condiciones de esterilidad en refrigerador a 4-6 ° C.
2. Preparación de solución de trabajo de tampón de fosfato en el momento de la preparación de solución de cisteína papaína que tiene
pH 6,2
M / 15 Na 2 HP0 4. 2H 2 0 M / 15 KH 2 P0 4
1 Vol 4Vol para pH 6,2

4Vol 1 Vol para pH 7,4
0.4 Vol 9.6 Vol pH 5,4
B. Preparación del reactivo cisteína papaína

1. 10 g de papaína (BDH / Merck 1: 350) se disuelve en 250 ml de tampón fosfato
(PH 6,2)
2. Mezcla. moler, si es necesario.
3. Centrifugar la solución después de 15 min., Separar el sobrenadante y desechar depósito, filtro
a través del filtro de Whatman No. 1.
313
4. 4,85 g de L-cisteína HCl (alemán) se añade en 25 ml de tampón de fosfato (pH 6,2).

5. Mezclar solución de papaína y solución de cisteína y añadir tampón fosfato (pH 6,2) para hacer el
volumen 1000 ml.
6. Incubar a 37 ° C durante 1 hora.
7. Ajustar el pH a 6,2, si es menor se puede aumentar mediante la adición de 5N - NaOH (10 g de NaOH en 50
ml H 2 0). Si el pH es más se descarta.
8. Almacenar en pequeña alícuota a -20 ° C.
Preparación de solución de papaína para 2-Etapa técnica
A. Solución madre de solución de papaína
(1) Suspender I g de papaína (BDH / Merck 1: 350) en 100 ml de solución salina tamponada con fosfato (Este
solución puede mantenerse durante varios meses a 4 ° C, pero se puede mantener mejor a -20 ° C). (2) Si se desea, esta
suspensión puede centrifugarse después de un almacenamiento durante 24 horas a 4 ° C con

agitación ocasional. El sobrenadante claro es ligeramente menos activo que la suspensión original.
B. Solución de Trabajo de la solución de papaína
Para su uso, se añade 1 volumen de la solución madre a 9 volúmenes de solución salina tampón de fosfato, pH 7,3, preparado
mediante la adición de 3 volúmenes de M / 15 Na2HPO4 (9,46 g / L) a 1 volumen de M. / 15 KH 2 P0 4 ( 9.07g / L)
Pruebas de enzimas para los
métodos de IgG
1. método de una etapa
2. método de dos etapas
La técnica de enzima de dos etapas es más sensible que la técnica de enzima de una etapa. Dos método etapa se utiliza para la
detección e identificación de anticuerpos IgG. método en una sola etapa se utiliza generalmente para la coincidencia de cruz y la
tipificación de células, ya que es muy conveniente. También se puede utilizar para la detección e identificación de anticuerpos de IgG en
suero.
Un método enzimático Etapa
1. Tome suero 1 vol en un tubo de ensayo.

2. Añadir 1 vol de reactivo de la papaína de cisteína.
3. Añadir 1 volumen de 2% suspensión de células en solución salina.
4. Incubar a 37 ° C durante 30-45 min.
5. Véase, por aglutinación. Confirmar resultado negativo bajo el microscopio.
NOTA: Autocontrol debe ser puesto.
Dos método enzimático Etapa
• Primera etapa de pretratamiento de los glóbulos rojos
1. Tomar 0,1 ml de 3 veces las células lavadas en un tubo de ensayo.
2. Añadir 0,2 ml de solución de papaína de trabajo.
3. Incubar a 37 ° C durante 15-30 min. 314

4. Lavar las células 3 veces con solución salina normal.
5. Hacer 2-4% de suspensión de células sensibilizadas en solución salina normal.
Segunda etapa-antígeno-anticuerpo reacción
1. Tome 2 volúmenes de suero en un tubo de ensayo.
2. Añadir 1 volumen de glóbulos rojos papainised.
3. Incubar a 37 ° C durante 30 min.
4. Véase, por aglutinación. Confirmar resultado negativo bajo el microscopio.
NOTA: Autocontrol debe ser puesto.
BAJA iónica de la solución FUERZA DE SAL (LISS)

medios de soluciones de baja resistencia iónica generalmente contienen cloruro de sodio 0,2%. Se da como resultado un aumento de la
frecuencia y el grado de absorción de anticuerpo de dos a cuatro veces en comparación con solución salina normal durante la sensibilización, con
un tiempo de incubación de 5-15 minutos. Sin embargo, todos los anticuerpos no son igualmente sensibles a LISS. Anti- A y anti-B permanecen
uneffected.
Usos de LISS
• Screening, identificación y cuantificación de anticuerpos

• Es útil en pruebas cruzadas de emergencia debido al tiempo de incubación corto
• Útil en la cirugía electiva, el suero del paciente se mantiene después de hacer grupo sanguíneo, rastreo de anticuerpos y de
compatibilidad cruzada se realiza bajo petición en el momento de la operación
Preparación de solución de bajo Ionic Strenght Sal (LISS) LISS
descrito por baja y Messeter consiste en:

0. 17 M Saline 180 ml
tampón 0,15 M de fosfato, pH 6,7 20 ml
0,3 M glicinato de sodio, pH 6,7 800 ml
Procedimiento para la preparación de un litro de LISS
1. 18 g de glicina se disuelve en aproximadamente 500 ml de agua destilada (glicinato de sodio no es

comercialmente disponible).
2. El pH se ajusta a 6,7 por adición gota a gota de NaOH 1 N.
3. se añaden 20 ml de tampón de fosfato (0,15 M) pH 6,7 a la solución de glicina. Fosfato
tampón (0,15 M) pH 6,7 se prepara añadiendo 0,15 M NaH 2 correos 4. 2H 2 O (23,4 g / L) a 25 ml de 0,15 M Na 2 HP0 4 ( 21,3 g /
L) hasta que el pH es 6,7. se necesitan volúmenes aproximadamente iguales de las soluciones de ambas.
4. se añade 1,79 g de NaCl disueltos en 100 ml de agua destilada a la solución.

5. La solución se completa hasta un litro con agua destilada, mezclar bien.
6. Ajustar el pH a 6,7 con NaOH 1 N.
7. Se esteriliza por filtración Seitz o tratamiento en autoclave para evitar el crecimiento bacteriano. Se puede añadir
Alternativamente baja concentración de azida de sodio 0,1 g / L.
8. Agregue 100 ml en viales pequeños esterilizados bajo flujo laminar. Almacenar a 4 ° C oa -20 ° C a
evitar el crecimiento bacteriano.
315
Control de Calidad de
No serológica
• pH debe estar dentro de la gama de 6,65 a 6,85,

• Conductividad debería ser 3/6 a 3/7 mmho / cm a 23 ° C.
• Osmolaridad 270-285 mmol.
serológica
Una débil IgG anti-D (0,25 UI / ml) debe dar a / reacción + ++ con R 1 r glóbulos rojos por la prueba de rutina LISS-AHG.
Este examen debe llevarse a cabo en ensayos paralelos utilizando el lote anterior de USS.
Método alternativo para la preparación de LISS
1. Añadir 1,75 g de NaCl y 18 g de glicina a un matraz aforado de 1 litro.

2. Añadir 20 ml de tampón fosfato preparada combinando 11,3 ml de 0,15 M KH 2 P0 4 y 8.7
ml de 0,15 M Na 2 HP0 4.
3. Añadir agua destilada hasta la marca de 1000 ml.
4. Ajustar el pH a 6,7 con NaOH IN.

5. Añadir azida de sodio 0,1 g / L como conservante.
6. Agregue 100 ml en viales estériles bajo flujo laminar. Almacenar a 4 ° C o -20 ° C.
NOTA: La adición de azida de sodio en esta cantidad aumenta la fuerza iónica ,0355-,043.
Esto no afecta el comportamiento serológico de la solución.
Método (LISS -IAT técnica)

1. Lavar las células rojas dos veces en solución salina normal.
2. Lavar estas células una vez en LISS.
3. Hacer suspensión celular del 2-3% en LISS.
4. Tome igual volumen (2 gotas) de suero y células suspendidas LISS- (2 gotas) en el tubo.
5. Incubar a 37 ° C durante 15 min en la rutina y 5 min en caso de emergencia.
6. Centrifugar a 1000 rpm durante un minuto
7. Examine el sobrenadante para la hemólisis, resuspender las células y observar la aglutinación,
y registrar los resultados. Un resultado positivo (aglutinación y / o hemólisis) indica incompatibilidad.
8. Si no hay hemólisis o aglutinación visto en el ensayo anterior, se lavan las células tres veces en gran cantidad de solución
salina normal. Decantar el sobrenadante en cada lavado lo más completamente posible.
9. Añadir 1-2 gotas de suero AHG.

10. Centrifugar a 1000 rpm durante 1 min (500 g durante 15 segundos.).
11. Agitar suavemente el tubo para desalojar el botón y examinar para la aglutinación, utilizando óptico
ayudar y grabar el resultado.
12. Añadir 1 gota de células rojas recubiertas de IgG a cualquier prueba que no es Reactivo. Mezcla, se centrifuga a
1000 rpm para I min. Busque aglutinación. Si se obtiene un resultado negativo (sin aglutinación), el resultado de la
prueba no es válida y toda la prueba debe repetirse
316.
Interpretación
• Es igual que en DAT o IAT.
• Hemólisis o aglutinación es un resultado positivo.
precauciones
Por rutina LISS trabajo debe estar a temperatura ambiente tan frío LISS recta de los aumentos de almacenamiento C 4 °
reacción anticuerpo frío no deseada.
• Los glóbulos rojos se deben lavar dos veces en solución salina normal para liberarlos de suero antes de añadir LISS a ellos. Las
huellas de suero residual resultará en la absorción no específica de complemento del suero autólogo en las células rojas en
LISS.
• Un volumen igual de suero y LISS suspendió 2-3 celular% debe ser utilizado.
• El tubo debe agitarse suavemente para ver aglutinación.
• Botella de LISS en uso debe desecharse después de 48 horas.
TEST AM1HUMANGL0BULIN para IgG ANTICUERPOS

Véase el capítulo sobre 'antihumano globulina prueba'
ANTIBODYTITRATION
La titulación es técnica semi-cuantitativa de medir la concentración de un anticuerpo en un suero. El título de un anticuerpo se determina
habitualmente mediante pruebas de la dilución de dos veces en serie del suero contra las células rojas apropiados.
• meticulosa técnica de pipeteo es necesario para obtener resultados significativos de titulación. pipetear con la boca
no debe hacerse y la punta de la pipeta no debe ser roto. se recomienda la pipeta semiautomática con puntas
desechables. Nueva punta desechable se debe utilizar para cada suero.
• El tiempo óptimo de incubación, la temperatura y método apropiado dependiendo del tipo del anticuerpo debe ser utilizado. Los
anticuerpos IgM son probados por el método de solución salina y los anticuerpos IgG se prueban por la albúmina o enzima o
método AHG.
• La edad y la concentración de glóbulos rojos pueden afectar los resultados. Recién extraídos y células preparadas suspensión
debe ser utilizado. Cuando se comparan los títulos de un anticuerpo en dos o más sueros, todos los sueros se debe probar
simultáneamente contra los glóbulos rojos del mismo donante.
• Cuando las muestras de suero prenatales secuenciales son probados para el cambio de título de anticuerpos, las muestras se
deben almacenar congelado para la comparación con las muestras posteriores. Cada espécimen deben probarse junto con la
muestra inmediatamente anterior.
• Sólo un cambio en el título de dos tubos o más es significativo.
• Los resultados deben ser leídos macroscópicamente. los fenómeno prozona pueden producir reacciones más débiles en los
primeros uno o dos tubos que en diluciones más altas, por lo que debe ser evaluado toda la serie de tubos.
Técnica de valoración (dilución doble)
1. Etiquetar una fila de tubos de ensayo, de acuerdo con la dilución de suero, por lo general 1: 1 a 1: 512.
2. Administrar 0,1 ml o 1 volumen de solución salina en todos los tubos, excepto el primer tubo.
3. Añadir 0,1 ml o 1 volumen de suero a los tubos 1 y 2 (dilución 1: 1 y 1: 2).

317
4. Mezclar el contenido del tubo 2 con una pipeta limpia y luego transferir 0,1 ml o 1 volumen de la
mezcla de tubo 3 (dilución 1: 4).
5. Continuar la misma técnica, a través de todas las diluciones y retirar 0,1 ml o 1 volumen de
el tubo de dilución con una dilución de 1: 512 y descartar o guardar para su posterior dilución si es necesario.
6. Añadir 0,1 ml o 1 volumen de 2-5% suspensión salina de glóbulos rojos apropiadas a cada tubo.
7. Incubar a la temperatura apropiada de acuerdo con el anticuerpo que se está probando. En caso de anti- A y anti-B,
incubar a temperatura ambiente durante 30-45 minutos.
8. agitando suavemente las células rojas y observar macroscópicamente la aglutinación. los

título de aglutinación se registra. Los resultados se expresan como el recíproco de la dilución más alta de suero que
produzca la aglutinación macroscópica. Así, un suero que da aglutinación visible a 1: 256 se dice que tiene un título de
256. En la descripción de la titulación del suero, es habitual para ignorar el efecto de dilución de la suspensión celular.
NOTA
• Para el título de anticuerpos IgG añadir 0,1 ml o 1 volumen de albúmina bovina 22% o cisteína papaína después de la etapa 5.
• Incubar a 37 ° C durante 30-40 min.
• Observar para la aglutinación.

• título de anticuerpos IgG también se puede hacer por I AT.
AVIDEZ
La velocidad y la fuerza de aglutinación que se denomina como la avidez. La prueba se realiza mediante la mezcla de dos gota de anti-suero con
una gota de suspensión celular 40-50% en un portaobjetos o baldosas y balanceo suavemente a temperatura ambiente (RT). El tiempo para una
reacción claramente visible (1) y luego por (4) reacción fuerte a ocurrir se registran con la ayuda de reloj de parada.
CALIFICACIÓN DE reacción de aglutinación

+ 4 grupo individual de aglutinación con no hay células libres
+ 3 Tres o cuatro terrones individuales con pocas células libres
+ 2 Muchos bastante grandes macizos con muchas células libres
+ 1 aspecto granular fino visualmente, pero definidas pequeños grupos (10-15 células) por la energía baja
campo
+ W 2 a 3 células se pegan juntos por campo de baja potencia, la distribución desigual visualmente sin
aglutinación
- Todas las células están libres
H Hemólisis (parcial o total) debe interpretarse como positivo
Prueba de saliva para A, SUSTANCIAS BH
(Técnica de inhibición)
Aproximadamente el 75% de los individuos poseen el gen Se que gobierna la secreción de agua antígenos ABH soluble en todos los fluidos
Bods con la excepción de líquido cefalorraquídeo. Estos antígenos secretados pueden demostrarse en saliva mediante la prueba de inhibición
con ABH antisueros. 318

Recogida y preparación de la saliva

• Después de enjuagar la boca recoger 3-5 ml de saliva en un recipiente de boca ancha limpio. Para aumentar la salivación preguntar a la
persona a masticar una goma elástica o mantener unos granos de sal en la boca.
• Mantenga el recipiente en un baño de agua hirviendo durante 10 minutos para inactivar las enzimas.
• Recoger el sobrenadante limpio después de la centrifugación a alta velocidad durante 10 minutos.
• Desechar el material opaco o semi-sólido.

• Mantenga sobrenadante en el refrigerador a 4-6 ° C si la prueba es que ser hecho dentro de pocas horas; congelarlo si la prueba no se
realiza el mismo día.
La dilución de saliva
La saliva de adultos debe diluirse 1: 2, saliva no diluida contiene glicoproteínas no específicos que pueden causar resultados
erróneos.
La dilución de antisuero
Título anti-A, anti-B y anti-H: dependiendo del título final, diluir el suero en solución salina a un título de 1: 8 a 1:16 (ejemplo: si el título
final de anti-Ais 1: 256 y la de titulación deseado es de 1: 8, diluir anti-a en 32 (256 ÷ 8 = 32).
Método
Configurar los tubos y el control de la siguiente manera:
Testa TestB TestH

2 gotas de saliva 2 gotas de saliva 2 gotas de saliva
+ + +
2 gotas de diluido 2 gotas de diluido 2 gotas de diluido
anti-A anti-B anti-H
Un control de Control B control de H
2 gotas de solución salina 2 gotas de solución salina 2 gotas de solución salina
+ + +
2 gotas de diluido 2 gotas de diluido 2 gotas de diluido
anti-A anti-B anti- H
controles de saliva adicionales de secretores conocidos y no secretores son deseables.
• Mezclar y dejar los tubos en reposo a temperatura ambiente durante 20 minutos.
• Añadir 1 gota de 5% suspensión salina de células A a tubo A, B células de suspensión al tubo B, y O células
suspensión a tubo H.
• Mezclar e incubar todos los tubos a temperatura ambiente durante 30-60 minutos.
• Centrifugar a 1000 rpm durante 1 minuto.
• Leer los resultados con los ojos desnudos.
319
Interpretación
• No aglutinación en la muestra de ensayo y la aglutinación en el tubo de control correspondiente indica que el
antisuero se ha neurteralized por la sustancia específica de grupo sanguíneo
A, B, o H y el individuo es secretor.
• La aglutinación en todas las muestras de ensayo y tubos de control indica la ausencia de sustancias de grupos
sanguíneos y la persona no es secretor o fenotipo Bombay (OH). Ejemplo
Prueba UNA prueba B H prueba

Aglutinación - + -
Un control de Control B control de H
Aglutinación + + +
Este ejemplo indica la presencia de sustancias A y H en la saliva y el individuo es el grupo sanguíneo A. Del mismo
modo B grupo secretor segregará B y H sustancias y secretor grupo O sólo tendrá sustancia H en la saliva.
PRUEBA DE ANTI hemolisinas UNA Y ANTI-B

los Prueba de hemolisina detecta inmune anti-A o anti-B que hemoliza los glóbulos rojos apropiados en presencia de complemento.
Prueba de hemolisina se utiliza para determinar la capacidad de anti-A y anti-B en los sujetos del grupo O para hacer que la hemólisis de
las células cuando se da grupo O a un individuo de otro grupo sanguíneo.
Método
1. Colocar 2 gotas de suero de ensayo fresco, no más de 24 horas de edad, en cada uno de los dos tubos
etiquetados A y B. Si el suero es inevitablemente más de 24 horas de edad, añadir un volumen igual de fresco suero AB
humano libre de lisinas, como una fuente de complemento, que es importante para la reacción.
2. Añadir 1 gota de fresco suspensión salina 2-5% de A lavó 1 células a tubo A y 1 gota de B
suspensión de células al tubo B.
3. Mezclar suavemente y se incuba a 37 ° C durante 2 horas.
4. Centrífuga y examinar el sobrenadante contra el fondo blanco espalda bien iluminado para detectar
hemólisis.
5. Puntuación el grado de lisis de acuerdo con la intensidad del color sobrenadante (rosa a
rojo) y el botón celular tamaño.
6. Cualquier tono de color rosa o rojo indica hemólisis.
7. La hemólisis en el tubo containg A 1 glóbulos rojos indican la presencia de hemolisinas anti-A
y la hemólisis en el tubo containg células B rojo indica la presencia de anti-B hemolisina.
NÓTESE BIEN: Uso de la suspensión celular más débil o más grande cantidad de suero se incrementará la actividad hemolítica.
Metodo alternativo
Un volumen de cada suspensión de 50% de un lavado, y las células B se pone en dos tubos A y B marcadas que tienen 9 volúmenes de
suero de ensayo fresco de sangre grupo O. La mezcla se incuba a 37 ° C durante 2 horas, después se centrifugó y el sobrenadante se
inspecciona para hemólisis. El resultado se interpreta como anteriormente. 320
ELUCIÓN
Un resultado DAT positivo indica que los glóbulos rojos se sensibilizan con anticuerpo IgG y / o complementan in vivo, y puede haber poco o
ningún anticuerpo en el suero. Positivo DAT puede ser causada por autoanticuerpos, aloanticuerpos (en HTR o HDN) o anticuerpos frente a
ciertos medicamentos. Las pruebas con reactivos AHG monoespecíficos pueden determinar si la IgG o componente del complemento o
ambos son el recubrimiento de la célula roja, pero la especificidad del anticuerpo no se puede determinar que está unido a la membrana de
los glóbulos rojos por DAT.
La elución es una técnica utilizada para disociar anticuerpo de los glóbulos rojos sensibilizados y para recuperar el anticuerpo en un diluyente
inerte tal como solución salina normal o 6% de albúmina, y se llama eluyen. Este eluido se puede probar, como suero, para determinar la
especificidad del anticuerpo.
El objetivo de tales procedimientos es recuperar anticuerpo limitada a las células rojas en eluyen para la detección y la identificación y
algunos procedimientos de elución recuperar libre de anticuerpos glóbulos rojos en forma utilizable para fenotipado y o absorción de
auto-anticuerpo.
La elución puede llevarse a cabo por un número de siguiendo los procedimientos físicos y químicos CAMBIAR
en termodinámica (temperatura)
Los cambios en las fuerzas de atracción inversa termodinámicas entre antígeno y anticuerpo, o perturban la complementariedad
estructural del antígeno y anticuerpo.
La elución de calor
(Landsteiner y Miller 1925)
Solicitud
Esto es útil en eluyendo anti-A y / o anti-B a partir de células rojas en el diagnóstico de ABO-HDN o para la elución de otros anticuerpos
que se unían más fuertemente a baja temperatura. No es mucho eficiente en la recuperación de los anticuerpos IgG. Este método tiene la
ventaja de la velocidad y simplicidad.
materiales
• 6% de albúmina bovina, preparado por dilución de 22% de albúmina de bovino con solución salina (1,4 ml 22% de albúmina
bovina + 3,6 ml de solución salina normal) o suero AB.
• Anticuerpo recubre los glóbulos rojos, DAT positivo (2 ml)
• solución salina sobrenadante de último lavado de las células recubiertas de anticuerpo.
métodos
1. Preparación de sobrenadante de último lavado
• Lavar las células rojas recubiertas de anticuerpo (de la que el eluido se quiere realizar) seis veces en grandes volúmenes de
solución salina normal.
• El lavado final se debe realizar mediante la adición de solución salina igual al volumen de concentrado de glóbulos rojos
lavados. Centrifugar y recuperar el sobrenadante de la última de lavado y probarlo en paralelo con el eluato.
• Este último lavado es un importante control negativo que demuestra que el anticuerpo del suero residual se ha eliminado
antes de que el eluato se prepara a partir de los glóbulos rojos lavados.
2. Preparación de Eluir
• Añadir solución salina (o AB de suero o 6% de albúmina) igual al volumen de células empaquetadas lavadas.
• Colocar el tubo en un baño de agua C 56 ° durante 5-10 minutos. Agitar con frecuencia durante la incubación.
321
• Inmediatamente centrifugar a 1000 rpm durante 2 minutos. Una centrífuga calentada se mantiene a 56 ° C es ideal,
pero si esto no es posible, entonces calentar las tazas de la centrífuga en agua a 56 ° C y centrifugar rápidamente.
• transferir inmediatamente el eluyen sobrenadante a otro tubo de ensayo y prueba frente a un panel de; las células para la
presencia de anticuerpos en paralelo con el último sobrenadante de lavado.
• Si eluyen utiliza mismo día, se puede preparar en solución salina, si el almacenamiento se eluyen anticipado se
prepara en el suero AB o en 6% de albúmina.
NÓTESE BIEN: Última sobrenadante de lavado es la prueba de anticuerpo en paralelo con eluyen para asegurar que cualquier eluido
anticuerpo no es contiminants de suero residual.
Congelación-descongelación (Lui)
Es un método de elución anticuerpos ABO mediante la congelación de las células rojas recubiertas de anticuerpo lavados en 5% de albúmina y
luego descongelar ellos. Tras la eliminación del estroma por centrifugación el eluido está listo para anticuerpos de prueba.
Elución mediante EL USO DE disolvente orgánico (éter, xileno)

El disolvente orgánico disruct bonos anticuerpo-antígeno mediante la reducción de la tensión superficial de los medios líquidos, invirtiendo de esta
manera fuerzas necesarias para mantener el antígeno y el anticuerpo juntos. El disolvente orgánico son más sensibles porque eliminan más
anticuerpos de glóbulos rojos en eluyen para el ensayo de anticuerpos.
Elución mediante ETER

Es útil en separatice de auto-calentamiento reactivo y aloanticuerpos (IgG) de los glóbulos rojos que son positivas para dirigir prueba de
antiglobulina viz (DAT). en Rh- HDN, anemias hemolíticas inmunes y las sospechas de reacciones transfusionales etc.
materiales
• Dietil éter de grado reactivo o grado anestesiológico).
• Pic DAT células rojas positivos (2 ml), se lavaron 6 veces en solución salina.
• El sobrenadante m último lavado de las células rojas recubiertas de anticuerpo.
Método
1, Preparación de sobrenadante de último lavado
• Lavar las células rojas antebody de la que el eluido se hace que, seis veces en un gran volumen de solución salina.
• Recuperar el lavado no sea como se describe anteriormente en el paso 1 en el método de elución de calor.
2. Preparación de elure
1. Añadir un volumen igual de solución salina a las células rojas lavadas y mezclar.
2. Añadir éter en una cantidad igual al volumen total de glóbulos rojos más solución salina. El éter debe
sé fresco; la aparición de color marrón del éter indica que el éter es oxidado y el eluato será
inútil.
3. Stopper y mezclar el tubo mediante inversión repetida durante 1 min.
4. Retirar con cuidado el tapón para liberar el éter volátil.

5. Incubar a C durante 30 min. Este paso es opcional, pero dará lugar a una más potente eluyen si está incluido. 322
6. Centrifugar el tubo a 1000 x g (3.400 rpm) durante 10 min. El tubo contendrá entonces 3
capas- éter claro en la parte superior, estroma de glóbulos rojos en el eluato medio y hemoglobina tensas en la parte inferior.
7. Aspirar y descartar la capa superior.

8. perforar con cuidado el stromalayer medio con una pipeta y aspirar la parte inferior de la hemoglobina
capa manchada por debajo de la capa estromal en un tubo limpio.
9. Incubar la eluyen en el tubo sin tapón a 37 ° C durante 15 min y periódicamente aire de la burbuja a través eluyen mediante una
pipeta para eliminar el éter residual.
10. Prueba de la elución para la presencia de anticuerpos en paralelo con el último sobrenadante de lavado. Última sobrenadante del
lavado se prueba en paralelo con eluyen para asegurar que cualquier anticuerpo eluido no es contaminantes de suero residual.
Elución mediante XYLENO
reactivos
• xileno de grado reactivo.
• Pic DAT células rojas positivos, se lavó 6 veces en solución salina.
• solución salina sobrenadante de último lavado de las células recubiertas de anticuerpo.
Método
1. Mezclar un volumen igual de glóbulos rojos, solución salina normal y xileno en un tubo de ensayo.
2. Se tapa el tubo y mezclar el contenido durante 2 minutos.
3. Quitar el tapón. Colocar el tubo a 56 ° C durante 10-15 minutos. Agitar el contenido de la

tubo.
4. Centrifugar el tubo a 1000 rpm durante 10 minutos.
5. Con cuidado, retirar y desechar la capa superior de xileno y el estoma.
6. Transferir el eluido en un tubo limpio, y la prueba en paralelo con el último lavado sobrenadante.
ACIDELUTES
En ácido eluye técnicas el uso de solución de ácido reduce el pH y se altera la complementariedad de bonos antígeno-anticuerpo. El pH
óptimo para la unión antígeno-anticuerpo es 6/8 a 7/2. Acid eluye reducir el pH a 3 o menos mediante la mezcla de las células
sensibilizadas con una solución ácida. El anticuerpo es liberado de la membrana de los glóbulos rojos. La solución de ácido se convierte en
eluyen. El ácido cítrico, glicina, y el ácido Digiton se utilizan en técnicas de elución de ácido.
Estas técnicas son rápidos y sensibles y no necesitan productos químicos peligrosos.
ELUCIÓN ácido cítrico

reactivos
• solución de elución: ácido cítrico (monohidrato), 1,3 g; KH 2 P0 4, 0,65 g; Saline a 100 ml ,: Almacenar a 4 ° C.
• solución neutralizante: Na, P0 4, 13,0 g: agua destilada para almacenar 100 ml .: a 4 ° C.
• células positivas DAT pic, se lavaron 6 veces en solución salina.
• solución salina sobrenadante del último lavado.
323
Método
1. Chill todos los reactivos a 4 ° C antes de su uso.
2. Tomar 1 ml de glóbulos rojos envasados en un tubo y añadir 1 ml de solución de elución. Tenga en cuenta el tiempo.
3. Tapar el tubo y mezclar por inversión durante 90 segundos.
4. Retirar el tapón y centrifugar inmediatamente el tubo a 1000 g durante 45 segundos.
5. Transferir el sobrenadante a un tubo limpio y añadir 5-6 gotas de solución de neutralización: guardar los glóbulos rojos para su
uso en la adsorción si es necesario.
6. Verificar el pH; ajustar, si es necesario, a pH 7,0 mediante la adición de más solución neutralizante.
7. Centrifugar a 1000 xg durante 23 minutos para eliminar el precipitado que se forma después de la neutralización. Retire el eluyen
sobrenadante y prueba en paralelo con la solución salina de lavado sobrenadante del lavado final.
NOTA • Una vez que los glóbulos rojos se han rendido DAT negativos, pueden ser utilizados para fenotipificación,
a excepción del sistema Kell. Los antígenos de los sistemas Kell se debilitan después del tratamiento ácido cítrico.
• Cítrico-ácido glóbulos rojos modificados pueden ser tratados con enzimas y se usan en la adsorción autólogo.
ELUCIÓN FRÍO-ÁCIDO
reactivos
• Glicina-HCl (0,1 M, pH 3,0) se prepara disolviendo 3,75 g de glicina y 2,992 g de cloruro de sodio en 500 ml
de agua destilada. Ajustar el pH a 3,0 con 12 N de HCl. Tienda AT4 ° C.
• Tampón fosfato (0,8 M, pH 8,2) se prepara disolviendo 109,6 g de Na, HP0 4 y 3,8 g de KH 2 P0 4 en aproximadamente 600
ml de agua destilada. Ajustar el pH con NaOH IN o IN HCl si es necesario. Añadir agua destilada hasta un volumen final
de 1 litro. Almacenar a 4 ° C.
• La solución salina normal, AT4 ° C.
• Pic DAT células rojas positivos, se lavó 6 veces en solución salina.
• solución salina sobrenadante de lavado final.

Método
1. Colocar las células rojas en un tubo de ensayo y el enfriamiento en un baño de hielo durante 5 minutos.
2. Añadir 1 ml de solución salina enfriada y 2 ml de glicina-HCl enfriado a 1 ml de glóbulos rojos lavados.
3. Mezclar e incubar el tubo en baño de hielo durante 1 minuto.
4. centrifugar rápidamente el tubo a 1000xg durante 2-3 minutos.
5. Transferir el eluido sobrenadante a un tubo de ensayo limpio y añadir 0,1 ml de fosfato bufferPH
8,2 por cada 1 ml de eluato.
6. Mezclar y centrifugar a 1000 rpm durante 2-3 minutos.
7. Transferir el sobrenadante se eluyen en un tubo de ensayo limpio y probar el eluato en paralelo con el
solución salina sobrenadante del lavado final.
NOTA
• Mantenga glicina en baño de hielo durante el uso, para mantener el pH correcto.
• El tampón fosfato se cristalizará durante el almacenamiento a 4 ° C.Redissolve a 37 ° C antes de su uso. 324

• La adición de tampón de fosfato restaura la neutralidad a la elución de ácido. acidez no neutralizado puede causar hemólisis de
los glóbulos rojos reactivo utilizado en prueba en el eluido.
Las técnicas anteriores, a veces se hace referencia apropiadamente a como 'eluido total' para su uso en anticuerpo
-- estudios de identificación; RBCs a partir de los cuales se prepara eluyen generalmente se vuelven inútiles para cualquier propósito. "eluye parcial
para eliminar el anticuerpo de eritrocitos sensibilizados se pueden realizar usando Zzap o disulfato cloroquina soluciones para que los glóbulos
rojos se puede usar para autoabsorption o fenotipificación respectivamente.
La elución de IgG de anticuerpo mediante USO CHEMICAL TRATAMIENTO

disociación de anticuerpos de las células rojas recubiertas de anticuerpo se puede lograr mediante el uso de reactivos químicos capaces de división
complejo inmune sin la desnaturalización de la membrana de glóbulos rojos. El objetivo de estas técnicas de elución es para eluir anticuerpos calientes
de las células rojas de modo que las células pueden ser utilizadas para la tipificación de antígenos como Rh, Fy Kell, Kidd etc. por IAT y para la
adsorción de aloanticuerpos cálidos auto-y-. Dos reactivos químicos comúnmente utilizados para la obtención de células rojos intactos libres son:
• difosfato de cloroquina
• Zzap reactivo, (una mezcla de enzima proteolítica y agente reductor ditiotreitol).
La eliminación de los glóbulos rojos IgG unida con cloroquina difosfato

difosfato de cloroquina se disocia IgG a partir de células rojas recubiertas de anticuerpo con un daño mínimo a la integridad de la membrana de
los glóbulos rojos. El tratamiento prolongado puede provocar la hemólisis y la pérdida de antígeno células rojo. se puede producir cierta
desnaturalización del antígeno Rh. Las células tratadas pueden dar reacción débil de lo esperado o reacción falsa negativa, especialmente
cuando se usa solución salina-reactiva o modificados químicamente de anti-Rh reactivos de tipificación. Por lo tanto, Rh fenotipificación debe
hacerse con la diapositiva de alta proteína / reactivos tubo rápidos y el control diulent del fabricante apropiado. difosfato de cloroquina no se
disocia componente del complemento de los glóbulos rojos, por lo tanto, monoespecíficos suero globulina humana anti- (IgG) se debe utilizar y
no reactivo antiglobulina poliespecífica.
materiales
1. Solución difosfato de cloroquina
• 20 g de difosfato de cloroquina (Sigma Chemical) se disuelve en 100 ml de solución salina tamponada
con 0,01 M fosfato, pH 7,2 (200 mg de cloroquina difosfato por ml. De tampón fosfato salino).
• El pH se ajusta a 5,0-5,1 usando NaOH 5 N. El reactivo se almacenó a 4 ° C.

2. hematíes (células recubiertas de anticuerpo).
3. Antiglobulina reactivo (anti- IgG).
Procedimiento 1.
A un volumen de concentrado de glóbulos rojos lavados añadido 4 volúmenes de solución de difosfato de cloroquina.
2. Mezclar por inversión. A continuación, dejar la muestra a temperatura ambiente durante 2 horas con mezcla periódica
3. Después de la incubación, los tratados con cloroquina glóbulos rojos se lavaron 4 veces con grandes volúmenes de solución salina
isotónica y luego hacer suspensión celular 2-5% de células lavadas en solución salina para la prueba.
4. Tomar un volumen de 2-5% suspensión tratada celular y 1 volumen de reactivo anti-IgG-mono específico
(AHGS) y realizar DAT
325
5. Si reactiva, repita los pasos 1-3, hasta que las células son no reactivos a DAT.
6. Hacer la suspensión de células como en el paso 3. Las células pueden usarse para la tipificación de antígeno o auto-
procedimiento de absorción.
NÓTESE BIEN: Toda célula sensibilizada IgG no puede volverse no reactivo, incluso después de un tratamiento prolongado y en ocasiones células rojas
obtener hemoliza.
La eliminación de los glóbulos rojos IgG unida con Zzap Reactivo
(Zzap es una mezcla de papaína y ditiotreitol cisteína-activado)
Esto da lugar a la disociación completa de anticuerpo y el componente del complemento de los glóbulos rojos, pero antígenos MNSS, Duffy y Kell
son destruidos. Se descubre los sitios antigénicos en glóbulos rojos que son capaces de autoanticuerpos de unión en el suero. ZAAP tratada
glóbulos rojos están especialmente adecuados para procedimientos autoabsorption porque los resultados de tratamiento en intacta RBC que han
reducido IgG. ZAAP glóbulos rojos tratados por lo general no se utilizan para escribir (excepto Rh mecanografía).
reactivos necesarios
• 1% papaína cisteína activado; almacenar a-20 ° C (ficina, bromelina, o tripsina se puede sustituir por la papaína
activada cisteína).
• 0,2 M de ditiotreitol (DTT); almacenar a -20 ° C, (0,2 M 2- mercaptoetanol puede ser sustituido por 0,2 MDTT).
• PBS, 0,01 M, pH 7,3; almacenar a 4 ° C.
• Las células de ensayo recubiertas con anticuerpo.
Preparación de Zzap Reactivo
(0.2 M DTT + 0. 1% La papaína cisteína Activado)
Método
Preparación del reactivo Zzap

1. Mezclar 2,5 ml de 0,2 M DDT, 0,5 ml de 1% cisteína activa papaína y 2 ml de tampón PBS,
pH 7,3 2 Invertir varias veces para mezclar; pH debe ser 6,0-6,5. El reactivo es estable durante al menos 5 días
AT4 ° C.
Tratamiento Zzap de células rojas
1. Tomar 1 ml glóbulos rojos empaquetados en un tubo a tratar.
2. Añadir 2 ml de reactivo Zzap.
3. Mezclar e incubar a 37 ° C durante 30 minutos con mezcla periódica.
4. Lavar las células rojas 3-4 veces con solución salina isotónica, y eliminar el sobrenadante tanto como sea posible.
5. Resuspender Zzap células tratadas con 2 - 5% en solución salina para su uso. Las células se pueden utilizar para auto-
absorción.
326
ABSORCIÓN
Absorción: Esta técnica se utiliza para la eliminación de un anticuerpo a partir del suero mediante la unión del anticuerpo específico
para el antígeno correspondiente en la superficie de células rojas en condiciones óptimas (opuesto de elución), a menudo se usa de
manera intercambiable con adsorción.
Solicitud
• Separación de anticuerpo en el suero que contiene anticuerpos múltiples.
• La eliminación del anticuerpo no deseado, especialmente anti-A o anti-B a partir de un suero que contiene un anticuerpo adecuado
para el reactivo.
• La eliminación de auto-anticuerpo para permitir la detección de la coexistencia de alo-anticuerpo (s).
• La confirmación de la presencia de antígenos en las células rojas través de su capacidad para eliminar el anticuerpo en suero
específico.
ABSORCIÓN DE ALLO-ANITBODY TÉCNICA

Solicitud
Para eliminar un anticuerpo deseado a partir de suero con el propósito de identificación de anticuerpos o para preparar antisueros de reactivo.
Método
1. Lavar un gran volumen de células rojas para ser utilizado en la absorción, tres veces en solución salina normal. Estas
células deben poseer el antígeno correspondiente al anticuerpo que es para ser absorbida y faltará el antígeno
correspondiente a otro anticuerpo, en su caso, que no es para ser absorbida (es decir, a permanecer en el suero).
2. Después del lavado final .Centrifuge las células de modo que estén bien embalados y eliminar la mayor cantidad de solución salina
como sea posible.
3. Dividir las células en dos alícuotas.

4. Añadir suero igual al volumen de células empaquetadas en una parte alícuota.
5. Incubar a temperatura óptima, en el que el anticuerpo sea absorbido reaccionará, durante 30-60 min, la mezcla de vez en
cuando.
6. Centrifugar y recuperar el suero.
7. Pruebe el suero para ver que la absorción se ha completado., Si no, repetir el procedimiento utilizando otra alícuota de glóbulos
rojos empaquetados. Siempre prueba para asegurar que el anticuerpo que ha de permanecer en el suero es suficientemente
reactivo antes de continuar con la absorción de repetición.
TÉCNICA DE FRÍO AUTO-ABSORCIÓN
Solicitud
Esta técnica está indicada cuando la reactividad del anticuerpo se ve a temperatura ambiente con las células de detección y con
autocontrol del paciente. Si el paciente ha sido transfundidos recientemente, el procedimiento se debe usar con precaución, ya que
aloanticuerpos pueden eliminarse además de autoanticuerpos.
Muestras de sangre
• Para obtener mejores resultados de absorción, muestras de sangre fresca deben obtenerse en solución anti-coagulante y vial
llanura separado ..
Suero de absoiption: Permitir que la muestra se coagule en el baño de hielo o el refrigerador, eliminar el suero y
mantener a temperatura fría.
327
• Las células para la absorción: Anti-coagulada muestra se coloca a 37 ° C. Permitir que las células se asienten por gravedad. Eliminar
plasma, lavar las células restantes tres veces con solución salina caliente (37 ° C).
Método 1 (Uso de las células no tratadas)
1. Se lavan las células rojas tres veces en solución salina (esto se puede omitir si se ha recogido la muestra
como se describió anteriormente).
2. Retire la solución salina sobrenadante tras el último lavado
3. Dividir las células rojas en dos alícuotas iguales.

4. Añadir el suero del paciente igual al volumen de células empaquetadas en una parte alícuota.
5. Mezclar e incubar en la nevera durante 30-60 min. Mezclar con frecuencia durante la incubación durante
la máxima absorción.
6. Centrifugar y separar el suero.
7. Prueba el suero absorbido contra las células autólogos para asegurar que la absorción es completa .Si absorbido suero es todavía
reactiva con las células autólogas, la absorción no es completa y se debe repetir con la segunda alícuota de glóbulos rojos
empaquetados lavadas. glóbulos rojos no tratados pueden ser utilizados para la absorción homóloga, pero son menos eficaces que los
tratados con enzimas de glóbulos rojos en la eliminación de autoanticuerpos, como las células tratadas con enzimas ocupan más
anticuerpos.
Ciertos antígenos, a saber. M, N, S, s Duffy y se destruyen o modifican por la enzima.
Método II (utilizando la enzima tratada glóbulos rojos)
1. Añadir yo volumen de solución de papaína 1% a 1 volumen de lavado, concentrado de glóbulos rojos autólogos.
2. Mezclar e incubar a 37 ° C durante 15 min.

3. Lavar las células rojas 3 veces con solución salina normal. Retire la solución salina sobrenadante del último lavado.
4. Dividir las células rojas en dos alícuotas.
6. Mezclar e incubar en la nevera durante 30-60 min. Mezclar con frecuencia durante la incubación para
una máxima absorción.
7. Centrifugar y separar el suero.

8. Pruebe el suero absorbido contra células autólogas para asegurar que la absorción es completa si
suero absorbido todavía es reactivo con las células autólogas, la absorción no es completa y
debe ser repetido con la segunda alícuota de células rojas tratadas con enzimas empaquetadas lavadas.
TÉCNICA WARMAUTO-ABSORCIÓN
Solicitud
Esta técnica está indicada cuando la reactividad del anticuerpo se ve a 37 ° C con células de detección y con autocontrol del paciente. El
procedimiento debe utilizarse con precaución si el paciente ha recibido una transfusión en los últimos 2-3 meses.
Método 1
El calor y el método enzimático
1. Recoger la muestra del paciente en el anticoagulante y otra muestra en un vial de llanura a
37 ° C y separar el suero a 37 ° C.
328
2. Lavar las células rojas de la paciente con solución salina caliente (37 ° C). Retire la solución salina sobrenadante de
el último lavado.
3. Suspender los glóbulos rojos del paciente se lavó en solución salina a 1: 1 ratio.
4. Eluir los autoanticuerpos calientes de las células en un volumen igual de solución salina a 56 ° C durante 3 a
4 minutos (o a 44 ° C durante 60 min si las células rojas son frágiles) mezclar constantemente, centrifugar y eliminar el
sobrenadante.
5. Lavar las células de nuevo 3 a 4 veces en solución salina caliente.
6. Girar y retirar el exceso de solución salina.
7. Añadir un volumen de solución de papaína 1% a un volumen de lavado de color rojo autólogo embalado
Células.
8. Mezclar e incubar a 37 ° C durante 15 min.
9. Lavar las células tres veces con solución salina normal. Retire la solución salina sobrenadante.
10. Dividir las células rojas en 2 alícuotas.
12. Mezclar e incubar a 37 ° C durante 30-60 min. mezclando ocasionalmente.
13. Centrifugar y recuperar el suero

14. Prueba de la absorción suero contra las células autólogas.
Si el suero absorbida es todavía reactiva, la absorción no es completa y repita los pasos 11-13 con la segunda alícuota de lavado las
células tratadas con enzimas empaquetadas.
TÉCNICA DONATH -LANDSTEINER (cualitativo).

Es un diagnóstico prueba para Paraoxysmal hemoglobinuria fría (PCH)
Método: Prueba directa
Recoger dos muestras de sangre del paciente, un espécimen, el control, se mantiene a 37 ° C durante 60 minutos después de la
recogida. La segunda muestra se enfría a 4 ° C durante 30 minutos y después se incubó a 37 ° C durante 30 minutos. Ambas
muestras se centrifugaron y se observaron la para la hemólisis.
Interpretación
En una prueba de Donath-Landsteiner positivo, la hemólisis se ve en la muestra colocada a 4 ° C y luego a 37 ° C, mientras que no se
observa hemólisis en la muestra de control.
Método 2: prueba indirecta
1. Separar el suero de la sangre coagulada a 37 ° C, con precaución de que la muestra de

la sangre no se debe permitir que se enfríe.
2. Añadir nueve gotas de suero del individuo sometido a prueba a una gota de lavados embalado rojo
células (grupo O) en el tubo 1.
3. En el segundo tubo de tomar partes iguales de suero de la undertest individual, suero normal fresco para actuar
como una fuente de complemento y células rojas lavaron (grupo O)
4. Coloque el primer tubo y el segundo tubo a 0 ° C en hielo picado durante 30 minutos. Negativo
los controles se proporcionan al mantener un duplicado de los tubos 1 y 2 a 37 ° C durante toda la prueba. Transferir los tubos a
0 ° C al baño de agua (37 ° C) y mantener durante una hora.
5. Examine para la hemólisis.
329
Interpretación
Una prueba positiva muestra hemólisis en los tubos 1 y 2 (o en 2 solamente, si el paciente es deficiente en complemento). Sin
hemólisis debe ser observada en los controles negativos.
Donath -Landsteiner Technique (cuantitativo) Método 1. Hacer diluciones dobles en serie de suero del paciente en el
suero AB fresco normal.

2. Añadir un volumen igual de un 2 por ciento se lavó la suspensión de los glóbulos rojos del grupo O a cada
tubo.
3. Sumergir los tubos en hielo picado a 0 ° C durante 30 minutos, a continuación, transferir el tema a un 37 ° C
baño de agua durante una hora.
4. Centrifugar y examinar cada tubo para el grado de hemólisis. Leer de acuerdo

con la siguiente escala:
+4 = hemólisis completa
+3 = profundo sobrenadante rojo
+2 = sobrenadante roja
+1 = sobrenadante de color rosa pálido
± = hemólisis débil
Interpretación
El título de hemólisis es el recíproco de la mayor dilución que da una reacción ±.
ABSORCIÓN y elución
(Para los subgrupos débiles de A o B)
1. Lavar 1 ml. células a ensayar al menos tres veces con solución salina. Descartar el
sobrenadante después
de la última de lavado.
2. Añadir 1 ml. de anticuerpos anti -A para glóbulos rojos si se sospecha débil variante de A, o 1 ml de anticuerpos anti -B
Si
Se sospecha variante débil de B.
3. Mezclar las células con anti-suero y se incuba a temperatura ambiente durante una hora.
4. Centrifugar la mezcla y descartar el sobrenadante anti-sueros
5. Lavar las células rojas restantes para un mínimo de cinco veces con un gran volumen de
solución salina (10
ml o más). Guardar el sobrenadante del quinto lavado para la prueba de anticuerpo libre.
6. Añadir un volumen igual de solución salina a las células lavadas y empaquetadas y mezclar.
7. Eluir el anticuerpo absorbido colocando el tubo 56 ° C baño de agua durante diez minutos y
mezcla
Los glóbulos rojos mezcla de solución salina al menos una vez durante este período.
8. Centrifugar y eliminar la elución de color cereza y desechar las células.
Las pruebas de Eluir
1. Si se utilizó anti-A, probar el eluato contra tres muestras diferentes de, células A y células tres grupo O a
temperatura ambiente, a 37 ° C y con suero de antiglobulina.
2. Es contra -B se utilizó, probar el eluato contra tres muestras de células B y tres grupo de células O a temperatura
ambiente, a 37 ° C y con suero de antiglobulina.
3. Pruebe el quinto lavado de solución salina de la misma manera para mostrar que el lavado se ha eliminado todo el anticuerpo,
no unido a las células. 330
Interpretación
Si los aglutinados Eluir o reaccionan con células específicas A o B y no reacciona con 0 células, las células ensayadas tienen Un
antígeno activo ro B en su superficie capaz de unirse con el anticuerpo específico. Si el eluato reacciona también con las células S,
indica reactividad no específica en eluir, y los resultados no son válidas.
Si el quinto material de lavado de solución salina es reactivo con células A y B, los resultados de la prueba realizada en el eluato no son válidos, ya
que indica que el anticuerpo activo estaba presente en el medio no unido a las células que están siendo probados.
TECNOLOGÍA MICROPLACA
El uso de la microplaca se ha aplicado con éxito en el laboratorio del banco de sangre. Todas las pruebas de rutina de determinación del grupo
sanguíneo, el cribado contra el cuerpo y pruebas cruzadas se pueden hacer en microplaca sin pérdida de sensibilidad de anitbodies o cualquier
problema en la determinación del grupo sanguíneo.
Ventajas de microplacas Tecnología:

• Eso es rentable para el ensayo de gran número de muestras de sangre.
• Aumento de la sensibilidad de las reacciones.
• Ahorro en reactivos y equipo.
• requiere espacio de laboratorio menos.
• Menos tiempo para los tecnólogos.
• Los resultados se pueden observar visualmente o pueden ser evaluados con los lectores automáticos photometeric que elimina el
error humano.
microplaca:
Estas son placas polystyene que tienen 96 pocillos dispuestos en 8 filas (con letras de A a H) que tienen cada uno 12 pozos (lto numerada
12). Fig. 20-1
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
DOOOO O OO O OO OO
BOOOO O O O O OO OO
COOOO O O O OOO OO
Doooo O O O OOO OO
eooo O O O O O OO OO
fooo O O O O O OO OO
GOOO O O O O O OO OO
HOOO O O O O O OO OO
Fig. 21-1 de microplacas
Estas son placas polystryene, que tienen 96 pocillos dispuestos en 8 filas (con letras de A a H) que tienen cada uno 12 pozos
(numeradas del 1 al 12). Microplaca con forma de U o V pozos forma, teniendo cada uno capicity de 25 micras se puede utilizar en la
serología de grupos sanguíneos ,. Las placas tienen propiedades electrostáticas. Es importante seleccionar las placas con propiedades
estáticas bajas. La adición de albúmina bovina y para Tween 20 al diluyentes y soluciones de lavado puede ayudar a eliminar efecto estático
producido por poliestireno. Incluso entonces es aconsejable preparar placas antes de su uso. Se puede hacer lavando las placas con Tween
20, después de lo cual se agitaron y se secó durante la noche a 37 ° C. Microplacas son desechables.
331
Principio
Microplaca es una matriz de 96 tubos de ensayo "cortas". también se aplica aquí Principio de hemaglutinación por el método de tubo de ensayo.
Microplaca puede ser rígido o flexible, ya sea con forma de U o V en forma de pozos. placas de fondo en U son más ampliamente utilizados
debido resultado se puede-leer mediante la observación de las características de resuspendió RBC o el patrón de streaming de RBC de cuando la
placa se coloca en un ángulo.
la fuerza de aglutinación se puede estimar mediante dispositivos fotométricos automática también, que leen resultados por la
observancia luz en fondo en U pozos para diferenciar entre los resultados positivos y negativos.
U pozos y pozos V
En de grupos sanguíneos serológicos las placas con pocillos de U o pozos V se pueden utilizar igualmente bien. En los pocillos en forma de V
cuando se utilizan baja concentración (0,1 -0,2%) de las células rojas, la sensibilidad es más, mientras que en forma de U células suspensiones
bien rojas de 2-3% se utilizan.
Equipo 1. Dispensadores semiautomática dispositivos para dispensar volúmenes iguales a una fila de
pozos.
2. Arandelas semi-automatizados se utilizan normalmente para lavar los especímenes antes
añadiendo
suero de antiglobulina. placas de fondo en U se prefieren para el lavado de RBC porque las muestras
puede ser re-suspendido más fácilmente.

3. lectores de microplacas - Los dispositivos automáticos están disponibles que leer microplacas por
fotómetro;
la diferenciación entre la prueba positiva y negativa se acompaña de luz en la observancia
U -fondo pozos. 96 valor observancia se puede procesar en menos de 1 minuto y la
resultados interfaz con microprocesador. El lector automatizado pasa haces de luz a través de
el fondo de los pocillos. Los resultados negativos producen lecturas de alta densidad ópticas, debido
dispersos en la parte inferior así absorber más luz de los glóbulos rojos que el botón de concentrado
de células obtenidas en unos resultados positivos. El componente de microprocesador del lector
interpreta las reacciones y se imprimen los resultados de los grupos sanguíneos para el registro de laboratorio.
el control de RBC se debe ejecutar con el lector automatizado para que el lector pueda diferenciar
falsa reacción, positiva debido a la agregación no específica. Para obtener resultados precisos, de los glóbulos rojos
concentración de muestras de ensayo de rutina debe ser controlada cuidadosamente (0,5 a 2% dar el
mejor sensibilidad) y la centrifugación y resuspensión deben llevarse a cabo de manera muy uniforme.
4. Centrífugas para microplacas - condiciones de centrifugación apropiadas deben estar

establecido
para cada una centrifugadora. Consulte a los fabricantes para obtener información específica.
Personal
Antes de personal tiene suficiente experiencia, el procedimiento de microplacas debe funcionar en paralelo con el procedimiento estándar en
tubos que confirmar que si los resultados del procedimiento de microplacas son las mismas que la de procedimiento estándar en los tubos.
Todos los resultados discrepantes obtenidos en la evaluación paralela deben registrarse con el resumen de las investigaciones llevadas a cabo
para resolver cada discrepancia.
soluciones de diluyente y de lavado

En todas las técnicas de 0,02% de albúmina en solución salina se recomienda como células rojas diluyente y soluciones de lavado. Esto se
prepara por adición de 6 ml de 30% de albúmina a un litro de solución salina normal, pH6-8. Alubumin limita las propiedades electrostáticas de
polystryene y evita monolayering lo cual es importante cuando se diluyen las células rojas se utilizan suspensiones. Alternativamente, las células
rojas pueden ser diluidos en soluciones de fuerza iónica baja.
Para las células procedimiento de enzima se tratan previamente con 1% de papaína o 0,05% bromelina y células suspensiones se hace en
solución salina normal o en solución de baja fuerza iónica. 332
Normalización de los anti-sueros
1. Hacer diluciones dobles maestras de los anticuerpos anti-A, anti-B, anti-AB y anti Rh (D) monoclonales
anticuerpos.
2. Dispensar 25 μ L volúmenes de cada diluciones en placas de pocillos U y añadir 25? l de 2-3%

suspensión de glóbulos rojos apropiados en solución salina de albúmina.
3. Incubar la placa a temperatura ambiente durante 20-30 min.
4. Centrifugar la placa a 100 g (aproximadamente 500 rpm) durante 40 segundos.
5. La aglutinación, existen varios métodos para la lectura:

(I) agitar el plato sobre el agitador para el período mínimo necesario para dispersar negativo
controles. Después de agitar, cada placa se coloca inmediatamente en un soporte de plancha en ángulo a 60 ° -70 ° respecto
a la horizontal. La reacción se puede leer macroscópicamente; en unas reacciones negativas células rastro rojo del centro del
pozo, y en unos reacciones positivas células permanecen en el centro o caída de un botón discreto a la parte inferior del pozo.
Alternativamente después de la colocación de la microplaca en el stand en ángulo para al menos un minuto (y
más de 5 min) no el resultado puede obtenerse a través de lector automático a 570 nm de longitud de onda.
(Ii) Después de centrifugar la placa (etapa 4), colocar la placa a un soporte de placa en ángulo a 60 ° -
70 ° desde la horizontal durante 2-3 min y que invertir para la lectura. Las reacciones se leen macroscópicamente de la
cara posterior de las placas. En unas reacciones negativas células rastro rojo desde el centro del pozo y en las células de
reacción positiva permanecer en el centro o caída de un botón discreto a la parte inferior del pozo.
6. La mayor dilución que da aglutinación +++ macroscópico, y una reacción de control negativo claro está seleccionado para
su uso:
Nota: Probar los anti - A contra una 1 UNA 2, UNA 1 B. Un 2 B, las células B y O agrupados; contra -B contra B, A 1 B, A 2 Células B y O
agrupados. Anit Rh (D) contra OR 1 R 2 O 2 R 2 Se ,, y las células Orr.
Método alternativo para hacer dilución de trabajo de anti-sueros

dilución doble a partir de 1 en 2 a 1 en 1024 se preparan de anti-A, anti-B, anti-DL y anti-D2 en solución salina normal en tubos.
Estos se ensayaron frente a células reactivos A, células B y células D positivas.
reacción positiva clara con células de reactivos y 2-3 diluciones cortos del punto final se seleccionan como la dilución de
trabajo.
pruebas:
Técnica solución salina
1. 25? L Anti-sueros (-A, -B, -AB, y -D) de la dilución apropiada se dispensan en los pocillos
de microplacas. En ABO y Rh escribiendo las placas se pueden almacenar en bolsa de plástico sellada a 4 ° C.
2. Añadir 25? L de un 3% suspensión de células de las células a anti-sueros (-A, -B, -AB y -D) en los pozos.
3. Incubar la placa durante 30 min a 1 hora dependiendo de la anti-sueros a la temperatura

apropiada.
4. Centrifugar la placa a 100 g durante 40 segundos.
5. Examinar la aglutinación ya sea después de la agitación o después de inclinar a alrededor de 60 ° -70 °

desde
horizontal hasta que los controles negativos comienzan a arrastrarse como se describe anteriormente.
333
MICROPLACA FORMATO ABO

y Rh (D) Taping
12 34 567 8 9 10 11 12
ABO Anti-A AOOOOOOOOOOOO
Célula Anti-B BOOOOOOOOOOOO
Mecanografía Anti-AB COOOOOOOOOOOO
ABO A Cells DOOOOOOOOOOOO
Suero Las células B EOOOOOOOOOOOO
Mecanografía Las células O FOOOOOOOOOOOO
Rh (D) Anti-Dl GOOOOOOOOOOOO
Mecanografía Anti-D2 HOOOOOOOOOOOO
Anti-cuerpo de cribado o 1 R
2 O OOOOOOOOOOOOO
O2 R2 O OOOOOOOOOOOOO
(Fig-21.2 de microplacas formiato)
Las técnicas enzimáticas
técnica de enzima Una etapa
1. Dispensar 25pL suero, papaína de 25pL Low y 25 ul 3% de células de suspensión en solución salina o
LISS a los pocillos apropiados de la microplaca.
2. Incubar la placa a 37 ° C durante 20-25 minutos.
4. Examinar la aglutinación ya sea después de la agitación o después de inclinar a aproximadamente 60 ° -70 pag hasta el
control negativo comienzan a pista como se ha descrito antes.
Dos técnica enzima -etapa

Pre -tratamiento de los glóbulos rojos
Reactivo requerido: 1% papaína o 0,5% bromelina

1. Incubar un volumen de células empaquetadas, lavadas y 2 volúmenes de solución de papaína (véase pretratamiento de las
células rojas) a 37 ° C durante 15-30 minutos.
2. Lavar las células tres veces en solución salina.
3. Hacer 2-4% de células rojas de suspensión en solución salina normal o LISS.
Método:
1. Dispensar 25 | iL de suero, 25 ul de células pre-tratadas con enzimas en los pozos.
2. Incubar la placa a 37 ° C durante 20-25 min (cubierto con tapa).

4. Examinar la aglutinación ya sea después de la agitación o después de inclinar a alrededor de 60 ° -70 ° hasta que la
control negativo comienzan a pista como se ha descrito antes. 334
prueba de antiglobulina indirecta (IAT)
1. Dispensar 25 ul de suero y 25 (IL de una suspensión al 5% de los glóbulos rojos lavados en solución salina o
LISS en pocillos apropiados.
2. Incubar a 37 ° C durante 30 min (cubierto con una tapa)
3. Llenar el pozo con solución salina.
4. Centrifugar la placa a 200 g (1000 rpm) durante 40 segundos.

5. Se decanta la solución salina con un movimiento rápido de la placa.
6. Resuspender las células y mezclar en el agitador de placas durante 40-60 segundos, repite el proceso de
lavar cuatro veces y dejar las células concentradas después del último lavado.
7. Añadir 50 uL de suero sin diluir poliespecıfico contra la globulina humana- (suero AHG) a la
las células en cada pocillo.
8. Los contenidos de los pocillos se mezclan agitando la placa en el agitador de placas durante una
minutos a baja velocidad.

10. Examinar la aglutinación ya sea después de la agitación o después de la labranza a alrededor de 60 ° - 70 ° hasta que el
control negativo comienza a arrastrarse como se describió anteriormente.
11. Añadir ldrop de células IgG conciencia de todas las reacciones negativas.
12. Re-centrífuga de la placa y leer los resultados. Todas las reacciones negativas ahora deben ser positivos.
prueba de antiglobulina directa (PAD)
1. Dispensar 25 l de una suspensión al 5% de glóbulos rojos en solución salina.
2. Llenar el pozo con solución salina.
3. Lavar las células cuatro veces tal como se describe en la prueba antigloubulin indirecto (paso .5,6).
4. Realizar la prueba del peine como en la prueba de antiglobulina indirecta (Paso 7-12)
GELTECHNOLOGY
Gel Tecnología DiaMed ID Sistema Microtyping desarrollado por el Dr. Yves Lapierre de Francia, da más reproducible y resultados de
pruebas estandarizadas prueba de antiglobulina se puede realizar sin el lavado múltiple de glóbulos rojos antes de añadir en suero anti
globulina humana (AHG) y sin la necesidad de añadir sensibilizado las células de control a todas las pruebas negativas AHG. tecnología de
gel se puede utilizar para cualquier prueba de hemaglutinación inmunohematológico que tiene como su punto final, tales como:
• ABO y Rh
• El pulsar por otros sistemas de grupos sanguíneos
• selección de anticuerpos y la identificación
• La prueba de compatibilidad incluyendo pruebas cruzadas
La prueba de gel DiaMed ID se proporciona como geles, celebrada en microtubos contenidos en una tarjeta de plástico. Cada microtubo
contiene aproximadamente 35 ml de Sephadex gel (acrilamida dextrano) preparado en una solución tampón tal como LISS o solución salina. El
gel puede contener otros elementos: conservantes tales como azida de sodio, regentes específicos tales como AHG u otro antisueros
RBC-específico para la agrupación, agentes como albúmina de suero bovino etc. sedimentan Estos reactivos se añaden al gel en el momento
de la fabricación. Así. el reactivo se dispersa uniformemente en toda la longitud de la columna de gel. Seis de estos microtubos están
incrustados en una tarjeta de plástico para permitir la facilidad de manejo, el ensayo, la lectura y la disposición. Una amplia gama de sistemas
de prueba está disponible, incluida la tipificación de células rojas, DAT. detección e identificación de anticuerpos y pruebas de compatibilidad.
335
principio:
El principio básico de la prueba de gel es que, en lugar de un tubo de ensayo, el suero y la reacción celular se lleva a cabo en un microtubo que
consiste en una cámara de reacción que se estrecha para convertirse en una columna (higueras
21,3). Los glóbulos rojos o mezcla de células y suero, (según corresponda) se dispensan en el gel. Las células son siempre añadido
antes de la suero - de manera que el suero no entra en contacto con el gel, lo que es muy importante en IAT. Así se elimina la
necesidad de que el ' phase'as de lavado en las técnicas convencionales. La incubación se lleva a cabo, seguido de centrifugación en
condiciones estrictamente controladas.
Métodos Forward Agrupación ABO y
Rh (D) Determinación
• Una suspensión al 5% de las células rojas de ensayo

se prepara inLISS.
• 501 de esta suspensión se añade a cada una de

las
microtubos (1- 4 que tiene actividad anti-A, Anti-
B, anti-AB y
Fig. 21.3 Anti-D).
microtubos con Gel • Después de la incubación a temperatura
ambiente durante 10 minutos, se centrifuga la
tarjeta.
• Lea los resultados.
ABO Serum Agrupación
(Reverse agrupación)
agrupación inversa se hace generalmente a lo largo con la agrupación hacia adelante.
• Para agrupación inversa 50 uL de suspensión celular conocido 5% de las células A1 y B se añaden a los respectivos
microtubos. (5 y 6 respectivamente)
• 25 ul de cada paciente suero se añade a microtubos 5 y 6.
• Incubar a temperatura ambiente durante 10 minutos.
• La tarjeta se centrifuga a continuación y los resultados se leen.
DAT
DAT se realiza utilizando tarjetas del LISS / Coombs. Cada tarjeta contiene seis microtubos que contienen gel con poliespecífica suero
AHG incorporado en ella. Cada tarjeta se puede utilizar para llevar a cabo 6 pruebas.
• Una suspensión 0,8% de los glóbulos rojos del paciente se prepara añadiendo 10 T L de los glóbulos rojos del paciente a 1 ml de
solución de LISS.
• 50 ^ L de esta suspensión se añade a una microtubo.

• La tarjeta se centrifuga a continuación y los resultados se leen.
YO EN
Las tarjetas utilizadas para la realización de IAT son tarjetas LISS / Coombs contienen seis microtubos con poliespecífica AHG
incorporados en el gel. Cada tarjeta se puede utilizar para llevar a cabo 6 pruebas.
• células rojas apropiadas se añaden al gel primero.

• Esto es seguido por la adición de suero del paciente.
• Incubar a 37 ° C durante 15 minutos.
• Centrífuga y leer los resultados. 336

Detección e identificación de anticuerpos

selección de anticuerpos y la identificación utiliza tanto AHG y tarjetas de geles neutros. Prepapainized
células se usan con las tarjetas gel neutro y LISS células suspendidas se introducen en los geles
que contiene AHG.
Las reacciones de prueba
Las reacciones de aglutinación se clasifican similar a la de la hemaglutinación tubo de ensayo.

4+ reacción está representado por una banda sólida de los glóbulos rojos aglutinados en la parte superior de la columna de gel. Por lo
general, no hay glóbulos rojos son visibles en el fondo del microtubo.
3+ reacción se representa por una cantidad predominante de los glóbulos rojos aglutinados hacia la parte superior de la columna de gel
con unas pocas aglutina escalonados debajo de la banda más gruesa. La mayoría de los aglutinados se observan en la mitad superior de la
columna de gel.
2+ reacciones se caracteriza por aglutina los glóbulos rojos dispersos por toda la columna de gel con pocos aglutinados
en la parte inferior del tubo Micro. Aglutina deben ser distribuidos a través de las mitades superior e inferior del gel.
1+ reacciones se caracteriza por células aglutina rojas observadas predominantemente en la mitad inferior del gel columna con células
rojas también en la parte inferior. Estas reacciones pueden ser débiles, con unas pocas aglutina restantes en la zona de gel justo por encima
de los glóbulos rojos sedimento en el fondo del microtubo.
Negativo reacción se representa por las células rojas que forman un sedimento delineado bien en la parte
inferior
Las células aglutinadas forman una capa de Las células aglutinadas se dispersan a través de los
células en la parte superior de los medios de gel. medios de comunicación de gel y pueden
4+ concentrarse hacia el fondo del microtubo.
1+
Las células aglutinadas comienzan a dispersarse Todas las células pasan a través de los medios de
en medios de gel y se concentran cerca de la comunicación de gel y forman un botón de células
parte superior del microtubo. en el fondo del microtubo.
3+
Negativo
Las células aglutinadas dispersan intoe la Las células aglutinadas forman una capa en la
gelmedia y se observan a lo largo de la parte superior de los medios de gel. células no
longitud del microtubo. aglutinadas pasan al fondo del microtubo.
2+ El campo mixto
Fig-21.4
337
Fig-21,5 La centrifugación
de microtubos
del microtubo. El gel por encima del sedimento celular rojo es clara la libre de aglutinados.
Mixed-campo reacciones pueden ser reconocidos como una capa de aglutinados de glóbulos rojos en la parte superior de la
gel acompañado de sedimento de células no aglutinadas en el fondo del microtubo.
Ventajas de la Tecnología Gel

• los técnica de gel es simple, fiable, rápido de usar, reproducible y muy sensible.
• Una mayor uniformidad entre ensayos repetidos.
• son necesarios el volumen de muestra Disminución para llevar a cabo un gran número de pruebas.
• No tubo de agitación o la resuspensión de botón de glóbulos rojos que conduce a la variación entre los tecnólogos en la
lectura y la clasificación de la aglutinación.
• En AHG probar no hay etapas de lavado, y no hay necesidad de utilizar glóbulos rojos sensibilizados en pruebas negativas AHG
• La provisión de centrifugadora (Fig. 21.5) calibrado para girar a una velocidad óptima para la longitud fija y de tiempo
correcta, reducir el potencial de errores durante esta fase de la prueba.
• Más objetiva, la interpretación consistente y reproducible de los resultados.

• Las tarjetas tienen una vida útil de 1 año y un fácil almacenamiento a temperatura ambiente (18 - 25 ° C).
Desventajas de Gel Technique

Se necesitan los siguientes equipos:
• centrifugadora especial para dar cabida a las tarjetas de microtubos (Fig.21.5)
• incubadoras especiales para incubar las tarjetas de microtubos.
• Pipeta para disponer 25 ul de suero.

• Pipeta para dispensar 50 uL células rojas suspensión.
• Es caro. 338
VIDRIO microperlas TECNOLOGÍA
Este sistema para el cribado de anticuerpos irregular fue descrito en 1993 por Reis KJ Esta prueba se realiza en una microcolumna rellenada
previamente con microesferas de vidrio en la suspensión de suero globulina antihumana, cualquier reactivo de diagnóstico o solución isotónica
neutra. Las células sensibilizadas son atrapados por la suspensión de las microperlas durante la centrifugación de la columna. Véase la Figura
12.6.
Fig-12.6
La detección de glóbulos rojos sensibilizados se basa en el efecto de tamizado de microperlas de vidrio. Los glóbulos rojos y el suero se
incuban a la parte superior de una columna sobre la suspensión microesferas de vidrio. Estas microbolas están calibrados y durante la
etapa de centrifugación que retienen los aglutinados y las células no sensibilizadas de sedimento en la parte inferior. Kits son fabricados
por el sistema de diagnóstico Ortho y comercializados con el nombre de sistema de Ortho Bio Vue. Véase la Figura 12.7.
Fig-12.7
339
Cassettes de diferentes programas están disponibles como:
1. ABO-Rh (D) escribiendo con agrupamiento ABO inversa
2. AHG poliespecífica (anti-IgG + anti-C3d)

3. monoespecíficos IgG - AHG
4. Pruebas cruzadas
5. ABO-Rh (D) escribiendo en el recién nacido
Tecnología columna de aglutinar: Prueba
Pipeta Incubación centrifug

ABO y Rh (D) escribiendo 10? L de glóbulos rojos de - 5 minutos.
3-5% de suspensión
tipificación ABO inversa UNA 1 y células B + de 40 μI paciente - 5 minutos.
suero / donante
AHG prueba directa (DAT) 10 l de glóbulos rojos 3-5% - 5 minutos.
Indirecto prueba AHG (IAT) 50? L LISS + 10ul3-5% de células 10-30 min 5 minutos.
rojas suspensión + 40 l de suero del

paciente
Ventajas de la tecnología de perlas de cristal
1. tiempo de incubación mínimo de 10 minutos para la detección de anticuerpos o de compatibilidad cruzada
2. tiempo de centrifugación bifásica es sólo 5 minutos
3. En la prueba AHG no hay necesidad de lavar las células o el uso de células sensibilizadas para la confirmación
4. No tubo de agitación o re-suspensión de botón de células conduce a la variación en la lectura y la clasificación
la aglutinación
5. La provisión de centrífuga de calibrado para girar a una velocidad óptima de longitud fija y correcta
de tiempo, reducir el error durante esta fase de la prueba
6. Más objetiva, la interpretación consistente y reproducible de los resultados
Desventajas de la Tecnología de cuentas de cristal
1. centrifugadora especial para acomodar cuentas de vidrio de cassettes (Bio Vue TM Centrifugar)
2. incubadoras especiales a incuban los cassettes panes de vidrio (Bio Vue TM Incubadora 32)
3. Pipetas para dispensar 10 p.1, 40 μJ, 50? L
4. Es caro 340
22
Aseguramiento
de la Calidad en
la transfusión
sanguínea
Los servicios de transfusión sanguínea deben proporcionar sangre y productos sanguíneos que son seguros, puro, potente y eficaz. Para
proporcionar un alto nivel de seguridad de las prácticas de transfusión de sangre y seguras a los donantes de sangre, los médicos, los pacientes y
las familias de los pacientes, una filosofía de calidad debe ser desarrollado por los servicios de transfusión de sangre
El método de llevar esta filosofía de calidad en funcionamiento incluye, control de calidad, control de calidad y la mejora
continua de la calidad.
Aseguramiento de un producto de calidad incluye temas de seguridad de los pacientes y donantes de sangre, control de calidad de reactivo, el
control de la reparación y mantenimiento de equipos, competencia del personal, y el ensayo de un número definido de unidades de cada
producto para los parámetros adecuados y gestión de residuos peligrosos. Inherente a este objetivo es la provisión de un ambiente de trabajo
seguro. el mantenimiento de registros adecuados es esencial para el proceso de aseguramiento de la calidad y la seguridad. Además, la
recogida de datos apropiado, recuperación y análisis son también esenciales para el proceso de seguimiento de la calidad.
sangre y sus componentes son productos biológicos y considerado como medicamentos. el cumplimiento del banco de sangre con las
regulaciones federales y las normas prescritas en Drogas y Cosméticos Hechos es el requisito legal de la Contraloría General de
Drogas de la India.
El control de calidad, control de calidad y la mejora continua de la calidad son conceptos complementarios, pero claramente
diferentes
341
CONTROL DE CALIDAD
El control de calidad es la gestión del proceso de prueba. Incluye :
• La evaluación de la precisión y reproducibilidad de una prueba.

• Equipos o instrumentos utilizados para llevar a cabo las pruebas deben ser monitoreados para determinar si están funcionando
correctamente.
• Los reactivos deben ser probados para determinar si han mantenido su especificidad y sensibilidad.
• Control de calidad de los productos
SEGURO DE CALIDAD
• aseguramiento de la calidad es el término utilizado para todas las medidas de reclutamiento de donantes a la transfusión de
sangre o productos sanguíneos, para asegurar que los productos son de la calidad requerida para el uso previsto, y que los
resultados de laboratorio son fiables. Esto asegura que el paciente recibe una, ventaja positiva definida a partir de un producto en
particular, que los donantes, los pacientes y el personal no se vean perjudicados. Algunas actividades son totalmente bajo el
control de los servicios de transfusión de sangre, mientras que otros (por ejemplo, muestra de sangre recogida y administración de
sangre) pueden estar fuera de su control inmediato, aunque incluso éstos deben cumplir los requisitos establecidos por el servicio
de transfusión.
• La garantía de calidad implica definir, controlar y documentar todos los aspectos de un proceso o procedimiento de tal manera
que el cumplimiento de las normas determinadas se puede predecir. Así, el control de calidad es la parte integral de
aseguramiento de la calidad.
Mejora Continua de Calidad

• la mejora continua de la calidad es un amplio término que implica revisar si el cuidado adecuado y eficaz se
proporciona al paciente. También implica el proceso de reducción de la reanudación, el cuidado del paciente
apropiado y los residuos.
• En todos estos procesos de calidad, se hacen observaciones y se sacan conclusiones. se toman medidas correctivas si no
se cumplen las expectativas.
Principios de garantía de calidad en la transfusión de sangre

Para la práctica de transfusión segura, control de calidad requiere un sistema organizado de gestión y niveles bien identificados de
la responsabilidad individual, personal debidamente capacitado y laboratorios adecuadamente diseñadas y equipadas.
Dependiendo del nivel de operación, una sección con responsabilidad específica para el control de calidad bajo un alto nivel
técnico entrenado puede ser creado.
Las principales áreas que requieren atención en el programa de garantía de calidad incluyen:
• Local
• Personal
• Las especificaciones y el control de calidad de
• la sangre y los productos

• reactivos
• equipo
342
Aseguramiento de la Calidad en la transfusión sanguínea
• Manual de procedimientos operativos estándar (SOP)

• Documentación
• Educativa, programas de investigación y desarrollo.
• Introducción de la automatización y la informática (cuando sea posible)
Local
• El diseño y construcción de instalaciones de transfusión de sangre son aspectos importantes de buenas prácticas de
fabricación.
• Debe haber un espacio adecuado para el trabajo y el movimiento del personal, el hacinamiento debe ser evitado.
• Muebles, accesorios y material del suelo deben ser cuidadosamente seleccionados para que pueda ser limpiado, y conveniente
para trabajar.
• La iluminación debe ser adecuada en todo el recinto, y la iluminación adecuada puede ser necesario en la habitación y las zonas
donde las pruebas se llevan a cabo sangrado.
• Se debe prestar atención para una ventilación adecuada.
• energía y agua suministros adecuados, las instalaciones de residuos adhesión desechable y estricta a las normas de
saneamiento son esenciales.
• Local debe ser climatizado, si no es posible, al menos habitación sangrado, laboratorios, y el componente
sala de preparación debe ser aire acondicionado.
• Provisión de generador para suministro continuo de energía es esencial.
personal de ese centro debe ser suficiente personal con cualificación adecuada educación, capacitación y experiencia para asegurar un
rendimiento competente de las funciones asignadas aplicables a todas las categorías del personal que trabaja en el departamento de los
servicios de transfusión de sangre incluyendo laboratorios, los trabajadores sociales.
descripción del trabajo debe existir para todo el personal involucrado en el servicio de transfusión de sangre que incluye centro de donación.
El personal del personal deben ser amables, interesado, alegre y amable, así como profesional y eficiente.
personas técnicas
• Las personas técnicas deben tener título de estudios básico en la tecnología de laboratorio médico junto con la
experiencia de trabajar en el servicio de transfusión sanguínea.
• Se les debe dar la formación interna para los procedimientos de laboratorio, una vez que son contratados.
• La competencia del personal a continuar cumpliendo con sus funciones de trabajo asignados deben ser evaluados y
registrados periódicamente.
• No es aconsejable disponer de programa de educación médica continua (CME) para actualizar los conocimientos en las
técnicas recientes.
• El personal de supervisión deben revisar periódicamente los resultados y evaluaciones, para asegurar que todas las personas que
se adhieren a los estándares de prueba. Las acciones correctivas se deben tomar, si es necesario.
Los trabajadores sociales y organizadores donantes:
Los organizadores de donantes de sangre, que pueden ser trabajadores sociales, deben tener toda la información sobre la donación voluntaria de
sangre, necesidad de sangre y productos sanguíneos, y los avances científicos y técnicos en la sangre
343
bancario. No debe haber reuniones para los trabajadores sociales y los donantes organizadores a la que pueden expresar e intercambiar
opiniones acerca de su trabajo.
Los organizadores de los donantes deben ser corteses, interesado, alegre y amable, así como profesional y eficiente,
EVALUACIÓN DE LA CALIDAD Y revisión de la utilización

Evaluación de la calidad y la utilización está acreditada por:
Director del Servicio de Transfusión Sanguínea
Asegura que los técnicos hagan procedimientos de acuerdo con los procedimientos operativos estándar y control de calidad se
mantiene.
Representantes del Estado / central Drugs Controller
Asegura que el servicio de transfusión sanguínea sigue la regla y regultions establecidas en la parte B del XII Drogas y Cosméticos
Hechos y Reglas notificado por el Controlador General de Drogas (India).
Comité de Transfusión del Hospital
comité de transfusión hospitalario evalúa la adecuación del servicio de transfusión de sangre, así como el rendimiento de los
clínicos en el uso de la sangre y sus componentes de manera apropiada. Cuenta con representantes de las disciplinas que son
usuarios máximos de la sangre, superintendente médico como presidente, a cargo del servicio de transfusión sanguínea como
miembro - secretaria, y el superintendente de enfermería.
Papel de comité de transfusiones
■ Revisar la conveniencia de ordenar las políticas de sangre / células rojas / componentes.
■ manejo de revisión y administración de sangre y sus componentes.

■ Revisión de historias clínicas seleccionadas al azar de la lista de pacientes transfundidos.
■ Revisar el informe resumen de las estadísticas de uso, tales como -
• Número total de unidades de sangre / componente ordenado o emparejados cruz.
• Número total de unidades de sangre / componente transfusión dadas.
• Compatibilidad cruzada: relación de Transfusión
Se calcula dividiendo unidades de cruce-emparejado por el número de unidades transfundidas. Si es más, es un indicador
de que el exceso de unidades se les pide que 'en espera'.
■ Número de residuos y fuera unidades de fecha: Su alto número indica
• El manejo inadecuado de servicio de transfusión sanguínea
• Con el ordenamiento de sangre / componentes de la práctica de los médicos
■ Número de transfusión autóloga dado

■ Revisión de las reacciones transfusionales (en su caso, establecer medidas correctivas).
■ Para promover la educación médica continua en la medicina de transfusión para el personal del hospital.
■ Para preparar máximo horario orden quirúrgica de sangre (MSBOS) para los procedimientos quirúrgicos. Un comité de
transfusión hospitalario eficiente contribuirá a aumentar la seguridad de la sangre y los productos sanguíneos y su correcta utilización. 344
Procedimientos normalizados de trabajo (PNT), documentación, incluida
Todos los servicios de transfusión de sangre debe tener sus propios procedimientos operativos estándar (SOP) manual. Se debe tener
instrucciones en detalle acerca de las técnicas, procedimientos y otras actividades en el laboratorio del banco de sangre para mantener
normas uniformes de procedimientos y control de calidad. Cada actividad debe llevarse a cabo de acuerdo con las instrucciones
claramente escrito en los SOP. Los procedimientos operativos estándar deben revisarse tan a menudo como sea necesario; y la fecha de
revisión se graba con claridad. procedimientos operativos obsoletos deben ser retirados de la circulación. SOP debe estar disponible en
cada área de trabajo.
Manual de procedimientos operativos estándar debe incluir:

• La selección de donantes mediante un cuestionario
• La recogida de sangre (flebotomía)
• Procedimientos de pruebas y procesar las donaciones de sangre.
• El título y la breve explicación de la finalidad de la intervención.

• Los detalles de los métodos y el ejemplo de protocolos de trabajo.
• El procedimiento de notificación de los resultados, y las medidas que deben tomarse si se produce un problema.
• Especificaciones de los reactivos y equipo.

• Procedimientos de preparación de componentes de la sangre y su control de calidad.
• procedimientos de control de calidad específicos.
• El entrenamiento de los requisitos para el personal para llevar a cabo los procedimientos.
• Bioseguridad en el laboratorio de transfusión
Ventajas de SOP.
• Eso asegura que los estándares especificados se cumplen de manera uniforme y en todo momento.
• Ayuda a normalizar y controlar el rendimiento de todos los miembros del personal, en especial el
personal técnico.
• Esto ayuda en la formación del personal sobre todo los recién nombrados.
• Ayuda a que el personal en la realización de trabajo asignado.
ESPECIFICACIONES Y CONTROL DE CALIDAD DE REACTIVOS Principios
Generales
• Los reactivos deben ser de alta calidad y tienen un -la vida útil de por lo menos un año para su uso.
• Todos los antisueros debe cumplir con las normas establecidas para la potencia (título y avidez) y especificidad.
• Todos los reactivos antiglobulina humana (AHG) determinación del grupo sanguíneo y deben contener un conservante para
minimizar el crecimiento de bacterias y hongos.
• Ellos deben mantenerse en los refrigeradores a 2 ° C-6 ° C, sin embargo, no se recomienda la congelación. Las instrucciones del
fabricante deben seguirse para su almacenamiento.
• Todos los reactivos deben estar claramente etiquetados con el número de lote, fecha de caducidad y la temperatura de
almacenamiento; instrucciones de uso se incluyen con cada embalaje del reactivo.
345
• Todos los reactivos deben ser utilizados de acuerdo a las instrucciones del fabricante. Ellos deben ser re-estandarizados si
son para ser utilizado por técnicas alternativas, o en una forma diluida (por ejemplo ABO y Rh en el sistema de microplacas
o automático)
• Nuevos reactivos no deben ser introducidos en el trabajo rutinario hasta que las evaluaciones serológicas internos han
confirmado que los nuevos reactivos son satisfactorios.
• Policlonales (suero humano) los reactivos deben llevar una declaración diciendo que las donaciones individuales que se utilizan
para preparar el producto han sido probados y encontrados negativos para VIH
anticuerpo, HBsAg y el anticuerpo HCV. Sin embargo, dado que no existe ninguna prueba ofrece la completa seguridad de que
los productos derivados de la sangre humana no transmitan infecciones, debe ser manejado con cuidado.
REACTIVOS
Normalización de los reactivos de grupos sanguíneos se lleva a cabo por los fabricantes y que debe cumplir con los requisitos establecidos.
El control de calidad en el laboratorio el usuario debe realizar para comprobar los lotes nuevos para asegurar que cumplen con todas las
normas biológicas.
Casi todos los laboratorios utilizan reactivos de células rojas, ABO y Rh sueros, globulina anti-humana (AHG), una o más
proteasas, albúmina de suero bovino (BS A), solución salina isotónica y soluciones de sal de baja fuerza iónica (LISS). Su control de
calidad es muy esencial.
Tabla 22.1: Control de calidad de reactivo de glóbulos rojos Parámetros
Requerimientos de calidad Frecuencia de los controles
Apariencia No hemolisis o turbidez en el sobrenadante Cada día

mediante inspecciones visuales
Reactividad y reacciones claras con sueros conocida contra Cada día

especificidad antígenos de células rojas de la sangre
Si las células rojas reactivas están ligeramente hemolizados, las células se pueden lavar una vez con solución salina. Si el sobrenadante se vuelve
transparente después de un lavado, y que son reactivos, las células son aceptables para su uso. Hemolizadas y se descartan los glóbulos rojos
descoloridos.
CONTROL DE CALIDAD DE ANTICUERPO REACTIVOS
Control de calidad de los reactivos ABO:
Los principales criterios para la calidad de reactivos de anticuerpos ABO están probando para la especificidad, y la potencia (avidez, y
título). No debería haber ninguna reacción con control negativo, no reactiva cruz y no hay rouleaux o prozona fenómenos.
El reactivo debe ser claro en la inspección visual diaria. 346

Tabla 22.2 Control de calidad de reactivo ABO (anti-A, anti-B y anti-AB) Parámetro REQUISITOS
calidad Frecuencia del control

Aspecto No turbidez, precipitado, partículas o formación Cada día
de gel por insepction visual.
especificidad reacción clara con rojo Diaria y de cada nuevo lote.

células que tienen el antígeno (s) correspondiente; y
ninguna reacción con el control negativo.
Avidez aglutinación macroscópica con 50% de células rojas Diaria y cada nuevo lote
suspensión en suero homólogo de solución salina / normal
utilizando la prueba de cremallera; 10 segundos para anti-A,
anti-B y anti-AB con A 1 y / o células B a TA; 20 segundos con
A 2 y A 2 células B.
Reactividad No hemólisis inmune, la formación de Cada nuevo lote. •

rollos o prozona.
Potencia suero sin diluir debe dar +++ / C reacciones en tubo de Cada nuevo lote
ensayo de solución salina utilizando un 3% de rojo
células suspensiones a TA, el título debe ser de al
menos 128 para anti-A, anti-B y anti-AB con A, y / o B
células, 64 con A 2 y A 2 células B.
Tabla 22.3 Titer aceptable y avidez de reactivos ABO
Tipo antisueros de la Tipo de células rojas título Tiempo Intensidad

reactivo (2-3% de células en avidez
suspensión)
Anti-A policlonales Automóvil 1: 256 1: 10-12 sec +++
club británico 2 128 15-18 sec + + A +++
UNA 2 MOVER 1:64 15-18 sec ++
monoclonal UNA 1 1: 256 1: 3-4 sec +++

UNA 2 128 5-6 sec + + A +++
UNA 2 MOVER 1:64 5-6 sec ++++
- - -
- - -
Anti-B policlonales licenciado 1: 256 1: 10-12sec +++
en Letras 1 segundo 128 12-15sec +
347
Titer aceptable y avidez de reactivos ABO ( continuado)
O - - -
UNA 1 - - -
monoclonal segundo 1: 256 3-4sec ++++
UNA 1 segundo 1: 128 5-6sec ++ + A +++
O - - -
UNA 1 - - -
Anti-AB policlonal UNA 1: 256 10-12sec +++
segundo 1: 256 10-12sec +++
UNA 2
1:64 15-18sec + + A +++
O
monoclonal UNA 1 1: 256 3-4sec ++++
segundo 1: 256 3-4sec
UNA 1 1: 128 5-6sec +++
O - - -
Control de calidad de Anti-D sueros
Rh (D) es más inmunogénica y tiene una distribución de frecuencia más alta entre todos los cinco variedades de Rh. Control de
calidad de regentes anti-Rh (D) son más complejos que los reactivos ABO debido a la gran variedad de reactivos, métodos de uso y
el procedimiento de control necesario. El control de calidad de los principales tipos de reactivos anti -D se dan en la tabla 22-4 y 5.
Tabla 22.4 aceptable calidad de Rh contra sueros ( Anti-D)
Parameterl exigencia de calidad Frecuencia del control
Apariencia No turbidez, precipitiation, partículas o gel Cada día

formación mediante inspección visual
especificidad reacción clara con R1, células r Cada día y cada nuevo lote. y ninguna
reacción con ESO Células:
Avidez aglutinación visible con 40% de células rojas Cada día y cada nuevo lote
suspensión en suero ogous homol- usando la
prueba de diapositivas.
Reactividad Sin hemólisis inmune, la formación de Cada nuevo lote

rollos o fenómeno prozona.
Potencia suero sin diluir dar +++ reacciones en la prueba designada Cada nuevo lote
para cada suero y un título de 32-64 para el anti-D, anti-C
contra -E, anti-CD anti-DE usando, R, R, R, glóbulos rojos
R.
348
Tabla 22-5 Titer aceptable y avidez de Anti-D en Anti-Rh reactivo (D)
Tipo de Tipo de título + Avidez Intensidad

reactivo células rojas
Inmediato Tras 30-45
girar minutos de
incubación
IgM O, R o R 1 R 2 células 1: 64-1: 128 1: 128-1: 256 5-10 Sec +++

monoclonal
Mezcla de IgM 1: 128-1: 256 10-20 Sec +++

+ monoclonal IgG OR, ROR R 1 R 2 células 1: 32-1: 64
Mezcla de Lo mismo que arriba Lo mismo Lo mismo que arriba Lo mismo que arriba +++
monoclonal IgM que arriba
policlonal + (humano)
IgG.
Policlonales OR, ROR R 1 R 2 Células - 1: 32-1: 64 60 Sec +++

(humano) InAlb / Enz /
anti-Rh (D) AHGtest
Para Rh fiable (D) escribiendo los siguientes requisitos se deben cumplir:
1. Use dos reactivo distinto anti-Rh (D) de dos fabricantes diferentes o utilizar dos distintos
anti-Rh (D) reactivos de dos lotes diferentes de un mismo fabricante.
2. Incorporar Rh- positivo (grupo OR 1 r) y negativo Rh- ( ESO) las células de control con ensayo.
3. Cada muestra de prueba debe dar una prueba negativa 'auto' (las propias células y el suero propio). controles de automóviles
son necesarias para minimizar los resultados positivos falsos debido a la auto-aglutinación o la presencia de células
sensibilizadas in vivo ..
4. Monoclonal Rh (D) reactivos son poco fiables para la detección de D u.

5. Mezcla de anticuerpos monoclonales o mezcla de monoclonal IgM y policlonal de IgM e IgG (humano)
IgG se puede utilizar para la prueba de AHG para identificar D débil antign (D u).
Poliespecífica anti -Human Globulina reactivos (AHG).
Poliespecíficos reactivos antiglobulina humana tienen anti-complemento C3b y C3d, así como anti- acitvity IgG.
Para las pruebas de control de calidad:
• Cada vial de un nuevo lote se prueba por su especificidad y sensibilidad con IgG (anti-D) recubiertos o 1 r células rojas como
control positivo y no sensibilizados OR 1 células R como control negativo.
• Para Acitivity complemento, comprobar con glóbulos rojos recubiertos con C3b, C3d o células rojas sensitizied con la unión del
complemento (anti -Le una).
• La potencia de anti-IgG de AHG reactivos pueden ser estimados mediante valoración usando IgG (anti-D) sensibilizada OR 1 células
r.
349
Tabla 22.6 aceptable calidad de reactivo anti-globulina: Parámetro
exigencia de calidad Frecuencia del control
Apariencia No precipitado, partículas o gel formación Cada día

mediante inspección visual.
Reactividad y • Ningún fenómeno prozona Cada nuevo lote.

especificidad • No hemólisis o aglutinación de los glóbulos rojos Cada nuevo lote.
no sensibilizados
• La aglutinación de los glóbulos rojos sensitizied con Cada día y cada nuevo lote
suero anti-D que contiene actividad de anticuerpo de no
más de 0,2 mg / ml.
• La aglutinación de los glóbulos rojos sensibilizados con Cada nuevo lote.
un anticuerpo de unión al complemento (Le eganti una).
• La aglutinación de los glóbulos rojos recubiertos con C3b Cada nuevo lote.
y C3d, y no débil aglutinación / con células rojas C4
recubiertos.
Los requisitos mínimos para la calidad del producto de AHG son:

Anti-IgG 1:64
Anti-C3 / C4 1: 4
Para más detalles - ver capítulo de la globulina anti-humana (Suero de Coombs).
Reactivo de Enzima
Las enzimas proteasas (por ejemplo papaína y bromelina) son ampliamente utilizados para la detección de anticuerpos. Su idoneidad en general
se basa en la demostración de la actividad serológica satisfactoria con una débil IgG anti-Rh (D). Para el control de calidad de la proteasa
(enzimas) ver tabla 22.7
Tabla 22.7: Control de calidad de las proteasas (enzimas) Parámetro Requerimientos
de calidad Frecuencia del control
Reactividad • No aglutinación o hemólisis utilizando suero AB Cada día

inerte.
• Aglutinación (+++ / C) de las células sensitizied con una Cada lote
IgG débil (Anti-D).
Potencia • Un anticuerpo IgG, preferabely anti-D estandarizada para dar un Cada lote
título de aproximadamente 32-64 por la técnica de proteasa, debe
mostrar el mismo título en pruebas repetidas con diferentes lotes.
• El título de la enzima 2-etapa debe al menos ser igual al Cada lote

título obtenido con IgG (anti-D) mediante la prueba de
AHG.
350
La técnica de una etapa, en el que la enzima, anticuerpo y las células rojas son todos mezclados es satisfactoria
pero no tan sensible como la técnica de 2 etapas.
Albúmina de suero bovino (ASB)
Se utiliza por lo general como
1. 22% de albúmina como un potenciador de la aglutinación.
2. 1-7% de albúmina como estabilizador en los demás reactivos especialmente aquellos que deben almacenarse a 4 ° C.
Tabla 22.8: Control de calidad de 22% de albúmina de suero bovino (BSA)
Parámetro exigencia de calidad Frecuencia del control
Apariencia No precipitado, partículas o gel formación Cada día
mediante inspección visual.
Pureza > 98% de albúmina, como determied por Cada nuevo lote
electroforesis.
Reactividad La ausencia de aglutinación de los glóbulos rojos sensibilizados; Cada nuevo lote
ninguna actividad hemolítica; ningún fenómeno prozona.
Potencia IgG anti-D debe dar un título de 32-64 con glóbulos Cada mes
rojos R 1 r
Control de calidad de LISS (Baja Resistencia Lonic Saline)
Para la preparación y control de calidad de la lista véase el capítulo sobre métodos especiales.
Tabla 22.9: Control de calidad de solución salina normal
Apariencia No turbidez o partículas mediante Cada día

inspección visual
contenido de NaCl 0-154 mol / l (= 9 g / I) Cada nuevo lote
PAG H 6.0-8.0 Cada nuevo lote
hemólisis Mezcla de 0,1 ml de solución salina y 0,1 ml de Cada nuevo lote
5% suspensión de glóbulos rojos se centrifugó después
de 10 min, sin hemólisis.
Tabla 22.10: Control de calidad de agua destilada
Apariencia Claro, no hay partículas en inspecciones visuales Cada día
PH 6.0-7.0 Cada nuevo lote
351
Manual técnico Transfusion Medicine Manual
Control de calidad de sulfato de cobre (CuSO 4) gravedad específica 1,053

Véase el capítulo sobre la preparación de soluciones y métodos fo
Control de calidad de los componentes sanguíneos VARIOS

Control de calidad de la sangre y sus productos depende;
• La selección de los donantes
• Calidad de la solución de recipiente y conservante anticoagulante
• Técnica de flebotomía
• Temperatura de almacenamiento
Control de calidad de sangre entera
• Control de calidad de volumen de sangre entera: se pesan al menos 1% de las donaciones y calcular el volumen de la fórmula dada a
continuación:
Vol (ml) = Wt. de la bolsa de sangre + (g) - peso de la bolsa de vacío (g)
1.05
• Actualmente variando cantidad de sangre se recoge 350/450 ml en varios centros. Centros de preparación de componentes de la
sangre toman 450 ml de sangre.
• La mayoría de centros utilizan equipos para sacudir automático y un peso de la sangre recogida.
Tabla 22.11 El control de calidad de sangre entera. Parámetro
Requisito de la calidad Frecuencia de control
Volumen 350/450 ml ± 10% 1% de las unidades
Anticoagulantes * 49/63 ml Todas las unidades
PCV (Hct) 30 a 40% 4 de unidades al mes
HBs Ag Negativas por ELISA Todas las unidades
Anti-HCV Negativas por ELISA Todas las unidades
Anti-VIHI y II Negativo por ELISA Todas las unidades
Sífilis Prueba de selección negativa Todas las unidades
Esterilidad por la cultura Periódicamente (1% de todas las unidades)
* Volumen de anticoagulante debe ser proporcional al volumen de sangre. 14 ml de CPD / se

requiere solución anticogulant CPDA -I para 100 ml de sangre.
Tabla 22-12: Control de calidad de los glóbulos rojos concentrado (preparado a partir de sangre 450 ml) Parámetro
exigencia de calidad Frecuencia del control
Volumen 280 ± 40 ml 1% de las unidades
PCV (Hct) 109 C ± 59c periódicamente
352
Tabla 22-13: Control de calidad de los glóbulos rojos en sol conservante. (Adsol / SAGM)
Volumen 350 ± 20 ml 1% de todas las unidades
PCV (Hct) 55-65% periódicamente
leucocitos Los glóbulos rojos -poor
Leucocitos glóbulos rojos pobres tengan al menos 70% de las células blancas retiradas al tiempo que conserva al menos el 70% de células de sangre rojas.
Tabla: 22-14 Control de calidad de los glóbulos rojos pobres Leucocytes-
Método de Parámetro exigencia de Frecuencia del

PREPARACIÓN calidad control
Leucocitos hematíes Los glóbulos blancos <70% leucocitos de 4 unidades al mes

pobres modificados por eliminaron las células rojas cantidad original
centrifugación residuales que quedan > 70% de la
cantidad original
glóbulos rojos lavados plasma eliminado 99%

pérdida de glóbulos rojos 20%
leucocitos retirados 85%
leucocitos pobres Los glóbulos blancos eliminan 99% eliminado 4 unidades al mes
células rojas modificadas Los glóbulos rojos restantes 90-95%.

por filtro de leucocitos
Tabla: 22-15 Control de calidad de concentrado de plaquetas.
Control de calidad de plaquetas concentrado preparado a partir de 450 ml de sangre entera
Calidad de parámetros requisitos Frecuencia del control
Volumen 50-70 ml Todas las unidades
Las plaquetas cuentan > 5.5xl0 10 4 unidades al mes
pH > 6.0 4 unidades al mes
contaminación RBC 0,5 ml 4 unidades al mes
contaminación WBC 5.5xl0 7 - 5xl0 8 4 unidades al mes
Control de calidad de concentrado de plaquetas preparar a partir de la capa leucocitaria
Volumen 70-90 ml 4 de unidades al mes
Recuento de plaquetas 6-9X10 10 4 de unidades al mes
PH > 6.0 4 de unidades al mes
contaminación WBC > 5.5X10 6 4 de unidades al mes
contaminación RBC Traces a 0,5 ml 4 de unidades al mes
En unidad de inspección visual que no tiene una coloración rosa o rojo se puede suponer que para contener glóbulos rojos insuficiente para
causar immuniztion.
353
Tabla: 22-16 Calidad de concentrado de plaquetas por aféresis
Parámetro Requisito de la calidad
Volumen 200-300 ml
Las plaquetas cuentan > 3.0-7.0xl0 11
pH > 6.0
leucocitos residuales <5,0 x 10 6
glóbulos rojos traza a 0,5 ml
Tabla: 22-17 de control de calidad del plasma fresco congelado (FFP)
Parámetro Control de calidad Frecuencia del control
Volumen 200-220 plasma 4 de unidades al mes
factores de coagulación estables 200 unidades de cada factor 4 de unidades al mes
Factor VIII 0,7 unidades / ml 4 de unidades al mes
fibrinógeno 200-400mg 4 de unidades al mes
Tabla: 22-18 Control de Calidad de crioprecipitado (factor VIII)
Parámetro Control de calidad Frecuencia del control
Volumen 10-20 ml De vez en cuando
El factor VIII 80-120 unidades De vez en cuando
el factor de von Willebrand 40-70% del original presente ocasionalmente.
El factor XIII 20-30% del original De vez en cuando
fibrinógeno 150-250 mg De vez en cuando
fibronectina 55 mg De vez en cuando
unidades 75% muestreados y probados deben tener los valores indicados anteriormente.
Tabla: 22-19 Control de Calidad de plasma. (Congelado)
Parámetro Cantidad requisito
Volumen 200-220 ml
factores de coagulación estables 200 unidades de cada factor
Factor V, VII, fibrinógeno Reducido
354
Tabla: 22-20 Control de calidad de granulocitos
A: Los granulocitos preparados a partir de aféresis
Parámetro Cantidad requisito

granulocitos 1 x 10 10
otros leucocitos 0,1 x0.7xl0 9

Las plaquetas 2-10 x 10 11
glóbulos rojos 5-50 ml
Plasma 200 - 400 ml.
HES si se usa 6-12% del volumen de
B: Los granulocitos preparan a partir de una sola unidad de sangre Parámetro
Cantidad requisito
Volumen 200-250 ml
granulocitos 0,5-1 x 10 9
Control de calidad de los equipos.
Selección y Evaluación
1. Todos los equipos utilizados en el banco de sangre debe cumplir con los estándares técnicos, eléctricos y de seguridad obligatorias.
2. Preferiblemente equipo se debe comprar para los que la experiencia para el mantenimiento y la reparación está disponible localmente
con el fabricante / proveedor.
3. La instalación debe ser formalizada con la asistencia del personal de la instalación comercial en conjunto con los
departamentos de ingeniería hospitalaria, para garantizar el cumplimiento eléctrica
estándares de seguridad.
4. Una vez que el equipo ha sido instalado y calibrado de acuerdo con las especificaciones del proveedor, se debe confirmar
que su desempeño cumple con los estándares requeridos. Se puede entonces ser introducido en el trabajo de rutina.
5. Cada equipo debe ser revisado y evaluado para su buen funcionamiento después de la reparación y su registro debe ser
mantenido.
Control de calidad general de Equipo

1. El rendimiento de los equipos de laboratorio debe ser monitoreado periódicamente, el resultado
deben ser registrados y el ajuste se hará si es necesario.
2. Programa de mantenimiento preventivo, incluyendo la limpieza y la recalibración es obligatorio.

Este programa debe ser planificada, en conjunto con especialistas ingeniero de mantenimiento del hospital o del contrato de
mantenimiento anual, con el fin de minimizar la interrupción de los servicios.
3. El personal del laboratorio debe hacer la limpieza del equipo, y la verificación periódica de la velocidad por el tacómetro y la
temperatura de termómetro.
El control de calidad y mantenimiento del equipo: Refrigerador para el
almacenamiento de la sangre:
• Leer gráfico de registro de temperatura y de temperatura digital con frecuencia, al menos una vez al día, el rango de temperatura
apropiado está entre 2-6 ° C.
355
• El mecanismo de las agujas del reloj conduce el registrador de temperatura debe de heridas regularmente y el gráfico se cambian
semanalmente.
• periódicamente, temperatura dentro del gabinete debe ser contador verificado con la ayuda de
termómetro de precisión.
• Sistema de alarma se debe a pilas e independiente del suministro eléctrico principal. El sistema de alarma deberá ser ajustada
de una manera tal como para hacer el sonido cuando la temperatura es fuera del lado de la gama requerida de 2 0- 6 0 C. El
sistema se debe comprobar una vez a la semana por inmersión del sensor en agua con hielo (para baja temperatura) y en
agua a 15 ° -20 ° C (para una temperatura más alta).
Si el sistema de alarma no está funcionando adecuadamente medidas correctoras deben
ser tomado.
• refrigerador de sangre debe estar limpia y bien iluminada
congeladores:
• Control de calidad de los congeladores es similar al refrigerador para bancos de sangre. Compruebe el temperaturechart y digital de la temperatura
con frecuencia al menos una vez al día.
• Periódicamente comprobar la temperatura del sistema digital por termómetro de precisión mantenido dentro del gabinete
periódicamente.
• Si no existe un sistema de descongelación automática debe ser descongelada cada vez que sea necesario.
Centrífuga refrigerada:
• Esto debe ser revisado por el ingeniero de servicio, cada 3-4 meses.
• Precisión de la velocidad y el tiempo se debe comprobar con el metro de precisión rpm (tacómetro) y cronómetro.
• La temperatura dentro del taza de la centrifugadora debe ser registrada por un probador de temperatura con la tapa cerrada y el
diseño de rotor.
Centrífuga de laboratorio (Bench Top):
• Esto se debe comprobar cada 3-4 meses para la exactitud de la velocidad y el tiempo con el medidor de precisión
rpm (tacómetro) y el cronómetro.
• Se debe limpiar con regularidad.
baño de agua y la Incubadora:
• Ellos deben mantenerse limpios.
• La temperatura debe ser revisado diariamente.
• La exactitud del termómetro también debe ser revisado periódicamente
• El agua debe ser cambiado con frecuencia.
Microscopio:
• Mantenga el microscopio cubierto no cuando está en uso
• Lubrique el ajuste grueso de la cremallera y el condensador cada seis meses.
• Mantenga limpia etapa, condensador limpio, lentes, lentes con papel humedecido con frecuencia y
limpiar las lentes inmediatamente si accidentalmente se ensucia.
lavador de células automático:
• lavador de células automático es centrífuga programada para agregar solución salina automáticamente a tubos de ensayo, a continuación,
centrifúguelas y decantar la solución salina. Ellos se pueden configurar para realizar esta función 1-4 veces.
356
• La lavadora de células se debe comprobar periódicamente para determinar si los tubos reciben
correctamente llena con solución salina, se vació y se realiza el botón adecuado de las células.
• Un estrechamiento en la tubería de entrada de solución salina, el bloqueo del puerto de solución salina debido a los cristales de sal o puerto salina doblada o
desalineada puede dar rellenos irregulares y lavados inadecuadas.
• Los tubos de plástico se debe revisar mensualmente por cualquier deterioro.
• Realizar titulación duplicado de las normas de los antisueros, por ejemplo, Anti-D (IgM + IgG)
• contra las células positivas D en solución salina. Lavar un conjunto de título con lavador de células y otro conjunto de forma manual, prueba ambos establecidos
por el suero antiglobulina. Puntuación no debe diferir significativamente.
Los equipos automatizados para sacudir y un peso de bolsa de sangre:
• Eso debe ser revisado diariamente por su rendimiento.
• Comprobar su sistema de pesaje con un peso conocido en gramos.
CONTROL DE LA CALIDAD DE LAS TÉCNICAS
• El objetivo del control de calidad de las técnicas es garantizar un alto nivel de rendimiento de las técnicas más
comúnmente utilizadas, tales como ABO y la tipificación Rh, prueba globulina humana anti-, detección e identificación de
anticuerpos irregulares de clínica
importancia y prueba de compatibilidad.
• Técnicas que han sido validados para la exactitud, fiabilidad y sensibilidad están sujetas
al monitoreo de la calidad mediante el uso de controles positivos, negativos y automático.
• errores técnica puede ser debido a:
• La falta de reactivos adecuados
• La falta de atención a tiempo de incubación o la temperatura, o la velocidad de centrifugación y la hora,
• Un lavado insuficiente de las células.
• células demasiado fuertes o demasiado débiles suspensión, hemólisis leerse como un resultado negativo
• La falta de confirmar los resultados negativos bajo el microscopio.
SEGURIDAD BIO EN EL LABORATORIO TRANSFUSION

• Es esencial que la práctica de trabajo seguro exista y se mantiene como el personal en los laboratorios de transfusión de sangre
están constantemente en riesgo de infección de la sangre que que manejan
todos los días.
• Análisis microbiológico HBsAg, anticuerpos contra el VIH y el VHC debe realizarse en una habitación separada.
• Para la desinfección de la solución de hipoclorito% viral y bacteriana contaminación 1 es el desinfectante de elección para uso en
banco de sangre. Todos los tubos y portaobjetos de vidrio utilizadas deben ser desinfectados en solución hyprochlorite antes del
lavado, y tubos de plástico deben ser sumergidos en hyprochlorite antes de su eliminación, el tiempo de mantener
el material infectado en hyprochlorite
solución debe tener al menos 30 minutos.
• Para la desinfección derrame de sangre y equipos muy sucia, solución hyprochlorite de 10 veces de la fuerza (1%) debe
ser utilizado.
• El material infectado debe ser descontaminado en autoclave, antes de su eliminación o incinerados.
Precauciones generales de seguridad son:
• No se permite comer, beber, fumar o aplicación de cosméticos en el laboratorio.
• pipetear con la boca está prohibido.
• Cualquier interrupción en el corte Tike piel, herida por punción o erupción cutánea debe mantenerse cubierto de agua a prueba de vestidor.
357
• capas protectoras deben ser usados en el laboratorio y se deben retirar antes de salir del laboratorio
• El personal del laboratorio debe utilizar guantes desechables.
• Las manos deben lavarse adecuadamente antes de salir del laboratorio.
Mantenimiento de registros Sistema
banco de sangre y servicios de transfusión de sangre deben tener un manual de sistema de archivo, informatizado o una combinación de
ambos. Los registros deben ser indeleble, legible mano oa máquina o pueden ser retenidos por vía electrónica, proporcionar que puedan ser
recuperados fácilmente para referencia de revisión y existe un respaldo adecuado en caso de fallo del sistema. Los registros deben ser
almacenados de manera que los protege de los daños y de la destrucción o modificación accidental o no-autorizado. Los registros deben
mantenerse durante 5 años según lo dispuesto en medicamentos y cosméticos Hechos y reglas.
Un banco de sangre debe ser capaz de trazar una unidad de sangre / componente de la colección / preparación para desechable final en una manera oportuna.
documentación eficiente requiere un diseño apropiado de las formas, etiquetas y registros para cada actividad
de banco de sangre. Registro debe ser legibles y la corrección debe ser rubricado.
Registro mínimos requisitos de mantenimiento son: Registro de
Donantes de Sangre formulario de registro de los donantes tiene:
• consentimiento de los donantes de sangre para la donación
• nombre y el padre / esposo el nombre del donador
• Donación - voluntaria o reemplazo

• Fecha de nacimiento (edad), sexo y peso
• Dirección (oficina y residencia) y número de teléfono
• Historial de enfermedad
Registro de la donación de sangre
• Fecha de la donación de sangre
• Donación número (número de identificación)
• registro físico examen - pulso, la temperatura y la presión arterial

• Hemoglobina

• Los resultados de HBsAg, anti-HCV, anti-HIV 1 & 2. VDRL / RPR y pruebas de malaria
• Eliminación: emitido para transfusión o desechado
Registro de componente de sangre Preparación
• Nombre del componente
• número donación
• Fecha de preparación
• Resultado de las pruebas de marcadores de infecciones transmisibles
• Eliminación: emitido para transfusión o desechado
358
Garantía de Calidad de Transfusión de Sangre
formulario de solicitud del destinatario
• Nombre del paciente con el nombre de padre / esposo
• Admisión / número de registro

• La edad y el sexo
• Nombre del hospital - número de habitación / cama
• Nombre del médico que atiende al paciente
• Diagnóstico y razones de la transfusión

• Número de unidades de sangre / componente requerido
• Fecha y hora de requerimiento

• Requisito es de rutina o de emergencia
Compatibilidad protocolo de ensayo en el Formulario de Solicitud
• ABO del destinatario y el grupo Rh (D)
• detección de anticuerpos en la sangre del paciente
• número donación unidad de donador
• ABO y Rh (D) de donante unidad
• Cross-juego para IgM y IgG

• Resultado de la compatibilidad: compatible o uncompatible
• Inicial del técnico que realiza la prueba
Sangre / Blood Componentes Número de registro:
• número de serie y fecha
• el nombre del paciente, edad y sexo
• número de admisión y número de habitación / sala
• ABO y Rh (D)
• Número de donación, ABO y Rh (D)
• Fecha de la Colección y fecha de caducidad
• Nombre de Componentes
• Compatibilidad para IgM y IgG
• Cruz-igualada por
• Publicado por y hora de emisión
Registro de reacciones a la transfusión de sangre y sus investigaciones
• casos de reacción de transfusión reportados deben ser investigadas
• Registro debe mantenerse
Registro de las pruebas Infecciones Marcadores:
• Anti-HIV 1 & 2test

• HBsAgTest
• Anti-HCVtest
• VDRL / RPR
• Malaria
359
Otros documentos utilizados por los servicios de transfusión de sangre:
• De registro de los artículos de consumo.
• Registro de los artículos no consumibles.
• Daily registro de acciones de la sangre y componentes
• registro de control de calidad
Para más detalles de documentación y registro véase el capítulo sobre Seguridad de la sangre y federales Regularidad
360
sistema HLA
Laboratorio
técnicas
El Complejo Mayor de Histocompatibilidad (MHC) existe en casi todas las especies de animales y en el hombre está representado por
el sistema HLA. La letra H en HLA designa humana y L designa leucocitos, ya que éstos eran las primeras células que se muestran
para llevar a los antígenos de este complejo. La letra A fue originalmente una designación locus. Sin embargo, con el descubrimiento
de varios más loci HLA, es
ahora toma para representar un antígeno. sistema HLA es el determinante genético más importante de la aceptación o el rechazo del injerto
entre genéticamente distintas los individuos y por lo que sus productos son conocidos como
las principales moléculas de histocompatibilidad en contraste a otros loci genéticos, los cuales ejercen solamente relativamente
efectos menores sobre histocompatibilidad. Así individuos que expresan los mismos moléculas MHC
aceptar injertos de tejido entre sí, mientras que los que difieren en sus loci MHC rechazar tales injertos.
YO. GENÉTICA DE HLA
Las moléculas de HLA están codificados por un grupo de genes en una pequeña región de aproximadamente 2cm (centimorgan)
de longitud, en el brazo corto (p21.3) del cromosoma 6. La región tramos
aproximadamente 4 megabases o 4x10 6 nucleótidos y contiene numerosos genes, sólo algunos de los cuales se ocupan de
Histocompatibilidad. La principal biológica funcion de los genes HLA
se refiere a la presentación de extranjero (o auto) antígenos al sistema inmune. Por lo tanto moléculas de HLA actúan como
'receptores' que los fragmentos de péptidos de captura de antígeno que se muestran (o presentan) el
la superficie de la célula donde pueden ser reconocidos por las células T apropiadas. En la presentación de antígenos extraños
361
a las células T, moléculas de HLA evocan CTL (linfocitos T citotóxicos) y células T helper respuestas,
que luego regular la inmunidad específica.
El sistema HLA contiene cerca de 240 genes potenciales dispuestos tan estrechamente entre sí ese
por lo general se heredan juntos. Un conjunto de antígenos en el mismo cromosoma heredado en bloque de cada padre
se llama un haplotipo. Casi el 40% del total de genes de HLA tienen inmune relacionada
funciones. Hay 6 importante loci HLA codificada en el MHC humano (Fig. 23.1). Estos genes codifican los productos
estructuralmente homólogas, que se clasifican en HLA de clase I y moléculas de clase II sobre la base de su estructura,
distribución en los tejidos, fuente de antígeno péptido y la función
de la respuesta de células T.
Las moléculas de HLA de clase I están codificadas por tres loci genético distinto, conocido como HLA-A, B y C, agrupadas en la
región de clase I del MHC y que abarca aproximadamente 2 megabases. Las moléculas de la clase II incluyen HLA-DR, DQ y DP, cada uno
de los cuales está codificado por los loci genéticos distintos agrupado en la región de clase II que abarca aproximadamente 1 megabase.
Cada uno de los 6 loci ligados codifica un producto HLA distinto expresado en la superficie de las células presentadoras de antígeno. La
parte del MHC entre la clase I y clase II regiones se refiere como la región de clase III o central.
La Fig 23.1 El complejo mayor de histocompatibilidad: El complejo mayor de histocompatibilidad humano (MHC) en el
brazo corto del cromosoma 6. El HLA de clase I, clase II y Clase III regiones se muestran que abarca una región 4000 Kb.
transportador TAP de péptidos antigenec; 21- OHOSteroid enzima de 21-hidroxilasa; C4 A & B-complemento loci C4; factor
de Bf-properdina B la patheway complemento alternativo; C2- componente del complemento C2; TNF-factor de necrosis
tumoral, clase MICA-MHC I gen de la cadena relacionados; gen haemachromatosis HFE. La clásica loci HLA) A, B, C, DR,
DQ, DP) se muestran en barras sólidas
4.1.1 Polimorfismo en el MHC
Una característica única de el sistema HLA estrechamente relacionada con su importancia biológica es su ,
polimorfismo extraordinario. En efecto, no hay otra loci sabe que tienen grado similar de
polimorfismo, lo que significa ese excepcional enterrar- variabilidad individual es encontrado en las secuencias de ADN
de moléculas de HLA de una población.
Todos regiones el MHC se sabe que son altamente polimórficos, constituyendo varias cercanamente
vinculado loci cada uno con un gran número de genes que puede ser aún más dividido en muchos tipos alélicas
que difieren en sus secuencias de nucleótidos. La figura 23.2 muestra el número de alelos en los últimos años
362
definido por separado por medio de técnicas basadas serológicas y de ADN en el HLA de clase I (A, B, C loci) y II (DR, DQ, DP loci)
regiones clase. En julio de 2001, más de un total de 1340 alelos se han conocido a nivel del ADN (IMGT / base de datos de HLA)
(Robinson et al, 2000).
Eso es evidente ese la determinación del polimorfismo depende fuertemente de la metodología
empleado para el estudio. Por lo tanto polimorfismo detectado por molecular tecnologías es mucho más grande
que la detectada por serología (Tabla 23.1).
Tabla 23.1. Polimorfismo en HLA. Número de alelos definidos por métodos basados serológicas y de ADN.
UNA segundo do DR DQ DP
No. de alelos
Serología 23 47 8 14 9 6
Molecular 201 412 106 262 46 97
Teóricamente varios millones de combinaciones fenotípicas (Aproximadamente 150 mil millones o incluso
más) son posibles en el sistema HLA. Un estudio detallado de diferentes grupos de población revela que el grado de polimorfismo
en el sistema HLA puede no ser tan extensa como se indica ya que ciertos alelos están asociados entre sí con más frecuencia de lo
esperado sobre la base de sus frecuencias de los genes individuales. Esta asociación no aleatoria de los alelos de loci HLA dos se
encuentran juntos en el mismo haplotipo HLA es desequilibrio termed''Linkage' y se expresa en términos de delta.
Eso se conoce a variar entre las diferentes poblaciones. Cada individuo hereda dos
antígenos de cada loci -A, -B, -C y DR, uno de cualquiera de los padres. Un conjunto de antígenos en el mismo cromosoma heredado
en bloque de un padre se llama un haplotipo. Los dos haplotipos HLA en
un individuo formar el genotipo, mientras que el perfil total de antígeno HLA constituye el fenotipo.
363
De acuerdo con el patrón mendeliano de segregación al azar, un niño en la familia tiene una probabilidad del 25% de ser HLA idéntico con
uno de sus hermanos, 50% de probabilidad de ser HLA haplo-idénticas (compartiendo un único haplotipo parental) y 25% de probabilidad
ser HLA no idéntico, es decir, una falta de coincidencia total. Ya que
padres y descendencia comparten 50% de los genes, el partido HLA en esta categoría de trasplantes es un 'partido de un haplotipo', es decir, el
donante y los receptores se hacen coincidir para un cromosoma HLA.
3. NOMENCLATURA
Los antígenos HLA se designan numéricamente por separado para cada locus. Individual loci se dan
nombres descriptivos en letras romanas, por ejemplo, HLA-A26, HLA-B8, HLA-DR3, etc. A 'prefijo W en el número
indica una especificidad taller, que, aunque reconocido serológicamente, no tiene todavía
alcanzado la definición óptima, por ejemplo, HLA-BW22 o DRw6. Con la introducción de procedimientos de biología molecular,
las secuencias de nucleótidos y aminoácidos de casi todos los alelos en el HLA
sistema han dado a conocer. Por lo tanto, una nomenclatura revisado que se ha introducido entra
alelos de la cuenta (y sus divisiones) definidos en cada uno de los alfa o beta cadenas de loci individuales. Por ejemplo, el DR4
original se ha dividido en al menos 22 subtipos. Éstas se designan como símbolo locus (por ejemplo, DRB1) seguido por (*) y luego el
número de alelos. En consecuencia, los nuevos alelos DR4
y sus subtipos están diseñados como DRB1 *, 040l. * 0402, * 0403, etc., indicando varios molecular
subtipos. Igualmente, los 14 subtipos conocidos de HLA-B27 se designan como B * 2701, B * 2702,
B * 2703, etc. Un ejemplo de la nueva nomenclatura de una alelo DR4 se muestra a continuación.
HLA-DRBI * 04 02
Subtipo de un alelo
nombre del locus
familia alélica
4. Métodos de Laboratorio DE LA VERIFICACIÓN HLA
las pruebas de HLA se lleva a cabo en pacientes que requieren trasplante de órganos y de médula ósea con el fin de encontrar un donante
compatible adecuado de entre los miembros de la familia o el grupo de donantes no relacionados. coincidente de los donantes es esencial para el
trasplante para evitar el riesgo de enfermedad injerto contra huésped (GVHD) y el injerto
rechazo. Un donante emparejado casa llena es esencial para la médula ósea

trasplante. Por otro lado, los trasplantes de riñón se encuentran para funcionar bien incluso con una falta de coincidencia del 50% con el receptor.
Desde alelos HLA determinan la susceptibilidad a enfermedades, su identificación
se ha utilizado con fines de diagnóstico y / o el pronóstico. El ejemplo más común en esta área es la prueba de HLA-B27 de la
espondilitis anquilosante y espondiloartropatías relacionados. pruebas de HLA precisa es también esencial
para el componente de la sangre terapia, antropológicos estudios la participación de diferentes
grupos raciales y para una variedad de aplicaciones de investigación, incluyendo el desarrollo de vacunas basadas MHC.
Los materiales requeridos para las pruebas de HLA
(H) Sangre periférica: Para las pruebas de serología en los linfocitos viables o para la extracción de ADN para las pruebas basadas en PCR. 364
SISTEMA HLA - Técnicas de Laboratorio
segundo)Los ganglios linfáticos / Bazo: Para las pruebas de serología en los linfocitos extraídos (requerido para la tipificación del donante cadáver) o para la extracción
de ADN para las pruebas basadas en PCR.
do) Suero / plasma: Para la detección de moléculas de HLA solubles y prueba para anticuerpos anti HLA
re) Tissue: Necesario para la extracción de ADN para las pruebas basadas en PCR.
Métodos para las pruebas de HLA
En función de las necesidades y requerimientos, siguientes metodologías pueden ser seguidos para la prueba
polimorfismo del HLA -A, -B, -C (clase I), DR, DQ y -DP (II clase) loci.
(yo) serológica: prueba de microlinfocitotoxicidad (dos etapas)
ii) Celular: cultivo mixto de linfocitos (MLC), las pruebas de linfocitos Primed (PLT).
iii) Bioquímico: Unidimensional o electroforesis en gel de dos dimensiones.
iv) Los métodos moleculares: Varias técnicas se han hecho disponibles, de los cuales más de una
técnica es esencial para la prueba de HLA óptima. RFLP, PCR-SSP, PCR-SSOP, PCR-SSCP, ARMS PCR, RBH /
RLS.
v) la tipificación basada en la secuencia ( SBT)
vi) microrreordenamiento la tecnología de chips de ADN.
Serología se basa en la expresión e identificación de diferentes motivos de la molécula de HLA en la superficie celular. Por
otra parte, las metodologías basadas en PCR dependen de la calidad del ADN extraído y se basan en la identificación de
diferencias de nucleótidos entre alelos HLA en varios niveles de resolución (bajo / intermedio / alto) (Figura 23.3).
La utilidad de los ensayos serológicos convencionales para la tipificación de HLA ha estado limitada por la no disponibilidad de alelo
fiable sueros específicos. En efecto, a menudo es difícil obtener sueros que reaccionan
exclusivamente con el producto de un alelo de un locus. Aunque la tecnología de hibridomas ha ayudado a superar el problema en cierta
medida, un conjunto completo de anticuerpos monoclonales para la detección de los serotipos regulares todavía falta. La razón principal de esto
es el hecho de que la mayoría de estos anticuerpos se producen en el sistema de ratón y por lo tanto no son idénticos a los aloanticuerpos
humanos. También,
Fig 233. Principio de la prueba de HLA serológico y molecular.: Serología se basa en la identificación de diferencias
expresadas en la superficie celular, mientras que los métodos basados en ADN identificar las diferencias en el nivel de
nucleótidos, dando como resultado las diferencias representadas en
365
serología convencional está diseñado para identificar amplias familias alélicas (por ejemplo HLA-A2, B40). Sin embargo monoclonal
anticuerpos menudo reconocen determinantes estrechas y por lo tanto muchas de-
ellos no son aplicables para el sistema de examen de serología. Figura 23.3 listas varias otras limitaciones de la serología ya que la
prueba depende principalmente de la expresión de moléculas HLA en la superficie celular, los requisitos de las células viables y de
complemento. Molecular de técnicas, por otro lado, son
más preciso, diferencias fiables y detectar incluso a diferencia de un solo nucleótido. Estos son
por lo tanto, más adecuado para la definición de varias veces más número de alelos que serología
4.1.1 Serología
El método convencional para la clase de las pruebas de HLA I y clase II alelos es la de microlinfocitotoxicidad dependiente del
complemento prueba (Terasaki y McClelland, 1964), mono implican o
sueros oligospecific. Esta es una prueba de dos etapas que implica la reacción antígeno-anticuerpo en el inmune
superficie celular (primera etapa), seguido de la lisis mediada por el complemento de las células (segundo paso). Eso es
realizado sobre una bandeja de microensayo con 60 ó 72 pocillos que contiene un ml de capa preliminar antisuero específico de alelo que define
una especificidad HLA particular (figura 23.4). Generalmente, periférico sangre
linfocitos o preparaciones de células T purificadas se utilizan para HLA-ABC escribir, mientras que para las pruebas de clase II de los
antígenos HLA-DR y DQ, las preparaciones de linfocitos B de lana de nylon separados se
empleada. Aproximadamente 2000 linfocitos se añaden en cada pocillo y la bandeja incubaron a temperatura ambiente durante media hora. Esto es
seguido por una etapa de incubación adicional de una hora utilizando complemento de conejo. La prueba se termina mediante la tinción de las
células muertas con colorante azul o eosina Y tripano y se fijan con formaldehído. Para la tipificación de clase II, se utilizan periodos de incubación
dobles.
En esta prueba, la discriminación de los antígenos HLA se basa en el reconocimiento de diferentes

conformacional estructuras de cada antígeno expresado en la superficie celular. Varios son los antisueros
generalmente se requiere para asignar una especificidad debido a los complejos patrones de reactividad cruzada serológica entre los determinantes HLA
individuales. Dos antígenos, con las mismas secuencias de aminoácidos en posiciones críticas para el plegamiento de proteínas tendrán la misma
configuración estructural y por lo tanto lo harían
La Fig 23.4. Principio de la prueba microlinfocitoxicidad. Las células muertas son vistos bajo el microscopio de
contraste de fase, como las células teñidas más grandes y oscuras, mientras que las células vivas aparecen como
puntos brillantes como pequeñas, sin teñir.
366
ser identificados por el mismo anticuerpo, un fenómeno llamado " reactividad cruzada'. Los alelos con diferentes secuencias de nucleótidos pero
con la misma estructura conformacional de la proteína expresada no puede ser
distinguido por serología. Por lo tanto la identificación de nuevos alelos es difícil por técnicas serológicas.
resultados de HLA de clase I por la serología son bastante fiables para todas las especificidades amplios pero a menudo es difícil
para asignar correctamente las especificidades de clase II por serología. De hecho, sólo la diversidad limitada en el
HLA-DR, DQ y DP loci puede ser satisfactoriamente discriminado por este método. Dado que la técnica depende de la clara
diferenciación entre células vivas y muertas, Tiene varias limitaciones debido
de escasa viabilidad de las células B, los defectos de procesamiento, el fondo de células T, la expresión de la superficie celular variables de las moléculas de HLA y
el fracaso de las reacciones mediados por complemento. Aunque la técnica está perdiendo rápidamente su fiabilidad como un método para generar un resultado de
tipificación de HLA caracterizado completamente, aún es

usado para los propósitos de rutina debido al bajo costo de la pruebas, nominal infraestructura y equipamiento
requisitos. Eso es también un útil herramienta para la identificación de alelos nulos o no expresado en
conjunción con los métodos basados en el ADN. La creciente discrepancia entre los resultados obtenidos por métodos serológicos, en
comparación con los métodos basados en ADN está eliminando lentamente el primero,
particularmente para la tipificación de clase II. Un análisis de los resultados del trasplante ha revelado hasta discrepancia 28% entre las técnicas de
serología y de ADN (Opelz, 1990). A menudo, la información sobre el vínculo entre
amplios alelos serológicos de DR y DQ loci se utiliza para verificar HLA-DR resultados mecanografía. Cuando
haplotipos se encuentran que no albergan una de las asociaciones DR y DQ conocidos, una mala interpretación de
resultados de tipificación es inminente. Para ello es necesario el uso de tipificación alternativa
métodos.
4.1.1 Las pruebas serológicas fenotipado
yo) De HLA-ABC fenotipificación: Desde HLA-A, - SEGUNDO,

-C alelos se expresan sobre todo nucleado
células y cuantitativamente mejor expresan en los linfocitos, se emplean principalmente estas células
para esta prueba. linfocitos de sangre periférica (PBL) o preparaciones de células T purificadas se utilizan en la citotoxicidad
dependiente del complemento (CDC) de ensayo para el propósito de HLA
coincidente en órganos y trasplante de médula ósea, los marcadores de asociación de enfermedades y para propósitos de transfusión de
plaquetas.
ii) HLA-DR / DQ fenotipificación: serológica tipificación de HLA de clase II (DR y DQ) alelos es
generalmente realizada en lana de nylon linfocitos separados B por métodos y propósitos
descrito arriba. Una vez que el HLA de clase I y antígenos de todos los miembros de la familia II han sido definidos mediante
serología, los cuatro haplotipos HLA parentales pueden ser deducidas y se analizaron
para HLA coincidente genotipo para el trasplante de órganos y médula ósea.
4.1.2 Pruebas cruzadas serológicas

Además de HLA coincidente, es esencial para la prueba de anticuerpos antidonantes preformado en la
receptor de suero en situaciones órgano de participación trasplante. por este propósito, la
técnica de microlinfocitotoxicidad se aplica para poner a prueba el recipiente (Paciente) de suero con el donante
Células. Cualquier anticuerpos preformados en el suero sería así resultar en una reacción citotóxica. Dependiente
en la clínica requisitos, la prueba se lleva a cabo usando linfocitos de sangre periférica
(PBLs) o preparaciones de T o de células B purificadas con el fin de identificar anticuerpos a tipos de células particulares. A menudo es deseable
llevar a cabo la prueba usando las propias células del destinatario (CXM autólogo) para determinar la presencia de autoanticuerpos.
Eso También es necesario utilizar DTT (Dithiotheritol) absorbe suero
para descartar la presencia de antibodes IgM en el suero destinatario. TDT se une a la estructura pentamérica de la molécula de IgM e
interrumpe su estructura que conduce a una reacción negativa partido una cruz de las situaciones en las único tipo IgM de anticuerpos están
presentes en el suero.
367
4.1.3 La citometría de flujo pruebas cruzadas (FCXM)
La citometría de flujo prueba cruzada es a menudo deseable en situaciones que implica segundo injertos
y en los receptores con antecedentes de pre-sensibilización debido a otros factores tales como múltiples transfusiones de sangre y los
embarazos. La prueba utiliza los donantes linfocitos y destinatario sueros utilizando una
fluorocromo segundo anticuerpo marcado con el fin detectar anticuerpos IgG donante-específicos contra T
y / o células B en un citómetro de flujo. El FCXM es 10-100 veces más sensible que la prueba de compatibilidad cruzada serológica
convencional. También eso identifica tanto celular, así como tipo específico (IgM o
IgG) anticuerpos de litros incluso bajas.
4.1.4 Anti-leucocitos prueba de detección de anticuerpos
La técnica serológica también se utiliza para detectar anticuerpos dirigidos al tipo de HLA específico mediante el ensayo el suero del
paciente (del destinatario) con un panel de células de donantes de tipos de HLA conocidos. Esto ayuda a evitar selectivamente injertos
positivos para HLA alelos a los que el receptor puede haber sido sensibilizado previamente. Esta
prueba que se llama el ' Panel Reactivo Anticuerpo (ARP) screening' para
HLA Clase I y / o anticuerpos de clase II, utilizando un panel de células seleccionadas al azar. Se trata esencialmente de un dependiente del complemento
ensayo de linfocitotoxicidad, aunque PRA basado flujo puede también ser empleado
para lograr una mayor sensibilidad.
4.2 Técnicas celulares:

antígenos de la HLA-D antígenos del locus y la DP se definen por las técnicas celulares de cultivo mixto de linfocitos (MLC) y la
tipificación de linfocitos imprimada respectivamente. Esto requiere la
utilización de células de tipificación homocigotos (CTH) que tienen sólo una especificidad HLA-D y / o clones celulares T específicas.
Cuando los linfocitos de dos individuos se cultivan juntos, cada población celular es capaz de reconocer la clase HLA nonself
antígenos de la otra II. Como respuesta a esas diferencias,
los linfocitos se transforman en blastos con la síntesis de ADN asociada que pueden ser monitoreados por 3 la captación de H.
MLC sirve como un equivalente de 'Prueba cruzada celular' antes de BMT y más
Curiosamente sirve como un modelo de trasplante in vitro para estudiar el posible rechazo o reacción EICH. el celular
técnicas tienen una serie de dificultades intrínsecas que los hace menos aplicable
rutinariamente. Estas son pruebas para la mayoría de los laboratorios HLA casi olvidados.
4.3 Métodos bioquímicos:

Estas metodologías se basan en el principio de que la variación alélica en los antígenos HLA están correlacionados con
sustituciones de aminoácidos específicos. El método de una electroforesis en gel unidimensional (1D-IEF) es muy eficiente en la
detección de variantes o subtipos de antígenos B HLA-A y, pero adolece del inconveniente de que
la interpretación de IEF depende del antígeno serológica
definición. Serología y IEF juntos, por otro lado, proporcionan una mejor definición de cada producto alélica y también puede detectar
sustancialmente mayor número de alelos de clase I. El polimorfismo estructural de
los antígenos de clase II pueden ser determinados por electroforesis en gel de dos dimensiones. Esta técnica, sin embargo, es
laborioso, costoso y consume mucho tiempo.
4.4 métodos basados en ADN
Como alelos HLA se definen por sus secuencias de nucleótidos, una metodología de tipificación detectar directamente
variaciones en la secuencia / polimórficas motivos de secuencia definiría el HLA codificada moléculas mejor
que el serológica técnicas. Las metodologías basadas en ADN requieren
amplificación de ADN mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) un proceso descubierto originalmente
368
por Mullis y colaboradores (1986) y la diferenciación subsiguiente utilizando oligonucleótidos sintéticos

a las variaciones de nucleótidos entre diferentes moléculas HLA. La metodología de tipificación de ADN ha reemplazado serología como una
forma más eficiente para la tipificación de HLA en clínica de rutina Laboratories prueba
Ries y permite una mejor resolución de fenotipos HLA. Estos métodos se basan en la discriminación de diferencias específicas de
secuencias de nucleótidos entre los alelos. A diferencia de al rápido desa-
rrollo de clase II estrategias de tipificación de HLA, la tipificación de ADN para los alelos HLA de clase I ha sido lento debido a la
complejidad de polimorfismo en la región de clase I, y alto grado de homología y el intercambio de motivos de secuencia entre loci. Una
variedad de técnicas basadas en PCR se utilizan dependiendo de la resolución de la prueba deseada y el número de muestras a ensayar.
Las técnicas derivan sus nombres por el uso de reactivos empleados, con PCR como el de prefijo.
genes HLA de clase I
• cebadores específicos de secuencia PCR-SSP

• Invertir hibridación tiras de línea Blot / inversa RBH / RLS
• soporte polimorfismo de conformación PCR-SSCP
genes HLA de clase II
• Restricción de longitud de fragmentos de polimorfismo RFLP

• sondas de oligonucleótidos específicos de secuencia PCR-SSOP
• cebadores específicos de secuencia PCR-SSP
4.4.1 RFLP: los fragmentos de restricción polimorfismo de la longitud (RFLP) o hibridación de transferencia de Southern
fue la primera tecnología basada en ADN empleado para la tipificación de HLA a principios de los 80. Se proporciona un nuevo enfoque
para el estudio de clase II HLA polimorfismos estructurales previamente no reconocidos por serología. Brevemente, los fragmentos de
ADN de diferentes longitudes generados por digestión con endonucleasas de restricción específicas están separados por electroforesis
en gel y luego se hibridan utilizando secuencias de ADN de radio etiquetado como sondas. Aunque RFLP proporciona un medio para
estudiar tanto la codificación, así como regiones no codificantes del complejo HLA ya sea en intrones o en regiones que flanquean,
la complejidad de los patrones de bandas observadas con este tecnología y

inter locus transversal hibridación de sondas hace Menos útil en la práctica habitual. los
polimorfismo revelado por RFLP es limitado y depende de las enzimas de restricción
y sondas utilizadas. La técnica se utiliza muy poco para la tipificación HLA rutina. Recientemente, se ha introducido una
mejora en RFLP, combinándolo con PCR (PCR-RFLP).
4.4.2 PCR-SSCP o RSCA: La técnica implica la reacción en cadena de la polimerasa o basadas sola
conformacional strand polimorfismo o referencia hebra mediada análisis conformación.
El método se basa en las diferencias en la movilidad de las moléculas de ADN causadas por bases no complementarias en
dos hebras de la doble hélice. Así, cuando los productos de PCR de idéntica
longitud de diferentes alelos se hibridan con una cadena de referencia, se mueven diferente
distancias en el gel debido a desajustes en el dúplex formado con la hebra de referencia y el ADN de prueba.
4.4.3 PCR-SSOP: La técnica de sonda de oligonucleótido específica de la secuencia basado en la PCR es bien
establecido como una baja a procedimiento de tipificación de alta resolución para la definición de HLA de clase II polimórfica
alelos. La resolución del método depende del tipo y el número de sondas utilizadas para la prueba. Esencialmente,
se trata de la amplificación del locus a ensayar usando genérico
cebadores a todos los alelos que constituyen dicho locus e inmovilización de el ADN covalentemente
unido a membranas de nylon por irradiación UV. La membrana se incuba posteriormente
369
con una sonda de oligonulceotide al motivo polimórfica a detectar. Una serie de incubación y etapas de lavado seguir
después de que el oligonucleótido unido se detecta por un sistema de detección (quimioluminiscente, colorimétrica o
radiactivo). Sólo el ADN amplificado con secuencias complementarias se unen a la sonda y por lo tanto son
detectados como positivos señales dot blots (Figura 23.5a).
La técnica de PCR-SSOP es especialmente adecuado para pruebas de gran número de muestras a la vez. Un aparato de transferencia
en punto se utiliza para inmovilizar hasta 96 ADN sobre una membrana de nylon y se hibridó con sondas específicas marcadas con otros
sistemas de detección biotina o. La eficiencia de la técnica
depende de la disponibilidad de , secuencias de la sonda monoespecíficos ideales para identificación de alelos individuales
en alta resolución, estandarización de temperatura de hibridación de la sonda y el lavado crítico
pasos para descartar falsas reacciones positivas y negativas (Mehra et al, 1991, 1 994; Rajalingam et al,
1996). Aunque PCR-SSOP es una técnica de muy alta sensibilidad, eso no es discriminatoria en
cis que definen / trans localizaciones de la secuencia de motivos en heterocigotos los individuos. Por ejemplo
B * 3501 / B * 4901 no puede distinguirse de B * 5001 / B * 5301 heterocigotos ya que las secuencias HLA-B de ambos genotipos
difieren sólo con respecto a las cis o posiciones trans de secuencia
motivos en la región hipervariable del exón 2 y el exón 3. PCR-SSOP produce lo mismo
patrón de hibridación tanto para las combinaciones. En tales situaciones, PCR-SSP o PCR anidada
son técnicas más útil. PCR-SSOP necesita mayor mejoras para convertirse en una más fiable
y precisa procedimiento de tipificación rutinaria. Recientemente, otros dos muy similares relacionada con técnicas
PCR-SSOP se han desarrollado, tanto que implica una metodología inversa SSOP el uso de tiras de nylon con sondas de pre-inmovilizado (Reverse
hibridación de transferencia (RBH) y las tiras de línea inversa (RLS)).
una segundo
Fig 23.5:. PCR-SSP y SSOP metodologías: La figura representa del principio de las dos técnicas * 'basado en
la PCR comúnmente empleados para la tipificación HLA
370
4.4.4.1 PCR-SSP: La técnica cebador específico de secuencia basado en la PCR es fiable para ambos alelos de clase 1 y de clase II. Aquí, se
utilizan oligonucleótidos basados en secuencias polimórficas como un conjunto de pares de cebadores para amplificar regiones de diferencias
entre cualquiera de los dos alelos. El número de diferentes PCRs necesarios para distinguir entre un conjunto de alelos que son al menos la
mitad el número de alelos para ser escrito. Solamente los oligonucleótidos complementarios son capaces de cebar una reacción de PCR y se
pueden visualizar como una banda amplificada en un gel de agarosa (Figura 23.5b). Completo alta resolución tipificación se puede llevar a
cabo utilizando cebadores anidados. La técnica es más conveniente para el pequeño número de muestras y para obtener resultados rápidos.
Aunque el costo es un factor limitante para la PCR-SSP, es la técnica de elección para la donante-receptor a juego para el trasplante de
médula ósea y para HLA-DR / DQ tipificación alelo en situaciones de trasplante de órganos. Una versión de
esta técnica llamada 'fototipia' implica

pruebas de alelos de la HLA de clase I, así como II región en alta resolución utilizando un gran número de cebadores todo
estandarizado para trabajar en condiciones de PCR similares (Bunce et al, 1995). Otra variación de esta técnica usando cebadores
anidados '' ayuda a distinguir alelos en alta resolución. Eso implica
dos PCR reacciones en el mismo ADN diana. En el primer paso, una secuencia variable se amplifica después de lo cual se utiliza un conjunto
de cebadores internos a los utilizados en la primera etapa. Esta ayuda método para resolver alelos que muestran una extensa homología de
secuencia entre sí. En situaciones en las que el número de muestras grandes, como en los estudios de población,
eso es aconsejable el uso de PCR-SSOP alongwith clase
Me serología.
Fig 23.6:. Principio de la metodología de la línea de tira inversa. muestras de ADN marcadas mediante la incorporación de
cebadores biotinilados se hibridan con sondas inmovilizadas sobre membranas de nylon con la ayuda de enlazadores químicos. El
ADN hibridado se detecta entonces mediante la adición de estreptavidina conjugada con la enzima peroxidasa de rábano de caballo.
La posterior adición de sustrato (3,3' , 5,5' tetrametil bencidina) conduce a desarrollo de color sólo en muestras positivas.
371
4.4.5 técnicas RBH / RLS: Las técnicas de hibridación de transferencia inversa y la línea de tira inverso son de proa corredores a la
tecnología de chip de ADN, donde un conjunto de sondas de oligonucleótidos a défini ng
motivos polimórficos específicos se inmovilizan sobre membranas de nylon y luego se hibridan con el amplificado DNA para ser
probado. La técnica es adecuada para escribir pequeño número de muestras como en los casos forenses (figura 23.6). La técnica
es una mejora sobre la PCR-SSP ya que puede definir HLA-A, B, C en un nivel intermedio tipificación de alta resolución; No
disponible con cualquier otra técnica similar para la clase Ihla escribir.
4.4.6 ARMS-PCR técnica: La técnica es un sistema de mutación refractario amplificación definida originalmente por Newton y
compañeros de trabajo (1989). El método utiliza una combinación de cebadores diseñados contra de grupo y de los alelos sitios
específicos de secuencia. El diseño SSP se basa en los brazos 1 sistema por el que una falta de coincidencia en 3 1 residuo de la
imprimación inhibe la amplificación no específica. La técnica es particularmente útil para la detección de alelos HLA de clase I a nivel
de alta resolución, en donde la variación de la secuencia no se limita a regiones específicas del genoma de ser repartidos en todo el
locus. alelos HLA de clase I muestran extensa homología entre diferentes alelos en el mismo locus, así como similitudes interlocus. El
diseño especial de imprimación en esta técnica permite la asignación alelo correcto y inhibe las reacciones de falsos positivos (figura
23.7).
Fig. 23.7. Principio de la metodología ARMS-PCR: Se consigue una amplificación positiva cuando el cebador
es un partido complementaria exacta a la secuencia de ADN diana. Por otra parte el cebador no se une a las secuencias no diana resulta en un
fracaso de la amplificación de PCR.
4.5 Secuencia de tipificación basado (SBT): la tipificación basada en la secuencia ha ganado gran importancia durante los últimos pocos años como una
técnica a toda prueba para proporcionar lo último tipificación alta resolución
372
de alelos de HLA. La técnica se basa en la identificación de la secuencia exonic completa del alelo en cuestión y por lo tanto no
permite discrepancias. Una PCR se realiza que amplifica tanto los alelos
en un heterocigoto individual. Los dos alelos son luego secuenciados y posiciones de
heterocigosidad se analizan utilizando software informático que se alinea Las secuencias obtenidas con
combinación de todos los alelos conocidos y por lo tanto asignan posibles tipos de HLA. La técnica es muy adecuado para la tipificación de
Clase II, pero de clase I alelos debido a sus extensas lugar polimorfismo grandes exigencias en la calidad de los análisis de secuenciación.
Alto grado de homología de secuencia entre los diferentes HLA de clase I loci
incluyendo el menos polimórficos HLA-E, F, G, genes y varios pseudogenes
causar múltiples problemas si un particular, locus tiene que ser investigado. Teniendo en cuenta la creciente
número de alelos detectados recientemente, la secuenciación está convirtiendo rápidamente en el más razonable y adecuada
enfoque tipificación tanto para HLA de clase I y II alelos.
Como resultado de la aplicación de técnicas basadas en el ADN, un gran número de nuevos alelos HLA se han descubierto y
caracterizado. Varios' nuevos alelos se han descubierto en la población india y reportado recientemente por nuestro grupo (Mehra et al,
2001, Jainietal, 2001).
4.6 Limitaciones de técnicas basadas en PCR
yo.) El costo de la mayoría de las tecnologías basadas en PCR es prohibitivo para su uso en laboratorios de rutina de servicio y por lo tanto éstos se
utilizan principalmente en los grandes centros de referencia, como las técnicas de tipificación secundarias, confirmatorias, para fines de
trasplante y aplicaciones de investigación.
ii.) Dado que la alta resolución de métodos se basan en las secuencias disponibles a partir de estudios llevados a cabo
predominantemente en Caucasoid y poblaciones orientales, identificación de nuevos alelos
encontrado en otros grupos étnicos o de alelos raros podría perderse menos que se aplique más de un procedimiento.
iii.) Algunos heterocigotos no pueden ser distinguidos por las técnicas basadas en PCR en función de las secuencias de los alelos en
cuestión. Los métodos alternativos a continuación, tienen que ser utilizados para resolver tales discrepancias.
iv.) reacciones positivas y negativas falsas debido a un fallo de la amplificación y / o hibridación necesitan estandarización
laborioso de las técnicas y análisis cuidadoso de los resultados para evitar la asignación incorrecta de los alelos.
4.7 Las perspectivas de futuro
Histocompatibilidad ha cambiado mucho a lo largo los años. Desde los primeros días de comparativamente
serología simple, metodologías bioquímicos y celulares, HLA ha recorrido un largo camino para la presente sofisticación de
procedimientos moleculares incluyendo la tipificación basada en la secuencia recientemente definido
(SBT). Debido a la extraordinaria papel importante que desempeñan las moléculas de HLA en la presentación de antígenos y rigor de
la relación entre el epítopo y alelos de HLA asociados, de alta resolución
escribir es cada vez más en la demanda en clínicas y experimentales ajustes. funcionalmente significativa
alta resolución tipificación de alelos de HLA sólo es alcanzable a través de métodos moleculares.
La finalización de el proyecto del genoma humano ofrece la oportunidad de identificar genoma

variaciones en células y tejidos cuantitativamente, de forma automática y simultáneamente usando el análisis de microarrays de alto rendimiento.
la tecnología de matriz basado oligonucleótido de ADN (popularmente llamada la tecnología de chips de ADN)
es la técnica de futuro para la detección de polimorfismos de nucleótido único (SNPs)

relevantes para la tipificación de HLA.
373
Y los derivados del plasma
Los sustitutos de plasma
Soultions proteína plasmática (PSS)

soluciones de proteínas de plasma se prepararon a partir de plasma de mezcla después de la eliminación de concentrado de factor VIII, el fibrinógeno y las
inmunoglobulinas ya sea por el método de extracción con etanol Conn o por el método cromatográfico.
Las preparaciones de albúmina
La albúmina está disponible para uso clínico como;
1. Albúmina solución al 5%
2. Albúmina solución al 25%
Ellos contiene 96% de albúmina y un 4% de globulina.
3. fracción de proteína de plasma (PPF) solución al 5% Contiene
83% de albúmina y 17% de globulina.
características de albúmina Preparación
• La solución de 5% son osmóticamente y oncóticamente equivalente al plasma, mientras que el 25%

solución es cinco veces mayor que la de plasma
• Los productos se calientan y / o tratado químicamente para reducir el riesgo de transmisión de enfermedades virales.
375
<W>. Manual técnico
• Estantería - vida depende de la temperatura de almacenamiento:

Temperatura Duracion
Temperatura ambiente (20-25 ° C) 3 años
2 ° -8 ° C 5 años
Las indicaciones para la 5% albúmina y FPP:
• Se utiliza para la expansión del volumen sanguíneo y la sustitución de coloides
• Hipoproteinemia siguientes quemaduras y cirugía extensa, la albúmina se administra a

mantener el nivel de albúmina de 5,2 g / dl.
• El fluido de sustitución en el intercambio de plasma terapéutico
• shock hipovolémico hemorrágico
• quemaduras
• cirugía retroperitoneal en la que gran volumen de líquido rico en proteínas puede acumularse en el intestino
Indicaciones de 25% de albúmina.
■ Sever hipoproteinemia en el síndrome de nephortic aguda y enfermedad hepática aguda.
• Adultos deben recibir 100-400 ml de 25% de albúmina de diario.
• Los niños 1.5-6 ml / kg de peso corporal en 24 horas.
• Los diuréticos también deben recibir alongwith albúmina si el edema está presente.
■ Hyperbilirubinema en el recién nacido: se da 5-10 ml de sal pobre albúmina junto con la sangre para transfusión de
intercambio. Se une exceso de bilirrubina y reducir la incidencia de
ictericia nuclear.
■ Toxemia del embarazo: se administra diariamente 50 ml de sal pobres albúmina.
Contraindicaciones:
• Hipoproteinemia de la malnutrición.
• síndrome nefrótico crónica.

• La cirrosis del hígado.
Efecto adverso:
• Urticaria y reacciones anafilácticas

• La sobrecarga circulatoria
• reacciones febriles
• La hipotensión debido a la sustancia vasoactivo en el plasma, a veces se ve con PPF cuando la velocidad de administración es
de más de 10 ml / min.
Nota:
Proceso de calor tratamiento o químico tratamiento de los derivados de plasma para reducir el riesgo de
la transmisión de los virus es muy eficaz contra los virus que tienen lípidos envuelve:
• virus de VIH 1 y 2
• virus de la hepatitis B
• virus de la hepatitis C
• HTLV-1 y 2 virus
La inactivación de la no-lípido virus envueltos, por ejemplo, hepatitis A son menos eficaces.
376
Derivados de plasma y plasma Sustitutos
Factor VIII Concentrate:

Preparaciones disponibles:
(1) Factor VIII preparó a partir de grandes reservas de plasma es estéril, liofilizado.
• Viales de proteína liofilizada etiquetados con el contenido, por lo general 250 UI de factor VIII.
• Se reconstituye asépticamente con el diluyente suministrado con el vial.
• Una UI es la actividad del factor presente en 1 ml de plasma de mezcla normal de menos de 1 hora de edad.
• Eso inactiveated se para virus por calor de tratamiento, de disolvente / detergentes o purificada con
anticuerpos monoclonicos.
(2) tecnología de ADN recombinante se utiliza actualmente para la producción de factor VIII concentrado
que está disponible comercialmente. Eso es equivalente clínicamente al factor VIII derivado de
plasma. No tiene el riesgo de transmisión de infecciones virales. Almacenamiento: productos secos por congelación se
almacenan a 2-6 ° C hasta la fecha de caducidad que figura en la etiqueta.
Dosis: 10 - 20 UI / kg de peso corporal después de cada 12 horas. (Véase el capítulo 14 'Factor crioprecipitado
VIII).
aPTT se puede utilizar para monitorizar niveles de factor VIII.
Indicaciones: • La hemofilia A, para prevenir o controlar el sangrado
• La hemofilia A con bajos niveles de inhibidores del factor VIII
• la enfermedad de von Willebrand- Si la preparación contiene von-Willebrand Factor (Factor

VIII: vWF). Mayormente concentrados de factor VIII no proporcionan factor VIII: los niveles de vWF necesarios para la función normal de las
plaquetas en la enfermedad de von-Willebrand.
Inhibidores a Factor VIII
Aproximadamente 10-15 hemofílicos por ciento desarrollan inhibidor al factor VIII. En las personas con
hemofilia A, un inhibidor se sospecha si la administración del factor VIII concentrado ya no
produce los resultados terapéuticos esperados. Las personas que desarrollan inhibidores pueden ser divididos en dos grupos:
baja y alta respondedores. baja respuesta tienen una baja concentración de anticuerpos y
pueden ser tratados con el estándar o ligeramente más alta que las dosis normales de concentrado de factor VIII. De alta respuesta
tienen alta concentración de anticuerpo al factor VII y son difíciles para tratar.
productos de factor IX se han encontrado para ser eficaz.
Derivados de plasma que contiene Factor IX (1) complejo de
protrombina: (PCC)
Contiene factores II, IX y X y a un grado variable de factor VII
[Complejo de coagulación Anti-inhibidor (AICC) para el tratamiento de pacientes con títulos elevados de anticuerpos contra el factor
VIII]
(2) Factor IX Concentrate: contiene Factor IX

Los viales de ambos productos son liofilizada y de virus inactivado. indicaciones:
• El tratamiento de la hemofilia B (enfermedad de Christmas)
• PCC también se usa para tratar el tiempo de protrombina prolongado y los pacientes con alto título de anticuerpos contra el factor VIII.
377
PREPARATIVOS inmunoglobulinas de
inmunoglobulina para uso intramuscular ::
UNA solución concentrada del componente de anticuerpo IgG de plasma, preparado a partir de grandes reservas de plasma de donantes que
contienen anticuerpos contra agentes infecciosos. Ellos son inactivados en busca de virus
y no transmitir infecciones virus transmitidos. indicaciones:
• hipogammaglobulinemia congénita: 0,7 ml / kg IM

• Las personas expuestas a enfermedades como: dosis profiláctica se
Hepatitis A o el sarampión 0,02 a 0,04 ml / kg, IM
Inmunoglobulina para Intavenous de aplicación
preparadas para la administración IV seguro.
indicaciones:
• La púrpura trombocitopénica idiopática autoinmune y algunos otros trastornos del sistema inmune.
• El tratamiento del estado de inmunodeficiencia
• hipogammaglobulinemia
• Miastenia gravis
• enfermedades relacionadas con el VIH
globulinas hiperinmunes
Se utiliza para la prevención de enfermedades como la hepatitis B

La rabia de la varicela zoster, las
paperas y otras
Anti-Rh (D) de inmunoglobulina (Anti-D IGRh)
Preparado a partir de plasma que contiene alto nivel de anticuerpo anti-Rh D de personas previamente inmunizados.
Indicaciones: Prevención de Rh (D) negativo madre de la inmunización Rh que está embarazada de Rh (D) positivo lactante.
Tabla 24.1: derivados de plasma y sus usos: (Resumen)
Producto Composición El volumen Indicación
aproximado
Albúmina 5% o 25% varía Expansión de volumen; la movilización de fluidos
Factor III El factor VIII alguna La hemofilia A; La enfermedad de

Concentrados fibrinógeno y von Willebrand von Willebrand-(productos
recombinante factor de seleccionados)
humanF, VII)
complejo del factor IX, X Facror II, VII, IX, cantidades factor de la herencia II. IX, o
Factor IX conc.) mínimas de otras proteínas deficiencia X, inhibidor del factor VIII
378
Los derivados del plasma <w>
derivados de plasma y sus usos ( Continuado)
lmmunoglobulin anticuerpos IgG, para varía Tratamiento de hypoglobinemia o

IV o IM uso agammaglobinemia,
Inmune-thromboctopenia (IV
Preparación solamente)
Inmunoglobulina Rh preparación l ml Prevención de HDN debido al
IgGanti-D antígeno D
Los sustitutos del plasma
Aquellos diseñados para proporcionar una presión osmótica de coloides o expandir el volumen de plasma es decir, coloides y cristaloides.
soluciones coloidales son (Tabla 24.2)

1. Los dextranos: Ellos son mezclas de moléculas de polisacárido de peso molecular diferente
es decir, Dextrano 40 y Dextrano 70
2. almidón de hidroxietilo 450
3. Gelatina
Tabla: 24.2: soluciones coloidales actualmente comercializadas son:
Intrayescular vida media
nombre genética Contenido Me ntrayescular, media - vida
Dextron 40 10% de polisacárido (MW 40.000) con solución 4-6 horas
salina normal
dextrano 70 6% polisacárido (MW 70.000) con solución 6-8 horas

salina normal
almidón de hidroxietilo 450 6% en soluciones 24 horas
0,9% de solución salina (MW 45.000)
La gelatina (Haemacel) 3,5% polipéptido gelatina (MW 35.000) con las 3-5 horas
soluciones de Ringers
dextrano 40
Eso es del 10% de polisacárido solución (MW40,000) en solución salina normal. Dextrano 40 aumenta el volumen de plasma
relativamente rápidamente debido a su alta concentración y bajo peso molecular. Sus
intravascular vida media es más corta (4-6 h) que la de hidroxietil almidón o dextrano 70, ya que se excreta rápidamente en la orina.
La infusión de dextrano está asociada con la deshidratación intersticial en paciente
cristaloides no se dan con ella. También tiene un papel en la prevención de la trombosis. En general se acepta que la dosis de
Dextrano 40 no debe exceder de 500 ml en 24 h en adultos.
dextrano 70
Es 6% de polisacárido (MW 70.000) solución en solución salina normal. Tiene un efecto fuerte y comparativamente larga duración
(6-8 horas). Dextrano 70 tiene acción antitrombótica significativa a través de interferir
con el factor de plaquetas VIII- interacción endotelial. La infusión de 500 ml de dextrano 70 por 24 horas se ha visto
ofrecer significativo protección contra postoperatorio tromboembólica
complicación. Su uso de más de 1000-1500 ml puede causar sangrado anormal en los pacientes y
debido a esto, el uso de dextrano 70 ha reducido en algunos lugares.
379
Los efectos secundarios de Dextrans1
• Circulatorio sobre carga, sobre todo en pacientes en los que la anemia es más marcada.
• obstrucción tubular renal se ha asociado con pacientes deshidratados. %

• defectos hemostáticos como resultados de la inhibición de la función plaquetaria en dosis más altas.
• reacciones anafilácticas.
Hidroxietil almidón 450 (HES)

HES está disponible como una solución al 6% en 0,9% de solución salina (MW 45.000). Debido a su más reciente introducción, se han
realizado pocos ensayos clínicos controlados de este sustituto del plasma coloidal. Sus efectos de expansión son más modestas que las
de dextrano 70, pero su vida media intravascular parece ser más largo. Su inicial vida media en la circulación es de 24 h, pero casi 20%
de la HES infundido permanece en el cuerpo después de una semana después de una sola infusión de HES, y la administración repetida
tiene un efecto acumulativo. Indicación de uso
• La expansión de volúmenes de sangre
• HES se utiliza como aditivo para aumentar yiels de granulocitos en leucoféresis por los efectos secundarios separartor celular:
• HES interfiere en cierta medida con los mecanismos hemostáticos, a través de menos de dextrano.
• No tiene propiedades antitrombóticas.
• no parece ser efectuada por HES funciones renales.

• Se han observado reacciones graves anaplylactoid. Dosis:
El tolerada hace parece ser aproximadamente 3000-4000 ml / 24h
Gelatina (Haemacel)
Succinil gelatina y gelatina parcialmente degradado tienen un peso molecular de 35.000. Están disponibles como 3.5-4.0 soluciones% en
botellas de 500 ml (Haemacel). La gelatina tiene una vida media en la circulación de entre tres y cinco horas. La gelatina tiene ninguna
propiedad antigénica y no interfiere con la hemostasia. Las gelatinas son los menos potente de los sustitutos de plasma coloidales.
efectos de la expansión del volumen de sangre son satisfactorios a la espera de la sangre. La dosis es de 500-1000 ml. Efectos secundarios:
• sobrecarga circulatoria aguda.
• No tienen ningún efecto adverso sobre las funciones renales.
• Mostrar no interferencia con la hemostasia en volúmenes de hasta 1000-1500 ml en 24 horas.
• No tienen efectos anti-trombóticos.

• Se han observado reacciones anafilácticas.
380
Derivados de plasma y plasma Sustitutos
Comando Tabla 24.3: Ventajas y desventajas de las diferentes soluciones coloidales
Nombre de Los efectos de volumen La sobrecarga Los posibles efectos reacciones La dosis
Coloides intravascular circulatoria secundarios lactoid máxima (ml).
Anaphy- para "adulto a
intia l duración damag
alteradarenal 70 kg '
Dextarn 40 ++++ ++ ++++ + + + 500

Dextarn70 +++ +++ +++ + ++ 1000-1500
Hidroxietil ++ ++++ ++ + + + 3000-4000 *
almidón 450
Gelatina + + + + + + 1500 *
* junto con la sangre o de glóbulos rojos concentrados
soluciones cristaloides
soluciones cristaloides de tipo reemplazo se formulan para corregir el déficit de fluidos corporales. Tienen la capacidad de ampliar el
volumen de plasma temporalmente ya que la concentración intravascular aand extravascular de los electrolitos tienden a equilibirate
rápidamente.
cristaloide de reemplazo son isotónicas con respecto a la concentración de sodio e incluyen
soluciones de cloruro de sodio lactato y 0,9% de Ringer.
Estos fluidos entran tanto en el plasma y el compartimento de fluido intersticial sin desplazar el equilibrio osmótico. Como
resultado gran volumen de estos fluidos de reemplazo son necesarios para expandir el volumen de plasma intravascular. Ellos
deben ser administrados juiciosamente para evitar la inundación del espacio extravascular, en particular en el edema pulmonar. Las
ventajas y desventajas de coloides y soluciones cristaloides de la Tabla 24.3
Tabla 24.4: Ventajas y desventajas de los coloides y cristaloides
soluciones ventajas desventajas

coloides • Fácilmente disponibles • -la vida media corta en circulación
• Almacenamiento y fácil administración
• mediados Immungenic
• No transmitir enfermedades
• Puede interferir con la hemostasia
• Proporcionar una presión oncótica • Puede interferir con la determinación del
grupo sanguíneo y pruebas cruzadas
• Puede retrasar la sustitución de la
albúmina
cristaloides La falta de la presión oncótica de

plasma
• Fácilmente disponibles
• Almacenamiento y fácil administración
• No inmunogénicos
• No transmitir enfermedades
• No inhiben la síntesis de la albúmina
• Barato
381
Transfusión de sangre
seguridad y
Regulador
requisitos
servicios de transfusión de sangre es una parte vital de los Servicios Nacionales de Salud y el aumento de avance en el campo de la tecnología
de la transfusión ha hecho necesario para hacer cumplir las regulaciones para garantizar la seguridad y la eficacia de los productos biológicos, que
incluyen la sangre, y sus componentes y reactivos de diagnóstico y dispositivos utilizados por el establecimiento de la sangre . Controlador General
de Drogas de la India ha formulado una legislación integral para asegurar un mejor sistema de control de calidad en la recogida, almacenamiento,
pruebas y distribución de la sangre y sus componentes.
Director General de Servicios de Salud lleva a cabo modificaciones de vez en cuando en relación a los requisitos de los servicios de
transfusión sanguínea de los Medicamentos y Cosméticos de 1940 y reglas relacionadas con él para cumplir con los últimos requisitos de seguridad
de la sangre y sus componentes.
El Controlador General de Drogas (India) emitió una notificación de que la sangre no debe ser recogido de los donantes de
sangre profesionales pagados wef enero de 1998, con el fin de suministrar más sangre segura y sus componentes a los pacientes, a
raíz de una orden del Tribunal Supremo.
El problema de asociada a la transfusión adquirido el síndrome de inmunodeficiencia (SIDA)
como resultado la introducción de una serie de políticas y procedimientos nuevos relacionados con la seguridad de la sangre. El Ministerio
de Salud y Bienestar de la Familia (Gobierno de la India) emitió una notificación en el año 1989 bajo las Drogas y Cosméticos Hechos y
Reglas e hizo la prueba para el virus immunodefiiency humana (VIH) obligatoria.
Para el cumplimiento estricto, las Reglas de medicamentos y cosméticos fueron nuevamente modificado (Reglas 68A, Parte XB y Parte XIIB de
la Lista F) en el año 1992 a 1993 y el Controlador General de Drogas (India)
383
fue concedida con el poder de la Licencia central autoridad de aprobación (CLAA) para aprobar la licencia de drogas notificadas a saber. sangre y
productos sanguíneos, fluidos IV, vacunas y sueros.
Gobierno Central Modifica los medicamentos y los cosméticos Reglas de 1945 y notificado la
Medicamentos y Cosméticos (Reglas segunda enmienda), de 1999 y entró en vigor y se han destacado en este capítulo.
Concurrentes nuevos datos y una mayor preocupación por la seguridad de la sangre provocaron la introducción de las pruebas para el marcador
del virus de la hepatitis C (VHC) y la prueba de anticuerpos contra el VHC se ha hecho obligatoria en 2001 bajo las Drogas y Cosméticos Reglas.
La sangre humana está cubierto por la definición de "drogas" bajo la Sección 2 (b) de la Ley de Medicamentos y Cosméticos. Por lo tanto, es
imperativo que los bancos de sangre necesitan ser regulados por la Ley y el Reglamento bajo el mismo Medicamentos y Cosméticos
y la licencia se concede para el funcionamiento de un banco de sangre por
la Central de Licencias y Licencias Estado Aprobar Autoridades después de la inspección.
PARTXB
REQUISITOS Para la recogida, ALMACENAMIENTO, Y PROCESAMIENTO

Distribución de sangre total, los componentes sanguíneos HUMANOS bancos de sangre y el fabricante de los productos
sanguíneos
122-EA. Definición - En esta parte y en los formularios que figura en el Anexo A y en la Parte B y la Parte XII XIIC de la Lista F, a
menos que haya algo repugnante en el contexto objeto:
(A) "banco de sangre" significa un lugar o organización o unidad o institución u otros acuerdos
efectuado por dicha organización, unidad o institución para llevar a cabo la totalidad o cualquiera de las operaciones, para las colecciones,
aféresis, almacenamiento, procesamiento y distribución de la sangre extraída de donantes y / o para la preparación, almacenamiento y distribución
de componentes de la sangre. (B) "donante" se refiere a una persona que dona sangre voluntariamente después de haber sido declarado apto
después de
un examen médico, por la donación de sangre, en el cumplimiento de los criterios dados a continuación, sin aceptar a cambio de toda
contraprestación en metálico o en especie de cualquier fuente, pero no incluye un profesional o de un donante remunerado;
Explicación- A los efectos de esta cláusula, beneficios o incentivos como alfileres, placas, insignias, medallas,
certificados de elogio, tiempo- fuera del trabajo, miembros de aseguramiento de la sangre
programa, regalos de poco o intrínseco valor monetario no se interpretarán como contraprestación. (C) "donante de reposición" significa un
donante que es un amigo de la familia o un pariente del paciente -

recipiente.
(D) "donante profesional" significa una persona que dona sangre a título oneroso, en
dinero en efectivo o en especie, de cualquier fuente, en nombre del destinatario - paciente e incluye un donante pagado o un donante
comercial"
(e) medios de "sangre" e incluye sangre humana total, extraído de un donante y se mezcla con una
anticoagulante.
(F) "sangre autóloga" significa la sangre extraída del paciente para volver a la transfusión en sí mismo /
a sí misma más adelante.
(G) "componente sanguíneo" significa un fármaco preparado, obtenido, derivado o separada de una unidad de
la sangre extraída de un donante. (H) "Aphersis" significa el proceso por el cual la extracción de sangre de un donante, después de separar el
plasma
o las plaquetas o leucocitos, se retransfundida simultáneamente en dicho donante.
384
Seguridad de las transfusiones de sangre y los requisitos reglamentarios
(yo) "Plaquetoféresis" significa el proceso por el cual la extracción de sangre de un donante, después de concentrados de plaquetas se han
separado, se retransfundida simultáneamente en dicho donante. (J) "Plasmaféresis" significa el proceso por el cual la extracción de sangre
de un donante, después de la
plasma ha sido separado, se vuelve a transfundida en el mismo sentado en a dicho donante. (K) "Leucapheresis" significa el proceso por el
cual la extracción de sangre de un donante, después de leucocitos
concentrados han sido separados, se re-transfunden simultáneamente en dicho donante (l) "Productos de la sangre" significa un fármaco
fabricado o se obtiene a partir de plasma agrupado de sangre
por fraccionamiento, extraída de donantes.
122-F. Formulario de solicitud de licencia para la operación del Banco de Sangre / procesamiento de la sangre humana entera para componentes /
fabricación o productos sanguíneos para la venta o distribución -
Solicitud de concesión y / o renovación de la licencia para la operación del Banco de Sangre / procesamiento de la sangre humana
para componentes / fabricación de productos sanguíneos se efectuará a la autoridad otorgante designado por la Parte VII en el
Formulario 27-C o Formulario 27-E ( Apéndices 1 y 2) como sea el caso, y irán acompañadas de los derechos de licencia de seis
mil rupias y una tasas de inspección de rupias mil quinientos por cada inspección de los mismos o con el propósito de la renovación
de la licencia.
A condición de que si el solicitante pide la renovación de la licencia después de la expiración, pero dentro de los seis meses a
partir de la expiración del impuesto fijado para la renovación de la licnece será rupias seis mil y tasas de inspección de rupias mil
quinientos más un cargo adicional en el tasa de rupias mil por mes o una parte del mismo en adicional a la tasa de inspección.
Condición adicional de que una licencia de titular de una licencia en el Formulario 28 C o el Formulario 28 E (apéndices 3 y 4) como puede ser el
caso para el funcionamiento del banco de sangre / procesamiento de la sangre humana entera para componentes / fabricación de productos de la sangre se
aplicará para la concesión de licencia para renovación en
subregla (1) antes de la expiración de dicho licenece en el Formulario 27-C o el Formulario 27-E, como puede ser el caso y que deberá
seguir funcionando de la misma hasta que las órdenes de su aplicación se comunican con él.
La autoridad otorgante inspeccionar el establecimiento antes de renovar la licencia y si

satisfecho, certificado de renovación de licencia se emite en el Formulario 26-G y la forma 26-I (Apéndices 5 y 6) como puede ser el caso.
1. {Para Explicación.- el propósito de Esta regla, 'Banco de Sangre' significa un lugar o

unidad de organización o una institución, u otro arreglo hecho por tal unidad de organización o institución para llevar a cabo la
totalidad o cualquiera de las operaciones de fabricación de componentes de la sangre humana o productos sanguíneos o la
sangre humana entera para su recogida, almacenamiento,
procesamiento, la distribución de donantes humanos seleccionados.}
2. Una cuota de rupias mil se pagará por un duplicado de la licencia emitida bajo
esta regla, si ha sido borrado el original, dañado o perdido.
3. Solicitud de licencia para la fabricación de medicamentos adicionales enumerados en la solicitud será

acompañado por un costo de trescientos rupias por cada medicamento que aparece en la solicitud.
4. Al recibir la solicitud de concesión o renovación de dicha licencia, la concesión de licencias
Autoridad, (i) Verificar las declaraciones hechas en el formulario de solicitud. (yo) Inspeccionar
la fabricación y ensayo de establecimiento de conformidad con las disposiciones

de reglas 122-I.
385
(yo) En caso de que la solicitud es para la renovación de licencia, la información de los resultados anteriores de
el titular deberá ser verificada.
5. Si la Dirección de Licencias que se cumple el aplicante está en condiciones de cumplir la

requisitos establecidos en las normas, el cual preparará un informe al respecto y lo remitirá junto con la solicitud y la licencia
(por triplicado) para ser concedido o renovado, debidamente cumplimentado a la Licencia central autoridad de aprobación.
A condición de que si la Dirección de Licencias es de la opinión de que el solicitante no está en condiciones de cumplir los
requisitos establecidos en estas bases, se puede, por fin, por razones que se registra por escrito, se niegan a otorgar o renovar la
licencia, según el caso puede ser.
6. Si, al recibir la solicitud y el informe de la Dirección de Licencias se refiere el párrafo 5 y después de tomar este tipo de
medidas, incluida la inspección de los locales, por el inspector, designado por el Gobierno central. bajo la Sección 21 de la
Ley, y / o junto con experto en el campo en cuestión si se considera necesario,
la Licencia central autoridad de aprobación, es
considera que el solicitante está en condiciones de cumplir el requisito establecido en esta norma, se concede o se renovó la licencia,
como puede ser el caso.
Siempre que Si la licencia central autoridad de aprobación es de la opinión de que la
solicitante no está en condiciones de cumplir los requisitos establecidos en estas reglas puede, no obstante el informe de
la Dirección de Licencias, por fin, por razones que se registró
en la escritura, denegará la solicitud de concesión o renovación de la licencia como puede ser el caso y deberá proporcionar al
solicitante una copia del informe de inspección.
122-G. Forma de licencia para el funcionamiento de un Banco de Sangre / Procesamiento de entera humana
La sangre de los componentes y fabricación de productos sanguíneos y las condiciones para la concesión o renovación de dicha licencia
Una licencia para la operación de un banco de sangre o para el procesamiento de sangre humana total para los componentes y la
fabricación de productos de la sangre se emiten en forma 28-C o Forma 28 forma E o 26-G o el Formulario 26-1. Antes de una licencia en el
Formulario 28-C o la Forma 28 Forma E o G-26 o el Formulario 26-I se conceda ni se renueve las siguientes condiciones deberán ser cumplidas
por la demandante-
1. El funcionamiento del banco de sangre y / o el procesamiento de sangre humana total para componentes /
fabricación de producto de la sangre se lleva a cabo bajo la dirección y supervisión activa de personal de competente
el personal técnico que consta de por lo menos una persona que es toda
tiempo de los empleados y que es un oficial médico y que posee -
una) post grado en Medicina-MD (Patología / Transfusión de Medicamentos); o.

segundo) Licenciado en Medicina (MBBS) con Diploma de Patología y Medicina de Transfusión
tener un conocimiento adecuado de la serología de grupos sanguíneos, la metodología de grupos sanguíneos y los principios
médicos involucrados en la obtención de sangre y / o preparación de sus
componentes; o
do) Licenciado en Medicina (MBBS) que tienen experiencia en el Banco de Sangre de un año durante
servicio regular y también tiene el conocimiento y la experiencia adecuada en la serología de grupos sanguíneos,
metodología de grupos sanguíneos y los principios médicos involucrado en el
obtención de sangre y / o preparación de sus componentes, el grado o diploma de ser
de una universidad reconocida por el Gobierno central explicación-A los efectos de esta condición,
la experiencia en el Banco de Sangre de un año será

No aplicar en el caso de las personas que son aprobados por la Autoridad de Licencias y / o Licencia central
386
seguridad transfusión de sangre y <w>
Autoridad de aprobación previa al inicio de los Medicamentos y Cosméticos (Enmienda)

Reglas, 1999.
2. El solicitante deberá proporcionar un espacio adecuado, maquinaria y equipo para cualquiera o todas las operaciones de recogida de
sangre o de procesamiento de sangre. El espacio, planta y equipo requerido para
vario funcionamiento se da en la Lista 'F', Parte XII-B y / o XII-C.
3. El solicitante deberá proporcionar y mantener el personal técnico adecuado como se especifica en el Anexo 'F', la parte XII-B y / o C-XII.
4. El aplicante deberá proporcionar disposiciones adecuadas para el almacenamiento de sangre entera humana,
Human componentes sanguíneos y los productos sanguíneos.
5. El solicitante deberá presentar a la Dirección de Licencias, si así lo requiere, los datos sobre la
estabilidad de sangre humana entera, sus componentes o productos de la sangre que puedan
deteriorándose, para la fijación de la fecha de caducidad que se imprime en las etiquetas de estos productos sobre la base de los datos de
modo amueblado.
122-H. Duración de la licencia-
Una licencia original en el Formulario 28-C o el Formulario 28-E o una licencia renovada en el Formulario 28-G o Formulario 28I menos
pronto suspendido o cancelado será válida durante un período de cinco años desde la fecha del año en el que es concedido o renovado.
122-I. Inspección antes de la concesión o renovación de La licencia de funcionamiento del Banco de Sangre, el procesamiento
de sangre humana total para componentes y fabricación de productos de sangre
Antes de una licencia en la Forma 28-C o el Formulario 28-E se concede o se hace una renovación de la licencia en el formulario 26G o el
Formulario 26-I, como puede ser el caso, la Dirección de Licencias y / o Licencia central
La aprobación de Autoridad, inspeccionar el establecimiento en el que se propone banco de sangre para ser
operado / sangre entera humana para el componente se procesa / productos sanguíneos se fabrican deberán
ser inspeccionado por uno o más inspectores, nombrados de conformidad con la Ley y / o junto con el Experto en el ámbito en cuestión.
El inspector o inspectores deberán examinar todas las partes de las instalaciones y aparatos / equipos e inspeccionar
el proceso de fabricación destinado a ser empleado o estar
empleado para el funcionamiento del banco de sangre / procesamiento de la sangre humana entera para componentes / fabricación de productos de la
sangre. El inspector (s) también deberá inspeccionar las instalaciones de ensayo y también
indagar en la cualificación profesional de el personal experto y otra Personal técnico ser

empleada.
122-J. Informe del Inspector
El inspector o inspectores deberán remitir un informe descriptivo detallado con su conclusión sobre cada aspecto de
inspección junto con su recomendación de conformidad con lo dispuesto en el
Regla 122-I de la Dirección de Licencias o para la Licencia central autoridad de aprobación.
122-K. Además aplicación después del rechazo
Si en un plazo de seis meses desde el rechazo de la solicitud de licencia el solicitante informa a la autoridad de concesión de
licencias que las condiciones establecidas se han aplicado y depósitos
una tasa de inspección de rupias doscientos cincuenta, la Dirección de Licencias, puede volver a inspeccionar la
establecimiento y si estima que las condiciones para la concesión o renovación de una licencia se han cumplido, podrán otorgar o renovar una
licencia en el Formulario 28-C o el Formulario 28-E;
Siempre que en el caso de un fármaco notificado por el Gobierno Central en virtud del artículo 68-A, la
solicitud junto con el informe de inspección y el formulario de licencia (por triplicado a concederse
387
<W>
o renovada), debidamente cumplimentado deberá ser enviado, a la Licencia central autoridad de aprobación, que puede
aprobar la misma y devolverla a la autoridad de concesión de licencias para la emisión de la licencia ".
122-L. Delegación de facultades por la Autoridad de Licencias Aprobar central
La oficina central de licencias autoridad de aprobación podrá, con la aprobación de el Gobierno Central,
por el delegado notificación de su poder de licencias de firma o cualquier otra potencia bajo las reglas a las personas bajo su control que
tiene mismas calificaciones según lo prescrito por Autoridad de Control bajo la Regla 50-A, para tales áreas y en los plazos que se
especifiquen.
122 M-. Provisión para llamamiento al Gobierno del Estado por una Parte cuya licencia no haya sido concedida o renovada
Cualquier persona que está perjudicada por la orden dictada por la autoridad de licencia o una Licencia central autoridad de aprobación, como
sea el caso, podrá, dentro de los treinta días siguientes a la fecha de recepción de dicha orden, de interés para el Gobierno del Estado o del Gobierno
central, según sea el caso puede ser, después de dicha investigación,
en la materia que considere necesario y después de dar a dicho individuo una oportunidad para representar su punto de vista en la materia
puede pasar dicha orden en relación con ello que considere oportuno.
122-n. Adicional Información a facilitar por un [demandante] para la licencia o por un licenciatario
a la Dirección de Licencias
los solicitante de la concesión de la licencia o cualquier persona designada para recibir una licencia bajo la parte expedirán, a
instancia suministrar a la Dirección de Licencias, antes de la concesión de la licencia o durante el período de la licencia está en vigor, como
puede ser el caso, las pruebas documentales en materia de propiedad u ocupación, alquiler u otra base de las premisas, se especifica en
la solicitud de licencia o en la licencia concedida, la constitución de la empresa o cualquier otro asunto relevante, que pueda ser requerida
con el fin de verificar la exactitud de la declaración hecha por el solicitante o el titular de la licencia, mientras que la solicitud o después de
obtener la licencia, como se en su caso.
122-O. Cancelación y suspensión de licencias
(1) La Autoridad de licencia o una Licencia Autoridad central que aprueba mayo de este certificado
concedido o renovado por él después de darle al licenciatario una oportunidad para mostrar causa por una orden de este
tipo no debe ser aprobada por una orden por escrito indicando el motivo de la misma, cancelar una licencia emitida bajo esta
parte o suspenderla por el período que considere adecuada, en todo o en relación con algunas de las sustancias a que se
refiere, [o dirigir el titular de la licencia para detener recogida, almacenamiento, procesamiento, fabricación y distribución de
dichas sustancias y acto seguido ordenar la destrucción de las sustancias y las poblaciones de los mismos en presencia de
una inspector] si, en su opinión, el titular ha dejado de cumplir alguna de las condiciones de la licencia o con cualquier
disposición de la Ley o reglas relacionadas con él. (2) Un licenciatario cuya licencia ha sido suspendida o cancelada, en el
plazo de tres meses
la fecha de la orden con arreglo a las subreglas (1) prefieren un recurso contra dicha orden al Gobierno del Estado o del
Gobierno central, que decidirá sobre el mismo.
388
122-P. Condiciones de licencia
"Una licencia en el Formulario 28-C, Formulario 28-E, Formulario 28-G o el Formulario 26-I estará sujeta al
condiciones especiales establecidas en el Anexo F, Parte XII-B y la Parte XII-C, según el caso puede ser, que * se refieren a la
sustancia para la que se concede o se renueva la licencia y con las siguientes condiciones generales, a saber: - "
(yo)
(una) El titular de la licencia deberá proporcionar y mantener una adecuada del personal, instalaciones y locales para la
el correcto funcionamiento de un banco de sangre para el procesamiento de sangre humana entera, sus componentes
y / o fabricación de los productos sanguíneos. (segundo) La licencia mantendrá personal, locales y equipos
especificados en la Norma
122-G. El licenciatario deberá mantener registros y los registros necesarios según se especifica en la Lista F, Parte
XII-B y XII-C. (do) El titular
prueba en su propio laboratorio de sangre humana entera, sus componentes
y productos de la sangre y mantener los registros y los registros respecto de tales pruebas como se especifica en la Lista F,
Parte XII-B y la Parte XII-C. Los registros y los registros se conservarán durante un período de cinco años a partir de la fecha
de fabricación. (D) La
licenciatario deberá mantener / preservar muestra de referencia y el suministro a la Inspector la muestra de referencia
de toda la sangre humana recogida por él en cantidad adecuada para llevar a cabo todas las pruebas prescritas. (Ii)
El titular de la licencia deberá permitir que un inspector designado en virtud de la Ley para entrar, con o [sin] previo aviso, los
lugares en que las actividades del Banco de Sangre se están llevando a cabo, para el procesamiento de sangre entera humana
y / o productos de sangre, para inspeccionar los locales
y la planta y el proceso de fabricación y los medios empleados para la normalización y probar la sustancia. (Iii)
El titular de la licencia deberá permitir que un inspector designado en virtud de la Ley de inspeccionar todos los registros y
los registros mantenidos bajo estas reglas y tomar muestras del producto fabricado y proporcionará al inspector dicha
información que pueda requerir con el fin de determinar si las disposiciones de la Ley y reglas relacionadas con él se han
observado. (Iv)
El titular de vez en informe de tiempo para la Dirección de Licencias cualquier cambio en el equipo de expertos responsables de la
operación de un banco / procesamiento de sangre de la sangre humana entera para componentes y / o fabricación de productos de la
sangre y sus distintas modificaciones sustanciales de las instalaciones o plantas utilizado a tal fin que se han realizado desde la fecha
de la última inspección realizada en nombre de la Autoridad de licencias antes de la concesión de la licencia. (V)
El titular de la licencia, previa solicitud, proporcionar a la Dirección de Licencias, o autoridad de aprobación de licencia central
o a la autoridad que la Licensing Authority, o el central
Autoridad de aprobación de licencia puede dirigir, desde cualquier unidad de lote de medicamentos como la Autoridad de licencia o de la
licencia de central aprobador puede de vez en cuando especifique, muestra de la cantidad que puede ser considerada adecuada por parte de
esa Administración para cualquier examen y, si así se requiere, también proporcionar protocolos completos de la prueba que se han aplicado.
(Vi)
Si la Autoridad de licencia o de la Licencia central autoridad de aprobación lo requiera, la

licenciatario no podrá vender u ofrecer en venta cualquier lote / unidad respecto de las cuales es una muestra, o protocolos son transferidos
en virtud de la última sub-párrafo anterior hasta un certificado
autorizar la venta de lotes / unidad ha sido emitida a él por o en nombre de la Autoridad de licencia o de la Licencia central
autoridad de aprobación.
389
(Vii) La persona con licencia al ser informado por la Dirección de Licencias o El control"
Autoridad que cualquier parte de cualquier lote / unidad de la sustancia se ha encontrado por la Autoridad de licencia o una
la Licencia central autoridad de aprobación no para cumplir con las normas
de fuerza, calidad o pureza especificado en estas Normas y al ser que lo indique, retirar, de las ventas y la medida en que
puede, en las circunstancias particulares del caso será el recuerdo de lo posible todos los temas ya hechos de ese lote /
unidad. (Viii)
Ningún fármaco fabricado bajo la licencia se venderá a menos que las precauciones necesarias
para la conservación de sus propiedades se han observado a lo largo el período después de la fabricación.
Además no lote / unidad fabricado bajo esta licencia se suministra / distribuido a

cualquier persona sin la prescripción del médico registrado practicante. (Ix)
El titular de la licencia deberá cumplir con las disposiciones de la Ley y de este Reglamento y con las especificaciones
adicionales, si la hay, que pueda ser fijado en cualquier Reglas hecho posteriormente
bajo el capítulo IV de la Ley, siempre que, cuando las especificaciones adicionales que se especifican en las Normas,
éstos vendrían en vigor cuatro meses después de su publicación en el Diario Oficial
Gaceta.
(X) El titular deberá mantener un libro de Inspección en el Formulario 35 para permitir que un inspector para registrar sus impresiones y
defectos notado. (Xi)
El titular deberá destruir las existencias de lotes / unidad que no cumpla con las pruebas estándar, de tal manera que no se
propagaría cualquier enfermedad / infección por medio del método de desinfección adecuada. (Xii)
Todos los residuos bio-sanitario será tratado, desecharse o destruidas de acuerdo con las disposiciones
de los desechos biomédicos (gestión y manipulación) Reglamento de 1996.
El licenciatario no podrá percibir la sangre de un donante profesional o de donantes pagados ni podrá preparar componentes de la
sangre y / o fabricación de productos de la sangre de la sangre extraída de
un donante tal.
PARTE XII B de la Lista F

REQUISITOS PARA el funcionamiento y operación de un banco de sangre y / o para la
preparación de BANCOS COMPONENTES sangre La sangre COMPONENTES / Blood
A . GENERAL
1. Localización y Medio Ambiente: El banco de sangre se encuentra en un lugar que será

lejos de las aguas residuales abierto, drenaje, baño público o ambiente antihigiénico similares.
2. Edificio: El edificio (s), utilizado para el funcionamiento de un banco de sangre y / o la preparación de

componentes de la sangre deben ser construidos de tal manera a fin de permitir la operación del banco de sangre y
preparación de componentes de la sangre en condiciones higiénicas, y evitará la entrada de insectos, roedores y
moscas. Será bien iluminado, ventilado y se tamiza (malla), siempre que sea necesario. Las paredes y suelos de
las habitaciones, donde la recolección de
sangre o la preparación de componentes de la sangre o productos sanguíneos se lleva a cabo deberá ser lisa, lavable y capaz de ser
mantenido limpio. Los drenajes deben ser del tamaño adecuado y donde se conecta directamente a una alcantarilla, deberán estar
equipados con trampas para evitar el sifonaje.
3. La salud, la ropa y el saneamiento del personal: Los empleados deberán estar libres de contagiosa o
enfermedades infecciosas. Ellos deberán estar provistos de un mono limpio, cabeza-engranajes, Lleva pies
y guantes, siempre que sea necesario. Habrá instalaciones de lavabos y retretes adecuados, limpio y conveniente.
390
seguridad de las transfusiones de sangre y la transfusión de regulación,
Un banco de sangre tendrá un área de 100 metros cuadrados para su operativa y una adicional zona
de 50 metros cuadrados para la preparación de componente de la sangre s. Eso se cuenta con una sala
cada una para -
(1) Registro y examen médico con muebles y de los medios adecuados para el registro
y la selección de los donantes; (2) La recogida de
sangre (con aire acondicionado); (3) componente de la sangre
preparación. (Esta deberá ser-aire acondicionado mantener temperatura

entre 20 ° C - 25 ° C); (4) Laboratorio para la serología de grupos sanguíneos.
(Aire acondicionado) (5) De laboratorio de sangre
enfermedades transmisibles como la hepatitis, la sífilis, la malaria, el VIH

anticuerpos (con aire acondicionado); (6) Esterilización-cum-lavado;
(7) Refresco-cum-resto habitación (aire acondicionado); (8) Almacenar-con-registros.
NOTAS:
(1) La requisitos anteriores en cuanto a alojamiento y área pueden ser relajado, con respecto a
laboratorios de ensayo y sala de esterilización-cum-lavado, para razones para ser registrada en
escrito por la Dirección de Licencias y / o la Licencia central autoridad de aprobación, en
el respeto de los bancos de sangre que operan en los hospitales, siempre que el hospital en cuestión tiene una patológica
laboratorio y una esterilización-cum-lavado sala común con otra
departamentos en dicha hospitalaria. (2) Refrescos para el donante después de la flebotomía, serán atendidos de manera que se
mantiene bajo
observación en el banco de sangre.
DO. PERSONAL
Cada banco de sangre tendrá siguientes categorías de tiempo todo el personal técnico competente: - (a) General de Salud Pública, que
reúna los requisitos especificados en la condición (I) de la Regla 122-G. (segundo) Banco de Sangre Técnico (s), que posee -
(yo) Licenciado en Tecnología de Laboratorio Médico (MLT) con seis meses experiencia en
la prueba de sangre y / o sus componentes; o (ii) Diploma en Laboratorio de Tecnología Médica (ML T) con la
experiencia de un año en
la prueba de sangre y / o sus componentes, el grado o diploma de ser de una
Universidad / Institución reconocida por la Administración General del Estado o de Gobierno del Estado. (do) Enfermeras
registradas). (re) Supervisor Técnico (donde se fabrican componentes de la sangre), que posee -
(yo) Licenciado en Tecnología de Laboratorio Médico (MLT) con seis meses experiencia en
la preparación de componentes de la sangre; o (ii) Diploma en Tecnología de Laboratorio Médico (MLT), con un año
de experiencia en
la preparación de componentes de la sangre, el grado o diploma de ser de una universidad /
Institución reconocida por la Administración General del Estado o de Gobierno del Estado.
391
NOTAS:
(1) Los requisitos de cualificación y experiencia en materia de Supervisor Técnico y
Banco de Sangre Técnico se aplicará en los casos de personas que han sido aprobados por la Dirección de Licencias y / o
autoridad de aprobación de licencia Central después el inicio
de las Reglas de Medicamentos y Cosméticos (enmienda), 1999. (2) En cuanto
a, el número de todo el tiempo competente personal tecnico, el banco de sangre

deberán cumplir los requisitos establecidos en la Dirección General de Servicios de Salud Manual. (3) Será
responsabilidad del titular de asegurar a través del mantenimiento de los registros
y otras últimas técnicas utilizadas en el sistema de almacenamiento de la sangre que el personal involucrado en las actividades de los bancos de sangre
para la recogida, almacenamiento, ensayo y distribución son adecuadamente

entrenado en las Buenas Prácticas de Manufactura / procedimientos operativos estándar para las tareas llevadas a cabo por el
personal de cada uno. El personal deberá ponerse en conocimiento de los principios de las Buenas Prácticas de Manufactura /
Procedimientos de Operación Estándar que afectan ellos y
recibir una formación inicial y continua relevante para sus necesidades.
RE. MANTENIMIENTO:
Los locales deberán mantenerse de una manera limpia y adecuada para garantizar la limpieza y el mantenimiento de las operaciones adecuadas
adecuada. Las instalaciones deberán incluir:
(1) Privacidad y examen exhaustivo de los individuos para determinar su idoneidad como donantes. (2) Recogida de sangre de
donantes con riesgo mínimo de contaminación o exposición a

actividades y equipos no relacionados con la extracción de sangre. (3) El almacenamiento de sangre o componentes sanguíneos pendientes finalización
de pruebas. (4) Provisión de cuarentena, el almacenamiento de sangre y componentes sanguíneos en un lugar designado,
pendiente de repetición de aquellas pruebas que inicialmente dan resultados serológicos cuestionables. (5) Provisión para la cuarentena,
almacenamiento, manipulación y eliminación de productos y reactivos no
adecuado para su uso. (6) Almacenamiento de productos terminados antes de su
distribución o emisión. (7) recolección, procesamiento, pruebas de compatibilidad,
almacenamiento y distribución de sangre

y componentes de la sangre para prevenir la contaminación. (8) rendimiento adecuado y apropiado de todos los procedimientos
relativos a la plasmaféresis,
plaquetoaféresis y leucapheresis.
(9) La conducta apropiada de todos los envases, etiquetado y otras operaciones de acabado. (10) Provisión para la
eliminación segura e higiénica de-
(yo) Sangre y / o componentes de la sangre no es adecuado para uso, distribución o venta. (Ii) La basura y los elementos utilizados
durante la prueba recogida, el procesamiento y la compatibilidad de
componentes de la sangre: la sangre y / o.
E. EQUIPO:
El equipo utilizado en la recolección, procesamiento, control, almacenamiento y venta / distribución de la sangre
y sus componentes se mantendrán en una manera limpia y adecuada y colocados de tal manera como para facilitar la limpieza y el
mantenimiento. se observará el equipo, estandarizado y calibrado sobre una base regular como se describe en el Manual de
Procedimientos de Operación Estándar y deberá
392
Requisitos reglamentarios ana seguridad de las transfusiones de sangre
operar de la manera para la que fue diseñado con el fin de garantizar el cumplimiento de los requisitos oficiales (los equipos) como se indica a
continuación para sangre y sus componentes.
Equipo que se observarán, estandarizado y calibrado con al menos el seguimiento
frecuencias: -
EQUIPO ACTUACIÓN FRECUENCIA, Frecuencia de

calibración
1. Temperatura Comparar con Diario Cuantas veces sea necesario

grabadora termómetro
2. Refrigerado Observe velocidad y Cada día de uso Cuantas veces sea necesario
centrífugo temperatura
1 -
3. hematocrito - Estandarizar antes de su uso inicial,
centrífugo después de reparación o ajustes, y
anualmente.
4. laboratorio general. - - Compruebe la velocidad con tacómetro cada

centrífugo 6 meses,
5. automatizado Observe controles para Cada día de uso -

determinación del grupo sanguíneo resultados correctos
6. Haemoglo- Estandarizar contra la Cada día de uso -

binomete norma Bulin
cyanamethemoglo-
7. Refractiometer Estandarizar frente a - ídem - -

o urinómetro agua destilada.
8. recipiente de sangre estandarizar contra - ídem - Cuantas veces sea necesario,

dispositivo de pesaje recipiente de peso
conocido
9. Baño de agua observar Temperatura - ditto- - ditto-
10. cuadro de vista Rh - ídem - - ídem - - ditto-

(Siempre que sea necesario
11. .Autoclave - ídem - Cada momento de - ídem -

su utilización
12. rotadores Observe controles para Cada día de uso Acelerar la frecuencia
.Serologic resultados correctos necesaria
13. Los termómetros - - Antes del primer uso

.Laboratory
14. Los termómetros - Mensual . -

.electronic
393
Normalización y caliberation de equipo ( continuado)
15. agitador Blood / Observe peso del primer Cada día de uso estandarizar con recipiente
dispositivo de pesaje contenedor de sangre de masa conocida o
lleno de resultados volumen antes de su uso
correctos inicial, y después de
reparaciones o adustment
(F) SUMINISTROS Y REACTIVOS:
Todos los suministros y reactivos utilizados en la recogida, el tratamiento, la compatibilidad, control, almacenamiento y distribución de sangre
y componentes sanguíneos deberán almacenarse a temperatura adecuada en un lugar seguro e higiénico, de una manera apropiada y en particular-
(una) Todos los suministros que entran en contacto con la sangre y componentes sanguíneos destinados a la transfusión
deberá ser estéril, libre de pirógenos, y no deberán interactuar con el producto de una manera tal como para tener un efecto adverso
sobre la seguridad, pureza, potencia o eficacia del producto. (segundo) Suministros y reactivos que no estén provistos de una fecha de
caducidad se almacenarán de manera que la
más antiguo se utiliza primero. (do) Suministros y reactivos deberán ser usados de una manera consistente con las instrucciones
proporcionadas por
el fabricante. (re) Todos los recipientes y cierres finales para sangre y componentes sanguíneos destinados a la transfusión
deberá estar limpia y libre de sólidos de superficie y otros contaminantes. (mi) Cada contenedor de recogida de sangre, y su recipiente (s)
por satélite, en su caso, serán examinados
visualmente por daños o evidencia de contaminación antes de su uso e inmediatamente después del llenado. Este examen
deberá incluir la inspección para la rotura de precintos, cuando esté indicado, y la decoloración anormal. Cuando se observa
ningún defecto, el recipiente no será utilizada o, si se detecta después del llenado, deberá ser desechado adecuadamente. (F) Las
muestras representativas de cada lote de los siguientes reactivos y / o solución serán
probado regularmente de forma programada mediante los métodos descritos en el Manual de procedimientos operativos estándar para
determinar su capacidad para llevar a cabo según sea necesario:
Reactivos y soluciones Frecuencia de las pruebas junto
con los controles
Blood suero anti-humano Cada día de uso cada
agrupación sueros lectina día de uso cada día
de uso cada día de
detección de anticuerpos y revertir células Hepatitis reactivos uso de cada
reactivos de prueba serología de la sífilis Enzimas agrupación ejecución de cada
carrera cada día de
uso de cada carrera
VIH I y II reactivos solución salina normal cada día de uso cada
(LISS y PBS) Albúmina bovina día de uso
394
La transfusión de sangre con seguridad y los requisitos reglamentarios
(SOL) Buenas prácticas de fabricación (GMPs) / operativo estándar

Procedimientos (SOP):
Escritos procedimientos operativos estándar se mantendrán y serán incluir todos los pasos que se
seguido en la recogida, el tratamiento, pruebas de compatibilidad, almacenamiento y venta o distribución de
sangre y / o la preparación de componentes de la sangre para homóloga transfusión, autólogo transfusión
y fines de fabricación adicionales. Tales procedimientos deberán estar disponibles para el personal para usar
en las zonas en cuestión. Los procedimientos operativos estándar se Interalia incluir:
1. Criterios de (a) utilizado para determinar la idoneidad del donante. (segundo) métodos de realización de pruebas de calificación de los
donantes y las mediciones incluyendo mínimo

, y los valores máximos para un examen o procedimiento, cuando un factor en la determinación de aceptabilidad; (do)
soluciones y métodos utilizados para preparar el sitio de flebotomía a fin de dar la máxima garantía de un recipiente estéril de la
sangre; (re) método de relacionarse con precisión el producto (s) para el donante; (mi)
procedimiento de recogida de sangre, incluyendo precauciones en proceso tomado para medir con precisión
la cantidad de sangre extraída del donante; (F)
los métodos de preparación de los componentes incluidos, las restricciones de tiempo para pasos específicos en el procesamiento; (sol)
todas las pruebas y ensayos repetidos realizados en sangre y sus componentes durante el procesamiento; (H)
pruebas previas a la transfusión, en su caso, incluyendo precauciones que deben tomarse para identificar
con precisión los componentes de la sangre receptor durante el procesamiento; (yo)
procedimientos de gestión de reacciones adversas en reacciones de donantes y receptores (j)
las temperaturas de almacenamiento y métodos de control de temperaturas de almacenamiento de sangre y sus componentes y reactivos;
(K)
longitud de las fechas de caducidad, en su caso, asignado para todos los productos finales;
(L) criterios para determinar si la sangre devuelta es adecuado para reedición; (metro)
procedimientos usados para relacionar una unidad de sangre o componente de la sangre del donante a su eliminación final; (norte)
procedimientos de control de calidad de los suministros y reactivos empleados en la extracción de sangre, procesamiento y ensayo
de re-transfusión; (O)
horarios y procedimientos para el mantenimiento y calibración de equipos; (pag)
procedimientos de etiquetado para salvaguardar su confusiones, la recepción, emisión, rechazado y en mano; (Q)
procedimientos de plasmaféresis, plateletphersis y leucapheresis si se realiza, incluso

precauciones que deben tomarse para garantizar la re-infusión de las propias células del donante.
(R) procedimientos para la preparación de plasma recuperado (salvado) si se realiza, incluyendo detalles de
la separación, puesta en común, etiquetado, almacenamiento y distribución. (S)
todos los registros pertinentes para el lote o unidad mantenida de conformidad con el presente reglamento serán revisados antes de
la liberación o la distribución de un lote o unidad de producto final. La revisión o porciones de la revisión se pueden realizar en
períodos apropiados durante o después de la recogida de sangre, el procesamiento,
pruebas y almacenamiento. Una investigación a fondo, incluyendo el
conclusiones y seguimiento, de cualquier discrepancia inexplicable o el fracaso de un lote o unidad para satisfacer cualquiera de sus
especificaciones se harán y se registró. 395

2. Un concesionario puede utilizar actuales procedimientos operativos estándar, tales como los manuales de la
siguientes organizaciones, siempre que tales procedimientos específicos son consistentes con, y al menos tan estrictas como, los
requisitos contenidos en esta parte, a saber: (i) Dirección General de Servicios de Salud Manual. (Ii) Otras organizaciones o
manuales de bancos de sangre individual, tema a la aprobación de

Dirección de Licencias Estado y autoridad de aprobación de licencia central.
H. CRITERIOS PARA LA DONACIÓN DE SANGRE:
Condiciones para la donación de sangre: (I)
-No persona General donar sangre y ningún banco de sangre deberá extraer la sangre de una persona, más de una vez en tres
meses. El donante deberá estar en buena salud, mentalmente alerta y en buena forma física y no será presos de la cárcel, las
personas que tienen múltiples parejas sexuales y drogadictos. Los donantes deberán cumplir los siguientes requisitos, a saber:
(a)
del donante será en el grupo de edad de 18 a 60 años. (segundo)
el donante no deberá ser inferior a 45 kilogramos; (do)
temperatura y el pulso del donante serán normal; (re)
las presiones arteriales sistólica y diastólica son dentro de lo normal sin límites
medicación; (mi) hemoglobina que no deberá ser inferior a 12,5
gramos; (F)
el donante debe estar libre de enfermedades respiratorias agudas; (sol)
el donante debe estar libre de cualquier enfermedades de la piel en el sitio de flebotomía; (H)
el donante debe estar libre de cualquier enfermedad transmisible por transfusión de sangre, en lo
lo que puede ser determinado por la historia y examen se ha indicado anteriormente; (yo)
los brazos y antebrazos del donante deberán estar libres de pinchazos o cicatrices indicativos de donantes de sangre
profesionales o adicción de narcóticos auto inyectado piel
3. Adicional calificaciones de un donante. -
Ninguna persona podrá donar sangre, y ningún banco de sangre deberá extraer la sangre de un donante, en las condiciones
mencionadas en la columna (1) de la Tabla dada a continuación antes de que expire el período de aplazamiento mencionado en la
columna (2) de dicho cuadro .
Tabla: aplazamiento de la donación de sangre
CONDICIONES Período de aplazamiento

(1) (2)
(una) abortos 6 meses

(segundo) Antecedentes de transfusión sanguínea 6 meses
(do) Cirugía 12 meses
(re) Tifoidea 12 meses después de recuperación
(mi) Historia de la malaria y de 3 meses (endémica)

debidamente tratada 3 años (zona no endémica)
(F) Tatuaje 6 meses
(sol) La lactancia materna 12 meses después de la entrega
396
Aplazamiento de la donación de sangre ( continuado)
(yo) Inmunización (cólera, 15 días
Tifoidea, la difteria, el tétanos plaga,
gammaglobulina)
(J) vacuna contra la rabia 1 año después de la vacunación
(K) Historia de la hepatitis en 12 meses
la familia o el contacto directo
(L) inmunoglobulina 12 meses
2. Ninguna persona podrá donar sangre y ningún banco de sangre deberá extraer la sangre de una persona,
que sufre de cualquiera de las enfermedades mencionadas a continuación, namely.- una
Cáncer
segundo. Enfermedad del corazón
do. tendencias de sangrado anormal

re. Pérdida de peso inexplicable
mi. Diabetes controlado sobre insulina
F. La infección por hepatitis
sol. nefritis crónica

h. Los signos y síntomas sugestivos de SIDA,
yo. Enfermedad del higado
j. Tuberculosis
k, Policitemia vera
YO. Asma
metro. Epilepsia
norte. Lepra
o. Esquizofrenia
pag. Desordenes endocrinos
YO. EQUIPO GENERAL E INSTRUMENTOS:

1. Para el sitio de recogida de sangre: (i)
camas donantes, sillas y mesas: Estos deben estar protegidos adecuadamente y comfortbly y deben ser de tamaño apropiado. (Ii) Mesilla
de noche. (Iii) Esfigmomanómetro y un estetoscopio. (Iv) camas de recuperación para los donantes. (V)
refrigeradores, para almacenar por separado probado y sangre no probado, manteniendo

temperatura entre 2 a 6 grados centígrados con dial digital termómetro,
grabación termógrafo y dispositivo de alarma, con provisión para suministro continuo de energía. (Vi) dispositivos para el
donante de sangre y recipientes de pesaje.
2. Para la determinación de hemoglobina: (i)
solución de sulfato de cobre (gravedad específica 1,053) (ii)
lanceta estéril y toallitas de alcohol impregnadas. (Iii) El tubo
capilar (1.3x1.4x96 mm o Pipetas Pasteur) (iv) bulbos de goma para tubos
capilares.
397
hemoglobinómetro de Sahli / método Colorimeteric.
3. Para la determinación la temperatura y pulso:
(yo) Los termómetros clínicos. (Ii) Watch (equipado con un segundo mano) y
un cronómetro.
4. Para contenedores de sangre: (a) Sólo desechables bolsas de sangre de PVC se deben usar (sistema cerrado) según
la
especificaciones de IP / USP / BR (b) Anticoagulantes:
El anti-coagulante solución deberá ser estéril, y de libre de pirógenos

la siguiente composición que garantice una seguridad satisfactoria y la eficacia de la
sangre entera y / o para todos los componentes de la sangre separados. (yo)
solución de citrato fosfato dextrosa (CPD) o citrato fosfato dextrosa adenina 1 (CPDA-1), 14 ml. será
necesaria solución para 100 ml de sangre.
NOTA 1.
(yo) En caso de las bolsas individuales / doble / triple / cuádruple de recogida de sangre utilizadas para las preparaciones de componentes de la sangre, se
puede utilizar CPDA bolsas de recogida de sangre. (Ii)
solución de citrato ácido de dextrosa (ACD con la Fórmula-A). IP, será necesaria una solución de 15 ml para 100 ml de
sangre. (Iii)
soluciones aditivo tal como SAGM, ADSOL, Nutricel se pueden usar para almacenar y retener los glóbulos
rojos de la sangre hasta 42 días.
NOTA 2.
los licenciatario velará por que las soluciones anti-coagulantes son de un fabricante con licencia
y el bolsas de sangre en la que están contenidas las citadas soluciones tienen un certificado de análisis de la dicho fabricante.
5. Equipo de emergencia / artículos. (yo)
Cilindro de oxígeno con la máscara, manómetro y regulador de presión. (Ii)
5 por ciento de glucosa o solución salina normal, (iii)
jeringas estériles y agujas desechables de diferentes tamaños. (Iv)
Desechables equipos de infusión IV estériles. (V)
ampollas de adrenalina, Noradrenalina, Mephentin, betametasona o

Dexametasona, inyecciones Metoclorpropamide (vi)
Aspirina.
6. Accesorios: (i)
Tales como mantas, cuencas emesis, pinzas hemostáticas, abrazaderas de ajuste, fórceps de esponja, gasa,
tarros vestidores, frascos, latas de soluciones de desecho.
(Ii) bolas de algodón Mediano, 1,25 cm. cintas adhesivas. (Iii)
espíritu desnaturalizado, tintura de yodo, jabón verde o jabón líquido. (Iv)
servilletas o toallas de papel. (V)
Autoclave con la temperatura y el indicador de presión. (Vi)
Incinerador
(vii) Stand-by generador.
398
Equipo de laboratorio:
(yo) refrigeradores, para el almacenamiento de kits y reactivos de diagnóstico, el mantenimiento de una temperatura
entre 4-6 0 C + 2 0 C con dial digital termómetro que tiene provisión para
fuente de alimentación continua. (Ii)
Microscopio compuesto con objetivos de baja y de alta potencia. (Iii)
Centrifugar (Tabla Model) (iv) Baño de agua: tener rango
entre 37 ° -56 ° C (v)
Rh cuadro de visualización en el caso de la técnica de
deslizamiento.
Incubadora
(Vi) con control termostático. (Vii) agitadores mecánicos para las pruebas
serológicas para la sífilis. (Viii) Hand-lente para la observación de las pruebas realizadas en
los tubos. (Ix)
Serológica pipetas graduadas de varios tamaños (x)

Pipetas (Pasteur) (xi)
Los portaobjetos de
vidrio (xii) Tubos de ensayo de varias placas de tamaños / de micropocillos (U o de tipo V) (xiii) tubos precipitantes de 6 mm x 50
mm de diferentes tamaños y vasos de precipitados de vidrio de diferentes
tamaños (xiv) bastidores para tubos de ensayo de diferentes
especificaciones, (xv)
Temporizador de intervalos eléctrico o de resorte de la herida, (xvi) Equipo y materiales para la limpieza de artículos de
vidrio de manera adecuada, (xvii) Aislado contenedor para el transporte de sangre, entre centígrados 2 grados a 10
temperaturas grados centígrados, a las salas de los hospitales y, (xviii) Frasco
de lavado (xix) Los papeles de filtro (xx) sellador de tubo dieléctrico. (Xxi) viales Plain y
EDTA (xxii) equilibrio químico (cuando sea necesario) (xxiii) lector de ELISA con la
impresora, la arandela y micropipetas.
J. reactivos especiales:
(1) Standard grupo sanguíneo sueros anti-A, anti-B y anti-D con controles conocidos. la tipificación Rh
sueros deberá estar en cantidad doble y cada uno de diferente marca o si de la misma, suministrando cada suministro deberá ser de diferentes
números de lote. (2) Reactivos para pruebas serológicas para la sífilis y sueros positivos para los controles. (3) Anti-humano globulina en suero (suero de
Coombs) (4) Albúmina bovina 22 por ciento y enzimáticos reactivos para anticuerpos incompletos. (5) ELISA o RPHA kits de prueba para la hepatitis B y C y
VIH I y II. (6) Detergentes y otros agentes para la limpieza de artículos de vidrio de laboratorio.
399
K. PRUEBA DE SANGRE:
(1) Será responsabilidad del titular de la licencia para asegurarse de que toda la sangre recogida
se ajusta procesados y suministrados a las normas establecidas en la Farmacopea India y otros ensayos publicados, en
su caso, por el Gobierno. (2) La libertad de VIH anticuerpos (SIDA) Prueba -Cada titular deberá obtener muestras de cada
unidad de sangre de prueba, antes de su uso, por la libertad de anticuerpos ya sea desde los laboratorios especificados para el
efecto por el Gobierno Central o en su propio laboratorio de VIH I y II VIH. Los resultados de tales pruebas se registrarán en la etiqueta
del recipiente. (3) Cada unidad de sangre también se someterá a ensayo para la libertad de antígeno de superficie de Hepatitis B, y
anticuerpo virus de la hepatitis C, VDRL y malaria parásito y los resultados de tales pruebas se registrarán en la etiqueta
del recipiente.
NOTA:
(una) Las muestras de sangre de donantes en tubo piloto y las muestras de sangre del receptor serán
conservada durante 7 días después de su emisión. (segundo) La sangre destinada a la transfusión no se
congela en cualquier etapa. (do) contenedores de sangre no vendrán directamente en contacto con el hielo en
cualquier etapa.
L. Registros:
Los registros que se requiere el licenciatario para mantener incluirán entre otras cosas, los datos siguientes, a saber: -
(1) registro de donantes de sangre: Se deberá indicar el número de serie, fecha de sangrado, nombre, edad, dirección
y la firma del donante con otras particularidades de la edad, el peso, hemoglobina, agrupación de sangre, presión arterial,
examen médico, número de bolsa y el detalle del paciente para quien donado
en caso de donaciones de reposición, categoría de donación (voluntaria / reemplazo) y
expedientes de aplazamiento y la firma del médico oficial de InCharge. (2) Los registros maestros de la sangre y sus componentes: Se deberán indicar el
número de serie de la bolsa, la fecha de
colección, fecha de caducidad, la cantidad en ml. ABO / Rh Grupo, como resultado de las pruebas de VIH I y II VIH anticuerpos,
malaria, VDRL, antígeno de superficie de la Hepatitis B y anticuerpos irregulares (si existe), nombre y dirección del
el donante con datos, número de emisión de utilización,
componentes preparados o desechados y la firma del médico oficial InCharge. (3) Registro de Emisión: Se indicará el número de
serie, fecha y hora de emisión, número de serie de la bolsa,
ABO / Rh Grupo, cantidad total en ml, nombre y dirección del destinatario, grupo de destinatario,
unidad / institución, los detalles del informe de las pruebas cruzadas, indicación para la transfusión. (4) Los
registros de componentes suministrados: cantidad suministrada; informe de compatibilidad, detalles de

destinatario y la firma de emitir persona. (5) Registros de bolsas ACD / CPD / DPC-A / SAGM dando detalles
del fabricante, lote
número, fecha de la oferta, y los resultados de las pruebas. (6) Registrarse kits de diagnóstico y reactivos utilizados: nombre de los kits /
reactivos, detalles del lote

número, fecha de caducidad y fecha de uso. (7) Banco de sangre debe emitir el informe de compatibilidad cruzada de la sangre al
paciente junto con
la sangre, unidad. (8) registros de reacciones adversas de la transfusión. (9) Los registros de compra, uso y acción a disposición de agujas
desechables, jeringas, bolsas de sangre,
se mantendrán.
400
NOTA: Lo anterior dijo que los registros serán conservados por el titular de la licencia por un período de cinco años.
M. ETIQUETAS:
los etiquetas de cada bolsa que contiene la sangre y / o componente deberá contener la siguiente
datos, a saber:
(1) El nombre correcto del producto en un lugar prominente y en negrita en la bolsa. (2) Nombre y dirección del banco de sangre (3) Número
de licencia (4) Número de serie (5) La fecha en la cual se extrae la sangre y la fecha de expiración como se prescribe en la Lista
P a estas reglas. (6) Una etiqueta de color deberá ser puesto en cada bolsa que contiene la sangre. El siguiente esquema de colores
para dichas etiquetas se utilizará para diferentes grupos de sangre:
Grupo sanguíneo Color de la etiqueta
O Azul
UNA Amarillo
segundo Rosado
AB Blanco
(7) Los resultados de las pruebas para el antígeno de la hepatitis B de superficie, y el anticuerpo virus de la hepatitis C, la sífilis, la libertad de
anticuerpos VIH I y VIH II y parásito de la malaria. (8)
El grupo Rh. (9)
Volumen total de la sangre, la preparación de la sangre, la naturaleza y el porcentaje de anti-coagulante. (10)
Mantener continuamente la temperatura a 2 ° C-6 ° C para la sangre y / o componentes humana entera que figuraba bajo III de la
Parte XIIB. (11)
equipos de transfusión con filtro desechables se utilizan en equipos de administración. (12)
cruz compatible adecuada emparejado sangre sin un anticuerpo típico de destinatario se utilizará. (13)
El contenido de la bolsa no se utilizarán si hay alguna evidencia visible de deterioro como la hemólisis, la coagulación o
decoloración. (14)
La etiqueta deberá indicar la clasificación de los donantes apropiados como “Donante Voluntario” o
“Donante de reposición” de no menos importancia que el nombre propio.
NOTAS:
1. En el caso de componentes de la sangre, las referencias de la sangre de la que se han preparado estos componentes serán
dados contra números de artículos (5), (7), (8), (9) y (14).
2. La sangre y / o sus componentes se distribuirán sobre la prescripción de un médico practicante registrado.
II. II. CAMPS BLOOD donación.
Un campamento de la donación de sangre puede ser organizado por -

(una) un Centro de Transfusión de Sangre Regional de licencia designado; o (b) un banco de
sangre Gobierno con licencia; o
401
(do) la Sociedad India de la Cruz Roja o (d) un banco de sangre con licencia a cargo de las organizaciones de voluntarios o de beneficencia registrados
reconocido
por estado o territorio de la Unión Consejo de Transfusión de Sangre.
NOTAS:
(yo) “Designado Regional de Transfusión de Sangre” será un centro autorizado y designado por un Consejo de Transfusión
de Sangre constituido por un Gobierno del Estado para recoger, procesar
y distribuir la sangre y sus componentes para atender a las necesidades de la región y que el centro también ha sido
autorizada y aprobada por la Autoridad de Licencias y autoridad de aprobación de licencia con el propósito central. (Ii) El
designado Regional de Transfusión de Sangre, banco de sangre y Gobierno de la India
Sociedad de la Cruz Roja se íntimas dentro de un período de siete días, el lugar donde la sangre
campo se llevó a cabo y los detalles del grupo sabia unidades de sangre recogidas en dicho campo a la oficina de licencias y la autoridad de
aprobación de licencia central. Para la celebración de un campo de la donación de sangre,
los siguientes requisitos deberán cumplirse / cumplidas,

a saber:-
(UNA) Locales, personal, etc.

(una) Locales bajo el campo de la donación de sangre deben tener un área suficiente y la ubicación deberá
ser higiénico de manera que permita un correcto funcionamiento, mantenimiento y limpieza. (pelota
información sobre el personal de trabajo, el equipo utilizado y las instalaciones disponibles en un campamento de tales
estará bien documentado y puesto a disposición para su inspección, si es requerido,
y asegurar que: (i)
suministro eléctrico continuo e ininterrumpido para el equipo utilizado en el Camp; (Ii) iluminación adecuada
para todas las actividades necesarias; (Iii) instalaciones de lavado de manos para el personal; (Iv) sistema de
comunicación fiable a la oficina central de
el Controlador / organizador de
el campamento;
(V) mobiliario y equipo dispuesto dentro del lugar disponible; (Vi) máquinas de refrescos
para los donantes y personal; (Vii) (Vii) instalaciones para el examen médico de los donantes;
(Viii) la disposición adecuada de los residuos.
(SEGUNDO) El personal de fuera de la puerta del campo de donación de sangre:
Para recoger la sangre de 50 a 70 donantes en aproximadamente 3 horas o de 100 a 120 donantes en 5 horas, los siguientes requisitos
deberán cumplirse / cumplirse: -
(yo) Un oficial médico y dos enfermeras o flebotomistas para la gestión de 6-8 mesas de donantes; (Ii) dos trabajadores sociales médico; (Iii) tres
técnicos de bancos de sangre; (Iv) dos asistentes; (V) vehículo que tiene una capacidad para asentar 8-10 personas, con previsto el transporte de
donación
bienes que incluyen instalaciones para llevar a cabo un campamento de la donación de sangre.
402
(C) Equipo:
1. aparato de BP.
2. Estetoscopio.
3. Las bolsas de sangre (simple, doble, triple, cuádruple)
4. cuestionario para los donantes.
5. dispositivo de pesaje para los donantes.
6. dispositivo de pesaje para bolsas de sangre,
7. pinzas hemostáticas, tijeras.
8. Stripper para tubos de sangre.
9. sábanas, mantas / colchón.
10. selecciones de lancetas, hisopo / diente.
11. Diapositivas de vidrio.
12. Portable metros Hb / sulfato de cobre.
13. tubo de ensayo (grande) y 12x100 mm (pequeño)
14. Soporte para tubos de ensayo.
15. Anti-A, Anti-B y Anti.AB, antisueros y Anti-D
dieciséis. Tubo de ensayo film sellador.
17. cinta adhesiva medicado.
18. cesto de basura de plástico
19. Las tarjetas de donación y refresco para los donantes.
20. El botiquín de emergencia
21. contenedores de bolsa de sangre aisladas con disposiciones para almacenar entre 2 ° - 10 ° C
22. sellador dieléctrico o sellador de tubo portátil
23. destructor de agujas (cuando sea necesario)
III. PROCESAMIENTO de los componentes sanguíneos de la sangre entera POR un banco de sangre
Los componentes sanguíneos serán preparados por los bancos de sangre como parte de los servicios de banco de sangre. Las condiciones para la concesión o renovación de
la licencia para preparar componentes de la sangre serán los siguientes: -
(UNA) ALOJAMIENTO:
(1) Habitaciones con un área adecuada y otras especificaciones, para la preparación de componentes de la sangre
dependiendo de la cuantía de la carga de trabajo serán los especificados en el punto B en la rúbrica “I. BANCOS DE SANGRE /
componentes de la sangre”de esta parte.
(2) Preparación de componentes de sangre se llevará a cabo sólo bajo sistema cerrado usando,
doble, bolsas triples o cuádruples de plástico, excepto para la preparación de los glóbulos rojos
Concentrados, donde las bolsas individuales se pueden usar con bolsas de transferencia.
(SEGUNDO) EQUIPO:
(yo) Aire acondicionado; (Ii) banco de flujo de aire laminar; (Iii) centrífuga
refrigerada adecuado; (Iv) exprimidor de plasma (v) Clipper y
clips y o sellador dieléctrico;
403
(Vi) dispositivo de pesaje; - (vii) material de

equilibrado caucho seco; (Viii) pinzas hemostáticas,
tijeras; (Ix) frigorífico mantenimiento
una temperatura entre 2 ° C - 6 ° C, una digital marcar
termómetro con grabación termógrafo y dispositivo de alarma, con la provisión para
suministro continuo de energía; (X)
agitador de plaquetas con incubadora (cuando sea necesario) (xi) congeladores manteniendo una temperatura entre
-30 ° C a -40 ° C y -75 ° C a -
80 ° C (xii) Baño de agua refrigerada para Plasma descongelación; (Xiii) Aislado recipientes bolsa de sangre con disposiciones para el
almacenamiento a temperatura apropiada
con fines de transporte ;.
(DO) PERSONAL:
Durante todo el tiempo competente técnico El personal destinado para el procesamiento de los componentes sanguíneos (que es
Médico, Supervisor Técnico, Técnico del Banco de Sangre y enfermera registrada) serán los especificados en el punto C, bajo
la rúbrica “I. Los bancos de sangre / componentes de la sangre”de esta
Parte.
(RE) Instalaciones de ensayo:

General: instalaciones para A, B, AB y grupos O y Rh (D) de agrupación. Hepatitis B al antígeno de superficie y el anticuerpo virus de la
hepatitis C, VDRL, HIV I y II VIH anticuerpos y parásitos de la malaria serán obligatorios para cada unidad de sangre antes de que
se utiliza para la preparación de componentes de la sangre. los
resultados de dicha prueba se indican en la etiqueta.
(MI) Categorías de componentes de la sangre: (I) CONCENTRADO rojo

humano corpúsculos de la sangre:
El producto se conoce como “concentrado de glóbulos rojos” que está de glóbulos rojos empaquetados que quedan después de separar el plasma de la
sangre humana.
Requerimientos generales :
(una) Almacenamiento: Inmediatamente después de la transformación, Los glóbulos rojos empaquetados se mantienen a una
temperatura se mantuvo entre centígrados 2 grados a 6 grados centígrados. (segundo) Inspección: El componente deberá ser
inspeccionado inmediatamente después de la separación de el plasma,
durante el almacenamiento y otra vez en el momento de su emisión. El producto no deberá ser emitido si hay alguna anormalidad
en color o físico apariencia o alguna indicación de microbiana
contaminación. (do) se obtendrá La sangre fuente de concentrado de glóbulos rojos: Idoneidad de Donante
de un donante que cumple los criterios de donación de sangre como se especifica en el punto H en el apartado “I. BANCOS DE
SANGRE / componentes de la sangre”de esta parte. (re) Pruebas de Sangre Total: Sangre de la que de glóbulos rojos empaquetados
se preparan deberá
ser probado como se especifica en el punto K en relación a las pruebas de sangre entera bajo los “componentes BANCOS I.BLOOD /
Blood” la partida de esta parte.
404
(E) las muestras piloto: muestras piloto recogidos en integral tubos o en piloto separada tubos deben
cumplir las siguientes especificaciones: (i) Una o más muestras piloto de cualquiera de la sangre original o de la Sangre rojos
empaquetados
Las células que se están procesando se conservarán con cada unidad de glóbulos rojos empaquetados que se emiten. (Ii) Antes de ser
llenados, todos los tubos de muestra piloto deberán estar marcados o identificados de manera que se
relacionarlos con el donante de esa unidad o concentrados de glóbulos rojos. (Iii) Antes
de que el recipiente final está vacío o al el tiempo que el producto final Esta preparado, la
tubos de muestra piloto que acompañan a una unidad de glóbulos rojos empaquetados, se adjuntan en el
una de manera a prueba de manipulaciones ese deberá conspicuamente identificar eliminación y re-
adjunto archivo. (Iv) Todos los tubos de muestra piloto, que acompaña a una unidad de glóbulos rojos empaquetados, se llenarán
inmediatamente después de que se recogió la sangre o por lo el tiempo que el producto final Esta preparado,
en cada caso, por la persona que realiza la recogida de preparación.
(F) Procesamiento:
(yo) Separación: de glóbulos rojos empaquetados se separan de la sangre entera, - (a)
si toda la sangre se almacena en solución ACD dentro de 21 días, y (b)
si toda la sangre se almacena en solución CPDA-1, dentro de los 35 días, desde la fecha de colección- de glóbulos
rojos empaquetados se pueden preparar ya sea por centrifugación hecho de una manera que no se tenderá a aumentar
la temperatura de la sangre o por la normalidad sedimentación sin perturbaciones “método. Una porción de
el plasma, suficiente para asegurar
conservación óptima de la célula, se dejó con los concentrados de glóbulos rojos.
(Ii) de glóbulos rojos empaquetados congelados: sustancia Cryophylactic se puede añadir a la
De glóbulos rojos empaquetados para el almacenamiento del fabricante extendida no wanner de menos 65 ° C
siempre que el fabricante envía datos a la satisfacción de la concesión de licencias
Autoridad y autoridad de aprobación de licencias central, como demostrando de manera adecuada
a través de células de supervivencia in vivo y otras pruebas apropiadas que la suma de la
sustancia, del material utilizado y los métodos de transformación da como resultado un producto final cumple con los
estándares requeridos de seguridad, pureza y potencia para de glóbulos rojos empaquetados, y que
el producto congelado deberá mantener esas propiedades para el especificado
periodo de caducidad. (Xiv) De pruebas: de glóbulos rojos empaquetados deberán ajustarse a las normas establecidas en el
Farmacopea India.
(2). PLAQUETAS CONCENTRADOS:

El producto se conoce como “Las plaquetas Los concentrados” que se plaquetas recogidas de una
unidad de sangre y re-suspendió en un volumen apropiado de plasma inicial.
Requerimientos generales :
(yo) Fuente: El material de origen para las plaquetas deberán ser plasma rico en plaquetas o capa leucocitaria
que puede obtenerse de la sangre entera o por plaquetoféresis. (Ii) Procesamiento de (a) La separación de la capa leucocitaria o
plasma rico en plaquetas y las plaquetas y re-suspensión de
las plaquetas será en un sistema cerrado por-centrífuga método con apropiado

velocidad, la fuerza y el tiempo.
405
(segundo) Inmediatamente despues colección, toda la sangre o el plasma deberá almacenarse a 20 ° -

24 ° C. Cuando eso es ser transportado desde el lugar de recogida de sangre a la
tratamiento laboratorio, durante tal transporte acción, la temperatura como cerrar como
posible 20 ° -24 ° C deberá ser asegurado. los plaqueta concentrados deberá ser apartado
dentro de las 6 horas después de la hora de recogida de la unidad de sangre entera o plasma. (do) El tiempo y la velocidad de
centrifugación se demostrará a producir un no amortiguado
producto, sin hemólisis visible, que se obtiene un recuento de no menos de 3.5 x 10 10 y
4.5x 10 10 es decir, plaquetas por unidad de una unidad de 350 ml. y 450 ml. sangre, respectivamente.
El uno por ciento de plaquetas total preparado se someterán a ensayo de los cuales 75 por ciento de la
unidades se ajustarán a lo anterior, dijo el recuento de plaquetas. (re) El
volumen de original plasma utilizado para resuspensión de las plaquetas deberá ser
determinada por el mantenimiento del pH de no menos de 6 durante el período de almacenamiento.
El pH se midió en una muestra de plaquetas que ha sido almacenado para la
máxima admisible período de caducidad a 20 ° C-24 ° C. (mi) contenedores finales utilizados para las plaquetas
debe ser incoloro y transparente para permitir visual
inspección de los contenidos. Los tapones seleccionados deberán mantener un sello hermético para prevenir
contaminación de los contenidos. El material del recipiente deberá no interactuar con la
contenido, debajo las condiciones normales de el almacenamiento y uso, de una manera tal que se
tener un efecto adverso sobre la seguridad, pureza, potencia, o la eficacia de el producto. A
el momento del llenado, el recipiente final será marcado o identificado por el número con el fin de
relacionarlo con el donante. (Iii) Almacenamiento
Inmediatamente despues re-suspensión, las plaquetas se colocan en almacenamiento inferior o igual

durante un período de 5 días a partir de la fecha de recogida a 20 ° C-24 ° C. con agitación suave continua de los
concentrados de plaquetas. (Iv) Pruebas:
Las unidades preparadas a partir de diferentes donantes se someterán a ensayo en el final de la almacenamiento
período para - (a) El recuento de plaquetas: (b) pH de no menos de 6 medido a la temperatura de
almacenamiento de la unidad; (do) medición del volumen de plasma actual; (re) uno por ciento del total de las
plaquetas preparadas se les realizarán pruebas de esterilidad; (mi)
las pruebas de viabilidad funcional de las plaquetas se hará por turbulencia movimiento antes de la emisión; (F)
Si Los resultados de las pruebas indican que el producto no cumple el especificado

requisitos, se deben tomar medidas correctivas inmediatas y mantenerse registros. (V) Prueba de
compatibilidad:
Compatible transfusión de el propósito de número variable de los glóbulos rojos,
A, B, AB y O agrupación será hecho si el concentrado de plaquetas se contamina con células rojas de la sangre.
(3) CONCERNTRATES GRANULOCITOS:

(yo) Almacenamiento: se mantuvo a 20 ° C-24 ° C por un período máximo de 24 horas. (Ii) Unidad de los granulocitos no deberá ser
inferior a 1x10' ° cuando se prepara en separador de células. (Iii) prueba específica pruebas / HLA grupo siempre que sea
necesario se llevará a cabo.
406
(4) FRESCO plasma congelado:

Plasma congelado dentro de las 6 horas después de la recogida de sangre y se almacena a una temperatura no más caliente que 30 ° C, se conserva
durante un período de no más de un año.
(5) CRIOPRECIPITADO:
El concentrado de factor anti-hemofílico será preparado por descongelación de el plasma fresco congelado
se almacena a -30 ° C.
(una) almacenamiento:
El crioprecipitado se conserva a una temperatura no superior a -30 ° C y puede ser conservado durante un periodo de no más de un
año desde la fecha de recogida.
(segundo) Actividad :
la actividad del factor antihemofílico en el producto final no deberá ser menos de 80 unidades por bolsa. Uno
por ciento de la crioprecipitado total preparado se someterá a ensayo de los cuales setenta y cinco por ciento de la unidad se ajustará a dicha
especificación.
F. plasmaféresis, plaquetaféresis, LEUCAPHERESIS utilizando un separador de CELL.
Una superficie de 10 metros cuadrados se proporcionará para la aféresis en el banco de sangre. Los bancos de sangre permiten
específicamente para llevar a cabo dicha aféresis en el donante deberá observar los criterios como se especifica en el punto H en relación
con los criterios de donación de sangre en el epígrafe “sangre COMPONENTES DEL BANCO / sangre” de esta parte. El consentimiento por
escrito del donante será tomado, y el donante debe ser explicado,
los peligros de aféresis. El médico deberá certificar que es donante
apto para aféresis y se llevará a cabo por una persona entrenada bajo la supervisión del oficial médico.
(UNA) Plasmaféresis, PLAQUETARIA Féresis Y LEUCAPHERESIS:

Los donantes sometidos a plasmaféresis, plaquetaféresis y leucoféresis deberá, Adicionalmente
con los criterios especificados en el punto H relativos a los criterios de donación de sangre, en el epígrafe “I bancos de sangre /
componentes de la sangre” de esta parte observándose, también se
sometido a la estimación de proteínas en post-pheresis / primera sesión cuyos resultados se tomará como una
referencia para la posterior pheresis / sesión. También será necesario que el plasma total obtenida
de tal donante y la periodicidad de plasmaféresis será conforme a las normas descritas bajo validados procedimientos operativos
estándar.
NOTA: ( yo) Al menos 48 horas deben transcurrir entre aféresis sucesiva y no más de dos veces en una
semana. (Ii) el volumen de sangre Extracoporeal no excederá del 15% del volumen sanguíneo estimado del donante, (iii) trombocitaféresis no
se llevará a cabo en los donantes que han tomado medicamentos que contengan
asprin dentro de los 3 días antes de la donación, (iv) Si

durante o plaquetoaféresis leucapheresis, los glóbulos rojos no pueden ser re-transfunden a continuación, en menos
12 semanas deberán transcurrir antes de que se llevó a cabo un segundo procedimiento citoaféresis.
407
(DO) SEGUIMIENTO DE LA AFÉRESIS:

Antes de empezar procedimiento de aféresis, hemoglobina o hematocrito deberá por hacer. Plaqueta contar.
recuento de leucocitos, recuento diferencial pueden llevarse a cabo. En la plasmaféresis repetida, la proteína de suero
será de 6 gm./100ml.
(RE) COLECCIÓN DE PLASMA:

La cantidad de plasma separado de la sangre de un donante no excederá de 500 ml. por sesión y una vez en una quincena o no
excederá de 1000 ml. por mes,
PARTE XIIC
YO. REQUISITOS PARA LA FABRICACIÓN DE PRODUCTOS sangre

Los productos sanguíneos deberán ser fabricados en un local separado distintos que significaba para el banco de sangre. Los
requisitos que son esenciales para la concesión o renovación de licencia para la fabricación
hemoderivados como la albúmina, proteína de plasma, Fracción Inmunoglobulinas y factores de la coagulación
Concentrados, será el siguiente a saber: -
A REQUISITOS GENERALES:
1. Ubicación y el entorno, los edificios y el suministro de agua:
Los requisitos relativos a la ubicación y los alrededores, los edificios y el suministro de agua contenidas en los párrafos
1.1.1,1.1.2,1.1.3 de la parte I del Anexo M se aplicarán mutatis mutandis a la fabricación de productos de la sangre.
2. Eliminación de residuos y materiales infecciosos:

(yo) El requisito en cuanto a la eliminación de residuos y materiales infecciosos que figura
en el párrafo 1.1.4 de la Parte I del Anexo M se aplicarán mutatis mutandis al
fabricación de productos de la sangre. (Ii) Apropiado
instalación también se proporcionan para los materiales potencialmente infecciosos, en particular el VIH I y VIH II, antígeno de
superficie de Hepatitis B y anticuerpos contra el virus de la hepatitis C a través de tratamiento en autoclave, incineración o cualesquiera otros
métodos validados adecuados.
3. La salud, la ropa y el saneamiento del personal:
(yo) El requisito que figura en el párrafo 3 de la parte I de la Lista M será
en conjunto con. (Ii) El personal que trabaja en las áreas de fabricación deberán ser vacunados contra la hepatitis
virus B y otras enfermedades de transmisión infecciosas.

4. Requisitos para el área de fabricación de productos sanguíneos.
(Yo para la fabricación de productos de la sangre; áreas cerradas separadas diseñados específicamente
para tal efecto debe ser proporcionada. Estas áreas estar provistas de cierres de aire para la entrada y serán
esencialmente libre de polvo y ventilado con un suministro de aire. El suministro de aire para la zona de fabricación se
filtra a través de las bacterias de retención filtros (filtros HEPA) y estará a una presión mayor que en las zonas adyacentes.
Los filtros deben ser revisados para el rendimiento de la instalación y periódicamente a partir de entonces,
y los registros del mismo deberá
ser mantenido. (Ii) Las superficies
interiores (paredes, pisos y techos) deben ser lisas y libres de grietas,
No tendrán verter la materia y deberá permitir fácil limpieza y desinfección. desagües
se excluirán de las zonas asépticas. los recuentos microbianos de rutina de la fabricación
408
Requisitos reglamentarios transfusión de sangre y Seguridad
área se llevará a cabo durante las operaciones de fabricación. Los resultados de estos conteos deberá
cotejarse con bien documentada los estándares internos y mantenerse registros.
Acceso a las áreas de fabricación deberá ser restringido a un número mínimo de
autorizado personal. Especial procedimientos para entrar y dejando de la
Se expondrá visiblemente áreas de fabricación. (Iii) Sumideros serán excluidos de las zonas asépticas. Cualquier fregadero
instalado en otras áreas limpias
deberá ser de material adecuado como inoxidable acero, sin un desbordamiento, y se
alimentado con agua de calidad potable. Se tomarán las precauciones adecuadas para evitar la contaminación
de la drenaje sistema con peligroso efluentes y aerotransportado
difusión de microorganismos patógenos. (Iv) Iluminación,
aire acondicionado, ventilación deberá ser diseñado mantener una satisfactorio
temperatura y humedad relativa para minimizar la contaminación y para tener en cuenta la comodidad de los personales que
trabajan con la ropa de protección, (v) Locales utilizados para
la fabricación de productos de la sangre estará diseñada adecuadamente y
construido para facilitar un buen saneamiento, (vi) Local
deberá ser cuidadosamente mantenido y eso deberá garantizarse ese reparar y
operaciones de mantenimiento no presentan ningún peligro para la calidad de los productos. locales deberán
ser limpiado y donde aplicable, desinfectado conforme detallado por escrito
procedimientos validados, (vii) Adecuado
instalaciones y equipos deberá ser usado para la fabricación de sangre
productos derivados de plasma de la sangre, (viii) Todos
envases de productos de la sangre, a pesar de la fase de fabricación, deberá ser
identificado por firmemente sujeto etiquetas. Cruzar contaminación deberá prevenirse
adopción de las siguientes medidas, a saber: - (a)
procesamiento y llenado deberán estar en áreas segregadas; (segundo)
fabricación de diferentes productos al mismo tiempo deberá ser evitado; (do)
llenado simultáneo de los diferentes productos se evitará; (re)
asegurar transferir, contenedores / materiales por medio de esclusas de aire, extracción de aire, ropa
cambiar y cuidadoso lavado y descontaminación de equipos; (mi)
la protección de contenedores / materiales contra la riesgo de la contaminación causada por re-
circulación de aire sin tratar o por accidental re-entrada de aire extraído; (F)
el uso de contenedores que se esterilizan o son de “carga biológica” documentado baja;
(Ix) zona de presión positiva se dedica al área de procesamiento que se trate; (X) Las unidades de aire de
manipulación se dedican al área de procesamiento que se trate; (Xi) tuberías,
válvulas y de ventilación filtros deberá estar debidamente diseñada para facilitar la limpieza
y sterlisation. válvulas en fraccionamiento / buques que reaccionan deberá ser completamente vapor-
sterlisable. Aire respiraderofiltros deberá ser hidrófobo y deberá validarse para su
uso designado;
5. Zonas auxiliares:
(yo) Descanso y refrigerio habitaciones deben estar separados de otras áreas. (Ii) Instalaciones
para cambiar y guardar la ropa y para el lavado y aseo debe ser fácilmente accesible y adecuada para
el número de usuarios. Los inodoros no serán
conectado directamente con las zonas de producción o de almacenamiento, (iii) Los talleres de mantenimiento deben estar
separadas de las zonas de producción. Dondequiera piezas
409
y las herramientas se guardan en el área de producción, se mantendrán en habitaciones o taquillas

reservado para este uso. (Iv)
casas de los animales deberán estar bien aislados de otras áreas, con entrada independiente.
COLECCIÓN B y el depósito del plasma para fraccionamiento:

Una colección :
(1) Plasma se recoge de los bancos de sangre con licencia a través de un proceso de la cadena de frío
y se almacena en estado congelado no más caliente que -20 ° C. (2) plasma
individual permanecerá en cuarentena hasta eso se prueba para la hepatitis B de superficie
antígeno y virus de la hepatitis C de anticuerpos del VIH I y Se VIH. (3) Una muestra de agrupada-lot plasma de aproximadamente 10-12
unidades de diferentes donantes deberá
ser probado para el antígeno de superficie de la Hepatitis B y anticuerpos contra el virus de la hepatitis C, el VIH I y II VIH y si la muestra se
encontró negativo, sólo entonces se tendrá para fraccionamiento.
B. Área de almacenamiento:
(1) Las áreas de almacenamiento deben ser de espacio y la capacidad suficiente para permitir el almacenamiento ordenado de
las diversas categorías de materiales, productos intermedios, a granel y productos terminados,
productos en cuarentena, puestos en libertad, rechazados, devueltos o productos retirados del mercado. (2) Las áreas de almacenamiento deben
estar diseñados o se adoptan para garantizar buenas condiciones de almacenamiento. En
especial, deberán estar limpias, secas y mantenido dentro de la temperatura requerida para tal almacenamiento y donde se
requieren condiciones especiales de almacenamiento (por ejemplo, temperatura,
humedad), éstos se proporcionan, comprueba y supervisa. (3) Recibir y bahías de despacho deberán proteger los
materiales y productos de la intemperie
y deberá ser diseñado y equipado para permitir que los contenedores de materiales entrantes a ser limpiados, si es necesario, antes de su
almacenamiento. (4) Dónde estado de cuarentena es asegurada por el almacenamiento en áreas separadas, estas zonas estarán
claramente marcada y su acceso restringido sólo el personal to.authorised. (5) Habrá área de muestreo separado para
las materias primas. Si el muestreo se realiza en
el área de almacenamiento, que se llevará a cabo de tal manera a fin de evitar la contaminación o la contaminación cruzada. (6) La
segregación deberá ser proporcionada por
el almacenamiento de los rechazados, se recuerda, o devuelto
materiales o productos. (7) instalación adecuada será suministrada para el suministro de material auxiliar, tal como etanol,
agua, sales y polietilenglicol. Instalaciones separadas se proporcionan para la recuperación de disolventes orgánicos
utilizados en el fraccionamiento.
C. personal;
1. Fabricación:
La fabricación de productos de la sangre se llevará a cabo bajo la dirección activa y
supervisión personal de competente personal técnico, que consta de por lo menos una persona que
deberá ser un empleado a tiempo entero, con un año de experiencia práctica en la fabricación de productos de sangre
fraccionamiento / plasma y posee - (a) Post-grado
la licenciatura En medicina - MD (Microbiología / Patología / Bacteriología /
Inmunología / Bioquímica); o
410
seguridad de las transfusiones de sangre y los requisitos reglamentarios
(segundo) Post-grado en Ciencias (Microbiología); o (c) Poste grado

graduado en Farmacia (Microbiología), a partir de una Universidad reconocida
o Institución.
2. Pruebas:
La cabeza de la unidad de pruebas será independiente del la unidad de fabricación y pruebas
deberá ser llevada a cabo bajo la dirección activa y personal supervision de competente
el personal técnico que consta de por lo menos una persona que deberá ser un empleado a tiempo entero. los
Jefe de la unidad de ensayo debe tener experiencia práctica dieciocho meses en la prueba de drogas, especialmente los
productos sanguíneos y posee -
(una) Postgrado la licenciatura en Farmacia o Science- (Química / Microbiología / Bio-
química); o (b) Poste grado
graduado En medicina -MD (Microbiología / Patología / Bioquímica),
de una universidad reconocida o institución
D. CONTROL DE PRODUCCIÓN:
(1) La zona de producción y la sala de inactivación viral serán aire acondicionado central y
equipado con filtros HEPA que tiene ambiente como se da en la siguiente Tabla Grado C (Clase 10.000). (2) El
relleno y el sellado se llevarán a cabo en condiciones asépticas en aire centralmente
áreas acondicionado equipados con filtros HEPA teniendo grado A o, en su caso, de grado B (100 Class) entorno
dado en dicho cuadro.
MESA
AIRE SISTEMA DE CLASIFICACION DE FABRICACIÓN DE PRODUCTOS estéril. El número máximo de
partículas permitido por m 3
Número máximo de número máximo de

partículas permitido por microorganismo viable
m3 permitida Menos de 5
Perm 3
GRADO 0,5-5 micras
A (Clase 100) 3500 Ninguna Menos de 1
(Estación de trabajo Laminar-flujo de aire)
B (Clase 100) 3500 Ninguna Menos de 5
C (Clase 10.000) 3,50,000 2000 Menos de 100
(3) Las operaciones físicas y químicas que se utilizan para la fabricación de fraccionamiento de plasma
deberá mantener un alto rendimiento de proteína seguro y eficaz. (4) El procedimiento de fraccionamiento utilizado dará un buen
rendimiento de productos que cumplen los in-
requisitos de calidad de la casa según lo aprobado por la Autoridad de Licencias y Central License autoridad de
aprobación reducir el riesgo de contaminación microbiológica y la desnaturalización de proteínas al mínimo. (5) El
procedimiento adoptado no afectará a la actividad de los anticuerpos y la vida media biológica o
características biológicas de los productos.
411
E. proceso de inactivación viral:

los procedimiento utilizado por el titular de la licencia para inactivar los organismos patógenos tales como envuelto y virus no envueltos,
especialmente la infectividad de VIH I y VIH II, los antígenos de superficie de hepatitis B y La hepatitis C anticuerpo del virus de los métodos de
inactivación viral y validación adoptadas por el titular de la licencia, será sometida a la aprobación de la Autoridad de Licencias y Central License
autoridad de aprobación
NOTAS: ( 1) No conservante (excepto estabilizador para evitar la desnaturalización-proteína tal como glicina, sodio
cloruro o caprilato de sodio) deberá ser adicional a la albúmina, plasma Proteína

Fracción, Las inmunoglobulinas intravenosas o factor de coagulación Concentrados sin la
aprobación previa de la autoridad emisora y la autoridad de aprobación de licencia central. (2) El titular de la licencia deberá asegurarse de que
los citados estabilizadores no tienen efecto en la final deleterial
producto de la cantidad presente de modo que no causa ninguna reacción desfavorable o adversa en seres humanos.
F. Control de calidad:
Se proveerán instalaciones separadas para el Control de Calidad tales como hematológica, Bio-química,
Físico-química, Microbiológico, Pirógenos. Instrumental y La seguridad pruebas. La calidad
Departamento de Control tendrá entre otras, las siguientes funciones principales, namely.-
(1) Para preparar instrucciones detalladas, por escrito para la realización de pruebas y análisis. (2) Para aprobar o rechazar las materias primas, componentes,
contenedores, dispositivos de cierre, materiales en proceso,
material de embalaje, etiquetado y los productos terminados. (3) Autorizar o rechazar el lote de productos terminados, listos para
su distribución. (4) Para evaluar la idoneidad de las condiciones bajo las cuales las materias primas, semi-acabado
productos terminados y se almacenan. (5) Para evaluar la calidad y estabilidad de los productos terminados y cuando sea necesario de
las materias primas
materiales y productos semi-acabados. (6) Para revisar los registros de producción para asegurar que no se han producido errores o
si tienen errores
ocurrieron que han sido ampliamente investigadas. (7) Para aprobar o rechazar todos los procedimientos o especificaciones que impactan
sobre la identidad, la fuerza,
la calidad y la pureza del producto (8) Para establecer los requisitos de vida útil de almacenamiento y sobre la base de pruebas de estabilidad
relacionados con
condiciones de almacenaje.
(9) Para establecer y cuando sea necesario revisar, procedimientos de control y especificaciones. (10) Para examinar las
reclamaciones, recuerda, productos e investigaciones llevadas a cabo devueltos o recuperados
en virtud del mismo para cada producto
(11) Para revisar la fórmula maestra Records / Tarjetas periódicamente.
G. REALIZACIÓN DE PRUEBAS DE SANGRE:

Los productos fabricados se ajustarán a las normas especificadas en la Farmacopea India y en el nivel de cualquier producto
No se especifica en la Farmacopea, el estándar para tales
producto deberá ajustarse a la norma especificada en la Farmacopea de Estados Unidos o la Farmacopea Británica. Los productos finales se
someterán a ensayo para la libertad de VIH 1 y los anticuerpos del VIH II, antígeno de superficie de la Hepatitis B y anticuerpos contra el virus de la
hepatitis C.
412
H. Almacenamiento del producto final:
(I) Los productos finales se almacenarán entre 2 ° C - 8 ° C, a menos que se especifique lo contrario por el
Autoridad de aprobación de licencia central. (Iii)
La vida útil asignada a los productos por parte del titular de la licencia será sometido a la
aprobación a
la Autoridad de Licencias y Central License autoridad de aprobación.
I. ETIQUETADO
Los productos fabricados se clasificarán como se especifica en la Farmacopea India, el británico
Farmacopea o los Estados Unidos Farmacopea que sea además de cualquier otra
. requisito establecido en la Parte IX o X Parte de estas reglas Las etiquetas deberán indicar los resultados de las pruebas para el antígeno de la
hepatitis B de superficie y el anticuerpo virus de la hepatitis C, la libertad de anticuerpos VIH I y VIH II.
RECORDS J.:
El titular de la licencia deberá mantener registros de acuerdo con el Anexo U y también cumplir con los registros de fabricación por lotes según se
especifica en el párrafo 9 de la Parte I de la Lista M y cualquier otro requisito que pueda ser dirigida por Autoridad de Licencias y autoridad de
aprobación de licencia central.
K. registros maestros de fórmula:

El licenciatario deberá mantener registros fórmula maestra relativos a todos los procedimientos de fabricación y control de calidad para cada
producto, que se prepararon y aprobados por el personal técnico competente, es decir, la cabeza de la unidad de fabricación. Los registros
Fórmula Master deberán contener: -
(I) la patente o nombre comercial del producto alongwith el nombre genérico, en su caso, la fuerza
y la forma de dosificación;
(Ii) una descripción o identificacion de el final contenedores, materiales de embalaje, y etiquetas
cierres para ser utilizado;
(Iii) la identidad, cantidad y calidad de cada materia prima para ser utilizado independientemente de si
o no que aparece en el producto acabado. El exceso admisible que puede ser incluido en un lote formulado se
indicará;
(Iv) una descripción de todos los buques y equipos y los tamaños utilizados en el proceso; (V) de
fabricación y control instrucciones junto con los parámetros de crítica etapas tales como
mezcla, el secado, mezcla, tamizado y esterilizante la producto;
(Vi) la rendimiento teórico que se espera de la formulación a diferentes las etapas de
fabricar y límites de rendimiento admisibles;
(Vi) instrucciones detalladas sobre precauciones que deben tomarse en la fabricación y almacenamiento de medicamentos
y de productos semi-acabados; y (vii)
los requisitos en proceso de control de calidad pruebas y análisis a llevar a cabo durante
cada escenario de la fabricación incluso la designación de personas o departamentos
responsable de la ejecución de tales pruebas y análisis.
II. REQUISITOS PARA LA FABRICACIÓN DE PRODUCTOS sangre de PRODUCTOS acabada en bruto
Cuando los productos sanguíneos, tales como albúmina, proteína de plasma Fracción, inmunoglobulinas y
Factor de coagulación concentrados se fabrica a través de las actividades de fabricación de relleno
y sellar los productos de la sangre a partir de polvo a granel o solución o ambos, los requisitos que se
aplicará a la fabricación de productos de la sangre de la sangre entera se aplicarán mutatis mutandis a dicha fabricación de productos de
la sangre, a menos que otros requisitos han sido aprobados por la autoridad de aprobación de licencias central.
413
directrices para la aprobación de la sangre y o sus componentes centros de almacenamiento gestionados por Primera
Remisión Unidad, Community Health Center, centro de atención primaria o de cualquier hospital:
Ministerio de Salud y Bienestar Familiar (Deptt. De Salud) la notificación vide No GSR 909 (E) de 20 de diciembre,
2001 centros de almacenamiento de sangre exentas a cargo de la Unidad de Referencia de Primera (FRU),
Community Health Center, Centro de Salud Pública (PHC) o cualquier hospital del ámbito de
la obtención de la licencia para la operación. Esta notificación se ha insertado en la Lista K de Medicamentos y Cosméticos reglas,
1945 bajo 5B NO- serie. El objetivo principal de esta notificación es hacer abundante disponibilidad de toda la sangre humana o sus
componentes a los citados hospitales sin teniendo licencia.
Sin embargo, esta exención es aplicable a aquellos centros que están transfundir sangre y / o sus
componentes de menos de 2000 unidades por año.
Con el fin de garantizar la seguridad y calidad de la sangre y / o de sus componentes para ser almacenados en dichos centros de almacenamiento de sangre,
las siguientes condiciones son aplicables antes de obtener la exención de la
ámbito de toma de una licencia de los respectivos controladores Drugs Estado: - (1)
La primera unidad de referencia, Community Health Center, Centro de Salud y / o cualquier hospital deben ser aprobados por el
Territorio Estado / Unión Licensing Authority después de satisfacer las condiciones y facilidades a través de la inspección. (2)
El consumo cautivo de IP sangre humana o sus componentes en la primera unidad de referencia, Community Health
Center, Centro de Salud y / o cualquier hospital no deberá contener más de 2000 unidades al año. (3) La sangre humana
entera y / o sus componentes deberán ser adquiridos solamente de Gobierno
Los bancos de sangre y / o indio Cruz Roja de Banco de Sangre y / o Centros Regionales de Transfusión de sangre debidamente
licenciados. (4) La aprobación será válida por un período de dos años a partir de la fecha de emisión a menos que sea
suspendido o cancelado y la primera unidad de referencia, Community Health Center, Centro de Salud o el hospital deberán
solicitar la renovación de la Autoridad de Licencias Estado tres meses antes de la fecha de expiración de la autorización. (5) La Unidad
de Referencia En primer lugar, Community Health Center, centro de atención primaria y / o cualquier
Hospital deberá tener el siguiente personal técnico para el almacenamiento de la sangre o de sus componentes: - (a) Un oficial médico entrenado
para la adquisición, almacenamiento y pruebas cruzadas de sangre y
/ O sus componentes. Él / ella también será responsable de la identificación de hemolizado de sangre y garantizar la no provisión de la fecha de
vencimiento de la sangre o de sus componentes. (segundo) Un técnico de banco de sangre con la calificación y experiencia, como se especifica en la
Parte B del XII
Lista F o un técnico de laboratorio experimentado entrenado en determinación del grupo sanguíneo y pruebas cruzadas.
(2) La primera unidad de Referencia. Community Health Center, Centro de Salud y el Hospital tendrán una superficie de 10 m². Metros.
Eso será así iluminado, limpio y preferiblemente aire.
acondicionado. refrigerador para bancos de sangre de capacidad apropiada equipado con dispositivo de alarma y
Indicador de la temperatura con un seguimiento regular la temperatura se proporciona para almacenar la sangre
414
Transfusión de sangre segura y los requisitos reglamentarios
unidades entre 2 ° C a 8 ° C y si Se proponen para ser almacenados los componentes, especificado

También se proporcionarán equipos especificados en la parte XII B de la Lista F. (3) La primera unidad de Referencia, Community Health
Center, centro de atención primaria y el hospital deberá mantener
archivos y registros incluyendo detalles de adquisiciones de entera humana
componentes IP sangre y / o de la sangre, como se requiere bajo la Parte XII B de la Lista F. (4) La primera unidad de referencia, Community
Health Center, Centro de Salud y el Hospital deberán almacenar muestras de donantes de sangre, así como sueros de pacientes por un período de
siete días después de la transfusión “.
requisitos para eximir a la primera unidad de remisión, Community Health Center, Primaria
Centro de salud o cualquier hospital como centro de almacenamiento de la sangre y sus componentes, o:
1. El solicitante tendrá como primera unidad de referencia, Community Health Center, Centro de Salud o cualquier hospital.
2. El aplicante deberá proporcionar una empresa a la Autoridad para licenciar ese el cautivo
consumo de sangre humana entera o componentes no será más de 2000 unidades anualmente.
3. El solicitante lista de equipos necesarios para el almacenamiento a saber refrigerador de banco de sangre con el sistema de alarma y
temperatura encerrar indicador. Una separacion lista de equipos para la sangre
componentes serían encerrados si propuesto para ser almacenados.
4. El solicitante deberá presentar la siguiente:
un nombre del médico responsable de la realización de la operación del centro de almacenamiento de sangre. b Arrested copias
certificadas de MBBS o MD cualificación c
Nombre, copias certificadas de calificación y experiencia del técnico banco de sangre.
d Nombre. copias certificadas y acreditados de cualificación y experiencia de los técnicos de bancos de sangre,
no tener calificación DMT.
5. El aplicante deberá proporcionar la fuente de adquisición de Sangre Total / Sangre humana
Componentes a saber, el nombre y la dirección de los bancos de sangre.
a. La fuente de obtención de sangre / componentes será de bancos de sangre con licencia a cargo de Gobierno. Hospitales / única Sociedad de la Cruz
Roja de la India / Centros Regionales de Transfusión Sanguínea. b Una carta de consentimiento de los bancos de sangre anteriores que tengan la
intención de suministrar sangre entera humana /
Los componentes sanguíneos a los centros de almacenamiento de sangre serán suministrados junto con la solicitud. do
El solicitante deberá presentar el plano de los locales. Una superficie mínima de 10 sq. Metros es
esencial para el Centro de Almacenamiento de sangre. re
Con el fin de satisfacer las condiciones y facilidades, una inspección de la propuesta de centro de almacenamiento de sangre puede ser llevada a cabo por el
respectivo Departamento de Control Estatal de Medicamentos. mi
El equipo de inspección también inspeccionará los bancos de sangre que hayan dado su consentimiento cartas para
seguramente de Whole Human Blood / Componentes. los grupo de inspección podrá verificar si la
Bancos de sangre tienen una cantidad suficiente de unidades de sangre para ser suministrado a los centros de almacenamiento de la sangre y también verificar el modo
de transporte o contenedores utilizados para el suministro de unidades de sangre /
415
componentes para asegurar ese el correcto almacenamientocondiciones se mantiene como por la

farmacopea. El Banco de Sangre deberá etiqueta la sangre unidades / componentes según las Drugs &
Cosméticos Reglas de 1945.
9. Los bancos de sangre que tengan la intención de suministrar las unidades de sangre / componentes deberán probar las siguientes pruebas obligatorias antes de suministrar a
los centros de almacenamiento de sangre., Una agrupación B de sangre
La determinación de anticuerpos
contenidos c hemoglobina D HIV
I & II anticuerpos e
Antígeno de superfície para la hepatitis B
F anticuerpo de la hepatitis C
sol parásito de la malaria
h sífilis orVDRL
La etiqueta de la unidad de sangre probado contendrá los elementos anteriores con fecha de pruebas
antes de suministrar a los centros de almacenamiento de sangre.
El Banco de Sangre deberá mantener un registro separado para el suministro de unidades de sangre / componentes a centros de almacenamiento de sangre con todos
los detalles necesarios.
10. La validez de la aprobación se concederá por un período de 2 años a partir de la fecha de concesión de la homologación.
11. La Autoridad de Licencias del Estado remitirá los centros de almacenamiento de sangre aprobados a la
preocupados Oficial Zonal de inmediato.
12. Un formato de la proforma de aprobación está encerrado. (Apéndice VII).
416
APÉNDICE I
“Form27-C (Ver la
regla 122-F)
Solicitud de concesión / renovación * de licencia para el funcionamiento de un banco de sangre para el procesamiento de sangre total y / o *
preparación de componentes de la sangre,
1. Yo / Nosotros __________________________ de M / s ______________________________ la presente solicito la concesión de la licencia / renovación
de number______________________________________dated_________________ licencia para operar un banco de sangre,
para el procesamiento de sangre total y / o * para la preparación de sus
componentes en el at______________________________________ locales situados
2. Nombre (s) del artículo (s):

1.
2.
3.
3. El nombre (s), calificación y experiencia del personal técnico componente son las siguientes:
(una) Nombre (s) del oficial médico. (segundo) Nombre (s) del
Supervisor Técnico. (do) Nombre (s) de la enfermera registrada.
(re) Nombre (s) del Banco de Sangre del técnico.
4. Los locales y la planta son Listo para inspección ser Listo para inspección
_________________________________
5. Una tasa de licencia de rupias _____________________________________ y una tasa de inspección de rupias

________________________has han acreditado al Gobierno en virtud el Jefe de Cuenta
_______________ (recibo adjunto).
Firma____________________________
Anticuado______________________ Nombre y Designation________________________
* eliminar, lo que no proceda.
Nota 1. La solicitud deberá ir acompañada de un plan de los locales, Lista de maquinaria y

equipo para la recogida, el procesamiento, almacenamiento y ensayo de sangre total y sus componentes,
memorando de asociación / constitución de la empresa, copias de certificados relacionados con la titulación académica y experiencia
de la competencia personal técnico y los documentos relacionados con la propiedad
o arrendamiento de los locales.
Nota 2. Una copia de la solicitud junto con los recintos correspondientes también se enviará a la autoridad de aprobación de licencia
central y al interesado zonales / Oficiales Sub-zonales de la Organización de Control de Drogas central estándar.”;
417
ANEXO II
“Forma 27-E (Ver la
regla 122-F)
Solicitud para concesión / renovación de * licencia para la fabricación de productos de la sangre para venta
o distribución 1. Yo / Nosotros ___________________________ de M / s __________________________ la presente solicito
para la conceder de
/ renovación de licencias de dated___________________________ licencia number_______________________ para la fabricación de productos
de la sangre en el local situado at________________________
1.
2.
3.
4.
3. El nombre (s), calificación y experiencia del personal técnico competente, conforme a: (a) responsable de
(B) el responsable de
fabricación pruebas
1. 1.
2. 2.
3. 3.
4. Los locales y las plantas son preparado para inspección / será ser preparado para inspección
en________________________________
15. Una tasa de licencia de rupias. ___________________________ y una tasa de inspección de rupias
____________________has ha acreditado al Gobierno en virtud el Jefe de Cuenta
_________________ (recibo adjunto).
Firma_____________________
Anticuado____________________ Nombre y Designation___________________
* eliminar, lo que no proceda.
NOTA 1. La solicitud deberá ir acompañada de un plan de los locales, Lista de maquinaria y

equipo para la fabricación de productos de la sangre, memorando de asociación / constitución de la
firme, copias del certificado relativo a la titulación académica y experiencia de la competencia
personal técnico y los documentos relativos a la propiedad o tenencia de dichas instalaciones.
N0TE.2. Una copia de la solicitud junto con los recintos correspondientes también se enviará a la autoridad de aprobación de licencia
central y al interesado Zonal / Oficiales Sub Zonal de la
Central de Drogas de la Organización de control estándar.”;
418
Seguridad de las transfusiones de sangre y los requisitos reglamentarios APÉNDICE III
“Form28-C (Ver la regla
122-G)
Licencia para operar un banco de sangre para la recolección, almacenamiento y procesamiento de toda humana
sangre y / o sus componentes * para la venta o distribución
1. Número de la fecha de licence___________________ issue_____________________________ en los locales situados
at________________________________
2. m / s __________________________________ es por este medio con licencia para recoger, almacenar, proceso
y distribuir la sangre entera y / o sus componentes.
1.
2.
3.
4. Nombre (s) del personal técnico competente: (a)
responsable de (B) el responsable de
Pruebas fabricación
1. 1.
2. 2.
3. 3.
5. La licencia autoriza licencia para fabricar, almacenar, vender o distribuir los productos de la sangre, con sujeción a las condiciones
aplicables a esta licencia.
6. La licencia deberá estar en vigor from______________________to______________________
7. La licencia estará sujeta a las condiciones indicadas a continuación y en las demás condiciones que se especifique de vez
en cuando en las Reglas hechas bajo la Ley de Medicamentos y Cosméticos de 1940.
5.
Firma______________________
Anticuado____________________ Nombre y Designation_________________ Licencias

Licencia Authority___________________ central
* eliminar, lo que no proceda
CONDICIONES DE LICENCIA
1. El titular ni recoger la sangre de un donante profesional ni de donantes pagados ni podrá preparar componentes de la sangre
de la sangre extraída de un donante tales.
2. Esta licencia y cualquier certificado de renovación en vigor se muestra en el aprobado
locales y el original deberán presentarse en la solicitud de un inspector designado
bajo la Ley de Medicamentos y Cosméticos de 1940.
3. Cualquier cambio en el personal técnico será comunicada inmediatamente a la Dirección de Licencias y / o autoridad de aprobación
de licencia central.
4. El titular deberá informar a la Dirección de Licencias y / o Licencia central Aprobar
419
Autoridad por escrito en caso de cualquier cambio en la constitución de la empresa operadora;

debajo la licencia. Donde cualquier cambio en la constitución de la firma lleva a cabo, la
corriente se considerará licencia de ser válida para el período máximo de tres meses desde
la fecha en que ha tenido lugar el cambio a menos que, mientras tanto, tiene una licencia fresca
estado tomado de la Dirección de Licencias y / o Licencia central autoridad de aprobación en
el nombre de la empresa con la constitución cambiada “.
ANEXO IV
“Forma 28-E (Ver la
regla 122-G)
Licencia para fabricar y almacenar sangre productos para la venta o distribución
1. Número de licence________________________date de emisión ______________________at los locales situados en

_______________________________________
2. M / s _________________________________________ Queda licencia para fabricar, almacenar,
vender o distribuir los siguientes productos de la sangre: -
1. 2.
3. 4.
5.
4. Nombre (s) del personal técnico competente: (a)

responsable de las pruebas (B responsable de la fabricación
1. 1.
2. 2.
3. 3.
5. La licencia autoriza licencia para fabricar, almacenar, vender o distribuir los productos de la sangre, con sujeción a las condiciones
aplicables a esta licencia.
6. La licencia deberá estar en vigor from__________________to____________________.
7. La licencia estará sujeta a las condiciones indicadas a continuación y en las demás condiciones que se especifique de vez
en cuando en las Reglas hechas bajo la Ley de Medicamentos y Cosméticos de 1940.
Firma_____________________
Anticuado_______________________ Nombre y Designation__________________ Licencias
Licencia Authority____________________ central
420
CONDICIONES DE LICENCIA
1. El licenciatario no podrá fabricar productos de sangre de un donante profesional o de donantes pagados.
2. Esta licencia y cualquier certificado de renovación en vigor se muestran en los locales autorizados y el original será
expedida a petición de un inspector designado en virtud de la Ley de Medicamentos y Cosméticos de 1940.
3. Cualquier cambio en el personal técnico será comunicada inmediatamente a la Dirección de Licencias

y / o autoridad de aprobación de licencia central.
4. El titular deberá informar a la Dirección de Licencias y / o autoridad de aprobación de licencia central por escrito
en caso de cualquier cambio en la constitución de la empresa que opera bajo la licencia. Donde cualquier cambio
en la constitución de la empresa se lleva a cabo, la licencia actual se considerará válida por el plazo máximo de
tres meses desde la fecha en que ha tomado el cambio de lugar a menos que, en el ínterin, una licencia fresca se
ha tomado de la Dirección de Licencias y / o autoridad de aprobación de licencia central en el nombre de la firma
con la constitución cambiada.
APÉNDICE V
“Form26-G (Ver la regla
122-F)
Certificado de renovación de licencia para operar un banco de sangre para el procesamiento de toda humana
sangre y / o * para la preparación para la venta o distribución de sus componentes
1. certificado que number_________________________ licencia concedida a on____________________________ M / s para

______________________________________ la operación de un banco de sangre para
procesamiento de sangre entera y / o para la preparación de sus componentes en las premisas
at_____________________________is situados presente renovados con to____________________ efecto from____________________.
2. Nombre (s) de artículos:

1.
2.
3.
3. Nombre (s) del personal técnico competente:
1. 2.
3. 4.
5. 6.
Firma______________________
Anticuado___________________ Nombre y Designation_________________ Licencias
Licencia Authority___________________ central
421
ANEXO VI
“Forma 26-1 (Ver regla
122-1)
Certificado de renovación de la licencia para la fabricación de productos de sangre
1. Certificado de que el número de licencia ___________________________granted en _________________________ a M / s

__________________________________ para la fabricación de productos de la sangre en el la
locales situados at_________________________________ se renueva a partir del ___________________to_______________.

1.
2.
3.
3. Nombres de personal técnico competente:
(A) responsable de las pruebas (B) responsable de la fabricación

1. 1.
2. 2.
3. 3.
4. 4.
Firma____________________________
Nombre y Designation_________________
Autoridad para licenciar
Autoridad de aprobación de licencias central
Anticuado:
422
ANEXO VII
Certificado de aprobación al centro de almacenamiento para el almacenamiento de la sangre humana entera y * / o

sus componentes
No. ____________________ Fecha de emisión_________________________
M / s _____________________________________________ Queda aprobado para almacenar los siguientes elementos en los locales
situados en __________________________________________ bajo la supervisión del personal técnico siguiente:
1. Nombres de oficial médico theapproved :

2. Nombres de los elementos :
3. Nombre del Banco cualificado técnico de Sangre :
4. Nombre y dirección de la Sangre con licencia :
Banco de quien wouldbe adquiridos unidades theblood.
5. Theapproval será de inForce a

Signature___________________________________ Nombre y
Designation________________________ Licencias
Authority___________________________
Fecha
* Eliminar lo que no proceda.
CONDICIONES
El centro de almacenamiento de sangre deberá cumplir con las condiciones según se estipula en 5B del elemento
Anexo K de las Normas de medicamentos y cosméticos que también incluye como en: -
1. La concepción cautiva de sangre humana entera o sus componentes en el dicho centro por encima
no deberá contener más de 2000 unidades al año.
2. En el caso de cualquier cambio en el personal técnico se pondrán inmediatamente a la autoridad otorgante.
3. En el caso de anychange en el nombre del banco de sangre con licencia de los cuales se obtienen las unidades de sangre, la misma se
dio a entender a thelicensing autoridad para su aprobación.
4. El centro deberá solicitar la renovación de la aprobación de la autoridad de concesión de licencias de tres meses
antes de la fecha de expiración de la autorización.
5. El centro deberá mantener registros y los registros, incluyendo los detials de adquisición de la sangre * /
sus componentes
6. El centro deberá almacenar muestras de donantes, así como patients'sera por un período de 7 días después de
transfusión.
423
1. medicina transfusional Manual técnico
GLOSARIO
Absorción: La eliminación de un anticuerpo deseado a partir de un suero; a menudo se usa de manera intercambiable con la absorción.
antígeno adquirida: Antígeno no determinado genéticamente y, a veces transitoria.
Adsorción: Proporcionar un anticuerpo con su antígeno correspondiente en condiciones óptimas para que el anticuerpo se unirá al antígeno, eliminando de
este modo el anticuerpo a partir del suero; a menudo se usa de manera intercambiable con la absorción.
aglutinina (normal o típico): Un aglutinina que es regularmente presente en el suero de un individuo que carece de antígeno correspondiente sobre las células
rojas.
aglutinina { atípico): Un aglutinina irregular presente en el suero de un individuo que carece correspondiente antígeno anti-Ig D presente en Rh
(D) negativo persona.
aglutinina (frío): Un anticuerpo que reacciona a temperatura fría, cuya potencia disminuye con el aumento de la temperatura y a 35 ° C es muy semanas o
ausente.
aglutinina (Automático): Un aglutinina que reacciona con las células rojas de la persona en cuyo suero se encuentra; reacciona con las células rojas de la mayoría
del otro individuo también.
alelo: Una de dos o más genes diferentes que pueden ocupar un locus específico en un cromosoma.
Amorph: Un gen que no aparece para producir un antígeno detectable; un gen silencioso, tales como JK, Lu, O.
respuesta anamnésica: Una respuesta de anticuerpos acentuado tras una exposición secundaria a un antígeno. Los niveles de anticuerpos a partir de la exposición
inicial no son detectables en el suero del paciente hasta que las exposiciones secundarias, cuando se observa un rápido aumento de litros de anticuerpos.
Prenatal: Presente antes del nacimiento.

Y lectina-A: Un reactivo anti A, suero producido a partir de las semillas de las biflours Dolichos vegetales; reacciona con
A. células, pero no con una células de subgrupos, tales como A 2, UNA 3, y así; reacciona débilmente con A En t Células.
Anti-B de la lectina: Un suero anti-B reactivo producido a partir de las semillas de la planta Bandeiraea simplicifolia.
determinante antigénico (epítopo): El sitio particular en una molécula de antígeno que se combina con el anticuerpo correspondiente.
prueba de la globulina anti-humana o prueba de antiglobulina ( AGT): Prueba para determinar la presencia o ausencia de recubrimiento de glóbulos rojos por la
inmunoglobulina G (IgG) o complemento, o ambos; prueba de la globulina anti-humana directa (DAT): Se utiliza para detectar en la sensibilización de células vivo. Indirecto
prueba globulina antihumana (IAT): Se utiliza para detectar antígeno - anticuerpo reacciones que se producen in vitro.
suero antihumano: Un anticuerpo preparado en conejos u otros animales adecuados que se dirige contra la inmunoglobulina humana o del complemento,
o ambos; utilizado para realizar la globulina anti-humana o la prueba de Coombs. El suero puede ser poliespecífico (anti - IgG más anti - complemento) o
monoespecíficos (anti IgG o anti - complemento).
anti - M lectina: Un reactivo de suero anti - M producido a partir de la planta Iberis amara.
Anti - N lectina: Un reactivo anti - suero N producido a partir de la planta Vicia graminea.
aféresis: Un método de recogida de sangre en el que se retira la sangre entera, un componente deseado separó y se conservó, y el
resto de la sangre devuelta al donante. Ver también Plaquetoféresis y plasmaféresis.
aplasia: El fallo de un órgano o tejido se desarrolle normalmente.
Arachis hypogoea: Una lectina de cacahuete utiliza para diferenciar polyagglutination T de Tn polyagglutination.
Autoabsorption: Un procedimiento para eliminar el anticuerpo de un paciente usando las propias células del paciente.
Control autólogo: Prueba de suero del paciente con sus propias células, en un esfuerzo para detectar la actividad de autoanticuerpos
bilirrubina: El pigmento de color amarillo anaranjado en la bilis llevado al hígado por la sangre; producida a partir de la hemoglobina de las células rojas de la sangre por
las células reticuloendoteliales de la médula ósea, el bazo y en otros lugares. biliubin directa: La forma soluble en agua conjugado de bilirrubina. bilirrubina indirecta: La
forma insoluble en agua no conjugada de la bilirrubina.
sustancias específicas de grupo de sangre: Los antígenos solubles presentes en los fluidos que se pueden utilizar para neutralizar sus correspondientes anticuerpos:
sistemas que demuestran sustancias de grupos sanguíneos specifiic incluyen ABO, Lewis, y sistemas de grupos sanguíneos P.
424
Glosario
Filtros de sangre: (1) filtros de sangre estándar (primera generación) - tener filtros de pantalla con un tamaño de poro de 170 - 200 micras. Estos filtros se utilizan
para la sangre / componente transfusión y tienen capacidad para filtrar grandes derbis, como la fibrina y la formación de coágulos. ( 2) los filtros de microagregados
(segunda generación) - filtros de pantalla o de tipo de profundidad que eliminan agregados más pequeños de 170 micras. filtros de pantalla de microagregados tienen
tamaño de poro de 20 - 40 micras y eliminan eficazmente 70 - 90 por ciento de los leucocitos. ( 3) filtros de reducción de leucocitos (tercera generación) - adhesión
que eliminan eficazmente 99,0 a 99,9 por ciento de los leucocitos.
Bombay: Fenotipo ocurre en individuos que poseen genes normales A o B, pero que son incapaces de expresar ellos debido a que carecen del gen necesario
para la producción de antígeno H, el precursor requerido para A y B. Estas personas a menudo tienen una potente -H contra en su suero, que reacciona con
todas las células, excepto Bombays otros. También conocido
bromelina: Una enzima proteolítica obtenida de la piña.

Capa leucocitaria: estrato Luz de una sangre visto cuando la sangre se centrifuga o se deja reposar en un tubo de ensayo. El rojo células de la sangre se depositan en
la parte inferior, y entre el plasma y los glóbulos rojos es una capa de color claro que contiene células de la sangre en su mayoría blancos y plaquetas.
Quimera: Genetic Chimera: (1) Una persona que posee una población celular mixto derivado genéticamente de la. vínculos cigóticos distintas, por ejemplo, la
anastomosis vascular entre los gemelos durante la vida embrionaria. (2) quimerismo Dispermic: fertilización de un huevo con dos espermatozoides también
puede causar quimera.
Quimera artificial: La transfusión de sangre, trasplante de médula ósea, y de purga fetal / materna pueden resultar en quimera artificial.
Difosfato de cloroquina: Sustancia que se disocia de anticuerpos IgG a partir de células rojas con poco o ningún daño a la membrana de glóbulos rojos.
Cromosoma: Las estructuras dentro de un núcleo que contienen un hilo lineal de ADN, que transmite la información genética. Los genes se disponen
a lo largo de la hebra de DAN y constituyen porciones del ADN.
unidad comprometido a la eritropoyesis (CFU-E) formadoras de colonias: Una célula progenitora que se ha comprometido a la formación de células de la serie de glóbulos
rojos.
Formación de colonias-cultivo (CFU-C); Generación de células madre usando métodos de cultivo de tejidos. sinonimo actual es CFU-GM. que es una
colonia - unidad de formación comprometido a la producción de células mieloides (granulocitos y monocitos).
células del cordón: Las células fetales obtenidas del cordón umbilical al nacer; pueden estar contaminados con gelatina de Wharton. La cumarina (Coumadin): Un
anticoagulante comúnmente empleado que actúa como un antagonista de la vitamina K que prolonga el tiempo de protrombina.
crioprecipitado: Una fuente concentrada de factor de coagulación VIII preparado a partir de una sola unidad de sangre del donante; también contiene fibrinógeno,
factor XIII, y el factor de von Willebrand.
criopreservación: Conservación por congelación a temperaturas muy bajas.
Cytopheresis: Un procedimiento realizado usando una máquina mediante la cual se puede eliminar selectivamente una rype célula particular que se encuentra normalmente en la
sangre periférica de un paciente o donante.
23 -Diphosphoglycerate (2,3-DPG): Un fosfato orgánico en las células rojas de la sangre que altera la afinidad de la hemoglobina por el oxígeno. Las células sanguíneas
almacenadas en un banco de sangre pierden 2,9-DPG. Pero una vez infundido, la sustancia se vuelve a sintetizar o reactivado.
La coagulación intravascular diseminada (DIC); condición clínica del alterado coagulación de la sangre secundaria a una variedad de enfermedades.
Ditiotreitol (DTT): Un compuesto de sulfhidrilo utiliza para interrumpir los enlaces disulfuro de la inmunoglobulina IgM, produciendo unidades monoméricas
en lugar de la molécula pentamérica típico.
Dominante: Un rasgo o característica que se expresa en la descendencia a pesar de que sólo se realiza en uno de los cromosomas
homólogos.
electroforesis: El movimiento de partículas cargadas a través de un medio (papel, gel de agar) en presencia de un campo eléctrico: útiles en la
separación y análisis de las proteínas.
elución: Un proceso por el cual las células que están recubiertas con anticuerpo son tratados de una manera tal como para romper los enlaces entre el antígeno y el
anticuerpo. El anticuerpo liberado se recoge en un diluyente inerte tal como solución salina o 6
425
por ciento de albúmina. Este suero de anticuerpos puede ensayarse para identificar su especificidad utilizando métodos de rutina. El mecanismo para liberar
el anticuerpo puede ser física (calefacción, agitación) o químicos (éter, ácido), y el anticuerpo cosechado que contiene fluido se llama un eluato.
El tratamiento enzimático: Un procedimiento en el cual los glóbulos rojos se incuban con una solución de enzima que escinde algunas de las glicoproteínas de la
membrana, después se lavó libre de la enzima, y se utiliza en las pruebas serológicas. Enzyme escinde de tratamiento de algunos antígenos y expone otro.
epítopo: La porción de la molécula de antígeno que está implicado directamente en la interacción con el anticuerpo; el determinante antigénico.
eritroblastos: Cualquier forma de corpúsculos rojos nucleados, que contiene hemoglobina, que normalmente no se ven en la sangre circulante.
ácido etilendiaminotetraacético (EDTA): Un anticoagulante útil en las pruebas hematológicas y cuando preferible pruebas de globulina
anti-humana directa se indica.
reacción febril: Una reacción a la transfusión causada por leukoagglutinins que se caracteriza por fiebre; por lo general se observa en multiplican
transfundida de pacientes multíparas.
fibrinógeno: Una proteína producida en el hígado que circula en plasma. En presencia de trombina, una enzima producida por la activación del
mecanismo de coagulación, el fibrinógeno se escinde en fibrina, que es una proteína insoluble que es responsable de la formación de coágulos.
fibrinolisina: La sustancia que tiene la capacidad de disolver la fibrina; también llamada plasmina.
El plasma fresco congelado (FFP): Un producto congelado plasma (de un único donante) que contiene todos los factores de la coagulación, especialmente el
factores lábil V y VIII; útiles para deficiencias de factores de coagulación distintos de la hemofilia A, von
* S Willebrand enfermedades, y hipofibrinogenemia.
G6PD (glucosa -6-fosfato deshidrogenasa): Una enzima del hígado utiliza para controlar la función hepática.
prueba de gel: Un método de prueba serología de grupos sanguíneos que utiliza un gel de microtubo que contiene (la incorporación de antisueros o sueros de antiglobulina) que
actúa como un recipiente de reacción para la aglutinación.
Gene: Una unidad de herencia dentro de un cromosoma.
Genotipo: la composición genética de un individuo real.
El síndrome de Goodpasture: Una entidad de enfermedad que representa una glomerulonefritis rápidamente progresiva asociada con lesiones pulmonares. Por
lo general, los pacientes poseen un anticuerpo a la membrana basal de los glomérulos renales.
Injerto - contra -host (ICH) de la enfermedad: Un trastorno resultante de injerto de tejido de un donante en un huésped comprometida inmuno ..
hemolisina: Un anticuerpo que activa el complemento conduce a la lisis de células.

hemólisis: La alteración de la membrana de glóbulos rojos y la posterior liberación de hemoglobina en el medio o plasma de suspensión.
enfermedad hemolítica del recién nacido (HDN): Una enfermedad caracterizada por anemia, ictericia, agrandamiento del hígado y el bazo, y edema
generalizado (hidropesía fetal) que es causada por anticuerpos IgG maternas que cruzan la placenta y atacar a las células rojas fetales cuando hay una
incompatibilidad de grupo sanguíneo fetomatenal (por lo general ABO o Rh anticuerpos). Sinónimo es eritroblastosis fetal.
reacción a la transfusión hemolítica (HTR): Una reacción de la destrucción de glóbulos rojos causada por el anticuerpo del paciente (es) dirigida a antígeno (s) de glóbulos rojos
del donante.
La hemofilia A: Un trastorno hereditario caracterizado por el tiempo de coagulación en gran medida prolongada. La sangre no coagula y se produce una hemorragia; causado
por la herencia de una deficiencia del factor VIII, que se produce casi exclusivamente en varones.
La hemofilia B: “Enfermedad de Navidad”, que es la hemofilia como una enfermedad causada por una deficiencia del factor IX.
Hepatitis B Inmunoglobulina (HBIg): Un suero inmune dado a los individuos expuestos al virus de la hepatitis B.
heterocigóticos: La posesión de los diferentes alelos en un locus dado.
HLA: Antígeno leucocitario humano.
homocigoto: Un individuo en desarrollo de gametos con alelos similares y poseer así como pares de genes para una característica hereditaria
dado.
hibridoma: Un híbrido (cruz) entre una célula de plasmacitoma y un bazo (o anticuerpo - producción) célula que produce un anticuerpo monoclonal, lo que
resulta en un tailandés línea celular maligno puede crecer indefinidamente en cultivo y puede
426
Glosario
producir grandes cantidades de anticuerpos. Este anticuerpo es monoclonal porque sólo una célula productora de anticuerpos se combina con la célula de
plasmocitoma está presente.
almidón de hidroxietilo (HES): Un agente de sedimentación de glóbulos rojos utiliza para facilitar la retirada de los leucocitos durante sukapheresis.
hipogammaglobulinemia: Disminución niveles de gammaglobulinas visto en algunos estados de la enfermedad.

hipovolemia: volumen de sangre disminuido.
hipoxia: La deficiencia de oxígeno.
Ictericia: Una condición caracterizada por piel amarillenta, blanco de los ojos, membranas mucosas y fluidos corporales causada por aumento de la
bilirrubina circulante resultante de hemólisis excesiva o de daños en el hígado debido a la hepatitis. <W> es la ictericia.
idiopática: Relativas a las condiciones sin patogénesis clara, o la enfermedad sin causa reconocible, un origen contaneous.
La púrpura trombocitopénica idiopática (ITP): Sangrado debido a una disminución del número de plaquetas; la etiología es desconocida, con la mayoría de pruebas
que apuntan a plaquetas auto-anticuerpos.
Respuesta inmune: Las reacciones del cuerpo a sustancias que son extraños o se interpretan como extrañas. inmunidad-Fell mediada o celular se refiere a
la destrucción de tejidos mediada por células T, tales como rechazo del injerto y reacciones persensitivity. La inmunidad humoral se refiere a la respuesta de
la destrucción de células durante el período temprano de la acción.
Immunodediciency: Una disminución de la concentración normal de inmunoglobulinas en suero.

Incubación: En combinación vitro de antígeno y anticuerpo en ciertas condiciones de tiempo y temperatura para permitir complejos antígeno - anticuerpo
que se produzca.
Rernicterus: Una forma de ictericia neonatourm que ocurre en bebés, desarrollando en 2 a 8 días de vida; mal pronóstico sin tratamiento.
Leucemia: proliferación maligna de leucocitos, que se derrame en la sangre, produciendo un leuckocyte elevada <w>.
Leukoagglutinins: Los anticuerpos para ceils blancas de la sangre.

Solución de bajo fuerza iónica (LISS): Un tipo de potenciar medio en uso para las pruebas serológicas. La reducción de la fuerza de la célula roja medio
de suspensión aumenta la afinidad del antígeno para su anticuerpo correspondiente, tal que la sensibilidad puede ser aumentada y tiempo de incubación
disminuyó.
linfocitos: Un tipo de glóbulo blanco que participan en la respuesta inmune. Los linfocitos son normalmente total de 20 a
-■ por ciento de las células blancas totales. linfocitos T maduran durante el paso por el timo o después de la interacción con: hormonas nic; estas células
funcionan tanto en la inmunidad celular y humoral. Subconjunto incluye células T helper (Th),: mejorar ch la producción de anticuerpos de células B y
células T supresoras (Ts), que inhiben la producción de anticuerpos de células B. células de linfocitos no se procesan por el timo. A través morfológica y la
diferenciación funcional, que futuro en células plasmáticas que segregan inmunoglobulina.
macrófagos: el desarrollo en fase terminal para el monocitos de sangre; estas células pueden ingerir (phagocytose) una variedad de sustancias para la digestión o
almacenamiento posterior y se encuentran en un número de sitios en el cuerpo (por ejemplo, bazo, hígado,
- ~ G) células móviles libres existente o como células fijadas. Las funciones incluyen la eliminación de células sanguíneas senescentes y anticipación en la respuesta
inmune.
Mercaptoetanol (2-ME): Un compuesto de sulfhidrilo utiliza para interrumpir los enlaces disulfuro de la inmunoglobulina
- 'I. produciendo unidades monomric en lugar de las unidades pentaméricas típicas.
campo mixto: Un tipo de patrón de aglutinación en el que existen numerosos pequeños grupos de células en medio de un mar de libre
monoclonal: Anticuerpo derivado de un solo la producción de anticuerpo-células parentales ancestrales.
El mieloma múltiple: A proliferación neoplásica de células plasmáticas, que se caracteriza por una muy alta inmunoglobulina
- - els de origen monoclonal.
Muraminidase: Una enzima que escinde el ácido siálico de la membrana de glóbulos rojos.
Muturalization: La inactivación de un anticuerpo por reaccionar ins con un (sustancia de grupo sanguíneo) antígeno contra el que se
-; al.
427
neutrófilos: Un leucocito que ingiere bacterias y partículas pequeñas y desempeña un papel en la lucha contra la infección.
oliguria: cantidad disminuida de formación de orina.
Panagglutinin: Un anticuerpo capaz de aglutinar todas las células rojas de la sangre ensayadas, incluyendo las células del propio paciente.
Fancytopenia: Una reducción en todos los elementos celulares de la sangre, incluyendo glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas.
Papaína: Una enzima proteolítica derivada de papaya.
hemoglobinuria paroxística nocturna (PNH): Un defecto intrínseco en las células rojas .blood membrana haciéndola más susceptible a
hemolisinas en un medio ácido; caracterizado por la hemoglobina en la orina después de períodos de duerme.
fenotipo: La expresión exterior de genes (por ejemplo, un tipo de sangre). En las células rojas de la sangre, serológicamente antígenos demostrables constituyen el
fenotipo.
Flebotomía: El procedimiento utilizado para extraer la sangre de una persona.
Fototerapia: La exposición a la luz solar o artificial con fines terapéuticos.
Plasma: La porción líquida de la sangre entera que contiene agua, electrolitos, glucosa, grasas, proteínas, y los gases de plasma contiene todos los factores de
coagulación necesarios para la coagulación, pero en una forma inactiva. Una vez que se produce la coagulación, el líquido se convierte en suero.
La plasmaféresis: Un procedimiento de uso de una máquina para eliminar solamente el plasma de un donante o paciente.
Plaqueta: Una ronda o disco oval, de 2 a 4 m de diámetro, que se deriva desde el citoplasma de la megacariocitos, una células grandes en la mañana hueso. Las
plaquetas desempeñan un papel importante en la coagulación de la sangre, la hemostasia y la formación de trombos en la sangre. Cuando una pequeña embarcación está
lesionado, las plaquetas se adhieren entre sí y a los bordes de la lesión, la formación de un “tapón” que cubre el área y se detiene la hemorragia.
plaquetoaféresis: Un procedimiento de uso de una máquina para eliminar sólo las plaquetas de un donante o paciente.
refractariedad plaquetaria: No ceder un aumento en plaquetas del receptor cuente con transfusión de plaquetas adecuadamente conservadas. HLA
aloinmunización es una causa común.
Polyagglutination: Un estado en el que las células rojas de un individuo son aglutinadas por todos los sueros independientemente del tipo de sangre.
Polyagglutinins: anticuerpos de origen natural de inmunoglobulinas que se encuentran en la mayoría de los sueros de humano adulto normal.
Policitemia vera: Una vida crónica acortando trastorno mieloproliferativo que involucra todos los elementos de la médula ósea, que se caracteriza por un aumento de la
masa de glóbulos rojos y la concentración de hemoglobina.
reacción en cadena de la polimerasa (PCR): Un método in vitro de la amplificación de un segmento de ADN específico.
sueros poliespecıfico Cooombs': Un reactivo que contiene suero globulina anti-humana contra la inmunoglobulina IgG y C3d y C3b.
El complejo de protrombina: Un concentrado de factores de coagulación II, VII, IX y X en forma liofilizada.

La garantía de calidad (QA): Un conjunto de acciones planificadas para proporcionar la confianza de que los sistemas y elementos que influyen en la calidad del
producto o servicio están funcionando como se esperaba, individual y colectivamente.
Radioinmunoensayo (RIA): Un método muy sensible para la determinación de la sustancia presente en bajas concentraciones en suero o plasma de compra utilizando
anticuerpos específicos y sustancias marcadas radiactivamente o marcadas.
Recesivo: Un tipo de gen que, en presencia de su alelo dominatnt, no se expresa; expresión ocurre cuando se hereda en el estado
homocigótico.
sistema reticuloendotelial (RES): Las células fagocíticas fijas del cuerpo, un tal el macrófago, que tienen la capacidad para ingerir la materia
particulada.
inmunoglobulina RH (RhIg): Un concentrado, purificado anti-Rh (D) preparado a partir de suero humano (de donantes inmunizados) que se da a Rh (D)
negativos al madres después de que hayan dado a luz a un bebé -positivo RH (D) o después de un aborto o aborto involuntario. Actúa para evitar que la madre se
convierta inmunizado a Rh (D) células fetales positivas que pueden haber entrado en su circulación y por lo tanto previene la formación de anticuerpos anti-Rh (D)
por la madre.
rouleaux: Coin como apilamiento de los glóbulos rojos en presencia de expansores de plasma o proteínas plasmáticas anormales.
Saline anti-D: Un sinónimo de reactivos bajo proteína anti-Rh (D).
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Glosario
Secretor: Un individuo que es capaz o secretoras de glicoproteína solubles ABH- sustancias solubles en saliva y otros fluidos corporales.
Duracion: La cantidad de sangre o productos sanguíneos de tiempo puede ser almacenada tras la recogida.
Ácido siálico: Un grupo de azúcares que se encuentran en la membrana de glóbulos rojos unido a un esqueleto de la proteína; la principal fuente de carga negativa neta de la
membrana.
rasgo falciforme: La sangre que es heterocigoto para el gen codificante para la hemoglobina anormal de la anemia de células falciformes.
Soltero - plaquetas de donantes; Las plaquetas recogidas de un solo donante por aféresis.
especificidad: La afinidad de un anticuerpo y el antígeno contra el que se dirige. Vástago célula: Una célula no especializada, capaz de auto-renovación, que
da lugar a un grupo de células diferenciales tales como las células hematopoyéticas.
Estroma: El mmbrane de glóbulos rojos que se deja después de producirse hemólisis.

Talasemia Mayor: La forma homocigótica de la síntesis de la cadena beta deficiente, lo que es muy grave y presentarse a sí misma durante la infancia. El
pronóstico varía; sin embargo, el más pequeño es el niño en enfermedades aparición., menos favorable el resultado.
trombina: Una enzima que convierte el fibrinógeno en fibrina para que un coágulo soluble puede ser formado.
trombocitopenia: Una reducción en el recuento de plaquetas por debajo del nivel normal, que se asocia con hemorragia espontánea.
púrpura trombocitopénica trombótica (TTP): Un trastorno de la coagulación caracterizado por (1) aumentó la hemorragia debido a una disminución del
número de plaquetas, (2) anemia hemolítica, (3) insuficiencia renal, y (4) el cambio de signos neurológicos. los lesión morfológica característica es la
oclusión trombótica de las pequeñas arterias o capilares en diversos órganos.
El síncope vasovagal: Síncope resultante de la hipotensión causada por el estrés emocional, el dolor, la pérdida de sangre aguda, trasera, o rápida levantarse de una
posición reclinada.
venopunción: La punción de una vena para cualquier propósito.
Viabilidad: Capacidad de una célula para vivir o de sobrevivir durante un período de vida razonablemente normal.
factor de von Willebrand: El factor de coagulación VIII. von Willebrand 's enfermedad:
Un trastorno de sangrado congénito.
WAIHA: anemia hemolítica autoinmune caliente. A anemia hermolytic causada por antuantibody del paciente que reacciona a 37 ° C
Wharton; s jalea: Una sustancia intercelular gelatinosa que consiste en tejido conectivo primitiva del cordón umbilical.
período de ventana: ese período entre la infección y la capacidad de detectar la enfermedad mediante pruebas de laboratorio.
Zeta potencial: La diferencia en la densidad de carga entre las capas interior y exterior de la nube iónica que rodea las células rojas en una solución
electrolítica.
Zzap: Una mezcla de la papaína de cisteína-activado y di-thiothreitol. Los glóbulos rojos tratados con Zzap han reducido IgG y se tratan previamente
enzima
429
Referencias
Akerblom, O., Hogman, CF Frozen Blood, un método de bajo glicerol, nitrógeno líquido que permite diferentes después de descongelados
procedimiento deglcerolization, Transfusion, volumen 14 número 3,1974, Archer, Gordon y Parker Gracia, una guía para transgusion sangre, 4 º Ed.,
1982, Sociedad Australiana de la Cruz Roja
(División de NSW)
Bensinger WI, Weaver CH, Appelbaum FR, et al. El trasplante de células madre de sangre periférica alogénicos
movilizados por factor estimulante de colonias de granulocitos humano recombinante. Blood 1995: 85: 1655-1658. Bensinger WI, Rowley S, Appelbaum FR,
et al. CD34 seleccionado de células perioheral madre de sangre alogénica (PBSC)
el trasplante en pacientes mayores con enfermedades hematológicas malignas avanzadas. (Blood 86: 97a, 1995 (Abstr) Bensinger WI, Cantante J,
Applebaum FR, et al trasplante autólogo con células mononucleares de sangre periférica...
recogido después de la administración del factor estimulante de granulocitos recombinante. Blood 1993: 81: 3.158-3.163. Bhatia, HM,
Procedurec en Banco de Sangre y Inmunohematología, 1977.
Bhende, YM, Despande, CK, Bhatia, HM, Sanger, Ruth, Race, .RR et al. (1952) Un nuevo grupo sanguíneo
personaje relacionado con el sistema ABO. Lancent, 1903.
Boorman, KE, Dodd, BE, incond, PJ Grupos Sanguíneos, 6ª Ed., 1988. Churchill Livingstone. Branko Brozovic y Milica Brozovic, Manual
de Transfusión de Sangre Clínica, Churchill Livingstone, Reino Unido 1986. Bowman, JM, Chown, B., Lews, Marion y Pollack, Janet
(1978) la inmunización Rh durante el embarazo, prenatal
profilaxis, Canad, Med. Assoc.J. 118.623.
Branch, DR y Petz, LD (1982) Un nuevo reactivo (Zzap) que tiene múltiples aplicaciones en inmunohematología,
Amer. J. Cin, Path. 78,161-167.
Bruce M, O' Neill CM, Bamardo MC, Krausa P, et al. Fototipia: tipificación completa de ADN para HLA-A, B,
C, DRB1, DRB9, DRB4, DRB5 y DQB1 por PCR con 144 de imprimación se mezcla utilizando Promers específicos de secuencia (PCR-SSP). Los
antígenos del tejido, 1995: 46: 355-67. Dacie, Sir John V, Lewis, SM, practicle Hematiology, 6 º Edn., 1984, Churchill Livingstone. DiPersio J, Martin B,
Abboud C, et al .: El BMT alogénico usando médula ósea y CD34- seleted movilizó PBSC:
comparación con BM solo y movilizó CMSP solo. Blood 84 (10): 91a, 1994 (abstr.). Dodd RY, el riesgo de
infección transusion de transmisión. N. Engl J. Med. 1992: 327: 419-2.
Edwards, JM, Moldes, JJ y Judd. WJ disociación (1982) Cloroquina de complejo antígeno-anticuerpo. Un nuevo
técnica para la tipificación de las células rojas de la sangre con una prueba de antiglobulina directa positiva, Transfusion. 22,59-61. Gianni AM, Siena S, Bregni M,
et al. Granulocitos y macrofase factor estimulante de colonias de cosechar circulante
células madre hematopoyéticas para autotrasplante. Lancent 1989: 2: 580-585.
Heaton, A., Miripol, J., Aster, R. et al. (1984) Uso de la solución de conservante Adsol para el almacenamiento prolongado de baja
viscosidad AS-1 células rojas de la sangre, Brit. Heamto. 57,467-468.
Hogman, CF, Akerblom, O., Hedlund, K., et al. (1983) Red células en suspensión en medio SAGM, Vox Sang. 45,
217-223.
Huestis, DW, Bove, JR y Busch. S. (1981) hemaféresis en practicle Blood Transfusion, 3 rd Edn. Pequeño
Brown Boston.
Issit, PD (1985) Applied Blood Serología, 3 rd Edn. Montogomercy publicación científica. Miame, Floridia. Issaragrisil S, Visuthisakchai S, Suvaue V, et
al. Breve reprt: trasplante de células madre de sangre de cordón en un paciente
con talasemia grave. New Eng J Med 332: 367, 1995.
Klein J: Células de la sangre y su origen: Inmunología. Boston, Blackwell Scientific, 1990.
Kessinger A, Armitage JO, Landmark JD et al. El trasplante autólogo de células madre hematopoyéticas periférico
restaura la función hematopoyética después de la terapia ablativa de médula. Blood 71: 723-72” '. 1988.
430
referencias
Lane, TA, Anderson, KC, Goodnough, LT et al., La reducción de leucocitos en la terapia de componentes sanguíneos. Ana
Intern Md 199.; 117: 151-62.
Levy, JA, Humanos Immunodefigiency Los virus y la patogénesis del SIDA, JAMA: 1989: 261: 2907-3006. Low, B. (1995) Un método práctico utilizando
papaína e incompletas Rh-antbodies en la rutina Rh de los grupos sanguíneos. Vox Sang. (OS), 5, 94.
Low, B. y Messeter, L. (1974) prueba de antiglobulina en solución de sal de fuerza iónica baja para el cribado de anticuerpos rápida
y compatibilidad cruzada ing Vox. Cantó. 26, 53.
Mollison PL., Engelfriet, CP, Contreras Marcela, transfusión de sangre en la medicina clínica, 9 º Edn., 1993. Mehra NK, Verduijin W,
Taneja V, drabbles J, Singh SP, Giphart MJ. Análisis de-DR2 asociado a HLA
polimorfismo mediante hibridación de oligonucleótidos en una población india asiática. Hum Immunol. 1991; 32: 246-53. Mehra NK,
Bouwens AG, Naipal A, Rajalingam R, Grubic Z, Taneja V, et al. Asian Indian HLA-DR2-, DH4-,
y DR52 relacionados con genotipos DR-DQ analizados por tipificación de nucleótidos oligo no radiactivo basado reacción en cadena de la
polimerasa. haplotipos únicos y un nuevo subtipo de DR4. Hum Immunol. 1994; 39; 202-10. Mehra NK, Jaini R, Rajalingam R, Balamurugan A,
diversidad Kaur G. Molecular de HLA-A * 02 en indios asiáticos:
predominio de A * 0211. Los antígenos de tejido. 2001: 57: 502-7.
Meryman, HT, y Homblower, M. (1972) un método de congelación y lavar las células rojas de la sangre utilizando de alta
concentración de glicerol, Transfusion, 12.145.
Moore, HC y Mollison, PL (1976) El uso de medio de baja fuerza iónica en pruebas manuales para la detección de anticuerpos.
Transfusión, 15.266.
Mourant, AE (1949) fenotipos Rh y motation de Fisher. Nature (Lond), 163, 913.
Rajalingam R, Mehra NK, Jain RC, Myneedu VP, Pandey JN. de secuencia basada en la reacción en cadena de la polimerasa
análisis de hibridación de oligonucleótidos específica de antígenos II en la tuberculosis pulmonar HLA de clase: relevancia a la quimioterapia y gravedad de
la enfermedad. J Infect Dis. 1996: 173; 669-76.
Petz, Lawrence, D. y Swisher, Scott, N. Práctica Clínica de Medicina de Transfusión, Sec. Edn. Chuchill Livingstone,
1989.
Opelz G. Análisis de la 'NIMA efecto' en el trasplante renal. Collaborative Transplant Study. Clin Transpl.
1990; 63-7.
Race, RR y Sanger, Ruth (1975) Los grupos sanguíneos en el hombre, 6 º Ed., Blankwell Publicación Científica, Oxford. Robinson J., Malik A, Partha P,
Bodmer JG, Marsh SG. base de datos-a IMGT / HLA base de datos de secuencia para el
complejo mayor de histocompatibilidad. Los antígenos de tejido. 2000: 55: 280-7.
Rowley SD, Bensinger WI, Gooley TA, et al. El efecto de la concentración de células de la médula ósea y periférico
madre de sangre criopreservación de células. Sangre 1994; 83: 2731-2736.
Saran, RK y Makroo, RN, Transfusion Medicine, Manual Técnico, Dirección General de Servicios de Salud,
Ministerio de Salud y Bienestar Familiar, Gobierno. de la India (1991). Sarin, SK y Hess, G., asociada
a la transfusión de hepatitis. (1998). Simon, ER (1977) adenina en Blood Banking, Transfusion, Vol. 17,
número 4. Normas de bancos de sangre y servicios de transfusión, Dirección General de Salud.
Servicios, Ministerio de Salud y Bienestar de la Familia. Gbno. de la India (1987) Normas para banco de sangre y
servicios de transfusión, 20 lh Edn. Asociación de Bancos de Sangre Ammerican, EE.UU. (2000). Stratus, terapia de transfusión RG en neonatos.
A.m. J. Dis Child 1991; 145: 904-11. Manual Técnico, 13 º Edn.
Asociación Americana de Bancos de Sangre, EE.UU. (2000).
El Manual Técnico de la Cruz Roja Canadiense, transfusión de sangre, BPL Moore et al. 1972. Terasaki PI y McClelland JD. ensayo de
microgotas de citotoxinas de suero humano. Naturaleza 1964: 204: 998-1000.
431
Valeri, CR (1975) La simplificación de los métodos para añadir y eliminar glcerol durante la congelación-preservación de
células humanas rojos de la sangre con los métodos de alta o glicerol: mdification bioquímico antes de la congelación. Transfusión,
15.195.
OMS (1977) Veintiocho Informe del Comité de Expertos de la OMS en Patrones Biológicos. Reporte técnico
Series, 610.
Wick, MR, Moore, S. y Taswell, HF (1985) Non-A, no-B Hepatitis asociados con la transfusión de sangre,
Transfusión, 25,93-101.
Wiener, AS (1951) Los tipos de sangre Rh-HR; serología, la genética y la nomenclatura, Trans. NY Acad. Sci, 13,
198.
Weiner, AS, Unger, LJ, Cohen, L. y Feldman, J. (1956) específicas del tipo frías auto-anticuerpos como una causa de
anemia hemolítica adquirida y direc- transfusión hemolíticas: prueba biológica con células rojas de la especie bovina. Amn. Interno. Medicina. 44, 221.
Wright, G. y Sanderon, JM (1974) ACD y CPD conservación de la sangre, Lancet ii, 173.
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244 síndrome hemolítico síndrome urémico
urinaria hemolítico
246 la anemia paroxística paroxística
nocturna hemoglobinuria nocturna
432

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1

que requiere el diseño y la gestión cuidadosa.

Directrices básicas para el ORGANIZACIÓN DE BTS

• El mantenimiento de un registro de donantes de sangre voluntarios no remunerados.

• El seguimiento y evaluación del uso clínico de la sangre.

Reclutamiento donantes estrategias son:

Las donaciones basadas remunerado:

Medios nacional o local de masas

Motivar a los familiares y amigos de los pacientes

Estrategias de retención DONANTES

Instalaciones de extracción de sangre

centros de acopio estáticas

lugares de recogida de móviles

• Tiene un ambiente muy agradable y ofrece un aspecto festivo.

ORGANIZACIÓN DE OUT-PUERTA CAMPS BLOOD donación:

Relaciones con los donantes

estrategias después de la donación

El proceso de selección de donantes tiene cuatro aspectos principales:

(1) El registro, el consentimiento del donante, y la información demográfica. Demográfico

pruebas simples de laboratorio

La información demográfica destacadas incluyen:

2. Padre / nombre del marido

3. Fecha de nacimiento / Edad

4. Género Masculino Femenino

6. direcciones residenciales y oficiales con números de teléfono

Información proporcionada a la DONANTES relación con el VIH / SIDA

Grupo de Alto Riesgo de Donantes para la transmisión del VIH son

1. homosexual masculino o bisexuales

2. hombres o mujeres promiscuas

3. animadores sexuales masculinos o femeninos

4. abusadores drogas intravenosas

6. vendedores de sangre (Profesional donantes remunerados)

Los síntomas de la relacionado con el SIDA (ARC):

Dentro de los 6 meses cualquiera de los siguientes:

Los donantes de sangre CUESTIONARIO:

• ¿Usted sabe sobre el SIDA?

Los riesgos laborales:

• Cirujía importante 6 meses después de la recuperación

• Cirugía menor 3 meses después de la recuperación

• Cirugía a corazón abierto- Permanentemente aplazar ..

• cirugía de cáncer aplazar de forma permanente

• cáncer de piel localizado que 6 meses después de la eliminación

• la extracción del diente o la

• Cirugía dental Aplazar durante 1 mes

• Tiene cualquier síntoma activa aplazar de forma permanente

• actividad restringida aplazar de forma permanente

• La presión arterial alta controlada

• infarto de miocardio aplazar de forma permanente

• Enfermedad de la arteria coronaria aplazar de forma permanente

• Angina de pecho aplazar de forma permanente

• La cardiopatía reumática con

• Ha tenido hepatitis (ictericia) aplazar de forma permanente

• La exposición a la hepatitis por los tatuajes, Aplazar durante 12 meses

• Se teje en la diálisis renal Aplazar durante 12 meses

• transfusión Recibido de sangre Aplazar durante 12 meses

• El contacto cercano con persona Aplazar durante 12 meses

Haya tenido alguna vez ictericia asociada a:

Infección por VIH / SIDA

donantes de grupos de alto riesgo para la infección por VIH

Aceptadas 3 meses después

fiebre prolongada tenido o Aplazar hasta totalmente recuperado y fuera

• La infección aguda de riñón

• enfermedades renales crónicas / fracaso aplazar de forma permanente