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PROYECTO Cana de Azucar
PROYECTO Cana de Azucar
PROYECTO
DE
MICROBIOLOGÍA INDUSTRIAL
TEMA:
INTEGRANTES:
ALVEAR SANDRA
BASANTES FERNANDA
FIENCO ESTEFANÍA
GUEVARA DIANA
HERAS DIANA
ANTECEDENTES:
1. TEMA: AISLAMIENTO, SELECCIOÓ N Y CARACTERIZACION DE CEPAS
SACHAROMYCCES CEREVISIAE TERMOTOLERANTES Y RESISTENTES A ELEVADAS
CONCENTRACIONES DE ALCOHOL PARA LA PRODUCCION DE AGUARDIENTE
2. OBJETIVOS:
2.1. OBJETIVO GENERAL:
Obtener melaza de canñ a de azuó car mediante la preparacioó n, extraccioó n del jugo,
clarificacioó n, evaporacioó n, cristalizacioó n y centrifugacioó n
Aislar las cepas de Saccharomyces cerevisiae fermentadoras y de melaza de canñ a
de azuó car en agar malta.
Seleccionar las cepas de Saccharomyces cerevisiae termotolerantes y resistentes a
etanol del cultivo aislado de melaza de canñ a
Obtener cultivos axeó nicos de Saccharomyces cerevisiae
Caracterizar morfoloó gicamente las cepas aisladas de Saccharomyces cerevisiae
3. ANTECEDENTES
Los fenoó menos relacionados con la tolerancia teó rmica y la tolerancia a etanol de los
microorganismos han sido investigados exhaustivamente. La temperatura optima de
crecimiento especialmente de saccharomyces cereviciae es de 30° a 35 °C, la temperatura
afecta el crecimiento de manera notable, principalmente porque los microorganismos de
una especie dada solo pueden crecer en un rango restringido de temperatura, seguó n
estudios realizados se ha reportado que la tolerancia a el etanol y altas temperaturas son
interactivos, porque las concentraciones altas de alcohol disminuyen la temperatura
optima de crecimiento y el aumento de la temperatura incrementa el efecto inhibitorio de
etanol por lo tanto afecta directamente al rendimiento.
Los efectos toó xicos de la temperatura y el etanol estaó n relacionados con alteraciones de la
permeabilidad de las membranas celulares, la desnaturalizacioó n de proteíónas
intracelulares, asíó como la inhibicioó n del transporte de nutrientes.
El mecanismo de respuesta celular al estreó s por temperatura y por etanol es
esencialmente similar y consiste en cambios en la composicioó n lipíódica de las membranas
y en síóntesis transitoria de proteíónas. Entre las estrategias para mejorar la tolerancia
teó rmica se encuentran la seleccioó n de cepas, adaptacioó n de cepas mediante incubacioó n a
temperaturas crecientes.
Las cepas nativas dan un rendimiento de 0.39 g de etanol por cada gramo de azuó cares a
35°C pero a 40°C (cepas termotolerantes) se obtiene0.41g de etanol por cada gramo de
azuó cares, mejorando asíó su rendimiento y a la par dando una disminucioó n de tiempo de
fermentacioó n.
4. JUSTIFICACION
5. MARCO TEORICO:
La canñ a de azuó car es una gramíónea tropical, en cuyo tallo se forma y acumula un jugo rico
en sacarosa, compuesto que al ser extraíódo y cristalizado forma el azuó car.
Las melazas, mieles finales o melazas “blackstrap”, suelen ser definidas, por muchos
autores como los residuos de la cristalizacioó n final del azuó car, de los cuales no se puede
obtener maó s azuó car por los medios fíósicos.
La melaza es una mezcla compleja que contiene sacarosa, azuó car invertido, sales y otros
compuestos solubles en aó lcali que normalmente estaó n presentes en el jugo de la canñ a
localizado, asíó como los formados durante el proceso de manufactura del azuó car. Ademaó s
de la sacarosa, glucosa, fructosa y rafinosa los cuales son fermentables, las melazas
tambieó n contienen sustancias reductoras no fermentables.
Estos compuestos no fermentables reductores del cobre, con principalmente caramelos
libres de nitroó geno producidos por el calentamiento requerido por el proceso y las
melaniodinas que si contienen nitroó geno derivadas a partir de productos de condensacioó n
de azuó car y aminocompuestos.
Las melazas se obtienen como un subproducto final en la elaboracioó n de la canñ a de azuó car.
Las levaduras, son organismos eucarioó ticos unicelulares, por lo tanto sus estructuras se
encuentran formadas por pared celular, nuó cleo diferenciado y organelos con ribosomas y
mitocondrias.
6. MARCO METODOLOGICO:
6.2.1 AISLAMIENTO
FASE DE ENRIQUECIMIENTO
1. A partir de los cultivos diluidos efectuar siembras por estriado sobre agar malta.
2. Incubar las cajas a 35°C por 48 horas
1. Realizar una resiembra por estriado en agar malta enriquecido con ampicilina
(300mg/L) para inhibir la flora competitiva que aun puede persistir.
2. Incubar las cajas a 35°C por 48 horas.
1. Del cultivo puro obtenido en la fase anterior seleccionar las mejores colonias y
aplicar el meó todo de perlas para conservacioó n
2. Colocar en los crioviales de 10 a 20 perlas las cuales seraó n conservadas.
3. La temperatura adecuada para la conservacioó n de la cepa es de 4°C
Figura N°1
Crecimient NO
SI
o
Diluciones
Siembra en placa
Colonias aisladas
Colonias aisladas
Resiembra en placas
Método de perlas
Selección de perlas y
colocación en crioviales
Crioconservación a 4°C (T
sugerida)
7. HIPOTESIS NULA
8. FACTIBILIDAD
Cantidad de Cantidad
Precio
Medios y Referencia Ncesaria
Reactivos Cantidad a
mL g mL 500g
utilizar
Agar Maltosa 983 38 450 62 0.70
Caldo
1000 37 50 47 0.27
Maltosa
Suero 1000 9 50 12 0.06
Fisiológico
MATERIAL CANT UNITARIO TOTAL
Tubos 5 5 0.10 0.50
Cajas 15 15 0.15 2.25
Crioviales 5 5 1.50 7.50
Pipetas LABORATORIO
Biorreactor
TOTAL 11.28