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Trabajo de investigación presentado como requisito parcial para optar al título de:
Magister en Ingeniería Agroindustrial
Directores:
Ph.D. Andrés Mauricio Hurtado Benavides
Ph.D. Hugo Alexander Martínez Correa
Línea de Investigación:
Ingeniería de procesos aplicada a la obtención de compuestos naturales bioactivos
Grupo de Investigación:
Tecnologías Emergentes en Agroindustria (TEA)
Al Dr. Andrés Hurtado por su asesoría como director del trabajo de grado.
Al Dr. Hugo Martínez por su asesoría como co-director del trabajo de grado.
A los evaluadores de este trabajo Dr. Luis Ignacio Rodríguez y Dr. Luis Eduardo Ordoñez
por sus recomendaciones y aportes a este estudio.
Resumen y Abstract VII
Resumen
Se realizó la extracción, caracterización fisicoquímica y composicional y medición de la
actividad antioxidante de los aceites vegetales de semillas de maracuyá, lulo, y mora
mediante la tecnología de extracción con fluidos supercríticos utilizando CO 2 como
solvente verde. Se evaluaron diferentes condiciones de presión y temperatura frente al
rendimiento del aceite, utilizando un diseño compuesto central rotacional 22. El mejor
resultado fue obtenido a 350 bar de presión y 60°C de temperatura, en las cuales se
obtuvo rendimientos de aceite del 15,7% de maracuyá, 14,5% de mora y 12,3% de lulo.
La determinación de la composición química de los aceites se realizó utilizando
cromatografía de gases que presentó una composición de ácidos grasos enriquecida en
linoleico, oleico, palmítico, linolénico, esteárico y palmitoleico. En cuanto a compuestos
minoritarios determinados por cromatografía de gases acoplado a espectrometría de
masas se encontraron en mayor concentración el β-sitosterol presente en los tres aceites
estudiados, además de escualeno en maracuyá, γ-sitosterol en lulo y γ-tocoferol en mora.
Las propiedades fisicoquímicas evaluadas indicaron que los aceites cumplen con los
estándares de calidad establecidos para aceites comestibles y de interés en la industria
cosmética. En cuanto a la actividad antioxidante determinada por los métodos ABTS y
DPPH se evidenció que los aceites poseen dicha característica, en la cual el aceite de
mora presenta mayor actividad seguido por el aceite de lulo y finalmente el aceite de
maracuyá. Las sustancias encontradas y el rendimiento del aceite de semillas de frutas
plantean la posibilidad de su utilización en matrices cosméticas.
Palabras clave: Rubus glaucus, Solanum quitoense, Passiflora edulis, CO2 supercrítico,
aceite vegetal, actividad antioxidante
Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas VIII
con potencialidad en la industria cosmética
Abstract
Extraction, physical chemistry and compositional characterization and measurement of
the antioxidant activity of vegetable seed oils from passion fruit, lulo and blackberry were
performed using supercritical fluid extraction using CO2 as a green solvent. Different
conditions of pressure and temperature were evaluated against oil yield, using a central
composite design rotational 22. The best result was obtained at 350 bar pressure and 60 °
C temperature, in which oil yields of 15,7% was obtained passion fruit, blackberry of
14.5% and 12.3% of lulo. Determining the chemical composition of the oils was performed
using gas chromatography showed a composition of fatty acids enriched in linoleic, oleic,
palmitic, linolenic, stearic and palmitoleic. As for minority compounds determined by
chromatography coupled with mass spectrometry gases are found in higher
concentrations the β-sitosterol present in the three oils in addition to squalene studied in
passion fruit, γ-sitosterol in lulo and γ-tocopherol in blackberry. The physicochemical
properties evaluated indicated that oils meet the quality standards set for food and
cosmetic industry interest in oils. As for the specific antioxidant activity by ABTS and
DPPH methods showed that the oils have said characteristic, in which the oil has greater
activity blackberry followed by oil lulo and finally passion fruit oil. The substances found
and yield fruit seed oil raise the possibility of their use in cosmetic matrices.
Contenido
Pág.
Introducción………………………………………………………………………………………1
2. Justificación ............................................................................................................. 5
3. Objetivos ................................................................................................................... 9
3.1 Objetivo general ................................................................................................. 9
3.2 Objetivos específicos ......................................................................................... 9
Lista de figuras
Pág.
Lista de tablas
Pág.
Tabla 5-1. Revisión de extracción de aceites de semillas con CO2 supercrítico ............. 21
Tabla 6-1. Matriz de diseño experimental ....................................................................... 31
Tabla 6-2. Resultados de la prueba ABTS°+ con patrones de trolox .............................. 35
Tabla 6-3. Valores de absorbancia obtenidos a diferentes concentraciones de DPPH*.. 37
Tabla 6-4. Eficiencia anti-radical en ácido ascórbico y ácido gálico ................................ 38
Tabla 7-1. Diámetros promedio de partícula ................................................................... 41
Tabla 7-2. Análisis proximal de semillas de maracuyá, lulo y mora ................................ 42
Tabla 7-3. Resultados de extracción de aceite de semillas de maracuyá ....................... 45
Tabla 7-4. Análisis de varianza para rendimiento de aceite de semillas de maracuyá .... 46
Tabla 7-5. Resultados de extracción de aceite de semillas de lulo ................................. 48
Tabla 7-6. Análisis de varianza para rendimiento de aceite de semillas de lulo .............. 49
Tabla 7-7. Resultados de extracción de aceite de semillas de mora............................... 51
Tabla 7-8. Análisis de varianza para rendimiento de aceite de semillas de mora ........... 52
Tabla 7-9. Composición promedio de ácidos grasos en aceite de semillas de maracuyá 55
Tabla 7-10. Valor de P en el análisis de varianza para la composición del aceite de
semillas de maracuyá ..................................................................................................... 56
Tabla 7-11. Resultados del rendimiento de aceite en la extracción y relación Insat/sat de
ácidos grasos en aceite de maracuyá ............................................................................ 60
Tabla 7-12. Composición de ácidos grasos de aceite de semillas de lulo ....................... 62
Tabla 7-13. Valor de P en el análisis de varianza para la composición del aceite de
semillas de lulo ............................................................................................................... 64
Tabla 7-14. Resultados del rendimiento de aceite en la extracción y ácidos grasos
saturados e insaturados en aceite de lulo....................................................................... 65
Tabla 7-15. Optimización multirespuesta para el rendimiento de la extracción y la relación
ácidos grasos de aceite de semillas de lulo .................................................................... 65
Tabla 7-16. Composición de ácidos grasos de aceite de semillas de mora .................... 67
Tabla 7-17. Valor de P en el análisis de varianza para la composición del aceite de
semillas de mora ............................................................................................................ 68
Tabla 7-18. Resultados del rendimiento de aceite en la extracción y ácidos grasos
saturados e insaturados en aceite de mora .................................................................... 70
Tabla 7-19. Condiciones óptimas el rendimiento de la extracción y la relación de ácidos
grasos de aceite de semillas de mora ............................................................................ 71
Tabla 7-20. Composición de escualeno y esteroles en aceite de semillas de maracuyá 73
Tabla 7-21. Composición de escualeno y esteroles en aceite de semillas de lulo .......... 74
Tabla 7-22. Composición de tocoferoles en aceite de semillas de lulo ........................... 74
Contenido XIII
Lista de gráficos
Pág.
Gráfico 7-21. Gráfico de efectos principales para ácido palmítico en aceite de maracuyá
....................................................................................................................................... 60
Gráfico 7-22. Respuesta para la optimización de múltiples respuesta en el rendimiento de
la extracción y la relación Insat/Sat de aceite de semillas de maracuyá ......................... 61
Gráfico 7-23. Respuesta para la optimización de múltiples respuesta en el rendimiento de
la extracción y la relación Sat/Insat de aceite de semillas de maracuyá ......................... 61
Gráfico 7-24. Composición de ácidos grasos de aceite de semillas de lulo extraído con
CO2-SC .......................................................................................................................... 63
Gráfico 7-25. Diagrama de Pareto para ácido palmitoleico en aceite de lulo .................. 64
Gráfico 7-26. Gráfico de efectos principales para ácido palmitoleico en aceite de lulo ... 64
Gráfico 7-27. Respuesta para la optimización de múltiples respuesta en el rendimiento de
la extracción y la relación Insat/Sat de aceite de semillas de lulo ................................... 66
Gráfico 7-28. Respuesta para la optimización de múltiples respuesta en el rendimiento de
la extracción y la relación Sat/Insat de aceite de semillas de lulo ................................... 66
Gráfico 7-29. Composición de ácidos grasos de aceite de semillas de mora extraído con
CO2-SC .......................................................................................................................... 68
Gráfico 7-30. Diagrama de Pareto para ácido palmítico en aceite de mora .................... 69
Gráfico 7-31. Diagrama de Pareto para ácido esteárico en aceite de mora .................... 69
Gráfico 7-32. Gráfico de efectos principales para ácido palmítico en aceite de mora ..... 69
Gráfico 7-33. Gráfico de efectos principales para ácido esteárico en aceite de mora ..... 70
Gráfico 7-34. Respuesta para la optimización de múltiples respuesta en el rendimiento de
la extracción y la relación Insat/Sat de aceite de semillas de mora................................. 71
Gráfico 7-35. Respuesta para la optimización de múltiples respuesta en el rendimiento de
la extracción y la relación Sat/Insat de aceite de semillas de mora................................. 71
Gráfico 7-36. Resultados capacidad antioxidante de aceite de semillas de frutas .......... 79
Gráfico 7-37. Comportamiento de ácido ascórbico frente al radical DPPH* .................... 81
Gráfico 7-38. Comportamiento de ácido gálico frente al radical DPPH* .......................... 81
Gráfico 7-39. Comportamiento del aceite de semillas de mora frente al radical DPPH* .. 83
Gráfico 7-40. Comportamiento del aceite de semillas de lulo frente al radical DPPH* .... 84
Gráfico 7-41. Comportamiento del aceite de semillas de maracuyá frente al radical
DPPH* ............................................................................................................................ 84
Gráfico 7-42. Comparación del %[DPPH*]remanente a 0,5 mL aceite/mL solución ........ 85
Introducción 1
Introducción
Nariño es un departamento que posee diversas características geográficas,
climatológicas y biológicas, lo que hace que su vegetación sea variada y enriquecida con
numerosas especies de frutas producidas durante todo el año. Este recurso es utilizado
para la elaboración de productos a base de frutas, entre las cuales se encuentran mora,
lulo, maracuyá, tomate de árbol, mango, papaya, guayaba y guanábana.
Cerón, Osorio y Hurtado 2012; Fazio et al., 2013; Pasquel et al., 2014) y recientemente,
la extracción con fluidos supercríticos (EFS), específicamente con dióxido de carbono
como una alternativa interesante para la extracción y fraccionamiento de aceites
vegetales por cuanto no posee los inconvenientes de las técnicas de extracción
tradicionales (Hurtado, 2002). Además, la EFS, permite la obtención de aceites vegetales
con características particulares o fracciones con determinados componentes de interés
para fines específicos.
La pregunta a resolver con este proyecto de investigación fue la siguiente: ¿Cuáles son
las propiedades y el rendimiento de aceites obtenidos de semillas de frutas obtenidos
mediante la técnica de extracción con fluidos supercríticos?
2. Justificación
“Colombia cuenta con 433 especies nativas de frutales comestibles identificados, que lo
posicionan como el primer país del mundo en biodiversidad de frutas por kilómetro
cuadrado” (Nucci, 2013). Por lo cual la cadena frutícola es considerada como una de las
actividades productivas con mayor potencialidad en nuestro país (Ministerio de
Agricultura y Desarrollo Rural, 2006).
En Colombia se cuenta con 188.487 hectáreas de frutales sembradas DANE, (2015), que
generan en promedio 0,64 empleos directos/ha y 2,3 indirectos (Ministerio de Agricultura
y Desarrolo Rural, 2009). Según la Secretaria de Agricultura de Pasto, la participación
promedio del valor agregado de la producción de frutas y hortalizas en el Producto
Interno Bruto (PIB) agrícola de Nariño fue del 17,27% para 2008, siendo uno de los
subsectores con mayor dinámica en la economía rural del país.
El departamento de Nariño cuenta con una producción anual de 23.885,7 t, de las cuales
las frutas de mayor producción al año son: mora con 5.552 t, lulo con 5.514 t, maracuyá
con 1.382 t, tomate de árbol con 2.563 t, mango con 476,0 t, guanábana con 163,5 t,
papaya con 824,2 t y guayaba con 146,0 t (DANE, 2015).
pollos y cerdos. De esta manera se generan en total 1750 kg de residuos al mes, entre
estas tres empresas, que varían dependiendo de la cantidad de fruta disponible para
procesar (Narváez et al., 2013).
Los aceites vegetales son los ingredientes de mayor demanda a nivel mundial en la
industria (88%) según Proexport- Colombia (2010); estos son utilizados en alimentación,
obtención de biodiesel y como ingredientes naturales en la preparación de cosméticos.
Además se cree que cuentan con compuestos antioxidantes que pueden estar ligados al
antienvejecimiento y prevención de enfermedades de la piel.
Maracuyá (Passiflora edulis): es originaria de sur América y con más de 500 especies en
todo el mundo (Oliveira et al., 2016). La maracuyá contiene, cerca de 250 semillas
pequeñas, de color café oscuro y agradable sabor. Las semillas se encuentran
suspendidas en un líquido gelatinoso de color amarillo naranja (Osorio, 2009). En
Colombia se produce aproximadamente 46.879 t/año de maracuyá y es una de las frutas
tropicales de mayor producción en el departamento de Nariño (1.382 t/año) (DANE,
2015).
12 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
Un triglicérido se forma fundamentalmente de tres ácidos grasos unidos por enlaces éster
a una molécula de glicerol (Figura 4-1). Las propiedades físicas y químicas de las grasas
obedecen en gran medida de los tipos y proporciones de los ácidos grasos que lo
constituyen, así como el modo en que se distribuyen en el esqueleto de glicerol (Escobar,
2012).
Entre los ácidos grasos insaturados más abundantes en los aceites vegetales se
encuentran los ácidos linoleico y oleico. Mientras que los ácidos palmítico y esteárico son
los ácidos grasos saturados más comunes en los vegetales (Jurado y Muñoz, 2009).
Vitamina E:
Pertenece al grupo de vitaminas liposolubles y está conformada por un grupo de ocho
vitaminas. Estos se dividen en dos grupos fundamentales cuatro tocoferoles y cuatro
tocotrienoles que se diferencian en la saturación de la cadena lateral (α, β, γ y δ). Se
encuentra en aceites vegetales, tales como el del germen de maíz y trigo, de la semilla
de algodón, de soya, de girasol, de maní y en guisantes secos como chicharos,
garbanzos y lentejas entre otros; siendo los más activos el α-tocoferol por ser el isómero
más activo (Ortiz y Ratner, 2009) y el γ-tocoferol por su poder antioxidante (Martínez y
Ceballos, 2012).
Fitoesteroles:
Son todos los componentes bioactivos de los alimentos vegetales presentes
mayoritariamente en plantas oleaginosas (maíz, soya, girasol y canola), nueces y
cereales. Son triterpenos insaturados con uno o dos dobles enlaces entre carbono y
carbono. Se han encontrado más de 200 tipos de esteroles en diferentes especies de
plantas, siendo los más abundantes el β-sitosterol, campesterol y estigmasterol (Muñoz,
Alvarado-Ortíz y Encina, 2011). Los fitoesteroles tienen propiedades antiinflamatorias,
antitumorales, antioxidantes, bactericidas y antifúngicas (Valenzuela y Ronco, 2004).
Antioxidantes:
14 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
Son sustancias que puede inhibir o retardar el proceso oxidativo, interfiriendo con la
iniciación o propagación de las reacciones en cadena de la auto-oxidación. La
importancia de un antioxidante depende de su concentración, del medio donde actúa y
de su habilidad para interaccionar con sistemas regeneradores (Jurado y Muñoz, 2009).
Figura 4-4. Diagrama de fases de una sustancia pura (S: Sólido, L: Líquido, G: Gas, Pc:
Presión crítica, Tc: Temperatura crítica, Pt: Punto triple)
Etapa de presurización: se eleva la presión del gas a utilizar como solvente a un valor por
encima de su presión crítica; esta operación se realiza por medio de un compresor o
bomba.
Actividad antioxidante:
No es posible hacer una medida directa, pero la mayoría de los métodos se basan en el
uso de sistemas generadores de radicales, los cuales son métodos de inhibición donde
se emplea una especie generadora de radicales libres y una sustancia detectora de estas
especies. Su efecto se analiza por métodos espectrofotométricos UV-Vis. Entre los
métodos se encuentran:
Método ABTS+: Consiste en generar el radical ABTS a partir del ácido 2,2’-azino-bis-(3-
etilbenzotiazolin)-6-sulfónico, donde el radical catiónico obtenido es un compuesto
Capítulo 4. Marco Teórico 17
estable, de color verde- azulado y con un espectro de absorción máximo a 734 nm (UV-
vis). La ventaja del radical es su estabilidad cuando se encuentra en refrigeración y
lejos de la luz. Estos factores permiten almacenar una solución de trabajo por
aproximadamente seis meses. Además este absorbe en la región cercana al
infrarrojo (645, 734 y 815 nm), evitando interferencias con las antocianinas (Kuskoski,
et al., 2004; Okezie 2002, citados por Cerón y Lopez, 2013). El método permite
expresar los resultados de acuerdo a la capacidad del antioxidante para donar un
hidrógeno y estabilizar al radical ABTS°+. La decoloración que la solución de ABTS°+
experimenta en la reacción, se compara con la decoloración hecha por un
antioxidante patrón derivado de la vitamina E conocido como Trolox (6-Hidroxi-
2,5,7,8-tetrametilcroman-2-ácido carboxílico), mediante una curva de calibración. Por
esta razón el resultado se expresa como capacidad antioxidante en equivalentes
trolox ó TEAC (Trolox Equivalent Antioxidant Capacity) (Okezie 2002, citado por
Jimenez y Villareal, 2008).
Método del DPPH*: Consiste en determinar la capacidad de captura del radical libre
DPPH* por parte de los compuestos antioxidantes (Samaniego, 2006). El procedimiento
seguido para determinar la actividad antioxidante se basa en el método descrito por
Brand-Williams et al., (1995) y descrito por Malacrida y Neuza (2012), el cual consiste
en la medición a 517 nm de la reducción del radical estable 1,1-difenil-2-picril-
hidrazilo (DPPH.). La absorbancia característica de este radical que posee un color
violeta intenso, disminuye en presencia de un antioxidante. Por lo tanto, es posible
cuantificar la capacidad captadora de radicales libres que poseen determinados
compuestos mediante la determinación del grado de decoloración que provocan a
una solución de DPPH (Figura 4-5).
18 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
AH A*
H
5. Estado del arte
En la actualidad las empresas procesadoras de frutas dirigen su mayor esfuerzo al
aprovechamiento de la pulpa para la obtención de productos como jugos, pulpas,
mermeladas, conservas, confites y colorantes los cuales generan valor agregado;
desechando grandes cantidades de materia orgánica ocasionando perjuicio a la cadena
frutícola y al medio ambiente.
Además varios estudios han encontrado en los aceites de maracuyá compuestos de alto
valor nutricional como ácidos grasos, principalmente linoleico, oleico y palmítico (Liu et
al., 2009); y características antioxidantes descritas en otros estudios (Malacrida y Neuza,
2012) por lo cual se ha considerado como una fuente promisoria para posibles
aplicaciones en la industria alimentaria, cosmética y farmacéutica (Zeraik et al., 2010;
Malacrida y Neuza, 2012).
Temperatura Presión
Semillas Referencia
(°C) (bar)
Oleaginosas 35-75 150-450 (Boutin y Badens, 2009)
Guayaba 40-60 100-300 (Castro et al., 2010)
Sasha inchi 40-60 300-400 (Follegatti, 2007)
Maracuyá 40-50 150-250 (Oliveira, Angonese y Ferreira, 2013)
Guayaba 40-60 100-300 (Castro et al., 2010)
Guayaba 40 170-310 (Nivia et al., 2007)
Almendra 40-80 207-483 (Zaidul et al., 2006)
Nuez 50-70 200-400 (Martínez, Mattea y Maestri, 2008)
Café 50-70 152-352 (Azevedo et al., 2008)
Mora 35 75-90 (Oztas, Galip y Murathan, 2011)
Roselle 40-80 200-400 (Nyam et al., 2010)
Nigella
40-70 100-400 (Rao et al., 2007)
sativa
Olivo 40 180-250 (Vázquez et al., 2009)
(Hurtado-Benavides, Dorado y Sanchez-
Café 40-60 150-300
Camargo, 2016)
Guayaba 40-60 200-350 (Cerón, Hurtado y Ayala, 2016)
Maracuyá 50-60 200-300 (Liu et al., 2009)
Mora 50 350 (Yang et al., 2011)
Mora 40-60 150-250 (Pasquel et al., 2014)
Granada 35-65 150-450 (Liu et al., 2012)
La adecuación del material en cuestión (Figura 6-1) consistió en separar las semillas de
restos de pulpa, cascara, nervaduras o materiales diferentes a estas con abundante agua
y con ayuda de un filtro colador de diferente tamaño de acuerdo al tipo de semilla
utilizada, posteriormente se colocó la semilla lavada en un recipiente en el cual pueda
eliminar el exceso de agua y pasar al proceso de secado (Figuras 6-2, 6-3, 6-4). El
material se colocó en un secador de bandejas (FIQ, Colombia) ubicado en la planta piloto
de la Universidad de Nariño a 60°C durante 8 horas. Seguidamente se empacó en bolsas
de papel kraft y polietileno, y se almacenó a temperatura ambiente hasta su posterior
extracción.
24 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
RECEPCIÓN DE LAVADO O
MATERIA PRIMA SEPARACIÓN ESCURRIDO SECADO
(Residuos de • Semillas SEMILLAS
maracuyá, lulo y LAVADAS (60°C - 8 horas)
• Restos de pulpa
mora)
• Cáscara
MOLIENDA
EMPACADO ALMACENAMIENTO • Molino de discos
(Papel kraft) (T° Ambiente) • Molino de martillos
• Molino de cuchillas
ANALISIS
EMPAQUE AL ALMACENAMIENTO
GRANULOMÉTRICO
VACÍO (4°C)
(NTC 2441)
Análisis Granulométrico
Dentro del estudio se determinó el tamaño promedio de partícula de las semillas de
maracuyá, lulo y mora secas y molidas, de acuerdo a los parámetros establecidos en la
NTC 2441 de 1996. De esta manera 100 g de material fueron tamizados utilizando una
tamizadora (modelo PS-35 serie 1182) en la serie de tamices 10-80, A.S.T.M.E., por
espacio de 10 minutos.
100
ln(ln ( )) (6.1)
%𝑅
Fibra cruda: Se realizó mediante dos digestiones con ácido sulfúrico y con hidróxido
de sodio con el fin de eliminar las proteínas, carbohidratos solubles, residuos de grasas y
vitaminas (AOAC 962.09).
Diseño Experimental
Se aplicó un diseño factorial 22 con 4 puntos centrales con repeticiones (2) y de manera
aleatoria (Tabla 6-1), de acuerdo a la metodología descrita por Hurtado-Benavides,
Dorado y Sanchez-Camargo (2016), con algunas modificaciones. El aceite obtenido se
colectó y almacenó en un vial de vidrio ámbar en refrigeración (4°C), hasta su posterior
análisis. El rendimiento fue calculado mediante la ecuación 6.2, y se expresó como
porcentaje de aceite extraído.
𝑃𝑒𝑠𝑜𝐴𝑐𝑒𝑖𝑡𝑒𝐸𝑥𝑡𝑟𝑎í𝑑𝑜
%𝑅𝑒𝑛𝑑𝑖𝑚𝑖𝑒𝑛𝑡𝑜 = ( )𝑥 (6.2)
𝑃𝑒𝑠𝑜𝑆𝑒𝑚𝑖𝑙𝑙𝑎𝑈𝑡𝑖𝑙𝑖𝑧𝑎𝑑𝑎
Capítulo 6. Materiales y Métodos 31
N° °C Bar %
1 50 275
2 50 275
3 50 275
4 50 275
5 40 200
6 60 200
7 40 350
8 60 350
9 40 200
10 60 200
11 40 350
12 60 350
Los ácidos grasos fueron identificados por comparación de tiempos de retención de una
mezcla estándar de ácidos grasos (Restek, USA) analizados bajo las mismas
condiciones operacionales. La cuantificación se realizó por porcentaje relativo de área y
también mediante estándar interno empleando como estándar metil undecanoato
(Alltech, USA), para la cuantificación en mg/mL.
Esteroles y tocoferoles
La composición de esteroles y tocoferoles se determinó según la metodología descrita
por Matthaus y Ozcan (2011) con algunas modificaciones. Se utilizaron 20 µL de aceite y
se diluyeron a 1 mL en diclorometano grado HPLC (Honeywell, USA). Los extractos se
agitaron en un vortex por 0,5 min y se les adicionó sulfato de sodio anhidro (Merck,
Germany). Se inyectaron 1,0 µL en un cromatógrafo de gases acoplado a espectrometría
de masas (Shimadzu QP2010S, USA), equipado con una columna SHXRI-5MS
(Shimadzu. 30 m x 0,25 mm x 0,25 µm), un detector selectivo de masas QP2010S con
ionización por impacto electrónico (full scan EI a 70eV) y un inyector de modo de
inyección splitless a 270°C.
𝑀3 −𝑀1
𝜌𝜃 = + 𝑘(𝜃𝑑 − 𝜃) (6.3)
𝑉𝑑
Donde:
ρ: Densidad (g/mL)
M1: Masa del picnómetro vacío (g)
M3: Masa del picnómetro con muestra (g)
Vd: Volumen del picnómetro a temperatura deseada (θd)
θd: Temperatura de determinación
θ: Temperatura para ser establecida
k: Cambio medio de densidad de las grasa debido al cambio de temperatura.
k = 0,00068 gr/mL °C
Índice de refracción:
Según NTC 289, este ensayo se llevó a cabo en un refractómetro de mesa Brixco 3030,
la determinación del índice de refracción de la muestra (aceite) se midió entre 20 y 25°C.
Para la medición se remueve la parte móvil del prisma y se limpió la superficie con un
paño suave y luego con un algodón humedecido con unas gotas de solvente (tolueno) y
se dejó secar. Posteriormente se llevó a cabo la medición del índice de refracción con
aproximación de 0,0001 y se registró la temperatura del prisma del instrumento. Para
calcular del índice de refracción se tuvo en cuenta que si la diferencia entre la
temperatura de la medición t1 y la temperatura de referencia t es menos que 3°C, el
índice de refracción nDt a la temperatura de referencia t está dado por la fórmula:
Donde:
t1: es la temperatura de medición
t: es la temperatura de referencia
F: es un factor igual a 0,00035 a t = 20 y 25°C
34 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
Índice de acidez:
Según NTC 218: es el número de miligramos de hidróxido requeridos para neutralizar los
ácidos grasos libres presentes en 1 gr de grasa de acuerdo al procedimiento especificado
por esta norma. Se expresa en mg KOH/g.
Índice de yodo:
Según NTC 283: consiste en disolver el aceite en un solvente y se adiciona el reactivo de
Wijs, posteriormente se adiciona yoduro de potasio y agua y se titula la liberación de
yoduro con una solución de tiosulfato. Se determina el grado de insaturación de la
muestra, expresado como gramos de yodo absorbidos por 100 g de muestra.
Índice Saponificación:
Según AOAC 920.160: es el número de miligramos de hidróxido de potasio que se
requieren para saponificar 1 gr de aceite.
Índice Peróxidos:
Según AOAC 965.33: la muestra se dispone en una solución de ácido acético y
cloroformo, con una solución de yoduro de potasio. Se hace la titulación del yodo liberado
con una solución normalizada de tiosulfato de sodio. Se expresa en miliequivalentes de
oxigeno activo por kilogramo de muestra.
La metodología aplicada fue la descrita por Re et al. (1999), citado por Jimenez y
Villareal (2008). El radical ABTS°+ se generó tras la reacción de ABTS (7 mM) con
persulfato potásico (2,45 mM). La mezcla reaccionante permaneció a temperatura
ambiente y en ausencia de luz durante 24 horas. El ABTS°+ preparado se diluyó con
etanol hasta obtener un valor de absorbancia de 0,7 + 0,2 a una longitud de onda de 734
Capítulo 6. Materiales y Métodos 35
1,0
0,9
y = -0,3102x + 0,8885
0,8
La funcionalidad del método se comprobó con un patrón de ácido ascórbico 1,6 mM, al
cual se realizó el mismo procedimiento que a las muestras de aceite y se obtuvo un valor
de 0,904 mM de trolox, el cual es cercano al reportado por Jimenez y Villareal (2008).
%[ ]
%[ ] 𝑒𝑚 𝑛𝑒𝑛𝑡𝑒 = (6-5)
%[ ] 0
1
=𝐸 (6-6)
0
El primer paso para el desarrollo del método, fue la preparación de la curva (tabla 6-3)
absorbancia Vs concentración DPPH* (Gráfico 6-2), de la cual se obtuvo la ecuación Y=
9,9307x + 0,0108 (R2 = 0,9996), con la que se calcula la concentración de DPPH* en el
tiempo.
Coeficiente
Concentración Absorbancia Desviación
Promedio de
(mM) 515 nm estándar
Variación
0,0025 0,034 0,034 0,034 0,034 0,000 0,000
0,0050 0,062 0,061 0,062 0,062 0,001 0,936
0,0075 0,088 0,087 0,087 0,087 0,001 0,661
0,0100 0,108 0,108 0,109 0,108 0,001 0,533
0,0250 0,259 0,258 0,260 0,259 0,001 0,386
38 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
0,300
Absorbancia 515 nm
0,250
0,200
0,050
0,000
0,000 0,005 0,010 0,015 0,020 0,025 0,030
Concentración DPPH (mM)
La funcionalidad del método se verificó con patrones de ácido ascórbico y ácido gálico,
como punto de referencia sobre la eficiencia anti-radical (Sánchez, Larrauri y Saura,
1997). La tabla 6-4 presenta los resultados obtenidos para estos patrones. El
%[DPPH*]remanente y el tiempo, hacen referencia a la concentración que permanece en
la solución, al estabilizarse y cuánto tiempo tarda para lograrlo. Con estos resultados se
elaboró el gráfico 6-3: %[DPPH*]remanente Vs Concentración de antioxidante. Se obtuvo
la concentración necesaria para disminuir el %[DPPH*]remanente al 50% (EC50.),
mediante la expresión 𝑦 = ,36𝑒 −0,01𝑥 (R2 = 0,9896) para ácido ascórbico y para ácido
gálico por medio de 𝑦 = 75,536𝑒 −0,016𝑥 (R2 = 0,949). Para calcular el tiempo que alcanza
el EC50, se graficó tiempo Vs %[DPPH*]remanente (Gráfico 6-4 y 6-6), donde se obtuvo
las expresiones 𝑦 = − ,82 5𝑥 + 5, 4(R²=0,9438), 𝑦 = − , 4 4𝑥 + 64,29 (R2 =
0,9926) para los ácidos ascórbico y gálico respectivamente.
a EA EA
Patrón [Patrón] %[DPPH*]rem Tiempo (min) EC50* TEC50 -3 -3 b
(x10 ) (x10 )
30 70,488 0,83
80 47,978 1,25
Ácido Ascórbico 70,7 1,13 12,52 11,44
130 28,398 1,33
177 15,877 1,92
10 79,146 9,92
50 31,062 16,17
Ácido Gálico 25,79 13,47 2,88 2,62
100 10,816 18,08
171 5,887 18,33
a b
g Antioxidante/kg DPPH* - Tomado de Sánchez (1997)- *g antioxidante/kg DPPH*
Capítulo 6. Materiales y Métodos 39
80,0
70,0
y = 101,36e-0,01x
60,0
%[DPPH]remanente
R² = 0,9896
50,0
40,0
30,0
20,0
10,0
0,0
0 50 100 150 200
g Antioxidante/kg DPPH
100,0
90,0 y = -0,821x + 105,53
R² = 0,94
80,0
70,0
% [DPPH]reman
60,0
50,0
40,0
30,0
20,0
10,0
0,0
0 20 40 60 80 100 120 140
Tiempo (s)
40 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
90,0
80,0
70,0
%[DPPH]remanente
60,0
y = 75,536e-0,016x
50,0 R² = 0,949
40,0
30,0
20,0
10,0
0,0
0 50 100 150 200
g Antioxidante/kg DPPH
60,0
50,0
40,0
30,0
20,0
10,0
0,0
0 200 400 600 800 1000 1200
Tiempo (s)
7. Resultados y discusión
humedad, materia seca, ceniza, extracto etéreo, fibra cruda, proteína y extracto no
nitrogenado; lo cual da una información rápida sobre el potencial de aprovechamiento de
las semillas como residuo agroindustrial. Se observa un bajo contenido de agua que
favorece para el proceso de extracción de aceites, debido a que la mayoría de semillas
oleoginosas deben contener una humedad alrededor del 8% para su conservación y
extracción (Londoño, Mieres-Pitre y Hernández, 2012). El contenido de extracto etéreo
muestra que las semillas de maracuyá, lulo y mora pueden ser una fuente promisoria de
aceite, cuentan también con un alto contenido de fibra y proteína para ser encaminado a
posteriores estudios para su aprovechamiento.
Entre los resultados se evaluó el extracto etéreo que hace referencia a la materia grasa
contenida en las semillas, siendo la característica de mayor interés en la presente
investigación. Las semillas de maracuyá presentaron un contenido de extracto etéreo de
27,6 g/100 g de semilla, lo cual es acorde a lo reportado por Oliveira, Angonese y
Ferreira (2013); en las semillas de lulo se reportó un contenido graso de 10,3 g/100 g de
semillas, similar al obtenido por Jurado y Muñoz (2009); mientras que en las semillas de
mora se encontró una cantidad de extracto etéreo de 18,5 g/100 g de muestra,
superando el valor reportado por Conrado (2008) y Oztas, Galip y Murathan (2011).
Semillas
Parámetro Técnica
Maracuyá Lulo Mora
g/100 g de muestra
Humedad Gravimétrica 7,80 ±0,7 5,70 ±0,5 7,59 ±0,7
Materia seca Gravimétrica 92,20 ±0,7 93,34 ±0,5 92,41 ±0,7
Ceniza* Gravimétrica 1,72 ±0,2 1,44 ±0,4 1,90 ±0,1
Extracto etéreo* Gravimétrica 27,6 ±0,8 10,3 ±0,4 18,5 ±0,3
Fibra cruda* Gravimétrica 55,5 ±0,2 70,1 ±0,3 67,8 ±0,1
Proteína* Titulométrica 15,2 ±0,5 10,9 ±0,6 11,0 ±0,3
Extracto no nitrogenado* Cálculo matemático 0,07 ±0,4 7,21 ±0,4 0,80 ±0,2
*Determinación basada sobre el contenido total de materia seca (base seca)
25
20
Rendimiento Aceite (%p/p)
15
10
Lulo
0 Mora
Maracuyá
30
EFS
25 Soxhlet
Rendimiento (%p/p)
20
15
10
0
Maracuyá Lulo Mora
Aceites de semillas
Zahedi y Azarpour (2011) obtuvieron un rendimiento del 25,76% de aceite extraído con
fluidos supercríticos; mientras que Cardoso, Davantel, y Gimenes (2013) utilizaron
acetona en la extracción asistida por ultrasonido y obtuvieron un rendimiento de 23,8%.
Pero Liu, et al. (2009) extrajeron aceite de semillas de maracuyá por prensado mecánico
y obtuvieron un rendimiento del 9,8%, inferior al obtenido en la presente investigacion.
18
16
14
12
Rendimiento (%p/p)
10
0
200-40 200-60 275-50 350-40 350-60
En la tabla 7-4 se muestran los resultados del análisis de varianza. Se puede observar
que únicamente la presión influye significativamente sobre el rendimiento de aceite
extraído de maracuyá (p<0,05). Mientras que los factores temperatura e interacción
presión-temperatura no presentaron efecto significativo dentro del intervalo de las
condiciones estudiadas (Gráfico 7-4).
Suma de
Fuente Gl Cuadrado Medio Razón-F Valor-P
cuadrados
A: Presión 181,909 1 181,909 31,85 0,0008
B:Temperatura 13,4058 1 13,4058 2,35 0,1693
AB 25,4327 1 25,4327 4,45 0,0728
Bloques 0,0823363 1 0,0823363 0,01 0,9078
Error total 39,9748 7 5,71068
Total (corr.) 260,804 11
Capítulo 7. Resultados y Discusión 47
+
A:Presión -
AB
B:Temperatura
0 1 2 3 4 5 6
Efecto estandarizado
El gráfico 7-5 muestra el efecto particular de cada factor sobre la variable de respuesta,
por lo tanto se evidencia que la presión presenta una pendiente con mayor inclinación lo
cual hace referencia a su significancia frente al rendimiento y la sensibilidad de la
variable de respuesta a los cambios de este factor. El efecto de la presión frente al
rendimiento es directamente proporcional en los rangos evaluados en la presente
investigación.
14,2
12,2
Rendimiento
10,2
8,2
6,2
4,2
200,0 350,0 40,0 60,0
Presión Temperatura
En este estudio se obtuvo mayor rendimiento de aceite mediante extracción con fluidos
supercríticos en algunas de las condiciones en comparación con el contenido graso
reportado en el análisis bromatológico (Tabla 7-2) de las semillas de lulo, realizado
mediante la técnica de extracción soxhlet (10,3 %p/p), lo cual puede deberse al tipo de
solvente utilizado, como por ejemplo Zhao y Zhang (2014) obtuvieron diferente
rendimiento en la obtención de aceite de eucalipto utilizando extracción soxhlet, variando
el tipo de solvente. Debido a la polaridad del solvente obtuvo mayor rendimiento con
etanol, en comparación al hexano.
Coeficiente Densidad
Ensayo Rendimiento Promedio Desviación
Variación CO2*
P(bar)/T
% % (g/mL)
(°C)
200-40 2,463 2,305 - - 2,384 0,112 4,697 0,840
200-60 4,465 4,247 - - 4,356 0,154 3,543 0,724
275-50 10,630 11,045 10,795 11,195 10,916 0,253 2,314 0,853
350-40 11,464 10,989 - - 11,226 0,335 2,988 0,935
350-60 13,672 10,957 - - 12,315 1,920 15,590 0,863
*Base de datos NIST 2016
Capítulo 7. Resultados y Discusión 49
16
14
12
Rendimiento (%p/p)
10
0
200-40 200-60 275-50 350-40 350-60
Condiciones: Presión (bar) - Temperatura (°C)
La tabla 7-6 presenta el análisis de varianza, el cual indica que únicamente el factor
presión ejerce un efecto estadísticamente significativo sobre el rendimiento del aceite
(p<0,05). El rendimiento del aceite aumentó significativamente con el aumento de la
presión, debido al aumento de la densidad del CO2 lo cual mejora el poder de solvatación
(Duba y Fiori, 2015). Así mismo, muestra que otros factores como la temperatura y la
interacción presión-temperatura no ejercieron efectos significativos en los niveles
evaluados en el proceso de extracción frente a la variable de respuesta. El gráfico 7-7
también describe detalladamente el efecto de los factores.
Suma de
Fuente Gl Cuadrado Medio Razón-F Valor-P
Cuadrados
A:Presión 141,137 1 141,137 30,72 0,0009
B:Temperatura 4,6818 1 4,6818 1,02 0,3463
AB 0,390728 1 0,390728 0,09 0,7790
Bloques 0,74053 1 0,74053 0,16 0,7000
Error total 32,1571 7 4,59388
Total (corr.) 179,107 11
50 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
+
A:Presión -
B:Temperatura
AB
0 1 2 3 4 5 6
Efecto estandarizado
Gráfico 7-8. Diagrama de efectos principales para rendimiento de aceite de semillas lulo
Gráfica de Efectos Principales para Rendimiento
14,4
12,4
Rendimiento
10,4
8,4
6,4
4,4
200,0 350,0 40,0 60,0
Presión Temperatura
mora (Gráfico 7-9). Puede observarse que cuando se lleva a cabo la extracción en el
nivel bajo de presión (200 bar), el rendimiento es menor, mientras que al trabajar en los
niveles altos de presión y temperatura (350 bar-60°C), el rendimiento de aceite se
incrementa notablemente. El mayor rendimiento obtenido fue del 14,5% de aceite.
Coeficiente Densidad
Ensayo Rendimiento Promedio Desviación
Variación CO2*
P bar/ T °C % % (g/mL)
200-40 2,864 3,334 - - 3,099 0,333 10,739 0,840
200-60 2,197 2,445 - - 2,321 0,175 7,554 0,724
275-50 10,444 8,351 7,055 10,493 9,086 1,682 18,515 0,853
350-40 8,977 8,748 - - 8,862 0,162 1,825 0,935
350-60 13,631 15,433 - - 14,532 1,274 8,769 0,863
*Base de datos NIST 2016
18
16
14
Rendimiento (%p/p)
12
10
0
200-40 200-60 275-50 350-40 350-60
Condiciones Presión (bar)-Temperatura (°C)
El análisis de varianza (Tabla 7-8) al igual que el diagrama de Pareto (Gráfico 7-10)
proporcionan la variabilidad del rendimiento de aceite de semillas de mora de acuerdo al
nivel de los factores, donde la presión y la interacción presión-temperatura presentan un
p-valor <0,05 indicando que son estadísticamente significativos con un nivel de confianza
52 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
del 95%. Adicionalmente se observa que los factores significativos ejercen un efecto
positivo sobre el rendimiento.
Suma de Cuadrado
Fuente Gl Razón-F Valor-P
Cuadrados Medio
A:Presión 161,541 1 161,541 57,59 0,0001
B:Temperatura 11,9634 1 11,9634 4,26 0,0778
AB 20,7851 1 20,7851 7,41 0,0297
Bloques 0,090828 1 0,090828 0,03 0,8623
Error total 19,6356 7 2,80508
Total (corr.) 214,016 11
+
A:Presión -
AB
B:Temperatura
0 2 4 6 8
Efecto estandarizado
El diagrama de efectos principales (Gráfico 7-11) ilustra que la presión tiene mayor
influencia que la temperatura en el rendimiento de aceite. La pendiente muestra un efecto
positivo de la presión sobre el rendimiento, que se produce por el aumento de la
densidad del CO2 con el incremento de la presión, y aumento de la solubilidad del aceite
en el disolvente. Este efecto ha sido descrito por otros investigadores en la extracción de
aceite de granada (Liu et al., 2012) y semillas de uva (Duba y Fiori, 2015).
13,3
11,3
Rendimiento
9,3
7,3
5,3
3,3
200,0 350,0 40,0 60,0
Presión Temperatura
16
Temperatura=60,0
12
Rendimiento
Temperatura=40,0
8
4 Temperatura=40,0
Temperatura=60,0
0
200,0 350,0
Presión
El rendimiento de aceite de mora máximo real observado fue el de 14,532% para las
mejores condiciones (350 bar- 60°C); mientras que el valor estadístico medio fue de
15,159%.
soxhlet y extracción con CO2 supercrítico. El mayor rendimiento de aceite fue de 18,25%
obtenido con fluidos supercríticos. Las diferencias se deben a la técnica de extracción,
tipo de solvente, condiciones de operación y principalmente a que las moras son
cultivadas en diferentes zonas geográficas, suelos y otros factores que pueden influir en
el contenido de aceites.
El contenido graso de semillas de mora es similar a los niveles reportados para otras
semillas oleoginosas como oliva (12,37%) extraído con CO2 supercrítico a 240 bar y 60°C
(Al-Otoom et al., 2014), y uva con un rendimiento de aceite que oscila entre 12,35 y 16%,
obtenido por extracción soxhlet (Nilgün et al., 2007). Estos rendimientos evidencian la
posibilidad de utilizar las semillas de mora como materia prima para la obtención de
aceite.
de semillas de uva (Codex Alimentarius, 2015). Por lo tanto el alto contenido de ácidos
grasos poliinsaturados hace del aceite de semillas de maracuyá un posible ingrediente
para la industria alimentaria y cosmética.
Concentración
Ácidos Grasos % relativo de área
(mg/mL)
Linoleico (C18:2) 112,48 67,53 ± 10,3
Oleico (C18:1) 31,74 16,33 ± 4,8
Palmítico (C16:0) 30,16 14,16 ± 6,1
Esteárico (C18:0) 1,43 1,29 ± 0,7
Linolénico (C18:3) 0,91 0,46 ± 0,2
Palmitoleico (C18:3) 0,28 0,23 ± 0,1
Monoinsaturados 32,02 16,56
Poliinsaturados 113,39 67,99
Saturados 31,59 15,45
Además en la gráfico 7-13 se presentan los resultados del análisis de ácidos grasos del
aceite de maracuyá obtenido con CO2-SC a diferentes condiciones de presión (200-350
bar) y temperatura (40-60°C).
56 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
100
Palmitico
Palmitoleico
Estearico
Oleico
80 Linoleico
Linolénico
% Relativo de Área
60
40
20
0
200-40 200-60 275-50 350-40 350-60
Condiciones P (bar)-T(°C)
Los siguientes análisis fueron realizados para los ácidos palmítico, oleico y linoleico dado
que presentaron efectos estadísticamente significativos.
En el gráfico 7-14, se puede observar claramente que el factor más influyente sobre el
porcentaje relativo de ácido linoleico fue la interacción presión-temperatura, seguido por
la presión y finalmente la temperatura, donde solo la presión ejerce un efecto negativo en
dicho ácido graso. Además el efecto particular de cada uno de los factores en estudio
sobre el contenido de ácido linoleico se presenta en el gráfico 7-15, donde se observa
por la inclinación de las pendientes, que tanto la presión como la temperatura influyen en
% de ácido linoleico.
+
AB -
A:PRESIÓN
B:TEMPERATURA
0 1 2 3 4
Efecto estandarizado
Gráfico 7-15. Gráfico de efectos principales para ácido linoleico en aceite de maracuyá
Gráfica de Efectos Principales para Acido Linoleico
75
72
Ácido Linoleico (%)
69
66
63
60
200,0 350,0 40,0 60,0
Presión (bar) Temperatura (°C)
58 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
78
Temperatura=40°C
73 Temperatura=60°C Temperatura=60°C
Ácido Linoleico (%)
68
63
58
53
48 Temperatura=40°C
200,0 350,0
Presión (bar)
En el diagrama de Pareto (Gráfico 7-17) se observa que todos los factores a excepción
de la presión influyen sobre el porcentaje relativo de ácido oleico. Mientras que en gráfico
de efectos principales (Grafico 7-18) muestra un marcado efecto de la temperatura, se
observa claramente el efecto negativo a medida que se incrementa sobre el contenido
del ácido graso. El gráfico 7-19 muestra la influencia de la interacción en la composición
de ácido oleico del aceite de maracuyá.
+
AB -
B:TEMPERATURA
A:PRESIÓN
0 1 2 3 4 5
Efecto estandarizado
Capítulo 7. Resultados y Discusión 59
Gráfico 7-18. Gráfico de efectos principales para ácido oleico en aceite de maracuyá
Gráfica de Efectos Principales para Acido Oleico
19
18
17
Acido Oleico
16
15
14
13
200,0 350,0 40,0 60,0
Presión (bar) Temperatura (°C)
26
Temperatura=40°C
23
Acido Oleico
20
17
Temperatura=60°C
14
Temperatura=40°C
11 Temperatura=60°C
200,0 350,0
Presión (bar)
+
A:PRESIÓN -
B:TEMPERATURA
AB
0 2 4 6 8
Efecto estandarizado
60 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
20
18
Äcido Palmitico
16
14
12
10
8
200,0 350,0 40,0 60,0
Presión (bar) Temperatura (°C)
y una relación de ácidos grasos sat/Insat de 0,35. Dichos resultados se ven reflejados
gráficamente en la superficie de respuesta (Gráficos 7-22, 7-23).
Deseabilidad
0,1
0,2
0,8
0,3
0,6 0,4
Deseabilidad
0,5
0,4 0,6
0,7
0,2
60
56
0 52
48
200 230 44
260 290 40 Temperatura (°C)
320 350
Presión (bar)
Deseabilidad
0,11
0,21
0,31
0,41
1 0,51
Deseabilidad
0,8 0,61
0,6 0,71
0,4 0,81
0,2 60
0 56
200 52
230 48
260
290 44 Temperatura (°C)
320 40
Presión (bar) 350
El perfil de ácidos grasos del aceite de semillas de lulo analizado mediante cromatografía
de gases (GC-FID) se presenta en la tabla 7-12. Los resultados indican que el aceite de
semillas de lulo contiene un alto contenido de ácidos grasos insaturados (89,2%), entre
ellos ácido linoleico, ácido oleico, ácido linolénico y ácido palmitoleico; siendo el ácido
linoleico el más abundante en el aceite, el cual es un ácido graso del grupo omega 6 muy
importante para el desarrollo y mantenimiento del sistema nervioso y funciones
fisiológicas en los seres humanos debido a que reduce los niveles del LDL- colesterol
62 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
(Wu et al., 2011). También presenta una pequeña cantidad de ácidos grasos saturados
(10,8%) representada por ácido palmítico y ácido esteárico.
Los resultados son comparables a los obtenidos por Cerón, Osorio y Hurtado (2012) y
Jurado y Muñoz (2009) en aceite de semillas de lulo obtenido mediante la extracción con
solventes (soxhlet). El contenido de ácidos grasos en aceite de semillas de lulo es similar
al perfil de ácidos grasos de los aceites de semillas de uva, cártamo, girasol (Codex
Alimentarius, 2015); ajonjolí (Botelho et al., 2014) y el reportado por Wu et al., (2011) en
aceite de almendra de durazno utilizado en la industria cosmética por su alto contenido
de ácidos grasos insaturados.
Concentración
Ácidos Grasos % relativo de área
(mg/mL)
Linoleico (C18:2) 386,76 76,06 ± 3,12
Oleico (C18:1) 49,75 10,98 ± 2,49
Palmítico (C16:0) 40,25 10,18 ± 2,66
Linolénico (C18:3) 6,02 1,17 ± 0,4
Palmitoleico (C18:3) 5,46 0,95 ± 0,4
Esteárico (C18:0) 3,78 0,65 ± 0,5
Monoinsaturados 55,21 11,93
Poliinsaturados 392,78 77,23
Saturados 44,03 10,83
El perfil de ácidos grasos de aceite de semillas de lulo obtenido con CO2-SC bajo
diferentes condiciones de presión y temperatura de extracción, se muestra en gráfico 7-
24.
Capítulo 7. Resultados y Discusión 63
Gráfico 7-24. Composición de ácidos grasos de aceite de semillas de lulo extraído con
CO2-SC
100
Palmitico
Palmitoleico
Estearico
Oleico
Linoleico
80 Linolénico
% Relativo de Área
60
40
20
0
200-40 200-60 275-50 350-40 350-60
Condicones P(bar)-T(°C)
El diagrama de Pareto (Gráfico 7-25) indica que la presión fue el principal factor de
variabilidad para el contenido de ácido palmitoleico en el aceite de lulo y la influencia de
la temperatura y la interacción presión-temperatura no fue significativa.
64 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
+
A:Presión -
AB
B:Temperatura
En el Gráfico 7-26, se presenta el efecto particular de cada uno de los factores en estudio
en la concentración de ácido palmitoleico, de esta manera se puede observar una
reducción de la concentración del ácido graso con el aumento de la presión.
1,42
1,22
Ácido Palmitoleico
1,02
0,82
0,62
200,0 350,0 40,0 60,0
Presión (bar) Temperatura (°C)
Los gráficos 7-27 y 7-28, indican las condiciones óptimas o la deseabilidad predicha para
la rendimiento y composición de ácidos grasos saturados e insaturados, valores que se
pueden verificar en las tablas de respuesta óptima (Tabla 7-25), donde se encuentran los
puntos óptimos arrojados por el programa estadístico para el proceso de extracción en el
rango experimental estudiado.
Óptimo Óptimo
Factor Bajo Alto
Insat/sat Sat/Insat
Presión (bar) 200 350 270,7 349,8
Temperatura (°C) 40 60 60,0 52,7
Respuesta Rendimiento (%) - - 9,20 13,0
Respuesta Relación AG - - 12,27 0,11
66 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
Deseabilidad
0,0
0,1
1,16 0,2
0,3
0,96
Deseabilidad
0,4
0,5
0,76
0,6
0,7
0,56
60 0,8
56
0,36 52 0,9
48
200 230 44 1,0
260 290 40
320 350 Temperatuta (°C)
Presión (bar)
Deseabilidad
0,0
0,1
0,2
1,16 0,3
0,4
0,96
Deseabilidad
0,5
0,6
0,76
0,7
0,56 0,8
60 0,9
56
0,36 52 1,0
48
200 230 44
260 290 40 Temperatura (°C)
320 350
Presión (bar)
Concentración
Ácidos Grasos % relativo de área
(mg/mL)
Linoleico (C18:2) 244,99 56,11 ± 6,58
Linolénico (C18:3) 148,33 34,55 ± 4,39
Palmítico (C16:0) 19,21 4,56 ± 1,35
Oleico (C18:1) 16,94 4,17 ± 2,35
Esteárico (C18:0) 2,14 0,58 ± 0,54
Monoinsaturados 16,94 4,17
Poliinsaturados 393,32 90,66
Saturados 21,35 5,72
Los resultados de la composición de ácidos grasos del aceite de mora obtenido de las
diferentes condiciones de extracción se presentan en el gráfico 7-29, donde se observa la
el contenido de cada ácido graso en cada condición de extracción.
Gráfico 7-29. Composición de ácidos grasos de aceite de semillas de mora extraído con
CO2-SC
70
Palmítico
Estearico
Oleico
Linoleico
60 Linolénico
50
% Relativo de Área
40
30
20
10
0
200-40 200-60 275-50 350-40 350-60
Condiciones P(bar)-T(°C)
En el Gráfico 7-30, se puede observar claramente que los factores más influyentes fueron
la temperatura y la presión, en donde este último factor ejerció un efecto negativo. Con
relación al ácido esteárico el factor más influyente fue la temperatura ejerciendo un efecto
positivo (Gráfico 7-31).
Capítulo 7. Resultados y Discusión 69
El efecto particular de cada uno de los factores sobre el ácido palmítico y el ácido
esteárico se presentan en los gráfico 7-32 y 7-33 respectivamente. Se puede observar el
mismo efecto de la temperatura en ambos ácidos grasos, en donde se presenta un
incremento del contenido de los ácidos grasos con el aumento de la temperatura y un
efecto contrario con el aumento de la presión.
+
B:Temperatura -
A:Presión
AB
0 1 2 3 4
Efecto estandarizado
+
B:Temperatura -
AB
A:Presión
0 1 2 3 4
Efecto estandarizado
Gráfico 7-32. Gráfico de efectos principales para ácido palmítico en aceite de mora
Gráfica de Efectos Principales para Ácido Palmitico
5,9
5,5
Ácido Palmitico
5,1
4,7
4,3
3,9
3,5
200,0 350,0 40,0 60,0
Presión (bar) Temperatura (°C)
70 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
0,8
Ácido Estearico
0,6
0,4
0,2
0
200,0 350,0 40,0 60,0
Presión (bar) Temperatura (°C)
Ácidos Ácidos
Condiciones Rendimiento Relación Relación
Grasos Grasos
P(bar)-T(°C) (%p/p) Insat/Sat Sat/Insat
Insaturados Saturados
200-40 3,10 95,78 4,21 22,75 0,04
200-60 2,32 91,20 8,68 10,51 0,10
275-50 9,09 95,49 4,58 20,86 0,05
350-40 8,86 96,02 4,01 23,94 0,04
350-60 14,53 95,02 4,98 19,10 0,05
Óptimo Óptimo
Factor Bajo Alto
Insat/sat Sat/Insat
Presión (bar) 200 350 350,0 348,9
Temperatura (°C) 40 60 59,02 59,98
Respuesta
14,88 15,06
Rendimiento (%)
Respuesta
20,02 0,05
Relación AG
Deseabilidad
0,0
0,1
0,8 0,2
0,3
0,6
Deseabilidad
0,4
0,5
0,4
0,6
0,2 0,7
60
56 0,8
0 52
48
200 230 44
260 290 40 Temperatura (°C)
320 350
Presión (bar)
0,6
0,7
0,4 0,8
0,2 60 0,9
56 1,0
0 52
200 48 Temperatura (°C)
230
260 44
290
320 40
Presión (bar) 350
72 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
Concentración Concentración
Compuestos
(mg/mL) (mg/kg)
Escualeno 11,13 11941,8
Campesterol 0,78 831,9
Estigmasterol 2,43 2608,4
β-sitosterol 2,58 2769,4
Lanosterol 0,58 617,2
Esteroles Totales 6,36 6827,0
semillas de algodón, maíz, mostaza, palma, colza o canola, salvado de arroz, sésamo y
girasol (Codex Alimentarius, 2015). Sin embargo presenta mayor concentración de
tocoferoles que los aceite de nuez, almendra, avellana, maní y pistacho, investigados por
Arranz et al. (2008). Teniendo en cuenta lo mencionado anteriormente el aceite de
semillas de lulo contiene compuestos de gran importancia en industria cosmética y
farmacéutica.
Concentración Concentración
Compuestos
(mg/mL) (mg/kg)
Escualeno 1,10 1195,7
No Identificado 3,06 3322,5
β-sitosterol 2,15 2337,9
γ-sitosterol 1,26 1372,3
Dihidrolanosterol 0,56 607,8
Esteroles Totales 7,03 7640,4
Concentración Concentración
Compuestos
(mg/mL) (mg/kg)
γ-tocoferol 0,65 702,0
α-tocoferol 0,11 116,8
Tocoferoles totales 0,76 818,8
resultados son comparables a los reportados por Fazio et al. (2013), Yang et al. (2011) y
Conrado (2008). La concentración de tocoferoles de aceite de semillas de mora es
superior al encontrado en cualquier otro aceite reportado en la literatura, incluyendo al de
oliva (Ibañez et al., 2002), palma (Gonçalves et al., 2016) y uva (Fiori et al., 2014).
Además sobrepasa los niveles para aceites vegetales especificados en Codex
Alimentarius (2015); lo cual hace al producto extraído, una fuente promisoria de
tocoferoles naturales.
Concentración Concentración
Compuestos
(mg/mL) (mg/kg)
Escualeno 0,81 869,0
β-sitosterol 4,27 4566,0
24-metil-cicloartanol 0,93 999,1
Estigmasterol 0,20 210,3
Esteroles Totales 5,45 5774,5
Concentración Concentración
Compuestos
(mg/mL) (mg/kg)
γ-tocoferol 4,85 5186,3
α-tocoferol 0,77 820,0
δ-tocoferol 0,52 557,0
Tocoferoles totales 6,14 6563,3
Tabla 7-25. Características fisicoquímicas de los aceites de semillas extraídos con CO2
supercrítico
Aceite de semillas
Parámetro
Maracuyá Lulo Mora
Densidad (g/mL) 0,9316 0,9197 0,9348
Índice de Refracción (25°C) 1,4741 1,4759 1,4805
Índice de Peróxido (meq H2O2/kg) 4,55 13,92 7,80
Índice de Saponificación (mg KOH/g) 167 163 182
Índice de Yodo (g/100 g) 108 106 109
Índice de Acidez (mg/g) 2,56 8,39 1,16
El índice de refracción de los aceites de semillas determinado a 25°C fue de 1,474 para
maracuyá y 1,476 para lulo, valor similar al aceite de semillas de uva (1,467-1,477)
(Codex Alimentarius, 2015), germen de trigo (1,469-1,478) y ricino (1,473-1,477) (NTC
1529, 1998). El valor para mora fue de 1,4805 cercano al valor de aceite germen de trigo
(NTC 3758, 1995).
El índice de peróxido es uno de los parámetros de calidad establecidos para los aceites
vegetales con un valor inferior a 10 meq H2O2/kg, para lo cual los aceites de semillas de
maracuyá y mora cumplen con lo establecido en la normatividad vigente (Codex
Alimentarius, 2015). Mientras que el aceite de lulo no cumple con los requisitos mínimos
establecidos en la normatividad Colombiana (<10 meq H2O2/kg), lo cual puede ser
atribuido a la inadecuada manipulación de las semillas o proceso de recepción, empaque
y almacenamiento del aceite extraído, indicando el grado de rancidez que ha sufrido el
aceite. Sin embargo, el valor obtenido en este estudio de 13,92 meq H2O2/kg se
encuentra dentro del rango establecido para los aceites prensados en frio y vírgenes por
el Codex Alimentarius (2015).
78 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
El valor del índice de saponificación determinado para el aceite de maracuyá fue de 167
meq KOH/gr, valor cercano al establecido para el aceite de colza y mostaza (Codex
Alimentarius, 2015). Mientras que para el aceite de semillas de mora fue de 182 meq
KOH/gr, similar a los aceites de germen de trigo, ricino, mostaza, salvado de arroz,
girasol y colza, ademas este valor indica la presencia de acidos grasos de cadena larga,
al igual que los aceites de soja, girasol, maíz, semillas de algodón y canola (Lawson,
1994). Pero el índice de saponificación del aceite de semillas de lulo fue de 163 mg
KOH/100 g, inferior a los aceites de maracuyá y mora, siendo un valor comparable al
reportado en aceite de almendra de durazno (101,8-165,7), el cual ha sido ampliamente
utilizado en la industria cosmética como ingrediente en jabones, champú, lociones y
cremas (Saadany et al. (2004) citado por Wu et al. (2011).
Los valores del índice de yodo de los aceite de maracuyá, lulo y mora fueron 108, 106 y
109 g/100 g respectivamente, los cuales se clasifican como aceites semi-secantes como
los aceites de algodón, ajonjolí, maíz, maní, mostaza, salvado de arroz y canola ya que
su índice está comprendido entre 100-120 (Codex Alimentarius, 2015), utilizados
principalmente en elaboración de jabones, productos de limpieza y cosméticos (Leao et
al., 2014). Al comparar el índice de yodo de los aceites, el valor del aceite de mora fue
mayor porque puede presentar más insaturaciones en la composición de ácidos grasos
(Rodríguez et al., 2011).
El valor del índice de acidez de los aceites de semillas de maracuyá (2,56 mg/g) y mora
(1,16 mg/g) se encuentran dentro de los parámetros permisibles de calidad de los aceites
vegetales (<4 mg KOH/g aceite). El índice de acidez del aceite de semillas de lulo fue de
8,39 mg/g, valor no apto para aceites vegetales; pero dicho valor no supera el índice de
acidez establecido para el aceite de palma (10 mg/g) (Codex Alimentarius, 2015), el cual
es un aceite comestible.
Tabla 7-29. Resultados de actividad antioxidante en TEAC para los aceites de semillas
de frutas obtenidos a 350 bar y 60°C
500
TEAC (µmol de trolox/100 g de aceite)
400
300
200
100
0
Maracuyá Lulo Mora
Aceite de semillas
Según Liu et al., (2012) la favorabilidad de la actividad antioxidante del aceite es debida
al alto contenido de tocoferoles en su composición. Los resultados de actividad
antioxidante del aceite de mora son comparados con los reportados por Yang et al.,
(2011) en aceites obtenidos de diferentes especies de mora, extraidos con CO2
80 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
supercrítico presentados en la tabla 7-30. En esta se observa que unicamente una de las
especies supera notablemente la actividad antioxidante de la presente investigación.
Además el aceite de mora presento una actividad antioxidante superior al aceite de oliva
(Sousa et al., 2015), por lo que podría tener importantes propiedades benéficas.
g/kg DPPH
g/kg DPPH
De acuerdo a la metodología descrita por Sánchez, Larrauri y Saura (1997) los aceites de
semillas de maracuyá y lulo se clasifican en el grupo de mediana eficiencia antiradical,
similar a la eficiencia radical reportada para un patrón de ácido gálico realizado para la
verificación de la funcionalidad del método (Sánchez, Larrauri y Saura, 1997), mientras
que el aceite de mora se clasifica de alta eficiencia antiradical, al igual que el ácido
ascórbico.
Tabla 7-31. Expresión matemática para el cálculo de EC50 y TEC50
El comportamiento de los aceites de semillas de mora (Gráfico 7-39), lulo (Gráfico 7-40) y
maracuyá (Gráfico 7-41) a diferentes concentraciones frente al radical DPPH* en el
tiempo, es similar al comportamiento de los patrones (ácido ascórbico y gálico), ya que a
mayor concentración de antioxidante deja menor %[DPPH] remanente, en mayor tiempo.
Los resultados presentados en el gráfico 7-42 se relacionan con los obtenidos por el
método ABTS, ya que en ambos métodos el aceite que mayor actividad presenta es el de
semillas de mora. Sin embargo el aceite de maracuyá presenta mayor actividad que lulo
por el método ABTS, mientras que por el DPPH los dos se clasifican de mediana
eficiencia antiradical.
Gráfico 7-39. Comportamiento del aceite de semillas de mora frente al radical DPPH*
Concentración Aceite
(mL aceite/mL sln)
84 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
Gráfico 7-40. Comportamiento del aceite de semillas de lulo frente al radical DPPH*
ácido linoleico; y finalmente el aceite de semillas de mora sobresale por su alto contenido
de vitamina E y mayor actividad antioxidante. Dichas características pueden brindar
muchos beneficios a nivel cosmético o nutricional.
8. Conclusiones y recomendaciones
8.1 Conclusiones
Los residuos generados tras el procesamiento industrial de mora, lulo y maracuyá
demostraron ser una fuente promisoria de aceites, obtenidos con una tecnología limpia,
que garantiza un buen rendimiento y calidad.
Con la presente investigación se concluye que los aceites de semillas de maracuyá, lulo
y mora pueden ser una fuente de aceite vegetal rico en ácidos grasos insaturados tipo
omega 3, 6 y 9, compuestos minoritarios tales como escualeno, esteroles y tocoferoles y
propiedades antioxidantes, con gran potencial para la industria cosmética.
8.2 Recomendaciones
Los aceites obtenidos tienen perfiles cosméticos y nutricionalmente interesantes de
ácidos grasos, contenido de tocoferoles y fitoesteroles, pero baja estabilidad a la
oxidación, lo que requiere embalaje y almacenamiento cuidadoso, para lo cual se
recomienda realizar estudios de estabilidad oxidativa.
Realizar estudios de extracción con fluidos supercríticos utilizando co-solvente, con el fin
de mejorar el rendimiento del aceite de semillas de frutas.
A. Anexo: Análisis proximal de
semillas de maracuyá, lulo y mora
90 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
Anexo A: Análisis proximal de semillas de maracuyá, lulo y mora 91
92 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
B. Anexo: Cromatogramas de ácidos
grasos, esteroles y tocoferoles
94 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
Anexo B: Cromatogramas de ácidos grasos, esteroles y tocoferoles 95
96 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
Anexo B: Cromatogramas de ácidos grasos, esteroles y tocoferoles 97
98 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
C. Anexo: Análisis químico de
aceites de semillas de maracuyá, lulo
y mora
100 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
Anexo C: Análisis químico de aceites de semillas de maracuyá, lulo y mora 101
102 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
D. Anexo: Producción Académica
Relacionada
Estimados autores,
No obstante, la editora jefe considera que se deben tomar en cuenta las observaciones emitidas
por los pares evaluadores, observaciones y ajustes que consideramos importantes de realizar y
que se tendrán en cuenta para la aceptación final.
1. Traducir al inglés el paper. Se debe adjuntar la certificación de la persona que traduzca el paper.
2. En caso de que lo consideren necesario la Revista Acta Agronómica presta el servicio, el costo y
condiciones lo remitiremos en otro correo en caso de que lo requieran.
Estas evaluaciones tienen algunas sugerencias para mejorar el manuscrito, por lo cual, se hace imperiosa
la necesidad que realicen las correcciones y observaciones emitidas por los pares evaluadores, para así
poder otorgarle la debida continuidad editorial. Una vez tengan esta versión corregida, enviarla
nuevamente a la revista utilizando este medio.
El plazo en el cual esperamos esta versión corregida es de 20 días, es decir hasta el próximo 25 de
octubre de 2016. Por favor acusar recibo del presente mensaje a la mayor brevedad posible. Cualquier
inquietud, estaremos prestos a atenderla, no dude en contactarnos,
Cordialmente,
--
Asistente Editorial
Acta Agronómica
http://www.revistas.unal.edu.co/index.php/acta_agronomica/index
Al-Otoom, A., Al-Asheh, S., Allawzi, M., Mahshi, K., Alzenati, N., Banat, B., et al. (2014).
Extraction of oil from uncrushed olives using supercritical fluid extraction method.
J. of Supercritical Fluids, 95, 512-518.
Azevedo, A., Kieckbush, T., Tashima, A., y Mohamed, R. (2008). Extraction of green
coffee oil using supercritical carbon dioxide. Journal supercritical fluids, 48, 186-
192.
Barrales, F., Rezende, C., y Martínez, J. (2015). Supercritical CO2 extraction of passion
fruit (Passiflora edulis sp.) seed oil assisted by ultrasound. The Journal of
Supercritical Fluids, 104, 183-192.
Botelho, J., Medeiros, N., Rodrigues, A., Araújo, M., Machado, N., Santos, A., et al.
(2014). Black sesame (Sesamum indicum L.) seeds extracts by CO2 supercritical
fluid extraction: Isotherms of global yield, kinetics data, total fatty acids,
phytosterols and neuroprotective effects. The Journal of Supercritical Fluids, 93,
49-55.
Brand-Williams, W., Cuvelier, M., y Berset, C. (1995). Use of a free radical method to
evaluate antioxidant activity. Lebens Wiss Technol, 28(1), 25-30.
Cardoso, R., Davantel, S., y Gimenes, M. (2013). The extraction of passion fruit oil with
green solvents. Journal of Food Engineering, 117, 458–463.
108 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
Castro, H., Rodríguez, L., Ferreira, S., y Parada, F. (2010). Extraction of phenolic fraction
from guava seeds (Psidium guajava L.) using supercritical carbon dioxide and co-
solvents. J. of Supercritical Fluids, 51, 319–324.
Cerón, A., Osorio, O., y Hurtado, A. (2012). Identificación de ácidos grasos contenidos en
los aceites extraídos a partir de semillas de tres diferentes especies de frutas.
Acta Agronómica, 61(2), 126-132.
Cerón, A., Osorio, O., y Hurtado, A. (2012). Identificación de ácidos grasos presentes en
el aceite extraído a partir de semillas de guanábana (Annona muricata). Revista
de ciencias agrícolas, 29(1), 81 - 87.
Codex Alimentarius. (2015). Norma para aceites vegetales especificados- Codex stan
210. Normas internacionales de los alimentos, 1-14.
Da Silva, A., & Neuza, J. (2014). Bioactive compounds of the lipid fractions of agro-
industrial waste. Food Research International, 493-500.
Duba, K., y Fiori, L. (2015). Supercritical CO2 extraction of grape seed oil: Effect of
process parameters on the extraction kinetics. Supercritical fluids, 98, 33-43.
Fazio, A., Plastina, P., Meijerink, J., Witkamp, R., y Gabriele, B. (2013). Comparative
analyses of seeds of wild fruits of Rubus and Sambucus species from Southern
Italy: Fatty acid composition of the oil, total phenolic content, antioxidant and anti-
inflammatory properties of the methanolic extracts. Food chemistry, 140, 817-824.
Fiori, L., Lavelli, V., Duba, K., Charan, P., Mohamedc, H., y Guella, G. (2014).
Supercritical CO2 extraction of oil from seeds of six grape cultivars: Modeling of
mass transfer kinetics and evaluation of lipid profiles andtocol contents. The
Journal of Supercritical Fluids, 94, 71-80.
Follegatti, L. (2007). Extracao de óleo de Sasha inchi (Plukenetia volubilis L.) com dióxido
de carbono supercrítico. Campinas.
Gaforio, J., Sanchez, C., Lopez, A., Ramires, M., y Warleta, F. (2015). Molecular aspects
of squalene and implications for olive oil and the mediterranean diet. An evidence
- based approach, 281-290.
García, D., Viloria, A., Belén, D., y Moreno, M. (2003). Características fisico-químicas y
composición de ácidos grasos del aceite crudo extraído de residuos de mora
(Rubus glaucus Benth). Grasas y aceites, 54(4), 259-263.
Gonçalves, C., Rodrigues, C., Marcon, E., y Meirelles, A. (2016). Deacidification of palm
oil by solvent extraction. Separation and Purification Technology, 160, 106-111.
Górnas, P., Siger, A., y Seglina, D. (2013). Physicochemical characteristics of the cold-
pressed Japanese quince seed oil: New promising unconventional bio-oil from by-
products for the pharmaceutical and cosmetic industry. Industrial crops and
products, 48, 178-182.
Ibañez, E., Hurtado, A., Señoráns, F., y Reglero, G. (2002). Concentration of sterols and
tocopherols from olive oil with supercritical carbon dioxide. JAOCS, 79(12).
ICONTEC 283. (26 de 08 de 1998). Norma Técnica Colombiana NTC 283. Grasas y
aceites vegetales y animales. Determinación del índice de yodo. (Icontec, Ed.)
Colombia.
Jurado, J., y Muñoz, V. (2009). Caracterización del aceite de las semillas de Solanum
quitoense L variedad la selva y evaluación de su actividad antioxidante. Tesis de
grado, Universidad Tecnológica de Pereira. Facultad de Tecnología. Escuela de
Química, Pereira.
Kobori, C., y Neuza, J. (2005). Caracterizacao dos óleos de algumas sementes de frutas
como aproveitamento de residuos industriales. Cienc. agrotec, 29(5), 1008-1014.
Lawson, H. (1994). Food oils and fats. Technology, utilization, and nutrition. Zaragoza:
Acribia.
Leao, K., Sampaio, K., Pagani, A., y Da Silva, M. (2014). Odor potency, aroma profile and
volatiles composition of cold pressedoil from industrial passion fruit residues.
Industrial crops and products, 58, 280-286.
Liu, G., Xu, X., Gong, Y., He, L., y Gao, Y. (2012). Effects of supercrítical CO 2 extraction
parameters on chemical composition and free radical-scavenging activity of
pomegranate (Punica granatum L.) seed oil. Food and bioproducts processing, 90,
573-578.
Liu, S., Yang, F., Zhang, C., Ji, H., Hong, P., y Deng, C. (2009). Optimization of process
parameters for supercritical carbon dioxide extraction of Passiflora seed oil by
response surface methodology. The journal of supercrítical fluids, 48, 9-14.
Lopes, R., Sevilha, A., Faleiro, F., Basbosa, D., y Fontes, R. (2010). Estudo comparativo
do perfil de ácidos graxos em semente de passifloras nativas do cerrado
brasileiro. Bras. Frutic, 32(2), 498-506.
Malacrida, C., y Neuza, J. (2012). Yellow passion fruit seed oil (Passiflora edulis F.
flavicarpa): Physical and chemical characteristics. Braz. Arch. Biol. Technol, 55(1),
127-134.
Martínez, M., Mattea, M., y Maestri, D. (2008). Pressing and supercritical carbon dioxide
extraction of walnut oil. Journal of Food Engineering, 88, 399–404.
Micic, D., Ostojic, S., Simonovic, M., Krstic, G., Pezo, L., y Simonovic, B. (2015). Kinetics
of blackberry and raspberry seed oils oxidation by DSC. Thermochimica Acta,
601, 39-44.
Narváez, H., Villareal, O., Betancurth, V., y Arizag, F. (2013). Socialización proyecto
"Aprovechamiento de residuos agroindustriales de frutas para la obtención de
aceites con potencialidad en la industria cosmética, utilizando la tecnología de
extracción con fluidos supercríticos". (A. Hurtado, Interviewer)
Nilgün, B., Gülcan, Ö., y Emine, Ç. (2007). Characterization of grape seed and pomace
oil extracts. Grasas y aceites, 58(1), 29-33.
Nivia, A., Castro, H., Parada, F., Rodriguez, I., y Restrepo, P. (2007). Aprovechamiento
integral de la guayaba (Psidium guajava L.): i. obtención de extractos a partir de
semillas utilizando como solvente CO2 supercrítico. Scientia et Technica, 33,
0122-1701.
Nolasco, s., Quiroga, O., Pereyra, A., y Wiese, B. (2001). Caracterización química del
aceite y harina residual de Solanum sisymbriifolium Lam. Grasas y aceites, 52(2),
123-126.
112 Extracción de aceites con fluidos supercríticos a partir de semillas de frutas con
potencialidad en la industria cosmética
NTC 1529. (28 de 10 de 1998). Norma Técnica Colombiana NTC 1529. Aceite puro de
castor (Aceite de ricino) para la industria cosmética.
NTC 283. (26 de 08 de 1998). Norma Técnica Colombiana NTC 283. Grasas y aceites
vegetales y animales. Determinación del índice de yodo. (Icontec, Ed.) Colombia.
NTC 3758. (18 de 10 de 1995). Norma Técnica Colombiana NTC 3758. Producto para la
industria cosmética. Aceite de germen de trigo. Colombia.
Nyam, K., Tan, C., Lai, O., Long, K., y Che Man, Y. (2010). Optimization of supercritical
fluid extraction of phytosterol from roselle seeds with a central composite design
model. Food and bioproducts processing, 88, 239-246.
Nyanzi, S., Carstensen, B., y Schwack, W. (2005). A comparative study of fatty acid
profiles of Passiflora seed oils from Uganda. JAOCS, 82(1), 41-44.
Oliveira, D., Angonese, M., y Ferreira, S. (2013). Supercritical fluid extraction of passion
fruit seeds and its processing residue (cake). III Iberoamerican Conference on
Supercritical Fluids, (págs. 1-7). Cartagena de Indias.
Osorio, C. (2009). Maracuyá (Passiflora edulis Sim), una gran alternativa como
fitimedicamento. Cartagena de Indias.
Oztas, E., Galip, F., y Murathan, A. (2011). Süperkrİtİk akişkan özütlemesİyle böğürtlende
(Rubus fructicosus) doğal antİoksİdan tespİtİ. J. Fac. Eng. Arch. Gazi Univ, 4,
801-805.
Pasquel, J., Da Fonseca, A., Barbero, G., Rezende, C., y Martinez, J. (2014). Extraction
of antioxidant compounds from blackberry (Rubus sp.) bagasse using supercritical
CO2 assisted by ultrasound. Supercritical fluids, 94, 223-233.
Bibliografía 113
Rai, A., Mohanty, B., y Bhargava, R. (2016). Supercritical extraction of sunflower oil: A
central composite design for extraction variables. Food chemistry, 192, 647–659.
Rao, M., Al-Marzouqi, A., Kaneez, F., y Ashraf, S. (2007). Comparative evaluation of SFE
and solvent extraction of black seeds (Nigella sativa). Journal of liquid
chromatography y related technologies, 30, 2545-2555.
Re, R., Pellegrini, A., Pannala, A., Yang, M., y Rice-Evans, C. (1999). Antioxidant activity
applying an improved ABTS radical cation decolorization assay. Free Radical
Biology y Medicine, 26, 1231-1237.
Rodríguez, P., Silva, A., Ramírez, M., y Carrillo, L. (2011). Caracterización fisicoquímica
del aceite de nuez de Macadamia (Macadamia integrifolia) Physicochemical
characterization of Macadamia nut (Macadamia integrifolia) oil. CyTA - Journal of
Food, 9(1), 58-64.
Ruiz, M., Urueña, M., y Martinez, J. (2009). Situación actual y perspectivas del mercado
de la mora. Economic research service, 1-16.
Samaniego, C., Troncoso, A., García, M., Quesada, J., López, H., y López, M. (2007).
Different radical scavenging tests in virgin olive oil and their relation to the total
phenol content. Analytica chimica acta, 593, 103-107.
Sánchez, C., Larrauri, J., y Saura, F. (1997). A procedure to measure the antiradical
efficiency of polyphenols. J. Sci Food Agric, 76, 270-276.
Skoog, D., Holler, F., y Crouch, S. (2008). Principios de análisis instrumental. (Sexta ed.).
Cengage learning editores.
Sousa, A., Casal, S., Malheiro, R., Lamas, H., Bento, A., y Pereira, J. (2015). Aromatized
olive oils: Influence of flavouring in quality, composition, stability, antioxidants, and
antiradical potential. LWT - Food Science and Technology, 60, 22-28.
Suárez, L., y Toro, N. (2012). Obtención y caracterización del aceite de las semillas de
Vitis labrusca L. (Uva isabela) y evaluación de su actividad antioxidante.
Universidad Tecnológica de Pereira.
Van Hoed, V., De Clercq, N., Echim, C., Andjelkovic, M., Leber, E., Dewettinck, K., et al.
(2009). Berry seeds: A sourceno0f specialty oils with high content of bioactives
and nutritional value. Journal of food lipids, 16, 33-49.
Vasco, C., Ruales, J., y Kamal-Eldin, A. (2008). Total phenolic compounds and
antioxidant capacities of major fruits from Ecuador. Food chemistry, 111, 816-823.
Vázquez, L., Hurtado, A., Reglero, G., Fornari, T., Ibañez, E., y Señoráns, F. (2009).
Deacidification of olive oil by countercurrent supercrictical carbon dioxide
extraction: Experiemntal and thermodynamic modeling. Journal of food
engineering, 90, 463-470.
Velasco, R., Villada, H., y Carrera, J. (2007). Aplicación de los fluidos supercríticos en la
agroindustria. Información Tecnológica, 18(1), 53-65.
Wu, H., Shi, J., Xue, S., Kakuda, Y., Wang, D., Jiang, Y., et al. (2011). Essential oil
extracted from peach (Prunus persica) kernel and its physicochemical. LWT -
Food Science and Technology, 44, 2032-2039.
Yang, B., Ahotupa, M., Määttä, P., y Kallio, H. (2011). Composition and antioxidative
activities of supercritical CO2-extracted oils from seeds and soft parts of northern
berries. Food research international, 44, 2009-2017.
Zaidul, I., Norulaini, N., Mohd, A., y Smith, R. (2006). Supercritical carbon dioxide (SC-
CO2) extraction and fractionation of palm kernel oil from kernel as cocoa butter
replacers blend. Journal of food engineering, 73, 210-216.
Zhao, S., y Zhang, D. (2014). Supercritical CO2 extraction of Eucalyptus leaves oil and
comparison with Soxhlet extraction and hydro-distillation methods. Separation and
Purification Technology, 133, 443-451.