Libro de Abstarcts GENETICS

PRESENTACIONES ORALES
Sesión: Diagnóstico Prenatal
C0083 VALORACIÓN DEL CRIBADO PRENATAL NO INVASIVO EN UNA MUESTRA DE

MUJERES QUE HABÍAN REALIZADO PRUEBA INVASIVA EN UNA GESTACIÓN PREVIA
María Orera Clemente, Sara Aldana, Carlos de Pablo Gallego
Departamento Biología Celular. Facultad de Medicina. Universidad Complutense (Madrid) España
1 Objetivos
Determinar el nivel de conocimiento y valoración acerca de las pruebas de diagnóstico prenatal, en una
muestra de 100 mujeres en edad fértil, que habian realizado biopsia corial o amniocentesis en una
gestación anterior.
2 Material y Método
Encuesta telefónica en 100 mujeres que realizaron prueba invasiva entre 2014-2016 en el hospital
Universitario Gregorio Marañón de Madrid. Las mujeres habían firmado un consentimiento informado y
aceptaron libremente participar en la encuesta. Los datos demográficos fueron anonimizados
3 Resultados
- El 54% de las mujeres había oído hablar de la prueba de ADN fetal en sangre.
- De entre las que la conocían, el 80 % la consideraba más segura.
- Sin embargo, solo el 20% la valoraba como más eficaz, siendo la mejor valorada la amniocentesis.
- El medio de información más habitual fue el ginecólogo (78,1%).
- El factor de elección extra-personal predominante fue la opinión del médico, seguido de la opinión
de su pareja.
- El factor de decisión característico de la prueba fue la ausencia de riesgos para el feto, seguido de
la calidad de los resultados.
- El 79,7 % de las pacientes elegirían la prueba del ADN fetal tras serle presentada.
- El 98,4% considera que esta prueba debería estar disponible en centros públicos.
- El 65,6 % estarían dispuestas a asumir los costes de la prueba.
4 Conclusiones
La mitad de las mujeres encuestadas conocen las distintas opciones de diagnóstico prenatal,
principalmente a través de la información obtenida del ginecólogo. Las pruebas no invasivas están muy
bien valoradas por la ausencia de riesgos, aunque algunos de los aspectos metodológicos no se conocen
bien. La mayoría de las mujeres realizaría una prueba invasiva y piensa que debería estar financiada por
el sistema sanitario público. En caso contrario, 2/3 de las mujeres estarían dispuestas a asumir los costes
de la misma.
C0287 DIAGNÓSTICO PRENATAL DE LAS DISPLASIAS ESQUELÉTICAS: DE LA
SOSPECHA ECOGRÁFICA AL DIAGNÓSTICO GENÉTICO
1 2 3 3 3 4
Eugenia Antolin Alvarado , Agnieska Rychlik , Karen Heath , Miriam Aza , Fe García , Laura Sotillo , Beatriz
4 4 5 6 4 6
Herrero , Francisco lópez , Rita María Regojo , Fernando Santos , Roberto Rodríguez , Elena Mansilla , José Luis
4
Bartha
1
Sección de Ecografía y Medicina Fetal. Servicio de Obstetricia y Ginecología. Unidad Multidisciplinar de Displasias
Esqueléticas (UMDE). Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid) España
2
Servicio de Obstetricia y Ginecología. Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
3
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM). Unidad Multidisciplinar de Displasias Esqueléticas (UMDE).
IdiPAZ, UAM y CIBERER, ISCIII. Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
4
Sección de Ecografía y Medicina Fetal. Servicio de obstetricia y Ginecología. Hospital Universitario La Paz (Madrid)
España
5
Servicio de Anatomía Patológica. Unidad Multidisciplinar de Displasias Esqueléticas (UMDE). Hospital Universitario La
Paz. (Madrid) España
6
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM). Unidad Multidisciplinar de Displasias Esqueléticas (UMDE).
1 Objetivos
Evaluar la capacidad de la ecografía para sospechar una displasia esquelética (DE) y dirigir el estudio
genético específico.
Estudio descriptivo retrospectivo de una serie de casos con sospecha ecográfica de DE controlados en un
hospital terciario (enero 2011-diciembre 2016). Ante el hallazgo de una longitud de fémur (LF) < p3 se
realizó un estudio ecográfico protocolizado orientado al despistaje de DE. En función de los hallazgos y
valorado por un equipo multidisciplinar se procedió a cariotipo + arrays o estudios NGS. En caso de
ILE/muerte intrauterina/neonatal se realizó estudio radiológico, dismorfológico y necrópsico.
3 Resultados
De 35.301 embarazos, se sospechó una DE en 49 casos (0.17%). En 19 (38.8%) el único hallazgo fue la
presencia de HL cortos (HLC): 9 (47.4%) fueron RN normales, en 7 (6.8%) se confirmó una DE y 3 fueron
CIR. En 23 (46.9%) los HLC asociaban otros hallazgos sugestivos de DE: en 19 (82.6%) se confirmó
la DE, hubo 1 Cornelia de Lange y de los 3 casos con anomalía estructural no esquelética asociada, en 2
se diagnosticó una cromosomopatía. En 7 (14.3%), si bien no existían HLC, la ecografía mostraba otras
anomalías compatibles con DE: en 3 se confirmó la DE, hubo 1 Cornelia de Lange, 1 macrocefalia-
malformación capilar y 1 asociación VACTERL; en 1 caso se trató de una hemivértebra aislada.
De las 49 gestaciones en que se sospechó una DE, ésta se confirmó en 29 (59.2%) ya fuera por estudio
genético molecular (14) o sólo dismorfológico (15).
4 Conclusiones
La presencia de una LF<p3 es el signo de alarma para buscar otros hallazgos ecográficos sugestivos de
DE. Casi mitad de los HLC aislados son RN normales, sin embargo, cuando se asocia a otras anomalías
sugestivas de DE, la capacidad diagnóstica de la ecografía supera el 80%. Es fundamental un trabajo
multidisciplinar para llegar a un diagnóstico que nos permita un correcto asesoramiento.
C0414 ROBUSTEZ DE LOS VALORES DE SENSIBILIDAD, ESPECIFIDAD Y PREDICCIÓN
PARA LAS TRISOMIAS 21, 13 Y 18 A PARTIR DE CRIBADO PRENATAL NO INVASIVO DE
ANEUPLOIDÍAS (NIPT). ESTUDIO EN 12000 GESTANTES
1 1 1 2
Yaima Torres , Xana da Silva , Juan Cruz Cigudosa , Javier Suela
1
NIMGenetics (Madrid) España
2
NIMGenetics, Genómica Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
El cribado prenatal no invasivo es una herramienta de diagnóstico genético prenatal con creciente
implantación. Este estudio pretende definir los parámetros de utilidad clínica que proporciona el NIPT para
las trisomías 13, 18 y 21 en una serie de >12000 gestantes españolas con embarazos unitarios.
Analizamos 12694 muestras. Todas ellas tuvieron el mismo protocolo de extracción de ADN circulante y
secuenciación tras controles de calidad (incluyendo cálculo de fracción fetal). Secuenciamos una media
>6M/secuencias por caso y determinamos los riesgos de la presencia de las trisomías T21, T18 y T13.
Todos los casos de alto riesgo se validaron por técnica de diagnóstico prenatal invasiva.
3 Resultados
Del total de muestras analizadas, fueron informativas un total de 12.660 (99.74%). Solo 204 muestras
(1.6%) requirieron un segundo ensayo por baja fracción fetal, recuperando 170 casos.
De las 12660 muestras con resultados, se identificaron 150 de casos de alto riesgo para T21, 43 altos
riesgos para T18 y 21 altos riesgos para T13. Tras validación, observamos un total de 146 Verdaderos
Positivos (VP), 4 Falsos Positivos (FP) y 1 Falso Negativo (FN) para T21; 31 VP y 12 FP para T18, y 16
VP y 5 FP para T13. No observamos ningún FN para T18 ni T13. Los valores de contingencia son:
T21 T18 T13
SENSIBILIDAD 99.32 (96.27-99.98) 100 (88.78-100.00) 100 (79.41-100.00)
ESPECIFICIDAD 99.97 (99.92-99.99) 99.9 (99.83-99.95) 99.96 (99.91-99.99)
V.PRED. POS. 97.33 (93.20-98.98) 72.09 (59.47-81.97) 76.19 (57.12-88.49)
V.PRED. NEG 99.99 (99.94-100.00) 100 100
4 Conclusiones
La técnica NIPT reporta resultados de sensibilidad y especificidad superiores al 99% para todas las
trisomías.
Los valores predictivos están muy por encima de las técnicas convencionales de cribado.
El VPP de la trisomía 21 (> 97%) es superior al de T18 y T13, si bien en nuestra serie
todas las trisomías presentaron los mismos VPN.
C0416 LOS VALORES DE SENSIBILIDAD, ESPECIFIDAD Y PREDICCIÓN DE
ANEUPLOIDÍAS SEXUALES OBTENIDOS POR CRIBADO PRENATAL NO INVASIVO
(NIPT) SON SIMILARES A LOS OBSERVADOS PARA LAS TRISOMÍAS AUTOSÓMICAS
MÁS FRECUENTES
1 1 2 1
Xana da Silva , Yaima Torres , Javier Suela , Juan Cruz Cigudosa
1
2
1 Objetivos
El cribado prenatal no invasivo es una herramienta de diagnóstico genético prenatal con creciente
implantación. Este estudio pretende definir los parámetros de utilidad clínica que proporciona el NIPT para
las diferentes aneuploidías sexuales en una serie de >6000 gestantes españolas con embarazos
unitarios.
Analizamos 6526 embarazadas. Todas ellas tuvieron el mismo protocolo de extracción de ADN circulante
y secuenciación tras controles de calidad (incluyendo cálculo de fracción fetal). Secuenciamos una media
>8M/secuencias por caso y determinamos los riesgos de la presencia de las aneuploidías sexuales: X0,
XXX, XXY e XYY. Los casos altos riesgos fueron validados con una técnica invasiva.
3 Resultados
Del total de muestras analizadas, fueron informativas un total de 6.513 (99.8%). Solo 107 muestras
(1.67%) requirieron un segundo ensayo por baja fracción fetal, recuperando 94 casos.
De las 6513 muestras con resultado, identificamos 38 casos de altos riesgos para cromosomas sexuales
(0.58%): 13 X0, 15 XXY, 5 XXX y 5 XYY. Una vez validadas, observamos un total de 25 Verdaderos
Positivos (4 X0, 13 XXY, 4 XXX y 4 XYY), 13 Falsos Positivos (9 X0, 2 XXY, 1 XXX y 1 XYY) y 1 Falso
Negativo (XYY):
Crom Sex X0 Resto de aneuploidías
SENSIBILIDAD 96.15 (80.36-99.90) 100 (39.76-100.00) 95.45 (77.16-99.88)
ESPECIFICIDAD 99.80 (99.66-99.89) 99.86 (99.74-99.94) 99.94 (99.84-99.98)
V.PRED. POS. 65.79 (52.63-76.90) 30.77 (18.79-46.04) 84 (66.25-93.35)
V.PRED. NEG 99.98 (99.89-100.00) 100 (100.00) 99.98 (99.90-100.00)
4 Conclusiones
La detección de aneuploidías sexuales, como conjunto, presentan ratios de sensibilidad, especificidad y
valor predictivo negativo >96%, siendo el mejor dato la especificidad. Son similares a los observados para
las trisomías más frecuentes.
La monosomía del cromosoma X, debido a la posibilidad de pérdida de cromosoma por
la gestante (edad) y/o la elevada frecuencia de mosaicismo placentario, tiene un valor
predictivo positivo limitado, si bien el valor predictivo negativo es extremadamente
elevado
C0496 MEJORANDO EL DIAGNÓSTICO MOLECULAR EN CASOS DE DISPLASIAS
ESQUELÉTICAS DIAGNOSTICADAS PRENATALMENTE
1 2 3 3
Carlos Iván Rivera Pedroza , Jimena Barraza García , Carolina de la Torre , Victoria EF. Montano , Eugenia Antolin
4 5 6 7 8
Alvarado , Roberto Rodríguez González , Elena Vallespin , Ángela del Pozo , Fernando Santos Simarro , Rita Maria
9 10 10
Regojo Zapata , Elena Mansilla Aparacio , Karen E. Heath
1
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz, Universidad Autónoma de Madrid.
Unidad Multidisciplinar de displasias Esqueléticas (UMDE), Hospital Universitario La Paz, Madrid Madrid (Madrid)
España
Unidad Multidisciplinar de displasias Esqueléticas (UMDE), Hospital Universitario La Paz, Madrid. CIBERER, ISCIII,
Madrid (Madrid) España
4
Unidad Multidisciplinar de displasias Esqueléticas (UMDE), Hospital Universitario La Paz, Madrid. Unidad de Medicina
Fetal, Hospital Universitario La Paz, Madrid (Madrid) España
6
7
CIBERER, ISCIII, Madrid. (Madrid) España
8
9
Unidad Multidisciplinar de displasias Esqueléticas (UMDE), Hospital Universitario La Paz, Madrid. Unidad de
Patología, Hospital Universitario La Paz, Madrid. (Madrid) España
1 Objetivos
Las displasias esqueléticas (DE) son un grupo heterogéneo de enfermedades que se caracterizan por
alteraciones del sistema óseo. La sospecha diagnóstica de DE prenatal se establece mediante
ultrasonido, valorando el tipo de alteración ósea, las malformaciones asociadas y la edad gestacional al
diagnóstico.
Objetivo: Determinar la tasa de diagnóstico molecular y la eficacia de un panel de NGS para displasias
esqueléticas en casos diagnosticados prenatalmente.
Cohorte de 29 casos de DE diagnosticados prenatalmente. En cuatro de ellos se realizó estudio
anatomopatológico. Las muestras fueron líquido amniótico, vellosidades coriales, sangre y/o fibroblastos
tomadas prenatalmente, o de aborto. 25 casos fueron analizados mediante un panel de NGS de diseño
propio (SkeletalSeq.V4-V6, 327-368 genes) y 4 casos mediante secuenciación Sanger de FGFR3 para
displasia tanatofórica.
3 Resultados
Se identificó el defecto molecular en 19/29 (65,5%) de los casos.

El análisis mediante el panel se realizó en 23 casos (falló en dos casos), y 15 casos fueron
diagnosticados, en dos casos se identificó sólo una variante para un padecimiento recesivo y en un caso
se observó una variante patogénica en PTPN11 en heterocigosiscomohallazgo secundario. Se detectaron
16 variantes nuevas y cuatro previamente descritas.
Las patologías más frecuentes fueron: Síndrome de Costilla-Corta con o sin polidactilia, displasia
tanatofórica y osteogénesis imperfecta.
4 Conclusiones
La(s) mutación(es) patogénica(s) fueron identificadas en 65.5% de los casos; esta tasa es mayor a lo
reportado en la literatura, demostrando que la combinación del panel SkeletalSeq y secuenciación directa
es eficiente para el abordaje de las DE prenatales, permitiendo ofrecer un asesoramiento más preciso y la
posibilidad de diagnóstico preimplantacional o prenatal en subsecuentes embarazos. En los casos sin
diagnóstico se sugiere realizar array para descartar CNVs, y/o exoma para descartar mutaciones en
genes relacionados con síndromes que involucran el sistema óseo o genes nuevos de DE.
C0521 VALIDACIÓN DE LA TECNOLOGÍA NEXT GENERATION SEQUENCING PARA SU
APLICACIÓN AL DIAGNÓSTICO GENÉTICO PREIMPLANTACIONAL DE ALTERACIONES
CROMOSÓMICAS ESTRUCTURALES.
Alvaro Gomez Duro, Almudena Polo Picasso, Maria Lidón Carretero Vilarroig, Esther Fernández García
Geniality Diagnostico Genetico Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
Introducción: Las alteraciones cromosómicas estructurales representan el 15% de las indicaciones de
diagnóstico genético preimplantacional (DGP). La incorporación del array-CGH (aCGH) al DGP de
alteraciones estructurales supuso una mejora sustancial al analizar todo el complemento cromosómico del
embrión. Recientemente, la tecnología de secuenciación masiva (NGS) ha irrumpido en el campo de la
genética reproductiva desplazando al aCGH en el screening de aneuploidías. La gran ventaja del NGS
radica en que combinada con la biopsia de Trofoectodermo, permite por primera vez detectar con
fiabilidad la presencia de mosaicismo, cuando está presente en al menos el 20% de las células
biopsiadas, mejorando así la selección de embrión Euploide.
Objetivo: Validación de la tecnología NGS como método de DGP de alteraciones cromosómicas
estructurales.
14 embriones de 9 pacientes portadores de reordenamientos. Las muestras amplificadas mediante Whole
Genome Amplification (Sureplex), procedentes de embriones biopsiados en día+3 (4) y dia+5 (10) de
cultivo embrionario, habían sido previamente analizados mediante la tecnología de aCGH (24sure+).
NGS: protocolo de Veriseq-PGS (Illumina) y secuenciación en sistema MiSeq. Análisis de resultados
mediante el software BlueFuse Multi4.3.
3 Resultados
En las 14 muestras analizadas se obtuvo diagnóstico clínico (trasferible/no transferible) igual al obtenido
previamente mediante aCGH. Tanto la sensibilidad como la especificidad Clínica fueron del 100%. La
sensibilidad y especificidad analítica fue del 100% y 99,67%, respectivamente. Una de las muestras de
trofoectodermo mostró ganancia y pérdida de dos cromosomas en mosaico no detectadas mediante
aCGH.
4 Conclusiones
Los resultados obtenidos demuestran la capacidad del NGS, para el análisis de alteraciones
cromosómicas estructurales en el DGP, tanto en blastómero como en trofoectodermo, proporcionando en
este último, además del análisis del reordenamiento y el screening de todo el componente cromosómico,
la detección de embriones mosaico. El NGS es una técnica robusta, de alto rendimiento y lista para su
aplicación clínica en el campo de la genética reproductiva
Sesión: Enfermedades Metabólicas y Mitocondriales
C0123 SECUENCIACIÓN MASIVA COMBINADA CON ESTUDIOS BIOQUÍMICOS Y

FUNCIONALES COMO HERRAMIENTA PARA LA CONFIRMACIÓN DE ENFERMEDADES
METABÓLICAS HEREDITARIAS DETECTADAS EN LOS PROGRAMAS DE CRIBADO
NEONATAL
Rosa Navarrete, Ana Isabel Vega, Fatima Leal, Lourdes Desviat, Pedro Ruiz-Sala, Patricia Alcaide, Margarita Castro,
Paloma Sanz, Maria Jesus Ecay, Pilar Rodriguez-Pombo, Magdalena Ugarte, Begoña Merinero, Celia Perez-Cerdá,
Belen Perez
Centro de Diagnóstico de Enfermedades Moleculares, Centro de Biología Molecular, Ciberer, IdiPAZ, Universidad
Autónoma de Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
El análisis de aminoácidos y acilcarnitinas por espectrometría de masas en tándem en sangre impregnada
en papel permite detectar en el cribado neonatal más de 30 enfermedades metabólicas hereditarias que
deben ser confirmadas por pruebas bioquímicas de segundo nivel y análisis genético. En este trabajo
presentamos el estudio genético por secuenciación masiva de 107 muestras de casos con cribado
neonatal positivo con el propósito de evaluar la capacidad de ser utilizada como única prueba de segundo
nivel.
El análisis se realizó mediante la captura del exoma de 120 genes. En algunos casos se utilizó el panel
TruSightOne®.
3 Resultados
En 62 casos se confirmó la sospecha inicial identificando la presencia de mutaciones bialélicas en 25
genes, todos con una mutación de pérdida de función y/o descrita en las bases de datos. En 32 casos
solo se detectó una mutación en PAH, ACADM, ACADVL, GCDH, MCCC1, MCCC2, ACADS o SLC22A5
o dos mutaciones monoalelicas en genes de la misma ruta. No se encontró ninguna mutación en 13
muestras de recién nacidos con sospecha bioquímica de hiperfenilalaninemia, aciduria glutárica tipo I, o
en las deficiencias de ACADVL o SLC22A5. La revisión de las pruebas bioquímica de segundo nivel
(homocisteína, ácidos orgánicos, pterinas, etc.) y ensayos enzimáticos específicos sugirieron que todos
estos casos eran portadores o falsos positivos de cribado. Finalmente, en dos recién nacidos, con una
alteración bioquímica persistente y con resultado negativo utilizando el panel de 120 genes, se detectaron
por primera vez mutaciones en los genes BCAT2 y SLC7A1 utilizando el exoma clínico.
4 Conclusiones
Estos resultados ponen de manifiesto el valor añadido de las pruebas bioquímicas, aplicadas en segundo
o tercer nivel, para la interpretación de los análisis genéticos y que la combinación de ambos tipos de
pruebas permiten ofrecer un diagnóstico certero
C0471 SECUENCIACIÓN MASIVA COMO PRUEBA DE SEGUNDO NIVEL EN PROGRAMAS
DE CRIBADO NEONATAL
1 2 2 3
Maria Segura-Puimedon , Jairo Rodríguez , Benjamín Rodríguez-Santiago , María del Amor Bueno-Delgado , Antonio
3 4 4 5
González-Meneses , María Jesús Alonso-Ramos , Isabel Fernández-Carbajal , Raquel Yahyaoui , Yolanda González-
6 7 7 2 8
Irazabal , Mercedes Espada , Kontxi Higón , Lluís Armengol , Luis Alberto Pérez-Jurado
1
Universitat Pompeu Fabra / qGenomics Espluques de Llobregat (Barcelona) España
2
Genomics (Barcelona) España
3
Departmento de pediatría, Hospital Universitario Virgen del Rocío (Sevilla) España
4
Laboratorio de Enfermedades genéticas y cribado neonatal, Departamento de Genetica Molecular de la Enfermedad,
Instituto de Biologìa y Genética Molecular Universidad de Valladolid-CSIC (Valladolid) España
5
Cribado neonatal y laboratorio clínico , Hospital regional de Málaga (Málaga) España
6
Servicio de Bioquímica Clínica, Hospital Universitario Miguel Servet (Zaragoza) España
7
Laboratorio de salud pública, Departamento de Salud del Gobierno Vasco, Parque Tecnológico de Bizkaia (Vizcaya)
España
8
Unidad de Genética, Universitat Pompeu Fabra / Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras
(CIBERER) (Barcelona) España
1 Objetivos
Los programas de cribado neonatal son programas de salud pública para el diagnóstico e intervención de
enfermedades genéticas que, de no ser tratadas, pueden llegar a tener consecuencias clínicas graves.
Con el objetivo de reducir falsos positivos, falsos negativos y tiempos de diagnóstico, y facilitar el
asesoramiento genético, se ha evaluado el uso de secuenciación masiva como prueba de segundo nivel
en estos programas.
Se han usado muestras de papel de filtro de recién nacidos positivos para el cribado para elaborar
librarías de secuenciación masiva. Se ha desarrollado un panel de 71 genes que incluye las
enfermedades detectadas por los programas de cribado neonatal y se han identificado variantes raras que
pueder ser causantes de enfermedad. Se han analizado 214 muestras de forma retrospectiva para
establecer la sensibilidad y especificidad y 362 muestras prospectivas en tiempo real para determinar la
utilidad clínica.
3 Resultados
Retrospectivamente se han identificado mutaciones bialélicas en un 65,8% de las muestras y mutaciones
en un sólo alelo en el 14,4%. De las muestras sin mutaciones identificadas (19,6%), el 76% corresponden
a hipotiroidismo. En muestras con diagnóstico genético previo (n=99), la sensibilidad al final del proceso
de mejora de los algoritmos de detección fue del 100%. En la fase prospectiva se han detectado
mutaciones bialélicas en un 21,8%, únicas en 31,2% y en el 47% de las muestras no se detectaron
mutaciones, siendo el 68.8% de estas muestras positivas para fibrosis quística. En esta fase, se ha
obtenido una sensibilidad del 100% en muestras de fibrosis quística (n=131) que contaban con
diagnóstico genético paralelo.
4 Conclusiones
Hemos desarrollado con éxito un panel secuenciación masiva que puede permitir omitir o redirigir las
pruebas de confirmación bioquímicas y proporcionar asesoramiento genético temprano en los programas
de cribado neonatal.
C0165 BASES GENÉTICAS DE ENFERMEDADES NEURODEGENERATIVAS CON
ACUMULACIÓN DE HIERRO EN EL CEREBRO
1 2 3 4 2
Cristina Aisha Tello Vicente , Vincenzo Lupo , Alejandra Darling , Belén Perez Dueñas , Carmen Espinós
1
1. Genética y Genómica de Enfermedades Neuromusculares y Neurodegenerativas, Centro de Investigación Príncipe
Felipe (CIPF) Valencia (Valencia) España
2
1. Genética y Genómica de Enfermedades Neuromusculares y Neurodegenerativas, Centro de Investigación Príncipe
Felipe (CIPF), Valencia. 2. Servicio de Genómica y Genética Traslacional, Centro de Investigación Príncipe Felipe
(CIPF), Valencia. (Valencia) Valencia
3
3. Servicio de Neuropediatría, Hospital Sant Joan de Déu (Barcelona) Barcelona
4
3. Servicio de Neuropediatría, Hospital Sant Joan de Déu y CIBER de Enfermedades Raras (CIBERER), Barcelona.
(Barcelona) Barcelona
1 Objetivos
Las enfermedades neurodegenerativas con acumulación cerebral de hierro (ENACH) constituyen un
grupo heterogéneo de trastornos del movimiento. Clínicamente se caracterizan por dificultades
progresivas en el habla, la marcha y la deglución, compartiendo la presencia de depósitos de hierro en los
ganglios basales. Se trata de enfermedades hereditarias raras altamente discapacitantes que en la
mayoría de ocasiones conducen a muerte en la segunda década de vida. Se conocen diez genes, siendo
los más frecuentes PANK2 y PLA2G6; el resto son formas raras. El objetivo principal de esta investigación
es la caracterización de las bases moleculares subyacentes en los trastornos ENACH en pacientes
españoles.
El estudio genético comprende: (1) análisis de las regiones codificantes e intrónicas flanqueantes de los
genes más frecuentes (PANK2 y PLA2G6) mediante secuenciación Sanger; (2) análisis de grandes
deleciones/duplicaciones mediante MLPA (Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification); (3) Panel
basado en tecnología SureSelect (Agilent) que comprende 500 genes implicados en trastornos de
movimiento: ENACH, ataxia, corea, distonía, parkinson, paroximales, paraparesias espásticas.
3 Resultados
De las 96 familias incluidas en la serie clínica, se ha logrado el diagnóstico genético en 41, en quienes se
han detectado 30 mutaciones en PANK2 y 11 mutaciones en PLA2G6
(http://espinos.cipf.es/index.php/en/mutations-db). Es de destacar que se ha identificado la mutación
PANK2 p.T528M como fundadora en población gitana. Por otra parte, hemos resuelto el caso de unas
gemelas monozigóticas portadoras de una mutación en PLA2G6, en quienes se ha detectado una disomía
uniparental paterna del cromosoma 22 mediante un array CytoScan® HD(Affymetrix).
4 Conclusiones
Se ha logrado el diagnóstico molecular en el 43% de familias. El estudio genético de 16 pacientes ENACH
mediante panel de genes implicados en trastornos del movimiento está en marcha. Financiación:
Fundació La Marató de la TV3.
C0094 DESARROLLO DE ORGANOIDES DE HÍGADO COMO MODELO DE ENFERMEDAD
HEPÁTICA EN EL DÉFICIT DE ALFA-1 ANTITRIPSINA
1 2 1 1 3
Gema Gomez Mariano , Carolina Epifano , Nerea Matamala , Selene Martinez , María Teresa Martínez , Meritxell
4 2 5
Huch , Ignacio Perez de Castro , Beatriz Martinez-Delgado
1
Genetica Molecular. ISCIII (Madrid) España
2
Terapia Génica. ISCIII (Madrid) España
3
Hospital 12 de Octubre (Madrid) España
4
Universidad de Cambridge (Cambridge) Reino Unido
5
Instituto de Salud Carlos III Majadahonda (Madrid) España
1 Objetivos
Los organoides son sistemas de cultivo in vitro tridimensionales (3D), en los que células madre de tejidos
adultos son capaces de auto-organizarse y tras diferentes señales de diferenciación formar estructuras
que adquieren el mismo patrón del tejido a desarrollar, imitando a sus homólogos en vivo. Este nuevo
sistema de cultivo permite modelar enfermedades y por otro lado estudiar mecanismos y ensayar nuevas
estrategias terapéuticas.
La Alfa-1 Antitripsina (AAT) se secreta principalmente en el hígado. En el Déficit de AAT la mutación más
frecuente y la más importante en la práctica clínica es el alelo Z (Glu342Lys), que causa acumulación de
la AAT mutada en los hepatocitos. Sin embargo, los procesos de polimerización y degradación de estas
proteínas anómalas no son bien conocidos dada la dificultad de obtención de biopsias hepáticas.
Hemos establecido las condiciones de cultivo para la generación de organoides de hígado procedentes de
pacientes con DAAT y de controles sanos. Hemos analizado mediante western blot la expresión de AAT
en los organoides y su capacidad de ser secretada al medio. La capacidad de formación de polímeros de
AAT se miró mediante tinción PAS y la expresión de los diferentes transcritos del gen mediante RT-PCR y
QT-PCR.
3 Resultados
Se está valorando su capacidad de reproducir la enfermedad in vitro, mediante detección de la proteína
AAT y análisis de la formación de polímeros de AAT. Además, estos organoides han permitido estudiar la
regulación de la expresión y formas de splicing del gen SERPINA1 en el hígado. Por último, hemos usado
este modelo experimental para poner a prueba el potencial del editado genético como herramienta
terapéutica en esta patología hepática.
4 Conclusiones
El establecimiento de organoides de hígado puede ser una herramienta muy útil para investigar los
factores que contribuyen a la enfermedad hepática en el DAAT y el ensayo de nuevas terapias.
C0156 DETERIORO DE LA FUNCIÓN Y DE LA DINÁMICA MITOCONDRIAL EN LA
PATOGÉNESIS DEL FXTAS
1 2 2 2
Laia Rodriguez-Revenga Bodi , Maria Isabel Alvarez Mora , Irene Madrigal , Mariona Guitart Mampel , Gloria
2 2
Garrabou , Montserrat Mila
1
Departamento de Bioquimica y Genética Molecular, Hospital Clinic Barcelona (Barcelona) España
2
Hospital Clinic, CIBERER, IDIBAPS (Barcelona) España
1 Objetivos
Un tercio de los adultos portadores de la premutación en el gen FMR1 (55-200 repeticiones CGG)
desarrollará un trastorno neurodegenerativo de aparición tardía conocido como síndrome de tremor /
ataxia asociado a X frágil (FXTAS). La disfunción mitocondrial se ha visto que juega un papel importante
en la aparición y desarrollo de varias enfermedades neurodegenerativas como el Parkinson o el
Alzheimer. El objetivo de este estudio es proporcionar nuevos conocimientos sobre los mecanismos
implicados en la patogénesis de FXTAS mediante la caracterización de la función y dinámica mitocondrial.
La función mitocondrial ha sido caracterizada mediante la determinación de la capacidad oxidativa de las
mitocondrias, el contenido mitocondrial y los niveles de estrés oxidativo en muestras de sangre periférica
y fibroblastos de individuos portadores de la premutación en FMR1 con FXTAS y en muestras controles.
La dinámica mitocondrial se ha estudiado mediante la determinación de la complejidad de la red
mitocondria por microscopia confocal en muestras de fibroblastos de individuos con FXTAS.
3 Resultados
En cuanto a la función mitocondrial, encontramos que la capacidad respiratoria mitocondrial está
comprometida en los fibroblastos mientras que, en la sangre, no se observaron diferencias entre los
grupos FXTAS y control. Además, los fibroblastos de los individuos portadores de la premutación en
FMR1 con FXTAS presentaron una alteración significativa de la arquitectura mitocondrial, con
mitocondrias más circulares y menos interconectadas.
4 Conclusiones
La función y dinámica mitocondrial se encuentran desreguladas en los portadores de la premutación en
FMR1 con FXTAS. Estas alteraciones pueden estar limitando el suministro bioenergético de las células,
contribuyendo a la patogénesis de la enfermedad.
C0281 DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES MITOCONDRIALES MEDIANTE
SECUENCIACIÓN MASIVA
1 2 2 2 2 2
Dèlia Yubero Siles , Raquel Montero , Jose Guerrero , Paola Pacheco , Núria Brandi , Cristina Jou , Cecilia Jimenez-
2 2 2 2 2 2
Mallebrera , Andrés Nascimento , Federico Ramos , Carlos Ortez , Àngels García-Cazorla , Judith Armstrong , Rafael
2
Artuch
1
Hospital Sant Joan de Déu Esplugues de Llobregat (Barcelona), España
2
Hospital Sant Joan de Déu (Barcelona), España
1 Objetivos
Las enfermedades mitocondriales son entidades genéticas que se caracterizan por una disfunción del
sistema de la fosforilación oxidativa. La complejidad de los fenotipos clínicos, así como la falta de
especificidad de los biomarcadores existentes asociados a alteración mitocondrial, denotan la importancia
del diagnóstico genético, siendo la secuenciación masiva (NGS) de gran utilidad para abordar este grupo
de enfermedades. Nuestro objetivo ha sido evaluar la eficacia de distintas metodologías de NGS para el
diagnóstico, así como estimar la efectividad diagnóstica de los biomarcadores clásicos de enfermedad
mitocondrial.
Se ha estudiado una serie de 78 pacientes con sospecha de enfermedad mitocondrial (criterios de
Morava), con datos clínicos y bioquímicos disponibles. El análisis genético se ha realizado mediante
paneles génicos dirigidos de diseño propio (HaloPlex, Agilent), de diseño comercial (TruSightOne (TSO),
Illumina), y secuenciación de exoma (WES) y genoma (WGS). Se ha valorado la patogenicidad siguiendo
las recomendaciones y guías de la ACMG y la AEGH.
3 Resultados
La efectividad diagnóstica en nuestra cohorte es del 39%, siendo mayor en los pacientes estudiados con
TSO, WES o WGS (40%), mientras que para los estudios con paneles resulta menor (35%).
Curiosamente, las mutaciones halladas en el 32% de los pacientes diagnosticados son en genes no
mitocondriales. No se observa una asociación clara entre alteración de marcadores mitocondriales y
diagnóstico.
4 Conclusiones
El algoritmo diagnóstico de las enfermedades mitocondriales debería consolidarse como algo más
práctico y resolutivo. Un porcentaje importante de los pacientes son de etiología no mitocondrial, lo cual
puede explicar la tasa diagnóstica, ya que la mayoría de los pacientes han sido evaluados mediante
aproximaciones menos codiciosas. En el ámbito hospitalario es básico encontrar el equilibrio entre
practicidad, eficacia y rapidez, siendo el grado de resolución adecuado un enfoque más amplio como el
TruSightOne o incluso la secuenciación de exoma.
Sesión: Cardiogenética
C0146 ABORDAJE MULTIDISCIPLINAR DE LA MUERTE SÚBITA CARDIACA:

EXPERIENCIA DE LA UNIDAD DE CARDIOGENÉTICA.
1 1 2 2
Rosa Riveiro-Álvarez , Miguel-Angel Lopez-Martinez , Pepa Sánchez-Borque , Ángel L. Miracle , Olga Carvajal del
3 2 3 1 1
Castillo , Mª José Calero-Rueda , Nieves Domínguez-Garrido , Ana Bustamante-Aragonés , Jesús Gallego-Merlo ,
1 1 1 2 2
Camilo Vélez-Monsalve , Carmen Ayuso , Isabel Lorda-Sánchez , Jerónimo Farré , José Manuel Rubio , Mª José
1
Trujillo-Tiebas
1
Servicio de Genetica. H.U. Fundacion Jimenez Diaz Madrid (Madrid) España
2
Servicio de Cardiología. H.U. Fundación Jiménez Díaz (Madrid) España
3
Servicio de Pediatría. H.U. Rey Juan Carlos. (Madrid) España
1 Objetivos
La muerte súbita cardiaca (MSC) se define como un fallecimiento natural e inesperado que tiene lugar
durante la primera hora tras el comienzo de los síntomas. Existen dos grupos de enfermedades asociadas
a MSC que pueden presentar una etiología genética: las cardiopatías estructurales o miocardiopatías y
las cardiopatías arritmogénicas o canalopatías. Este trabajo recoge 4 años de experiencia en el
diagnóstico genético posnatal, preimplantatorio (DGP) y post-mórtem de estas patologías.
Se realizaron pruebas diagnósticas a 198 pacientes con miocardiopatías y canalopatías, procedentes de
los servicios de Cardiología, Pediatría y Ginecología y Obstetricia, así como estudios predictivos a sus
respectivos familiares. Asimismo, se realizó una autopsia molecular en un caso de muerte súbita
intrahospitalaria. El abordaje molecular incluyó secuenciación de última generación -panel de genes vs.
exoma clínico-, identificación de deleciones o duplicaciones -aCGH- y estudios familiares de
informatividad -marcadores microsatélites- en parejas que solicitaron DGP.
3 Resultados
En total, se estudiaron 198 casos -71 síndromes arritmogénicos y 127 cardiopatías estructurales-, de los
cuales se diagnosticaron 137 (137/198; 69,2%). El uso del exoma clínico en lugar del panel de genes no
incrementó dicha tasa de detección. En 4 casos con síndrome de QT largo se identificaron mutaciones en
genes que codifican proteínas estructurales. Por último, 3 pacientes con mutación identificada en los
genes TNNT2, DSP y MHY7 solicitaron un diagnóstico genético preimplantatorio.
4 Conclusiones
El presente estudio ha mostrado una mayor prevalencia de las cardiopatías estructurales frente a los
trastornos del ritmo, identificando los genes responsables, su espectro mutacional y permitiendo la
reclasificación clínica de algunos casos. El abordaje mediante un panel de genes se plantea como
primera herramienta diagnóstica por su elevada tasa de detección de mutaciones, ya que proporciona
opciones preventivas, terapéuticas y reproductivas para los pacientes, y permite establecer un diagnóstico
diferencial frente a otras patologías.
C0461 DISEÑO Y APLICACIÓN DE UN PANEL DE SECUENCIACIÓN MASIVA (NGS) PARA
EL ESTUDIO DE LA HIPERTENSIÓN ARTERIAL PULMONAR (HAP): PANEL_HAP_V1.2.
1 1 2 3 3 1
Jair Tenorio , Natalia Gallego , Pedro Arias Lajara , Paula Navas , Carlos Andrés Quezada , Angela Del Pozo ,
1 1 3 3 3
Kristina Ibañez , Juan Carlos Silla , Julián Palomino , Nuria Ochoa Parra , Ignacio Hernández González , Gema
1 1 4 1
Gordo , Irene Dapía , Pilar Escribano , Pablo Lapunzina
1
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM). Instituto de Investigación Hospital Universitario La Paz (IdiPAZ),
CIBERER, Centro de Investigación en Red de Enfermedades Raras, ISCIII, (Madrid) España
2
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM) H. Universitario La Paz. CIBERER, Laboratorio de
Sobrecrecimiento Madrid (Madrid) España
3
Unidad multidisciplinar de Hipertensión Pulmonar, Servicio de cardiología, Hospital Universitario 12 de Octubre.
(Madrid) España
4
Unidad multidisciplinar de Hipertensión Pulmonar, Servicio de cardiología, Hospital Universitario 12 de Octubre.
(Madrid) España
1 Objetivos
La hipertensión arterial pulmonar (HAP) es una enfermedad infrecuente de pronóstico ominoso en
ausencia de tratamiento. La HAP puede presentarse en diferentes formas, entre ellas la HAP idiopática
(HAPI), hereditaria (HAPH) y una forma más grave denominada veno-oclusiva. Gracias a la secuenciación
masiva, se han descrito una elevada cantidad de genes relacionados con la HAP en los últimos años.
Así, se seleccionó una cohorte de 168 pacientes con HAPI, HAPH o veno-oclusiva, para la realización de
un panel de genes relacionados con HAP, tanto genes ya descritos en la literatura como genes
candidatos propuestos por otros grupos.
Se han seleccionado los pacientes del proyecto multicéntrico de HAP. Se ha diseñado un panel de genes
mediante la plataforma Nimbledesign de Roche, captura SeqCap EZ, genoma de referencia hg19, análisis
bioinformático mediante un script propio y análisis de datos mediante diferentes herramientas
bioinformáticas.
3 Resultados
Tras el análisis bioinformático se encontró un 20% de pacientes con mutaciones patogénicas y un 5,8%
de variantes de significado incierto. Un 8,3% de las muestras se rechazaron tras el análisis de los
parámetros de calidad establecidos.
4 Conclusiones
Las mutaciones encontradas en HAP en la cohorte de pacientes analizada demuestran la elevada
variabilidad genética de esta enfermedad. Además, se encontraron dos variantes en un mismo paciente,
ambas relacionadas con HAP, cuyo análisis in silico demuestra la posible patogenicidad de ambas. Una
variante en BMPR2, c.961C>T; p.Arg321*) ya descrita previamente y otra variante en un gen que codifica
un canal de potasio y que se ha relacionado en estudios de NGS con HAP. Este hecho podría demostrar
por primera vez la existencia de dos mutaciones en un paciente con HAP, lo que podría abrir la posibilidad
de la existencia de herencia digénica en la HAP, un hecho que no se había planteado hasta el momento.
C0057 MUERTE SÚBITA ASOCIADA A DEFECTOS GENÉTICOS CARDIOCEREBRALES
EN PACIENTES CON EPILEPSIA
Mònica Coll Vidal, Anna Fernández Falgueras, Oscar Campuzano Larrea, Jesús Matés Ramírez, Bernat Del Olmo
Cabestré, Irene Mademont Soler, Alexandra Pérez Serra, Ferran Picó Micaló, Ramon Brugada Terradellas
Centro de Genética Cardiovascular (Girona) España
1 Objetivos
Se ha descrito que las canalopatías de origen genético pueden contribuir tanto en la epilepsia como en la
enfermedad cardíaca para incrementar la incidencia de arritmias letales. La muerte súbita inesperada en
individuos con epilepsia, también conocida como SUDEP, representa hasta el 20% de todas las muertes
en pacientes con epilepsia. El mecanismo fisiopatológico que subyace a SUDEP aún no está identificado.
Se desarrolló un panel de re-secuenciación con genes relacionados con epilepsia y canalopatías. Se
analizaron 22 casos de SUDEP mediante tecnología de ultra secuenciación para identificar posibles
variantes genéticas que pudieran explicar la causa de la muerte súbita.
3 Resultados
Se identificaron 58 variantes raras en 20 de los 22 casos estudiados. Se detectaron 2 variantes en
número de copias (una deleción y una duplicación de un exón completo), 6 inserciones/deleciones, 3
variantes intrónicas y 47 variantes missense. El estudio de segregación familiar fue posible en 10 de los
20 casos. De las 30 variantes raras identificadas en los casos con familia disponible, 8 variantes
mostraron segregación familiar en los genes KCNQ1, CDKL5, CNTNAP2, TSC1, GRIN2A, ADGRV1,
KCNQ2 y HTR5A. Se observópenetrancia incompleta en 11 variantes yno mostraron segregación familiar
otras 11 variantes diferentes. Una de las familias estaba clínicamente diagnosticada tanto de epilepsia
como el síndrome de QT largo. Gracias al estudio genético, se identificó una deleción del exón 2 en el gen
KCNQ1 que segregaba con el síndrome de QT largo y una variante en CDKL5 que segregaba con la
epilepsia.
4 Conclusiones
Nuestro estudio da soporte al concepto de una canalopatía cardiocerebral determinada genéticamente. La
identificación de estos factores genéticos de predisposición a muerte súbita en pacientes con epilepsia
ayudaría a la toma de medidas de prevención de episodios que pueden desencadenar en una muerte
súbita.
C0058 MUTACIONES DESMOSÓMICAS EN CORAZÓN ESTRUCTURALMENTE NORMAL
PREDISPONEN A MIOCARDITIS Y MUERTE SÚBITA
1 1 2 3
Anna Fernández Falgueras , Oscar Campuzano Larrea , Georgia Sarquella Brugada , Carles Ferrer Costa ,
1 1 1 1 1
Alexandra Pérez Serra , Mònica Coll Vidal , Irene Mademont Soler , Ferran Picó Micaló , Jesús Matés Ramírez ,
1 1 4 5
Bernat Del Olmo Cabestré , Anna Iglesias Muñoz , Josep Castellà Garcia , Josep Brugada Terradellas , Ramon
1
Brugada Terradellas
1
2
Hospital Sant Joan de Déu (Barcelona) España
3
Gendiag-Ferrer (Barcelona) España
4
Instituto de Medicina Legal de Catalunya (Barcelona) España
5
Hospital Clínic (Barcelona) España
1 Objetivos
La miocarditis es una inflamación del tejido miocárdico, cuyas manifestaciones clínicas pueden ir desde
casos asintomáticos hasta muerte súbita cardíaca. Nos planteamos estudiar si mutaciones genéticas en
proteínas desmosomales pueden predisponer a miocarditis fulminante y a muerte súbita en corazón
normal.
Alteraciones genéticas en las proteínas desmosómicas están asociadas a cardiomiopatía arritmogénica,
patología en la cual los miocitos se sustituyen por tejido fibro-adiposo, causando arritmias y muerte súbita.
En nuestro estudio evaluamos 3 muestras post-mortem de jóvenes fallecidos repentinamente con un
diagnóstico forense de miocarditis fulminante, sin otras alteraciones cardíacas estructurales en la
autopsia. En estos casos realizamos estudio genético por ultrasecuenciación de los principales genes
asociados a muerte súbita cardíaca.
3 Resultados
Identificamos en todos ellos mutaciones desmosomales asociadas a cardiomiopatía arritmogénica. Se
realizó evaluación clínica y genética en los familiares de los 3 casos índices. En dos de las familias se
confirmó segregación familiar de las variantes genéticas con patología cardíaca y se tomaron medidas
preventivas que incluyeron el tratamiento farmacológico y la implantación de un desfibrilador automático.
4 Conclusiones
Nuestros resultados sugieren que las alteraciones genéticas desmosomales pueden causar un miocardio
vulnerable, propenso a inflamación por agentes externos. La investigación de los familiares portadores es
esencial para identificar los familiares portadores de las variantes genéticas, para adoptar mecanismos de
prevención.
C0073 MUTACIÓN FUNDADORA EN MYBPC3 COMO EJEMPLO DE HETEROGENEIDAD
ALÉLICA.
1 2 2 2 2 3
Rebeca Lorca , Juan Gómez , Juilian Rodirguez Reguero , María Martín , Juan Calvo , Rubén Cabanillas , César
3 2
Morís , Eliecer Coto
1
Hospital Universitario Central de Asturias Oviedo (Asturias) España
2
HUCA (Oviedo) España
3
IMOMA (Asturias) España
1 Objetivos
La miocardiopatía hipertrófica (MCH) es la enfermedad genética cardiaca más común, con herencia
autosómico dominante y penetrancia variable. La mutación en MYBPC3 (gen más frecuentemente
mutado) c.787G>T (G263X) introduce un codón de parada prematuro causando una proteína truncada.
Fue reportada como mutación autóctona en Asturias y no ha sido reportada en otras regiones del mundo,
por lo que se pretende actualizar su fenotipo.
Se realizaron estudios genéticos mediante secuenciación de nueva generación(NGS) en el caso índice y
secuenciación directa en familiares. El diagnóstico de MCH se realizó con grosores de pared del
ventrículo izquierdo (LVWT) ≥15 mm (13 mm en familiares), no explicable por otras causas.
3 Resultados
Se identificaron 38 portadores: 34 cumplen criterios de MCH (90% de penetrancia, 97% en mayores de 40
años). 59% de los pacientes fueron diagnosticados asintomáticos, siendo la disnea el síntoma más
común (29%), seguida del síncope (18%) y angor (9%). El 26.5% presentaron taquicardias ventriculares
no sostenidas. El LVWT promedio fue de 20mm y sólo el 15% presentó obstrucción significativa del tracto
de salida del ventrículo izquierdo.
En 2 pacientes el fenotipo de MCH coexistía con el de miocardiopatía no compactada (MCH+MCNC). De
los 3 accidentes cerebrovasculares diagnosticados en la cohorte, 2 presentaban MCH+MCNC.
6 pacientes tenían SCORE de alto riesgo de muerte súbita y 3 moderado, siendo el SCORE medio de
bajo riesgo (3%).
4 Conclusiones
MYBPC3 G263X es mutación autóctona con una alta penetrancia que llega al 97% en más de 40 años de
edad. En general, tiene un perfil de riesgo de MS bajo, aunque el 26.5% tienen moderado-alto riesgo.
Esta mutación representa un ejemplo de heterogeneidad alélica con expresión fenotípica variable (MCH y
MCNC), planteando la posibilidad de que ambas miocardiopatías formen parte de un mismo espectro
fenotípico.
C0122 EL PAPEL DE LAS VARIACIONES GENÉTICAS EN NÚMERO DE COPIAS EN LA
ETIOLOGÍA DE LA MUERTE CARDIACA SÚBITA
1 1 2 1
Jesús Matés Ramírez , Anna Fernández Falgueras , Carles Ferrer Costa , Bernat Del Olmo Cabestré , Alexandra
1 1 1 1 1
Pérez Serra , Mònica Coll Vidal , Irene Mademont Soler , Ferran Picó Micaló , Anna Iglesias Muñoz , Georgia
3 1 1 1
Sarquella Brugada , Josep Brugada Terradellas , Oscar Campuzano Larrea , Ramon Brugada Terradellas
1
2
3
1 Objetivos
El papel patogénico de las alteraciones genéticas en número de copias (CNVs) en las enfermedades
cardíacas asociadas a muerte súbita es un campo que ha sido poco estudiado. Los estudios publicados
hasta el momento, no incluyen grandes cohortes de pacientes o se han limitado a pocos genes lo cual no
permite establecer la prevalencia real de tales mutaciones en estas patologías.
Se analizaron un total de 1765 pacientes europeos (587 post-mortem y 1178 muestras de pacientes). El
análisis genético de los 78 genes principales asociados a MSC se llevó a cabo utilizando tecnología de
ultrasecuenciación. Se utilizó un algoritmo bioinformático para la detección de CNVs utilizando NGS.
Estas alteraciones fueron confirmadas por MLPA o Q-PCR.
3 Resultados
Se identificaron 36 pacientes (2%) portadores de CNVs (7 post-mortem y 29 muestras de pacientes: 8 con
algún tipo de canalopatía y 21 con miocardiopatía). A pesar de la baja prevalencia, en el 40% de los
casos, este hallazgo podría llevar a establecer la causalidad de la patología, ya que en estos pacientes,
no se detectaron otro tipo de variantes (ausencia de SNVs/indels) que pudiesen explicar la enfermedad.
Este es el caso de una paciente con SQTL e historia de MSI en una hija de 10 días. El análisis de SNVs e
indels no permitió identificar la causa genética. No obstante, el análisis de CNVs identificó una deleción de
2 exones en KCNQ1.
4 Conclusiones
Nuestros resultados apoyan la aplicación de análisis de CNVs en patologías arritmogénicas cardíacas así
como en muestras post-mortem sin causa evidente de muerte tras la autopsia. La identificación de este
tipo de variantes genéticas, junto con la identificación de SNVs permitirá no sólo identificar la etiología de
estas muertes repentinas sino también realizar una mejor evaluación clínica, asesoramiento genético y
toma de medidas preventivas tanto en individuos diagnosticados como en sus familiares.
Sesión: Cáncer hereditario y familiar
C0021 DESCUBRIMIENTO DE UN NUEVO GEN INVOLUCRADO EN SUSCEPTIBILIDAD A

CÁNCER DE MAMA
1 2 2 2 3
Jordi Surrallés Calonge , Gonzalo Hernández , Mª José Ramírez , Jordi Minguillón , Paco Quiles , Gorka Ruíz De
4 2 5 6 7 8
Garibay , Roser Pujol , Rosario Prados Carvajal , Sara Gutiérrez Enríquez , Javier Benítez , Joan Brunet , Pablo
6 9 3 10
Huertas , Xose S. Puente , Conxi Lázaro , Miguel Angel Pujana
1
Universidad Autónoma de Barcelona. Departamento de Genética y de Microbiología Bellaterra. Cerdanyola del Vallès)
(Barcelona) España
2
Department of Genetics and Microbiology, Universitat Autònoma de Barcelona, Bellaterra, and Centro de Investigación
Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER) (Barcelona) España
3
Hereditary Cancer Programme, Catalan Institute of Oncology (ICO), Bellvitge Institute for Biomedical Research
(IDIBELL), (Barcelona) España
4
Breast Cancer and Systems Biology Laboratory, Program Against Cancer Therapeutic Resistance (ProCURE), ICO,
IDIBELL, (Barcelona) España
5
Centro Andaluz de Biología Molecular y Medicina Regenerativa (CABIMER) and Departamento de Genética,
Universidad de Sevilla (Sevilla) España
6
Oncogenetics Group, Vall d´Hebron Institute of Oncology (VHIO), (Barcelona) España
7
Human Cancer Genetics Program, Spanish National Cancer Research Centre (CNIO), (Madrid) España
8
Hereditary Cancer Programme, ICO, Girona Biomedical Research Institute (IDIBGI) (Girona) España
9
Department of Biochemistry and Molecular Biology, Instituto Universitario de Oncología, Universidad de Oviedo
(Oviedo) España
10
Hereditary Cancer Programme, Catalan Institute of Oncology (ICO), Bellvitge Institute for Biomedical Research
(IDIBELL),3Breast Cancer and Systems Biology Laboratory, Program Against Cancer Therapeutic Resistance
(ProCURE), ICO, IDIBELL (Barcelona) España
1 Objetivos
Mutaciones germinales en BRCA1/2 y BRIP1 están asociadas con elevado riesgo de aparición de
tumores de mama y de ovario. No obstante, no se conocen al completo los reguladores de estos
fenómenos y la mayoría de casos de cáncer de mama familiar no están genéticamente asignados a un
gen. Nuestro objetivo es expandir este conocimiento e identificar nuevos genes involucrados en cáncer de
mama hereditario.
En el ensayo del doble híbrido se usó como cebo a TOPBP1, conocida por su papel en reparación del
ADN y que interacciona con BRCA1. El papel de EDC4 en reparación se estudió mediante RNAi y KO
usando CRISPR/Cas9. Todos los exones de pacientes con cáncer de mama sin mutaciones en BRCA1/2
se secuenciaron. La patogenicidad de las mutaciones se estudió mediante complementación usando
partículas lentivirales en una línea EDC4 deficiente.
3 Resultados
Identificamos a EDC4 como un nuevo interactor tanto de TOPBP1 como de BRCA1. La perdida de EDC4
conlleva una hipersensibilidad a agentes que causan enlace cruzados (EC), fragilidad cromosómica y
deficiencia en reparación mediante RH. Similar a BRCA1, EDC4 regula la reparación promoviendo la
resección de las dobles roturas y permitiendo la carga de RPA y de RAD51 en el ssADN. Consistente con
estas deficiencias, células sin EDC4 son hipersensibles a inhibidores de la PARP. Encontramos 6
mutaciones de cambio de sentido en EDC4 en 427 pacientes sin mutaciones en BRCA1/2, una frecuencia
mucho más alta que en la población general. 5 de ellas se analizaron funcionalmente y se observó que
eran patogénicas. Observamos una LOH del locus de EDC4 en uno de los tumores analizados.
4 Conclusiones
Identificamos a EDC4 como la primera proteína de P-body involucrada en reparación de ADN. Mutaciones
germinales en EDC4 contribuyen a la susceptibilidad de cáncer de mama. Por ello proponemos BRCAP
(BRCA y P-body) como un alias para EDC4.
C0212 LA INCORPORACIÓN DE PANEL DE GENES MEJORA EL DIAGNÓSTICO
GENÉTICO EN CÁNCER DE MAMA/OVARIO HEREDITARIOS
1 2 3 4
Ana Blanco Pérez , Marta Santamariña Pena , Sandra Filippini Blanco Perez , Belinda Rodriguez Lage , Pablo Raña
3 2 6
Díez , Uxía Esperón Moldes , Ana Vega Gliemmo
1
Fundación Ramón Domínguez, Grupo de Medicina Xenómica-Universidade de Santiago de Compostela, CIBERER,
Instituto de Investigaciones Sanitarias de Santiago Santiago de Compostela (A Coruña) España
2
Grupo de Medicina Xenómica-Universidade de Santiago de Compostela, CIBERER, Instituto de Investigaciones
Sanitarias de Santiago (Santiago de Compostela) España
3
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica-Servicio Galego de Saúde, Grupo de Medicina Xenómica-
Universidade de Santiago de Compostela (Santiago de Compostela) España
4
Fundación Ramón Domínguez, Instituto de Investigaciones Sanitarias de Santiago (Santiago de Compostela) España
6
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica-Servicio Galego de Saúde, Grupo de Medicina Xenómica-
Universidade de Santiago de Compostela, CIBERER, Instituto de Investigaciones Sanitarias de Santiago (Santiago de
Compostela) España
1 Objetivos
Las variantes patogénicas en BRCA1 y BRCA2 sólo se identifican en el 20-40% de las familias de alto
riesgo; más del 60% de la predisposición hereditaria en CMOH no parece estar asociada a estos genes.
En la última década con el objetivo de buscar otras causas genéticas para CMOH, varios genes de alto y
moderado riesgo fueron identificados.
Las nuevas tecnologías de secuenciación NGS están teniendo gran impacto sobre los avances en
genómica y en medicina personalizada. La secuenciación NGS permite la captura específica y
secuenciación masiva en paralelo de muchos genes con alta cobertura.
Este es un escenario adecuado para la aplicación de un panel multigénico diagnóstico de CMOH, al ser
posible la inclusión en un único experimento de todos los genes que puedan estar implicados con el
desarrollo de la enfermedad.
El objetivo principal de nuestro trabajo es valorar la sensibilidad diagnóstica de la implementación de
nuevos genes
En nuestro laboratorio hemos desarrollado un panel multigénico de 14 genes implicados en cáncer de
CMOH y lo hemos incorporado a la rutina diagnóstica. Los genes incluidos son: BRCA1, BRCA2, BRIP1,
CDH1, CHEK2, MLH1, MSH2, MSH6, PALB2, PTEN, RAD51C, RAD51D, STK11, TP53.
3 Resultados
A día de hoy hemos analizado más de 500 familias e identificado variantes patogénicas en distintos
genes, entre los que destacan: CHECK2, PALB2, RAD51C, RAD51D, STK11 y TP53.
Estos resultados han sido de gran utilidad para los pacientes y sus familias.
4 Conclusiones
Las pruebas de panel NGS que permiten el análisis simultáneo de genes de elevada penetrancia han
incrementado la sensibilidad de la prueba diagnóstica para cáncer de mama/ovario hereditarios.
C0307 IMPLEMENTACIÓN DE UN PROGRAMA DE MEDICINA DE PRECISIÓN EN
ONCOLOGÍA PEDIÁTRICA. RESULTADOS DE UN ESTUDIO PILOTO
1 2 2 3
Cristina Robledo Montero , Carlos Rodríguez-Martín* , Gema Gómez-Mariano , Ana Sastre , Jose Juan Pozo-
4 5 5 6 7 8
Kreilinger , Cristina Mata , Jorge Huerta , Manuel Ramírez , Daniel Azorín , Javier Alonso
1
Unidad de Tumores Sólidos Infantiles. Instituto de Investigación de Enfermedades Raras, Instituto de Salud Carlos III
Majadahonda (MADRID) España
2
Servicio de Diagnóstico Genético. Instituto de Investigación de Enfermedades Raras, ISCIII (Madrid) España
3
Servicio de Hemato-Oncología Pediátrica. Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
4
Servicio de Anatomía Patológica. Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
5
Sección de Oncohematología infantil, Servicio de pediatría. Hospital General Universitario Gregorio Marañón (Madrid)
España
6
Servicio de Oncología, Hospital Universitario Niño Jesús (Madrid) España
7
Servicio de Anatomía Patológica, Hospital Universitario Niño Jesús (Madrid) España
8
Unidad de Tumores Sólidos Infantiles. Instituto de Investigación de Enfermedades Raras, ISCIII (Madrid) España
1 Objetivos
Evaluar la utilidad de la secuenciación masiva para caracterizar las alteraciones genéticas tumorales
presentes en pacientes con cáncer infantil y valorar, en el contexto de un equipo multidisciplinar, la
utilidad diagnóstica, pronóstica y terapéutica de las alteraciones identificadas en tres servicios de
referencia en oncología pediátrica.
La caracterización genética de las muestras tumorales se llevó a cabo con un panel comercial de 160
genes frecuentemente mutados en cáncer, y que incluía la mayoría de los genes diana que disponen de
una terapia biológica asociada (GeneRead_Comprehensive_Cancer, Qiagen). Hasta el momento se han
estudiado un total de 34 pacientes diagnosticados con diferentes tipos de cáncer infantil: 19 Leucemias, 8
Sarcomas y 7 otros tumores.
3 Resultados
El 53% de los pacientes presentaron mutaciones en alguno de los genes analizados (18/34). Se
detectaron un total de 43 mutaciones. Los genes más frecuentemente mutados fueron KRAS (5/43),
TP53 (4/43), NRAS (3/43) y PTEN (3/43). La mutación p.G12D en KRAS se encontró en tres pacientes.
Varias de las alteraciones identificadas disponen de terapias biológicas asociadas (p. ej. Everolimus
(PIK3CA, PTEN); Trametinib (NRAS/KRAS); Trastuzumab (ERBB2); Sorafenib (FLT3)). La identificación
de una mutación en CTNNB1 en un paciente contribuyó a confirmar su diagnóstico como fascitis craneal.
Un paciente fue portador de una mutación constitucional en DICER1 lo que contribuyó a caracterizar el
síndrome asociado.
4 Conclusiones
Los resultados obtenidos en este estudio piloto llevado a cabo en tres servicios de referencia en oncología
pediátrica demuestran que la caracterización genética de tumores infantiles mediante técnicas de
secuenciación masiva es de utilidad también en el contexto del cáncer infantil, permitiendo identificar
alteraciones con valor diagnóstico, pronóstico y terapéutico, abriendo la puerta a la utilización de fármacos
biológicos dirigidos en los tumores refractarios.
Este trabajo ha sido financiado por la Fundación Sonrisa de Alex, La Hucha de Tomás-ASION y la
Asociación Pablo Ugarte.
C0523 INCREMENTO DEL RENDIMIENTO DIAGNÓSTICO MEDIANTE EL USO DE UN
PANEL DE GENES RELACIONADOS CON EL CÁNCER HEREDITARIO
1 2 2 2
Lidia Feliubadaló Elorza , Elisabeth Castellanos Pérez , Bernat Gel Moreno , Eduard Serra Arenas
1
Programa de Cáncer Hereditario-CIBERONC, Institut Catala d Oncologia (ICO-IDIBELL) L Hospitalet de Llobregat
(Barcelona) España
2
Programa de Cáncer Hereditario-CIBERONC, The Institute for Health Science Research Germans Trias i Pujol (IGTP)
- IMPPC, Can Ruti Biomedical Campus, Badalona (Barcelona) España
1 Objetivos
Implantación en la rutina diagnóstica de un panel de genes de predisposición al cáncer hereditario.
Evaluación de su rendimiento.
Análisis de 411 pacientes con sospecha clínica de predisposición hereditaria al cáncer, mediante
secuenciación masiva (MiSeq-Illumina)de un panel de diseño propio I2HCP (SureSelect-Agilent) que
contiene 122 genes (1,2). El análisis se ha dividido en dos fases. En la fase diagnóstica se han
seleccionado diversos subconjuntos de genes dependiendo de la categorización clínica de los pacientes.
En la fase de investigación se han analizado todos los genes del panel.
3 Resultados
A nivel diagnóstico se han identificado 85 mutaciones patogénicas en 82 pacientes (20,0%); con el
algoritmo previo al uso del panel se hubiesen detectado 68 mutaciones patogénicas en 66 pacientes
(16,1%). Adicionalmente, se han detectado 282 variantes de significado desconocido en los genes
estudiados a nivel diagnóstico.
En el marco de investigación, se han identificado mutaciones putativamente patogénicas en genes no
contemplados inicialmente según la historia personal/familiar (47; 11,4%). Además se ha obtenido una
visión panorámica del espectro mutacional de los pacientes en el conjunto de genes del panel, que se
valorarán como posibles genes modificadores en nuestra cohorte. Por último, cabe destacar que se han
detectado 12 (2,9%) pacientes portadores de más de una mutación patogénica, confirmando la existencia
de pacientes con el denominado síndrome MINAS (Multilocus Inherited Neoplasia Alleles).
4 Conclusiones
La estrategia empleada ha permitido aumentar el rendimiento diagnóstico, mejorando el manejo clínico de
los pacientes así como profundizar en el conocimiento de las bases genéticas del cáncer hereditario. La
clasificación clínica de las VSD identificadas es uno de los principales retos del uso de paneles.
(1,2) Castellanos et al. y Feliubadaló et al. Scientific Reports, 2017-Jan 4;7
Financiación: Instituto de Salud Carlos III-FEDER (PI13/00285, PI16/00563, PIE13/00022,
RD12/0036/0031), Govern Catalunya (2014SGR338), Asociación Española Contra el Cáncer.
C0524 CÁNCER FAMILIAR PAPILAR DE TIROIDES: IDENTIFICACIÓN DE DEFECTOS
GENÉTICOS HEREDITARIOS A TRAVÉS DE UN PANEL DIRIGIDO DE NGS.
1 2 3 4 5
Paula Jiménez García , Rajdee de Randamie , Sergio Donnay , Rita María Regojo , Gabriel Ángel Martos , Ángela del
6 7 7 8 9 10
Pozo , Julián Nevado , Elena Vallespín , Jesús Argente , David Hardisson , José Carlos Moreno
1
INGEMM Hospital La Paz Madrid (Madrid) España
2
Laboratorio Molecular de Tiroides, INGEMM, Hospital La Paz (Madrid) España
3
Endocrinología, Hospital de Alcorcón (Madrid) España
4
Departamento de Anatomía Patológica, Hospital La Paz, (Madrid) España
5
Endocrinología, Hospital del Niño Jesús (Madrid) España
6
Bioinformática, INGEMM, Hospital La Paz (Madrid) España
7
Genómica Estructural y Funcional. INGEMM. Hospital La Paz (Madrid) España
8
Pediatría. Hospital del Niño Jesús.. Profesor asociado de la Universidad Autónoma de Madrid (Madrid) España
9
Departamento de Anatomía Patológica, Hospital La Paz,. Profesor Asociado de la Universidad Autónoma de Madrid
(Madrid) España
10
Laboratorio Molecular de Tiroides, INGEMM, Hospital La Paz. Profesor Asociado de la Universidad Autónoma de
1 Objetivos
Introducción: El carcinoma papilar de tiroides (CPT) es la neoplasia endocrina más frecuente. Es
normalmente esporádico, pero el 9% de casos se presenta en agrupamiento familiar (CFPT), sugiriendo la
existencia de una susceptibilidad genética hereditaria.
Objetivo: Identificar genes involucrados en la susceptibilidad hereditaria al CFPT.
Pacientes y métodos: Secuenciación del ADN germinal de una cohorte de 10 pacientes índice con CFPT
en el panel NGS TiroseqV.1 de diseño propio dirigido de 320 genes tiroideos (Illumina, NextSeq500).
Filtrado de variantes por frecuencia poblacional <1% y alta predicción de patogenicidad in silico.
Confirmación de variantes por PCR y Sanger. Segregación fenotípica de variantes en familiares afectos y
no afectos.
3 Resultados
Resultados: En 10 familias se identificaron un total de 22 variantes candidatas en 18 genes (IDH2,
GLIS3, LPCAT2, TPO, GRASP, AFAP1L2, NOTCH1, EIF3A, ZHFX3, SECISBP2, PLCB1, UBR1, TSC2,
PDE8B, TG, NRG1, NCOA3, FOXE1). 6/8 variantes estudiadas no segregaban con el fenotipo CPT en los
pedigríes. Sin embargo, 2 mutaciones missense en heterocigosis en los genes PLCB1 y EIF3A,
segregaron con CFPT. La mutación en fosfolipasa C Beta 1 (PLCB1) (c.C3347T, p.A1116V), con MAF de
0,03%, está presente en 5 pacientes de 2 generaciones y ausente en 2 sanos. Se localiza en el dominio
funcional para interacción con las subunidades de Gα. En EIF3A, la mutación c.3136C>T (R1046W), con
MAF de 0,2%, cosegrega con CPT en otra familia, presentándose en 2/2 pacientes de 2 generaciones y
ausente en cónyuges sanos.
4 Conclusiones
Conclusiones: La NGS dirigida a un número amplio de genes puede ser alternativa útil y más barata que
el exoma para el gene-finding. Dos variantes hereditarias raras en PLBC1 y EIF3, ambos implicados en
control de ciclo celular y proliferación, representan candidatos plausibles de susceptibilidad al CPFT que
han de sustanciarse en ensayos funcionales in vitro en la siguiente fase del estudio.
C0113 MUTACIONES GERMINALES EN RB1 Y OSTEOSARCOMAGÉNESIS. EL
MANTENIMIENTO DE LA ARQUITECTURA TELOMÉRICA COMO PUNTO CRÍTICO EN LA
INICIACIÓN DE PROCESOS CARCINOGÉNICOS
1 1 1 1
Iria Gonzalez Vasconcellos , Isidoro Lopez Baltar , Montserrat Rodríguez Pedreira , Alejandro Mosquera Rey ,
2 2 2 1
Natasa Anastasov , Michael Rosemann , Michael Atkinson , Jose Luis Fernández García
1
Departamento de Genética. Hospital Teresa Herrera A Coruña (A Coruña) España
2
Institute of Radiation Biology, Helmholtz Zentrum München, (Baviera) Alemania
1 Objetivos
Las mutaciones germinales del gen supresor de tumores RB1 predisponen a osteosarcomas espontáneos
y radioinducidos en humanos y modelos de ratón. El objetivo de este estudio es ahondar en el mecanismo
por el que las mutaciones en Rb1 predisponen a osteosarcoma.
+/+ +/Δ19
Se utilizaron osteoblastos primarios wild-type (Rb1 ) y haploinsuficientes en Rb1 (Rb1 ), obtenidos
mediante el sistema Cre-LoxP con diana en el exón 19, y la línea humana U2OS. Se emplearon técnicas
citogenéticas, FISH telomérico de ADN y ARN, western-blot, citometría de flujo, PCR cuantitativa,
infecciones lentivirales y transfecciones, ensayos de actividad promotora, ensayos ChIP y ensayo TCCA
de compactación de cromatina telomérica.
3 Resultados
+/Δ19
Los osteoblastos Rb1 presentaron inestabilidad genética debido a disfunción del telómero por una
erosión acelerada de las secuencias teloméricas. La exposición a radiación no incrementó la pérdida de
secuencias teloméricas pero amplificó la inestabilidad genética. La expresión del RNA largo no codificante
implicado en el mantenimiento de la estructura telomérica (TERRA), se encontró reducida en las células
+/Δ19
Rb1 . Los estudios de transducción y transfección demostraron que los niveles de TERRA variaban
según los niveles de Rb1. Posteriormente, el análisis in silico identificó una secuencia promotora de
TERRA que se evidenció ligaba la proteína Rb1. Los ensayos ChIP demostraron una unión de Rb1 con el
+/Δ19
promotor de TERRA y los osteoblastos Rb1 presentaban menores niveles de Rb1 ligados al promotor.
Además, se observaron cambios en el patrón de modificaciones de histonas asociadas al telómero, en
consonancia con una menor compactación cromatínica.
4 Conclusiones
Rb1 ejerce una función oncosupresora contribuyendo a la estabilidad telomérica mediante la regulación
+/Δ19
de TERRA. Los osteoblastos Rb1 presentan inestabilidad genética debida a una arquitectura
telomérica alterada, consecuente con la deficiencia de TERRA. Esta función no canónica de Rb1
contribuye a explicar cómo deficiencias en este gen pueden contribuir a la carcinogénesis.
C0019 CARACTERIZACIÓN DE LA PRIMERA MUTACIÓN FUNDADORA EN EL GEN DE LA
POLIMERASA DELTA-1 (POLD1)
1 2 3 4 2
Rosario Ferrer Avargues , Virginia Díez Obrero , Ester Martín Tomás , Eva Hernández Illán , María Isabel Castillejo ,
2 2 2 2 2
Alan Codoñer Alejos , Sergio Larrínaga , Víctor Manuel Barberá , Adela Castillejo , José Luis Soto
1
CSIC Madrid (madrid) españa
2
Unidad de Genética Molecular, HGUE (Alicante) España
3
Análisis Clínicos. HGUE (Alicante) España
4
Unidad de Investigación. Hospital Universitario Alicante (Alicante) España
1 Objetivos
Determinar el carácter fundador de la mutación patogénicaenlínea germinal en POLD1 c.1421T>C;
p.(Leu474Pro), responsable de un elevado riesgo a cáncer colorrectal (CCR) y otros tumores.
Se incluyeron 32 individuos procedentes de las 4 familias aparentemente no relacionadas descritas hasta
la fecha con la mutación p.(Leu474Pro): 20 portadores heterocigotos y 12 no portadores de la mutación.
Además se incluyeron 30 controles sanos (DNAs de sangre) para estudiar la frecuencia alélica en
población normal de los marcadores a analizar. Se realizó un análisis de haplotipos utilizando 14
marcadores polimórficos (11 microsatélites y 3 SNPs) abarcando una región de 13,818 Mb circundando el
locus POLD1 en 19q13.33. La estimación de la edad de la mutación se llevó a cabo mediante el método
de marcador único.
3 Resultados
Las cuatro familias con la mutación son originarias de la Comunidad Valenciana. Se identificó un haplotipo
mínimo común en estas familias de 2,995 Mb. La frecuencia alélica en controles sanos de este haplotipo
-6
fue de 1,25·10 , confirmando que la mutación p.(Leu474Pro) es la primera mutación fundadora
identificadaen POLD1. La edad estimada de aparición de la mutación es de 4 a 28 generaciones (entre
100 y 700 años).
A nivel clínico, se diagnosticaron 13 tumores en 10 portadores: 8 CCR, 3 cánceres endometriales, un
GIST y un cáncer de mama. La mediana de edad de aparición del cáncer de los portadores fue de 48
años. La penetrancia observada fue del 50% y el riesgo acumulado a los 50 años fue del 30%.
4 Conclusiones
La mutación de p.(Leu474Pro) es la primera mutación fundadora identificadaendicho gen. El fenotipo
clínico de esta mutación coincide con el del síndrome de Lynch y en consecuencia, las recomendaciones
de vigilancia y seguimiento deben ser similares.
Sesión: Mecanismos Molecular/ Asensor Genético
C0449 ANEMIA DE FANCONI: EVALUACIÓN DEL SEGUIMIENTO MÉDICO Y EL ROL DEL

ASESOR GENÉTICO
1 2 2 3 2 2
Judith Reina Castillón , Irene Esteban , Neus Gadea , Cristina Díaz de Heredia , Judith Balmaña , Estela Carrasco
1
Departamento de Ciencias Experimentales y de la Salud (Universitat Pompeu Fabra). Instituto Hospital del Mar de
Investigaciones Médicas (IMIM). Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER)
Barcelona (Barcelona) España
2
Unidad de Alto Riesgo y Prevención del Cáncer. Hospital Vall de Hebrón. (Barcelona) España
3
Servicio de Oncología y Hematología Pediátricas. Hospital Vall de Hebrón (Barcelona) España
1 Objetivos
La anemia de Fanconi (AF) es una enfermedad genética caracterizada por defectos congénitos, riesgo de
fallo de medula osea (MO) y de tumores hematológicos y sólidos requiriendo seguimiento multidisciplinar.
Hemos evaluado la calidad y periodicidad de los controles médicos en pacientes AF adultos y el rol del
asesor genético en dicha enfermedad.
La calidad del seguimiento médico fue estudiada mediante la evaluación de la historia clínica de 21
pacientes AF adultos. El conocimiento acerca la enfermedad, su impacto psicológico y la adhesión al
seguimiento fueron evaluados con un cuestionario en 50 individuos (pacientes y padres) regularmente
atendidos por asesores genéticos o facultativos con funciones similares.
3 Resultados
Respecto al seguimiento establecido por la guía española de diagnóstico y manejo de AF, hemos
detectado un infraseguimiento a nivel hematológico (p=0.001) y un sobreseguimiento a nivel ginecológico
(p=0.002) así como baja frecuencia de visitas al dentista, aspirados de MO, tests de detección del VPH y
controles hormonales. La coordinación en el mismo centro de los especialistas, el recibir recordartorios de
visitas y concentrar varios controles en un mismo día aumenta la adherencia al seguimiento. La
información y el apoyo psicológico proporcionados por los asesores genéticos contribuyen a que
pacientes y padres tengan un conociemiento satisfactorio de la enfermedad pero algunos conceptos
deberían ser reforzardos. Las madres muestran mayor preocupación por la clínica de la AF y asimilan
peor el no saber el diagnóstico molecular.
4 Conclusiones
La coordinación de los profesionales y las visitas de estos pacientes permiten que el seguimiento de los
adultos AF siga globalmente las recomendaciones de la guía española de diagnóstico y manejo de AF. Se
detecta que la frecuencia de los controles hematológicos y ginecológicos difieren un poco de la
recomendada. Manteniendo informadas a las familias y proporcionándoles apoyo psicológico, los
asesores genéticos contribuyen a un satisfactorio conocimiento de la enfermedad.
C0050 RECUPERACIÓN DEL MARCO DE LECTURA MEDIANTE EDICIÓN GÉNICA DEL
GEN COL7A1 EN CÉLULAS PRIMARIAS DE PACIENTE DE EBDR
1 2 2 3 3
Ángeles Mencía Rodríguez , Cristina Chamorro Poyo , Blanca Duarte , Marcela del Río , Fernando Larcher , Rodolfo
2
Murillas
1
Departamento de Bioingeniería. UC3M/Fundación Jiménez Díaz (IIS-FJD) de Medicina Regenerativa y Bioingeniería
Tisular Madrid (Madrid) España
2
División de Biomedicina epitelial. CIEMAT-CIBERER/Fundación Jiménez Díaz (IIS-FJD) de Medicina Regenerativa y
Bioingeniería Tisular (Madrid) España
3
Departamento de Bioingeniería. UC3M/División de Biomedicina epitelial. CIEMAT-CIBERER/Fundación Jiménez Díaz
(IIS-FJD) de Medicina Regenerativa y Bioingeniería Tisular (Madrid) España
1 Objetivos
La Epidermolisis bullosa distrófica de herencia autosómica recesiva (EBDR) es una enfermedad rara
monogénica asociada a mutaciones en el gen COL7A1. La mutación c.6527insC está localizada en el
exón 80 y es muy frecuente en la cohorte de pacientes españoles. Ocasiona la alteración del marco de
lectura y la aparición de un codón de parada prematuro. Como consecuencia, los pacientes portadores
de esta mutación en homocigosis carecen de la proteína, Colágeno VII, en la región dermoepidérmica. El
alto porcentaje de pacientes que presenta esta mutación hace que sea adecuada para diseñar
aproximaciones terapéuticas específicas con el fin de corregir esta mutación en el genoma o bien sus
efectos sobre el marco de lectura.
Se diseñaron nucleasas TALE que reconocen secuencias próximas a la mutación c.6527insC. Se
utilizaron vectores adenovirales para la transducción de los vectores TALEN y vectores adeno-asociados
para la transducción del DNA molde para favorecer la recombinación homóloga. Como primera
aproximación, utilizamos una línea inmortalizada de queratinocitos de un paciente portador de la citada
mutación en homocigosis, para después trabajar con los queratinocitos primarios de paciente.
3 Resultados
Conseguimos corregir el gen COL7A1 mediante recombinación homóloga y recuperar el marco de lectura
aprovechando los sistemas de reparación celular que inducen pequeñas indels. La expresión de
Colágeno VII se comprobó tanto en células corregidas como en equivalentes de piel trasplantados en
ratones inmunodeficientes. Utilizando la misma estrategia, hemos conseguido aislar clones en los que se
ha corregido el marco de lectura alterado por la mutación c.6527insC en queratinocitos primarios de
paciente y utilizarlos para regenerar piel in vivo.
4 Conclusiones
Nuestros resultados sirven como prueba de concepto de que es factible editar el gen COL7A1 de forma
dirigida en células primarias de paciente, aislar clones corregidos y utilizarlos para realizar trasplantes en
los propios pacientes.
C0010 FENOTIPO Y GENOTIPO DE PACIENTES RUBINSTEIN-TAYBI CON MUTACIÓN EN
EP300.
1 2 3 4
María López Martínez , Judith Armstrong , Inmaculada García-Cobaleda , Sixto García-Miñaur , Fernando Santos-
4 5 6
Simarro , Verónica Seidel , ELENA DOMINGUEZ GARRIDO
1
FUNDACIÓN RIOJA SALUD. EDIFICIO CIBIR (La Rioja) España
2
3
Hospital Universitario NS de Candelaria (Santa Cruz de Tenerife) España
4
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM)-IdiPAZ, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
5
Hospital General Universitario Gregorio Marañón (Madrid) España
6
FUNDACIÓN RIOJA SALUD. EDIFICIO CIBIR, UNIDAD DE DIAGNÓSTICO MOLECULAR LOGROÑO (LA RIOJA)
ESPAÑA
1 Objetivos
El Síndrome de Rubinstein-Taybi (SRT) se caracteriza por pulgares anchos en manos y pies, anomalías
faciales, retraso del crecimiento y discapacidad intelectual (DI). Se han descrito mutaciones en los genes
CREBBP y EP300. Este trabajo presenta la caracterización clínica y molecular de una cohorte de
pacientes con mutaciones en EP300.
De 60 individuos con sospecha clínica de SRT, se incluyeron en el estudio aquellos que resultaron
negativos en el análisis del gen CREBBP. Se realizaron: MLPA, secuenciación mediante panel de EP300
y confirmación mediante secuenciación Sanger. Las variantes obtenidas fueron evaluadas in-silico para
valorar su patogenicidad.
3 Resultados
Se encontraron mutaciones en EP300 en 8 pacientes. La edad de diagnosis fue (nº de casos): temprana
(2), pediátrica (6) o adulta (1, madre). Las características fenotípicas encontradas incluyeron: (DI (8), leve
(4/8) y moderada (4/8); retraso en el crecimiento (3); problemas de alimentación infantil (4); retraso
psicomotor (2); retraso en el lenguaje (3); autismo (2). Entre las características faciales destacan:
microcefalia, fisuras palpebrales descendentes, columela colgante bajo fosas nasales y nariz prominente.
Se observaron pulgares anchos en manos/pies en 4 pacientes, angulados sólo en uno de ellos. Las
variantes encontradas fueron: 1 deleción de varios exones, 4 frameshift, 1 nonsense, una missense y 1
mutación que altera el splicing. El origen de novo se confirmó en todos los casos excepto en uno
(detectado en la madre).
4 Conclusiones
Los pacientes SRT-EP300 presentan una capacidad intelectual más conservada y rasgos faciales menos
marcados que los SRT-CREBBP. Es difícil establecer una correlación fenotipo-genotipo en estos
pacientes; los individuos con mutaciones en EP300 pueden presentar un fenotipo más leve o diferente y
hay que tener en cuenta que todos nuestros pacientes han sido diagnosticados clínicamente de SRT. La
menor prevalencia de EP300 podría explicarse por un no diagnóstico/diagnóstico incorrecto de estos
pacientes.
C0341 MECANISMOS MOLECULARES DE LOS REORDENAMIENTOS CROMOSÓMICOS
RECÍPROCOS EN 7Q11.23
Raquel Flores Peirats, Roser Corominas Castiñeira, Maria Gabriela Palacios Verdu, Nuria Rivera Brugués, Ivon
Cuscó Martí, Luís Alberto Pérez Jurado
Universitat Pompeu Fabra (BARCELONA) España
1 Objetivos
Los síndromes de Williams-Beuren (SWB) y de microduplicación 7q11.23 (7DUP) son dos trastornos del
neurodesarrollo con afectación multisistémica. El SWB está causado por una deleción genómica
recurrente en 7q11.23, mientras que la duplicación de esta misma región causa 7DUP. La generación de
estos eventos está mediada por recombinación homóloga no-alélica (NAHR) entre duplicaciones
segmentarias (DS) de alta homología específicas de la región.
Hemos caracterizado los reordenamientos de 720 casos con SWB y 96 con 7DUP mediante diversos
métodos que incluyen microsatélites, cuantificación de variantes parálogas de secuencia y secuenciación,
lo cual ha permitido determinar el intervalo exacto alterado, el origen parental, el punto de recombinación
y los genes afectados.
3 Resultados
Mientras que todas las deleciones ocurrieron de novo, el 18% de las duplicaciones son heredadas. El tipo
y tamaño del reordenamiento se distribuye de manera similar en deleciones y duplicaciones: 1.55Mb (86%
/ 88%), 1.83Mb (12% / 5%) y atípicas (2% / 7%). No existe ninguna preferencia en el origen parental de
ambos reordenamientos. Se pueden detectar alelos de riesgo en casi 1/3 de padres transmisores,
incluyendo inversiones paracéntricas y variaciones estructurales en las DS flanqueantes. En estos casos,
los reordenamientos son por NAHR inter-cromosómico. Se han definido tres puntos calientes de
recombinación, uno para reordenamientos intracromosómicos, y dos para reordenamientos mediados por
inversión. Dependiendo del punto de recombinación resulta un número variable de copias funcionales de
los genes NCF1 y/o GTF2IRD2, con generación incluso de transcritos quiméricos, lo que correlaciona con
variabilidad fenotípica.
4 Conclusiones
La deleción del SWB y la microduplicación 7DUP están causadas por mecanismos moleculares de NAHR
recíproco entre DS, y facilitadas por variación estructural en la región. Existen puntos calientes de
recombinación específicos de división celular. La definición molecular detallada permite explicar parte de
la variabilidad fenotípica de ambos cuadros.
C0473 NUEVA VARIANTE EN NF1 DE NOVO EN PACIENTE CON SÍNDROME DE
NOONAN.
1 1 2 1
Carmen Palma Milla , José Miguel Lezana Rosales , Sara Franco Freire , Sandra Carmona Tamajón , Carmen Torres
1 1 1 1 1
Fernández , Javier López Montiel , Julio Torres González , Carlos Sánchez Linares , Juan López Siles , Carmen Benito
2
Rodríguez
1
C.G.M GENETAQ Málaga (Málaga) España
2
UGC Laboratorio H.R.U Málaga (Málaga) España
1 Objetivos
Estudio de paciente con facies peculiar y retraso madurativo. No presenta manchas café leche. Padres
asintomáticos.
Cariotipo, array-CGH (60k), MLPA de regiones subteloméricas, estudio de X Fragil (FMR1) y Opitz GBBB
ligado al X (gen MID1) negativos. Se solicita panel de NGS de RASopatías.
Panel NGS de RASopatías. Secuenciación paired-end de 2x151pb mediante el kit TruSight One (Illumina)
en MiSeq (Illumina). Análisis de la variante de interés en los progenitores del paciente mediante
amplificación con primers específicos y secuenciación mediante ABI 3130XL (Applied Biosystems).
3 Resultados
Se identifica en el probando la variante missense c.3634G>A (p.Val1212Ile) en heterocigosis en el gen
NF1. Este cambio, no descrito en la bibliografía ni en bases de datos consultadas afecta a un aminoácido
conservado; las predicciones bioinformáticas realizadas coinciden en un posible efecto patogénico
(Polyphen2, Mutation taster, LTR). Esta variante no ha sido detectada en los progenitores del caso índice,
por lo que aparentemente tiene un origen de novo (si bien no se puede descartar la posibilidad de un
mosaicismo germinal en alguno de los progenitores).
Por todo lo anterior, la variante c.3634G>A detectada en NF1 se considera probablemente patogénica.
El 12% de los individuos con NF1 presentan un fenotipo de síndrome de Noonan (Colley et al. 1996) y se
han descrito otros casos de variantes missense asociadas a fenotipos de Noonan o Noonan-
neurofibromatosis. La variante c.3634G>A estaría dentro del dominio RAS-GAP de neurofibromina al igual
que ocurre con otras mutaciones descritas en NF1 asociadas a síndrome de Noonan (Chen et al 2014).
4 Conclusiones
Se detecta una variante de novo no descrita en el gen NF1: c.3634G>A, clasificada como probablemente
patogénica. Este caso ilustra la utilidad de la secuenciación masiva en el diagnóstico de Noonan y otras
RASopatías donde el diagnóstico diferencial puede ser difícil.
Sesión: Neuropatía y Epilepsia
C0395 IDENTIFICACIÓN DEL DEFECTO MOLECULAR EN PACIENTES CON SÍNDROME

DE DRAVET MEDIANTE LA APLICACIÓN DE UN PANEL DE SECUENCIACIÓN MASIVA
PARA EPILEPSIAS GENÉTICAS
1 2 2 3 2
Eva Barroso , Miguel de la Puente Iglesias , Alba Rubio Lozano , Ana Mingorance Le Meur , Pablo Lapunzina Badía
1
Hospital Universitario La Paz, INGEMM Madrid (MADRID) España
2
INGEMM (Madrid) España
3
Fundación Síndrome de Dravet (Madrid) España
1 Objetivos
El síndrome de Dravet (SD, MIM607208) es una epilepsia infantil severa que se debe a mutaciones en
heterocigosis del gen SCN1A y otros genes minoritarios. La aplicación de un panel de NGS específico
para epilepsias de base genética puede mejorar la tasa diagnóstica en pacientes SD, y permitir la
identificación de nuevos genes y rutas implicadas en esta epilepsia.
Se estudió una serie de 107 pacientes con diagnóstico presuntivo de SD. Se aplicó un panel de NGS de
diseño propio, Epilepsy v5.0 (425 genes), mediante captura de Roche Nimblegen SeqCap EZ y
secuenciación MiSeq o NextSeq de Illumina. Se utilizó una herramienta bioinformática desarrollada por
nuestro instituto para el alineamiento y anotación de variantes. El filtrado de variantes siguió un protocolo
propio y, posteriormente, se estableció la correlación genotipo-fenotipo, la caracterización de variantes
según ACMG y la validación por secuenciación Sanger.
3 Resultados
El análisis de NGS con el panel Epilepsy v5.0 en los pacientes SD permitió el diagnóstico molecular de 41
pacientes SD portadores de variantes en SCN1A patogénicas (28), posiblemente patogénicas (9) o
variantes de significado incierto (VOUS) (4). Asimismo, 18 pacientes SD negativos para SCN1A resultaron
portadores de 18 variantes patogénicas (3), posiblemente patogénicas (3) o VOUS (12) en 14 genes
adicionales que podrían explicar su defecto molecular.
4 Conclusiones
Un 55,1% de los pacientes estudiados (59/107) presenta variantes en SCN1A o genes adicionales que
podrían ser la causa molecular del SD. La aplicación del panel NGS Epilepsy v5.0 mejora la tasa de
detección de mutaciones en pacientes SD, anteriormente establecida por nuestro laboratorio en un 44,3%
por secuenciación Sanger y MLPA, limitada al estudio de SCN1A. Se han identificado variantes
candidatas en genes anteriormente no relacionados con SD y que podrían abrir una nueva vía de
diagnóstico molecular y tratamiento para pacientes SD sin causa molecular conocida hasta el momento.
C0055 DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE NEUROPATÍAS PERIFÉRICAS HEREDITARIAS:
¿PANEL DE GENES O SECUENCIACIÓN DE EXOMA?
1 1 1 2 3
Vincenzo Lupo , Ana Sánchez Monteagudo , Francisco García García , Marisa Barreiro , Mar García Romero ,
4 5 5 5 6 4
Antonia Alberti , Sophia Derdak , Enric Serra , Sergi Beltran , Celedonio Marquéz , Carlos Casasnovas , Samuel
3 2 2 1
Ignacio Pascual , Marina Frasquet , Teresa Sevilla , Carmen Espinós
1
Centro de Investigación Príncipe Felipe (Valencia) España
2
Hospital Universitari i Politècnic La Fe / Instituto de Ivestigación Sanitario-La Fe (Valencia) España
3
Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
4
Hospital de Bellvitge (Barcelona) España
5
Centre Nacional de Análisis, Barcelona Ins Genómico-Centre de Regulació Genómica (CNAG-CRG), Barcelona
Institute of Science and Technology (BIST) / Universitat Pompeu Fabra (UPF) (Barcelona) España
6
Hospital Universitario Virgen del Rocío (Sevilla) España
1 Objetivos
Diseño, validación e implementación de herramientas basadas en secuenciación masiva para el
diagnóstico molecular de neuropatías periféricas hereditarias (NPH): enfermedad de Charcot-Marie-Tooth
(CMT), atrofia espinal distal (AED), esclerosis lateral amiotrófica (ELA), y atrofia muscular espinal (AME).
El análisis genético se realizó mediante dos aproximaciones: (1) secuenciación de exoma de 3-4 DNAs
por familia en el CNAG; (2) panel de genes de diseño propio basados en tecnología de Agilent
Technologies para Illumina, en muestras independientes de pacientes. Los ficheros FASTQ se procesaron
con distintos pipelines según la aproximación empleada:(1) propios del CNAG y/o del BIER-CIBERER; (2)
según estándares del GATK.
3 Resultados
(1) La secuenciación de exoma nos ha permitido identificar mutaciones no descritas en genes conocidos,
nuevos genes candidatos, y nuevos fenotipos clínicos asociados a genes previamente caracterizados, en
un 70% de casos analizados. (2) El panel de genes nos ha permitido detectar mutaciones patológicas
descritas y mutaciones noveles probablemente patológicas en aproximadamente el 40% de casos
estudiados. El análisis estadístico de nuestro panel de genes, muestra que todos las dianas de interés
correspondientes a los genes estudiados se han secuenciado, y que el 99,99% de bases nucleotídicas
presenta una cobertura >20X.
4 Conclusiones
La secuenciación de exoma es una herramienta potente, ya que permite identificar las mutaciones
responsables aun cuando se trate de un gen previamente no descrito. Nuestro panel de genes presenta
una cobertura muy alta y homogénea de los targets, y es coste-efectivo. Ambas estrategias nos han
ayudado a reclasificar genéticamente algunos fenotipos clínicos, un desafío imposible con las técnicas de
secuenciación convencional. Finalmente, la comparación entre estas dos estrategias nos sugiere que el
panel de genes podría considerarse como primera herramienta diagnóstica para las NPHs cuyo
diagnóstico diferencial, dado el solapamiento clínico existente entre las diferentes entidades, es difícil de
abordar.
Financiación: ISCIII (PI12/00453, PI15/00187); Fundació per Amor a l’Art
C0377 DETECCIÓN DE MOSAICISMO PARENTAL EN FAMILIAS DE PACIENTES CON
SÍNDROME DE DRAVET Y MUTACIONES EN SCN1A
1 1 1 2
Alba Rubio Lozano , Gema Gordo Trujillo , Pablo Lapunzina Badía , Eva Barroso
1
2
1 Objetivos
El síndrome de Dravet (SD, MIM607208) es una epilepsia infantil severa que se debe mayoritariamente a
mutaciones en heterocigosis del gen SCN1A. Los objetivos son: identificar el ratio de mosaicismo parental
para mutaciones “de novo” en SCN1A en familias de pacientes SD de nuestra cohorte, estimado en un
10%; verificar que el mosaicismo está más frecuentemente presente y en mayor porcentaje en padres con
síntomas neurológicos; establecer un protocolo de actuación mediante pirosecuenciación para reducir el
infra-diagnóstico del mosaicismo parental.
Se seleccionaron 20 familias de pacientes SD con mutaciones “de novo” en SCN1A, pertenecientes a una
cohorte de 508 pacientes SD, pareadas en historia familiar de síntomas neurológicos o no. El ADN
genómico estudiado proviene de linfocitos de sangre periférica. Se realizó un análisis mutacional
mediante pirosecuenciación.
3 Resultados
La pirosecuenciación realizada en las primeras 9 familias (5 con y 4 sin historia familiar asociada) ha
permitido la identificación de un padre asintomático mosaico (7,8%) para la mutación p.Arg377*.
Asimismo, se ha evidenciado una posible situación de mosaicismo germinal en una familia con dos
hermanos afectos (SD y GEFS+) portadores de p.Gly1371Val, con padres asintomáticos no mosaicos en
sangre periférica. Quedan 11 familias por evaluar.
4 Conclusiones
Un 11,1% de las familias estudiadas (1/9, sin síntomas neurológicos asociados) ha mostrado mosaicismo
somático en un porcentaje detectable de un 7,8%, en linfocitos de sangre periférica. Los hallazgos se
corresponden con el porcentaje estimado de casos de mosaicismo parental enmascarado como
mutaciones “de novo“ en SCN1A, un 10% aproximadamente, y con el porcentaje estimado de mosaicismo
en linfocitos de sangre periférica para familias sin historia familiar de síntomas neurológicos asociados,
<15%. La aplicación de la pirosecuenciación en diagnóstico molecular se presenta como una alternativa a
la secuenciación Sanger para la identificación de mosaicismo parental, clave en el consejo genético
familiar.
C0385 IDENTIFICACIÓN DEL DEFECTO MOLECULAR EN PACIENTES CON
ENCEFALOPATÍA EPILÉPTICA MEDIANTE LA APLICACIÓN DE UN PANEL DE
SECUENCIACIÓN MASIVA PARA EPILEPSIAS GENÉTICAS
1 1 1 2
Miguel de la Puente Iglesias , Alba Rubio Lozano , Pablo Lapunzina Badía , Eva Barroso
1
2
1 Objetivos
Las encefalopatías epilépticas (EE) comprenden un grupo de síndromes epilépticos en los que las crisis
epilépticas contribuyen al deterioro progresivo de las funciones cerebrales y cuya causa, en muchos
casos, es genética. La aplicación de un panel de NGS específico para epilepsias de base genética puede
mejorar la tasa diagnóstica en pacientes con epilepsia y permitir la identificación de nuevos genes y rutas
implicadas en la misma, mejorando asimismo las opciones de tratamiento antiepiléptico.
Se estudió una serie de 75 pacientes con diagnóstico presuntivo de EE de tipo variable, excluyendo a los
pacientes con síndrome de Dravet (SD). Se aplicó un panel de NGS diseño propio, Epilepsy v5.0 (425
genes), mediante captura de Roche Nimblegen SeqCap EZ y secuenciación MiSeq o NextSeq de
Illumina. Se utilizó una herramienta bioinformática desarrollada por nuestro instituto para el alineamiento y
anotación de variantes. El filtrado de variantes siguió un protocolo propio y, posteriormente, se estableció
la correlación genotipo-fenotipo, la caracterización de variantes según ACMG y la validación por
secuenciación Sanger.
3 Resultados
El análisis de NGS con el panel Epilepsy v5.0 en los pacientes EE permitió el diagnóstico molecular de 26
pacientes EE portadores de variantes patogénicas (12), posiblemente patogénicas (2) o variantes de
significado incierto (VOUS) (12) en 20 genes diferentes que podrían explicar su defecto molecular.
4 Conclusiones
La detección de la causa molecular de EE con sospecha de base genética no ha sido posible en nuestro
laboratorio hasta la incorporación de la NGS. La aplicación del panel NGS Epilepsy v5.0 ha permitido la
detección de variantes con potencial efecto patogénico en un 34,6% (26/75) de los pacientes EE
analizados, para los que en ocasiones la identificación del gen afectado ha permitido establecer una
correcta identificación del tipo de EE, mejorando presumiblemente el control de la evolución clínica de la
enfermedad y su tratamiento específico.
C0479 ESTUDIO GENÉTICO DE 141 GENES ASOCIADOS A EPILEPSIA EN UNA
COHORTE DE 122 PACIENTES.
1 1 1 1 2 1 1
M Martinez-Garcia , C Rodriguez , M Carcajona , I Diez , R Sanchez-Alcudia , MM Peña-Vilabelda , P Maietta , J
1 3 4 5 6 7 8 1
Botet , A Santana-RodrIguez , A Rodriguez-Valle , A Patiño , A Gil-Nagel , L Martorell , M Galvez , S Alvarez
1
Unidad de secuenciación, NIMGenetics S.L., Madrid. (Madrid) España
2
NIMGENETICS MADRID (MADRID) ESPAÑA
3
Hospital Universitario Materno Infantil de Canarias. (Las Palmas) España
4
Departamento Genética Clínica. Hospital Universitario Miguel Servet. (Zaragoza) España
5
Clínica Universidad de Navarra. CIMA. (Pamplona) España
6
Hospital Ruber Internacional. (Madrid) España
7
Hospital Sant Joan de Déu. (Barcelona) España
8
Laboratorio de Genética. Gencell Pharma. (Bogota) España
1 Objetivos
Establecer el diagnóstico genético en 122 pacientes con manifestaciones clínicas de epilepsia, mediante
el análisis de 141 genes seleccionados por su asociación previa a formas sindrómicas y no sindrómicas
de epilepsia.
A partir de DNA obtenido de muestras de sangre periférica se prepararon las librerías genómicas
TM
empleando el kit Ion AmpliSeq Exome RDY y el kit AmpliSeq panel design. Esta aproximación
combinada enriquece la cobertura de los genes diana con respecto a la secuenciación exómica. La
secuenciación de las librerías, alineamiento, variant caller y anotaciones se realizaron en las plataformas
TM TM
de secuenciación Ion Proton y Ion S5 con Torrent Suite software y ION Reporter.
3 Resultados
Se analizaron un total de 122 pacientes (45% mujeres y 56% varones), de los cuales 90 fueron referidos
con el diagnóstico de encefalopatía epiléptica de inicio precoz (EEIE). Se identificaron variantes
potencialmente causales en el 49% (44/90) de los casos de EEIE, siendo en los genes SCN1A, KCNT1,
SPTAN1, los más frecuentemente representados. En pacientes con otras manifestaciones fenotípicas la
rentabilidad diagnóstica fue del 19% (6/32), identificándose variantes patogénicas en los genes ATP1A2,
TPP1. En el global de pacientes analizados el 39% (66/169) de las variantes, estaban asociadas a un gen
con herencia autosómica dominante. Se obtuvo un mayor número de variantes de significado incierto en
los genes RYR3, GPR98 y FASN. La actualización recurrente de los genes a analizar, los estudios de
segregación familiar, y el análisis de otros tejidos en los casos de mosaicismo, como en CDKL5 o en
mecanismos hereditarios de interferencia celular como en PCDH19, han sido determinantes.
4 Conclusiones
El estudio genético de epilepsia mediante secuenciación de exoma enriquecido, es una estrategia
diagnóstica con un óptimo ratio coste-efectividad. Establecer una adecuada correlación genotipo-fenotipo
facilita una aproximación precisa al manejo clínico del paciente.
Sesión: Farmacogenética y Cáncer Esporádico
C0487 DETECCIÓN TEMPRANA DE CÁNCER COLORECTAL CON UN TEST DE SANGRE

PERIFÉRICA: EVALUACIÓN DE LA METILACIÓN DEL GEN SEPT9 EN 2272 MUESTRAS
DE POBLACIÓN ESPAÑOLA
Beatriz Hidalgo Calero, Amanda Herranz Cecilia, Miriam León Otegui, Evangelina Pestaña Molinero, Alberta
Belinchon Martinez, José Antonio López García-Asenjo
Servicio de Genética, Synlab Diagnósticos Globales (Madrid) España
1 Objetivos
En España, el programa de detección precoz de cáncer de colorectal (CCR) mediante el test de sangre
oculta en heces, ofrecido por la sanidad pública, tiene una baja aceptación.
Actualmente se ofrecen nuevas opciones de cribado mediante la detección de marcadores de CCR en
plasma de sangre periférica; el test “Septina9” detecta el estado de metilación del gen SEPT9, tiene
una sensibilidad y especificidad de 80,6% y 99,3%, respectivamente, y el valor predictivo positivo es del
47,5% (datos del fabricante), mientras que la del test de sangre oculta en heces tiene una sensibilidad y
especificidad de 61-69% y 91-98%, respectivamente (1, 2).
El objetivo de nuestro trabajo es realizar una revisión de los 2272 casos informados desde 2012 de
población asintomática y mixta (de bajo y alto riesgo), donde se ha estudiado la metilación del gen SEPT9
como marcador molecular de cáncer colorectal.
Se estudió 2272 muestras de plasma en población asintomática española, de bajo y alto riesgo, recogidas
entre 2012 y 2016.
Se realizó el ensayo Epi proColon 2.0 siguiendo las instrucciones del fabricante, tanto en la técnica como
en el análisis (Roche LightCycler480).
3 Resultados
De las 2272 muestras recibidas, 154 (6,8%) fueron rechazadas previo al estudio debido, principalmente, a
una mala conservación de la muestra durante el envío. De las 2118 muestras analizadas 148 se informan
como positivas (7%), y 1970 como negativas (93%)
4 Conclusiones
El ratio de positividad (7%) es superior al descrito en la literatura (3,4%) analizado en población general
(3); asumimos que se detectó un 3,6% de paciente con CCR y adenoma avanzados.
La aceptación del programa de detección precoz de CCR mediante muestra de sangre periférica es
cómoda y eficaz, lo que genera una mayor aceptación del estudio, permitiendo un mejor cumplimiento de
dicho programa (4).
C0280 CARACTERIZACIÓN BIOINFORMÁTICA DE LA REGULACIÓN EPIGENÉTICA DEL
MICROARNOMA EN CÉLULAS TUMORALES DE CÁNCER DE PULMÓN Y OVARIO
RESISTENTES A CISPLATINO
1 1 2 3 1 1
Carlos Rodriguez Antolin , Olga Pernía , Fátima Sanchez-Cabo , Ron Schuller , Olga Vera , Julia Jiménez , Ana
2 1 1
Dopazo , Javier De Castro , Inmaculada Ibáñez
1
Hospital Universitario La Paz madrid (Madrid) España
2
Centro Nacional de Investigaciones Cardiovasculares (Madrid) España
3
Centro Nacional de Análisis Genómicos (Cataluña) España
1 Objetivos
El resultado de nuestro trabajo tiene como objetivo identificar los microARNs inactivados
epigenéticamente en cáncer de pulmón no microcítico (CPNM) y cáncer de ovario (CO) como
consecuencia del tratamiento con cisplatino (CDDP) y cuya inhibición involucre el posible desarrollo de
resistencia.
Analizamos el conjunto de micoARNs (microARNoma) inhibidos en resistencia y reactivados tras
tratamiento con 5aza-dC y TSA en cuatro líneas celulares resistentes y sensibles a CDDP utilizando
microarrays de expresión, seguido de la valoración de su estado de metilación a partir de la secuenciación
del genoma completo modificado por bisulfito. Los candidatos se validaron por qRT-PCR y secuenciación
por bisulfito.
3 Resultados
Encontramos 19 micrARNs con expresión diferencialmente inhibida (FDR<0.05) en el fenotipo resistente
frente a los fenotipos sensibles y tras el tratamiento de reactivación (14 en CPNM, 7 en CO y 2 en
ambos). De ellos, cuatro microARNs poseen hipermetilación en su zona promotora en el fenotipo
resistente, mientras dos presentan hipermetilación en la zona promotora del gen huespéd. En al menos
uno de ellos se valida el cambio en expresión y metilación. Las predicciones de interacción de estos seis
microARNs con sus posibles genes diana indican que pueden estar regulando rutas de control de ciclo
celular, respuesta a fármacos, estrés celular y daños en el ADN, todas ellas de gran implicación en el
desarrollo y mantenimiento del proceso tumoral.
4 Conclusiones
1-De los 19 candidatos indentificados, en al menos seis la regulación de su expresión está vinculada a
modificaciones en el perfil de metilación de la correspondiente área reguladora. 2-Se presenta por tanto
una potencial herramienta que aportaría información novedosa sobre el perfil de respuesta a platino,
basada en elementos de regulación epigenéticos de la expresión de microARNs y que podrían ser
empleados como biomarcadores predictivos de uso clínico.
C0116 ANALISIS DE MIRNAS ASOCIADOS A LOS DISTINTOS PATRONES DE
AMPLIFICACIÓN DE EGFR EN EL GLIOBLASTOMA
1 2 2 2 2
Lisandra Muñoz Hidalgo , Concha López Ginés , Javier Megías Vericat , Rosario Gil Benso , Teresa San Miguel ,
2
Miguel Cerdá Nicolás
1
INCLIVA Valencia (Valencia) España
2
Universidad de Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
El Glioblastoma (GB) es el tumor de mayor agresividad biológica y clínica de los tumores primarios del
SNC, con una supervivencia promedio de 12 meses. La amplificación del receptor del factor de
crecimiento epidérmico (EGFR) presente en el 50-70% de los GBM es uno de los cambios genéticos más
frecuente. Los miRNA, son RNAs de pequeño tamaño, que regulan la expresión del RNAm. Los genes
implicados en las vías de señalización están también regulados por miRNA, entre ellas, las vías de
señalización dependientes de EGFR.
Este trabajo tiene como objetivo el estudio de la expresión de los miRNAs en el GB y el análisis
comparativo con los diferentes niveles de amplificación del EGFR. Estos estudios están orientados a
definir perfiles distintos en los GB, que permitan establecer criterios pronósticos y terapéuticos.
El estudio está basado en 46 tumores diagnosticados de GBs primarios. Se caracterizaron las muestras
tumorales mediante un estudio clínico, morfológico, histopatológico y genético mediante análisis por FISH,
PCR diferencial y MLPA. El estudio de la expresión de miRNAs se realizó mediante Genechip miRNA
Array. El biochip fue analizado mediante el software Partek Genomic Suite 6.6 y la comparación entre
grupos fue mediante un ANOVA P ≤ 0,05.
3 Resultados
Los casos estudiados de GB presentaron tres patrones de amplificación de EGFR: casos con un alto nivel
de amplificación en número de copias y presente en un alto porcentaje de células; casos con un nivel bajo
de amplificación y un número de células afectadas no superior al 15%; y casos sin amplificación de
EGFR.
4 Conclusiones
Se identificaron perfiles de expresión de miRNAs que diferenciaron los tres grupos de glioblastomas,
siendo el miR-200c el miRNA más significativo. El estudio de perfiles de expresión de miRNAs constituirá
una de las nuevas aproximaciones en la caracterización molecular de neoplasias como es el GB.
C0205 ESTRATEGIAS DE IMPLEMENTACIÓN DE LA FARMACOGENÉTICA EN LA
PRÁCTICA CLÍNICA: APLICACIÓN DE UN FORMATO PERSONALIZADO DE SNP-ARRAY
(PHARMARRAY®) EN UNA CONSULTA DE FARMACOGENÉTICA.
1 2 3 2 3 3 2
Irene Dapía García , Mario Muñoz , Pedro Arias , Rafael Hernández , Jair Tenorio , Gema Gordo , Hoi Y Tong ,
2 3 2
Antonio J Carcas , Pablo Lapunzina , Alberto M Borobia
1
INGEMM- Instituto de Genética Médica y Molecular, Hospital Universitario La Paz, Laboratorio de Síndromes de
Sobrecrecimiento, Laboratorio de Farmacogenética Madrid (Madrid) España
2
Servicio de Farmacología Clínica, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
3
INGEMM- Instituto de Genética Médica y Molecular, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
1 Objetivos
En 2013 nuestro grupo puso en marcha la Unidad de Farmacogenética con el objetivo de facilitar la
implementación de la farmacogenética en la práctica clínica. Se articuló entorno a una consulta de
Farmacogenética Clínica y el diseño y validación de un SNP-microarray para el genotipado de
polimorfismos asociados a la respuesta a fármacos (PharmArray®). Este trabajo describe la experiencia a
lo largo de estos tres años con el fin de evaluar la utilidad de implementar esta estrategia en un hospital
de tercer nivel asistencial.
La Consulta de Farmacogenética atiende las consultas en las que se plantee la posibilidad de que un
estudio genético sea necesario para seleccionar un tratamiento farmacológico, realizar un ajuste de dosis
e identificar fallos terapéuticos o reacciones adversas. A continuación se realiza el genotipado simultáneo
de 180 polimorfismos en genes que codifican enzimas del metabolismo y transporte de fármacos
mediante la plataforma de diseño propio PharmArray®. La determinación del HLA-B*57:01 se realiza por
secuenciación clásica e INNOLIPA®. Teniendo en cuenta la información genética y clínica, el farmacólogo
clínico responsable de la consulta elabora un informe clínico.
3 Resultados
En estos 3 años hemos realizado 1687 determinaciones del HLA-B*57:01 previo al tratamiento con
Abacavir y 600 estudios de PharmArray® previos a la administración de distintos fármacos: Tioguaninas
(60%), Metotrexate (20%), Inmunosupresores (6%), Voriconazol (2%), Anticoagulantes (3%) y
Antineoplásicos (3%), principalmente. Alrededor de un 32% de los pacientes presentaban perfiles
moleculares asociados a alteraciones en la actividad de las proteínas codificadas y por tanto el ajuste y
revisión de los tratamientos estaba indicado, de acuerdo con las guías de la CPIC y las recomendaciones
de la EMA y FDA.
4 Conclusiones
En nuestra experiencia, la implementación de la farmacogenética en la práctica clínica mediante una
estrategia de genotipado anticipado en determinadas poblaciones de riesgo ha facilitado la optimización
de los tratamientos farmacológicos.
C0239 EVALUACIÓN DE UN PROGRAMA DE GENOTIPADO ANTICIPADO DEL GEN DE
LA TPMT EN PACIENTES QUE VAN A RECIBIR TRATAMIENTO CON TIOGUANINAS
1 2 2 3 2 3 3
Irene Dapía García , Rafael Hernández , Sarahi Valdez , Pedro Arias , Mario Muñoz , Jair Tenorio , Gema Gordo , Hoi
2 2 3 3
Y Tong , Antonio J Carcas , Pablo Lapunzina , Alberto M Borobia
1
INGEMM- Instituto de Genética Médica y Molecular, Hospital Universitario La Paz, Laboratorio de Síndromes de
Sobrecrecimiento, Laboratorio de Farmacogenética Madrid (Madrid) España
2
Servicio de Farmacología Clínica, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
3
INGEMM- Instituto de Genética Médica y Molecular, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
1 Objetivos
Evaluación de un programa de genotipado anticipado de polimorfismos en el gen TPMT asociados a
alteraciones en la actividad enzimática y a la respuesta al tratamiento con tioguaninas en una cohorte de
pacientes remitidos a la Unidad de Farmacogenética Clínica de un hospital de tercer nivel asistencial.
La transición en los últimos 3 años del modelo de genotipado caso-a-caso al genotipado anticipado en
poblaciones de riesgo permite que la información genética del paciente esté disponible en el momento de
la prescripción. El screening molecular de los polimorfismos rs1800460, rs1800462 y rs1142345 de TPMT
se realizó mediante un SNP-array de diseño propio (PharmArray®) que incluye 180 SNPs con relevancia
farmacogenética. Teniendo en cuenta la información genética además de otros factores clínicos y
demográficos se elaboró un informe clínico con una recomendación de dosis de inicio.
3 Resultados
Se han atendido 364 pacientes derivados de los servicios de Digestivo, Dermatología, Medicina Interna y
Reumatología con indicaciones de tratamiento para dermatitis atópica, enfermedad inflamatoria intestinal
(EII), artritis reumatoide, leucemias y psoriasis fundamentalmente. Un 15,1% de los pacientes
presentaban un perfil molecular alterado en el gen TPMT. Los diplotipos alterados más frecuentes
fueronTPMT*1/*3C (6,9%), TPMT*1/*3A (5,8%) y TPMT *1/*2 (1,4%). Además, 4 pacientes presentaban
alguna de las variantes en homocigosis: dos presentaban un genotipo codificado TPMT*3C/*3C, otro
TPMT*3A/*3A y otro TPMT*3A/*3C. En estos pacientes se recomendó no iniciar el tratamiento o una
reducción de dosis del 90% con analíticas periódicas en aquellos casos en los que no hubiese un
tratamiento alternativo disponible. En el resto de pacientes las recomendaciones de ajuste de dosis se
realizaron de manera individualizada basándose en la guía CPIC.
4 Conclusiones
El genotipado de TPMT previo al inicio de tratamiento con tioguaninas ha demostrado ser coste-eficiente y
ha permitido reducir su toxicidad sin comprometer la eficacia.
C0275 IMPLICACIÓN DE LOS ESTUDIOS FARMACOGENÉTICOS EN LA RESPUESTA AL
TRATAMIENTO DE ENFERMEDADES PSIQUIATRICAS.
1 1 1 1
María Isidoro-García , María Celsa Peña Martín , Mª Belen Garcia Berrocal , Almudena Sánchez Martín , Laura
1 1 1 1
Pedraza Nieto , Rosalía Fernández Caballero , Fernando Marqués García , María Jose Otero Lopez , Santiago
1 2 1 1 2
Sánchez Iglesias , Manuel Franco Martín , Catalina Lorenzo Romo , David González Parra , Francisco Sans Lecussan
1
Complejo Asistencial Universitario de Salamanca (Salamanca) España
2
Hospital Virgen de la Concha (Zamora) España
1 Objetivos
El enorme avance de las técnicas moleculares está favoreciendo la implantación de la Farmacogenética
en los laboratorios asistenciales. En este estudio nos planteamos analizar el perfil farmacogenético de los
pacientes psiquiátricos para evaluar la relevancia clínica de dichas determinaciones en el ámbito
asistencial.
En este estudio se incluyeron 158 pacientes psiquiátricos remitidos para estudio farmacogenético. Se
recogieron variables epidemiológicas y clínicas (diagnósticas, terapéuticas y genéticas).
El estudio farmacogenético se realizó, previa extracción del DNA, utilizando Microarrays de Genotipado y
PCR en tiempo real, para el análisis de las variantes génicas de CYP2B6*6;
CYP2C9*2,*3;CYP2C19*2,*3,*17;CYP2D6*2,*3,*4,*5,*6,*7,*8,*9,*10,*12,*14,*17,*29,35*,*41,*XN;CYP3A4
*1B;CYP3A5*3C;MDR1 3435C>T y UGT1A1,*28, de forma personalizada en cada paciente.
3 Resultados
Los pacientes presentaron una media de edad de 44 años (ds 17; 51,8% varones). La media de
prescripción fue de 5 fármacos por paciente. El motivo de consulta incluyó ineficacia del tratamiento
(71.3%), respuesta parcial (2.8%), efectos adversos e intolerancia al tratamiento (25.9%). Se realizaron un
total de 977 determinaciones farmacogenéticas. Las frecuencias alélicas y genotípicas de CYP2B6
asociadas a disminución de actividad enzimática fueron 0.32 y 0.51, CYP2C9 (0.25/0.42), CYP2C19
(0.15/0.24), CYP2D6 (0.34/0.11), CYP3A4 (0.04/0.09), CYP3A5 (0.91/0.99), MDR1 (0.46/0.69) y UGT1A1
(0.4/0.6) y asociado a aumento de actividad CYP2C19 (0.17/0.31) y CYP2D6 (0.03/0.05). Media global
(0.31/0.40), ds (0.27/0.30).
4 Conclusiones
En este estudio observamos que los pacientes psiquiátricos remitidos para estudio farmacogenético
presentan elevadas frecuencias alélicas y genotípicas de variantes asociadas a modificaciones de
actividad de las enzimas implicadas en la respuesta farmacológica, lo que podría estar relacionado con la
gran variabilidad de la respuesta terapéutica observada. La alta frecuencia de genotipos mutados junto
con el elevado número de fármacos prescritos pone de manifiesto la relevancia de los estudios
farmacogenéticos en psiquiatría y subraya la necesidad de un abordaje individualizado de su tratamiento.
Sesión: Trastornos del Neurodesarollo y Medicina Personalizada
C0484 LA SECUENCIACIÓN DEL EXOMA EN TRÍOS ES UNA HERRAMIENTA DE

ELEVADA RENTABILIDAD DIAGNÓSTICA EN ENFERMEDADES GENÉTICAS.
1 1 1 1 1
María del Mar Peña-Vilabelda , Marta Carcajona , Celia Rodríguez , Irene Diez , Mónica Martinez-Garcia , Rocio
1 1 1 2 3 4 5
Sanchez-Alcudia , Javier Botet , Paolo Maietta , Alfredo Santana , Isabel Espejo , Soraya Ramiro , Loreto Martorell ,
6 7 1
María Dolores Miramar , Marcela Gálvez , Sara Álvarez
1
2
Hospital Universitario Materno Infantil de Canarias (Las Palmas) España
3
Hospital Universitario Reina Sofía (Córdoba) España
4
Hospital Universitario de Getafe (Madrid) España
5
6
Hospital Miguel Servet (Zaragoza) España
7
Gencell Pharma (Colombia) Colombia
1 Objetivos
Evaluación de la rentabilidad diagnóstica del análisis exómico en tríos. La secuenciación del exoma
completo se ha implementado en la práctica clínica como una herramienta que permite una mayor eficacia
en el diagnóstico molecular de las enfermedades de origen genético.
TM
La secuenciación del exoma se realizó con tecnología Ion AmpliSeq Exome RDY en las plataformas Ion
TM TM
Proton e Ion S5-XL . Las lecturas de secuenciación y las variantes identificadas fueron analizadas con
el Torrent Suite, el Ion Reporter y un pipeline bioinformático de desarrollo propio.
3 Resultados
Presentamos los resultados de 260 casos de análisis por tríos, incluyendo un 57% de casos
neuropediátricos con discapacidad intelectual sindrómica. La etiología genética fue potencialmente
establecida en 94 probandos, portadores de 56 variantes identificadas como causales y 38 variantes
como probablemente causales, resultando en una rentabilidad diagnóstica del 36%. Las variantes
identificadas corresponden a 57 de novo, 7 en hemicigosis, 7 en heterocigosis compuesta in trans, 18 en
homocigosis y 5 heredadas. Los pacientes con discapacidad intelectual sindrómica y con trastornos
neurológicos específicos mostraron una rentabilidad diagnóstica del 42% (n=62 de 149 casos) y del 39%
(n=13 de 33 casos), respectivamente, mayor a la observada en los pacientes con trastornos no
neurológicos y con discapacidad intelectual no sindrómica que fue del 28% (n=7 de 25 casos) y del 21%,
(n=11 de 51 casos), respectivamente.
4 Conclusiones
En este estudio el análisis exómico en tríos ha demostrado una rentabilidad diagnóstica del 36%, en
pacientes en los que el diagnóstico genético tradicional no resultó informativo. El análisis en tríos ha
demostrado ser una estrategia especialmente efectiva para la identificación de variantes potencialmente
causales, de novo, hemicigotas, homocigotas y heterocigotas compuestas. La implementación de la
secuenciación del exoma completo ha demostrado una elevada rentabilidad diagnóstica, especialmente
en pacientes con discapacidad intelectual sindrómica.
C0493 EXPERIENCIA PRÁCTICA EN LA APLICACIÓN DE SECUENCIACIÓN DE EXOMA
COMPLETO EN MÁS DE 500 CASOS CLÍNICOS
1 2 2 2 2
Benjamín Rodríguez Santiago , Maria Segura Puidemon , Isabel Banchs , Heidi Mattlin , Manel Garcia Aragonés ,
2 3 2
Raquel Flores Peirat , Luis A. Pérez-Jurado , Lluís Armengol Dulcet
1
qGenomics Esplugues del Llobregat (Barcelona) España
2
qGenomics (Barcelona) España
3
Unitat de Genètica, Universitat Pompeu Fabra (Barcelona) España
1 Objetivos
Evaluar el rendimiento diagnóstico de la secuenciación de exoma completo en casos con diagnósticos
clínicos filiados y sospechas clínicas no filiadas (ejemplos: retraso mental, epilepsia, etc).
Secuenciación de exoma completo en más de 500 pacientes utilizando kits de captura de sondas en
solución de diferentes proveedores. Análisis bioinformático para detección de variantes de nucleótido
único (SNVs), pequeñas indels y grandes deleciones y duplicaciones. Secuenciación Sanger para
estudios de segregación y determinación del patrón de herencia.
3 Resultados
En los casos filiados y/o con indicaciones clínicas precisas se detectaron variantes patogénicas o
probablemente patogénicas en más del 70% de los casos.
En casos no filiados y/o clínicos heterogéneamente, la tasa de detección se acerca al ~25%.
Se detectaron 3 casos debidos a alteraciones de número de copias.
Algunos estudios dirigidos a genes concretos según indicación clínica que eran negativos, se resolvieron
al extender el estudio al resto del exoma. Finalmente, la revisión/reanotación de variantes tras
actualización de bases de datos y/o algoritmos computacionales, permitió la resolución de un porcentaje
no menospreciable de casos.previos sin resolver.
4 Conclusiones
1) Las tasas de detección concuerdan con las descritas en la literatura.
2) El análisis de número de copia en exoma puede detectar alteraciones causantes en algunos casos
3) El análisis extendido al exoma completo resolvió casos adicionales en en los que la búsqueda de
candidatos de acuerdo con la indicación clínica había resultado negativa.
4) El reanálisis de datos tras un periodo de tiempo con conocimiento más avanzado ha permitido
diagnosticar un % no menospreciable de casos.
C0538 SECUENCIACIÓN DEL EXOMA PARA LA IDENTIFICACIÓN DE VARIANTES
CAUSALES EN NIÑOS CON TRASTORNOS DEL DESARROLLO NEUROLÓGICO O
DISCAPACIDAD INTELECTUAL SEVERA-MODERADA.
1 1 2 3 1
Maria Palomares Bralo , Elena Vallespín , Fernando Santos-Simarro , Pilar Tirado , Luis Fernández , Ángela de Pozo
4 4 4 1 5 1
Maté , Kristina Ibáñez Garikano , Juan Carlos Silla , Lázaro Alba Valdivia , Elena Mansilla , Rocío Mena , Rubén
1 1 3 3
Martín Arenas , María Victoria Gómez del Pozo , Pablo Lapunzina Badía , Sixto García-Miñaúr
1
INGEMM, Genómica Estructural y Funcional Madrid (Madrid) España
2
Sección de genética clínica. INGEMM (Madrid) España
3
Servicio de neurología infantil, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
4
Sección de bioinformática. INGEMM (Madrid) España
5
Sección de citogenética. INGEMM (Madrid) España
1 Objetivos
La secuenciación masiva ha demostrado ser una herramienta muy eficiente para la identificación de
genes relacionados con trastornos de tipo mendeliano. Concretamente la secuenciación del exoma
mediante abordaje de trios (estudio simultáneo de probando, madre y padre) ha sido clave para la
descripción de variantes patogénicas nuevas en individuos con discapacidad intelectual (DI) esporádica,
aumentando el rendimiento diagnóstico hasta un 36 % en las formas más severas de DI. Presentamos los
resultados del análisis del exoma de 25 niños con trastorno del desarrollo neurológico o DI severa-
moderada.
Se evaluaron y seleccionaron 25 niños con DI idiopática o trastorno del desarrollo, sin historia familiar
previa de DI y con fenotipo singular que incluyera anomalías congénitas asociadas y/o trastornos del
crecimiento y/o rasgos faciales marcadamente dismórficos.
Se realizó secuenciación del exoma completo empleando un abordaje de trios. La preparación de las
librerías se llevó a cabo con el kit Kapa HTP (Kapa) y SeqCap EZ VCROME (Roche Nimblegen), y la
secuenciación se realizó en un equipo NextSeq500 (Illumina).
3 Resultados
En 11 de los 25 niños (44%) se encontró una variante patogénica compatible con el fenotipo clínico.
4 Conclusiones
El análisis del exoma mediante abordaje de trios en nuestra cohorte permitió obtener un elevado
rendimiento diagóstico (44%), demostrando ser una herramienta muy eficiente para la identificación de
variantes causales en individuos con trastornos del desarrollo o DI esporádica moderada a severa
asociada a anomalías congénitas, alteraciones del crecimiento y rasgos faciales particulares.
En el flujo de trabajo establecido en el INGEMM para la aplicación clínica de la secuenciación del exoma
consideramos clave una colaboración muy estrecha entre el los genetistas clínicos y el laboratorio
molecular antes, durante y después de realizarse el estudio.
C0405 ACUMULACIÓN DE VARIANTES GENÉTICAS RARAS EN 5 VÍAS FUNCIONALES
IMPLICADAS EN LOS TRASTORNOS DEL ESPECTRO AUTISTA
1 1 2 3 1
Mar Costa Roger , Marta Codina Solà , Dóra Koller , Marcos López Sánchez , Luis A. Pérez Jurado , Ivon Cuscó
1
Martí
1
Unidad de Genética, Universitat Pompeu Fabra. Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras
(CIBERER). Instituto Hospital del Mar de Investigaciones Médicas (IMIM). Barcelona (Barcelona) España
2
Unidad de Genética, Universitat Pompeu Fabra. (Barcelona) España
3
Unidad de Genética, Universitat Pompeu Fabra. Instituto Hospital del Mar de Investigaciones Médicas (IMIM).
ISGlobal, Centro de Investigación en Epidemiología Ambiental (CREAL). (Barcelona) España
1 Objetivos
Los Trastornos del Espectro Autista (TEA) son un grupo de trastornos del neurodesarrollo caracterizados
por alteraciones en la interacción social y el comportamiento. Son altamente prevalentes y presentan alta
heredabilidad. Su etiología es compleja y heterogénea, existiendo formas de novo monogénicas,
oligogénicas y multifactoriales. El objetivo de este estudio es identificar la presencia de genes que
acumulen variantes raras de manera recurrente e identificar qué vías funcionales se encuentran
desreguladas como consecuencia de estas variantes.
Hemos realizado un meta-análisis de datos exómicos de 5 colecciones distintas. Hemos comparado una
población de 1354 pacientes con TEA y 511 controles. Para identificar las variantes raras hemos
seleccionado para cada individuo aquellas variantes no sinónimas y de pérdida de función (splicing y non-
sense) con una frecuencia inferior a 1/500 (ExAC). Hemos realizado el estudio de enriquecimiento de vías
consultando la base de datos del KEGG.
3 Resultados
Hemos identificado 76 genes que acumulan variantes raras de manera recurrente en la población TEA
-7
(14-73 individuos, p-value<0.0448-5,92·10 ) destacando entre ellos los genes AGBL4, CHRNA3 y LRFNA
previamente asociados a TEA. El estudio de enriquecimiento ha puesto de manifiesto la presencia de 5
vías comúnmente afectadas a consecuencia de la acumulación de estas variantes que no se encuentran
enriquecidas en controles: secreción pancreática, fagosoma, sistema de señalización del fosfatidilinositol,
transducción del gusto y red immunológica intestinal de producción de IgA.
4 Conclusiones
Este meta-análisis de datos exómicos ha mostrado la presencia de genes que de manera recurrente y
significativa acumulan variantes raras en los individuos con TEA. Nuestros datos refuerzan los modelos
aditivos de alelos múltiples que confieren susceptibilidad a la patología. Las variantes raras detectadas
señalan 5 vías funcionales comunes que pueden estar implicadas en el fenotipo TEA. Se intentará la
replicación en poblaciones adicionales para confirmar su implicación.
C0051 DIAGNÓSTICO GENÉTICO DE LA HIPOACUSIA MEDIANTE SECUENCIACIÓN DE
NUEVA GENERACIÓN
1 1 3 1 2
Rubén Cabanillas , Marta Diñeiro Soto , David Castillo , Guadalupe A. Cifuentes , Patricia C. Pruneda , Ana
3 3 4 4 5 5 6
Plasencia , Mónica Viejo , Alfredo Repáraz , Cristina Torreira , Jordi Rosell , Nancy Govea , José A. Garrote , Ángel
17 2 1
Mazón , Gonzalo R. Ordóñez , Juan Cadiñanos
1
IMOMA (Instituto de Medicina Oncológica y Molecular de Asturias) (Asturias) España
2
DREAMgenics (Disease REsearch And Medicine) (Asturias) España
3
HUCA (Hospital Universitario Central de Asturias) (Asturias) España
4
Complejo Hospitalario Universitario de Vigo (Pontevedra) España
5
Hospital Universitario Son Espases (Mallorca) España
6
Hospital Universitario Río Ortega (Valladolid) España
7
Hospital universitario Marqués de Valdecilla (Cantabria) España
1 Objetivos
La hipoacusia neurosensorial afecta a 1/1.000 recién nacidos. >60% de las hipoacusias neurosensoriales
de la infancia tienen una etiología genética, siendo los test genéticos la prueba diagnóstica con mayor
rendimiento. La extremada heterogeneidad genética y fenotípica de las hipoacusias hereditarias supone
un reto a la hora de llevar a la práctica clínica los estudios genéticos. Se presenta el diseño, la validación
y los resultados clínicos de una nueva plataforma diagnóstica basada en secuenciación de nueva
generación (NGS).
Se desarrolló un panel NGS con enriquecimiento por captura (SureSelectXT) de 176 genes asociados con
hipoacusia neurosensorial no sindrómica y/o sindrómica. Se analizaron muestras de ADN germinal de 45
pacientes con hipoacusia neurosensorial (2 sindrómicos: CHARGE y Alport) en los que previamente se
había descartado la presencia de mutaciones en los genes GJB2, OTOF y MTRNR1
3 Resultados
Se identificó la causa genética en 21/45 pacientes (46,7%). 11/21 casos (52,4%) con patrón de herencia
autosómico recesivo (BSND, CDH23, LOXHD1, MYO15A, STRC(x2), USH2A(x3), SLC26A4(x2)), 7/21
(33,3%) autosómico dominante (ACTG1(x3; 2 de novo), CHD7, GATA3 (de novo), MITF, P2RX2) y 3/21
(14,3%) ligados al cromosoma X (COL4A5 (XD), POU3F4 (XR), PRPS1 (XD)). De las 32 variantes
consideradas responsables del fenotipo, 17 (53,1%) no estaban descritas en las bases de datos. 5/21
casos (23,8%) presentaban síndromes previamente no diagnosticados (Barakat, Usher tipo 2A (3x) y
Waardenburg). 3/21 casos (14,3%) se debieron a alteraciones en el número de copias (deleción completa
de STRC (2x) y duplicación parcial de CDH23). La sensibilidad y especificidad analíticas para variantes de
un solo nucleótido (SNVs) y pequeñas inserciones/deleciones (indels) fueron superiores al 99,5%.
4 Conclusiones
La NGS es una herramienta excepcional para afrontar las dificultades inherentes al diagnóstico genético
de la hipoacusia. Con la metodología adecuada, esta tecnología está lista para ser trasladada con
seguridad a la práctica clínica.
C0045 EL DIAGNÓSTICO GENÓMICO DE LA CEGUERA HEREDITARIA PUEDE REVELAR
SÍNDROMES OCULTOS Y OPCIONES TERAPÉUTICAS PERSONALIZADAS
1 1 2 1 2
Marta Diñeiro Soto , Rubén Cabanillas , Patricia C. Pruneda , Guadalupe A. Cifuentes , David Castillo , Beatriz
3 4 4 4 1 1
Fernández-Vega , Ana Plasencia , Mónica Viejo , Inés Hernando , Noelia S. Durán , Rebeca Álvarez , Gonzalo R.
2 1
Ordóñez , Juan Cadiñanos
1
IMOMA (Instituto de Medicina Oncologica y Molecular de Asturias) OVIEDO (ASTURIAS) España
2
DREAMgenics (Disease REsearch And Medicine) (Asturias) España
3
IOFV (Instituto Oftalmológico Fernández-Vega) (Asturias) España
4
HUCA (Hospital Universitario Central de Asturias) (Asturias) España
1 Objetivos
Las deficiencias visuales de origen genético, encabezadas por la retinosis pigmentaria, representan más
del 60% de los casos de ceguera. En el presente trabajo se evaluó el impacto del diagnóstico genómico
de la ceguera hereditaria sobre el manejo clínico de los pacientes. Para realizar el diagnóstico se empleó
un panel de genes basado en secuenciación de nueva generación (NGS), diseñado para responder a la
gran heterogeneidad genética y fenotípica de esta patología.
Se estudiaron 55 pacientes con ceguera hereditaria mediante un panel NGS con enriquecimiento por
captura (SureSelectXT) de 282 genes asociados con alteraciones en la retina, el vítreo, la coroides y/o el
nervio óptico.
3 Resultados
La metodología desarrollada detectó la causa genética de la ceguera en 29/55 pacientes (53%), entre
ellos uno con la primera variante de novo descrita en IMPDH1. 9/29 casos (31%) resultaron sindrómicos.
El 55,5% de estos síndromes (5/9) no había sido identificado previamente al estudio genético y un
síndrome de Heimler, había sido erróneamente filiado como Usher. Los síndromes cuyos fenotipos no
oftamológicos habían pasado desapercibidos, o no se habían manifestado aún, fueron Alport, Bardet-
Biedl, Saldino-Mainzer, mucolipidosis tipo IV y mucopolisacaridosis tipo IVA. Estos diagnósticos permiten
proponer tratamientos destinados a evitar o paliar algunas de las manifestaciones de estos síndromes,
como la terapia restitutiva con elosulfatasa-alfa en el caso con mucopolisacaridosis tipo IVA o el
tratamiento hormonal sustitutivo en el varón con Bardet-Biedl. Además, dos casos con coroideremia por
mutaciones en CHM serían candidatos a terapia génica. La sensibilidad y especificidad del panel para
identificar variantes de un solo nucleótido e inserciones/deleciones son >99%.
4 Conclusiones
El elevado rendimiento diagnóstico de la NGS en la ceguera hereditaria influyó significativamente en el
manejo clínico de los pacientes analizados, proporcionando información pronóstica, revelando síndromes
ocultos y, en ocasiones, identificando opciones terapéuticas personalizadas.
Pósters
Asesoramiento Genético y aspectos éticos y emocionales
C0211 ASESORAMIENTO GENÉTICO FAMILIAR EN LA DETECCIÓN DE MUTACIONES

NO DESCRITAS EN EL SÍNDROME DE LOEYS DIEZT TIPO 3, EN UNA FAMILIA CON
ANTECEDENTES DE ANEURISMA TORÀCICO.
N. Capdevila Atienza; E. Gabau Vila; N.Baena; E. Guillaume
Parc Taulí, Hospìtal Universitari Sabadell (Barcelona) España
1 Objetivos
La clasificación de la variante p.Tyr384Asn del gen SMAD3 como patogénica mediante estudio de co-
segregación familiar de la variante con las manifestaciones clínicas familiares, dirigido a través del
proceso de asesoramiento genético.
En el caso índice, tras sufrir un aneurisma torácico se realizó un panel de 35 genes para síndromes
aórticos-vasculares que detectó la variante P.Tyr384Asn del gen SMAD3, aún no descrita pero
probablemente patogénica. El caso índice también presentaba afectación osteoarticular típica de las
alteraciones del gen SMAD3 causantes del Síndromes Loeys-Diezt.
El asesoramiento de los familiares a riesgo tiene dos objetivos principales: discernir la patogenicidad de la
variante mediante co-segregación familiar e indicar evaluaciones complementarias, por ecografia y TAC,
para la exploración del riesgo vascular.
En la visita pre-test de los familiares de primer grado se explican los hallazgos genéticos, la sospecha
clínica, las implicaciones del estudio genético y la necesidad de comprobar la patogenicidad de la
variante. Se ofrece la realización del estudio genético y se recoge una anamnesis detallada, incluyendo
cuestionario de manifestaciones relacionadas en alteraciones descritas en el gen SMAD3. Paralelamente,
se ofrece la posibilidad de iniciar las exploraciónes complementarias por el posible riesgo de aneurismas.
3 Resultados
La correlación fenotipo-genotipo-fenotipo en 15 familiares permitió clasificar la mutación como patogénica
y ofrecer estudio genético a los familiares a riesgo y seguimiento específico a los portadores, incluidos los
asintomáticos, y excluir a los no portadores.
4 Conclusiones
La realización de un asesoramiento genético completo ayuda a los familiares a comprender y entender la
necesidad de la realización de estudios complementarios para la determinación de la patogenicidad de
una variante y consigue una mayor colaboración y aceptación del proceso, del seguimiento y los
resultados.
La asignación de la variante como patogénica permite detectar los familiares portadores y realizar
seguimiento específico.
C0271 CONSEJO GENÉTICO EN UN CASO CLÍNICO CON SINDROME DE
INSENSIBILIDAD ANDROGÉNICA COMPLETA (SICA): ASPECTOS CULTURALES Y
PSICOSOCIALES.
1 2 3 3
Maria Mercedes Navarro de Miguel , Lourdes Escriva Cholbi , Noemí Garrigós Gomez , Miriam García Bautista , Ana
3 2 2 2 2
Jaén Jorquera , Rosa Maria Arrese Caballo , Laura Chofre Escrihuela , María Beneyto Lluch , Raquel Lucas Sendra ,
4 3 3 3
Jamal Nasser , Maria Dolores Merino Ponce , Ana García-Climent , Jose María Alamo Marzo
1
Centro Inmunológico de Alicante San Juan -Alicante (Alicante) España
2
Hospital Marina Salud.Denia (Alicante) España
3
Centro Inmunológico de Alicante (Alicante) España
4
hospital Marina Salud-Comunidad Islámica Denia (Alicante) España
1 Objetivos
Estudio descriptivo sobre Consejo Genético en un caso de una niña con Síndrome de Insensibilidad
Androgénica Completa
Paciente: Niña de origen marroquí de 6 años con Síndrome de Insensibilidad Androgénica Completa.
Hermana de 1 año sana. Progenitores sanos. No consanguinidad.
La evaluación consiste en la realización de entrevistas clínicas llevadas a cabo por la pediatra, dónde se
requiere traductor.
En las dos primeras entrevistas se explica la discordancia entre los resultados citogenéticos (46,XY)y el
fenotipo femenino de la niña. Se intenta recoger información familiar, anamnesis y se proporciona
información sobre otras pruebas genéticas que se van a llevar a cabo.
Posteriormente se informa a los padres de la confirmación diagnóstica de SICA (mutación gen AR en
hemicigosis: c.58C>T; p.(Arg20*)[NM_000044.3]). Al tratarse de un Síndrome recesivo ligado al X, se
recomienda el estudio genético de la madre y hermana
3 Resultados
La comunicación de un primer resultado del cariotipo masculino discordante con el fenotipo femenino
resulta ser de difícil aceptación para el progenitor. La información posterior del resultado de la mutación
del gen AR junto con las pruebas anteriores consiguen que se aumente la aceptación.
No es posible una anamnesis completa debido a las barreras idiomáticas, finalmente se recurre a un
médico traductor miembro de la Comunidad Islámica. La toma de decisiones se lleva a cabo por el
progenitor de la familia.
La infertilidad de la menor se detecta como la mayor causa de estrés para la madre. No se percibe riesgo
por parte de los progenitores para gonadoblastoma, ni posibles problemas causados por disforia de
género de la menor.
4 Conclusiones
Los aspectos culturales familiares, así como psicosociales y psicosexuales en el SICA se convierten en
indispensables para un adecuado Consejo Genético y una toma de decisiones a tiempo en aspectos
clínicos presente y futuros de la paciente.
C0325 OSTEOGÉNESIS IMPERFECTA TIPO I COMO MUTACIÓN DE NOVO
Ana Astorga Zambrana, Carolina Vigil Chacón, Cristina Navarro Gutiérrez, Eva Robles Cuadrado
Hospital de Poniente (Almería) España
1 Objetivos
Grupo de anomalías genéticamente heterogéneo. Resultan de las mutaciones en la producción de

cantidad anormal (OI tipo I) o calidad (tipos II, III y IV) del colágeno.
Existen cuatro subtipos clínicos. El caso que presentamos forma parte del subtipo I.
El tipo I, autosómico dominante, tiene una prevalencia aproximada de 1 de cada 30.000 recién nacidos,
caracterizado por huesos frágiles, esclerótica azul y sordera progresiva, con una esperanza de vida
normal. El diagnóstico prenatal se puede realizar mediante análisis de ADN y/o ecografía en el segundo y
tercer trimestre (en las que se pueden demostrar fracturas de huesos largos).
Presentamos el caso de una paciente de 33 años primigesta sin antecedentes de interés. Fumadora de 2-
3 cigarrillos al día.
3 Resultados
Embarazo de curso normal. Screening del primer trimestre de bajo riesgo. En semana 12 de gestación,
se diagnostica un doppler de arterias uterinas patológico por lo que inicia tratamiento con acido
acetilsalicílico 100 mg cada 24 horas. En la visita de semana 24, se diagnostica restricción del crecimiento
precoz (percentil 1 de crecimiento) y sospecha de malformación esquelética que se confirma en hospital
de referencia. Los huesos largos de miembros inferiores (fémures, tibias y peronés) se presentaban con
una curvatura fuera de la normalidad. La paciente no desea técnica invasiva para estudio genético. La
gestación finalizó mediante cesárea electiva en semana 35 por restricción del crecimiento severa.
4 Conclusiones
Se realizó estudio genético postnatal confirmándose osteogénesis imperfecta tipo I en neonato. El
cariotipo de los progenitores fue normal por lo que la mutación en el neonato se originó de novo.
C0327 CONSENSO DE INTERPRETACIÓN Y ASESORAMIENTO GENÉTICO DE LOS
RESULTADOS DE LA TÉCNICA DE ARRAY-CGH PRENATAL PROPUESTO POR EL
GRUPO DE TRABAJO DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE ASESORAMIENTO GENÉTICO.
1 2 3 4 3
Núria Capdevila Atienza , Anna Abulí Vidal , Mar Borregán Prats , Cristina Hernando Davalillo , Alberto Plaja Rustein ,
4
Olaya Villa Marcos
1
Parc Taulí, Hospìtal Universitari Sabadell (Barcelona) Espanya
2
Salud de la Mujer Dexeus (Barcelona) España
3
Hospital Universitario Vall Hebrón (Barcelona) España
4
qGenomics Laboratory (Barcelona) España
1 Objetivos
Mediante la edición del consenso se pretende:
1. Proponer una guía para la interpretación y el asesoramiento genético de los resultados de Array-
CGH prenatal.
2. Facilitar la toma de decisiones y el manejo de los pacientes.
3. Homogeneizar la atención asistencial.
En la primera etapa, se establece un grupo de trabajo multicéntrico, de salud pública y privada, formado
por especialistas de laboratorio en realización de estudios de Array –CGH y asesores genéticos para:
• Recopilar y evaluar los protocolos internos y externos.

• Recopilar y evaluar las publicaciones científicas existentes.
• Elaborar un consenso de interpretación y asesoramiento genético de los resultados de Array-
CGH prenatal.
En la segunda etapa se elabora el consenso incluyendo directrices de interpretación y clasificación de los

resultados, modelos de hojas de información para el paciente y modelo de consentimiento informado
específico para estos estudios.
En la tercera etapa se programa la presentación del consenso a las diferentes asociaciones científicas
relacionadas con estudios de Array-CGH, al igual que en reuniones científicas y congresos de interés.
3 Resultados
Los resultados tras el periodo de trabajo comprendido entre Enero y Diciembre del 2016 han sido:
• La evaluación los diferentes estudios, consensos y protocolos de interpretación publicados hasta

la fecha.
• La realización de un consenso de interpretación y asesoramiento genético de los resultados
Array-CGH prenatal.
4 Conclusiones
• La publicación del consenso puede resultar una guía útil frente a la interpretación y el
asesoramiento de los resultados de Array-CGH, consiguiendo una optimización de los recursos y
una estandarización del manejo de los pacientes.
• La realización del consenso por profesionales tanto del ámbito público como privado y con
experiencia en la realización e interpretación de los estudios en el laboratorio y en asesoramiento
genético post test, favorece que las directrices establecidas consideren la complejidad de la
interpretación y el asesoramiento genético en la aplicación habitual del proceso asistencial y
faciliten su implementación.
C0340 ACCESO A LOS SERVICIOS DE GENÉTICA DE LOS PACIENTES CON AUTISMO
EN ESPAÑA: LIMITACIONES Y CONSECUENCIAS
Marta Codina Solà, Ivon Cuscó Martí, Luis A. Pérez Jurado, Clara Serra Juhé
Unidad de Genética, Universitat Pompeu Fabra, CIBERER (U735) (Barcelona) España
1 Objetivos
Los Trastornos del Espectro Autista (TEA) son un grupo de trastornos del neurodesarrollo caracterizados
por alteraciones en la interacción social y el comportamiento. Aunque una evaluación genética completa
puede identificar la causa del trastorno en aproximadamente el 15-30% de los casos, varios estudios han
mostrado una baja utilización de los servicios de genética por parte de las familias. El objetivo de este
estudio es explorar el acceso de las familias españolas a dichos servicios y las implicaciones que este
hecho conlleva.
Los participantes del estudio son padres y madres pertenecientes a asociaciones de familias de Cataluña
(n=130). La información fue recogida mediante un cuestionario electrónico, que incluía preguntas
relacionadas con: 1) Datos demográficos, 2) Acceso a los servicios de genética y fuentes de información,
3) Percepción de las causas, 4) Conocimiento y opinión respecto a la genética y los estudios genéticos, 5)
Percepción del riesgo de recurrencia y 6) Impacto en las decisiones reproductivas.
3 Resultados
Nuestros resultados muestran una amplia infrautilización de los servicios de genética, dado que sólo el
30% de las familias habían sido visitadas en un servicio de genética y sólo se había realizado un cariotipo
molecular (prueba de elección en TEA) en el 13% de los pacientes. No obstante, el 94% de los padres
estaban interesados en que se realizara un estudio genético. Los participantes sobrestimaban
ampliamente el riesgo de recurrencia y afirmaban que éste había afectado a sus decisiones reproductivas.
Finalmente, haber visitado un profesional de la genética estaba asociado con un mayor conocimiento y
una percepción de riesgo más exacta.
4 Conclusiones
El acceso a los servicios de genética de familias con TEA en España es bajo, a pesar del interés de las
familias y de las repercusiones que ello tiene en aspectos tan relevantes como la planificación familiar.
C0363 DIAGNÓSTICO PRENATAL DE DISTROFIA MIOTÓNICA TIPO 1 (STEINERT)
1 Objetivos
La distrofia miotónica tipo 1 es una enfermedad hereditaria autosómica dominante, multisistémica y
crónica, de progresión lenta y heredabilidad variable. Se puede manifestar en cualquier momento de la
vida, independientemente del sexo. Se caracteriza por reducción de masa muscular, cataratas
subcapsulares iridiscentes - cristalinos opacos-, bloqueos cardiacos y miotonía. La enfermedad de
Steinert - distrofia miotónica tipo 1- es la forma congénita que afecta a neonatos. La prevalencia se estima
en 1/20000 habitantes. En la distrofia miotónica tipo 1 el fen afectado es el DMPH que codifica la kinasa
miosina, expresada en los músculos esqueléticos. Este gen se localiza en el brazo largo del cromosoma
19. La distrofia miotónica está incluida dentro de las enfermedades por expansión de trinucleótido. En
DM1, hay repetición del triplete citosina-timina-guanina en el gen DMPK.
Presentamos el caso clínico de una paciente de 34 años portadora de distrofia miotónica de Steinert. Hijo
previo sano de 5 años de edad.
3 Resultados
La paciente acude en primera visita de embarazo en semana 12. Screening de bajo riesgo para síndrome
de Down y Edwards y ecografía normal. Se encuentra preocupada y quiere conocer si el feto está afecto
por su enfermedad. Se realiza biopsia corial a petición de la paciente. Ecografía dentro de la normalidad.
Se solicitan cariotipo y Arrays.
El resultado de estudio genético del ADN del feto determina cariotipo 46 XY e informa de afectación
fetal de distrofia miotónica congénita al presentar un patrón de señales compatible con la presencia de un
alelo de 4 repeticiones, dentro del rango de la noralidad, y otro superior a 125 repeticiones, en la zona de
la mutación.
4 Conclusiones
El alto riesgo de transmisión de la mutación a a la descendencia hace que el consejo genético sea
imprescindible para esta pareja así como un diagnóstico genético preimplantacional para evitar afectación
fetal en futuros embarazos.
C0420 VERSIÓN ESPAÑOLA DE LA ESCALA NFTI-QOL, CUESTIONARIO ESPECÍFICO
PARA EVALUAR LA CALIDAD DE VIDA EN LA NEUROFIBROMATOSIS TIPO 2.
ADAPTACIÓN TRANSCULTURAL Y ANÁLISIS DE VALIDEZ Y FIABILIDAD DE
INSTRUMENTOS PSICOMÉTRICOS
Andrea Ros Peña, Ignacio Blanco, Alicia Castillo, Isabel Bielsa, Francesc Roca-Ribas, Emilio Amilibia, Juan Luís
Becerra
Hospital Universitari Germans Trias i Pujol Badalona (Barcelona) España
1 Objetivos
Hornigold et al (2012) han desarrollado un cuestionario para evaluar el impacto en la calidad de vida
(NFTI-QOL) de los pacientes con Neurofibromatosis Tipo 2 (NF2). No existe un cuestionario específico
validado en castellano que evalúe la calidad de vida en nuestra población NF2. El objetivo del estudio es
la adaptación transcultural y validación de la escala NFTI-QOL.
Traducción y retro-traducción de la escala NFTI-QOL al castellano. Validación mediante métodos de
análisis factorial de sus componentes y el uso de un segundo cuestionario de calidad de vida genérico
(SF-36) en una muestra de 64 pacientes.
3 Resultados
La escala de calidad de vida NFTI-QOL contiene 8 ítems (Valor total: 0-24). El análisis de validez del
contenido demuestra que la versión española del NFTI-QOL es conceptualmente equivalente a la escala
original. La alpha de Cronbach para la escala completa es 0.69. La consistencia interna del NFTI-QOL es
buena (Alfa de Cronbach de 0.7). El puntuación total obtenida presenta una correlación estadísticamente
significativa con cada uno de los 8 dominios del SF-36 (p<0.001). La correlación con el sumatorio de la
puntuación de los 8 dominios del SF-36 es significativa (r=-0.73, p<0.001). La puntuación media de NFTI-
QOL es 8.4 (Rango: 0-21).
4 Conclusiones
Se ha validado la versión española de NFTI-QOL por lo que permite evaluar la calidad de vida en
pacientes españoles con NF2. Presenta una correcta validez y fiabilidad del contenido. Es una
herramienta útil para que los profesionales sanitarios puedan evaluar los resultados de sus intervenciones
sobre pacientes con NF2.
C0500 LA IMPORTANCIA DE LAS CONSULTAS DE ASESORAMIENTO POST
INTERRUPCIÓN LEGAL DEL EMBARAZO. NUESTRA EXPERIENCIA EN UN HOSPITAL
TERCIARIO
laia Martinez Ribot, Mar Borregan Prats, Irene Valenzuela Palafoll, Anna Maria Cueto González, Teresa Vendrell
Bayona, Fermina López Grondona, Susana Boronat Guerrero, Eduardo Tizzano Ferrari
Departamento Genética Clínica y Enfermedades Minoritarias. Hospital Vall Hebron barcelona (Barcelona) España
1 Objetivos
Desde el año 2012 en nuestro hospital inició una consulta estructurada de asesoramiento post
interrupción legal del embarazo (ILE). En este trabajo se describe la experiencia de nuestro centro
poniendo de manifiesto la importancia del asesoramiento genético en este tipo de consultas.
Estudio retrospectivo de las consultas de asesoramiento post ILE que han tenido lugar entre los años
2012-2016 en nuestro hospital. Se han analizado los diagnósticos fetales por medio de anatomía
patológica, estudios radiológicos y estudios genéticos y los antecedentes familiares de todos los
casos. Asimismo se ha valorado la trayectoria y evolución de dichas consultas de asesoramiento durante
estos cinco años.
3 Resultados
Se realizaron 900 consultas de asesoramiento post ILE siendo las anomalías cromosómicas la indicación
más frecuente de interrupción (40%). También han sido identificados defectos de tubo neural (8%),
cardiopatías aisladas (7%), microanomalías genéticas (6%), síndromes polimalformativos (6%), otros
defectos del sistema nervioso central y alteraciones genitourinarias (<5% cada uno). No en todos los
casos ha sido posible determinar la etiología, lo que implica no haber podido establecer un riesgo de
recurrencia preciso para la pareja. En estos casos es posible ofrecer un asesoramiento genético con
riesgos de recurrencia empíricos, lo que disminuye la ansiedad y ayuda a la pareja a afrontar nuevas
gestaciones.
.
4 Conclusiones
Las consultas de asesoramiento post ILE implican el trabajo de colaboración multidisciplinar entre
obstetras, anatomopatólogos, radiólogos, genetistas y asesores genéticos siendo esenciales para llegar a
un diagnóstico además de ofrecer un riesgo de recurrencia lo más preciso posible. Este tipo de consultas,
brinda la oportunidad a la pareja de disponer de un espacio en el cual abordar aspectos emocionales en
relación a la interrupción. Estos aspectos ayudan a reducir la angustia del proceso, contribuyen a la
gestión del duelo del embarazo perdido y aportan información que ayudan a decidir sus opciones
reproductivas.
C0502 MUTACIÓN EN HETEROCIGOSIS DEL GEN PKHD1: POLIQUISTOSIS RENAL
AUTOSÓMICA RECESIVA
1 Objetivos
La poliquistosis renal es una enfermedad genética que se caracteriza por presencia de múltiples quistes
en ambos riñones. Puede afectar a otros órganos como hígado, páncreas, corazón y cerebro. El patrón
hereditario distinto da lugar a dos formas de la enfermedad: autosómica dominante o recesiva.
La enfermedad poliquística renal autosómica recesiva es menos común y es incompatible con la vida. Se
diagnostica en edades tempranas y mediante ecografía diagnóstica prenatal. Se debe a la mutación del
cromosoma locus 6p12.2 PKHD1. Su alta mortalidad tras el nacimiento se debe a la insuficiencia
respiratoria severa.
Presentamos el caso de una paciente con embarazo previo normal y niño vivo sano. En segundo
embarazo, se diagnosticó mediante ecografía sospecha clínica de poliquistosis renal autosómica recesiva
(sin estudio genético confirmatorio) y la paciente interrumpió el embarazo. Acude embarazada de nuevo.
3 Resultados
Evolución normal del embarazo. Screening de bajo riesgo para cromosomopatías. Se diagnostica en
semana 21 riñones hiperrefringentes y líquido normal. En hospital de referencia, confirman sospecha
diagnóstica. Se solicita estudio genético en líquido amniótico que confirma afectación fetal de enfermedad
poliquísitca renal autosómica recesiva.
4 Conclusiones
Se realizó estudio genético a los progenitores. El padre presentaba mutación en heterocigosis para la
mutación en la posición c.9689delA del gen PKHD1. En el estudio genético de la madre, se encontró
mutación de significado incierto de la variante c.6122-12G>A en el gen PKHD1. Se informó a la pareja de
que la herencia es autosómica recesiva y tienen un 25 % de probabilidad de que sus hijos hereden la
enfermedad. Son candidatos a diagnóstico genético preimplantacional de manera privada (al tener hijo
previo sano no está cubierto por la seguridad social). Si se quedase esta paciente embarazada de nuevo,
se debería realizar estudio en líquido amniótico para conocer si la mutación estuviera presente en el feto.
Cardiogenética
C0046 DISEÑO, VALIDACIÓN Y APLICACIÓN DE UNA NUEVA PLATAFORMA DE

SECUENCIACIÓN GENÓMICA PARA LA PERSONALIZACIÓN DEL TRATAMIENTO
ONCOLÓGICO Y EL CONSEJO GENÉTICO EN CÁNCER
1 1 2 2 1 1
Juan Cadiñanos , Marta Diñeiro Soto , David Castillo , Patricia C. Pruneda , Cristina Penas , Guadalupe A. Cifuentes ,
1 1 1 2 1
Álvaro de Vicente , Noelia S. Durán , Rebeca Álvarez , Gonzalo R. Ordóñez , Rubén Cabanillas
1
Instituto de Medicina Oncológica y Molecular de Asturias (IMOMA) (Asturias) España
2
Disease REsearch And Medicine (DREAMgenics) (Asturias) España
1 Objetivos
La aplicación clínica de la secuenciación de nueva generación (NGS) requiere procedimientos de
laboratorio y bioinformáticos optimizados, una interpretación meticulosa e informes claros adaptados al
motivo de la solicitud. En este trabajo desarrollamos, validamos y aplicamos una nueva plataforma para
detectar 1) alteraciones somáticas asociadas con terapias dirigidas aprobadas para el tratamiento
oncológico y 2) mutaciones germinales que predisponen al desarrollo de cáncer.
Extracción de ADN de 37 muestras tumorales (tejidos parafinados/citologías), 35 germinales (sangre) y 10
líneas celulares. Preparación de genotecas para NGS enriquecidas en los exones de 200 genes (90 para
selección de terapias, 140 para predisposición al desarrollo de cáncer y 30 para ambos fines) y en
intrones seleccionados de 15 genes mediante captura (SureSelectXT). Secuenciación NGS (Illumina) y
análisis bioinformático mediante herramientas propias validadas científicamente.
3 Resultados
La metodología detecta variantes de un solo nucleótido (SNVs) e inserciones/deleciones (indels) con
sensibilidad y especificidad superiores al 99,5% (frecuencia alélica > 0,1), así como variantes de número
de copias (CNVs) y reordenamientos. Identificamos alteraciones asociadas a fármacos dirigidos
aprobados en 33/37 muestras somáticas (89,19%) (rendimiento comparable al de las plataformas de
referencia). El resultado del análisis somático de una metástasis mediastínica de cáncer de mama
(mutación EGFR p.Glu746_Ser752delinsAla) motivó su revisión anatomopatológica, su reclasificación
definitiva como adenocarcinoma pulmonar y su tratamiento con gefinitib (respuesta parcial sostenida
durante 15 meses). Los análisis germinales identificaron 2 mutaciones patogénicas (en CDKN2A y
BRCA2). Proponemos una estrategia de interpretación y comunicación de resultados adaptada a todas
las combinaciones de finalidad de la solicitud (tratamiento/consejo genético/ambas), disponibilidad de
muestras (tumoral/germinal/ambas) y alcance del consentimiento informado (alteraciones
somáticas/alteraciones germinales).
4 Conclusiones
Mediante la metodología adecuada es posible trasladar a la práctica clínica los últimos avances en
oncología de precisión, integrando en una misma plataforma la identificación de alteraciones genómicas
somáticas y germinales.
C0071 UTILIDAD DEL ESTUDIO GENÉTICO EN LA MUERTE SÚBITA PARA PREVENIR
NUEVOS EVENTOS FATALES.
1 1 2 1 1
Rebeca Lorca , Juilian Rodirguez Reguero , Rubén Cabanillas Lorca , Juan Gómez de Oña , Sara Alonso Álvarez ,
1 1 1
María Marín , Eliecer Coto , César Morís
1
2
1 Objetivos
La muerte súbita (MS) en jóvenes tiene un enorme impacto en la salud pública. Realizar una autopsia es
esencial para llegar al diagnóstico definitivo, y la autopsia molecular es clave para identificar
enfermedades hereditarias. En ausencia de autopsia, se asume un origen cardiaco de la MS, en
ocasiones erróneamente. En este trabajo se pretende ilustrar la importancia del estudio genético.
Se presenta una familia con una MS a los 38 años por enfermedad tromboembólica, diagnosticada
mediante autopsia clínica. Su hermano (caso índice), con antecedentes de flebitis a los 28 años, a los 31
presentó trombosis axilohumeral y embolia pulmonar masiva, sufriendo actualmente hipertensión
pulmonar secundaria. Al no existir autopsia molecular del fallecido, se realizaron exámenes clínicos y de
coagulación a toda la familia, así como estudio de los genes asociados a las principales trombofilias
hereditarias y secuenciación del exoma del caso índice.
3 Resultados
Tras exámenes clínicos, coagulación básica y secuenciación convencional sin hallazgos, se llegó al
diagnóstico final gracias a la secuenciación del exoma: disfibrinogenemia congénita (enfermedad
autosómica dominante por una mutación en FGA (c.1717C>T(p.Arg573Cys)).
Esta mutación fue identificada en 8 miembros de la familia. El hermano asintomático no era portador.
Tanto la madre como hermanas eran portadoras y habían presentado episodios de flebitis y/o trombosis
venosa profunda. Los 2 hijos y 2 sobrinos eran portadores, habiendo sufrido una sobrina una embolia
pulmonar a los 20 años.
4 Conclusiones
Identificar la causa de cualquier MS, con la ayuda de la autopsia y estudio genético, es esencial por su
potencial heredabilidad, independientemente de que su origen sea o no cardiológico. En la era de la
Medicina de Precisión, identificar portadores asintomáticos de mutaciones causales de enfermedades
graves (como la disfibrinogenemia) puede prevenir potenciales eventos fatales como la MS.
C0075 PERFIL DE RIESGO DE LOS PACIENTES CON MIOCARDIOPATÍA HIPERTRÓFICA
PORTADORES DE MUTACIONES SARCOMÉRICAS
1 2 3 2 3 2
Rebeca Lorca , Juan Gómez , David Calvo , María Martín , Rubén Cabanillas , César Morís , Juilian Rodirguez
3 2
Reguero , Eliecer Coto
1
2
HUCA (Asturias) España
3
1 Objetivos
La miocardiopatía hipertrófica (MCH) es la enfermedad genética cardiaca más común y la causa más
frecuente de muerte súbita (MS) en jóvenes. La incidencia de mutaciones sarcoméricas (MutS) es alta,
pero el papel que juegan en la estratificación del riesgo es controvertido, por lo que se pretende estudiar
en nuestra población.
Se realizó un estudio genético mediante secuenciación de nueva generación para identificar MutS
(MYBPC3, MYH7, TNNI3, TNNT2, TPM1, TNNC, MYL1, MYL2, ACTC1 Y FLNC) en 64 casos índice con
MCH referidos para estudio de forma consecutiva. Se calculó el perfil de riesgo de cada paciente en el
momento del estudio genético, según las escalas recomendadas en las guías de práctica clínica de MCH
de la Sociedad Europea de Cardiología de 2014.
3 Resultados
64 casos índice con edad media 59 ± 15 años, grosor ventrículo izquierdo medio 20 ± 5 mm, aurícula
izquierda media 44.5 ± 4 mm, Gradiente medio 20 ± 33, 17% síncope, 16% TVNS y 8% antecedentes
familiares de MS. Un 28 % de los pacientes eran portadores de MutS y un 72%. En el análisis univariante,
la única variable que mostro diferencias entre ambos grupos fue el antecedente de síncope, el cual fue
más frecuente en el grupo portador de MutS (p<0.01). El grupo portador de MutS presentó una
puntuación de riesgo superior al grupo sin MutS (probabilidad de eventos arrítmicos a los 5 años de
seguimiento 3,8% ± 1.7 vs 2,2% ± 1.7; p<0.01).
4 Conclusiones
El perfil de riesgo de los pacientes con MCH portadores de MutS parece superior al de los pacientes sin
MutS identificadas. Esta asociación se comprueba por la mayor puntuación en las escalas cuantitativas de
riesgo y se justificaría por la mayor prevalencia de síncope.
C0075 PERFIL DE RIESGO DE LOS PACIENTES CON MIOCARDIOPATÍA HIPERTRÓFICA
PORTADORES DE MUTACIONES SARCOMÉRICAS
1 1 1 1 2 1
Rebeca Lorca , Juan Gómez , David Calvo , María Martín , Rubén Cabanillas , César Morís , Juilian Rodirguez
1 1
Reguero , Eliecer Coto
1
2
1 Objetivos
La miocardiopatía hipertrófica (MCH) es la enfermedad genética cardiaca más común y la causa más
frecuente de muerte súbita (MS) en jóvenes. La incidencia de mutaciones sarcoméricas (MutS) es alta,
pero el papel que juegan en la estratificación del riesgo es controvertido, por lo que se pretende estudiar
en nuestra población.
Se realizó un estudio genético mediante secuenciación de nueva generación para identificar MutS
(MYBPC3, MYH7, TNNI3, TNNT2, TPM1, TNNC, MYL1, MYL2, ACTC1 Y FLNC) en 64 casos índice con
MCH referidos para estudio de forma consecutiva. Se calculó el perfil de riesgo de cada paciente en el
momento del estudio genético, según las escalas recomendadas en las guías de práctica clínica de MCH
de la Sociedad Europea de Cardiología de 2014.
3 Resultados
64 casos índice con edad media 59 ± 15 años, grosor ventrículo izquierdo medio 20 ± 5 mm, aurícula
izquierda media 44.5 ± 4 mm, Gradiente medio 20 ± 33, 17% síncope, 16% TVNS y 8% antecedentes
familiares de MS. Un 28 % de los pacientes eran portadores de MutS y un 72%. En el análisis univariante,
la única variable que mostro diferencias entre ambos grupos fue el antecedente de síncope, el cual fue
más frecuente en el grupo portador de MutS (p<0.01). El grupo portador de MutS presentó una
puntuación de riesgo superior al grupo sin MutS (probabilidad de eventos arrítmicos a los 5 años de
seguimiento 3,8% ± 1.7 vs 2,2% ± 1.7; p<0.01).
4 Conclusiones
El perfil de riesgo de los pacientes con MCH portadores de MutS parece superior al de los pacientes sin
MutS identificadas. Esta asociación se comprueba por la mayor puntuación en las escalas cuantitativas de
riesgo y se justificaría por la mayor prevalencia de síncope.
C0225 APLICACIÓN DE LA SECUENCIACIÓN MASIVA EN PARALELO A LA AUTOPSIA
MOLECULAR DE CASOS DE MUERTE SÚBITA CARDIACA POR DISECCIÓN DE AORTA
TORÁCICA
1 1 2 3 4 5 6
Marina Gago-Diaz , Eva Ramos-Luis , Silvia Zoppis , Esther Zorio , Pilar Molina , Aitana Braza-Boïls , Juan Giner ,
7 7 1 7 8
Beatriz Sobrino , Jorge Amigo , Alejandro Blanco-Verea , Angel Carracedo , Maria Brion Martinez
1
Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago (A Coruña) España
2
Università di Roma Sapienza (Roma) Italia
3
Hospital Universitario y Politécnico La Fe (Valencia) España
4
Instituto de Medicina Legal de Valencia (Valencia) España
5
Instituto de Investigación Sanitaria La Fe (Valencia) España
6
Instituto de Medicina Legal de Valencia (Valencia) España
7
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica (A Coruña) España
8
Instituto de investigacion Sanitaria de Santiago, Xenéticas de enfermidades cardiovasculres Santiago (A Coruña)
España
1 Objetivos
Las disecciones de aorta torácica son, con una incidencia de aproximadamente 3,5/100.000 pacientes por
año, una causa importante de muerte súbita cardíaca y, generalmente, la primera manifestación clínica de
un aneurisma en crecimiento. El descubrimiento de algunos de los factores genéticos implicados en
aproximadamente el 40% de los casos hereditarios ha demostrado ser útil en el ámbito clínico para la
anticipación de esta consecuencia fatal. El principal objetivo del presente trabajo fue poner en práctica
una estrategia de autopsia molecular mediante secuenciación masiva de 22 genes, para el diagnóstico de
casos de muerte súbita cardíaca por disección de aorta torácica.
Secuenciación masiva de un panel de 22 genes (FBN1, COL1A1, COL1A2, COL1A3, EFEMP2, ELN,
PLOD1, TGFBR1, TGFBR2, TGFB2, TGFB3, SMAD3, SMAD4, SLC2A10, SKI, ACTA2, MYH11, FLNA,
MYLK, PRKG1, NOTCH1 y PTPN11) en 17 casos de disección de aorta torácica. Priorización de las
variantes genéticas identificadas de acuerdo a las recomendaciones publicadas. Confirmación de los
resultados por secuenciación tradicional.
3 Resultados
Del total de 10 variantes genéticas potencialmente causales identificadas en siete de los17 casos de
partida, dos resultaron patogénicas, dos probablemente patogénicas, una posiblemente benigna y las
cinco restantes variantes de significado incierto. El rendimiento diagnóstico alcanzado fue de un 23%,
aproximadamente.
4 Conclusiones
La autopsia molecular por secuenciación masiva de 22 genes resultó una herramienta diagnóstica útil en
casos de muerte súbita cardíaca por disecciones de aorta torácica, tanto para contribuir al descubrimiento
del componente genético de dicha manifestación clínica, como para prevenir sus consecuencias fatales
en familiares a riesgo.
C0228 IMPORTANCIA DEL TEST GENÉTICO EN CASCADA EN CASOS DE MUERTE
SÚBITA CARDIACA INEXPLICADA
1 1 1 1 2 2
Alejandro Blanco-Verea , Eva Ramos-Luis , Rocio Gil , Sandra Fernandez Novo , Beatriz Sobrino , Jorge Amigo , Jose
3 2 4
Luis Gómez , Angel Carracedo , Maria Brion Martinez
1
Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago (A Coruña) España
2
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica (A Coruña) España
3
IMELGA Vigo (Pontevedra) España
4
Instituto de investigacion Sanitaria de Santiago, Xenéticas de enfermidades cardiovasculres Santiago (A Coruña)
España
1 Objetivos
El síndrome de QT largo es un trastorno arritmogénico causado por anomalías en los canales iónicos que
provocan una repolarización ventricular anormal, siendo muchas veces la muerte súbita el primer síntoma
de la enfermedad. Generalmente presenta herencia autosómica dominante y al menos 15 genes han sido
identificados, representando 3 de ellos entre el 70 y 75% de los casos. Las guías actuales recomiendan el
estudio genético en todos los pacientes diagnosticados y en los casos de muerte súbita cardiaca
inexplicada, así como el estudio en cascada de los familiares de primer grado.
Secuenciación masiva de 86 genes asociados con enfermedades hereditarias cardiacas en un caso de
muerte súbita cardiaca inexplicada de una mujer de 36 años. Análisis de portador de variante genética en
5 familiares de primer grado mediante secuenciación de Sanger.
3 Resultados
La cobertura media de las regiones blanco secuenciadas fue de 351x, con un 99.09% de la región blanco
cubierta al menos 30x. Además de polimorfismos y variantes raras sin patogenicidad conocida, el estudio
genético mostró la presencia de una variante missense, p.(R248C):c.727C>T (NM_000218.2) en el gen
KCNH2. El estudio familiar demostró la presencia de la variante en dos individuos aparentemente sanos
sin síntomas en el momento del estudio, pero uno de ellos falleció súbitamente con posterioridad al
estudio genético
4 Conclusiones
El estudio genético permitió identificar familiares con riesgo de muerte súbita, a pesar de la ausencia de
síntomas y de la edad avanzada de los individuos. La segunda muerte súbita en la familia, puso en
evidencia la necesidad de medidas preventivas en los portadores de la variante.
C0236 RENDIMIENTO DIAGNÓSTICO DEL GENOTIPADO EN LAS SOSPECHAS DE
SÍNDROME DE NOONAN Y RASOPATÍAS
Begoña Ezquieta Zubicaray, Ana Cambra Conejero, Consolación Casado Fúnez, Mª Dolores García González
Laboratorio de Diagnóstico Molecular. Servicio de Análisis Clínicos/Bioquímica Clínica. Hospital General Universitario
Gregorio Marañón. (Madrid) España
1 Objetivos
El diagnóstico del síndrome de Noonan se basa en criterios clínicos. Desde el descubrimiento de PTPN11
en 2001 hasta RIT1, descrito mediante análisis de exomas en 2013, son más de 15 los genes implicados
en las Rasopatías. El objetivo de este trabajo es definir un abordaje que maximice el rendimiento
diagnóstico, con mínimo coste y tiempo de respuesta.
Valoramos el rendimiento del análisis dirigido de forma estratificada por fenotipo incluyendo 9 genes
mayoritarios, aplicado entre 2005-2015 (1122 casos analizados), que permitió genotipar 408 pacientes
(371 índices).
Analizamos los datos de 5 publicaciones recientes (2013-2016) que aplican abordajes masivos en el
contexto de diagnóstico para realizar comparativa, excluyendo trabajos dirigidos a identificación de
nuevos genes.
3 Resultados
El rendimiento diagnóstico del cribado estratificado fue del 33% (25% solo PTPN11) y alcanzó el 69% si el
solicitante era experto. En los pacientes con cardiopatía fue del 48%, 61,5% en las cardiopatías
específicas del síndrome. La mediana de tiempos de respuesta fue de 27 a 376 días para los distintos
genes. El análisis que maximiza el rendimiento, minimizando tiempos de respuesta a 15 días, incluye 14
exones en 5 genes (cribado básico para casos urgentes).
Los estudios con técnicas masivas difieren en cuanto a diseño: sospecha clínica/estudio previo negativo.
Los paneles dirigidos incluyen 11-19 genes y obtienen rendimientos de 19-46% y tiempos de respuesta
medios de 60 días, aunque destaca una publicación que combina abordaje estratificado+panel,
obteniendo un 68%.
4 Conclusiones
Si el objetivo es la confirmación diagnóstica y/o diagnóstico diferencial, el cribado básico de primer nivel
aporta un rendimiento diagnóstico no despreciable con tiempo de respuesta muy favorable y coste
limitado. Deben ser abordajes masivos los aplicados en segundo nivel, preferentemente paneles si se
trata de un contexto asistencial. En ambos abordajes el rendimiento diagnóstico fue extremadamente
dependiente de un correcto establecimiento de la sospecha clínica.
C0305 INCIDENCIA DE CARDIOPATÍA CONGÉNITA EN 149 PACIENTES CON SÍNDROME
CORNELIA DE LANGE.
1 2 2 2
Ariadna Ayerza Casas , Beatriz Puisac Uriol , María Hernández Marcos , Mª Esperanza Teresa Rodrigo , Mª
2 3 2 4
Concepción Gil Rodríguez , Carolina Baquero Montoya , Sheila López Triguero , Daniel Nieto Ibáñez , Sergio Gil
4 4 2 5
Clavero , Francisco J Santiago Arcos , Juan Pié Juste , Feliciano J. Ramos Fuentes
1
Servicio Cardiología-Hospital Infantil Miguel Servet (Zaragoza) España
2
Unidad Genética Clínica y Genómica Funcional, Dpto. Farmacología y Fisiología, Facultad de Medicina, Universidad
de Zaragoza – IIS Aragón-CIBERER-GCV02 (Zaragoza) España
3
Hospital Pablo Tobón Uribe (Medellín) Colombia
4
Unidad Genética Clínica y Genómica Funcional, Dpto. Farmacología y Fisiología, Facultad de Medicina, Universidad
de Zaragoza – IIS Aragón - (Zaragoza) España
5
Facultad de Medicina, Universidad de Zaragoza - Hospital Clínico Univ. "Lozano Blesa", Pediatría Zaragoza
(Zaragoza) España
1 Objetivos
El Síndrome Cornelia de Lange (SCdL; OMIM #1227470, #300590, #610759, #614701 y #300882) es un
síndrome polimalformativo hereditario que se produce por afectación de genes implicados en la regulación
del complejo de cohesinas (NIPBL (60%), SMC1A (4-6%), HDAC8 (<4%), SMC3 (<1%) y RAD21 (<1%).
Aunque la presencia de cardiopatía no constituye un criterio mayor de la enfermedad, afecta a un número
importante de individuos. El objetivo de este trabajo ha sido estudiar la incidencia, tipo de cardiopatía y
correlaciones genotipo-fenotipo que presentan estos pacientes.
Estudio de 149 pacientes con diagnóstico clínico de SCdL en los que se ha evaluado la presencia y tipo
de cardiopatía congénita así como su relación con otras variables clínicas y genéticas.
3 Resultados
La incidencia de cardiopatía congénita en pacientes con SCdL ha sido del 34,9%, predominando los
defectos septales (50%), seguidos de la estenosis pulmonar (27%) y la coartación de aorta (9,6%). Los
afectados de cardiopatía han precisado más ingresos en el periodo neonatal (p=0,04), y han presentado
mayor tasa de hipoacusia (p=0,002) y de mortalidad (p=0,09). Un 19,2% de cardiópatas han requerido
corrección quirúrgica. En cuanto al estudio genético, presentan cardiopatía un 60% de pacientes
HDAC8(+), un 33% de los NIPBL(+) y un 28,5% de los SMC1A(+). En los primeros predominan la
estenosis pulmonar y en los segundos los defectos septales.
4 Conclusiones
Observamos una incidencia importante de defectos cardiacos congénitos en pacientes con SCdL, entre
ellos predominan los defectos septales y la estenosis pulmonar. El estudio genético puede orientar en
cuanto a la incidencia y tipo de cardiopatía. No obstante, es importante realizar una valoración
cardiológica en todos estos pacientes para establecer un diagnóstico y tratamiento precoces.
C0398 UNA FAMILIA ADICIONAL CON DISPLASIA VALVULAR CARDÍACA LIGADA A X
DEBIDO A UNA NUEVA MUTACIÓN EN FLNA.
1 2 2 2 2
Pablo Lapunzina , Elena Vallespin , Jair A. Tenorio Castaño , María Palomares Bralo , Sixto García-Miñaur , Fernando
3 2 2 4 4 4
Santos Simarro , Víctor Martínez-Glez , Pedro Arias , Silvina Gianivelli , Juan Medina , Jorge Solís , Mónica
4 4 1 1
Rodriguez , Alexandra Villagrá , Julian Nevado , Luis Fernandez
1
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM). Hospital Universitario La Paz. CIBERER., Laboratorio de
2
INGEMM-IdiPaz-CIBERER (Madrid) España
3
(Madrid) España
4
Grupo HM (Madrid) España
1 Objetivos
La displasia valvular cardíaca ligada al cromosoma X (CVD1, MIM # 314400) también conocida como
degeneración valvular mixomatosa polivalvular es un trastorno clínico poco frecuente. Las mutaciones de
la filamina A (FLNA) se han reconocido como la causa de degeneración mixomatosa progresiva de la
válvula mitral y tricúspide. Sin embargo sólo unos pocos pacientes/familias han sido descritos hasta ahora
con esta enfermedad genética rara.
Presentamos una nueva familia con CVD1 con 4 afectados personas debido a una nueva mutación en
FLNA.
3 Resultados
Se detectó mediante ecocardiografía prenatal una displasia multivalvular en un feto de 22 semanas de
gestación. Nace con un peso de 3780m gramos. Debido a distress respiratorio y descompensación
cardiovascular ingresa en ECMO, se lleva a quirófano y fallece intraoperatoriamente. Análisis molecular:
todos los exones de FLNA (y las regiones de unión intrón-exón) se secuenciaron mediante secuenciación
de Sanger. Se encontró una mutación en la madre portadora del paciente (c.1066-3C>G), que luego se
confirmó la segregación en el resto de los afectados y de las mujeres portadoras obligadas.
4 Conclusiones
Además de la displasia valvular cardíaca ligada al cromosoma X, mutaciones en FLNA ligado a X pueden
causar otras enfermedades genéticas como el síndrome FG tipo2 (MIM 300321), displasia
frontometafisaria tipo 1 (MIM 305620), heterotopía periventricular (MIM 300049 ), S. Otopalatodigital, tipo I
(MIM 311300), síndrome Otopalatodigital, tipo II (MIM 304120), displasia ósea terminal (MIM 300244),
pseudoobstrucción intestinal neuronal (MIM 300048) y síndrome de Melnick-Needles (MIM 309350).
Existen sólo unas 7 familias reportadas en todo el mundo con esta condición. Comunicamos una nueva
familia con CVD1 con 4 personas afectados debido a una nueva mutación en FLNA (c.1066-3C>G). Estos
hallazgos refuerzan la importancia de considerar la displasia multivalvular como una cardiopatía congénita
inusual y consecuentemente proporcionar riesgos de recurrencia mediante el asesoramiento genético y /
o pruebas prenatales de la enfermedad.
C0409 RECURRENCIA DE MIOCARDIOPATÍA NO COMPACTADA DE INICIO PRECOZ EN
UNA FAMILIA CON MOSAICISMO GERMINAL PARA UNA VARIANTE EN MYH7
1 2 3 1 1
Luis Fernández , Patricia Muñoz-Cabello , Kristina Ibáñez , Victoria Eugenia Fdez-Montaño , Francisca Nieto , Elena
2 2 3 4 4 1
Mansilla , Fernando Santos-Simarro , Juan Carlos Silla-Castro , Carlos Labrandero , Marta Ortega , Julián Nevado ,
2 3 2 1
Sixto García-Miñaúr , Ángela del Pozo , Pablo Lapunzina , Elena Vallespín
1
Sección de Genómica Estructural y Funcional, Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital
Universitario La Paz, IdiPAZ, CIBERER (Comunidad de Madrid) España
2
Sección de Genética Clínica, Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz,
IdiPAZ, CIBERER (Comunidad de Madrid) España
3
Sección de Bioinformática, Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz, IdiPAZ,
CIBERER (Comunidad de Madrid) España
4
Servicio de Cardiología Infantil, Hospital Universitario La Paz (Comunidad de Madrid) España
1 Objetivos
La miocardiopatía no compactada es un trastorno genéticamente heterogéneo con un rendimiento
diagnóstico limitado. Las estrategias multigénicas de diagnóstico pueden elevar la tasa de detección, si
bien el incremento asociado de variantes de significado incierto dificulta el asesoramiento genético. Se
estudia un caso de familiar de miocardiopatía no compactada neonatal en dos gestaciones consecutivas
de una pareja sana consanguínea que sugirió una herencia autosómica recesiva.
El caso índice se estudió con el panel de secuenciación masiva de diseño propio CardioMass v2.1 con
268 genes asociados a miocardiopatías y trastornos del ritmo cardíaco, captura basada en tecnología de
Roche NimbleGen y secuenciación realizada en plataforma MiSeq de Illumina. Los estudios familiares
confirmaron las variantes detectadas por NGS.
3 Resultados
Una mutación en MYH7 aparentemente de novo en ambos hijos reveló en la familia un fenómeno de
mosaicismo germinal. Además, ambos hermanos, así como sus padres sanos, resultaron ser portadores
en heterocigosis de una variante rara en HCN4 previamente asociada a síndrome de bradicardia-
taquicardia y miocardiopatía no compactada.
4 Conclusiones
Estos resultados destacan la utilidad de la aproximación por NGS para trastornos genéticamente
heterogéneos. Por lo demás, este caso muestra el desafío en la interpretación y la importancia de los
estudios de segregación familiar en el diagnóstico de pacientes con más de una variante probablemente
patogénica.
Este estudio se realizó con fondos del proyecto PI13/1450, Instituto de Salud Carlos III.
C0426 DIAGNÓSTICO POR SECUENCIACIÓN MASIVA DE UN CASO DE DISTROFIA
MUSCULAR CONGÉNITA CON PRESENTACIÓN ATÍPICA
1 2 1 3 2 4
Luis Fernández , Kristina Ibáñez , Rubén Martín , Carmen Prior , Juan Carlos Silla-Castro , Isabel Esteban , María del
5 6 7 7 7
Mar García-Romero , Luis García-Guereta , Francisca Nieto , Julián Nevado , Samuel Ignacio Pascual Pascual ,
2 8 8 1
Ángela del Pozo , Sixto García-Miñaúr , Pablo Lapunzina , Elena Vallespín
1
2
Sección de Bioinformática, Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz, IdiPAZ,
CIBERER (Comunidad de Madrid) España
3
Sección de Genética Molecular, Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz,
4
Servicio de Anatomía Patológica, Hospital Universitario La Paz (Comunidad de Madrid) España
5
Servicio de Neurología Infantil, Hospital Universitario La Paz (Comunidad de Madrid) España
6
Servicio de Cardiología Infantil, Hospital Universitario La Paz (Comunidad de Madrid) España
7
8
1 Objetivos
Las estrategias genómicas actuales facilitan el estudio genético de las enfermedades minoritarias pero
también plantean desafíos. Las distrofias musculares asociadas al gen DMD presentan debilidad
muscular progresiva con un espectro de severidad variable entre la distrofia muscular de Becker y la
distrofia muscular de Duchenne. Se estudió un paciente con una miopatía leve de inicio en la infancia y
una miocardiopatía dilatada de rápida evolución que precisó trasplante cardíaco en la adolescencia.
Se realizaron estudios de inmunohistoquímica en biopsia muscular y tejido cardíaco, así como estudios
genéticos dirigidos por secuenciación Sanger que se ampliaron al panel de secuenciación masiva de
diseño propio CardioMass v3.1 con 304 genes asociados a miocardiopatías y trastornos del ritmo
cardíaco, captura basada en tecnología de Roche NimbleGen y secuenciación realizada en plataforma
NextSeq500 de Illumina. Los estudios familiares confirmaron las variantes detectadas por NGS.
3 Resultados
Estudios genéticos y anatomopatológicos dirigidos a distrofinopatías y otras patologías compatibles con el
cuadro clínico no resultaron concluyentes. La ampliación a un panel de genes asociados a miocardiopatía
con miopatía esquelética permitió diagnosticar una presentación atípica de una distrofia muscular
congénita de herencia autosómica recesiva por mutaciones en el gen FKTN.
4 Conclusiones
La precisión de la orientación clínica y la compatibilidad del genotipo hallado en este caso facilitaron el
diagnóstico frente al predominio habitual de hallazgos inciertos en los estudios de secuenciación masiva.
Este estudio se realizó con fondos del proyecto PI13/1450, Instituto de Salud Carlos III.
C0453 MUTACIONES EN EL GEN DSP SON RESPONSABLES DE DISPLASIA
ARRITMOGÉNICA Y ALOPECIA
Andrea Ros Peña, Roger Villuendas, Josep Lupon, Isabel Bielsa, Marta De Antonio, Ignacio Blanco
1 Resultados
Caso clínico: Varón de 17 años de edad procedente de Paquistán con alopecia global, hiperqueratosis
palmo-plantar, alteraciones de los anexos cutáneos, anhidrosis, retrognatia y displasia arritmogénica con
afectación biventricular con frecuencia de eyección del 42%, ventrículo derecho dilatado hipocontráctil con
acinesia y deformidad a nivel apical y tracto de salida del TSVD. Portador de DAI monocameral.
Antecedentes familiares: Progenitores primos hermanos. Hermana con fenotipo idéntico exitus por muerte
súbita en infancia.
Secuenciación de los genes JUP y DSP por NGS. Se han identificado 2 mutaciones en cis en
homocigosis en el gen DSP. La mutación c.913A>T (p.Ile305Phe) se ha descrito en un caso de alopecia
no sindrómica. Los estudios in silico revelan su posible efecto patogénico debido a la disrupción del
splicing. Su frecuencia en heterocigosis en población general supera el 1 % (ExAC= 0.03). La mutación
c.1493C>T (p.Pro498Leu) no ha sido descrita en población general. Los estudios in silico revelan su
posible efecto deletéreo dado que se altera el dominio SH3 y su función reguladora. Los progenitores y un
hermano de 15 años de edad, no controlados clínicamente, son portadores de ambas variantes en
heterocigosis.
El gen DSP codifica la proteína desmoplakina, principal componente de los desmosomas en tejido
cardíaco y piel. Está implicada en la organización de los complejos caderina-placoglobina de los
desmosomas y en el anclaje con los filamentos intermedios. Mutaciones en este gen se han asociado a
cardiomiopatía, queratodermas o al Síndrome de piel frágil-pelo lanoso-queratodermia palmoplantar.
2 Conclusiones
La combinación de las dos mutaciones en homocigosis posiblemente sea responsable del fenotipo del
paciente. Son necesarios más estudios para determinar el efecto de estas variantes en heterocigosis.
C0472 CASO CLINICO DE UN SINDROME DE SHPRINTZEN-GOLDBERG IDENTIFICADO
MEDIANTE NEXT-GENERATION SEQUENCING (NGS)
1 2 3 4
Juan Pablo Trujillo Quintero , Roberto Barriales Villa , José María Herrera Noreña , Martín F. Ortiz Genga , Lorenzo
4
Monserrat Iglesias
1
Calle José María Hernansáez 14, 7F A Coruña (A Coruña) España
2
Unidad de Cardiopatías Familiares, Servicio de Cardiología, Complexo Hospitalario Universitario de A Coruña, Instituto
de Investigación Biomédica de A Coruña (INIBIC), Servizo Galego de Saúde (SERGAS), Universidade da Coruña (A
Coruña) España
3
Servicio de Cirugía cardiaca, Complexo Hospitalario Universitario de A Coruña (A Coruña) España
4
Instituto de Investigación Biomédica de A Coruña (INIBIC); Departamento clínico, Health in Code (A Coruña) España
1 Objetivos
Además del síndrome de Marfan (SM) que afecta el tejido conectivo y compromete a los sistemas
cardiovascular y esquelético, existen otras patologías hereditarias aórticas de muy baja frecuencia que
pueden presentar un solapamiento clínico con este síndrome, dificultando o retrasando su correcto
diagnóstico diferencial. Describimos un caso de un varón que a la edad de 12 años fue diagnosticado
clínicamente de SM pero que con la ayuda del estudio genético mediante NGS se replanteó el diagnóstico
a síndrome de Shprintzen-Goldberg a los 47 años.
Mediante un panel de secuenciación masiva que incluye 35 genes relacionados con síndromes
aórticos/vasculares se ha estudiado la muestra de este paciente. A partir de estudios familiares se
determinó la presentación de novo de una variante en SKI en el caso índice.
3 Resultados
El paciente remitido para estudio genético, estaba pendiente de cirugía de reparación aórtica por
aneurisma. Al examen físico destacaba un dismorfismo craneofacial no típico del SM (craneosinostosis),
pero con alteraciones que cumplían criterios clínicos de Ghent (>7). En el estudio genético se identificaron
dos variantes de patogenicidad incierta en los genes FBN2 y SKI. El estudio genético familiar determinó la
no relevancia de la variante en FBN2 (presente en familiares no afectados) y confirmó la presentación de
novo de la variante en SKI (p.Thr180Met). Esta variante no ha sido publicada previamente y tampoco
aparece en población control. En ClinVar consta como de significado incierto e identificada en un estudio
de Aneurisma/disección aortica familiar. La nueva valoración clínica del paciente permitió confirmar el
diagnóstico, del cual se han descrito menos de 50 pacientes a nivel mundial, y replantear la cirugía.
4 Conclusiones
Este trabajo demuestra la utilidad de los paneles de secuenciación masiva en el diagnóstico diferencial de
estas patologías muy raras, así como la relevancia de realizar estudios genéticos familiares completos por
los centros de referencia.
C0508 CARACTERIZACIÓN MOLECULAR MEDIANTE EXOMA CLÍNICO DE UN CASO DE
ARRITMIA VENTRICULAR FAMILIAR
Lola Rey Zamora, Matias Morin, Verónica Vaca Tierno, Luciana Santos, Patricia Fernández San José, Marcia Ajenjo,
Luis Miguel Rincón Díaz, Miguel Angel Moreno Pelayo
Hospital Ramon y Cajal Madrid (MADRID) España
1 Objetivos
Presentamos un caso de arritmia ventricular familiar que ha podido ser diagnosticado genéticamente
mediante la utilización del exoma clínico.
Exposición del caso: mujer de 21 años diagnosticada de taquicardia ventricular bidireccional. Como
antecedentes familiares destacan distintos grados de arritmias ventriculares de distinta intensidad y
corazón estructuralmente normal en la rama materna.
Se utilizó el panel comercial TruSight One Sequencing Panel (Illumina) para el estudio de la región
exónica de 4813 genes clínicamente relevantes y un secuenciador masivo de última generación MiSeq
(Illumina) en el ADN del probando. La clasificación y el estudio de las variantes encontradas se realizó
empleando la herramienta Variant Studio (Illumina) restringiendo el análisis bioinformático a 53 genes
asociados a arritmias. La validación de las variantes y el estudio de segregación se realizó mediante
3 Resultados
Tras el análisis molecular se detectó la mutación en heterocigosis p.Arg218Trp (NP_000882.1) en el gen
KCNJ2, asociada previamente al síndrome de Andersen-Tawil (Andersen-Tawil syndrome, ATS; MIM
170390) que fue confirmada mediante secuenciación Sanger y segregada en los familiares afectos
estudiados hasta el momento.
El ATS es una enfermedad rara, con prevalencia de 1/100.000 y herencia autosómica dominante. Tiene
una presentación clínica variable que cursa principalmente con la triada: debilidad muscular periódica,
taquicardias ventriculares y/o prologanción del intervalo QT y unos rasgos dismórficos característicos.
Tras el resultado genético obtenido se reevaluó clínicamente la familia observándose, en distinta
intensidad, los rasgos típicos del síndrome.
4 Conclusiones
La utilización del exoma clínico es una aproximación adecuada en el caso de patologías poco frecuentes
con elevada heterogeneidad clínica y genética, como ocurre con el caso presentado. Mediante esta
herramienta, basada en secuenciación masiva, se ha podido realizar un diagnóstico definitivo que
permitirá un mas adecuado tratamiento, manejo y consejo genético de la paciente y sus familiares.
C0549 ESTUDIO DE VARIANTES GENÉTICAS EN VÍAS FARMACOCINÉTICAS Y
FARMACODINÁMICAS QUE AUMENTEN LA SUSCEPTIBILIDAD DE SUFRIR ARRITMIAS
Y MUERTE SÚBITA CARDIACA INDUCIDAS POR FÁRMACOS.
1 1 2 1 1
Marina Martinez Matilla , Alejandro Blanco Verea , María Torres , Eva Ramos Luís , Rocío Gil Torres , Ana Bermejo
3 4 5 6 7 1
Barrera , Mario Hirata , Francesca Brisighelli , Mario Páramo , Ángel Carracedo Álvarez , María Brion Martínez
1
Xenética de Enfermidades Cardiovasculares e Oftalmolóxicas, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago de
Compostela, España Santiago de Compostela (A Coruña) España
2
CeGen (Centro Nacional de Genotipado), Nodo de Santiago de Compostela (A Coruña) España
3
Instituto de Ciencias Forenses "Luís Concheiro" (INCIFOR), Santiago de Compostela (A Coruña) España
4
Instituto Dante Pazzanese de Cardiologia (São Paulo) Brasil
5
Forensic Genetics Laboratory, Institute of Legal Medicine, Università Cattolica del Sacro Cuore, Roma (Roma) Italia
6
Servicio de Psiquiatría, Hospital General de Conxo, Santiago de Compostela (A Coruña) España
7
Grupo de Medicina Xenómica, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago de Compostela - Universidade de
Santiago de Compostela - Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica (A Coruña) España
1 Objetivos
El objetivo del estudio es la búsqueda de factores genéticos que predispongan a la aparición de arritmias
y muerte súbita cardiaca (MSC) inducidas por fármacos.
El estudio se realizó mediante el análisis de genes asociados a vías farmacodinámicas y farmacocinéticas
del fármaco en 32 individuos con sospecha de arritmias o MSC inducidas por fármacos.
Para el estudio farmacodinámico se analizaron 96 genes asociados a MSC mediante secuenciación
masiva con Ion Proton™ System y 5500xl SOLiD™ System (Life Technologies). Las variantes detectadas
se priorizaron en función de su posible patogenicidad atendiendo a: localización y consecuencia del
cambio, frecuencia en bases de datos poblacionales, predicción de patogenicidad in silico, conservación y
evidencias publicadas.
El análisis farmacocinético se llevó a cabo mediante genotipado de iPLEX®Pro PGx Panel con la
tecnología MassARRAY (Sequenom), ambos de Agena Bioscience. Se estudiaron los diplotipos de cada
paciente para los genes clínicamente relevantes en el metabolismo de los fármacos de interés.
3 Resultados
En el análisis farmacodinámico, se priorizaron 52 variantes en 28 individuos: 47 de significado incierto, 4
probablemente patogénicas y 1 patogénica, estas 5 últimas en genes responsables de miocardiopatías. El
polimorfismo D85N en KCNE1, variante de riesgo en S. QT Largo inducido por medicamentos, se detectó
en un paciente. El análisis farmacocinénico no detectó variabilidad en CYP3A4 sugiriendo un papel
importante de los CYPs 3A5, 2C9, 2C19 y 2D6 en el metabolismo de los fármacos de interés.
4 Conclusiones
Estos resultados sugieren que la combinación del análisis farmacocinético y farmacodinámico ayuda a
predecir un mayor riesgo de sufrir arritmias inducidas por fármacos. La estrategia propuesta para el
estudio del componente genético farmacodinámico, mediante secuenciación masiva de genes no sólo de
canalopatías sino también de miocardiopatías, ha resultado efectiva para la caracterización genotípica de
pacientes con mayor riesgo de MSC, sin embargo, aún es necesario seguir profundizando con tamaños
muestrales mayores para confirmarlo.
Discapacidad intelectual y Trastornos del Espectro Autista
C0039 UN NUEVO FENOTIPO CLÍNICO PRODUCIDO POR MUTACIÓN EN EL GEN BCOR.

Monica Roselló Piera, Alfonso Caro Llopis, Carmen Orellana Alonso, Juan Silvestre Oltra Soler, Sandra Monfort
Membrado, Francisco Martínez Castellano
Hospital Universitario y Politécnico La Fe Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
Describir una nueva presentación clínica producida por el gen BCOR conocido por ser responsable de los
síndromes oculofaciocardiodental y de Lenz.
Paciente varón de 12 años de edad remitido para estudio genético por rasgos dismórficos (asimetría
facial, hipotelorismo, ptosis, epicantus, fisuras palpebrales hacia abajo y cortas, nistagmus, miopía, filtrum
largo, labio superior fino, dientes supernumerarios, prognatismo), hipotiroidismo con tratamiento
sustitutivo, microcefalia, retraso del crecimiento, cardiopatía congénita compleja, limitación a la extensión
de codos y rodillas, clinodactilia, hipotonía y discapacidad intelectual grave, con afectación severa del
lenguaje. Tanto la RMN cerebral, el cariotipo y el CGH-array fueron normales. Se ha realizado estudio de
secuenciación masiva con un panel de 1274 genes relacionados con trastornos del neurodesarrollo. Se
ha empleado la tecnología Sureselect XT Custom Kit (Agilent Technologies) como sistema de captura y
posterior secuenciación en la plataforma HiSeq 2000 (Illumina). El análisis y la interpretación funcional se
han realizado mediante el portal informático DNA-Nexus.
3 Resultados
Se ha detectado una variante en el gen BCOR que da lugar a la aparición de un codón de parada
temprana en el último exón del gen, ocasionando una proteína truncada debido a la pérdida de los últimos
95 aminoácidos de la proteína (c.4981C>T). El estudio mediante secuenciación convencional (Sanger)
junto con el haplotipo familiar, tanto en los progenitores como en otros familiares, ha permitido confirmar
la presencia de la mutación en el paciente y comprobar que ha surgido de novo en la madre.
4 Conclusiones
Los síndromes conocidos causados por mutaciones en BCOR cursan en general con anomalías oculares,
dentales y cardiacas. Aunque el paciente no presenta estrictamente ninguno de estos síndromes,
comparte muchos rasgos clínicos con ambos, pudiendo considerar este nuevo fenotipo como una entidad
clínica solapante aunque diferente.
C0078 ANÁLISIS FUNCIONALES CONFIRMAN LA PATOGENICIDAD DE UNA VARIANTE
DE SPLICING EN EL GEN CHD7 HALLADA MEDIANTE SECUENCIACIÓN MASIVA
1 2 2 2 3
Olatz Villate Bejarano , Eugenia Fraile-Bethencourt , Alberto Valenzuela , Eladio A. Velasco , Detelina Grozeva , Lucy
3 4 5
Raymond , María Pilar Botella , María Isabel Tejada
1
Insitituto de Investigación Sanitaria BioCruces Barakaldo (Vizcaya) España
2
Instituto de Biología y Genética Molecular (Valladolid) España
3
Department of Medical Genetics, Cambridge Institute for Medical Research, University of Cambridge (Cambridge) UK
4
Servicio de Pediatría (Neuropediatría), Hospital Txagorritxu (Álava) España
5
Instituto de Investigación Sanitaria BioCruces/Servicio de Genética, Hospital Universitario Cruces, Barakaldo
(Vizcaya) España
1 Objetivos
Recientemente, gracias a las nuevas tecnologías de secuenciación masiva (Next Generation Sequencing,
NGS), se ha realizado un gran progreso en la identificación de variantes genéticas responsables de
patologías como la discapacidad intelectual (DI) asociada o no a malformaciones congénitas. Nuestro
objetivo ha sido analizar funcionalmente la variante c.5665+1G>T en el gen CHD7, que predice un
síndrome de CHARGE en un paciente fallecido e inicialmente diagnosticado de Síndrome de Treacher-
Collins.
La variante fue identificada mediante NGS utilizando un panel de 565 genes relacionados con DI. Se
realizaron análisis bioinformáticos de su posible efecto en el splicing con el programa Human Splicing
Finder. Los exones y secuencias intrónicas flanqueantes fueron amplificados a partir de ADN del paciente
y clonados en el vector de splicing pSAD®. Se transfectaron células HeLa con esta construcción y un
minigen wildtype; se aisló el ARN a las 48h y se realizó RT-PCR con primers específicos.
3 Resultados
El análisis bioinformático de la variante c.5665+1G>T predijo la eliminación del sitio donador canónico del
exón 28. El minigen wildtype produjo el transcrito canónico esperado, mientras que el constructo con
c.5665+1G>T produjo un transcrito aberrante mayoritario que presentaba la inserción de 63 nucleótidos
del intrón 28 por uso de un sitio donador alternativo 64 nt downstream. El efecto en la proteína sería la
inserción de 8 nuevos aminoácidos (VKVPEKLV) y la aparición de un codón de terminación (TAG)
prematuro 25 nucleótidos downstream dando lugar a una proteína truncada de 1896 aminoácidos
(proteína normal 2997 aa).
4 Conclusiones
La variante c.5665+1G>T tiene un impacto completo en el splicing del gen CHD7 cuyo resultado sería una
proteína truncada, lo que confirma el Síndrome de CHARGE en este paciente. Estos análisis tienen una
gran utilidad para confirmar la patogenicidad de las variantes halladas mediante NGS y para el Consejo
Genético a las familias.
C0091 EFECTIVIDAD DE LA COMBINACIÓN DE ANTIOXIDANTES, ÁCIDO ASCÓRBICO Y
ALFA-TOCOFEROL, EN LOS PROBLEMAS COGNITIVOS Y DE COMPORTAMIENTO
ASOCIADOS AL SÍNDROME X-FRÁGIL.
1 2 3 4
Yolanda de Diego Otero , Lucía Pérez Costillas , Rocio Calvo Madina , Carolina Quintero Navarro , Cristina Nogueiras
5 6 2 7
Cobas , Isabel del Pino Benitez , Yolanda Casado Martín , Isabel Fernández Carvajal
1
UGC Salud mental, Hospital Regional Universitario de Málaga. 2Instituto de Investigación Biomédica de Málaga
(IBIMA). Malaga (Malaga) España
2
Unidad de Gestión Clínica de Salud Mental. Hospital Regional Universitario de Málaga. 2Instituto de Investigación
Biomédica de Málaga (IBIMA). Universidad de Málaga. (Málaga) España
3
Unidad de Gestión Clínica de Pediatría. Hospital Regional Universitario de Málaga (Málaga) España
4
Instituto de Investigación Biomédica de Málaga (IBIMA). (Málaga) España
5
Unidad de Gestión Clínica de Pediatría. Hospital Regional Universitario de Málaga (Málaga) España
6
Unidad de Gestión Clínica de Salud Mental, Instituto de Investigación Biomédica de Málaga (IBIMA). Universidad de
Málaga. (Málaga) España
7
IBGM Departamento de Pediatría. Universidad de Valladolid. (Valladolid) España
1 Objetivos
Síndrome X Frágil (SXF) es un trastorno genético del neurodesarrollo infantil que afecta a la inteligencia y
el comportamiento, puede causar autismo y epilepsia. La fisiopatología incluye aumento del estrés
oxidativo en el cerebro del ratón modelo del síndrome, que se ha revertido con el tratamiento crónico con
antioxidantes así como las características fenotípicas. Comprobaremos si el tratamiento antioxidante
mejora la sintomatología cognitiva y comportamiento de pacientes jovenes con el Síndrome.
100 pacientes SXF a doble ciego aleatorizados, 50 tratamiento (10mg/kg/dia ácido ascórbico y alfa-
tocoferol hasta maximo de 800 y 600mg/dia) y 50 placebo agrupados por edad: A:<7 años (N =19 niños),
B: 7-18 años (N=64 adolescentes) y C :>18 años (N=17 adultos). Las pruebas neuropsicológicas se
realizaron al inicio (T0) y después de 12 semanas (T1). Variables: porcentaje de cambio en las
subescalas manipulativas y verbales de (WISC-R) en el grupo B (n = 64), para los estudios cognitivos.
Test Peabody para las evaluaciones del lenguaje receptivo (n=100). Análisis de los porcentajes de cambio
por el test U de Mann Whitney (p <0,05). Ensayo código EudraCT:2009-017837-23
3 Resultados
Mejora significativa en las Escala Verbal WISC-R: 30,8 en el grupo tratado frente a 13,7 en el placebo (p
<0,05). Mejora muy significativa en la escala manipulativa WISC-R: 35,4 en el grupo tratado y 10,9 en
placebo, (P = 0,01). Mejora significativa en lenguaje: 24,4 en tratamiento frente a 6,8 en placebo (P
<0,05). Fue bien tolerado en general, no se han descrito efectos adversos significativos.
4 Conclusiones
La cognición mejora con una potencia de 65% y el lenguaje en un 45% después de 12 semanas de
tratamiento con ácido ascórbico y alfa-tocoferol, una combinación sinérgica de vitaminas con una potente
capacidad antioxidante. Ahora los ensayos clínicos con antioxidantes deben probar la eficacia en niños
menores de 6 años con FXS. (Proyectos PI2009-0507, EC10-191, EC11-434, PI10-CTS-05704, Fondos
FEDER).
C0097 DUPLICACIÓN PARCIAL 2P ORIGINADA POR INVERSIÓN PARACÉNTRICA
FAMILIAR: PRESENTACIÓN DE UN CASO
1 1 1 2 1
Monica Viejo Diaz , Noelia García González , Gema Arnedo Jiménez , Maria Calvente , Ana M. Fernández Suarez ,
1 1 1 1
Yolanda Iglesias Oliveros , Verónica Roces Dago , Maria Soledad Silva Pérez , Julio Cesar Suarez De Franscisco ,
1 1 1
Victoria Álvarez Martínez , Ana Plasencia Amela , Inés Hernando Acero
1
Unidad De Genética Hospital Universitario Central De Asturias Oviedo (Asturias) España
2
1 Objetivos
Las inversiones paracéntricas equilibradas son reorganizaciones estructurales con una incidencia que
oscila entre 0,1 - 0,5%. El riesgo de patología cromosómica en la descendencia es bajo, ya que los
gametos desequilibrados derivados de entrecruzamientos en el bucle de la inversión raramente producen
cigotos viables. Sin embargo, eventos meióticos infrecuentes pueden originar cromosomas recombinantes
monocéntricos y desequilibrios en la descendencia. Presentamos una inversión paracéntrica familiar en el
cromosoma 2p que genera una duplicación-inversión con consecuencias fenotípicas en uno de sus
miembros.
Estudiamos un varón, hijo de padres sanos, no consanguíneos. Nació tras gestación de 36 semanas en la
que se detectó CIR en el tercer trimestre con un peso de 2.230 gramos y Apgar 9/10. Presenta mínimos
rasgos dismórficos faciales,y retraso mental leve (WISC-R CI total 69) e hipocrecimiento tratado con
somatotropina. Los estudios de neuroimagen y un cariotipo previo fueron informados como normales. Se
aplicaron técnicas de array CGH (plataforma KaryoNIM 60k) diseñado por NIMGenetics y el FISH
metafásico con sonda locus- específica (Illumina RP11-437K15)
3 Resultados
El Array de CGH detectó una duplicación de 8,65 Mb en 2p16.3-p15. El cariotipo de alta resolución, con
una alteración del patrón de bandas G en 2p, y el FISH metafásico con sonda locus- específica, que
mostró una señal adicional ectópica de la región duplicada, permitieron confirmar la duplicación- inversión
en el paciente. El estudio familiar identificó una inversión paracéntrica 2p en su padre y abuela paterna.
4 Conclusiones
El desequilibrio que hemos detectado puede obedecer a un evento infrecuente de recombinación en U en
el bucle de la inversión y/o rotura y reagrupamiento de cromátides hermanas. Casos como este reafirman
la importancia del asesoramiento genético y plantean la indicación de diagnóstico prenatal en portadores
de inversiones paracéntricas, tradicionalmente consideradas de bajo riesgo.
C0117 HISTONA DESACETILASA 2 (HDAC2): UN NUEVO GEN CANDIDATO PARA EL
SÍNDROME DE RETT.
1 1 1 1
Carmen Orellana Alonso , Mónica Roselló Piera , Alfonso Caro Llopis , Sandra Monfort Membrado , Silvestre Oltra
1 2 1 1
Soler , Salvador Climent Alberola , Cristina Gimenez Lozano , Francisco Martínez Castellano , Carmen Orellana
3
Alonso
1
Hospital Universitario y Politécnico La Fe (Valencia) Spain
2
Hospital General d’Ontinyent (Valencia) España
3
Hospital Universitario La Fe, Unidad de Genética y Diagnóstico Prenatal valencia (valencia) españa
1 Objetivos
Identificar nuevas variantes y nuevos genes responsables del fenotipo Rett/Agelman.
DNA de pacientes con fenotipo similar al del síndrome de Rett o de Angelman. Estudio mediante técnicas
de secuenciación masiva (NGS) con un panel de genes de diseño propio compuesto por 1256 genes
patológicos y candidatos a causar discapacidad intelectual sindrómica.
3 Resultados
En una de las pacientes estudiadas, con un fenotipo muy similar al del síndrome de Rett, identificamos la
variante c.83G>A en el exón 2 del gen HDAC2 (p.Gly28Asp). Se trata de una variante de novo, no
descrita previamente en ninguna base de datos, que afecta a un residuo altamente conservado y que los
programas de predicción del impacto funcional identifican como patogénica.
4 Conclusiones
El hallazgo de una variante de novo en el gen HDAC2, predicha como patogénica, en una paciente con
una forma clásica de síndrome de Rett, junto con la estrecha relación funcional entre MECP2 (principal
responsable del síndrome de Rett) y HDAC2, así como diversas evidencias experimentales que
demuestran que la manipulación de HDAC2 puede imitar los efectos sobre las anomalías sinápticas
causadas por la pérdida de función de MECP2, nos permite proponer al gen HDAC2 como un nuevo gen
candidato para el síndrome de Rett.
C0121 SIN3B: UN NUEVO GEN PATOLÓGICO CAUSANTE DE TRASTORNOS DEL
NEURODESARROLLO.
Alfonso José Caro Llopis, Carmen Orellana Alonso, Silvestre Oltra Soler, Sandra Monfort Membrado, Mónica Roselló
Piera, Cristina Giménez Lozano, Francisco Martínez Castellano
Hospital Universitario y Politécnico de La Fe Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
Describir nuevos mecanismos moleculares de enfermedad en un paciente con un diagnóstico clínico de
síndrome de Asperger, discapacidad intelectual leve, dismorfia facial y anomalías congénitas.
Se aplicó la técnica de secuenciación masiva mediante un panel de diseño propio con 1256 genes
relacionados con el neurodesarrollo. Las variantes encontradas se priorizaron en función de su frecuencia
alélica, su relevancia funcional, tipo de herencia y la consistencia fenotípica con los signos clínicos
asociados a las mutaciones del mismo gen. Cada variante genética con una posible relevancia clínica se
confirmó mediante secuenciación Sanger en el paciente y sus progenitores.
3 Resultados
Se encontró una variante deletérea de novo en el gen SIN3B, consistente en la deleción de una base
(c.31delA) en el exón 1 que produce un cambio de la pauta de lectura y en consecuencia una proteína
anómala.
La proteína codificada por este gen forma el andamiaje del complejo represor SIN3/HDAC, que media la
expresión génica a través de la compactación de la cromatina. Cabe señalar que en este complejo
pueden participar, de manera mutuamente excluyente, tanto SIN3B como su parálogo SIN3A. Para el
SIN3B no se ha descrito patología asociada. Sin embargo, recientemente se han descrito mutaciones en
el gen SIN3A como causa del síndrome de Witteveen-Kolk, cuyos pacientes presentan discapacidad
intelectual leve, con o sin trastornos del espectro autista, dismorfia facial, y otras anomalías congénitas.
4 Conclusiones
El hallazgo de esta mutación patológica de novo en el gen SIN3B en un paciente que comparte rasgos
clínicos con el síndrome de Witteveen-Kolk y la estrecha relación funcional entre este gen y SIN3A,
ambos reguladores de la transcripción, nos permite proponer al gen SIN3B como un nuevo gen patológico
causante de trastornos del neurodesarrollo.
C0131 RENDIMIENTO DIAGNÓSTICO DE LA NEXT GENERATION SEQUENCING EN LOS
TRASTORNOS DEL NEURODESARROLLO
1 2 3 2 2
Maria Isabel Alvarez Mora , Irene Madrigal , Raquel Rabionet , Laia Rodriguez-Revenga , Montserrat Mila
1
Departamento de Bioquimica y Genética Molecular, Hospital Clinic, CIBERER y IDIBAPS Barcelona (Barcelona)
España
2
Hospital Clinic, CIBERER, IDIBAPS (Barcelona) España
3
Genomics and Disease Group-CRG, IMIM, UPF, CIBERESP (Barcelona) España
1 Objetivos
El estudio genético de los trastornos del neurodesarrollo (TND) constituye uno de los campos más
complejos de la genética humana debido a la gran heterogeneidad tanto clínica como molecular.
Siguiendo el protocolo diagnóstico de la TND, una vez confirmadas o descartadas las sospechas clínicas,
la expansión del gen FMR1 y ganancias o pérdidas de ADN mediante microarrays de CGH, alrededor del
60% de los individuos permanecen aun sin diagnóstico y por lo tanto sin poder ofrecerles un consejo
genético. El objetivo de este trabajo es valorar diferentes estrategias utilizando next genereation
sequencing (NGS) con el fin de ver con cual obtenemos mayor rendimiento diagnostico.
Gracias a la financiación obtenida mediantes diversos proyectos de investigación así como con la
colaboración de diversos grupos hemos realizado la secuenciación de 263 exomas siguiendo diferentes
estrategias y correspondientes a 65 familias (1) secuenciación de 8 casos familiares con diversas
generaciones afectadas y elevado número de individuos para estudios de segregación familiar; (ii)
secuenciación de 15 núcleos familiares: padres sanos (portadores obligados) y parejas de hermanos
afectados; (iii) secuenciación de 27 tríos; (iv) secuenciación de 15 casos índices. Por otra parte, con los
datos obtenidos se ha realizado targeted-resequencing de 100 casos adicionales con DI.
3 Resultados
Se ha identificado la alteración causativa en el 75% de casos familiares, 27% de parejas de hermanos, el
15% de tríos, 5 % esporádicos y 1% casos targeted-resequencing. En un 38% de los casos con
secuenciación de varios individuos (tríos/parejas de hermanos) se han identificado alteraciones
candidatas pendientes de confirmar.
4 Conclusiones
La NGS incrementa la tasa diagnóstica en cualquiera de las estrategias utilizadas, pero los mejores
resultados se obtienen en las familias con más de un afectado. Resulta fundamental una buena
descripción clínica tanto para no realizar estudios innecesarios como para validar la causatividad de una
variante.
C0135 MUTACIONES DE NOVO EN HUWE1: UNA NUEVA FORMA DOMINANTE DE
DISCAPACIDAD INTELECTUAL LIGADA AL X?
Francisco Martinez Castellano, Alfonso Caro Llopis, Carmen Orellana Alonso, Silvestre Oltra Soler, Sandra Monfort
Membrado, Cristina Gimenez Lozano, Monica Rosello Piera
Hospital Universitario y Politecnico La Fe Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
La discapacidad intelectual ligada al cromosoma X se suele relacionar con mutaciones que afectan sobre
todo a varones, mientras que las mujeres suelen ser asintomáticas o con afectación leve. Solo unos
pocos genes se relacionaban con una discapacidad grave en mujeres, tales como MECP2, CDKL5, EBP
o PCDH19. Las tecnologías de secuenciación masiva nos permitirán identificar nuevos genes causantes
de discapacidad grave en mujeres, como DDX3X o USP9X, pero también determinadas mutaciones de
carácter dominante en genes que hasta ahora solo se habían relacionado con formas recesivas ligadas al
X, como NAA10.
Técnicas de secuenciación masiva, en pacientes de sexo femenino con trastorno grave del
neurodesarrollo.
3 Resultados
Se han identificado dos mutaciones de novo en el gen HUWE1 que afectan a posiciones conservadas y
no descritas previamente: p.Ser115Phe y p.Leu4157Val. Clínicamente, ambas pacientes presentan una
discapacidad intelectual grave con ausencia de lenguaje, déficit de crecimiento (peso y talla en percentil
<3), microcefalia, estereotipias, hipertelorismo y orejas de implantación baja. Una de ellas presenta
además autismo y espasticidad, que se evidenciaron tras un periodo de regresión a los pocos años de
edad.
HUWE1 (E3 ubiquitin-protein ligase) es una proteína encargada de ubiquitinar proteínas para su
degradación, y se relaciona con diversas funciones incluyendo la proliferación y diferenciación neuronal.
La duplicación de este gen y las mutaciones puntuales descritas causan una discapacidad intelectual
moderada-profunda en varones, donde las mujeres portadoras apenas están afectadas.
4 Conclusiones
Basándonos en la similitud clínica de nuestras pacientes, tanto entre ellas como con otros pacientes
descritos previamente, proponemos que algunas mutaciones de este gen pueden presentar un carácter
dominante. Este sería, por tanto, un nuevo gen que puede ocasionar tanto formas dominantes como
recesivas de discapacidad intelectual ligada al X.
C0140 EFECTIVIDAD DE LA COMBINACIÓN DE ANTIOXIDANTES, EL ÁCIDO
ASCÓRBICO Y EL ALFA-TOCOFEROL, SOBRE LOS PROBLEMAS COGNITIVOS EN
PORTADORAS DEL SÍNDROME X-FRÁGIL
1 2 3 4
Yolanda de Diego Otero , Carolina Quintero Navarro , Rocío Calvo Medina , Isabel del Pino Benitez , Yolanda Casado
4 3 5 6
Martin , Cristina Nogueira Cobas , Isabel Fernández Carvajal , Lucia Pérez Costillas
1
(IBIMA). Malaga (Malaga) España
2
Instituto de Investigación Biomédica de Málaga (IBIMA). (Malaga) España
3
UGC Pediatría, Hospital Regional Universitario de Málaga. (Malaga) España
4
(IBIMA). (Málaga) España
5
IBGM Departamento de Pediatría. Universidad de Valladolid. (Valladolid) España
6
Unidad de Gestión Clínica de Salud Mental. Hospital Regional Universitario de Málaga. 2Instituto de Investigación
Biomédica de Málaga (IBIMA). Universidad de Málaga. España. (Málaga) España
1 Objetivos
Síndrome X Frágil (SXF) es un trastorno genético que afecta a la inteligencia y el comportamiento en
varones e incluso afecta a nivel cognitivo y determina trastornos neuropsiquiatricos como depresión y
ansiedad en mujeres portadoras. Hemos demostrado estrés oxidativo en el cerebro del ratón modelo del
síndrome y el tratamiento crónico con antioxidantes revierte las características propias del fenotipo del
ratón trasgenico. Comprobaremos si el tratamiento antioxidante mejora a nivel cognitivo en un ensayo
piloto doble ciego, aleatorizado con placebo en mujeres portadoras del Síndrome.
30 pacientes mujeres portadoras con sintomatología neuropsiquiátrica y cognitiva se incluyeron en un
ensayo doble ciego, aleatorizadas en dos grupos: 15 en tratamiento (10mg/kg/día ácido ascórbico y alfa-
tocoferol hasta un máximo de 800 y 600mg/día respectivamente) y 15 en placebo. Las pruebas
neuropsicológicas se realizaron al inicio (T0) y después de 12 semanas (T1). Variables: porcentaje de
cambio en el Test de inteligencia no verbal TONI-2 para mujeres portadoras (n=30). Análisis de los
porcentajes de cambio por el test U de Mann Whitney (p <0,05).
3 Resultados
Mejora significativa en el test de inteligencia no Verbal TONI-2: 15,3 en el grupo de tratamiento con
antioxidantes frente a 3,2 en el grupo de placebo (p< 0,05). El tratamiento fue bien tolerado en general y
no se han descrito efectos adversos significativos durante las 12 semanas de tratamiento.
4 Conclusiones
La sintomatología cognitiva de portadoras del Síndrome mejora con una potencia de 55% después de 12
semanas de tratamiento con ácido ascórbico y alfa-tocoferol, una combinación sinérgica de vitaminas con
una potente capacidad antioxidante. Los ensayos clínicos con antioxidantes en el FXS deben continuar
para probar la eficacia en niños menores de 6 años aumentando el número de pacientes en ese rango de
edad y así conseguir demostrar eficacia en cualquier rango de edad. (Proyectos PI2009-0507, EC10-191,
EC11-434, PI10-CTS-05704, Fondos FEDER)
C0151 DIAGNÓSTICO GENÉTICO DE PACIENTES CON CLÍNICA SOLAPADA RETT-LIKE
POR NGS
1 2 2 2
Nuria Mercedes Brandi Tarrau , Paola Pacheco Fernández , Silvia Vidal Falco , Laura Blasco Pérez , Angels García
2 2 2 2 2
Cazorla , Mar Callaghan , Esther Gean Molins , Merce Pineda Marfa , Judith Armstrong Moron
1
Hospital San Juan de Dios, Genética Bioquímica&Rett BARCELONA (BARCELONA) España
2
Hospital San Juan de Dios (BARCELONA) España
1 Objetivos
El objetivo de nuestro trabajo es ofrecer diagnóstico genético a pacientes que tienen una clínica
compatible con Sd.: Rett. Por este motivo, hemos introducido la NGS como metodología fundamental en
el estudio simultáneo de genes implicados que nos permita concluir el diagnóstico genético de pacientes
Rett/Rett-like de difícil resolución.
Se ha analizado el DNA procedente de muestras de sangre de 241 pacientes utilizando un panel de 17
genes, diseñado con la tecnología HaloPLex Target Enrichment System. La secuenciación se ha hecho
con el equipo MiSeq de Illumina. Las variantes genéticas se han identificado usando DNAnexus y los
resultados se han interpretado mediante los programas VariantStudio de Illumina y Pipeline propio. Las
variantes han sido comprobadas por secuenciación Sanger junto con los progenitores para estudiar el
origen de la variante. Se consultaron las bases de datos HGMD-Professional, 1000G, ExAC, dbSNP, y los
programas estadísticos de predicción de patogenicidad Polyphen 2.0 y SIFT.
3 Resultados
Se obtiene diagnóstico genético positivo en el 21,6% (52/241) de los pacientes estudiados: 32/52
corresponden a genes causantes de Rett (MECP2, CDKL5 y FOXG1) y el 20/52 a pacientes que
muestran un fenotipo Rett-like. De este grupo presentamos 2 pacientes con mutación en el gen KCNQ2
(NM_172107) y 3 pacientes en el gen SCN2A (NM_021007), causantes de alteraciones en los canales de
+ +
K /Na , respectivamente, relacionados con encefalopatías epilépticas de inicio precoz . De las 5
mutaciones detectadas, 3 están descritas como patológicas y 2 son mutaciones novel.
4 Conclusiones
Nuestros resultados demuestran la importancia de las NGS en el diagnóstico genético de pacientes que
presentan clínicas solapadas proporcionando más información sobre las correlaciones genotipo-fenotipo.
El estudio genético mediante NGS reduce el tiempo de espera y el coste del estudio.
C0163 ESTUDIO GENÉTICO DEL SINDROME DE RETT MEDIANTE “NEXT GENERATION
SEQUENCING”
1 2 2 3
Silvia Vidal Falco , Nuria Mercedes Brandi Tarrau , Paola Pacheco Fernández , Edgar Gerotina Mora , Laura Blasco
3 4 4 5 6
Pérez , Angels Garcia Cazorla , Maria del Mar o’Callaghan , Esther Gean Molins , Juan José García Peñas , Mercè
3 2
Pineda Marfa , Judith Armstrong Morón
1
Fundación San Juan de Dios, Bioquimica Genética Rett Esplugues (Barcelona) España
2
Servicio de Genética Bioquímica&Rett (Barcelona) España
3
Fundació Sant Joan de Déu (Barcelona) España
4
Neurología, Hospital Universitario Sant Joan de Déu (Barcelona) España
5
Genética Clínica, Hospital Universitario Sant Joan de Déu (Barcelona) España
6
Unidad Neuropediátrica, Hospital Infantil Universitario Niño Jesús (Madrid) España
1 Objetivos
El síndrome de Rett es un trastorno del neurodesarrollo de inicio precoz, base genética, herencia
dominante y ligada al cromosoma X. Afecta casi exclusivamente a niñas con una prevalencia de 1/15000.
Están descritos varios genes causantes de la enfermedad, MECP2, CDKL5 y FOXG1. Sin embargo, la
etiología del 15% de las pacientes sigue siendo desconocida.
En los últimos años, las nuevas tecnologías de secuenciación masiva (NGS) han permitido propulsar el
diagnóstico genético, convirtiéndolo en más asequible y más rápido. Para evaluar la utilidad de la NGS en
el ámbito clínico, presentamos el estudio genético de pacientes Rett-like utilizando diferentes técnicas
basadas en esta tecnología.
Se han estudiado pacientes con clínica Rett-like sin diagnóstico genético así como también se ha revisado
pacientes con estudio genético por secuenciación Sanger de los 3 genes causantes de Rett.
- Panel personalizado: Se ha diseñado un panel génico de 17 genes relacionados con la clínica RTT-like
mediante la tecnología HaloPlex Target. Enrichment System, for Illumina Sequencing.
- Panel comercial: Se ha utilizado el TruSight One Sequencing Panel (TSO Illumina) que incluye un total
de 4813 genes asociados a fenotipo clínico.
- WES: Se realizó el estudio del exoma completo por secuenciación masiva en tríos con TruSeq Sample
Preparation Kit (Illumina).
3 Resultados
Se han diagnosticado genéticamente 477 de 1659 pacientes con sospecha Rett-like. Se han obtenido
resultados positivos en un 30% por Sanger (100% genes Rett), 23% por Panel personalizado (58% genes
Rett), 24% por TSO (25% genes Rett) y 32% por WES (25% genes Rett).
4 Conclusiones
El estudio genético por NGS permite estudiar un mayor número de genes relacionados con una clínica
Rett-like de forma simultánea, permitiendo ofrecer un diagnóstico genético a un grupo más amplio de
pacientes. Así como disminuir considerablemente el tiempo de respuesta y el coste del estudio.
C0164 IMPLICACIÓN DEL GEN IRAK1 EN PACIENTES CON SÍNDROME DE
DUPLICACIÓN MECP2
1 2 2 3 2
Laura Blasco Perez , Silvia Vidal Falcó , Paola Pacheco , Nuria Brandi , Judith Armstrong Morón
1
Hospital Sant Joan de Déu, Genética Bioquímica Esplugues (Barcelona) España
2
3
Hospital Universitario Sant Joan de Déu (Barcelona) España
1 Objetivos
El síndrome de duplicación de MECP2(OMIM_300260) es un trastorno del neurodesarrollo ligado al
cromosoma X caracterizado por un retraso mental de severo a profundo, hipotonía infantil, rasgos
autistas, convulsiones e infecciones respiratorias recurrentes. Afecta generalmente a niños, aunque
también hay niñas afectas. Se ha descrito la existencia de una regulación recíproca entre el gen MECP2 e
IRAK1, implicada en la vía de señalización NF-?β.
El objetivo del proyecto es estudiar la implicación del gen IRAK1 en una cohorte de pacientes españoles
con síndrome de duplicación MECP2 previamente caracterizada.
Nuestra cohorte está formada por 16 pacientes, de ambos sexos, diagnosticados en hospitales de toda
España. Se diagnostica al paciente (MLPA/CGH-array) y se caracteriza clínicamente (usando el Checklist
diseñado). Se caracteriza a nivel molecular mediante qPCR, FISH, ICX y RT-qPCR para conocer la
localización de la duplicación, el ratio en la inactivación del ChrX, el tamaño exacto de la duplicación y la
expresión de las dos isoformas de MECP2 y de IRAK1 a nivel de RNAm.
3 Resultados
La caracterización de la cohorte nos ha permitido ver que no todos los pacientes tienen duplicado el gen
MECP2 al completo, pero sí el gen IRAK1, contiguo a MECP2. Hemos estudiado la expresión de IRAK1 a
nivel de RNAm y todos los pacientes muestran una expresión alterada. Es necesario corroborar este
estudio a nivel proteico.
4 Conclusiones
Es necesario estudiar la expresión del gen IRAK1 en todos los pacientes con síndrome de duplicación
MECP2 ya que la duplicación de IRAK1 parece ser el punto común en todos los pacientes de la cohorte.
C0204 DIAGNÓSTICO GENÉTICO MOLECULAR EN VARONES CON DISCAPACIDAD
INTELECTUAL E HISTORIA FAMILIAR: 25 AÑOS DE HISTORIA
1 2 2 3
Nekane Ibarluzea Guenaga , Cristina Martinez Bouzas , Hiart Maortua , Ana Belén de la Hoz , María Asun López
2 2 2 2 4 5
Aríztegui , Laura García Naveda , Isabel Llano Rivas , Blanca Gener , María García Barcina , María Pilar Botella ,
5 6 6 2
Intzane Ocio , Paul Zubillaga , Iñaki Múgica , María Isabel Tejada Minguez
1
IIS BIOCRUCES Barakaldo (Bizkaia) España
2
IIS Biocruces, Servicio de Genética Hospital Universitario Cruces-Osakidetza, Grupo clínico vinculado (GCV04)
CIBERER (Bizkaia) España
3
IIS Biocruces, Grupo clínico vinculado (GCV04) CIBERER (Bizkaia) España
4
Unidad de Genética Hospital Universitario Basurto (Bizkaia) España
5
Servicio de Pediatría (Neuropediatría) Hospital Universitario Araba (Araba) España
6
Fundación Uliazpi (Gipuzkoa) España
1 Objetivos
El descubrimiento del gen FMR1 (1991) supuso un hito en el diagnóstico genético molecular de la
Discapacidad Intelectual (DI). Desde entonces numerosas herramientas moleculares han mejorado su
diagnóstico. Recientemente, gracias a la secuenciación masiva el número de casos con DI de origen
genético diagnosticados ha crecido exponencialmente. La DI es prevalente (1-3%) y muy heterogénea,
estimándose que un 25-50% de los pacientes tienen un origen genético, y que un 10% tienen su origen en
el cromosoma X (XLID). Esto explica la mayor proporción de varones con DI (1.4:1). En este contexto, los
objetivos de este trabajo han sido: 1) Averiguar la contribución de la historia familiar de DI entre los
pacientes que llegan para diagnosticar el Síndrome del X Frágil (SXF); 2) Calcular la frecuencia de
diagnósticos obtenidos y 3) Reportar las diferentes mutaciones halladas.
Se ha realizado una revisión exhaustiva de las historias clínicas de todos los pacientes varones cuyas
muestras llegaron al laboratorio para descartar el SXF durante los últimos 25 años (1991-2015), -en total
1909 casos- seleccionando aquellos casos con historia familiar de DI que se han registrado, así como sus
diagnósticos.
3 Resultados
El 12.05% (230/1909) tiene historia familiar de DI, y entre ellos, el 40.43% (93/230) parece presentar una
XLID. Gracias a las diversas tecnologías utilizadas, se ha obtenido un diagnóstico preciso en 60 casos.
Entre ellos 52 son XLID, siendo el más prevalente el SXF (43 pacientes). De los 9 pacientes restantes, 6
presentaron CNVs; otro, una expansión de tripletes (FRAXE) y en los 2 restantes se hallaron mutaciones
en los genes UPF3B y SYP.
4 Conclusiones
A pesar de que la literatura médica recalca habitualmente la importancia de la XLID en los varones con
DI, pocos son los trabajos que se publican con datos reales. Este estudio avala dicha teoría,
proporcionando una importante contribución en este campo.
C0207 ALTERACIONES CROMOSÓMICAS EN MOSAICO: LIMITACIONES DEL
CARIOTIPO. A PROPÓSITO DE UN CASO DE SÍNDROME DE WARKANY.
1 2 3 3 4 5
Pilar Carrasco Salas , Rosario Mateos Checa , Ana Cía , Alvaro Gragera , Javier Labraña , Antonio León Justel ,
3
Ignacio Vázquez
1
Unidad de Genética, Servicio de Análisis Clínicos. Hospital Juan Ramón Jiménez Huelva (Huelva) España
2
Servicio de Pediatría, Hospital Juan Ramón Jiménez (Huelva) España
3
Servicio Análisis Clínicos. Hospital Juan Ramón Jiménez (Huelva) España
4
Reference Laboratory (Barcelona) España
5
Hospital Juan Ramón Jiménez (Huelva) España
1 Objetivos
Determinar si la causa de la discapacidad intelectual de un paciente de 8 años con fenotipo peculiar era
de origen genético. El paciente presentaba facies gargoloide, babeo frecuente, incisivos centrales
prominentes, labio inferior grueso evertido, tendencia a protrusión de la lengua, hipertricosis, lesión
hiperpigmentada en abdomen, rigideces articulares distales, clinodactilia leve del meñique de la mano
izquierda con leve engrosamiento de las manos. Años atrás no se habían encontrado anormalidades en
un cariotipo en el que se habían analizado 20 metafases mediante técnica de bandas G.
Se realizó el array de SNPs CytoScan® 750K, de Affymetrix®. El análisis de los resultados se llevó a
cabo con el software Chromosome Analysis Suite (ChAS) v.3.1.0.15 de Affymetrix® con el método
CytoScan750K_Array Single Sample Analysis: NA33. Filtros aplicados: se reportan variaciones en el
número de copias mayores de 100 Kb y pérdidas de heterocigosidad mayores de 5 Mb. La referencia del
genoma humano es NCBI37 (hg19).
3 Resultados
Se detectó una ganancia del cromosoma 8 completa, que se interpretó como trisomía 8 en mosaico, de
aproximadamente el 20% y que se asocia al síndrome de Warkany. Dicho hallazgo era compatible con la
clínica del paciente. Se repitió el cariotipo, analizando 50 metafases y se observó la trisomía 8 en un
porcentaje de mosaicismo bajo (8%), que está por debajo del límite de detección del cariotipo
convencional.
4 Conclusiones
Este caso muestra las limitaciones que tiene en el diagnóstico de pacientes con discapacidad intelectual,
el análisis de sólo 20 metafases en el cariotipo. Recomendamos ampliar el análisis y estudiar al menos 50
metafases en aquellos casos con cariotipo convencional y array normal para descartar la presencia de
alteraciones cromosómicas en mosaico de bajo nivel.
C0255 ESTUDIO DE LA COHORTE HISPANO-ARGENTINA DE PACIENTES CON
SÍNDROME DE WOLF HIRSCHHORN: ANÁLISIS CORRELACIÓN GENOTIPO-FENOTIPO
1 2 1 3 1 2
Julián Nevado , Raquel Blanco Lago , Pilar Barruz , Harry Pachajoa Londoño , Carolina Peña , Ignacio Málaga , Juan
4 1 1
José Granizo , Mariví Gómez , Pablo Lapunzina Badia
1
INGEMM, HULP Madrid (Madrid) España
2
Hospital Universitario Central de Asturias (Oviedo, Asturias) España
3
Universidad ICESI (Cali, Valle del Cauca) Colombia
4
Hospital Universitario Infanta Cristina (Madrid, Madrid) España
1 Objetivos
el síndrome de Wolf–Hirschhorn (SWH) es un síndrome polimalformativo asociado con un retraso del
crecimiento/desarrollo, epilepsia y dismorfias faciales resultantes de una pérdida de material genético en
el brazo corto del cromosoma-4. Nuestros objetivos son: i) describir caracteri?sticas sociodemogra?ficas y
clínicas de una muestra hispano-argentina de pacientes con SWH. ii) Conocer la prevalencia de epilepsia
y sus características electrocli?nicas. iii) Describir la posible existencia de patrones EEG característicos
del síndrome. iv) establecer una posible relación genotipo/fenotipo.
Una cohorte de pacientes hispano-argentinos (72), con diagnóstico clínico y/o citogenética sugiriendo
SWH, se analiza molecularmente mediante array de SNP (cytoSNP850K, Illumina). Adicionalmente, se
recoge características descriptivas generales (epidemiológico) e Información clínica para cada paciente:
Epilepsia/Neurodesarrollo/Análisis de EEG/Aspectos genéticos. Con todo ello se realiza un análisis
estadístico a diferentes niveles.
3 Resultados
se establecen manifestaciones clínicas similares a las previamente descritas en otras cohortes. La
epilepsia afecta al 90% de los pacientes con SWH (de tipo polimorfa), con primeras crisis antes de los dos
an?os de vida e importante predisposición para desarrollar estatus (55%). No obstante, 64% de los
pacientes muestra un nivel aceptable de control de crisis (sin crisis en el último año). El nivel de
desarrollo-psicomotor es superior al de otras muestras publicadas en los últimos 15 años.
4 Conclusiones
Se describen caracteri?sticas sociodemogra?ficas y cli?nicas de una muestra de 72 pacientes con SWH.
Se trata de la Serie más amplia de pacientes caracterizada mediante arrays de alta resolución y con una
descripción pormenorizada del síndrome, incluyéndose grado de desarrollo psicomotor y dependencia de
los pacientes. En ella, se discute la posible existencia de patrones EEG específicos, aspectos
electrocli?nicos de la epilepsia, su prevalencia, y se estableciéndose por primera vez, una relación entre
grado de desarrollo psicomotor y ciertas variables relacionadas con Epilepsia y el tamaño de la deleción.
C0256 IMPLICACIÓN DEL GEN CNTN6 EN EL SÍNDROME DE DELECIÓN 3P26-P25 Y
REVISIÓN DE LA LITERATURA.
1 2 3 3 2
Angeles Perez Granero , Nancy Govea , María Soledad López García , Begoña de Azúa , Jordi Rosell
1
Hospital Universitari Son Espases, Genética Palma de Mallorca (Illes Balears) España
2
Hospital Son Espases (Baleares) España
3
Hospital Son Llàtzer (Baleares) España
1 Objetivos
Las deleciones terminales de la zona distal del brazo corto del cromosoma 3 provocan una gran
variabilidad clínica desde la normalidad hasta discapacidad intelectual, microcefalia y rasgos dismórficos.
Hasta este momento el gen CHL1 parecía el responsable de la discapacidad intelectual. El objetivo de
este trabajo es analizar y revisar los conocimientos actuales sobre el gen CNTN6 y su posible implicación
en el fenotipo del síndrome distal 3p.
Fue remitido a nuestro servicio niño de 9 años con retraso madurativo, dificultades de aprendizaje y
fenotipo peculiar. Se realizó la técnica de CGH arrays con la plataforma comercial (Cytochip ISCATM
8x60 v2.0 BlueGnome), para el análisis bioinformático se ha utilizado el algoritmo Cytochip v2.
3 Resultados
El paciente presenta una deleción de 1,4 Mb en la banda cromosómica 3p26.3 dónde se encuentran
delecionados dos genes, CHL1 y CNTN6. Esta deleción solapa parcialmente con la región conocida por
producir el síndrome de deleción3pter-p25, y es una de las más pequeñas descritas asociadas a
patología.
El gen CNTN6 forma parte de la familia de las contactinas (CNTN) que son proteínas glucosiladas de
adhesión celular que intervienen en sinaptogénesis, crecimiento axonal y plasticidad sináptica. Además
este gen parece estar altamente implicado en el desarrollo cerebral. En recientes estudios se asocian
mutaciones o variaciones en el número de copia del gen CNTN6, como candidatos a generar trastornos
del desarrollo neurológico. Particularmente trastornos del espectro autista, pero también discapacidad
intelectual, esquizofrenia, trastorno déficit de atención e hiperactividad.
4 Conclusiones
Las deleciones de uno o dos gens son de especial interés para analizar los efectos clínicos de la variación
de dosis génica. En nuestro caso además nos puede permitir acotar la región crítica.
Este estudio puede mejorar el conocimiento sobre el síndrome de deleción 3p distal y en particular
destacar la relevancia de deleciones del gen CNTN6 en los trastornos del desarrollo neurológico.
C0266 NUEVA VARIANTE PATOGÉNICA EN EL GEN ATRX DETECTADA MEDIANTE
PANEL NGS: ETIOLOGÍA DE LA DISCAPACIDAD INTELECTUAL SEVERA Y ROSTRO
HIPOTÓNICO EN VARÓN DE 16 AÑOS
1 2 2 2
Silvia Izquierdo Alvarez , María Dolores Miramar Gallart , Ana Rodríguez Valle , María Jose Alcaine Villarroya , Ana
2 2 2 3
Belén Lasierra Monclús , Francisco Javier López Pisón , Jose Luis Peña Segura , Sonia Santillán , Diana Valero
3 3 4 4
Hervas , Dan Diego Álvarez , Jose Ignacio González Hevia , José Puzo Foncillas
1
Hospital Universitario Miguel Servet Zaragoza, Sección De Genética Clínica Y Reproducción Asistida Zaragoza
(Zaragoza) España
2
Hospital Universitario Miguel Servet de Zaragoza (Zaragoza) España
3
Sistemas Genómicos s.l. (Valencia) España
4
Hospital Universitario Miguel Servet de Zaragoza (Zaragoza) España
1 Objetivos
Encontrar la causa genética de la discapacidad intelectual (DI) en un varón de 16 años sin filiar para
ofrecer un adecuado asesoramiento genético en el paciente y a sus progenitores. La asociación de la DI
severa con signos dismórficos puede estar causada por la presencia de mutación en el gen ATRX.
Varón controlado en neuropediatría, primer hijo de progenitores sanos no consanguíneos, con ausencia
de lenguaje, escolarizado en Educación Especial, presenta alguna estereotipia, hipertelorismo, babeo
frecuente, sonrisa sin motivo; facies hipotónicas y estrabismo. No control de esfínteres. Estudios previos
de cariotipo, FRAXA, distrofia miotónica, y Angelman negativos. El estudio del array CGH reveló una
deleción intersticial de 1 Mb en el cromosoma 8 heredada del padre sin fenotipo reportado. Se analizó una
muestra de ADN de sangre periférica mediante un panel NGS diseñado de 124 genes asociados a DI con
herencia ligada al cromosoma X.
3 Resultados
Se detectó la variante probablemente patogénica c.5957-9_5958del en hemicigosis, en el intrón 25 del
gen ATRX en el cromosoma Xq21.1 que fue validada mediante secuenciación Sanger. El estudio de
secuenciación del cDNA obtenido a partir del ARNm en nueva muestra del paciente confirmó que la
variante afectaba al procesamiento del ARNm provocando la deleción de 66 nucleótidos del exón 26 del
transito NM_000489.3, dando lugar a la pérdida de 23 aminoácidos y a la inserción de un residuo de
asparagina [r.5957_6022del (p.Ser1986_Asp2008delinsAsn)]. Dicha variante no fue identificada en la
muestra de ADN de la madre del paciente.
4 Conclusiones
El origen de novo de la variante en el paciente y su efecto patogénico sobre la proteína confirmaba desde
el punto de vista genético el diagnóstico de Mental retardation-hypotonic facies syndrome, X linked
(OMIM #309580; XL). Es relevante el uso de paneles NGS para detectar la etiología de la DI sin filiar en
pacientes en edad pediátrica.
C0267 ESTUDIO GWAS DE COCIENTE Y DISCAPACIDAD INTELECTUAL EN PACIENTES
TEA
1 2 1 3 1 1 1
MJ Arranz Calderon , Isabel Rueda , Silvina Guijarro , Anna Gonzalez , Ayhesa Ruiz , Aitana Bigorra , Marta Salgado ,
1 1
Enric Duran , Amaia Hervas
1
Fundació Mútua Terrassa Terrassa (Barcelona) España
2
Hospital Sant Joan de Deu (Barcelona) España
1 Objetivos
Los trastornos del espectro autista (TEA) son sindromes de neurodesarrollo complejos que resultan de
una compleja interacción entre genes y ambiente. Sin embargo, hasta la fecha se ha identificado un
número limitado de genes asociados con TEA cuya contribución no está claramente determinada. La
investigación de simtomatologia TEA puede ayudar a identificar genes implicados en el desarrollo de
estos severos trastornos.
Se realizo un estudio GWAS (PsycChip Illumina, 538.000 SNPs después de los controles de calidad) en
una cohorte de N=115 pacientes con TEA (87% niños)
3 Resultados
Se observaron asociaciones nóveles y con genes previamente asociados con TEA (ADAM12, p=4x10-5)
y el cociente intelectual (CI) de los pacientes TEA. También se observaron asociaciones entre genes
previamente asociados con autismo (SLC25a24,, p=7x10-5) y discapacidad intelectual (DI) entre otros. No
se detectaron asociaciones claras con retraso lingüístico en nuestra cohorte.
4 Conclusiones
Se detectaron varias asociaciones entre genes involucrados en enfermedades mentales y CI y DI,
sugiriendo un origen genético común de estos fenotipos. Se confirmaron asociaciones previamente
reportadas y se detectaron asociaciones noveles no previamente observadas en pacientes TEA.
C0274 EVALUACIÓN DEL IMPACTO DE LA TÉCNICA DE ARRAY-CGH EN EL
DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES RARAS
Juan Antonio Bafalliu Vidal, Ascension Vera Carbonell, Gloria Soler Sanchez, Isabel López Exposito, Maria Eugenia
Tudela Tortosa, Isabel Bocos Rodriguez
Centro de Bioquímica y Genética Clínica. Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca El Palmar (Murcia)
España
1 Objetivos
La introducción de la técnica de array-CGH en los laboratorios de genética está desplazando al
diagnóstico citogenético clásico por su mayor poder de resolución y consiguiente incremento en la
detección de desequilibrios cromosómicos. La demanda analítica de esta técnica ha ido aumentando
desde su implantación en 2011 en nuestro laboratorio. En este estudio se analiza la repercusión que ha
tenido en el diagnóstico de enfermedades raras.
Se pretende valorar si ha supuesto un incremento en la cobertura analítica para pacientes con sospecha
de enfermedad rara y cuál ha sido su rendimiento en el diagnóstico de anomalías cromosómicas. Para
ello se comparan los datos anteriores y posteriores a la introducción del array-CGH y se calcula el
porcentaje de pacientes diagnosticados con esta técnica.
Por otro lado, se analizan los resultados obtenidos considerando las limitaciones técnicas del cariotipo y
el arrayCGH.
3 Resultados
La incorporación del array-CGH a nuestro laboratorio, ha producido un incremento en el número de
análisis de probandos, a pesar de que los estudios familiares generados por esta técnica (30%) son muy
superiores a los del cariotipo convencional (<10%). Con arrayCGH se han diagnosticado un 10% de los
pacientes analizados.
En la mayoría de los casos (94%) la alteración patogénica detectada por arrayCGH no lo sería por
cariotipo. Las diagnosticadas por cariotipo que escaparían al análisis de arrayCGH (mosaico inferior a un
30% y equilibradas), han supuesto aproximadamente un 25%, siendo relevantes por su repercusión
clínica solo las desequilibradas (10%, la mayoría en cromosomas sexuales).
4 Conclusiones
La técnica de arrayCGH en nuestro laboratorio ha permitido realizar un mayor número de análisis y ha
supuesto un 10% de diagnóstico adicional de anomalías cromosómicas. No obstante, en los estudios
donde con frecuencia se pueden presentar alteraciones en mosaico (cromosomas sexuales) el cariotipo
es una herramienta diagnóstica imprescindible.
C0290 UN NUEVO CASO DE ICTIOSIS LIGADA AL CROMOSOMA X CON
MICRODELECIÓN EN XP22.31 AFECTANDO A 3 GENES: VCX3A, PUDP Y STS.
1 1 2 3
Raquel de la Varga Martínez , Francisco Mora López , Cristina Albarrán Planelles , Rosario Marín Iglesias , Mario
2
Linares Barrios
1
Servicio de Inmunología, UGC de Hematología e Inmunología. Hospital Universitario Puerta del Mar Cádiz (Cádiz)
España
2
UCG de Dermatología Médico-Quirúrgica y Venereología. Hospital Universitario Puerta del Mar (Cádiz) España
3
Unidad de Genética Clínica, UGC de Laboratorios. Hospital Universitario Puerta del Mar (Cádiz) España
1 Objetivos
La ictiosis ligada al cromosoma X (ILX, OMIM #308100) es un trastorno genético que afecta a la
queratinización de la piel y está causada por mutaciones inactivantes o deleciones en el gen de la
sulfatasa esteroidea, STS, localizado en Xp22.3-pter, cerca de la región pseudoautosómica. La XLI puede
presentarse de manera aislada o asociada a trastornos del neurodesarrollo constituyendo un síndrome de
genes contiguos debido a microdeleciones en la citobanda Xp22.31. Estos niños pueden presentar
trastorno por déficit de atención con hiperactividad, trastornos del espectro autista o retraso mental.
Presentamos el caso de un niño de 4 años con xerosis en extremidades inferiores que a los 18 meses de
edad experimentó una regresión de las habilidades lingüísticas lo que junto con otros indicadores fue
compatible con un trastorno del espectro autista.
Secuenciación Sanger del gen STS y array-CGH (KaryoNIM 60K –NIMGenetics) en el ADN genómico del
paciente y la madre.
3 Resultados
Se intentó secuenciar el gen STS en el paciente, pero no fue posible la amplificación por PCR de los
exones del gen. Ante la sospecha de deleción se realizó un array-CGH que detectó en ambos una
microdeleción patogénica en la citobanda Xp22.31 de 1,38 megabases (6.455.836 – 7.834.377). Esta
deleción provoca la pérdida de tres genes: VCX3A, PUDP y STS.
4 Conclusiones
La deleción detectada en Xp22.31 explica el fenotipo del paciente. El diagnóstico de ILX se confirma al
incluir la deleción el gen STS, mientras que VCX3A es el gen candidato para los síntomas neurológicos
en los pacientes con ILX debida a microdeleciones. No obstante, se han descrito pacientes con deleción
en VCX3A sin síntomas neurológicos, y en pacientes con deleciones más grandes otros genes pueden
estar implicados.
Este hallazgo en el paciente es de importancia obvia para tener un diagnóstico certero y también para el
asesoramiento genético en la familia.
C0294 VARIANTES DEL NÚMERO DE COPIAS CROMOSÓMICAS EN NIÑOS PERUANOS
CON RETRASO PSICOMOTOR Y DEFICIENCIA INTELECTUAL
1 2 2 2 2
Julio Poterico Rojas , Flor Vásquez , Miguel Chávez Pastor , Milana Trubnykova , Hugo Abarca Barriga
1
Universidad Peruana Cayetano Heredia Lima (Lima) Peru
2
Instituto Nacional de Salud del Niño (Lima) Perú
1 Objetivos
Reportar la frecuencia de ganancias o pérdidas submicrocópicas cromosómicas en los pacientes
pediátricos peruanos con los diagnósticos de retraso psicomotor o deficiencia intelectual, sindrómico o no-
sindrómico.
Estudio transversal descriptivo, en población pediátrica peruana menor de 18 años que acudió al servicio
de genética médica con diagnósticos de retraso psicomotor o deficiencia intelectual, sindrómicos o no-
sindrómicos. Se recopiló información clínica y resultados del análisis de microarrays cromosómico (CMA).
Se utilizó la plataforma GeneChip CytoScan 750K Array (Affymetrix, USA), incluyendo marcadores
550,000 no polimórficos y 200,436 marcadores de polimorfismos de nucleótido simple (SNP). Se
consideraron como variantes de número de copias (CNVs) a las ganancias y pérdidas que afectaron un
mínimo de 25 marcadores y pérdida de heterocigosidad (LOH) comprometiendo más de 5Mpbs.
3 Resultados
Se analizaron los genomas de 225 pacientes, teniendo la mayoría el diagnóstico de retraso psicomotor
sindrómico (n=92, 40.9%) seguidos por aquellos con discapacidad intelectual sindrómica (n=52, 23.1%).
En conjunto, se obtuvieron resultados anormales en el 61.3% de los pacientes con CMA realizado
(n=138), y de ellos 82.6% (n=114) contaron con CNVs. De los 114 pacientes con CNVs, 62 y 50 pacientes
presentaron ganancias y pérdidas cromosómicas submicroscópicas, respectivamente. Tres pacientes
presentaron estas dos alteraciones en el mismo cromosoma y 17 pacientes tuvieron CNVs en al menos 2
cromosomas. Nuestros pacientes mostraron mayor afectación de los cromosomas 7 y X (22.8%, ambos
n=26 del total de 114), correspondientes a CNVs.
4 Conclusiones
La frecuencia de alteraciones cromosómicas submicroscópicas es alta en los pacientes peruanos con
diagnóstico de retraso psicomotor o deficiencia intelectual. La promoción y extensión de pruebas
avanzadas como el CMA contribuiría con el pronóstico, asesoría, tratamiento y prevención de este tipo de
condiciones; promoviendo un manejo adecuado y equitativo en los países latinoamericanos en condición
vulnerable.
C0308 DIAGNÓSTICO MEDIANTE CARIOTIPO MOLECULAR DE SÍNDROME DE TEMPLE
CAUSADO POR ISODISOMÍA UNIPARENTAL DEL CROMOSOMA 14 DE ORIGEN
MATERNO
Yolanda Ramírez García, Raquel Muguerza Iraola, Leire Otaolea Santacoloma, Julien Swen Crettaz, Nerea Bastida
Lertxundi, Raquel Sáez Villaverde
Hospital Universitario Donostia San Sebastián (Guipúzcoa) España
1 Objetivos
El Síndrome de Temple es una enfermedad rara de difícil diagnóstico en edades tempranas ya que el
fenotipo es dependiente de la edad.
El cariotipo molecular está desplazando al cariotipo convencional en el diagnóstico de niños con
Trastornos de Espectro Autista (TEA), discapacidad intelectual y/o del desarrollo y múltiples
malformaciones congénitas ya que presenta una capacidad diagnóstica diagnóstica.
Describimos el caso de un niño de 18 meses en estudiopor CIR, retraso pondero estatural y psicomotor y
dificultad en la alimentación al que se le solicita cariotipo molecular. Plataforma empleada: array
Cytoscan® 750K de Affymetrix®, compuesto de 550.000 sondas no polimórficas y 200.000 sondas de
SNPs. Análisis de los datos: software Chromosome Analysis Suite 2.0 (ChAS).
3 Resultados
Se detecta una pérdida de heterocigosidad en el cromosoma 14 de 86759Kb, compatible con isodisomía
uniparental del cromosoma 14.
Se realizó cariotipo molecular a los progenitores para obtener el genotipo y poder comparar con el
genotipo del paciente determinándose así el origen materno y estableciendo el diagnóstico de Síndrome
de Temple. Este síndrome presenta, además de las características observadas en el paciente, hipotonía,
dismorfismo facial, obesidad durante la infancia/adolescencia, pubertad precoz y edad ósea avanzada
implicando baja estatura.
También se realizó cariotipo convencional a los progenitores, descartando la existencia de
reordenamientos cromosómicos balanceados.
4 Conclusiones
El empleo de una plataforma de array que combina el uso de sondas que detectan variación en el número
de copias y de SNP, ha sido determinante para realizar un diagnóstico temprano y certero de Síndrome
de Temple puesto que, además de detectar alteraciones en el número de copias, detecta pérdida de
heterocigosidad, capacidad que no poseen las plataformas de array empleadas habitualmente.
Puesto que los padres no son portadores de anomalías cromosómicas, el riesgo de recurrencia asociado
es bajo, <1%.
C0323 REVISIÓN CLÍNICA DE 7 PACIENTES AFECTOS SÍNDROME 49,XXXXY
Elisabeth Gabau Vila; Concepció Escofet Soteras; Jacobo Pérez Sánchez; Lorena Joga Elvira;
Parc Taulí. Hospital Universitari Sabadell (Barcelona) España
1 Objetivos
La frecuencia de la polisomía 49,XXXXY se sitúa entre 1/85000-1/100000 recién nacidos varones, durante
el año 2016 hemos tenido la oportunidad de evaluar a 7 pacientes procedentes del estado español, a
petición de las mismas familias dentro de un programa de atención multidisciplinar que ofrece nuestro
centro a las aneuploidias de cromosomas sexuales.
Los 7 pacientes de edades entre 3 y 16 años, fueron evaluados por diferentes especialistas
(endocrinólogo, psicólogo, neuropsicólogo, neuropediatra y genetista clínico), dado que procedían de
diferentes regiones del estado español eran atendidos por los diferentes profesionales en dos días
consecutivos. Recogiendo según protocolo preestablecido los datos de historia clínica y exploración física.
Así como la aplicación de los tests WNV, SENA i ABAS-II.
3 Resultados
Todos los pacientes mostraban dismorfia facial como hipertelorismo 4/7, epicantus 5/7, puente nasal
ancho 5/7; todos presentaban malformaciones esqueléticas especialmente subluxación codo y/o
sinostosis radiocubital, entre otros. El estrabismo en 4/7. Agenesia renal en un paciente. Persistencia
ductus arterioso 3/7, CIV múltiples 1/7. RCI reportado en 4/7. En 2/7 cesárea por presentación podálica y
una tercer caso por mala dinámica fetal. En todos los pacientes se registra hipotonía neonatal que
provoca retraso del desarrollo motor y problemas en la ingesta del alimento. En todos ellos alteración de
los genitales externos en forma de pene pequeño y criptorquidia. En todos ellos se observa retraso del
desarrollo intelectual siendo el área más afectada el lenguaje. Los trastornos de conducta más
representados son el déficit de atención y conductas ansiosas.
4 Conclusiones
Destacamos que 4/7 fueron diagnosticados en el período neonatal o de lactante. Uno de los casos es
mosaico con tres líneas celulares 47,XXY; 48,XXXY y 49,XXXXY. Todos los pacientes evaluados
muestran una evolución muy positiva en los aspectos del neurodesarrollo, como resultado de la atención
mutidisciplinar que reciben en sus áreas de referencia.
C0389 MÁXIMA PRECISIÓN Y EFICIENCIA EN EL ANÁLISIS GENÉTICO DE LA
DISCAPACIDAD INTELECTUAL, AUTISMO Y EPILEPSIA. UNA APROXIMACIÓN DE 360º
Carolina Monzó-Cataluña, Cristian Pérez-García, Miguel González-Acera, Carlos Ruiz, M Carmen Álvarez, María
García-Hoyos, Javier García-Planells, Pablo Marín-García
Instituto de Medicina Genómica Paterna (Valencia) España
1 Objetivos
La discapacidad intelectual (DI), los trastornos del espectro autista (TEA) y la epilepsia son enfermedades
con alta frecuencia poblacional, etiología muy diversa y elevado componente genético: 50% de la DI, 40%
del TEA y 70% de la epilepsia. Ninguno de los diversos métodos para el diagnóstico de estas patologías
cubre todas las causas conocidas. El objetivo de este método es la combinación de distintas tecnologías
para obtener el mayor rendimiento diagnóstico.
Se ha diseñado un modelo de gestión de información genómica que permita la selección y priorización de
genes y mutaciones de acuerdo a su utilidad clínica y facilite su posterior interpretación clínica. Para el
diseño se ha utilizado una combinación de tecnologías que permite el análisis de mutaciones puntuales
en 652 genes asociados a DI, 311 genes de TEA y 117 genes de epilepsia, regiones no exónicas de
interés clínico, variaciones en el número de copias en todo el genoma, repeticiones CGG del gen FMR1
en casos de DI y TEA y variantes asociadas al metabolismo de fármacos relacionados con el tratamiento
del fenotipo.
3 Resultados
Nuestros resultados muestran una cobertura media por gen del 97.9% y una cobertura del 100% en los
genes ‘core’. Se confirmó la obtención de mutaciones puntuales mediante exoma dirigido y de variaciones
en número de copias mediante Array CGX.
4 Conclusiones
El método diseñado permite obtener una alta cobertura y fiabilidad en las regiones de interés y un gran
rendimiento diagnóstico. La actualización constante de la información facilita la optimización continua del
método, la identificación e interpretación de variantes, incrementando su eficiencia diagnóstica.
C0401 SECUENCIACIÓN DE EXOMA EN EL DIAGNÓSTICO GENÉTICO DE LA
DISCAPACIDAD INTELECTUAL
1 2 3 3 3 4
Alejandro Brea Fernández , Inés Quintela , Rita Quintas Rey , Beatriz Sobrino , Jorge Amigo , Ángel Carracedo ,
4
Francisco Barros
1
Grupo de Medicina Xenómica-USC, Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER)
Santiago (A Coruña) España
2
Grupo de Medicina Xenómica-USC, CEGEN-PRB2-ISCIII, Santiago de Compostela (A Coruña) España
3
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica (FPGMX)-SERGAS, Grupo de Medicina Xenómica-USC, IDIS,
Santiago de Compostela. (A Coruña) España
4
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica (FPGMX)-SERGAS, Grupo de Medicina Xenómica-USC, IDIS,
Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER),Santiago de Compostela (A Coruña)
España
1 Objetivos
La Discapacidad Intelectual (DI) es una condición genéticamente heterogénea que afecta a ~1% de la
población mundial. Dicha heterogeneidad genética dificulta en gran medida el diagnóstico genético de la
patología. De hecho, se desconoce la alteración genética responsable de DI en ~50% de los casos. En el
presente estudio se ha secuenciado el exoma de 35 pacientes con Array CytoScan HD negativo con la
intención de determinar la causa genética subyacente a la DI y reducir el número de casos sin diagnóstico
genético.
El ADN genómico de cada paciente ha sido sometido a un enriquecimiento de los exones y zonas
flanqueantes con SureSelect Focused Exome. Posteriormente, las regiones enriquecidas han sido
secuenciadas en la plataforma Ion Proton System, alcanzando una profundidad de cobertura media de
202X y un 96,3% de las bases cubiertas a >30X. Tras el mapeo y anotación de las secuencias, se han
filtrado los resultados en busca de variantes potencialmente deletéreas en 707 genes relacionados con
DI.
3 Resultados
El análisis de los exomas identificó 257 variantes en los 35 pacientes: 3 Stopgain (1,16%), 1 Stoploss
(0,39%), 4 de Splicing (1,56%), 4 Frameshift (1,56%), 234 Missense (91,05%) y 11 Non-Frameshift
(4,28%). Aunque la mayoría de estas variantes se relacionan con síndromes autosómicos recesivos, en la
mayor parte de ellos no se ha encontrado el segundo evento mutacional responsable de DI en los
pacientes. No obstante, en 6 (17,14%) de los 35 individuos analizados se ha identificado la posible causa
genética de DI.
4 Conclusiones
Los resultados obtenidos refuerzan la valía de la secuenciación de exoma como estrategia diagnóstica de
primera elección en patologías genéticamente heterogéneas. Sin embargo, la eficiente consecución de un
diagnóstico genético preciso requiere la continua actualización de la lista de genes relacionados con DI
empleada en el análisis de exomas.
C0417 IMPACTO DE LOS EVENTOS CROMOSÓMICOS EN MOSAICO E INVERSIONES
ANCESTRALES POLIMÓRFICAS EN LOS TRASTORNOS DE ESPECTRO AUTISTA
1 2 2 3
Marcos López Sánchez , Armand Gutiérrez Arumí , Ivon Cuscó Martí , Alejandro Cáceres Domínguez , Juan Ramón
3 2
González Ruiz , Luis Alberto Pérez Jurado
1
Unidad de Genética, Universitat Pompeu Fabra, Instituto Hospital del Mar de Investigaciones Médicas (IMIM).
ISGlobal, Centro de Investigación en Epidemiologia Ambiental (CREAL) Barcelona (Barcelona) España
2
Unidad de Genética, Universitat Pompeu Fabra. Instituto Hospital del Mar de Investigaciones Médicas (IMIM). Centro
de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER) (Barcelona) España
3
ISGlobal, Centro de Investigación en Epidemiologia Ambiental (CREAL). Centro de Investigación Biomédica en Red de
Epidemiología y Salud Pública (CIBERESP) (Barcelona) España
1 Objetivos
Los trastornos del espectro autista (TEA) tienen un gran componente genético, pero sólo una pequeña
parte se ha conseguido identificar. Reordenamientos cromosómicos en mosaicismo o que no afectan en
número de copias, como las inversiones, han sido poco explorados y pueden contribuir a parte de la
heredabilidad.
Se han analizado datos de micromatrices de genotipado de 5599 familias de probandos con TEA. Como
controles pareados por edad se han analizado 7527 niños sanos.
Para detectar mosaicismo se han utilizado dos algoritmos diferentes, MAD y triPOD, que detectan
alteraciones en ploidía o balance alélico. El análisis de inversiones ancestrales se ha realizado mediante
dos algoritmos, inveRsion e InvClust, que detectan regiones con patrones aberrantes de desequilibrio de
ligamiento y permite clasificar individuos en base a haplotipos. Posteriormente hemos aplicado el test de
desequilibrio de transmisión en tríos y estudios de asociación caso-control.
3 Resultados
Se han detectado un total de 23 reordenamientos en mosaico en muestras de ADN de sangre
pertenecientes a 21 de 4427 pacientes (0.47%). La frecuencia en el grupo control ha sido de 5/7517
-5
(0.066%), siendo significativamente más frecuente en TEA (OR 7.1, pval=1.23x10 ). La mayoría de los
reordenamientos en mosaico pueden tener una relación causal con el trastorno.
Respecto a las inversiones se ha detectado una sobretransmisión y asociación con TEA de alelos de dos
-4 -3
inversiones polimórficas en la población: 8p23.1 (%ST= 7.38, pval adj=3.9x10 ; OR 1.14, pval=6.7x10 ),
-2
y 17q21.31 (%ST= 5.76, pval adj=4.1x10 ; OR 1.14, pval=0.01). Ambos alelos de riesgo se asocian a
expresión diferencial de genes candidatos.
4 Conclusiones
Los reordenamientos cromosómicos somáticos, con origen embrionario y detectables en sangre, son una
causa infrecuente pero significativa de TEA (0.47%), sugiriendo una detección incluso mayor en tejido
diana. Al menos dos inversiones polimórficas comunes detectadas suponen alelos de riesgo para TEA
mediante la regulación de la expresión de determinados genes.
C0425 EL GEN CTCF, GEN DIANA EN CASOS DE RETRASO MENTAL. CASO CLÍNICO Y
REVISIÓN DE LA LITERATURA.
Andrea Ros Peña, Guillem Pintos, Alicia Castillo, Agustín Rodriguez-Palmero, Ignacio Blanco
1 Resultados
Caso clínico: Varón de 10 años de edad procedente de Rusia. Presenta discreta hipoplasia maxilar con
anomalías de erupción dental, órbitas prominentes, cejas poco pobladas en extremo externo, estrabismo
convergente no parético, anomalías de extensión de los dedos índices, clinodactilia bilateral, hernia
umbilical intervenida quirúrgicamente, escroto en chal con testes de 2 cc y nevus único de 1 cm de
diámetro en la zona antero-inferior torácica. Presenta imagen de resonancia magnética cerebral
compatible con malrotación de hipocampo bilateral. Se realiza microarray (CytoScan® 750K Affymetrix®)
donde se detecta la presencia de una deleción de 95,749 Kb en el brazo largo del cromosoma 16, la cual
incluye los genes FAM65A y CTCF. La deleción del gen CTCF se asocia al Síndrome de Retraso Mental
Autosómico dominante 21 (OMIM#615502) y probablemente sea la responsable del cuadro clínico del
paciente. Este síndrome se caracteriza por retraso mental y múltiples alteraciones fenotípicas. Está
causado por mutaciones en heterocigosis en el gen CTCF. El gen CTCF codifica una proteína nuclear
implicada en procesos de regulación de la transcripción, en la cohesión de cromátidas hermanas y en
imprinting genómico. Este gen regula también la expresión del gen FMR1, asociado a la Síndrome de X
Frágil, a través de modificaciones en la organización de la cromatina.
2 Conclusiones
Hasta la fecha solo se han reportado en la literatura 4 casos clínicos con mutaciones puntuales en CTCF
causantes fundamentalmente de retraso mental y microcefalia. En Decipher se reportan 22 casos con
alteraciones que incluyen este gen y todos los individuos portadores presentan retraso mental.
Probablemente, el gen CTCF será gen candidato en el algoritmo de estudio del déficit cognitivo.
C0429 ANÁLISIS DE VARIANTES DEL NÚMERO DE COPIAS EN PACIENTES GALLEGOS
CON TRASTORNO DEL ESPECTRO AUTISTA
Aitana Alonso González
Fundación de Medicina Genómica Santiago de Compostela (A Coruña) España
1 Objetivos
El trastorno del espectro autista (TEA) está caracterizado por déficits en la comunicación, interacción
social y desarrollo del lenguaje. Habitualmente se acompaña de comportamientos estereotipados y/o
repetitivos e intereses restrictivos. Los avances tecnológicos de los últimos años, principalmente
microarrays cromosómicos y tecnologías de secuenciación de nueva generación, han revelado un alto
impacto de las variantes raras en este trastorno- incluyendo anomalías cromosómicas, variantes del
número de copias submicroscópias (CNVs, del inglés Copy Number Variation) y variantes de un solo
nucleótido (SNVs, del inglés Single Nucleotide Variation)- que representan una proporción importante del
riesgo en TEA. Dada la importancia de CNVs en su etiología, el objetivo de este estudio ha sido identificar
CNVs causales asociadas a este trastorno.
Hemos analizado una cohorte compuesta por 310 pacientes gallegos aplicando un microarray de genoma
completo de alta densidad de SNPs (del inglés Single Nucleotide Polymorphism).
3 Resultados
Hemos encontrado 85 CNVs exónicas raras que fueron clasificadas en tres grupos: clínicamente
relevantes (20/85; 23,5%), de significado incierto (55/85; 64,7%) y benignas (10/85; 11,8%). Las 20 CNVs
patogénicas fueron identificadas en 18 pacientes, mientras que 8 CNVs de significado incierto
probablemente causales, fueron detectadas en 8 pacientes (dos de ellos también portaban una CNV
clínicamente relevante).
4 Conclusiones
El análisis de variantes del número de copias con un panel de SNPs de alta densidad en un total de 310
pacientes con TEA nos ha permitida alcanzar una capacidad diagnóstica entre 5.8% y 7.7%.
C0437 EL PROGRAMA DE ENFERMEDADES RARAS NO DIAGNOSTICADAS DEL
CIBERER (ENOD): CONTRIBUCIÓN AL DIAGNÓSTICO GENÉTICO DE PACIENTES NO
DIAGNOSTICADOS MEDIANTE UNA APROXIMACIÓN COLABORATIVA
1 1 2 3 4
Sorina Daniela Tatu Boncota , Andrés Medrano , María Juliana Ballesta , Joaquín Dopazo , Sixto García-Miñaúr ,
5 2 6 7 8 9
Blanca Gener , Encarnación Guillén , Feliciano Ramos , Jordi Rosell , Aurora Sánchez , Fernando Santos , Isabel
10 11 12
Tejada , Montserrat Milà , Luis Alberto Pérez Jurado
1
Unidad de Genética, Universitat Pompeu Fabra. Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras
(CIBERER) Barcelona (Barcelona) España
2
Sección Genética Médica, Servicio de Pediatría, Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca. Centro de
Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER). (Murcia) España
3
Departamento de Genómica Computacional, Centro de Investigación Príncipe Felipe (CIPF). Centro de Investigación
Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER). (Valencia) España
4
Sección de Genética Clínica, Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz.
Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER). (Madrid) España
5
Laboratorio de Genética Molecular del Servicio de Genética, Hospital Universitario Cruces. Centro de Investigación
Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER). (Vizcaya) España
6
Unidad de Genética Clínica-Servicio de Pediatría, Hospital Clínico Universitario “Lozano Blesa”. Centro de
Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER). (Zaragoza) España
7
Sección Genética, Hospital Son Espases. Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras
(CIBERER). (Islas Baleares) España
8
Servicio de Bioquímica y Genética Molecular, Hospital Clínic y el Instituto de Investigaciones Biomédicas August Pi i
Sunyer (IDIBAPS). Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER). (Barcelona)
España
9
Sección de Genética Clínica, Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz.
Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER). (Madrid) España
10
Laboratorio de Genética Molecular del Servicio de Genética, Hospital Universitario Cruces. Centro de Investigación
Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER). (Vizcaya) España
11
Servicio de Bioquímica y Genética Molecular, Hospital Clínic y el Instituto de Investigaciones Biomédicas August Pi i
Sunyer (IDIBAPS). Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER). (Barcelona)
España
12
Unidad de Genética, Universitat Pompeu Fabra. Instituto Hospital del Mar de Investigaciones Médicas (IMIM). Centro
de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER). (Barcelona) España
1 Objetivos
Las enfermedades raras (ERs) son un grupo importante de patologías de muy difícil diagnóstico, en un
alto porcentaje (>80%) de causa genética. La discapacidad intelectual (DI), los trastornos del espectro
autista (TEA), y la epilepsia (E), son fenotipos complejos, interrelacionados y asociados a diversas ERs.
Presentan una alta heterogeneidad y una mayor dificultad diagnóstica, con tasas de éxito inferior a 1/3 de
los casos. Aunque disponibles, las técnicas moleculares avanzadas (cariotipado molecular y
ultrasecuenciación) no son rutina diagnóstica, muchos profesionales de la salud implicados adolecen de
una base sólida en Medicina Genómica y la imputación de causas genéticas suele ser un proceso
anárquico. Desde el CIBERER se ha establecido un programa para contribuir al diagnóstico de ERs no
diagnosticadas (ENoD) con una fase piloto focalizada en DI/TEA/E y los siguientes objetivos:
- Establecer una cohorte de casos bien estudiados y sin diagnóstico causal, registrados en una base de
datos común, para la revisión cruzada de expertos colaboradores y la selección para aplicar nuevas
técnicas diagnósticas.
- Optimizar protocolos de estudio, algoritmos bioinformáticos de análisis, y establecer guías clínicas.
- Compartir libremente los datos generados.
- Contribuir a la formación de profesionales de la salud en Medicina Genómica.
Los métodos consisten en la creación de una base de datos como herramienta fundamental que incluya
información clínica completa codificada y datos genéticos o genómicos, la coordinación de expertos
colaboradores para el re-análisis de datos existentes, y la indicación y obtención de estudios de
ultrasecuenciación y técnicas bioinformáticas cuando proceda.
3 Resultados
La fase de reclutamiento se acerca a los 100 casos en la base de datos, cuyo estudio y re-análisis está en
curso.
4 Conclusiones
Esta aproximación colaborativa facilitará el estudio integral de pacientes con ERs, contribuyendo a la
implementación de la Medicina Genómica.
C0438 EL DISEÑO DE ARRAY-CGH OPTIMIZADO PARA LOS PROBLEMAS DE
NEURODESARROLLO INCREMENTA EL RENDIMIENTO DIAGNÓSTICO Y REDUCE LOS
CASOS CON VARIANTES DE SIGNIFICADO INCIERTO.
1 1 1 2 1
Francisco Martínez , María Calvente , Sara Comín , Javier Suela , Juan Cruz Cigudosa
1
2
1 Objetivos
El array-CGH es una tecnología estándar en el estudio genético de los problemas del neurodesarrollo,
incluyendo los trastornos de espectro autista (TEA). Para ello es necesario contar con una alta resolución
analítica, lo que puede incrementar la detección de variantes de significado incierto, disminuyendo el
rendimiento diagnóstico de la técnica. Un diseño específico para este tipo de patologías permitiría reducir
la detección de estas variantes. Por ello, se ha analizado una serie de aproximadamente 900 pacientes
afectos de TEA con un array-CGH diseñado específicamente.
Se recogieron un total de 903 muestras de sangre periférica procedente de pacientes afectos de
trastornos del neurodesarrollo. Todas los ADN extraídos fueron analizados con un diseño de array-CGH
orientado a dismorfología y problemas del. Dichos resultados se compararon con una serie anterior de
aproximadamente 1126 muestras realizadas con arrays genéricos de alta resolución.
3 Resultados
Se identificaron un total de 123/903 casos con variantes patogénicas (13.6%), un dato similar al de la
serie anterior (227/1126, un 11.2%). Al separar los pacientes de TEA con o sin dismorfias mayores, se
observaba un ratio de variantes patogénicas superior en aquellos con dismorfias (62 de 347, un 17.8%)
frente a los que no (61 de 556, un 11%).
Al utilizar el diseño a medida se detectaron muchas menos variantes de significado incierto, detectando
118/903 (un 13.1%) frente a la otra serie con un arrays genéricos, donde se detectaron 258/1126 (un
22.91%).
4 Conclusiones
La utilización de un array-CGH de alta resolución en los trastornos del espectro autista o de problemas del
neurodesarrollo es una herramienta eficaz para detectar patología genética en un 13% de los pacientes
estudiados. Así mismo, gracias a la mejora de los diseños y del conocimiento de variantes poblacionales,
siguen detectándose, aunque en menor medida, variantes de significado incierto.
C0451 APLICACIÓN DE LA TÉCNICA DE ARRAY CGH EN DIAGNÓSTICO POSTNATAL:
EXPERIENCIA DEL CARIOTIPO MOLECULAR DE UNA COHORTE DE ~5000 PACIENTES
1 2 2 2 2 2 2
Olaya Villa Marcos , Cristina Hernando , Patricia Muñoz , Neus Fornés , Heidi Mattlin , Sonia Cano , Anna Zurano ,
2 2 3
Manel García-Aragonés , Lluís Armengol , Luis A. Pérez Jurado
1
qGenomics, Laboratorio Barcelona (Barcelona) españa
2
qGenomics (Cataluña) España
3
Unitat de Genètica- Universitat Pompeu Fabra (Cataluña) España
1 Objetivos
Valoración del rendimiento diagnóstico de la técnica de array CGH en análisis postnatal en nuestro
laboratorio, mediante el uso de un array custom de oligonucleótidos (60K).
Desde noviembre de 2011 hasta diciembre 2016, se analizaron prospectivamente ~5000 muestras
principalmente pediátricas, con fenotipos de retraso del desarrollo/discapacidad intelectual, autismo y
anomalías congénitas, empleando un array custom (qChip CM, enriquecido en regiones de
reordenamiento recurrente, subteloméricas y pericentroméricas, para maximizar la identificación de
alteraciones de número de copia clínicamente relevantes, y minimizar la detección de variantes de
significado clínico incierto - VOUS). Paralelamente, se utilizó una plataforma comercial de 180K en más
de 500 muestras. La clasificación de las variantes se realizó de acuerdo con las recomendaciones del
American College of Medical Genetics standards and guidelines for interpretation and reporting of
postnatal constitutional copy number variants (Kearney y cols., 2011).
3 Resultados
El análisis genético de las muestras con el qChip CM reveló la presencia de ~14.75% de alteraciones
patogénicas o probablemente patogénicas, así como ~15.7% de VOUS; mientras que con la plataforma
comercial de 180K la tasa de detección de alteraciones patogénicas fue del 18.2%, y la de VOUS
notablemente superior (26.7%). En los casos en que se pudo analizar muestras parentales,
aproximadamente 68% de las variantes fueron heredadas y 31% de novo, con valores similares en ambas
plataformas.
4 Conclusiones
• La tasa de detección de variantes causales en nuestra serie utilizando el array qChip CM

(~15%) está en concordancia con lo descrito en la literatura.
• La utilización de una plataforma de mayor resolución (180K) no comporta un aumento
significativo en el rendimiento diagnóstico (dado que todas las alteraciones patogénicas también
se hubieran detectado con la plataforma qChip CM); mientras que sí que implica una mayor tasa
de identificación de VOUS (26% versus 15%).
C0458 EL SÍNDROME DE MICRODELECIÓN 3Q29: CASO CLÍNICO Y REVISIÓN DE LA
LITERATURA
Andrea Ros Peña, Laura Monlleo, Agustín Rodriguez-Palmero, Guillem Pintos, Alicia Castillo, Ignacio Blanco
1 Resultados
Caso clínico: Varón de 18 años de edad afecto del Síndrome de microdeleción 3q29. Presenta déficit
cognitivo, trastorno del espectro autista, cabeza triangular, orejas con pabellón prominente ligeramente
hipoplásicas, miopía con estrabismo convergente y ambliopía relativa sin posibilidad de mejora visual,
hiperlaxitud articular en manos, torpeza motriz fina y ancha, lenguaje inadecuado, problemas de
conciliación del sueño y conducta obsesiva. Los resultados del cariotipo, del estudio de X Frágil y de
microdeleciones subteloméricas, al igual que el TAC craneal y RM cerebral fueron anodinos. El estudio de
microarray (CytoScan® 750K Affymetrix®), además de una deleción patogénica de 1,2 Mb en 3q29 que
incluye 24 genes, detecta dos duplicaciones de significado incierto: una de 874 kb en 5q35.3 y otra de 536
kb en16q22.1.
El Síndrome de microdeleción 3q29 se caracteriza por retraso global del desarrollo, trastornos de
alimentación y de ansiedad, autismo, reflujo gastrointestinal, infecciones de oído recurrentes, anomalías
dentales, hipotonía, problemas respiratorios, trastornos psiquiátricos y defectos cardíacos. En la mayoría
de casos es causado por una deleción de 1.6 Mb que incluye aproximadamente 30 genes. La
microdeleción 3q29 constituye un síndrome bien documentado con una gran variabilidad fenotípica. Esta
expresividad variable puede explicarse por la presencia de alteraciones genéticas acompañantes u otros
factores modificadores. Nuestro paciente es portador de dos microduplicaciones de significado incierto
que podrían actuar como factores genéticos modificadores del fenotipo.
C0466 COMPILACIÓN DE CASOS CLÍNICOS DE GANANCIAS Y PÉRDIDAS
CROMOSÓMICAS EN LA REGIÓN XP22 EN PACIENTES CON DISCAPACIDAD
INTELECTUAL. DETECCIÓN MEDIANTE ARRAY-CGH (HIBRIDACIÓN GENÓMICA
COMPARATIVA)
1 1 2 2 2
Sara Franco Freire , Carmen Benito lópez , Diego Amorós Cerdán , Vanessa Penacho Martín , Irene Manchón Trives ,
2
Luis A. Alcaráz Mas
1
Hospital Materno Infantil de Málaga (Málaga) España
2
Bioarray S.L. (Elche) España
1 Objetivos
Las ganancias y pérdidas cromosómicas submicroscópicas son responsables de la discapacidad
intelectual (DI) y los rasgos dismórficos que afectan a alrededor del 3% de la población. La porción distal
del brazo corto del cromosoma X humano (Xp22) es una región que experimenta frecuentes
reordenamientos genómicos. Este estudio compila casos clínicos de ganancias y pérdidas
submicroscópicas localizadas en la región Xp22 que fueron indetectables mediante análisis citogenético
de rutina mientras que el array-CGH permitió una detección fiable.
Se recogieron muestras de 14 individuos (5 de ellos no relacionados) en el Hospital Materno Infantil de
Málaga para el estudio de duplicaciones/deleciones en la región Xp22. Cinco pacientes no relacionados
presentaron DI y sospecha de dismorfismo asociado a alguna anomalía cromosómica, no confirmados
mediante cariotipo. La plataforma de array-CGH Agilent 60K se empleó con el objetivo de detectar tales
anomalías.
3 Resultados
Cinco casos no relacionados presentaron variaciones en número de copia (CNV) con tamaños que
variaban desde ~0,126 hasta ~1,6 Mb. Dos individuos mostraron duplicaciones de origen materno
(microduplicación en Xp22.31) y tres presentaron cambios submicroscópicos de origen desconocido, dado
que no se realizó el estudio parental (microdeleciones en Xp22.33 y Xp22.32; microduplicación en
Xp23.33). El valor DLRSD (derivative log ratio standard deviation), medida de dispersión de la señal en
microarrays, fue menor de 0,2, lo cual indica una detección muy precisa para aberraciones cromosómicas
pequeñas.
4 Conclusiones
Nuestros datos confirman que la plataforma array-CGH Agilent 60K puede detectar con gran precisión
microduplicaciones y microdeleciones en la región cromosómica Xp22. Esta diseñada con más de 60.000
sondas para detectar pequeñas ganancias y pérdidas asociadas con retraso mental y/o síndromes del
desarrollo, entre otros.
C0482 DELECIÓN MONOALÉLICA EN 2Q24.1-24.3 ASOCIADA A RETRASO
PSICOMOTOR E HIPERTIROIDISMO POR T3
1 2 3 4 2
Nerea Lacámara Ormaechea , Mónica Martín Belinchón , Belén Roldán , Concepción Miranda , María Palomares ,
2 2 1
Juan Bernal , Beatriz Morte , Jose Carlos Moreno
1
INGEMM, Hospital La Paz Madrid (Madrid) España
2
Instituto de Investigaciones Biomédicas. CSIC-UAM. (Madrid) España
3
Hospital Ramón y Cajal (Madrid) España
4
Hospital Gregorio Marañon (Madrid) España
1 Objetivos
Mutaciones en el gen MCT8, principal transportador de hormonas tiroideas al sistema nervioso central,
provocan el Síndrome de Allan-Herndon-Dudley (SAHD) que cursa con grave retraso psicomotor,
hipotonía y un perfil tiroideo típico (T3L elevada, T4L normal/baja y TSH levemente incrementada). Sin
embargo, existen pacientes con criterios clínico-analíticos típicos que no presentan mutación del gen y
que denominamos “MCT8-like”. Ojetivo: Identificar la base genética de fenotipos “MCT8-like”.
PCR y Secuenciación Sanger de región codificante de otros transportadores intracelulares de hormonas
tiroideas y genes funcionalmente relacionados con MCT8:, LAT1, LAT2, OATP1C1 PTTG1IP, THRA y
DIO3. Análisis de dosis génica mediante array-CGH enriquecido en 18 genes implicados en el
metabolismo hormonal tiroideo.
3 Resultados
Identificamos 12 pacientes (9 varones) compatibles con fenotipo “MCT8-like”, todos con retraso
psicomotor, hipotonía axial marcada y/o patrón de hipomielinización en RM cerebral. La T3 total/libre está
elevada; la T4L es normal en 11 pacientes y disminuida en uno y la TSH esta levemente incrementada en
5 pacientes y normal en 7/12. No se encontró ningún cambio patogénico en la secuenciación Sanger. En
un paciente, se identifica una deleción en heterozigosis de 4.6Mb en 2q24.1-24.3. El intervalo delecionado
contiene 20 genes, destacando algunos como PSMD14, TBR1, KCNH7, DPPG4 asociados con retraso
psicomotor e hipotonía, que no explicarían el hipertiroidismo T3-dependiente. Destaca también SLC4A10,
un transportador intracelular de sodio-bicarbonato que, como MCT8, se expresa en plexos coroideos
cerebrales y cuya deleción experimental conlleva traslocación anómala de algunos transportadores co-
expresados en este tejido.
4 Conclusiones
Describimos una deleción de 20 genes contiguos en la región 2q24.1-24.3 que asocia un fenotipo
neurológico y hormonal (T3 alta, T4 baja y TSH elevada) similar al de los pacientes con SAHD pero sin
mutación en MCT8. El impacto individual de los genes en el metabolismo de las hormonas tiroideas
necesita ser investigado.
C0529 VARIANTE DE PÉRDIDA DE FUNCIÓN EN ANKRD11 EN UN NIÑO CON
SOSPECHA CLÍNICA DE SÍNDROME DE CORNELIA DE LANGE.
1 2 3 4
Maria Palomares Bralo , Elena Valespín , Fernando Santos Simarro , Ángela del Pozo Maté , Kristina Ibáñez
4 4 5 5 2
Garikano , Juan Carlos Silla , Julián Lara Herguedas , Rosario Cazorla Calleja , Héctor González Pecellín , Victoria
2 2 2 2 3
Eugenia F-Montaño , Rubén Martín Arenas , Rocio Mena , Francisca Nieto Aranda , Pablo Lapunzina Badía , Sixto
3
García-Miñaúr
1
INGEMM, Genómica Estructural y Funcional Madrid (Madrid) España
2
Genómica Estructural y Funcional. INGEMM (madrid) España
3
Sección de genética clínica. INGEMM (Madrid) España
4
Sección de bioinformática. INGEMM (Madrid) España
5
Servicio de neurología infantil, Hospital Universitario Puerta de Hierro. (Madrid) España
1 Objetivos
Los síndromes de Cornelia de Lange (CdLS, MIM #122470,300590, 610759, 300882 y 614701) y KBG
(MIM #148050) son trastornos del desarrollo bien diferenciados que presentan algunas características
comunes como discapacidad intelectual, retraso psicomotor y alteraciones craneofaciales y de las
extremidades. Aproximadamente el 70% de individuos con CdLS presentan alteraciones en los genes
NIPBL, SMC1A, SMC3, HDAC8 o RAD21. Sin embargo la única causa conocida del síndrome de KBG
son alteraciones en el gen ANKRD11. Presentamos un lactante de 17 meses de edad con retraso del
crecimiento pre y postnatal, retraso del desarrollo psicomotor, rasgos faciales particulares (micrognatia,
cejas perfiladas con sinofridia, nariz corta con narinas antevertidas y filtro largo) y extremidades
normales con dedos cortos con sospecha de forma leve de CdLS que presenta una variante de pérdida
de función en ANKRD11.
Estudio mediante secuenciación masiva de un panel dirigido de genes de diseño propio implicados en
trastornos del desarrollo (Panel clínico_v1.0). La preparación de las librerías se realizó con el kit Kapa
HTP (Kapa) y SeqCap EZ system (Roche Nimblegen). La secuenciación se llevó a cabo en un
NextSeq500 (Illumina).
3 Resultados
El análisis inicial dirigido exclusivamente a los genes asociados a CdLS no nos permitió identificar
ninguna variante patogénica. La ampliación del análisis al resto de genes contenidos en el panel (1.253
genes) reveló la presencia de una variante de pérdida de función en el gen ANKRD11
(NM_001256182.1:c.2593dupT, p.Tyr865Leufs*51) que fue posteriormente validada por Sanger y nueva
en el paciente.
4 Conclusiones
Variantes en ANKRD11 pueden dar lugar a un fenotipo que solapa parcialmente con el síndrome de
CdLS, especialmente en la primera infancia. Debe valorarse la secuenciación de este gen en niños con
sospecha diagnostica de CdLS y con estudio molecular negativo de los genes NIPBL, SMC1A, SMC3,
HDAC8 y RAD21.
C0551 MICRODUPLICACIONES Y MICRODELECIONES DE 15Q11.2 (BP1-BP2): ANÁLISIS
DE UNA SERIE DE 20 PACIENTES.
1 2 2
María Gutiérrez Agulló , María Eugenia Torregrosa Quesada , María del Carmen Bernal Soriano , Marisa Graells
2
Ferrer
1
HospitalGeneral Universitario de Alicante, Análisis Clínicos Alicante (Alicante) España
2
Hospital General Universitario de Alicante (Alicante) España
1 Objetivos
En la región proximal del brazo largo del cromosoma 15 presenta sedefinen cinco puntos de ruptura
frecuentes (BP). La región comprendida entre BP1 y BP2 en 15q11.2. Las deleciones y duplicaciones de
la región 15q11.2 se han asociado previamente con alteraciones y retrasos del desarrollo, epilepsia y
cardiopatía, entre otros.
El objetivo es analiza los fenotipos encontrados en pacientes con CNVs de la región 15q11.2, así como
las características de las CNVs comparadas con la literatura.
Análisis de las variantes de la región 15q11.2 en 20 pacientes con la patología detallada y de sus
familiares de primer grado si estaban disponibles. La presencia de la duplicación o alteración se
estableció mediante análisis con array CGH 8x60K (PerkinElmer-Agilent)
3 Resultados
La región chr15:22,822,019-23,085,219 (263.20 kb) presentó CNVs en el 4% de los pacientes que
consultaron por discapacidad intelectual o trastorno generalizado del desarrollo (DI/TGD), autismo y
encefalopatía epiléptica entre otras. La prevalencia global de la alteración El 2% de los pacientes
presentaron deleciones (n=11) y el 2% duplicaciones (n=9). La deleción fue heredada de un progenitor
aparentemente sano en el 87,5 % de los casos.
La patología más frecuente en los pacientes con duplicaciones fueron las alteraciones del sistema
nervioso central (74%) en el que se incluyen la DI/TGD, el autismo, la encefalopatía epiléptica y la
hipotonía. El 11% presentaba manifestaciones psiquiátricas. Sólo un paciente presentó patología
cardíaca (dilatación ventricular).
El 68% de los pacientes con microdelección presentaba patología del sistema nervioso central y patología
de cabeza y cuello (18%). Ningún paciente presentaba patología cardíaca ni psiquiátrica.
4 Conclusiones
La prevalencia, el tipo de herencia y el espectro fenotípico de los pacientes es similar a la descrita
previamente, a excepción de la frecuencia de patología epiléptica en pacientes que presentaban la
microduplicación, y de la ausencia de patología cardíaca en pacientes con la microdeleción.
Dismorfología y genetica clínica
C0011 EFECTO DEL GTF2IRD2 EN EL COMPORTAMIENTO INUSUAL Y AGRESIVO EN

SÍNDROME DE WILLIAMS
1 2 3
Carlos Alberto Serrano Juárez , Carlos Alberto Venegas Vega , Dulce María Belén Prieto Corona , Ma. Guillermina
3 3 3 3
Yáñez Téllez , Hermelinda Salgado Ceballos , Juan Felipe Silva Pereyra , Mario Arturo Rodríguez Camacho
1
PRIVADA México D.F. (México D.F.) México
2
Hospital General de México (Ciudad de México) México
3
UNAM (Ciudad de México) México
1 Objetivos
El Síndrome de Williams (SW) es una enfermedad genética poco frecuente y es el resultado de una
deleción heterocigótica en la región 7q11.23. De acuerdo con Campo y Pérez (2010) la región deletada en
la mayoría de los casos (92%) contiene 1.55 Mb de secuencia y codifica para 25 genes, mientras que solo
un 8% tiene una deleción mayor (1.8 Mb) que afecta a 28 genes. Actualmente no hay un consenso
específico sobre la relación genotipo/fenotipo cognitivo-conductual de los pacientes con Síndrome de
Williams ya que existe una gran cantidad de genes, de los cuales existe poco conocimiento sobre los
mismos y su función en las características clínicas del fenotipo conductual. El presente estudio tiene como
objetivo identificar el fenotipo cognitivo-conductual de dos genotipos.
Participaron 7 pacientes sin deleción del GTF2IRD2 y 3 pacientes con deleción de éste gen. Los
pacientes tuvieron una edad de entre 7 y 18 años, se les realizó una prueba de microarreglos con
CytoScan Óptima y se les aplicó una batería neuropsicológica-conductual.
3 Resultados
Los resultados obtenidos indican que los pacientes con deleción del GTF2IRD2, cognitivamente,
presentaron mejor memoria episódica y mayores dificultades visoespaciales, además, conductualmente
se encontraron mayores conductas agresivas y de comportamiento inusual, o autistas.
4 Conclusiones
Estos resultados concuerdan con los reportados por Porter et al. (2012), quiénes encontraron alteraciones
conductuales similares a las reportadas en este estudio, además, comprueba que el GTF2IRD2 tiene una
alta implicación en conductas que tienen relación con el funcionamiento ejecutivo y las habilidades
visoespaciales, debido a que se expresa mayormente en la corteza cerebral, principalmente en la
prefrontal dorsolateral (Tipney et al., 2004; Makeyev et al., 2004; Li et al., 2015).
Apoyado por PAPIIT UNAM IA301916
C0038 FENOTIPO FACIAL SIMILAR EN UNA COHORTE DE 232 NIÑOS CONCEBIDOS
GRACIAS A TÉCNICAS DE REPRODUCCIÓN ASISTIDA ASOCIADO A
MALFORMACIONES CONGÉNITAS MAYORES Y MENORES
1 2 3 3
María José Sánchez Soler , Jorge Gálvez Pradillo , Vanesa López González , María Juliana Ballesta Hernández , Ana
4 5 6 7 6
Teresa Serrano Antón , María Nicolás Arnao , José Sánchez , Mariló Pérez Izquierdo , Laura Sarabia Cos , Remedios
8 9 10
Gil Ferrer , Virginia Pérez Fernández , Encarna Guillén Navarro
1
Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca, IMIB-Arrixaca, Murcia, Sección Genética Médica, Servicio de
Pediatría El Palmar (Murcia) España
2
Unidad de Reproducción, Servicio Ginecología y Obstetricia, HCUVA (Murcia) España
3
Sección Genética Médica, Servicio Pediatría, HCUVA, IMIB-Arrixaca.entro de Investigación Biomédica en Red de
Enfermedades Raras (CIBERER), Instituto de Salud Carlos III (ISCIII), Madrid, (Murcia) España
4
Sección Genética Médica, Servicio Pediatría, HCUVA (Murcia) España
5
Sección Ginecología. Clínica IVI (Murcia) España
6
Laboratorio de FIV y Andrología. Instituto Murciano de Fertilidad (IMFER) (Murcia) España
7
Instituto Bernabeu-Centro de Reproducción Asistida (Murcia) España
8
Sección Genética Médica, Servicio Pediatría, HCUVA, IMIB-Arrixaca. (Murcia) España
9
Servicio de Estadística, Universidad de Murcia (Murcia) España
10
Consejería de Sanidad (Murcia) España
1 Objetivos
Más de 5 millones de niños han sido concebidos gracias al uso de técnicas de reproducción asistida
(TRA). Numerosos estudios describen mayor tasa de defectos de impronta genómica (DIG) y
malformaciones congénitas (MC) en esta población. Objetivo: determinar la frecuencia de MC y DIG en
una cohorte de niños-TRA y detectar posibles factores asociados.
Seguimiento de niños-TRA (FIV/ICSI), de mujeres tratadas desde 05/2012-05/2014 en la Unidad de
Reproducción de nuestro centro. Recogida de datos epidemiológicos, de TRA y descripción de MC
mayores/menores. Análisis de posibles factores asociados.
3 Resultados
232/265 RN fueron evaluados por un genetista clínico al año/dos años de edad (participación 89%). Edad
media materna: 33 años. 24% gemelaridad, 25% prematuridad, 21% bajo peso y 9% hipercrecimiento
prenatal. El 6% presentó MC mayores, detectándose asociación (p<0.05) entre ellas e hipercrecimiento
prenatal, con antecedente de síndrome de hiperestimulación ovárica (SHO). Hubo un caso de S.
Beckwith-Wiedemann (WBW), de madre con SHO. Hasta el 60% asoció MC menores. Solo 60% tomó
ácido fólico preconcepcional (ACP).
Durante las evaluaciones se detectó inesperadamente en el 68% un patrón craneofacial similar (frente
prominente, hipoplasia mediofacial, epicantus, filtrum plano y labio superior fino); 10% fenotipo parcial;
asociado a MC mayores/menores, independientemente de edad materna, gemelaridad, prematuridad,
PEG, SHO o toma de ACP.
4 Conclusiones
Nuestros resultados muestran una alta frecuencia de MC mayores y su asociación con SHO sugiere que
este sea el factor implicado. Hubo un SBW lo que apoya la asociación DIG-TRA. Describimos un fenotipo
facial no descrito anteriormente asociado a MC, lo que sugiere que las TRA puedan condicionar un
desarrollo embrionario alterado. Aunque son necesarios más estudios, consideramos necesario el
conocimiento de estos resultados a la hora de evaluar a niños con anomalías congénitas, al poder
condicionar su manejo, así como el asesoramiento de parejas candidatas a TRA.
C0063 USO DE PANEL DE NGS PARA EL DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL DE
COHESINOPATÍAS: DETECCIÓN DE NUEVA MUTACIÓN MISSENSE PATOLÓGICA EN
GEN NIPBL EN UN CASO DE SÍNDROME DE CORNELIA DE LANGE.
1 1 1 1 1 1 2
Laia Pedrola , Inés Calabria , Marina Martinez , Maria Jose Aparisi , Sara Moreau , Lola Gonzalez , Graciela Pi , Angel
3 4 4
Zuñiga Cabrera , Francisco Martinez , Jose Cervera
1
IIS La Fe (Valencia) España
2
HU La Ribera (Valencia) España
3
HUP La Fe Valencia (Valencia) España
4
HUP la fe. Unidad de genetica. (Valencia) España
1 Objetivos
Empleo de la NGS como herramienta para conseguir un diagnóstico clínico certero en las Cohesinopatías.
La Cohesina es un complejo proteico multifuncional que mantiene las cromátidas hermanas unidas
durante la segregación de los cromosomas. Las mutaciones en los genes que codifican para sus
subunidades y/o cofactores, causan un grupo de defectos congénitos conocidos como Cohesinopatías.
Entre ellas se encuentran los síndromes como Cornelia de Lange, Coffin-Siris y Nicolaides-Baraitser entre
otros, con fenotipos similares que hace complicado el diagnóstico clínico.
Niña de 9 años que se remite para valoración al Servicio de Pediatría. Lo más destacable era el
hirsutismo con cabello abundante e implantación baja en la región occipital. Cejas muy pobladas.
Pestañas largas, abundantes. Vello abundante en espalda, brazos y piernas. Dedos con contracturas en
articulaciones interfalángicas. Discapacidad intelectual leve.
Dadas las características observadas en la paciente la primera impresión diagnóstica fue de un Síndrome
de Coffin-Siris. Se extrajo ADN de la paciente que se analizó mediante un panel génico de NGS diseñado
para síndromes de Cohesinopatías (Cornelia de Lange, Coffin-Siris y Nicolaides-Baraitser entre otros).
3 Resultados
La paciente es portadora de una mutación missense p.Asn1823Asp (c.5467A>G; NM_133433.3) en el
exón 29 del gen NIPBL que modificó el diagnóstico inicial a un Síndrome de Cornelia de Lange, con un
carácter de novo. Dicha mutación no ha sido descrita previamente, el análisis in silico de predictores
indica que es patológica. Se encuentra localizada en el extremo C-terminal en la región HEAT-repeat,
estando en esa zona las mutaciones asociadas a un fenotipo leve.
4 Conclusiones
Dada la dificultad para el diagnóstico diferencial a nivel clínico de síndromes como SCdL, Coffin-Siris y
Nicolaides-Baraitser, el empleo de paneles de NGS donde se puede analizar de manera simultánea
genes implicados en fenotipos similares es de gran utilidad para un diagnóstico certero.
C0066 CASO DE SÍNDROME DE CHARGE DETECTADO EN NEONATO MEDIANTE PANEL
DE NGS PORTADOR DE MUTACIÓN P.ARG157TER EN GEN CHD7 CON PRESENTACIÓN
FENOTÍPICA INCOMPLETA.
1 1 1 1 1 1 2
Laia Pedrola , Inés Calabria , Marina Martinez , Maria Jose Aparisi , Sara Moreau , Lola Gonzalez , Purificacion Marin ,
3 4
Angel Zuñiga Cabrera , Jose Cervera
1
2
HUP La Fe. Pediatría. (Valencia) España
3
4
HUP LA FE. Unidad De Genetica. (Valencia) España
1 Objetivos
Utilización de un panel custom de NGS para el diagnóstico genético de síndromes con fenotipo displásico
y/o dismórfico.
El acrónimo CHARGE describe un síndrome polimalformativo congénito que incluye coloboma (C),
malformaciones cardiacas (H), atresia de coanas (A), retraso psicomotor y/o en el crecimiento (R),
hipoplasia de genitales (G), malformaciones auriculares y/o sordera (E); (incidencia 1/10.000). Se
considera infradiagnosticado debido a la existencia de formas incompletas y atípicas.
Recién nacida a la que se detecta una cardiomiopatía con un defecto del septo atroventricular tipo canal
AV y ductus arterioso persistente. Hija de padres sanos no consanguíneos, parto eutócico y gestación
controlada. Madre con estudio prenatal en sangre circulante de aneuploidias y otros síndromes
microdelecionales de resultado normal. Al mes se aprecia la presencia de coloboma de iris izquierdo. Con
el desarrollo se aprecia asimetría facial, sin estenosis de coanas, sin problemas renales, orejas pequeñas
y triangulares.
Ante la sospecha diagnóstica de síndrome de CHARGE se realiza un estudio mediante NGS utilizando un
panel custom y tecnología de Ion Torrent (cobertura media 100X) que incluye los genes CHD7 y
SEMA3E.
3 Resultados
Se detecta la presencia en heterocigosis de la mutación c.469C>T (p.Arg157Ter; NM_017780.3) en el gen
CHD7. Dado el patrón de herencia autosómico dominante se considera responsable de la clínica
detectada. Los progenitores deciden no hacerse estudio de portadores.
A pesar de presentar una mutación de parada que produce una proteína truncada de sólo 157 aa
(completa 2297 aa), la paciente al nacimiento sólo mostró como fenotipo CHARGE una cardiomiopatía.
4 Conclusiones
El interés de nuestro caso radica en la detección de una deleción del gen CHD7 que debería asociarse a
fenotipo típico de síndrome de CHARGE y sin embargo tiene una presentación incompleta. El estudio
molecular mediante paneles de NGS es de especial utilidad en el estudio de síndromes de presentación
fenotípica variable.
C0068 FENOTIPO COMPARTIDO POR SÍNDROMES ORIGINADOS POR ALTERACIÓN EN
EL PROCESO DE TRASCRIPCIÓN DEL ADN.
1 2 3 4
Graciela Pi Castan , Salvador Climent Alberola , Antonio Martínez Carrascal , Amparo Sanchis Calvo
1
Hospital La Ribera (Valencia) España
2
Hospital General de Ontinyent (Valencia) España
3
Hospital de Requena. Servicio de Pediatría Requena (Valencia) España
4
Hospital Universitario Dr.Peset (Valencia) España
1 Objetivos
El uso de la secuenciación masiva ha permitido el diagnóstico molecular de muchos pacientes con
síndromes conocidos pero con fenotipo atípico y de muchos otros con síndromes muy infrecuentes y con
fenotipos muy poco definidos. Una parte importante de ellos corresponden a desórdenes causados por
modificaciones epigenéticas, concretamente por genes que intervienen en la trascripción del ADN. Para
los clínicos, cada vez es más evidente la coincidencia de rasgos de estos pacientes, aunque el fenotipo
no sea uniforme. En síndromes como el Cornelia de Lange, los síndromes debidos a anomalías en los
genes del complejo BAF (Coffin Siris), el síndrome de Wiedemann Steiner, el síndrome de Bohring Opitz,
el síndrome de Rubinstein Taybi, el síndrome de Kabuki, y otros, observamos casi de forma constante la
asociación de discapacidad intelectual, talla corta, hipertricosis y anomalías esqueléticas distales, además
de otras características propias de cada entidad.
En esta presentación, analizamos un grupo de pacientes con diagnóstico confirmado de estos síndromes
en los que el proceso de trascripción es defectuoso, valiéndonos de la herramienta diagnóstica “The
Facial Dysmorphology Novel Analysis” que valora el fenotipo facial y características clínicas clasificadas
mediante el human phenotype ontology.
3 Resultados
Con el margen propio de error en cualquiera de las herramientas diagnósticas de este tipo, observamos la
coincidencia de estos síndromes como posibilidad diagnóstica, que apoya la impresión clínica y siempre
subjetiva, de que se parecen entre sí.
4 Conclusiones
Concluimos que los rasgos fenotípicos de estos trastornos se solapan debido a un origen común, la
alteración en el proceso de la trascripción del ADN.
C0069 CUTIS VERTICIS GYRATA NEONATAL
1 1 2 3
Salvador Climent Alberola , Montserrat Grau Bono , Graciela Pi Castan , Antonio Martínez Carrascal , Amparo Sanchis
4
Calvo
1
Hospital General de Ontinyent (Valencia) España
2
Hospital La Ribera (Alzira) (Valencia) España
3
Hospital General de Requena (Valencia) España
4
Hospital Universitario Dr Peset Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
El Cutis Verticis Gyrata (CVG) es una alteración del cuero cabelludo caracterizada por la presencia de
circunvoluciones, pliegues y surcos que se asemejan a la superficie cerebral con distribución en el eje
fronto-occipital. Puede ser primaria esencial (sin otras alteraciones asociadas) y no esencial (asociada a
problemas neuropsiquiátricos), o secundaria a otras patologías como el síndrome de Turner, Noonan,
trisomías 13 y 18.
La etiopatogenia es desconocida en la forma primaria esencial y en la no esencial está relacionada con
alteraciones endocrinas. En el Síndrome de Turner y Noonan, el linfedema durante la gestación se
postula como causa. Hay una clara prevalencia varón-mujer (5:1).
Recién nacida, correspondiente a tercera gestación de padres sanos que presenta a nivel fronto-parietal
piel redundante con pliegues y áreas lisas alopécicas de tamaño superior a 10 cm. Asocia orejas de
implantación baja y en retroposición.
Embarazo con controles ecográficos entre 12 y 14 semanas que evidencian formación quística
paracervical de 13 x 11 mm. En el control de la semana 22 se observa higroma quístico tabicado con dos
dilataciones quísticas a nivel parietal que en posteriores controles desaparecen.
3 Resultados
Estudios complementarios: Ecografía cerebral y abdominal normales. Cariotipo 46 XX, estudio del
síndrome de Noonan (PTPN11 negativo), pendiente resto panel genes vía RAS.
4 Conclusiones
El CVG es una rara condición que hay que tener presente en el diagnóstico prenatal y en el caso de su
presentación en recién nacidos descartar síndromes de Turner, Noonan y cromosomopatías.
El tratamiento por motivo estético es quirúrgico.
C0098 CAPACIDAD DELETÉREA DE LA REGIÓN 16P11P13 EN EL DESARROLLO DE
OBESIDAD EN FENOTIPOS SINDRÓMICOS
1 2 1 2 1
Fátima Gimeno-Ferrer , David Albuquerque , Rebeca Melero-Valverde , Carolina Monzó , Carola Guzmán Luján , Inés
3 1 4 4
Quintela García , Goitzane Marcaida Benito , José Juan Alcón-Sáez , Montserrat Aleu Pérez-Gramunt , Raquel
1
Rodríguez-López
1
Laboratorio de Genética Molecular, Hospital General de Valencia Valencia (Valencia) España
2
Grupo de Genómica, Fundación Hospital General de Valencia (Valencia) España
3
Centro Nacional de Genotipado, NODO Santiago de Compostela (A Coruña) España
4
Servicio de Pediatría, Hospital General de Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
Evaluar y caracterizar molecularmente las CNVs detectadas en 6 regiones genómicas previamente

asociadas a obesidad sindrómica no filiada (OSNF), en una cohorte de pacientes estudiados mediante el
algoritmo diagnóstico consensuado para el análisis genético de discapacidad intelectual dismórfica (DID).
La heterogeneidad molecular del sobrepeso grave en los fenotipos sindrómicos, requiere analizar posibles
causas de obesidad monogénica sindrómica (OMS) así como alelos de alta y moderada susceptibilidad
asociados a obesidad no sindrómica. Estudios de asociación de las CNVs identificadas en series de este
tipo de pacientes, han identificado nuevos loci y genes de susceptibilidad a tales fenotipos.
104 pacientes afectados de DID y analizados mediante array genómico de SNPs/CNVs CytoScan®HD
Affymetrix, tras descartar OMS e historia familiar de alto riesgo a obesidad.
3 Resultados
La prevalencia de obesidad grave fue del 19,23%. Una duplicación de 10 Mb en 16p13.11p13.2 explicó
uno de los fenotipos de OSNF; solapó con 14 CNVs entre las localizaciones 11,218,971 y 17,481,778 de
16p11p13, identificadas en 8 pacientes similares. 1 CNV se consideró deletérea, 2 potencialmente
causales y 12 estaban descritas en población control. 2 pacientes portaban alteraciones causales en otras
regiones cromosómicas, cuyos síndromes asociados no describen el desarrollo de sobrepeso temprano.
Las CNVs descritas en población control solapan recurrentemente con los genes MYH11, NDE1 y
NOMO3. Los genes CLEC16A y SHISA9 han sido encontrados cada uno en una de las dos CNVs
clasificadas como potencialmente causales. No hemos encontrado asociación de las otras 5 regiones
candidatas con OSNF.
4 Conclusiones
Corroboramos la existencia recurrente de CNVs en una región mínima de la banda 16p13.1, en pacientes
con fenotipos complejos que alcanzan pesos extremos; estos hallazgos redundan con asociaciones
previamente descritas en patologías neuropsiquiátricas. Siendo preciso el análisis de su heredabilidad y
segregación fenotípica, el estudio funcional de las rutas implicadas augura su importancia en el común
desarrollo del SNC y de alteraciones nutricionales.
C0104 PACIENTE CON DELECIÓN INTERSTICIAL EN 3P DISTAL.
1 2 2 3
Jose María Carbonell Perez , María Eugenia Sánchez Gutiérrez , Julia Sáenz Hurtado , Enrique Galán Gómez , Pilar
3
Méndez Pérez
1
Hospital Infanta Cristina, Genetica Badajoz (Badajoz) España
2
Hospital Infanta Cristina. Laboratorio de Genética. (Badajoz) España
3
Hospital Materno Infantil. Consulta de Genética Clínica. (Badajoz) España
1 Objetivos
Las deleciones de la región distal del brazo corto del cromosoma 3 son raras. Clínicamente se
caracterizan por discapacidad intelectual, estatura corta, microcefalia, hipotonía y rasgos dismórficos
característicos: Micrognatia, blefarofimosis, raíz nasal deprimida, ptosis, hipertelorismo, filtro largo.
También se pueden asociar cardiopatía, malformación renal, hipoacusia y epilepsia.
Presentamos el caso de un paciente que presenta una deleción intersticial a nivel de 3p distal.
El paciente es evaluado a los 4 meses de edad por presentar hipotonía y rasgos dismórficos
(blefarofimosis, epicantus invertido, filtro largo, raíz nasal deprimida e hipertelorismo). Posteriormente el
paciente presenta epilepsia, hipoacusia moderada y retraso del desarrollo.
Se realizó un estudio mediante Array-CGH con plataforma CGX (8x60K). Ante el resultado del Array-CGH
realizamos estudio de FISH con sonda RP11-438J1.
3 Resultados
El estudio de Array-CGH mostró una deleción en heterocigosis de 7 Mb a nivel de 3p distal. El estudio de
FISH (RP11-438J1) en el paciente y en sus padres, corroboró la deleción y mostró que era un evento de
novo: arr[GRCh37] 3p26.1p25.3(4303218_11269411)x1 dn.
Dentro de la región delecionada se encuentran varios genes cuya alteración en heterocigosis se puede
asociar a patología clínica: ITPR1 (ataxia espinocerebelar), CAV3 (distrofia muscular, miocardiopatía),
SETD5 (retraso mental), MTMR14 (miopatía), VHL (enfermedad de von Hippel-Lindau) y SLC6A1
(epilepsia).
4 Conclusiones
El paciente presenta una deleción intersticial en 3p26.1-p25.3 que se asocia a una cromosomopatía poco
frecuente: Deleción 3p distal.
Recientemente se ha publicado la asociación de mutaciones del gen SLC6A1 con la epilepsia, que en
nuestro paciente es de tipo severo.
La deleción del gen VHL se asocia a enfermedad de von Hippel-Lindau y a un riesgo elevado de
desarrollar hemangioblastomas y otros tumores. Por ello, los pacientes con deleción 3p que incluya el gen
VHL, deben ser sometidos a los seguimientos adecuados para esta enfermedad.
C0142 APROXIMACIÓN AL SÍNDROME DE LOWE
1 2 2
Antonio Martinez Monseny , Mercedes Serrano Gimaré , Mercè Bolasell
1
Hospital Sant Joan de Déu Esplugues de Llobregat (Barcelona) España
2
1 Objetivos
Delinear mejor las características clínicas y genéticas de pacientes con Síndrome de Lowe (LS).
Estudio y análisis de las características clínicas y genéticas de pacientes y familias con LS de diferentes
centros de Francia, Italia, Sudamérica y España. A través de información recogida en la plataforma
rarecommons y otros medios de internet por las familias y sus profesionales desde Enero de 2014 a
Diciembre del 2015.
3 Resultados
Se obtienen 61 familias de los diferentes centros (24 de Argentina, Brazil, Colombia, Cuba, Costa Rica,
Uruguay; 19 de España, 13 de Italia y 5 de Francia). El intervalo de edad de los pacientes fue entre 1,5 y
43 años. Se dispone del estudio molecular de 23 pacientes con diferentes tipos de mutación: 6 missense,
1 deleción, 5 nosense, 5 frameshift, 6 sitios de splicing. Todas las mutaciones se encuentran entre los
exones 8 y 22. Un 35% eran de novo. De 39 pacientes con datos clínicos de debut, el 12,8% presentaron
dificultades de la alimentación, un 23,1% criptorquidia y hasta un 35,9% hernia umbilical. Las alteraciones
más frecuentes oculares al debut fueron las cataratas (76%) y el glaucoma (5%). A nivel neurológico en la
evolución destaca la hipotonía (84%), alteración de la neuroimagen (51%), epilepsia (40%) y rasgos TEA
(24-45%). Más del 60% presentaron tubulopatía, un 50% litiasis y menos de 20% desencadenaron
insuficiencia renal. Se recogen otros datos clínicos (endrocinológicos, articulares, dentales…)
4 Conclusiones
Establecer la relación genotipo-fenotipo para el LS es complicada debido al amplio espectro de
mutaciones, la ausencia de registros internacionales y de una clasificación homogénea. Se necesita una
buena descripción de la historia natural de la enfermedad y la definición de parámetros objetivos para
evaluar fármacos en un futuro. Es importante capacitar a las familiar a compartir sus conocimientos para
mejorar en investigación y en guías clínicas y de seguimiento.
C0158 FACE2GENE UNA TECNOLOGÍA EN CONSTANTE DESARROLLO CON MÁS
LUCES QUE SOMBRAS.
1 2 3 4
Antonio Martínez Carrascal , Graciela Pi Castan , Salvador Climent Alberola , Amparo Sanchis Calvo
1
Hospital de Requena. Servicio de Pediatría Requena (Valencia) España
2
Hospital La Ribera (Alzira) (Valencia) España
3
Hospital de Ontinyent (Valencia) España
4
Hospital Dr. Peset (Valencia) España
1 Objetivos
El reto exponencial al que nos enfrentamos es el combinar los hallazgos de la genética molecular y resto
de conocimientos básicos con los datos y hallazgos clínicos en una ciencia de crecimiento acelerado. El
aforismo “no hay enfermedades sino enfermos” se va a tener que aplicar en este momento donde se
amplía el espectro en muchos síndromes clínicos y donde se demuestra la mutación de un gen con
diferente expresividad. Sobre este nuevo panorama, surge una herramienta que intenta vincular todo lo
comentado bajo una plataforma de acceso libre al profesional llamada Face2Gene. Presenta dos
vertientes clínicas y una molecular, va implementando nuevas herramientas con el tiempo; esta basada
en el trabajo en conjunto del equipo FDNA. La vertiente clínica es un software matemático de
reconocimiento de caras que se va implementando mediante el concepto de big data a través de su uso.
La segunda herramienta es el análisis de los hallazgos clínicos, como se utiliza en las bases de datos tipo
London Medical Database o el Possum, pero esta vez clasificados mediante el sistema Human Phenotype
Ontology. A su vez se complementa con el acceso al London Medical Database. Cumple las normas de
privacidad HIPAA.
El grupo firmante ha utilizado la plataforma durante medio año bajo la opción “team”, el programa permite
compartir los casos dentro del grupo para facilitar el diagnóstico.
3 Resultados
Hay síndromes donde la Gestalt es más fácilmente reconocible: Williams, Kabuki, Noonan, Kleefstra y
otros donde se solapan varios síndromes. No obstante las posibilidades que ofrece como alternativas son
a tener en cuenta. Sobre la descripción clínica exige una adecuada enumeración de los hallazgos clínicos
presentes y ausentes facilitando la orientación clínica.
4 Conclusiones
Una gran herramienta a la que muchos grupos nos debemos de familiarizar, exige a los genetistas
clínicos y dismorfólogos un mayor nivel de exactitud clínica.
C0171 SÍNDROME DE LA CHAPELLE (VARÓN 46,XX): CARACTERIZACIÓN GENÉTICO
CLÍNICA.
1 2 2 2
Karen Mabel Pinto Tapia , Cristina Torreira Banzas , María Milagros Blanco Pérez , Alfredo Repáraz Andrade , María
2
Amalia Andrade Olivié
1
hospital Alvaro Cunqueiro Vigo (Pontevedra) España
2
Hospital Alvaro Cunqueiro (Pontevedra) España
1 Objetivos
INTRODUCCION
Es una enfermedad infrecuente, representa 2%de casos de infertilidad masculina.
La mayoría presentan fenotipo masculino, testículos pequeños y azoospermia. Pueden asociar
ginecomastia, talla baja, criptorquidia e hipospadias.
El 5-10%de azoospermia u oligoespermia se asocian a microdeleciones del brazo largo del
crom.Y(región-AZF).
Se produce recombinación de novo anómala entre crom.X e Y en meiosis paterna, la consecuencia es un
crom.X con región SRY+(80-90%). El SRY(TDF) condiciona el fenotipo masculino, y la ausencia del brazo
largo(AZF) explica la azoospermia. La deleción más frecuente es AZFc(~80%), seguido de AZFa(0.5-4%),
AZFb(1-5%) y AZFbc(1-3%).
CASOS CLINICOS Y METODOS
Caso1. 34 años. Remitido de Ginecología por infertilidad.
Caso2. 38 años. Remitido de Endocrinología por Hipogonadismo hipergonadotropo, talla baja y
obesidad. Crecimiento y pubertad retrasados, adipomastia y ginecomastia. Atrofia testicular bilateral.
Caso3. 40 años. Remitido de Hematología por cariotipo M.Osea: Sd.Klinefelter. Linfoma
Linfoplasmocítico. Con hipodesarrollo sexual, adipomastia, testes hipodesarrollados.
Caso4. 19 años. Remitido de Urología por atrofia testicular bilateral e hipogonadismo
hipergonadotropo. Pubertad retrasada y caracteres sexuales secundarios normales.
El diagnóstico se basa en el cariotipo, identificándose incongruencia entre el sexo

cromosómico(femenino), y fenotipo gonadal(masculino). FISH y QF-PCR para confirmar la presencia en el
crom.X de región-SRY.
3 Resultados
RESULTADOS
CASO1 CASO2 CASO3 CASO4
Espermiograma Azoospermia Azoospermia NR Azoospermia
QF-PCR XX,región
NR NR XX,regiónSRY
Aneploidias SRY
QF-PCR
Deleción completa región AZF y
Microdeleciones NR NR NR
presencia SRY
crom.Y
Cariotipo 46,XX 46,XX 46,XX 46,XX
FISH
genSRY+ genSRY+ genSRY+
nuc ish(CEPXx2), genSRY+
(SRYx1)
NR:No realizado.
4 Conclusiones
CONCLUSIONES
Siendo un síndrome con fenotipos variables es necesario un diagnóstico citogenético que incluya
cariotipo, FISH y QF-PCR para identificarlo correctamente, que además nos permite diferenciarlo del
Sd.Klinefelter principalmente.
El oportuno tratamiento hormonal ha demostrado mejorar la calidad de vida. Realizar un asesoramiento
genético y valoración psicológica es fundamental así como una actuación multidisciplinaria orientada a no
poner en duda la identidad sexual del paciente.
C0191 PACIENTE AFECTA DE SÍNDROME BORJESON-FORSSMAN-LEHMANN POR
NUEVA MUTACIÓN EN EL GEN PHF6. LA IMPORTANCIA DEL RECONOCIMIENTO
CLÍNICO DEL FENOTIPO EN MUJERES.
1 2 2 2
Ana Teresa Serrano Antón , Vanesa López González , María José Sánchez Soler , María Juliana Ballesta Martínez ,
2 3
Lidia Rodríguez Peña , Encarna Guillén Navarro
1
Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca El Palmar (Murcia) España
2
Sección de Genética Médica, Servicio de Pediatría. Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca, IMIB-Arrixaca.
(Murcia) España
3
1 Objetivos
El síndrome Borjeson-Forssman-Lehman (BFLS), con patrón de herencia ligado a X, fue descrito
inicialmente en varones. En los últimos años ha emergido un fenotipo asociado a mujeres, con dismorfia
craneofacial específica, discapacidad intelectual, alteraciones endocrinológicas, anomalías esqueléticas y
ectodérmicas. Mutaciones puntuales y deleciones en PHF6 han sido descritas como causales.
Presentamos una paciente diagnosticada de BFLS por mutación nueva en el gen PHF6.
Revisión de historia clínica de paciente diagnosticada de BFLS debido a mutación nueva en PHF6.
3 Resultados
Paciente remitida a los 5 años por retraso psicomotor y lesiones cutáneas lineales hiperpigmentadas.
Segunda hija de padres sanos, no consanguíneos, de origen marroquí, sin antecedentes familiares de
interés. Embarazo, parto y periodo neonatal sin incidencias. Somatometría al nacimiento normal. Retraso
psicomotor y del lenguaje. Retraimiento social y baja tolerancia a la frustración. Visión y audición
conservadas. RM cerebral, EEG, ecocardiografía, ecografía abdominal, serie ósea, cariotipo y estudio
molecular X-frágil normales. Somatometría actual normal. Pelo ralo, cejas arqueadas, desviación
palpebral superior, filtrum corto, labios gruesos y dientes cariados. Braqui-clinodactilia marcada del 5º
dedo de manos, sindactilia cutánea de 2º-3º dedos de pie derecho y primer dedo de pies corto y ancho.
Distrofia ungueal. Lesiones hiperpigmentadas lineales en cuello, axilas, cintura e ingles, y lesión
hipopigmentada abdominal derecha. Valoración oftalmológica normal. CI 74 (discapacidad psicosocial
leve). ArrayCGH (ADN piel hiperpigmentada): normal. Estudio gen IKBKG: normal. Secuenciación gen
PHF6: mutación nonsense c.767C>A, p.S256X en exón 8 que provoca una proteína truncada.
4 Conclusiones
El reconocimiento clínico del fenotipo BFLS en mujeres es fundamental para su diagnóstico precoz,
siendo anomalías esqueléticas e hiperpigmentación lineal signos cardinales. El diagnóstico diferencial
incluye Incontinentia pigmenti, BAFopatías y mutaciones en USP9X. El diagnóstico etiológico permite
ofrecer información pronóstica, dada la posibilidad de afectación multisistémica evolutiva (alteración
tiroidea, oligomenorrea, trastornos psiquiátricos, epilepsia, pérdida auditiva y distrofia retiniana entre
otros), así como asesoramiento genético.
C0192 UTILIDAD DE UN PROGRAMA INFORMÁTICO DE RECONOCIMIENTO FACIAL EN
EL DIAGNÓSTICO ETIOLÓGICO DE RETRASO PSICOMOTOR / DISCAPACIDAD
INTELECTUAL
Laura Morlan Herrador, Inmaculada Garcia Jimenez, Javier Lopez Pison, Lorena Monge Galindo, Jose Luis Peña
Segura, Miguel Lafuente Hidalgo, Amparo Lopez Lafuente, Lorena Lahilla Cuello, Sara Feo Ortega, Gloria Miguel
Llordes, Montserrat Tirado Melero, Ana Rodriguez Valle, Maria Dolores Miramart Gallart, Silvia Izquierdo Alvarez, Maria
Jose Alcaine Villarroya
Hospital Universitario Miguel Servet Zaragoza (Zaragoza) España
1 Objetivos
El retraso global del desarrollo (RGD) y la discapacidad intelectual (DI) son motivos de consulta
frecuentes en la práctica clínica neuropediátrica. La prevalencia oscila entre 1 -10%, de estos, del 50-80%
de los casos no tienen diagnóstico etiológico establecido. Este estudio consiste en evaluar la eficacia del
programa informático “Face2Gene” (FDNA Inc, USA) en la práctica clínica como apoyo al diagnóstico
etiológico en casos de pacientes que acudan a la Consulta de Neuropediatría y de Metabolismo en el
Hospital Universitario Miguel Servet para estudio o seguimiento RGD y DI.
Estudio analítico observacional prospectivo doble ciego. El “Face2Gene” supone una herramienta de
búsqueda y referencia diseñado para uso exclusivo del profesional médico. Mediante el análisis de
manifestaciones clínicas y reconocimiento de rasgos faciales, el programa propone 30 diagnósticos por
paciente. Se trata de correlacionar los hallazgos genéticos de los pacientes que acudan a la consulta con
los diagnósticos propuestos por el programa tras la introducción de los datos clínicos y las fotos del
paciente.
3 Resultados
A día de hoy se han introducido 91 pacientes de edades de 6 meses a 20 años, de los cuales 21 tienen
diagnóstico genético confirmado y el programa ha reconocido a 7 de estos (versión oct-dic2016). 70
pacientes tienen pendientes estudios de array-CGH o panel de secuenciación masiva de DI o estudio
exoma. Se considerará útil si al menos un 10% de los pacientes introducidos, uno de los diagnósticos
propuestos por el programa coincide con los resultados del análisis genético realizado al paciente
4 Conclusiones
Si los resultados son positivos al concluir el proyecto supondría un acortamiento del tiempo de estudio del
paciente, así como un aumento en las tasas de diagnóstico etiológico
C0195 TRES FETOS TRIPLOIDES EN 2016
Beatriz Esquivel Vázquez, Abián Vega Falcón, Ángel Nazco Deroy, Isabel González Villa, Cipriano Manzano Sanz,
Rafael Méndez Medina, Margarita Álvarez De La Rosa, Sandra Afonso Hernández
Hospital Universitario de Canarias San Cristóbal de La Laguna (Santa Cruz de Tenerife) España
1 Objetivos
Se considera que un 1% de las gestaciones es triploide así que es infrecuente detectarla prenatalmente.
Se asocian a retraso de crecimiento intrauterino y dismorfología en cabeza, corazón y extremidades.
Se presentan tres casos de fetos triploides, con datos ginecológicos, citogenéticos y anatomopatológicos
diagnosticados en el último año en nuestro centro.
3 Resultados
Caso1: feto triploide varón de 18 semanas que presenta retrognatia, orejas de implantación baja,
sindactilia, depresión del tabique nasal, hipoplasia pulmonar, cardiomegalia, riñón derecho poliquístico y
signos de inmadurez visceral.
Caso2: feto hembra de 22 semanas que muestra cardiopatía congénita malformativa, orejas de
implantación baja, retrognatia e inmadurez visceral.
Caso3: feto varón de 13 semanas en el que se describe comunicación interventricular alta, defecto en la
unión lumbosacro, orejas de implantación baja, retrognatia e inmadurez visceral.
4 Conclusiones
Presentación de las alteraciones morfológicas coincidentes y no en los tres casos que pueden ayudar a
un diagnóstico prenatal en futuras gestaciones triploides.
C0210 IDENTIFICACIÓN DE UN NUEVO GEN IMPLICADO EN TALLA BAJA: NPPC,
CODIFICANTE DE C-NATRIURETIC PEPTIDE (CNP)
1 2 3 4
Alfonso Hisado Oliva , Alba Ruzafa Martin , Lucia Sentchordi Montané , Mariana F.A Funari , Carolina Bezanilla
5 2 1 2 6
López , Marta Alonso Bernáldez , Jimena Barraza García , Maria Rodriguez Zabala , Antonio M. Lerario , Sara Benito
1 1 7 8 9
Sanz , Miriam Aza Carmona , Angel Campos Barros , Alexander A.L. Jorge , Karen Heath
1
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM) y Unidad Multidisciplinar Displasias Esqueléticas (UMDE),
Hospital Universitario La Paz, Universidad Autónoma de Madrid, IdiPAZ y CIBERER, ISCIII (Madrid) España
2
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz, Universidad Autónoma de Madrid,
IdiPAZ (Madrid) España
3
Servicio de Pediatria, Hospital Universitario Infanta Leonor y Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM) y
Unidad Multidisciplinar Displasias Esqueléticas (UMDE), Hospital Universitario La Paz, Universidad Autónoma de
Madrid, IdiPAZ (Madrid) España
4
Laboratorio de Hormonios e Genetica Molecular (LIM42), Hospital das Clinicas da Faculdade de Medicina,
Universidade de São Paulo (USP) (Sao Paolo) Brasil
5
Servicio de Pediatría, Hospital Universitario Fundación Alcorcón (Madrid) España
6
Unidade de Endocrinologia Genetica (LIM25), Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo (USP) y
Department of Internal Medicine, Division of Metabolism, Endocrinology and Diabetes, University of Michigan (Sao
Paolo) Brasil
7
IdiPAZ y CIBERER, ISCIII (Madrid) España
8
Laboratorio de Hormonios e Genetica Molecular (LIM42), Hospital das Clinicas da Faculdade de Medicina,
Universidade de São Paulo (USP) y Unidade de Endocrinologia Genetica (LIM25), Faculdade de Medicina da
Universidade de São Paulo (USP) (Sao Paolo) Brasil
9
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM) y Unidad Multidisciplinar Displasias Esqueléticas (UMDE),
Hospital Universitario La Paz, Universidad Autónoma de Madrid, IdiPAZ y CIBERER, ISCIII
1 Objetivos
El Péptido C-Natriurético (CNP) y su principal receptor, NPR-B, intervienen en la homeostasis del
cartílago y formación ósea endocondral. La unión de CNP al receptor NPR-B induce la síntesis de cGMP,
activando una cascada de señalización intracelular. CNP y NPR-B están codificados por los genes NPPC
(péptido precursor natriurético-C) y NPR2 (péptido natriurético receptor 2), respectivamente. Si bien se
han descrito mutaciones de NPR2 en pacientes con displasias esqueléticas y existen varios modelos de
ratón knock-out de Npr2 y Nppc con displasia esquelética, hasta la fecha no se han descrito mutaciones
en NPPC en humanos.
Se analizó el gen NPPC en 668 pacientes: 357 con talla baja desproporcionada y 311 con talla baja
idiopática (TBI) con herencia autosómica dominante mediante secuenciación Sanger y 29 familias
adicionales de TBI en un estudio de exomas en curso. La patogenicidad de las variantes identificadas se
determinó funcionalmente mediante análisis desu capacidad de sintetizar cGMP utilizando un ELISA de
cGMP.
3 Resultados
Se identificaron dos variantes de NPPC en heterocigosis, localizadas en el anillo CNP, altamente
conservado. Ambas variantes fueron incapaces de activar NPR-B en homocigosis y mostraron una
reducción significativa en la síntesis de cGMP en heterocigosis, cuando se cotransfectaron con la proteína
salvaje, confirmando así su patogenicidad. Curiosamente, una de las dos variantes ha sido previamente
vinculada a anomalías esqueléticas en un modelo de ratón mutante de Nppc: “long-bone abnormality
(lbab)”.
4 Conclusiones
Nuestros resultados demuestran por primera vez que mutaciones en NPPC (CNP) causan talla baja de
herencia autosómica dominante en humanos. Las mutaciones NPPC cosegregan con un fenotipo de talla
baja y manos pequeñas en ambas familias. El tratamiento con análogos de CNP, actualmente en ensayo
clínico para el tratamiento de la acondroplasia, parece un enfoque terapéutico prometedor, ya que
sustituye directamente a la proteína defectuosa.
C0218 RENDIMIENTO DE UN PANEL NGS PARA EL DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE
DISPLASIAS ESQUELÉTICAS
1 2 1 3
Jimena Barraza García , Carlos Iván Rivera Pedroza , Miriam Aza Carmona , Lucia Sentchordi Montané , Elena
1 1 1 1 1 2
Vallespin , Elena Mansilla , Alberta Belinchón , Sara Benito Sanz , Angela del Pozo , Carolina de la Torre , Pablo
1 1 4 1
Lapunzina , Fernando Santos Simarro , Clínicos remitentes , E Heath
1
Institute of Medical and Molecular Genetics (INGEMM) y Unidad Multidisciplinaria de Displasias Esqueléticas (UMDE),
IdiPAZ, Hospital Universitario La Paz, Universidad Autónoma de Madrid, Madrid, España; CIBERER, ISCIII, Madrid,
España Madrid (Madrid) España
2
IdiPAZ, Hospital Universitario La Paz, Universidad Autónoma de Madrid, (Madrid) España
3
IdiPAZ, Hospital Universitario La Paz, Universidad Autónoma de Madrid, Madrid, España; Servicio de Pediatría,
Hospital Universitario Infant (Madrid) España
4
Clínicos remitentes de hospitales nacionales e internacionales
1 Objetivos
Objetivo: Las displasias esqueléticas (DE) son un grupo numeroso y heterogéneo de enfermedades con
alta variabilidad fenotípica y genotípica, con 436 entidades clasificadas en 42 grupos, y 364 genes
causales de acuerdo a la Nosología revisada del 2015 [Bonafé et al., 2015]. Con el objetivo de mejorar el
diagnóstico clínico y molecular de las DE, se analizó una cohorte de casos utilizando un panel de Next-
generation sequencing (NGS) de diseño propio.
Método: Se han evaluado clínicamente y radiológicamente 304 probandos con DE de etiología molecular
desconocida. El ADN se analizó utilizando el panel SKELETALSEQ.V3-V6 (n = 315-368 genes) en una
plataforma MiSeq/NextSeq. Todas las variantes fueron confirmadas por secuenciación Sanger o array-
CGH. Cuando fue posible, se realizó análisis familiar y funcional.
3 Resultados
Resultados: En 155/304 (51%) probandos fueron identificadas la mutación o mutaciones causales;
86/140 (61.4%) presentaban una displasia clasificada como grave y 69/164 (42.1%) como leve. Se
detectaron 172 diferentes mutaciones, siendo más frecuentes las variantes missense (118), nonsense
(19), y las deleciones pequeñas (17). Los genes en los que más se identificaron variantes fueron:
COL2A1 (19), COL1A1 (16), ACAN (10) y DYNC2H1 (8). Se identificaron mutaciones en genes muy poco
frecuentes: POP1 (displasia espondilometafisaria con talla baja severa, similar a displasia anauxética),
POC1A (síndrome SOFT), EFTUD2 (síndrome de Treacher-Collins atípico), GPX4 (displasia
espondilometafisiaria tipo Sedaghatian), y NEK1 (síndrome de costilla corta-polidactilia tipo II o de
Majewski), etc.
4 Conclusiones
Conclusiones: El panel SKELETALSEQ es una herramienta poderosa en la determinación de las
mutaciones causales en los pacientes con DE, con un rendimiento diagnóstico del 51% hasta el momento.
La NGS se ha convertido en una herramienta central para el diagnóstico molecular de las DE, mejorando
así el manejo, seguimiento y tratamiento de los afectados. También permite ampliar el espectro fenotípico
de trastornos conocidos, y descubrir nuevos genes relacionados con las DE.
C0220 IDENTIFICACIÓN DE FGF9 COMO NUEVO GEN CAUSANTE DE
CRANEOSINOSTOSIS EN HUMANOS.
1 2 3 2
Maria Rodriguez Zabala , Miriam Aza Carmona , Carlos I. Rivera Pedroza , Alberta Belinchón Martínez , Isabel
1 2 4 4 5
Guerrero , Jimena Barraza García , Elena Vallespin , Angela del Pozo , Marc J. Glucksman , Fernando Santos
2 2
Simarro , Karen E. Heath
1
IdiPAZ. Madrid (Madrid) España
2
IdiPAZ; Unidad Multidisciplinar de Displasias Esqueléticas (UMDE), Hospital Universitario La Paz; Centro de
Investigación Biomédica en Red de (Madrid) España
3
IdiPAZ; Unidad Multidisciplinar de Displasias Esqueléticas (UMDE), Hospital Universitario La Paz. (Madrid) España
4
IdiPAZ; Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER), Instituto Carlos III. (Madrid)
España
5
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Chicago Medical School, Rosalind Franklin University of Medicine
and Science. (North Chicago, IL) Estados Unidos
1 Objetivos
La craneosinostosis es una alteración congénita caracterizada por una fusión prematura de las suturas
craneales. Gran parte de los síndromes de craneosinostosis se producen por mutaciones en
losreceptores de factores de crecimiento de fibroblastos (FGFRs), involucrados en el desarrollo y
homeostasis de los huesos y articulaciones. La activación de estos receptores se realiza mediante su
unión a los factores de crecimiento de fibroblastos (FGFs).
El objetivo es identificar y caracterizar el defecto molecular en una familia con craneosinostosis y
sinostosis múltiple, en la que se han descartado mutaciones en los FGFRs.
Se analizaron el probando y su padre mediante un panel de secuenciación masiva de displasias
esqueléticas (Skeletal.Seq.V4), confirmándose la variante identificada mediante secuenciación Sanger.
Se estudió la patogenicidad de la variante mediante modelado estructural de la proteina mutante, estudios
de homodimerización del ligando e interacción ligando-receptor mediante DuoLink-PLA in situ, y análisis
de la activación de la vía MAPK mediante Western blot.
3 Resultados
Se identificó una mutación missense en heterocigosis del gen FGF9, c.184A>G (p.Arg62Gly), que
cosegrega con el fenotipo en la familia. Esta mutación reduce significativamente la capacidad de
homodimerización de FGF9 así como la de su unión al receptor FGFR3, e inhibe la activación de la vía de
señalización de MAPK.
4 Conclusiones
Se ha identificado una nueva mutación patogénica en FGF9 en una familia con craneosinostosis y
sinostosis múltiple. Hasta ahora, una única mutación en FGF9 ha sido descrita en humanos, aunque en
una familia con sinostosis múltiple en la que ningún miembro presentaba craneosinostosis. Sin embargo,
el ratón espontáneo Eks (Elbow knee synostosis), con otra mutación missense en Fgf9, presenta un
fenotipo parecido al de la familia estudiada, con fusiones prematuras de suturas craneales y múltiples
fusiones de articulaciones. Por tanto, hemos demostrado, por primera vez, que mutaciones en FGF9
pueden causar craneosinostosis en humanos.
C0221 APLICACIONES DEL EXOMA CLÍNICO EN EL DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES
DE ETIOLOGÍA GENÉTICA DESCONOCIDA
1 1 1 1
Alfonso Andújar Pastor , Gracia Hernández Poveda , Alejandro Romera López , Diego Cantalapiedra De la Fuente ,
1 1 1 2 1
Elena Mesa Rísquez , Sandra Valverde , Clara Casañ Martínez , Oscar Rodríguez Cruz , Guillermo Marco Puche ,
1 2 2 1 1
Carmen Collado Micó , Raquel Rodríguez De Pablos , Khalid Al-Thihli , Celia Buades Gomis , Diana Valero Hervás ,
1
Sonia Santillán Garzón
1
Sistemas Genómicos S.L. Paterna (Valencia) España
2
Sultan Qaboos University Hospital (Al Khoudh) Sultanate of Oman
1 Objetivos
El uso clínico del exoma, especialmente en pacientes con enfermedades heterogéneas, trastornos del
neurodesarrollo, diagnóstico diferencial de patologías solapantes o fenotipos ambiguos, incrementa las
posibilidades de llegar al diagnóstico genético. El diseño y desarrollo de una estrategia precisa de análisis
es esencial para su implementación en la práctica clínica.
Un total de 52 pacientes consecutivos fueron analizados mediante exoma clínico (7448 genes asociados
a enfermedad). Las secuenciación y el análisis bioinformático se realizó utilizando la captura
SureSelectXT Human All Exon 50Mb V5 (Agilent), la plataforma Illumina HiSeq2500 (Illumina), y un
pipeline propio. El filtrado y selección de variantes se realizó teniendo en cuenta el patrón de herencia, el
efecto de la variante, la frecuencia alélica y la información presente en las bases de datos (HGMD, LOVD
y NCBI ClinVar).
3 Resultados
El análisis inicial mediante exoma de las muestras incluidas en el estudio identificó una media aproximada
de 35.000 variantes/individuo. Tras la aplicación del algoritmo diagnóstico el número de variantes
candidatas se redujo a 2,58 variantes/paciente. El 49,25% fueron variantes deletéreas o descritas en
HGMD como variantes patogénicas o probablemente patogénicas, frente al 50,75% de variantes de
significado incierto (VSI). En el 26% de los casos se identificó la mutación responsable del cuadro clínico
del paciente. En un 26% adicional se identificaron variantes patogénicas o probablemente patogénicas en
heterocigosis asociadas a enfermedades autosómicas recesivas relacionadas con la clínica descrita.
4 Conclusiones
• Los resultados obtenidos indican que la metodología utilizada para análisis de exoma es eficiente
en el estudio de enfermedades genéticas de etiología desconocida.
• La información clínico-genética de los pacientes resulta de elevada importancia para aumentar la
eficiencia diagnóstica del exoma.
• La realización de estudios funcionales sobre las VSI permitiría confirmar o descartar la
implicación de estas variantes en el desarrollo de la patología, incrementando el poder
diagnóstico del exoma.
C0223 CASO CLÍNICO: DOS DISPLASIAS ESQUELÉTICAS CON HERENCIA RECESIVA
EN UNA MISMA FAMILIA
1 1 2 1 3
Miriam Aza , Fernando Santos Simarro , Lucia Sentchordi Montané , Sara Benito Sanz , Elena Vallespin , Juan Carlos
4 3 4 1 1
Silla , Angela del Pozo , Kristina Ibáñez Garikano , Pablo Lapunzina , Karen Elise Heath
1
INGEMM, UMDE, CIBERER (Madrid) España
2
Hospital Infanta Leonor, INGEMM, UMDE (Madrid) España
3
INGEMM, CIBERER (Madrid) España
4
1 Objetivos
Dos hermanos, hijos de padres sanos no consanguíneos, con presentación clínica diferente. El niño
presenta tórax estrecho y pectus carinatum, mientras que la niña presenta acortamiento de manos, pies y
tronco y opacidad corneal bilateral siendo los mucopolisacaridos en orina normales. Estos hallazgos junto
con los datos radiológicos sugieren dos displasias esqueléticas diferentes, respectivamente, una forma
leve de displasia torácica asfixiante y, o bien una displasia espondiloepifisiaria tarda o una
mucopolisacaridosis tipo IV. El objetivo es identificar la causa genética responsable de la displasia
esquelética específica de cada uno de los hermanos.
Búsqueda de mutaciones en los pacientes con el panel de secuenciación masiva (NGS) de displasias
esqueléticas, SkeletalSeqV4 y V5 (327 y 362 genes, respectivamente). La validación y los estudios de
cosegregacion genotipo-fenotipo de las variantes identificadas fueron realizados mediante secuenciación
Sanger.
3 Resultados
El niño presenta dos variantes de significado incierto en el gen DYNC2H1: c.(5114T>C);(8098C>T),
p.[(Leu1705Pro);(Leu2700Phe)] en heterocigosis compuesta. La niña presenta dos variantes en el gen
GLB1: c.(248A>G);(1768C>T), p.[(Tyr83Cys)];(Arg590Cys)] en heterocigosis compuesta, previamente
descritas en pacientes con mucopolisacaridosis tipo IVB y gangliosidosis tipo I, respectivamente. Todas
las variantes están ausentes en bases de datos de población control, afectan a aminoácidos altamente
conservados, están predichas como patogénicas por diferentes herramientas de predicción de
patogenicidad y han sido heredadas de cada uno de los padres.
4 Conclusiones
El niño presenta displasia torácica con costillas cortas (MIM 613091), una ciliopatía causada por
mutaciones en homocigosis o heterocigosis compuesta en DYNC2H1; mientras que su hermana presenta
una enfermedad lisosomal, mucopolisacaridosis tipo IVB (MIM 253010), causado por mutaciones
bialélicas en GLB1. Por tanto, el estudio molecular mediante NGS ha permitido identificar el defecto
molecular causante del cuadro clínico específico de cada uno de los hermanos, confirmando que ambos
presentan patologías diferentes de herencia autosómica recesiva, aunque los padres no son
consanguíneos.
C0229 NUEVA MUTACIÓN P.SER28STOP EN FAMILIA CON COROIDEREMIA
1 2 2
Rosario Marín Iglesias , Raquel de la Varga Martínez , Francisco Mora López
1
2
España
1 Objetivos
La coroideremia (CHM [MIM-30100]) es una distrofia coriorretiniana ligada al X caracterizada por una degeneración
progresiva de la coroides, el epitelio pigmentario de la retina y la retina. Su prevalencia se estima en 1/50.000-
1/100.000.
Los varones afectados desarrollan ceguera nocturna en su adolescencia, seguido por la pérdida de la visión
periférica y llegando a la ceguera a mediados de la edad adulta. Las mujeres portadoras son generalmente
asintomáticas, pero el examen del fondo de ojo puede mostrar áreas irregulares de atrofia coriorretiniana que
representan áreas de origen clonal con diferentes patrones de inactivación del cromosoma-X.
La CHM se ha relacionado con mutaciones en el gen CHM situado en la región Xq21.2. Codifica para la proteína REP-
1, GTPasa ligada a Ras, que controlan el tráfico de proteínas secretoras y endocíticas, y la ausencia de esta
activación postraduccional da como resultado una pérdida de la capacidad de asociarse con las membranas
donadoras, conduciendo así a la muerte celular.
Presentamos el caso de un hombre de 30 años con diagnóstico clínico de CHM. Como antecedentes familiares, tiene
un hermano con la misma clínica.
Se extrajo ARN y se retrotranscribió a c-DNA. Se amplificaron en 4 PCRs la región codificante del gen CHM, que
contiene 15 exones. Posteriormente se secuenció el c-DNA y se confirmaron los resultados en el ADN genómico.
3 Resultados
Se detecta en el paciente y hermano una sustitución de citosina (C) por guanina (G) en la posición 83 del ARNm
(c.83C>G) en hemicigosis. Esta sustitución provoca la aparición de un codón de STOP prematuro: p.Ser28Stop
(S28X).
4 Conclusiones
La variante p.Ser28Stop no está descrita entre las mutaciones causantes de coroideremia. Sin embargo, dada su
naturaleza, se puede considerar que se trata de una mutación patogénica y no de un polimorfismo benigno. El
resultado confirma el diagnóstico de coroideremia.
C0230 DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDAD DE MILROY EN DOS FAMILIAS CON
LINFEDEMA Y DISPLASIA UNGUEAL
1 1 2 3 4
Raquel de la Varga Martínez , Francisco Mora López , David Jiménez Gallo , Mercedes Pico , Rosario Marín Iglesias ,
2
Mario Linares Barrios
1
España
2
UCG de Dermatología Médico-Quirúrgica y Venereología. Hospital Universitario Puerta del Mar (Cádiz) España
3
Unidad de Dermatología. Hospital Universitario Puerto Real (Cádiz) España
4
1 Objetivos
El linfedema primario (LP) es clínicamente y genéticamente heterogéneo. LP es causada por defectos anatómicos o
funcionales en el sistema linfático, provocando hinchazón crónica de ≥1 parte/s del cuerpo. Hasta la fecha,
mutaciones en 7 genes (CCBE1/FOXC2/GATA2/GJC2/KIF11/SOX18/FLT4) han sido identificados como causantes de
trastornos en los que LP es característica principal.
La enfermedad de Milroy (EM) es una forma de LP congénito con herencia autosómica dominante, expresión
variable y penetrancia reducida. El edema suele ser bilateral, indoloro y crónico. Otras manifestaciones clínicas
incluyen uñas de los pies oblicuas hacia arriba, pliegues en los dedos del pie, papilomas y venas prominentes en
piernas. La EM es causada por mutaciones en FLT4 que codifica el receptor del factor de crecimiento endotelial
vascular-3 (VEGFR-3) que regula el crecimiento, movimiento y supervivencia de las células linfáticas.
Presentamos el caso de dos niños de 1 y 11 años, respectivamente, que presentan edema y displasia ungueal en
ambos pies. Como antecedentes familiares presentan linfedema la prima y abuela paternas del primer caso, y el
padre del segundo caso.
Se secuenciaron los exones del 17-26 del gen FLT4, que codifican el dominio tirosina-quinasa del VEGFR-3, en el
ADN genómico de los pacientes y padres.
3 Resultados
Se detecta en ambos pacientes una sustitución de guanina (G) por citosina (C) en la posición 2797 del ARNm del gen
(c.2797G>C) en heterocigosis que afecta al dominio tirosina-quinasa. Esta sustitución provocaría un cambio de
glicina por arginina en el aminoácido 933 de la proteína: p.Gly933Arg. En ambos casos, la mutación se heredó por
vía paterna.
4 Conclusiones
El resultado confirma el diagnóstico de EM en los pacientes. La mutación G933R ha sido descrita como causante de
EM. El padre del primer caso, es portador de la mutación pero no tiene clínica por la penetrancia reducida de la
enfermedad.
C0231 LINFOHISTIOCITOSIS HEMOFAGOCÍTICA EN UN PACIENTE CON MUTACIÓN
G93D EN EL GEN SH2D1A
1 1 2 1
Raquel de la Varga Martínez , Francisco Mora López , Rosario Marín Iglesias , Carmen Rodríguez , Almudena
1
Sampalo
1
España
2
1 Objetivos
La linfohistiocitosis hemofagocítica (LHH) se caracteriza por una activación no controlada del sistema inmune que
conlleva a una situación de hiperinflamación sistémica que promueve la infiltración visceral de linfocitos e
histiocitos con capacidad hemofagocítica.
El síndrome linfoproliferativo ligado al cromosoma X (LPX) es una inmunodeficiencia hereditaria desencadenada por
una respuesta inmune inadecuada a una infección por el virus Epstein-Barr (VEB), que comúnmente se asocia con
LHH siendo una de las principales característica clínica de LPX (60%), junto con disgammaglobulinemia (30%) y
desordenes linfoproliferativos (30%).
Presentamos el caso de un niño de 10 años sin antecedentes familiares de inmunodeficiencia que presentaba fiebre
de 39ºC, síndrome constitucional, coloración ictérica y dolor muscular y abdominal. Presenta linfocitosis en sangre
periférica y las pruebas serológicas sugieren infección por VEB.
Se realizó inmunofenotipo de sangre periférica, estudio citológico de médula ósea y secuenciación de nueva
generación (MiSeq, Illumina) de la región codificante y regiones intrónicas adyacentes (±8pb) de los genes
relacionados con enfermedades de la desregulación inmunitaria-LHH:
AP3B2,BLOC1S6,LYST,PRF1,RAB27A,SH2D1A,STX11,STXBP2, UNC13D y XIAP.
3 Resultados
El inmunofenotipo era sugestivo de síndrome linfoproliferativo. En el estudio del aspirado medular se observó
fenómenos de hemofagocitosis de hematíes.
Se detectó la variante c.278G>A en hemicigosis en el gen SH2D1A, confirmado por secuenciación Sanger. Esta
variante no se detectó en la madre considerándose de novo en el paciente.
4 Conclusiones
La variante c.278G>A del gen SH2D1A se ha descrito previamente en la literatura como una mutación en un solo
paciente con enfermedad linfoproliferativa. Esta mutación se encuentra en el dominio SH2, una región altamente
conservada de la proteína. La transición G>A provocaría en la proteína un cambio de aminoácido no conservativo de
glicina por aspartato (p.Gly93Asp, G93D). Finalmente, el paciente fue diagnosticado de XLP con mutación en el gen
SH2D1A que presentó LHH primaria asociada a infección por VEB.
C0232 SINDROME DE COHEN: APRENDER A IDENTIFICARLO
1 2 2 2
Antonio Martinez Monseny , Mercedes Serrano Gimaré , Mercedes Bolasell Girgas , Francesc Palau Martinez
1
2
1 Objetivos
El síndrome de Cohen (SC) es una enfermedad rara, con herencia autosómica recesiva, asociada con
dismorfismo facial, retraso del desarrollo psicomotor y discapacidad visual. Es debida a mutaciones en el
gen VPS13B situado en el brazo largo del cromosoma 8 (8q22.2) que codifica una proteína de función
desconocida.
Se describen los datos clínicos y genéticos del único caso con diagnóstico genético en el Hospital Sant
Joan de Déu durante los últimos 10 años.
3 Resultados
Niño de 3 años con retraso del desarrollo psicomotor, microcefalia y miopía precoz. Antecedente de CIR
simétrico, primer gemelo de gestación bicorial-biamniótica. Las dismorfias faciales incluyen cejas
espesas, pestañas largas y rectas, fisuras palpebrales descendentes con contorno ondulado
característico, punta nasal picuda, hipoplasia malar, columnela prominente, hipoplasia de narinas, filtrum
corto, labio superior fino que deja visibles los incisivos superiores, comisuras bucales hacia
abajo, retrognatia y pits en la parte posterior del hélix. Se objetiva hiperlaxitud articular con dedos largos.
Presenta rasgos TEA de predominio en el área del lenguaje y conductas desadaptativas. A nivel analítico
destaca neutropenia oscilante con estudio aloinmune negativo. Se realiza estudio de secuenciación
detectando mutación patogénica c.5996_5997delCT (p.leu2000AlafsTer2) situada en el exón 35 en gen
VPS13B y deleción de los exones 34 a 39 sobre el alelo restante, compatible con SC.
4 Conclusiones
El SC supone un problema en el diagnóstico, particularmente en los niños más pequeños, debido a la
gran variabilidad clínica descrita en la literatura y a la ausencia de criterios diagnósticos estandarizados.
Es necesario determinar mejor la variabilidad fenotípica de estos pacientes y establecer criterios
diagnósticos para ayudar a describir la historia natural de la enfermedad. Se benefician de terapia
ocupacional y seguimiento multidisciplinar. Es necesario controlar el riesgo de infecciones por la
neutropenia y asegurar un seguimiento visual por la posible progresión a retinopatía pigmentaria.
C0234 MUTACIÓN EN EL RECEPTOR DE ANDRÓGENOS COMO CAUSA DEL SÍNDROME
DE INSENSIBILIDAD ANDROGÉNICA COMPLETA
1 2 1 1
Maria Mercedes Navarro De Miguel , Lourdes Escriva Cholbi , Miriam García Bautista , Irene González Nicolau , Rosa
2 1 1 1 1
Maria Arrese Caballo , Ana Jaén Jorquera , Tatiana Molina García , Paula Flor Del Olmo , Patricia Boix Cutillas , Josep
2 2 2 1 1
Mut Buigues , Enrique Jiménez Santos , Soraya Borraz Gracia , Alberto Múrtula Corbí , Noemí Garrigós Gómez
1
Centro Inmunológico de Alicante San Juan -Alicante (Alicante) España
2
Hospital Marina Salud.Denia (Alicante) España
1 Objetivos
Establecer el diagnóstico genético de una niña remitida con sospecha de disgenesia gonadal mixta.
Paciente: niña de 6 años remitida por sospecha de disgenesia gonadal mixta. La paciente presenta
genitales externos femeninos normales. En una intervención de hernia inguinal derecha se describe un
hallazgo incidental de una gónada, que tras su biopsia intraoperatoria se define como testículo. Las
imágenes de RM y de ecografía pélvica muestran el saco rectovesical libre sin presencia de útero, ovario,
ni restos anexiales.
Diagnóstico clínico: anamnesis, antecedentes familiares, análisis hematológico, bioquímico y hormonal en
sangre.
Estrategia de diagnóstico genético. Citogenética Convencional: Cultivo de linfocitos estimulados con
fitohemaglutinina durante 72 horas. FISH: hibridación con sonda LSI SRY (Yp11.3) en muestra de sangre
periférica de paciente. Secuenciación Sanger de la región codificante completa y uniones intron-exon del
gen AR.
3 Resultados
Los niveles de hormonas sexuales masculinas son residuales (testosterona: 0,05ng/ml;
dihidrotestosterona: 0,05ng/ml). Cariotipo masculino normal 46,XY. Detección por FISH de gen SRY,
confirmando su presencia localizada en un autosoma grupo G. En la secuenciación del gen AR se
caracterizó una mutación de tipo nonsense en hemicigosis: c.58C>T; p.(Arg20*) [NM_000044.3]. Esta
misma mutación ha sido previamente descrita en pacientes con el sindrome de insensibilidad completa a
los andrógenos o síndrome de Morris.
4 Conclusiones
El resultado del estudio molecular con la detección de una mutación patogénica en el gen AR confirma el
diagnóstico clínico de síndrome de insensibilidad androgénica completa (SICA). Los pacientes con SICA
muestran un mayor riesgo de malignización de las gónadas y precisan de seguimiento regular. El estudio
genético de familiares a riesgo, un adecuado asesoramiento genético, así como apoyo psicológico son
necesarios para un correcto manejo del paciente y sus familiares.
C0246 IDENTIFICACIÓN DE UNA DUPLICACIÓN DE LA CITOBANDA 17P13.3, QUE
INCLUYE EL GEN BHLHA9, EN UN PACIENTE CON ECTRODACTILIA.
Isabel Ochando Sanchez, Antonio Urbano Carrillo, Marina Sanchez Soler, Estefania Montoya Diaz, Rosario Vazquez
Conejero, Joaquin Rueda Puente
Unidad Genetica Vistahermosa Alicante (Alicante) España
1 Objetivos
La ectrodactilia o síndrome mano partida-pie partido (SHFM) es una alteración congénita, heterogénea,
que se caracteriza por la ausencia de uno o más dedos centrales de las manos y de los pies.
Consecuentemente, las manos o los pies asumen una forma que recuerda a las pinzas de una langosta.
En OMIM está descrito el síndrome SHFM con deficiencia de huesos largos (SHFLD, MIM#119100) que
se asocia, en estudios de ligamiento en diferentes familias, a duplicaciones de la región 17p13.3
(MIM#612576, SHFLD3) donde se localiza el gen candidato responsable del síndrome BHLHA9, que
codifica un factor de transcripción que se expresa en las extremidades en formación.
Es un síndrome autosómico dominante con penetración incompleta, menor al 50%, expresividad variable,
pudiendo afectar a una o más extremidades y con un sesgo sexual claro, con afectación muy superior en
varones respecto de mujeres.
El paciente objeto del presente estudio es un varón de 6 meses de edad que presenta ectrodactilia en
ambas manos, con dos dedos en la mano izquierda y tres en la derecha. No presenta otras alteraciones
aparentes ni antecedentes familiares. Nacido de un embarazo obtenido mediante ICSI con gametos
propios en el que se realizó SGP. Se transfirieron dos embriones que nacieron a término, una niña,
aparentemente sin alteraciones, y un niño con ectrodactilia.
3 Resultados
Se realizó al paciente un CGH-array (KaryoNIM® Prenatal 60K) y se detectó una duplicación de la
citobanda 17p13.3, coordenadas genómicas 1.092.577-1.256.253, de 164 Kb que incluye 3 genes OMIM:
BHLHA9, TUSC5 y YWHAE. La ectrodactilia se asocia con la duplicación del gen BHLHA9. La madre del
paciente no presenta la duplicación.
4 Conclusiones
En casos de aplasia de huesos largos o ectrodactilia, que no incluya las cuatro extremidades, debe
considerarse el estudio de duplicaciones en el gen BHLHA9.
C0249 ANÁLISIS DE ARRAYS-CGH EN DOS PACIENTES PEDIÁTRICOS AFECTADOS DE
DOS SÍNDROMES DE CAUSA DESCONOCIDA
1 2 2 2 2 2 2
María José Gamundi , Emma Borràs , Imma Hernan , Begoña Mañé , Beatriz Pascual , Ramon Vidal , Miguel Carballo
1
Hospital de Terrassa, Unidad de Genética Molecular Terrassa (Barcelona) España
2
Hospital de Terrassa (Barcelona) España
1 Objetivos
Determinar la causa genética de dos casos pediátricos con síndromes de etiología desconocida remitidos
desde la Unidad de Neuropediatría.
El primer caso es una niña de 7 años con dismorfias menores, disfagia madurativa, incoordinación
deglutoria, laringomalacia, retraso psicomotor, cisterna magna cerebral agrandada e hipoplasia del vermis
inferior, entre otros. Se realizó cariotipo, estudio molecular del síndrome Opitz G/BBB dominante y ligado
al X. Finalmente se realizó un array CGH.
El segundo caso es un niño de 9 años con posible trastorno del espectro autista con déficit cognitivo,
fenotipo peculiar y presencia de quistes renales. Se realizó cariotipo y array CGH.
3 Resultados
En el primer caso, el cariotipo y el estudio molecular del síndrome Opitz G/BBB resultaron normales. En el
estudio molecular por array CGH se detectó una duplicación de 1.39 Mb en la región 7q11.23, que solapa
al 100% con la microduplicación 7q11.23 que causa en los pacientes portadores diversas dismorfias y una
gran variedad de problemas neurológicos y de conducta.
En el segundo caso, el cariotipo resultó normal y el estudio por array CGH reveló una deleción de 1.39 Mb
en la región 17q12, que solapa al 100% con el síndrome de quistes renales y diabetes (RCAD) o MODY
5, disgenesia mulleriana y características asociadas, y susceptibilidad al espectro autista y esquizofrenia.
4 Conclusiones
Dada la alta similitud entre la clínica presente en los pacientes estudiados y la clínica observada en otros
pacientes portadores de las variantes detectadas, a falta del estudio familiar, es muy probable que las
variantes detectadas por array CGH sean la causa de las patologías de los dos pacientes. Un estudio
clínico exhaustivo, junto con la tecnología de arrays CGH y la búsqueda bibliográfica y en bases de datos,
es crucial para la caracterización de síndromes aparentemente desconocidos.
C0250 CARACTERIZACIÓN DEL SÍNDROME DELECIÓN 1Q44
1 2 3 3
Antonio Martinez Monseny , Patricia Fuentes Pita , Antonio Martinez Monseny , Mercedes Serrano Gimaré , Mercedes
3 3
Bolasell Girgas , Francesc palau Martinez
1
2
Hospital Clínico de Santiago de Compostela (Santiago de Compostela) España
3
1 Objetivos
El síndrome de microdeleción 1q44 (1q44) es una patología infrecuente con una prevalencia estimada de
<1/1000000 de individuos. En este trabajo pretendemos la mejor caracterización del síndrome a través del
estudio de una cohorte de pacientes.
se presentan las características clínicas y genéticas de un grupo de 6 pacientes menores de 18 años
vistos en el Hospital Sant Joan de Déu y procedentes de diferentes puntos de España.
3 Resultados
Se obtiene un grupo de 6 pacientes, 4 de ellos varones y 2 mujeres, con edades entre los 3 y los 16 años.
Entre los genes incluidos en la deleción: AKT3, ZNF238, HNRNPU, FAM36A, NCRNA00201. En todos los
casos el estudio familiar por cariotipo fue normal. Clínicamente todos los pacientes presentan una
microcefalia con hipocrecimiento, hipotonía generalizada y dismorfismo facial característico. La mayoría
precisan ayuda para la deambulación siendo únicamente uno autónomo. Todos los pacientes tienen
dificultad para la deglución, recibiendo alimentos triturados y líquidos espesados. Destaca un lenguaje
escaso o ausente con un grado variable de discapacidad intelectual, con un retraso medio de 2,5 años
(escala Haizea-Llevant para los niños menores de 6 años). Todos presentan epilepsia de comienzo antes
del año de vida con un buen control con 1 o 2 fármacos antiepilépticos. En la neuroimagen, 2 de ellos
presentan hipoplasia del cuero calloso y un paciente con agenesia. Encontramos otras alteraciones
presentes como hipospadias o hipertensión arterial no podemos correlacionarlas de forma clara con el
síndrome.
4 Conclusiones
El análisis presentado aquí es uno de los grupos de pacientes con deleción 1q44 más grandes publicados
hasta la fecha. Las características constantes son la microcefalia, la discapacidad intelectual con
afectación del lenguaje, la hipotonía, la epilepsia y fenotipo facial sugestivo. Es importante el seguimiento
multidisciplinar, la estimulación precoz y el control de las crisis para mejorar el pronóstico de estos
pacientes.
C0262 HIALINOSIS SISTÉMICA INFANTIL: CAUSA DE LLANTO INTENSO CON LA
MOVILIZACIÓN PASIVA DESDE EL NACIMIENTO
1 2 2 2
Didac Casas-Alba , Rosa María Pino-Ramírez , Laia Alsina Manrique de Lara , Esperanza Natividad Castejón Ponce ,
2 2 2
Sergi Navarro Vilarrubí , Belén Pérez Dueñas , Alfredo García-Alix Pérez
1
Hospital Sant Joan de Deu Esplugues de Llobregat (Barcelona) España
2
1 Objetivos
Descripción de un caso de hialinosis sistémica infantil, una enfermedad extremadamente rara de herencia
autosómica recesiva que se caracteriza por acumulación de sustancia hialina en partes blandas debido a
mutaciones del gen ANTXR2.
Revisión de historia clínica.
3 Resultados
La paciente fue una niña de padres sanos con consanguinidad de tercer grado originarios de Marruecos,
con 3 hermanos sanos. El embarazo y el parto a término cursaron sin incidencias. El peso al nacimiento
fue 3.480g (0,41DE), la longitud 50cm (0,01DE) y el perímetro cefálico 36cm (0,92DE).
Al nacer presentaba puente nasal deprimido y amplio, nariz corta y respingona y rizomelia de
extremidades superiores. De forma progresiva desarrolló macrocefalia con dolicocefalia, estrechamiento
bitemporal y abombamiento frontal y occipital, hipertrofia gingival con pápulas blanquecinas, máculas
hiperpigmentadas sobre prominencias óseas y nódulos en boca y pabellones auriculares.
Los hallazgos más llamativos fueron marcada hipomovilidad espontánea, rigidez articular y llanto intenso
con la más mínima movilización pasiva desde el nacimiento que empeoró progresivamente. La rigidez
articular evolucionó hacia artrogriposis múltiple. El electromiograma mostró hallazgos compatibles con
patrón miopático. Se descartaron enfermedades mitocondriales, lisosomales, peroxisomales y defectos de
la glicosilación.
A los 4 meses apareció diarrea persistente, hipoalbuminemia e hipogammaglobulinemia secundarias a
enteropatía pierde proteínas. La endoscopia mostró linfangiectasia intestinal. La niña presentó un
empeoramiento progresivo y falleció con 8 meses. La reacción en cadena de la polimerasa y
secuenciación directa de exones y regiones intrónicas flanqueantes del gen ANTXR2 (cromosoma
4q21.21), mostró una mutación en homozigosis c.903dup (p.Ser302llefs*16), presente en heterozigosis en
los padres no afectos.
4 Conclusiones
El dolor intenso con la movilización pasiva que condiciona rigidez y acinesia extrema desde los primeros
días de vida, con evolución a artrogriposis, debe hacer sospechar esta rara entidad sin tratamiento
efectivo y con pronóstico fatal en la mayoría de casos. Reportamos una mutación no descrita en la
literatura previa.
C0264 DESCRIPCIÓN DE UN NUEVO FENOTIPO ASOCIADO A VARIANTES
PATOGÉNICAS EN PUF60.
Fernando Santos Simarro, Elena Vallespín García, Angela Del Pozo Mate, Kristina Ibáñez Garikano, Juan Carlos Silla,
Luis Fernández García-Moya, Julián Nevado, Hector González-Pecellín, Victoria Eugenia Fernández Montaño, Rubén
Martín Arenas, Lázaro Alba Valdivia, Sixto García-Miñaúr Rica, Pablo Lapunzina, María Palomares Bralo
INGEMM, Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
Comunicar tres nuevos casos con variantes patogénicas en PUF60 y describir este nuevo síndrome.
Recientemente se ha demostrado que variantes en heterocigosis en el gen PUF60 (Poly-U Binding
Splicing Factor 60KDa) son responsables del síndrome Verheij (MIM 615583). Inicialmente se habían
descrito microdeleciones en 8q23.4 en 5 pacientes con un fenotipo superponible consistente en
discapacidad intelectual y anomalías asociadas en los cuales la región mínima de solapamiento incluía
tres genes, entre ellos SCRIB y PUF60. Estudios funcionales en células de estos pacientes demostraron
alteraciones en el procesamiento y expresión de una isoforma truncada de PUF60 mientras que la
supresión de puf60 y/o scrib en peces zebra daban lugar a retraso del crecimiento, microcefalia y
anomalías craneofaciales (aunque solamente la supresión de scrib daba lugar a coloboma o anomalías
renales y la de puf60 a anomalías cardiacas). Posteriormente se han identificado al menos otros 13
pacientes con variantes heterocigotas de novo (de truncamiento, missense o afectando al splicing) en
PUF60.
Estudio molecular mediante secuenciación masiva de un panel de genes de diseño propio (panel clínico
v1) asociados a diferentes trastornos genéticos/discapacidad intelectual. Validación de las variantes
mediante secuenciación Sanger. Descripción clínica detallada de tres nuevos pacientes.
3 Resultados
Se identifican las variantes de novo c.439C>T (p.Gln147*), c.541G>A (p.Glu181Lys) y c.1144+1G>A, dos
de ellas no previamente descritas, en PUF60 (NM_078480.2).
4 Conclusiones
Describimos tres nuevos casos y dos variantes no previamente descritas en PUF60, lo que apoya la
existencia de un fenotipo reconocible asociado a alteraciones en este gen. Las manifestaciones clínicas
características incluyen discapacidad intelectual, retraso del crecimiento, microcefalia, un fenotipo facial
reconocible y de forma variable alteraciones esqueléticas, renales, cardiacas (incluyendo defectos
septales y anomalías cardiacas complejas) y oculares (siendo el coloboma un hallazgo frecuente).
C0265 DISPLASIA DE CZECH ASOCIADA A UNA MUTACIÓN DE NOVO EN COL2A1.
1 2 3 3 3
Fernando Santos Simarro , Miriam Aza Carmona , Elena Vallespín , Juan Carlos Silla , Angela Del Pozo , Kristina
3 2 2
Ibáñez , Pablo Lapunzina , Karen Elise Heath
1
INGEMM, Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid) España
2
INGEMM, UMDE, CIBERER (Madrid) España
3
INGEMM, CIBERER (Madrid) España
1 Objetivos
Describir un caso clínico de displasia de Czech asociado a una mutación de novo en COL2A1.
La displasia de Czech se ha descrito en muy pocas familias (menos de 15) casi todas de origen checo.
Las manifestaciones clínicas incluyen una osteoartritis progresiva de inicio temprano, acortamiento de III-
IV metatarsianos y platispondilia siendo la talla normal. En todos los casos se ha identificado la misma
mutación p.Arg275Cys en heterocigosis en el gen COL2A1.
Varón de 34 años con displasia esquelética que consulta para evaluación diagnóstica y asesoramiento
genético. Mayor de tres hermanos, los otros dos sanos, de padres sanos no consanguíneos. Estudiado en
la infancia inicialmente por retraso constitucional del crecimiento. Ha precisado tratamiento ortopédico de
cifoescoliosis en la adolescencia. A los 15 años epifisiolisis bilateral de caderas por lo que precisó
corrección quirúrgica, actualmente artrosis grave de cadera izquierda. Alteración de la marcha. Pérdida
auditiva bilateral leve y defecto de refracción. La exploración muestra talla en rango de la normalidad, sin
rasgos faciales particulares, paladar normal. Tórax un poco corto, columna alineada. Extremidades
superiores con limitación a la extensión completa de codos, manos con dedos cortos y engrosamiento de
articulaciones interfalángicas. Pies con acortamiento característico de III-IV metatarsianos.
Se realiza búsqueda de mutaciones con el panel de secuenciación masiva (NGS) de genes de displasias
esqueléticas, SkeletalSeqV4 (327 genes). La validación y los estudios de cosegregacion de las variantes
identificadas fueron realizados mediante secuenciación Sanger.
3 Resultados
Se detecta la mutación en heterocigosis, c.823C>T (p.Arg275Cys) en el gen COL2A1 (NM_001844),
confirmada por secuenciación Sanger y ausente en la muestra de ambos padres.
4 Conclusiones
El estudio molecular confirma el diagnóstico de displasia de Czech siendo este el primer caso comunicado
de origen español y la primera vez que se identifica el origen de novo de la mutación c.823C>T
(p.Arg275Cys) en COL2A1.
C0268 CARACTERIZACIÓN GENÉTICA DE PACIENTES CON ANIRIDIA CONGÉNITA EN
ESPAÑA
1 2 2 3 3
Fiona Blanco Kelly , Cristina Villaverde , Luciana R. Jacy da Silva , María Palomares , María Tarilonte , Ascensión
2 2 2 4 3 2
Giménez , Camilo Vélez , Patricia Ramos , Ignacio Arroyo , Pablo Lapunzina , Almudena Avila-Fernandez , Isabel
2 2 2 2
Lorda , María José Trujillo-Tiebas , Carmen Ayuso , Marta Corton
1
Departamento de Medicina Genetica. Instituto de Investigacion Sanitaria Fundación Jiménez Díaz Madrid (Madrid)
España
2
Departamento de Medicina Genética. Instituto de Investigacion Sanitaria Fundación Jiménez Díaz (IIS-FJD). Hospital
Universitario Fundación Jiménez Díaz (Madrid) España
3
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), IdiPaz, Hospital Universitario La Paz, Madrid (Madrid) España
4
Servicio de Pediatría. Hospital San Pedro de Alcántara. (Caceres) España
1 Objetivos
La aniridia congénita es una enfermedad genética con herencia autosómica dominante, causada por la
haploinsuficiencia del gen PAX6, localizado en cr.11p13. Presenta afectación panocular, caracterizada por
una hipoplasia del iris y puede aparecer aislada o formando parte de un síndrome, como el síndrome de
WAGR (tumor de Wilms, Aniridia, anomalías Genitourinarias y Retraso mental). El principal objetivo de
este estudio ha sido definir el espectro mutacional de la aniridia en población española.
En unacohorte de 73 familias españolas con aniridia (aislada o sindrómica) se realizó un análisis genético
de PAX6 y la región 11p13 mediante una combinación de secuenciación Sanger, NGS, MLPA, FISH,
cariotipo y aCGH.
3 Resultados
El 52% (38/73) de los casos presentan 33 mutaciones puntuales diferentes en la secuencia codificante de
PAX6, incluyendo 30 variantes de pérdida de función y 3 mutaciones missense / deleción in-frame. En
total, el 45% (15/33) de las variantes no habían sido previamente descritas. Adicionalmente, encontramos
5 (7 familias) variantes de significado inciertoen regiones no codificantes, cuya posible patogenicidad está
actualmente siendo evaluada mediante análisis in vitro e in vivo.
En el 23% (17/73) de los casos, se han identificado reordenamientos genómicos en la región 11p13: 3
deleciones multi-exónicas, 4 deleciones de elementos reguladores upstream de PAX6, 9 síndromes de
deleción de genes contiguos y una traslocación tr.(6,11). El uso de aCGH personalizado permitió precisar
el tamaño, los puntos de rotura y los genes involucrados.
4 Conclusiones
El estudio molecular de PAX6 nos ha permitido identificar la causa de la Aniridia en el 75% (55/73) de
nuestros pacientes, y la posible causa en 7 familias adicionales (55+7, 85%). Este estudio demuestra la
utilidad de nuevas técnicas genómicas en el estudio de la Aniridia, permitiendo aumentar la tasa
diagnóstica mediante un análisis más preciso de la región genómica 11p13 y de las regiones no
codificantes de PAX6.
C0270 SÍNDROME DE LA CHAPELLE (VARÓN 46,XX): CARACTERIZACIÓN GENÉTICO
CLÍNICA.
Karen Mabel Pinto Tapia, Cristina Torreira Banzas, María Milagros Blanco Pérez, Alfredo Repáraz Andrade, María
Amalia Andrade Olivié
Hospital Alvaro Cunqueiro, Vigo (Pontevedra) España
1 Objetivos
INTRODUCCION
Es una enfermedad infrecuente, representa 2%de casos de infertilidad masculina.
La mayoría presentan fenotipo masculino, testículos pequeños y azoospermia. Pueden asociar
ginecomastia, talla baja, criptorquidia e hipospadias.
El 5-10%de azoospermia u oligoespermia se asocian a microdeleciones del brazo largo del
crom.Y(región-AZF).
Se produce recombinación de novo anómala entre crom.X e Y en meiosis paterna, la consecuencia es un
crom.X con región SRY+(80-90%). El SRY(TDF) condiciona el fenotipo masculino, y la ausencia del brazo
largo(AZF) explica la azoospermia. La deleción más frecuente es AZFc(~80%), seguido de AZFa(0.5-4%),
AZFb(1-5%) y AZFbc(1-3%).
CASO CLINICO Y METODO
Caso1. 34 años. Remitido de Ginecología por infertilidad.
Caso2. 38 años. Remitido de Endocrinología por Hipogonadismo hipergonadotropo, talla baja y
obesidad. Crecimiento y pubertad retrasados, adipomastia y ginecomastia. Atrofia testicular bilateral.
Caso3. 40 años. Remitido de Hematología por cariotipo M.Osea: Sd.Klinefelter. Linfoma
Linfoplasmocítico. Con hipodesarrollo sexual, adipomastia, testes hipodesarrollados.
Caso4. 19 años. Remitido de Urología por atrofia testicular bilateral e hipogonadismo
hipergonadotropo. Pubertad retrasada y caracteres sexuales secundarios normales.
El diagnóstico se basa en el cariotipo, identificándose incongruencia entre el sexo
cromosómico(femenino), y fenotipo gonadal(masculino). FISH y QF-PCR para confirmar la presencia en el
crom.X de región-SRY.
3 Resultados
RESULTADOS
CASO1 CASO2 CASO3 CASO4
Espermiograma Azoospermia Azoospermia NR Azoospermia
QF-PCR XX,región
NR NR XX,regiónSRY
Aneploidias SRY
QF-PCR
Deleción completa región AZF y
Microdeleciones NR NR NR
presencia SRY
crom.Y
Cariotipo 46,XX 46,XX 46,XX 46,XX
FISH
genSRY+ genSRY+ genSRY+
nuc ish(CEPXx2), genSRY+
(SRYx1)
NR:No realizado.
4 Conclusiones
CONCLUSIONES
Siendo un síndrome con fenotipos variables es necesario un diagnóstico citogenético que incluya
cariotipo, FISH y QF-PCR para identificarlo correctamente, que además nos permite diferenciarlo del
Sd.Klinefelter principalmente. El oportuno tratamiento hormonal ha demostrado mejorar la calidad de vida.
Realizar un asesoramiento genético y valoración psicológica es fundamental así como una actuación
multidisciplinaria orientada a no poner en duda la identidad sexual del paciente.
C0277 SÍNDROME HIPER-IGM DE TIPO 2 ASOCIADO A POLIPOSIS LINFOMATOSA
RECTOSIGMOIDEA
Francisco Mora López, Miriam Vilches, Raquel de la Varga Martínez, Antonio Nieto, Carmen Rodríguez, Almudena
Sampalo
Servicio de Inmunología, UGC de Hematología e Inmunología. Hospital Universitario Puerta del Mar (Cádiz) España
1 Objetivos
El Síndrome de Hiper-IgM (SHIGM) es una inmunodeficiencia primaria infrecuente, caracterizada por
ausencia o niveles bajos de IgG, IgA e IgE y niveles normales o aumentados de IgM.
El SHIGM 1 es la forma más común, se debe a mutaciones en CD40LG y tiene herencia ligada a X. El
SHIGM 2 es autosómico recesivo y es causado por mutaciones en AICDA.
La enfermedad suele manifestarse en la infancia con infecciones bacterianas recurrentes, respiratorias y
gastrointestinales, puede presentarse también hiperplasia linfoide y autoinmunidad.
Presentamos el caso de un individuo de 26 años original de China que es estudiado por un cuadro de
rectorragia. Se detectó una poliposis linfomatosa rectosigmoidea con hiperplasia folicular linfoide benigna.
La cuantificación de Igs fue anormal: IgG <4 mg/dL, IgA <5 mg/dL, IgE <2 UI/ml, IgM 2514 mg/dL. El
paciente no refiere historial de infecciones bacterianas recurrentes. No hay constancia de consanguinidad
entre los padres.
Secuenciación Sanger de los genes CD40LG y AICDA.
3 Resultados
No se detectaron mutaciones en CD40LG. La secuenciación del gen AICDA detecta dos mutaciones en
heterocigosis: c.295C>T (p.Arg99*) y c.520A>G (p.Arg174Gly). Ninguna de las dos mutaciones ha sido
descrita previamente. La primera de ellas crea un codón de STOP prematuro. La segunda es un cambio
no conservativo que afecta a un residuo de Arg altamente conservado, el análisis mediante PolyPhen-2 la
clasifica como patogénica.
4 Conclusiones
Los resultados confirman el diagnóstico de SHIGM2 (OMIM#605258). El SHIGM2 suele presentarse en
los primeros años de vida con infecciones respiratorias y gastrointestinales recurrentes aunque el
diagnóstico en la edad adulta no es infrecuente, como ocurre en este caso. La presentación en nuestro
paciente es atípica ya que no hay historial de infecciones recurrentes y el paciente llega a consulta por
una poliposis linfomatosa intestinal. La hiperplasia linfoide es frecuente en el SHIGM2, pudiendo afectar a
las placas de Peyer.
C0296 PACIENTE PERUANO CON REARREGLO CROMOSÓMICO 18P-/18Q+ Y SU
CORRELACIÓN GENOTIPO-FENOTIPO
1 2 2 2 2
Julio Poterico Rojas , Flor Vásquez Rojas , Miguel Chávez Pastor , Félix Chavesta , Milana Trubnykova Pastor , Hugo
2
Abarca Barriga
1
Universidad Peruana Cayetano Heredia Lima (Lima) Peru
2
Instituto Nacional de Salud del Niño (Lima) Perú
1 Objetivos
Los portadores de inversiones pericéntricas en el cromosoma 18 pueden tener descendencia con
recombinantes cromosómicos. Así, los pacientes con ganancias y pérdidas submicroscópicas en el
cromosoma 18 han venido siendo reportados correlacionándose su genotipo con el fenotipo. Presentamos
un paciente peruano con este tipo de rearreglo cromosómico, con discapacidad intelectual, dismorfia y
hematuria microscópica persistente.
Se realizó en el paciente y familiares el estudio de cariotipo convencional en sagre periférica con bandeo
GTG. El genoma del probando tuvo análisis molecular mediante microarrays cromosómicos. Se utilizó la
plataforma GeneChip CytoScan 750K Array (Affymetrix, USA), incluyendo marcadores 550,000 no
polimórficos y 200,436 marcadores de polimorfismos de nucleótido simple (SNP). Se consideraron como
variantes de número de copias (CNVs) a las ganancias y pérdidas que afectaron un mínimo de 25
marcadores y pérdida de heterocigosidad (LOH) comprometiendo más de 5 Mpbs. Estos estudios
contaron con el consentimiento informado de la familia.
3 Resultados
Encontramos una inversión pericéntrica en el cromosoma 18 en la madre del probando
18[inv(18)(p11.2q21.3)], y esta alteración fue transmitida a 3 hermanos del caso índice. Nuestro paciente
mostró en el cariotipo un recombinante cromosómico del 18, contando con un cariotipo:
46,XY,rec(18)dup(18q)inv(18)(p11.2q21.3)mat. En el análisis cromosómico por microarrays se
encontraron una zona de pérdida (18p11.32p11.21(136,227-11,246,728)x1) en el brazo corto y dos zonas
de ganancias (18q22.1q23(62,142,135-74,982,796)x3 y 18q23(74,983,927-78,013,728)x3) en el brazo
largo de este cromosoma. Nuestro paciente muestra características clínicas más parecidas a las
descripciones de pacientes con síndrome 18p- que aquellas reportadas en trisomías parciales del brazo
largo de este cromosoma.
4 Conclusiones
Los pacientes con el síndrome 18p-/18q+ muestran una variedad en la correlación genotipo-fenotipo,
posiblemente mediados por otros efectos más allá de la haploinsuficiencia. Nuestro paciente cuenta con
hematuria microscópica persistente y esta observación podría ser explicada por haploinsuficiencia en el
gen LAMA1.
C0315 MUTACIÓN EN MOSAICO DEL GEN RASA1 CAUSANTE DE SÍNDROME PARKES-
WEBER
1 2 3 4 2
Víctor Martínez-Glez , Lara Rodríguez-Laguna , Pilar Méndez Pérez , Juan Carlos López-Gutiérrez , Gema Gordo
1
INGEMM - HULP Madrid (Madrid) España
2
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM-CIBERER-IdiPAZ) Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
3
Unidad de Genética, Servicio de Inmunología y Genética, Complejo Hospitalario Universitario de Badajoz (Badajoz)
España
4
Departamento de CIrugía Plástica Pediátrica, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
1 Objetivos
El síndrome Parkes-Weber asociado al gen RASA1 se caracteriza por malformaciones capilares
asociadas a múltiples fístulas arterio-venosas y a hipertrofia de miembros afectados. Describimos el
primer caso detectado de mutación en mosaico en RASA1 causante de este síndrome.
Niña de 16 meses de vida con malformaciones capilares múltiples (glabela, axila, región abdominal y
muslo derecho), entre las que destacan las de mano y antebrazo izquierdo por estar asociadas a
sobrecrecimiento. Se obtuvo ADN a partir de linfocitos de sangre periférica y de biopsia de tejido afecto.
Se estudió el gen RASA1 por medio de un panel custom de NGS a profundidad media de 300 lecturas.
Para el análisis bioinformático se utilizaron las herramientas trimmomatic, bowtie2, picard-tools, samtools
y GenomeAnalysisTK version. Las variantes detectadas se validaron por pirosecuenciación.
3 Resultados
La paciente presenta la variante NM_002890.2(RASA1):c.1248T>A (p.Tyr416*) que genera un codón de
stop en el exón 8 del gen RASA1. La variante se detecta en ADN obtenido a partir de sangre periférica en
un mosaico del 7%, así como en ADN de biopsia de tejido afecto en mosaico del 19%. La presencia de
mosaicismo fue contrastada en ambas muestras por medio de la técnica de pirosecuenciación, capaz de
detectar mosaicos superiores al 5%.
4 Conclusiones
Mutaciones heterocigotas en este gen son causantes del Síndrome de Parkes-Weber. Por otro lado, se
han descrito 2 familias con una mutación germinal heterocigota causante de la enfermedad, en la que uno
de sus miembros presenta además un “second hit” para este mismo gen presente únicamente en tejido
afectado. Sin embargo, este es el primer caso con una única mutación en mosaico bajo presente tanto en
sangre como en tejido afecto, incluyendo al Síndrome Parkes-Weber entre el cada vez más amplio grupo
de patologías asociadas a mosaicismo.
C0320 MUTACIONES EN HETEROCIGOSIS EN ACAN COMO RESPONSABLES DE TALLA
BAJA
1 2 2 3
Lucia Sentchordi Montane , Miriam Aza Carmona , Sara Benito-Sanz , Mª Consuelo Sánchez Garre , Pablo Prieto
4 5 5 6 2
Matos , Alfonso Lechuga Sancho , Pablo Ruiz Ocaña , Ana C Barreda Bonis , Fernando Santos Simarro , Isabel
6 2
González Casado , Karen E Heath
1
Hospital Infanta Leonor Madrid (Madrid) España
2
INGEMM, Hospital Universitario La Paz, IdiPAZ, UAM, (Madrid) España
3
Hospital Terrassa (Barcelona) España
4
Hospital Universitario Salamanca (Salamanca) España
5
Hospital Puerta del Mar (Cádiz) España
6
Hospital Universitario La Paz, (Madrid) España
1 Objetivos
Recientemente se han descrito mutaciones heterocigotas en ACAN en familias con talla baja leve-
moderada, maduración ósea adelantada, braquidactilia, dismorfia leve, cese del crecimiento precoz,
osteoartritis precoz y discopatía degenerativa. Presentamos las características clínico-genéticas de 13
familias con talla baja con mutaciones heterocigotos en ACAN.
Se estudió una cohorte de pacientes con talla baja y alteraciones esqueléticas leves remitidos desde
endocrinología pediátrica y genética clínica tras descartar patología conocida. Se revisaron datos
familiares, de crecimiento y serie ósea. Se realizó un panel de secuenciación masiva (SKELETALSEQ.V1-
V6, 315-368 genes relacionados con displasias esqueléticas). Las variantes encontradas fueron
interpretadas con herramientas de predicción de patogenicidad y validadas posteriormente mediante
secuenciación Sanger. Se realizó estudio de segregación familiar.
3 Resultados
Se encontraron mutaciones en heterocigosis en ACAN en 13 pacientes (3 nonsense, 1 frameshift, 9
missense). La edad media fue 10.2 años (6 hombres y 7 mujeres). La talla media -2.98 DE. 12 pacientes
presentaron al menos un progenitor con talla baja, pudiendo comprobarse mutaciones en ACAN en 11 de
ellos (rango de tallas -5.9/-1.79 DE). 9 pacientes presentaron una maduración esquelética acorde o
retrasada y 3 presentaron maduración adelantada. 3 pacientes presentaron acortamiento de
extremidades, 7 braquidactilia, 6 primer metacarpiano corto y 9 pacientes dismorfia leve. 6 pacientes
presentaron anomalías en la serie ósea. Dos familias presentan artropatía precoz o discopatía
degenerativa.
4 Conclusiones
Se describen 13 pacientes con mutaciones en heterocigosis en ACAN ampliando la serie descrita hasta
ahora. La presencia de edad ósea adelantada, osteoartritis precoz y dismorfia orientan el diagnóstico. Sin
embargo el elevado número de pacientes encontrados sugiere que ACAN deba considerarse no sólo en
estos supuestos sino también en familias con talla baja y anomalías esqueléticas leves, lo que expande el
espectro clínico de esta entidad.
C0326 HALLAZGOS ACCIDENTALES EN SECUENCIACIÓN MASIVA: CARACTERIZACIÓN
FUNCIONAL DE UNA NUEVA MUTACIÓN DEL GEN FGF23 E IMPLICACIONES
DIAGNÓSTICAS
1 1 2
Mª Pilar López Garrido , Ingrid Johana Rojas Arizmendi , Mª Carmen Carrascosa Romero , Francisco Sánchez
1
Sánchez
1
Universidad de Castilla-La Mancha Albacete (Albacete) España
2
Complejo Hospitalario Universitario de Albacete (Albacete) España
1 Objetivos
La secuenciación de exomas y paneles de genes resulta de gran utilidad para el diagnóstico y
asesoramiento genético de Enfermedades Minoritarias, donde la mayoría de casos son pediátricos
monogénicos. El uso de estas técnicas puede conllevar la obtención de hallazgos accidentales, es decir,
variantes genéticas potencialmente patogénicas que a priori no correlacionan con la clínica familiar pero
que podrían desempeñar un papel deletéreo en un futuro. En este sentido, se ha detectado una variante
nueva (p.Pro30Ser) de significado incierto en el gen FGF23 en un paciente con Síndrome trino-rino-
falángico. Las mutaciones en este gen se han asociado con raquitismo hipofosfatémico y calcinosis
tumoral hipofosfatémica, dependiendo del efecto dominante o recesivo de la mutación, respectivamente.
Los objetivos de este estudio son caracterizar funcionalmente esta variante, determinar su grado de
patogenicidad, y establecer el patrón de herencia en la familia estudiada.
Se han realizado análisis in silico para evaluar el efecto de la mutación. Además, se ha expresado la
versión silvestre y mutante del gen FGF23 en células humanas HEK-293T, y se ha analizado mediante
Western Blot el procesamiento y la secreción de la proteína, puntos clave de la funcionalidad de la misma.
3 Resultados
Los estudios in silico muestran un elevado grado de conservación evolutiva e indican un efecto deletéreo
de la variante Pro30Ser. Este efecto es confirmado con el estudio funcional en el que se observa la
inhibición de la secreción de la proteína mutante.
4 Conclusiones
La mutación Pro30Ser del gen FGF23 provoca una pérdida de función proteica y podría causar calcinosis
tumoral hipofosfatémica siguiendo un patrón de herencia autosómico recesivo. En el caso estudiado, al
estar la mutación presente en heterocigosis, el paciente sería portador sano para esta patología. El
estudio de los hallazgos accidentales en secuenciación masiva es imprescindible para ofrecer un
adecuado diagnóstico y asesoramiento genético a las familias afectadas.
C0342 LAS MUTACIONES EN EL GEN PIK3R1 SE ASOCIAN A APDS2, SÍNDROME
SHORT O A AMBOS
1 2 3 2
Maria Bravo Garcia-Morato , Sixto García Miñaúr , Javier Molina Garicano , Fernando Santos Simarro , Eduardo López
1 1 1
Granados , Antonio Ferreira Cerdán , Rebeca Rodríguez Pena
1
Unidad de Inmunología, Hospital Universitario La Paz Madrid (MAD) España
2
INGEMM, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
3
Servicio de Pediatría, Complejo Hospitalario de Navarra (Navarra) España
1 Objetivos
El gen PIK3R1 codifica para 3 subunidades reguladoras que forman parte de las enzimas PIK3 kinasas.
Diferentes mutaciones en este gen se han asociado en literatura a dos fenotipos distintos: las que originan
una pérdida del exón 11 generan una inmunodeficiencia primaria conocida como APDS2 y cambios de
aminoácido en los últimos exones del gen, a síndrome SHORT. Presentamos dos pacientes en los que
ambas entidades están presentes.
La secuenciación masiva fue llevada a cabo mediante la utilización de un panel de diseño propio. La
secuenciación tipo Sanger fue realizada en nuestro centro.
3 Resultados
El paciente 1 es un niño de 10 años de edad que presenta, entre otras, infecciones respiratorias
recurrentes, episodios linfoproliferativos, cardiopatía congénita, sordera, fallo de crecimiento y escaso
panículo adiposo. Su estudio inmunológico e historia de infecciones fueron compatibles con APDS2
mientras que fenotípicamente cumplía criterios de síndrome SHORT. Se detectó la mutación
c.1425+1G>A (NM_181523), que previamente había sido asociada a APDS2.
El paciente 2 es un varón que presentó infecciones respiratorias de repetición desde el nacimiento,
cardiopatía congénita, sordera y fallo de medro. A los 4 años empezó a presentar procesos
linfoproliferativos. A los 20 años desarrolló un linfoma no- Hodgkin que respondió al tratamiento. Seis
meses después, desarrolló un linfoma tipo Hodgkin clásico que también respondió al tratamiento. Sin
embargo, a los 26 años falleció debido a una recaída de su primer linfoma. Inmunológicamente cumplía
criterios de APDS2 mientras que sus datos fenotípicos eran consistentes con síndrome SHORT. Se
detectó la mutación c.1425+1G>T (NM_181523), que previamente había sido asociada a APDS2.
4 Conclusiones
Los pacientes con mutaciones en el gen PIK3R1 deben ser evaluados por inmunólogos y genetistas
clínicos, dado que pueden tener dos fenotipos asociados a un único genotipo.
C0347 MUTACIONES GERMINALES EN MTOR (SÍNDROME DE SMITH-KINGSMORE): UN
NUEVO SÍNDROME CON MACROCEFALIA, DISCAPACIDAD INTELECTUAL Y
CONVULSIONES. PRESENTACIÓN DE 4 CASOS
1 1 1 1 1 1
Gema Gordo , Jair Tenorio , Pedro Arias , Fernando Santos-Simarro , Sixto García-Miñaur , Julián Nevado , Elena
1 1 1 1 1 2
Vallespín , Irene Dapía , María Palomares , Ángela Del Pozo , Eva Barroso , Víctor L. Ruíz-Pérez , Víctor Martínez-
1 1
Glez , Pablo Lapunzina
1
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM-CIBERER-IdiPAZ) Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid)
España
2
Instituto de Investigación “Alberto Sols" (IIB-CIBERER-UAM) (Madrid) España
1 Objetivos
Los síndromes con macrocefalia, discapacidad intelectual y epilepsia (MDIE) son infrecuentes y de difícil
diagnóstico. Recientemente (2013) se ha descrito un nuevo síndrome de MDIE causado por mutaciones
germinales, constitutivas en el gen mTOR, denominado Síndrome de Smith-Kinsgmore (SSK,
MIM616638; ORPHA457485). Hasta el momento, sólo 24 pacientes en todo el mundo se han reportado
con mutaciones germinales en mTOR. El objetivo de este estudio es presentar cuatro pacientes con
mutaciones constitutivas en mTOR, los únicos de España según nuestro conocimiento.
Se realizaron estudios de secuenciación masiva mediante uso de un panel customizado, el cual incluye
genes relacionados con sobrecrecimientos, en una serie de pacientes con diagnóstico de
sobrecrecimiento, macrocefalia o ambos hallazgos.
3 Resultados
Se hallaron cuatro pacientes (dos de ellos hermanos) con mutaciones germinales en mTOR, que
presentaban clínicamente hiperpigmentación siguiendo líneas de Blaschko en brazos y piernas,
estrabismo, hipotonía, hipoglucemia neonatal, hipospadias, malformación capilar facial y/o en los
hombros, talipes bilaterales equinovarus, disminución de la grasa subcutánea, retraso en la edad ósea,
ventriculomegalia, gliosis, cavum vergae, malformación venosa periventricular, hemimegelencefalia y
macrocefalia. Los pacientes presentaban las siguientes mutaciones de ganancia de función: c.5395G>A
(p.Glu1799Lys), c.4448G>A (p.Cys1483Tyr) y c.6605T>G (p.Phe2202Cys) en dos hermanos.
4 Conclusiones
No hay una clara correlación genotipo-fenotipo en el SSK. Las mutaciones puntuales en mTOR resultan
en ganancia de función y se agrupan principalmente en los dominios FAT y quinasa de la proteína.
Aproximadamente la mitad de los pacientes descritos hasta el momento (13/28) tienen la mutación
p.Glu1799Lys. Debe considerarse el diagnóstico de SSK en todo paciente con DI, macrocefalia y
epilepsia.
C0353 SÍNDROMES DE SOBRECRECIMIENTO ASOCIADOS A PIK3CA: ESTUDIO
GENÉTICO EN UNA COHORTE ESPAÑOLA DE 63 PACIENTES
1 1 1 1 1 1 1
Gema Gordo , Lara Rodríguez-Laguna , Kristina Ibañez , Jair Tenorio , Pedro Arias , Elena Vallespín , Irene Dapía ,
1 1 2 3 4
Ángela Del Pozo , Juan Carlos Silla , Encarnación Guillén-Navarro , Jordi Rosell , Juan Carlos López-Gutiérrez , Pablo
1 1
Lapunzina , Víctor Martínez-Glez
1
España
2
Unidad de Genética Médica, Servicio de Pediatría, Hospital Universitario Virgen de la Arrixaca (Murcia) España
3
Unidad de Genética. Hospital Son Espases (Palma de Mallorca) España
4
Servicio de Cirugía Plástica Pediátrica. Hospital Universitario La Paz. (Madrid) España
1 Objetivos
El espectro PROS (PIK3CA related overgrowth spectrum), entre los que se incluyen síndromes como
MCAP o CLOVES, se caracteriza por sobrececimiento segmentario y anomalías vasculares; y está
causado por mutaciones somáticas en PIK3CA. Presentamos un protocolo bioinformático y experimental
para el diagnóstico de pacientes con PROS.
Se diseñó un panel custom de NGS incluyendo 20 genes relacionados con sobrecrecimiento y
malformaciones vasculares. Se estudiaron muestras de ADN de sangre, saliva y/o tejido afecto en 63
pacientes PROS. Las variantes encontradas se validaron por Sanger para mosaicos >20%,
pirosecuenciación para mosaicos entre el 5 y el 20% y Droplet Digital PCR (ddPCR) para variantes
inferiores al 5%. Ésta última fue también utilizada para detectar las 3 variantes frecuentes descritas para
PROS en muestras con resultado negativo por NGS.
3 Resultados
A la fecha detectamos mutaciones en PIK3CA en 24 pacientes, 13/36 MCAP (36%), 10/25 CLOVES
(40%) y 1/2 macrodactilias (50% por ddPCR). Los porcentajes de lectura varían según el tejido estudiado,
siendo más altos los porcentajes para MCAP. Una de las mutaciones no se ha descrito previamente. En
CLOVES las mutaciones sólo están presentes en tejido afecto, como se esperaba. En MCAP el
porcentaje de mosaicismo es mayor en tejido afecto, pero también hemos detectado mutaciones en saliva
e incluso en algunas muestras de sangre (en mosaicos bajos). También encontramos una mutación
germinal en un paciente MCAP. Además de PIK3CA, hemos detectado mutaciones (mosaico y línea
germinal) en otros dos genes incluidos en la vía PI3K-AKT-MTOR en 4 pacientes MCAP.
4 Conclusiones
La combinación de panel custom de NGS y ddPCR (para mutaciones frecuentes) nos ha permitido
detectar mosaicos entre el 1% y el 50% en pacientes con PROS. La capacidad de detección de variantes
en mosaicos bajos en muestras de saliva permitirá prescindir en algunos casos de la necesidad de
realizar biopsias (método invasivo).
C0355 CARACTERIZACIÓN DE SÍNDROMES DE RETINA Y CILIOPATÍAS ASOCIADAS
MEDIANTE UNA ESTRATEGIA COMBINADA DE PANEL DE NGS Y ACGH
1 2 3 3 3
Iker Sánchez Navarro , Luciana Rodrigues-Jacy da Silva , Fiona Blanco-Kelly , Olga Zurita , Noelia Sanchez-Bolivar ,
4 3 3 3 3
Mª Isabel Lopez-Molina , Saoud Tahsin Swafiri , Pablo Mínguez , Rosa Riveiro-Alvarez , Isabel Lorda , Rocío Sanchez-
3 3 3 3 3
Alcudia , Raquel Perez-Carro , Almudena Avila-Fernandez , Marta Corton , Carmen Ayuso
1
Instituto de Investigación Sanitaria Fundación Jiménez Díaz (IIS-FJD) Madrid (Madrid) España
2
Universidade de Mogi das Cruzes (São Paulo) Brasil
3
Servicio de Genética, FJD (Madrid) España
4
Servicio Oftalmología, FJD (Madrid) España
1 Objetivos
Los síndromes de retina son un grupo heterogéneo de enfermedades tanto clínica como genéticamente
compuesto por anomalías retinianas con diversas manifestaciones sistémicas incluyendo sordera,
alteraciones neurológicas, enfermedad renal y malformaciones congénitas entre otras. Incluyen
enfermedades ciliopáticas (síndromes de Alström, Bartet-Biedl y Joubert); otras entidades clínicas bien
definidas (síndromes de Cohen, Stickler y enfermedad de Refsum) y casos con enfermedad sistémica sin
definir. La caracterización clínica y molecular de estos pacientes supone un enorme reto en el contexto
clínico.
Una cohorte de 47 casos índice con síndromes de retina heterogéneos se estudiaron por secuenciación
masiva mediante un panel dirigido de 121 genes (tanto para SNVs como para CNVs). En 14 de dichos
pacientes se llevó a cabo un análisis de aCGH complementario.
3 Resultados
Se identificaron mutaciones patogénicas en 13 de los 47 casos, lo que indica una tasa global de
diagnóstico del 28%. En total se detectaron 20 mutaciones en 11 genes (ABCC6, ALMS1, BBS1, CEP41,
CEP290, IFT27, MKKS, OTX2, PEX1, USH2A, VPS13B), 12 de ellas nuevas. El 60% de los pacientes con
ciliopatías se diagnosticaron molecularmente. Cuatro familias con diagnóstico previo incierto o no
diagnosticadas se caracterizaron molecularmente. Además, mediante aCGH, se identificó la coexistencia
de los síndromes de Usher y Koolen de Vries en un caso esporádico.
4 Conclusiones
Se demuestra que este panel de genes en combinación con el abordaje de aCGH es una estrategia útil
para la caracterización molecular y así guiar el pronóstico y ayudar en el consejo genético en pacientes
con patología retiniana y síndromes complejos no diagnosticados
C0356 RIESGO A PRIORI DEL RENDIMIENTO DIAGNÓSTICO DEL ARRAY-CGH EN
FUNCIÓN DE LA CLÍNICA PRESENTADA POR EL PACIENTE CON TRASTORNO DEL
NEURODESARROLLO: NUESTRA EXPERIENCIA
1 2 3 3
Raluca Oancea Ionescu , María Fenollar Cortés , Adrian García Ron , Olga Pérez Rodríguez , Teresa De Santos
3 3 2
Moreno , Diego López De Lara , María Carmen Cotarelo Pérez
1
H.U. Clínico de San Carlos, AACC Madrid (Madrid) España
2
Sección de Genética, Servicio de Análisis Clínicos, Hospital Clínico San Carlos (Madrid) España
3
Servicio de Pediatría, Hospital Clínico San Carlos (Madrid) España
1 Objetivos
El array-CGH presenta un rendimiento diagnóstico para pacientes con discapacidad intelectual de entre el
26-35%. Las expectativas puestas por los profesionales y familiares de afectos en esta tecnología, deben
ser moduladas en la consulta de Genética prestest. Se pretende estimar el riesgo a priori del rendimiento
diagnóstico del array-CGH en función de la clínica presentada por el paciente en la consulta de genética
en una serie de pacientes con trastornos del neurodesarrollo.
Estudio descriptivo retrospectivo de 98 casos con estudio de array-CGH 400K ó 180K en función de la
clínica asociada. A todos los pacientes se les realizó un cariotipo y se confirmó, en los que se pudo,
mediante otra técnica la alteración encontrada. En la consulta se recogió la anamnesis y la exploración.
3 Resultados
Se encontró un 35% de CNVs causales, un 15% de significado incierto y el resto, normal. En los casos
patológicos, además del trastorno en el neurodesarrollo, el 74% presentaba dismorfia facial, el 44%
malformación mayor asociada, el 27% epilepsia, el 17% historia prenatal positiva y un 4%TEA.
En el total de pacientes con trastorno del neurodesarrollo que acudieron a la consulta, se puede estimar
que si además presentan dismorfia, la rentabilidad diagnóstico fue de un 42%; si es malformación
asociada, un 37%; con epilepsia, un 34%; con historia prenatal positiva, un 28% y con TEA, un 9%.
4 Conclusiones
La presencia de la dismorfia y las malformaciones asociadas, junto al trastorno del neurodesarrollo,
constituye un criterio mayor suficiente para estudio de array-CGH y permite preveer un resultado
patológico alrededor del 40%. En el resto de criterios, la rentabilidad diagnostico disminuye por lo que es
necesario comunicárselo tanto a los profesionales como a los familiares de los afectos con el fin de no
levantar falsas expectativas y ampliar los estudios diagnóstico.
C0360 REVISIÓN DE 19 CASOS CON SÍNDROME DE DUPLICACIÓN 15Q
1 1 2 2 3
Elena Mansilla Aparicio , Fe García-Santiago , Mª Angeles Mori , Julian Nevado , Sixto García- Miñaur , Patricia
4 2 2 4 4 6
Vallcorba , Luis Fernández , María Palomares , Blanca Fernández , Teresa Ramos , Pablo Lapunzina
1
Hospital Universitario La Paz. CIBERER U753, INGEMM. Sección de Citogenética madrid (Madrid) España
2
Hospital Universitario La Paz. CIBERER U753 INGEMM. Sección de genómica estructural y funcional (Madrid) España
3
Hospital Universitario La Paz. CIBERER U753 INGEMM. Sección de genética clínica. (Madrid) España
4
Hospital Universitario La Paz. INGEMM. Sección de citogenética. (Madrid) España
5
Hospital Universitario La Paz. Coordinador INGEMM. Sección de genética clínica. CIBERER (Madrid) España
1 Objetivos
La duplicación de la región 15q11-13 (incluye la región crítica del síndrome de PW/Angelman) puede
ocurrir por un duplicación intersticial en tandem o por la presencia de un cromosoma 15
marcador isodicéntrico (inv dup(15) o idic(15)) que da lugar a una trisomía o tetrasomía de esa región.
El objetivo de este trabajo es revisar los casos diagnosticados con duplicación de la región 15q11-13 en el
INGEMM, en los que se determinará el tamaño de la duplicación, el origen parental, si se trata de una
duplicación intersticial o un marcador y se intentará establecer una correlación fenotipo-genotipo.
Disponemos de 19 casos, el fenotipo de todos los pacientes ha sido valorado en la consulta de genética
clínica de nuestra unidad.
En los casos más antiguos el diagnóstico se ha establecido mediante análisis citogenéticos y FISH
clásicos, usando sondas a la vez del cromosoma 15 y de la región crítica PWS/AS. Los casos más
recientes se han diagnosticado mediante array CGH con la plataforma KaryoArray®v3.0 (Agilent).
Para detectar el origen parental de la duplicación, se han realizado análisis de microsatélites de ADN
parental o análisis de metilación del ADN del caso índice mediante MLPA ME028-B2.
3 Resultados
La mayoría de los casos se corresponden con un idic 15, probablemente por que el estudio citogenético
clásico no permite detectar las duplicaciones intersticiales y estén infradiagnosticadas hasta la llegada del
a-CGH. La indicación del estudio mayoritaria fue la discapacidad intelectual grave y la epilepsia. Los
rasgos faciales resultaron poco específicos. Hemos hallado diferencias en el tamaño y localización de las
duplicaciones que se correlacionan con diferencias en el fenotipo.
4 Conclusiones
Es importante la correcta caracterización citogenética y molecular para establecer una correcta
correlación genotipo fenotipo en esta patología.
Palabras clave: duplicación 15q, inv dup(15), idic(15)
C0373 SÍNDROME LARSEN-LIKE Y MUTACIÓN EN B3GAT3: PRIMER CASO EN ESPAÑA
1 2 3 4
Víctor M Becerra Muñoz , Jimena Barraza García , Adela Gómez González , Rafael Luque Aranda , Lorenzo Monserrat
5 1
Iglesias , Fernando Cabrera Bueno
1
Unidad de Gestión Clínica del Corazón, Servicio de Cardiología, Hospital Clínico Universitario Virgen de la Victoria de
Málaga, Instituto Biosanitario de Málaga (IBIMA), Universidad de Málaga, España (Málaga) España
2
IdiPAZ, Hospital Universitario La Paz, Universidad Autónoma de Madrid, Madrid, España; CIBERER, ISCIII, Madrid,
España Madrid (Madrid) España
3
Servicio de Medicina Física y Rehabilitación. Hospital Clínico Universitario Virgen de la Victoria de Málaga, España.
(Málaga) España
4
Unidad de Glaucoma y Unidad de Oculoplastia y Vías Lagrimales. Servicio de Oftalmología, Hospital Clínico
Universitario Virgen de la Victoria de Málaga, España. (Málaga) España
5
Instituto de Investigación Biomédica (INIBIC), A Coruña, Spain. e. Health in Code SL, A Coruña, Spain. (A Coruña)
España
1 Objetivos
Objetivos: Se presenta el caso de una mujer de 32 años con fenotipo esquelético a determinar a la que
se realizó estudio genético con fines de asesoramiento preconcepcional.
Material y Método: Femenino de 32 años en seguimiento cardiológico por sospecha previa de síndrome
de Loeys-Dietz vs Marfan vs. Larsen. Padres sanos, procedentes de una población pequeña.
Antecedentes de intervención por luxación bilateral de caderas y pie plano valgo, retraso madurativo leve
y estrabismo corregido. Presenta también escafocefalia, hipertelorismo, rasgos dismórficos y escoliosis
lumbar severa. Sin alteraciones cardiovasculares. El análisis de los genes FBN1, TGFBR2 y FLNB no
identificó variantes patogénicas. Acude para orientación acerca de riesgos reproductivos.
Se realizó análisis con panel de Next-Generation Sequencing (NGS) que incluye 41 genes relacionados
con enfermedades aórticas y de tejido conectivo. La preparación de la muestra se llevó a cabo utilizando
el kit SureSelect Target Enrichment (Agilent), y fue secuenciada en la plataforma HiSeq 1500 (Illumina),
obteniéndose una cobertura media de 228 x.
3 Resultados
Resultados: Se identificó la variante c.593C>T (Thr198Ile) en el gen B3GAT3 en homocigosis, presente
en 1/121,390 alelos analizados en el ExAC, y clasificada como patogénica por la mayoría de las
herramientas bioinformáticas. Se realizó el diagnóstico de síndrome de Larsen-like, o de dislocaciones
múltiples, talla baja y dismorfismo craneofacial con o sin defectos cardiacos congénitos (MIM 245600), y
se indicó la evaluación de esta variante en padres y hermanos (una hermana presenta el mismo fenotipo).
4 Conclusiones
Conclusiones: Se presenta el séptimo reporte de síndrome de Larsen-like, y el primero descrito en
España. Este caso resalta la utilidad de los estudios genéticos de NGS en el diagnóstico de
enfermedades raras. El diagnóstico molecular en esta paciente permitirá la detección de otros miembros
portadores y/o afectados, así como un adecuado asesoramiento reproductivo.
C0379 SÍNDROME CLAPO: ACTUALIZACIÓN DEL FENOTIPO
1 1 2 1
Lara Rodriguez Laguna , Gema Gordo , Pablo Lapunzina Badía, Juan Carlos López-Gutiérrez , Victor Martinez-Glez
1
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM-CIBERER-IdiPAZ) Hospital Universitario La Paz, INGEMM Madrid
(Madrid) Spain
2
1 Objetivos
El síndrome CLAPO (OMIM # 613089) es un trastorno vascular combinado caracterizado por la presencia
de malformación Capilar en el labio inferior, malformación Linfática predominantemente en el área
cervicofacial, Asimetría facial y sobrecrecimiento Parcial/generalizado (Overgrowth). CLAPO es una
enfermedad rara, de causa desconocida, descrita hasta ahora únicamente en 7 casos. Presentamos una
actualización del fenotipo de este síndrome en una serie mayor de casos.
Revisamos trece casos de CLAPO, la cohorte más grande de pacientes reportados hasta la fecha.
Estudiamos retrospectivamente todos los casos de CLAPO y recopilamos datos sobre características
fenotípicas y evolución de la enfermedad a lo largo de 8 años de seguimiento médico.
3 Resultados
La única manifestación clínica innata y común (el resto de características pueden ser congénitas o
aparecer a lo largo de la vida) fue la malformación capilar del labio inferior, siempre en línea media y
simétrica, cuya intensidad suele disminuir con el tiempo. Todos los pacientes presentaron algún tipo de
malformación linfática, siendo en nuestra cohorte las más frecuentes en mucosa oral y lengua, aunque
también observamos dos casos en miembros inferiores. Las malformaciones linfáticas en lengua, algunas
veces asociadas a malformación venosa, pueden evolucionar en eventos hemorrágicos graves y aumento
del área de la lengua afectada con la edad. A pesar de que el sobrecrecimiento es una característica
clínica definida en el acrónimo CLAPO, en esta revisión hemos observado que está más asociado al
aumento de volumen derivado de las malformaciones vasculares que a un verdadero sobrecrecimiento
(hiperplasia), por lo que no puede considerarse un criterio clínico cardinal en el diagnóstico.
4 Conclusiones
Hemos actualizado el fenotipo y la historia natural del síndrome CLAPO. La descripción detallada de las
malformaciones vasculares asociadas y de su historia natural, así como la designación del
sobrecrecimiento como “criterio menor”, permitirá mejorar el diagnóstico clínico y seguimiento de estos
pacientes.
C0392 PACIENTE CON CUTIS LAXA AR TIPO IIIA: IMPORTANCIA DE LA COMBINACIÓN
DE ESTUDIOS GENÓMICOS PARA EL DIAGNÓSTICO
1 2 1 1
Maria Juliana Ballesta Martinez , Mª Juliana Ballesta Martínez , Vanesa Lopez Gonzalez , Maria Jose Sanchez Soler ,
1 1 1 3
Ana Teresa Serrano Anton , Lidia Rodriguez Peña , Remedios Gil Ferrer , Benjamin Rodriguez , Lluis Armengol
3 4
Dulcet , Encarna Guillen Navarro
1
H. Virgen de la Arrixaca (Murcia) España
2
Hospital Universitario Virgen de la Arrixaca
3
qGenomics (Barcelona) España
4
Consejeria de Sanidad (Murcia) España
1 Objetivos
El síndrome de De Barsy (SDB) o síndrome de Cutis Laxa tipo IIIA (OMIM#219150), de herencia
autosómica recesiva, se caracteriza por dismorfia facial, cutis laxa, hiperlaxitud articular, retraso del
crecimiento y déficit intelectual. Se presenta paciente afecto de dicha entidad por combinación de
monosomía 10q23.33 afectando a varios exones del gen ALDH18A1 de origen paterno, junto con variante
missense en el mismo gen de origen materno.
Caso clínico: Niño de 12 años con encefalopatía, epilepsia, retraso crecimiento, microcefalia y rasgos
particulares. Segundo hijo de padres sanos, no consanguíneos. Embarazo natural, normal. Ecografía
tercer trimestre: CIR y oligoamnios. Parto a término, eutócico. Somatometría al nacimiento percentil<1.
Encefalopatía grave con epilepsia sintomática. RM cerebral: atrofia cortico-subcortical frontotemporal y
cuerpo callosos hipoplásico. Hernia inguinoescrotal derecha y RGE intervenidos a los 3 meses,
gastrostomía. Exploración Física: Peso: 23 kg (p8, -1.43 DE). Talla: 107 cm (p<1, -4.99 DE) P. cefálico: 45
cm (p<1, -6.16 DE). A destacar: microcefalia. Tórax muy ancho con aumento de distancia intermamilar.
Encefalopatía grave, hipotonia generalizada. Articulaciones hipermóviles. Pies valgos. Piel laxa,
redundante en dorso de manos. Almohadillado palmo-plantar con pliegues profundos. Uñas de
implantación profunda. Hipertricosis generalizada.
3 Resultados
Array-CGH (400K) Monosomía segmentaria de 37 Kb de la banda 10q23.33 que afecta a varios exones
del gen ALDH18A1 (frecuencia poblacional 0%) heredada del padre. Secuenciación exómica: variante en
heterocigosis de tipo missense en el gen ALDH18A1 (frecuencia poblacional 0,403226%, localizada en
dominio C-terminal) heredada de la madre.
4 Conclusiones
Este caso clínico pone de manifiesto la importancia de valorar los resultados de estudios genómicos en su
globalidad. Esto es, detectar genes incluidos en CNVs detectadas por arrayCGH implicados en
patologías con herencia autosómica recesiva, potencialmente patogénicas en heterocigosis para genes
recesivos en estudios de exoma en fenotipos compatibles, pensando en la combinación de ambos tipos
de variantes como posible mecanismo patogénico.
C0394 C.805A>G EN LMX1B. VARIANTE PROBABLEMENTE PATOGÉNICA EN PACIENTE
CON SÍNDROME DE UÑA-RÓTULA
1 2 3 3
Javier López Montiel , Sara Franco Freire , Sandra Mª Carmona Tamajón , Carmen Palma Milla , Julio Torres
3 3 3 3
González , José Miguel Lezana Rosales , Carmen Torres Fernández , Carlos Sánchez Linares , Lucas David Andrés
3 3 2
Garrido , Juan López Siles , Carmen Benito López
1
C.B.M. Genetaq, Diagnóstico Málaga (Málaga) España
2
UGC Laboratorio H.R.U. (Málaga) España
3
C.B.M. Genetaq (Málaga) España
1 Objetivos
Se pretende confirmar molecularmente un paciente diagnosticado clínicamente de síndrome de uña-rótula
mediante la secuenciación del gen LMX1B.
Paciente varón de 38 años diagnosticado de síndrome de uña-rótula. Presenta retraso psicomotor,
malformaciones en las manos (dedos gruesos y cortos, pliegue palmar único, deformidad de uñas o bien
hipoplásicas), síndrome ungueopatelar, osteocondrodisplasia, hipertelorismo, ausencia de rótula,
limitación en la extensión del codo y afección renal. Para el análisis molecular, se secuencia mediante
Sanger los exones codificantes y regiones intrónicas flanqueantes del gen LMX1B, previa amplificación
por PCR.
3 Resultados
Se detectó en heterocigosis la variante c.805A>G (p.N269D), no descrita hasta la fecha. Este cambio está
ausente en bases de datos de población control (ExAC datase, 1000G). Otra variante descrita, como
p.N169K, que afecta al mismo residuo, ha sido previamente asociada al síndrome y se sitúa en el dominio
conservado homeobox de la proteína. Las predicciones in silico la catalogan como patogénica y el
nucleótido adenina805 presenta una alta conservación en la filogenia. Se amplió el estudio a dos
muestras fetales de dos embarazos de la pareja del paciente, detectándose también la variante en las
dos. El primer feto mostró anormalidades en las extremidades superiores con flexión permanente de
codos, posición rígida de los dedos y pie izquierdo equino-varo. La necropsia reveló agenesia de rótulas,
dismorfias ungueales y presencia de cuernos iliacos posterolaterales, rasgos compatibles con el
síndrome. El segundo feto presentó flexión fija de brazos sobre antebrazos.
4 Conclusiones
En base a todo lo argumentado anteriormente, y a la cosegregación que presenta la variante con las
evidencias fenotípicas (teniendo en cuenta el modo de herencia autosómico dominante de la
enfermedad), es altamente probable que la variante c.805A>G tenga un carácter deletéreo y esté
implicada en la aparición del síndrome de uña-rótula.
C0411 MUTACIONES EN EL GEN PKD1 EN PACIENTES CON POLIQUITOSIS RENAL
AUTOSÓMICA DOMINANTE.
1 2 2 2
Carmen Torres Fernández , Sandra Carmona Tamajón , José Miguel Lezana Rosales , Javier López Montiel , Carlos
2 2 2 2 3
Sánchez Linares , Carmen Palma Milla , Julio Torres González , Juan López Siles , Loida García Cruz , Ramón Gine
3 3
Benaiges , Alfredo Santana Rodríguez
1
Centro de Genética Molecular GENETAQ, Diagnóstico Málaga (Málaga) España
2
Centro de Genética Molecular Genetaq (Málaga) España
3
Hospital Materno Infantil (Las Palmas) España
1 Objetivos
La enfermedad del riñón poliquístico autosómico dominante (ADPKD) es un desorden multisistémico cuya
característica principal son los quistes renales. El gen PKD1 es el responsable del 85% de los casos.
Existe variabilidad fenotípica intrafamiliar.
En este estudio se analizan cinco familias con ADPKD para confirmar el diagnóstico clínico.
Análisis del gen PKD1 por secuenciación Sanger y Nextera XT (Illumina), tras la amplificación con
primers específicos mediante PCR y Long PCR para evitar los pseudogenes.
3 Resultados
Familia1:variante no descrita, significado clínico incierto c.3107C>T p.(T1036M). Estudio familiar:
cosegrega con la enfermedad.
Familia2: variante no descrita, probablemente patogénica c.6961delA p.(S2321AfsX20). Estudio familiar:
Familia3:variante no descrita, probablemente patogénica c.9683dupG (p.G3228fsX24). Estudio familiar:
no realizado.
Familia4:variante no descrita,probablemente patogénica c.2702G>A, p.(W901X). Estudio familiar:
Familia5:variante descrita, patogénica c.4957C>T p.(Q1653X), en trans con dos variantes de significado
clínico incierto: c.8293C>T (p.R2765C) (descrita como alelo probablemente hipomórfico) y c.10043G>A
(p.R3348Q) (descrita como probablemente patogénica). Estudio familiar: la variante patogénica
cosegrega con la enfermedad. El caso índice presente una clínica más severa que la de su padre, quien
solo presenta la variante patogénica c.4957C>T p.(Q1653X).
4 Conclusiones
En las familias (1-2-4) a las que se le detecta una variante no descrita previamente y se realiza el estudio
familiar, se determina que dichas variantes cosegregan con la enfermedad, por lo que pueden justificarla.
En el caso en el que no se dispone de estudio familiar (familia3), puesto que se trata de una mutación
frameshift, es muy probable que se trate de la mutación causal. El caso de la familia5 es complejo, ya que
se ha detectado una mutación patogénica en trans con otras dos variantes que pueden estar modificando
el fenotipo, como se infiere del estudio familiar.
C0412 TRÍO DE MUTACIONES EN CFTR.
1 1 1 1 1
Sandra Carmona , Carmen Torres Fernández , Julio Torres González , Carmen Palma Milla , Javier López Montiel ,
1 1 1 2
José Miguel Lezana Rosales , Carlos Sánchez Linares , Juan López Siles , Carles de Diego Boguñá
1
Centro de Genética Molecular Genetaq, MALAGA (MALAGA) España
2
Hospital Virgen de la Salud, (Toledo, España) España
1 Objetivos
El gen CFTR es el responsable, entre otras patologías, de la fibrosis quística (FQ).
Presentamos un caso de un paciente de 3 años con diagnóstico clínico y bioquímico de FQ, con variante
ΔF508 (c.1521_1523delCTT) detectada en heterocigosis mediante secuenciación. El objetivo era
encontrar la segunda variante causal, ya que la madre estaba embarazada.
Se realizó estudio del CFTR mediante MLPA (Multiplex Ligation Probe Amplification) (SALSA P091-D1
CFTR) en el caso índice, progenitores y feto. Se visualiza y analiza los resultados empleando el software
Coffalyser.Net (MRC-Holland). Posteriormente, confirmación de la mutación ΔF508 mediante sondas
fluorescentes en el Lightcycler de PCR a tiempo real, según protocolo descrito por Burggrafy y cols.
(Rapid Real Time PCR— Methods and Applications 2002, pp 85-94), con algunas modificaciones.
3 Resultados
Se detectaron varios perfiles compatibles con la presencia de tres variantes en el gen CFTR: dos grandes
deleciones de los exones 4 al 8, y de los exones 12 al 21, y la mutación ΔF508.
El caso índice y el feto presentaron la mutación ΔF508 y las dos grandes deleciones. Ambas deleciones
fueron detectadas mediante MLPA y la ΔF508 fue detectada tanto por MLPA como por q-PCR.
La madre presentó las dos grandes deleciones y el padre la ΔF508.
4 Conclusiones
Paciente y feto presentan dos grandes deleciones heredadas vía materna, en disposición cis. La variante
patogénica ΔF508 fue heredada por vía paterna.
Es de destacar que no se ha descrito en la literatura la presencia de estas dos deleciones en disposición
cis.
Ambos hermanos presentaron las tres variantes, encontrándose por lo tanto en disposición trans. Estos
resultados justificarían la clínica del caso índice y son compatibles con una futura FQ en el feto.
Resaltamos la importancia de realizar siempre un estudio familiar completo.
C0413 SÍNDROME MOWAT-WILSON: REVISIÓN DE CASOS DIAGNOSTICADOS Y NUEVA
EVIDENCIA DE HETEROGENEIDAD GENÉTICA.
1 2 3 4 5
Ana Teresa Serrano Antón , Fernando Santos Simarro , Verónica Seidel , Esta Cross , Elena Vallespín , María
5 6 6 6 7
Palomares Bralo , Ángela Del Pozo Maté , Kristina Ibáñez Garikano , Juan Carlos Silla Castro , Luis Guereta , Pilar
8 5 2 2
Tirado Reguero , Julián Nevado Blanco , Pablo Lapunzina , Sixto García Miñaúr
1
Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca El Palmar (Murcia) España
2
IdiPaz, Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER), Instituto de Salud Carlos III.
(Madrid) España
3
Unidad de Genética Médica, Servicio de Pediatría, Hospital Universitario Gregorio Marañón. (Madrid) España
4
Wessex Regional Genetics Laboratory, (Salisbury) Inglaterra
5
Sección de Genómica estructural y funcional, Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital
Universitario La Paz, IdiPaz, Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER), Instituto
de Salud Carlos III, (Madrid) España
6
Sección de Bioinformática, Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz, IdiPaz.
Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER), Instituto de Salud Carlos III. (Madrid)
España
7
Servicio de Cardiología Infantil, Hospital Universitario La Paz, IdiPaz, (Madrid) España
8
Servicio de Neuropediatría, Hospital Universitario La Paz, IdiPaz, (Madrid) España
1 Objetivos
El síndrome Mowat-Wilson (MWS) se caracteriza por microcefalia, discapacidad intelectual, enfermedad
de Hirschsprung (HSCR) o estreñimiento pertinaz y rasgos faciales característicos. Asocia
frecuentemente anomalías cardiacas, urogenitales y cerebrales. MWS está causado por la
haploinsuficiencia del gen ZEB2. Presentamos seis casos con su descripción clínica, evolución y
resultado del estudio molecular.
Estudio descriptivo retrospectivo de pacientes con diagnóstico clínico de MWS. Análisis de
reestructuraciones del gen ZEB2 mediante técnica MLPA. Análisis de regiones codificantes y transiciones
intrón:exón mediante secuenciación directa Sanger del caso índice y ambos progenitores; en dos casos
mediante técnica de secuenciación masiva.
3 Resultados
Tres varones y tres mujeres con edad media al diagnóstico de 6 años (rango: 0.5-16). Somatometría
normal al nacimiento (6/6) con talla baja postnatal (4/6). Rasgos faciales característicos. Discapacidad
cognitiva importante en todos ellos con ausencia o mínimo lenguaje, agenesia o hipoplasia del cuerpo
calloso (4/6), crisis epilépticas (3/6). Anomalías asociadas: HSCR (1/6), esqueléticas (escoliosis 3/6 y pie
equino-varo/plano-valgo 1/6), cardiopatía estructural (2/3), oculares (3/6 defectos de refracción, asociando
uno estrabismo), hipoacusia neurosensorial bilateral (1/6) y displasia renal derecha (1/6). Dos varones
tenían hipospadias y el tercero criptorquidia unilateral. El estudio genético detectó alteraciones en ZEB2
en 5/6 casos, todos ellas de novo: una deleción completa del gen y cuatro mutaciones de truncamiento.
En el caso restante, con diagnóstico clínico de MWS, no se detectaron alteraciones en ZEB2, TCF4,
UBE3A, KIAA1279, DHCR7 o CREBBP.
4 Conclusiones
El diagnóstico de MWS es fundamentalmente clínico, basado en el patrón de anomalías, la discapacidad
intelectual y los rasgos faciales característicos. En una mayoría de casos, estimada en 85%, se detectan
alteraciones en ZEB2 que permiten confirmar el diagnóstico clínico. La ausencia de alteraciones en uno
de los casos con diagnóstico clínico de MWS aporta nueva evidencia de posible heterogeneidad genética.
C0423 HISTORIA CLINICA PRE/PERI/POSTNATAL DE 41 PACIENTES PEDIÁTRICOS CON
ARRAY CGH POSTNATAL ALTERADO.
1 2 2 2
Luis E. Celis García , Isabel Lorda Sánchez , Saoud Tahsin Swafiri Swafiri , Fernando Infantes Barbero , Marta
3
Rodriguez de Alba
1
Servicio de Génetica del Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen, (Lima) Peru
2
Servicio de Genética. Fundación Jiménez Díaz (Madrid) Madrid
3
Fundacion Jimenez Diaz, Genetica Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
1. Revisión de la historia prenatal, perinatal, postnatal y motivo de consulta de 41 pacientes

con array-CGH postnatal alterado de un total de 157 casos pediátricos atendidos entre
2015/1016 en el Servicio de Genética de nuestro hospital.
2. Determinación de las regiones cromosómicas sobrerrepresentadas entre todas las
alteraciones observadas en estos array-CGH.
Se revisó la historia clínica de 41 pacientes de 0-10 años, junto con la de sus madres, que fueron
atendidos entre el 2015 - 2016 con array-CGH 60K alterado. La interpretación de los resultados
genómicos se realizo utilizando software Genoglyphix y las bases de datos consultadas: OMIM, UCSC,
PubMed, DGV y Ensembl. Se analizaron separadamente los 9 casos con síndromes de
microduplicacion/microdelecion conocidos.
3 Resultados
PRENATAL: En 13/41 casos se obtuvieron datos de seguimiento prenatal, solo 1 presentaba alteraciones
del primer trimestre [TN (4.6 mm), IRC T21 >1/50, foco hipoecogénico en VI)] diagnosticándose
postnatalmente una deleción de novo probablemente causal en 16p11.2. En 5/40 se observó CIR.
PERINATAL: Parto pretérmino y APGAR anormal en 3 casos. De los 7 RN con bajo peso, 3 se asociaron
a síndromes ya descritos. El periodo neonatal estuvo comprometido en 6 casos.
POSTNATAL: Facies peculiar estaba presente en 10/41 (5 con síndrome conocido); alteraciones en EEG
en 5/38 (solo 1 con síndrome conocido) y RNM cerebral alterada 4/35 (ninguno con síndrome conocido).
La patología neurológica fue el motivo de consulta más frecuente: T. especifico del DPM (10), T.
generalizado del desarrollo (9), T. específico del lenguaje (6).
Los CROMOSOMAS mayormente implicados fueron: 22, 15, 16 y 12 .Cabe destacar tres casos con doble
anomalía en el X y 20.
4 Conclusiones
En esta cohorte no se encontraron signos ni síntomas clínicos objetivos que puedan prever un hallazgo
patológico en array. Los cromosomas frecuentemente implicados concuerdan con lo descrito en literatura.
C0442 MANIFESTACIONES ENDOCRINOLÓGICAS EN PACIENTES CON DELECIÓN
22Q11
Irene Valenzuela Palafoll, Maria Clemente, Anna Cueto, Teresa Vendrell, Eduardo Tizzano
Universidad San Jorge. Campus Universitario Villanueva de Gállego (Zaragoza) España
1 Objetivos
Los pacientes con deleción 22q11 presentan mayor incidencia de diversas alteraciones endocrinológicas:
hipoparatiroidismo y talla baja las más frecuentes. El objetivo del estudio es revisar y determinar la
prevalencia de anomalías endocrinológicas en este conjunto de pacientes.
En una muestra bien caracterizada de 120 pacientes con deleción 22q11 en seguimiento en la consulta
multidisciplinar de nuestro centro. Se han seleccionado 80 individuos con seguimiento endocrinológico y
datos disponibles al nacimiento y de seguimiento tanto clínicos como de laboratorio. Se recogen datos
antropométricos tanto al nacimiento como en la última visita a la consulta (talla, peso y velocidad de
crecimiento comparado con la edad cronológica). Se recogen también datos analíticos tanto prospectivos
como en el momento actual (calcio sérico total e iónico, fósforo, PTH, hormonas tiroideas, calcidiol)
3 Resultados
Entre los trastornos endocrinológicos más frecuentes en la población de pacientes con deleción 22q11
estudiada hemos encontrado la talla baja (40%) y el hipoparatiroidismo (20%). Se hallaron 3 casos de
hipotiroidismo autoinmune (4%) y un caso de hipotiroidismo secundario a agenesia tiroidea. Se detectó
también un caso de hipogonadismo hipergonadotropo y otro caso con diabetes mellitus de debut
temprano. Es destacable la prevalencia de sobrepeso particularmente alrededor de la adolescencia (20%)
y los niveles de vitamina D insuficientes (20%) detectados durante el seguimiento con necesidad de
suplementación.
4 Conclusiones
La prevalencia de trastornos endocrinológicos en nuestra población de pacientes con deleción 22q11 es
globalmente del 50% y por tanto, requiere un seguimiento clínico específico. A destacar que en aquellos
pacientes en que se detecta algún trastorno endocrinológico existe mayor prevalencia de otros trastornos
endocrinológicos.
C0445 EFECTO DE LA HOMOCIGOSIS GÉNICA EN UNA COHORTE DE PACIENTES DE
LA COMUNIDAD DE MADRID CON INMUNODEFICIENCIA COMÚN VARIABLE
Juliana Ochoa Grullón, Kissy Guevara Hoyer, Edgard Rodríguez Frías, Keila Llano Hernández, Alejandra Comins Boo,
Natalia Zapata Juárez, Luis Sánchez Pérez, Mercedes Castaño Pinedo, Silvia Sánchez Ramón, Miguel Fernández
Arquero
Servicio de Inmunología Clínica, Hospital Clínico San Carlos (madrid) España
1 Objetivos
Objetivos: Estudio genético de los loci HLA:DRB1, DQA1,DQB1 en una cohorte de pacientes con
Inmunodeficiencia Común Variable y controles de la Comunidad de Madrid
Introducción: La inmunodeficiencia común variable (IDCV) es el tipo de inmunodeficiencia primaria
sintomática más prevalente en nuestro medio y se caracteriza por ser un grupo de enfermedades
heterogéneas que presentan hipogammaglobulinemia (al menos 2 desviaciones estándar por debajo de
los valores de referencia para su edad) asociada a déficit de producción de anticuerpos específicos (tanto
en IgG como en IgA) y predisposición de episodios infecciosos así como no infecciosos (procesos
autoinmunes y neoplasias).
Dada la naturaleza poco uniforme de la IDCV, no se ha definido un patrón de herencia claro. En algunos
casos, sin embargo, más de un miembro de la familia se ha encontrado deficiente en una o más clases de
inmunoglobulinas. En los últimos años se han descubierto mutaciones de distintos genes que están
relacionadas con la IDCV.
Material y método: Se realizó el estudio Inmunológico de 40 pacientes de la Comunidad de Madrid
con Inmunodeficiencia Común Variable, se analizaron los niveles de Inmunoglobulinas y el estudio
celular.
Se aislaron las muestras de DNA de sangre periférica de forma automática (MagnaPure). de cada uno de
los 40 pacientes y 300 controles sanos de la Comunidad de Madrid.
Se realizó el genotipado de la región HLA, de los loci: DRB1, DQA1 y DQB1, por tecnología Luminex.
3 Resultados
Resultados: Se encontró aumentado de forma significativa el efecto de la homocigosis de los locus
estudiados HLA-DRB1, DQA1,DQB1 asociado a la IDCV (24%) frente a los controles (6%) P<0,0004 y
OR=5,2.
4 Conclusiones
Conclusiones: La IDCV se encuentra asociada con el efecto de la homocigosis de los loci HLA, lo que
implicaría un menor repertorio de respuesta del sistema inmune y por lo tanto, una mayor susceptibilidad
a la enfermedad.
C0446 MICROCEFALIA CON O SIN CORIORRETINOPATÍA, LINFEDEMA O RETRASO
MENTAL (MCLMR) ASOCIADA A MUTACIONES EN KIF11
1 2 3 4 5
Sixto Garcia-Minaur Rica , Pia Ostergaard , Pilar Botella Astorqui , Julia Escudero Gómez , Natalia Pastora Salvador ,
6 7 8 8
Fernando Santos Simarro , Pilar Tirado Requero , Elena Vallespín García , María Palomares Bralo , María Ángeles
8 9 9 9
Mori Alvarez , Ángela del Pozo Maté , Kristina Ibáñez Garikano , Juan Carlos Silla Castro , María del Carmen Benito
10 11
López , Pablo Lapunzina Badía
1
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz, Sección de Genética Clínica
2
Medical Genetics Unit, St George´s University (Londres) Reino Unido
3
Neuropediatría, Hospital Universitario Txagorritxu, Vitoria-Gasteiz (Alava) España
4
Sección de Oftalmología Infantil, Hospital Regional Universitario, Málaga (Málaga) España
5
Servicio de Oftalmología Infantil, Hospital Universitario La Paz, IdiPaz, Madrid (Madrid) España
6
IdiPaz, Madrid España
7
Servicio de Neuropediatría, Hospital Universitario La Paz, IdiPaz, Madrid (Madrid) España
8
Universitario La Paz, IdiPaz, Madrid (Madrid) España
9
Sección de Bioinformática, Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz, IdiPaz,
10
Unidad de Genética, Hospital Regional Universitario, Málaga (Málaga) España
11
Director, Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz, IdiPaz, Madrid (Madrid)
España
1 Objetivos
La microcefalia con o sin coriorretinopatía, linfedema o retraso mental (MCLMR) (MIM 152950) se
caracteriza por microcefalia, anomalías oculares que incluyen la displasia coriorretiniana, linfedema
congénito de extremidades inferiores y discapacidad intelectual de grado variable. Se han identificado
mutaciones en el gen KIF11 en una proporción considerable de casos con MCLMR. Presentamos cinco
casos con su descripción clínica, evolución y resultado del estudio molecular.
Información clínica obtenida a través de la anamnesis y exploración física personal, hallazgos de la
exploración oftalmológica y resultados de las pruebas complementarias realizadas. Análisis de regiones
codificantes y transiciones intrón:exón mediante secuenciación directa Sanger del caso índice y de ambos
progenitores; en un caso, mediante técnica de secuenciación masiva.
3 Resultados
Tres varones y dos mujeres con edades comprendidas entre 4-18 años. Padres no consanguíneos. Un
padre con anomalías oculares (estrabismo y miopía) y perímetro craneal normal (55 cm, percentil 50), el
resto sanos. Diagnóstico prenatal de microcefalia, sin otras anomalías asociadas. Parto a término con
talla normal y perímetro craneal inferior a 3 D.E. en todos ellos. Linfedema en dorso del pie, bilateral, en
3/5. Estudios TORCH, metabólico, cariotipo y array-CGH, normal. RM cerebral sin anomalías
estructurales, salvo un caso con atrofia de predominio frontal. Displasia coriorretiniana en retina periférica
en 4/5 y pliegues falciformes en 1/5; PEV normales, afectación visual variable, no progresiva.
Discapacidad intelectual global leve-moderada, sin epilepsia. Rasgos faciales dismórficos en 2/5. Se
detectan variantes patogénicas en KIF11 en 4/5 (estudio parental de un caso en curso, el resto variantes
de novo).
4 Conclusiones
Se debe considerar la posibilidad diagnóstica de MCLMR en pacientes con diferentes combinaciones de
microcefalia, displasia coriorretiniana y linfedema congénito, y solicitar análisis de mutaciones de KIF11.
La ausencia de alteraciones en KIF11 en casos con diagnóstico clínico de MCLMR sugiere la posibilidad
de heterogeneidad genética.
C0447 MUTACIONES EN EL GEN CRB1 CAUSAN ESQUISIS FOVEAL AUTOSÓMICA
RECESIVA EN FAMILIAS ESPAÑOLAS
1 2 3 1
Almudena Avila Fernandez , Marta Corton Perez , María Isabel López Molina , Saoud Tashin Swafiri Swafiri , Guillermo
4 1 5 1 4
Fernández Sanz , Raquel Perez Carro , Marta Galdós , Rosa Riveiro Alvarez , Miguel Ángel López Martínez ,
1 6 4 1
Ascensión Gimenez Pardo , Blanca Gener Querol , Blanca García Sandoval , Carmen Ayuso
1
Servicio de Genética. H.U. Fundación Jimenez Diaz Madrid (Madrid) España
2
Servicio de Genética. IIS-Fundación Jiménez Díaz (Madrid) España
3
H.U, Fudanción Jiménez Díaz (Madrid) España
4
Servicio de Oftalmológia. H.U. Fundación Jiménez Díaz (Madrid) España
5
Servicio de Oftalmología. Hospital de Cruces. Instituto Clinico Quirúrgico de Oftalmología. Centro Oftalmológico
Astarloa (Bilbao) España
6
Servicio de Genética. Hospital Universitario Cruces (Bilbao) España
1 Objetivos
Caracterizar genéticamente familias españolas con diagnóstico inicial de foveosquisis
Se han estudiado mediante secuenciación masiva- (NGS), dos casos esporádicos (MD-0109 y MD-0987)
de familias españolas no emparentadas, analizándose 75 genes (Nimblegen) y 197 genes (TruSightOne
exoma clínico), respectivamente asociados a patología ocular. La revisión oftalmológica incluyó medida
de agudeza visual, refracción, campimetría, retinografía, angiografía, tomografía de coherencia óptica
(OCT) y electrorretinograma difuso (ERG).
3 Resultados
Inicialmente se descartaron mutaciones en genes asociados a distintas formas de foveosquisis. Tras el
análisis de NGS, se identificaronlosdos alelos mutados en el genCRB1 en ambos casos (MD-
0109:p.Ile167_Gly169del/p.Lys801* y MD-0987:p.Ile167_Gly169del/p.Leu1316Thrfs*24). Los dos
pacientes presentaron disminución de la agudeza visual. En el fondo de ojo se observó una leve
alteración macular con pérdida de reflejo foveal y sin la presencia de alteraciones en retina periférica. La
OCT mostró espacios quísticos nivel de las capas nuclear interna y nuclear externa. El ERG era normal.
Los hallazgos oftalmológicos eran específicos y no concordantes con distrofias de conos y/o bastones ni
retinosquisis juvenil.
4 Conclusiones
En este trabajo se describen dos nuevos casos con esquisis foveal autosómica recesiva, causados por
mutaciones en CRB1, ampliando elespectro fenotípico y mutacional descrito hasta ahora en nuestra
población. Estos hallazgos han permitido establecer un diagnóstico clínico y asesoramiento genético más
preciso.
C0459 DISMORFOLOGÍA INVERSA O LA NECESIDAD DE ADAPTAR LAS HABILIDADES
DIAGNÓSTICAS CLÍNICAS A LAS NUEVAS TÉCNICAS DE SECUENCIACIÓN MASIVA.
1 2 3 4
Sixto Garcia-Minaur Rica , Fernando Santos Simarro , Elena Vallespín Garcia , Ángela del Pozo Maté , Juan Carlos
4 4 3 3
Silla Castro , Kristina Ibáñez Garikano , Lázaro Alba Valdivia , María Ángeles Mori Alvarez , Antonio Martínez-
5 5 6 7 3
Bermejo , Pilar Tirado Requero , Jesús Peralta Calvo , Marta Ortega Molina , Julián Nevado Blanco , Pablo Lapunzina
8 3
Badía , María Palomares Bralo
1
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz, Sección de Genética Clínica
2
IdiPaz, Madrid (Madrid) España
3
Universitario La Paz, IdiPaz, Madrid (Madrid) España
4
Sección de Bioinformática, Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz, IdiPaz,
5
Servicio de Neuropediatría, Hospital Universitario La Paz, IdiPaz, Madrid (Madrid) España
6
Servicio de Oftalmología Infantil, Hospital Universitario La Paz, IdiPaz, Madrid (Madrid) España
7
Servicio de Cardiología Infantil, Hospital Universitario La Paz, IdiPaz, Madrid (Madrid) España
8
Director, Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz, IdiPaz, Madrid (Madrid)
España
1 Objetivos
Presentar dos casos ilustrativos de dismorfología inversa en acción.
Datos clínicos obtenidos a través de la anamnesis, exploración física personal, resultado de exploraciones
complementarias y seguimiento, en dos pacientes con retraso psicomotor/discapacidad intelectual,
anomalías asociadas y rasgos faciales dismórficos muy distintivos. Secuenciación del exoma del caso
índice y ambos progenitores empleando el kit SeqCap EZ VCROME Exome (Roche, Nimblegen) en el
equipo Nextseq 500 (Illumina).
3 Resultados
Caso 1: Estudios neurometabólicos, imagen cerebral, array-CGH 60K (KaryoArray v3.0, Agilent) y análisis
de mutaciones del gen TCF4, normal; EEG alterado, sin crisis epilépticas evidentes. La secuenciación del
exoma identificó una variante patogénica de truncamiento (N_M016628.4:c.1873C>T, p.R613X), de novo,
en el exón 13 del gen WAC.
Caso 2: Esclerocórnea bilateral con fondo de ojo normal. Estudios neurometabólicos, imagen cerebral,
EEG, array-CGH 60K (KaryoArray v3.0, Agilent) y análisis de mutaciones del gen B3GALTL, sin
alteraciones. La secuenciación del exoma identificó una variante patogénica de splicing
(ENST00000263046.1:c.849-7A>G), de novo, en el intrón 5 del gen TFAP2B.
4 Conclusiones
En el caso 1, con un fenotipo distintivo parecido a los síndromes Smith-Magenis y Pitt-Hopkins, la
secuenciación del exoma permitió el diagnóstico de una entidad recientemente descrita, el síndrome
DeSanto Shinawi (MIM 616708), causado por alteraciones en el gen WAC. En el caso 2, las
manifestaciones oculares, no previamente descritas en el síndrome Char (MIM 169100), desviaron la
orientación diagnóstica clínica. Esto es sólo otro ejemplo de la necesidad de cambiar la estrategia del
diagnóstico diferencial y estudio molecular dirigido por una de valoración diagnóstica conjuntamente con
los resultados de la secuenciación masiva, como ya ha sido señalado por algunos expertos (Hennekam,
Biesecker. Hum Mutat. 2012;33(5):884-6).
C0462 NUEVAS MUTACIONES EN IHH COMO CAUSA DE TALLA BAJA CON O SIN
BRAQUIDACTILIA
1 2 1 3 1
Miriam Aza , Lucia Sentchordi Montane , Sara Benito Sanz , Jimena Barraza Garcia , Fernando Santos Simarro ,
5 3 4 3 3
Elena Vallespin , Juan Carlos Silla , Angela del Pozo , Kristina Ibáñez Garikano , Carolina de la Torre , Gabriela
5 5 1
Vasques , Alexander Jorge , Karen Elise Heath
1
INGEMM, UMDE, CIBERER (madrid) España
2
Hospital Infanta Leonor, INGEMM, UMDE (madrid) España
3
INGEMM (madrid) España
4
INGEMM, CIBERER (madrid) España
5
Unidade de Endocrinologia Genetica, Hospital das Clinicas da Faculdade de Medicina, Universidade de São Paulo
(São Paulo) Brazil
1 Objetivos
Indian Hedgehog (IHH) tiene un papel fundamental en la osificación endocondral. De hecho, mutaciones
missense en heterocigosis localizadas en su región amino-terminal (aminoácidos 95-158) producen
braquidactilia tipo A1 (MIM 112500), que cursa con talla baja y acortamiento de las falanges medias y
distales de pies y manos, y de la proximal del primer dedo.
Nuestro objetivo es identificar la causa genética responsable de la clínica de un grupo de pacientes con
talla baja y/o braquidactilia.
Búsqueda de mutaciones en la cohorte de pacientes con un panel de secuenciación masiva de displasias
esqueléticas (SKELETAL.SEQV3-V6, 315-368 genes, según la versión). La validación de las variantes
identificadas así como los estudios de cosegregación genotipo-fenotipo fueron realizados mediante
3 Resultados
Se han identificado 11 individuos con variantes en heterocigosis en IHH. Ninguna de las variantes ha sido
descrita previamente, todas están ausentes o presentes en una frecuencia inferior al 0.1% en bases de
datos de población y han sido predichas como patogénicas por diferentes herramientas bioinformáticas de
predicción de patogenicidad. Además, se ha podido confirmar que la variante cosegrega con el fenotipo
en algunas de las familias. La mayoría de las variantes (9/11) se localizan fuera de la región
tradicionalmente asociada con braquidactilia tipo A1. Aunque la mayoría de las mutaciones son tipo
“missense”, también hay tipo “frameshift” (2/11). El fenotipo de los pacientes varía dependiendo del tipo
de mutación, pero siempre incluye al menos talla baja (proporcionada o desproporcionada) y/o
braquidactilia (fundamentalmente acortamiento de la falange media del 2º y 5º dedo).
4 Conclusiones
Nuevasmutaciones en heterocigosis en IHH localizadas fuera de la región tradicionalmente asociada con
braquidactilia tipo A1 producen nuevos fenotipos, que incluyen talla baja desproporcionada y acortamiento
de la falange media del 2º y 5º dedo, expandiendo así el espectro clínico-genético de mutaciones en IHH.
C0463 EFECTO DE LA DOSIS GÉNICA EN PACIENTES CELIACOS PEDIÁTRICOS DE LA
COMUNIDAD DE MADRID
Kissy Guevara Hoyer, Edgard Rodríguez Frías, Juliana Ochoa Grullón, Natalia Zapata Juárez, Keila Llano Hernández,
Luis Sánchez Pérez, Mercedes Castaño Pinedo, Alejandra Comins Boo, Silvia Sánchez Ramón, Miguel Fernández
Arquero
Servicio de Inmunología Clínica, Hospital Clínico San Carlos (madrid) España
1 Objetivos
El presente estudio genético pretende caracterizar el efecto de la dosis génica y la susceptibildad a la
enfermedad celiaca en pacientes pediátricos DQ2 positivos: DQA1*0501/DQB1*0201.
La enfermedad celíaca (EC) es un desorden sistémico de naturaleza autoinmune causado por la ingesta
de gluten. Se caracteriza por la presencia de una combinación variable de manifestaciones clínicas,
anticuerpos específicos, haplotipos HLA-DQ2 y/o HLA-DQ8 y enteropatía.
La EC se presenta en personas con una predisposición genética, cuyos marcadores genéticos son útiles
en el diagnóstico de la EC, dado que aproximadamente un 92% de los pacientes celíacos son HLA-DQ2
positivos y en torno al 5-10% son HLA-DQ8 positivos
Se estudiaron 200 pacientes pediátricos de la Comunidad de Madrid y 200 controles sanos. Se realizaron
los estudios de anatomía patológica e inmunológicos de cada uno de los pacientes en estudio. Se aisló el
DNA de los pacientes y controles de forma automática (MagnaPure). Se utilizó la tecnología de
Luminex para el estudio genético de los loci HLA-DRB1, DQA1 y DQB1
3 Resultados
Se encontró la presencia de los genes DQA1*0501/DQB1*0201 en 92,5% de los pacientes frente 25,5%;
p<10-7. Cuando se estudio el efecto dosis del gen DQB1*02, se encontró en el 50% de los pacientes
frente 3% de los controles p<10-8.
4 Conclusiones
En este estudio se encuentra asociado la importancia del gen DQB1*02 como efecto de dosis en los
individuos DQA1*0501/DQB1*0201 con una mayor susceptibilidad a la enfermedad, posiblemente por
tener más capacidad de presentación antigénica de los péptidos derivados del gluten.
C0468 ATRESIA DE ESÓFAGO: VARIABILIDAD CLÍNICA Y ETIOLÓGICA EN NUESTRO
MEDIO
Purificacion Marin Reina, Antonio Perez Aytes, Francisco Martinez Castell, Ramiro Quiroga De La Cruz, Monica
Rosello Piera, Carmen Orellana Alonso
Hospital Universitario y Politécnico La Fe, (VALENCIA) Valencia
1 Objetivos
La atresia de esófago (AE) es una malformación congénita que aparece en 2,5/10000 recién nacidos (RN)
vivos. Puede presentarse tanto aislada (AE no sindrómica) como asociada a otras malformaciones y/o
síndromes complejos (AE sindrómica). El objetivo de esta revisión es valorar las características de los
pacientes con AE, conocer su evolución y facilitar la orientación pre y postnatal.
Revisión de historias clínicas de pacientes ingresados con diagnóstico de AE (CIE-Q.39) en un servicio de
Neonatología desde 01.01.2005 hasta 31.12.2015.
3 Resultados
Ingresaron 60 RN con AE. Se excluyeron 2 por falta de datos. De los 58, un 55,1% se etiquetó de AE no
sindrómica y 44,8% de AE sindrómica. Los diagnósticos finales se recogen en la Tabla I. El diagnóstico
prenatal de AE se realizó en un 13,8%. Ecografías prenatales fueron normales en 48,2% de gestaciones.
En las AE sindrómicas, el 70,3% de las malformaciones asociadas se encuentran en el complejo
VACTERL. 8 pacientes fallecieron en los primeros meses de vida, la mayoría en relación a cardiopatías
complejas. En 48 RN en que disponemos de datos sobre seguimiento, el neurodesarrollo fue normal en el
91,7%.
Tabla 1
DIAGNOSTICO Nº
AE aislada (No sindrómica) 32
AE sindrómica sin diagnóstico especifico 10
Asociación VACTERL 8
Síndrome CHARGE 2
Síndrome de Feingold 1
Síndrome AEG 1
Microdelecion 22q11 1
Trisomía 21 1
Trisomía 18 1
Heterotaxia 1
4 Conclusiones
- El diagnóstico prenatal de la AE continúa siendo un reto.
- En el abordaje de AE deben descartarse malformaciones asociadas propias de la asociación
VACTERL.
- Otros síndromes, además de los clásicamente asociados a AE (cromosopatías, VACTERL,
CHARGE) deben tenerse en cuenta en el diagnóstico diferencial pre y postnatal de AE.
- El neurodesarrollo en pacientes con AE no sindrómica o VACTERL es favorable en la gran mayoría
de los casos.
C0475 PRMT7 UN NUEVO GEN A EVALUAR EN EL ESTUDIO GENÉTICO DE PACIENTES
CON SOSPECHA CLÍNICA DE ACRODISOSTOSIS.
1 2 1 1 1 1 1 1 1
I Diez , D Castro , P Maietta , M Carcajona , C Rodriguez , D Rodriguez , N Sanchez , G Benito , M Martinez-Garcia ,
1 1 1 3 1
MM Peña-Vilabelda , R Sanchez-Alcudia , J Botet , M Galvez , S Alvarez
1
Unidad de Secuenciación, NIMGenetics S.L. Madrid (Madrid) España
2
Instituto de Genética Humana, Facultad de Medicina, Pontificia Universidad Javeriana (Bogotá D.C.) Colombia
3
Laboratorio de Genética, Gencell Pharma (Bogotá) Colombia
1 Objetivos
Ampliar, a propósito de un caso, el panel de genes seleccionados en el estudio de la acrodisostosis con
nuevos genes recientemente identificados. Hasta el momento, el estudio de la acrodisostosis, una
displasia esquelética poco frecuente caracterizada por anormalidades esqueléticas (baja estatura,
braquidactilia severa, disostosis facial e hipoplasia nasal), endocrinas y neurológicas, se dirige
fundamentalmente a la identificación de mutaciones en los genes PRKAR1A y PDE4D, asociados a la
acrodisostosis tipo I y tipo II, respectivamente.
Mediante secuenciación exómica (SureSelectXT Human All Exon V5, Agilent Technologies/HiSeq 2500
SystemTM, Illumina) se analizó el ADN obtenido de muestra de sangre periférica de un varón de 8 años
con retraso psicomotor, talla baja, plagiocefalia, braquidactilia en manos y otras anomalías menores, con
niveles de PTH normales y estudio negativo del gen PRKAR1A. El análisis se realizó mediante exoma
clínico, incluyendo 5700 genes OMIM.
3 Resultados
Se identificó una variante homocigota de pérdida de función en el gen PRMT7 (NM_019023.2;
c.1168C>T; p.(Arg390*)), asociado recientemente con un patrón de herencia autosómica recesiva a una
forma de acrodisostosis caracterizada por baja estatura, braquidactilia, discapacidad intelectual y
convulsiones. Si bien, la asociación genotipo-fenotipo fue establecida en 2015 [1] exclusivamente en
mujeres, su inclusión en la base de datos OMIM no fue efectiva hasta octubre 2016. Nuestro paciente es
el primer varón identificado hasta el momento. Dada la escasez de casos publicados, PRMT7 no está
sistemáticamente incluido en el estudio de displasias esqueléticas.
4 Conclusiones
Este caso pone de manifiesto la necesidad de incluir el estudio de PRMT7 en el diagnóstico diferencial de
la acrodisostosis. Asimismo, refleja la utilidad del exoma clínico para identificar casos previamente
negativos en los estudios genéticos dirigidos y la importancia de actualizar la información OMIM en estos
estudios.
Referencias:
1. Akawi N, et al. Nat Genet. 2015 Nov;47(11):1363-9.
C0477 DIAGNÓSTICO MOLECULAR EN EL SÍNDROME DE JOUBERT: A PROPÓSITO DE
DOS CASOS
1 2 2 2 3 4
Nancy Govea , M. Antonia Grimalt , Elena Miravet , Esther Córdoba , Jordi Roldan , Jordi Rosell
1
Servei Genètica Hospital Universitari Son Espases (Illes Balears) España
2
Servei Pediatria Hospital Universitari Son Espases (Illes Balears) España
3
Servei de Radiologia Hospital Universitari Son Espases (Illes Balears) España
4
Hospital Universitari Son Espases, Genética Palma de Mallorca (Illes Balears) España
1 Objetivos
El síndrome de Joubert es un complejo malformativo que afecta al tronco cerebral y al vermis cerebeloso
siendo obligatorio el signo del diente molar en la RMN cerebral. Tiene una incidencia baja de
aproximadamente 1/100000 recién nacidos. Se han descrito más de 20 genes responsables del síndrome.
Presentamos dos casos de síndrome de Joubert.
Caso 1) detección de una hipoplasia cerebelosa en ecografía prenatal de semana 24. Se procedió a
realizar la amniocentesis con resultado citogenético de 46,XX,inv(2)(p11.2q13) y el estudio posterior de
aCGH compatible con la normalidad. Se siguió la gestación con el nacimiento de una niña a las 41
semanas con PN: 3980 (p90-97), T: 55 (p90-97) y PC: 36,5 (p90). Ingresada en UCI neonatal por
presentar de flutter diafragmático e hipotonia. Se realizó la RMN que fue diagnóstica. Evolutivamente la
paciente mantiene la hipotonía y presenta a los 2 años un retraso psicomotor.
Caso 2) se trata de una paciente de 14 años de edad remitida desde neuropediatria por detección en la
última RMN cerebral de imagen compatible con el signo diente molar. La niña ha sido controlada desde
los 4 meses por apraxia oculomotriz y ligera ataxia. Siempre ha tenido buen rendimiento escolar. Sin
rasgos dismórficos asociados.
3 Resultados
Caso 1) El estudio molecular puso de manifiesto las mutaciones c.G278A (p.R93H) y c.C343T (p.R115X)
en el gen ARL13B. Diagnóstico de Joubert tipo 8.
Caso 2) El estudio molecular efectuado puso de manifiesto las mutaciones c.3868G>C (p.Val1290Leu) y
c.4667ª>T 8p.Asp1556Val) en el gen CC2D2A. Diagnóstico de Joubert tipo 9.
4 Conclusiones
La existencia de muchos genes responsables del síndrome de Joubert hacía inviable el estudio molecular
de estos pacientes. Actualmente con las técnicas de secuenciación masiva la confirmación diagnóstica a
nivel molecular permite catalogar de forma precisa a estos pacientes lo que ofrece la posibilidad del
diagnóstico preimplantacional o prenatal preciso.
C0480 SÍNDROME CEREBRO-PULMÓN-TIROIDES: DELECIÓN EN 14Q13.2-Q21.1 QUE
INCLUYE NKX2-1 Y AMPLÍA EL ESPECTRO FENOTÍPICO A HIPOGAMMAGLOBULINEMIA
1 2 3 4 4 5
Beatriz Villafuerte , Aidy Gonzalez , Daniel Natera , Luis Gonzalez , Luis Allende , Julián Nevado , José Carlos
2
Moreno
1
INGEMM-Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid) España
2
Laboratorio Molecular de Tiroides, Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), IdiPAZ, Hospital Universitario
La Paz, Universidad Autónoma de Madrid. (Madrid,) España.
3
Hospital Universitario de Fuenlabrada (Madrid) España
4
Departamento de Inmunología, Hospital Universitario 12 de Octubre (Madrid) España
5
Genómica Funcional y Estructural. Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), IdiPAZ, Hospital Universitario
La Paz, Universidad Autónoma de Madrid. (Madrid,) España.
1 Objetivos
Los defectos genéticos de NKX2-1 asocian hipotiroidismo, corea benigna y distrés respiratorio neonatal.
El propósito del estudio fue identificar la patogenia molecular de un cuadro compatible con la “tríada
NKX2-1”en una niña con características adicionales no descritas en la enfermedad.
Niña que presentó al nacimiento hipotonía generalizada y dificultad respiratoria con bronquiolitis
recurrentes. Fue diagnosticada de hipotiroidismo primario por hipoplasia tiroidea (volumen 1,35ml; p<3) a
los 10 meses, desarrollando deambulación tardía, torpeza motora y retraso del lenguaje. A los 2 años
inició movimientos coreicos sutiles en extremidades. Fenotipo facial con frente amplia, abombamiento
frontal leve, implantación baja de pabellones auriculares, puente nasal ancho y boca pequeña con labios
finos. Erupción dental tardía (10 años), con ausencia de piezas 15, 25, 37 y 47 en ortopantomografía.
Talla baja (-1,89DE; talla genética +0,23DE) y marcada hiperextensibilidad de extremidades superiores.
Respuesta inmune a antígenos polisacáridos disminuida, con niveles indetectables de inmunoglobulinas
frente a citomegalovirus, sarampión y varicela, (hipo-gammaglobulinemia, incluyendo todas las subclases
de IgG). Subpoblaciones de linfocitos T normales. PCR y secuenciación Sanger de la región codificante
de NKX2-1. MLPA (Kit Salsa P319 MRC-Holland) del ADNg del paciente y sus padres. Array-CGH (Karyo-
Array, 8X60 K, Agilent).
3 Resultados
No se identificaron mutaciones en NKX2-1. El MLPA mostró pérdida dosis génica en las 3 sondas
localizadas en NKX2-1 en heterocigosis. El Array-CGH identificó deleción de novo de 3,44Mb en el
intervalo 14q13.2-q21.1 que contiene 20 genes, incluyendo NKX2-1, PAX9 y dos genes (NFKB1A y
PPP2R3C) involucrados en defensa humoral.
4 Conclusiones
La tríada Cerebro-Pulmón-Tiroides asociada a otros fenotipos debe hacer sospechar deleciones
monoalélicas del cromosoma 14 que provoquen haploinsuficiencia de NKX2-1 (responsable de
hipotiroidismo, coreatetosis e insuficiencia respiratoria), PAX9 (oligodontia) y otros genes contiguos que
induzcan hipo-gammaglobulinemia (NFKB1A como candidato más plausible), talla baja, fenotipo facial o
hiperlaxitud articular.
C0501 VARIANTES GENÉTICAS EN PACIENTES ESPAÑOLES CON SIGNOS DE
DISPLASIA ECTODÉRMICA HIPOHIDRÓTICA
1 2 2 2
Mª Carmen Martínez Romero , Lidia Rodríguez-Peña , María Juliana Ballesta-Martínez , Vanesa López-González ,
3 1 4 5 6
María Barreda-Sánchez , Guillermo Glover-López , Jaime Sánchez del Pozo , Verónica Seidel , Isabel Llanos-Ribas ,
6 7 8 9 10
Blanca Gener-Querol , Lucero Noguera , Pablo Lapunzina , Isabel Lorda , Paloma Sánchez-Pedreño , Encarna
11
Guillén-Navarro
1
Centro de Bioquímica y Genética Clínica. Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca (Murcia) España
2
Sección de Genética Médica. Servicio de Pediatría. Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca (Murcia)
España
3
Cátedra de Genética Médica. UCAM- Universidad Católica de Murcia (Murcia) España
4
Servicio de Pediatría. Hospital 12 de Octubre (Madrid) España
5
Pediatría-Genética Clínica. Hospital Gregorio Marañon (Madrid) España
6
Servicio Genética. Hospital Universitario Cruces (Vizcaya) España
7
Servicio Dermatología. Hospital Niño Jesus (Madrid) España
8
Sección de Genética Clínica y Dismorfología INGEMM (Madrid) España
9
Genética Clínica. Fundación Jimenez Díaz (Madrid) España
10
Servicio de Dermatología. Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca (Murcia) España
11
1 Objetivos
La displasia ectodérmica hipohidrótica (DEH) es la más frecuente y se caracteriza por hipohidrosis,
hipotricosis e hipodontia. El subtipo más frecuente ligado a X (XHED), con incidencia de 1/50.000-
1/100.000 en varones, se asocia a mutaciones en el gen EDA(Xq12-q13.1; MIM_300451), y los subtipos
dominante y recesivo a los genes EDAR(2q13;MIM_604095) y EDARADD(1q42.3;MIM_606603). Se han
identificado casos con mutaciones en WNT10A(2q35;MIM_ 606268). Presentamos el estudio molecular
de los genes EDA, EDAR, EDARADD y WNT10A en 59 pacientes españoles con signos de DEH.
Los pacientes estudiados fueron 18 mujeres y 41 varones, posteriormente se realizó estudio familiar. Se
amplificaron todos los exones y regiones flanqueantes de los genes EDA, EDAR, EDARADD y WNT10A y
se analizaron mediante Sanger. En todos los casos se realizó una Multiplex Ligation-dependent Probe
Amplification (MLPA) para detectar grandes deleciones.
3 Resultados
Entre los pacientes con clínica completa de DEH(52/59) se encontró la mutación causal en el
63,3%(35/52). La distribución por genes fue 91,4%(32/35) en EDA(NM_001399.4) y 8,6%(3/35) en
EDAR(NM_022336.3). Entre los pacientes con oligodontia como signo destacable (7/59) se identificaron
predominantemente mutaciones en WNT10A(MN_025216.2)(3/7) que se presentan de forma aislada, en
heterocigosis o en combinación con una segunda variante en EDARADD (MN_145861.2); otro caso
presentó una variante en homocigosis en este último gen. En total se identificaron 39 variantes
patogénicas, 32 de ellas heredadas (82.1%). Alta variabilidad mutacional: deleción gen EDA completo(1),
deleción exón 1 EDA(2), mutaciones missense(23), nonsense(5) y pequeñas indels(8).
4 Conclusiones
Las mutaciones en EDA asociadas a XHED son las más frecuentes, la mayoría privadas y se identifican
con mayor frecuencia en exones 1, 5 y 8-9, constituyendo puntos calientes. Alta prevalencia de variantes
en WNT10A en pacientes con oligodontia. La mayoría de mutaciones son heredadas, subrayando
importancia del estudio familiar para el asesoramiento genético adecuado.
Proyecto financiado por el Instituto de Salud Carlos III (ISCIII-Madrid-España)(PI/14/01259), Edimer y
AADE.
C0510 VARIABILIDAD FENOTÍPICA EN TRASTORNOS DEL NEURODESARROLLO CON
ALTERACIONES EN LA REGION 16P11.2
1 1 1 1
Gloria Soler Sanchez , Juan Antonio Bafallíu Vidal , Ascensión Vera-Carbonell , Piedad Salas Valero , Mª Carmen
2 2 2 2
Bernabeú Martínez , Mª José Sánchez-Soler , María Juliana Ballesta-Martínez , Vanesa López-González , Ana Teresa
2 2 3 1
Serrano-Antón , Lidia Rodríguez , Encarna Guillén-Navarro , Isabel López-Expósito
1
Centro de Bioquímica y Genética Clínica Murcia (Murcia) España
2
Servicio Genética Clínica-HUVA (Murcia) España
3
Consejería Sanidad (Murcia) España
1 Objetivos
Alteraciones en la región 16p11.2 se han asociado a un amplio espectro de trastornos del
neurodesarrolloy constituyen un claro ejemplo de CNVs asociadas a penetrancia incompleta y
expresividad variable. Nuestro objetivo es evaluar si la presencia de otras alteraciones genéticas y la
localización precisa de los puntos de rotura de la alteración podrían contribuir a la variabilidad clínica
inter/intra familiar.
Análisis del resultado de arrayCGH 60K y clínica de 13 pacientes remitidos por trastorno del
neurodesarrollo con hallazgo de deleción o duplicación en 16p11.2 y del estudio familiar realizado en
10/13 casos.
3 Resultados
Describimos 9 casos con deleción y 4 con duplicación en 16p11.2. Estudio en progenitores en 10/13, 9 de
ellos portadores sanos (6 origen paterno/3 materno); un único caso de novo. 5 casos (55%) con diferente
punto de rotura proximal entre paciente/progenitor. 9/13 (77%) presentó la alteración típica BP4-BP5. En
6/13 (46%) se detectaron otras CNVs, todas identificadas en progenitores, 5 sin asociación patológica
conocida y un caso con CNV asociada a riesgo de trastorno del neurodesarrollo. Manifestaciones clínicas:
10/13 (77%) discapacidad intelectual leve-moderada, más frecuente en casos con deleción; 9/13 (69%)
retraso en la adquisición del lenguaje, presente en todos los casos con duplicación. 5/13 (38%) autismo,
trastorno observado en 3/4 casos con duplicación; 5/9 (55%) con deleción presentó macrocefalia y un
caso con duplicación microcefalia; otras manifestaciones clínicas menos frecuentes fueron hipotonía,
obesidad, epilepsia y alteraciones cardíacas.
4 Conclusiones
Nuestros resultados son similares a los descritos en la literatura en variabilidad fenotípica, con predominio
de trastornos del comportamiento y del lenguaje en casos de duplicación, y discapacidad intelectual y
macrocefalia en casos de deleción. Aunque la muestra es pequeña, en nuestro estudio no se ha podido
establecer asociación entre las diferencias fenotípicas de pacientes/progenitores y la variabilidad genética
adicional detectada por arrayCGH.
C0512 VARIANTE DE SIGNIFICADO CLÍNICO INCIERTO EN EL GEN RNASEH2A EN
PACIENTE CON SOSPECHA DE SÍNDROME DE AICARDI-GOUTIÈRES
1 Objetivos
El síndrome de Aicardi-Goutières (AGS) es una encefalopatía subaguda hereditaria caracterizada por la
asociación de calcificación de los ganglios basales, leucodistrofia y linfocitosis del líquido cefalorraquídeo.
En la literatura se han publicado más de 120 casos. La mayoría de neonatos afectados nacen a término y
presentan parámetros de crecimiento normales. Los síntomas aparecen en los primeros días o meses de
vida con una encefalopatía subaguda grave.
Presentamos el caso de una mujer magrebí de 28 años. Tiene tres embarazos previos de curso normal y
dos hijas sanas. Un segundo embarazo con diagnóstico de infección congénita por citomegalovirus con
cultivo microbiológico positivo que falleció a los 2 años de vida por complicaciones respiratorias. Acude
embarazada de nuevo. Ambos padres son consanguíneos (primos hermanos)
3 Resultados
Tiene lugar el parto por cesárea en semana 37 de feto varón de 1940 gramos. Precisó reanimación tipo III
al nacer y presentó Apgar 6-7-9 con pH normal. Ingresa en neonatos por restricción de crecimiento
simétrica y sospecha de citomegalovirus congénito secundario a reactivación. En la exploración
nerológica al mes de vida, presenta microcefalia, hiperexcitabilidad. En RMN muestra calcificaciones
periventriculares en rosario, atrofia cortical, lisencefalia e hidrocefalia. EEG con lentificación generalizada,
no paroxismos. En la ecografía transfontanelar se evidencian múltiples calcificaciones parenquimatosas.
El estudio de infección congénita por citomegalovirus es negativo. Se solicita estudio genético que informa
de variante de significado clínico incierto detectada en el gen RNASEH2A. Cambio en homocigosis en la
posición c.317T>C que da ligar a un cambio aminoacídico p.Leu106Pro (p.L106P) en el gen RNASEH2A.
4 Conclusiones
Se realiza estudio genético a los progenitores con resultado de ambos como portadores. Se les explica
que tienen el 25 % de posibilidad de tener hijos sanos, 25 % de tener hijos enfermos y 50 % de tener
portadores sanos en futuros embarazos.
C0530 FISURAS LATERALES DE LABIO SUPERIOR CON O SIN FISURA DE PALADAR
ANTERIOR Y FISURAS DE PALADAR POSTERIOR AISLADAS. REVISIÓN DE LA
CASUÍSTICA EN UN HOSPITAL TERCIARIO ENTRE 2007 Y 2016
Anna Mª Cueto González
Hospital Mútua de Terrassa - Pediatría
1 Objetivos
Dentro de los defectos congénitos craneofaciales, uno de los que con más frecuencia observamos en la
práctica clínica y que mayores consecuencias tiene son las fisuras laterales de labio superior con o sin
fisura de paladar anterior y las fisuras de paladar posterior aisladas.
OBJETIVOS: valorar el número de pacientes que presentaban fisuras laterales de labio superior con o sin
fisura de paladar anterior y fisuras de paladar posterior aisladas; cuáles de éstos presentaban
sintomatología asociada; si se habían realizado estudios moleculares; así como el diagnóstico final
(sindrómico o no sindrómico).
Hemos analizado los pacientes visitados en la consulta de Genética Clínica durante el periodo
comprendido entre los años 2007 a 2016, ambos incluidos. Se analizó la edad de derivación, el tipo de
fisura, la asociación o no a otros defectos congénitos, fenotipo o retraso global del desarrollo.
Posteriormente se analizaron los estudios moleculares (si se realizaron) y si finalmente se catalogó como
fisuras sindrómicas o no sindrómicas.
3 Resultados
Durante este periodo hemos valorado 43 pacientes con fisuras de labio y/o paladar, de los cuales un 53%
presentaban fisuras laterales de labio superior con o sin fisura de paladar anterior y un 47% pacientes
fisuras de paladar posterior aisladas. De todos estos pacientes un 35% presentaban otra sintomatología
asociada y fueron casos sindrómicos.
4 Conclusiones
una aproximación sistemática en la definición de las fisuras de labio y paladar hace posible comparar
datos de poblaciones heterogéneas de pacientes con estas malformaciones. De todas las clasificaciones
descritas, en nuestra consulta hemos utilizado la clasificación embriológica. Este estudio nos ha permitido
elaborar un algoritmo de seguimiento para poder aplicar a nuestros pacientes. La creación del comité
multidisciplinar y la coordinación entre las diferentes especialidades implicadas en el seguimiento y
tratamiento de estos pacientes es fundamental para garantizar una asistencia óptima y adecuada
información a las familias
C0531 DESCRIPCIÓN CLÍNICA Y MOLECULAR DE UNA SERIE DE 99 PACIENTES
ESPAÑOLES Y ALEMANES CON RASOPATÍAS
1 2 2 3
Vanesa López González , M. Juliana Ballesta Martínez , María José Sánchez Soler , Guillermo Glover López , M.
3 4 5 6
Carmen Martínez Romero , Begoña Ezquieta Zubicaray , Francesca Lepri , Johanna Christina Czeschik , Alma
6 6 7 8 9 8
Küchler , Beate Albrecht , Elena Vicente Martínez , Christina Lissewski , Dagmar Wieczorek , Martin Zenker , Encarna
10
Guillén Navarro
1
Murcia (Murcia) España
2
Sección de Genética Médica, Servicio de Pediatría, Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca, IMIB-Arrixaca,
Murcia; Grupo Clínico Vinculado al CIBERER, ISCIII, Madrid (Murcia) España
3
Laboratorio de Genética Molecular, Centro de Bioquímica y Genética Clínica, Hospital Clínico Universitario Virgen de
la Arrixaca, El Palmar, Murcia; Grupo Clínico Vinculado al CIBERER, ISCIII, Madrid (Murcia) España
4
Laboratorio de Diagnóstico Molecular, Hospital General Universitario Gregorio Marañón, Madrid (Madrid) España
5
Genetics and Rare Diseases Research Division, Ospedale Pediatrico Bambino Gesù, IRCCS, Roma, Italia (Roma)
Italia
6
Institut of Human Genetics, University Hospital of Essen, Essen, Alemania (Essen) Alemania
7
Técnico en gestión estadística (Murcia) España
8
Institute of Human Genetics, University Hospital of Magdeburg, Magdeburg, Alemania (Magdeburg) Alemania
9
Institute of Human Genetics, University Hospital Düsseldorf, Heinrich-Heine University, Düsseldorf, Alemania
(Düsseldorf) Alemania
10
1 Objetivos
Las RASopatías se caracterizan por rasgos dismórficos, talla baja y cardiopatía, e incluyen los síndromes:
Noonan (NS), Noonan con cabello anágeno (NS-LAH), LEOPARD (LS), Cardiofaciocutaneo (CFC),
Costello (CS), Neurofibromatosis tipo 1 (NF1/NF1-NS) y Legius. Se han identificado 16 genes
responsables en la vía RAS-MAPK. Nuestro objetivo es describir el fenotipo y genotipo en un amplio
grupo de afectados.
Estudio colaborativo internacional descriptivo. Revisión retrospectiva de historias clínicas de 99 pacientes
con diagnóstico de RASopatía (78 españoles/21 alemanes).
3 Resultados
53 mujeres (53,5%) y 46 varones (46,4%). 85 menores y 14 mayores de 18 años (edad remisión 3,84 y
33,7 años). 66 NS [PTPN11 50 (75,8%), SOS1 10 (15,2%), RIT1 3 (4,5%), KRAS 1 (1,5%), RAF1 1
(1,5%) y NRAS 1 (1,5%)], 10 NF1-NS (NF1), 8 CFC (BRAF 4, KRAS 2 y MAP2K1 2), 7 Legius (SPRED1),
5 LS (PTPN11), 2 CS (G12S HRAS) y 1 NS-LAH (SHOC2). Edad media madres/padres al nacimiento:
29/31,4 años. En NS: polihidramnios 9%; Talla baja 45,45% (52% PTPN11 y 10% SOS1), microcefalia
36,36%, dificultades alimentación 44%, retraso motor 44%, discapacidad intelectual 6%, alteración
conductual 15,5%, anomalías neuroimagen 18,2% y epilepsia 6%; Sangrado 31,8%, 2 tumores SNC (3%;
PTPN11), 2 LMMJ (3%; PTPN11 y NRAS); Hipertelorismo 82%, ptosis 39,4% y cuello corto 74,2%;
Defectos cardiacos 69,7% (74% EVP, 34,8% CIA y 15,2% MCH); Deformidad torácica 51,5%, escoliosis
10,6% y sindactilia 12,2%; Manchas café-con-leche 19,7%, escaso pelo en cejas 42% y pliegues palmo-
plantares profundos 24,2%; Anomalías renales 16,6%, oftalmológicas 36,3% e hipoacusia 4,5%.
4 Conclusiones
Serie amplia de pacientes afectos de RASopatía con confirmación molecular, incluyendo genes
recientemente identificados o con baja frecuencia mutacional. Manifestaciones clínicas superponibles a lo
publicado, con menor porcentaje de hallazgos prenatales, discapacidad intelectual, epilepsia, deformidad
torácica, anomalías oftalmológicas e hipoacusia, y mayor de microcefalia. Ampliación del conocimiento de
la correlación genotipo-fenotipo, mejorando la información pronóstica.
C0533 SÍNDROME DE SAETHRE CHOTZEN. PRESENTACIÓN DE DOS CASOS.
Julia Candel Pau
Unidad de Neonatología, Servicio de Pediatría, Hospital del Mar (Barcelona) España
1 Objetivos
Revisar la clínica y el diagnóstico etiológico del síndrome de Saethre Chotzen ( acrocefalosindactilia tipo
III, OMIM: 101400), una craneosinostosis sindrómica, autosómica dominante, causada por
haploinsuficiencia del gen TWIST, involucrado en el cierre de suturas y en la maduración de los
osteoclastos, en el que se han descrito mutaciones intragénicas y alteraciones cromosómicas en 7p21
(sitio alélico del gen) que pueden asociar retraso del desarrollo psicomotor ( RDPM) y otras
manifestaciones.
Se presentan dos casos con diagnóstico clínico y causa confirmada, derivados a nuestro Hospital en el
año 2016.
Caso1: lactante varón de 2 meses, con asimetría facial, fontanelas amplias, sin craneosinostosis, orejas
pequeñas con crux prominente, manos con sindactilia parcial de segundo y tercer dedo y pies con
polidactilia preaxial y sindactilia de tercer y cuarto dedos.
Caso2: lactante de 4 meses de sexo femenino, con fontanelas amplias, craneosinostosis coronal
izquierda, asimetría facial con ptosis en ojo derecho, manos con duplicación completa del primer dedo
izquierdo y clinodactilia de quintos bilateral, y desarrollo psicomotor normal
3 Resultados
Caso1: secuenciación del gen TWIST negativo; evoluciona con RDPM, por lo que a los 5 meses se
solicita array de CGH, detectándose una deleción de 11 Mb en 7p21.3-15.3, que incluye el gen TWIST y
otros 33 genes contiguos.
Caso2: secuenciación de gen TWIST, mutación puntual no descrita (p. Ser184Arg), probablemente
patogénica, de novo.
4 Conclusiones
El Síndrome de Saethre Chotzen es un diagnóstico clínico difícil debido a la variabilidad en las
manifestaciones y a la sobreposición clínica con otras entidades, especialmente con las pertenecientes a
las acrocefalosindactilias. Destacamos la importancia de buscar signos claves como la ptosis, la
morfologia de las orejas y el tipo de polisindactilia asociada, para persisitir en el diagnostico, frente a la
ausencia de mutaciones intragénicas en TWIST ( 60-70 % de los casos), asi como la aparición de RDPM,
asociado a microdeleción.
C0536 EXPERIENCIA CLÍNICO-MOLECULAR EN 1800 CASOS DE SÍNDROMES DE
SOBRECRECIMIENTO EXISTENTES EN EL REGISTRO ESPAÑOL DE SÍNDROMES DE
SOBRECRECIMIENTO.
1 1 1 1 1 1
Jair Tenorio , Elena Vallespin , María Palomares , Sixto García Miñaur , Fernando Santos Simarro , Víctor Martínez ,
1 1 1 1 1 1 1
Pedro Arias , Irene Dapia , Gema Gordo , Karen Heath , Ángel Campos , Elena Mansilla , Fé García-Santiago , Julián
1 2
Nevado , Pablo Lapunzina
1
INGEMM-IdiPAZ-CIBERER (Madrid) España
2
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM). Hospital Universitario La Paz. CIBERER., Laboratorio de
1 Objetivos
Los Síndromes de Sobrecrecimiento (SSC) son un grupo de patologías caracterizadas por un crecimiento
aumentado y el incremento del peso, talla y/o perímetro cefálico 2-3 desvíos estándar por encima de la
media para edad y sexo. Los SSC comprenden un grupo poco conocido de patologías, heterogéneo y de
etiología diversa. Actualmente se incluyen aproximadamente unas 30 entidades nosológicas distintas.
Objetivo: Analizar los resultados globales de los últimos 14 años de los pacientes incluidos en el RESSC,
describir el rendimiento diagnóstico y la aportación a la descripción de nuevas entidades y nuevos genes.
Se realizaron estudios genético-moleculares orientados a la patología específica en la mayoría de los
pacientes enviados al RESSC. Los pacientes con diagnóstico clínico de algún SSC fueron estudiados
específicamente para éstos desde el punto de vista molecular. Los pacientes negativos para estos
estudios y los que inicialmente se catalogaron como Síndromes de Sobrecrecimiento no sindrómicos
fueron estudiados con arrayCGH, arrays de SNPs y/o paneles/ exomas.
3 Resultados
El rendimiento diagnóstico de los pacientes con diagnóstico clínico orientado por clínica fue de
aproximadamente un 60%. Entre los pacientes con Sobrecrecimiento no sindrómico, se pudo completar el
diagnóstico en un 25% aproximadamente. Se han descrito nuevas entidades nosológicas no descritas
anteriormente y se han reconocido nuevos genes responsables de enfermedades.
4 Conclusiones
Globalmente, los datos clínicos y moleculares de los pacientes del RESSC sugieren que: 1) el rendimiento
de confirmación del diagnóstico etiológico es mayor del 50%; 2) Se ha contribuido con el diagnóstico
clínico o molecular de nuevas patologías, describiéndose 3 nuevas entidades clínicas/genéticas en los
últimos 7 años.
Enfermedades metabólicas y mitocondriales
C0024 PSEUDOACONDROPLASIA. DESCRIPCIÓN DE TRES CASOS Y UNA NUEVA

MUTACIÓN
Antonio Martinez Monseny
1 Objetivos
La pseudoacondroplasia (PSACH) es una osteocondrodisplasia autosómica dominante con una
prevalencia estimada de 1/30.000 individuos. Es debida a por mutaciones del gen COMP.
Se presentan los tres únicos casos diagnosticados a nivel genético en el Hospital Sant Joan de Déu
durante los últimos 5 años.
3 Resultados
Niño de 2 años (caso 1) que presenta cojera desde el inicio de la deambulación con talla de 82,5 cm (-
2,36 DE). Niña de 4 años (caso 2) con estancamiento de la talla desde los 2 años y talla de 92,2 cm (-3,44
DE). Ambos con ecografías prenatales sin alteraciones, antecedentes familiares sin interés y
antropometría al nacimiento normal. La exploración física de ambos casos con talla baja, ausencia de
dismorfias faciales, rizomelia de extremidades superiores, braquidactilia, tibias varas, lordosis lumbar y
escoliosis leve. Destaca hiperlaxitud ligamentosa y “marcha de pato”. Serie ósea esquelética que muestra
osificación retardada, irregularidades óseas y cuerpos vertebrales con lengüetas anteriores. Se analizan
exones y regiones intrónicas adyacentes del gen COMP. En el caso 1 revela la mutación en heterocigosis
c.1552G>C en el exón 14, ya descrita. En el caso 2 muestra la mutación en heterocigosis c.868G>T en el
exón 9, no descrita anteriormente y de novo. Padre del caso 1 (caso 3) se advierte que presenta talla de
165 cm (-1,95 DE), hiperlordosis lumbar y dismetría de extremidades inferiores con estudio genético
positivo.
4 Conclusiones
La PSACH puede pasar desapercibida hasta el inicio de la marcha o incluso no diagnosticarse hasta la
edad adulta. Se describe penetrancia completa con expresividad variable. Mutaciones del gen COMP
son asociadas tanto a PSACH como a displasia epifisaria múltiple (MED) autosómica dominante. La talla
final es variable, puede aparecer dolor crónico y los pacientes precisan seguimiento en un centro
especializado.
C0052 APLICABILIDAD DE UN MÉTODO DE SECUENCIACIÓN MASIVA (NGS) EN ION
TORRENT PARA LA CARACTERIZACION DE MUTACIONES PATOGÉNICAS EN EL ADN
MITOCONDRIAL
1 2 1 1 3
Adrián González-Quintana , Alberto Blázquez Encinar , Pablo Serrano Lorenzo , Laura Rufián , Pablo Villalba ,
1 2 2 2
Guillermo Amate , Joaquín Arenas , Aitor Delmiro , Miguel Ángel Martín Casanueva
1
Instituto de Investigación Hospital 12 de Octubre (i+12) Madrid (Madrid) España
2
Instituto de Investigación Hospital 12 de Octubre (i+12)/U723 CIBERER (Madrid) España
3
1 Objetivos
Numerosas mutaciones en el ADN mitocondrial (mtDNA) se han asociado con trastornos OXPHOS
primarios. En este estudio se evalúa la capacidad del kit “Precision ID mtDNA Whole Genome Panel”
(ThermoFisher) (mtDNA-WGP) basado en amplicones, para la detección de mutaciones patogénicas
heteroplásmicas, la discriminación de NUMTs, la asignación del haplogrupo mitocondrial, y la
identificación de grandes deleciones simples del mtDNA
Como método estándar se capturó el mtDNA mediante un único amplicón en PGM-IonTorrent (mtDNA-
LPCR). Se utilizaron 15 muestras de pacientes previamente caracterizadas por mtDNA-LPCR, y ADN de
células que carecen de mtDNA (ρ0). Se siguió el protocolo recomendado del mtDNA-WGP kit en
TM
IonChef System y secuenciación >1000X en IonPGM ™. Las variantes mtDNA se anotaron integrando
MITOMAP con “scripts” propios. Adicionalmente, se analizaron 16 nuevas muestras sin mutación
conocida con sospecha de disfunción OXPHOS.
3 Resultados
7 de 8 mutaciones patogénicas puntuales y un indel (1/1) fueron detectadas en el porcentaje de
heteroplasmia esperado. Únicamente una de las deleciones simples con elevada heteroplasmia fue
detectada por el nuevo método (1/4). La concordancia entre variantes por ambos métodos osciló entre 82-
100%. La predicción individual del haplogrupo mitocondrial fue idéntica. Las células ρ0 presentaron un
elevado número de variantes priorizadas al alinear frente a rCRS y a hg19. En los pacientes no
caracterizados se logró detectar una mutación patogénica y 3 nuevas variantes candidatas y se consiguió
secuenciar 7 muestras no amplificables por el método mtDNA-LPCR
4 Conclusiones
Nuestros resultados sugieren que mediante el kit mtDNA-WGP es posible secuenciar mtDNA en muestras
de baja calidad y detectar cuantitativamente nuevas variantes puntuales e indels patogénicas, y su fondo
genético mitocondrial, teniendo en cuenta posibles interferencias por NUMTs. Adicionalmente el protocolo
NGS recomendado disminuye el tiempo de análisis respecto al método de referencia (mtDNA-LPCR)
utilizado en este estudio
C0053 DIAGNÓSTICO GENÉTICO DE MUCOPOLISACARIDOSIS EN PACIENTES
CUBANOS MEDIANTE SECUENCIACIÓN DEL EXOMA CLÍNICO.
1 2 2 2
Tatiana Acosta Sánchez , Ana Isabel Vega Pajares , Rosa Navarrete López de Soria , Magdalena Ugarte , Belén
2 2 1 1
Pérez González , Celia Pérez-Cerdá Silvestre , Lilia Caridad Marín Padrón , Laritza Martínez Rey , Norma de León
3 3 4 1 1
Ojeda , Alina García García , Gretel Huertas Pérez , Maidalys Bravo Ramírez , Lazara Emma Larrinaga , Misleidy
1
Miranda
1
Centro Nacional de Genética Médica de Cuba Playa (La Habana) Cuba
2
Centro de Diagnóstico de Enfermedades Moleculares (Madrid) España
3
Hospital Pediátrico Wiliam Soler (La Habana) Cuba
4
Hospital Pedriátrico Pedro Borrás (La Habana) Cuba
1 Objetivos
Las mucopolisacaridosis están causadas por deficiencias de origen genético en las hidrolasas lisosomales
encargadas de degradar los glucosaminoglicanos. Se han descritos 11 defectos genéticos, todos
autosómicos recesivos excepto uno con herencia ligada al cromosoma X. La determinación del
glucosaminoglicano acumulado y la cuantificación de actividad enzimática permiten identificar siete
entidades clínicas diferentes (MPSI-IX).En este trabajo se realizó la caracterización genética de 19
pacientes cubanos con sospecha clínica y bioquímica de mucopolisacaridosis.
Secuenciación masiva mediante el panel de exoma clínico TruSightOne® combinado con una captura
virtual de genes relacionados con los hallazgos clínicos y bioquímicos, análisis de la segregación
mendeliana y análisis bioinformático de variantes (Alamut Visual Software)
3 Resultados
Se han diagnosticado 17 pacientes: siete con mutaciones en hemicigosis en IDS (MPS II; Hunter); nueve
con mutaciones bialélicas, tres en IDUA (1 MPSI; Schie y 2 MPSI; Hurler), tres en NAGLU (MPS IIIB; San
Fillippo B), dos en GALNS (MPS IVA; Morquio A), uno en HGSNAT (MPS IIIC; San Filippo C) y en un
caso se identificó una única mutación en NAGLU. Cinco de estos nueve pacientes eran compuestos
heterocigotos de dos mutaciones. El espectro mutacional incluye 16 mutaciones de cambio de nucleótido
(9 missense, 4 nonsense y 3 de splicing), 1 pequeña inserción, 1 pequeña deleción y un reordenamiento
genético. Siete variantes no estaban descritas, cuatro de ellas previsiblemente severas (c.103+1G?A y
p.Trp109Ter en IDS, c.852-2A?G en HGSNAT y p.Leu214Pro fsTer59 en NAGLU) y tres de significado
clínico incierto (VUS) (p.Met1Leu y p.Trp404Cys en NAGLU, p.Leu18Pro en IDUA), aunque los análisis
bioinformáticos predicen que podrían ser patogénicas.
4 Conclusiones
El empleo de la secuenciación masiva ha permitido identificar el defecto genético responsable de la
enfermedad en 17 pacientes cubanos con mucopolisacaridosis, aportando información esencial para el
adecuado asesoramiento genético y para la aplicación de un tratamiento personalizado en algunos de los
defectos identificados.
C0064 EMPLEO DE EXOMA CLÍNICO PARA RESOLVER CASO DE ICTIOSIS CONGÉNITA
AUTOSÓMICA RECESIVA TIPO 4B CON MUTACIÓN EN GEN ABCA12 EN PACIENTE
PEDIÁTRICA DE ORIGEN MARROQUÍ.
1 1 1 1 1 1 2
Maria Jose Aparisi , Laia Pedrola , Ines Calabria , Cristina Cardona , Marina Martinez , Lola Martinez , Graciela Pi ,
1 3 3
Angel Zuñiga Cabrera , Francisco Martinez , Jose Cervera
1
2
HU La Ribera (Valencia) España
3
HUP La Fe. Unidad de genetica. (Valencia) España
1 Objetivos
Evaluación de la utilidad del Exoma clínico para el diagnóstico genético de Ictiosis congénitas
autosómicas recesivas.
Las ictiosis congénitas autosómicas recesivas (ICAR) son trastornos infrecuentes de la queratinización
que se engloban en las formas no sindrómicas de ictiosis. Clásicamente se distinguían en este grupo la
ictiosis laminar (IL) y la eritrodermia ictiosiforme congénita (EIC), actualmente se incluyen también otras
ictiosis como la arlequín, ... El diagnóstico clínico diferencial entre los distintos tipos de ictiosis congénitas
es de gran dificultad, pero tiene una gran importancia a la hora de establecer un pronóstico y tratamiento.
Paciente de 8 años de origen marroquí con Ictiosis eritrodérmica desde el nacimiento, padres
consanguíneos. Se realiza biopsia de piel de las lesiones y el estudio anatomopatológico es compatible
con una Dermatitis Espongioforme. No presenta procesos infecciosos recurrentes, ni alergias ni
intolerancias alimentarias. En controles analíticos destaca desde el nacimiento hipocolesterolemia e IgE
muy elevada. El tratamiento con Acitretino consigue una mejoría importante.
El análisis de ADN de la paciente mediante Exoma clínico permite detectar en homocigosis la mutación
c.4139A>G (p.N1380S; NM_173076) en el exón 28 del gen ABCA12 descrita como patológica.
3 Resultados
En 2003 el gen ABCA12 fue descrito como responsable de algunos casos de IL, posteriormente se
confirmó también era responsable de la Ictiosis tipo Arlequín. Los defectos en el ABCA12 conllevan la
alteración del transporte de lípidos a nivel de los cuerpos lamelares determinando la disminución de
lípidos intercelulares en la capa córnea. Las mutaciones en el gen ABCA12 han permitido diagnosticar a
la paciente como una Ictiosis Congénita Autosómica Recesiva tipo 4b.
4 Conclusiones
El empleo de Exoma clínico en pacientes con fenotipo con posibilidades multigénicas demuestra ser un
instrumento con una gran potencia diagnóstica que facilita de gran manera el poder establecer un correcto
diagnóstico clínico.
C0085 PRIMER CASO DE DIABETES INSÍPIDA NEFROGÉNICA EN NEONATO POR
PÉRDIDA DE HETEROCIGOSIDAD EN EL GEN AVPR2 DETECTADA MEDIANTE ARRAY
GENÓMICO.
1 1 1 1 1 1 1
Laia Pedrola , Jorge Selles , Ines Calabria , Maria Jose Aparisi , Marina Martinez , Lola Gonzalez , Sara Moreau ,
2 3
Angel Zuñiga Cabrera , Jose Cervera
1
2
3
HUP La Fe. Unidad De Genética. (Valencia) España
1 Objetivos
Diagnóstico de Diabetes Insípida Nefrogénica (DIN) mediante técnica de Array CGH ante la imposibilidad
de llegar a un resultado por análisis de secuenciación directa. La diabetes insípida se caracteriza por la
eliminación de volúmenes elevados de orina muy diluida. Este trastorno es causado por la insuficiencia de
la neurohipófisis para secretar cantidades adecuadas de arginina vasopresina (AVP), (diabetes insípida
neurogénica o central), o por incapacidad del riñón para responder a la AVP circulante (DIN).
Paciente de 8 meses remitido desde Nefrología Pediátrica para estudio genético por sospecha de DIN.
Mediante secuenciación directa se analizan todos los exones y las regiones intrónicas adyacentes de los
genes AQP2 y AVPR2, en un secuenciador Applied Biosystems 3130XL. Posteriormente se realiza un
estudio de cariotipo molecular mediante array genómico (Affymetrix CytoscanHD array).
3 Resultados
El análisis de secuenciación no detectó ninguna mutación en el gen AQP2, mientras que el gen AVPR2
no se logró amplificar. Los resultados del array genómico tuvieron que ser analizados sin aplicar filtro
dado que la región a analizar se limitó al gen AVPR2, apreciándose una deleción de 354 pb en el
cromosoma X que afectaba a este gen (chrX: 153171418-153171772). Se realizó array molecular en la
madre que resultó ser portadora de la misma deleción, lo que también permitió la realización de un
asesoramiento genético para futuras gestaciones.
4 Conclusiones
El 90% de los pacientes con DIN presentan mutaciones inactivantes en el gen APVR2 que codifica el
receptor que capta la AVP circulante. El 10% restante presentan mutaciones en el gen AQP2 (patrón de
herencia autosómico recesivo), que provocan la falta de respuesta de las células principales de los
túbulos colectores de la nefrona a la acción de la AVP. Sin embargo, no hay descritas en la literatura
pérdidas de heterocigosidad causantes de esta patología, siendo por tanto el primer caso descrito.
C0092 MUCOPOLISACARIDOSIS. PRESENTACIÓN DE DOS FORMAS CLÍNICAS
1 2 1 3
Alicia Rosalina La O Cabrera , Melek Dager Salomon , Annia María Linares Rodríguez , Idalmis Aguilera Proenza ,
4
Tatiana Acosta Sánchez
1
Centro Provincial de Genética Médica de Granma (Granma) Cuba
2
Hospital Infantil Sur/ Centro Provincial de Genética Médica Santiago de Cuba (Santiago de Cuba) Cuba
3
Hospital Provincial “Carlos M. de Céspedes” (Granma) Cuba
4
Centro Nacional de Genética Médica (La Habana) Cuba
1 Objetivos
Las mucopolisacaridosis constituyen un grupo muy heterogéneo de trastornos genéticos debidos a
deficiencias de enzimas necesarias para el metabolismo de los glucosaminoglicanos. Dichas estructuras
no degradadas completamente se acumulan en el interior de las células alterando tejidos y órganos
específicos. En este estudio presentamos dos pacientes con diferentes formas clínicas de desórdenes
lisosomales.
Se estudiaron dos pacientes masculinos de ocho años de edad, utilizando el método clínico
conjuntamente con estudios radiológicos y bioquímicos.
3 Resultados
Las principales características fenotípicas observadas en ambos niños fueron: displasia esquelética con
alteraciones óseas y baja talla, dismorfismo cráneo facial, alteraciones viscerales y discapacidad
intelectual. El hallazgo radiológico de disostosis múltiple se presentó en ambos, con ensanchamiento de
metáfisis en forma de copa para el primero y tórax en quilla por costillas y esternón prominentes, en el
segundo. Las pruebas metabólicas en orina resultaron positivas para azul de toloidina. Se observó
excreción de keratán sulfato y condroitín sulfato 6 respectivamente en estos pacientes. Por la sospecha
diagnóstica para el primer niño se evaluó la actividad de las enzimas n-acetil-α-D-glucosaminidasa, β-
galactosidasa, arilsulfatasa B y β-glucoronidasa, resultando normales. En el segundo se determinaron la
α-L-iduronidasa, β-galactosidasa y β-glucoronidasa. Esta última con un valor de actividad inferior al 30%.
4 Conclusiones
En el primer paciente por cuadro clínico y exclusión de estudios enzimáticos se planteó
Mucopolisacaridosis tipo IV-A o Síndrome Morquio tipo A. En el segundo paciente además de sus
características clínicas, el estudio enzimático fue positivo para la Mucopolisacaridosis tipo VII o Síndrome
Sly.
C0111 UTILIDAD DE UN PANEL NGS PARA LA CARACTERIZACIÓN GENÉTICA DE
PACIENTES CON ENFERMEDADES MITOCONDRIALES (OXPHOS) CAUSADAS POR
DEFECTOS EN LA TRADUCCIÓN MITOCONDRIAL
1 2 1 3 2
Pablo Serrano-Lorenzo , Alberto Blázquez Encinar , Laura Rufián , Maria Teresa García-Silva , Joaquín Arenas , Sara
4 1 2 2
Jiménez , Adrián González-Quintana , Aitor Delmiro , Miguel Ángel Martín Casanueva
1
Instituto de Investigación Hospital 12 de Octubre (i+12) (Madrid) España
2
Instituto de Investigación Hospital 12 de Octubre (i+12)/U723 CIBERER (Madrid) España
3
Unidad de E. Mitocondriales y E. Metabólicas Hereditarias. Hospital 12 de Octubre (Madrid) España
4
Hospital 12 de Octubre/U723 CIBERER (Madrid) España
1 Objetivos
La amplia heterogeneidad clínica y genética subyacente a la patología mitocondrial hace difícil su
diagnóstico genético mediante secuenciación dirigida. Recientemente, se han descrito en pacientes
pediátricos y con diversos fenotipos numerosas mutaciones en genes nucleares implicados en distintas
etapas de la traducción mitocondrial.
Mejorar la caracterización genética en pacientes OXPHOS mediante el diseño de un panel NGS de genes
involucrados en la traducción mitocondrial.
Se diseñó un panel NGS de 43 genes mediante captura Haloplex-Agilent, con una cobertura teórica del
99,99 %. Se estudiaron prospectivamente 42 pacientes menores de 15 años sin lesiones moleculares
frecuentes en el mtDNA que presentaban fenotipos descritos previamente asociados a estos genes y/o
déficits combinados en complejos OXPHOS. Las librerías se secuenciaron en una plataforma PGM-
IonTorrent. La anotación y priorización de variantes se realizó mediante integración de “scripts” propios
con Annovar.
3 Resultados
En 4 pacientes (10% del total) se priorizaron mutaciones potencialmente patogénicas en: 1) gen VARS2,
en un niño con hipotonía, disfagia y déficit del complejo IV, 2) gen AARS2, en un paciente con hipotonía,
acidosis láctica y proliferación mitocondrial, 3) gen TRMU, en una niña con acidosis láctica, hepatopatía,
encefalopatía, hipotonía y déficits combinado de los complejos I y IV, y 4) gen RARS2, en una niña con
microcefalia, hipotonía, encefalopatía severa, ceguera cortical y atrofia cerebral, con alteraciones en
sustancia blanca.
4 Conclusiones
En trastornos poco frecuentes con extrema variabilidad fenotípica como los defectos OXPHOS la
estrategia dirigida a la utilización de paneles NGS centrados en genes que participan en una ruta
biológica común permite identificar la causa molecular, especialmente en pacientes infantiles con
fenotipos clínicos y bioquímicos OXPHOS complejos. Por otro lado, la versatilidad de los chips en PGM-
IonTorrent permite gestionar mejor la demanda en estas enfermedades de baja prevalencia.
C0134 INCONTINENCIA PIGMENTARIA
Marina Salamanca Campos, Blanca Borrás Mullor, Amparo Sanchis Calvo, Amparo Fuertes Prosper
Hospital Universitario Dr Peset (Valencia) España
1 Objetivos
La incontinencia pigmentaria (IP) es una entidad autosómica dominante ligada al cromosoma X (Xq28).
Es una genodermatosis neurocutánea que afecta a los tejidos derivados del ectodermo. La afectación
cutánea presenta 4 estadíos clásicos que siguen
las líneas de Blaschko: vesículas inflamatorias perinatales; máculas verrucosas; hiperpigmentación lineal
y curvilínea (desde los 6 meses hasta la adolescencia) y cicatrización dérmica con hipopigmentación
linear (adultos).
Otros hallazgos incluyen alopecia, hipodontia, uñas distróficas y neovascularización de la retina que
predispone a su desprendimiento.
Desde el nacimiento se produce una apoptosis selectiva de las células que expresan el
cromosoma X portador, resultando en una inactivación del cromosoma X en las mujeres afectas de IP.
El 65% de los afectos tienen una deleción de los exones 4-10 del gen IKBKG. Los padres pueden estar
clínicamente afectados o asintomáticos (posible mosaicismo germinal). La IP es letal en la mayoría de
embriones masculinos. Existen varones afectados con Síndrome de Klinefelter (47 XXY) o mosaicismo
somático para la deleción. Las mujeres afectadas tienen un 50% de posibilidades de transmitir el alelo
mutado.
Lactante mujer de 1 mes con lesiones ampollosas persistentes desde los 7 días de vida. Madre sin
lesiones cutáneas, con un aborto previo.
3 Resultados
Ecografía cerebral y revisión oftalmológica normales.
Biopsia cutánea con espongiosis eosinofílica. Vesículas intraepidérmicas con exocitosis de eosinófilos.
Estudio genético molecular: deleción de 11,7kb en los exones 4-10 del gen IKBKG. El estudio molecular
materno muestra la misma alteración genética detectada en la hija.
Durante su seguimiento hasta la actualidad (2 años) se observan las distintas lesiones evolutivas
características, pelo escaso y uñas distróficas. Dentición adecuada con incisivos cónicos. No desarrolla
patología ocular ni del desarrollo psicomotor
4 Conclusiones
El diagnóstico molecular permite la confirmación diagnóstica y consejo reproductivo adecuado. El
tratamiento es sintomático con necesidad de seguimiento oftalmológico y odontológico.
C0166 CONFIRMACIÓN DIAGNÓSTICA DE CASOS IDENTIFICADOS EN EL CRIBADO
NEONATAL CON SOSPECHA DE DEFICIENCIA DE ACIL-COA DESHIDROGENASA DE
CADENA MUY LARGA
Patricia Alcaide Alonso, Isaac Ferrer-López, Fatima Leal, Pedro Ruiz-Sala, Magdalena Ugarte, Belen Pérez, Celia
Pérez-Cerdá, Begoña Merinero Cortes
Centro de Diagnóstico de Enfermedades Moleculares, Centro de Biología Molecular-SO UAM-CSIC, Universidad

Autónoma de Madrid, Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER), IdiPAZ, Madrid
Cantoblanco (Madrid) España
1 Objetivos
La deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga (VLCAD) puede ser identificada en
neonatos presintomáticos en los programas de cribado neonatal. Presentamos un estudio retrospectivo en
individuos identificados en el cribado neonatal con sospecha de deficiencia VLCAD, integrando los datos
bioquímicos y genéticos junto con la actividad enzimática VLCAD en linfocitos, con el fin de realizar la
confirmación diagnóstica y facilitar información a los clínicos sobre la necesidad o no de realizar
intervención terapéutica.
Muestras biológicas (sangres totales, plasmas y/o linfocitos) de 36 neonatos asintomáticos seleccionados
en el cribado neonatal ampliado con valores elevados de tetradecenoilcarnitina (C14:1) en sangre seca.
Para la confirmación diagnóstica se estudió el perfil de acilcarnitinas (AC) en plasma mediante MS/MS de
los 36 casos, se realizó el análisis de mutaciones del gen ACADVL mediante secuenciación por Sanger
en DNA de 28 casos; y se midió la actividad VLCAD en linfocitos mediante LC-MS/MS cuantificando los
productos de la oxidación de palmitoil-CoA en 18 casos.
3 Resultados
Doce de los 36 casos presentaron valores significativamente elevados de C14:1 (0.36-2.74 µmol/L; NV
<0.17) y de las relaciones C14:1/C2, C14:1/C16 y C14:1/C12:1 en plasma, presencia de dos mutaciones
en el estudio genético y una actividad VLCAD muy deficiente (<12% del control intraensayo (CIE)), siendo
considerados verdaderos casos positivos.
Otros 17 casos con elevaciones moderadas de AC, identificación de una sola mutación y/o actividad
enzimática intermedia (18-57% del CIE) fueron clasificados como portadores. Y a los siete restantes no se
les encontró ninguna mutación y fueron clasificados como “falsos positivos”.
4 Conclusiones
Estos resultados ponen de manifiesto la importancia de integrar los datos bioquímicos, enzimáticos y
genéticos para un correcto diagnóstico de los casos identificados en los programas de cribado neonatal.
C0199 VARIANTE DE MTDNA CAUSANTE DE DIABETES Y SORDERA DE HERENCIA
MATERNA
Alvaro Gragera, Pilar Carrasco
Complejo Hospitalario Universitario de Huelva Huelva (Huelva) España
1 Objetivos
La diabetes y sordera de herencia materna (MIDD) es trastorno de la edad adulta que implica una
mutación en el ADN mitocondrial, que codificará para un tipo de ARN de transferencia. La mutación más
frecuente encontrada en este tipo de patologías es en el gen MTTL1, en concreto la variante A3243G.
Este desorden mitocondrial se caracteriza en su inicio por pérdida auditiva y diabetes, entre la segunda y
tercera década de vida. Esta alteración genética presenta un fenotipo muy variado, llegando a ser
complicado el diagnóstico de este tipo de patologías.
El caso índice es una mujer diagnosticada de miocardiopatia dilatada, diabética y con sordera
neurosensorial. Vimos que la sordera y la diabetes familiar podían ser debidas a una alteración
mitocondrial.
Se obtuvo DNA a partir de sangre periférica, se procedió a la amplificación mediante primers específicos
para ADN mitocondrial, entre los nucleótidos 3029 y 3456. Posteriormente se secuenció el producto de
amplificación obtenido mediante el secuenciador automático ABI 3130. Se precedió al estudio de la
secuencia mediante el software SeqScape v.2.5 y la búsqueda de las posibles variantes en la base de
datos MITOMAP usando como secuencia de referencia la secuencia de Anderson.
3 Resultados
Se obtuvo la variante A3243G en heteroplasmia en la mujer índice. Por tanto se procedió al estudio del
resto de los familiares con fenotipo de la enfermedad, obteniendo igual resultado, variante A3243G en
heteroplasmia en cuatro miembros de la familia.
4 Conclusiones
Tenemos constancia de al menos cuatro generaciones con sordera y diabetes, todas ellas de herencia
materna. Estandoo cuatro miembros de la misma afectos por la variante. La alta prevalencia de esta
mutación en la población adulta hace que sea la más frecuente en pacientes con diabetes de origen
mitocondrial. Siendo esta alteración mitocondrial una de las alteraciones neurogenéticas más frecuentes
en la población adulta.
C0235 VARIANTES GENÉTICAS DE LA HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAR
1 2 2 3
María del Pilar Sanz Martín , Ana Arteche López , Iluminada García Polo , Sonia Rodríguez Nóvoa , Carmen
3 2 2 2
Rodríguez Jiménez , Catalina Delgado Tortajada , Marta Molina Romero , Concepción Alonso Cerezo
1
Pilar Sanz Martín Madrid (Madrid) España
2
Hospital Universitario de la Princesa (Madrid) España
3
Hospital Universitario la Paz (Madrid) España
1 Objetivos
Describir las variaciones patogénicas en los genes estudiados de los pacientes que cumplen criterios de
la hipercolesterolemia familiar (HF).
Se derivaron 154 pacientes de los cuales 118 cumplían criterios de la Dutch Lipid Clinic Network (DLCN)
de HF según cierto (>8), probable (6-7) y posible (>3). Se ha descartado hipotiroidismo, enfermedad renal,
diabetes o fármacos. Se estudiaron los genes LDLR, APOB, PCSK9 Y LDLRAP1 y el tipo de variante
patogénica. Las variantes genéticas han sido clasificadas como: patogénicas, de significado incierto y
benignas. La técnica empleada fue el Lipochip o secuenciación masiva y MLPA.
3 Resultados
De los 118 pacientes, en 54 (45.8%) se detecta una mutación, afectando a ambos sexos (44% hombres,
56% mujeres).
En el 97% de los casos se detecta variante en el gen LDLR, en el 2% en el gen PCSK9 y 1% en el gen
LDLRAP1.
En el 93% de los casos la alteración es causada por la variación de un único nucleótido, en el 5% a una
deleción y en el 2% por una inserción.
En cuanto al tipo de variantes, en el 26% de los afectados son de significado incierto y en el 74% son
patogénicas.
4 Conclusiones
La variación de un único nucleótido en el gen LDLR se ha detectado con más frecuencia. En un 54% de
pacientes afectados no podemos discriminar cuál es la variante implicada, ya sea porque existen otros
genes aun no estudiados o bien la técnica de estudio empleada no detecta las variantes genéticas
preseleccionados.
C0237 GENOTIPADO CYP21A2 EN LA HIPERPLASIA SUPRARRENAL CONGÉNITA
(HSC). ALGO MÁS QUE ASESORAMIENTO GENÉTICO.
Begoña Ezquieta Zubicaray, Ana Cambra Conejero, Consolación Casado Fúnez, Mª Dolores García González
Laboratorio de Diagnóstico Molecular. Servicio de Análisis Clínicos/Bioquímica Clínica. Hospital General Universitario
Gregorio Marañón. (Madrid) España
1 Objetivos
La deficiencia 21-hidroxilasa, causa mayoritaria de HSC presenta formas neonatales clásicas (CL) y
formas leves tardías (NC), todas ellas recesivas. El marcador 17OHProgesterona determinado mediante
inmunoanálisis directo presenta limitaciones: falsos positivos HSC en las muestras neo- y perinatales y
pobre discriminación de formas NC y portadores con hiperandrogenismo (HA) en adultas y niño/as. Nos
planteamos valorar las aportaciones del genotipado CYP21A2.
3.223 pacientes con sospecha HSC provenientes de hospitales terciarios del ámbito nacional (1995-
2015): 620 sospechas perinatales, 1.705 pediátricas y 898 adultas. Cribado de mutaciones frecuentes,
dosis génica, secuenciación y microsatélites HLA.
3 Resultados
En 365/620 sospechas perinatales se confirmó la HSC, CYP21A2+ (dos alelos graves, GG); en 255 el
estudio fue negativo, en 119 la clínica de clitoromegalia o hiperpigmentación y en 136 sólo la 17OHP
habían motivado la sospecha. De las formas pediátricas, 851 fueron formas NC (793 CYP21A2+), de las
que 671 fueron LL (dos alelos leves) o LG (79%); 795 HA (ninguno con dos alelos mutados, 377
portadores) y 59 fueron formas CL (todas GG), 26 de ellas VS (21 varones). En etapa adulta 821/883
mujeres, 544 fueron formas NC (496 CYP21A2+), 444 LL o LG (82%); 312 fueron HA (ninguno dos alelos
mutados y 114 portadores) y 7 eran formas CL (GG). Un 35% de las formas NC y un 9% de los
portadores con HA presentaron un alelo grave.
4 Conclusiones
La amplia caracterización de alelos graves CYP21A2 permitió confirmar y descartar las sospechas HSC
perinatales (clínica y cribado neonatal). En los afectos de forma NC solo la 17OHP muestra sensibilidad
100%, aunque fueron los datos 17OHP en portadores genotipados los que permitieron establecer el dintel
diagnóstico para la forma NC. Solo el genotipado discrimina los portadores L vs G. La complejidad del
locus y sus alteraciones exige la experiencia en su análisis e interpretación.
C0259 ABORDAJE MULTIDISCIPLINAR EN EL DIAGNÓSTICO DE UN PACIENTE CON
HIPOFOSFATASIA NO DETECTADA
1 2 3
DIANA PÉREZ TORRELLA , María Teresa Darnaude Ortiz , María Jesús Ceñal González-Fierro , Carmen Mercado
3 4 5 5 6
Díaz , Santiago Villanueva Curto , Mónica Olid Velilla , Nemesio Torres Pacho , Jair Antonio Tenorio Castaño , Pablo
6 2
Lapunzina , Aránzazu Díaz de Bustamante Zulueta
1
Servicio de Análisis clínicos. Hospital Universitario de Móstoles MÓSTOLES (MADRID) ESPAÑA
2
Unidad de Genética. Hospital Universitario de Móstoles (Madrid) España
3
Servicio de Pediatría. Hospital Universitario de Móstoles (Madrid) España
4
Servicio de Análisis clínicos. Hospital Universitario de Móstoles (Madrid) España
5
Servicio de Medicina interna. Hospital Universitario de Móstoles (Madrid) España
6
Instituto de genética médica y molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz. Instituto de Investigación
Biomédica (IdiPaz), Universidad Autónoma de Madrid. Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades
Raras (CIBERER), ISCIII (Madrid) España
1 Objetivos
La Hipofosfatasia (HPP) es una enfermedad metabólica hereditaria poco frecuente caracterizada
principalmente por defecto en la mineralización ósea y dentaria. Causada por mutaciones que inactivan el
gen ALPL, provoca deficiencia de la isoenzima fosfatasa alcalina no específica de tejido, y acumulación
de sus sustratos: pirofosfato inorgánico, piridoxal-5´-fosfato (PLP) y fosfoetanolamina. Su expresión
clínica es muy variable, desde síntomas leves como caída precoz de la dentición hasta presentaciones
severas con convulsiones o deformidades óseas que pueden provocar la muerte. El estudio genético del
gen ALPL permite diagnosticar hasta el 95% de pacientes severos.
Es importante su diagnóstico pues los pacientes más severos podrían beneficiarse de tratamiento, y/o
podrían retrasar y mejorar síntomas con ciertas recomendaciones, así como recibir consejo genético
familiar.
Se realizó un screening con propósito de detectar casos de HPP infradiagnosticados en nuestro hospital.
Se seleccionaron aquellos menores que presentaban más de una determinación de fosfatasa alcalina
(FA) inferior al rango de referencia (según edad y sexo), sin ningún valor superior al límite bajo, en un
periodo de 4 años (2012-2015). Se secuenciaron en dichos casos regiones codificantes y uniones exón-
intrón del gen ALPL.
3 Resultados
Se detectaron tres casos con mutación en el gen ALPL. Dos de ellos correspondían a adolescentes
asintomáticas quienes entraron en el protocolo de seguimiento clínico propuesto en el hospital, así como
estudio genético familiar.
Además se detectó una variante no descrita en un varón de 4 años con: debilidad muscular, fractura de
fémur con 18 meses y de tibia con 4 años por caídas desde su propia altura. Analítica: FA 126U/L(142-
335), PLP 164,32µg/L(6,7-18,5). Estos signos son compatibles con HPP.
Actualmente se está valorando la pertinencia de tratamiento a este paciente.
4 Conclusiones
Es importante que los sanitarios conozcan la enfermedad para que sospechen de ella ante pacientes con
datos clínicos compatibles y niveles persistentemente disminuidos de FA.
C0272 ANÁLISIS FUNCIONAL DE MUTACIONES DE PROCESAMIENTO QUE AFECTAN
AL GEN GAA
1 1 1 2
Cinthia Amiñoso Carbonero , Maria Gordillo Marañon , Pilar Martinez Fernandez , Jesus Solera Garcia
1
2
Hospital La Paz Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
La enfermedad de Pompe es una enfermedad minoritaria, autosómica recesiva, causada por mutaciones
en el gen GAA que codifica para la enzima alfa glucosidasa ácida lisosomal. Los mecanismos
patogénicos implicados incluyen alteraciones a nivel de expresión del gen, procesamiento del pre-mRNA
y traducción a proteína. Concretamente, las variantes de procesamiento del RNA mensajero resultan
difíciles de caracterizar debido a la compleja regulación del proceso. En este trabajo se realiza un
abordaje funcional cualitativo y cuantitativo de mutaciones que afectan al exon 2 del gen GAA.
Se ha realizado un análisis cualtitativo de los productos de procesamiento del exón 2, mediante extracción
de RNA, PCR de fragmentos flanqueantes del exon 2, análisis en geles de agarosa y secuenciación de
los fragmentos obtenidos. Asímismo, se ha llevado a cabo un análisis cuantitativo mediante qRT_PCR y
un estudio bioinformático con diferentes algoritmos de predicción disponibles online.
3 Resultados
Hemos identificado variantes alélicas en los productos de expresión del exón 2 del gen GAA, resultado del
procesamiento aberrante como consecuencia de dos mutaciones puntuales que afectan a la región
codificante. El procesamiento aberrante observado no se correspondía con lo que se podría anticipar
dada de la naturaleza de las mutaciones. El análisis comparativo del estudio bioinformático de predicción
junto con el funcional, ha permitido evaluar la capacidad de discriminación de las herramientas utilizadas.
4 Conclusiones
Consideramos recomendable la incorporación del análisis funcional del procesamiento del gen como parte
del proceso de diagnóstico molecular de la enfermedad de Pompe, incluso en aquellas mutaciones en las
que la naturaleza de las mismas no sugiera la posible afectación del procesamiento del mRNA.
C0300 SINDROME DE NEURODEGENERACION PROGRESIVA INFANTIL CAUSADA POR
UNA VARIANTE HOMOCIGOTA DE NOVO EN LA 3-HIDROXIISOBUTIRIL-COA
HIDROLASA-PRIMER CASO EN COLOMBIA
1 2 1 3 3 1
Estephania Candelo Gomez , Lea Cochard , Gabriela Caicedo Herrera , Ana Granados , Juan Gomez , Lorena Diaz ,
1
Harry Pachajoa
1
Universidad Icesi Cali (Valle del Cauca) Colombia
2
Sciencespo (Paris) Francia
3
Fundacion Valle del Lili (Valle) Colombia
1 Objetivos
La deficiencia de 3-hydroxyisobutyrl-CoA hidrolasa (HIBCHD, MIM: 250620) es un trastorno poco
frecuente de la infancia asociado con hipotonía, retraso del desarrollo y atrofia cerebral.
Se llevó a cabo la secuenciación completa del exoma (WES). Identificando una mutación de sentido
erróneo homocigótica no reportada en la literatura (c.808A> G, (p.Ser270Gly) en el gen HIBCH, para la
cual, los padres eran heterocigotos para esta mutación (confirmada por la secuenciación de Sanger).
3 Resultados
Reportamos el caso de lactante colombiana femenina con deficiencia de HIBCH portadora de una nueva
mutación homocigótica (c.808A> G, (NM_014362.3) en la citobanda 2q32.2, incluyendo una mutación
recién identificada (p.Ser270Gly) revelando una correlación clínica. Paciente con padres consanguíneos,
quien presenta vómitos persistentes, irritabilidad, anorexia, dificultad para deglutir, falta de alimentación y
retraso del desarrollo psicomotor, ausencia de lenguaje y regresión del desarrollo. A los 9 meses
desarrolló múltiples episodios de convulsiones y mioclonias. A la exploración física: frente pequeña,
fisuras palpebrales anchas, pliegues epicanticos, sinófisis, hipoplasia de los huesos nasales, puente nasal
bajo, surco filiforme prominente, boca pequeña con arco de cupido, microcefalia, punta de fontanela
anterior, hipotonía axial, reflejo tendinoso disminuido y hepatomegalia.
4 Conclusiones
Este conocimiento es esencial para la elaboración de diagnósticos correctos, manejo clínico y
consideraciones terapéuticas como parte de tratamientos integrales para pacientes con deficiencia de
HIBCH.
C0324 CARACTERIZACIÓN DE GENES CITOCROMO P450 EN PORFIRIA AGUDA
INTERMITENTE EN POBLACIÓN ESPAÑOLA
1 2 3 4
María Barreda Sánchez , Guillermo Glóver López , Mª Carmen Martínez Romero , Pablo Carbonell Meseguer , Vanesa
5 6 7
López González , Maria Juliana Ballesta Martínez , Encarna Guillén Navarro
1
UCAM Universidad Católica de Murcia Guadalupe (Murcia) España
2
Centro de Bioquímica y Genética Clínica/CIBERER/IMIB-Arrixaca (Murcia) España
3
Centro de Bioquímica y Genética Clínica/CIBERER/IMIB-Arrixaca/UCAM (Murcia) España
4
Centro de Bioquímica y Genética Clínica/IMIB-Arrixaca (Murcia) España
5
Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca/CIBERER/IMIB-Arrixaca (Murcia) España
6
Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca/CIBERER/IMIB-Arrixaca/UCAM (Murcia) España
7
Consejería de Sanidad/CIBERER/IMIB-Arrixaca (Murcia) España
1 Objetivos
La porfiria aguda intermitente (PAI) es una enfermedad autosómica dominante con baja penetrancia. Se
presenta con crisis neuroviscerales, precipitadas por fármacos inductores de citocromos P450 (CYP),
entre otros factores.
Se ha descrito menor frecuencia del alelo CYP2D6*4 y mayor frecuencia de metabolizador extensivo
(normal) en PAI en población argentina, sugiriendo una posible relación de éste con el
desencadenamiento de la enfermedad. Objetivo: estudio de las frecuencias alélicas de los principales
CYP hepáticos en PAI y análisis de su relación con la ocurrencia de crisis.
Se estudiaron 50 pacientes, 52% sintomáticos. Se genotiparon los alelos CYP2C9*2 y *3, CYP2C19*2,
CYP2D6*4 y *5, responsables de actividad enzimática reducida; CYP3A4*1B y variantes en número de
copias de CYP2D6, con actividad incrementada. La ausencia de éstos se interpretó como alelo normal
(*1), dada la baja frecuencia de otros alelos alternativos en nuestra población. El fenotipo se clasificó en
ultra-metabolizador (UM), metabolizador extensivo (EM), intermedio (IM) y pobre (PM).
3 Resultados
Las frecuencias halladas fueron: CYP2C9*2 0.28 y CYP2C9*3 0.01, correspondientes a EM 54%, IM 34%
y 12% PM; CYP2C19*2 0.15, EM 70% y IM 30%; CYP3A4*1B 0.03, UM 3%; CYP2D6*4 0.13, CYP2D6*5
0.01, UM 10%, EM 68%, IM 20% y PM 1%.
4 Conclusiones
Las frecuencias alélicas fueron similares a las descritas en población española excepto para el alelo
CYP2C9*2, que fue del doble en PAI. A diferencia de población argentina la frecuencia de CYP2D6*4 no
se vio disminuida respecto a población general. No se encontraron diferencias entre sintomáticos y
asintomáticos, por lo que el grado de actividad de los CYP no se relacionó con el desencadenamiento de
la enfermedad.
C0368 ENFERMEDAD DE NIEMANN-PICK TIPO C CAUSADA POR UNA VARIANTE
SINÓNIMA EN NPC1
1 2 3 4
Cristina Castro Fernández , Víctor Rodríguez Sureda , Patricia Blanco Arias , Manuel Arias Gómez , Carmen
5 6 7
Domínguez Luengo , Jesús Eirís Puñal , Maria Jesús Sobrido Gómez
1
1) Instituto de Investigaciones Sanitarias de Santiago. 2) Universidad de Santiago de Compostela Santiago de
Compostela (A Coruña) España
2
3) CIBBIM – Nanomedicina Vall d´Hebrón; 5) CIBER de Enfermedades Raras (Barcelona) España
3
1) Instituto de Investigaciones Sanitaria de Santiago, 4) Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica, 5) CIBER
de Enfermedades Raras (A Coruña) España
4
1) Instituto de Investigaciones Sanitarias de Santiago; 6)Servicio de Neurología, Complexo Hospitalario Universitario
de Santiago (A Coruña) España
5
3) CIBBIM – Nanomedicina Vall d´Hebrón; 5) CIBER de Enfermedades Raras (Barcelona) España
6
7)Servicio de Pediatría, Complexo Hospitalario Universitario de Santiago (A Coruña) España
7
1) Instituto de Investigaciones Sanitaria de Santiago, 4) Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica, 5) CIBER
de Enfermedades Raras (A Coruña) España
1 Objetivos
La enfermedad de Niemann-Pick tipo C (NPC) es una enfermedad lisosomal autosómica recesiva,
caracterizada por la acumulación de colesterol en el citoplasma y debida a variantes patogénicas en los
genes NPC1 y NPC2. Presentamos la caracterización genética, bioquímica y celular de una paciente con
una variante sinónima en homocigosis en NPC1.
Historia clínica y familiar, examen neurológico y neuroimagen. Secuenciación de nueva generación
mediante la plataforma IonPGM de NPC1, NPC2 y otros ocho genes que causan enfermedades con
fenotipo solapante. Confirmación de variantes mediante secuenciación Sanger. Tinción de filipina en
fibroblastos cultivados a partir de biopsia de piel.
3 Resultados
Mujer de 26 años con distonía desde la adolescencia, posteriormente asoció corea y otros movimientos
involuntarios, parálisis supranuclear de la mirada, disfagia, deterioro cognitivo y trastorno progresivo de la
marcha. La neuroimagen mostró atrofia del cuerpo calloso, cortical de predominio frontal y cerebelosa, así
como hiperseñal difusa de la sustancia blanca. Se detectó la variante sinónima NM_000271.4
(NPC1):c.1686G>A; NP_000262.2:p.V565V en homocigosis en la paciente y en heterocigosis en los
padres. Esta variante, descrita previamente en un paciente, no está presente en la población general. La
tinción de filipina reveló un patrón de acumulación citoplásmica de colesterol no esterificado. Los niveles
de quitotriosidasa plasmática y CCL18 fueron normales.
4 Conclusiones
Cada vez se reconocen más las implicaciones funcionales y potencial patogenicidad de variantes
sinónimas. En el caso presentado, tanto el fenotipo clínico como la acumulación de colesterol intracelular
son típicos de NPC, lo que nos lleva a considerar la variante p.V562V es probablemente causal. Es
necesario profundizar en su caracterización molecular mediante estudios funcionales. Financiación:
Actelion Pharmaceuticals.
C0378 OSTEOPENIA DIFUSA E HIPOPARATIROIDISMO CONGÉNITO COMO
PRESENTACIÓN ATÍPICA DE MUCOLIPIDOS TIPO II
1 1 1 1 2
María Fenollar Cortés , Carmen Cotarelo Pérez , Marta Illán , Diego López de Lara , Joaquín Villarrubia , Raluca
1
Oancea Ionescu
1
Hospital Clínico San Carlos Madrid (Madrid) España
2
Hospital Universitario Ramón Y Cajal (Madrid) España
1 Objetivos
La mucolipidosis tipo 2 (MLII) es una enfermedad recesiva de depóstio lisosomal, rara y fatal, debido a
mutaciones en el gen GNPTAB. Las mutaciones en este gen afectan a la vía de marcaje de las enzimas
lisosomales. Presentamos un caso de MLII con presentación severa y atípica de inicio en la época
prenatal. A raíz del caso se realiza revisión bibliográfica así como diagnósticos diferenciales
Neonata de 36+4 semanas, de progenitores consanguíneos, con fenotipo peculiar y con diagnóstico
prenatal de displasia ósea. Al nacimiento presenta una osteopenia difusa severa con hiperparatiroidismo
grave. Se realiza, por orden cronológico, cariotipo, cribado de mucopolisacáridos en orina y sangre, frotis
sanguíneo, determinación de enzimas lisosomales y estudio mutacional del gen GNPTAB.
3 Resultados
El cariotipo y el estudio de mucopolisacáridos fueron normales. Ante este resultado y por sospecha de
metabolopatía se realiza frotis sanguíneos observándose inclusiones heterogéneas, densas, azurófilas
con vacuolas en los linfocitos, lo que orientó el diagnóstico diferencial hacia MLII, San Filippo o Sly. La
MLII es la patología que con más frecuencia presenta esta alteración en el frotis sanguíneo.
Concentración sérica muy elevada de alfa-iduronidasa y beta flucuronidasa, junto a la serie ósea a los 5
meses, confirmaron una MLII. El estudio molecular demostró la presencia de la mutación en homocigosis
c.3503_3504delTC; p.Lys1168GlnfsX (rs34002892) en el gen GNPTB. Sólo están reportados dos casos
con esta presentación. La paciente falleció con 13 meses de edad por insuficiencia cardiaca congestiva.
4 Conclusiones
En el diagnóstico de enfermedades raras de baja prevalencia, y más ante presentaciones atípicas, el
trabajo en equipos multidisciplinares tiene especial relevancia. Aún con las nuevas tecnologías de
diagnóstico molecular, existen pruebas rutinarias de laboratorios que permiten dirigir los diagnósticos
moleculares. El estudio de enfermedades de depósito requiere de la realización de un frotis sanguíneo.
C0381 IDENTIFICACION DE UN NUEVO GEN CANDIDATO A ORIGINAR
ABETALIPOPROTEINEMIA MEDIANTE SECUENCIACIÓN DE EXOMA
1 1 2 2
Alba Sanchis-Juan , Daniel Perez-Gil , Cecilia Martinez-Costa , Vanessa Martinez-Barquero , Inmaculada Galan-
2 2 2 2 3
Chilet , Veronica Gonzalez-Albert , Pablo Marin-Garcia , F. Javier Chaves Martinez , Ana Barbara Garcia-Garcia
1
Unidad de Genómica y Diagnóstico Genético, INCLIVA, (Valencia) España
2
Servicio de Pediatría. Hospital Clínico Universitario de Valencia (Valencia) España
3
CIBER de Diabetes y Enfermedades Metabólicas Asociadas (CIBERDEM). Unidad de Genómica y Diagnóstico
Genético, INCLIVA valencia (Valencia) España
1 Objetivos
Identificación de la causa que origina abetalipoproteinemia (enfermedad rara del metabolismo lipídico
caracterizada por niveles muy bajos de ApoB, colesterol total y LDLc) en una familia compuesta por dos
hijos afectados y dos padres sin sintomatología, en la que se han descartado mutaciones en genes
conocidos como responsables de esta enfermedad u otros tipos de hipobetalipoproteinemias: APOB,
PCSK9, MTTP, ANGPTL3.
Secuenciación de exoma en los cuatro miembros de la familia, mediante el sistema Illumina, siguiendo las
instrucciones dadas por el fabricante. Análisis de los datos: alineamiento frente al genoma de referencia
utilizando el programa BWA. Llamado de variantes y anotación con los programas GATK Best Practices
v3.4 y Variant Effect Predictor v84.
3 Resultados
Se han detectado dos variaciones (c.1367C>T (p.Thr456Ile) y c.1872T>G (p.Tyr624Ter) (NM_006364.2))
en el gen SEC23A con un patrón de herencia recesiva en la familia, siendo heterocigotos compuestos los
dos hijos mientras que cada uno de los progenitores es heterocigoto para una de estas
variaciones. Estos resultados se han confirmado mediante secuenciación Sanger.
4 Conclusiones
El gen SEC23A forma parte del sistema COP-II, que transporta proteínas desde el retículo endoplásmico
al sistema de Golgi. SEC23A interacciona con SAR1B, gen responsable de la Enfermedad de Retención
de Quilomicrones, otra hipobetalipoproteinemia. Con estos datos, nuestros resultados sugieren que las
mutaciones encontradas son las responsables de la enfermedad en esta familia. La identificación de un
nuevo gen implicado en esta enfermedad abre las puertas a la identificación de nuevas dianas
terapéuticas y una mejora en el diagnóstico de estos pacientes.
C0391 HIPOBETALIPOPROTEINÉMIA FAMILIAR. DESCRIPCIÓN DE UN CASO
1 2 1 1
María Ester Simarro Rueda , María Luisa Quintanilla Mata , Ana María Gómez Pastor , Patricia Juan García , Laura
1
Navarro Casado
1
HGUA (Albacete) España
2
Hospital General Universitario de Albacete, Unidad de Genética Clínica. Servicio de Análisis Clínicos Albacete
(Albacete) España
1 Objetivos
La hipobetalipoproteinemia familiar (HBF) es un trastorno del metabolismo lipídico, con herencia
autosómica codominante. Está caracterizada por concentraciones plasmáticas bajas de apolipoproteina B
(Apo-B), colesterol total (CT) o lipoproteínas de baja densidad (c-LDL). Los portadores de mutaciones en
el gen APOB (2p24) en homocigosis presentan alteraciones clínicas debidas a la malabsorción de grasas
y deficiencia de vitaminas liposolubles. Los portadores en heterocigosis suelen ser asintomáticos; en
algunos casos puede desarrollarse esteatosis hepática, deficiencia de vitaminas liposolubles,
acantocitosis, retinopatía, hipotiroidismo, diabetes mellitus (DM) y alteraciones neurológicas.
Varón de 63 años, con hipocolesterolemia e hipotrigliceridemia, elevación de bilirrubina total (BT) e
indirecta (BI) y de GPT. Presenta hipotiroidismo, dolor abdominal, fibromialgia, pancreatitis, esteatosis
hepática (EH) y colelitiasis.
Hermano con EH, DM tipo 2, CT y c-LDL disminuídos y bilirrubina elevada. Varios familiares con niveles
de CT, c-LDL y TG disminuídos. Estudio genético: secuenciación del gen APOB y posterior estudio de la
mutación en familiares que demostró que la mutación cosegregaba con la enfermedad.
3 Resultados
En el probando se demostró la presencia en heterocigosis de la mutación patogénica c.1315C>T. Es
una mutación nonsense, que genera un codón de parada prematuro (p.Arg439Stop), provocando una
proteína truncada de 438 aminoácidos, frente a los 4536 de la proteína normal. El estudio genético
realizado en el hermano, sobrina e hija con hipocolesterolemia demostró la presencia de la misma
mutación
4 Conclusiones
Mutaciones en el gen APOB originan proteínas truncadas de Apo-B, que se expresa como
hipocolesterolemia y valores bajos de c-LDL. La HBF heterocigota presenta una expresión fenotípica muy
variable, en función del tamaño de los fragmentos de la proteína truncada. En el estudio genético familiar,
el pequeño tamaño de la proteína truncada (10% de la APOB madura) explicaría las manifestaciones
clínicas de los miembros portadores de la mutación.
C0428 DEFECTOS GENÉTICOS SUBYACENTES A LA ACIDOSIS LÁCTICA CONGÉNITA
(ALC)
1 2 2 2 2 2
Irene Bravo-Alonso , Rosa Navarrete , Ana Vega , Begoña Merinero , Celia Pérez-Cerdá , Magdalena Ugarte , Belén
1 1
Pérez , Pilar Rodríguez-Pombo
1
Centro de Biología Molecular Severo Ochoa Cantoblanco (Madrid) España
2
CEDEM (Madrid) España
1 Objetivos
La Acidosis Láctica es el marcador bioquímico de un número muy elevado y heterogéneo de condiciones
genéticas y no genéticas en humanos. Alteraciones del metabolismo del piruvato y/o de la función
mitocondrial se encuentran entre los defectos genéticos asociados a este grupo clínico. Por ello el
diagnóstico definitivo requiere un enfoque multidisciplinario sistemático no siempre disponible, y que sitúa
al análisis genético como elemento diagnóstico clave.
En este trabajo, se muestran los datos relativos a la secuenciación masiva del exoma clínico, utilizando el
TM
panel TruSight One, de una cohorte de 49 pacientes, y que mayoritariamente presentaban
encefalopatía neonatal/infantil con ALC. Todas las variantes identificadas consideradas clínicamente
significativas fueron confirmadas por secuenciación de Sanger.
3 Resultados
En quince de los 49 pacientes se identificaron mutaciones en PDHA1 (3), PDHX (1), ACAD9 (1), TK2 (1),
NDUFS4 (1), FOXRED1 (1), GFM1 (1), TSFM (1), PDSS1 (1), COQ2 (1), ATPAF2 (1), MPRS22 (1) y
TMEM70 (1). Las predicciones in silico apoyaron el carácter patogénico en cada caso. La tasa global de
diagnóstico positivo fue del 31%. Subrayando la heterogeneidad genética de la ALC, nuestros hallazgos
implican 13 genes diferentes en nuestra cohorte de pacientes. En ausencia de análisis funcionales
previos, y siempre que las muestras estén disponibles, se utiliza la determinación de la tasa de consumo
de oxígeno en tiempo real como método estándar para evaluar la funcionalidad mitocondrial en
fibroblastos de pacientes.
4 Conclusiones
En pacientes con sospecha clínica y bioquímica de acidosis láctica congénita, la secuenciación masiva
paralela facilita la identificación de la causa genética subyacente reduciendo con ello los tiempos de
espera hasta alcanzar el diagnóstico definitivo.
C0441 ANÁLISIS MUTACIONAL DEL GEN LIPA MEDIANTE NGS EN UNA COHORTE DE
731 PACIENTES CON ESTEATOSIS HEPÁTICA NO ALCOHÓLICA E
HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAR.
1 2 3 4 5
Jair Antonio Tenorio Castaño , María Teresa Arias Loste , Pedro Arias Lajara , Rocío Gallego Duran , Javier Abad ,
6 7 8 9 9
Mercedes Latorre , Carmelo García Monzón , Leonardo Reinares García , Nagat Alahmade , Dia Afarah , José García
10 11 2 3 3
Morillo , Jesús Banales , Javier Crespo , Sonia Rodríguez Novoa , Pablo Lapunzina
1
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM) Madrid (Madrid) España
2
Servicio de Digestivo. Hospital Universitario Marqués de Valdecilla. Instituto de Investigación Valdecilla (IDIVAL).
Facultad de Medicina. Universidad de Cantabria (Cantabria) España
3
Instituto de GenéticaMédica y Molecular (INGEMM). Instituto de Investigación Hospital Universitario La Paz (IdiPAZ)
(Madrid) España
4
UCM Enfermedades Digestivas y CIBEREHD. Instituto deBiomedicina de Sevilla (IBiS). Hospital Universitario Virgen
Macarena-Virgen del Rocío, Universidad de Sevilla (Sevilla) España
5
Servicio de Gastroenterología y Hepatología. Hospital Universitario Puerta de Hierro-Majadahonda. Universidad
6
Servicio de Digestivo. Consorcio Hospital General Universitario de Valencia (Valencia) España
7
HospitalUniversitario Santa Cristina, Instituto de Investigación Sanitaria del Hospital de la Princesa. (Madrid) España
8
Medicina Interna III, Hospital Clínico Universitario, (Madrid) España
9
Maternity and children Hospital (Dubai) United Arab Emirates
10
Unidad de atención médica integral (UCAMI), Hospital Universitario Virgen del Rocío. (Sevilla) España
11
Instituto de Investigación Biodonostia. CIBERehd. Hospital Universitario de Donostia (Guipúzcoa) España
1 Objetivos
La deficiencia de la lipasa ácida lisosomal (LIPA, OMIM 613497) causa 2 fenotipos distintos en los seres
humanos: la enfermedad de Wolman y la enfermedad por almacenamiento de ésteres de colesterol
(CESD). La enfermedad de Wolman es un trastorno fulminante de inicio temprano en la infancia con
infiltración masiva del hígado, el bazo y otros órganos por los macrófagos llenos de ésteres de colesterol y
triglicéridos. La frecuencia alélica global de la mutación más frecuente en CESD es c.894G>A; p.E8SJM
varía de 0,05% (asiáticos) a 0,17% (caucásicos y latinos). El objetivo del estudio es presentar el análisis
mutacional de dos cohortes de pacientes (una de pacientes con esteatosis hepática no alcohólica y otra
de hipercolesterolemia familiar) en las que se realizó un rastreo de mutaciones en este gen.
Se realizaron estudios de secuenciación masiva mediante uso de 2 paneles personalizados de NGS en
una serie de 403 pacientes con diagnóstico deesteatosis hepática no alcohólica y 328 pacientes con
hipercolesterolemia familiar. Se diseñaron paneles de captura con tecnología Nimblegen y se corrieron en
secuenciadores NextSeq500 y MiSeq (Illumina).
3 Resultados
Se halló un paciente con mutación germinal en LIPA (heterocigosis compuesta) y siete pacientes
portadores de variantes en heterocigosis.
Entre éstos, 2/403 (0,49%) pertenecientes a la cohorte de pacientes con esteatosis hepática no alcohólica
tienen la mutación c.894G>A. Además, 3/328 (1,1%) pacientes con hipercolesterolemia presentaron
mutaciones en el gen LIPA. De las siete variantes encontradas, 3 de ellas estaba descrita en las bases de
datos asociada a CESD y el resto se clasificaron como de significado incierto.
4 Conclusiones
La frecuencia de mutaciones en el gen LIPA en pacientes con esteatosis hepática no alcohólica e
hipercolesterolemia familiar es mucho mayor que en la población general sugiriendo que alteraciones en
este gen tienen un efecto etiológico o modulador de la enfermedad.
C0460 NUEVA VARIANTE EN EL GEN LDLR ASOCIADA A HIPERCOLESTEROLEMIA
FAMILIAR: ESTUDIO FUNCIONAL DE SU IMPACTO SOBRE EL SPLICING.
1 2 3 4 2
Carmen Rodriguez Jimenez , Elena Sevilla , Concepción Alonso Cerezo , Iluminada García Polo , Karen Heath ,
2 2 2 2
Carlos Rodríguez Antolín , Rocio Mena , Pablo Lapunzina , Sonia Rodríguez Nóvoa
1
Instituto de Investigación Hospital Universitario La Paz, INGEMM Madrid (Madrid) madrid
2
Instituto de Investigación Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
3
Servicio de Genética. Hospital Universitario la Princesa (Madrid) España
4
Servicio de Medicina Interna. Hospital Universitario la Princesa (Madrid) España
1 Objetivos
Algunas variantes intrónicas en LDLR ocasionan alteraciones en el proceso de splicing generando
transcritos que pueden dar lugar a formas del LDLR sin actividad o con actividad reducida siendo
responsables del fenotipo de hipercolesterolemia familiar (HF). El estudio funcional de dichas variantes
nos permite confirmar su impacto en el splicing.
Paciente de 66 años, sexo femenino, con LDL-c ≥330mg/dL fue remitida a nuestro centro para estudio
genético de LDLR, APOB, PCSK9 y LDLRAP1 por NGS. Se recogió muestra de sangre en tubos
PAXgene para extracción de ARNm del LDLR a partir de los linfocitos de la paciente. Se realizó RT-PCR
y posterior amplificación del producto con primers específicos para la región cDNA del LDLR bajo
condiciones especiales para abarcar el tamaño completo de los posibles transcritos. La secuencia de los
transcritos se verifica mediante secuenciación Sánger.
3 Resultados
Se encontró una variante genética en el LDLR no descrita previamente,
LDLR:intrón6:c.940+3_940+6del, en heterocigosis. Los predictores bioinformáticos de splicing utilizados,
MaxEntScan, NNSPLICE, Gene Splicer y Human_Splicing_Finder, predicen que esta variante podría
afectar al lugar donador interfiriendo con el splicing. En el estudio del mRNA del LDLR de la paciente se
detectó un transcrito de 584pb excediendo en 240pb con respecto a la secuencia de referencia. El nuevo
transcrito incluyó 130pb del inicio del intrón 6-7 y 214pb de la parte final, por lo que se predice que daría
lugar a una proteína aberrante.
4 Conclusiones
La variante en LDLR:intrón6:c.940+3_940+6del dio lugar a un transcrito aberrante por lo que la variante
encontrada en nuestro paciente se clasifica como patogénica y queda confirmado el diagnóstico de
hipercolesterolemia familiar. La demostración del impacto de variantes en regiones intrónicas proporciona
información valiosa para la correcta clasificación de las nuevas variantes encontradas en el LDLR.
C0464 ESTUDIO FUNCIONAL DE NUEVAS VARIANTES ENCONTRADAS EN EL GEN
LDLR EN PACIENTES CON HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAR
1 2 2 3
Carmen Rodriguez Jimenez , Olga Pernía Arias , Luis Beltrán Romero , Aránzazu Díaz de Bustamente , Lucía Garzón
4 2 2 2
Lorenzo , Inmaculada Ibáñez de Cáceres , Pablo Lapunzina , Sonia Rodríguez Nóvoa
1
Instituto de Investigación Hospital Universitario La Paz, INGEMM Madrid (Madrid) madrid
2
Hospital La Paz INGEMM (Madrid) España
3
Hospital de Móstoles (Madrid) España
4
1 Objetivos
Estudio funcional de nuevas variantes encontradas en el gen que codifica el receptor de lipoproteínas de
baja densidad (LDLR) y estudio funcional de una variante en LDLR previamente descrita.
Se incluyen en el estudio las nuevas variantes missense encontradas tras el análisis de 290 casos índice
de Hipercolesterolia Familiar con puntuación >6 según los criterios de la red de clínicas holandesas. El
análisis genético se realizó mediante NGS de los genes LDLR, APOB, PCSK9 y LDLRAP1. El estudio
funcional de las nuevas variantes se llevó a cabo mediante mutagénesis dirigida, transfección en células
HepG2. Se cuantificó la actividad del LDLR para cada variante por internalización de LDL-dil mediante
fluorescencia. La expresión de LDLR y la eficiencia de la transfección se comprobaron por Western Blot.
3 Resultados
Entre los 290 casos índice de HF analizados en nuestro centro se encontraron tres nuevas variantes
missense en el LDLR: c.518G>C;p.Cys173Ser, c.1594T>A;p.Y532N, c.2054C>A;p.P685Q. Los
predictores bioinformáticos utilizados predecían patogenicidad para todas ellas. Se observó expresión del
LDLR maduro en todas las variantes. La actividad del LDLR de cada mutante con respecto al WT fue del
27%, 22% y 49% para cada una de las variantes citadas. La variante previamente descrita,
c.2054C>T;p.P685L presentó una actividad del 33% respecto al WT.
4 Conclusiones
Las variantes encontradas en el gen LDLR en nuestros pacientes, c.518 G>C;p.Cys173Ser,
c.1594T>A;p.Y532N, c.2054C>A;p.P685Q, han demostrado tener un impacto sobre la funcionalidad del
receptor de LDL, permitiendo su clasificación como patogénicas. De igual forma sucedió con la variante
previamente descrita, c.2054C>T;p.P685L. Los análisis funcionales son una herramienta de gran utilidad
en la mejora de la clasificación de las variantes con potencial patogénico.
C0518 DUPLICACIÓN-DELECIÓN EN IGSF1 EN DOS HERMANOS CON HIPOTIROIDISMO
CONGÉNITO CENTRAL, MACROORQUIDISMO Y GRAN HIPOPLASIA TIROIDEA.
1 2 3 4 5 2 1
Marta García , Meropi Toumba , Julián Nevado , Ángela del Pozo , Maria de Miguel , Nicos Skordis , José C. Moreno
1
Laboratorio Molecular de Tiroides. Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM). Hospital Universitario La Paz.
Universidad Autónoma de Madrid Madrid (Madrid) España
2
Endocrinología Pediátrica, Hospital Makarios. (Nicosia) Chipre
3
Laboratorio de Genómica Estructural y Funcional. INGEMM. Hospital Universitario La Paz.. (Madrid) España
4
Unidad de Bioinformática, INGEMM. Hospital Universitario La Paz. (Madrid) España
5
Laboratorio de ingeniería celular, Instituto de investigación del Hospital Universitario La Paz (IdiPAZ). (Madrid) España
1 Objetivos
IGSF1 es una proteína de membrana con 12 dominios inmunoglobulina, codificada en el cromosoma X y
expresada en hipófisis y testículo. Mutaciones puntuales, pequeñas deleciones y deleciones completas
del gen causan hipotiroidismo congénito central (HCC) y macrooquidismo. Sin embargo, existe una
variabilidad fenotípica interindividual en el tamaño tiroideo de causa desconocida.
Objetivo: Estudio genético del “Síndrome IGSF1” en dos hermanos con HCC y macroorquidismo
asociado a hipoplasia tiroidea severa.
Seguimiento hormonal del eje hipófisis-tiroides y gammagrafía tiroidea. Panel de secuenciación masiva
(NGS, NextSeq 500) de 320 genes de patología tiroidea. MLPA (P319-A2-Thyroid) para descartar CNVs
en genes de hipoplasia tiroidea (TSHR, PAX8, FOXE1, NKX2-1). RT-PCR e inmunohistoquímica de
IGSF1 en tiroides.
3 Resultados
Dos hermanos (26 y 20 años) fueron diagnosticados de HCC (T4: 4/0,44pmol/L, N: 11-25pmol/L; TSH
normal: 2,7/2,8mU/L; N: 1,5-5,7mIU/L) en los primeros días de vida, iniciando tratamiento sustitutivo (L-
T4). A los 3 años son reevaluados con suspensión de L-T4 por un mes, mostrando ambos un
hipotiroidismo con TSH muy elevada (48/81,8 mU/L) y disgenesia tiroidea severa, típicos de hipotiroidismo
primario. Por NGS y Sanger se identificó una duplicación de 7pb seguida de una deleción de 739pb en la
parte carboxi-terminal del gen IGSF1 [c.3488-59_3775delinsCAATAAG] que reordena los exones 17 al
19. NGS y MLPA descartan defectos genéticos en genes de hipoplasia tiroidea. El cDNA y proteína de
IGSF1 se expresan abundantemente en tiroides.
4 Conclusiones
Por primera vez se identifica un reordenamiento complejo tipo INDEL en IGSF1, asociado a un
hipotiroidismo mixto, central y primario. Sin poder descartar defectos en genes del desarrollo tiroideo
desconocidos hasta la fecha, la inédita y abundante expresión tiroidea de IGSF1 implica la posible
participación directa de este defecto en el desarrollo embrionario del tiroides por interferencia de rutas
TFG-B y Activina en las que participa demostradamente en células tirotropas de la hipófisis.
C0539 MUTACIONES MONOALÉLICAS DEL GEN TPO Y DISFUNCIÓN TIROIDEA
GESTACIONAL.
1 2 3 4 4 3
Tamara Esquivel Martin , Ainhoa Iglesias , Natalia Hillman , Ana Coral Barreda , Isabel González , Lucrecia Herranz ,
5 6 6 7
Ángela Del Pozo , Julián Nevado , Elena Vallespín , José Carlos Moreno
1
INGEMM-Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid) España
2
Laboratorio Molecular de Tiroides (INGEMM-Hospital Universitario La Paz) (Madrid) España
3
Servicio Endocrinología (Hospital Universitario La Paz) (Madrid) España
4
Servicio de Endocrinología Pediátrica (Hospital Universitario La Paz) (Madrid) España
5
Unidad de Bioinformática (INGEMM-Hospital Universitario La Paz) (Madrid) España
6
Unidad de Genómica estructural y funcional (INGEMM-Hospital Universitario La Paz) (Madrid) España
7
Universidad Autónoma de Madrid y Laboratorio Molecular de Tiroides (INGEMM-Hospital Universitario La Paz)
(Madrid) España
1 Objetivos
La hipofunción tiroidea gestacional es una patología frecuente. Si su etiología no es autoinmune, se
atribuye a la deficiencia de yodo, pero se desconoce un posible componente genético. El enzima clave de
la síntesis de hormonas tiroideas es la tiroperoxidasa (TPO), cuyos defectos producen hipotiroidismo de
herencia recesiva clásica. Los portadores heterocigotos son eutiroideos, por tanto, se asume que el 50%
de dosis génica de TPO es suficiente para mantener una síntesis normal de hormonas tiroideas. El
objetivo de este estudio es investigar si mutaciones heterocigotas en TPO pueden causar hipotiroidismo
de expresión exclusivamente gestacional.
Estudiamos una cohorte de 16 mujeres con hipofunción tiroidea gestacional (TSH >3 mUI/ml y/o T4 libre
<0.89 ng/ml), anticuerpos antitiroideos negativos, suplementos de yodo en el embarazo y con algún
antecedente familiar de hipotiroidismo. Se secuenció su ADN genómico a través de un panel NGS (Next
Generation Sequencing) de diseño propio con 320 genes tiroideos (plataforma Illumina NextSeq500). Las
variantes se filtraron por frecuencia poblacional y predicción in silico de patogenicidad. Posteriormente, se
confirmaron por PCR y secuenciación Sanger.
3 Resultados
Se identificaron 2 mutaciones patogénicas de TPO en dos gestantes con hipotiroidismo gestacional, que
necesitaron tratamiento hormonal sustitutivo a partir del segundo trimestre del embarazo. Tras el parto,
ambas recuperaron el eutiroidismo. Las dos mutaciones son heterocigotas y consisten en un cambio
puntual en el exón 9, que codifica el centro catalítico del enzima, conocida como inactivadora
(c.1471G>A; p.R491C), y una deleción de 19 nucleótidos en el exón 13 que origina un cambio del patrón
de lectura y un codón stop prematuro (c.2310_2328del; p.H770fsX791), respectivamente.
4 Conclusiones
Mutaciones de TPO en heterocigosis se asocian a hipotiroidismo gestacional, que se recupera tras el
parto. Los resultados indican, por primera vez, la existencia de un componente genético en el
hipotiroidismo no-autoinmune de la gestación.
C0541 DESCRIPCIÓN DE UNA PACIENTE CON CATARATAS Y MUTACIONES EN FLAD1.
NUEVO GEN ASOCIADO A DEFICIENCIA MÚLTIPLE DE DESHIDROGENASAS (MADD).
1 2 3 3 3 3
Judit García-Villoria , Begoña de Azua , Frederic Tort , Leslie Matalonga , Olatz Ugarteburu , Laura Teixidó , Antonia
3
Ribes
1
Hospital Clínico Barcelona (Barcelona) España
2
Servicio de Pediatría, Hospital Son Llàtzer (Palma de Mallorca) España
3
Secció Errors Congènits del Metabolisme-IBC. Servei de Bioquímica i Genètica Molecular. Hospital Clínic de
Barcelona; IDIBAPS, CIBERER (Barcelona) España
1 Objetivos
Presentamos una paciente de 6 meses de edad con cataratas bilaterales, escoliosis y miopatía a los 4
años. Las investigaciones metabólicas mostraron una alta excreción de ácido etilmalónico y un
incremento de acilcarnitinas de cadena media y larga en plasma. Estos resultados sugerían una
deficiencia múltiple de deshidrogenasas (MADD), y la oxidación de palmitato en fibroblastos confirmó la
sospecha diagnóstica. Por ello, la paciente fue tratada con riboflavina y dieta baja en grasas. Sin
embargo, después de 3 años de tratamiento no ha objetivado ninguna respuesta clínica.
Para el estudio molecular se utilizó un panel Haloplex (Agilent technology) de diseño propio, que contenía
los siete genes asociados a MADD.
3 Resultados
Paciente heterozigoto compuesto para dos nuevas mutaciones en FLAD1: c.1555-3C> G y
c.797_798delAGinsT.
FLAD1 codifica para FADS, proteína implicada en la biosíntesis de flavina adenina dinucleótido (FAD) que
es un cofactor redox implicado en varias reacciones importantes del metabolismo. Hasta ahora, sólo se ha
publicado un único artículo (Olsen et al., Am J Hum Genet, 2016) que recopila nueve pacientes con
mutaciones en FLAD1. Se demostró que la mitad de ellos tenían mutaciones de cambio de aminoácido en
el dominio FADS y respondían a la riboflavina; Nuestro paciente no respondió a dicho tratamiento. Este
hecho puede ser explicado porque las mutaciones son más severas que las descritas previamente.
Queremos destacar que es la primera vez que las cataratas se asocian a mutaciones en FLAD1.
4 Conclusiones
FLAD1 debe estudiarse en pacientes con MADD, alta excreción de ácido etilmalónico y cataratas, sean o
no sensibles a la riboflavina.
Epigenética y Regulación genética
C0009 EPIDEMIOLOGÍA CLÍNICA Y GENÉTICA DE LA ENFERMEDAD DE WILSON

1 1 2 3 4 5
Ana Sánchez-Monteagudo , Vincenzo Lupo , María Álvarez , Eva Girona , Begoña Polo , Isabel Sastre , Irene
5 3 1
Martínez , Marina Berenguer , Carmen Espinós
1
Unidad de Genética y Genómica de Enfermedades Neuromusculares y Neurodegenerativas, Centro de Investigación
Príncipe Felipe (CIPF) Valencia (Valencia) España
2
Servicio de Neurología, Hospital General Universitari dÉlx (Alicante) España
3
Servicio de Medicina Digestiva, Hospital General Universitari dÉlx (Alicante) España
4
Servicio de Medicina Digestiva Pediátrica, Hospital Universitari i Politècnic La Fe (Valencia) España
5
Servicio de Neurología, Hospital Universitari i Politècnic La Fe (Valencia) España
1 Objetivos
La enfermedad de Wilson (EW) es un trastorno hereditario causado por una deficiencia en el metabolismo
del cobre por mutaciones en la proteína ATP7B, transportadora de cobre en el hígado. Esto provoca un
fallo en la excreción biliar y una acumulación progresiva de cobre en el organismo, especialmente en
hígado y cerebro. Los pacientes cursan con daño hepático, y muchos de ellos con síntomas neurológicos.
El análisis genético de ATP7B en pacientes y familiares permite obtener un diagnóstico temprano de la
enfermedad y la aplicación de un tratamiento eficaz y preventivo. El objetivo de esta investigación es la
caracterización molecular de los pacientes con EW de la Comunitat Valenciana y su evaluación clínica en
profundidad, con el propósito de avanzar en el diagnóstico y mejorar el pronóstico de estos pacientes.
Serie de 39 casos índice con diagnóstico de EW. Evaluación clínica convencional para disfunción
hepática, RMN cerebral y examen neurológico completo basado en la Global Assessment Scale (GAS). El
estudio genético de ATP7B comprende el análisis de las regiones codificantes, intrónicas flanqueantes y
promotora mediante secuenciación Sanger; y el estudio de grandes deleciones/duplicaciones por MLPA
(multiplex ligation-dependent probe amplification).
3 Resultados
Hemos logrado el diagnóstico genético en 22 casos, y en otros 5 sólo hemos identificado una mutación
patológica. En los probandos restantes, 3 están bajo estudio y en 9 casos no se han detectado
mutaciones en ATP7B. Además de afectación hepática, los pacientes cursan con signos neurológicos
(temblor, distonía y parkinsonismo).
4 Conclusiones
El estudio genético en los pacientes con EW permite ampliar el conocimiento sobre la variabilidad clínica
apreciada. A pesar del tratamiento farmacológico, en varios casos los síntomas neurológicos persisten. Es
preciso realizar una evaluación clínica más detallada para establecer si dichas manifestaciones se deben
aún a la presencia de depósitos de cobre cerebrales.
Financiación: Fundació Per Amor A L' Art
C0025 VALIDACIÓN E IMPLEMENTACIÓN DE UN PANEL DE GENES DE DISEÑO PROPIO
PARA EL DIAGNÓSTICO GENÉTICO DE LAS RASOPATÍAS: MEJORA DIAGNÓSTICA DE
CASOS CON SOLAPAMIENTO CLÍNICO O DIAGNÓSTICO INCIERTO.
1 1 1 2 3 4
Elisabeth Castellanos Perez , Imma Rosas Garrido , Bernat Gel , Hilde Brems , Conxi Lázaro , Ignacio Blanco , Hector
5 6 7 7 1
Salvador , Guillem Pintos , LLuisa Vilageliu , Daniel Grinberg , Eric Legius, Eduard Serra
1
Joint Program on Hereditary Cancer, Germans Trias I Pujol Research Institute (IGTP) Badalona (Barcelona) España
2
Laboratory for Neurofibromatosis Research, Department of Human Genetics, KU Leuven (Leuven) Belgium
3
Hereditary Cancer Program, Catalan Institute of Onclogy (ICO-IDIBELL) (Barcelona) España
4
Clinical Genetics and Genetic Counselling Program, Germans Trias i Pujol Hospital (Barcelona) España
5
Pediatric oncology Unit, Hospital Sant Joan de Déu, Esplugues (Barcelona) España
6
Department of Paediatrics, Germans Trias i Pujol University Hospital and Research Institute (IGTP) & Universitat
deBarcelona (UB) (Barcelona) España
7
Department of Genetics, Microbiology and Statistics, Facultad de Biología, Universitat de Barcelona (UB), IBUB,
IRSJD, CIBERER, (Barcelona) España
1 Objetivos
Las RASopatías son un grupo de síndromes hereditarios causados por mutaciones constitucionales en
genes que codifican para componentes o reguladores de la vía de RAS/mitogen-activated protein kinase
(MAPK), con un alto solapamiento clínico a nivel pediátrico. Estos síndromes incluyen clásicamente la
neurofibromatosis tipo1, los síndromes de Noonan, Costello, Legius, LEOPARD y cardiofaciocutáneo, y
están causados por mutaciones en más de 20 genes. El objetivo de este estudio es validar e implementar
en la actividad diagnóstica un panel de genes desarrollado por nuestro laboratorio para este conjunto de
síndromes que solvente los problemas de heterogeneidad genética y permita el correcto diagnóstico a
pesar del solapamiento clínico.
El estudio de 20 genes asociados a RASopatías se ha realizado mediante un panel NGS de diseño propio
(I2HCPv2.2) a partir de ADN de sangre periférica de pacientes con clínica sugestiva de Síndrome de
Noonan, Costello, LEOPARD o síndrome cardiofaciocutaneo. Los datos se han analizado mediante un
pipeline de análisis propio diseñado específicamente para diagnóstico genético.
3 Resultados
El panel de diseño propio se ha validado en un grupo de 20 casos de RASopatías previamente
caracterizados genéticamente, obteniendo una precisión, sensibilidad y especificidad analíticas superiores
al 99%. Además, se han analizado 20 casos con sospecha clínica de RASopatía sin mutación conocida.
Este estudio ha permitido detectar la mutación causante del fenotipo del paciente en la mayoría de casos
e incluso, en alguno de ellos, detectar mutaciones en genes que no serían seleccionados como una
primera opción diagnóstica según la presentación clínica del paciente.
4 Conclusiones
La utilización en el diagnóstico genético del panel I2HCP basado en la ultrasecuenciación de los genes de
la vía de RAS/MAPK mejora la sensibilidad diagnóstica, permite el diagnóstico de casos con clínica
solapante o incierta, y solventa el problema de la heterogeneidad genética de las RASopatías.
C0084 CRIBADO MASIVO E IDENTIFICACIÓN DE MIRNAS QUE REGULAN EL GEN
SERPINA1 MEDIANTE UNIÓN A LA REGIÓN 3’UTR
1 1 1 2 3
Nerea Matamala Zamarro , Gema Gomez Mariano , Selene Martinez , Beatriz Lara , María Teresa Martínez , Lourdes
4 5 6 7 8 9
Lázaro , Sergio Cadenas , Sergio Curi , Francisco Javier Michel de la Rosa , Cristina Esquinas , Silvia Castillo , Ana
10 8 11 12
Bustamante , Marc Miravitlles , Francisco Casas , Beatriz Martinez-Delgado
1
Genética Molecular. ISCIII (Madrid) España
2
REDAAT (Coventry) Reino Unido
3
4
Hospital Burgos (Burgos) España
5
Hospital Salamanca (Salamanca) España
6
Hospital de Navarra (Navarra) España
7
Hospital Donostia (San Sebastian) España
8
Hospital Vall de Hebron (Barcelona) España
9
Hospital Clinico (Valencia) España
10
Hospital de Sierrrallana (Cantabria) España
11
HU San Cecilio (Granada) España
12
1 Objetivos
Los microRNAs son una nueva clase de reguladores post-transcripcionales, que modulan la expresión de
muchos genes. Se estima que hasta un 30% de los genes humanos están regulados por miRNAs. El
principal mecanismo descrito de la acción es mediante la unión de los miRNAs maduros al extremo 3'UTR
de los genes diana, lo que resulta en la represión transcripcional o degradación de estos genes. Dado que
existe un conocimiento muy limitado sobre los miRNAs implicados en DAAT nuestro objetivo es identificar
miRNAs que estén regulando el gen SERPINA1 que codifica para la Alfa-1 Antitripsina.
Hemos realizado un screening masivo para identificar todos los miRNAs que pueden unirse a la 3'UTR del
gen SERPINA1 utilizando una libreria de miRNAs. La librería de miRNAs Mimic (Sigma-Aldrich) está
basada en la versión 21 de miRBase y cuenta con 2754 miRNAs distribuidos en 35 placas de 96 pocillos.
Hemos co-transfectado células 293T con plásmidos pGL3-Control Modified que incluye la 3ÙTR del gen
SERPINA1 y pRL-CMV y hemos ensayado cada uno de estos miRNAs en ensayos reporteros de
luciferasa.
3 Resultados
Hasta este momento hemos analizado un total de 1092 miRNAs. Este screening nos ha permitido
identificar hasta el momento 63 miRNAs (5.7%) candidatos que bajaban la expresión del gen de la
luciferasa de forma significativa. De estos 63 miRNAs, 12 tienen sitios de unión a la 3'UTR del gen
SERPINA1 según las predicciones bioinformáticas, por más de un predictor, por lo que estos 12 miRNAs
serían buenos candidatos para futuros estudios.
4 Conclusiones
Este estudio va a permitir identificar de forma experimental todos los miRNAs candidatos a unirse al gen
SERPINA1 y regular su expresión, y por tanto podrían estar de alguna manera implicados en el déficit de
Alfa-1 Antitripsina.
C0095 MÉTODO PARA LA TRANSLACIÓN CLÍNICA DE UNA ESTRATEGIA DE
DIAGNÓSTICO GENÉTICO BASADA EN LA COMBINACIÓN DE SECUENCIACIÓN Y
GENOTIPADO DE ALTO RENDIMIENTO
1 1 1 1
Javier Ruiz Ederra , Maitane Ezquerra Inchausti , Olatz Barandika Fernández , Ander Ansasgasti Viteri , Ane Miren
1 2 3
Imaz Borrajeros , Adolfo López de Munain Arregui , Cristina Irigoyen Laborra
1
IIS Biodonostia San Sebastián (Gipuzkoa) España
2
IIS Biodonostia/HU Donostia (Gipuzkoa) España
3
HU Donostia/IIS Biodonostia (Gipuzkoa) España
1 Objetivos
Para trasladar las ventajas de las nuevas técnicas de secuenciación al diagnóstico clínico es clave
simplificar su implementación y abaratar su coste. Con estos objetivos hemos desarrollado una eficiente
estrategia de búsqueda de mutaciones patogénicas que combina la secuenciación masiva -Next
Generation Sequencing (NGS)- con un método altamente sensible de genotipado optimizado por
nosotros.
Hemos secuenciado en pool un total de 67 pacientes con distrofias hereditarias de retina (IRD), utilizando
un panel de más de 300 genes de IRD, de manera simultánea en un secuenciador Ion Proton. Para el
genotipado de los pacientes se ha utilizado una técnica coste-eficiente, sensible y de alto rendimiento
puesta a punto por nuestro grupo.
3 Resultados
Hemos logrado identificar 37 mutaciones atribuibles a la causa de la distrofia de retina en un total de 19
individuos de 67 analizados, representando un 28% de los casos. 17 de las 37 mutaciones encontradas
(46%) han sido descritas por primera vez en este estudio.
4 Conclusiones
La metodología desarrollada supone una simplificación, así como una reducción en los costes de más de
6 veces en el proceso de filtrado de variantes genéticas patogénicas, con respecto a métodos estándares
de secuenciado de NGS. La tasa de detección de mutaciones (28%) es similar a la descrita por otros
grupos en los que el DNA se secuencia de manera individualizada. Además, nuestro método nos ha
permitido encontrar un elevado número de mutaciones noveles. Esta metodología será aplicada como un
primer paso en la búsqueda de mutaciones patogénicas, y podrá ser extrapolado a otras enfermedades
genéticas.
C0105 EL `ÈFECTO ISLA´´ IMPLICACIONES PARA EL DIAGNÓSTICO DE
ENFERMEDADES RARAS Y EL DISEÑO DE LA PRUEBA DEL TALÓN EN RECIÉN
NACIDOS.
1 2 1 3
Pascual Lorente Arencibia , Luis Peña Quintana , Luis García Villarreal , Antonio Tugores
1
Unidad de Investigacion, Complejo Hospitalario Universitario Insular Materno Infantil (Las Palmas) España
2
Servicio de Pediatría, Complejo Hospitalario Universitario Insular Materno Infantil (Las Palmas) España
3
Complejo Hospitalario Universitario Insular Materno Infantil las palmas de gc (las palmas) ESP
1 Objetivos
La población actual de las islas canarias proviene de un contingente aborigen de origen norteafricano, y
de la España continental. El aislamiento insular podría haber propiciado la amplificación de determinados
haplotipos ancestrales. El objetivo de este estudio es determinar, hasta que punto, esta estructura podría
afectar a la aparición de enfermedades genéticas y a su abordaje.
Se realizó un seguimiento genético de algunas enfermedades familiares en Gran Canaria, acompañado
por la secuenciación de exoma en los casos en los que no había genes candidatos.
3 Resultados
El análisis de 35 exomas de individuos con ancestros en Gran Canaria revela que, entre las variantes con
un valor de DP≥20, hasta un 8% pueden no estar anotadas en las grandes bases de datos públicas
implementadas en la herramienta VEP. La presencia de alelos patogénicos recesivos específicos de esta
población ha supuesto la aparición de ciertas enfermedades raras con una frecuencia mayor de la
esperada. En Gran Canaria, el ejemplo más llamativo es la enfermedad de Wilson (MIM:277900), con
más de una treintena de familias afectadas, la mayoría portadoras de una mutación en el gen ATP7B que
sólo se encuentra en Gran Canaria y en descendientes de emigrados. Aproximadamente uno de cada 50
habitantes de la isla son portadores de este alelo, con ancestros en los valles de NE. Otro ejemplo es la
tirosinemia de tipo II (MIM:276600), en el que 5 familias son portadoras de una única mutación endémica
en el gen TAT.
4 Conclusiones
Gran Canaria es la región del mundo con mayor prevalencia de dos patologías raras recesivas. Estos
hallazgos deberían de alertar al sistema de salud sobre la sintomatología y el diagnóstico temprano de
estas enfermedades, e invita a replantearse el escrutinio neonatal de enfermedades raras desde un punto
de vista local.
C0116 ANALISIS DE MIRNAS ASOCIADOS A LOS DISTINTOS PATRONES DE
AMPLIFICACIÓN DE EGFR EN EL GLIOBLASTOMA
1 2 2 2 2
Lisandra Muñoz Hidalgo , Concha López Ginés , Javier Megías Vericat , Rosario Gil Benso , Teresa San Miguel ,
2
Miguel Cerdá Nicolás
1
INCLIVA Valencia (Valencia) España
2
Universidad de Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
El Glioblastoma (GB) es el tumor de mayor agresividad biológica y clínica de los tumores primarios del
SNC, con una supervivencia promedio de 12 meses. La amplificación del receptor del factor de
crecimiento epidérmico (EGFR) presente en el 50-70% de los GBM es uno de los cambios genéticos más
frecuente. Los miRNA, son RNAs de pequeño tamaño, que regulan la expresión del RNAm. Los genes
implicados en las vías de señalización están también regulados por miRNA, entre ellas, las vías de
señalización dependientes de EGFR.
Este trabajo tiene como objetivo el estudio de la expresión de los miRNAs en el GB y el análisis
comparativo con los diferentes niveles de amplificación del EGFR. Estos estudios están orientados a
definir perfiles distintos en los GB, que permitan establecer criterios pronósticos y terapéuticos.
El estudio está basado en 46 tumores diagnosticados de GBs primarios. Se caracterizaron las muestras
tumorales mediante un estudio clínico, morfológico, histopatológico y genético mediante análisis por FISH,
PCR diferencial y MLPA. El estudio de la expresión de miRNAs se realizó mediante Genechip miRNA
Array. El biochip fue analizado mediante el software Partek Genomic Suite 6.6 y la comparación entre
grupos fue mediante un ANOVA P ≤ 0,05.
3 Resultados
Los casos estudiados de GB presentaron tres patrones de amplificación de EGFR: casos con un alto nivel
de amplificación en número de copias y presente en un alto porcentaje de células; casos con un nivel bajo
de amplificación y un número de células afectadas no superior al 15%; y casos sin amplificación de
EGFR.
4 Conclusiones
Se identificaron perfiles de expresión de miRNAs que diferenciaron los tres grupos de glioblastomas,
siendo el miR-200c el miRNA más significativo. El estudio de perfiles de expresión de miRNAs constituirá
una de las nuevas aproximaciones en la caracterización molecular de neoplasias como es el GB.
C0153 POLIMORFISMOS ASOCIADOS CON SUSCEPTIBILIDAD A LA OBESIDAD EN EL
GEN SRNPN EN LA POBLACIÓN ESPAÑOLA
1 2 2 2 2
Rebeca Melero-Valverde , Licínio Manco , Fátima Gimeno-Ferrer , Luz M Gonzalez , Guillermo Gervasini , Goitzane
2 2 2 2
Marcaida Benito , Juan R Gonzalez , Raquel Rodríguez-López , David Albuquerque
1
Laboratorio de Genética Molecular Consorcio Hospital General de Valencia Valencia (Valencia) España
2
Consorcio Hospital General de Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
El gen SNRPN, que codifica para la proteína SmN de unión a RNA, es uno de los genes de
susceptibilidad al Síndrome de Prader-Willi (PWS). Un rasgo neuroendocrino muy marcado de esta
entidad es la hiperfagia, etiopatogenia de una obesidad extrema de aparición temprana. El estudio tiene
como objetivo evaluar este gen como agente causal en obesidad común.
Se realizó un estudio caso-control incluyendo 218 pacientes no relacionados, afectados de obesidad
severa no sindrómica de inicio temprano y pertenecientes a familias de obesidad de alto riesgo; y 190
individuos control del mismo origen poblacional y étnico. Fueron seleccionados y genotipados cuarenta y
nueve polimorfismos (SNPs llave) que evalúan la región completa del gen SNRPN, usando la plataforma
Sequenom MassARRAY.
3 Resultados
Identificamos 4 SNPs (rs12905653, rs752874, rs1391516 y rs2047433) estadísticamente asociados con
obesidad (p<0.05). El análisis de diversidad haplotípica atribuyó a la combinación TAT (rs12905653-
rs8028322-rs4028395) un efecto protector contra la obesidad (OR=0.49; p=0.0006). Además, se
evidenció una puntuación de riesgo poligénico (GRS) basada en los SNPs rs12905653, rs1391516 y
rs2047433. Dicho GRS mostró una asociación significativa con riesgo a sobrepeso grave (OR=1.49; CI
95%: 1.24-1.80), con un incremento del 49% por cada unidad de los alelos de riesgo.
4 Conclusiones
Este estudio aporta la primera evidencia de la implicación de variabilidad genética (SNPs) localizada en el
gen SNRPN en la contribución poligénica al riesgo heredado a desarrollar obesidad común.
Curiosamente, el alelo consenso de cada SNP fue el asociado con el riesgo heredado y transmisible para
la ganancia de peso. Resulta imprescindible la incorporación de datos familiares, el estudio del origen
parental, así como de la segregación de las combinaciones de alelos (capacidad deletérea aditiva); la
asociación de alelos de riesgo (SNPs) con CNVs, se erige fundamental en el avance del conocimiento de
las bases moleculares de la obesidad.
C0161 ESTUDIO DEL METILOMA EN PACIENTES CON CÁNCER DE MAMA TRIPLE
NEGATIVO Y SU IMPLICACIÓN EN LA PREDICCIÓN DE LA RESPUESTA AL
TRATAMIENTO
1 2 3 1 2
BEGOÑA PINEDA MERLO , Angel Diaz Lagares , José Alejandro Pérez Fidalgo , Elisa Alonso , Juan Sandoval , Inés
3 2 1 1 1 1 3
Gonzalez , Ana Belén Crujeiras , Edu Tormo , Sandra Ballester , Anna Adam , Paula Cabello , Octavio Burgués ,
2 3 1
Manel Esteller , Ana Lluch Hernández , Pilar Eroles Asensio
1
INCLIVA VALENCIA (Valencia) ESPAÑA
2
IDIBELL (Barcelona) España
3
Hospital Clínico de Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
El cáncer de mama triple negativo (CMTN) presenta un fenotipo agresivo. Actualmente no existe
tratamiento específico para el CMTN por lo que es importante encontrar marcadores de respuesta a
tratamiento y dianas terapéuticas que ayuden en el diagnóstico y tratamiento de la enfermedad. La
metilación del ADN puede tener un papel importante en la respuesta al tratamiento en CMTN. Objetivo:
estudiar el metiloma en pacientes TN y encontrar potenciales marcadores epigenéticos predictivos de
respuesta al tratamiento.
Métodos: se seleccionaron 24 pacientes con CMTN tratadas con quimioterapia neoadyuvante y
agrupadas según su índice RCB (residual cancer burden) en respondedoras (RCB = 0) y no
respondedoras (RCB > 0). Se realizó un estudio del metiloma (Infinium HumanMethylation450 array,
Illumina) a partir del ADN de biopsias tumorales previas al tratamiento. Los genes diferencialmente
metilados obtenidos de este estudio fueron validados mediante pirosecuenciación (PyroMark Q96 System
version 2.0.6, Qiagen) en una cohorte independiente de pacientes TN (N=30) y en líneas celulares TN
(basales y tratadas con agentes demetilantes). Del mismo modo se realizaron estudios de expresión
(qPCR) de los genes validados.
3 Resultados
Resultados: el análisis del array mostró un patrón de metilación diferente entre pacientes respondedoras y
no respondedoras. Seleccionando aquellas CpGs diferencialmente metiladas localizadas solo en regiones
promotoras, se identificaron 9 genes: 6 presentaron mayor metilación en pacientes no respondedoras y 3
mayor metilación en las respondedoras. Estos genes se relacionaron con funciones celulares como la
transición epitelio-mesenquimal, migración celular y las vías Wnt y Hedgehog. Tras la validación de los
resultados solo se identificó uno de los genes candidatos con menor metilación en pacientes no
respondedoras. Los estudios de expresión génica correlacionaron con los niveles de metilación tanto en
pacientes como en las líneas celulares.
4 Conclusiones
Conclusiones: la metilación del ADN puede ser un marcador predictivo de respuesta al tratamiento en
CMTN
C0189 PERFIL DE MIRNAS PREDICTIVO DE RESPUESTA A TRASTUZUMAB EN CÁNCER
DE MAMA HER2+
1 2 3 4 4 3
Elena Beristain Mendizabal , Borja Calvo , Nerea Ancizar , Ainhara Lahuerta , Lide Larburu , Irune Ruiz , Ricardo
4 5 5 6 6
Rezola , Maria Amparo Viguri , Isabel Guerra , María de los Ángeles Martínez de Pancorbo , Naiara G. Bediaga
1
Elena Beristain Vitoria-Gasteiz (Araba) España
2
Universidad del País Vasco. Intelligent System Group (Gipuzkoa) España
3
H.U.Donostia. (Gipuzkoa) España
4
Onkologikoa (Gipuzkoa) España
5
H.U.Araba-Txagorritxu (Araba) España
6
Universidad del País Vasco. Centro de Investigación Lascaray. Grupo BIOMICS (Araba) España
1 Objetivos
El cáncer de mama es el tumor maligno más frecuente entre la población femenina. El 25-30% de los
cánceres de mama presentan sobreexpresión del oncogén HER2. Las actuales estrategias terapéuticas
tienen por objeto silenciar la hiperactividad de HER2 mediante terapias dirigidas como el trastuzumab, un
anticuerpo monoclonal humanizado contra la proteína HER2, que bloquea su actividad. No obstante, la
mayoría de las mujeres con un cáncer de mama metastásico HER2-positivo termina desarrollando
resistencia al trastuzumab en el plazo de un año a partir del inicio del tratamiento (resistencia adquirida).
E incluso aproximadamente el 40% de los tumores HER2-positivos son resistentes o poco sensibles al
trastuzumab desde el inicio (resistencia innata). Por lo tanto, es necesario identificar los mecanismos de
resistencia a trastuzumab y emplear dicha información en la estratificación de las pacientes según su
capacidad de respuesta a la terapia anti-HER2.
Teniendo en cuenta el papel que juegan los microARNs en la regulación de la expresión de multitud de
genes y su implicación en diferentes rutas del proceso canceroso, el objetivo de este estudio es la
identificación de un modelo predictivo de microARNs capaz de determinar la respuesta al tratamiento con
trastuzumab en mujeres con cáncer de mama HER2-positivo.
Se analizó la expresión de 768 microARNs mediante TLDA cards (Applied Biosystems) en 37 biopsias de
aguja gruesa de cáncer de mama: 21 con una respuesta patológica completa tras tratamiento
neoadyuvante con antraciclinas+taxanos+trastuzumab.
3 Resultados
Se obtuvieron 9 microARNs con un buen valor predictivo (AUC 0.8-0.75). Las muestras sin una respuesta
patológica completa se comportaron de forma más homogénea que las de respuesta patológica completa,
mostrando en general sobreexpresión de estos microARNs.
4 Conclusiones
Dado el gran número de microARNs analizados y el tamaño de la muestra, estudios de validación serán
necesarios para confirmar la utilidad clínica de este modelo predictivo de respuesta al tratamiento.
C0203 HALLAZGOS INESPERADOS EN EL ESTUDIO DE DOS PACIENTES CON
SÍNDROME DE BECKWITH-WIEDEMANN
1 2 2 1 3 3
Javier Errea , Beatriz Barreña , María García-Barcina , Intza Garin Elcoro , Blanca Gener Querol , Isabel Llano-Rivas ,
4 2 2 1
Begoña Loureiro , Sonia Merino , Esther Sarasola , Guiomar Pérez de Nanclares Leal
1
Laboratorio de (epi)genética molecular, OSI Araba (Alava) España
2
Unidad de Genética, OSI Bilbao-Basurto (Bizkaia) España
3
Servicio de Genética, Hospital Universitario de Cruces (Bizkaia) España
4
Unidad Neonatal, Hospital Universitario de Cruces (Bizkaia) España
1 Objetivos
El síndrome de Beckwith-Wiedemann (BWS) puede estar causado por pérdida de metilación en
KCNQ1OT1:TSS-DMR (50% de los pacientes), disomía uniparental del cromosoma 11 (20% de los
casos), ganancia de metilación en H19/IGF2:IG-DMR (5%), mutaciones en CDKN1C (5% de los casos
esporádicos) y, más raramente, duplicaciones paternas, inversión materna o traslocaciones de la región
11p15.5 (menos del 1%). El estudio molecular de la región 11p15 permite caracterizar el mecanismo
genético subyacente, siendo el MS-MLPA la técnica de elección, dado que permite identificar la mayor
parte de las alteraciones genéticas y epigenéticas asociadas a BWS. Dada la posibilidad de presentar
alteración en la metilación en más de un loci, el MS-SNuPE permite el estudio simultáneo de varias de
estas regiones diferencialmente metiladas.
El objetivo de este trabajo fue identificar la alteración (epi)genética causante de este síndrome en dos
pacientes no emparentadas.
Se estudió la región 11p15 mediante MS-MLPA y MS-SNuPE en dos consultantes con clínica sugestiva
de BWS.
3 Resultados
En la paciente 1 se identificó una hipermetilación de novo en la región IGF2P0, sin alteración de
H19/IGF2:IG-DMR. Hay al menos tres casos publicados con de hipometilación en esta región asociada a
Silver Russell, enfermedad espejo del BWS, causadas por deleciones que afectaban al enhancer.
En la paciente 2, se detectó una duplicación de al menos 0.9Kb la región KCNQ1OT1:TSS-DMR. El
estudio familiar confirmó la herencia materna de la duplicación. Existe un caso descrito con una
duplicación materna incluyendo esta región que conlleva una menor expresión de CDKN1C, asociada a
BWS.
4 Conclusiones
(i) En algunos casos el estudio por MS-MLPA puede no identificar alteraciones posiblemente asociadas a
BWS. (ii) Es necesario realizar estudios más detallados (target sequencing / aCGH) para poder
caracterizar correctamente las alteraciones genéticas identificadas de cara a un adecuado asesoramiento.
C0219 UNA APROXIMACIÓN EPIGENÓMICA GLOBAL IDENTIFICA PATRONES
DIFERENCIALES DE LONG NON-CODING RNAS EN LÍNEAS TUMORALES RESISTENTES
A PLATINOS
1 1 2 2 1
Olga Vera Puente , Carlos Rodriguez Antolín , Jin Cheng , Thomas Sellers , Inmaculada Ibáñez de Cáceres
1
Hospital la Paz, IdiPAZ, INGEMM Madrid (Madrid) España
2
MOFFITT Cancer Centre (Tampa, F.L.) Estados Unidos
1 Objetivos
Los ARNs no codificantes de cadena larga (lncRNAs), constituyen un tipo de moléculas reguladoras
recientemente identificadas, involucrados en distintos procesos celulares clave para el correcto
funcionamiento de la célula. Su alteración se ha relacionado con el desarrollo de enfermedades como el
cáncer y en algunos casos, su disfunción se ha visto implicada en el desarrollo de resistencia a fármacos
quimioterapéuticos.
Hemos utilizado 4 líneas pareadas Cisplatino-sensibles/resistentes de cáncer de pulmón no microcítico y
cáncer de ovario para la detección de cambios epigenéticos implicados en el desarrollo de resistencia,
mediante el uso de microarrays de expresión de lncRNAs y mRNAs, así como la secuenciación del
genoma completo por bisulfito (WGBS). Se analizó el estado de metilación en un área situada a -
2000/+500pb del lugar de inicio de la transcripción de aquellos lncRNAs candidatos que mostraron
cambios significativos en su expresión, así como de sus mRNAs asociados, a través de diferentes
algoritmos informáticos. Los cambios observados a nivel de la expresión y de la metilación se validaron
por diferentes metodologías alternativas.
3 Resultados
Globalmente se observó una tasa de cambio en respuesta a platino en un 1,5% y 2,0% del total de
lncRNAs y mRNAs analizados, respectivamente. La correlación de estos datos con el WGBS identificó
dos grupos de lncRNAs según su relación con el gen con el que complementan in silico y su posible
regulación epigenética a nivel de metilación del ADN.
4 Conclusiones
1) Hemos identificado los lncRNAs que cambian en células cisplatino-resistentes a nivel de expresión. 2)
Hemos iniciado su caracterización en cuanto a la potencial regulación epigenética a nivel de metilación
del DNA, identificando inicialmente dos grupos de lncRNAs diferenciados. Estos resultados indicarían una
nueva aproximación al estudio de los mecanismos involucrados en el desarrollo de resistencia adquirida
al tratamiento con cisplatino en cáncer.
C0332 ESTUDIO EWAS DE LA INFLUENCIA EPIGENETICA Y AMBIENTAL EN EL
DESARROLLO DEL TRASTORNO LIMITE DE LA PERSONALIDAD.
1 2 2 2 2 2 2
MJ Arranz Calderon , A Martin Blanco , J Salazar , M Elices , J Soler , C Carmona , JC Pascual
1
2
Hospital de la Santa Creu I Sant Pau (Barcelona) España
1 Objetivos
El Trastorno Límite de la Personalidad (TLP) es el resultado de la interacción de factores ambientales con
factores genéticos. Varios estudios han observado asociaciones entre la presencia de mutaciones génicas
y el riesgo de TLP. Además, se ha observado que estas asociaciones pueden estar moduladas por
factores ambientales como la existencia de traumas infantiles. Estos estudios sugieren que factores
epigenéticos pueden jugar un papel importante en el desarrollo de TLP. La determinación de factores
epigenéticos asociados con el desarrollo de TLP permitirá mejorar su diagnosis y tratamiento.
Se llevó a cabo un estudio EWAS en una muestra clínica de N= 50 pacientes TLP con historia de traumas
infantiles, N=50 pacientes TLP sin historia de traumas infantiles, y N=50 controles con datos sobre
traumas. Se utilizó el array de Illumina humanmethylation450K. El análisis estadístico de resultados se
realizó por medio de R y del paquete estadístico CHAMP para minimizar posibles errores de
estratificación
3 Resultados
-5
Se observaron 38 islas CpG diferencialmente metiladas (p<10 ) entre pacientes TLP y controles. El
resultado más significativo correspondía a una isla CpG situada en un gen previamente relacionado con
-8
esquizofrenia (LRRF1P1, p=10 ). Las comparaciones entre pacientes TLP con traumas infantiles y
-5
pacientes TLP sin historia de traumas revelaron diferencias de metilación en 17 islas CpG (p<10 ). Los
-7
resultados más significativos incluían diferencias de metilación en el gen IL2RA (p=5x10 ), relacionado
-7
con desregulación emocional, y en el gen MLB2A (p= 7x10 ), anteriormente relacionado con
esquizofrenia, trastorno bipolar y trastorno de pánico.
4 Conclusiones
diferencias de metilación en genes relacionados con trastornos mentales y estados de ánimo pueden
contribuir al desarrollo de TLP. Estas diferencias de metilación pueden ser influidas por factores
ambientales, como los traumas infantiles
C0396 MARCADORES EPIGENÉTICOS ASOCIADOS CON LA RESPUESTA A LOS
FÁRMACOS ANTI-TNF EN PSORIASIS MODERADA- GRAVE
1 2 1 3
María del Carmen Ovejero Benito , Ancor Sanz-García , Teresa Cabaleiro , Mar Llamas-Velasco , Miriam Saiz-
1 4 1 1 1 3
Rodríguez , Rocío Prieto-Pérez , María Talegón , Manuel Román , Dolores Ochoa , Esteban Daudén , Francisco
1
Abad-Santos
1
Servicio de Farmacología Clínica, Instituto de Investigación Sanitaria La Princesa IIS-IP, Instituto Teófilo Hernando del
Medicamento, Universidad Autónoma de Madrid Madrid (Madrid) España
2
Servicio de Neurofisiología Clínica, Hospital de La Princesa, Instituto de Investigación Sanitaria La Princesa (IIS-IP)
(Madrid) España
3
Servicio de Dermatología, Hospital de La Princesa, Instituto de Investigación Sanitaria La Princesa (IIS-IP) (Madrid)
España
4
Insituto Teófilo Hernando del Medicamento, Universidad Autónoma de Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
Objetivos: Los fármacos anti-TNF aprobados para el tratamiento de la psoriasis en placa moderada-grave
(adalimumab, etanercept and infliximab) son muy eficaces, pero en torno al 30-50% de los pacientes no
muestran una respuesta adecuada. Por lo tanto, el objetivo de este estudio es identificar marcadores
epigenéticos que puedan predecir la respuesta a fármacos anti-TNF en psoriasis moderada-grave.
Se aisló ADN procedente de sangre periférica de 70 pacientes de psoriasis moderada-grave tratados con
fármacos anti-TNF. El PASI (Área de extensión y severidad de la psoriasis) se utilizó como medida de
efectividad. Los pacientes que alcanzaron una mejora del 90% respecto al PASI basal se consideraron
respondedores excelentes (N=49) mientras que los pacientes que no alcanzaron el 75% de mejora
respecto al PASI basal (PASI75) se consideraron no respondedores al tratamiento (N=21). Las muestras
de ADN se bisulfitaron y se hibridaron en un microarray de metilación Illumina 450K. Se corrigieron los
datos de metilación ajustando las proporciones de los tipos celulares derivados de muestras de sangre.
Se empleó el t-test moderado para comparar valores de metilación entre respondedores excelentes y no
respondedores a fármacos anti-TNF. Los valores de metilación se ajustaron por edad y género. Los
valores de p se ajustaron empleando la corrección de Benjamini-Hochberg.
3 Resultados
Aunque no se encontraron diferencias entre respondedores excelentes y no respondedores, se encontró
una asociación significativa entre tres CpGs (cg09141835 (CBFA2T3), cg23446055 (PRELID2) and
cg03242666 (PMP22)) y el PASI a los 6 meses. Además, tres sitios CpG (cg18837178 (non-coding),
cg23132469 (TAS1R2), cg05221720 (COL9A1)) están hipermetilados en pacientes no respondedores a
adalimumab (n=4) frente a respondedores excelentes (n=21).
4 Conclusiones
Este estudio sienta las bases para la búsqueda de marcadores epigenéticos que permitan predecir la
respuesta a fármacos anti-TNF.
C0434 DELECIÓN PATERNA EN 14Q32 Y SÍNDROME DE TEMPLE: DESCRIPCIÓN DE
DOS CASOS.
1 1 1 1 1
Natàlia Claver Belver , Neus Baena Diez , Elisabeth Gabau Vila , Núria Capdevila Atienza , Anna Ruiz Nel·lo , Miriam
2
Guitart Feliubadalo
1
Corporació Sanitària Parc Taulí (Barcelona) España
2
Sabadell (barcelona) Spain
1 Objetivos
La región 14q32.2 está sometida a impronta genómica y es responsable de dos síndromes, Kagami-
Ogata por ausencia de expresión del alelo materno y Temple por ausencia de alelo paterno, ambos
causados por una disomia uniparental o microdeleción.
Se presentan dos casos afectados de trastornos del neurodesarrollo con deleción en 14q32
diagnosticados mediante array CGH (8x60K ISCA, Agilent technologies).
Para determinar la herencia, el patrón de metilación y el análisis de dosis se realizó la técnica de MS-
MLPA (SALSA MS-MLPA probemix ME032-A1 UPD7/UPD14, MRC Holland).
El paciente con la deleción de 1 Mb en el periodo prenatal presentó un retraso de crecimiento y
oligomamnios. A los tres años presentaba talla baja, retraso psicomotor, hipotonía y fenotipo peculiar.
La paciente con la deleción de 69 kb presentaba retraso psicomotor e hipotonía leves a los dos años.
3 Resultados
La deleción de 1 Mb (incluye 27 genes siendo los más relevantes DLK1, MEG3 y RTL1) es de novo y el
patrón de metilación hipometilado indica que el alelo es materno, por tanto está delecionado el alelo
paterno confirmando el Síndrome de Temple.
La deleción de 69 kb (incluye sólo DLK1) es heredada del padre y el patrón de metilación es normal.
4 Conclusiones
En el primer caso tanto el tamaño de la deleción de origen paterno de 1 MB como las características
clínicas que presenta el paciente concuerdan con las alteraciones descritas en la literatura para el
Síndrome de Temple.
En el segundo caso la ausencia de expresión del único gen delecionado DLK1 en el alelo paterno podría
ser responsable de las características clínicas (retraso psicomotor e hipotonía leves) compatibles con el
síndrome de Temple. Este gen se considera el principal candidato responsable del fenotipo de Temple y
hasta la fecha no hay ningún caso similar publicado en la literatura.
Genética repruductiva/ Genética Prenatal
C0041 DETERMINACIÓN MOLECULAR DE LA ZIGOSIDAD DEL GEN RHD: PREDICCIÓN

DE RIESGO FETAL RELACIONADO CON ANTI-D
Irene Gómez-Manjón, Ana Moreno Izquiedo, Consuelo Pascual Pérez, Marta Moreno García, Francisco Javier
Fernández Martínez
Hospital 12 de Octubre Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
Obtener un método fiable para la determinación de la zigosidad del gen RHD en muestras de sangre
paterna, en embarazadas Rh negativas susceptibles de determinación del Rh fetal mediante
diagnóstico prenatal no invasivo (DPNI).
Se realizó una amplificación mediante PCR de tres fragmentos correspondientes a los exones 5 y 7 del
gen RHD y al exón 7 del gen RHCE de 80, 99 y 111 pb, respectivamente. Los productos obtenidos se
analizaron mediante electroforesis capilar.
Para la determinación de la zigosidad del gen RHD, se calculó la relación de área entre los picos de los
fragmentos del gen RHD y RHCE.
Cuando el paciente es homocigoto, se observan tres picos de aproximadamente igual área de
fluorescencia, correspondientes a los tres alelos amplificados.
En cambio, si es heterocigoto el pico del gen RHCE tiene una relación de área 2:1 con los del RHD.
En un paciente RhD negativo, sólo se observa un pico de fluorescencia correspondiente al fragmento
del gen RHCE.
3 Resultados
Se analizaron un total de 23 muestras de ADN, 17 RhD positivas y 6 RhD negativas, replicadas en
diversos ensayos, extraídas tanto de sangre como de saliva.
Todos los resultados obtenidos se correspondieron con los resultados de aglutinación y/o con la
historia familiar de los pacientes.
No se obtuvieron resultados no informativos.
4 Conclusiones
La determinación de la zigosidad del gen RHD paterno resulta un dato fundamental en el consejo
genético y manejo de los embarazos de mujeres RhD negativas.
Su utilización evitaría la realización de pruebas complementarias, como la determinación del RhD fetal
en sangre materna en casos de padres homocigotos para el gen RHD.
Se propone utilizar esta prueba junto con el DPNI de Rh para diseñar un flujo de trabajo que maximice
el rendimiento diagnóstico de fetos RhD positivos en embarazadas RhD negativas.
C0082 VALIDACIÓN DE UN NUEVO PROTOCOLO BASADO EN LA SECUENCIÓN MASIVA
PARA LA DETECCIÓN DE ANEUPLOIDÍAS EN EMBRIONES HUMANOS
PREIMPLANTACIÓN.
1 1 1 1 1
Xavier Vendrell , Victoria Fernández-Pedrosa , Juan Carlos Triviño , Rosa Bautista-Llàcer , Carmen Collado Micó ,
1 1 2 2 2
Oscar Rodríguez , Elena García-Mengual , Empar Ferrer , Carmen Calatayud , Miguel Ruiz-Jorro
1
Sistemas Genómicos (Valencia) España
2
CREA, Medicina de la Reproducción (Valencia) España
1 Objetivos
Presentamos el diseño y validación de un nuevo protocolo de estudio, basado en técnicas de
secuenciación masiva a baja cobertura, para la detección de aneuploidías en embriones humanos en
estadio preimplantación, a partir de una sola célula embrinoaria, o unas 5 a 10 células del
trofectodermo. La validación pretende asegurar la sensibilidad, especificidad, robustez, precisión, límite
de detección, resolución y reproducibilidad. Desde el punto de vista de la genética unicelular, las
novedades radican en una técnica de amplificación genómica completa que genera librerías de
fragmentos de forma simultánea (en el mismo paso y tubo único), la longitud de las lecturas (150
nucleótidos en paired-ends), el diseño de un algoritmo bioinformático original y de un visor del número
de copias para todos los cromosomas.
Se analizaron 129 muestras: 1) amniocitos únicos cariotipados procedentes de líquido amniótico
cultivado (n=10), 2) productos de amplificación genómica completa (WGA) de blastómeros únicos de
embriones preimplantación aneuploides (n=74); 3) productos de WGA de muestras de trofectodermo
de blastocistos patológicos (n=5), 4) ADN control diluido (n=22) y 5) productos de WGA de blastómeros
únicos de casos clínicos (n=18). Las muestras fueron amplificadas y se generaron las librerías de
fragmentos con índices y adaptadores de la plataforma Illumina. La secuenciación fue en la plataforma
MiSeq® (Illumina) en paired-ends (150nt x2). La validación compara los resultados con técnicas
consolidadas; el cariotipo y los microarrays de CGH. Se definieron parámetros específicos de
rendimiento.
3 Resultados
La sensitibilidad y especificidad se calcularon por cromosoma, alcanzando valores del 96% and 99%
respectivamente. El porcentaje de concordancia por cromosoma fue del 98.2% y el 100% de las
muestras aneuploides fueron detectadas.
4 Conclusiones
La validación rinde resultados altamente reproducibles, exactos y precisos. El protocolo propuesto
representa una estratega válida y coste-efectiva para la detección rutinaria de aneuploidías en
embriones humanos preimplantación.
C0090 DIAGNÓSTICO PRENATAL DE ENFERMEDADES GENÉTICAS Y DEFECTOS
CONGÉNITOS EN SANTIAGO DE CUBA DE 1985 A 2015.
1 2 2 2
Melek Dager Salomon , Dulce M. Hechavarría Estonoz , Yolanda Cuadras Brown , Hilda Alvarez Valiente , Yamilé
2 2 2 2
Lozada Mengana , Margarita Argüelles Arza , Humberto Gómez Pérez , Margarita Mayeta Delis , Acelia Salmón
3 2 2 2
Cruzata , Valia Hernández Viel , Odelinda Acosta Camacho , Tamara Rubio González
1
Hospital Infantil Sur/ Centro Provincial de Genética Médica Santiago de Cuba (Santiago de Cuba) Cuba
2
Centro Provincial de Genética Médica de Santiago de Cuba (Santiago de Cuba) Cuba
3
Hospital Materno Norte “Tamara Bunke” (Santiago de Cuba) Cuba
1 Objetivos
El inicio de los programas de pesquisa de defectos congénitos y enfermedades genéticas en la década
de los 80 del siglo pasado, ha significado un importante avance en el desarrollo de la salud pública.
Nuestro objetivo es describir los resultados fundamentales de estos programas en la provincia de
Santiago de Cuba.
Se analizaron los registros clínicos del servicio de Genética Médica desde 1987 hasta 2015 de los
programas de diagnóstico, manejo y prevención de enfermedades genéticas y defectos congénitos:
detección de malformaciones congénitas por cuantificación de Alfafetoproteína en suero materno (por
tecnología de Sistema Ultra Micro Analítico) y ultrasonido, prevención de hemoglobinopatías mediante
detección de portadores por electroforesis de hemoglobina y diagnóstico prenatal de cromosomopatías
para gestantes con riesgo genético incrementado.
3 Resultados
Para la pesquisa de hemoglobinopatías se estudiaron 486381 gestantes; 32371 (6.6%) presentaron
variantes de hemoglobina. El 9,6% correspondían a parejas de alto riesgo y en el 67.1% se realizó
diagnóstico prenatal molecular. Se identificaron 344 fetos sicklémicos (22%). La cuantificación de
Alfafetoproteína en suero materno se realizó en 427667 gestantes, obteniéndose valores elevados en
37611 (8.7%), en 779 (2%) de ellos se confirmaron malformaciones congénitas fetales. Las anomalías
más frecuentes fueron: defectos de cierre del tubo neural, de pared anterior, renales y
cardiovasculares. Se detectaron defectos congénitos mediante ultrasonido prenatal en 3175 fetos,
incrementándose la capacidad diagnóstica de este medio en los últimos años. El diagnóstico prenatal
de anomalías cromosómicas abarcó 13721 estudios, 261 resultados positivos y predominó la Trisomía
21 con el 46.3%.
4 Conclusiones
La integración de la Genética Médica a la salud pública ha permitido disminuir el impacto de las
enfermedades genéticas y defectos congénitos sobre la calidad de vida y el bienestar de las familias
mediante estrategias de prevención, consolidándose progresivamente los indicadores de los
programas de diagnóstico prenatal.
C0119 ESTUDIO DE LA UTILIDAD DE LOS POLIMORFISMOS GENÉTICOS EN
INFERTILIDAD MASCULINA
1 2 3 2
Anais Garcia Rodriguez , Jaime Gosalvez Berenguer , Moises de la Casa , Rosa Roy
1
Universidad Autonoma de Madrid Campus de Cantoblanco, Madrid. (Madrid) España
2
Universidad Autonoma de Madrid (Madrid) España
3
Clinica de Reproduccion GINEFIV (Madrid) España
1 Objetivos
Con el sistema actual de valoración espermática (volumen, concentración, motilidad, morfología)
muchos casos de infertilidad masculina no pueden ser explicados. La introducción de marcadores
genéticos podría resultar de utilidad para aclarar algunas de estas situaciones.
El objetivo de este estudio es determinar si existe relación entre polimorfismos localizados en los genes
codificantes para enzimas de los sistemas seminales antioxidantes y de reparación del ADN y la
aparición de infertilidad masculina.
Se genotiparon 200 muestras seminales mediante la técnica RFLP (120 de pacientes infértiles y 80 de
donantes de fertilidad probada). Se analizaron 6 polimorfismos potencialmente funcionales localizados
en 5 genes: 3 de sistemas antioxidantes (SOD2, CAT y GPX) y 2 de sistemas de reparación del ADN
(OGG1 y XRCC1).
3 Resultados
Únicamente se encontraron diferencias significativas en la distribución de las frecuencias genotípicas
entre pacientes y donantes para 2 polimorfismos: CAT -262 C>T (pacientes infértiles 0.697 CC, 0.246
CT, 0.057 TT; donantes 0.494 CC, 0.468 CT, 0.038 TT; p=0.005) y XRCC1 Arg399Gln (pacientes
0.488 Arg/Arg, 0.344 Arg/Gln, 0.172 Gln/Gln; donantes 0.278 Arg/Arg, 0.557 Arg/Gln, 0.165 Gln/Gln;
p=0.006); en ambos casos el genotipo heterocigoto es prácticamente el doble de frecuente en
donantes por lo que parece resultar beneficioso. Para el resto de los polimorfismos analizados (OGG1
Ser326Cys, SOD2 Val16Ala y GPX1 Pro200Leu) no se encontraron diferencias significativas en la
distribución de las frecuencias genotípicas entre pacientes y donantes. En nuestra población el SNP
SOD2 Ile54Thr no es polimórfico, apareciendo únicamente el genotipo homocigoto dominante.
4 Conclusiones
Nuestro estudio demuestra de manera preliminar que existen polimorfismos localizados en genes
relacionados con la formación y protección del espermatozoide cuyo genotipo muestra relacción con la
presencia de infertilidad. El estudio en profundidad de este tipo de polimorfismos podría permitir
utilizarlos en un futuro como marcadores genéticos relacionados con el exceso de estrés oxidativo
seminal y/o de fragmentación en el ADN espermático.
C0141 PUBERTAD PRECOZ CENTRAL IDIOPÁTICA: CORRELACIÓN DE VARIANTES
DETECTADAS EN GENES IMPLICADOS EN EL PROCESO PUBERAL
1 2 2 2
Nelmar Valentina Ortiz Cabrera , Rosa Riveiro Álvarez , Miguel Ángel López Martínez , Pilar Pérez Segura , Isabel
2 2 2 2
Aragón Gómez , Carmen Ayuso García , Leandro Soriano Guillén , María José Trujillo Tiebas
1
Hospital Universitario Clínico San Carlos Madrid (Madrid) España
2
Fundación Jiménez Díaz (Madrid) España
1 Objetivos
La pubertad está influenciada por variables hereditarias y ambientales, donde el evento crucial es el
cambio de secreción de GnRH en las neuronas hipotalámicas, a un patrón capaz de activar la
producción hipofisiaria de FSH y LH. La secreción de GnRH está controlada por factores inhibidores
(MKRN3, GABA) y activadores (KISS1, TAC3).
La Pubertad Precoz Central Idiopática (PPCI) es la activación prematura del eje hipotálamo-
hipófisiario-gonadal. Su base genética se ha determinado en menos del 30% de los casos, siendo las
variantes patogénicas de MKRN3 la causa más frecuente. Se ha descrito en algunos pacientes
variantes patogénicas de ganancia de función en el gen KISS1 y en el de su receptor KISS1R.
El objetivo del presente trabajo ha sido analizar un grupo de genes que forman parte de la vía
hormonal relacionada con el inicio puberal, en un grupo de individuos diagnosticados de PPCI y en
población control, para evaluar la presencia de variantes que puedan correlacionarse con la PPCI.
En 20 pacientes con PPCI se analizó el exoma clínico mediante el Kit True SightOne® (Illumina) y
secuenciación en la plataforma NextSeq 500. Filtrado inicial 7 genes: GNRHR, LIN28B, KISS1,
KISSR1, MKRN3, TAC3, TACR3. Todas las variantes fueron validadas por secuenciación Sanger,
buscándose tanto en el grupo control (46 individuos) como en los progenitores.
3 Resultados
En dos pacientes se detectaron variantes probablemente patogénicas en el gen MKRN3:
NM_005664.3:c.203G>A y c.-85A>C.
Un conjunto de polimorfismos en KISS1, KISS1R se encontraron sobrerrepresentados en el grupo con
diagnóstico de PPCI frente al grupo control
4 Conclusiones
Las variantes patogénicas en MKRN3 se confirman como la causa monogénica más frecuente de
PPCI.
Algunos polimorfismos en KISS1 y KISS1R están correlacionados con la PPCI y requieren un análisis
más detallado para valorar su asociación.
El análisis mediante exoma clínico nos permite abrir la investigación a otros genes candidatos.
C0149 MICRODUPLICACIÓN EN EL LOCUS HOXD EN FETO CON MALFORMACION EN
EXTREMIDADES INFERIORES
1 2 2 3
Eugenia Sanchez Gutierrez , Julia Sáenz Hurtado , Jose Maria Carbonell Perez , Enrique Galán Gomez
1
Genetica Badajoz (España) España
2
Hospital Infanta Cristina (Badajoz) España
3
Hospital Materno Infantil (Badajoz) España
1 Objetivos
Las displasias óseas son un conjunto de enfermedades causadas por la alteración primaria del tejido
óseo y cartilaginoso con una incidencia de 1/5000 nacidos vivos, siendo aproximadamente un 25% de
ellas letales. Se han identificado más de 400 entidades , de las cuales, en unas 300 se han
encontrado alteraciones genéticas en alguno de los más de 200 genes relacionados con las
anomalías óseas.
Nosotros presentamos el caso de un feto de 17 semanas con sospecha de displasia ósea al que se le
diagnosticó una alteración que involucra a un grupo de genes relacionados con las anomalías del tejido
óseo.
Recibimos una muestra de restos abortivos de un feto con sospecha de displasia ósea en la semana
17. Presentaba un acortamiento e incurvación de los fémures , tibias y peronés, así como sospecha de
contractura de caderas, rodillas y tobillo y pies varos. Cabeza, torax y extremidades superiores
normales. Se realiza cariotipo y estudio de array-cgh.
3 Resultados
Cariotipo normal, 46,XX.
Fórmula del array: arr[GRCh37] 2q31.1(176945816_177030099)x3 dn.
Esta CNV, de 84 kb, contiene una serie de genes cuyas anomalías se han relacionado con
malformaciones esqueléticas de las extremidades: locus HOXD (HOXD13, HOXD12, HOXD11,
HOXD10, HOXD9, HOXD8, HOXD4, HOXD3).
4 Conclusiones
La duplicación de 84kb de la región de 2q31.1 encontrada en el feto afecta al locus HODX. La
alteración de la topografía de este locus produce una desregulación de la expresión del mismo y se ha
asociado a la aparición de malformaciones en las extremidades. Como se ha descrito en la literatura,
este locus es fundamental en el desarrollo correcto de las extremidades y su alteración podría ser la
causa de las anomalías encontradas en el feto en estudio. Serían necesarios estudios más exhaustivos
para determinar cómo influyen las alteraciones de cada uno de los genes en el desarrollo de las
extremidades.
C0159 ANOMALÍA DE LA DIFERENCIACIÓN SEXUAL CON DISCREPANCIA ENTRE EL
CARIOTIPO PRE Y POSTNATAL
1 1 1 2
Maria Jose Alvarez Blanco , Luis Antonio Varela Sanz , Blanca García García , Joaquín Ramírez Fernández , José
3
Manuel Gasalla Herráiz
1
Laboratorio de Genética. Servicio de Análisis Clínicos. Hospital Universitario Príncipe de Asturias. Alcalá de Henares.
Alcalá de Henares. (Madrid) España
2
Servicio de Pediatría. Hospital Universitario Príncipe de Asturias. Alcalá de Henares. (Madrid) España
3
Servicio de Análisis Clínicos. Hospital Universitario Príncipe de Asturias. Alcalá de Henares. (Madrid) España
1 Objetivos
Mejorar la comprensión y el manejo de las anomalías de la diferenciación sexual mediante la
presentación de un caso clínico.
Niña de 5 años diagnosticada prenatalmente de Síndrome de Turner, con cariotipo 45,X en las 29
metafases estudiadas en líquido amniótico.
En la exploración física presenta cabello de implantación baja, tórax ancho con mamilas separadas,
cúbito valgo y genitales femeninos normales.
Se solicita cariotipo de alta resolución en sangre periférica.
3 Resultados
Se observa un mosaicismo con tres líneas cromosómicas: la 45,X predominante (78%) y otras dos con
46 cromosomas y un marcador adicional diferente en cada una de ellas, que se identifican con FISH
como dos isodicéntricos derivados del Y por duplicación del brazo corto y de la región proximal del
brazo largo, con puntos de corte en Yq11.21 (12% de metafases) y en Yq11.22 (10%).
Cariotipo: mos 45,X[39]/46,X,idic(Y)(q11.21)[6]/46,X,idic(Y)(q11.22)[5]
Estos resultados se comprueban en una segunda muestra, así como mediante MLPA de regiones
subteloméricas y QF-PCR en frotis de mucosa bucal, detectando ambas técnicas la presencia de DNA
del cromosoma Y.
Se revisaron los portas del estudio prenatal confirmándose el cariotipo 45,X.
Se realizó una laparoscopia a la paciente observándose un útero rudimentario y cintillas gonadales,
que fueron extirpadas.
4 Conclusiones
En el Síndrome de Turner se ha descrito que el 5-12% de las pacientes presentan un cariotipo 45,X
asociado en mosaico con un cromosoma Y estructuralmente anómalo, en ocasiones con diferentes
reordenamientos, como ocurre en esta paciente.
La existencia de material genético del cromosoma Y representa un riesgo del 10-30% de degeneración
neoplásica del tejido gonadal, por lo que en pacientes con Síndrome de Turner estaría indicado hacer
PCR para detectar secuencias del Y aunque en el cariotipo no se observe mosaicismo ni haya
ambigüedad genital. En los casos en que sea positivo se debe realizar seguimiento y/o extirpación de
las gónadas.
C0170 DETECCIÓN DE ANOMALIAS CONGÉNITAS PRENATALES. EXPERIENCIA EN
NUESTRO CENTRO.
Paloma Badia Agustí, Cristina García Marin, Inmaculada Alcover Barrachina, Amparo Sanchís Calvo, Natalia
Camarasa Lillo, María Reyes Balanzá Chancosa
Hospital Doctor Peset Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
El objetivo principal es el análisis de las anomalías congénitas detectadas en el servicio de Diagnóstico
Prenatal de nuestro centro, desde enero 2012 hasta diciembre 2016.
Como objetivo secundario, se estudiará a posteriori la correlación entre el diagnóstico ecográfico y el
resultado anatomopatológico.
Estudio descriptivo retrospectivo llevado a cabo en nuestro hospital.
Obtención de datos mediante la búsqueda de datos en historia clínica en ORION.
Se incluyeron todas aquellas gestantes que fueron vistas en la consulta de Diagnóstico Prenatal en
semana 12
Periodo de estudio enero 2012 hasta diciembre 2016.
3 Resultados
Se diagnosticaron un total de 590 gestantes con feto afecto de anomalía congénita ( 6.86% de las
gestantes atendidas en la consulta de diagnóstico prenatal).
La edad media de las gestantes al diagnóstico fue de 33 años.
En lo referente la nacionalidad de las gestantes, 78.5% españolas, 21 % extrangeras y del 0.5% no se
disponen datos.
Se agruparon las anomalias congénitas detectadas por sistemas obteniendo los siguientes resultados
• Sistema nervioso central: 135 casos (23%).

• Cara y Cuello: 30 casos (5%).
• Tórax: 19 casos (3%)
• Corazón: 67 casos (11%)
• Pared abdominal y abdomen: 11 casos (2%)
• Aparato digestivo: 13 casos (2%)
• Aparato urogenital: 42 casos (7%)
• Placenta y cordón: 1 caso (0.2%)
• Hidropesía fetal: 7 casos (1.2%)
• Polimalformados: 53 casos 9%
• Sistema músculo- esquelético:25 casos 4.2%
• Cromosomopatias: 178 casos 30.2%
• Otros (1.5%)
o CIR severo: 4 casos
o Óbito fetal :2
o Infección congénita: 2 casos
o Hipercrecimiento 1 caso
4 Conclusiones
Se registraron un total de 6235 partos en nuestro hospital, desde 2012 hasta 2016.
De un total de 6792 gestantes vistas en la consulta de ecografía de primer trimestre de diagnóstico
prenatal durante este periodo de tiempo, a 590 gestantes se les detectó algún tipo de anomalía
congénita ( 8.68%). El tipo de anomalía detectada más frecuente fueron las cromosomopatias (30%).
C0172 ACONDROGÉNESIS TIPO I B
Ana Astorga Zambrana, Carolina Vigil Chacón, Cristina Navarro Gutierrez, Eva María Robles Cuadrado, María Pinel
Rosario
1 Objetivos
Las displasias esqueléticas constituyen un amplio y heterogéneo grupo de trastornos caracterizados
por el anormal desarrollo óseo. Pueden presentarse asociadas a otros defectos congénitos. En su
etiología, encontramos causas extrínsecas e intrínsecas entre las que se incluyen las anomalías
cromosómicas y los trastornos genéticos.
Gestante de 23 años con antecedentes en gestaciones anteriores de aborto espontáneo del primer
trimestre y parto inducido por rotura prematura de membranas.
En gestación actual, presenta un screening para cromosomopatías de alto riesgo para Síndrome de
Down (1/5). En la ecografía de semana 13, se evidencia acortamiento de miembros superiores e
inferiores y se describe posible cardiopatía con comunicación ventricular amplia y dominancia de
cavidades derechas. Se visualizaba higroma quístico. En semana 15, se realiza biopsia corial y estudio
de Arrays siendo el resultado de ambos estudios normal. En semana 28, aparece un derrame pleural
bilateral severo, edema fetal generalizado y retraso del crecimiento (percentil 3). Se deriva a Hospital
de referencia para valorar shunt de drenaje pleural pero la paciente no asistió. En semana 30, se
diagnostica en visita de control muerte fetal anteparto.
3 Resultados
Los hallazgos ecográficos coinciden con acondrogénesis tipo 1 B ya que el feto presentaba hidrops
generalizado, micromelia, hernia umbilical, perfil plano, costillas cortas y defecto de osificación en
columna vertebral.
Nos encontramos a la espera de Arrays específicos de displasia esquelética para confirmación del
caso(secuenciación completa del gen SLC24A2).
La paciente comprendía la letalidad de la displasia esquelética pero no deseaba la interrupción de la
gestación en ningún caso.
4 Conclusiones
*Caso buen documentado para presentación como comunicación oral. A la espera de secuenciación
completa del gen SLC26A2 (tendremos el resultado en Febrero). El caso está bien documentado ya
que contamos con umerosas fotos de ecografías con muy buena calidad y radiografía postnatal para
completar estudio óseo.
C0173 TRISOMÍA 21: CLAVES DEL DIAGNÓSTICO GENÉTICO PRENATAL
Ana Astorga Zambrana, Cristina Navarro Gutierrez, Carolina Vigil Chacón, Eva María Robles Cuadrado
1 Objetivos
El síndrome de Down es la anomalía cromosómica más común entre los neonatos vivos. Es la causa
más frecuente de retraso mental causada por alteración cromosómica. Aproximadamente la mitad de
los pacientes afectados de síndrome de Down tienen cardiopatía congénita.
Presentamos un estudio observacional descriptivo en el que exponemos 40 casos de diagnóstico
prenatal de síndrome de Down durante el periodo comprendido entre 2008 a 2016.
3 Resultados
La media de edad de las gestantes fue de 36 años. El 92,5 % eran mujeres de raza blanca, 7,5 % raza
magrebí y 2,5 % de raza negra. La media de la translucencia nucal fue de 5 mm. Se diagnosticaron en
el 20 % de los fetos malformaciones cardiacas, un feto con onfalocele y un feto con restricción del
crecimiento precoz. Los screening combinados del primer trimestre fueron en un 52,5 % de alto riesgo
para síndrome de Down, un 20 % riesgo intermedio, un 1 % de bajo riesgo y un 15 % no realizaron el
screening por someterse directamente a la prueba invasiva tras hallazgo ecográfico. El diagnóstico
genético de trisomía del cromosoma 21 se obtuvo en un 25 % mediante biopsia corial y en un 75 %
mediante amniocentesis.
El 90 % de las gestantes interrumpieron el embarazo mientras que el 10 % continuó con el embarazo.
4 Conclusiones
El screening de Síndrome de Down en el primer trimestre combina los valores de BHCG, PAPP-A,
translucencia nucal y edad materna. Con estos marcadores genera un riesgo para esta
cromosomopatía con una sensibilidad del 85 % y una tasa de falsos positivos del 5 %. A aquellas
gestantes con screening de alto riesgo, se les ofrece técnica invasiva o estudio de ADN fetal en sangre
materna para confirmación genética de alteraciones cromosómicas fetales.
C0174 DIAGNÓSTICO GENÉTICO PRENATAL DE LA TRISOMÍA 18: ESTUDIO
DESCRIPTIVO OBSERVACIONAL
Ana Astorga Zambrana, Carolina Vigil Chacón, Cristina Navarro Gutierrez, Eva María Robles Cuadrado
1 Objetivos
Los fetos afectos por el Síndrome de Edwards se presentan con más de una malformación severa. El
90 % de ellos presentaran cardiopatías complejas, 40 % anomalías de la fosa posterior, 30 %
onfalocele, 20 % atresia esofágica, 20 % hernia diafragmática, así como alteraciones renales,
restricción del crecimiento, anomalías de posición de manos y pies, fisura palatina y arteria umbilical
única.
Presentamos un estudio descriptivo observacional desde 2008 hasta 2016 con diagnóstico de 10
casos de Síndrome de Edwards en nuestro hospital mediante biopsia corial o amniocentesis.
3 Resultados
La edad media fue de 36 años. El 77 % de raza blanca y el 22 % de origen magrebí. No historias de
consanguinidad documentada. Un 25 % de las gestantes obtuvieron un screening para Síndrome de
Edwards de alto riesgo y otro 25 % riesgo intermedio. El 50 % restante eligió técnica invasiva. La
media de MoM de BHCG fue de 0,16 y de PAPP-A de 0,27. La media de translucencia nucal fue 4.04.
El 55 % de los casos se sometieron a una biopsia corial y el 33 % a una amniocentesis. El 12 %
decidió interrupción legal del embarazo.
En primer trimestre, se detectaron dos casos de hidrops fetal, un caso de anencefalia y un caso con
translucencia nucal aumentada. En 2º trimestre, se detectaron dos casos con afectación de varios
órganos, un caso con malformación cardiaca aislada y otro caso con un retraso precoz del crecimiento
fetal.
4 Conclusiones
En la trisomía 18 generalmente se observa más de una anomalía asociada con fetos
polimalformados. Tras la detección de alguno de estos marcadores, está recomendado el estudio del
ADN fetal mediante amniocentesis, efectuando cuando sea posible un estudio rápido mediante QF-
PCR.
La complejidad de las malformaciones es lo que marca el mal pronóstico (50 % mortalidad intraútero).
C0176 IMPORTANCIA DEL DIAGNÓSTICO GENÉTICO DE CITOPATÍA MITOCONDRIAL: A
PROPÓSITO DE UN CASO
Ana Astorga Zambrana, Carolina Vigil Chacón, Cristina Navarro Gutiérrez, Eva María Robles Cuadrado
1 Objetivos
Las enfermedades mitocondriales conforman un grupo heterogéneo de enfermedades por mutación del
ADN nuclear o del ADN mitocontrial. La procedencia exclusiva del óvulo del ADN mitocondrial
condiciona que las enfermedades mitocondriales sigan un patrón de transmisión particular; bien de
forma autosómica para la alteraciones que tienen lugar en el ADN nuclear y vertical o materno para las
alteraciones del ADN mitocondrial.
Paciente de 26 años sin patología asociada. Como antecedentes de interés, un primer embarazo con
hijo afecto de citopatía mitocondrial con déficit en la cadena respiratoria mitocondrial (diagnóstico
mediante biopsia muscular). Tiene una hija sana posterior. La pareja y la paciente son consanguíneos
(primos hermanos). La paciente acude a de nuevo a nuestra consulta embarazada con una nueva
gestación de curso normal. Se oferta amniocentesis para estudio genético de citopatías mitocondriales
en líquido amniótico que la paciente rechaza.
3 Resultados
El hijo previo debutó con crisis epilépticas al quinto mes de vida. Hoy tiene cinco años y no deambula,
emite bisílabos y se alimenta mediante gastrostomía. Se le realizó una biopsia muscular que resultó
como no concluyente y un estudio citoquímico del músculo con resultado de déficit del complejo I, II,
I+III y II+III de la cadena respiratoria mitocondrial. En la resonancia magnética nuclear postnatal
describe afectación difusa de la sustancia blanca periventricular y lesiones quísticas frontales y el ECG
informa de elementos epileptiformes bilaterales sincrónicos y asincrónicos centro-temporales
bilaterales.
4 Conclusiones
El diagnóstico definitivo de la enfermedad mitocondrial se obtiene con confirmación genética y
bioquímica en la biopsia muscular. En este caso, sería necesario estudiar el tipo de mutación genética
del hermano afecto así como el estudio de progenitores. Una vez identificado el gen, se podrá ofrecer a
esta pareja terapia genética preimplantacional para evitar nuevos casos de hijos afectos.
C0177 HIDROPS FETAL DE REPETICIÓN DE CAUSA NO INMUNE EN PACIENTE CON
HISTORIA DE CONSANGUINIDAD
1 2 2 2
Ana Astorga Zambrana , Cristina Navarro Gutierrez , Carolina Vigil Chacón , Eva María Robles Cuadrado
1
Ana Malaga (Malaga) España
2
1 Objetivos
El hidrops fetal se refiere a colección anormal de líquido en tejidos blandos y cavidades fetales. El
hidrops se clasifica en inmune y no inmune. El no inmune se define por la ausencia materna de
anticuerpos circulantes contra las células rojas sanguíneas.
Paciente de 35 años que acude a primera consulta de embarazo. Como antecedentes personales de
interés, consta embarazo previo con hidrops fetal y posterior embarazo con diagnóstico de mola
hidatiforme parcial (ambos en 2012). Tiene una hija normal nacida en 2009. Existe consanguinidad
(padres primos hermanos). Se descartó por servicio de hematología hemoglobinopatía estructural en
ambos padres.
3 Resultados
En semana 17, se constata hidrops fetal moderado con derrame pleural bilateral moderado y ascitis
abdominal moderada. No se identifican alteraciones anatómicas fetales. Se deriva a hospital de
referencia en Granada donde se solicita estudio genético. Se realiza estudio genético de
metabolopatías y array con resultado de cariotipo normal (46, XY) con una delección en 2p11.2 de
0,981 Mb (chr2:87024867-88005418) que describe como alteración de significación desconocida.
Resultado negativo para enfermedades lisosómicas. Líquido amniótico negativo para estudio
microbiológico.
Acude en semana 26 a visita de control en la que se constata muerte fetal anteparto. La paciente fue
informada en todo momento del mal pronóstico fetal, pero no deseó interrumpir el embarazo con
previamente.
La autopsia fetal confirmó el hidrops fetal con derrame seroso generalizado en cavidades y en tejido
celular subcutáneo sin malformaciones fetales ni otros hallazgos.
4 Conclusiones
El hidrops de causa no inmune (85%) se debe hasta en un 70 % en primer trimestre a anomalías
cromosómicas. Siempre que sospechemos hidrops no inmune, se solicitará estudio QF-PCR y array-
CGH. Si no se alcanza diagnóstico genético, se debe conservar líquido amniótico para investifación de
posible metabolopatía.
C0179 UTILIDAD DEL ANÁLISIS CITOGENÉTICO COMPLETO DE LAS VELLOSIDADES
CORIALES EN EL ESTUDIO DE LOS ABORTOS DIFERIDOS PRECOCES.
1 2 2 2 3 3
Anna Soler Casas , Ester Margarit , Yolanda Viedma , M. Ángeles Villar , Antoni Borrell , Virginia Borobio , Aurora
2
Sánchez
1
Hospital Clínic, Servei de Bioquímica i Genètica Molecular Barcelona (Barcelona) España
2
Hospital Clínic Servei de Bioquímica i Genètica Molecular Seu Maternitat, edifici Helios III s/n08028-Barcelona
(Barcelona) España
3
Hospital Clínic, BCNatal (Barcelona) España
1 Objetivos
Las anomalías cromosómicas constituyen la causa más frecuente de las pérdidas gestacionales de
primer trimestre. El análisis citogenético del material abortivo es esencial para establecer la etiología de
la pérdida y asesorar las pacientes sobre el riesgo de recurrencia. El cultivo convencional de los restos
fetales expulsados presenta serias dificultades debido a contaminaciones microbianas y riesgo de error
diagnóstico por crecimiento de células maternas presentes en la muestra. Estudios recientes utilizando
microarrays, que prescinden del cultivo celular, han demostrado su utilidad en la detección de
anomalías cromosómicas en este tipo de muestras, aunque también presentan limitaciones.
Analizamos los resultados obtenidos en una serie de abortos diferidos de primer trimestre utilizando
una estrategia con una alta tasa de éxito y ausencia de contaminación materna, y destacamos los
aspectos más ventajosos en comparación con los estudios moleculares.
Se obtuvieron 1.119 muestras de vellosidades coriales antes de la expulsión, y se realizó el cariotipo
mediante un cultivo corto. En 603 de las muestras se realizó además un cultivo largo.
3 Resultados
Se obtuvo resultado en el 90.3% de las muestras. Se observó un cariotipo anómalo en el 70,3%. La
anomalía cromosómica más frecuente fue la trisomía autosómica única (64,6% de las anomalías),
seguida por la triploidía (13,1%) y la monosomía X (10,4%). Se detectaron alteraciones estructurales
en el 5,2% de los casos anómalos, anomalías múltiples en el 8,9%, y mosaicos placentarios en el 3,5%
de las muestras con los dos cultivos. El 3,1% de las muestras presentó una reorganización
cromosómica inesperada.
4 Conclusiones
Los resultados obtenidos ofrecen información fiable de la incidencia y tipos de anomalías
cromosómicas y de mosaicos placentarios en abortos diferidos. En comparación con estudios
realizados mediante microarrays, nuestra serie ofrece la mayor tasa de anomalías cromosómicas
causales de pérdida gestacional, incluyendo poliploidías y anomalías estructurales que pueden
incrementar el riesgo de recurrencia.
C0184 DETERMINACIÓN DEL PORCENTAJE DE ADN LIBRE FETAL POR PCR DIGITAL
(DROPLET DIGITAL PCR) PARA EL TEST PRENATAL NO INVASIVO (TPNI)
Maria Collado Diaz, Raquel Tena, Marcos Calderon, Rafael Montaner, Gema Briz, Paloma Ferrer, Dan Diego, Juan
Carlos Triviño, Dolors Sanchez
Sistemas Genomicos, S.L. (Valencia) España
1 Objetivos
Desarrollo de una técnica molecular para determinar el porcentaje fetal en muestras de sangre materna
con el fin de complementar el test prenatal no invasivo basado en secuenciación masiva a baja
cobertura para la detección de aneuploidías cromosómicas y determinación del sexo fetal.
La fracción fetal se ha establecido en más de 100 muestras de mujeres embarazadas con edad
gestacional entre 10 y 19 semanas mediante la técnica molecular de Droplet Digital PCR (ddPCR). La
técnica se basa en cuantificar un gen marcador (RASSF1A) que está hipermetilado en la placenta e
hipometilado en las células de la sangre materna permitiendo así diferenciar entre ambos orígenes. A
partir de la digestión enzimática selectiva de regiones no metiladas, se cuantifica únicamente el gen
RASSF1A presente en el feto, usando como control interno la medida de este mismo gen en muestras
digeridas junto a un gen housekeeping (β-Actina), que está presente de igual forma tanto en la madre
como en el feto (hipometilado). El análisis bioinformático permite una segunda valoración de la fracción
fetal, pero solo en fetos de sexo masculino, dado que el análisis se basa en la presencia o ausencia del
cromosoma Y, y en su cuantificación mediante el número de lecturas totales normalizadas respecto a
los controles de sexo masculino.
3 Resultados
El porcentaje de ADN libre fetal osciló entre 3,42% y 31,38% independientemente de la edad
gestacional. El coeficiente de correlación entre el porcentaje de ADN libre fetal determinado por ddPCR
y el determinado por análisis bioinformático únicamente para los fetos de sexo masculino fue de 0,55.
4 Conclusiones
La técnica de PCR digital es novedosa y a la vez más sensible que la PCR cuantitativa tal y como se
ha publicado recientemente en la literatura. Esta técnica es una herramienta prometedora en el
incremento de la precisión de la fracción fetal.
C0193 DIAGNÓSTICO PRENATAL NO INVASIVO DE LA ENFERMEDAD HEMOLÍTICA
PERINATAL POR ANTÍGENO KELL
1 2 2 3
Ana Bustamante Aragones , Belén Méndez Cea , Sara Perlado Marina , Aurora Viejo Llorente , Maria Dolores
3 1
Hernandez Malaver , Marta Rodríguez de Alba Freiría
1
Servicio de Genética. Hospital Universitario Fundación Jimenez Díaz. CIBERER MADRID (MADRID) ESPAÑA
2
Servicio de Genética. Hospital Universitario Fundación Jiménez Díaz (Madrid) España
3
Unidad de Servicio de Hematología y Hemoterapia. Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
1 Objetivos
La enfermedad Hemolítica Perinatal (EHP) por isoinmunización feto-materna del grupo sanguíneo Kell
ocurre en gestantes Kell negativas (k2/k2) con un feto K(+) (K1/k2). Actualmente el diagnóstico de esta
patología se basa en una titulación periódica de anticuerpos durante el embarazo que no refleja el
grado real de anemia fetal debido a la hipoplasia eritroide que causa este antígeno. El genotipado fetal
del antígeno K en sangre materna permitiría un manejo más eficaz de estas gestaciones. En este
trabajo se expone la determinación prenatal del antígeno K en gestantes Kell negativas mediante el
estudio de ADN fetal presente en el torrente sanguíneo materno por la tecnología actual de
minisecuenciación y por la nueva tecnología de PCR Digital.
Se han estudiado 1-3 muestras de sangre periférica materna (entre las 12-27 semanas de gestación)
de 4 gestaciones diferentes con riesgo de EHP. El genotipado del cambio c.578 C>T del gen KEL
causante del fenotipo K1 se realizó mediante la técnica de minisecuenciación y de PCR Digital en 3 de
los 4 casos. Uno de los casos únicamente se analizó mediante PCR Digital.
3 Resultados
Mediante minisecuenciación se diagnosticaron correctamente 2/3 casos (66%) y se obtuvo un Falso
Negativo. Mediante la técnica de PCR Digital se diagnosticaron correctamente los 4 casos estudiados
(3 fetos Kell positivos y un feto Kell negativo).
4 Conclusiones
La mayoría de las gestaciones con EHP por antígeno K suelen requerir tratamiento antes de la semana
20 porque la anemia es grave y precoz. El genotipado fetal del antígeno K en sangre materna mediante
PCR Digital ha mostrado una eficacia diagnóstica del 100% desde las 12 semanas de gestación. El
estudio de un mayor número de casos ayudaría a confirmar la eficacia de este genotipado y su
relevancia clínica dentro del manejo de las gestantes Kell negativas con riesgo de EHP.
C0197 INVERSIÓN PARACÉNTRICA POLIMÓRFICA EN 8P23.1: REPORTE DE UN CASO
Raquel Tena Ros, Paloma Ferrer, Gema Briz, María Collado, Dan Diego, Marcos Calderón, Rafael Montaner, Dolors
Sanchez-Izquierdo
1 Objetivos
Estudio de los progenitores de un feto afecto de síndrome de deleción/duplicación invertida 8p,
invdupdel(8p), detectado mediante microarray, para descartar que sean portadores de la inversión en
8p23.1, descrita como polimórfica, que podría ser el origen del reordenamiento detectado en el feto.
Análisis de cariotipo convencional e hibridaciónin situ con sondas fluorescentes (FISH) sobre linfocitos
en metafase, obtenidos tras cultivo de 72 horas de muestra de sangre periférica de los progenitores.
Para el estudio de FISH se han utilizado las sondas RP11-399J23 Spectrum Green y RP11-589N15
Spectrum Orange, específicas de las regiones telomérica y centromérica, respectivamente, dentro de
la citobanda 8p23.1.
3 Resultados
Ambos progenitores presentaron cariotipos aparentemente normales. Sin embrago, en el estudio de
FISH se detecta en la madre una inversión paracéntrica en heterocigosis en la región 8p23.1: en el
análisis de 20 metafases con microscopio de fluorescencia se observa que las sondas específicas
utilizadas se localizan en la orientación normal en un par del cromosoma 8 y en la orientación invertida
en el otro par del cromosoma. En el estudio del padre las sondas se observan en la orientación normal
en ambos cromosomas 8, siendo por lo tanto no portador de la inversión.
4 Conclusiones
La detección mediante microarray de una duplicación intersticial junto con una deleción terminal
afectando al mismo brazo de un cromosoma puede ser consecuencia de la existencia de un
reordenamiento equilibrado en ese cromosoma en uno de los progenitores. En este caso, la detección
dela inversión polimórfica 8p23.1 en la madre, no visible a la resolución del cariotipo, podría explicar el
reordenamiento detectado en el feto. Un adecuado estudio de los progenitores en estos casos puede
derivar en hallazgos importantes para el correcto asesoramiento genético familiar en futuros
embarazos.
C0202 EMPLEO DE ARRAYS COMO HERRAMIENTA EN DIAGNÓSTICO PRENATAL
Ana Astorga Zambrana, Carolina Vigil Chacón, María Pinel Rosario
1 Objetivos
El “microarray genómico”es in método de análisiS basado en la hibridación sobre matriz de sondas
ADN que integran varios LOCI a lo largo del genoma.
Su resolución en 10-1000 veces mayor al cariotipo.
Está indicado solicitarlos en: Defecto congénito mayor (principalmente cardiopatía), RCIU precoz y/o
severo, TN >P99, alteraciones familiares…
Se presenta caso clínico y revisión de la literatura.
3 Resultados
Paciente de 28 años. Nuligesta. AP: SIC AF: Madre HTA y Glomerulonefritis.
Primera gestación: Inicio control gestación en primer trimestre con embrión CRL 52,7mm, TN >P99 (4,6
mm), Ductus Venoso normal y ausencia de Regurgitación Tricuspídea. SBQ 1º T Sd. Down 1/85 (Bhcg
1,55. PAPPA 2,48). Se realiza biopsia Corial (QF-PCR Normal). En ecocardiografía precoz se observa
CIV 2 mm y Regurgitación Tricuspídea leve.
Cariotipo definitivo: 46,XX.arr(hg18)16p.13.3(49.978-1.880.515)x1 Sd.ATR-16 con número OMIN
141750. Ante diagnóstico genético la paciente decide ILE.
La pareja acude a estudio y asesoramiento genético para estudio de progenitores. El marido es
portador de una translocación compensada en Cr16. Aconsejándose diagnóstico genético
preimplantacional en próximas gestaciones.
Segunda gestación: Gestación espontánea de gemelar BCBA. Ambos embriones presentan CRL 47
mm con TN 1,5 y 1,6 mm respectivamente. Ductus venosos onda A positiva y ausencia de
Regurgitación Tricuspídea. Por antecedentes de gestación previa y mutación en uno de los
progenitores se realiza Biopsia corial. 1º gemelo: Mutación “de novo” 1p36 relacionada con microcefalia
y discapacidad intelectual. 2º gemelo: 46 XX.
La pareja decide Interrupción selectiva del primer gemelo. Actualmente gestación única de 23 semanas
con buena evolución.
4 Conclusiones
El empleo de Arrays permite diagnosticar entre un 6-9 % más de anomalías cromosómicas en las
gestaciones con malformaciones mayore sy un 1-1,5 % en casos sin indicación previa respecto al
cariotipo convencional.
Deben emplearse en casos seleccionados para mejorar nuestra capacidad diagnóstica y
asesoramiento genético para futuras gestaciones
C0214 DIAGNÓSTICO PRENATAL MEDIANTE TÉCNICA DE AMNIOCENTESIS DE
ISOCROMOSOMA 18 TRAS DETECCIÓN DE MALFORMACIONES CARDIACAS FETALES
Ana Astorga Zambrana, Carolina Vigil Chacón, María Pinel Rosario, Eva María Robles Cuadrado
1 Objetivos
Un isocromosoma es un cromosoma anormal en el que se ha perdido un brazo, y el otro se ha
duplicado de manera especular. Dando lugar a una monosomía del brazo perdido y trisomía parcial
debido al brazo duplicado.
Se produce durante la división celular (meiosis o mitosis), a nivel del centrómero, que se produce en
plano transversal en lugar de en plano vertical. Como consecuencia, el isocromosoma resultante
presenta brazos genéticamente idénticos entre sí, pero en sentido inverso.
La prevalencia estimada es 1-9/1000000.
Presentamos un caso clínico de una paciente de 31 años, primigesta.
3 Resultados
Como antecedentes familiares, consta hermano con espina bífida (éxitus).
Primer control de embarazo en semana 12 con embrión de 65 mm, translucencia nucal de 1,4 mm.
Screening bioquímico del primer trismetre de bajo riesgo. MoM BHCG 0,1 y PAPPA 0,1.
Se realiza ecocardiografía precoz en semana 14, en la que observamos dilatación de aurícula derecha,
comunicación interventricular membranosa con regurgitación tricuspídea y ductus venoso reverso. Se
ofrece técnica invasiva para diagnóstico genético que la paciente acepta. Se obtiene en el estudio
genético en líquido amniótico el siguiente cariotipo 47 XX i(18)(p10),i(18)(q10). Se informa a la paciente
del pronóstico fetal y decide interrupción legal del embarazo.
El cariotipo de nuestra paciente era normal (46 XX).
4 Conclusiones
El isocromosoma 18q es una condición infrecuente. La mayoría de los casos se diagnostican
prenatalmente por sus malformaciones cardíacas graves. Los afectados presentan algunos rasgos de
trisomía 18 como cardiopatía congénita, fisura palatina, malformación de extremidades y retraso del
desarrollo psicomotor.
A pesar de que la mayoría de casos son esporádicos, se han descrito casos de asociación familiar.
Está indicado realizar un cariotipo a los progenitores así como ofrecer asesoramiento genético
informando del riesgo de recurrencia en futuras gestaciones.
C0215 CROMOSOMA 18 EN ANILLO: A PROPÓSITO DE UN CASO
Ana Astorga Zambrana, Carolina Vigil Chacón, María Pinel Rosario, Eva María Robles Cuadrado
1 Objetivos
Los cromosomas en anillo constituyen una forma especial de delección en la que el cromosoma, tras
perder material en ambos extremos, se constituye formando un círculo. Se trata de una alteración
cromosómica poco frecuente.
El Síndrome anillo 18 es diferente porque suele asociarse a mosaicismo; de modo que algunas células
tendrán 46 cromosomas mientras que otras, 45 cromosomas.
Los fetos o recién nacidos afectos pueden presentar: retraso físico y mental, holoprosencefalia,
microcefalia, hipotonía, alteraciones visuales, cardiopatía (comunicación interventricular
frecuentemente) y alteraciones genitourinarias (riñón poliquístico, agenesia renal, hipospadias…).
Se presenta caso clínico de paciente de 40 años, secundigesta, con hermano afecto de síndrome de
Down.
3 Resultados
Gestación actual con primer control en semana 12. Feto acorde a edad gestacional de características
normales. La paciente solicita biopsia corial por antecedentes familiares. El cariotipo que se obtiene es
el siguiente: En primera línea (50 %)con cariotipo 46 XY, r(18), se observa uncromosoma 18 en anillo.
En segunda línea (50 %) con un cariotipo 46 XY, - 18 se observa monosomía del cromosoma 18. En
cultivo celular por QF-PCR, se observa que el anillo del cromosoma 18 se va perdiendo durante
sucesivas mitosis, incrementando la población de monosomía del cromosoma 18.
Se explica a la paciente el pronóstico fetal (holoprosencefalia, alteraciones neurológicas, de la visión y
audición, malformaciones cardiacas - hasta el 40 %-, del sistema genitourinario y retraso del
crecimiento.
La paciente decide interrupción del embarazo.
4 Conclusiones
El estudio y asesoramiento genético de los progenitores será de gran importancia para determinar e
informar sobre el riesgo de recurrencia en posteriores gestaciones. A pesar de ser una alteración
cromosómica poco frecuente, la presencia de una mutación en los progenitores hará que el riesgo de
recurrencia aumente. En este caso, el cariotipo de ambos progenitores es normal por lo que se trataría
de una mutación de novo
C0216 DIAGNÓSTICO PRENATAL DE TRIPLOIDÍAS: ESTUDIO DESCRIPTIVO
OBSERVACIONAL
Ana Astorga Zambrana, Cristina Navarro Gutiérrez, Carolina Vigil Chacón, Eva María Robles Cuadrado
1 Objetivos
La triploidía es la presencia de una dotación cromosómica de 3n cromosomas, frente a los 2n normales
de las células diploides que causa abortos precoces, partos prematuros y muertes perinatales. Los
signos clínicos más comunes son retraso de crecimiento intrauterino, macrocefalia, osificación irregular
de los huesos del cráneo, sindactilia de tercer y cuarto dedo, alteraciones oculares, auriculares,
defectos del sistema nervioso central, corazón y riñones.
La triploidía es una situación relativamente rara que aparece en el 0,1% de las gestaciones
detectables. Representa el 20% de las aberraciones cromosómicas encontradas en el curso de abortos
precoces, de los que el 86% presentan degeneración molar parcial placentaria.
Los mecanismos que conducen a una triploidía son varios. Puede tratarse de una diandria por
dispermia o diplospermia, o de una diginia de origen materno, o deberse a un accidente mitótico.
Estudio descriptivo observacional desde 2008 hasta 2016 con los 6 casos diagnosticados de triploidía
en nuestro hospital mediante biopsia corial o amniocentesis.
3 Resultados
La edad media de nuestras pacientes fue de 33,5 años. En el 60 % de los casos, se obtuvo un riesgo
alto en el screening bioquímico del primer trimestre. La media de los valores de MoM de PAPPA fue
de 0,3. La detección de triploidía tuvo lugar en un 33 % de los casos mediante biopsia corial y en un 67
%, mediante amniocentesis. Todos los fetos presentaron malformaciones fetales asociadas: 50 %
holoprosencefalia, 33 % labio leporino, 33 % restricción severa del crecimiento fetal y un caso de
enfermedad trofoblástica gestacional. Uno de los fetos presentaba hipotelorismo.
4 Conclusiones
Los fetos afectos por triploidía en nuestro estudio presentaron varias malformaciones que
comprometían diferentes órganos vitales como cerebro y corazón. El diagnóstico definitivo se obtuvo
gracias el estudio genético en líquido amniótico tras la sospecha ecográfica.
C0217 GUÍA CLÍNICA DE ASESORAMIENTO PRECONCEPCIONAL DESDE ATENCIÓN
PRIMARIA.
1 1 2
Ismael Ejarque Doménech , Maria Isabel Castelló López , José Vicente Sorlí Guerola
1
Hospital Lluís Alcanyís, Xàtiva (Valencia) España
2
Dpto. Medicina Preventiva y Salud Pública, Universitat de València, y CIBER Fisiopatología de la Obesidad y Nutrición
(Valencia) España
1 Objetivos
La consulta preconcepcional está encaminada a promover la salud de la mujer y de su descendencia
desde un punto de vista multidisciplinar (médico de familia, matrona, genetista, ginecólogo, etc.) y debe
prevenir la transmisión de enfermedades hereditarias. La Atención Primaria (AP) tiene una situación
privilegiada; son los profesionales sanitarios que mejor conocen la historia personal y familiar de cada
individuo. Existe una necesidad de un protocolo asistencial que auxilie a los profesionales sanitarios de
AP a llevar a cabo la primera fase del Asesoramiento Preconcepcional. Para ello se ha desarrollado la
“Guía clínica de asesoramiento preconcepcional para AP” con el objetivo general de evitar transmitir
enfermedades hereditarias mediante la captación precoz de las parejas con riesgo, con la prevención
primaria (identificación temprana de parejas de riesgo) y secundaria (diagnóstico precoz) a través de
un equipo multidisciplinar de AP.
Dicho equipo multidisciplinar ha revisado la bibliografía al respecto y ha elaborado una guía clínica con
un perfil de conocimientos para AP. Ésta se divide en apartados de valoración de la pareja (anamnesis,
exploración física y pruebas diagnósticas), de intervenciones a realizar (como suplementos, adicciones,
enfermedades crónicas e infecciosas, o exposiciones laborales), de recursos materiales y personales
necesarios para desarrollar el proceso, de criterios de derivación, y con anexos de información a la
pareja y al profesional sanitario.
3 Resultados
Con la guía clínica desarrollada se dispone de una herramienta para: 1)Evaluar la salud materna.
2)Promocionar hábitos de vida saludables que disminuyan el riesgo de defectos congénitos en ambos
progenitores. 3)Identificar en la pareja las situaciones o factores de riesgo de transmitir una
enfermedad hereditaria. 4)Prevenir la recurrencia de enfermedades hereditarias en una misma familia.
5)Cuando fuera preciso, derivar a la pareja a un servicio de referencia de Genética Clínica.
4 Conclusiones
Ahora es posible aplicar esta nueva herramienta para el asesoramiento preconcepcional desde
Atención Primaria.
C0245 DIAGNÓSTICO GENÉTICO PRENATAL EN GESTACIONES DE ELEVADO RIESGO.
NUESTRA EXPERIENCIA EN LOS ÚLTIMOS TRES AÑOS.
1 2 2 3 3 2 4
Pilar Carrasco Salas , Ana Cía , Alvaro Gragera , María Del Mas , Angustias Pérez , Ignacio Vázquez , Antonio León ,
3
Praxedes Carreto
1
2
Servicio de Análisis Clínicos. Hospital Juan Ramón Jiménez (Huelva) España
3
Servicio de Ginecología y Obstreticia. Hospital Juan Ramón Jiménez (Huelva) España
4
1 Objetivos
Se plantearon dos objetivos: 1) Evaluar la eficacia diagnóstica del cariotipo, la QF-PCR y el array de
CGH en la detección prenatal de alteraciones cromosómicas y 2) determinar la incidencia de estas
alteraciones por indicación.
Se incluyeron en el estudio a todas aquellas embarazadas que se sometieron a diagnóstico prenatal
invasivo de anomalías cromosómicas en el período 2014-2016 debido a la presencia alteraciones
fetales estructurales, antecedentes de interés, cribado combinado positivo o marcadores ecográficos
sugestivos de anomalías cromosómicas. Se les realizó QF-PCR, array de CGH 60K (Agilent) y
cariotipo
3 Resultados
Se estudiaron un total de 100 pacientes. Se detectaron alteraciones cromosómicas en 21 de ellas
(21%), siendo 13 de estas alteraciones (72%) aneuploidías comunes que se identificaron por QF-PCR.
En el líquido amniótico de 7 de las pacientes (7%), se observaron ganancias y/o pérdidas de material
cromosómico que sólo pudieron ser identificadas con el array de CGH. Cuatro de estas alteraciones
eran de significado clínico incierto, dos de las cuales se comprobó posteriormente que habían sido
heredadas de uno de los progenitores. Sólo un caso presentó una translocación robertsoniana en el
cariotipo, alteración que no es identificable con el array ni con la QF-PCR. La presencia de anomalías
estructurales fue la indicación que más frecuentemente se asoció con la presencia de alteraciones
cromosómicas patológicas.
4 Conclusiones
La QF-PCR sigue siendo la técnica más eficaz para identificar la mayoría de las alteraciones
cromosómicas que se detectan en muestras prenatales. Por tanto, es recomendable seguir utilizando
la QF-PCR como test de primera línea. El array de CGH y el cariotipo detectan alteraciones
cromosómicas adicionales a las identificadas con la QF-PCR en un porcentaje pequeño de los casos.
C0253 FALLO OVARICO PRECOZ, UNA PREMUTACIÓN DE INTERÉS
1 2 2 3 3
Sonia Albero Amorós , Elizabeth Mármol Camino , Maria Isabel Acien Alvarez , Isabel Ochando , Joaquin Rueda ,
2
Francisco J. Quereda Seguí
1
H Novelda (Alicante) España
2
H.Universitario San Juan de Alicante-Area ginecología Universidad Miguel Hernández (Alicante) España
3
Clínica Vistahermosa (Alicante) España
1 Objetivos
El fallo ovárico precoz (FOP) es la pérdida de la función ovárica en mujeres menores de 40 años, que
se manifiesta con amenorrea, niveles de FSH elevados y niveles de estradiol. Se presenta en 1/100
mujeres de menos de 40 años y 1/1000 menores de 30 años.
Geneticamente, el FOP está relacionado con anomalías en el cromosoma X (BMP15, FMR1, entre
otros), aunque también puede asociarse a mutaciones en genes autosómicos (FSHR, LHR, GDF9,
GALT, FOXL2,...) El gen FMR1 (Fragile X Mental Retardation 1, FRAXA en Xq27,3), según el número
de repeticiones del trinucleótido CGG situado en el extremo 5' del gen tendremos: gen normal (6-40),
zona gris (41-60), premutación (61-200) y mutación (>200). Llamativamente, la asociación con FOP se
da en mujeres portadoras de la premutación y no en la mutación completa que producirá el Síndrome X
frágil
Presentamos el caso de una mujer de 26 años que desde la menarquía, presentaba reglas escasas y
su ginecólogo pautó Progyluton®. Al abandonar el tratamiento voluntariamente a los 23 años, quedó en
amenorrea. En nuestra exploración destacó: útero hipotrofico y ambos ovarios sin folículos. La analítica
mostró niveles elevados de FSH y LH y bajos de estradiol; el perfil autoinmune y el cariotipo fueron
normales.
3 Resultados
Ante la sospecha de FOP, se solicitó estudio de mutaciones en los genes anteriormente descritos y
resultó ser portadora de la premutación X frágil presentando 104 repeticiones del triplete CGG.
4 Conclusiones
La importancia de esta determinación viene dada por las implicaciones que para la paciente y sus
familiares directos, pudiera tener. Además del FOP, hay que tener en cuenta el riesgo de tener un hijo
afecto del Síndrome X frágil o de transmitir una mutación que tiene fenómeno de anticipación. En
nuestro caso, hemos llegado tarde con la paciente pero sus hermanas pueden beneficiarse del
diagnóstico.
C0254 ESTUDIO RETROSPECTIVO DE LOS RESULTADOS DE TPNI EN UNA COHORTE
DE PACIENTES
Marina Sánchez Soler, Isabel Ochando Sánchez, Antonio Urbano Carrillo, Estefanía Montoya Díaz, Clara Díaz García,
Joaquín Rueda Puente
Unidad de Genética Clínica Vistahermosa Alicante (Alicante) España
1 Objetivos
El test prenatal no invasivo (TPNI) se basa en la detección temprana de aneuploidías fetales mediante
el análisis del ADN fetal libre en sangre materna. El presente estudio tiene como objetivo la revisión de
los resultados obtenidos del TPNI de pacientes vistas en nuestro centro durante el periodo 2015-2016.
Se analizaron las muestras de 450 pacientes mediante NGS y análisis bioinformático empleando el
algoritmo NIFTY (Trisonim). El estudio se ha centrado en el riesgo de T13, T18, T21 y el par sexual.
Los resultados de alto riesgo se comprobaron por técnica invasiva (amniocentesis) mediante array
CGH y cariotipo fetal.
3 Resultados
Los motivos de estudio más frecuentes son los siguientes: deseo materno (44%), cribado combinado
del primer trimestre alterado (17%), antecedentes personales de anomalía cromosómica o abortos de
repetición (5%) y anomalías ecográficas (4%).
De las 450 pacientes estudiadas, un total de 13 presentan resultado de alto riesgo (8 para T21, 4 para
T18, y 1 XXY). De los 13 casos, 2 terminaron en aborto antes de la confirmación citogenética, la
paciente del resultado XXY no eligió prueba invasiva tras consejo genético y 10 casos confirmaron el
resultado. También fue reportado un resultado no concluyente y un fallo en la determinación del sexo
fetal.
De 96 muestras candidatas a amniocentesis (cribado combinado alterado y anomalías ecográficas)
sólo 8 fueron positivas (8,33%), por lo que se ha reducido el número de pruebas invasivas a realizar en
un 91.67%.
4 Conclusiones
El estudio de las trisomías 13, 18 y 21 en sangre materna ha permitido reducir considerablemente el
número de pruebas invasivas a realizar en nuestra cohorte de pacientes, principalmente en el grupo de
gestantes de alto riesgo según el cribado combinado y los datos ecográficos.
C0258 HERNIA DIAFRAGMÁTICA Y TETRASOMÍA 12P
César Rodríguez Hernández, Xavier Giner Martínez, Verónica Cañadas Garzó, María Orera Clemente
1 Objetivos
Presentar el caso de una gestante de 35 años que en semana 20 presenta hernia diafragmática
izquierda con contenido hepático e intestinal. Se realiza amniocentesis para estudio citogenético.
Cultivo de líquido amniótico y fijación. Las preparaciones fueron tratadas con técnica de bandeo
cromosómico tripsina Giemsa. Así mismo, se realizó FISH con la sonda CEP 12p11.1-q11.1 (Abbott)
en núcleos en interfase y células cultivadas.
3 Resultados
Se observaron dos líneas celulares, una de ellas con dos señales específicas para CEP 12 y una
segunda línea en la que se observan tres señales específicas para cromosoma 12 en una proporción
del 50%. En el cariotipo convencional, se observó en un 50% de las metafases, tetrasomía del brazo
corto del cromosoma 12, con cariotipo 46,XX/ 47,XX +mar, ishdup(12)(12p11.1q11.)(D12Z3)
4 Conclusiones
La hernia diafragmática congénita aparece con una frecuencia de 1:2000 a 1:4000 nacidos vivos.
Suele aparecer de forma aislada pero aproximadamente en el 10 % de los casos está asociada a uno
de los siguientes síndromes: Cornelia de Lange, Pallister Killian, Down, Edward o Patau. El pronóstico
es favorable con cirugía perinatal.
Los resultados confirman la presencia del isocromosoma 12p en mosaico, que se relaciona con el
síndrome de Pallister Killian (SPK). Es preciso considerar el SPK en el diagnóstico etiológico de la
hernia diafragmática congénita ya que tiene asociado retraso madurativo y discapacidad intelectiva
severa que debe tenerse en cuenta en el consejo genético. El diagnóstico debe realizarse mediante
cariotipo y FISH, ya que en mas del 50% de los casos, no se detecta la tetrasomía del brazo corto del
cromosoma 12 en Array CGH.
C0260 ARRAY-CGH EN EL DIAGNÓSTICO PRENATAL: APLICACIÓN EN FETOS CON
ANOMALÍAS ECOGRÁFICAS Y CARIOTIPO NORMAL.
1 1 1 1
María de los Angeles Mori Alvarez , Julián Nevado , Fe Garcia-Santiago , Elena Mansilla Aparicio , Elena Vallespín
1 2 1 2 1
García , Roberto Rodríguez , María Palomares Bralo , Cristina Martínez-Payo , Rubén Martín-Arenas , Héctor
1 1
González-Pellecín , Pablo Lapunzina Badia
1
INGEMM, HULP (Madrid, Madrid) España
2
Sº Obstetricia y Ginecología/HULP (Madrid, Madrid) España
1 Objetivos
El uso del array-CGH en el diagnóstico prenatal está actualmente en controversia, debido
principalmente a la posibilidad de detección de variantes inciertas que no permiten establecer un claro
significado clínico para el feto. Sin embargo y dada su mayor capacidad diagnostica su uso está
recomendado por un gran número de publicaciones científicas sobre todo en fetos con alteraciones
ecográficas. Por lo tanto nuestro principal objetivo es su aplicación rutinaria con el fin de aumentar la
tasa de detección de desequilibrios genómicos en fetos que presentan cariotipo normal y anomalías
ecográficas.
se analizaron 294 fetos que presentaban anomalías ecográficas. Las causas de derivación fueron:
cardiopatías congénitas (53 casos), polimalformados (85 casos), anomalías del SNC (57 casos),
anomalías estructurales (57 casos), CIR (20 casos), y la presencia de varios marcadores ecográficos
de cromosomopatías (22 casos)
Se utilizó un array personalizado, el KaryoArray®v3.0 (8x60K, Agilent). A todas las gestantes se les
realizó una consulta pre test en la cual se les informó de los beneficios y limitaciones de la
técnica, firmando estas un consentimiento informado. Cuando fue necesario se extendió el estudio de
cariotipo molecular a la pareja.
3 Resultados
De los 294 casos analizados, 160 (54%) no presentaron alteración en el número de copias. De los
casos restantes, 95 (32%) presentaron CNV benignas sin repercusión clínica, y 28 casos (10%)
presentaron alteraciones consideradas patogénicas. En un 4% de los casos se detectó una CNV
incierta.
4 Conclusiones
Mediante el uso del array-CGH se incrementó un 10% la capacidad diagnostica con respecto al
cariotipo en nuestra cohorte de fetos. Mediante esta tecnología se consigue el análisis global del
genoma a alta resolución, lo que permite la detección de alteraciones genómicas que pasarían
desapercibidas si solo se utilizara el cariotipo como herramienta diagnóstica.
C0261 DETECCION DE UNA DELECION EN HEMICIGOSIS DEL GEN ZIC3 EN UN FETO
CON ISOMERÍSMO.
1 1 1 1
María de los Angeles Mori Alvarez , Fe Garcia-Santiago , Elena Mansilla Aparicio , Cristina Martínez-Payo , Julián
2 2
Nevado , Pablo Lapunzina Badia
1
Sº Obstetricia y Ginecología/HU Puerta de Hierro (Madrid, Madrid) España
2
1 Objetivos
El array-CGH permite la detección de anomalías genómicas con una alta sensibilidad y especificidad.
Aunque el uso del array-CGH en el DP no está universalmente extendido, si se recomienda su uso en
gestaciones que presentan anomalías ecográficas. Esta tecnología ha demostrado ser eficiente a la
hora de identificar CNVs en regiones que incluyen genes causantes de enfermedades ligadas al X.
Se presenta el caso de una gestante de 30 años que acude a la consulta de diagnóstico prenatal
debido a que en la ecografía del primer trimestre de su feto varón se observa el estómago en posición
central y una posible malformación cardiaca, con sospecha de isomerismo.
La muestra de ADN se obtuvo a partir de muestra procedente de vellosidades coriales. Para el análisis
se utilizó un array personalizado de 60K (Karyoarray®).
3 Resultados
Se detectó una deleción en homocigosis de 297 Kb en Xq26.3 que implica la deleción completa del
gen ZIC3. La extensión del estudio molecular a la gestante permitió determinar su estatus de
portadora heterocigota para la deleción.
4 Conclusiones
Mutaciones y deleciones que afecten al gen ZIC3 se relacionan con entidades que presentan diversas
manifestaciones clínicas incluyendo Heterotaxia ligada al X, y defectos cardíacos complejos o
aislados.
La técnica del array permitió establecer que la causa de las anomalías detectadas en el feto era
debida a la deleción diagnosticada. Además el diagnostico de portadora heterocigota de la deleción de
la gestante permitió establecer el riesgo de recurrencia para futuros embarazos con el consiguiente
beneficio para la pareja.
C0283 DIAGNÓSTICO PRENATAL MEDIANTE ARRAY-CGH EN FETO CON HERNIA
DIAFRAGMÁTICA CONGÉNITA
Ana Astorga Zambrana, Cristina Navarro Gutiérrez, Carolina Vigil Chacón, Eva Robles Cuadrado
1 Objetivos
La translocación recíproca entre cromosoma 11 y 22 es la más frecuente en humanos y puede afectar
a ambos sexos. Se cree que está ligada a la gametogénesis. Pueden ser de novo o heredadas.
Se presenta el caso clínico de paciente de 33 años. Cesárea por placenta previa en 2011. Dos abortos
espontáneos posteriores.
3 Resultados
Embarazo de curso normal. Durante ecografía morfológica se visualiza hernia diafragmática izquierda
con estómago, intestino e hígado herniados. Índice pulmón-perímetro cefálico de 0.82. Sin detectarse
otra anomalía anatómica. No desean interrumpir embarazo.
La ecografía en semana 26 : Hernia diafragmática izquierda, hígado, estomago e intestino
intratorácicos. Índice pulmón-perímetro cefálico de 0.86.
Se realiza biopsia corial con estudio de cariotipo con trisomia parcial cr 22, fórmula cromosómica
47,XY, t(11;22)(q23;q11) mat[20]. ARRAY-CGH: duplicación 11q23.3-q25 de 18,146 Mb y duplicación
22q11.1-q11.21 de 2,914 Mb.
En el momento de el estudio cromosómico, la LHR O/E es del 26.8% que está en el umbral de
hipoplasia pulmonar severa-moderada, con supervivencia del 40-50%.
4 Conclusiones
El cuadro clínico es variable, con microcefalia, retraso del crecimiento , desarrollo psicomotor,
hipotonía, rasgos faciales característicos (micrognatia, paladar hendido, raíz nasal deprimida,
pabellones auriculares de baja implantación, cuello corto), defectos cardiacos congénitos, renales,
gastrointestinales y genitales en varones.
En cuanto a la herencia, cuando el padre es el portador de la translocación balanceada, transmite un
cromosoma 22 supernumerario en 2.2-5% y la translocacion balanceada en un 41.2%; si madre
portadora, la probabilidad de transmitir el cromosoma 22 supernumerario es el 5.7-6.1% y la
translocacion balanceada del 55.4%. El porcentaje del número de abortos espontáneos es del 23-37%.
El estudio genético de los progenitores, reveló que la madre era portadora de la translocación
recíproca 11/22 con puntos de rotura 11q23.3 y 22q11.1. Marido con cariotipo normal.
Finalización de la gestación a las 35 semanas mediante cesárea produciéndose muerte neonatal
posterior.
C0284 ESTUDIO DE ENFERMEDADES RECESIVAS Y LIGADAS AL X EN DONANTES DE
GAMETOS MEDIANTE NGS CON UN PANEL DE 15 GENES
1 2 3 3 2
Antonio Urbano Carrillo , Isabel Ochando , Marina Sánchez , Estefanía Montoya , Joaquín Rueda
1
Unidad de Genética, Hospital Clínica Vistahermosa Alicante (ALICANTE) España
2
Unidad de Genética. Hospital Clínica Vistahermosa; Departamento de Histología. Universidad Miguel Hernandez
(Alicante) España
3
Unidad de Genética. Hospital Clínica Vistahermosa; Cátedra de Biomedicina Vistahermosa (Alicante) España
1 Objetivos
El uso de la NGS está cada vez más extendido en el ámbito de la genética reproductiva, especialmente
en el estudio de las enfermedades recesivas más comunes en los donantes de gametos, para
disminuir el riesgo de tener descendencia afecta.
Los portadores de una mutación de enfermedades recesivas generalmente son sanos, por lo que
existe riesgo de ser portadores aunque no haya una historia familiar previa. En el caso de que ambos
progenitores sean portadores tendrían una probabilidad del 25% de tener un hijo afecto por la
enfermedad.
La legislación española no detalla , a día de hoy, qué estudios genéticos hay que realizar a
los donantes de gametos, (salvo cariotipo) si bien, dada la alta prevalencia de algunas de ellas resulta
sensato realizar un cribado de las enfermedades genéticas más prevalentes.
Desarrollo de un panel con un número reducido de genes, siguiendo los criterios definidos por las
sociedades científicas (ESHG, ACMG, ACOG, NSGC), concebido para minimizar el riesgo de tener
descendencia con enfermedades recesivas.
Hacer una primera valoración de resultados.
3 Resultados
En base a estas guías se han seleccionado un total de 15 genes relacionados con las 16
enfermedades más prevalentes en nuestro medio. Panel desarrollado con tecnología Generead v2
junto a la plataforma Miniseq.
De los primeros 90 casos, 17 fueron varones y 73 mujeres. Se detectaron:12 mutaciones patogénicas
en 11 donantes. 53 variantes de significado clínico desconocido y 3181 variantes benignas. Los
estudios complementarios resultaron, para AME, 2 deleción del exón 7 y para X-Frágil, 1 premutación.
En total se detectaron un total de 14 donantes portadores de mutaciones patogénicas lo que supone un
15.55% del total.
4 Conclusiones
Dada la alta prevalencia de portadores y nuestros resultados, se recomienda la realización de paneles
de estudio de enfermedades recesivas y ligadas a X a donantes de gametos y embriones.
C0297 DIAGNÓSTICO GENÉTICO DE SÍNDROME DE WISKOTT- ALDRICH
1 Objetivos
El Sd Wiskott-Aldrich es una inmunodeficiencia primaria caracterizada por microtrombocitopenia,

eccema, infecciones y mayor riesgo de manifestaciones autoinmunes y neoplasia.
Es una enfermedad autosómica recesiva ligada a X. Las mujeres portadoras tienen un 50% de riesgo
de transmitir la enfermedad a la progenie masculina.
Debido a mutación hemicigota en el gen WASP (Xp11.4-p11.21) que codifica la proteína del Sd
Wiskott-Aldrich (expresada en células hematopoyéticas con papel principal en la reorganización del
citoesqueleto de la actina).
Suele manifestarse en la infancia, aunque pueden manifestarse en periodo neonatal.
Los síntomas principales son: Alteraciones hemorrágicas (petequias, púrpura, hematoma, diarrea
sanguinolenta y sangrado intracraneal),eczema, infecciones (intestinales y respiratorias). Hasta un
40% presentan alteraciones autoinmunes.
Presentamos caso clínico de paciente secundigesta de 33 años con enfermedad Chron ileal, eritema
nodoso, artritis nodosa, lupus incompleto (3 criterios de ACR) y livedo reticularis.
3 Resultados
Revisión de 1º T con feto CRL 63, 1 mm. SBQ 1ºT bajo riesgo con Uterinas <P95. En SG 16
crecimiento fetal adecuado y Quiste ecogris homogéneo a nivel de inserción de cordón, Doppler
negativo de 31x26x28 mm.
Seguimiento semanal para comprobar ausencia de anemia y afectación fetal. Crecimiento fetal
adecuado, VpsACM<1´5MoMs.SG 26 se observa crecimiento de quiste de 64x16 mm de similares
características (permanece estable hasta fin de gestación).
Parto mediante cesárea electiva por presentación podálica de varón 3040 gr. Apgar 9/10/10.
Al examen macroscópico de la placenta se observa contenido hemático de quiste.
A las 24 horas de vida, ingreso del RN por trombocitopenia neonatal, petequias e infección urinaria.
Seguimiento postnatal por trombopenia, iniciando a los 6 meses de vida diarrea sanguinolenta, eccema
eritematoso pruriginoso y varios ingresos por bronquiolitis.
Se realiza estudio genético que confirma el diagnóstico de Sd. Wiskott-Aldrich
4 Conclusiones
El diagnóstico de sospecha es clínico y se confirma identificando el gen SWAP mutado y de la
presencia o no de proteína WAS.
C0298 ASESORAMIENTO GENÉTICO EN GESTANTE PORTADORA DE MUTACIÓN
LIGADA A CROMOSOMA X
1 Objetivos
La miopatía centronuclear es una enfermedad neuromuscular caracterizada por características de
miopatía congénita y centralización nuclear en la biopsia muscular. Tiene una incidencia estimada de
2/1000000 RN. El cuadro clínico es altamente variable. La Ligada al X, es la forma que se presenta con
fenotipo más severo, objetivandose desde el nacimiento con debilidad, marcada hipotonía,
oftalmoplejía y fallo respiratrio. La mutación se halla en la miotubularina, (MTM1) Xq28, bien causada
por inserciones/delecciones/translocaciones, identificado en la mayoría de estos pacientes. Existen
otras formas, menos severas, como son DNM2(dominante) y BIN1(recesiva) con pronóstico favorable.
La correlacion entre geneotipo y fenotipo ha sido difícil de definir. El diagnóstico se base en hallazgo
histopatológicos de una biopsia muscular. Solo la detección de la causa de la mutación determinaría la
forma de herencia de dicha pareja. Hay mujeres dentro de estas familias, como nuestro caso, que no
manifiestan la enfermedad, y lo detectamos ya en sus hijos afectos.
Presentamos caso clínico, con el objetivo de revisar la enfermedad y la actitud obstétrica/sospecha
ecográfico ante enfermedades detectables mediante diagnóstico preimplantacional y consejo genético .
3 Resultados
Mujer de 28 años. Magrebí. Gestaciones en 2009 y 2011, bien controladas con screening combinado
1ºtr. bajo riesgo. Parto mediante cesárea. Muerte neonatal de ambos fetos varones. Se envía la pareja
a consejo genético y se diagnostica a la madre como portadora de miopatía asociada al X.
4 Conclusiones
Tras asesoramiento genético, detectamos a la madre como portadora de la mutación.La sospecha
clínica tras el diagnóstico ecográfico se produzco al hallar macrosomía fetal (P>90), disminución de
movimientos fetales, polihidramnios y circunferencia cefálica grande en ambos casos. Al nacimiento,
ambos presentaron clínica severa compatible con miopatía miotubular congénita que produjo en ambos
casos muerte neonatal.
C0322 AUSENCIA DE CAVUM DEL SEPTUM PELLUCIDUM EN GESTANTE CON
ANTECEDENTE EN EMBARAZO PREVIO DE SÍNDROME DE TURNER
1 Objetivos
El Cuerpo Calloso (CC) es la principal conexión interhemisférica del cerebro humano. Comienza su
formación en semana 10 y finaliza sobre el sexto mes de gestación. Los casos de agenesia del cuerpo
calloso parcial comprometiendo la porción anterior son debido a destrucción por patología vascular o
infecciosa y aquellos afectados en la porción posterior resultan regularmente de anomalías del
desarrollo.
La sospecha ecográfica se obtiene ante signos como:
Cuernos frontales en “astas de toro”; ausencia cavum septum pellucidum; aumento de la separación de
los hemisferios; ascenso del III ventrículo; lesión de la línea o anomalías de la arteria pericallosa.
Se presenta el caso de una mujer de 41 años, tercigesta. Hija previa con S. Turner.
3 Resultados
Embarazo actual de curso normal. En semana 20 de embarazo se detecta ventriculomegalia bilateral
moderada y ausencia cavum del septum pellucidum. En corte sagital se evidencia ausencia completa
del cuerpo calloso.
4 Conclusiones
La ACC es la malformación comisural más frecuente. Su prevalencia es difícil de precisar, por ser a
veces totalmente asintomática. Se calcula en 3-7/10.000 en la población general.
La recurrencia familiar depende de la etiología de base, si es esporádico o cromosómico (1%), pero
hay casos que presentan un patrón autosómico recesivo (25%) o ligado al cromosoma X (50%). Alta
asociación con trisomias 8,13,18 y ploidías asi como a síndromes polimalformativos como Arnold-
Chiari II y Dandy Walker entre otros. Después de un estudio ecográfico, RMN y cariotipo, sólo 15% de
ACC se pueden considerar aisladas.
El consejo a los padres es difícil. La ACC asociada a una malformación cerebral, a una anomalía
cromosómica, a un síndrome malformativo o a una anomalía metabólica es siempre desfavorable.
En nuestro caso, la amniocensis genética, confirmó cariotipo normal y no se hallaron malformaciones
asociadas a las cerebrales. La pareja interrumpió la gestación.
C0333 VARIANTES EN EL NÚMERO DE COPIAS PATOLÓGICAS EN GESTACIONES
PROCEDENTES DE OVODONACIÓN.
Sandra Monfort Membrado, Silvestre Oltra Soler, Carmen Orellana Alonso, Mónica Roselló Piera, Alfonso Caro-llopis,
José Cervera, Francisco Martínez Castellano
Hospital Universitario y Politécnico La Fe Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
El hallazgo de varios casos nos planteó evaluar la frecuencia de variantes del número de copias
(CNVs) patológicas en recién nacidos y fetos de gestaciones procedentes de óvulo de donante.
Se ha realizado una revisión de los resultados del estudio de array en 87 niños nacidos entre 2014 y
2015 que presentan síndrome polimalformativo (7 concebidos por ovodonación) y 49 estudios
prenatales en fetos con alteraciones ecográficas. Se empleó el array de SNPs Affymetrix CytoScan 750
y el software Chromosome Analysis Suite v.3.1 de Affymetrix.
Por otra parte, para realizar los cálculos estadísticos, se han utilizado los datos del INE (nacimientos
en España en 2014: 427.595) y los datos del registro nacional de actividad de 2014 de la Sociedad
Española de Fertilidad SEF (partos procedentes de gestaciones mediante óvulo de donante: 7.842).
3 Resultados
En nuestra serie se han detectado 24 pacientes con CNVs patogénicas, 5 de ellos procedentes de
ovodonación. Según nuestros datos, el 21% (intervalo confianza al 95%: 9,2 – 40,5) de casos con
CNVs patológicas proceden de fecundación con óvulo de donante, proporción significativamente más
alta de lo esperado (Test de Fisher p=0,0073).
Por otra parte, en base a los datos del INE y la SEF estimamos que el 1,8% (intervalo confianza 95%:
1,8 a 1,9) de los niños nacidos en 2014 proceden de óvulo de donantes. La proporción de niños
nacidos de ovodonación con CNVs patogénicas detectada en nuestra serie (21%) también es
significativamente más alta de lo esperado con esta estimación.
4 Conclusiones
La proporción de casos con reordenamienos patológicas en gestaciones procedentes de ovocitos de
donantes es significativamente mayor que la esperada. Sin embargo, sería conveniente confirmar
estos hallazgos en series más amplias y estudios multicéntricos, para poder realizar un mejor
asesoramiento genético-reproductivo de estas parejas.
C0350 LA DETECCIÓN DE AUSENCIAS DE HETEROCIGOSIDAD MEDIANTE SNP-ARRAY
AYUDAN EN EL CONSEJO GENÉTICO PRENATAL: A PROPÓSITO DE UN CASO
1 2 3 4 4 3
Adela Cisneros Sala , Enric Trullen , Neus Ruiz-Xivillé , Mar Mallo , Neus Solanes , Encarnación Santafé , Carmen
3 3 3 5 5 5 4 3
Villena , Marisol Xandri , Javier Grau , Ignacio Blanco , Andrea Ros , Alicia Castillo , Francesc Solé , Evarist Feliu ,
3
Isabel Granada
1
ICO Badalona Badalona (Barcelona) España
2
Servicio de Ginecología. Hospital Verge de la Cinta, Tortosa (Tarragona) España
3
Servicio-Laboratorio Hematología. HUGTIP, ICO, IJC (Barcelona) España
4
Institut Josep Carreras (IJC) (Barcelona) España
5
Unidad de Asesoramiento y Genética Clínica. HGTIP (Barcelona) España
1 Objetivos
Introducción: La plataforma de SNP-array de Affymetrix permite detectar ganancias y pérdidas de
material genético y ausencias de heterocigosidad (AOH).
2 Resultados
Caso: Mujer de 32 años embarazada de 12 semanas. En la ecografía de primer trimestre se observa
una TN de 6,3mm, un hidrops fetal i un ductus venoso reverso por lo que se le realiza una biopsia de
corion para el estudio de microarrays (SNP-array CytoScan 750K Affymetrix). Este análisis identifica
una ganancia en 3q y una pérdida en 11q. Cariotipo molecular: arr[hg19] 3q26.32q29(178,372,618-
197,851,444)x3,11q23.3q25(119,461,090-134,937,416)x1, que se asocian al Síndrome de
microduplicación 3q29y al Síndrome de deleción 11q/Sindrome de Jacobsen. Ante la sospecha de una
translocación heredada en desequilibrio se realiza el cariotipo fetal: 46,XY,der(11)t(3;11)(q26.3;q23.3).
Se informa a la pareja que decide interrumpir la gestación. Para determinar el riesgo de recurrencia en
futuras gestaciones se realiza el estudio citogenético en los progenitores, siendo este normal, por lo
que, en un principio se excluye un mosaicismo germinal y la alteración se considera de novo. La
plataforma de Affymetrix permite la detección de AOH. En este caso el hecho de no detectar una AOH
en el cromosoma 3 confirma que la alteración se ha originado durante la gametogénesis de uno de los
progenitores y no en el feto por lo que sí podría existir un mosaicismo en la línea germinal.
3 Conclusiones
Conclusión: Gracias a la detección de AOH se puede ofrecer un consejo genético más preciso y
establecer mejor el riesgo de recurrencia en futuras gestaciones. En este caso se recomendaría un
diagnóstico prenatal en futuras gestaciones.
C0351 ALTERACIONES GENÉTICAS PLACENTARIAS NO ENCONTRADAS EN EL FETO
QUE EXPLICAN LOS HALLAZGOS ECOGRÁFICOS.
1 2 2 2 2
Fe Amalia García Santiago , Elena Mansilla Aparicio , Maria Angeles Mori Alvarez , Julian Nevado , Eugenia Antolín ,
2 3 2 2 2 2
Paloma Gordo , Miguel Ruiz de Azua García , Isabel Gómez , Rima Regojo , Laura Sotillo , Pablo Lapunzina
1
INGEMM, Idipaz, CIBERER, Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid) España
2
Hospital Universitario La Paz (Madrid) Spain
3
Hospital Universitario Puerta de Hierro (Madrid) Spain
1 Objetivos
Presentamos los datos de tres fetos con discrepancia entre los resultados genéticos de las muestras
de biopsia corial y líquido amniótico.
Se han estudiado tejido de biopsia corial y líquido amniótico de tres fetos, el primero con patología
placentaria y CIR precoz, el segundo por un resultado de riesgo combinado para trisomía 21 >1/50 y el
tercero por un resultado de riesgo combinado para trisomía 18>1/50 y CIR precoz. Se realizó técnicas
de cariotipo, array-CGH y en el primero y el segundo MLPA de metilación de la región 11p en ambas
muestras.
3 Resultados
Feto 1: Placenta: ganancia de dosis en el centro de imprinting 1 de la región responsable del Síndrome
de Beckwith Wiedemann/Silver Russell, no identificado en el feto.
Feto 2: estudio de array-CGH de biopsia corial: deleción de 232 Kb en Xp22.31 que comprende los
exones 6-10 del gen STS. Estudio en líquido amniótico normal.
Feto 3: array-CGH en vellosidad coriónica: trisomía completa del cromosoma 16 en el 85% de las
células. Resultado de array-CGH en líquido amniótico: normal.
4 Conclusiones
Las alteraciones genéticas encontradas en vellosidad corial justificaban las alteraciones placentarias y
por tanto las repercusiones en el feto aunque se encontraran confinadas en este tejido, explicando la
clínica fetal.
C0370 HALLAZGO PRENATAL DE RIÑONES GRANDES E HIPERECOGÉNICOS Y
GENÉTICA
1 1 2 2 2 3
Elena Mansilla Aparicio , Fe García-Santiago , Julian Nevado , Rocio Mena , Mª Angeles Mori , Laura Sotillo , Rima
4 5 6 6 7
Regojo , Cristina Martinez Payo , Alicia Llorente , Soledad Perez , Pablo Lapunzina
1
Hospital Universitario La Paz. CIBERER U753, INGEMM. Sección de Citogenética Madrid (Madrid) España
2
Hospital Universitario La Paz. CIBERER U753 INGEMM. Sección de genómica estructural y funcional (Madrid) España
3
Servicio de Ginecologia y Obstetricia, Fisiopatología Fetal. Hospital Universitario La Paz, Madrid (Madrid) España
4
Servicio Anatomia Patológica, Hospital Universitario La Paz, Madrid. (Madrid) España
5
Servicio de Ginecologia y Obstetricia. Hospital Universitario Puerta de Hierro, (Madrid) España
6
Hospital Universitario La Paz. INGEMM. Sección de citogenética. (Madrid) España
7
Hospital Universitario La Paz. Coordinador INGEMM. Sección de genética clínica. CIBERER (Madrid) España
1 Objetivos
La aparición en una ecografía prenatal de unos riñones grandes e hiperecogénicos constituye
un hallazgo poco específico que puede ser la manifestación de diferentes entidades.
Presentamos 5 casos en los se detectaron unos riñones grandes e hiperecogénicos que
evolucionaron a oligoamnios severo y secuencia de Potter con un diagnóstico etiológico diferente.
Las muestras han sido analizadas mediante paneles de secuenciación masiva, NEFROSEQ.V1.1 que
incluye un total de 230 genes y un Panel con 8 genes de enfermedad quística común (Nefrochus).
3 Resultados
Caso 1:
• Anomalías asociadas en el examen ecográfico prenatal: ARSA

• Necropsia: hallazgos compatibles con enfermedad renal poliquistica AR (ARPKD)
• Mutación gen PKHD1:c.9689delA; p.D3230VfsX34 (patogénica). No se identifica el segundo
evento.
Caso 2:
• No anomalías asociadas
• Necropsia. Resultados no disponibles.
• Mutación gen NHF1b (enfermedad poliquistica renal AD forma atípica y MODY tipo5):
c.1426C>T; p.Q476X y mutación gen TCS1:c.2950G>A; p.G984S. Posible poliquistosis renal
por interacción génica.
Caso 3:
• No anomalías asociadas.
• Necropsia: hallazgos compatibles con ARPKD.
• Estudio molecular NEFROSEQ.V1.1 pendiente.
Caso 4
• No anomalías asociadas.
• Necropsia: displasia renal multiquística bilateral y anomalías esqueléticas con varios cuerpos
vertebrales en mariposa.
• Panel NEFROSEQ.V1.1 no se detectan cambios patogénicos en PKHD1. Ante el hallazgo de
vértebras en mariposa se considera realizar estudio de Alagille (JAG1, NOTCH2).
Caso 5
• Anomalías asociadas: defecto reduccional de las 4 extremidades.

• Necropsia: displasia renal multiquística bilateral, defecto reduccional 4 extremidades y
fisura labio-palatina.
• Estudio citogenético: separación de las cromátidas (“rieles de tren).
• Sospecha diagnóstica síndrome de Roberts, pendiente estudio del gen.
4 Conclusiones
1)Para orientar a un correcto diagnóstico es muy importante descartar malformaciones asociadas, una
buena historia familiar, así como el estudio anatomopatológico. 2)La secuenciación masiva en el
ámbito de la medicina perinatal nos va a permitir llegar al diagnóstico de muchos casos, lo que
permitirá realizar estudios de detección prenatal o preimplantacion en futuros embarazos
C0375 INTERPRETACIÓN DE MICROARRAYS EN UN CASO DE PALLISTER-KILLIAN: LA
UTILIDAD DE MANTENER CÉLULAS EN CULTIVO.
1 2 3 4 4 3
Adela Cisneros Sala , Enric Trullen , Neus Ruiz-Xivillé , Mar Mallo , Neus Solanes , Encarnación Santafé , Carmen
3 3 3 5 5 5 4 3
Villena , Marisol Xandri , Javier Grau , Ignacio Blanco , Andrea Ros , Alicia Castillo , Francesc Solé , Evarist Feliu ,
3
Isabel Granada
1
ICO Badalona Badalona (Barcelona) España
2
Servicio de Ginecología. Hospital Verge de la Cinta, Tortosa (Tarragona) España
3
Servicio-Laboratorio Hematología. HUGTIP, ICO, IJC (Barcelona) España
4
Institut Josep Carreras (IJC) (Barcelona) España
5
Unidad de Asesoramiento y Genética Clínica. HGTIP (Barcelona) España
1 Objetivos
Introducción: Actualmente los microarrays se utilizan en primera línea para el diagnóstico prenatal en
los casos de translucencia nucal aumentada (TN), anomalía ecográfica mayor o varias de menores y
en los casos de retraso del crecimiento intrauterino precoz o severo (RCIU).
2 Resultados
Caso: Mujer de 44 años de 12 semanas de gestación. En la ecografía de primer trimestre se observa
un higroma generalizado, un ductus venoso reverso, una arteria umbilical única y un RCIU, por lo que
se le realiza una biopsia de corion para el estudio de microarrays (CytoScan 750K Affymetrix). Se
identifica una ganancia de 12p13.33p11.1 que puede relacionarse con una trisomía de 12p o con una
tetrasomía de 12p en mosaico, por lo que se realiza un estudio de FISH con la sonda LSI ETV6
(12p13)/RUNX1(21q22) dual color (Abbott) para caracterizar la anomalía. El resultado muestra núcleos
con 4 señales y núcleos con 2 señales de ETV6 lo que confirma la tetrasomía 12p en mosaico.
Fórmula ISCN2013: ish mos 12p13(ETV6x4)[52/100].arr[hg19] 12p13.33p11.1(173,786-
34,835,641)x2~4. Este resultado es compatible con el Síndrome Pallister-Killian. Se realiza el cariotipo
fetal para confirmar la presencia del isocromosoma 12p típico del síndrome. Cariotipo ISCN2013:
47,XY,i(12)(p10)[1]/46,XY[19]. Se informa a la pareja que decide interrumpir la gestación. No se solicita
muestra de líquido amniótico ya que el resultado concuerda con los hallazgos ecográficos y porqué se
han descrito casos de falsos negativos. En este caso, el riesgo de recurrencia, excluyendo el
mosaicismo germinal, es igual al de la población general.
3 Conclusiones
Conclusión: La detección del Síndrome Pallister-Killian con la técnica de microarrays, requiere una
confirmación mediante FISH o análisis cromosómico. Las distintas técnicas se complementan entre sí
para un correcto diagnóstico y consejo genético.
C0380 IMPACTO DEL CRIBADO PRENATAL NO INVASIVO DE ANEUPLOIDÍAS FETALES
COMO TEST CONTINGENTE EN LA DISMINUCIÓN DE PRUEBAS INVASIVAS
Maria Carmen Cotarelo Pérez, Raluca Oancea Ionescu, Eloy Asenjo de la Fuente, María Dolores Ortega de Heredia,
Patricia Soler Ruiz, Pluvio Coronado Martín, María Fenollar Cortés
1 Objetivos
Evaluar la disminución del número de pruebas invasivas tras la implementación del test prenatal no
invasivo de aneuploidías fetales (TPNI) en un grupo seleccionado de gestantes en riesgo de
cromosomopatía.
Estudio observacional prospectivo de las gestantes que han acudido a la Consulta de Genética
Prenatal desde octubre de 2015 hasta diciembre de 2016, tras la implementación del TPNI con alguno
de los criterios clínicos seleccionados. Estudio observacional retrospectivo de las gestantes que
acudieron de octubre de 2013 a diciembre de 2014 con las mismas indicaciones sin la implementación
del TPNI en el centro.
3 Resultados
Durante el periodo 2015-2016 han acudido 160 gestantes con indicación para TPNI y se han realizado
la prueba 138 lo que supone una renuncia global a las técnica invasivas del 86%. Durante el periodo
2013-2014 acudieron a la consulta 134 gestantes con una renuncia global del 51%. Por criterios
clínicos las renuncias a prueba invasiva fueron, para el riesgo en el cribado combinado de 1º trimestre
de 1/51 a 1/300, de un 52% frente al 83% en el periodo 2015-2016; para embarazos gemelares con
edad materna≥35 años fue de 83% frente al 96%, para gestantes con antecedente personal de feto
anterior con aneuploidía fue de 33% frente 93%,para mujeres con edad≥ a 35 años sin cribado
combinado fue de 42% frente al 87%, y para gestantes con feto con translucencia nucal ≥ a P97.5 pero
inferior a 3.5 mm con cribado de bajo riesgo fue del 50% frente al 70%. Se están recogiendo los datos
de parto del periodo 2015-2016.
4 Conclusiones
La introducción del TPNI como test contingente durante el 1º trimestre permite una disminución de
pruebas invasivas y un diagnóstico más efectivo, aunque es necesario confirmar esta efectividad una
vez completados los datos al nacimiento.
C0384 DONANTE DE SEMEN SANO CON VARIANTE CONSIDERADA COMO
PATOGÉNICA Y DELECIÓN HETEROCIGOTA COMPLETA DE MEFV
José Miguel Lezana Rosales, Carmen Palma Milla, Carlos Sánchez Linares, Carmen Torres Fernández, Javier López
Montiel, Julio Torres González, Sandra Carmona Tamajón, Juan López Siles
C.G.M. Genetaq Malaga (Malaga) España
1 Objetivos
Reclasificación de variantes en MEFV como paradigma de la complejidad del diagnóstico genético en
pacientes con fiebre mediterránea (FM) y su interpretación para establecer matching genético en
medicina reproductiva.
A partir de muestra de ADN de varón sano, se secuenció un panel de genes asociados a
enfermedades recesivas, empleando un MiSeq (Illumina). Tras alineamiento con BWA y Variant Caller
GATK para la obtención de las variantes, se realizó el análisis de variación de número de copias
(CNVs) mediante ExomeDepth, todo ello mediante pipeline propio.
3 Resultados
Además de otras variantes en otros genes del panel, se detectaron 2 variantes de potencial interés en
MEFV: NM_000243.2:c.2230G>T (p.Ala744Ser) en hemicigosis y deleción heterocigota que incluye al
gen completo, con coordenadas mínimas [hg19, chr16:3293110-3306989].
4 Conclusiones
No se ha encontrado en la literatura ningún individuo con la configuración de variantes en MEFV como
el caso presentado. Además, la coexistencia de estas dos variantes en un individuo sano cuestiona de
manera clara la clasificación de la variante missense hecha en muchas fuentes bibliográficas y paneles
comerciales, donde se considera patogénica, aunque hay fuentes que indican que se trataría de una
variante de penetrancia variable, que además se encuentra en homocigosis en 2 individuos en la base
de datos de población control ExAC.
En cuanto al CNV, sólo aparece deleción completa en 3 casos documentados en ExAC y en ningún
caso se ha encontrado descrita en la bibliografía relacionada con FM.
Por tanto, este caso muestra que la haploinsuficiencia de MEFV junto a una variante considerada como
patogénica no es suficiente, para encontrar manifestaciones clínicas de FM. Se añade más
controversia e incertidumbre a cómo llevar a cabo una adecuada clasificación de variantes y
evaluación de riesgo a la hora de establecer posibles matching donante-receptora en la medicina
reproductiva.
C0399 QUIMERISMO LINFOCITARIO Y SÍNDROME DE TRANSFUSION FETO-FETAL
(STFF) EN UN GEMELAR MONOCORIAL DIZIGÓTICO (MCDZ)
1 1 1 2 2
Silvia Marín Camacho , Sara Fernéndez Prada , Eugenia Antolín Alvarado , Carmina Bermejo , Pilar Martínez-Ten ,
1 1 1 1 1
Elena Mansilla , María de la Calle Fernández-Miranda , Roberto Rodríguez , Beatriz Herrero Ruiz , Laura Sotillo Mallo ,
1 1 1
Francisco López Sánchez , Fe García , José Luis Bartha
1
Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid) España
2
Clínica Delta (Madrid) España
1 Objetivos
Los gemelos monocoriales teoricamente son genéticamente idénticos, es decir, monozigotos, ya que
se desarrollan a partir de un único embrión. Sin embargo, recientemente se han descrito algunos casos
de gemelos MCDZ, fundamentalmente obtenidos mediante técnicas de reproducción asistida, en los
que se ha encontrado cariotipo mixto en ambos fetos, discordante con el fenotipo, e incluso
quimerismo para tejidos sólidos.
2 Resultados
Presentamos el caso de una gestación gemelar tras FIV-ICSI (transferencia de 2 embriones) en
una primigesta de 37 años. La ecografía a las 6 semanas mostraba una gestación MCBA. A las 15
semanas, dado que los sexos eran discordantes, se practicó una amniocentesis de ambos sacos con
cariotipo 46XX en el feto con genitales externos (GE) de aspecto femenino, y 46XY para el feto con GE
de aspecto masculino. El estudio de zigosidad confirmó el diagnóstico de DZ. Se siguió el protocolo de
seguimiento de gestación MC, realizándose controles ecográficos cada dos semanas, normales hasta
las 24s en que se diagnosticó una discordancia de LA y biométrica sin criterios de STFF. Los controles
semanales no mostraron cambios significativos hasta las 28.5s en la que se diagnosticó de STFF
estadio III. Dada la edad gestacional se indicó maduración pulmonar y amnioreducción, realizándose
cesárea a las 24h por persistencia de alteraciones críticas del Doppler, obteniendo un RN
fenotípicamente masculino y otro femenino. El estudio histológico de la placenta confirmó la MC. El
estudio genético de dos secciones de la placenta y de ambos RN mostró dos líneas celulares
procedentes de dos zigotos diferentes confirmando la presencia de un quimerismo linfocitario.
3 Conclusiones
La gestación MCDZ es una entidad rara. Ante su sospecha debemos hacer una confirmación genética
y anatomopatológica. Se desconoce el efecto que el quimerismo linfocitario y/o el tisular pueda tener a
largo plazo.
C0421 EL DISEÑO DE ARRAY-CGH OPTIMIZADO PARA DIAGNÓSTICO PRENATAL
IDENTIFICA UN 10% DE CASOS PATOLÓGICOS, LIMITANDO AL 0.6% LOS CASOS CON
VARIANTES DE SIGNIFICADO INCIERTO: EXPERIENCIA EN >1.000 CASOS.
María Calvente, Francisco Martínez, Sara Comín, Juan Cruz Cigudosa, Javier Suela
1 Objetivos
El arrayCGH es una tecnología cuya implementación al diagnóstico genético prenatal (DP) se ve
limitada por su capacidad de resolución y posible sobre-información. Creemos que es posible
sobrepasar esas limitaciones mediante un diseño orientado para DP y lo hemos analizado en una
muestra de >1000 muestras prenatales analizadas con el mismo diseño.
Incluimos un total de 1053 muestras prenatales: líquido amniótico de semana 16 (>5ml), fragmentos
de biopsia coriónica de semanas 11-13 (2mm3) o cultivo prenatal confluente para citogenética. Todas
los ADN extraídos fueron analizados con un diseño de array-CGH orientado a DP, que incluye al
menos 124 síndromes genéticos con pronóstico conocido. Adicionalmente, el diseño permite la
detección de regiones no polimórficas con un tamaño superior a 2 megabases.
3 Resultados
De las 1053 muestras incluidas, fueron analizadas 1043 (99.99%). Se identificaron un total de 110
casos (10.44%) con variantes genómicas patogénicas descritas que podrían, o bien explicar los
hallazgos ecográficos informados, o bien estar asociados a un fenotipo sindrómico evidente
Se detectaron 6 muestras con variantes no conocidas, con un tamaño superior a las 2 megabases
(0.6%); dos de ellas, por tamaño, relación con los hallazgos y revisión bibliográfica, constituían
entidades patogénicas; las otras cuatro, debido a su carácter potencialmente patogénico fueron
evaluadas con un estudio de progenitores, siendo las cuatro variantes de novo.
4 Conclusiones
La utilización de un array-CGH orientado a patología prenatal permite, por una parte, una detección
óptima (10%) de variantes patogénicas relacionadas con un fenotipo sindrómico o malformativo y, por
otra, la reducción casi total (0.6%) de variantes de significado incierto que pudieran generar
incertidumbre en el diagnóstico prenatal.
C0439 RELACIÓN ENTRE POLIMORFISMOS EN EL CARIOTIPO Y RIESGO
INCREMENTADO DE ANEUPLOIDÍAS EN EMBRIONES PREIMPLANTACIONALES
1 1 1 1 1
Elena Garcia Guixé , Èlia Alsina Xiol , Estefanía Toro Toro , Enric Balius Fort , Montserrat Palahí Bages , Diana
1 1 1 2 1
Campos Rodero , Laura Álvarez Gómez , Carles Giménez i Sevilla , Esther Fernández , Mireia Sandalinas
1
Reprogenetics Spain (Barcelona) España
2
Geniality Diagnóstico Genético (Madrid) España
1 Objetivos
Los polimorfismos cromosómicos son considerados una variante de la normalidad y no existe
consenso sobre si se deben informar o no al realizar un cariotipo. A pesar de no tener efectos
fenotípicos parecen estar sobrerrepresentados en parejas infértiles. Se ha descrito la posible
implicación de la heterocromatina en apareamiento meiótico, unión al huso cromático, movimiento
cromosómico y eventos epigenéticos pudiendo causar, entre otros, aneuploidía. Nuestro objetivo es
evaluar las aneuploidías de embriones preimplantacionales de parejas con polimorfismo
heterocromático (PH) en el cariotipo (variación en la longitud de la heterocromatina de cromosomas 1,
9, 16, Y, o variación en la longitud del brazo corto y/o satélites de los cromosomas acrocéntricos) y
comparar los resultados con un grupo control.
Se estudiaron 84 embriones (11 ciclos) de FIV-DGP-AS de parejas con cariotipo con las siguientes
variantes: 1qh+(2), 1qh+/9qh+(1), 1qh+/21ps+(1), 9qh+(1), 13pss(2), 21ps+(2), 22ps+(1). Los
resultados fueron comparados con 82 embriones (13 ciclos) de pacientes control (cariotipo normal,
ovodonación). Las muestras biopsiadas se analizaron mediante un array de CGH (24sure, Illumina),
excepto en un ciclo (Karyolite (Perkin Elmer)).
3 Resultados
No se observan diferencias significativas en la media de edad materna del grupo problema respecto al
grupo control (30.27 vs. 30.07, p= 0,9048). Se observa un descenso significativo del número de
embriones normales aptos para transferir en portadores de PH (27.16% vs. 58.54%, p<0.0001).
4 Conclusiones
En este estudio, los embriones de las parejas portadoras de PH presentan un incremento significativo
de aneuploidías. Los embriones aneuploides o no implantan o abortan o dan lugar a descendencia
afecta. Este resultado podría explicar la sobrerrepresentación de estos cariotipos en población infértil.
Son necesarios más estudios al respecto pero consideramos indicado que se reflejen estos hallazgos
en la fórmula cromosómica para poder prestar más atención a las parejas infértiles con cariotipo
revelando estas variantes cromosómicas.
C0440 DETECCIÓN DE ANOMALÍAS CROMOSÓMICAS NUMÉRICAS MEDIANTE LA
TÉCNICA DE KARYOMAPPING EN CICLOS DE DIAGNÓSTICO GENÉTICO
PREIMPLANTACIONAL PARA ENFERMEDADES GENÉTICAS (DGP-SGD)
Estefanía Toro Toro, Enric Balius Fort, Laura Álvarez Gómez, Elena Garcia Guixé, Elia Alsina Xiol, Montserrat Palahi
Bages, Diana Campos Rodero, Mireia Sandalinas, Carles Giménez Sevilla
1 Objetivos
La aplicación de la técnica de Karyomapping (Illumina) en ciclos de DGP-SGD permite la selección de
embriones no afectos mediante un protocolo único de análisis de ligamiento con un array de SNPs.
Pese a no estar validada para el diagnóstico de aneuploidías, la técnica también permite observar la
presencia de aneuploidías meióticas y algunas de origen mitótico. El objetivo de este estudio es
evaluar la detección de anomalías cromosómicas numéricas mediante la técnica de Karyomapping.
Se analizaron un total de 17 embriones: a) embriones de ciclos de DGP de enfermedades genéticas y
aneuploidía por indicación clínica (analizados mediante Karyomapping y técnicas de secuenciación
masiva (NGS, VeriSeq, Illumina)) y b) embriones afectos de ciclos de DGP sólo para enfermedades
genéticas, analizados mediante Karyomapping y reanalizados posteriormente mediante NGS. Se
comparan las aneuploidías detectadas en función de la técnica de análisis. Los embriones se clasifican
según la presencia o ausencia de anomalías cromosómicas numéricas y se evalúa la concordancia del
diagnóstico obtenido en ambas técnicas para cada embrión.
3 Resultados
Se observaron 35 aneuploidías mediante Karyomapping y 47 mediante NGS. Todos los eventos
aneuploides detectados por Karyomapping se confirmaron con la técnica de NGS. El diagnóstico
obtenido mostró concordancia en 15 embriones (88%): 12 se diagnosticaron como aneuploides por
ambas técnicas y 3 no presentaron anomalías cromosómicas por Karyomapping y se confirmaron
como euploides por NGS. En los 2 embriones no concordantes no se observaron anomalías mediante
Karyomapping pero sí mediante NGS.
4 Conclusiones
Según nuestros resultados preliminares, la aplicación exclusiva de Karyomapping en ciclos de DGP
para enfermedades genéticas, permite detectar un elevado porcentaje de anomalías cromosómicas.
Ahora bien, para poder establecer un diagnóstico de euploidía en los embriones es necesario
complementar el análisis de la muestra con una técnica de análisis específica para detección de
aneuploidías.
C0444 APLICACIÓN DE UN TEST DE CRIBADO EXPANDIDO DE PORTADORES EN
REPRODUCCIÓN ASISTIDA
Montserrat Palahi Bages, Laura Álvarez Gómez, Diana Campos Rodero, Èlia Alsina Xiol, Enric Balius Fort, Estefanía
Toro Toro, Elena Garcia Guixé, Carles Giménez Sevilla, Mireia Sandalinas
Reprogenetics Barcelona (Barcelona) España
1 Objetivos
Se estima que el 1-2% de las parejas presentan un elevado riesgo de descendencia afecta de una
enfermedad genética recesiva. El cribado de portadores permite reducir el riesgo de transmisión de
enfermedades genéticas recesivas y ligadas al sexo. En la actualidad es posible analizar >300
enfermedades en un solo test. El objetivo de este trabajo es realizar un estudio descriptivo de la
frecuencia de portadores de enfermedades recesivas al aplicar un cribado expandido así como
determinar el riesgo reproductivo de las parejas analizadas.
Se han analizado hasta 311 enfermedades genéticas (287 autosómicas recesivas y 24 ligadas al
®
cromosoma X) en 5698 individuos mediante CarrierMap™ test de Recombine (Illumina’s Infinium HD
Genotyping Platform). Este test no detecta variantes de significado desconocido.
3 Resultados
En la población estudiada un 44,31% de los individuos son portadores de entre 1 y 6 mutaciones,
siendo la mayoría portadores de 1 sola mutación (72,48%). En mujeres se ha detectado un 3,79% de
portadoras de una enfermedad ligada al cromosoma X. Respecto a las enfermedades analizadas, las
detectadas más frecuentemente son: Deficiencia de Biotinidasa (7,58%; 1/13), Pérdida de Audición y
Sordera No Sindrómica Relacionada con GJB2 (4,81%; 1/21), Deficiencia de Pseudocolinesterasa
(3,70%; 1/27), Síndrome del X Frágil (3,60%; 1/28) y Fibrosis Quística (2,83%; 1/35). De los 1080 test
de compatibilidad realizados un 4,17% mostró un alto riesgo reproductivo (superior al 1-2% estimado).
4 Conclusiones
La detección preconcepcional del riesgo reproductivo permite a las parejas tomar decisiones
informadas con antelación y contemplar las posibles opciones reproductivas (ciclo con donación de
gametos, realizar DGP, cambiar el/la donante escogidos o adopción) con el fin de disminuir el riesgo de
tener un hijo afecto de una enfermedad genética. La aplicación de estos test de cribado expandido
permitirá establecer frecuencias de portadores de enfermedades recesivas de forma más precisa.
C0450 CASO CLÍNICO Y REVISIÓN DE LA LITERATURA DEL SÍNDROME DE TRISOMÍA
PARCIAL 3P25PTER Y DELECIÓN PARCIAL 17Q25.3
Andrea Ros Peña, Guillem Pintos, Alicia Castillo, Agustín Rodriguez-Palmero, Ignacio Blanco
1 Resultados
Caso clínico: Gestante de 40 años de edad que realiza el primer control obstétrico a las 18 semanas
de gestación. Diabetes gestacional en tratamiento dietético. Se indica amniocentesis por riesgo de
1/132 de trisomía 21. En el estudio de líquido amniótico, la QF-PCR es normal y en el cariotipo se
observa material cromosómico adicional adherido al cromosoma 17q. Se solicita el cariotipo en sangre
periférica de los progenitores para descartar que la anomalía haya sido heredada en desequilibrio. La
madre resulta ser portadora de la translocación equilibrada 46,XX,t(3;17)(p25;q25.3). Por consiguiente,
el feto presenta una trisomía parcial 3p25pter y una deleción parcial 17q25.3
(46,XY,der(17)t(3;17)(p25;q25.3)mat). Tras recibir el oportuno asesoramiento genético, la paciente
decide continuar la gestación. Se provoca el parto a las 41 semanas de gestación. En la actualidad, su
hijo tiene 15 meses de edad y presenta hipotonía de predominio axial, hipertelorismo, epicantus,
aplanamiento de la raíz nasal con hipoplasia de alas nasales, microcefalia y piel y tejido subcutáneo
con discreta hiperlaxitud. Se recomienda seguir controles pediátricos y neuropediátricos.
2 Conclusiones
Hasta la fecha no se ha descrito un síndrome específico correspondiente a los hallazgos citogenéticos
de nuestro paciente. En la literatura se han reportado malformaciones cardiovasculares en individuos
portadores de deleciones en 17q25.3. La trisomía parcial 3p25pter se asocia a retraso mental y
psicomotor, microcefalia, talla baja, facies característica, malformaciones gastrointestinales y defectos
cardíacos congénitos. Únicamente se ha descrito un caso de trisomía 3p25pter aislada. La mayoría de
los casos son resultado de translocaciones en equilibrio en alguno de los progenitores.
Debido a la edad del paciente aún no podemos determinar la tradución clínica que tendrán la trisomía
parcial 3p25pter y la monosomía parcial 17q25.3. Pero este individuo tiene un mayor riesgo de
presentar retraso mental y psicomotor y defectos cardíacos.
C0454 ELECCIÓN DE LA MEJOR ESTRATEGIA EN EL DIAGNÓSTICO GENÉTICO
PREIMPLANTACIONAL DE ENFERMEDADES HEREDITARIAS (DGP-SGD)
Estefanía Toro Toro, Enric Balius Fort, Laura Álvarez Gómez, Elena Garcia Guixé, Elia Alsina Xiol, Montserrat Palahi
Bages, Diana Campos Rodero, Carles Giménez Sevilla, Mireia Sandalinas
1 Objetivos
La metodología convencional en ciclos de DGP-SGD requiere el desarrollo de protocolos específicos
para cada pareja para estudiar mediante PCR (PCR-CONV) la herencia de marcadores STR cercanos
al locus afectado y determinar la presencia/ausencia de la mutación en caso posible. En cambio el
Karyomapping (Illumina) realiza un estudio de ligamiento mediante un microarray de SNPs que permite
analizar diversas patologías con un único protocolo (si existe historia familiar) reduciendo el tiempo
para iniciar el tratamiento de reproducción asistida. El objetivo de este estudio es determinar la mejor
estrategia a seguir en los ciclos de DGP-SGD.
Se estudian un total de 604 ciclos mediante Karyomapping (biopsia en día 5) y 326 ciclos mediante
PCR-CONV (300 con biopsia en día+3 y 26 en biopsia de blastocisto; 33 con previa amplificación total
del genoma (WGA) y 293 sin WGA). Se evalúan el número de marcadores utilizados para el
diagnóstico en cada técnica y las tasas de allele drop-out (ADO) según día de biopsia y tipo de
amplificación en los casos de PCR-CONV (la presencia de ADO en Karyomapping no interfiere en el
diagnóstico).
3 Resultados
El diagnóstico se realizó a partir de un promedio de 4,2 marcadores en ciclos de PCR-CONV frente a
un mínimo de 20 mediante Karyomapping. En ciclos de PCR-CONV, la tasa de ADO fue superior
analizando un blastómero frente a trofectodermo (12% vs. 9,6%) y cuando se partía de una WGA
(21,5% vs. 10,8%). En este grupo la tasa de embrión diagnosticado fue superior en ciclos con biopsia
de blastocisto (98,7% vs 93%).
4 Conclusiones
El Karyomapping con biopsia de trofectodermo es la estrategia que ofrece un diagnóstico más robusto
ya que analiza un mayor número de marcadores y la presencia de ADO no afecta al diagnóstico.
Además permite el análisis de aneuploidías adicional sin interferir en la fiabilidad de la técnica.
C0494 EL ANÁLISIS GENÉTICO MEDIANTE PANEL DE NGS DE DOS FETOS HERMANOS
CON HIDROCEFALIA GRAVE IDENTIFICA LA POSIBLE IMPLICACIÓN DEL GEN ASCL1
EN SU ETIOLOGÍA
1 2 3 1 1
Fe Amalia García Santiago , Javier Rodriguez Contreras , Cristina Martínez-Payo , Elena Mansilla , Elena Vallespin ,
2 3 1 1 1
Nerea Lobato , Miguel Ruiz de Azua Gomez , Karen Heath Gomez , Pablo Lapunzina , Angel Campos
1
INGEMM, Idipaz, CIBERER, Hospital Universitario La Paz MADRID (MADRID) ESPAÑA
2
INGEMM, IdiPAZ, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
3
Servicio de Ginecología, Hospital Universitario Puerta de Hierro (Madrid) España
1 Objetivos
El diagnóstico genético prenatal de dos fetos hermanos con hidrocefalia grave
1. Pareja de 28 y 29 años sana, no consanguínea, que han tenido dos fetos, uno de sexo
femenino y otro masculino, en los que se ha detectado a las 16 semanas de embarazo una
hidrocefalia grave con separación de tálamos y afectación del tercer ventrículo. La necropsia
confirmó en ambos una estenosis de Acueducto de Silvio. Se ha procedido a analizar muestra
de ADN extraída de líquido amniótico de ambos fetos y de sus progenitores mediante el
panel HIPOPIT V1, que incluye 50 genes implicados en hipopituitarismo congénito y
holoprosencefalia (HPE) y 23 genes candidatos implicados en vías de señalización asociadas,
sin descripción patológica conocida en humanos. La anotación y predicción de patogenicidad
de variantes se ha realizado mediante bases de datos y herramientas bioinformáticas públicas
y de pago (Alamut Visual V2.9.0 e Ingenuity Variant Analysis V.).
3 Resultados
El análisis mediante panel de NGS identificó dos variantes en cis en el flanco 3’UTR del exón 1 del gen
ASCL1: NM_004316.3(ASCL1):c.*7C>A, no descrita previamente, y NM_004316.3(ASCL1):c.*21C>A
(ExAC: ALL:A=0.00087%) en ambos fetos afectos, siendo la madre portadora en mosaico.
4 Conclusiones
ASCL1 codifica un factor de transcripción implicado en el control espacio temporal de la neurogénesis
y gliogénesis del tubo neural y médula espinal. El análisis bioinformático de las variantes identificadas
sugiere la posibilidad de al menos dos mecanismos potencialmente patogénicos: a) activación de un
aceptor alternativo de splicing (Human Splicing Finder), que podría resultar en un “splicing” aberrante
del exón 2 (no codificante) de ASCL1, y b): eliminación de la secuencia de únión de un miRNA
conservado, hsa-miR-615-3p, lo que podría resultar en afectación de la regulación de la expresión
espacio-temporal de ASCL1 durante el desarrollo embrionario del SNC.
C0499 RESULTADOS PATOLÓGICOS EN EL ESTUDIO DE ARRAYS PRENATALES POR
ANOMALÍA ESTRUCTURAL
Beatriz Herrero Ruiz, Laura Sotillo Mallo, Noelia Martínez Carrión, Tamara Ruiz Martínez, Roberto Rodríguez
González, Eugenia Antolín Alvarado, José Luis Bartha Rasero
1 Objetivos
Seleccionar los estudios de array-CGH solicitados prenatalmente que tuvieron un resultado patológico,
cuya indicación fue anomalías ecográficas, y estudiar tipo de malformación y resultado perinatal.
Análisis de los arrays solicitados en el Hospital Universitario La Paz entre 2008-2016, ambos inclusive,
por feto portador de una o varias anomalías estructurales y cariotipo inicialmente normal. Se
seleccionan las variantes de significado patológico y se analizan las manifestaciones ecográficas en el
momento de la indicación y a lo largo de la gestación, así como el resultado perinatal.
3 Resultados
Encontramos 18 casos de arrays patológicos entre los fetos sometidos a prueba invasiva por estas
anomalías estructurales:
Anomalías múltiples: 44,4% del total, 100% de mortalidad perinatal en nuestra serie.
Cardiopatías: 22,2%. SCIH, ventrículo derecho hipoplásico, CAV, Arco aórtico derecho.
Otras anomalías estructurales únicas: HDC, microcefalia con ventriculomegalia, higroma quístico
CIR: como hallazgo más significativo:un caso. Hallazgo asociado en otros 4.
Marcadores ecográficos: 2 casos de tálipes bilateral
Resultado perinatal:
8 de las 18 pacientes interrumpieron la gestación.
Hubo 2 muertes fetales anteparto, 4 casos de muerte neonatal precoz y 3 de secuelas graves. 1
resultado es desconocido
Únicamente en 3 casos (16%) el resultado fue un recién nacido vivo con secuelas más o menos
graves.
Se informó de alteraciones “no causales” hasta en 4 casos
4 Conclusiones
Existe un número de casos pequeño pero significativo en los que encontramos una alteración
estructural ecográfica asociada una alteración submicroscópica detectable con técnicas como los
microarrays. Esto es así especialmente en las anomalías estructurales múltiples, e incluso en algunos
casos de marcadores de cromosomopatía, lo que modifica sustancialmente su pronóstico. Por tanto
hay que proponer esta técnica con anomalías estructurales, ya que aportan una valiosa información
adicional al cariotipo que permite un asesoramiento prenatal más preciso y una mejor información para
el manejo perinatal de estos casos.
C0515 BIOPSIAS CORIALES: DESCRIPCIÓN EPIDEMIOLÓGICA Y SEGUIMIENTO DE LAS
GESTANTES Y SUS HIJOS
Adriana Acha Salazar, Gonzalo Quesada Segura, Rosa Lobo Valentín, Katia Pavón Sáenz, Raquel del Hoyo Mitjans,
Luisa Gil Guillen, María Santana Macias, Isabel Moreno Amo, Gisel Ledesma Sayavedra, María Azpeitia Rodríguez,
José Manuel Mayor González, José Schneider Fontan, Patricia de la Fuente Alonso, Guadalupe Ruiz Martín, Cristina
Andrés Ledesma
Hospital Universitario Rio Hortega Valladolid (Valladolid) España
1 Objetivos
Conocer las indicaciones de biopsia corial en nuestro centro, los diagnósticos obtenidos y la evolución
de esas gestaciones.
Revisión de historias clínicas de las gestantes sometidas a biopsias coriales desde el año 2011 al 2016
y de sus recién nacidos. Estudio observacional descriptivo transversal de periodo. Se excluyeron las
pacientes derivadas de otros centros para el seguimiento de los embarazos y neonatos.
3 Resultados
88 biopsias coriales en 6 años, edad materna 34±5años, semanas gestacionales 11±1, indicación más
frecuente: hallazgos ecográficos (84,1%) de los cuales el predominante fue higroma quístico (60%).
Como complicaciones posiblemente atribuibles al procedimiento: 2 fetos muertos en la semana
siguiente al procedimiento, 1 diagnosticado de trisomía 18 (coriamnionitis sobreañadida) y otro con
cariotipo normal, y 1 caso de corioamnionitis en un feto con trisomía 13 a las 48 horas de la biopsia. Se
obtuvieron 82 diagnósticos citogenéticos: 49 cariotipos normales, 10 trisomías 21, 9 trisomías 18, 2
trisomías 13, 5 síndromes de Turner, 1 síndrome de Klinefelter, 2 triploidías y 1 tetraploidía; en 10
casos hubo contaminación con células maternas, y en 12 no se obtuvo crecimiento en el cultivo celular
y se dió como diagnostico definitivo el obtenido en la hibridación. Los desenlaces obstétricos: 52 IVE, 9
abortos espontáneos, 9 partos, 5 cesáreas (13 pacientes foráneas a las que no se les realizó
seguimiento);a destacar 1 caso de placenta previa y 1 caso de acretismo placentario; obteniéndose 14
recién nacidos vivos, todos a término, 3 presentaron distress respiratorio en periodo neonatal, 1
presentó múltiples malformaciones: hendidura palatina, microrretrognatia, criptoorquidea, microcórnea
(cariotipo normal), todos de alta en buenas condiciones.
4 Conclusiones
El índice de pérdidas gestacionales se mantiene dentro de lo esperado; el desarrollo de los neonatos
diagnosticados ha sido adecuado. La realización de biopsias coriales permitió la asesoría temprana y
dió información para el futuro reproductivo de las pacientes.
C0516 APLICACIÓN DE LA SECUENCIACIÓN MASIVA (NGS) EN EL DIAGNÓSTICO
PRENATAL DE UN FETO AFECTO DE ESCLEROSIS TUBEROSA.
1 2 2 1
MªConcepción Villalón Villarroel , Leopoldo Abarca Martínez , Irene Pelayo Delgado , Eva García-Galloway , Matías
1 1 1
Morín. Rodríguez. , Verónica Barca Tierno , Miguel Angel Moreno Pelayo
1
Hospital Ramón y Cajal. Servicio de Genética Madrid (MADRID) España
2
Hospital Ramón y Cajal. Servicio de Ginecología (Madrid) España
1 Objetivos
La EsclerosisTuberosa es una enfermedad genética, autosómica dominante, causada por los genes
TSC1 (9q34) y TSC2 (16p13.3). Su incidencia es de 1/10000 nacidos vivos y la mitad de los casos se
producen por mutaciones “de novo” en uno de los genes. Se presenta el caso de una gestante, cuyo
feto presentaba múltiples tumoraciones cardiacas con aspecto de rabdomiomas y tumoraciones
cerebrales. La sospecha clínica prenatal de feto afecto de esclerosis tuberosa, llevó al estudio
genético-molecular de los genes implicados en esta patología. A partir de una biopsia de resto abortivo
fetal, se obtiene ADN fetal y se realiza el análisis de un panel de genes mediante secuenciación
masiva (NGS), con objeto de identificar variantes genéticas de los dos genes asociados TSC1 y TSC2.
exónica de 4813 genes clínicamente relevantes y un secuenciador masivo de última generación MiSeq
(Illumina). La clasificación y el estudio de las variantes se realizó empleando la herramienta Variant
Studio (Illumina) acotando el análisis bioinformático a los genes TSC1 y TSC2. La validación de las
variantes y el estudio de segregación se realizó mediante secuenciación Sanger.
3 Resultados
El resultado de la secuenciación masiva identificó una mutación sin sentido “nonsense” en el exón 13
del gen TSC2, confirmando el diagnóstico fetal y permitiendo el estudio familiar. El estudio de
portadores, por secuenciación Sanger, no identificó esta mutación patogénica lo que indicó su origen
“de novo”. Sin embargo, en el padre, se detectó en el mismo exón una mutación de cambio de sentido
(misense) clasificada como variante de significado incierto.
4 Conclusiones
La secuenciación masiva (NGS) se ha convertido en una potente herramienta diagnóstica de aplicación
tanto, en el campo postnatal, como en el diagnóstico prenatal.
C0520 QUIMERISMO LINFOCITARIO Y SÍNDROME DE TRANSFUSION FETO-FETAL
(STFF) EN UN GEMELAR MONOCORIAL DIZIGÓTICO (MCDZ)
1 2 3 4
Silvia Marín Camacho , Sara Fernández Prada , Eugenia Antolín Alvarado , Carmina Bermejo López , Pilar Martínez-
4 5 2 3 3
Ten , Elena Mansilla , María de la Calle Fernández-Miranda , Roberto Rodríguez , Beatriz Herrero Ruiz , Laura Sotillo
3 3 5 3
Mallo , Francisco López Sánchez , Fe García , José Luis Bartha
1
2
Servicio de Obstetricia y Ginecología. Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
3
Sección de Ecografía y Medicina Fetal. Servicio de Obstetricia y Ginecología. Hospital Universitario La Paz. (Madrid)
España
4
Delta Ecografia, Centro de Diagnóstico por la Imagen en Obstetricia y Ginecología. (Madrid) España
5
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM). Hospital Universitario La Paz. IdiPAZ, UAM y CIBERER, ISCIII.
(Madrid) España
1 Objetivos
La norma es que los gemelos MC sean genéticamente idénticos, es decir, MZ, ya que se desarrollan a
partir de un único embrión. Sin embargo, recientemente se han descrito algunos casos de gemelos
MCDZ, fundamentalmente obtenidos mediante técnicas de reproducción asistida, en los que se ha
encontrado cariotipo mixto en ambos fetos, discordante con el fenotipo, e incluso quimerismo para
tejidos sólidos.
2 Resultados
Presentamos el caso de una gestación gemelar tras FIV-ICSI (transferencia de 2 embriones) en
una primigesta de 37 años. La ecografía a las 6 semanas mostraba una gestación MCBA. A las 15
semanas, dado que los sexos eran discordantes, se practicó una amniocentesis de ambos sacos con
cariotipo 46, XX en el feto con genitales externos (GE) de aspecto femenino, y 46, XY para el feto con
GE de aspecto masculino. El estudio de zigosidad confirmó el diagnóstico de DZ. De acuerdo con el
protocolo de seguimiento de gestación MC, se realizaron controles ecográficos/ 2s, siendo normal
hasta las 24s en que se diagnosticó una discordancia de LA y biométrica sin criterios de STFF. Los
controles semanales no mostraron cambios significativos hasta las 28.5s en la que se estableció el
diagnóstico de STFF estadio III. Dada la edad gestacional se indicó maduración pulmonar y
amnioreducción, realizándose una cesárea a las 24h por persistencia de alteraciones críticas del
Doppler, obteniendo 1 RN fenotípicamente masculino y otro fenotípicamente femenino. El estudio
histológico de la placenta confirmó la MC. El estudio genético de dos secciones de la placenta y de
ambos RN mostró dos líneas celulares procedentes de dos zigotos diferentes confirmando la presencia
de un quimerismo linfocitario.
3 Conclusiones
La gestación MCDZ es una entidad rara. Ante su sospecha debemos hacer una confirmación genética
y anatomopatológica. Se desconoce el efecto que el quimerismo linfocitario y/o el tisular pueda tener a
largo plazo.
C0522 PRIMER HOSPITAL PUBLICO QUE IMPLANTA EL CRIBADO PRENATAL NO
INVASIVO BASADO EN SECUENCIACIÓN MASIVA MEDIANTE EL TEST CLARIGO
1 2 2 3
Veronica Barca Tierno , Mª Concepción Villalón Villarroel , Matías Morín Rodríguez , Leopoldo Abarca Martínez , Irene
3 4 4 2
Pelayo Delgado , Ana M. García Cano , Lucía Jiménez Mendiguchia , Miguel Ángel Moreno Pelayo
1
Hospital Ramón y Cajal, Servicio de Genética Madrid (Madrid) España
2
Servicio Genética, Hospital Ramón y Cajal (MADRID) España
3
Servicio de Ginecología, Hospital Ramón y Cajal, Madrid. (MADRID) España
4
Servicio de Bioquímica Clínica, Hospital Ramón y Cajal de Madrid. (MADRID) España
1 Objetivos
El cribado prenatal no invasivo, a partir de ADN fetal libre en sangre materna (NIPT) para los
cromosomas 13,18 y 21, ha supuesto un salto cualitativo en el asesoramiento genético a gestantes con
riesgos elevados bioquímicos de primer trimestre y/o con marcadores ecográficos sugestivos de
cromosomopatía fetal. Las pruebas invasivas, biopsia de vellosidad corial y amniocentesis, han sido
durante muchos años la única herramienta diagnóstica prenatal para estas pacientes. Desde Octubre
de 2016, se ofrece este cribado de forma asistencial a las gestantes de nuestra área, que cumplan los
criterios de inclusión.
Se han analizado más de 100 muestras procedentes de embrazadas de 12-13 semanas de gestación.
El cribado prenatal no invasivo se llevó a cabo empleando el kit CLARIGO™ de Multiplicom, (marcado
CE-IVD). La secuenciación masiva se realizó en un secuenciador Miseq (Illumina). Los datos de
secuenciación fueron analizados con la herramienta bioinformática Clarigo Reporter™.
3 Resultados
Se ha realizado en nuestro servicio la puesta a punto de la técnica, tras lo cual hemos obtenido el
certificado europeo de capacitación para la realización del test Clarigo™. Posteriormente se ha pasado
a su implantación en rutina diagnóstica. De acuerdo al protocolo de la casa comercial, sólo se
analizaron muestras en las que la fracción fetal fue superior al 4% y el número de lecturas por muestra
superior a 2 millones. Todos los casos positivos diagnosticados mediante NIPT fueron validados
mediante amniocentesis y en ningún caso se obtuvieron falsos positivos.
4 Conclusiones
El impacto en el número de pruebas invasivas prenatales, amniocentesis y vellosidad corial, ha sido
evidente desde su implantación, reduciendo significativamente el número de gestantes sometidas a
este tipo de pruebas prenatales. Esta técnica ha demostrado gran sensibilidad y especificidad
permitiendo su utilización en la rutina asistencial del diagnóstico prenatal.
C0554 RESULTADOS DEL CRIBADO COMBINADO DE ANEUPLOIDÍAS EN PRIMER
TRIMESTRE EN GESTACIONES GEMELARES
Noelia Martinez Carrion, Tamara Ruíz Martínez, Beatriz Herrero Ruiz, Roberto Rodríguez González, Eugenia Antolín
Alvarado, José luis Bartha Rasero
1 Objetivos
Estudiar los resultados del cribado en gestaciones gemelares en nuestro centro durante el año 2015.
Se han recogido los datos de 94 pacientes con gestación gemelar que han realizado el cribado en
nuestro centro en 2015. El método utilizado ha sido el cribado combinado contingente del primer
trimestre. Se ha obtenido el riesgo de trisomía 21 y 18 en ambos gemelos y se han clasificado en bajo
riesgo (>1/1000), riesgo intermedio (1/100 -1/1000) y alto riesgo (<1/100). En el grupo de riesgo
intermedio se han reevaluado ecográficamente la presencia de hueso nasal, insuficiencia tricuspídea y
doppler en ductus venoso. Se ofrece la realización de técnica invasiva a pacientes de alto riesgo y a de
riesgo intermedio con alteración de marcadores ecográficos. Se ha estudiado el número de técnicas
invasivas realizadas y resultados.
3 Resultados
De las 94 gestaciones gemelares, 82 han sido bicoriales (87,23%) y 12 monocoriales (12,77%). 63
gestantes han obtenido un riesgo bajo para ambas trisomías 21 y 18 (67,02%), 28 gestantes un riesgo
intermedio de trisomía 21 (29,78%) y una gestante un riesgo alto de trisomía 21 (1,06%). En cuanto a
trisomía 18, se ha obtenido un alto riesgo en dos casos (2,12%). Las 92 restantes han obtenido un bajo
riesgo de trisomía 18 (97,87%).
Se han evaluado marcadores ecográficos a 23 pacientes con riesgo intermedio, siendo negativos en 20
(86,95%) y patológicos en 3 (13,05%). Se ofreció prueba invasiva, realizándose biopsia corial en un
caso.
Se han realizado 5 amniocentesis y 3 biopsias coriales. Se ha obtenido un resultado patológico en una
gestante con riesgo intermedio de trisomía 21 en uno de los fetos (1/506), un mosaicismo 47XXY
[18]/47XY[14]. En este feto se identificó en estudios ecográficos posteriores una malformación
adenomatoide quística, motivo por el que se realizó la amniocentesis.
4 Conclusiones
En el 4,25% de las gestaciones gemelares el riesgo de alteraciones cromosómicas fue alto. No hemos
tenido falsos negativos. En los 3 casos de cribado de alto riesgo no se confirmaron aneuploidías, pero
no ha habido complicaciones asociadas a las técnicas invasivas en nuestra casuística. Dado el escaso
porcentaje de cribados positivos, sería necesario una muestra mayor para sacar conclusiones acerca
de la sensibilidad y tasa de falsos positivos de este procedimiento.
C0556 MIRA MINUCIOSAMENTE Y LO ENCONTRARÁS!!
1 1 2 1
Laura Rodríguez Martínez , Mónica García , María Fernández Chereguini , Elena Abarca Cidón , Laura Rodriguez
3
Martinez
1
Laboratorio AbaCid-Genética. Grupo Hospital de Madrid, (Madrid) España
2
Servicio de Ginecología. Grupo Hospital de Madrid. (Madrid) España
3
AbaCid, Genética Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
Actualmente, la QF-PCR (Quantitative Fluorescent Polymerase Chain Reaction) y el array-CGH (Array
Comparative Genomic Hybridization) son técnicas de rutina en el diagnóstico prenatal. Ambas son de
gran utilidad para adelantar resultados evitando la espera que requiere el cultivo celular para obtener el
cariotipo fetal, a sabiendas de que su principal limitación, es la presencia de mosaicismos. A veces, en
el análisis de estas técnicas moleculares pequeños detalles pueden pasar desapercibidas.
Presentamos el caso de un embarazo de 12+5 semanas, que ecográficamente mostró un onfalocele y
una traslucencia nucal de 4,7 mm. Se realizó biopsia de vellosidad corial y amniocentesis.
3 Resultados
La QF-PCR de la biopsia mostró dos microsatélites del cromosoma X ligeramente alterados haciendo
sospechar un posible mosaico del cromosoma X. El cariotipo de la VC fue informado como normal y el
array-CGH mostró, por debajo del límite de detección, una deleción parcial del cromosoma X. En la
semana 15+4 de embarazo, se realizó una amniocentesis y el cariotipo mostró un derivado de
traslocación (1;X), con deleción parcial de cromosoma X y duplicación parcial de cromosoma 1, que
había pasado desapercibida en el array-CGH. La valoración global del caso puso de manifiesto la
presencia de un mosaico confinado a la placenta.
4 Conclusiones
Con la presentación de este caso se muestra la importancia de no infravalorar los pequeños detalles,
que a veces, nos pueden ayudar en la orientación del diagnóstico.
Mecanismos moleculares y citogeneticos
C0059 TRASLOCACIÓN CROMOSÓMICA COMPLEJA EN PACIENTE CON HIPERTROFIA

DE CLÍTORIS
1 1 1 2
María del Rosario Abellán Sánchez , Ana Ruíz Quílez , Esther Barba Serrano , Celia Villalba Martínez , Arturo
2 2
Carratalá Calvo , Ana Cuesta Peredo
1
INCLIVA Instituto de Investigación Sanitaria Valencia (Valencia) España
2
Servicio de Bioquímica Clínica y Patología Molecular. Hospital Clínico Universitario de Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
Presentamos paciente de 1 año y 7 meses de edad remitida por presentar hipertrofia de clítoris, sin
otros datos de interés. Con el objeto de identificar una posible causa genética, se le realizaron estudios
de citogenética convencional y molecular.
Análisis citogenético convencional, con bandas GTG. Técnicas de hibridación in situ fluorescente
(FISH) utilizando las sondas de pintado cromosómico: WCP2, WCP13 y WCP21 (Vysis). Array de
hibridación genómica comparada (aCGH) Cytochip Oligo Karyo 60K (BlueGnome).
3 Resultados
En el estudio del cariotipo en sangre periférica, se observa una traslocación compleja con tres
cromosomas implicados, cromosomas 2, 13 y 21. La fórmula del cariotipo fue:
46,XX,t(2;13;21)(p23;q14;q22.1).
Mediante FISH, utilizando la combinación de las sondas FISH de pintado cromosómico WCP2, WCP13
y WCP21, se confirmó la presencia de dicha traslocación.
Finalmente, se realizó un aCGH para establecer posibles deleciones/duplicaciones en los puntos de
corte de los cromosomas implicados. Únicamente se detectó una deleción de 1,5 Kb en 2q11.1
(chr2:95697581-95699110). Esta alteración no aparece descrita en las bases de datos (Decipher,
ClinVar NCBI) como polimorfismo de número de copia en la población normal, ni se encuentra
relacionada con ninguna patología.
4 Conclusiones
La paciente es portadora de una traslocación compleja equilibrada. La realización de estudios
complementarios mediante técnicas de FISH y aCGH permitieron una mejor caracterización de este
reordenamiento. Sin embargo, estos hallazgos citogenéticos no permitieron determinar la causa del
fenotipo observado.
Las traslocaciones complejas ocurren muy raramente en la población general, por lo que cada nuevo
caso aporta información sobre las posibles consecuencias de ser portador de dicho reordenamiento.
Habitualmente, estos presentan esterilidad y fallos reproductivos, incluyendo abortos de repetición.
Por encima del 70% de los casos, las traslocaciones equilibradas son de novo. Desafortunadamente,
los progenitores no quisieron realizarse el estudio citogenético para descartar el posible origen
hereditario de dicha traslocación.
C0079 DISGENESIA GONADAL MIXTA. CASO CLÍNICO.
Cristina Esteller Beltran, Angeles Sanchez Herrero, Amaya Hernándo Espinilla, Sonia Climent Estellés, Nuria Estañ
Capell
Hospital Univeristario Doctor Peset (Valencia) España
1 Objetivos
Las anomalías de la diferenciación sexual (DSD) son procesos patológicos originados por alteraciones
en alguna etapa del desarrollo fetal imprescindible para el normodesarrollo del sexo genético, gonadal
y genital. Intervienen genes ubicados en autosomas y gonosomas.
Paciente de 31 años acude a consulta de Ginecología para consejo reproductivo con diagnóstico
previo de Síndrome de Turner sin aportar informe citogenético. El examen físico reveló fenotipo
femenino sin virilización, caracteres sexuales secundarios normales y talla baja. Presenta
hipercolesterolemia, elevación de transaminasas, hipogonadismo, intolerancia a glucosa, escoliosis,
múltiples nevus cutáneos e hipoacusia neurosensorial. La ecografía transvaginal muestra disgenesia
gonadal. La resonancia magnética pélvica descartó la presencia de tumor anexial y reveló existencia
de útero pequeño. El ecocardiograma doppler descarta malformaciones .
Se realizó cultivo de linfocitos de sangre periférica y se aplicó la técnica de bandeo GTG. Para el
estudio de Hibridación in situ Fluorescente (FISH) se utilizaron las sondas CEP (centromérica
cromosomas X e Y), SRY (Yp11.3) y DYZ1 (Yqh).
3 Resultados
El cariotipo en sangre periférica muestra dos líneas celulares con fórmula cromosómica mos 45, XO /
46,X+mar , en un 61% y 39% respectivamente.
La técnica FISH con la sonda CEP mostró una línea celular con una señal de hibridación para el
cromosoma X y otra línea con una señal para el cromosoma X y dos para la sonda centromérica del
cromosoma Y, en la sonda SRY mostró dos señales. No se observó hibridación de la sonda DYZ en
ningún núcleo.
Estos hallazgos identifican el cromosoma marcador como isocromosoma de brazo corto del
cromosoma Y (iYp), con dos copias del gen SRY.
4 Conclusiones
Realizar un correcto informe citogenético debe contemplar la realización de estudios moleculares que
determinen el origen del cromosoma marcador. En este caso la presencia de parte del cromosoma Y
conlleva importante riesgo de gonadoblastoma
C0089 LOS TLR EN CÉLULAS MADRE DE GLIOBLASTOMA: EXPRESIÓN DE SUS GENES
Y EFECTO DE LA ACTIVACIÓN DE LOS RECEPTORES SOBRE LA DIFERENCIACIÓN
CELULAR.
1 1 2 1
Javier Megías Vericat , Rosario Gil-Benso , Alba Martínez Albiñana , Lisandra Muñoz-Hidalgo , Teresa San-Miguel
1 1 3 1 2
Díez , Amara Carratalá García , Daniel Gozalbo Flor , Concha López-Ginés , María Luisa Gil Herrero , Miguel Cerdá-
4
Nicolás
1
Facultad de Medicina, Universidad de Valencia (Valencia) España
2
Edificio de Investigación Jerónimo Muñoz, Universidad de Valencia (Valencia) España
3
Facultad de Farmacia. Universidad de Valencia. (Valencia) España
4
Hospital Clínico Universitario de Valencia. Facultad de Medicina, Universidad de Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
El glioblastoma (GBM) es el tumor cerebral más agresivo. Las células madre de GBM (GSC),
resistentes a la terapia, participan en su crecimiento sostenido y recurrencias. Los receptores “toll-like”
(TLR) se expresan en células del sistema inmunitario, reconocen ligandos de múltiples agentes
infecciosos y desencadenan la respuesta inmune. Los TLR se expresan además en otros tipos
celulares, entre los que se incluyen células de tipo neural, como las células de GBM y las células
madre neurales.
Se utilizaron dos líneas celulares de GBM: U-87 y U-118 (ATCC), cultivadas en presencia de medio
Neurobasal®, con el fin de aumentar la proporción de GSC.
3 Resultados
Tras siete días de cultivo, las neuroesferas se enriquecieron en GSC, dada la expresión detectada de
los marcadores de célula madre CD133 y CD44, medida por citometría de flujo. La expresión de los
genes de los receptores TLR, determinada por RT-PCR, mostró que TLR2, TLR3, TLR4 y TLR6 se
expresaban en estas células. Las neuroesferas se expusieron a los ligandos de los TLR expresados
durante 24 horas. Tras la exposición, la expresión de los marcadores de célula madre CD133 y CD44
disminuyó; este descenso fue más notable en respuesta a los ligandos de TLR2 y TLR4, y podría
relacionarse con la tasa incrementada de diferenciación de GSC observada tras la activación de TLR.
4 Conclusiones
Nuestros resultados sugieren que la inducción de la diferenciación de GSC en respuesta los ligandos
de los TLR podría ser útil para el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas, dado que las células
diferenciadas son menos agresivas y más sensibles a las terapias.
Proyectos y ayudas: VLC-Bioclínic-TLR-GBM-GIL-CERDÁ-2015, FIS-P114/01669 y
PROMETEOII/2015/007.
C0162 APLICACIÓN OPTIMIZADA DEL SISTEMA CRISPR/CAS9 PARA LA RECREACIÓN
DE REORDENAMIENTOS CROMOSÓMICOS ASOCIADOS A CÁNCER EN CÉLULAS
PRIMARIAS HUMANAS
Raul Torres Ruiz, Marta Martinez-Lage, Maria C Martin Guijarro, Sandra Rodriguez-Perales
CNIO Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
El uso del sistema de edición génica CRISPR-Cas9 ha facilitado la generación de líneas celulares
isogénicas en las que se han podido recrear gran cantidad de alteraciones génicas y cromosómicas
asociadas a determinados tipos de patologías humanas. Este sistema permite reconstruir la genética
de reordenamientos complejos en sus loci nativos manteniendo la arquitectura y los elementos
reguladores de la región editada. Aunque es un sistema eficiente en líneas celulares, su eficacia sigue
siendo baja cuando se pretende recrear reordenamientos cromosómicos en células primarias
humanas.
En este estudio se han comparado de tres estrategias dirigidas a mejorar la eficiencia del sistema
CRISPR para recrear reordenamientos cromosómicos en células primarias humanas, incluyendo
células madre mesenquimales y células madre pluripotentes inducidas (iPSs).
Celulas primarias humanas (células mesenquimales e iPSs). Los mecanismos de entrega utilizados
fueron electroporación, transfeccion y transducción lentiviral, de plásmidos, RNA y complejos
ribonucleoproteicos.
3 Resultados
i) el uso de factores implicados en los mecanismos no-homólogos de reparación de roturas en el ADN;
ii) el uso de oligonucleótidos de cadena sencilla (ssODNs) para guiar la reunión y reparación de los
extremos de la rotura de doble hebra generada por el sistema CRISPR-Cas9, y iii) el uso de complejos
ribonucleoproteicos sgRNA-Cas9; estas aproximaciones mejoran de forma significativa las eficiencias
de edición génica.
4 Conclusiones
Las nuevas aproximaciones optimizadas en este estudio permiten aumentar significativamente las
eficiencias de generación de reordenamientos cromosómicos dirigidos. Estos resultados representan
un avance técnico significativo en el campo de la edición génica encaminada a la inducción de
reordenamientos cromosómicos en células madre primarias humanas, con el fin de recrear los
procesos patológicos naturales, tanto translocaciones cromosómicas, deleciones y grandes
reordenamientos.
C0168 CROMOSOMA X DICÉNTRICO EN SÍNDROME DE TURNER EN MOSAICO
1 2 2 3
Ana Ruiz Quilez , Rosario Abellán Sánchez , Esther Barba Serrano , Juana María Vaquer Santamaría , Arturo
3 3
Carratalá Calvo , Ana Cuesta Peredo
1
Instituto de Investigación Sanitaria INCLIVA Valencia (Valencia) España
2
INCLIVA Instituto de Investigación Sanitaria (Valencia) España
3
Servicio de Bioquímica Clínica y Patología Molecular. Hospital Clínico Universitario de Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
Mujer de 19 años sin menárquia ni desarrollo mamario, que presenta útero hipotrófico con cintillas
ováricas. Vulva y vagina NR, cérvix pequeño.
Análisis citogenético mediante bandas GTG. Técnicas de hibridación in situ fluorescente (FISH)
utilizando las sondas teloméricas, TelVysion Xp /Yp de color verde, TelVysion Xq/Yq color rojo, sonda
alfa satélite CEP X (Xp11.1-q11.1) y la sonda de pintado cromosómico WCPX, de color rojo. (Vysis
TelVysion, Abbott). Array de hibridación genómica comparada (aCGH) Cytochip Oligo Kario 60K
(BlueGnome).
3 Resultados
En el cariotipo se observó la presencia de dos líneas celulares, una con una dotación cromosómica
45,X (50%) y otra con una dotación 46,X,+mar (50%). La fórmula del cariotipo fue
45,X[10]/46,X,+mar[10].
Con el objeto de caracterizar el cromosoma marcador, similar a un cromosoma de gran tamaño, se
utilizaron técnicas de citogenética molecular. Mediante FISH en metafase, utilizando la sonda de
pintado cromosómico, WCPX, se vio que el cromosoma marcador era en su totalidad derivado del
cromosoma X. Al utilizar las sondas teloméricas TelVysion Xp/Yp y TelVysion Xq/Yq, se observaron 3
señales para Xp y una señal para Xq. El análisis con la sonda centromérica CEP X (Xp11.1-q11.1)
reveló la presencia de dos centrómeros. Estos resultados muestran la presencia de dos brazos cortos
Xp, dos centrómeros y dos brazos largos Xq unidos en Xqter.
El análisis mediante aCGH detectó una deleción de Xq28.
4 Conclusiones
Mujer con síndrome de Turner en mosaico con fórmula cromosómica 45,X[10]/46,X,dic(X)(Xpter-
>p28::p28->Xpter)[10].
Al tratarse de un síndrome de Turner en un mosaico del 50%, mediante análisis con aCGH únicamente
se detecta una deleción en Xq28, como consecuencia de una compensación en la dosis genómica del
cromosoma X.
La combinación de las técnicas de citogenética convencional y molecular es fundamental para el
diagnóstico de anomalías cromosómicas complejas.
C0169 DIAGNOSTICO CITOGENETICO Y MOLECULAR EN UNA NIÑA CON TALLA BAJA
Y TRANSLOCACION X:AUTOSOMA DESEQUILIBRADA
1 1 1 2
Blanca Garcia Garcia , Luis Antonio Varela Sanz , Maria Jose Alvarez Blanco , Alicia Delicado Navarro , Luis
2 1
Fernandez Garcia-Moya , Jose Manuel Gasalla Herraiz
1
Hospital Universitario Principe de Asturias Alcala de Henares (Madrid) España
2
Hospital Universitario La Paz INGEMM (Madrid) España
1 Objetivos
Mejorar la interpretación de los casos de niñas con talla baja y variantes de S. de Turner mediante la
presentación de un caso clínico.
Caso clínico
Paciente de 4 años. Se realiza cariotipo en sangre periférica por talla baja (<p3) previo administración
de GH.
Padre y hermana con estatura normal, madre y abuelos maternos con talla baja.
3 Resultados
El Estudio Citogenético muestra una pérdida del extremo terminal de brazos cortos de uno de los
cromosomas X, presente también en la madre, que se interpreta como una deleción terminal:
46, XX, del (X)(p22.3)mat
MLPA regiones subtelomericas (PO36E1) se observa pérdida del número de copias en región
correspondiente a la sonda subtelomérica de brazos cortos de los cromosomas X/Y, acompañada de
un aumento en el número de copias en la sonda correspondiente a la región subtelomérica de brazos
largos del cromosoma 18.
FISH: Aplicando las sondas subteloméricas de brazos cortos del X/Y y sonda subtelomérica de brazos
largos del 18 se confirman los hallazgos detectados por MLPA. El estudio citogenético se interpreta
como un cromosoma derivado X de translocación t(X;18).
Cariotipo:
46,X,der(X) t(X;18)(p22.1;q23). ish der(X)t(X;18)(p22.1;q23)(DXYS130-, D18S1390+)mat
ESTUDIO DE INACTIVACIÓN CROMOSOMA X en linfocitos de sangre periférica:

La expresión génica del cromosoma X materno está silenciado con respecto al paterno en el tejido
estudiado
4 Conclusiones
1. El estudio citogenético de alteraciones estructurales del cromosoma X puede ser

malinterpretado si no se complementa con otras metodologías.
2. La inactivación preferencial del cromosoma X reestructurado minimiza las manifestaciones del
cuadro clínico.
3. El asesoramiento genético es complejo en los casos de translocaciones X;autosomas,
especialmente en los estudios prenatales, ya que los riesgos dados dependen en gran medida
del sexo del feto portador, así como de los patrones de inactivación del X, que incluso puede
modificarse según el tejido estudiado.
C0224 ESTUDIO CITOGENETICO Y MOLECULAR DE UN CROMOSOMA ISODICENTRICO
XQ28 EN NIÑA CON RETRASO MENTAL.
1 2 3 3
Cristina Gonzalez , Miriam Gutierrez Serrano , Maria Lorenzo Ruiz , Juan Manuel Fernandez Alonso , Almudena Vigil
3 2 2 2 2
Rodriguez , Rebeca Moreno Perea , Vanesa Barea Calero , Begoña Rodriguez Mogollon , Amelia Queipo Rojas ,
4 2
Severino Gonzalez Roces , Fernando Cava Valenciano
1
Hospital infanta sofia, Genetica San Sebastian De Los Reyes (Madrid) España
2
H.I.Sofia (Madrid) España
3
H.I.Cristina (Madrid) España
4
ICM (Lugo) España
1 Objetivos
Estudio de un cromosoma X isodicéntrico idic(X)(q28) en paciente con retraso psicomotor y rasgos
dismórficos. Los isocromosomas provenientes del cromosoma X producen un amplio rango de
manifestaciones, desde la ausencia de síntomas a la disgenesia gonadal, falta de desarrollo sexual,
amenorrea, infertilidad, o el fallo ovárico precoz, pero el retraso mental apenas está descrito.
Analizamos la reestructuración producida para determinar la posible causa de la inusual clínica que
presenta la paciente.
Paciente de 9 años de edad con retraso mental y motor, talla alta y obesidad (p>99), bradipsia,
estereotopias, hipertelorismo, puente nasal ancho, marcha en puntillas y estadio sexual Tanner 2. Se
toma muestra de sangre periférica de la paciente y progenitores para estudio citogenético mediante
bandas CTG, bandeo C, MLPA y CGH array.
3 Resultados
Se trata de una alteración de novo en una única línea celular formado por dos cromosomas X
completos unidos por la región q terminal 46,X,idic(X)(q28). Mediante bandas C se observan 2
centrómeros, uno visiblemente más marcado que podría actuar como el centrómero funcional
(isocromosoma pseudodicéntrico). Los cariotipos de los padres son ambos normales. Mediante técnica
de MLPA para la región telomérica se observa la perdida de sonda para la región telomerica Xq. Por
técnica de CGH array determinamos una delecion en Xq28 de 1.10Mb y duplicación del resto del
cromosoma X (trisomía).
4 Conclusiones
Según nuestra revisión bibliográfica no hay descrito ningún caso de paciente con cromosoma
isodicéntrico q28 con retraso mental. La deleción encontrada incluye 13 genes relacionados con
retraso mental, alteraciones del comportamiento y autismo. Se ha sugerido que el fenotipo en estos
casos puede estar estrechamente ligado tanto al patrón de replicación del cromosoma X como a su
comportamiento en la inactivación y su expresión tisular. Es importante caracterizar la alteración y los
genes delecionados para el consejo genetico.
C0242 TRISOMIA 13 EN MOSAICO MEDIANTE I(13)(Q10). UN FENÓMENO MUY
INFRECUENTE DETECTADO EN NEONATO CON LEVE DISMORFIA
Emma Triviño Palomares, Maria Jiménez Navajas, Maria Antònia Garrido González, Sonia Garcia Méndez, Esther
Barceló Liébana
CATLAB Viladecavalls (Barcelona) España
1 Objetivos
Diagnosticar el mecanismo genético subyacente en un paciente recien nacido con dismorfia moderada
Neonato pretérmino de 32 semanas, de sexo femenino, que ingresa por insuficiencia respiratoria,
objetivándose artrogriposis en mano izquierda, pulgares largos, raíz nasal ancha, ligera blefarofimosis,
y bultoma frontal.
3 Resultados
El resultado de la FISH con sonda específica de la región 22q11.2 resultó normal, detectándose dos
señales de hibridación. Mediante array CGH se observó una trisomía del cromosoma 13,
aparentemente en mosaico estimado del 45%. El resultado del cariotipo reveló que la trisomía se debía
a una anomalía estructural compatible con un isocromosoma, con fórmula
46,XX,i(13)(q10)[7]/46,XX[13]. Mediante QF-PCR se comprobó que la trisomía era dialélica.
El cariotipo de los padres resultó normal
4 Conclusiones
La trisomía del cromosoma 13, asociada al síndrome de Patau, se presenta en raras ocasiones en
mosaico. Es también poco frecuente que vaya ligada a una anomalía estructural (según nuestro
conocimiento este es el primer caso en que se describen los dos fenómenos en un paciente). El
fenotipo de los pacientes con trisomía 13 en mosaico es muy variable, lo que dificulta el diagnóstico
clínico. Aunque la afectación en el presente caso parecía ser moderada, la paciente fue exitus a los 2
meses de vida.
El patrón dialélico, el mosaicismo y el cariotipo normal de los padres son compatibles con un error
postcigótico, por lo que el riesgo de recurrencia no se vería incrementado respecto a la población
general. Los resultados obtenidos permitieron determinar el mecanismo más probable por el que se
generó la trisomía, establecer este bajo riesgo y asesorar adecuadamente a la pareja.
C0302 ALTERACIÓN DEL NÚMERO DE COPIAS DEL GEN NIPBL EN UN PACIENTE
ESPAÑOL CON SÍNDROME CORNELIA DE LANGE
1 1 1 1
María Hernández Marcos , Beatriz Puisac Uriol , Mª Esperanza Teresa Rodrigo , Mª Concepción Gil Rodríguez ,
2 3 1 1
Ariadna Ayerza Casas , Carolina Baquero Montoya , Sheila López Triguero , Sergio Gil Clavero , Francisco J. Santiago
1 4 1
Arcos , Feliciano J. Ramos Fuentes , Juan Pié Juste
1
Universidad de Zaragoza (Zaragoza) España
2
Hospital Infantil Miguel Servet (Zaragoza) España
3
Hospital Pablo Tobón Uribe (Medellín) Colombia
4
Facultad de Medicina, Universidad de Zaragoza - Hospital Clínico Univ. "Lozano Blesa", Pediatría Zaragoza
(Zaragoza) España
1 Objetivos
El Síndrome Cornelia de Lange (SCdL) (OMIM #122470; #300590; #610759; #614701; #300882) es un
desorden congénito del desarrollo que se caracteriza por dismorfia facial, retraso de crecimiento y
psicomotor, y malformaciones de las extremidades. La secuenciación de los 5 genes causales
conocidos (NIPBL, SMC1A, SMC3, RAD21 y HDAC8) permite diagnosticar alrededor de un 80% de los
pacientes.Se ha comunicado que entre los pacientes no diagnosticados, un 2,5% presentarían
alteraciones (deleciones o duplicaciones) en el número de copias génicas (CNV, Copy Number
Variations). El objetivo de este trabajo ha sido estudiar por primera vez, la presencia de CNV
intragénicas del gen NIPBL en 15 pacientes españoles con SCdL y diagnóstico genético negativo.
Se ha analizado la presencia de CNV mediante la técnica de MLPA (Multiplex Ligation-dependent
Probe Amplification) utilizando el kit SALSA MLPA probemix P141/P142 NIPBL de MRC-Holland. Los
productos de ligación han sido amplificados por PCR y analizados en un secuenciador capilar ABI-
3500XL. El análisis cuantitativo de la altura de picos en pacientes y controles se ha llevado a cabo con
el software Coffalyser.
3 Resultados
Entre los 15 casos estudiados se ha encontrado un paciente que tenía una deleción del exón 4 (128
pb) del gen NIPBL en heterocigosis. Se trataba de un varón de 21 años que mostraba un fenotipo leve
con rasgos faciales típicos (microcefalia, sinofridia, pestañas largas, puente nasal deprimido y narinas
antevertidas), retraso motor y del lenguaje y alteraciones menores de las extremidades superiores.
4 Conclusiones
Se confirma el hallazgo del primer paciente español con SCdL y deleción intragénica del gen NIPBL,
que refuerza la importancia de incluir el análisis de CNVs de este gen en el diagnóstico molecular del
síndrome.
C0329 LA SECUENCIACIÓN MASIVA (NGS) COMO MÉTODO DIAGNÓSTICO EN
ENFERMEDAD DE STARGARDT: DOS CASOS CLÍNICOS, UNA MUTACIÓN.
1 2 3 3 1
Belén Jiménez-Rolando , Rubén Martín-Arenas , Susana Noval , Irene Rosa-Pérez , Esther Mata-Díaz , Kristina
4 4 2 4 2
Ibáñez , Juan Carlos Silla , Victoria Eugenia F. Montaño , Ángela del Pozo , Elena Vallespín
1
Servicio Oftalmología. Hospital Central de la Cruz Roja (Madrid) España
2
Sección de Genómica Estructural y Funcional. Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM) - Hospital La Paz -
IdiPaz - CIBERER (Madrid) España
3
Servicio Oftalmología. Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
4
Sección de Bioinformática. Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM) - Hospital La Paz - IdiPaz - CIBERER
(Madrid) España
1 Objetivos
La enfermedad de Stargardt es la maculopatía más frecuente en la edad infantil y adulta. Presenta un
origen genético por afectación principalmente del gen ABCA4 con herencia autosómica recesiva. La
aparición y desarrollo de las técnicas de secuenciación masiva en el INGEMM (Instituto de Genética
Médica y Molecular del Hospital La Paz) permiten realizar el diagnóstico genético de la enfermedad de
Stargardt por NGS.
Se presentan dos casos clínicos con un fenotipo de maculopatía de ojo de buey con ausencia de
flecks. El estudio de ambos pacientes se llevó a cabo con el panel de NGS Oft_v1.0 (298 genes,
región exónica y ±10pb flanqueando los exones) diseñado de forma personalizada en el INGEMM y
empleado en la rutina clínica para el diagnóstico de pacientes con patología ocular con sospecha de
origen genético.
3 Resultados
El estudio con el panel Oft_v1.0 detectó los siguientes cambios en el gen ABCA4:
c.G5882A:p.Gly1961Glu y c.C3056T:p.Thr1019Met en el caso 1 y c.G5882A:p.Gly1961Glu y
c.287del:p.Asn96Thrfs*19 en el caso 2. Ambos pacientes comparten la mutación
c.G5882A:p.Gly1961Glu que explica su fenotipo similar tan característico.
4 Conclusiones
La NGS facilita el diagnóstico genético porque disminuye tanto el coste económico como el tiempo de
respuesta. Además el hecho de que se estén desarrollando numerosos ensayos clínicos, así como la
aparición de técnicas de edición génica (CRISPR/Cas9), hacen suponer el empleo de terapias génicas
en un futuro muy próximo, lo aumenta la importancia de un diagnóstico genético rápido y completo.
Para la implementación de la NGS en la rutina diagnóstica, es fundamental disponer de un equipo
especializado que trabaje de forma coordinada en todos los pasos del proceso (diagnóstico clínico,
asesoramiento genético, wet-lab, dry-lab e interpretación de los resultados) para que quede
garantizada la seguridad y utilidad en el diagnóstico del paciente
C0345 DIAGNÓSTICO GENÉTICO COMPLEJO DE INMUNODEFICIENCIAS PRIMARIAS
1 2 1 2
Maria Bravo Garcia-Morato , Elena Vallespín García , Lucía del Pino Molina , Ángela del Pozo Maté , Luis Fernández
2 2 2 1
García Moya , María de los Ángeles Mori , Julián Nevado Blanco , Antonio Ferreira Cerdán , Eduardo López
1 1
Granados , Rebeca Rodríguez Pena
1
2
1 Objetivos
Las inmunodeficiencias primarias (IDP) son un grupo de casi 300 enfermedades genéticas raras que
se caracterizan por un funcionamiento incorrecto de uno o más componentes del sistema inmunitario.
Presentamos tres casos cuyos diagnósticos genéticos fueron atípicos.
La secuenciación masiva fue llevada a cabo mediante la utilización de un panel de diseño propio. Los
arrays CGH y de SNPs, así como la expresión intracelular de BTK fueron diseñados y realizados en
nuestro centro.
3 Resultados
La paciente 1 es una niña de 6 años de edad que presenta infecciones respiratorias recurrentes desde
los 3 años de vida. En el último año ha tenido una neumonía y una giardiasis. Se detectó la mutación
p.Q103X en heterocigosis en el gen BTK, localizado en el cromosoma Xq22.1. Se comprobó la
ausencia de expresión de la proteína BTK mediante citometría de flujo. Un estudio de inactivación del
cromosoma X mostró un sesgo del 100%. Mediante un cariotipo de detectó una deleción del brazo
largo de uno de sus cromosomas X.
El paciente 2 es un varón de 14 años de edad con una historia clínica de manifestaciones autoinmunes
severas, infecciones, retraso intelectual leve y fallo de medro. Mediante un array CGH se detectó una
deleción de 4Mb en heterocigosis en el cromosoma 2 que afectaba a 22 genes asociados a patología,
entre ellos al gen CTLA4.
El paciente 3 es un varón de 9 meses de edad con broquiolitis y abscesos esplénicos en los que se
aisla C. parapsilosis. La mutación en homocigosis p.S118R en el gen CYBA, localizado en el
cromosoma 16q24.2, se detectó mediante secuenciación tipo Sanger. El estudio familiar mostró que
solo su madre era portadora de la mutación. Se llevó a cabo un array de SNPs mediante el cual se
detectó una isodisomía uniparental materna.
4 Conclusiones
Eldiagnóstico genético deIDP se debe adecuar a cada paciente para alcanzar resultados
concluyentes.
C0357 DIFERENCIAS EN LA EXPRESIÓN DEL GEN BMPR2 EN LINFOCITOS B
INHERENTES A LA INMORTALIZACION CON VIRUS DE EPSTEIN-BARR
1 1 1 2 3
Mauro Lago Docampo , Guillermo Pousada , Sonia Prado López , Adolfo Baloira , Rubén Varela Calviño , Beatriz
4 1
Mantiñán , Diana Valverde
1
Facultad de Biología, Universidad de Vigo Vigo (Pontevedra) España
2
Servicio de Neumología del Complejo Hospitalario de Pontevedra (Pontevedra) España
3
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Universidad de Santiago de Compostela (A Coruña) España
4
Servicio de Endocrinología, Diabetes, Nutrición y Metabolismo del Complejo Hospitalario Universitario de Vigo
(Pontevedra) España
1 Objetivos
El BMPR2, cuya expresión es descrita como ubicua, es el principal gen implicado en la Hipertensión
Arterial Pulmonar (HAP), una enfermedad rara caracterizada por el aumento de la resistencia vascular.
Caracterización funcional de la mutación c.419-43delT en el gen BMPR2 presente en heterocigosis en
el 18% de los pacientes HAP analizados.
Se llevó a cabo un análisis en la secuencia mutada y control, para la detección de alteraciones en el
proceso de splicing mediante un ensayo de minigenes utilizando el vector pSPL3. A partir de muestras
de sangre de pacientes (con deleción, sin ella, y controles) se extrajeron linfocitos B, se aislaron y
cultivaron. Posteriormente, se inmortalizaron utilizando el virus de Epstein-Barr. La inmortalización fue
confirmada por citometría de flujo. Los linfoblastoides fueron separados según su fase del ciclo celular
mediante cell sorting. La expresión génica del BMPR2 se analizó mediante qPCR utilizando ensayos
Taqman® comerciales.
3 Resultados
No se detectaron alteraciones en el proceso splicing. No se detectó expresión génica del BMPR2 en
linfocitos B de sangre periférica ni en el cultivo de estos, pero sí de los genes control (GADPH y
ACTB). Tras la inmortalización, sí se encontró expresión génica, tanto de BMPR2 como de los genes
control. La expresión normalizada mostró un aumento de los niveles de expresión en la fase S del ciclo
celular, y una disminución en la fase G2/M. entre pacientes y controles. Los pacientes sin deleción
mostraron valores intermedios.
4 Conclusiones
La expresión del BMPR2 en los linfoblastoides parece estar supeditada al proceso de inmortalización
de los linfocitos B. Las diferencias en la expresión del gen BMPR2 entre pacientes con deleción, sin
ella y controles, podrían reflejar el papel de esta mutación en la regulación de la expresión del mismo.
Estudios posteriores serán necesarios para corroborar esta hipótesis.
C0388 COOCURRENCIA DE DISOMÍA UNIPARENTAL 13Q Y DELECIÓN 13Q14.3 EN
MOSAICO
1 2 3 1
Judith Reina Castillón , Marcos López Sánchez , Benjamín Rodríguez Santiago , Luis Alberto Pérez Jurado
1
Investigaciones Médicas (IMIM). Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER)
Barcelona (Barcelona) España
2
Investigaciones Médicas (IMIM). ISGlobal, Centro de Investigación en Epidemiología Ambiental (CREAL). (Barcelona)
España
3
Investigaciones Médicas (IMIM). Laboratorio qGenomics. (Barcelona) España
1 Objetivos
La leucemia linfocítica crónica (LLC) consiste en la acumulación de células B-monoclonales CD5+ en
sangre y/o en tejidos linfáticos. Una deleción monoalélica (76%) o bialélica (24%) en 13q14.3 se
detecta en el 55% de casos, siendo también uno de los reordenamientos somáticos más comunes en
controles de edad avanzada. En este trabajo hemos analizado la coocurrencia de deleción 13q14.3
(del13q14.3) con disomía uniparental 13q (UPD13q) y la posible relación funcional entre ambos
reordenamientos.
Meta-análisis para estimar la prevalencia de UPD13q y/o del13q14.3 en 70144 individuos sin
diagnóstico de LLC y en 722 pacientes con LLC, todos analizados por SNParray. En los individuos
libres de leucemia con ambos reordenamientos, hemos estimado la proporción de células con cada
reordenamiento mediante el uso de diferentes parámetros del SNParray y ayudados por un simulador
desarrollado por nuestro grupo.
3 Resultados
La coocurrencia UPD13q-del13q14.3 ha sido validada en ambas cohortes, siendo mayor en individuos
sin leucemia (sin LLC: 8/39, 20.51%; con LLC: 21/419, 5.01%) (OR: 4.9; CI95%:2.0-11.9; p=0.0015), lo
que sugiere un posible efecto protector de UPD13q frente a la pérdida de función 13q14.3 y desarrollo
de LLC. Mediante aproximaciones matemáticas y simulaciones hemos detectado 4/8 individuos con
del13q14.3 homocigota por UPD13q. En 2 individuos se han detectado dos UPDs, una responsable de
la del13q14.3 en homocigosis y otra diferente en células sin deleción. En uno de ellos se ha definido
también una fracción celular con del13q14.3 en homocigosis por mecanismo de segundo hit.
Finalmente, hay dos individuos con homocigosidad por una segunda del13q14.3 diferente y UPD13q
adicional.
4 Conclusiones
Nuestros datos demuestran una coocurrencia UPD13q-del13q14.3 mayor de la esperada al azar
sobretodo en individuos sin LLC, y sugieren una posible acción compensatoria de la UPD13q ante la
pérdida de función 13q14.3.
C0404 IDENTIFICACIÓN DE ALTERACIONES EN UNA NUEVA REGIÓN DE PAR1
IMPLICADA EN DISCONDROSTEOSIS DE LERI-WEILL, DISPLASIA MESOMÉLICA DE
LANGER Y TALLA BAJA IDIOPÁTICA
1 1 2 1 3
Sara Benito Sanz , Alberta Belinchón Martínez , Carolina de la Torre , Miriam Aza Carmona , Hannah Verdin , Ana
4 3 4 1
Fernández Miñán , Elfride De Baere , José Luis Gómez Skarmeta , Karen Elise Heath
1
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), UMDE, Hospital Universitario La Paz, Universidad Autónoma de
Madrid, IdiPAZ. Centro de Investigación Biomédica en Enfermedades Raras (CIBERER), Instituto Carlos III (ISCIII).
2
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), UMDE, Hospital Universitario La Paz, Universidad Autónoma de
Madrid, IdiPAZ. (Madrid) España
3
Center for Medical Genetics Ghent, Ghent University (Ghent) Bélgica
4
Centro Andaluz de Biología del Desarrollo, Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Universidad Pablo de
Olavide. (Sevilla) España
1 Objetivos
SHOX localizado en la región pseudoautosómica 1 (PAR1), codifica un factor de transcripción
implicado en el crecimiento humano. Se han identificado siete “enhancers” en los flancos distales de
SHOX. Se han descrito mutaciones en SHOX o en sus “enhancers” en ~70% de los casos con
discondrosteosis de Leri-Weill (DLW), en ~90% de los casos con displasia mesomélica de Langer
(DML) y ~2-5% de talla baja idiopática (TBI), quedando un porcentaje significativo de estos pacientes
sin diagnóstico molecular. El objetivo fue identificar y caracterizar la base molecular de los casos sin
defecto conocido.
En el diagnóstico molecular rutinario de DLW, DML y TBI se analizaron alteraciones en PAR1 mediante
MLPA comercial. Se caracterizaron las alteraciones identificadas mediante MLPA de diseño propio o
aCGH. En 2015 se realizó un “Chromatin interaction map” (4C-seq) de PAR1 en células U2OS para
identificar regiones de PAR1 que interaccionen con el promotor de SHOX.
3 Resultados
Hemos identificado nueve deleciones/duplicaciones en el flanco distal 3´ de SHOX, que no incluyen a
ninguno de los “enhancers” conocidos en pacientes con DLW, DML y TBI. Las deleciones presentan
una zona común afectada de ~60kb localizada a ~347-407kb de SHOX. El 4C-seq demuestra
interacción del promotor de SHOX con regiones localizadas en el intervalo común afectado en nuestros
pacientes. Igualmente se han identificaron varios “enhancers” candidatos mediante la identificación de
regiones evolutivamente conservadas (ECRs) en las secuencias delecionadas.
4 Conclusiones
Nuestros resultados junto con dos deleciones descritas en la literatura, han permitido delimitar una
nueva región de PAR1 implicada en DLW/DML/TBI, donde podrían existir nuevos elementos
reguladores de la transcripción, “enhancers” de SHOX, cuya pérdida o reajuste cromosómico podría
explicar el mecanismo patogénico en estos pacientes. Sería necesario comprobar la capacidad
transcripcional de los ECRs mediante ensayos de luciferasa en células osteogénicas, 3C en embriones
de pollo y la creación de ratones transgénicos.
C0424 CASOS CLINICOS CON DERIVADOS “DE NOVO” DE TRASLOCACIONES
RECÍPROCAS NO PRESENTES EN EL CARIOTIPO DE LOS PROGENITORES
Carolina sanchez Jimeno, Isabel Lorda Sánchez, Camilo Vélez, Virgina Rufo, Laura Horcajada Burgos, Rocio De
Libertad Cardero Merlo, Fernando Infantes Barbero, Marta Rodriguez De Alba
Fundacion Jimenez Diaz Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
Es ya ampliamente conocido el mecanismo por el cual, una traslocación cromosómica equilibrada
presente en uno de los progenitores, puede dar lugar en el hijo a la presencia de un cariotipo con
derivados desequilibrados que resultan en exceso y defecto de material genético. Sin embargo, en el
presente estudio reportamos 3 casos que presentan reordenamientos desequilibrados crípticos todos
ellos productos de una segregación adyacente 1(perdida de material de un cromosoma y ganancia de
otro) de una traslocación equilibrada no presente en muestra de sangre periférica en los progenitores.
La detección de duplicación y deleción de las regiones terminales de los cromosomas implicados fue
mediante MLPA y aCGH. Todos los casos se confirmaron mediante técnica de FISH.
3 Resultados
Primer caso: niña de 8 años con retraso psicomotor y autismo con cariotipo 46,XX,der(9)t(3;9).
Segundo caso: niño de 18 meses con retraso psicomotor e hipotonía que presenta un cariotipo
46,XY,der(22)t(16;22)(q24;q13.3) Tercer caso:niña de 7 años con retraso psicomotor y del lenguaje
con cariotipo 46,XX,der(12)t(7;12)(p22.3;p13.3). En los 3 casos los progenitores presentan cariotipo
normal con ausencia de traslocación criptica mediante FISH.
4 Conclusiones
Estos hallazgos aparentemente “de novo” son poco frecuentes y podrían proceder de traslocaciones
presentes en las gónadas de los progenitores. Ante la imposibilidad de esta confirmación, deben
considerarse igualmente derivados “de novo”, aunque ante ellos se debe de realizar un asesoramiento
genético con un riesgo de repetición que tenga en cuenta la posible presencia de la traslocacion
equilibrada en forma de mosaicismo germinal.
C0431 DIAGNÓSTICO GENÉTICO DE LA HIPOFOSFATASIA: NUESTRA EXPERIENCIA EN
492 PACIENTES.
1 2 1 1 3
Jair Tenorio , Pedro Arias Lajara , Miriam Aza-Carmona , Angela Del Pozo , Diana Pérez Torrella , Carmen Mercado
4 5 6 7 8 9 10
Díaz , Mónica Olid Velilla , Pilar Aguado , José A. Riancho , Samia Temtamy , Jesús Argente , Víctor L. Ruiz-Pérez ,
1 1 1
Karen Heath , Consorcio Hipofosfatasia , Pablo Lapunzina
1
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM). Instituto de Investigación Hospital Universitario La Paz (IdiPAZ),
CIBERER, Centro de Investigación en Red de Enfermedades Raras, ISCIII, (Madrid) España
2
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM) H. Universitario La Paz. CIBERER, Laboratorio de
3
Servicio de análisis clínicos, Hospital Universitario de Móstoles. (Madrid) España
4
Servicio de Pediatría. Hospital Universitario de Móstoles. (Madrid) España
5
Servicio de Medicina interna. Hospital Universitario de Móstoles. (Madrid) España
6
Servicio de Reumatología, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
7
Departamento de medicina interna, Hospital Universitario Marqués de Valdecilla, IDIVAL, Universidad de Cantabria,
RETICEF, (Cantabria) España
8
Division of Human Genetics and Genome Research, Department of Clinical Genetics, National Research Centre,
Cairo, Centre of Excellence for Human Genetics, National Research Centre, (Cairo) Egipto
9
Departamento de Endocrinología, Hospital Universitario Niño Jesús, IIS La Princesa. Departamento de pediatría,
Universidad Autónoma de Madrid, CIBEROBN, Centro de Investigación Biomédica en Red sobre Fisiopatología de la
obesidad y nutrición, Instituto d (Madrid) España
10
CIBERER, Centro de Investigación en Red de Enfermedades Raras, ISCIII, Instituto de Investigaciones Biomédicas
Alberto Sols-UAM. (Madrid) España
1 Objetivos
La Hipofosfatasia (HPP) es una enfermedad rara con una prevalencia de 1:500.000 nacimientos. Las
características clínicas de esta enfermedad varían desde formas leves de aparición adulta hasta
formas perinatales letales. Según el grado severidad y el período en el que aparezcan los primeros
síntomas, podemos clasificar la HPP en 4 grupos: perinatal, infantil, adolescente y adulto. Está
causada por mutaciones en el gen ALPL que codifica la enzima fosfatasa alcalina no específica de
tejido. En la actualidad existe un tratamiento de reemplazo enzimático para aquellos pacientes con
diagnóstico positivo de HPP lo que hace fundamental el reconocimiento y diagnóstico precoz de estos
pacientes.
Se ha llevado a cabo el diagnóstico molecular de 564 muestras (500 muestras índices + 64 familiares).
En aquellos casos en los que no se encontró defecto molecular en ALPL, se seleccionó una cohorte de
pacientes con características clínicas severas (incluyendo una FA baja en repetidas ocasiones) para
estudiar mediante un panel de secuenciación masiva, todos los genes relacionados con displasias
esqueléticas descritas hasta la fecha.
3 Resultados
Tras la secuenciación del gen ALPL en 492 muestras, se encontraron 113 mutaciones patogénicas, un
23% del total. De aquellos que fueron negativos se seleccionó una cohorte inicial de 36 pacientes para
estudiar por NGS. Se encontraron 7 variantes en genes relacionados con: osteogénesis imperfecta,
displasia cleidocraneal, hipofosfatasemia ligada al X, y una colagenopatía.
4 Conclusiones
El estudio molecular ha permitido la identificación de nuevas mutaciones en ALPL, demostrando que
aún queda mucho por conocer a nivel molecular de esta enfermedad. Por otra parte, es importante
realizar un estudio mediante secuenciación masiva, en aquellos pacientes en los que sin defecto
molecular en ALPL, ya que es posible que puedan tener otras alteraciones moleculares en los genes
de otros de los síndromes que presentan homología a la HPP.
C0448 DETECCIÓN DE CNVS EN PACIENTES CON SOBRECRECIMIENTO NO
SINDRÓMICO Y DISCAPACIDAD INTELECTUAL
1 2 2 2 2 2
Jair Antonio Tenorio Castaño , Julián Nevado Blanco , Pedro Arias Lajara , Pilar Barruz , Gema Gordo , Irene Dapía ,
2 2
The SOGRI Consortium , Pablo Lapunzina
1
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM) Madrid (Madrid) España
2
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM). Instituto de Investigación Hospital Universitario La Paz (IdiPAZ)
(Madrid) España
1 Objetivos
El sobrecrecimiento se define como el aumento en el peso, talla o perímetro cefálico por encima de 2
desviaciones estándar o el percentil 97 para edad, sexo y grupo poblacional. Es frecuente encontrar en
estos pacientes, otras características clínicas como la discapacidad intelectual.
Así pues, el objetivo de este trabajo fue el de analizar una cohorte de pacientes con sobrecrecimiento y
discapacidad intelectual mediante microarrays de SNPs de alta resolución con el fin de detectar
pérdidas de heterocigosidad (LOH), grandes reordenamientos genómicos, alteraciones en la dosis
genómica, SNPs e indels.
Se seleccionó una cohorte de pacientes incluidos en el Registro Español de Síndromes de
Sobrecrecimiento (RESSC) que presentaban sobrecrecimiento no sindrómico o sin defecto molecular
inicial en el diagnóstico presuntivo con discapacidad intelectual leve o moderada.
Para la realización de los estudios moleculares se utilizó el microarray de SNP CytoSNP 850K
(Illumina). Los datos se analizaron con el software GenomeStudio-v2011.1.
3 Resultados
Tras un análisis preliminar de los resultados, se ha detectado una media de 19 regiones LOH por
paciente, y 15 regiones con CNVs que podrían tener un significado clínico tras el análisis “in silico”. El
rango de tamaño de las CNVs encontradas fue de 4.326pb hasta 44MB, en un paciente con
mosaicismo bajo de todo el brazo corto chr11p.
4 Conclusiones
El estudio de pacientes con sobrecrecimiento, discapacidad intelectual y un rango variable de
características clínicas adicionales mediante microarray de SNPs representa una poderosa extrategia
de análisis, ya que en nuestro estudio hemos podido encontrar alrededor de un 10% de CNVs que
podrían tener potencialmente un efecto sobre el fenotipo de los pacientes analizados.
Además, también es una herramienta muy útil para la detección de aquellos casos en los que no se
han detectado defectos moleculares en el diagnóstico presuntivo inicial o para casos de disomía
uniparental, translocaciones, microdeleciones o mosaicimos bajos.
C0506 PROFUNDIZANDO EN LAS BASES MOLECULARES DEL SÍNDROME DE
ALSTRÖM, UNA CILIOPATÍA ULTRA-RARA: AVANCES EN LA CARACTERIZACIÓN DE
LA REGIÓN PROMOTORA DE ALMS1 Y POTENCIAL IMPLICACIÓN DE ESTE GEN EN LA
RUTA TGF-BETA/BMP
Maria Alvarez-Satta, Sheila Castro-Sánchez, Diana Valverde
Facultad De Biologia, Universidad De Vigo (Pontevedra) España
1 Objetivos
Avanzar en el conocimiento de las bases moleculares del síndrome de Alström (ALMS), profundizando
en dos aspectos: regulación transcripcional de ALMS1 mediante mecanismos epigenéticos y análisis
del efecto del silenciamiento de ALMS1 sobre la ruta de señalización TGF-beta/BMP.
Se caracterizó in silico la región promotora de ALMS1 y se cuantificó su nivel de metilación en siete
pacientes mediante qMSP. Además, se silenció este gen en células hTERT-RPE1 y se estimularon por
separado las vías TGF-beta y BMP a distintos tiempos, analizándose las formas fosforiladas de las
proteínas SMAD2/3, SMAD1/5 y ERK1/2.
3 Resultados
Respecto al estudio de metilación, se encontró una isla CpG en el promotor de ALMS1 que contenía
cuatro secuencias de unión a factores de transcripción, incluyendo el factor E2F1. Tras diseñar y
optimizar un ensayo para analizar el estatus de metilación de ALMS1, no se detectó amplificación
metilación-específica en ningún paciente. En cuanto al estudio de la ruta TGF-beta/BMP, tras validar el
modelo celular de silenciamiento y realizar los ensayos de estimulación, se observó una reducción en
los niveles de las tres proteínas analizadas, suprimiéndose por lo tanto la ruta.
4 Conclusiones
Se ha realizado el primer estudio que analiza el papel de la metilación en ALMS, y aunque
aparentemente este mecanismo no estaría implicado en la regulación transcripcional de ALMS1, se
propone su regulación por parte del factor E2F1, siendo necesaria confirmación experimental. Por otra
parte, se ha comprobado como el silenciamiento de ALMS1 no afecta a la formación/estructura ciliar,
pero sí suprime la ruta TGF-beta/BMP, tanto la vía canónica como la no canónica. Esto indicaría que la
alteración de este balance en pacientes ALMS podría ser un nuevo mecanismo responsable del
desarrollo de alguno de los fenotipos asociados, como la cardiomiopatía característica.
Financiación: Instituto de Salud Carlos III (PI12/01853 y PI15/00049). MAS y SCS: investigadoras FPU
(MECD).
C0528 CARACTERIZACIÓN FUNCIONAL DE MUTACIONES EN EL GEN POU4F3
ASOCIADAS A SORDERA NO SINDRÓMICA AUTOSOMICA DOMINANTE DFNA15 EN
POBLACIÓN ESPAÑOLA
1 2 2 2 3
Luciana Santos Serrao De Castro , Matías Morín , Fernando Mayo , Lucía Borreguero , Irene Valenzuela , Ignacio del
2 2
Castillo , Miguel Angel Moreno Pelayo
1
Hospital Universitario Ramón y Cajal Madrid (Madrid) España
2
Servicio de Genética-Instituto Ramón y Cajal de Investigación Sanitaria (IRYCIS),CIBERER U728 (Madrid) España
3
Unitat de Genética Clínica, Hospital Valle Hebron (Barcelona) España
1 Objetivos
Obtener la prevalencia de la hipoacusia DFNA15 en población española secundaria a mutaciones en
POU4F3.
Cribado de mutaciones en POU4F3 por dHPLC de 80 probandos
afectados por sordera no sindromica autosómica dominante (SNSAD) y posterior
comprobación mediante secuenciación Sanger. Genotipado mediante plataforma Illumina con
6090 SNPs y análisis de ligamiento (easyLINKAGE Plus y FastLink v4) en un caso familiar de
SNSAD. El impacto de las distintas mutaciones sobre la función de la proteína se evaluó mediante
estudios de inmunofluorescencia en cultivos de células
NIH3T3 transfectadas transitoriamente con el Vector pcDNA3-HA/DEST. Para el análisis in
silico se utilizó el programa de predicción NucPred.
3 Resultados
Hemos identificado 6 mutaciones en POU4F3: p.R230S, p.W251Cfs*65,p.W251X, p.F293L, p.F322L y
p.G225X. Los estudios en NIH3T3 revelan que mientrasla forma POU4F3 silvestre se localiza
exclusivamente en el núcleo celular, las demás proteínas mutantes exhiben cuatro patrones de
distribución distintos: 1) los mutantes tipo missense se localizan en núcleo y citoplasma; 2) el mutante
frameshift exhibe un patrón como la forma silvestre, probablemente como consecuencia de una señal
“denovo” de localización nuclear presente en la cola de aminoácidos aberrante. 3) en el
cambio de tipo nonsense p.W251X se observa la formación de agregados citoplasmaticos;
y 4) en el mutante p.G225X se observa una dispersión uniforme en el citoplasma. Los
análisis de mRNA y Western blot mostraron que mientras que los niveles de transcripción de los
mutantes son similares al observado en el tipo salvaje, los niveles de proteína POU4F3 se redujeron en
todos los mutantes, indicando que la síntesis o la estabilidad de la proteína está alterada.
4 Conclusiones
Este primer estudio revela que DFNA15 representa el 7% de los casosde
SNSAD en población española, siendo una de las formas más prevalentes de sordera en
España.
C0542 GENES IMPLICADOS EN OBESIDAD SEVERA DE INICIO PRECOZ REVELADOS
POR VARIANTES EN EL NÚMERO DE COPIAS
1 1 2 2 1
Francesc Bou De Pieri , Clara Serra-Juhé , Gabriel Á. Martos-Moreno , Jesús Argente , Luis A. Pérez-Jurado
1
Unidad de Genetica, Universitat Pompeu Fabra Barcelona (Barcelona) España
2
Departamentos de Pediatría y Endocrinología Pediátrica, Hospital Infantil Universitario Niño Jesús, Universidad
1 Objetivos
La obesidad es una enfermedad multifactorial con una alta heredabilidad (50-75%), seguramente
superior en los casos severos y de inicio precoz. A pesar de que se han descrito formas monogénicas
raras y varios genes y regiones de susceptibilidad, las causas genéticas subyacentes a esta
enfermedad siguen ampliamente desconocidas. Las variantes en el número de copias (CNVs) podrían
ser relevantes a la hora de modificar la susceptibilidad a presentar obesidad.
Hemos buscado CNVs raras (>100kb en tamaño, alterando genes y presentes es <1/2000 controles
poblacionales) en 478 niños españoles con obesidad severa de inicio precoz no sindrómica (OSIP:
índice de masa corporal >3 desviaciones estándar por encima de la media a <3 años de edad) usando
cariotipos moleculares (Illumina).
3 Resultados
Hemos detectado una carga superior de CNVs en los casos de OSIP con respeto a 500 controles
(OR=1.63, p-valor=0.0001). Las CNVs detectadas de trastornos genómicos recurrentes incluyen 3
deleciones (15q13.3, 16p11.2 y 16p12) y 6 duplicaciones (15q11-proximal, 22q11-distal y 4 en
16p13.3). La duplicación en 10q26.3 estaba presente en 5% de casos frente a 3.6% en controles, un
aumento no significativo. Referente a CNVs en varios pacientes afectando una misma región, hemos
detectado cuatro CNVs de pérdida de función en receptores del glutamato, incluyendo tres
reordenamientos afectando GRM7 y una duplicación parcial de GRIK1; y varias CNVs solapantes en la
región 20p12.1 alrededor de TASP1. Entre las CNVs probablemente patogénicas hay una deleción en
KCNQ1 afectando el centro regulador de la impronta del síndrome de Beckwith-Wiedemann, una
duplicación en el gen TMEM18 y un caso familiar con una duplicación completa de NPY.
4 Conclusiones
Nuestros datos revelan una carga superior de CNVs raras en distintos genes en pacientes con OSIP
comparado con controles. CNVs con efectos altamente penetrantes para obesidad familiar se detectan
en un 11.9% de los casos con OSIP.
C0543 CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE 62 PACIENTES CON REORGANIZACIONES
GENÓMICAS EN LA REGIÓN 22Q11.22
Neus Castells Sarret; Alberto Plaja Rustein; Anna Cueto González; Teresa Vendrell Bayona; Fermina López Grondona;
Gabriel Sanjuan Garriga; Encarnación Oliveros González; M. Mar Borregán Prats; Laia Martínez Ribot;
Área De Genética Clínica Y Molecular (Barcelona) España
1 Objetivos
La región cromosómica 22q11.2 es muy inestable y susceptible a mutaciones debido a la presencia de
duplicaciones segmentarias (LCRs). La deleción 22q11.2 es causa del síndrome
DiGeorge/Velocardiofacial, uno de los trastornos genéticos más comunes (1 de 4000 rn).
El objetivo de este estudio es conocer las frecuencias con que los diversos LCRs (LCR22A-H) están
implicados en las anomalías de la región 22q11.2.
.
Presentamos la definición molecular precisa de 62 pacientes con reorganizaciones en la región 22q11,
fruto del estudio de más de 2000 pacientes con discapacidad intelectual, malformaciones y trastornos
del espectro autista. Los pacientes han sido valorados por dismorfólogos experimentados y analizados
mediante la técnica de array CGH (utilizado las plataformas Agilent G4827A CGH ISCA v2, 8x60K y
ogt 020045 CytoSure Constitutional v3 array 8x60K)
3 Resultados
Se han detectado cuatro duplicaciones de la región Cat-eye: dos 22centr-LCR22A, una 22centr-
LCR22B y una con puntos de rotura atípicos 22centr-<LCR22A. En la región velocardiofacial/diGeorge
y región 22q11 distal se han diagnosticado un total de 38 deleciones y dos duplicaciones del tipo más
frecuente (LCR22A-D), dos deleciones LCR22A-B, una deleción LCR22A-C, tres deleciones y dos
duplicaciónes LCR22B-D, dos deleciones LCR22C-E, una duplicación LCR22C-D, dos deleciones
LCR22D-E, una duplicación LCR22E-F, una duplicación LCR22E-G, una duplicación LCR22F-G, una
duplicación LCR22F-H y una gran duplicación LCR22B->H.
4 Conclusiones
• Las reorganizaciones de la región 22q11.2 son frecuentes y están principalmente mediadas por
los LCRs LCR22A y LCR22D
• Hemos hallado un mayor número de deleciones proximales (LCR22A-D) y un mayor
número de duplicaciones distales (LCR22D-H)
Medicina Personalizada - Predictiva y farmacogenómica
C0013 FRECUENCIA DE METABOLIZADORES LENTOS (CYP2D6) EN UNA MUESTRA DE

PACIENTES CUBANOS CON ESQUIZOFRENIA.
Hilda Roblejo Balbuena
Centro Nacional de Genética Médica Playa (La Habana) Cuba
1 Objetivos
El citocromo P450 CYP2D6 es una de las enzimas más importantes en el metabolismo de un gran
número de fármacos de uso común, entre estos los neurolépticos, y participa además en el metabolismo
de sustancias endobióticas. Se ha reportado que esta enzima participa en la biotransformación de varios
neurotransmisores funcionalmente involucrados en los trastornos psiquiátricos como la esquizofrenia,
entre estos la dopamina y la serotonina. Algunos estudios de asociación entre el citocromo CYP2D6 y la
esquizofrenia han mostrado una baja frecuencia de enfermos metabolizadores lentos, en comparación
con las frecuencias reportadas en las poblaciones de origen. Por lo tanto, el propósito de este estudio fue
investigar la frecuencia de los metabolizadores lentos de CYP2D6 en una muestra de pacientes
cubanos con esquizofrenia para determinar si existen diferencias entre las frecuencias de los
pacientes esquizofrénicos con voluntarios sanos.
Los alelos CYP2D6 * 3, * 4, * 5, * 6 se analizaron en 212 pacientes esquizofrénicos y en 326 voluntarios
sanos cubanos no relacionados. El diagnóstico de los casos se estableció mediante el DSM-IV. Previo
consentimiento informado se obtuvieron las muestras de sangre de cada sujeto. El grupo control fue en su
mayoría estudiantes de Medicina y Enfermería y personal de la Facultad de Medicina 'Calixto García', y
donantes de sangre. Para la determinación del genotipo CYP2D6, se analizaron las variantes alélicas
mediante PCR-RT (Applied Biosystems, CA, EUA).
3 Resultados
No se encontró una baja frecuencia de metabolizadores lentos en los pacientes esquizofrénicos con
relación a los controles (1,88 vs 1,84 en sujetos sanos). Todos los polimorfismos analizados se
encontraron en equilibrio de Hardy-Weinberg en los casos y los controles.
4 Conclusiones
El genotipo CYP2D6 metabolizador lento no es un factor determinante de la susceptibilidad a la
esquizofrenia en los pacientes cubanos.
C0096 USO DEL EDITADO GÉNICO MEDIADO POR CRISPR/CAS EN DISTROFIAS
MUSCULARES CONGÉNITAS ASOCIADAS A LMNA
1 2 1 3
Fernando de Miguel Pedrero , Carolina Epifano García , Borja Vilaplana Martí , Ignacio Pérez de Castro Insua
1
Instituto de Salud Carlos III (Madrid) España
2
Fundación Andrés Marcio (Madrid) España
3
1 Objetivos
Las distrofias musculares congénitas asociadas a LMNA (L-CMD) son enfermedades genéticas raras de
aparición en la infancia o juventud que se caracterizan por debilitamiento muscular progresivo, anomalías
en el sistema de conducción aurículo-ventricular, fibrosis del tejido cardiaco e insuficiencia respiratoria. Se
producen por mutaciones en el gen LMNA que codifica las proteínas lámina A/C que forman parte de la
lámina nuclear de las células eucariotas.
Uno de los propósitos fundamentales de nuestro grupo es el de avanzar en el tratamiento de L-CMD a
través de nuevas aproximaciones terapéuticas basadas en editado génico.
Nuestro objetivo ha sido llevar a cabo una prueba de concepto sobre la eficacia del uso de editado
genético mediado por CRISPR/Cas en el gen LMNA. Para ello hemos diseñado dos proyectos: uno
dirigido a la generación de un mutante R249W en una línea de mioblastos de ratón y otro dirigido a
revertir la misma mutación en mioblastos procedentes de un paciente de L-CMD.
3 Resultados
El estudio y caracterización de las líneas celulares generadas mediante la acción de CRISPR/Cas en el
locus LMNA nos han permitido: (i) seleccionar las mejores guías de RNA para el editado en ratón y
humano; (ii) constatar la baja frecuencia de eventos de editado génico mediados por recombinación
homóloga; (iii) generar una colección de nuevas líneas de mioblastos humanos y murinos de utilidad para
el estudio de las distorfias musculares tipo L-CMD.
4 Conclusiones
Nuestros resultados permiten corroborar la hipótesis de partida de que esta tecnología tiene un alto
potencial terapéutico para el tratamiento de las distrofias musculares tipo L-CMD.
C0106 ESTUDIO FARMACOGENÉTICO DE LA RESPUESTA A LARGO PLAZO DEL
METILFENIDATO EN EL TRASTORNO DEL DÉFICIT DE ATENCIÓN E HIPERACTIVIDAD
EN NIÑOS DE LA POBLACIÓN ESPAÑOLA.
1 1 1 1 1
Clara Isabel Gomez Sanchez , Juan J Carballo , Rosa Riveiro-Alvarez , Victor Soto-Insuga , Maria Rodrigo , Ignacio
1 2 3 1
Mahillo-Fernandez , Francisco Abad-Santos , Rafael Dal-Ré , Carmen Ayuso
1
Hospital Fundación Jiménez Díaz Madrid (Madrid) España
2
Hospital universitario de la princesa (Madrid) España
3
Universidad Autónoma de Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
El trastorno por déficit de atención e hiperactividad (TDAH) es una enfermedad altamente prevalente
cuya sintomatología tiene un importante impacto en la vida diaria de los afectos. El metilfenidato
(MPH) es el fármaco estimulante más utilizado en el tratamiento del TDAH, aunque hay una proporción
importante de pacientes que no responden . El objetivo de este trabajo es realizar un estudio
observacional prospectivo para evaluar el papel de las variantes genéticas de riesgo en la eficacia al
tratamiento con MPH.
Se estudiaron un total de 208 pacientes ente 6 y 18 años. Las medidas de eficacia al tratamiento con
MPH se evaluaron como datos continuos de la escala de evaluación clínica global de severidad (ICG-S)
y la escala de evaluación clínica global (CGAS). Se recogieron datos correspondientes de esas escalas
en la visita basal, a los 3, 6 y 12 meses. Se genotiparon 32 polimorfismos localizados en 16 genes
previamente asociados con TDAH. El efecto de esos polimorfismos en la respuesta al tratamiento se
evaluó mediante modelos lineales de efectos mixtos.
3 Resultados
Al considerar la escala ICG-S se encontraron efectos significativos en las siguientes variantes: SLC6A3
rs2550948, DRD4 VNTR promotor, SNAP25 rs3746544 y LPHN3 rs1868790. Además, se observó una
interacción con la evolución en el tiempo de los valores de la escala ICG-S y la variante SLC6A3 intrón 8
VNTR. Aunque no se obtuvo ninguna asociación significativa entre la escala CGAS y las variantes
polimórficas, se encontró una interacción entre el tiempo y la variante DRD2 rs1800497.
4 Conclusiones
Reportamos efectos moderados en la respuesta al tratamiento de polimorfismos presentes en los
siguientes genes: SLC6A3, DRD4, SNAP25 y LPHN3, apoyando resultados previos. Además, se
observaron interacciones entre la evolución temporal en la respuesta y los genotipos de SLC6A3 y
DRD2, no descritas previamente.
C0115 CRISPR/CAS Y CÁNCER: EL CASO DE LOS TUMORES OVÁRICOS DE CÉLULAS
DE LA GRANULOSA
1 2 1 1 1
Paloma Navarro Alcaraz , Borja Vilaplana Martí , Juan F Rodríguez , Alejandro Herrador , Jesús García-Donas ,
2
Ignacio Pérez de Castro Insua
1
Centro integral Oncológico Clara Campal (Madrid) España
2
Instituto de Salud Carlos III (Madrid) España
1 Objetivos
El cáncer de la granulosa ovárica es una enfermedad rara (menos del 5% de los tumores de ovario). Se
caracteriza por presentar, en más del 95% de los casos, una mutación puntual en el gen FOXL2
(402C>G). Dicha mutación es exclusiva y patognomónica, lo que le convierte en un modelo único de
cáncer con origen “monomutacional”. Actualmente este tipo de tumores carecen de una terapia eficaz en
los estadios avanzados y presentan un desenlace fatal. Por otra parte, aún está por determinar la relación
causal de la mutación 402C>G en el desarrollo y la progresión tumoral. Por lo tanto, existen grandes
vacíos de conocimiento y terapia en el campo de los tumores de granulosa ovárica.
Nuestra hipótesis de partida es que las técnicas de editado genético permitirán conocer mejor esta
enfermedad y podrán constituirse en potentes herramientas terapéuticas para este tipo de tumores raros.
Nuestro objetivo fundamental es el de usar la actividad CRISPR/Cas para revertir el fenotipo maligno
asociado a mutaciones en FOXL2.
Hemos usado la línea celular KGN, la única disponible con la mutación FOXL2 (402C>G), para valorar las
consecuencias del editado génico mediado por CRISPR/Cas. Para ello hemos generado clones derivados
de células en las que se expresaron guías de RNA específicas para la mutación junto con la
endonucleasa Cas9.
3 Resultados
Nuestros resultados se resumen en: (i) hemos generado una colección de líneas celulares que pemitirá
estudiar en detalle el papel de FOXL2 en la tumorogénesis asociada con el cáncer de la granulosa ovárica
y (ii) las guías específicas generadas muestran una alta selectividad para el alelo mutado.
4 Conclusiones
Este trabajo permite confirmar la validez de nuestra hipótesis sobre el potencial del editado genético en el
estudio y tratamiento del cáncer de célula de granulosa ovárica.
C0133 FARMACOGENÉTICA EN ASMA INFANTIL: ESTUDIO PILOTO
1 2 2 2 2
Zoraida Verde Rello , Catalina Santiago , Félix Gómez Gallego , Elena Santana Sosa , Jose Angel García , Andrea
2 3 3 2
Cárdenas , Verónica Sanz , Jose Ramón Villa , Margarita Pérez
1
UEM Villaviciosa de Odón (Madrid) España
2
UEM (Madrid) España
3
Hospital Niño Jesús (Madrid) España
1 Objetivos
El Asma es una enfermedad crónica muy común en niños y adolescentes. Las tres principales
farmacoterapias de mantenimiento son: glucocorticoesteroides, moduladores de leucotrienos y β2-
agonistas de acción prolongada, no obstante el tratamiento farmacológico no siempre obtiene los
resultados deseados sobre el control de la enfermedad. Tanto un control de factores ambientales como el
empleo de fármacos adecuados atendiendo al perfil farmacogenético podrían mejorar la calidad de vida
de estos pacientes basándose en tratamientos personalizados.
Durante los meses de mayo a julio de 2016 se desarrolló un estudio longitudinal reclutando 43 niños y
adolescentes asmáticos diagnosticados según criterios de la Guía GEMA 4.0 de ambos sexos entre 7 y
17 años. Se recogieron datos antropométricos, espirométricos y relativos al tratamiento pautado para el
control del asma. Asimismo se recogió una muestra de células bucales en tarjetas FTA para el análisis
genético de 4 SNPs en la región codificante del gen ADRB2 Arg16Gly (A46G), Gln27Glu (C79G),
Thr164Ile (C491T) y Arg19Cys (T-47C).
3 Resultados
Se estudiaron 43 niños con asma controlado de forma estable (40 niños y 13 niñas) con una media de
edad 10,9 años (SD=2,8). El 14,3%, 38,1% y 47,6% de los pacientes tenían pautada una carga de
tratamiento baja, media y alta, respectivamente. El haplotipo ADRB2 19Arg16Gly27Glu asociado con una
peor respuesta al tratamiento se encontró en el 18,2% de los niños. El porcentaje de pacientes portadores
del haplotipo riesgo en función de la distribución de carga de tratamiento fue de 0%, 12,5% y 30%
(p=0.182). Ningún paciente pautado con carga baja de tratamiento portaba el haplotipo de riesgo.
4 Conclusiones
A pesar de no obtener resultados estadísticamente significativos, nuestros datos preliminares apoyan la
hipótesis por la cual el análisis farmacogenético de ADRB2 previo a la pauta de tratamiento podría
beneficiar el control de la enfermedad desde una forma más segura desde el inicio del tratamiento.
C0148 APLICACIÓN DE UN MODELO DE ANÁLISIS FARMACOGENÉTICO EN LA
PRÁCTICA CLÍNICA. A PROPÓSITO DE UN CASO.
1 2 1 3 3
Maria Isidoro García , Mª Belen Garcia Berrocal , Almudena Sanchez Martín , Francisco Sans , Cristina Blanco ,
3 3
Carlos Llanes-Alvarez , Manuel Franco
1
Hospital Universitario De Salamanca (Salamanca) España
2
Complejo Asistencial Universitario de Salamanca Salamanca (Salamanca) España
3
Hospital Virgen De La Concha (Zamora) España
1 Objetivos
Entre los factores que influyen en la respuesta al tratamiento destacan los factores genéticos. Nuestro
grupo ha desarrollado un modelo farmacogenético para el estudio de la respuesta farmacológica aplicado
con éxito en más de 200 pacientes. En este caso presentamos su aplicación a un paciente psiquiátrico.
El modelo consta de 5 fases: Fase inicial, el facultativo recoge de forma detallada información
epidemiológica y terapéutica del paciente. Fase de análisis teórico de las interacciones medicamentosas
y de las vías de metabolización de los fármacos. Fase de Genotipado, se seleccionan y analizan
variantes génicas de los genes implicados. Fase de integración de la información farmacogenética y
clínica para el ajuste terapéutico. Fase de valoración de la respuesta clínica.
En este caso, se ha aplicado a un paciente con trastorno bipolar que acumula 18 ingresos hospitalarios en
los últimos años y estancia hospitalaria casi completa en el último trimestre, debidos a múltiples efectos
adversos y resistencia al tratamiento. Tras el análisis teórico se realizó al genotipado de CYP2B6,
CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6, CYP3A4, CYP3A5 y MDR1. Tras extraer el DNA (MagNAPure Compact,
Roche Diagnostics), el genotipado se realizó mediante Microarrays (Infiniti, Autogenomics) y PCR en
tiempo real (LightCycler 2.0 y 480, Roche Diagnostics).
3 Resultados
El estudio farmacogenético mostró una disminución de la expresión de MDR1, CYP2B6, CYP2C9 y
CYP3A5 y se procedió al ajuste terapéutico. Se observó una ostensible mejoría clínica con disminución de
los efectos adversos. En la actualidad el paciente se encuentra preparando oposiciones.
4 Conclusiones
La aplicación de este modelo farmacogenético permite un ajuste terapéutico que mejora la evolución
clínica de los pacientes, aumenta la seguridad al disminuir los efectos adversos e incrementa el ahorro al
reducir el consumo de recursos. Este modelo está especialmente indicado en los pacientes sometidos a
politerapia que presenten resistencia al tratamiento y/o efectos adversos.
C0167 MEJORA EN LA DETERMINACIÓN DE MUTACIONES DE EGFR EN CÁNCER DE
PULMÓN UTILIZANDO TÉCNICAS DE SECUENCIACIÓN DE NUEVA GENERACIÓN
1 1 1 1
Verónica González Albert , Enrique Seda Garcia , Daniel Pérez Gil , Sebastián Blesa Luján , Cristina Mongort
2 2 3 3 4
Sanchis , Amparo Compañ Quilis , Paloma Martín Martorell , Amelia Insa Mollá , Ana Cuesta Peredo , Arturo Carratalá
4 5 1
Calvo , María del Rosario Abellán Sánchez , Felipe Javier Chaves Martínez
1
Unidad de Genotipado y Diagnóstico Genético, Fundación de Investigación del Hospital Clínico Universitario de
Valencia – INCLIVA. (Valencia) España
2
Departamento de Anatomía Patológica, Hospital Clínico Universitario de Valencia. (Valencia) España
3
Departamento de Hematología y Oncología Médica, Hospital Clínico Universitario de Valencia. (Valencia) España
4
Departamento de Química Clínica y Patología Molecular, Hospital Clínico Universitario de Valencia. (Valencia) España
5
INCLIVA Instituto de Investigación Sanitaria Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
En el cáncer de pulmón no microcítico (CPNM), la determinación de mutaciones en EGFR permite la
identificación de pacientes respondedores a fármacos inhibidores de su actividad tirosina cinasa. Pese a
su importancia clínica, no existe un estándar que defina cuál es el método óptimo de determinación. En el
presente estudio comparamos los resultados obtenidos en la detección de mutaciones en EGFR con una
técnica de PCR cuantitativa alelo-específica comercial (Cobas) y con un panel NGS comercializado por
Sequencing Multiplex SL (Seqplexing).
Entre julio de 2013 y mayo de 2016, se analizaron 522 muestras de biopsia de tejido tumoral parafinado
de pacientes con CPNM. El panel de Seqplexing, diseñado en nuestro laboratorio, está optimizado para la
detección de mutaciones en los exones 18, 19, 20 y 21 del gen EGFR utilizando la plataforma de NGS-
454-Junior de Roche. El kit Cobas EGFR Mutation Test (Roche) analiza únicamente mutaciones
específicas.
3 Resultados
Del total de muestras, resultaron no analizables un 5,98% y un 3,47% para Cobas y Seqplexing,
respectivamente. Teniendo en cuenta sólo las mutaciones detectadas por Cobas, la concordancia
observada y esperada entre ambas técnicas fue del 92,7% y 63,5%, respectivamente (Kappa=0,80;
IC95%=0,74-0,86). Además, con el panel Seqplexing se detectaron 15 mutaciones somáticas no incluidas
en Cobas, pero sí descritas en la base de datos COSMIC. Entre ellas, las mutaciones Gly696Glu,
Pro699Leu, Ala702Ser, Thr725Met y Leu747Ser, que se han descrito asociadas a sensibilidad/resistencia
al tratamiento, lo que complementó el abordaje terapéutico de 7 pacientes.
4 Conclusiones
La comparación de ambas técnicas obtuvo una buena concordancia. Por tanto, el panel Seqplexing,
además de ser una metodología útil para el análisis de muestras clínicas, permite la detección de todas
las mutaciones somáticas presentes en la región tirosina cinasa de EGFR, aportando mayor información y
una mejor elección terapéutica para estos pacientes.
C0188 POLIMORFISMOS EN GENES IMPLICADOS EN EL TRANSPORTE DE
FLUOROPIRIMIDINAS Y RIESGO DE TOXICIDAD SEVERA A 5-FLUOROURACILO EN
CÁNCER COLORRECTAL.
1 1 1 2 2 1
Xandra García González , Marta Pellicer , Mª Isabel García , Luis Robles , Cristina Grávalos , Pilar García Alfonso ,
3 3 4 1 1 1
Vanessa Pachón , Federico Longo , Virginia Martinez , Carolina Blanco , María Sanjurjo , Luis Andrés López
1
H.G.U. Gregorio Marañón. Instituto de Investigación Sanitaria Gregorio Marañón Madrid (Madrid) España
2
H.U. 12 de Octubre. Instituto de Investigación Sanitaria 12 de octubre (Madrid) España
3
H.U. Ramón y Cajal. Instituto Ramón y Cajal de Investigación Sanitaria (Madrid) España
4
H.U. La Paz. Instituto de Investigación Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
1 Objetivos
Las reacciones adversas a fluoropirimidinas son un grave problema en el manejo del tratamiento del
cáncer colorrectal. Además del impacto sobre la calidad de vida de los pacientes, a menudo limitan la
adecuada y completa administración del tratamiento, pudiendo comprometer su efectividad. El objetivo de
nuestro estudio fue evaluar la asociación entre diferentes polimorfismos en genes implicados en el
transporte de flouropirimidinas y la aparición de efectos adversos al 5-fluorouracilo (5-FU) en el
tratamiento del cáncer colorrectal.
Estudio prospectivo/retrospectivo y multicéntrico, en pacientes con cáncer colorrectal de cualquier estadio
que recibieron tratamiento con esquemas quimioterápicos basados en 5-FU en alguna de las líneas de
tratamiento. Se analizaron nueve polimorfismos en cuatrogenes que codifican proteínas trasportadoras de
fármacos (SLC22A7, ABCB1, ABCC5 Y ABCG2) y se evaluó su asociación con la aparición de reacciones
adversas severas (grado≥3) y con la necesidad de efectuar reducciones de dosis, retraso de ciclos o
retirada de fármacos por toxicidad.
3 Resultados
Se incluyeron 248 pacientes procedentes de cuatro hospitales madrileños. El 81,5 % de los pacientes
sufrieron algún efecto severo o necesitaron de una reducción de dosis, retraso en la administración o
retirada del fármaco debida a toxicidad. SLC22A7 rs1574430 se asoció con un mayor riesgo de náuseas y
vómitos (OR:5,75 IC95%: 1,49-22,24) y además con una mayor probabilidad de reducción de dosis
(OR:2,87 IC95%: 1,29-6,42). SLC22A7 rs2270860 también se asoció con reducción de dosis (OR: 4,13
IC95%:1,16-14,71), anorexia (OR: 8,16 IC95% 1,13-67,05) y astenia severas (OR:7,27 IC95% 2,48-
21,35). SLC22A7 rs4149178 y ABCG2 rs2231142 también se relacionaron con astenia (OR:14,89 IC95%
2,34-94,90 y OR:3,72 IC95% 1,44-9,61 respectivamente).
4 Conclusiones
Variantes genéticas en los transportadores de fluoropirimidinas SLC22A7 y ABCG2 se asocian con la
aparición de reacciones adversas severas y reducciones de dosis durante el tratamiento de tumores
colorrectales con 5FU y podrían ser útiles en tests predictivos de toxicidad a fluoropirimidinas.
C0238 ESTUDIO GWAS DE LA RESPUESTA AL TRATAMIENTO FARMACOLÓGICO EN
PACIENTES TEA
1 2 3 3 3 3
MJ Arranz Calderon , Isabel Rueda , Silvina Guijarro , Anna Gonzalez , Aitana Bigorra , Noemi Balmanya , Enric
3 3
Duran , Amaia Hervas
1
2
3
Hospital Universitario Mutua Terrasssa (Barcelona) España
1 Objetivos
OBJETIVOS: El tratamiento farmacológico de pacientes con trastornos del espectro autista (TEA) resulta
inefectivo en 30-40% de los casos, y conlleva un alto nivel de efectos secundarios severos (incremento de
peso, irritación, agresividad, ausentismo y otros). La falta de respuesta al tratamiento farmacológico incide
negativamente en las probabilidades de mejoría del paciente, mientras que la presencia de efectos
secundarios incrementa notablemente el abandono del tratamiento. El objetivo de este estudio es
investigar marcadores genéticos que permitan identificar aquellos pacientes de TEA que sean
susceptibles de desarrollar efectos secundarios y/o responder negativamente al tratamiento
farmacológico, en los que se aplicarían tratamientos preventivos o alternativos.
METODOLOGIA: Se llevó a cabo un estudio GWAS (utilizando el array Psychip de Illumina) en una
muestra de N= 135 pacientes TEA (88% niños), tratados con diversos fármacos (103 recibieron
metilfenidato, 39 recibieron antipsicóticos, antidepresivos, estabilizadores o ansiolíticos).
3 Resultados
RESULTADOS: Se detectaron varias asociaciones con respuesta al tratamiento farmacológico,
incluyendo asociaciones con variantes en genes anteriormente involucrados en discapacidad intelectual
-5 -4 -4 -5
(SETBP1, p=3x10 ; TUSC, p=1x10 ), autismo (ROBO2, p=1x10 ), esquizofrenia (RYR3, p=3x10 ),
-4 -
respuesta al tratamiento con antipsicóticos (ST6GAL2, p=1x10 ) y síndrome metabólico (ADRB3, p=3x10
4
) entre otros. También se detectaron asociaciones con los efectos secundarios asociados al tratamiento,
-6
destacando la asociación con variantes genéticas en GRIP1 (p=3x10 ) un gen anteriormente asociado
con ideación suicida en pacientes tratados con antidepresivos.
4 Conclusiones
CONCLUSIONES: De confirmarse, estas asociaciones genéticas permitirían determinar la probabilidad de
respuesta al tratamiento farmacológico de pacientes TEA e identificar a aquellos susceptibles de sufrir
efectos secundarios severos.
C0241 FRECUENCIAS DE POLIMORFISMOS RELACIONADOS CON QUIMIOTERAPIA
DIFERENTES A LAS ESPERADAS EN NIÑOS CAUCÁSICOS CON NEUROBLASTOMA.
1 2 3 3 3
María José Herrero Cervera , Carolina González Navasa , Pablo Berlanga , Andrea Urtasun , Pablo Gargallo Herrero ,
2 4 4 3 3 5
Luis Sendra , Juan Eduardo Megías , Virginia Bosó , Yania Yáñez , Vanessa Segura , David Hervás , Miguel Ángel
6 3 3 7
Sanz , Adela Cañete , Victoria Castel , Salvador F. Aliño
1
Farmacogenética. IIS La Fe, Hospital La Fe, Torre, labo 4.01 Valencia (Valencia) España
2
Grupo de Farmacogenética, IIS La Fe- Hospital La Fe, Valencia (Valencia) España
3
Unidad de Oncología Pediátrica Hospital La Fe Grupo de Investigación Clínica y Traslacional en Cáncer. IIS La Fe-
Hospital La Fe (Valencia) España
4
Grupo de Farmacogenética, IIS La Fe- Hospital La Fe/Servicio de Farmacia, Hospital La Fe (Valencia) España
5
Unidad de Bioestadística, IIS La Fe (Valencia) España
6
Grupo de Investigación en Hematología y Hemoterapia, IIS La Fe- Hospital La Fe (Valencia) España
7
Grupo de Farmacogenética IIS La Fe- Hospital La Fe/Unidad de Farmacología Clínica, Hospital La Fe/Dpto.
Farmacología, Fac. Medicina, Universidad de Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
En un estudio para la validación de la utilidad clínica de un conjunto de polimorfismos de tipo SNP (Single
Nucleotide Polymorphisms) en la eficacia y toxicidad del tratamiento quimioterápico en Neuroblastoma, se
ha realizado un análisis como objetivo inicial, donde se han comparado las frecuencias observadas de
cada una de las variantes con respecto a las frecuencias descritas para población caucásica.
Se diseñó un panel de SNPs en relación a la quimioterapia del Neuroblastoma, principalmente de Alto
Riesgo, en una serie retrospectiva de 106 pacientes de la Unidad de Oncología Pediátrica. Los fármacos
a estudio fueron Carboplatino, Etopósido, Vincristina, Doxorrubicina, Ciclofosfamida, Topotecán,
Irinotecán, dando lugar a un panel de 97 SNPs que fueron analizados por triplicado sobre el ADN
obtenido a partir de muestras de sangre periférica de los pacientes. El estudio se realizó mediante
MassArray, Sequenom (Agena Bioscience). Se compararon las frecuencias de las variantes obtenidas en
cada SNP con las esperadas según las bases de datos públicas (NCBI dbSNP, HapMap CEU) mediante
test “Chi-cuadrado” teniendo en cuenta el número total de pacientes genotipados, tanto en nuestra
población como en los estudios de referencia, obteniendo el p-valor ajustado en función del número de
pruebas.
3 Resultados
Se han encontrado diferencias estadísticamente significativas en 20 SNPs de genes potencialmente
relevantes a nivel farmacogenético: TP53, ABCB1, SLC19A1, MTHFR, ABCB1, ABCG2, ABCC2, entre
otros.
4 Conclusiones
La diferencia hallada en frecuencia de las variantes puede estar mostrando un mayor riesgo basal de
ineficacia y/o toxicidad en los pacientes pediátricos caucásicos sometidos a quimioterapia. Estos
hallazgos habrán de ser replicados en una cohorte de individuos caucásicos no afectados por una
neoplasia, para descartar que las observaciones no estén vinculadas a una mayor prevalencia de estas
variantes asociada al proceso tumoral y poder concluir que son características propias de la población.
PIE13/00046.
C0279 BIOMARCADORES GENÉTICOS DE LA VÍA DEL VEGF COMO FACTORES
PRONÓSTICOS EN CÁNCER DE COLON ESTADIOS II Y III
Pau Riera Armengol, Anna Cristina Virgili, Juliana Salazar, Cristina Camps, María Tobeña, Ana Sebio, Elisabeth Del
Rio, David Páez
Hospital de la Santa Creu i Sant Pau Barcelona (Barcelona) España
1 Objetivos
La angiogénesis juega un papel clave en la progresión y metástasis de los tumores sólidos. Este proceso
puede estar relacionado con el riesgo de recaída en pacientes con cáncer de colon estadios II-III. El
objetivo de este estudio fue evaluar en la línea germinal la influencia de polimorfismos de genes
implicados en la vía del VEGF (vascular endothelial growth factor) en el pronóstico de dichos pacientes.
Se incluyeron 347 pacientes intervenidos de cáncer de colon estadios II y III entre 2009 y 2014 en nuestro
hospital. A partir de ADN genómico se analizaron un total de 27 polimorfismos de un solo nucleótido
(SNPs) de 12 genes implicados en el proceso de angiogénesis usando chips dinámicos en el sistema
BioMark™.
3 Resultados
Doscientos cinco pacientes fueron diagnosticados en estadio II y 142 en estadio III. Se observó recidiva
tumoral en el 16,6% de los pacientes con estadio II y en el 26,1% con estadio III. La supervivencia global
media (SG) fue de 86,0 y 68,0 meses para los pacientes con estadios II y III, respectivamente.
En el análisis univariado, 4 polimorfismos correspondientes a 3 genes se asociaron significativamente con

la SG: rs11656130 y rs2716191 (MAP2K6), rs9513070 (VEGFR1) y rs1551641 (VEGFR2). En los
estadios II los polimorfismos rs11549465 (HIF1α), rs1137282 (KRAS), rs833061 y rs1570360 (VEGFA) y
rs9513070 (VEGFR1) se asociaron significativamente con la SG. En el análisis multivariado, los pacientes
con el genotipo G/G del polimorfismo rs1137282 presentaron una menor SG (HR=0.064; p=0.007) y los
pacientes portadores del alelo G del rs9513070 se correlacionaron con una mayor SG (HR=0.265;
p=0.041).
4 Conclusiones
Este estudio muestra que polimorfismos de la vía del VEGF en línea germinal podrían ser útiles como
biomarcadores pronósticos en pacientes intervenidos de cáncer de colon estadios II-III.
C0285 INFLUENCIA DE VARIANTES GENETICAS EN MDR1 Y CYP3A4 EN LA
RESPUESTA A TRATAMIENTOS ANTIPSICOTICOS
1 1 1 2 3 1 1 1
R Catalan , A Gonzalez Rodriguez , R Penadés , B Gutierrez , J Perez Blanco , V Ruiz , M Bernardo , M Torra , MJ
4
Arranz Calderon
1
Hospital Clinic (Barcelona) España
2
Universidad Granada (Granada) España
3
Hospital Sant Pau (Barcelona) España
4
1 Objetivos
La respuesta a tratamientos antipsicóticos es insatisfactoria en un 40-50% de los pacientes tratados.
Existe evidencia de la influencia de genes de enzimas metabólicos en la variabilidad de la respuesta. En
particular, variantes genéticas en CYP2D6, CYP2C9 y CYP2C19 han sido asociadas cpm la respuesta a
tratamientos antidepresivos o con antipsicóticos de primera generación. Sin embargo, existe poca
evidencia de la influencia de polimorfismos en MDR1 y CYP3A4 en la respuesta al tratamiento con
antipsicóticos.
Se estudiaron variantes geneticas en MDR1 y CYP3A4 en una muestra de 135 pacientes con
esquizofrenia tratados con antipsicoticos durante 12 semanas. La respuesta al tratamiento se midio de
manera prospectiva utilizando las escalas PANSS y CGI.
3 Resultados
Se observaron asociaciones entre el polimorfismo CYP3A4*1B y el nivel general de respuesta (p=0.018),
con una mejora en los niveles de excitación (p=0.022), ansiedad y depresión (p=0.007) y cognitiva
(p=0.02). Además, se observó asociación entre el polimorfismo MDR1 rs1045642 y la mejora en
funcionalidad (p=0.01). No se observaron otras asociaciones significativas.
4 Conclusiones
polimorfismos en los genes CYP3A4 y MDR1 pueden influenciar la respuesta al tratamiento con fármacos
antipsicóticos.
C0304 EFECTO DE LOS POLIMORFISMOS CYP3A5 Y ABCB1 EN DONANTE Y
RECEPTOR DE TRANSPLANTE HEPÁTICO SOBRE LA FARMACOCINÉTICA DE
TACROLIMUS Y DESENLACES CLÍNICOS. ESTUDIO DE COHORTES
1 2 2 2 3 2
Luis Rojas Orellana , Luis Rojas Orellana , María José Herrero , Virgnia Bosó , David Hervás , José Luis Poveda ,
2 2
Juan Megías , Salvador F. Aliño
1
Pontifica Universidad Católica de Chile. Facultad de Medicina (Santiago) Chile
2
Unidad de Farmacogenética. Area de Farmacología Clínica.Hospital Universitari i Politecnic La Fe e Instituto de
Investigación Sanitaria La Fe valencia (valencia) España
3
Unidad de Bioestadística.Instituto de Investigación Sanitaria La Fe (Valencia) España
1 Objetivos
Los estudios que evalúan el impacto del polimorfismo de los genotipos CYP3A5 A6986G, ABCB1
C3435T, C1236T y G2677T / A sobre la farmacocinética de Tacrolimus y la incidencia de eventos clínicos
no son concluyentes. Buscamos evaluar el impacto de los polimorfismos de los genotipos ABCB1
aludidos en receptores y genotipo 6895A>G en donantes y receptores sobre la farmacocinética de
tacrolimus, rechazo agudo y nefropatía aguda y crónica en adultos receptores de trasplante hepático
Se incluyeron pacientes con seguimiento por 3 años o más. Para analizar los desenlaces agrupamos las
variantes según la capacidad de sintetizar glicoproteína P y citocromo P450 3A5. Los portadores del alelo
CYP3A5 6895A>G*1 (expresadores) se compararon con CYP3A5 6895A>G*3/*3 (no expresadores) y
pacientes con ABCB1 3435 CC/CT, ABCB1 1236 CC/CT o ABCB1 2677 GG/AG/AT/GT (expresadores)
se compararon con ABCB1 3435 TT, ABCB1 1236 TT, o ABCB1 2677 TT (no expresadores),
respectivamente. Se evaluó la asociación de los polimorfismos con la concentración plasmática/dosis de
tacrólimus (C/D) utilizando modelo de efectos mixtos lineales y se calculó odds ratio para los resultados
clínicos.
3 Resultados
Se incluyeron 77 pacientes. Los resultados mostraron una interacción significativa para CYP3A5
expresador del donante y receptor (p=0,012). Si los donantes o receptores era expresadores, C/D fue
más bajos. No se encontraron diferencias significativas para ABCB1. La incidencia de nefropatía crónica
fue mayor en CYP3A5 *1 en donantes (OR 6,1). Este efecto es mayor en los receptores con CYP3A5
expresadores. No hubo efecto sobre el riesgo de rechazo agudo y nefropatía por CYP3A5 en receptores y
ABCB1 en los donantes.
4 Conclusiones
El polimorfismo de CYP3A5 6989A>G en receptores y donantes afecta la farmacocinética de Tacrolimus
y en donantes afecta el riesgo de incidencia de nefropatía crónica. Por otro lado, el genotipo ABCB1 de
los receptores no afecta los desenlaces estudiados
C0343 LAS MUTACIONES EN MTOR, TSC1 Y TSC2 COMO PREDICTORES DE
RESPUESTA A LOS INHIBIDORES DE MTOR EN CÁNCER RENAL METASTÁTICO
1 2 3 2
Juan Maria Roldán Romero , Juan Francisco Rodríguez , Benoit Beuselinck , Jesús García-Donás , Cristina
4
Rodríguez-Antona
1
Grupo de Cáncer Endocrino Hereditario, Programa de Genética del Cáncer Humano, Centro Nacional de
Investigaciones Oncológicas (CNIO) Madrid (Madrid) España
2
Unidad de Oncología, Centro Oncológico Clara Campal; Spanish Oncology Genitourinary Group (SOGUG). (Madrid)
España
3
Department of General Medical Oncology and Laboratory for Experimental Oncology, University Hospitals Leuven,
Leuven Cancer Institute, KU Leuven (Leuven) Bélgica
4
Grupo de Cáncer Endocrino Hereditario, Programa de Genética del Cáncer Humano, Centro Nacional de
Investigaciones Oncológicas (CNIO); Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER)
(Madrid) España
1 Objetivos
El objetivo del estudio es determinar el valor predictivo de las mutaciones somáticas en MTOR, TSC1 y
TSC2 para la respuesta a los inhibidores de mTOR.
Una serie excepcional de DNA tumoral de muestras parafinadas correspondientes a 91 pacientes con
cáncer renal metastásico tratados con inhibidores de mTOR fueron reclutados por el Grupo Español de
Tumores Genitourinarios (SOGUG) y el Leuven Cancer Institute. Se diseñó un panel customizado de
secuenciación masiva (TruSeq Custom Amplicon) dirigido a las regiones codificantes de los genes MTOR,
TSC1 y TSC2 y se utilizó el MiSeq System para la secuenciación y análisis. Las mutaciones se validaron
mediante secuenciación de Sanger.
3 Resultados
La mayor parte de los casos analizados correspondieron a histología de célula clara (83%); 78%
recibieron everolimus y 22% temsirolimus; el tratamiento se administró mayoritariamente en 2º y 3º línea y
la respuesta a los inhibidores de mTOR fue: 1 respuesta completa, 12 respuestas parciales, 36
estabilizaciones de la enfermedad, 36 progresiones de la enfermedad. Resultados preliminares con 50
muestras identificaron 4 mutaciones activantes de la ruta de mTOR (MTOR p.Y1974H; MTOR
p.S2215_L2216delinsF; TSC1 p.P333HfsTer5; TSC2 p.L826M). La mutación en TSC1 se asoció a
respuesta parcial, la de TSC2 a progresión de la enfermedad y las de MTOR una a estabilización de la
enfermedad de 7 años y a un caso no evaluable. El estudio más extenso hasta la fecha (Clin Cancer Res
2016;22:2445) incluyó 79 pacientes y encontró mutaciones en el 28% de pacientes respondedores frente
al 11% de no respondedores (P=0.06).
4 Conclusiones
Las mutaciones activantes de la ruta de mTOR están sobre-representadas en pacientes respondedores,
pero la falta de concordancia completa entre respuesta y mutación indica que el estudio genético es útil
sólo para un subgrupo de pacientes. Será necesario identificar nuevos marcadores predictivos.
C0362 ESTUDIO FARMACOGENÉTICO DEL EVEROLIMUS EN PACIENTES CON
ESCLEROSIS TUBEROSA
1 2 2 2
Maria Pilar Ribate Molina , Julia Concha Mayayo , Rosa María Sanz-Carrillo , Estela Sangüesa Sanguesa , Cristina B.
2
García García
1
Universidad San Jorge. Facultad Ciencias de la Salud Villanueva de Gállego (Zaragoza) España
2
Universidad San Jorge (Zaragoza) España
1 Objetivos
La esclerosis tuberosa es una enfermedad rara causada por mutación de los genes TSC1 y TSC2,
causando una sobreactivación de la vía de señalización mTor. Su incidencia es de 1:6000. El tratamiento
es sintomatológico y el everolimus es utilizado para tratar el astrocitoma subependimario de células
gigantes y el angiomiolipoma asociados a la enfermedad. Este fármaco es un inmunosupresor de
estrecho margen terapéutico, por lo que la variabilidad interindividual, causada por la genética del
paciente, puede llevar a la aparición de efectos adversos o ineficacia. Los genes candidatos que pueden
influir en la farmacocinética y farmacodinamia del everolimus son ABCB1, CYP3A4, CYP3A5, CYP2C8 y
el PXR (o NR1I2).
El estudio se ha realizado en pacientes caucásicos que estén o hayan estado en tratamiento con
everolimus. Todos ellos firmaron un consentimento informado y se obtuvo información sobre la terapia
TM
con el fármaco. La muestra de sangre se obtuvo por punción capilar y se depositó en tarjetas FTA para
posterior extracción del DNA mediante resina Chelex-100®. El genotipado de los distintos genes se
realizó mediante PCR-RFLP.
3 Resultados
La presencia del SNP CYP3A4*1B (g.-290A>G) se relaciona con un aumento del metabolismo enzimático
y el requerimiento de una mayor dosis. El CYP3A5*3 (c.6986A>G) produce una proteína no funcional
impidiendo el metabolismo del fármaco por esta vía. El haplotipo del gen ABCB1 formado por las
variantes c.2677G>T/A, c.1236C>T y c.3435C>T se relaciona con una disminución de la expresión de la
gp-P y por tanto mayor concentración de fármaco en sangre. Las variantes del gen CYP2C8 c.269A>T,
c.399A>G y c.264C>G está relacionado con una disminución del metabolismo enzimático.
4 Conclusiones
El genotipado de los pacientes en tratamiento con everolimus es una herramienta para prever/explicar las
variaciones de dosis interindividuales y así ofrecer información relevante para mejorar el tratamiento de
los pacientes.
C0367 ENSEÑANDO, PRACTICANDO E INVESTIGANDO FARMACOGENÉTICA
1 2 2 2
Maria Pilar Ribate Molina , Julia Concha Mayayo , Estela Sangüesa Sanguesa , Cecilia Berrogaín Pascual , Cristina B.
2
García García
1
Universidad San Jorge. Facultad Ciencias de la Salud Villanueva de Gállego (Zaragoza) España
2
Universidad San Jorge (Zaragoza) España
1 Objetivos
El uso de la farmacogenética como herramienta para mejorar la eficacia y/o evitar la toxicidad de un
fármaco está limitado a tratamientos muy concretos y principalmente en la práctica hospitalaria. Pocos
farmacéuticos conocen las características de esta ciencia y las aplicaciones que pueden tener de cara a
mejorar la calidad de vida de los pacientes. El objetivo principal perseguido es la integración de su estudio
dentro del Grado en Farmacia para acercarla a los alumnos y otros profesionales.
Los alumnos de la asignatura optativa de 5º curso parten de unos conocimientos teóricos adquiridos a
través de clases magistrales y actividades de trabajo autónomo. Para afianzarlos se emplea como
enfoque pedagógico el Aprendizaje Basado en Problemas con el planteamiento de un caso clínico. Para
resolverlo se proponen entrevistas con los pacientes del caso, la selección de pruebas diagnósticas y el
planteamiento de protocolos de análisis de laboratorio. Los alumnos mediante una revisión bibliográfica
profundizan sobre los aspectos más relevantes de un estudio farmacogenético. Adicionalmente, durante
el segundo semestre, en su Trabajo Fin de Grado, pueden participar en un proyecto de investigación de
farmacogenética. Ponen a punto técnicas de biología molecular que permiten resolver casos reales
relacionados con diferencias interindividuales asociadas a un fármaco.
3 Resultados
La satisfacción de los alumnos y el carácter innovador de esta ciencia es evidente ya que algunos de ellos
en tercer ciclo dan continuidad al proyecto de investigación que comenzaron en su Trabajo Fin de Grado.
4 Conclusiones
La búsqueda del tratamiento personalizado hace de la farmacogenética un ámbito muy atractivo para
desarrollar tesis doctorales, apoyándose en las necesidades que presentan muchas asociaciones y
colectivos de pacientes. La sensibilización de los alumnos para impulsar la farmacogenética puede ser
una herramienta muy útil para su difusión y formación de otros profesionales de la salud.
C0369 POLIMORFISMOS QUE INFLUYEN EN LA FARMACOCINÉTICA,
FARMACODINAMIA Y EFECTOS ADVERSOS DE TRAZODONA EN SUJETOS SANOS
Miriam Saiz-Rodríguez, Carmen Belmonte, Nieves Derqui Fernández, Teresa Cabaleiro, Manuel Román, Dolores
Ochoa, María Talegón, María C Ovejero-Benito, Francisco Abad-Santos.
Servicio de Farmacol Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
Trazodona es un antidepresivo de segunda generación indicado para el tratamiento del trastorno
depresivo mayor y el trastorno mixto depresión-ansiedad. El objetivo del presente estudio es evaluar el
efecto de polimorfismos en enzimas metabolizadoras (CYP3A y CYP2D6) y transportadores (ABCB1) en
la farmacocinética, farmacodinamia y seguridad de trazodona en voluntarios sanos.
Treinta y seis voluntarios sanos (18 hombres y 18 mujeres) que recibieron una sola dosis oral de 100 mg
de trazodona fueron genotipados para 11 variantes genéticas en CYP3A4, CYP3A5, CYP2D6 y ABCB1,
todas analizadas por PCR en tiempo real. Las concentraciones plasmáticas de trazodona se midieron
mediante cromatografía líquida con detección espectrofotométrica de masas (LC / MS / MS). Se
recogieron los datos de presión sanguínea y ECG.
3 Resultados
No se encontró asociación entre los polimorfismos en los genes CYP3A y CYP2D6 y la farmacocinética
de trazodona. Los sujetos homocigotos T/T del polimorfismo C3435T de ABCB1 presentaron menor AUC,
T1/2 y Cmax, así como un mayor Cl/F. Trazodona tuvo un efecto reductor de la presión sanguínea,
directamente relacionado con las concentraciones de trazodona 1 hora post-dosis. Se encontró una
relación inversa entre AUC y la prolongación del QTc. No hubo asociación significativa entre los
polimorfismos en los genes estudiados y la farmacodinamia de trazodona. La incidencia de mareos y QTc
prolongado se asociaron significativamente con polimorfismos en CYP2D6 y ABCB1, respectivamente.
Aquellos sujetos con efectos adversos mostraron menores concentraciones de trazodona.
4 Conclusiones
Polimorfismos en ABCB1 influyen en los parámetros farmacocinéticos de trazodona, no así polimorfismos
en CYP3A o CYP2D6. La trazodona disminuyó la presión sanguínea y prolongó el intervalo QTc.
Polimorfismos en CYP2D6 y ABCB1 están asociados con la incidencia de efectos adversos. Aquellos
sujetos que experimentaron efectos adversos tuvieron concentraciones más bajas de trazodona, por lo
que sugerimos que algunos metabolitos pueden ser responsables de estos efectos.
C0382 VARIANTES GENÉTICAS EN NOS3, GSTM3 Y UGT1A1 SON PREDICTORAS DE
TOXICIDAD EN PACIENTES CON CÁNCER DE MAMA TRATADAS CON TAXANOS
1 2 3 2
Virginia Boso Ribelles , Ana Santaballa Bertran , Mº Jose Herrero Cervera , Juan Eduardo Megias Vericat , Joaquin
2 2 4
Montalar Salcedo , Jose Luis Poveda Andrés , Salvador F Aliño Pellicer
1
Hospital Universitari i Politécnic La Fe. Servicio de Farmacia Valencia (Valencia) España
2
Hospital Universitari i Potécnic La Fe (Valencia) España
3
4
Departamento Farmacología. Universidad de Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
Evaluar el papel predictivo de SNPs en genes implicados en la generación de especies reactivas de
oxígeno, reparación del ADN y respuesta antioxidante en la toxicidad hematológica y gastrointestinal en
pacientes con cáncer de mama (CM) tratadas con taxanos.
Se incluyeron 159 pacientes. La toxicidad se evaluó en cada ciclo (clasificación NCI CTCAE v4.0). Se
analizaron SNPs en ERCC1 (rs11615, rs3212986), ERCC2 (rs13181, rs1799793), NOS3 (rs1799983,
rs2070744), GSTM3 (rs1799735), SOD2 (rs4880) y UGT1A1 (rs4124874) (espectroscopia de masas,
MassARRAY SEQUENOM®). Se construyeron modelos predictivos (regresión logística y Elastic Net)
incluyendo: SNPs, edad, performance status, esquema quimioterápico, enfermedad metastásica
(R®v.3.1.2 (glmnet v.2-2.1)).
3 Resultados
El modelo Elastic Net para neutropenia por docetaxel (n=101) seleccionó: GSTM3 rs1799735 DEL/DEL
como factor de riesgo y NOS3 rs2070744 TT como factor protector. Mediante regresión logística se
obtuvo: NOS3 rs2070744 [16,2% TT frente a 3,2% CT/CC); OR=0,20 (0,04; 1,03), p=0,038]; GSTM3
rs1799735 [7,1% AGG.AGG/AGG.DEL frente a 66,7% DEL/DEL; OR=20,1 (IC95%=1,6-257,9)]. Ninguno
de los SNPs incluidos fue seleccionado como predictivo de neutropenia por paclitaxel (n=59).
EL mismo SNP en UGT1A1 (rs4124874) fue predictivo de mucositis en ambos grupos: docetaxel: 6,5%
AA/AC frente a 26,1% CC [OR=5,1 (IC95%=1,4-18,6); p=0,015]; paclitaxel: 4,2% AA/AC frente a 33,3%
CC [OR=11,5 (IC95%=1,6-83,4); p=0,016]. Este SNP también fue predictor de diarrea en pacientes con
paclitaxel [6,3% AA/AC frente a 33,3% CC; OR=7,5 (IC95%=1,2-46,0); p=0,035]. Además el
modelo Elastic Net, seleccionó GSTM3 rs1799735 DEL/DEL como predictor de diarrea por docetaxel.
4 Conclusiones
SNPs relacionados con una menor capacidad de respuesta frente al estrés oxidativo son predictivos de
toxicidad en pacientes con CM tratadas con taxanos.
C0422 ESTUDIO FARMACOGENÉTICO DEL TRATAMIENTO CON ANTIPSICÓTICOS EN
PACIENTES CON ESQUIZOFRENIA
1 2 1 1
Cristina B. García García , Estela Sangüesa Sangüesa , Julia Concha Mayayo , Amaya Ruiz Pinilla , Diego Marro
2 1
Ramón , Mª Pilar Ribate Molina
1
Universidad San Jorge. Campus Universitario Villanueva de Gállego (Zaragoza) España
2
Universidad San Jorge. Campus Universitario Villanueva de Gállego. Optimal Healthcare Experience, S.L. (Zaragoza)
España
1 Objetivos
La Esquizofrenia es un trastorno mental crónico grave incluido dentro de los trastornos psicóticos. Un
factor que influye en el curso que sigue la enfermedad es la respuesta al tratamiento farmacológico
mediante antipsicóticos. Clozapina y risperidona son fármacos generalmente eficaces. Sin embargo,
algunos pacientes no responden al tratamiento siendo una de las causas la elevada variabilidad
interindividual, destacando la adherencia al tratamiento y los factores genéticos. El proyecto se centra en
asociar la respuesta al tratamiento de estos fármacos con polimorfismos de los genes CYP1A2, CYP2D6,
HTR2A, SLC6A4 y ABCB1, relacionados con la farmacocinética y farmacodinamia.
Se estudian un total de 10 pacientes diagnosticados de Esquizofrenia en tratamiento con clozapina o
risperidona. Se les realiza un seguimiento farmacoterapéutico donde se analizan problemas relacionados
con medicamentos, los hábitos, factores inespecíficos y la calidad de vida. Para el análisis genético se
TM
realiza la extracción de DNA a partir de una muestra sanguínea en tarjetas FTA y se genotipa mediante
PCR-RFLP.
3 Resultados
En la mayoría de los casos los resultados obtenidos corresponden a los esperados. El alelo *1F (−163A)
del gen CYP1A2, el alelo S del gen SLC6A4 y los alelos 452Tyr y 102C del gen HRT2A se han asociado
con los pacientes no respondedores al tratamiento con clozapina. Sin embargo, el alelo 102C se ha
relacionado con una mejor respuesta a risperidona. Los metabolizadores lentos de CYP2D6 se han
asociado con efectos adversos del tratamiento con risperidona. Los pacientes con el genotipo TT para
C3435T y TT para G2677T del gen ABCB1 (MDR1) han requerido menos dosis de clozapina y mostrado
mejor respuesta a risperidona con menor frecuencia a efectos adversos extrapiramidales.
4 Conclusiones
La farmacogenética relacionada con clozapina y risperidona puede aportar información complementaria
para la gestión integral de la farmacoterapia que se realiza a los pacientes.
C0481 PAPEL DE LOS POLIMORFISMOS EN LOS GENES CYP2D6 Y CYP3A5 EN LA
FARMACOCINÉTICA Y SEGURIDAD DE ARIPIPRAZOL EN UNA POBLACIÓN DE
VOLUNTARIOS SANOS
Carmen Belmonte Campillo, Dolores Ochoa Mazarro, Manuel Román Martínez, Teresa Cabaleiro Ocampo, Aneta
Wojnicz, María Talegón García, Ana Ruiz Nuño, Francisco Abad Santos
Servicio de Farmacología Clínica, Hospital Universitario de la Princesa, Instituto Teófilo Hernando, Universidad
Autónoma de Madrid, Instituto de Investigación Sanitaria Princesa (IP) Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
El aripiprazol, un antipsicótico atípico, es metabolizado hepaticamente por el CYP2D6 y CYP3A4 y
además, es substrato de la glicoproteína-p. Existe una gran variabilidad en el tratamiento con aripiprazol
que puede deberse a los polimorfismos genéticos, siendo nuestro objetivo estudiar la influencia de los
polimorfismos en los genes CYP2D6, CYP3A4, CYP3A5 y ABCB1 en la farmacocinética y seguridad de
aripiprazol.
Se incluyeron 148 voluntarios sanos que participaron en 6 ensayos de bioequivalencia. Se determinaron
las concentraciones plasmáticas de aripiprazol (N=148) y del metabolito activo, dehidro-aripiprazol
(N=45). Los polimorfismos analizados fueron: CYP2D6 (*1, *3, *4, *5, *6, *7, *9 y CNVs), CYP3A5*3,
CYP3A4*20 y C3435T (gen ABCB1). Se recogieron los acontecimientos adversos desarrollados. El
análisis estadístico se realizó con el SPSS 15.0.
3 Resultados
El AUC, Cmax, t1/2 y Vd fueron mayores en mujeres así como el desarrollo de náuseas y vómitos (42,9%
mujeres vs 20,7% hombres, p=0,006). Aquellos sujetos con genotipo *1/*1 para el CYP3A5 presentaron
mayores valores de Cmax de la suma de aripiprazol+dehidro-aripiprazol (p=0,04). El fenotipo del CYP2D6
afectó la farmacocinética de aripiprazol, a medida que aumenta el número de alelos activos los valores de
aclaramiento de aripiprazol, el AUC del metabolito y la ratio metabolito/aripiprazol fueron mayores,
mientras que el AUC y la t1/2 de aripiprazolfueron menores. El polimorfismo C3435T no alteró la
farmacocinética de aripiprazol. Los sujetos *1/*1 para el CYP3A5 desarrollaron reacciones adversas
neurológicas con más frecuencia respecto a los *3/*3 (p=0,017). Además, las náuseas y vómitos fueron
más frecuentes en metabolizadores lentos e intermedios con respecto a los rápidos y ultra-rápidos para el
CYP2D6 (p=0,014).
4 Conclusiones
El sexo, el polimorfismo CYP3A5*3 y el fenotipo del CYP2D6 afectan a la farmacocinética de aripiprazol,
mientras que el polimorfismo C3435T no ejerce influencia sobre la misma. El CYP3A5 y CYP2D6 pueden
afectar al desarrollo de reacciones adversas con aripiprazol.
C0498 ESTUDIO RUTINARIO DE POLIMORFISMOS EN DPYD Y UGT1A1
Irene Ferrer Bolufer, Mª Jose Safont Aguilera, Enrique Zucchet, Claudio Dario Ávila Andrade, Raquel Rodriguez López,
Carola Guzmán Luján, Aida Robles Fort, Noelia Escartin Alarcón, Goitzane Marcaida Benito, Carlos Camps Herrero
Consorcio Hospital General de Valencia Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
La farmacogenética estudia los factores genéticos que influyen en la respuesta individual a los fármacos,
tanto en eficacia como en toxicidad. En el caso de la farmacogenética en oncología se han establecido
asociaciones entre toxicidad grave y pacientes portadores del alelo *28 del gen de la uridina difosfato-
glucuronosiltransferasa (UGT1A1) tras administración de irinotecán y pacientes portadores de variantes
en el gen de la dihidropirimidina dehidrogenasa (DPYD) tras administración de fluoropirimidinas. En éste
último caso los alelos *2A, *13 y el rs67376798 son los mejor caracterizados.
El objetivo de este trabajo es valorar si se justifica ofrecer rutinariamente la determinación de estas
variantes a todos los pacientes a los que se les vaya a administrar un régimen quimioterápico que incluya
estos fármacos.
Pacientes: 330 pacientes del servicio de oncología que iban a ser sometidos a tratamiento con
fluoropirimidinas y 252 de ellos, con posible tratamiento combinado con irinotecán.
Metodología: 1. Secuenciación de la región genómica de DPYD que contiene la variante *2A y otras 7
variantes con predicción funcional in sílico. 2. Genotipado dirigido de la variante *13 y del rs67376798 del
DPYD. 3. Secuenciación de la región A(TA)nTAA del gen UGT1A1
3 Resultados
Se ha identificado 1 paciente heterocigoto para la variante DPYD*2A y 2 pacientes heterocigotos para la
variante rs67376798. No hemos detectado el alelo *13.
Se ha identificado 28 pacientes con la variante UGT1A1*28 en homocigosis, sin detectar ningún alelo *37.
4 Conclusiones
A todos ellos se les ajustó la dosis del fármaco y no presentaron reacciones adversas graves.
En nuestra serie, al no detectar ninguna de las variantes localizadas en la región amplificada junto con la
variante DPYD*2A ni el alelo UGT1A1*37, decidimos sustituir la secuenciación por genotipado mediante
discriminación alélica, técnica mucho más económica.
El coste-beneficio justifica el estudio farmacogenético.
Oncogenetica y Oncohematología
C0017 ANEMIA DE FANCONI: DIAGNÓSTICO MOLECULAR POR ``WHOLE EXOME
SEQUENCING´´ DE UNA COHORTE DE 51 PACIENTES ESPAÑOLES
1 2 2 2 3 4
Massimo Bogliolo , Míriam Aza , Núria Muñoz Subirana , Roser Pujol , José Antonio Casado , Francisco García , T.
5 5 3 4 2
Paprotka , C. Bauser , Juan Bueren , Joaquín Dopazo , Jordi Surrallés
1
Centro de Investigación Biomédica en Enfermedades Raras (CIBERER) U745 Bellaterra (Barcelona) España
2
Centro de Investigación Biomédica en Enfermedades Raras (CIBERER) U745: Departamento de Genética y
Microbiología, Universitat Autònoma de Barcelona, Barcelona. (Barcelona) España
3
Centro de Investigación Biomédica en Enfermedades Raras CIBERER U710: Hematopoietic Innovative Therapies
Division, (CIEMAT). Advanced Therapies Mixed Unit. Instituto de Investigación Sanitaria-Fundación Jiménez Díaz
(UAM, IIS-FJD). (Madrid) España
4
Centro de Investigación Biomédica en Enfermedades Raras (CIBERER) U715: Departamento de Genómica
Computacional, Centro de Investigación Príncipe Felipe (CIPF) (Valencia) España
5
GATC Biotech AG, Jakob-Stadler-Platz 7,D-78467 Konstanz, Germany (Konstanz) Germany
1 Objetivos
La heterogeneidad genética es un problema importante para el diagnóstico molecular de la Anemia de
Fanconi (AF). Nuestro objetivos son de optimizar la caracterización molecular de los pacientes con AF
utilizando servicios de “Whole exome sequencing” (WES) comercialmente disponibles y caracterizar
mediante estudios funcionales en modelos celulares las variantes de cambio de sentido de significado
incierto encontradas en los genes mas frecuentemente mutados en AF.
51 pacientes de AF se secuenciaron con un sistema Illumina utilizando un kit de captura comercial para
el exoma completo. Las grandes deleciones intragénicas se detectaron mediante análisis de cobertura
utilizando el software IGV y se confirmaron mediante MLPA para FANCA. La patogenicidad de las
variantes de cambio de sentido de significado incierto de FANCA se evaluó mediante un ensayo de
-/-
complementación de la sensibilidad a Mitomicina-C (MMC) de una línea celular humana FANCA
generada por TALEN.
3 Resultados
Se identificaron genes y mutaciones en el 88% de los pacientes con AF y se caracterizó el 95% de los
alelos mutados. Se identificaron 23 mutaciones que no se habían descrito previamente y 5 de estas
eran variantes de cambio de sentido. Confirmamos funcionalmente la patogenicidad de las variantes de
cambio de sentido de significado incierto para FANCA.
4 Conclusiones
Demostramos que utilizar la WES utilizando kit comerciales para el exoma completo es un método
válido para caracterizar molecularmente los pacientes de AF. Confirmamos funcionalmente varias
mutaciones de cambio de sentido no previamente descritas de FANCA generando así valiosas
informaciones para el diagnóstico molecular de futuro pacientes AF.
C0031 PREVALENCIA DE MUTACIONES EN EL GEN CDH1 EN UNA COHORTE DE
CASOS CON CÁNCER GÁSTRICO DIFUSO HEREDITARIO
Alan Codoñer Alejos, María Isabel Castillejo Castillo, Victor-Manuel Barberá, Sergio Larrínaga, Rosario Ferrer-
Avargues, Adela Castillejo, José Luis Soto
Hospital General Universitario de Elche (Alicante) España
1 Objetivos
Analizar la prevalencia de las mutaciones en el gen CDH1 en una cohorte de casos índice de familias
que cumplen criterios clínicos diagnósticos de Cáncer Gástrico Difuso Hereditario (CGDH).
Se incluyeron 21 probandos de familias que cumplían los criterios clínicos para CGDH del International
Gastric Cancer Linkage Consortium 2010. La cohorte está compuesta por 15 mujeres y 6 varones con
una mediana de edad al diagnóstico de 37 años (rango 24-64 años). El análisis de mutaciones
puntuales se llevó a cabo a partir de DNA de sangre periférica mediante PCR y secuenciación Sanger
de la región codificante completa y uniones intrón-exón del gen CDH1. El estudio de grandes
reordenamientos se realizó mediante MLPA en aquellos casos con resultado no informativo en la
secuenciación.
3 Resultados
Se detectaron mutaciones patogénicas en heterocigosis en cinco casos (24%). Además, otro caso
presentó una variante missense, en heterocigosis, de significado clínico desconocido. Cuatro de las
cinco mutaciones patogénicas eran de tipo frameshift: c.326delA, c.415delT, c.1056delT y c.1906insA.
La quinta mutación detectada es una gran deleción en la que se pierden los exones 1 y 2 de CDH1 en
un alelo. En consecuencia, el 20% de las mutaciones patogénicas detectadas son de tipo gran
reordenamiento, lo que supone el 5% del total de casos analizados. Las predicciones in silico,
(PolyPhen2, SNPs3D) de la variante missense no clasificada p.Cys603Tyr indican que podría ser
probablemente deletérea. La ausencia de otras evidencias condujo a la consideración como variante
de significado clínico desconocido.
4 Conclusiones
La prevalencia de mutaciones en nuestra serie de casos con criterios clínicos de CGDH es del 24%.
Un 20% de las mutaciones detectadas son de tipo gran reordenamiento, por lo que se recomienda
también el análisis por MLPA en el estudio de CDH1.
C0032 IDENTIFICACIÓN DE MUTACIÓN ``DE NOVO´´ EN BRCA1, PREVIAMENTE NO
DESCRITA, EN MUJER ESPAÑOLA CON CÁNCER DE MAMA BILATERAL DE INICIO
TEMPRANO
1 1 1 1
José Manuel Sánchez Zapardiel , Daniel Rueda , Victoria Carrero Blázquez , Pablo Villalba Capilla , Mirella Gallego
1 2 1
Hervás , Teresa Martínez Gaspar , Montserrat de Miguel Reyes
1
Hospital Doce de Octubre Madrid (Madrid) España
2
Hospital Castellón (Castellón) España
1 Objetivos
Se estima que entre un 5-10% del cáncer de mama y ovario es hereditario. Se calcula que el riesgo de
desarrollar cáncer de mama es del 60% en las portadoras de mutación en BRCA1 y del 50% en
BRCA2. La tasa de mutación de novo en BRCA1/2 ha sido estimada en torno a un 0.3% (IC95% 0.1%-
0.7%) y, en concreto, en BRCA1 en un 0.4% (IC95% 0,1%-1.1%).
Caracterizar una mutación de novo en BRCA1, previamente no descrita, en mujer española con cáncer
de mama bilateral de inicio temprano.
Mujer diagnosticada a los 37 años de cáncer de mama bilateral sincrónico con fenotipo triple negativo
(II.1). Cumple criterios de alto riesgo por lo que se realiza el estudio completo de BRCA1/2 mediante
NGS (Ion AmpliSeq BRCA Panel) en la plataforma PGM System y MLPA. La posterior validación se
realiza mediante secuenciación Sanger.
Se estudian tanto a los padres biológicos (I.1 y I.2), se verifica la paternidad mediante marcadores
STRs (QF-PCR), como a su hermano (II.2) y sus dos hermanas (II.3 y II.4).
3 Resultados
El resultado del caso índice es informativo. Se identificó una variante en el exón 18 del gen BRCA1
NM_007294.3:c.5123C>A;p.(Ala1708Glu) en heterocigosis. Clasificada como variante patogénica
(Clase 5) en las bases de datos BIC, LOVD-IAR, BRCA-Share y ClinVar (rs28897696).
En todos los familiares estudiados no se identificó la variante encontrada en el caso índice.
4 Conclusiones
El estudio en los familiares de la variante c.5123C>A;p.(Ala1708Glu) sugiere que la mutación se haya
originado de novo en el caso índice.
Aunque la tasa de mutaciones de novo en BRCA1/2 es poco frecuente (<0,4%), habría que tener en
cuenta la posibilidad de este tipo de mutaciones en el consejo genético, en la comprensión de historias
familiares complejas y en los criterios establecidos para el estudio completo de BRCA1/2 en pacientes
sin agregación familiar.
C0037 UNA MUTACIÓN MISSENSE DE BRIP1 ALTERA EL SPLICING Y PROVOCA LA
EXCLUSIÓN DEL EXÓN ANTERIOR. IMPLICACIONES EN EL CONSEJO GENÉTICO AL
PACIENTE.
1 1 1
Carolina Velázquez Pérez , Mercedes Durán Domínguez , Eva María Esteban Cardeñosa , Luis Enrique Abella
2 1 1 1
Santos , Lara Hernández Sanz , Noemi Martínez Martín , María del Mar Infante Sanz
1
IBGM (Valladolid) España
2
H.U. Rio Hortega (Valladolid) España
1 Objetivos
La ruta Anemia Fanconi/BRCA es necesaria para una reparación eficiente del ADN. BRIP1 es un gen
de esta ruta que codifica para una helicasa que interacciona con BRCA1. Mutaciones en heterocigosis
en este gen pueden contribuir a la predisposición al cáncer de mama y ovario hereditario (CMOH).
La introducción de la tecnología de secuenciación masiva en el diagnóstico clínico del CMOH genera
una gran cantidad de variantes posiblemente relacionadas con la predisposición a esta
enfermedad. Lamentablemente, se identifica una proporción elevada de variantes de significado
incierto. La discriminación inequívoca entre variantes neutrales y deletéreas es un reto para el
asesoramiento genético en la era genómica.
Nuestro objetivo ha sido caracterizar la variante c.550G>T en el exón 6 de BRIP1 encontrada en una
familia estudiada por un panel de genes de predisposición al CMOH.
El análisis de esta variante mediante Human Splicing Finder predice la creación de un nuevo sitio
donador y la rotura de un sitio de unión a un enhancer exónico de splicing. El ARN de la muestra fue
amplificado mediante RT-PCR para obtener cDNA. Posteriormente se obtuvo un fragmento
correspondiente a los exones 4 a 7 de BRIP1 mediante PCR.
3 Resultados
El producto amplificado mostró un patrón de splicing aberrante en agarosa. Curiosamente, la
secuenciación de ambas bandas evidenció la ausencia del exón 5. El análisis bioinformático predice un
cambio conformacional de la proteína y una funcionalidad alterada ya que el exón 5 codifica para el
dominio helicasa.
4 Conclusiones
Hemos elucidado el efecto molecular de la variante c.550G>T de BRIP1. La predicción in silico y
confirmación en el ARN de una alteración del splicing demuestran una alteración en la proteína y en su
funcionalidad. Este hallazgo contribuye a un mejor consejo genético: estableciendo medidas de
prevención y posiblemente tratamiento con inhibidores de PARP.
C0042 PERFIL MOLECULAR DE LOS GENES IMPLICADOS EN LA VÍA
NOTCH1/FBXW7/PI3K/PTEN/AKT EN LA LEUCEMIA LINFÁTICA CRÓNICA
Sandra Ballester Garcia, Estefanía Martinez, Raimundo Cervera, Joan Climent, María José Terol
Incliva- Hospital Clínico Universitario Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
La Leucemia Linfática Crónica B (LLC-B) es un síndrome linfoproliferativo crónico muy heterogéneo e
incurable, cuyos mecanismos de progresión tumoral no son totalmente conocidos. Recientemente se
ha descrito la presencia de mutaciones de la vía NOTCH1 en el 8-12% de los pacientes. Existen
evidencias de que dicha vía puede estar regulada por mecanismos alternativos y contribuir a la
progresión y/o quimio-resistencia de la enfermedad. El objetivo principal de este estudio es analizar la
posible implicación de los componentes de la vía NOTCH1/FBXW7/PI3K/PTEN/AKT en la enfermedad.
Hemos analizado la variación en el número de copias de ADN y expresión génica mediante técnicas
FISH y qPCR en las líneas celulares MEC1, MEC-2, EHEB, JVM3, JURKAT y MOLT-4, mediante el
empleo de sondas comerciales y sondas marcadas a partir de clones BAC de secuencia específica
para todos los genes de la vía.
3 Resultados
Los resultados del FISH mostraron variación en el número de copias de ADN en los genes NOTCH1,
FBXW7 y PTEN, y normalidad en el resto. Validamos la variación en el número de copias mediante
qPCR. Adicionalmente, analizamos la expresión génica en las líneas celulares oncológicas mediante y
sondas Taqman.
4 Conclusiones
Los resultados preliminares obtenidos mostraron una relación inversa entre NOTCH1 y FBXW7/PTEN,
ya que estos dos actúan de manera conjunta, confirmando la implicación de la vía en la LLC-B. Estos
resultados podrían ser el punto de partida de futuros estudios sobre terapias dirigidas a estos genes.
C0047 CARACTERIZACIÓN CLÍNICA Y MOLECULAR DE FAMILIAS CON POLIPOSIS
ATENUADA FAMILIAR (PAF). DEFECTOS EN GENES DE LA RUTA BER. CORRELACIÓN
GENOTIPO-FENOTIPO.
1 1 1 1
Mónica Tascón Torres , Eva Mª Esteban Cardeñosa , Mar Infante Sanz , Carolina Velázquez Pérez , Enrique Lastra
2 3 1 1 4
Aras , Luis Enrique Abella Santos , Noemí Martínez Martín , Lara Hernández Sanz , Mercedes Durán Domínguez
1
IBGM (Valladolid) España
2
Hospital Universitario (Burgos) España
3
Hospital Río Hortega (Valladolid) España
5
IBGM, Lab-B7 Valladolid (Valladolid) España
1 Objetivos
La PAF es una forma menos severa de Poliposis, con presencia de 10-99 pólipos, y riesgo de
desarrollar cáncer colorrectal del 70% a los 80 años. Las rutas de carcinogénesis en este síndrome no
están claras y por ello se necesitan más estudios. Alteraciones en genes implicados en la ruta BER
(base excision repair) pueden explicar algunos de los casos.
Se han analizado los genes MYH y OGG1 en 62 muestras de ADN pertenecientes a 48 familias
diferentes, así como la Inmunohistoquímica, la Inestabilidad de microsatélites y el gen Kras en las
muestras tumorales disponibles. El análisis molecular se realizó mediante secuenciación Sanger.
3 Resultados
Se han detectado 32 familias con variantes en el gen MYH, identificándose 15 cambios diferentes; la
variante más frecuente es la c.1014G>C; p.Gln338His. 11 familias portaban dos variantes: 4 eran
dobles mutantes, 6 portaban una variante más p.Gln338His y 1 familia presentaba esta variante en
homocigosis. 23 familias portaban una sola variante.
Respecto al gen OGG1 se encontraron 19 variantes distintas en 39 muestras. 7 de las variantes están
descritas, una de ellas como patogénica y 12 eran nuevas.
En el estudio de variantes en el codón 12 y 13 del gen KRAS en las muestras tumorales hemos
detectado 5 variantes diferentes en 11 muestras.
El análisis conjunto nos dice que 12 familias no presentan variantes en ninguno de los genes, 4
familias presentan una poliposis asociada a MYH, 8 familias presentan una variante en MYH y otra en
OGG1, 6 familias no presentan variante en MYH pero presentan más de una variante en OGG1 y 5
familias tienen únicamente una variante en OGG1. Un caso con variante en los tres genes.
4 Conclusiones
Una correlación genotipo-fenotipo: edad de diagnóstico, número de pólipos y la presencia o no de
manifestaciones extracolónicas es posible.
C0065 IDENTIFICACION DE TRES NUEVOS CASOS DE SÍNDROME DE DEFICIENCIA
CONSTITUCIONAL DE LA REPARACIÓN DE ERRORES DE APAREAMIENTO EN DOS
FAMILIAS CONSANGUINEAS NO EMPARENTADAS
1 2 3 3 2 2
Nerea Domínguez Pinilla , Vanesa Pérez Alonso , Iciar Rey , Nuria Carrizo , Yolanda Rodríguez , Ana Belen Enguita ,
2 4 2 3 2
Luis Robles , María José Recio Hoyas , José Perea , Montserrat de Miguel , Jose Luis Vivanco Martínez , Luis
2 2 2
Allende , Ignacio González-Granado , Daniel Rueda
1
Hospital Virgen de la Salud (Toledo) España
2
Hospital Doce de Octubre (Madrid) España
3
Laboratorio de Cáncer Hereditario. Servicio de Bioquímica. Hospital Universitario Doce de Octubre (Madrid) España
4
Universidad Complutense de Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
El síndrome de deficiencia constitucional de la reparación de errores de apareamiento (Constitutional
MisMatch Repair Deficiency, CMMRD), OMIM #276300) es una enfernedad rara de herencia
autosómica dominante que confiere un elevado riesgo al desarrollo de tumores infantiles,
principalmente hematológicos y del sistema nervioso central. Es causada por mutaciones bialélicas
inactivantes en los genes del complejo de reparación mismatch repair (MMR). Se pretende caracterizar
clínica y molecularmente tres casos con sospecha de síndrome CMMRD.
Se identificaron inicialmente dos casos con sospecha clínica de CMMRD, pertenecientes a dos familias
consanguineas no relacionadas. Se recogieron datos clínicos y analíticos de los casos índice y sus
familiares. Se estudió la presencia de mutaciones en los genes MMR (MLH1, MSH2 y
MSH6) mediante un panel de secuenciación masiva, confirmandose con secunciación Sanger. La
mutacion identificada se estudió en todos los familiares accesibles. Se analizó en todos los tejidos
accesibles, sanos y tumorales, inestabilidad de microsatélites e inmunohistoquímica de proteinas
reparadoras MMR.
3 Resultados
Al primer caso índice se le diagnosticó un linfoma no Hodgkin B (2 años) y dos linfomas linfoblásticos
pre-T (3 y 8 años), siendo portador en homocigosis de la variante patogénica (clase 5)
MSH6 c.2653A>T, p.(Lys885*). El segundo caso fue diagnosticado de linfoma linfoblástico T (7 meses),
resultando portador en homocigosis de la variante potencialmente patogénica (clase 4) MLH1
c.332C>T, p.(Ala111Val). El cribado de los familiares permitió identificar un nuevo caso portador de la
primera variante, diagnosticándose en paralelo un nefroblastoma (6 años). La inmunohistoquímica
MMR mostró ausencia de expresión de MSH6 en el tejido sano del primer caso, mientras que la
inestabilidad de microsatélites solo se observo en el linfoma no Hodgkin B.
4 Conclusiones
Nuestro estudio resalta la utilidad del estudio inmunohistoquímica MMR en el diagnóstico del sindrome
CMMRD. Se considera que esta entidad está subdiagnosticada, de modo que junto con las
recomendaciones del grupo colaborativo C4CMMRD, sería interesante incorporar en el diagnóstico
diferencial en tumores infantiles, especialmente en familias con algún grado de consanguinidad, el
estudio inmunohistoquímico MMR.
C0107 IMPACTO DE NUEVOS POLIMORFISMOS RELACIONADOS CON LA
CITOTOXICIDAD DE LA CITARABINA EN LA EFECTIVIDAD DEL TRATAMIENTO DE
INDUCCIÓN DE LA LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA
1 2 3 4
Juan Eduardo Megías Vericat , Virginia Bosó Ribelles , Pau Montesinos , María José Herrero , David Martínez
5 3 5 6
Cuadrón , Miguel Ángel Sanz , José Luis Poveda Andrés , Salvador F Aliño Pellicer
1
Hospital Universitari i Politecnic La Fe VALENCIA (Valencia) España
2
Unidad de Farmacogenética, Servicio de Farmacia, Área del Medicamento e Instituto Investigación Sanitaria La Fe.
Hospital Universitari i Politècnic La Fe (Valencia) España
3
Servicio de Hematología y Hemoterapia. Hospital Universitari i Politècnic La Fe (Valencia) España
4
Unidad de Farmacogenética, Servicio de Farmacia, Área del Medicamento e Instituto Investigación Sanitaria La Fe.
Hospital Universitari i Politècnic La Fe (Valencia) España
5
Servicio de Farmacia, Área del Medicamento. Hospital Universitari i Politècnic La Fe (Valencia) España
6
Unidad de Farmacogenética, Servicio de Farmacia- Unidad de Farmacología Clínica. Área del Medicamento e Instituto
Investigación Sanitaria La Fe. Hospital Universitari i Politècnic La Fe. Departamento Farmacología, Facultad de
Medicina, Universidad de Vale (Valencia) España
1 Objetivos
Un estudio reciente (Gamazon.Blood. 2013;121(21):4366-76) del genoma completo en leucemia
mieloide aguda (LMA) descubrió nuevos polimorfismos de nucleótido único (SNPs) relacionados con la
citotoxicidad de la citarabina, así como con su eficacia LMA pediatrica. Sin embargo, el efecto de estos
SNPs en la efectividad LMA en adultos es desconocido.
Se han analizado los 6 principales SNPs del estudio previo (rs12036333, rs10758713, rs9883101,
rs6550826, IRX2:rs2897047, MCC:rs7729269) en 225 pacientes adultos con LMA de novo tratados con
un esquema de inducción basado en citarabina e idarubicina. El genotipado se ha realizado por
espectroscopia de masas (Sequenom®).
La efectividad de la inducción inicial se ha evaluado comparando la remisión completa (RC) frente a
remisión parcial o resistencia, excluyendo las muertes en inducción. Las variables de supervivencia
medidas a los 5 años son: supervivencia global (OS), supervivencia libre de evento (EFS) y
supervivencia libre de recaída (RFS). Los genotipos se han estudiado empleando el modelo
codominante. La asociación entre variables se determinó mediante regresión logística ajustando por
edad, sexo, riesgo citogenético, ECOG, recuento de leucocitos y plaquetas, hemoglobina, creatinina,
bilirrubina, albúmina y LDH al diagnóstico (R® version 3.1.2).
3 Resultados
Los pacientes analizados tenían una edad media 51,1 años (16-78 años). No se detectaron
asociaciones significativas entre la RC y los SNPs estudiados. Sin embargo, se asociaron con menor
supervivencia a los 5 años los alelos variantes de los SNPs rs9883101 (OS, ACvs.AA HR:0,6
IC95%:0,4-0,9 P=0,009; RFS, CCvs.AA HR:8,3 IC95%:1,8-39,7 P=0,008), rs6550826 (OS, CGvs.CC
HR:0,6 IC95%:0,4-0,9 P=0,011; RFS, CGvs.CC HR:6,3 IC95%:1,4-28,2 P=0,016), mientras que el alelo
variante del polimorfismo rs2897047 de IRX2 se relacionó con mayor OS (CTvs.CC HR:0,6 I95%:0,4-
0,9 P=0,019).
4 Conclusiones
Nuestros resultados confirman lo ya sugerido en pediatría en adultos con LMA, demostrando influencia
en supervivencia. Estudios confirmatorios que validen estas asociaciones pueden permitir su empleo
como biomarcadores de la toxicidad en la práctica clínica.
C0118 NUEVOS GENES CANDIDATOS DE SUSCEPTIBILIDAD AL CANCER
COLORRECTAL HEREDITARIO: SECUENCIACIÓN COMPLETA DE EXOMAS EN
FENOTIPOS EXTREMOS
1 1 2 1 1 1
Míriam Álvarez Barona , Ceres Fernández-Rozadilla , Laura Valle , Xabier Bello , Jorge Amigo , Beatriz Sobrino ,
3 3 4 4 4 5
Joaquín Cubiella , Fátima Valentín , Francesc Balaguer , Antoni Castells , Sergi Castellví-Bel , Rodrigo Jover , Angel
6 6
Carracedo , Clara Ruiz-Ponte
1
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica, SERGAS, Grupo de Medicina Xenómica USC, IDIS Santiago de
Compostela (A Coruña) España
2
Programa de Cáncer Hereditario, Instituto Catalán de Oncología, IDIBELL, Hospitalet de Llobregat (Barcelona) España
3
Departamento de Gastroenterología, Complexo Hospitalario Universitario de Ourense, Instituto de Investigación
Biomédica, Ourense, Pontevedra, Vigo (Ourense) España
4
Servicio de Gastroenterología, Hospital Clínic, IDIBAPS, CIBEREHD, Universitat de Barcelona (Barcelona) España
5
Unidad de Gastroenterología, Hospital General Universitario de Alicante, Instituto de Investigación Biomédica ISABIAL
(Alicante) España
6
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica, SERGAS, Grupo de Medicina Xenómica-USC, IDIS, CIBERER,
Santiago de Compostela (A Coruña) España
1 Objetivos
Se estima que la heredabilidad en cáncer colorrectal (CCR) es del 25-30%, pero solamente el 5-10%
se explica por mutaciones germinales en genes Mendelianos de susceptibilidad. Cabe destacar,
además, pacientes que presentan adenomas múltiples debido a su alto riesgo de CCR. Nuestro
objetivo es identificar nuevos genes candidatos de predisposición hereditaria al CCR, mediante la
secuenciación completa de exomas (Whole-Exome-Sequencing, WES) en fenotipos extremos, que
expliquen parte de esta heredabilidad perdida.
WES de 48 pacientes, procedentes de 39 familias no relacionadas, que presentaban fenotipos
extremos: CCR a edad temprana (<50 años) o más de 10 adenomas (<60 años), sin mutaciones
germinales en genes MMR o APC, MUTYH, respectivamente.
Del total de variantes identificadas seleccionamos variantes raras heterozigotas (MAFExAC≤0.001) y
homozigotas (MAFExAC ≤0.01), con pérdida de función (frameshift, stopgain/loss, splicing ±1 o 2) y
missense de alto impacto funcional. Para priorizar genes candidatos buscamos su relevancia clínica en
base a su función, rutas (KEGG, GO-Annotations), expresión, sobrerrepresentación de variantes raras
en genes candidatos y/o rutas, y cosegregación de variantes en familias.
3 Resultados
No identificamos variantes raras y de alto impacto funcional en los genes CCR identificados en
estudios recientes de exomas, implicados algunos en rutas de reparación del DNA (Mismatch repair,
Base-excision repair). Sin embargo, sí encontramos otros nuevos genes en estas rutas, y una
sobrerrepresentación de la ruta Fanconi en pacientes con adenomas múltiples, vía recientemente
relacionada con el riesgo a CCR familiar. Además identificamos genes en vías de señalización MAPK y
PI3K-Akt.
4 Conclusiones
La secuenciación completa de exomas es una aproximación útil para identificar nuevos genes de
susceptibilidad. No obstante, para demostrar su implicación en el riesgo a CCR estamos secuenciando
nuestros candidatos en cohortes de validación de pacientes con el mismo fenotipo (~300 CRC , ~300
adenomas múltiples).
Financiación: Plan Nacional I+D+I 2013-2016, ISCIII/FEDER: PI14/00230
C0120 CASOS FAMILIARES DE NEUROFIBROMATOSIS TIPO I CON SEGREGACIÓN DE
DOS MUTACIONES.
1 1 2 1
Yolanda Martín Santo Domingo , Elisabete Hernández Imaz , Anna Duat Rodríguez , Ana Mª Valero Rubio , Dolores
1 3
Tellería Orriols , Concepción Hernández Chico
1
H.U. Ramón y Cajal. Servicio de Genética. CIBERER. IRYCIS (Madrid) España
2
H.U. Niño Jesus. Servicio de Neurología (Madrid) España
3
H. U. Ramón y Cajal, Servicio Genética Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
La Neurofibromatosis tipo 1 (NF1) es una condición autosómica dominante que incrementa el riesgo de
padecer tumores en el sistema nervioso. Esta enfermedad está causada por mutaciones en el gen
NF1, que presenta una de las tasas de mutación más elevadas descritas hasta el momento, y más del
50% de los casos NF1 son esporádicos, debidos a la aparición de una mutación de novo.
En el proceso de diagnóstico genético de los pacientes/familias afectados de NF1 hemos encontrado
tres grupos familiares en los que aparecen dos mutaciones diferentes, una segregando en la familia y
otra de nueva aparición. Este fenómeno está pobremente descrito en la literatura y en este trabajo
cuestionamos su causa.
Nuestra cohorte de 500 casos independientes de NF1 incluye 130 casos familiares.
Hemos realizado el análisis mutacional del gen NF1 y, en los casos familiares, se ha realizado también
análisis de segregación con marcadores microsatélite intragénicos.
3 Resultados
Los casos familiares con dos mutaciones son los siguientes:
La primera familia (NF072) estaba constituida por cuatro individuos, de los cuales tres eran afectos; en
el estudio directo identificamos una mutación de novo (c.3587T>G) en la propósito, mientras que su
padre y su tío afectos portaban otra mutación (c.1756_1759delACTA).
En la segunda familia (NF232) de tres generaciones con siete pacientes, se identificó la mutación
puntual (c.7996_7997delAG) que segregaba en la familia. Sin embargo, uno de los afectados no
portaba dicha mutación y se detectó una mutación de novo (c.2543G>A).
En la tercera familia (NF790) también se identificaron dos mutaciones (c.4277A>G y c.7316C>A), una
de ellas en bajo grado de mosaicismo.
4 Conclusiones
La elevada tasa de mutación del gen NF1 no explica estos hallazgos y proponemos que las
mutaciones de novo son aún más frecuentes en un contexto NF1+/-.
C0125 LA DELECIÓN DE LOS GENES CDKN2A Y CDKN2B CAUSA UN CUADRO CLÍNICO
ESPECÍFICO CON SOLAPAMIENTO ENTRE LA NEUROFIBROMATOSIS TIPO 1 Y EL
SÍNDROME DE LI-FRAUMENI
1 2 3 1 4 3
Laura Pena Couso , Yolanda Martín , Elisabeth Castellanos , Fátima Mercadillo , Juana María Cano , Eduard Serra ,
2 5
Concepción Hernández , Miguel Urioste
1
Unidad Clínica de Cáncer Familiar, Centro Nacional de Investigaciones Oncológicas (CNIO) Madrid (Madrid) España
2
Servicio de Genética, Hospital Ramón y Cajal, FIBIO-HRC, CIBERER (Madrid) España
3
Grupo de Cáncer Hereditario, Instituto de Investigación Germans Trias y Pujol (IGTP)-PMPPC (Barcelona) España
4
Oncología Médica, Hospital General Universitario de Ciudad Real (Ciudad Real) España
5
Unidad Clínica de Cáncer Familiar, Centro Nacional de Investigaciones Oncológicas (CNIO). CIBERER (Madrid)
España
1 Objetivos
Mutaciones en el gen CDKN2A son la causa del Síndrome de Melanoma y Lunares Múltiples Atípicos
(FAMMM) y de Melanoma Cutáneo Maligno Familiar (FCMM). Recientemente se han descrito grandes
deleciones en la región 9p21.3 que incluían a los genes CDKN2A y CDKN2B en algunas familias con
rasgos de la Neurofibromatosis tipo 1 (NF1) o que cumplían criterios clínicos de Síndrome de Li-
Fraumeni (LFS).
Describimos una familia con rasgos de NF1 y de LFS, en la que segrega una gran deleción que implica
a ambos genes. Adicionalmente, hemos analizado la frecuencia de esta alteración en una serie
adicional de familias con criterios clínicos de LFS y Li-Fraumeni-like (LFLS) con estudio negativo de
TP53 y otros genes de susceptibilidad.
Varios miembros de la familia índice presentaban un cuadro clínico caracterizado por la presencia de
tumores del sistema nervioso central, tumor maligno de la vaina del nervio periférico, otros sarcomas y
neurofibromas.
Mediante técnicas de secuenciación masiva se identificó una deleción en la región 9p21.3 en los
pacientes. Combinando técnicas de MLPA, aCGH y long-PCR se caracterizaron los puntos de rotura
de la deleción. Además, analizamos una serie adicional de familias LFS y LFLS mediante MLPA.
3 Resultados
Los familiares afectos muestran un fenotipo reconocible, claramente diferente del observado en
familias FAMMM/FCMM. Dichos pacientes presentan una deleción de 68.5 kb en la región 9p21.3,
involucrando a los genes CDKN2A y CDKN2B. Sin embargo, no hemos identificado alteraciones
semejantes en la serie adicional de familias LFS y LFLS.
4 Conclusiones
Nuestros resultados apoyan que la deleción de CDKN2A y CDKN2B es la responsable de un cuadro
clínico específico con solapamiento entre los rasgos propios de la NF1 y del LFS. Esta alteración
genética parece muy infrecuente en otras familias LFS/LFLS que no compartan el espectro de tumores
observado en la presente familia.
C0143 ANÁLISIS GENOTIPO-FENOTIPO EN FAMILIAS DIAGNOSTICADAS DE SÍNDROME
DE BIRT-HOGG-DUBÉ
Sonia Alonso Soler, Montaña Corcho Gomez, Maria Helena Lopez De Ceballos Reyna, Silvia Romero Chala, Jose
Antonio Garcia Trujillo, Maribel Salgado, Luis Fernandez Pereira, Pablo Borrega Garcia, Santiago Gonzalez Santiago
Complejo Hospitalario Universitario De Caceres (Caceres) España
1 Objetivos
El síndrome de Birt-Hogg-Dubé (BHD) es una entidad infrecuente de herencia autosómica dominante,
provocado por mutaciones en el gen FLCN, que codifica la foliculina. Se caracteriza por la existencia
de fibrofoliculomas cutáneos, tumores renales y neumotórax, pero presenta gran variabilidad clínica y
disparidad genotipo-fenotipo. Presentamos un análisis de las familias diagnosticadas en nuestra
Unidad de Cáncer Hereditario.
A partir de los árboles genealógicos se recopilan y analizan las historias clínicas de los individuos
pertenecientes a las 3 familias con diagnóstico molecular de síndrome BHD hasta ahora en nuestra
Unidad.
3 Resultados
Se ha identificado una mutación en el gen FLCN diferente en cada familia: c.1546A>T, c.1177-5 1177-
3del y c.1285dupC.
Las manifestaciones cutáneas (dermatofibromas, fibrofoliculomas, tricodiscomas y acrocordones) son
las más frecuentes, aparecen en las 3 familias y afectan al 40% de los portadores. Por el contrario, no
se han identificado casos de neumotórax, tan sólo de quistes pulmonares.
Respecto a los tumores diagnosticados, el 22% de los portadores de la mutación c.1546A>T
desarrollaron un tumor fusocelular del seno renal. Dos de los portadores de esta mutación
desarrollaron cáncer de colon y de tiroides respectivamente.
El 33% de los portadores de la mutación c.1285dupC han desarrollado un tumor renal oncocítico
híbrido (oncocitoma y carcinoma cromófobo), que fue bilateral en el 16% de los casos. Un portador
desarrolló un adenocarcinoma papilar pulmonar.
Con respecto a c.1177-5 1177-3del se trata de una mutación de novo en la familia, diagnosticada en
una paciente con fibrofoliculomas y tricodiscomas sin otra manifestación clínica de momento.
4 Conclusiones
El síndrome de Birt-Hogg-Dubé presenta una variabilidad genotipo-fenotipo considerable en las
familias diagnosticadas en nuestra Unidad. No es precisa la existencia de la triada clínica completa
(dérmica, renal, y pulmonar) para sospechar su diagnóstico. La manifestaciones cutáneas son las más
frecuentes, de ahí la importancia de una adecuada valoración dermatológica de estas lesiones.
C0181 GENERACIÓN, CARACTERIZACIÓN Y DIFERENCIACIÓN DE CÉLULAS MADRE
CON PLURIPOTENCIA INDUCIDA (IPSC) NF1(+/-) Y (-/-) ESPECÍFICAS DE PACIENTE CON
NEUROFIBROMATOSIS TIPO 1 A PARTIR DE NEUROFIBROMAS PLEXIFORMES
1 2 1 2 1
Meritxell Carrió Llach , Yvonne Richaud , Bernat Gel Moreno , Senda Jimenez-Delgado , Elisabeth Castellanos Pérez ,
1 1 1 1 3
Ernest Terribas Pérez , Imma Rosas Garrido , Josep Biayna , Helena Mazuelas , Ignacio Blanco Guillermo , Conxi
4 2 5
Lázaro Garcia , Ángel Raya Chamorro , Eduard Serra Arenas
1
Institut de Recerca Germans Trias i Pujol (IGTP) (Barcelona) España
2
Center of Regenerative Medicine in Barcelona (CMRB) (Barcelona) España
3
Hospital Germans Trias i Pujol (HUGTiP) (Barcelona) España
4
Hereditary Cancer Program, Catalan Institute of Oncology (ICO) (Barcelona) España
5
The Institute for Health Science Research Germans Trias i Pujol (IGTP) - PMPPC Badalona (BARCELONA) España
1 Objetivos
Los neurofibromas plexiformes son tumores del sistema nervioso periférico asociados a la
Neurofibromatosis de tipo 1. Urgen modelos celulares que permitan investigar la progresión de estos
tumores hacia sarcomas de las vainas de los nervios periféricos y nuevas estrategias de tratamiento. El
objetivo de este proyecto ha sido la generación de células madre con pluripotencia inducida (iPSC)
específicas de pacientes NF1, a partir de neurofibromas plexiformes (PNFs), para utilizarlas como
modelo celular.
Se han utilizado estrategias no integrativas para reprogramar células disociadas o cultivadas a partir de
PNFs con mutaciones constitucionales y somáticas en el gen NF1 previamente caracterizadas. Las
capacidades de autorrenovación y diferenciación pluripotente de estas células han sido caracterizadas,
así como su genoma.
3 Resultados
Se han generado iPSC NF1(+/-) y (-/-) de diferentes neurofibromas plexiformes. Se ha demostrado su
pluripotencia. Se ha analizado su capacidad proliferativa y su potencial de diferenciarse hacia cresta
neural y célula de Schwann. Se ha comparado la expresión de marcadores de estos tumores entre
células primarias y células derivadas a partir de las iPSC generadas.
4 Conclusiones
Se ha generado por primera vez un conjunto de líneas iPSC con genotipos NF1(+/-) y (-/-) a partir de
células primarias de tumores benignos (neurofibromas plexiformes) con riesgo a malignizar. Este
recurso constituye una fuente inagotable de células como modelo para la Neurofibromatosis tipo 1, con
el que se podrá estudiar la progresión hacia malignidad de los PNFs. También facilitará la identificación
de estrategias terapéuticas para los mismos. Este recurso estará a disposición de la comunidad NF1.
C0183 RENTABILIDAD DIAGNÓSTICA DEL USO DE MLPA PARA DETECCIÓN DE
GRANDES REORDENAMIENTOS DE BRCA1 Y BRCA2 EN UNA CONSULTA DE CONSEJO
GENÉTICO.
1 1 1 2
José Antonio García Trujillo , Silvia Romero Chala , Irene Magriz Tascón , Santiago González Santiago , María Helena
2 2 1 1
López de Ceballos Reyna , Montaña Corcho Gómez , María Isabel Salgado Chaves , Eyad Madany Al-Kheder ,
1 1 1 1
Daniela Ionescu , Carmen Cámara Hijón , Isabel Tovar García , Luis Fernández Pereira
1
Hospital San Pedro de Alcántara. Laboratorio de Inmunología Cáceres (Cáceres) España
2
Hospital San Pedro de Alcántara. Servicio de Oncología (Cáceres) España
1 Objetivos
Estudiar la frecuencia de reordenamientos (grandes deleciones y duplicaciones) en los genes BRCA1 y
BRCA2 mediante Multiple Ligation Probe Amplification (MLPA), en una población de pacientes
derivados por la consulta de Consejo Genético en Cáncer Hereditario.
Se estudiaron 200 pacientes en los que el análisis de la secuencia de BRCA1 y BRCA2 no había
mostrado alteraciones patogénicas. Se extrajo ADN de sangre periférica mediante el kit QIAamp DNA
®
Blood (QIAGEN ). En los estudios de MLPA se emplearon los kits P002-C1 y P045-B2 (MCR-
®
Holland ). En un grupo independiente de 39 pacientes, cuyos genes fueron estudiados por
®
secuenciación masiva (ONCO GeneProfile, Sistemas Genómicos ) se analizaron las variantes en el
número de copias (CNV).
3 Resultados
Del total de 200 pacientes estudiados por MLPA, 2 de ellos (1%) mostraron reordenamientos,
afectando en ambos casos al gen BRCA1. Uno de estos pacientes presentó una deleción que afecta al
exón 22 y se considera patogénica, mientras que otro mostró una duplicación del exón 2, considerada
como variante de significado incierto. No se detectó ninguna alteración en el gen BRCA2.
En el grupo de 39 pacientes en los que se estudiaron las CNV no se observó ninguna alteración
sugerente de la presencia de reordenamientos.
4 Conclusiones
La frecuencia de reordenamientos en los genes estudiados es baja (1% en BRCA1 y 0% en BRCA2),
en línea con estudios previos.
Los datos de secuenciación masiva permiten un análisis detallado del número de lecturas de cada
región, sugiriendo posibles alteraciones. Debido a que la técnica de MLPA es costosa, requiere una
importante cantidad de tiempo en su realización, y se obtiene un bajo porcentaje de resultados
anormales, consideramos una estrategia eficiente el análisis de los resultados de secuenciación
masiva en busca de CNV, limitando la realización de MLPA a los casos que muestren resultados
alterados.
C0213 EL SEXO Y LAS VARIANTES GENÉTICAS DEL GEN MC1R: DIFERENCIAS EN LA
CAPACIDAD DE BRONCEADO Y LA SENSIBILIDAD SOLAR ENTRE HOMBRES Y
MUJERES
1 2 2 2
Barbara Hernando Fuster , Maider Ibarrola Villava , Maria Peña Chilet , Gloria Ribas Despuig , Conrado Martinez
3
Cadenas
1
Universidad Jaume I de Castellón (Castellón) España
2
INCLIVA - Valencia (Valencia) España
3
Dept. de Medicina, Universidad Jaume I Castellón (Castellón) España
1 Objetivos
La sensibilidad a la radiación ultravioleta – agente mutagénico clave en el cáncer de piel – está
determinada por características pigmentarias influenciadas por varios genes, entre los que el gen
MC1R es uno de los más importantes. Estudios recientes han expuesto que existen variaciones en
pigmentación y respuesta al sol entre hombres y mujeres, sugiriendo que existe un factor relacionado
con el sexo que puede contribuir a la regulación de genes que intervienen tanto en la pigmentación
como en la incidencia de melanoma.
Se incluyeron 515 hombres y 597 mujeres, tanto pacientes de melanoma como controles, de los cuales
se recogieron datos fenotípicos de sensibilidad solar relacionados con la aparición de melanoma. Se
secuenció el gen MC1R de cada individuo y se genotiparon varios polimorfismos en genes
involucrados en pigmentación. Para determinar si las diferencias fenotípicas entre sexos eran debidas
a una causa genética, se estimó el efecto de cada variante en los rasgos de sensibilidad solar según el
sexo.
3 Resultados
Las mujeres presentaron una menor capacidad de bronceado (fototipos I-II) y un menor número de
nevus que los hombres.Un meta-análisis integrando datos de estudios previamente publicados
confirmó nuestros resultados. Por otra parte, aunque no se observó asociación entre número de nevus
y las variantes genéticas estudiadas, sí se observó una asociación entre los fototipos I-II y el genotipo
de MC1R. Además, las mujeres portadoras de una mutación en MC1R tienden a mostrar fototipos más
bajos que los hombres con el mismo genotipo.
4 Conclusiones
Este estudio apoya evidencias previas de que el sexo podría contribuir a las variaciones en la
pigmentación humana, sensibilidad solar, y por tanto a la incidencia de melanoma, entre mujeres y
hombres. Además, nuestros resultados sugieren que los efectos genéticos de MC1R pueden influir en
estas diferencias.
C0227 DELECIÓN DEL GEN CBFB COMO FACTOR PRONOSTICO NEFASTO EN
PACIENTES CON LEUCEMIA MIELOMONOCITICA AGUDA
1 2 1 1 1 1
Miriam Gutierrez Serrano , Cristina Gonzalez , Beatriz Alvarez , Begoña Rodriguez , Rebeca Moreno , Amelia Queipo ,
1 1
Vanesa Barea , Fernando Cava
1
Hospital Infanta Sofia (Madrid) España
2
Hospital infanta sofia, Genetica San Sebastian De Los Reyes (Madrid) España
1 Objetivos
La leucemia mielomonocítica aguda se asocia con la inversión pericéntrica del cromosoma 16, a nivel
molecular, se produce una fusión entre el factor de unión al núcleo (CBFB) y la cadena pesada de
miosina del músculo liso (MYH11). En leucemia mieloide aguda se han identificado anomalías en los
genes NPM1, FLT3 y CEBPA. La inv(16) se asocia con un buen pronóstico, pero existen variantes de
Inv(16) con deleción de la región 3'CBFB que parecen estar asociados con un peor pronóstico. En este
estudio se presentan dos pacientes con deleción completa del gen CBFB y su correlación con una
progresión muy agresiva de la enfermedad. Hasta donde sabemos, estos son los primeros casos
reportados con esta deleción en una leucemia mielomonocítica aguda.
Dos pacientes con presencia de blastos en sangre periférica y sospecha de leucemia aguda. Estudio
de cariotipo y FISH con sonda LSI CBFB Break-Apart Rearrangement en muestra de medula ósea.
Estudio molecular de los genes FLT3, NPM1 y CEBPA en uno de los pacientes.
3 Resultados
Los estudios de citología e inmunofenotipo en médula ósea de ambos pacientes indicaron un
diagnóstico de leucemia mielomonocítica aguda. En el cariotipo de ambos pacientes se observaron dos
líneas celulares, una con deleción parcial del brazo largo del cromosoma 16 y otra normal. Los
estudios de FISH confirmaron la presencia de deleción completa de un alelo del gen CBFB. Los
estudios moleculares no detectaron mutaciones en FLT3, NPM1 y CEBPA.
4 Conclusiones
La deleción de genes supresores de tumores de la región 16q puede haber dado lugar a la
leucemogénesis. La deleción completa del gen CBFB no se ha descrito previamente, Analizando la
supervivencia de nuestros dos pacientes, los cuales fallecieron 2 meses después del diagnostico,
podemos concluir que la deleción completa del gen CBFB en un alelo confiere un pronóstico nefasto.
C0240 ESTUDIO DE LA INFLUENCIA DE VARIANTES GENÉTICAS EN RTEL1 EN EL
CÁNCER DE MAMA TRIPLE NEGATIVO.
1 2 1 1 1 1 1 1
Carlos Cabrera , MJ Arranz Calderon , MI Surralles , A Salas , X Tarroc , A Garcia , L Ibañez , S Gonzalez , M
1 1
Campayo , l Cirera
1
2
1 Objetivos
El cáncer de mama triple negativo (CMTN) es el subtipo histológico de cáncer de mama más agresivo
debido a sus características moleculares y genéticas que predisponen a una mayor agresividad y
resistencia a la quimioterapia adyuvante. Sin embargo, no existen biomarcadores claros de progresión
o supervivencia global. Varias publicaciones han asociado alteraciones en RTEL1, un gen implicado en
la síntesis de una helicasa reparadora de telómeros, en casos de cáncer de mama, pero no en la
población específica de CMTN. El objetivo de este estudio es evaluar variantes genéticas en RTEL1
como posibles biomarcadores de progresión y supervivencia en pacientes con CMTN
METODOLOGIA: Investigamos variantes polimórficas descritas en el gen RETL1 (rs2297449 y
rs6010620) en una cohorte de N=124 pacientes con CMTN y N=178 controles apareados por sexo y
origen étnico
3 Resultados
RESULTADOS: Se observó una mayor frecuencia del alelo rs2297440-T en pacientes (0.22) que en
controles (0.13, p=0.006, O.R.=1.85). Similarmente, el alelo rs6010620-A era más frecuente en
pacientes (0.22) que en controles (0.14, p=0.01, O.R.=1.76). Los análisis de haplotipos confirman estas
asociaciones. Los análisis multivariados, considerando la edad, estadio, tratamiento y presencia de
ganglios axilares como covariables, mostró una asociación marginal entre la variante rs2297440 y
supervivencia global (p=0.003).
4 Conclusiones
Nuestros resultados sugieren que variantes genéticas en RTEL1 podrían constituir biomarcadores de
riesgo y progresión de CMTN.
C0247 ESTUDIO DE MUTACIONES EN LOS GENES BRCA1 Y BRCA2 MEDIANTE
SECUENCIACIÓN MASIVA Y SECUENCIACIÓN SANGER
1 1 1 2
SILVIA ROMERO CHALA , José Antonio García Trujillo , Irene Magriz Tascón , Santiago González Santiago , María
2 2 1 1
Helena López de Ceballos Reyna , Montaña Corcho Gómez , María Isabel Salgado Chaves , Eyad Madany Al-Kheder ,
1 1 1 1
Daniela Ionescu , Carmen Cámara Hijón , Isabel Tovar García , Luis Fernández Pereira
1
Laboratorio de Inmunología. Hospital San Pedro de Alcántara Caceres (Caceres) España
2
Servicio de Oncología. Hospital San Pedro de Alcántara (Cáceres) España
1 Objetivos
Estudiar la prevalencia de mutaciones patogénicas en los genes BRCA1 y BRCA2 mediante
secuenciación masiva con el secuenciador MiSeq (Illumina), en una población de pacientes derivados
y seleccionados por la consulta de Consejo Genético en Cáncer Hereditario durante 1 año.
Comparación de los resultados obtenidos en el estudio de dichos genes mediante la secuenciación
Sanger (ABI 3130, Applied Biosystems) de pacientes derivados por dicha consulta durante 10 años.
Se estudiaron los genes BRCA1 y BRCA2 en 577 pacientes mediante secuenciación Sanger (ABI
3130, Applied Biosystems) y otros 75 pacientes por secuenciación masiva. Los pacientes fueron
seleccionados en base a criterios de alto riesgo en la consulta de Consejo Genético en Cáncer
®
Hereditario. Se extrajo ADN de sangre periférica con el kit QIAamp DNA Blood (QIAGEN ). En el
estudio de secuenciación masiva se utilizó un panel de 80 genes relacionados con diferentes
®
síndromes de cáncer hereditario (Kit ONCO GeneProfile, Sistemas Genómicos ). Los resultados fueron
®
filtrados con el programa de análisis GeneSystems (Sistemas Genómicos ).
3 Resultados
De un total de 577 pacientes estudiados mediante secuenciación clásica (Sanger), 54 de ellos (9.4%)
mostraron mutaciones patogénicas. De los 75 pacientes estudiados por secuenciación masiva
encontramos 7 mutaciones patogénicas (9.3%). Todos los resultados obtenidos mediante
secuenciación masiva fueron confirmados por secuenciación Sanger.
4 Conclusiones
La prevalencia de mutaciones encontrada en BRCA1 y BRCA2 por ambas técnicas de secuenciación
es equivalente. Estos resultados sugieren que mediante secuenciación masiva, en nuestro laboratorio,
no perdemos casos frente a la técnica tradicional en el estudio de las mutaciones patógenas en
BRCA1/2.
La secuenciación masiva es más rápida que la secuenciación clásica, y capaz de aportarnos
información muy valiosa sobre otros genes de intermedia y/o baja penetrancia implicados en el
síndrome de cáncer de mama y ovario hereditario.
C0321 SECUENCIACIÓN MASIVA: UNA NUEVA PERSPECTIVA DIAGNÓSTICA EN
CÁNCER HEREDITARIO
Adriana Lasa Laborde, Teresa Ramón y Cajal, Mónica Cornet, Consol López, Alexandra Gisbert, Nuria Cliville, David
Fisas, Carlos Cabrera, Nuria Calvo, Alexandra Vethencourt, Jordi Surralles
Hospital de la Santa Creu i Sant Pau (Barcelona) España
1 Objetivos
Mediante el análisis de los genes BRCA1 y BRCA2 únicamente es posible diagnosticar alrededor de un
22% de familias con cáncer de mama/ovario hereditario (CMOH). Las técnicas de secuenciación
masiva permiten el desarrollo de paneles para el análisis de un elevado número de genes de un modo
simultáneo y con una gran sensibilidad.
Se han analizado un total de 122 individuos utilizando el “kit” comercial “BRCA Hereditary Cancer
MASTR Plus” (Multiplicom) que incluye un total de 26 genes relacionados con cáncer hereditario en un
secuenciador MiSeq (Illumina). Del total, 88 son pacientes diagnosticadas de cáncer de mama /ovario
(CM/CO) que cumplen criterios clínicos de estudio, 7 pacientes que no se ajustan a estos criterios, 6
mujeres sanas con familiares de primer grado afectadas de CM/CO y, 21 pacientes con estudio previo
de los genes BRCA (utilizando otras técnicas) y con resultado negativo.
3 Resultados
Se han identificado un total de 11 mutaciones en los genes BRCA en los diferentes grupos estudiados.
Respecto a los otros genes únicamente se han leído las secuencias de 10 de los genes asociados a
riesgo alto y moderado de CM/CO según el fenotipo familiar. Se ha identificado una nueva mutación en
RAD51D, dos variantes probablemente patogénicas según predictores “in silico” en PALB2 y CHEK2 y,
6 variantes de significado incierto en otros genes.
4 Conclusiones
La incorporación de la técnica de secuenciación masiva en nuestra práctica clínica ha permitido el
análisis de un elevado número de genes en un breve espacio de tiempo. Hemos identificado
mutaciones en genes nuevos, en individuos sanos con alto riesgo candidatos a intervenciones
preventivas y optimizado el diagnóstico genético en familias previamente estudiadas. También se han
identificado variantes en genes con moderada penetrancia y variantes de significado desconocido
pendientes de clasificar.
C0328 IDENTIFICACIÓN Y ANOTACIÓN FUNCIONAL DE UN NUEVO PANEL DE GENES
DIFERENCIALMENTE EXPRESADOS COMO BIOMARCADORES CON UTILIDAD CLÍNICA
EN GLIOMAS.
1 2 2 3
Eduardo Larriba Tornel , Araceli García-Martínez , Cristina Alenda González , Teresa Quintanar Verduguez , Álvaro
3 4 4 5 5
Rodríguez-Lescure , María Fuentes Baile , José Martín-Nieto , José Luis Soto Martínez , Víctor Manuel Barberá Juan
1
Centro de Investigaciones Biológicas C.I.B. - CSIC (Madrid) España
2
Hospital General Universitario de Alicante, ISABIAL - FISABIO (Alicante) España
3
4
Universidad de Alicante (Alicante) España
5
Hospital General Universitario de Elche, ISABIAL - FISABIO (Alicante) España
1 Objetivos
El glioblastoma multiforme es el tumor cerebral más frecuente y uno de los tumores humanos más
agresivos. Los estudios de transcriptómica permiten identificar genes con expresión alterada en
diferentes tumores, pudiendo llegar a ser potenciales biomarcadores con interés clínico. Nuestro
objetivo es identificar los genes alterados en tumores gliales así como describir las principales
funciones moleculares alteradas en este tipo de tumores.
Se analizó una cohorte de 7 pacientes sin tratamiento previo, 2 tratados y RNA de tejido cerebral de 5
donantes sanos como control. El análisis de expresión génica se llevó a cabo mediante micromatrices
de DNA (Agilent Technologies). Los genes expresados diferencialmente (cambio de expresión >= 2, -2
=>, P-valor > 0,01) en los diferentes contrastes realizados, se identificaron utilizando el paquete limma
de R Bioconductor. Los genes seleccionados se anotaron funcionalmente utilizando DAVID v6.7 y
Cytoscape.
3 Resultados
El número medio de genes con aumento de expresión en el tumor fue de 1435, mientras que los
infraexpresados con respecto al tejido normal 1790, una media de 3225 genes diferencialmente
expresados en el tumor (Pacientes vs Control). Por medio de nuestro análisis bioinformatico, hemos
establecido un panel de 26 genes que mostraron una expresión diferencial en todos los tumores con
respecto al control normal. La anotación funcional de estos genes indica su participación en 27 rutas
presentes en la base de datos del KEEG (enciclopedia de genes y genomas de Kyoto).
4 Conclusiones
Las funciones específicas enriquecidas asociadas a genes sobreexpresados están relacionadas con la
carcinogénesis, incluyendo angiogénesis, proliferación celular, inflamación y apoptosis. En cambio, las
funciones específicas de los genes diferencialmente infraexpresados están relacionadas con la
diferenciación celular del sistema nervioso. Los 26 genes que presentan expresión diferencial en los
tumores se someterán a estudios de validación como potenciales nuevos marcadores con valor
diagnóstico, pronóstico y predictivo de respuesta al tratamiento.
C0339 BRCA 2 MIS-SPLICING: REGULACIÓN DE LOS EXONES 17 Y 18.
1 1 1 2 3
Eugenia Fraile Bethencourt , Beatriz Díaz Gomez , Alberto Valenzuela Palomo , Alberto Acedo , David José Sanz ,
4 4 1
Elisa Goina , Emanuele Buratti , Eladio Andrés Velasco Sampedro
1
IBGM Valladolid (Valladolid) España
2
AC-gen (Valladolid) España
3
University College Cork (Cork) Ireland
4
ICGEB (Trieste) Italia
1 Objetivos
El rastreo de mutaciones en BRCA2 ha identificado un gran número de variantes de significado clínico
desconocido (VUS). Nuestro objetivo es investigar el impacto de este tipo de variantes en el splicing de
los exones 17 y 18 de BRCA2, así como caracterizar elementos reguladores en los mismos que
constituyan hotspots para variantes de splicing.
Se construyó un minigen con los exones 14-20 de BRCA2 en el vector pSAD®. En él, se evaluaron 52
variantes seleccionadas a través de programas de predicción de splicing. Cada una de ellas, fue
introducida en el minigen mediante mutagénesis dirigida y ensayada en células MCF7. El estudio de
regulación se llevó a cabo mediante microdeleciones, ensayos de pulldown y siRNAs.
3 Resultados
El minigen wild type produjo un transcrito estable de tamaño (1.802nt) y estructura (V1-
[BRCA2_exons_14-20]-V2) esperada. El mapeo mediante microdeleciones reveló regiones esenciales
en el extremo 3’ del exón 17 (c.7944-7973) y en el 5’ del exón 18 (c.7979-7988, c.7999-8013). Estas
contienen secuencias de unión a proteínas SR, importantes en el reconocimiento de los exones. Por
otro lado, 30/52 variantes, provocaron alteraciones en el splicing. Se encontraron más de 16 tipos de
transcritos diferentes, siendo el skipping el evento más común. Encontramos alteraciones en un amplio
número de elementos de splicing, incluidos los sitios canónicos (15), sitios alternativos de novo (3),
tracto de polipirimidinas (3) y enhancer/silenciadores (9). Cabe destacar que 18 de las variantes
estudiadas podrían ser reclasificadas como patogénicas, lo cual supone un 28.6% de las variantes
patogénicas reportadas en los exones 17 y 18 de BRCA2.
4 Conclusiones
Las mutaciones de splicing son especialmente prevalentes en los exones 17 y 18 debido a la presencia
de ESEs activos. Los minigenes son una herramienta valiosa para discriminar entre variantes
patogénicas y neutras, así como para estudiar los mecanismos reguladores del procesamiento del
RNA mensajero.
C0352 METILACIÓN DEL PROMOTOR DE SOCS1: NUEVO BIOMARCADOR DE BUEN
PRONÓSTICO EN GLIOMAS
1 2 1 2 1
Araceli García Martínez , Esperanza Irles Vidal , Cristina Alenda , Teresa Quintanar Verduguez , Pedro Moreno , María
1 3 3
Fuentes Baile , José Luis Soto Martínez , Víctor Manuel Barberá Juan
1
Hospital General Universitario de Alicante, ISABIAL-FISABIO Alicante (Alicante) España
2
3
Hospital General Universitario de Elche, ISABIAL-FISABIO (Alicante) España
1 Objetivos
El objetivo del presente trabajo fue la identificación de nuevos biomarcadores epigenéticos (metilación
de ADN) con utilidad clínica y su asociación con marcadores moleculares y de expresión ya
consolidadosde uso rutinario en la práctica clínica.
El estudio se realizó en una serie retrospectiva de 235 gliomas primarios humanos (212 incluidos en
parafina y 28 congelados) con la siguiente estadificación: 28 de grado II, 28 astrocitomas de grado III y
179 glioblastomas multifomes. La mediana de edad fue de 55 años. Se analizaron las mutaciones
IDH1_R132 e IDH2_R172 mediante secuenciación Sanger, la metilación en MGMT, RUNX3,
CACNA1G, IGF2, MLH1, NEUROG1, CRABP1, SOCS1 y CDKN2A mediante Methylation-Specific
Multiplex Ligation-Dependent Probe Amplification (MS-MLPA) y la expresión proteica de TP53 y el
índice de proliferación ki67 por inmunohistoquímica. Para el análisis estadístico se usaron el Test chi-
cuadrado y el de Fisher. La supervivencia global fue analizada mediante curvas Kaplan-Meier.
3 Resultados
SOCS1 se asoció con la metilación en MGMT (p=0.021), con las mutaciones en IDH1 (p<0.001), con
edades tempranas (p<0.001) y con bajo grado tumoral (p<0.001). Además, el perfil definido como
pacientes más jóvenes (edades ≤mediana) con metilación de SOCS1 en su tumor demostró tener un
valor pronóstico independiente (p<0.001), considerando tanto la cohorte completa, como una
subcohorte seleccionada de largos supervivientes (>36 meses).
4 Conclusiones
La hipermetilación en SOCS1 podría ser un marcador de buen pronóstico. Para la validación de este
potencial marcador se precisan de estudios retrospectivos confirmatorios independientes, así como de
estudios prospectivos.
C0358 SÍNDROME DE CÁNCER DE MAMA Y OVARIO HEREDITARIO: EXPERIENCIA DE
UNA UNIDAD DE CONSEJO GENÉTICO EN CÁNCER FAMILIAR
Gisela Urgel Reig, Noemí Tuset Der-Abrain, Xavier Gómez Arbonés, Maria Antonia Salud Salvia
Hospital Universitari Arnau de Vilanova y Institut de Recerca Biomèdica Lleida (Lleida) España
1 Objetivos
Desde 2007, el Servicio de Oncología Médica de nuestro hospital ha contado con la Unidad de
Consejo Genético en Cáncer Familiar (UCGCF), encargada de valorar a las familias con historia
familiar y personal de cáncer con sospecha de una predisposición hereditaria.
Objetivos principales:
1. Describir si los pacientes visitados en nuestra UCGCF con mutaciones en los genes BRCA1/2 se
adhieren a las medidas de seguimiento y prevención establecidas a día de hoy.
2. Valorar la asociación de los distintos fenotipos de cáncer de mama (CM) entre los pacientes
portadores de mutaciones en BRCA1/2 y visitados en nuestra UCGCF.
El proyecto ha consistido en la realización de un análisis descriptivo de 369 pacientes visitados en la
UCGCF desde 2007 hasta mayo 2014 cuya historia personal y/o familiar está relacionada con el
Síndrome de Cáncer de Mama y Ovario Hereditario, con la obtención de datos epidemiológicos y de un
análisis cuantitativo de los distintos fenotipos de CM entre los pacientes portadores de mutaciones en
BRCA1/2.
3 Resultados
Entre los resultados más relevantes se observa:
1. Los pacientes portadores de mutaciones en BRCA1/2 realizan seguimiento mediante técnicas de
diagnóstico por la imagen en un 75-81% y se han sometido a medidas de reducción del riesgo para el
cáncer de ovario mediante salpingooforectomía bilateral profiláctica un 81-88%.
2. El 28,84% de los pacientes diagnosticados de CM triple negativo presentaban mutaciones en
BRCA1 vs 4,71% presentaban un fenotipo de CM no triple negativo.
4 Conclusiones
1. La mayoría de pacientes con mutaciones en BRCA1/2 visitados en la UCGCF se adhieren
correctamente a las medidas de seguimiento y prevención establecidas a día de hoy.
2. Los pacientes con CM triple negativo tienen un riesgo 8,2 veces superior de presentar una mutación
patogénica en BRCA1 que el resto de fenotipos de CM, tendencia similar observada en estudios
previos.
C0359 DETECCIÓN DE REORDENAMIENTOS GENÓMICOS EN LOS GENES
BRCA1/BRCA2 MEDIANTE NGS.
María José Roca Cervera, Lucía Pérez Cabornero, Vanesa Felipe Ponce, Rubén Pérez De la Fuente, Elena Mata
Gómez, Yolanda Moreno Sáez, Mari Luz Bellón Robles, Lola Arocas Castillo, Celia Buades, Sergio Lois, Jaime Garcia,
Victoria Oviedo, Marta Vázquez, Diana Valero Hervás, Sonia Santillán
1 Objetivos
Mutaciones germinales en los genes BRCA1 y BRCA2 están asociadas a cáncer de mama y ovario
hereditario (CMOH). Además de variantes de un solo nucleótido y pequeñas inserciones/deleciones, se
ha descrito que grandes reordenamientos genómicos (LGRs) son responsables de una proporción
significativa de casos con CMOH (1-27% de los casos, dependiendo de la población estudiada). Hasta
la fecha, la detección de LGRs ha estado basada en la utilización de una tecnología complementaria
como es el MLPA. El objetivo de este estudio ha sido validar una única herramienta bioinformática que
fuese capaz de detectar todo el espectro de mutaciones asociado a los genes BRCA.
Se ha desarrollado un algoritmo bioinformático propio, denominado CNid (Copy Number Identification),
basado en la utilización de NGS, con el sistema de captura SureSelect(Agilent) y la plataforma
MiSeq(Illumina). Este algoritmo es capaz de identificar LGRs, en base a la profundidad de lectura
(depth) en comparación con un pool de muestras control. La validación de este método se realizó
seleccionando 13 muestras de CMOH, MLPA positivas, incluyendo desde deleciones de un único exón
hasta deleciones completas del gen y mosaicos.
3 Resultados
Este proceso nos permitió estimar la sensibilidad y especificidad del método establecidas en un 100%
y un 93.8% respectivamente. La técnica CNid validada fue aplicada prospectivamente en 178
pacientes con sospecha de CMOH (99 casos con las dos metodologías CNid+MLPA, y 79 casos con
sólo CNid). Se detectaron 2 grandes deleciones en BRCA1, 5 falsos positivos (debido a que el límite
inferior de detección se ha establecido para detectar mosaicos) y ningún falso negativo. Todas las
LRGs detectadas fueron confirmadas mediante MLPA(7/178).
4 Conclusiones
La estrategia basada en NGS y CNid permite reducir el tiempo y los costes al tener que validar
mediante MLPA solo un 3,95% de los casos frente al 100% de los casos con la metodología
tradicional.
C0361 NUEVA MUTACIÓN EN EL EXÓN 13 DEL GEN BCR QUE INTERFIERE EN LA
CUANTIFICACIÓN DEL GEN DE FUSIÓN BCR-ABL1
1 2 3
Isabel Vallcorba Gomez del Valle , Elena Doblaré Higuera , Rafael Ramos Férnandez de Soria , Patrocinio Algara
4 5 2 5
Plana , Marta Segovia Amaro , Emilio Doblaré Castellano , Pablo Lapunzina Badia
1
Hospital Infanta Cristina, Genética Badajoz (Badajoz) España
2
Servicio de Inmunología y Genética. Hospital Infanta Cristina (Badajoz) España
3
Servicio de Hematología Hospital Infanta Cristina (Badajoz) España
4
Servicio de Genética Hospital Virgen de la Salud (Toledo) España
5
INGEMM Hospital La Paz (Madrid) España
1 Objetivos
La leucemia mieloide crónica es una neoplasia mieloprliferativa caracterizada por la presencia del gen
de fusión quimérico BCR-ABL1. La monitorización de este gen quimérico se considera imprescindible
en el seguimiento de los pacientes.
El objetivo de este trabajo es reportar una nueva mutación en el gen BCR que dificulta el seguimiento
de la enfermedad y diseñar una herramienta para la monitorización adecuada de la evolución
y tratamiento del paciente.
Paciente de 16 años con LMC estudiado con técnicas de citogenética convencional y molecular, PCR
cualitativa, PCR cuantitativa en tiempo real y secuenciación.
3 Resultados
El paciente presenta un cariotipo con translocación t(9;22;16) y un FISH también atípico con pérdida
del gen recíproco ABL1-BCR.
La PCR cualitativa identifica un tránscrito major b2a2
La PCR cuantitativa con kit comercial revela un IS(estandar internacional) de 0.41% y con primers
consenso (Europe against cancer) un IS de 50.7%. La inconsistencia de los resultados sugiere la
existencia de alguna variante, que se confirma con secuenciación sanger.
La secuenciación bidireccional del fragmento amplificado en la PCR cualitativa pone de manifiesto la
existencia de dos variantes; una ya descrita (Meissner 1988), presente en aproximadamente el 30% de
la población europea y una variante nueva: C>G en posición 14 anterior al punto de unión BCR-ABL1,
en el centro del primer de consenso para la PCR cuantitativa.
A partir de este resultado se diseño un primer complementario de las dos variantes que se sustituyó al
primer forward de consenso sin otras modificaciones en la técnica. Con esta aproximación se obtiene
un valor de IS de 157% en la muestra de diagnóstico. Este resultado indica la idoneidad de la
aproximación, que se utilizará en el seguimiento del paciente.
4 Conclusiones
El caso presentado nos hace concluir la necesidad de recurrir a cualquier aproximación técnica antes
de renunciar al seguimiento de los pacientes.
C0374 TASA DE MUTACIONES EN GENES BRCA 1 Y 2 EN PACIENTES DE ALTO RIESGO
DE CANCER DE MAMA/OVARIO HEREDITARIO
1 2 1 1
Alejandro Mosquera Rey , Laura Vazquez , Maria Montserrat Rodriguez Pedreira , Isidoro Lopez Baltar , Berta
1 3 1
Rodríguez Sanchez , Iria Gonzalez Vasconcellos , Jose Luis Fernández García
1
Hospital Teresa Herrera, Complexo Hospitalario Universitario A Coruña (A Coruña) España
2
Universidade de A Coruña (A Coruña) España
3
Inibic, Fundación Profesor Novoa Santos (A Coruña) España
1 Objetivos
Un 5-10% de los casos de cáncer de mama presenta un componente hereditario mendeliano. Se han
identificado dos genes de alta penetrancia implicados en el síndrome de cáncer de mama/ovario
hereditario, BRCA1 (17q21) y BRCA2 (13q12). El riesgo acumulado para cáncer de mama es del 52%
para portadoras de mutación en BRCA1 y 47% para portadoras de mutación en BRCA2. El riesgo para
cáncer de ovario se estima en 22% y 18%, para portadoras de mutaciones en BRCA1 y BRCA2,
respectivamente (Milne et al., 2008).
La mutación R71G c.211 G>A, que deriva en un cambio de aminoácido de Arginina a Glicina en el
extremo 3´del exón 5 del gen BRCA1, está descrita como mutación fundadora en el noroeste de la
península ibérica.
Nuestro objetivo es la estimación de la tasa de mutaciones en BRCA1 y BRCA2 detectada en una
población de alto riesgo de cáncer de mama/ovario hereditario atendida en nuestro centro.
Las pacientes a estudiar son seleccionadas mediante los criterios clínicos de inclusión aprobados en
nuestro hospital. Se secuenciaron los genes BRCA1 y 2 mediante el kit BRCA MASTR (Multiplicom) y
la plataforma Miseq (Illumina).
3 Resultados
Se estudiaron 167 familias. Se han encontrado 14,97% de VOUS (variantes de significado incierto) y
en el 20,36% se han hallado variantes patogénicas.
La mutación c.211A>G (o R71G) en BRCA1 ha sido detectada en el 11,31% y representó el 56% del
total de mutaciones identificadas en BRCA1 y 2.
4 Conclusiones
El estudio confirma la importancia en nuestro medio de la mutación R71G, que comprende más de la
mitad de las mutaciones encontradas. En consecuencia, planteamos que, dada su relativa simplicidad
de determinación, debería estimarse el coste/beneficio del estudio de la R71G en pacientes de riesgo
medio y bajo en nuestra población.
C0376 CANCER GASTRICO Y BRCA2. UN NUEVO DESAFÍO CLÍNICO DERIVADO DE LAS
TÉCNICAS DE SECUENCIACIÓN MASIVA
1 2 2 2 2
María Camila Armirola , Saoud T. Swafiri Swafiri , Rosa Riveiro Alvarez , Camilo Velez , Jesus Gallego Merlo , Miguel
2 2
Angel Martinez Lopez , Isabel Lorda Sanchez
1
Universidad de los Andes (Bogota) Colombia
2
Fundación Jímenez Diáz Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
El uso de paneles de cáncer aumenta la posibilidad de encontrar alteraciones en genes no claramente
relacionados hoy por hoy con el cáncer más frecuentemente observado en la familia. Las mutaciones
de BRCA2 están asociadas a un riesgo elevado de cáncer de mama y ovario, pero también están
relacionadas a otros tipos de neoplasias de una manera menos evidente. El objetivo de este estudio es
caracterizar las familias con variantes en BRCA2 y cáncer gástrico.
Se realizó una búsqueda retrospectiva de familias con variantes en BRCA2 registradas en nuestro
hospital en el periodo 2012/2016. Se seleccionaron aquellas que cumplieran con los criterios del
International Gastric Cancer Linkage Consortium (IGCLC) para cáncer gástrico familiar que incluyen:
≥2 parientes con cáncer gástrico y uno de ellos diagnosticado ≤50 años, o ≥3 parientes con la
enfermedad a cualquier edad. Se excluyeron los casos que presentaran ≥1 variante patogénica o
probablemente patogénica en otro gen.
3 Resultados
Se encontraron 67 familias portadoras, de las cuales 8 tenían ≥1 antecedente de cáncer gástrico(CG).
Tras el filtrado, 2 cumplían criterios de inclusión. La primera familia tenía 3 parientes afectos de CG en
dos generaciones, uno de ellos con CG de tipo difuso. En esta familia, se encontró una deleción de 3
bases que conservaba el marco de lectura y no estaba reportada anteriormente en la literatura. La
segunda familia tenía 2 miembros con CG y uno de ellos de tipo intestinal, y adicionalmente, 2 casos
de cáncer de mama. En esta familia se encontró un cambio puntual no reportado anteriormente.
4 Conclusiones
El hallazgo de familias con criterios de cáncer gástrico familiar portadoras de cambios en BRCA2 abre
la posibilidad para futuros estudios que evalúen minuciosamente la magnitud de la asociación entre el
cáncer gástrico y este gen, y su posible repercusión en el asesoramiento genético.
C0400 HETEROGENEIDAD INTRACLONAL EN LACTANTE DE 28 DÍAS CON LEUCEMIA
LINFOBLÁSTICA AGUDA (LLA)
1 2 3 3
Manuela Fernandez , María Baro Fernandez , M. Liz Paciello Coronal , Teresa Cedena Romero , M. José Gómez
4 4 4 4 4
Rodríguez , Paloma de Pablos Romero , Miguel Fernandez Navas , Isabel Padilla Barrio , M. Luisa Martín Ramos
1
Hospital 12 de Octubre, Servicio de Genética Madrid (Madrid) España
2
S. Pediatría. H. 12 de Octubre (Madrid) España
3
S. Hematología. H. 12 de Octubre (Madrid) España
4
S. de Genética. H. 12 de Octubre (Madrid) España
1 Objetivos
¿La heterogeneidad clonal detectada en nuestro paciente tiene un origen intraútero?
Lactante de 30 días con lesiones violáceas, hiperleucocitosis (152000 leucocitos) y 90% de blastos en
sangre periférica. El aspirado medular confirma el diagnóstico de leucemia linfoblástica aguda (LLA) y
el inmunofenotipo es definido como LLA proB con expresión de CD15. El estudio genético se realiza
según metodología estándar tras técnica directa y cultivo de 24 horas sin mitógenos. En la historia
clínica no hay recogidos casos de cánceres familiares.
3 Resultados
El análisis de 20 células en metafase mostró el siguiente cariotipo: 46,XY,t(5;15)(p15;q11)[9]/
48?51,XY,idem,+14,+21,+22[5cp]/46,XY[6]. La FISH con diferentes sondas de ADN (Vysis) confirmó
las alteraciones detectadas y descartó el reordenamiento del gen MLL.
4 Conclusiones
Sólo del 2 al 5% de todas las leucemias infantiles son descritas en lactantes, siendo las alteraciones
más recurrentes el reordenamiento del gen MLL y t(12;21). El hallazgo de t(5;15) observada en nuestro
caso es inusual y representaría el sexto recogido en la literatura. Además, nuestro paciente presentó
alteraciones adicionales que dieron origen a una nueva línea clonal. Dos hechos relevantes
caracterizan nuestro caso: 1. Lactante de 28 días, no expuesto a ningún agente tóxico externo, pero sí
a factores tóxicos, químicos o ambientales adquiridos a través de la madre. 2. La singularidad de este
caso viene marcada por la evolución clonal observada al diagnóstico y no descrita previamente en la
literatura, lo que muestra una enfermedad genéticamente evolucionada. Ambos hechos demostrarían
un origen intraútero de una enfermedad genéticamente compleja. La patogénesis de las leucemias con
origen intraútero quedará definida con mayor precisión con el estudio de series de pacientes
homogéneos y la utilización de nuevas tecnologías (NGS, GWAS, Chip Seq...)
C0402 ESTUDIO DE LA DINÁMICA DE ADQUISICIÓN DE MUTACIONES EN DOS CASOS
DE NEOPLASIA HEMATOLÓGICA EN CÉLULAS DEL DONANTE POST-TRASPLANTE
ALOGÉNICO DE PROGENITORES HEMATOPOYÉTICOS MEDIANTE SECUENCIACIÓN
DEL EXOMA COMPLETO.
1 2 3 3 4
Julia Suárez González , Carolina Martínez Laperche , Mi Kwon , Gabriela Rodríguez Macías , Angela Figuera , Antonio
5 6 3 3 7 5 3
Balas , Nerea Martínez , Pascual Balsalobre , David Serrano , Miguel Angel Piris , Jose Luis Vicario , Jorge Gayoso ,
3 3
Jose Luis Díez , Ismael Buño
1
Instituto de Investigación Sanitaria Gregorio Marañón. Unidad de Genómica Madrid (Madrid) España
2
H.G.U. Gregorio Marañón (Madrid) España
3
4
Hospital Universitario La Princesa (Madrid) España
5
Centro Nacional de Transfusiones (Madrid) España
6
Genómica del Cáncer, IDIVAL (Santander) España
7
Hospital Marqués de Valdecilla (Santander) España
1 Objetivos
La transformación leucémica de las células del donante post-trasplante alogénico de progenitores
hematopoyéticos(alo-TPH) proporciona un modelo in vivo para el estudio de la leucemogénesis.
Presentamos dos casos en los cuales se realizó la secuenciación del exoma completo en médula
ósea(MO) del receptor post-alo-TPH, para estudiar la dinámica de aparición de mutaciones que
preceden al desarrollo de una neoplasia hematológica.
1.Mujer, 43 años con leucemia linfoblástica-B(LLA)t(1;19),16 meses post-trasplante de cordón umbilical
desarrolló una leucemia mieloide aguda(LMA),46,XX,NPM1+en las células del donante.
2.Varón, 63 años con linfoma del manto,57 meses post-trasplante alogénico de hermano HLA-idéntico
desarrolló un síndrome mielodisplásico(SMD),45,XX,-7,del(12)(p12)en las células del donante.
Se analizó el exoma(SureSelect-XTHuman-exon50Mb)por secuenciación masiva(Hiseq2000)de
muestras de los donantes y de muestras de MO del receptor post-alo-TPH.Alineamiento
GRCh37/hg19(caso1)GRCh38/hg38(caso2).
Se compararon los exomas de las muestras post-trasplante con el exoma de las muestras de donantes
para identificar las variantes adquiridas.Se seleccionaros las variantes no-sinónimas detectadas en
regiones-codificantes de genes relacionados con leucemia y fueron evaluadas con
SIFT,Polyphen2.0,MutationTaster.
3 Resultados
El estudio del exoma reveló la aparición progresiva de mutaciones probablemente relacionadas con el
desarrollo de leucemia.
Se detectaron alteraciones en ambos donantes que podrían estar relacionadas con el desarrollo de
leucemia.
Se detectaron mutaciones somáticas en genes con funciones establecida en vías de señalización y se
identificaron mutaciones en subclones leucémicos que desaparecen tras la quimioterapia, así como la
adquisición de nuevas mutaciones en subclones resistentes.
4 Conclusiones
Se observa un proceso secuencial de expansiones clonales, promovidas por la adquisición de
mutaciones somáticas en las células del donante.
La causa de aparición de neoplasia en células del donante parece ser multifactorial; en estos casos,la
infusión de progenitores con un potencial pre-leucémico, en un nicho con toxicidad residual y vigilancia
immune disminuida, parecen tener un papel importante.
El estudio de más casos ayudaría a entender este proceso y a la detección de nuevas mutaciones
implicadas en LMA.
C0406 SÍNDROMES MINORITARIOS DE PREDISPOSICIÓN HEREDITARIA AL CÁNCER:
ACTUALIZACIÓN DE GENES ASOCIADOS
Elia Grau Garcés, Alex Teule Vega, Ares Solanes Cabús, Mónica Salinas Masdeu, Silvia Iglesias Casals, Matilde
Navarro García, Angela Velasco Gonzalez, Conxi Lázaro García, Sara González Romero, Gabriel Maria Capella
Munar, Joan Brunet Vidal
Institut Català d'Oncologia, España
1 Objetivos
Los síndromes minoritarios suponen un reto para los profesionales de salud tanto en su diagnóstico,
clínico y genético, como en el manejo de los individuos afectos y sus familiares.
Actualmente se está incorporando el uso de paneles multigenes para el estudio de los síndromes de
predisposición hereditaria al cáncer. Aun así, no se detecta la causa hereditaria del síndrome en todos
los casos. Los paneles permiten el análisis simultáneo de varios genes diana, aunque no detectan los
grandes reordenamientos.
Para el diagnóstico genético, es fundamental definir genes diana dependiendo de la historia familiar.
El objetivo es la actualización sobre los genes asociados a los principales síndromes minoritarios y
elaboración de material de soporte para el diagnóstico genético.
Revisión bibliográfica con 44 fuentes de información, tanto primarias como secundarias, incluyendo
artículos científicos (38), bases de datos (2), fuentes de información online (2) y libros de texto (2).
3 Resultados
Elaboración de tabla-guía con los genes asociados a melanoma familiar (CDKN2A/CDK4), cáncer de
páncreas familiar
(BRCA1/BRCA2/PALB2/MLH1/MSH2/MSH6/PMS2/CDKN2A/APC/STK11/ATM/PRSS1/VHL), cáncer
gástrico difuso hereditario (CDH1), síndrome de Cowden
(PTEN/SDHB/SDHC/SDHD/KLLN/PIK3CA/AKT1), síndrome de Li-Fraumeni (TP53), neoplasia
endocrina múltiple tipo 1 (MEN1) y tipo 2 (RET), GIST familiar
(KIT/PDGFRA/NF1/SDHA/SDHB/SDHC/SDHD), cáncer renal hereditario
(VHL/FLCN/FH/MET/BAP1/SDHB/SDHC/SDHD/PTEN) y cáncer de tiroides familiar
(RET/APC/PTEN/PRKAR1/WRN). Se incluye fenotipo y tipo de variantes genéticas asociados a cada
gen.
4 Conclusiones
Es importante que los profesionales de salud identifiquen correctamente a los pacientes con síndromes
minoritarios para poder beneficiarse de un asesoramiento genético adecuado. Existe una gran variedad
de paneles de genes, pero la elección de los genes diana debe venir condicionada por la historia
familiar, aumentando así la probabilidad de detectar mutación causal. Las mutaciones puntuales son
las responsables en la mayoría de los casos, pero se recomienda valorar el análisis de grandes
reordenamientos en los genes diana, si existe historia familiar sugestiva y no se ha detectado mutación
puntual.
C0408 ESTUDIO DE LA RELACIÓN FENOTIPO-GENOTIPO, FRECUENCIA Y ESPECTRO
MUTACIONAL DE LOS GENES APC Y MUTYH EN 600 CASOS DE POLIPOSIS
ADENOMATOSA
1 1 1 1 1 2
Sandra Tapial , Pablo Villaba Capilla , Daniel Parraga , Mirella Gallego , Nuria Carrizo , José Díaz-Tasende , Carlos
2 2 3 4 5 6 7
Marín , Inmaculada Salces , Juan de Dios García , Susana Hernando , David Marrupe , Luis Robles , José Perea ,
1 8
Montserrat de Miguel , Daniel Rueda
1
Laboratorio de Cáncer Hereditario. Servicio de Bioquímica. Hospital Universitario Doce de Octubre (Madrid) España
2
Servicio Aparato Digestivo. Hospital Doce de Octubre (Madrid) España
3
Hospital Príncipe de Asturias (Madrid) España
4
Hospital de Alcorcón (Madrid) España
5
Hospital de Móstoles (Madrid) España
6
Servicio de Oncología Médica. Hospital Doce de Octubre. (Madrid) España
7
Servicio de Cirugia Aparato Digestivo. Hospital Doce de Octubre (Madrid) España
8
Hospital 12 de Octubre Madrd (Madrid) España
1 Objetivos
La poliposis adenomatosa es una entidad clínica caracterizada por la aparición de múltiples adenomas
colónicos y un mayor riesgo de cáncer colorrectal. Un porcentaje de los casos presenta base genética,
explicándose por mutaciones deletéreas en el gen APC (Poliposís Adenomatosa Familiar, OMIN
#175100) o por mutaciones bialélicas en MUTYH (Poliposis Asociada a MUTYH, OMIM #608456). En
el presente trabajo se estudiará la frecuencia, el espectro mutacional y la relación fenotipo-genotipo de
las mutaciones en los genes APC y MUTYH en casos diagnosticados de poliposis adenomatosa en
población española.
Se estudió la presencia de las mutaciones MUTYH más frecuentes (c.536A>G, p.(Tyr179Cys) y
c.1187G>A, p.(Gly396Asp)) en 600 casos diagnosticados de poliposis adenomatosa. En aquellos
casos con una sola mutación se estudió el resto del gen. En pacientes con poliposis más agresivas o
con antecedentes familiares en primer grado de cáncer colorrectal o poliposis, se estudió el gen APC
completo. El cribado de las mutaciones frecuentes MUTYH se realizó mediante high resolution melting.
El estudio de los genes completos incluye grandes reordenamientos mediante MLPA y secuenciación
mediante NGS y/o secuenciación Sanger.
3 Resultados
Se detectaron mutaciones patogénicas en 85 pacientes (14.2%): 33 casos APC (5.5%) y 52 mutados
MUTYH (8.7%), 30 de estos (5.0%) portadores de mutaciones bialélicas. Las mutaciones en el gen
APC se localizaron a lo largo de todo el gen, con las mutaciones con fenotipos más agresivos en el
llamado mutation cluster region. Las relaciones fenotipo-genotipo se ajustaron a lo publicado en
anteriores estudios, correlacionado la tasa de detección de mutación con el mayor número de
adenomas detectados y la menor edad al diagnóstico.
4 Conclusiones
Nuestros resultados coinciden con los obtenidos previamente por otros autores. El conocimiento de las
frecuencias mutacionales y relaciones genotipo-fenotipo permiten elaborar guías clínicas para estudio
genético ajustadas a nuestra población.
C0418 LA DETECCIÓN DE UNA VARIANTE PROBABLEMENTE BENIGNA
DESENMASCARA UNA DELECIÓN ARTEFACTUAL EN EL GEN AIP
1 1 2 1
Julio Torres González , Javier López Montiel , Sara Franco Freire , Lucas David Andrés Garrido , Sandra Carmona
1 1 1 1 1
Tamajón , Carmen Palma Milla , Carmen Torres Fernández , José Miguel Lezana Rosales , Carlos Sánchez Linares ,
1 1
Carmen Benito López , Juan López Siles
1
C.B.M. Genetaq Málaga (Málaga) España
2
1 Objetivos
Determinar una causa genética al diagnóstico de hiperparatiroidismo con hiperplasia de tres glándulas
en una paciente.
Estudio mutacional en el gen MEN1 mediante secuenciador MiSeq (Illumina). Posterior estudio de
grandes deleciones y duplicaciones de los genes MEN1 y AIP mediante MLPA (Multiplex Ligation-
Dependent Probe Amplification) en el paciente probando y algunos familiares. Confirmación de los
resultados mediante secuenciador ABI-3130XL (Applied Biosystem), de un fragmento correspondiente
al exón 1 y zonas flanqueantes no codificantes del gen AIP. Posterior estudio familiar y confirmación de
una deleción en el gen AIP detectada mediante MLPA.
3 Resultados
La secuenciación inicial del gen MEN1 no mostró variantes patogénicas. El estudio por MLPA muestra
un descenso de una de las sondas correspondiente al exón 1 del gen AIP (la sonda hibrida unos
nucleótidos corrientes arriba del codón de inicio ATG), perfil compatible con una deleción en
heterocigosis. Este perfil fue observado en 6 de los 7 miembros de la familia estudiados, no
presentando co-segregación entre la supuesta deleción y la clínica. Por ello, se procedió a secuenciar
la región de hibridación de la sonda que mostraba esta deleción. Estos resultados mostraron la
presencia de la variante considerada como probablemente benigna c.-35C>G en el gen AIP en los
pacientes que mostraban dicha deleción, y ausencia de la variante en el paciente que no la mostraba.
4 Conclusiones
La caída de señal detectada en una de las sondas que hibrida en la región 5ÙTR del gen AIP es
probablemente debida a la presencia del cambio c.-35C>G, que provoca una pérdida de apareamiento
de la sonda con esta región. Por tanto, el resultado obtenido de la técnica MLPA es artefactual. La
influencia de este SNP en la sonda no había sido descrita previamente.
Se resalta la necesidad de comprobar siempre un resultado positivo por varias metodologías distintas
para evitar posibles errores de diagnóstico.
C0430 IMPORTANCIA DEL ESTUDIO GENÉTICO FAMILIAR EN PACIENTES CON
VARIANTES GERMINALES EN C/EBPA CANDIDATOS A TRASPLANTE DE
PROGENITORES HEMATOPOYÉTICOS.
Diego Carbonell Muñoz, Carolina Martínez-Laperche, Julia Suárez-González, María Chicano Lavilla, Gabriela
Rodríguez-Macías, Mi Kwon, Jorge Gayoso Cruz, José Luis Díez-Martín, Ismael Buño Borde
Hospital General Universitario Gregorio Marañón Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
El gen CCAAT/enhancer binding protein alpha (C/EBPα) codifica para un factor de transcripción que
interviene en la proliferación y maduración celular. Existen variantes somáticas y germinales en
C/EBPα con implicación pronóstica en la leucemia mieloide aguda (LMA). El objetivo de este estudio
fue analizar y caracterizar variantes de C/EBPα y revelar su implicación en la selección de donantes
familiares para un trasplante hematopoyético.
Se seleccionaron 23 pacientes de forma consecutiva con diagnóstico de LMA. Se analizó mediante
PCR convencional y secuenciación Sanger el gen en células tumorales (médula ósea) y no tumorales
(saliva y linfocitos T en remisión de la enfermedad). Para analizar a los donantes se utilizó sangre
periférica. La clasificación de las variantes se realizó en base a los criterios de The American College
of Medical Genetics and Genomics (ACMG) 2015, mediante la elaboración de un score que implicó la
búsqueda bibliográfica de cada variante y el uso de predictores (Polyphen-2, MutationTaster y SIFT).
3 Resultados
Se encontraron 9 variantes diferentes en el 65,2% de los pacientes (15/23). Cuatro fueron germinales:
dos benignas (p.T230T; p.H191H), una probablemente benigna (p.A134A) y una de significado incierto
(p.H195_P196dup). Cinco fueron somáticas: dos patogénicas (p.T60Rfs; p.H24Afs) y tres
probablemente patogénicas (p.F208L; p.L220P; p.I68Lfs*41). Se realizó el estudio familiar en los dos
casos con la variante p.H195_P196dup candidatos a trasplante hematopoyético ya que se trata de una
alteración germinal de significado incierto. Se eligieron como donantes a aquellos que no presentaban
la variante.
4 Conclusiones
La estratificación de variantes y el estudio familiar es crucial para una elección de donante apropiada,
para ello, es necesario el correcto análisis de las variantes y una exhaustiva búsqueda bibliográfica.
Sería recomendable el análisis de otros genes relacionados con predisposición familiar en neoplasias
mieloides en los posibles donantes si se encuentran mutados en el paciente.
C0435 ALTERACIONES EN EL NÚMERO DE COPIAS EN LEUCEMIA LINFOBLÁSTICA
AGUDA INFANTIL SIN ALTERACIONES CITOGENÉTICAS
1 2 2 3
Isabel Vallcorba Gomez del Valle , Marta Segovia Amaro , Teresa López Jiménez , Josefa Melero Ruiz , Javier Lara
3 4 2 2 5
Laranjeira , Jose Manuel Vagace valero , Julian Nevado Blanco , M. Angeles Mori Alvarez , Ana Sastre Urgelles ,
3 2
Emilio Doblaré Castellano , Pablo Lapunzina Badia
1
Hospital Infanta Cristina, Genética Badajoz (Badajoz) España
2
INGEMM Hospital La Paz (Madrid) España
3
Servicio de Inmunología y Genética Hospital Infanta Cristina (Badajoz) España
4
Servicio de Hematología Hospital Infanta Cristina (Badajoz) España
5
Servicio Hemato-Oncología Infantil (Madrid) España
1 Objetivos
La mayoría de los casos de leucemia linfoblástica aguda (LLA) presentan alteraciones genéticas que
definen las distintas entidades de la enfermedad. Estas anomalías afectan a funciones relacionadas
con la leucemogénesis y tienen una implicación conocida en el pronóstico, respuesta al tratamiento y
riesgo de recaída. Además son también una herramienta útil para el seguimiento de la enfermedad,
analizando, en los días indicados en los protocolos, la presencia o ausencia de las alteraciones
encontradas en el momento del diagnóstico. Sin embargo, existen casos en los que la citogenética
inicial no muestra alteraciones por lo que valoraremos el uso de técnicas con mayor resolución como
son los arrays de Hibridación Genómica Comparada (array-CGH) en la detección y caracterización de
alteraciones en pacientes sin alteraciones citogenéticas y su utilización en el seguimiento de la
enfermedad.
Presentamos una serie de 52 leucemias agudas infantiles diagnosticadas entre 2006 y 2016,
estudiadas en el momento del diagnóstico con técnicas de citometría de flujo, cariotipo, FISH de las
alteraciones de reconocido valor pronóstico y array CGH con OncoHematoarray, custom array de
60.000 oligonucleótidos dirigidos específicamente a más de 320 genes/loci relacionados con
neoplasias hematológicas
3 Resultados
De los 52 casos de LLA 13 ( 6 LLA-B y 7 LLA-T) presentaban al diagnóstico cariotipo normal y FISH
sin alteraciones. En 12 de ellos se encontraron alteraciones en el estudio de array que pudieron
utilizarse en el seguimiento de la enfermedad con sondas FISH.
4 Conclusiones
En el 92% de los pacientes sin alteraciones genéticas detectadas con técnicas convencionales se han
utilizado con éxito las CNVs encontradas en el estudio de array para el seguimiento de la enfermedad
con técnicas de FISH.
Estos resultados confirman la utilidad del array CGH en el estudio de la LLA, al menos en los casos sin
alteraciones detectadas con técnicas tradicionales
C0467 IDENTIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE UNA REPETICION TIPO ALU EN
BRCA2 QUE CAUSA CANCER DE PROSTATA EN UNA FAMILIA ESPAÑOLA
1 2 2 2 2
Veronica Barca Tierno , Matías Morín Rodríguez , Luciana Santos , Pablo Marcos Cava , Carmen Guillén Ponce ,
2
Miguel Ángel Moreno Pelayo
1
Hospital Ramón y Cajal, Servicio de Genética Madrid (Madrid) España
2
1 Objetivos
Mutaciones en la línea germinal de los genes BRCA1 y BRCA2 están asociados con un riesgo
incrementado a desarrollar cáncer de mama y ovario al igual que un riesgo incrementado de padecer
otro tipo de cánceres. El estudio molecular de ambos genes permite la identificación de SNP o CNV.
Sin embargo, la búsqueda de repeticiones tipo Alu no se realiza de manera rutinaria, aunque sí están
asociadas a este tipo de neoplasias. El objetivo de este trabajo fue la identificación y caracterización de
una repetición tipo Alu encontrada en una familia española con historia familiar de cáncer de mama y
ovario.
Amplificación mediante PCR multiplex (BRCA MASTR Dx Multiplicom) de los genes BRCA1 y BRCA2 y
secuenciación masiva paralela (Miseq, Illumina). La identificación de la repetición tipo Alu, se llevo a
cabo mediante análisis de fragmentos y posterior genotipado (ABI3130). La caracterización se realizó
mediante amplificación por PCR y posterior secuenciación Sanger (ABI3130).
3 Resultados
Hemos identificado y caracterizado una variante en heterocigosis de significado patogénico
c.5007_5008ins174 localizada en el exón 11 del gen BRCA2 en un paciente con cáncer de próstata. La
variante identificada es una inserción que corresponde a una repetición tipo Alu (AluYb8BRCA2) de
aproximadamente 174pb.
4 Conclusiones
La introducción de NGS en el campo del diagnóstico genético ha supuesto un avance para la
identificación de nuevos genes y mutaciones causantes de enfermedades hereditarias. Pero este tipo
de inserciones no son, a priori, capaces de ser detectadas mediante esta tecnología.
Empleando técnicas clásicas, hemos identificado y caracterizado una inserción que corresponde a una
repetición tipo Alu en la región codificante de BRCA2 en una familia española. Esta inserción
provocaría un desplazamiento en el marco de lectura que supondría la generación de un codón
prematuro de parada y la consiguiente proteína truncada lo que podría estar asociado con un
incremento en la oxidación del DNA.
C0469 UTILIDAD DE LOS LÍQUIDOS BIOLÓGICOS EN EL ESTUDIO DE ADN TUMORAL
CIRCULANTE (ADNTC) EN CÁNCER DE PULMÓN
Clara Pérez Barrios, Miguel Barquin Del Romo, Marta Colmena Garcia, Lidia González Jiménez, Mariano Provencio,
Atocha Romero
Fundación Biosanitaria Puerta de Hierro Majadahonda (Madrid) España
1 Objetivos
La biopsia líquida en cáncer de pulmón resulta interesante para analizar mutaciones de sensibilidad y
resistencia a fármacos inhibidores de tirosina kinasa (TKIs). Sin embargo, su baja concentración en
sangre supone una limitación metodológica importante.
El objetivo de este estudio es valorar la utilidad de los líquidos biológicos en el estudio de estos
biomarcadores.
Se realizó un estudio del ADNtc en 5 muestras pareadas de sangre y líquido biológico (pericárdico,
pleural o cefalorraquídeo) en 5 pacientes a la progresión. En todos los casos se analizaron de forma
simultánea 2 mutaciones en EGFR: una mutación de sensibilidad (p.L858R o p.E746_A750delELREA)
y una de resistencia (p.T790M) a TKIs.
La extracción de ADNtc se realizó utilizando el kit Maxwell® RSC ccfDNA (Promega). El estudio de las
mutaciones en EGFR se llevó a cabo mediante los siguientes ensayos Rare Mutation: p.T790M
(AHRSROS), p.L858R (AHRSRSV) y p.E746_A750delELREA (AHLJ0XO) en el sistema de PCR digital
QuantStudio® 3D (Applied Biosystems, South San Francisco, CA).
La comparación no paramétrica del número de copias de DNAtc mutado obtenido en cada tipo de
muestra se evaluó mediante el test Wilcoxon para muestras pareadas. El análisis estadístico se realizó
con el programa MedCalc v.11.2.1.0
3 Resultados
La mutación de sensibilidad se detectó en las 5 muestras de líquido y sólo en 3 muestras de sangre. La
mutación de resistencia p.T790M se identificó en 3 muestras de líquido y en 2 muestras de sangre. En
2 pacientes el análisis de esta mutación resultó negativo en ambas muestras.
La cuantificación de mutaciones en líquido fue superior a la de sangre en los 5 pacientes (p=0.0078).
4 Conclusiones
Los líquidos biológicos obtenidos a la progresión del tumor de pacientes con cáncer de pulmón
presentaron un mayor rendimiento a la hora de identificar mutaciones tumorales. Por tanto, la
disponibilidad en el laboratorio de líquidos biológicos puede resultar útil para el estudio de
biomarcadores.
C0485 EXPERIENCIA DE UN LABORATORIO DE GENÉTICA EN EL ANÁLISIS DE UN
PANEL DE 18 GENES PARA ESTUDIO DE CÁNCER GINECOLÓGICO HEREDITARIO
Amanda Herranz Cecilia, Oscar de Agustín Díez, Beatriz Hidalgo Calero, Evangelina Pestaña Molinero, Luis Izquierdo
Lopez, Alberta Belinchon Martinez, José Antonio López García-Asenjo
1 Objetivos
El cáncer de mama es el tipo de cáncer más frecuente en mujeres a nivel mundial. En España se
diagnostican unos 500.000 nuevos casos de cáncer al año de mama y 65.000 de ovario. De ellos entre
el 5-10% son hereditarios.
El objetivo de este trabajo es la evaluación retrospectiva de nuestra experiencia con un panel de
secuenciación masiva que analiza 18 genes relacionados con cáncer de mama y ovario hereditario.
Cohorte de 194 pacientes procedentes de Europa (la mayoría), américa latina y oriente medio.
Las muestras se analizaron por secuenciación masiva en plataforma Illumina, utilizando el kit TruSight
Cancer (Illumina) para el estudio de 18 genes asociados a aumento de riesgo de cáncer ginecológico:
ATM-BRCA1-BRCA2-BRIP1-CDH1-CHEK2-EPCAM-MLH1-MSH2-MSH6-NBN-PALB2-PMS2-PTEN-
RAD51C-RAD51D-STK11-TP53. MLPA de BRCA1, BRCA2 y la región 5´ de EPCAM. Variantes
patogénicas (P) y probablemente patogénicas (PP) se confirman por Sanger. La
clasificación/interpretación de las variantes se realiza siguiendo las indicaciones del ACMG. Se
informan las variantes P, PP y de significado incierto (VSI).
3 Resultados
Se identifican un total de 88 variantes entre P (7,2%), PP (2,1%) y VSI (28,9%). En 122 pacientes
(62,4%) no se identifican variantes P, PP o VSI.
4 Conclusiones
Los porcentajes de variantes P, PP y VSI son muy similares a los publicados por Susswein (1) (9% P +
PP; 20,4%-39,7% VSI, en función de la procedencia).
Se ha observado que las VSI se concentran en los genes descritos más recientemente y por lo tanto
menos estudiados, así como en las poblaciones no caucásicas. Se demuestra la importancia de los
estudios de cosegregación para la reclasificación de variantes, así como la participación en bases de
datos de variantes como ClinVar, con el fin de reducir el porcentaje de VSI en este tipo de estudios.
C0490 DPCR, UNA HERRAMIENTA DE DETECCIÓN DE MARCADORES TUMORALES DE
BAJA EXPRESIÓN
Belen Martinez Garcia, Kevin Salamanca, Belen Martinez Garcia, Alba Antunez, Esperanza Santiago, Ana Perez,
Antonio Gomez, Luis Javier Martinez
Genyo Granada (Granada) España
1 Objetivos
Es fundamental monitorizar una enfermedad sin utilizar técnicas agresivas. El uso de ARN libre en
sangre, en vesículas o en células abre la puerta al diagnostico no invasivo.
El éxito está en la especificidad de la técnica, la capacidad de detección y el tipo de muestra. La PCR
digital combinada con cebadores y sondas específicas se convierte en una herramienta muy eficaz.
El perfil de ARN de los biofluidos plantea numerosos desafíos. En sangre se ha descrito su presencia
tanto libres (cfRNAs) como confinados en membranas. También se ha descrito el problema que
plantean las RNasas e inhibidores de PCR.
Evaluamos la expresión de marcadores tumorales relacionados con la progresión del cáncer.
Recogida de muestras tumorales de pacientes metástasicos [pulmón(n=3), colon(n=8), próstata(n=4)] y
controles sanos(n=5) en tubos Tempus.
Extracción (<3h) mediante miRNeasy Serum de RNA total en suero. En sangre (7-30 días), Tempus
Spin RNA Isolation Kit. Se tomaron 100ng de RNA para las retrotranscripciones (SuperScript VILO).
Reacción de dPCR con distintas diluciones del cDNA (QuantStudio 3D Digital v2), con sondas TaqMan,
para el gen de interés(EpCAM, ATG5, PLCg2) y genes constitutivos (GAPDH, PGK1, HPRT1).
3 Resultados
En suero, el RNA circulante tumoral, está en un ratio más alto que el RNA circulante normal
comparado con sangre. Esto facilita la detección en suero de los marcadores tumorales seleccionados.
En todas las muestras observamos una relación entre marcadores (sangre/suero). Pero estos
resultados dependen del tratamiento y el origen de la muestra.
4 Conclusiones
El acceso y conservación de muestras de sangre para obtener ARN es más asequible que en suero.
La dPCR con sondas marcadas es una técnica muy robusta y específica, siendo mínima la desviación
entre réplicas.
En las muestras estudiadas es equivalente el estudio de marcadores genéticos en sangre y suero
aunque debemos aumentar el número de muestras para poder confirmar esta correspondencia.
C0507 CARACTERIZACIÓN DEL ESPECTRO MUTACIONAL DE LOS GENES BRCA1 Y
BRCA2 EN FAMILIAS DE ALTO RIESGO DE CÁNCER DE MAMA Y OVARIO
HEREDITARIO EN LA PROVINCIA DE MÁLAGA Y CARACTERIZACIÓN GENÉTICO-
POBLACIONALES DE ÉSTA CON RESPECTO A LA POBLACIÓN NACIONAL.
1 1 2 2
Javier Porta Pelayo , Jose Maria Porta Pelayo , Antonia Márquez Aragones , Bella Isabel Pajares Hachero , Ignacio
2 2 2 2 2
Moreno Pérez , Gema Durán Ogalla , Carolina Muriel López , Javier Pascual López , Marta Robles Lasarte , Nuria
2 2
Ribelles Entrena , Emilio Alba Conejo
1
Genologica Medica Malaga (Malaga) España
2
Hospital Virgen de la Victoria (Malaga) España
1 Objetivos
El objetivo fundamental del trabajo ha sido caracterizar el espectro mutacional de los genes BRCA1 y
BRCA2 en familias de alto riesgo de cáncer de mama y ovario hereditario (CMOH) en la provincia de
Málaga, así como definir las características genético-poblacionales de ésta con respecto a la población
nacional.
Se han estudiado 562 familias malagueñas con criterios clínicos de CMOH establecidos por la SEOM.
De cada caso índice se procedió a la secuenciación y MLPA de los genes BRCA1y BRCA2. Las
secuencias resultantes se compararon con las secuencias de referencia BRCA1:NM_007294;
BRCA2:NM_000059.
A partir de las secuencias se recogieron los datos de todas las variantes, desde patogénicas a
benignas. A partir de las primeras se han obtenido resultados de prevalencia y recurrencia en la
población de estudio y se ha realizado un estudio comparativo con las halladas en el territorio nacional.
A partir de las variantes no patogénicas se han realizado estudios de genética de poblaciones
mediante el análisis de las frecuencias haplotípicas de estos dos genes y su comparación con el resto
de población nacional. Además se ha estudiado el posible origen fundador de algunas de las
mutaciones más recurrentes.
3 Resultados
De las 562 familias estudiadas, 120 familias (21.3%) presentaron alguna mutación patogénica: 50
BRCA1+ (41.7%) y 70 BRCA2+ (58.3%), de las cuáles 11 mutaciones (9,2%) no habían sido
reportadas hasta la fecha. Además se han identificado 55 haplotipos para BRCA1 y 92 para BRCA2,
siendo algunos de ellos mayoritarios.
4 Conclusiones
Los resultados de mutaciones patogénicas reflejan claras diferencias respecto a otros trabajos
publicados en el territorio nacional, en parte debido a la existencia de un componente fundador
reflejado en algunas de las mutaciones más recurrentes. El estudio de los distintos haplotipos refleja
algunas diferencias claras con la población nacional y europea.
C0514 IDENTIFICACIÓN DE VARIANTES EN GENES DE MODERADA PENETRANCIA EN
CÁNCER DE MAMA/OVARIO HEREDITARIO (CMOH) MEDIANTE NEXT GENERATION
SEQUENCING (NGS). PILAR MARTÍNEZ-FDEZ (AUTOR PRESENTADOR DE LA
COMUNICACIÓN), SARA LOZANO, LAURA GARCÍA FDEZ, KRISTINA IBAÑEZ, ÁNGELA
DEL POZO, ELENA VALLESPIN, CINTHIA AMIÑOSO, ANA CARAZO Y JESÚS SOLERA.
1 1 1 2 2 3
Pilar Martínez , Sara Lozano , Laura García Fdez , Kristina Ibañez , Ángela Del Pozo , Elena Vallespin , Cinthia
1 1 1
Amiñoso , Ana Carazo , Jesús Solera García
1
INGEMM - Hospital La Paz, Oncogenética molecular Madrid (Madrid) España
2
Hospital La Paz, Servicio de Bioinformática, INGEMM (Madrid) España
3
Hospital La Paz, Genética Estructural y Funcional, INGEMM (Madrid) España
1 Objetivos
El CMOH es genéticamente complejo y heterogéneo, de etiología desconocida en muchos casos. Los
genes de elevada susceptibilidad explicarían menos de 2/3 de las familias de alto riesgo, lo que lleva a
proponer un modelo poligénico mediante combinación de variantes en otros genes de baja frecuencia y
moderado riesgo, clasificados en base a interacción con BRCA-1/BRCA-2 o participación en reparación
del ADN.
1. Identificación de mutaciones patológicas y variantes de significado desconocido (VSD) en

genes de baja frecuencia, pero moderado riesgo mediante NGS.
Análisis “in sílico” de la posible patogenicidad de VSD en la función proteica utilizando modelos
informáticos.
Se analizaron 408 pacientes CMOH mediante NGS (panel de diseño propio con genes relacionados
con cáncer hereditario). La tecnología de captura es SECAP EZ (Roche, Nimblegen) utilizando
plataforma MiSeq (Illumina). Datos de alineamiento y las diferentes variantes se visualizaron con el
programa IGV (Integrative Genomics Viewer).
Posteriormente, se analizaron las VSD utilizando herramientas informáticas: (Combined Annotation
Dependent Depletion (CADD)), Polyphen2, Sift y Mutation Assesor).
3 Resultados
Se detectaron 9 mutaciones patológicas en los genes analizados (panel ONCOv2-Roche), cinco de
ellas no descritas previamente: ATM (p.E2097X y c.4437-2A>C), BRIP1 (c.1702-1703delAA), MET
(c.939delG), EPAS1 (p.E838X).
La aplicación de las modelos bioinformáticos de predicción de patogenicidad indican que, de un total
de 40 VSD encontradas en los genes: CHEK2, ATM, PALB2, BRIP1, BARD1, RAD50, RAD51D,
CDH1, MET, NBN MLH1 Y MRE11A, 29 de ellas tendrían un carácter patogénico (72.5%), mientras
que en las otras 11 no (27.5%).
4 Conclusiones
-El análisis mediante NGS de genes de baja penetrancia y moderado riesgo en CMOH es clínicamente
relevante, aunque con frecuencia baja.
-Las variantes missense de significado desconocido en estos genes son más frecuentes (n=40, 9,8%)
que las mutaciones patológicas (n=9, 2.2%).
-Los modelos de predicción indicarían que la mayoría de estas VSD son probablemente patológicas.
C0517 UTILIDAD DE LA CARACTERIZACIÓN GENÉTICA DE LA LEUCEMIA
LINFOBLÁSTICA AGUDA INFANTIL
1 1 1 1 1 1
Adela Escudero López , Pilar Carrasco , Irene Gonzalo , Isabel Vallcorba , Elena Vallespín , Julián Nevado , David
2 2 1 2
Bueno , Berta González , Pablo Lapunzina , Antonio Pérez-Martínez
1
INGEMM-HOSPITAL UNIVERSITARIO LA PAZ MADRID (MADRID) ESPAÑA
2
Unidad de Hemato-Oncología Pediátrica - Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
1 Objetivos
La leucemia linfoblástica aguda tipo B (LLA-B) es la neoplasia más frecuente en la infancia y resulta de
la acumulación de numerosas alteraciones genéticas. De muchas de estas alteraciones no se conoce
su significado clínico y sólo se ha establecido el valor pronóstico de algunas de ellas como
aneuplpoidías o determinadas traslocaciones. Las técnicas de alta resolución como la secuenciación
masiva y los arrays-SNPs nos permiten identificar alteraciones genéticas asociadas a LLA-B de forma
rápida y eficiente con el objetivo de poder estratificar a los pacientes en diferentes subtipos genéticos
de importancia pronóstica y terapéutica
Se extrajo ADN de médula ósea de 23 pacientes con LLA-B con edades comprendidas entre 1-13
años. Se llevó a cabo de manera retrospectiva el estudio de variaciones en el número de copias
mediante el kit CytoSNP-850K de Illumina así como la identificación de mutaciones puntuales en
regiones exónicas mediante secuenciación masiva utilizando un panel de diseño propio que incluía 82
genes asociados a B-ALL
3 Resultados
Excepto uno, todos los pacientes presentaron variaciones en el número de copias con mayor número
de pérdidas que de ganancias. En 12 casos se observaros pérdidas totales o parciales de
heterocigosidad. Sólo se encontraron 4 alteraciones genéticas recurrentes. Además, identificamos una
gran diversidad de mutaciones puntuales distribuidas en 30 de los genes del panel, 40% descritas
previamente en pacientes con cáncer. En 3 pacientes, se detectaron mutaciones puntuales descritas
con anterioridad en la familia de genes JAK, que podría haber sido objeto de intervención terapéutica
con inhibidores específicos de estas kinasas.
4 Conclusiones
Las técnicas de alta resolución son herramientas potentes capaces de identificar multitud de
alteraciones genéticas asociadas a LLA-B. El uso de arrays-SNPs así como se secuenciación masiva
en la práctica clínica puede ayudar a identificar nuevas alteraciones con valor pronóstico y a desarrollar
tratamientos individualizados para los pacientes.
C0540 VALIDACIÓN INICIAL DEL ANÁLISIS BIOINFORMÁTICO Y DE UN PANEL DE
GENES PARA ANÁLISIS NGS DE TUMORES SÓLIDOS PEDIÁTRICOS
1 1 1 1 1
Carlos Mackintosh , Cristian Pérez García , Mari Carmen Álvarez , Miguel González Acera , Carol Monzó Cataluña ,
1 1 1 2
María García Hoyos , Carlos Ruiz Lafora , Javier García Planells , Carmen de Torres Gómez-Pallete , Pablo Marin
3
Garcia
1
Imegen (Valencia) España
2
Fundacion de Investigación Sant Joan de Deu (Barcelona) España
3
Agustin Escardino 9 Paterna (Valencia) Spain
1 Objetivos
A pesar de la notable mejora en supervivencia, el cáncer sigue siendo la principal causa de mortalidad
ligada a enfermedad pediátrica. La implementación de métodos moleculares en la clínica ha
contribuido mucho a dicha mejora. Los avances recientes en las tecnologías de secuenciación masiva
permiten el estudio mutacional de cientos de genes “accionables” y “drivers” de una forma coste-
efectiva. Aquí presentamos el desarrollo bioinformático y el resultado de la validación de un panel de
254 genes para uso diagnóstico en las unidades de cáncer pediátrico.
Los genes fueron seleccionados considerando los siguientes factores: la relevancia específica en
tumores sólidos pediátricos (ejemplo SMARCB1), genes “cancer driver” transversales a todas las
enfermedades oncológicas (ej. TP53) y genes con accionabilidad clara conocida (ej. EGFR).
Se trabajó con muestras congeladas de tejido tumoral, perteneciente a una serie retrospectiva de 16
tumores primarios (tumores rabdoide-teratoides, Wilms, meduloblastoma, neuroblastoma,
Neurofibromatosis, Retinoblastoma, osteosarcoma, desmoide y sarcoma de células claras).
Se secuenciaron pares tumor-sangre periférica y se analizaron mediante herramientas de desarrollo
propio para detección de CNVs. Para el genotipado se usó bwa, freebayes y annovar incluyendo bases
de datos específicas de cáncer.
3 Resultados
Nuestra pipeline bioinformática tuvo una concordancia del 100% de CNVs-NGS vs MLPA y del 100%
de detección de variantes de significación clínica usando freebayes.
4 Conclusiones
El uso de genotipado y CNV-NGS es una combinación perfecta para aumentar la confianza en la
calidad y diagnóstico en cáncer. Los datos del genotipado refuerzan las deleciones vistas por CNV.
Además, quedó demostrado que el genotipado con freebayes en vez de samtools mejoró la
sensibilidad de detección de variantes de interés.
Por último, el panel diseñado, conjuntamente con la metodología de trabajo utilizados ha mostrado una
concordancia perfecta con las técnicas moleculares utilizadas previamente (Secuenciación Sanger,
MLPA) con resultados rápidos y fiables.
C0552 IMPLEMENTACIÓN DE UN PANEL DE GENES DE SUSCEPTIBILIDAD A CÁNCER
EN UNA UNIDAD DE CÁNCER HEREDITARIO Y ASESORAMIENTO GENÉTICO
1 1 2 2
Gabriela Palacios Verdu , Anna Abulí Vidal , Benjamin Rodríguez Santiago , Lluis Armengol Dulcet , Rafael Fábregas
1 3 1
Xauradó , Maite Cusidó Gimferrer , Xavier Estivill Pallejà
1
Salud de la Mujer Dexeus Barcelona (Barcelona) España
2
Laboratorio qGenomics (Barcelona) España
3
Hospital Universitari Sagrat Cor (Barcelona) España
1 Objetivos
Las nuevas tecnologías de secuenciación masiva han permitido el estudio simultáneo de múltiples
genes a un coste y tiempo de entrega razonable. El uso de paneles de genes de susceptibilidad a
cáncer permite identificar mutaciones patogénicas que podrían modificar las pautas de seguimiento y
detección precoz, así como el estudio de otros familiares a riesgo. El objetivo es evaluar la
implementación de un panel de genes de susceptibilidad al cáncer en una unidad de cáncer hereditario
y asesoramiento genético.
Se incluyó 110 pacientes a quiénes se realizó el panel de genes de susceptibilidad a cáncer. Los
pacientes tuvieron una visita de asesoramiento de riesgo oncológico en que se recogió su historia
oncológica personal/familiar y se ofreció realizar el panel basado en su riesgo oncológico. Los
pacientes recibieron una visita de asesoramiento genético pre y post-test. El panel de genes incluyó 42
genes de susceptibilidad a cáncer hereditario.
3 Resultados
Un 54%(59/110) de pacientes cumplieron criterios clínicos de alto riesgo oncológico, un 26%(29/110)
riesgo moderado y un 20%(22/110) riesgo poblacional. Se encontró mutaciones patogénicas en
10,9%(12/110) y mutaciones potencialmente patogénicas en 1,8%(2/110) de pacientes. Se encontró
variantes de significado incierto (VUS) en 36%(40/110) de pacientes. Mutaciones patogénicas y/o
potencialmente patogénicas fueron identificadas en los genes BRCA1, BRCA2, PALB2, PMS2, NBN y
MLH1. La tasa global de detección fue de 13%(14/110) y para pacientes de alto riesgo de 20%(12/59).
4 Conclusiones
El estudio de un panel de genes de susceptibilidad a cáncer permitió encontrar mutaciones
patogénicas en genes que no se hubieran estudiado mediante un estudio mutacional dirigido. Se
debería realizar el estudio de un panel de genes en el contexto de un adecuado asesoramiento
genético pre y post test, en el que el mayor reto es la transmisión de los conceptos de hallazgos
incidentales y de detección de VUS.
C0557 LA VARIANTE INACTIVANTE D303N EN GALNT12 NO ES UN ALELO DE
SUSCEPTIBILIDAD AL CCR
1 2 1 3 1
Victor Lorca Castellanos , Daniel Rueda , Mª Jesus Fernandez Aceñero , Clara Ruiz-Ponte , Lorena Martín Morales ,
1 1 1 1 1 4
Patricia Llovet , Carmen Poves , Miguel de la Hoya , Eduardo Díaz-Rubio , Trinidad Caldés , Pilar Garre Rubio
1
H. Clínico San Carlos (Madrid) España
2
H. Doce de Octubre (Madrid) España
3
Fundacion Publica Galega de Medicina Xenomica (Santiago de Compostela) España
4
Lab. Oncología Molecular, H. Clínico San Carlos Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
La alteración de los patrones de glicosilación es una característica común en cáncer que puede afectar
tanto a la división y diferenciación celular como a los procesos de adhesión, metástasis y evasión al
sistema inmune (Brockhausen 2006). Dentro de esta familia se encientra El gen GALNT12 codifica
para una N-acetilgalactosamiltransferasas responsable del primer paso de la O-glicosilación en el
tracto digestivo (Guo 2002). Se han descrito mutaciones inactivantes en GALNT12 asociadas a la
susceptibilidad al cáncer colorrectal (Guda 2009) y a la poliposis adenomatosa (Clarke 2012). En este
estudio se pretende esclarecer la implicación de la variante inactivante c.907G>A (D303N), detectada
en una cohorte de poliposis adenomatosa, en la susceptibilidad al la poliposis atenuada.
Se ha llevado a cabo un cribado de todo el gen GALNT12 en DNA germinal de 173 pacientes con más
de 10 pólipos adenomatosos. Se ha ampliado el genotipado de la variante detectada D303N en nuevos
casos de poliposis y una población control. Se han llevado a cabo estudios de segregación de las
familias de los casos portadores y se ha revisado el estado de glicosilación de estos tumores mediante
inmunohistoquímica.
3 Resultados
Tanto el estudio caso-control, como los estudios de segregación y el estado de glicosilación en
adenomas indican que la variante c.907G>A (D303N) no es un alelo de susceptibilidad a la poliposis
adenomatosa.
4 Conclusiones
Pese a la pérdida de actividad de la variante D303N en GALNT12, nuestros resultados indican que no
afecta al desarrollo de adenomas y por tanto a la susceptibilidad al cáncer en la poliposis
adenomatosa.
C0558 CIS-ACTING REGULATORY VARIANTS AT THE CDH4 GENE LOCUS REVEAL A
NOVEL MECHANISM OF SUSCEPTIBILITY TO CAPECITABINE–INDUCED HAND-FOOT
SYNDROME
1 1 2 1 1 1
Sara Ruiz Pinto , Guillermo Pita , Miguel Martín , Ana Cuadrado , Marta Shahbazi , Daniela Caronia , Aleksander
1 1 3 4 1 5 6
Kojic , Leticia Moreno , Julio de la Torre , María Lozano , Rocío Nuñez , Luis López , Nuria Ribelles , Jose Angel
7 1
García , Anna González
1
Centro Nacional de Investigaciones Oncológicas (CNIO) Madrid (Madrid) españa
2
Instituto de Investigación Sanitaria Gregorio Marañón (Madrid) España
3
Universidad Pontificia de Comillas (Madrid) España
4
Taper (Madrid) España
5
6
Hospital Virgen de la Victoria (Málaga) España
7
Hospital Clínico San Carlos (Madrid) España
1 Objetivos
Capecitabine-induced hand-foot syndrome (CiHFS) is a common dermatological adverse reaction,
affecting around 30% of capecitabine-treated cancer patients, and the main cause of dose reductions
and chemotherapy delays.
Capecitabine-induced hand-foot syndrome (CiHFS) is a common dermatological adverse reaction,
affecting around 30% of capecitabine-treated cancer patients, and the main cause of dose reductions
and chemotherapy delays.
We carried out an extreme-phenotype genome-wide association study (GWAS) in 166 breast and
colorectal cancer patients (88 patients with high-grade toxicity [grade 3] and 78 patients with no sign of
CiHFS [grade 0]). Replication was performed in a second cohort of 85 breast and colorectal cancer
patients (24 grade 3 and 61 grade 0).
3 Resultados
We discovered and replicated a cluster of four highly correlated single nucleotide polymorphisms
(SNPs) associated with susceptibility to CiHFS at 20q13.33 locus (top hit=rs6129058, HR=2.40, 95%CI
-8
=1.78–3.20; P=1.2x10 ). Using circular chromosome conformation capture (4C) sequencing, we
identified a chromatin contact between the locus containing the risk alleles and the promoter of CDH4,
located 90 kilobases away. The risk haplotype was associated with decreased levels of CDH4 mRNA
and the protein it encodes, R-Cadherin (RCad), which localizes in the granular layer of the epidermis. In
human keratinocytes, CDH4 downregulation resulted in reduced expression of involucrin, a protein that
is essential for skin barrier function. Immunohistochemical analyses revealed that skin from patients
with severe CiHFS exhibited low levels of RCad and involucrin before capecitabine treatment.
4 Conclusiones
We have identified a risk locus near the CDH4 gene strongly associated with CiHFS occurrence. Our
findings uncover a novel mechanism underlying individual genetic susceptibility to CiHFS through
impairment of keratinocyte differentiation and function, with implications for clinically relevant risk
prediction.
Miscelánea
C0036 LA GENÉTICA AL ALCANCE DE TODOS

1 2 2 1
Maria Teresa Solé Pujol , Concepción Bach Vallmajor , Jose Sabrià Rius , Jaime Antich Femenias
1
Centre de Genètica Mèdica (Barcelona) España
2
SBP Soft 2007 S.L. (Girona) España
1 Objetivos
La genética al alcance de todos, www.lagenetica.info , es una web de divulgación gratuita sobre
genética humana, la cual mediante un lenguaje claro, sencillo y continuamente actualizado, se adentra
en la magia de la vida pre / postnatal a través de un amplio recorrido ( temario), que abarca desde la
fecundación, hasta el genoma humano, pasando por la transmisión de los caracteres, técnicas
diagnostico prenatal, técnicas reproducción asistida, terapia génica, clonación y células
madre, convirtiéndose así en el complemento ideal para el asesoramiento genético y como fuente
educacional para la población general, reforzada por el FORO y por todos los dibujos y animaciones
que la complementan.
Actualmente cuenta aproximadamente con una media anual de 650.000 visitas, (de las cuales 470.000
corresponden a visitantes únicos), unas 3.000.000 de páginas consultadas de visitantes procedentes
de más de 130 países distintos, y unas 800 consultas personalizadas atendidas directamente en el
foro.
Como podréis observar, la web ha sido acreditada por el Colegio de Médicos de Barcelona,
España y también por el HONcode. Esta enlazada con diversos Colegios, Universidades, y
Sociedades Científicas tanto Españolas como Internacionales.
“La Genética al Alcance de Todos”, actualmente esta publicada en inglés, español y en catalán.
C0049 LOS HALLAZGOS GENÉTICOS INCIDENTALES PUEDEN SALVAR VIDAS
1 2 3 1 1 2
Rebeca Lorca , Marta Diñeiro , David Castillo , Ana Plasencia , Mónica Viejo , Guadalupe A. Cifuentes , Patricia C.
3 1 1 1 1 3
Pruneda , María Costales , Julián Reguero , Faustino Núñez , Justo Gómez , Gonzalo R. Ordóñez , Jose Luis
1 2 2
Llorente , Juan Cadiñanos , Rubén Cabanillas
1
Hospital Universitario Central de Asturias (HUCA) (Asturias) España
2
Instituto de Medicina Oncológica y Molecular de Asturias (IMOMA) (Asturias) España
3
Disease REsearch And Medicine (DREAMgenics) (Asturias) España
1 Objetivos
La secuenciación de nueva generación (NGS) es una herramienta cada vez más empleada para el
diagnóstico genético de la hipoacusia hereditaria. Determinadas mutaciones en KCNE1 y KCNQ1
provocan hipoacusia y síndrome QT largo (SQTL), una temida causa de muerte súbita.
Basándose en un caso clínico, se pretende destacar la relevancia de los hallazgos genéticos
incidentales: resultados no relacionados con la indicación del estudio genético, pero potencialmente
relevantes para el probando y sus familiares. El Colegio Americano de Genética y Genómica Médica
(ACMG) recomienda informar toda variante patogénica (P) o probablemente patogénica (PP) en
aquellos genes incluidos en una lista consensuada.
Se analizó ADN germinal de 47 pacientes con hipoacusia neurosensorial mediante un panel NGS (176
genes asociados a hipoacusia).
3 Resultados
Caso índice de 2 años con sordera congénita secundaria a mutaciones en GJB2 (c.35delG,
p.Gly12Valfs*2) en homocigosis (causa genética más común de hipoacusia hereditaria), que presentó
como hallazgo incidental una variante en KCNE1 (c.226G>A, p.Asp76Asn) en heterozigosis heredada
de su padre, previamente asociada a SQTL, considerada PP según ACMG y P/PP por ClinVar, OMIM y
HGMD.
La probando y su padre presentaban QTc normales en reposo (el padre también con la prueba de
esfuerzo). Sin embargo, las Guías Europeas de Cardiología consideran que una mutación P es
suficiente para diagnosticar un SQTL, independientemente del QT (recomendación de Clase I, nivel de
evidencia C). Los portadores silenciosos de mutaciones P presentan un riesgo de eventos cardíacos
aproximadamente del 10% antes de los 40 años y en ellos debe considerarse tratamiento beta-
bloqueante, evitar fármacos que prolonguen el QT y corregir posibles anomalías electrolíticas.
4 Conclusiones
En la era de la Medicina de Precisión, la información predictiva proporcionada por hallazgos genéticos
incidentales puede salvar vidas. El riesgo de muerte súbita de los portadores silenciosos de
mutaciones P es potencialmente prevenible.
C0054 INDICACIÓN DEL ESTUDIO GENÉTICO EN MENORES
1 1 1 2
Anna Fernández Falgueras , Oscar Campuzano Larrea , Anna Iglesias Muñoz , Georgia Sarquella Brugada , Sergi
2 1 1 1 1
César Díaz , Irene Mademont Soler , Mònica Coll Vidal , Alexandra Pérez Serra , Ferran Picó Micaló , Fernando
3 4 1
Wangüemert Perez , Josep Brugada Terradellas , Ramon Brugada Terradellas
1
2
3
Cardiavant, Centro Médico Cardiológico (Las Palmas de Gran Canaria) España
4
Hospital Clínic (Barcelona) España
1 Objetivos
La realización de estudios genéticos en menores de edad no está recomendada cuando la información
que aporta no representa una utilidad médica clara, respetándose así la autonomía del menor a tomar
decisiones informadas cuando éste alcance la mayoría de edad. Esta premisa se ve alterada cuando la
información obtenida puede conllevar implicaciones médicas efectivas para tratar, prevenir o retrasar el
curso de la enfermedad.
En patologías cardíacas hereditarias asociadas a muerte súbita, la propia muerte súbita puede ser el
primer síntoma de la enfermedad por lo que los miembros de la familia portadores de la mutación
familiar están en riesgo. La taquicardia ventricular polimórfica catecolaminérgica es un desorden
arritmogénico que causa muerte súbita inducido por actividades adrenérgicas, especialmente en niños
y jóvenes.
Presentamos una familia de más de 1400 individuos con múltiples casos de taquicardia ventricular
polimórfica catecolaminérgica, incluyendo 36 muertes súbitas cardíacas en menores de 14 años. Tras
la identificación de la variante causal, se realizó análisis genético familiar y los individuos portadores
fueron tratados mediante beta-bloqueantes.
3 Resultados
Durante una media de 37 meses de seguimiento, no se documentaron más muertes súbitas cardíacas
exceptuando 3 jóvenes que habían rechazado el estudio genético (por lo tanto, no tratados
farmacológicamente) y que fueron confirmados como portadores de la variante en estudio post-
mortem.
4 Conclusiones
Realizar un estudio genético en patologías cardiacas arritmogénicas, independientemente de la edad
del paciente, permite identificar portadores genéticos así como tomar las medidas oportunas para
reducir el riesgo de muerte súbita.
C0056 LA INVESTIGACIÓN GENÉTICA AYUDA A RESOLVER LA ETIOLOGÍA DE LA
MUERTE SÚBITA INEXPLICADA
1 2 2 3
Anna Fernández Falgueras , Oscar Campuzano Larrea , Olallo Sanchez-Molero Nuñez , Georgia Sarquella Brugada ,
4 2 2 2 2
Carles Ferrer Costa , Irene Mademont Soler , Mònica Coll Vidal , Alexandra Pérez Serra , Ferran Picó Micaló , Anna
2 2 2 5
Iglesias Muñoz , Jesús Matés Ramírez , Bernat Del Olmo Cabestré , Josep Castellà Garcia , Josep Brugada
2 2
Terradellas , Ramon Brugada Terradellas
1
Centro de Genética Cardiovascular Salt (Girona) Espanya
2
3
4
5
Instituto de Medicina Legal de Catalunya (Barcelona) España
1 Objetivos
La muerte súbita inexplicada puede ser la primera manifestación de una enfermedad cardíaca
hereditaria desconocida. Las técnicas genéticas actuales pueden permitir la resolución de la etiología y
la identificación de familiares a riesgo. El proyecto MOSCAT tiene como objetivo definir la etiología de
las muertes naturales de menos de 50 años, e investigar si los defectos genéticos asociados a
enfermedades cardíacas proporcionan una etiología en los casos inexplicados.
Como parte de la investigación forense, en los casos con autopsia macroscópica negativa se realizó el
estudio genético de los principales genes asociados a muerte súbita cardíaca, mediante tecnología
NGS. También se realizó estudio genético en aquellos casos con diagnóstico macroscópico de
enfermedad cardíaca hereditaria.
3 Resultados
Nuestra población de estudio incluyó un total de 789 casos consecutivos (77.2% hombres) (media
38.6±12.2 años) que murieron súbitamente. La causa de la muerte se resolvió durante la autopsia en la
mayoría de los casos (81.1%), mayoritariamente de enfermedad cardíaca (56.87%). El estudio
genético detectó variantes potencialmente patogénicas en el 50% de las muestras clasificadas como
miocardiopatías. En los casos sin una causa concluyente de muerte, el estudio genético identificó un
41.2% de las muestras portadoras de una variante potencialmente patogénica como causa de muerte.
4 Conclusiones
La autopsia molecular debería realizarse cuando se identifica una miocardiopatía así como en los
casos sin una causa concluyente de muerte debido a posibles canalopatías. Se debe ofrecer
asesoramiento genético a todos los individuos con historia familiar de muerte súbita a edades jóvenes.
La identificación de variantes genéticas permite la realización de estudios de segregación y la
implementación de medidas preventivas en los familiares a riesgo.
C0114 MODELO DE GENÓMICA CLÍNICA - GENÓMICA FUNCIONAL EN LA INNOVACIÓN
DIAGNÓSTICA DE LAS ENFERMEDADES NEUROGENÉTICAS
1 2 2 2
Francesc Palau Martínez , Mercedes Serrano , Antonio Martínez Monseny , Mercè Bolasell , Macarena Dorado
3 2 2 2 2 2
Martinez , Judith Armstrong , Loreto Martorell , Dèlia Yubero , Maria del Mar Pérez Iribarne , Isabel Plensa , Aida
2 2 2 4 5
Ormazabal , Mercedes Casado , Cristina Jou , Rafael Artuch , Janet Hoenicka Martinez
1
Hospital Sant Joan de Déu y CIBERER Esplugues de Llobregat (Barcelona) España
2
3
CIBERER e Institut de Recerca Sant Joan de Déu (Barcelona) España
4
Hospital Sant Joan de Déu y CIBERER (Barcelona) España
5
Institut de Recerca Sant Joan de Déu (Barcelona) España
1 Objetivos
La mejora del diagnóstico de los pacientes con enfermedades raras (ER) es una necesidad. En el IPER
hemos puesto en marcha un programa de innovación en el diagnóstico de ER. Para ello, hemos
llevado a cabo un modelo de investigación y desarrollo traslacional basado en el triángulo definido por
el Fenotipo Clínico - Genómica Clínica - Genómica Funcional que nos permite trasladar la
experiencia científica en el descubrimiento de genes mutantes a la práctica médica. El objetivo es
desarrollar e implementar herramientas diagnósticas en el manejo de ER, que incluyen el análisis
fenotípico, genético y celular para establecer la patogenicidad de las variantes de los genes
candidatos.
El modelo diagnóstico comporta la aplicación y desarrollo de un proceso en tres áreas: (1) Desarrollo
Clínico para incorporar la aproximación ontológica en el análisis fenotípico de los pacientes con
enfermedades raras neurológicas aplicando la aproximación de la ‘Human Phenotype Ontology'; (2)
Desarrollo Tecnológico para la búsqueda de genes mutantes (secuenciación NGS), y su validación
mediante biomarcadores metabólicos (sistema UPLC-MS/MS) y patrones morfológicos (microscopía
confocal con sistema STED 3x en el estudio histológico, celular y molecular de muestras clínicas); (3)
Desarrollo Científico para la validación de variantes genéticas y genes candidatos asociados a
enfermedad en modelos celulares que sobre-expresen proteínas mutantes o con un genoma editado
con tecnología CRISPR/Cas9.
3 Resultados
El IPER desarrolla el diagnóstico genético en un único proceso de validación clínica de variantes
genéticas conjuntando fenotipado, análisis genómico y genómica funcional.
4 Conclusiones
Este modelo innovador en la aplicación de tecnologías experimentales genómicas, bioquímicas y
microscópicas en el diagnóstico clínico permite la identificación de nuevos genes y biomarcadores, la
mejor comprensión de la fisiopatología celular y molecular, y desarrollo de nuevas estrategias de
actuación clínica.
C0124 PLAN FUNCIONAL DE LOS PACIENTES CON SÍNDROME PRADER-WILLI
Merce Bolasell Girgas, Antonio Martinez Monseny, Mercedes Serrano Gimare
Hospital Sant Joan De Deu Esplugues De Llobregat (Barcelona) España
1 Objetivos
Mejorar la asistencia integral y la calidad de vida de los pacientes y familias con síndrome de Prader-
Willi (SPW)
Coordinar las visitas y pruebas de seguimiento de los pacientes con SPW menores de 18 años,
atendidos en el periodo entre Marzo y Noviembre de 2016, en consultas externas del Hospital Sant
Joan de Déu siguiendo un protocolo estandarizado y mediante visitas multidisciplinares. Se calcula el
gasto hospitalario antes y después de la instauración del protocol, así como los gastos indirectos que
repercuten en las familias.
3 Resultados
Seguimiento y coordinación de 37 pacientes con SPW por los especialistas del hospital en un mismo
día. Integración de las familias entre ellas.
Los pacientes acuden solamente 2 – 3 veces al año a consultas externas realizando las visitas
consecutivas y comunicadas mediante una gestión de los pacientes. Se consigue disminuir días
pedidos de trabajo en las familias y de colegio y otras actividades en los pacientes. Se programa cada
día una reunión sobre los niños atendidos para disertar sobre las mejores actitudes terapéuticas en
grupo y de forma consensuada. En esta reunión se cuenta con el gestor de pacientes, el trabajador
social y los datos clínicos del paciente.
4 Conclusiones
El plan funcional de SPW mejora el confort y la calidad de los pacientes y sus familias con visitas
consecutivas en un mismo día y con un seguimiento protocolizado siguiendo con los estándares
actualizados. Con este modelo se interfiere lo menos posible en su escolarización y rutinas (aspecto
crucial en esta alteración genética con un fenotipo conductual muy bien descrito) así como en la
dinámica familiar. Se facilita la coordinación entre profesionales. Además ayuda a conocer mejor la
historia natural de la enfermedad. Así mismo, se cuenta con la coordinación de una gestora de
pacientes que es el nexo de unión entre hospital y pacientes.
C0138 ASESORAMIENTO GENÉTICO A FAMILIARES DE NIÑOSCON DIAGNÓSTICO DE
AUTISMO.
1 1 1 2
Denia Tasé Vila , Daniel Quintana Hernández , Yohandra Calixto Robert , Deinys Carmenate Naranjo
1
Hospital Pediátrico Juan Manuel Márquez Marianao (La Habana) Cuba
2
Centro Nacional de Genética Médica (La Habana) Cuba
1 Objetivos
Diseñar una estrategia de asesoramiento genético para padres y familiares de niños con diagnóstico
de autismo.
Se realizó una actualizada revisión bibliográfica de este tema, el universo estuvo constituido por las
historias clínicas genéticas de la consulta de trastorno del lenguaje, ubicada en el servicio de Genética
Clínica del el hospital pediátrico Juan Manuel Márquez y la muestra por las historias clínicas de los
niños con diagnóstico de autismo, cuyos padres y familiares solicitaron asesoramiento genético.
3 Resultados
Los niños son remitidos con este diagnóstico por los especialistas en psiquiatría infantil, una vez
recibidos en estaconsulta se ajustan al protocolo diseñado, identificando la causa que lo provoca,
parael correcto estudio, manejo y seguimiento de cada paciente específicamente. Se valoró el diseño
del proceso de Asesoramiento Genético, teniendo en cuenta los elementos básicos del mismo
(diagnostico, estimación del riesgo, comunicación y soporte o basamento)
4 Conclusiones
La estrategia diseñada permitió una mejor comprensión de este trastorno por parte de los padres y
familiares de niños con este diagnóstico, facilitando un mejor manejo y adecuada estimulación en este
tipo de paciente.
C0178 IDENTIFICACIÓN POR NGS DE UNA NUEVA MUTACIÓN PUNTUAL CAUSANTE DE
AGAMMAGLOBULINEMIA AUTOSÓMICA RECESIVA POR DEFECTO DE IGHM
1 2 2 2
Paula Silva Rodríguez , Antonio Justicia Grande , Alexandra Regueiro García , Sabela Fariña Nogueira , José Miguel
2 3
Couselo García , Lourdes Loidi Fernández de Trocóniz
1
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica Santiago de Compostela (A Coruña) España
2
Servicio de Pediatría, Complejo Hospitalario Universitario Santiago de Compostela (A Coruña) España
3
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica-Complejo Hospitalario Universitario Santiago de Compostela (A
Coruña) España
1 Objetivos
La agammaglobulinemia se caracteriza por ausencia/reducción de anticuerpos y ausencia/reducción de
células B debido al bloqueo temprano del desarrollo de las mismas. La mayoría de casos muestra
herencia ligada a X mientras que la agammaglobulinemia autosómica recesiva (AAR) es menos
frecuente. La AAR está causada por mutaciones en distintos genes, un 30% de casos por mutaciones
en IGHM, gen que codifica la región constante mu de las cadenas pesadas de las inmunoglobulinas.
Normalmente las mutaciones en IGHM son deleciones, mientras que las mutaciones puntuales son
raras (dos descritas hasta la fecha).
El objetivo del estudio fue identificar el gen y mutaciones responsables de agammaglobulinemia en una
paciente de 7 meses de edad para confirmar el diagnóstico clínico e inmunológico y ofrecer a los
padres asesoramiento genético y posible diagnóstico prenatal.
TM
Mediante NGS (Ion AmpliSeq Custom Panel) se secuenciaron los genes CDT9A, CD79B, IGHM,
IGLL1, LRRC8 y PIK3R1 asociados a AAR y BTK asociado a la forma ligada a X. Por secuenciación
Sanger del exón 1 de IGHM se validó la mutación puntual detectada y se hizo estudio familiar. Se
realizó una PCR semicuantitativa para confirmar una deleción de IGHM en el alelo paterno de la
paciente.
3 Resultados
El estudio mediante NGS mostró una nueva mutación nonsense en IGHM:
ENST00000390559.2:c.132C>A;p(Tyr44*) y ausencia de secuencia normal en esa posición. Los otros
genes mostraron solamente variantes benignas.
El estudio por secuenciación Sanger y PCR semicuantitativa a la familia permitió concluir que la
paciente es heterocigota compuesta para la nueva mutación nonsense en el alelo materno y una
deleción en el alelo paterno del gen IGHM.
4 Conclusiones
Se confirma un diagnóstico de AAR por déficit de IGHM.
El resultado permite asesoramiento genético y diagnóstico prenatal fiable.
El resultado amplía el espectro de mutaciones puntuales en IGHM.
C0187 SÍNDROME DE INSENSIBILIDAD ANDROGÉNICA. A PROPÓSITO DE UN CASO
Ana Ruiz Quilez, Juana María Vaquer Santamaría, Rosario Abellán Sánchez, Arturo Carratalá Calvo, Ana Cuesta
Peredo
Hospital Clínico Universitario de Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
Mujer de 34 años remitida desde Unidad de Reproducción Asistida por ser portadora de una mutación
en heterocigosis en el gen que codifica para el receptor de andrógenos, gen AR (OMIM #313700), tras
realizársele un screening preconcepcional de enfermedades recesivas. Mutaciones en este gen causan
el síndrome de insensibilidad a los andrógenos, enfermedad de herencia recesiva ligada al cromosoma
X (Xq11-q12).
Nuestro objetivo fue determinar el sexo cromosómico y el perfil hormonal de la paciente para excluir
defectos en la biosíntesis de la testosterona o el déficit de la enzima 5α-reductasa.
Análisis citogenético mediante bandas GTG. Estudio hormonal realizado por técnicas de
®
electroquimioluminiscencia (ECLIA) en el analizador COBAS 8000 (Roche ).
3 Resultados
El cariotipo resultó normal de mujer (46, XX) y los resultados del perfil hormonal (FSH, LH, Estradiol
(17-beta Estradiol), hormona Antimulleriana y testosterona) fueron normales.
4 Conclusiones
Paciente portadora de mutación en heterocigosis en el gen AR con sexo cromosómico femenino y perfil
de hormonas sexuales dentro del rango de la normalidad.
Mutaciones en este gen causan el síndrome de insensibilidad a los andrógenos, caracterizado por la
resistencia de los tejidos diana a la acción de las hormonas masculinas, lo que impide el desarrollo
masculino normal de los genitales internos y externos de los individuos genéticamente varones (46
X,Y).
Al tratarse de una enfermedad recesiva ligada al cromosoma X, las mujeres, 46, XX con una mutación
serán portadoras asintomáticas y los varones, 46, XY, no podrán ser portadores y serán siempre
afectos o no afectos. La madre de un individuo 46, XY afecto puede ser portadora heterocigota de la
mutación, sin mostrar ningún efecto fenotípico, aunque se ha descrito que pueden presentar una
distribución asimétrica del vello pubiano y una edad tardía de la menarquía.
C0190 DIAGNÓSTICO GENÉTICO MOLECULAR DE LAS CILIOPATÍAS RENALES
MEDIANTE SECUENCIACIÓN MASIVA DE NUEVA GENERACIÓN (NGS).
1 1 1 2 1 3
Cristina Cardona Gay , Laia Pedrola Vidal , Inés Calabria Torres , Elena Román , Marina Martínez , Ángel Zúñiga ,
1 1 1 3 4
Sarah Moreau , Lola González , José Mª Millán , José Cervera , Maria Jose Aparisi Navarro
1
2
Unidad de Nefrología Pediátrica Hospital Universitario y Politécnico La Fe (Valencia) España
3
Unidad de Genética Hospital Universitario y Politécnico La Fe (Valencia) España
4
Instituto de Investigación Sanitaria La Fe, Hospital La Fe Valencia (Valencia) España
1 Objetivos
El 70% de los pacientes con cliliopatías renales permanecen sin diagnóstico genético debido a su
elevada heterogeneidad clínica y genética. La nefronoptisis es un trastorno autosómico recesivo que
representa la causa monogénica más común de insuficiencia renal en niños y jóvenes adultos. Hasta la
fecha se han descrito más de 50 genes asociados con ciliopatías renales, de los cuales 29 han sido
relacionados con la nefronoptisis, siendo el gen NPHP1 responsable del 70% de los casos. La
aparición de la secuenciación de nueva generación (NGS-Next Generation Sequencing) ha supuesto
una revolución debido a su capacidad para secuenciar simultáneamente un alto número de genes en
un tiempo y coste muy reducido. El objetivo de este estudio fue determinar la causa subyacente de la
enfermedad en 15 pacientes diagnosticados clínicamente de ciliopatía renal.
La selección de pacientes se realizó a partir de un diagnóstico clínico fenotípicamente bien
caracterizado: 8 pacientes con nefronoptisis infantil, 3 con nefronoptisis juvenil, 2 con síndrome de
Joubert, 1 con síndrome otobraquiorrenal y 1 con síndrome de Saldino-Mainzer. El estudio genético se
llevó a cabo mediante la secuenciación del panel de genes ClearSeq Inherited Disease, Agilent
Technologies empleando la tecnología Illumina (NextSeq500), permitiendo la detección de mutaciones
puntuales y CNVs (Copy Number Variations).
3 Resultados
En el presente estudio hemos podido determinar la causa de la enfermedad en los pacientes
analizados, permitiéndonos realizar una correcta correlación fenotipo-genoptipo.
4 Conclusiones
En el presente trabajo podemos confirmar que el diagnóstico genético molecular de los pacientes con
ciliopatías renales hereditarias (CRH) es esencial para la confirmación de la sospecha clínica, el
correcto asesoramiento genético, el planteamiento de su vida reproductiva, su inclusión en los
programas de diagnóstico genético preimplantatorio y su posible participación en los futuros ensayos
clínicos para este tipo de patología.
C0194 IDENTIFICACIÓN DE LOS DETERMINANTES GENÉTICOS DEL
HIPOPITUITARISMO CONGÉNITO MEDIANTE SECUENCIACIÓN MASIVA DIRIGIDA
1 1 2 1
Francisco Javier Rodríguez Contreras , Nerea Lobato Vidal , Ángela Del Pozo , Kristina Ibáñez Garikano , Juan Carlos
1 1 3 3 3
Silla , Victoria E.F. Montano , Luis Salamanca Fresno , Julio Guerrero Fernández , Isabel González Casado , Jaime
4 2 5 2 2
Sánchez Del Pozo , Pablo D. Lapunzina Badia , Vanesa López González , Elena Vallespín , Karen E. Heath , Angel
6
Campos Barros
1
INGEMM, IdiPAZ, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
2
INGEMM, IdiPAZ, Hospital Universitario La Paz y CIBERER (U753), ISCIII (Madrid) España
3
Endocrinología Pediátrica, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
4
Endocrinología Pediátrica, Hospital Universitario 12 de Octubre (Madrid) España
5
Servicio de Genética, Hospital Virgen de la Arrixaca (Murcia) España
6
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM), Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
El diagnóstico molecular mediante técnicas tradicionales del espectro clínico del hipopituitarismo
congénito (HIPC): deficiencia aislada (DAGH) o combinada de hormonas hipofisarias (DCHH),
displasia septo-óptica (DSO), holoprosencefalia (HPE) e hipogonadismo hipogonadotropo congénito
(HHC) presenta una muy baja tasa de éxito diagnóstico debido al elevado número de genes implicados
y un patrón de herencia oligogénica en numerosos casos.
Objetivos específicos:
1) Evaluar la utilidad de técnicas de NGS para identificar los determinantes genéticos del HIPC en
pacientes con DCHH, DSO o DAGH con anomalías hipofisarias.
2) Explorar la frecuencia de etiología digénica/oligogénica en estas entidades y el solapamiento con
genes implicados en HHC y HPE.
Sujetos: 106 pacientes diagnosticados de DCHH, DSO o DAGH. Análisis mediante el panel de NGS
HIPOPIT.V1, que incluye 50 genes implicados en DCHH/DSO/HHC/HPE y 23 genes candidatos
implicados en vías de señalización asociadas, sin descripción patológica conocida en humanos. La
anotación y predicción de patogenicidad de variantes se ha realizado mediante bases de datos y
herramientas bioinformáticas públicas y de pago.
3 Resultados
Hemos completado el análisis de 72 pacientes. En 10 de ellos (13,3%) hemos identificado las variantes
patogénicas causales, mientras que en otros 23 (30,7%) hemos detectado variantes posiblemente
patogénicas. 20 pacientes (26,7%) presentan variantes relevantes en varios genes, muchos
clásicamente implicados en HHC (FGFR1, FGF8, PROKR2, SEMA3A, GNRH1, CHD7, LEPR) y en
HPE (CDON, GLI2, ZIC2, PTCH1, EYA4). Destaca la frecuencia de detección de variantes relevantes
en GLI2, tradicionalmente implicado como base molecular de la HPE tipo 9.
4 Conclusiones
Nuestros resultados han permitido identificar posibles determinantes genéticos de la enfermedad en el
44% de los casos analizados. Asimismo, sugieren una probable etiología oligogénica en el 26,7% de
pacientes afectos de DCHH/DSO/DAGH.
La aplicación de técnicas de secuenciación masiva dirigida mejora significativamente el
diagnóstico del hipopituitarismo congénito y confirma una elevada incidencia de etiología
oligogénica.
C0208 ESTUDIO GENÉTICO DE UN PACIENTE CON ENFERMEDAD CELÍACA ATÍPICA
Natalia Zapata Juárez Zapata Juárez, Keila Llano Hernández, Luis Sánchez Pérez, Mercedes Castaño Pinedo, Kissy
Guevara Hoyer, Edgard Rodríguez Frías, Julie Ochoa Grullón, Alejandra Comins Boo, Natalia López Palacios, Enrique
Rey Díaz-Rubio, Silvia Sánchez Ramón, Miguel Fernández Arquero
1 Objetivos
La enfermedad celíaca (EC) es un proceso patológico de naturaleza autoinmune que afecta a
individuos genéticamente predispuestos y que determina la aparición de una lesión histológica
característica como respuesta frente a la ingesta de gluten. Los principales criterios diagnósticos de la
EC se basan en la sintomatología clínica, los datos genéticos, las determinaciones serológicas y los
hallazgos de las biopsias duodenales, que junto con la respuesta a la dieta sin gluten, constituyen la
base fundamental para su confirmación en la gran mayoría de los casos. Los estudios genéticos son
útiles en el diagnóstico de la EC, dado que aproximadamente un 90% de los pacientes celíacos son
HLA-DQ2 positivos y otro 5-10% expresan HLA-DQ8. Sin embargo, estos marcadores genéticos
constituyen una condición necesaria, pero no suficiente, ya que una pequeña proporción de pacientes
(3 %) son negativos para el HLA-DQ2 y HLA-DQ8, lo que implica que existen otros marcadores
genéticos aún no bien conocidos, localizados en otras regiones del genoma.
Se realizó el aislamiento de DNA de una muestra de sangre de forma automática (MagnaPure).
Se utilizó la tecnología de Luminex para el estudio de los loci HLA-DRB1, DQA1 y DQB1.
3 Resultados
La paciente presenta sintomatología clínica característica de EC y lesión histológica a nivel duodenal
en categoría Marsh 3. Sin embargo, el estudio genético obtenido fue homocigoto para los genes
DRB1*0101, DQA1*0101 DQB1*0501 (HLA-DQ2 y DQ8 negativo).
4 Conclusiones
La EC puede aparecer asociada a una genética atípica, lo que pone de manifiesto la presencia de
otros genes presentes en dicha patología.
C0243 CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE PACIENTES CON DISTROFIAS
MACULARES EN ESPAÑA. ESTUDIO LONGITUDINAL DE 25 AÑOS.
Carlos Lombardía, Paula Díaz-Fernández, Raquel Pérez-Carro, Inmaculada Martín-Mérida, Domingo Aguilera-García,
Fiona Blanco-Kelly, Saoud Swafiri, Marta Cortón, María Isabel López-Molina, Blanca García-Sandoval, Almudena Ávila-
Fernández, Rosa Riveiro-Álvarez, Carmen Ayuso
Fundación Jiménez Díaz Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
Las distrofias maculares (DM) son un tipo de distrofias de retina, con afectación de la región central
(mácula, constituida principalmente por conos), pérdida de agudeza visual y afectación del campo
visual central. Este trabajo recoge 25 años de experiencia en el diagnóstico genético de estas
patologías.
Se estudiaron 1047 familias españolas no emparentadas, diagnosticadas clínicamente de DM. En base
al patrón de herencia a priori, se estudiaron 717 familias con herencia autosómica recesiva (AR), 206
con herencia autosómica dominante (AD), 104 con herencia ligada al cromosoma X (XL) y 20 sin
clasificar.
Se aplicaron distintas técnicas moleculares, según su disponibilidad a lo largo del tiempo:
secuenciación Sanger, arrays de genotipado y de CGH, MLPA y secuenciación masiva (paneles,
exoma clínico y WES).
3 Resultados
Se obtuvo el diagnóstico genético en 513 familias, con una tasa diagnóstica global del 49% (49% para
AR, 37% para AD, 77% para XL y 15% en las familias sin clasificar). Tras el diagnóstico definitivo, se
pudieron reclasificar genéticamente el 2% de todas las familias presuntamente AR, el 6% de las AD y
el 4 % de las XL.
Se identificaron mutaciones responsables en 32 genes, siendo el más prevalente el gen ABCA4
(herenciaAR; 61% de todos los casos caracterizados), previamente asociado a diversas formas de
distrofias de retina como la enfermedad de Stargardt y distrofias de conos y bastones. Dentro de las
formas XL el gen más prevalente fue RS1 (15% del total de las familias caracterizadas) y, entre las
dominantes, PRPH2 (7%).
En 9 familias los resultados moleculares permitieron modificar el diagnóstico (distrofia de bastones y
conos, en lugar de DM).
4 Conclusiones
Este estudio ha permitido profundizar en el entendimiento de las principales causas moleculares de las
DM, mejorando el diagnóstico y consejo genético de los pacientes y permitiendo su futura inclusión en
ensayos clínicos gen-dirigidos.
C0244 SUSCEPTIBILIDAD GENETICA A LA ENFERMEDAD INVASIVA NEUMOCOCICA
1 2 3 4 5 6 7 7
A San Gil , MJ Arranz Calderon , R Güerri-Fernandez , M Perez , H Monzon , A Payeras , M Andres , J Torvisio , L
1 1 1
Ibañez , J Garau , E Calbo
1
2
3
Hospital del Mar (Barcelona) España
4
Xerencia Gestion Integrada de Vigo (Pontevedra) España
5
Hospital Sant Joan de Deu Martorell (Barcelona) España
6
Hospital Son llatzer (Baleares) España
7
Consorci Sanitari Terrassa (Barcelona) España
1 Objetivos
Streptococcus pneumoniae es una causa frecuente de neumonía, meningitis, otitis y bacteriemia. La
presencia de bacteriemia o de cultivos positivos en lugares habitualmente estériles se define como
enfermedad neumocócica invasora (EIN). La EIN se da fundamentalmente en los extremos de la vida
y/o en pacientes con algún factor de riesgo conocido. No obstante, existe un grupo de enfermos de
mediana edad, sin factores de riesgo ni comorbilidades asociadas en los que se diagnostica EIN.
OBJETIVO: Identificar marcadores genéticos de susceptibilidad asociados a un mayor riesgo de EIN
en pacientes con y sin los factores de riesgo clásicamente conocidos
Se investigaron 43 SNPs en 10 genes involucrados en la respuesta inmunológica en una cohorte de
144 pacientes EIN y 280 controles del mismo grupo étnico.
3 Resultados
Se encontraron asociaciones entre la distribución alélica de NFKBIA rs1050851 y NFKBIE rs2282151 y
2 2
riesgo de EIN (χ =4.23, p=0.04 and χ =5.13, p=0.02, respectivamente). También se encontró
2
asociación entre las frecuencias genotípicas de las variantes NFKBIZ rs645781 (χ =8.25, p=0.02) y
2
IL1R1 rs3917254 (χ =6.70, p=0.04) y susceptibilidad a EIN. El análisis de los pacientes sin factores de
riesgo conocidos reveló asociaciones con la frecuencia alélica de varios polimorfismos de IL1R1
2 2 2
rs2160227 (χ = 5.62, p=0.03), rs13020778 (χ =5.73, p=0.02), rs3917267 (χ = 3.72, p=0.05) y IL4
2 2
rs2227284 (χ =3.76, p=0.05) y con la frecuencia genotípica de IL10 rs3024509 (χ = 7.70, p=0.02),
2 2
IL1R1 rs3917254 (χ = 13.40, p=0.001), y NFKBIZ rs645781 (χ = 13.86, p=0.001).
4 Conclusiones
Nuestro estudio identificó varias asociaciones entre polimorfismos involucrados en la respuesta
inmunológica (IL1R1, IL4, IL10, NFKBIE, NFKBIA, NFKBIZ) y susceptibilidad a EIN. De confirmarse,
estos marcadores pueden ayudar a identificar personas con mayor susceptibilidad e EIN.
C0269 ANÁLISIS MOLECULAR DE 10 CASOS DE SÍNDROME DE GENES CONTIGUOS
TSC2/PKD1 EN POBLACIÓN ESPAÑOLA.
1 1 1 2 3 3
Julián Nevado , Rocio Mena , María Palomares Bralo , Carlos Peces , Emilio López-Cuesta , Mari Luz Picazo , Crsitina
3 3 1 3
Vega-Cabrera , Rafael Selgas , Pablo Lapunzina Badia , Ramón Peces Serrano
1
2
Centro de Tecnologías de la Infromación, SESCAM (Toledo) España
3
Sº Nefrología/HULP (Madrid, Madrid) España
1 Objetivos
Los pacientes con deleciones en el locus 16p13.3 que afectan a los genes TSC2/PKD1 sufren el
síndrome del gene contiguo (PKDTS, MIM #600273), que aparece como enfermedad poliquística renal
temprana, asociada a manifestaciones clínicas de esclerosis tuberosa tipo 2 (TSC2). El objetivo de
este trabajo es establecer La magnitud de la deleción relativa a TSC2/PKD1, discutir las posibles
consecuencias clínicas, con imagen renal, estudios histopatológicos y análisis molecular, tratando de
establecer correlaciones genotipo/fenotipo.
10 casos esporádicos de pacientes diagnosticados de TSC2, de edades (2-40 años), que presentaron
desde la infancia manifestaciones de poliquistosis renal. El diagnóstico de PKDTS se realizó mediante
clínica, imagen (sonografía, MRI y CT) y/o anatomía-patológica. El diagnóstico se confirmó a nivel
molecular por MLPA (MRC-Holland) y arrayCGH personalizado (8x15K en base Agilent).
3 Resultados
el abordaje molecular ha establecido la existencia de deleciones en heterocigosis, afectando total (2
casos) o parcialmente a los exones de TSC2 y PKD1 (8 casos; 2 mosaicos) y establecen que existe
una marcada heterogeneidad fenotípica en la presentación clínica de PKDTS. Aunque la deleción
parcial de TSC2 y PKD1 es suficiente para desarrollar estos signos clínicos.
4 Conclusiones
Se caracteriza clínica y molecularmente la serie más grande publicada de pacientes con el síndrome
de genes contiguos. El conocimiento clínico y adecuada investigación molecular de PKTDS es
necesario en todos los pacientes con un fenotipo típico de TSC en infancia, adolescencia o edad
adulta, con graves alteraciones renales. Recomendamos el uso del MLPA como primera elección, ya
que por su rapidez, relativo bajo coste y eficiencia permite detectar deleciones en TSC2 y PKD1 de
manera simultánea. Sin embargo, aconsejamos un estudio más completo mediante aCGH para asignar
el tamaño de la deleción y genes adicionales implicados. A diferencia de lo que comúnmente se creía,
la enfermedad poliquística juvenil severa no es un signo obligatorio.
C0276 ANÁLISIS GENÉTICO POR PANELES DE GENES SE DESCUBRE COMO UNA
HERRAMIENTA CLAVE EN EL DIAGNÓSTICO DE CIERTAS GLOMERULOPATÍAS,
TUBULOPATÍAS Y ENFERMEDADES QUÍSTICAS DE DIAGNÓSTICO CLÍNICO COMPLEJO
1 1 1 2
Maria Lara Besada Cerecedo , Patricia Regueiro Casuso , Ana Maria Barcia De la Iglesia , Beatriz Sobrino Rey , Jorge
2 3 3 3 3
Amigo Lechuga , Nisrine Arha , Carmen Vazquez , Manuel Fidalgo , Candido Diaz Rodriguez , Miguel Angel Garcia
1
Gonzalez
1
Laboratorio de Genetica y Biologia del Desarrollo de las Enfermedades Renales del Instituto de Investigacion Sanitaria
de Santiago de Compostela Santiago de Compostela (A Coruña) España
2
Fundacion Publica Galega de Medicina Xenomica (A Coruña) España
3
Servicio de Nefrologia del Complejo Hospitalario Universitario de Santiago de Compostela (A Coruña) España
1 Objetivos
Una de las principales ventajas de la realización del estudio genético en las enfermedades hereditarias
es la rotundidad en el diagnóstico clínico asociado a las mutaciones encontradas.
Nuestro grupo fue pionero en el desarrollo de estrategias para el diagnóstico genético de las
enfermedades renales hereditarias, en tres grupos de enfermedad: enfermedades quísticas (hasta 72
genes), enfermedades glomerulares (26 genes) y enfermedades túbulo-intersticiales (36 genes),
tomando ventaja de los métodos de Secuenciación Masiva de Nueva Generación(NGS).
3 Resultados
Tras someter a análisis genético a una cohorte de 73 pacientes sin antecedentes familiares de
enfermedad, pero con un diagnóstico clínico compatible con características fenotípicas de
enfermedades hereditarias, identificamos la mutación causante en el 31% de los casos (n=23). De
estos, el 78% de los casos correlacionaba el diagnóstico genético con el clínico. De los 18 individuos
sometidos al panel de 72 genes, identificamos la mutación en el 83% (n=15) de los casos, y de los
cuales sólo un 47% concordaba con el diagnóstico clínico asignado. Con respecto a los pacientes
sometidos al diagnóstico de enfermedades glomerular y tubular, el diagnóstico clínico concordaba con
el genético en un 56% y 67% de los casos, respectivamente. En la mayoría de los casos, los errores de
diagnóstico clínicos se asociaron con enfermedades sindrómicas con fenotipos muy parecidos, como
por ejemplo Gitelman y Bartter. En algunos casos, se debía a fenómenos de interacción génica, donde
la causa clínica se debe a la presencia de más de una mutación en distintos genes relacionados
funcionalmente
4 Conclusiones
Gracias al diagnóstico genético panelizado por fenotipos de grupos de genes utilizando técnicas
diagnósticas con elevado porcentaje de cobertura de los genes y alta tasa de sensibilidad y
especificidad, se pone de manifiesto la dificultad de proporcionar un diagnóstico clínico certero en
ciertas patologías renales, especialmente las glomerulares y túbulo-intersticiales.
C0278 DESARROLLO COMPLETO DE ESTRATEGIAS DE DIAGNOSTICO
COSTE/EFICIENTES PARA LA POLIQUISTOSIS RENAL EN BASE AL INDICE DE
MUTAGENESIS POBLACIONAL O NECESIDADES ESPECIFICAS.
1 2 2 1
Maria Lara Besada Cerecedo , Beatriz Sobrino , Jorge Amigo Lechuga , Patricia Regueiro Casuso , A Barcia De la
1 3 3 2 3
Iglesia , Manuel Fidalgo , Carmen Vazquez , Angel Carracedo , Candido Diaz Rodriguez , Miguel Angel Garcia
1
Gonzalez
1
Laboratorio de Genetica y Biologia del Desarrollo de las Enfermedades Renales del Instituto de Investigacion Sanitaria
de Santiago de Compostela Santiago de Compostela (A Coruña) España
2
Fundacion Publica Galega de Medicina Xenomica (A Coruña) España
3
Servicio de Nefrologia del Complejo Hospitalario Universitario de Santiago de Compostela (A Coruña) España
1 Objetivos
Las pruebas genéticas tienen el beneficio de asegurar un diagnóstico preciso y anticipar la
enfermedad, pero la limitación de un alto coste. Con la incorporación de la NGS, el coste de dichas
pruebas se ha reducido, acercándose al diagnóstico por resonancia magnética, con la ventaja de que
el diagnóstico genético es uno para toda la vida de un paciente con ADPKD y 100 veces más barato
para los otros miembros de la familia,en una enfermedad donde el tipo de mutación es fundamental
para predecir la progresión de la misma.
Nuestro grupo ha resuelto una de las limitaciones de la aplicación de NGS en el análisis de
enfermedades con pseudogenes con alta homología(como el gen PKD1).Desarrollamos una prueba
genética eficiente para todas las enfermedades quísticas:TEST-1)panel para la región genética
responsable de la mayoría de las poliquistosis renales en la población(región replicada de PKD1,
exones 1-34),TEST-2)Panel para la enfermedad poliquística común(con los 8 genes mutados más
prevalentes), y TEST-3)Panel para la enfermedad poliquística renal común, rara y ultra rara(72 genes
quísticos conocidos).
3 Resultados
Mediante el análisis de 252 familias PKD, desarrollamos una estrategia que identifica la mutación
asociada en 90 familias mediante el TEST-1, en 128 utilizando el TEST-2 y en 34 utilizando el TEST-3.
Reanalizamos todas las variantes génicas conocidas hasta el momento, para el establecimiento
definitivo de una base de datos completa y de acceso público, reclasificando un total de 3260 variantes
génicas en cuatro clases:1174 clase-I(definitivamente patogénicas;141 clase II(probablemente
patogénicas);1594 clase III(de significado incierto) y 351 SNPs(no asociados a
patogenicidad).Ampliamos el análisis genético a todos los miembros familiares (n=2150 pacientes,
afectos y no afectos) que representan el 83% de la poblacion gallega con PKD.
4 Conclusiones
Aquí se describe la primera estrategia coste/eficiente aplicada para el diagnóstico de todos los
pacientes ADPKD pertenecientes al Sistema Local de Salud, antes de finalizar el 2019.
C0286 CARACTERIZACIÓN GENÉTICA DE UNA FAMILIA CON PQRAR EN EL ADULTO.
1 2 1 1
María del Rocío Mena de la Cruz , Ramón Peces Serrano , Elena Vallespin García , Ángela del Pozo Mate , Carolina
1 1 2 1
Peña Granero , María Victoria Gómez del Pozo , María Fernádez Nieto , Julián Nevado Blanco
1
INGEMM-IdiPAZ Madrid (Madrid) España
2
Servicio Nefrología, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
1 Objetivos
Por sospecha clínica, se analizan los genes asociados a hiperuricemia familiar (HNF1B, UMOD, REN,
MUC1) en una paciente mediante un panel personalizado de NGS con 230 genes asociados a
nefropatías.
Se analizó en la paciente la secuencia de 230 genes asociados con nefropatías incluidos en el panel
personalizado NefroSeq_V1.1 con captura de Roche NimbleGen y secuenciación en una plataforma
MiSeq. Las variantes fueron validadas por secuenciación Sanger.
3 Resultados
En el rastreo de los genes asociados con la sospecha clínica no se encontraron alteraciones
patogénicas. La revisión de variantes en el resto de genes incluidos en el panel mostró dos
alteraciones en el gen PKHD1 (c.7280T>C y c.9689delT) con sospecha de implicación en el fenotipo
de la paciente. Las dos variantes detectadas fueron evaluadas mediante predictores de patogenicidad
in silico que catalogaron el cambio c.7280T>C con significado incierto, mientras que el mismo análisis
en la variante c.9689delT clasificó ésta como patogénica. Estudios de segregación en el hermano y los
descendientes pudieron concluir una heterocigosidad compuesta en el caso índice. La detección de
ambas variantes sugirió una revisión de la clínica que reveló presencia de múltiples quistes a nivel
medular con calcificaciones, función renal normal y afectación de la vía biliar en la paciente.
4 Conclusiones
El gen PKHD1 codifica para la fibrocisteína/poliductina localizada en el cilio primario. Esta se expresa
fundamentalmente en riñones y en menor medida en el hígado, el páncreas y pulmones. Cambios en la
secuencia nucleotídica del gen PKHD1 desencadenan fenotipos que varían desde una poliquistosis
perinatal mortal hasta la fibrosis hepática congénita con enfermedad renal leve.
La posibilidad del rastreo de alteraciones mediante paneles personalizados de NGS dirigidos
a patologías renales ha permitido redirigir el diagnóstico genético de la paciente y familiares, algo que
no hubiera sido posible tan fácilmente mediante técnicas de rastreo tradicionales.
C0289 DESCRIPCIÓN DE UNA NUEVA ALTERACIÓN EN WNK1 ASOCIADA A
PSEUDOHIPOALDOSTERONISMO TIPO II EN UNA FAMILIA ESPAÑOLA.
1 2 1 1
María del Rocío Mena de la Cruz , Ramón Peces Serrano , Elena Vallespín García , Ángela del Pozo Mate , Carolina
1 1 2 1
Peña Granero , María Victoria Gómez del Pozo , María Fernádez Nieto , Julián Nevado Blanco
1
INGEMM-IdiPAZ Madrid (Madrid) España
2
Servicio Nefrología, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
1 Objetivos
En una familia española con seis pacientes con clínica sugestiva de pseudohipoaldosteronismo tipo II
(PHA II, OMIM145260) con hipertensión e hipercalemia, se estudió un individuo afecto mediante panel
personalizado de NGS que incluye 230 genes asociados a patologías renales.
Estudio por NGS de los cuatro genes asociados a PHA II mediante un panel personalizado de 230
genes asociados a nefropatías (NefroSeq_V1.1) en un familiar afecto. Captura con tecnología Roche
NimbleGen y posterior secuenciación en un NextSeq500. Estudio de segregación mediante
3 Resultados
Se ha detectado la variante c.1889A>G, p.E630G en heterocigosis en el exón 7 del gen WNK1
mediante el abordaje de técnicas de alto rendimiento (NGS). La variante detectada, altamente
conservada según la aplicación GERP, no ha sido recogida en ninguna base de datos de mutaciones
consultadas (Human mutation Genome Database, EXAC, dbSNP, LOVD, Clin Var NCBI). Estudios
mediante predictores de patogenicidad in silico sugieren un efecto deletéreo. El análisis de la variante
en familiares muestra que segrega con la enfermedad.
4 Conclusiones
El pseudohipoaldosteronismo tipo II, conocido como hiperpotasemia- hipertensión tipo Gordon, es una
enfermedad de origen hereditario que puede ser causadao por mutaciones en WNK1, WNK4, CUL3 o
KLHKL3. Se caracteriza por hipertensión e hipercalemia con función renal normal. También se han
asociado, tanto en niños como en adultos, acidosis metabólica, hiperclorémica y supresión de renina
en plasma. Aldosterona elevada o normal, renina baja.
El abordaje con NGS de los estudios moleculares en esta familia nos han permitido describir una
nueva variante en el gen WNK1. Los análisis in silico, junto con el estudio de segregación, sugieren
que la variante puede asociarse a PHA II. El desarrollo en los últimos años de técnicas de alto
rendimiento, unido a la compilación de datos obtenidos mediante análisis bioinformáticos, ha supuesto
una ayuda en el diagnóstico de enfermedades de origen genético.
C0291 MUTACIONES NUEVAS Y RECURRENTES DEL GEN PNPLA1 EN PACIENTES
ESPAÑOLES E HISPANO-DESCENDIENTES CON ICTIOSIS CONGÉNITA AUTOSÓMICA
RECESIVA: ESTUDIO DE LA MUTACIÓN C.417_418DELINSTC(P.SER140PRO).
1 2 3 1 1
Uxia Saraiva Esperón Moldes , Manuel Ginarte , Laura Rodríguez-Pazos , Laura Fachal , Ana Vega
1
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica-SERGAS, CIBERER, IDIS, Santiago de Compostela, santiago de
compostela (a coruña) España
2
Servicio de Dermatología del Complexo Hospitalario Universitario de Santiago, Facultad de Medicina (a coruña)
España
3
Servicio de Dermatología del Complejo Hospitalario Universitario de Vigo (Pontevedra) España
1 Objetivos
Las ictiosis congénitas autosómicas recesivas (ICAR) son un grupo de enfermedades
raras no sindrómicas que afectan a la queratinización, siendo PNPLA1 uno de los 10 genes
relacionados. Hasta la fecha, se han reportado solamente 5 mutaciones en este gen.
En el marco de un proyecto destinado a identificar pacientes ICAR, nos encontramos a 6
familias aparentemente no relacionadas con una nueva mutación missense en PNPLA1,
c.417_418delinsTC(p.Ser140Pro), y otras dos nuevas mutaciones nonsense: c.282dupT y c.892C
>T.
El objetivo de nuestra investigación es profundizar en el estudio de la mutación
c.417_418delinsTC(p.Ser140Pro) y conocer si las familias portadoras de la misma comparten un
ancestro común.
El posible efecto de la mutación en la función de la proteína se analizó
utilizando el SWISS-MODEL online tool y la herramienta Swiss-PdbViewer. El estudio del grado
de conservación nucleotídica se realizó con el programa Clustal Omega.
Los haplotipos de las 6 familias (5 españolas y 1 venezolana de ascendencia española) se
estudiaron para conocer la edad de la mutación c.417_418delinsTC(p.Ser140Pro) y la del
ancestro común a todas ellas empleando 8 marcadores polimórficos flanqueantes al gen
PNPLA1.
3 Resultados
El análisis de la estructura proteica mostró que la mutación está presente en una

región de loop formado por residuos altamente conservados, lo que indica que el cambio
proteico en ese residuo tiene consecuencias estructurales probables.
Por otro lado, DMLE + estimó que esta mutación apareció por primera vez hace
aproximadamente 137 generaciones. Además nuestros datos sugieren que las 6 familias
descienden de un ancestro común que vivió hace aproximadamente 37 generaciones.
4 Conclusiones
En conclusión, este estudio explica el posible mecanismo que subyace en la
patogenicidad de la mutación c.417_418delinsTC(p.Ser140Pro). Nuestros resultados también
sugieren que todos los pacientes portadores de la misma son descendientes de un fundador
reciente posterior al origen de la mutación.
C0301 MICROCEFALIA EN COLOMBIA ANTES DE LA EPIDEMIA DEL VIRUS DEL ZIKA
(REVISIÓN SISTEMÁTICA DE LA LITERATURA)
1 1 2 1
Estephania Candelo Gomez , Gabriela Caicedo , Alexandra Cossio , Harry Pachajoa Pachajoa
1
Universidad Icesi (Valle) Colombia
2
CIDEIM (Valle) Colombia
1 Objetivos
La microcefalia es un importante signo neurológico, puede ser descrita como congénita o postnatal. En
ocasiones siendo esta, el primer indicio de una afección congénita, genética o un problema adquirido.
Las causas genéticas se han reportado en aproximadamente 15.5% a 53.3% de los casos. Describir la
prevalencia de microcefalia en Colombia, reportado en los diferentes artículos antes del inicio de la
epidemia del virus del Zika en Colombia.
Se revisaron diferentes bases de datos tales como; MEDLINE, SCOPUS, Scielo y los informes anuales
de sistemas de vigilancia de malformaciones congénitas nacionales y latinoamericanos publicados
antes de Abril de 2015. Se incluyeron artículos observacionales transversales, cohorte y ecológicos,
que describieron la prevalencia de microcefalia en las diferentes regiones del país. Se excluyeron
reportes de casos, revisiones y estudios que no tenían dentro de sus desenlaces la microcefalia. Para
todos los estudios incluidos dentro de la revisión se recopilaron datos como; diseño del estudio, año de
publicación, área de estudio, periodo de estudio, autores, y otras características poblaciones. Se tomó
como variable desenlace el cálculo de la tasa por 10.000 de microcefalia
3 Resultados
Se identificaron 32 artículos no duplicados, 25 artículos fueron revisados completamente para ser
seleccionados como artículo de revisión, 12 artículos cumplían con los criterios de inclusión en la
revisión sistemática, incluyendo 2.808.308 nacimientos, 21.363 malformados, 420 microcefalias, y
1680 malformaciones del sistema nervioso central. La tasa por 10.000 nacimientos más alta en el país
fue registrada por ECLAMC durante 1982-2013. En promedio durante el periodo estudiado la tasa de
microcefalia por 10.000 fluctuó entre 0,3-3,1 por 10.000 nacidos vivos, en promedio la tasa de
microcefalia fue de 1,78 x 10.000 NV.
4 Conclusiones
La evidencia sugiere que la tasa de microcefalia en Colombia no ha superado 3,1 x 10.000 NV y
comparado con Latinoamérica se encuentra en el promedio.
C0331 DÉFICIT DE ALFA-1-ANTITRIPSINA: IMPORTANCIA DE LA CORRELACIÓN
GENOTIPO/NIVELES SÉRICOS
1 2 3 3
Raquel Saez Villaverde , Beatriz Martínez Delgado , Julien Swen Crettaz , Raquel Muguerza Iraola , Leire Otaolea
3 3 3 4
Santacoloma , Yolanda Ramírez García , Nerea Bastida Lertxundi , Francisco Javier Michel de la Rosa , Francisco
5 5
Javier Eizaguirre Arocena , Leonor Arranz Arana
1
Hospital Donostia, Genética San Sebastian-Donostia (Guipuzcoa) España
2
Unidad de Genética Molecular IIER/ISCIII (Madrid) España
3
Genética Hospital Universitario Donostia, San Sebastián-Donostia (Gipuzkoa) España
4
Servicio de Neumología, Hospital Universitario Donostia, San Sebastián-Donostia (Gipuzkoa) España
5
Servicio de Pediatría, Hospital Universitario Donostia, San Sebastián-Donostia (Gipuzkoa) España
1 Objetivos
Introducción:
El déficit de alfa 1 antitripsina está causado por mutaciones en el gen SERPINA1 que predisponen al
desarrollo de enfisema y/o cirrosis hepática. Las mutaciones más comunes causantes de DAAT son
Glu342Lys (alelo Pi*Z) y Glu264Val (alelo Pi*S); sin embargo, hay algunas variantes atípicas que hay
que considerar porque pueden incrementar el riesgo de enfermedad pulmonar.
Objetivos:
Señalar la importancia de la correlación entre genotipo y niveles séricos de alfa 1 antitripsina en
aquellos pacientes a los que se les realiza el estudio genético mediante técnicas diferentes a la
secuenciación Sanger (PCR tiempo real)
Se analizaron 162 muestras de pacientes con sospecha de DAAT: determinación de niveles séricos
por inmunoturbidimetría y genotipado mediante PCR tiempo real (LightMix Alpha 1-Antitrypsin Pi*S and
Pi*Z)
3 Resultados
La distribución de los genotipos y concentraciones fue: 14,72% (24) PI*MM y niveles séricos >0,9 g/L,
22,08% (36) PI*MS y concentraciones 0,83-1,09 g/L, 5,52% (9) PI*SS y niveles 0,83-0,88 g/L, 37,42%
(61) PI*MZ y rangos 0,67-0,84 g/L, 12,88% (21) PI*SZ y niveles 0,45-0,73 g/L y 3,06% (5) PI*ZZ con
niveles inferiores a 0,3 g/L.
Los niveles séricos del 4,29% (7) estaban por debajo del rango que le debería corresponder a su
genotipo (PI*MM, PI*MS), por lo que se realizó estudio de confirmación por secuenciación Sanger. Se
determinó que en 2 de los 7 casos, genotipados como PI*MM (alelo no S no Z) por PCR tiempo real,
eran portadores de variantes atípicas deficitarias, uno de la mutación PI_Heerlen (PI*M Heerlen) y el
otro de la variante deficitaria PI_M Malton (PI*M_MMalton) confirmándose el genotipo previo en los 5
casos restantes.
4 Conclusiones
En nuestra serie la confirmación mediante Sanger de casos con discordancia genotipo (PCR tiempo
real)/niveles séricos de AAT nos ha permitido identificar dos casos con variantes deficitarias raras
(PI_Heerlen y PI_M Malton)
C0334 VARIABILIDAD FENOTÍPICA (PRE Y POSTNATAL) EN LA POLIQUISTOSIS RENAL
AUTOSÓMICA DOMINANTE
1 2 2 3 3
Maria Camila Armirola , Isabel Lorda Sanchez , Ana Bustamante Aragones , Maria Garcia Hoyos , Mercedes Molero ,
2
Saoud Swafiri
1
Universidad de los Andes (Bogota) Colombia
2
Fundacion Jimenez Diaz madrid (madrid) españa
3
IMEGEN (Valencia) España
1 Objetivos
El objetivo de este estudio es analizar la variabilidad clínica de la poliquistosis renal autosómica
dominante (PQRAD) en pacientes diagnosticados en nuestro hospital por sus implicaciones en el
diagnostico clínico, sobre todo prenatal.
Se realizó un estudio retrospectivo de los casos de PQRAD con diagnóstico genético en nuestro
hospital en periodo 2013/2016.
El diagnóstico genético se realizó mediante el análisis de PKD1 y PKD2 por secuenciación de Sanger.
Para el caso del gen PKD1, se usó la amplificación especifica del gen mediante long-PCRs y
posteriores PCRs internas para evitar la amplificación de pseudogenes.
3 Resultados
Se encontró un total de 9 casos diagnosticados genéticamente, de los cuales 4 se debían a cambios
en PKD1 y 5 en PKD2. Del primer grupo, sólo una variante producía una proteína truncada En cambio,
de los 5 casos con cambios en PKD2, 4 de ellos codificaban para una proteína truncada. La edad
promedio al diagnóstico de los casos en PKD1 fue de 21,5 años. Uno de ellos fue sospechado
clínicamente en el periodo prenatal por hallazgos ecográficos y resultó ser portador de una variante
actualmente considerada hipomórfica heredada de su de su madre asintomatica. Por otro lado, los
casos con variantes en PKD2 fueron diagnosticados en promedio alrededor de los 34,2 años. Uno de
ellos fue diagnosticado en una mujer clínicamente asintomática a partir de signos ecográficos claros en
un embarazo.
4 Conclusiones
La PQRAD, presenta un amplio espectro de variabilidad fenotípica, incluso intrafamiliar, que oscila
desde los portadores asintomáticos clínicamente hasta los casos diagnosticados prenatalmente. Ello
puede dificultar el diagnostico correcto en fetos afectos y consecuentemente, el asesoramiento sobre
pronostico y riesgo en futuros embarazos.
C0335 AISLAMIENTO DE CÉLULAS ENDOTELIALES LINFÁTICAS EN PACIENTES CON
ANOMALÍA LINFÁTICA GENERALIZADA
1 1 1 1 1
Noelia Agra Andrieu , Gloria Oliva-Molina , Gonzalo Herranz , Lara Rodríguez-Laguna , Gema Gordo , Juan Carlos
2 1 1
López-Gutiérrez , Pablo Lapunzina Badía , Victor Martinez-Glez
1
España
2
1 Objetivos
La anomalía linfática generalizada (GLA) se caracteriza por malformaciones linfáticas (MLs) y
osteolisis. Su causa genética se desconoce, aunque por su patrón de distribución se sospecha de un
mecanismo de mosaicismo somático, probablemente limitado a células endoteliales linfáticas (LECs).
El aislamiento de LECs a partir de tejido afectado de pacientes con GLA no ha sido descrito hasta el
momento, y permitirá la detección de posibles mutaciones en mosaico causantes de la enfermedad.
Presentamos un protocolo de aislamiento de LECs derivadas de ML tanto esporádicas como de un
paciente con GLA. Como control positivo se utilizaron LECs comerciales. El tejido fresco es disgregado
enzimáticamente y las células seleccionadas por métodos inmunomagnéticos (MACS) y/o de
fluorescencia (FACS), usando marcadores específicos de LECs: CD31, CD34 y Podoplanina. Las LM-
LECs obtenidas son posteriormente verificadas por citometría de flujo.
3 Resultados
La digestión enzimática del tejido con colagenasa es crítica para obtener un elevado rendimiento y
viabilidad de la población celular de partida. El empleo de VEGF-C en el medio de cultivo reduce la
contaminación por células no endoteliales. El porcentaje de LECs seleccionadas posteriormente por
citometría de flujo debe estar entre 0,8 y 12,4%. FACS demostró ser más eficiente y específico que
MACS, que requiere mayor cantidad de células. La selección por FACS debe seguir una estrategia
CD31+/Podoplanin+/CD34Low. La citometría de flujo nos permitió confirmar el correcto aislamiento de
las ML-LECs. Estos resultados requieren posteriores estudios fenotípicos y funcionales:
inmunohistoquímica, ensayos de proliferación y apoptosis, formación de vasos in vitro, etc.
4 Conclusiones
Hemos establecido un protocolo de aislamiento y obtenido por primera vez LM-LECs de un paciente
con GLA. Esto nos permitirá profundizar en las causas genéticas de la enfermedad, así como realizar
estudios funcionales que revelen posibles dianas para nuevos tratamientos.
C0337 APROXIMACIÓN GENÓMICA AL CONOCIMIENTO DE LAS BASES GENÉTICAS DE
LOS CASOS AISLADOS DE RETINOSIS PIGMENTARIA
1 1 1 1
Nereida Bravo Gil , María González del Pozo , Marta Martín Sánchez , Cristina Méndez Vidal , Enrique Rodríguez de la
2 1 1
Rúa , Salud Borrego , Guillermo Antiñolo
1
Unidad de Gestión Clínica de Medicina Materno Fetal, Genética y Reproducción del Hospital Universitario Virgen del
Rocío. Sevilla (Sevilla) España
2
Unidad de Gestión Clínica de Oftalmología de los Hospitales Universitarios Virgen Macarena y Virgen del Rocío.
(Sevilla) España
1 Objetivos
Identificar la causa genética de la enfermedad en una cohorte de casos aislados de Retinosis
Pigmentaria (RP), permitiendo así obtener la proporción de estos casos que siguen un modo de
herencia autosómico recesivo, autosómico dominante y ligado al cromosoma X.
Para el diagnóstico molecular de 106 casos aislados de RP se utilizó un panel de captura
personalizado (SeqCap EZ Choice System, NimbleGen) que cubre todos los exones de un total de 68
genes (65 asociados previamente a distrofias hereditarias de retina y 3 genes candidatos) y 3 regiones
intrónicas de los genes USH2A, CEP290 y OFD1. La secuenciación se realizó en un secuenciador
MiSeq de Illumina.
3 Resultados
La tasa de diagnóstico obtenida fue de un 62,26% (66 de los 106 casos) con un porcentaje de
rectificación clínica del 30,3%. Estos datos ponen de manifiesto la alta eficiencia de esta aproximación
genómica incluso para aquellos casos cuyo diagnóstico clínico resulta ambiguo. Los 66 casos resueltos
nos han permitido esclarecer las bases genéticas de este grupo de pacientes, siendo un 62,1% de los
casos autosómicos recesivos, un 24,2% autosómicos dominantes y un 13,6% ligados al cromoxoma X.
4 Conclusiones
Estos resultados indican que el patrón de herencia más representado en los casos aislados de RP es
el autosómico recesivo. Sin embargo, la proporción de casos con modos de herencia que suponen un
mayor impacto familiar (autosómico dominante y ligado al cromosoma X) es también considerable
(~38%) e incluso superior a lo observado en otros estudios, por lo que es crucial que estos casos sean
tenidos en cuenta en el manejo clínico y consejo genético de los pacientes. Por tanto, los datos aquí
presentados constituyen un avance significativo en el conocimiento de los casos aislados de RP, cuyo
abordaje se ha visto muchas veces postergado debido a sus características genéticas.
C0348 ANÁLISIS GENÉTICO DE PACIENTES CON ANIRIDIA CONGÉNITA SIN
MUTACIONES EN PAX6 MEDIANTE NGS Y ACGH
1 1 1 2 1
Maria Tarilonte Misas , Patricia Ramos , Cristina Villaverde , Luciana Rodrigues Jacy da Silva , Domingo Aguilera ,
1 1 1 1 1
Margarita Martínez Atienza , Isabel Lorda , Maria J. Trujillo-Tiebas , Fiona Blanco-Kelly , Carmen Ayuso , Marta
1
Corton
1
Departamento de Genetica. IIS-Hospital Universitario Fundación Jiménez Díaz-CIBERER Madrid (Madrid) España
2
University of Mogi das Cruces (San Paulo) Brasil
1 Objetivos
La aniridia congénita está causada por la haploinsuficiencia de PAX6 en el 75-90% de los pacientes.
Es una patología autosómica dominante con gran variabilidad clínica y solapamiento fenotípico con
otras disgenesias del segmento anterior. Nuestro principal objetivo fue el estudio genético de pacientes
con aniridia sin mutaciones y/o deleciones en PAX6.
A partir de una cohorte de 73 pacientes con diagnóstico de aniridia aislada y sindrómica,
seleccionamos 12 pacientes negativos tras cribado de PAX6. Se utilizaron distintas técnicas para
estudiar 150 genes involucrados en patologías del desarrollo ocular (paneles personalizados de NGS y
aCGH, secuenciación Sanger y MLPA), y exoma completo (WES) en dos familias.
3 Resultados
Se identificaron mutaciones y/o CNVs en FOXC1 y PITX2 en tres de los casos estudiados. Se
detectaron dos monosomías teloméricas de novo en 6p25.3, con tamaño de 1.7 y 1.9Mb,
respectivamente que afectan a la región completa de FOXC1. El primer paciente presentaba aniridia y
glaucoma congénito sin que se observaran otras manifestaciones sistémicas. El segundo caso, con
aniridia parcial y múltiples malformaciones congénitas, presentó adicionalmente una monosomía
telomérica de 9Mb en 6q26-27, confirmándose la presencia de un cromosoma 6 en anillo.
Un tercer paciente con aniridia, glaucoma congénito y algunos signos extraoculares del Síndrome de
Axenfeld-Rieger, presentó una nueva mutación en PITX2:c.784del;p.(Ser262Profs*30), de herencia
paterna y con expresividad variable.
En el resto de los pacientes no se ha podido identificar variantes claramente patogénicas en ninguno
de los genes estudiados, incluyendo también a TRIM44, gen recientemente implicado en aniridia.
4 Conclusiones
Este trabajo ha identificado alteraciones genéticas en pacientes con aniridia compleja o sindrómica en
dos genes previamente asociados al síndrome de Axenfeld-Rieger y, minoritariamente a aniridia. La
ausencia de variantes patogénicas en el resto de pacientes indica la posibilidad de la implicación de
nuevos genes en el desarrollo de aniridia.
C0349 RENDIMIENTO DIAGNÓSTICO DEL EXOMA DIRIGIDO. NUESTRA EXPERIENCIA
EN MÁS DE 500 CASOS ANALIZADOS EN EL ÚLTIMO AÑO.
1 1 1 1 1 1
Laura Rausell Sanchez , Cristian Perez , Merche Bermejo , María José Garcia , Carmen Marzal , Marian Lázaro ,
1 1 1 2 1 1
Merche Molero , Laura Cabrera , Anna Gómez , Isaura Araceli González , Eva Ramirez , Pablo Marín-Garcia , Carlos
1 1 1
Ruiz Lafora , Javier Garcia-Planells , Maria Garcia-Hoyos
1
Instituto de Medicina Genómica (Valencia) España
2
Facultad de Medicina de la Universidad Autónoma de Guadalajara (Jalisco) México
1 Objetivos
Los avances tecnológicos producidos durante los últimos años, entre ellos la NGS, son especialmente
relevantes en el diagnóstico de las enfermedades complejas, genéticamente heterogéneas y
enfermedades con fenotipos solapantes difíciles de diferenciar clínicamente.
Durante el último año, aplicando la NGS, hemos abordado el diagnóstico genético, mediante un exoma
clínico dirigido, en a más de 500 pacientes con más de 150 enfermedades/entidades clínicas distintas.
El objetico del presente trabajo es hacer un estudio retrospectivo para determinar el rendimiento
diagnóstico de esta estrategia.
Las regiones codificantes de los genes de interés asociados a cada una de las enfermedades objeto de
estudio fueron capturadas, y las librerías paired-end generadas, utilizando el Kit TruSight One. La
ultrasecuenciación (2x150pb) fue llevada a cabo en un NextSeq. El análisis e interpretación de los
resultados se realizó mediante un pipeline validado y desarrollado internamente que posee controles
de calidad del proceso en cada uno de los puntos críticos.
Todas las variaciones detectadas fueron anotadas y clasificadas siguiendo las recomendaciones de la
ACMG y los cambios de significado clínico incierto, probablemente patogénicos o patogénicos fueron
confirmados mediante Sanger.
3 Resultados
Mediante los exomas dirigidos pudimos detectar la causa genética de la enfermedad en más de un
14% de los pacientes y la posible causa de la enfermedad en un 9%. En aproximadamente un 30% de
los casos los resultados fueron de significado clínico incierto y en otro 30% todos los cambios
detectados fueron benignos. Aunque este rendimiento diagnostico varía dependiendo de la
enfermedad.
Con los parametros de calidad aplicados, no detectamos ningún falso positivo, en los casi 1000
cambios confirmados por Sanger.
4 Conclusiones
El análisis orientado, mediante un exoma clínico dirigido, a entidades clínicas concretas nos ha
permitido diagnosticar genéticamente en tiempos y costes cada vez más reducidos a pacientes con
enfermedades complejas cuyo estudio hace años era impensable o inabordable.
C0354 RETINOSIS PIGMENTARIA AUTOSÓMICA RECESIVA ASOCIADA A MUTACIONES
EN SYNE2: UNA NUEVA ASOCIACIÓN GEN-ENFERMEDAD
Cristina Méndez Vidal, Nereida Bravo Gil, María González del Pozo, Laura Romero Pérez, Marta Martín Sánchez,
Salud Borrego, Guillermo Antiñolo
UGC Medicina Maternofetal, Genética y Reproducción, Hospital Universitario Virgen del Rocio (Sevilla) España
1 Objetivos
Identificar el defecto genético asociado a la Retinosis Pigmentaria (RP) autosómica recesiva en una
familia española (RP184), en la que se habían excluido previamente la presencia de mutaciones en 64
genes de retina.
Se realizó la secuenciación de exoma completo en la familia RP184. Posteriormente, se llevó a cabo la
secuenciación de un panel de genes de retina personalizado en 163 casos no resueltos de RP. Por
último, aplicamos técnicas de PCR cuantitativa y de inmunohistoquímica para los estudios de
expresión en tejidos y de localización, respectivamente
3 Resultados
En la familia RP184, se identificaron dos mutaciones en heterocigosis compuesta (c.20140G>A;
p.Asp6714Asn y c.20339G>A; p.Arg6780Gln) en SYNE2, un gen que no había sido previamente
asociado a RP. El rastreo mutacional de SYNE2 en los casos de RP no resueltos, permitió identificar
dos mutaciones distintas (c.3235A>G; p.Thr1079Ala y c.15800A>T; p.Gln5267Leu), que co-
segregaban con la enfermedad en una familia no relacionada (RP26). El gen SYNE2 ha sido asociado
a defectos de retina en distintos modelos animales como la mosca de la fruta, pez cebra y ratón. De
-/-
hecho, se ha descrito que los defectos de retina presentes en los modelos de ratón, Syne2 y
cpfl8
Syne2 , se deben a la presencia de una deleción y a una mutación espontánea en Syne2,
respectivamente. Nuestros estudios indican que SYNE2 se expresa abundantemente en la retina
humana y que se localiza en el epitelio pigmentario de la retina, en los fotorreceptores, en la capa
nuclear interna y en la capa de células ganglionares de retina humana sana.
4 Conclusiones
En conjunto, estos resultados vinculan por primera vez al gen SYNE2 con la aparición de RP en
humanos. Consideramos que el rastreo mutacional de este gen en individuos afectos de RP, debería
ser tenido en cuenta para asegurar el correcto diagnóstico molecular en estos pacientes.
C0397 POLIQUISTOSIS RENAL AUTOSÓMICA DOMINANTE
1 1 2 1
Maria Esther Simarro Rueda , Ana María Gómez Pastor , María Luisa Quintanilla Mata , Patricia Juan García , Laura
1
Navarro Casado
1
HGUA (Albacete) España
2
Hospital General Universitario de Albacete, Unidad de Genética Clínica. Servicio de Análisis Clínicos Albacete
(Albacete) España
1 Objetivos
La poliquistosis renal autosómica dominante (PQRAD) es la enfermedad renal hereditaria más
frecuente. Es una enfermedad multiorgánica con manifestaciones clínicas derivadas de la formación de
quistes renales y, en muchos casos, de quistes en hígado y páncreas. Es responsable del 7-10% de
los casos de insuficiencia renal crónica que precisan tratamiento renal sustitutivo. Está causada por
mutaciones en los genes PKD1 (85-90%) y PKD2 (10-15%). El diagnóstico se establece mediante
técnicas de imagen. El estudio molecular confirma el diagnóstico y permite estratificar a la familia.
Estudio descriptivo de los casos de PQRAD clínicamente diagnosticados, derivados a la consulta de
Asesoramiento Genético, para realizar estudio molecular y asesoramiento genético.
Se realizó el estudio molecular de la PQRAD mediante la secuenciación de los exones y regiones
intrónicas adyacentes de los genes PKD1 y PKD2.
3 Resultados
Durante el periodo de tiempo 2 años se derivaron 11 pacientes a la consulta:
- Ocho presentaron mutación en gen PKD1 (tres de ellas descritas anteriormente). Todos tenían
quistes renales, con función renal conservada. Cuatro pacientes tenían familiares con diagnóstico
clínico de PQRAD, uno de ellos confirmado genéticamente.
- Dos presentaron mutación en gen PKD2 (ninguna descrita anteriormente). De ellos, ambos
presentaban familiares con diagnóstico clínico de PQRAD, y sólo uno de ellos tenía quistes renales,
con función renal conservada.
- Un paciente, a pesar de tener diagnóstico clínico, no se encontró mutación en ninguno de los genes.
Se realizó MLPA (Multiple Ligation-dependent Probe Amplication) de PKD1 y PKD2, para analizar la
presencia de grandes deleciones/duplicaciones no encontrándose alteración.
4 Conclusiones
Se confirmó el diagnóstico clínico en todos los pacientes excepto en uno.
El conocimiento de la mutación causal permite llevar a cabo programas de prevención temprana de la
enfermedad, así como la planificación de la vida reproductiva.
C0410 GENÉTICA DE MECANISMOS DE MODULACIÓN DEL DOLOR EN MUJERES
SANAS CON Y SIN DISMENORREA PRIMARIA
1 2 1 2 2
Estela Sangüesa Sangüesa , Rocío Fortún Rabadán , Julia Concha Mayayo , Agathe Medard , María Ortiz Lucas , Mª
1 3
Pilar Ribate Molina , Cristina B. García García
1
UNIVERSIDAD SAN JORGE. Grupo de investigación GREENLIFE. Campus Universitario Villanueva de Gállego.
(Zaragoza) España
2
UNIVERSIDAD SAN JORGE. Grupo de investigación i-Physio. Campus Universitario Villanueva de Gállego.
(Zaragoza) España
3
UNIVERSIDAD SAN JORGE. Campus Universitario Villanueva de Gállego (Zaragoza) España
1 Objetivos
La dismenorrea primaria (DP) se define como la presencia de dolor de origen uterino durante la fase
menstrual del ciclo. La exposición repetida al dolor menstrual puede alterar los mecanismos de
modulación del dolor, habiéndose evidenciado sensibilización central en las mujeres que la padecen.
Los estudios genéticos se postulan indispensables en la comprensión de estos mecanismos. Las
monoaminas ejercen influencia en el dolor ya que la serotonina y norepinefrina participan en la
modulación del dolor. Se pretende determinar si existe relación entre DP, los mecanismos de dolor y
polimorfismos de los genes SLC6A4 (transportador de recaptación de serotonina) y COMT
(degradación de noradrenalina y otras catecolaminas).
Estudio caso-control sobre mujeres sanas, con (n=16) y sin (n=11) DP. Se midió la modulación
mediante algometría en diferentes fases del ciclo menstrual. Para el genotipado de las participantes se
TM
tomaron muestras sanguíneas en tarjetas FTA y se analizaron mediante PCR-RFLP usando la
endonucleasa HpaII para el gen SLC6A4 y NlaIII para el gen COMT.
3 Resultados
No se ha encontrado asociación entre DP y ninguno de los polimorfismos estudiados. Las frecuencias
haplotípicas para el polimorfismo del gen SLC6A4 fueron: LA 59,3%, LG 5,5% y SA 35,2%. El genotipo
LA/SA fue el más común, sin haber casos de LA/SG ni SG/SG. En cuanto a COMT el genotipo más
frecuente fue el heterocigoto Val/Met. Las frecuencias alélicas para este gen fueron: Val 59,3% y Met
40,7%.
4 Conclusiones
Los resultados preliminares obtenidos apuntan a una posible asociación del genotipo SA/SA del gen
SLC6A4 y el genotipo Met/Met para el gen COMT con una menor modulación del dolor. En el futuro se
pretende aumentar el tamaño muestral así como el genotipado de genes adicionales como BDNF, que
codifica un factor neurotrófico implicado en la modulación del dolor y relacionado con la DP.
C0415 POTENCIAL Y POSICIONAMIENTO DE LA SECUENCIACIÓN MASIVA EN EL
DIAGNÓSTICO DE LAS INMUNODEFICIENCIAS PRIMARIAS
1 2 2 1
Maria Bravo Garcia-Morato , Elena Vallespín García , Ángela del Pozo Maté , Antonio Ferreira Cerdán , Rebeca
1 1
Rodríguez Pena , Eduardo López Granados
1
2
1 Objetivos
Nuestro centro fue pionero en España al introducir en 2015 la secuenciación masiva mediante un panel
de 421 genes, de diseño y desarrollo propios, para el diagnóstico de las inmunodeficiencias primarias
(IDP). Se incluyó en un proceso diagnóstico ya consolidado que constaba de enfoque clínico,
inmunológico celular y molecular, y secuenciación Sanger. Pretendemos, basados en nuestra
experiencia de uso, precisar la potencialidad, requisitos, y máxima eficiencia del empleo de la
secuenciación masiva en IDP.
El panel ha sido diseñado conteniendo todos los genes ya descritos y otros candidatos usando la
tecnología SeqCap EZ (Roche Nimblegen). Las librerías de ADN se llevan a cabo mediante el kit
comercial KAPA Library Prep SECAP EZ Library SR v4.2. Las muestras se procesan en
secuenciadores MiSeq system y HiSeq system (Illumina). La v.2 es la actualmente en uso. Numerosas
técnicas de confirmación a nivel genético e inmunológico han sido además desarrolladas como
complemento imprescindible para la interpretación de resultados.
3 Resultados
El panel ha sido validado con múltiples mutaciones de distintos subgrupos de IDP previamente
conocidas. Se han encontrado mutaciones en genes de baja prevalencia o necesidad de diagnóstico
prioritario. Todos los cambios se han confirmado por Sanger.Las regiones no capturadas comprenden
genes que tienen pseudogenes o secuencias de alta homología en el genoma, y su análisis requiere
tecnologías complementarias. El rendimiento diagnóstico del panel para nuestra cohorte ronda el 50%.
Sin embargo, muchos resultados siguen requiriendo volver a los estudios inmunológicos para su
correcta interpretación.
4 Conclusiones
Nuestro panel tiene gran sensibilidad y especificidad. Constituye ya la aproximación inicial al
diagnóstico genético rutinario de nuestros pacientes. El máximo aprovechamiento de esta tecnología
para las IDP requiere su posicionamiento adecuado en el proceso diagnóstico de un centro con
experiencia previa que aborde de manera global el diagnóstico de las IDP.
C0489 ENFOQUE MOLECULAR DE DEFICIENCIA DE 21 HIDROXILASA, PRESENTACIÓN
DE UN CASO CON ANTECEDENTE DE MADRE CON DELECIÓN DE CYP21A2 EN
POSIBLE MOSAICO.
1 1 1 1
Elena Van der Vorst Roncero , Marta García González , Jesús Sánchez Nogueiro , Oscar de Agustín Díez , Evangelina
1 2 3 1
Pestaña Molinero , Luige Biciati Alvim , Alberta Belinchon Martinez , José Antonio López García-Asenjo
1
2
Genética Molecular, Hermes Pardini (Belo Horizonte) Brasil
3
Servicio de Genética, Synlab Diagnósticos Globales Alcobendas (Madrid) España
1 Objetivos
La Hiperplasia Suprerrrenal Congénita (CAH) es un grupo de trastornos autosómicos recesivos
caracterizados por la incapacidad de convertir el colesterol en cortisol. El 90% de los casos están
causados por mutaciones en homocigosis o heterocigosis compuesta en el gen CYP21A2, que codifica
para la enzima 21-hidroxilasa.
El objetivo de este trabajo es mostrar el enfoque molecular del laboratorio de los casos de CAH
causados por mutaciones en CYP21A2.
Varón de 4 años con sospecha clínica de hiperplasia suprarrenal congénita.
Se estudia el gen CYP21A2 mediante secuenciación Sanger y MLPA (Kit P050-C1, MRC Holland)
siguiendo las indicaciones del proveedor. Las variantes detectadas en el índice fueron estudiadas en
los miembros familiares disponibles.
3 Resultados
Se identifican dos variantes patogénicas en CYP21A2. Primero, una variante de cambio de sentido,
p.Arg356Trp en hemicigosis, y posteriormente una deleción de los exones 1 - 7 (sondas L18351-
L21169) (los exones 8 al 10 no son analizados en este kit). El estudio de co-segregación familiar
demostró que la variante de cambio de sentido se heredada por rama paterna (padre y abuela paterna
portadores), mientas que la deleción fue detectada en posible mosaicismo del 20-30% en la madre.
4 Conclusiones
El abordaje metodológico de los casos con sospecha de CAH mediante la combinación de
secuenciación sanger y MLPA permite detectar variantes causadas por diferentes mecanismos. En
este caso, la realización del MLPA tras la secuenciación ha evitado un diagnóstico genético
inadecuado, mostrando el estado de hemicigosis de la mutación sin sentido y no de homocigosis.
El estado de portadora en mosaico (en sangre periférica) de la madre, no ha sido descrito en la
literatura con anterioridad, y modifica los riesgos para próximos embarazos.
Este caso demuestra la importancia del estudio familiar, que permite establecer un asesoramiento
genético preciso y ofrecer diagnóstico preimplantacional y/o prenatal.
C0495 IDENTIFICACIÓN DE DOS MUTACIONES NONSENSE EN EL GEN F5 ASOCIADAS
AL DÉFICIT DE FACTOR V
1 1 2 2 3 1
Sara Bernal Noguera , Manel Baena , Irene Pelaéz , Jesús De la Cruz , Laura Alias , Jordi Surrallés , Eduardo
4 5
Tizzano , Antonio Liras
1
Hospital Santa Creu i Sant Pau Barcelona (Barcelona) España
2
Complejo Hospitalario de Jaén (Jaén) España
3
CIBERER U-705 - Hospital Santa Creu i Sant Pau (Barcelona) España
4
Hospital Vall de Hebron (Barcelona) España
5
Universidad Complutense de Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
La deficiencia del Factor V se trata de una coagulopatía congénita clasificada dentro de las
enfermedades ultra raras, ya que se da 1-9:1.000.000 de recién nacidos vivos. La causa molecular de
esta deficiencia son las alteraciones en el gen F5, que mayoritariamente se clasifican por ser
mutaciones puntuales. A diferencia de las coagulopatías ligadas al cromosoma X, esta se transmite
siguiendo una herencia autosómica recesiva. Las principales manifestaciones clínicas son episodios
hemorrágicos y artropatía hemorrágica, siendo más graves en la infancia. La identificación y posterior
caracterización de la causa molecular en los pacientes con déficit de Factor V se hace necesario para
investigar en futuras terapias para esta patología.
Paciente de 10 años procedente del sur de España y que presentaba niveles de Factor V en plasma
<1%, las primeras manifestaciones hemorrágicas fueron presentadas a los 8 meses de vida. En el ADN
de esta paciente se procedió a secuenciar la totalidad de las regiones codificantes del gen del F5 (25
exones y las correspondientes zonas de unión exon-intron). Los padres de la paciente presentaban un
leve déficit de Factor V en plasma, infiriendo que ambos serían portadores de esta patología.
3 Resultados
Se han identificado 24 variantes en el gen F5 de esta paciente con déficit de Factor V (2 nonsense, 7
missense, 8 silenciosas y 7 cambios intrónicos). El estudio familiar permitió confirmar que los dos
cambios nonsense (p.Arg740* y p.Trp1093*) se encuentran en heterocigosis en la paciente, siendo una
de ellas previamente descrita.
4 Conclusiones
Con la identificación y posterior clasificación a nivel molecular de las dos mutaciones se confirma
genéticamente el déficit de Factor V en esta paciente. El pronóstico de la enfermedad siempre es mejor
cuando el diagnóstico se realiza de forma precoz. La caracterización molecular de estos pacientes es
importante para futuros estudios de investigación en terapia.
C0511 ABORDAJE DE OSTEOPETROSIS INFANTIL MALIGNA MEDIANTE EXOMA
CLÍNICO. PRESENTACIÓN DE CASO CLÍNICO
1 1 1 2
Elena Van der Vorst Roncero , Evangelina Pestaña Molinero , Miriam León Otegui , Marta Baragaño González ,
3 1
Alberta Belinchon Martinez , José Antonio López García-Asenjo
1
2
Servicio de oncohematología infantil, Hospital Universitario Quirón Salud (Madrid) España
3
1 Objetivos
La osteopetrosis es un grupo de patologías genéticas caracterizadas por un incremento en la densidad
ósea causada por un fallo en el desarrollo o función de los osteoclastos. Se pueden clasificar en
dominantes y recesivas. En el grupo de las formas recesivas, las de presentación infantil maligna son
las causadas por variantes patogénicas en los genes TCIRG1, TNFSF11, CA2, CLCN7, OSTM1,
PLEKHM1 y TNFRSF11A.
El objetivo de este trabajo ha sido analizar un caso de osteopetrosis autosómico recesivo mediante
secuenciación masiva.
Paciente femenina de 2 años y 6 meses de edad, con diagnóstico clínico y radiológico de
osteopetrosis, sometida a trasplante de células madre hematopoyéticas posterior al resultado
molecular. Antecedentes de 2 hermanos fallecidos con un fenotipo similar; padres y 3 hermanos sanos.
Se realizó secuenciación mediante plataforma de Illumina y el kit TruSight One (Illumina) filtrando
mediante Variant Studio, GeneGrid y fenotipo de la paciente.
3 Resultados
Se identificaron dos variantes en heterocigosis compuesta en el gen TCIRG1, c.1087A>C; p.Thr360Pro
y c.1331G>A; p.Arg444His (rs137853151). Ambas variantes se confirmaron mediante secuenciación
sanger.
4 Conclusiones
El uso de la secuenciación masiva en los casos de patologías con heterogenidad genética permite
establecer o confirmar el diagnóstico preciso. Pero además, en este caso concreto, dicho diagnóstico
molecular permite establecer si un paciente es candidato para alguna opción terapéutica; según la guía
europea de osteopetrosis, los pacientes con osteopetrosis infantil maligna causada por variantes en
TCIRG1 son candidatos para recibir de forma inmediata un trasplante de células madre
hematopoyéticas.
El estudio molecular no solo permite establecer el diagnóstico, sino también, en algunos casos como la
osteopetrosis infantil maligna, determinar la mejor opción terapéutica.
Neurogenética
C0093 ESTUDIO FAMILIAR DE HIPOACUSIA NEUROSENSORÍAL NO SINDRÓMICA CON

HALLAZGO DE PATOLOGÍA GENÉTICA MÚLTIPLE
1 1 1 2 1
Monica Viejo Diaz , Noelia García González , Gema Arnedo Jimenez , María Costales , Inés Hernando Acero , Victoria
1 1 2 3 4
Álvarez Martínez , Ana Plasencia Amela , Faustino Nuñez , Marta Diñeiro , Gonzalo Rodríguez Ordóñez , Juan
3 3
Cadiñanos , Rubén Cabanillas
1
Unidad De Genética Hospital Universitario Central De Asturias Oviedo (Asturias) España
2
Servicio Otorrinolaringología Hospital Universitario Central De Asturias (Asturias) España
3
Instituto De Medicina Oncológica Y Molecular De Asturias (Imoma) (Asturias) España
4
Dreamgenics (Asturias) España
1 Objetivos
La hipoacusia neurosensorial es la forma más común de déficit auditivo congénito con una incidencia
estimada en recién nacidos de 1:1.000 para formas profundas y 4:1.000 si se incluyen formas leves a
moderadas. Las causas genéticas representan más del 50% de las formas severas. Presentamos un
caso de dos hermanos, de un total de cuatro, con hipoacusia neurosensoríal bilateral no sindrómica,
hijos de pareja no consanguínea y normoyente. Otros antecedentes incluyen tío materno y prima
paterna sordomudos.
Se aplicó un panel de NGS con enriquecimiento por captura (SureSelectXT) de 176 genes asociados
con hipoacusia neurosensorial no sindrómica y/o sindrómica.
3 Resultados
En los dos hermanos se detectó una mutación patogénica en el gen TECTA p.C1036Y en
heterocigosis asociada a hipoacusia postlingual no sindrómica autosómica dominante (DFNA8/12)
heredada de su madre. Posteriormente se observó en ambos una deleción del gen STRC en
homocigosis relacionada con fenotipo de hipoacusia no sindrómica (DFNB16) de la que sus
progenitores eran portadores. Se prosiguió con estudio de segregación familiar.
4 Conclusiones
1-Este caso evidencia la complejidad del diagnostico etiológico de las hipoacusias genéticas, debido a
su gran heterogeneidad, incompleta penetrancia y expresividad variable.
2-Asi mismo, destacar que los resultados del estudio por NGS pudieron llevar a la causa de la
hipoacusia en esta familia que pudo ser atribuida a la deleción en homocigosis detectada en el gen
STRC.
3-La deficiencia auditiva representa un problema de salud pública que afecta a la población infantil y
adulta, de ahí la gran importancia de un adecuado asesoramiento genético, mediante la realización de
los estudios necesarios para perfilar la difícil relación entre genotipo y fenotipo de estos trastornos.
C0110 SÍNDROME DE OHTAHARA (OS), A PROPÓSITO DE UN CASO.
1 2 3 3
Esther Barba Serrano , Alberto Alcantud Bertolín , Ana Ruíz Quilez , Rosario Abellán Sánchez , Arturo Carratalá
2 2
Calvo , Ana Cuesta Peredo
1
Hospital Clínico Universitario de Valencia/INCLIVA Valencia (Valencia) España
2
Hospital Clínico Universitario de Valencia (Valencia) España
3
INCLIVA Instituto de Investigación Sanitaria (Valencia) España
1 Objetivos
Confirmar el Síndrome de Ohtahara (OS) en un recién nacido varón, que debutó a los 5 días de vida
con una encefalopatía epiléptica, consistente en episodios de crisis epilépticas en forma de sacudidas
generalizadas y espasmos tónicos y deterioro neurológico con dificultades importantes para la
alimentación. Además, presentaba un registro electroencefalográfico compatible con patrón de brote-
supresión, cumpliendo por tanto criterios diagnósticos de OS.
Tras realizar un estudio etiológico se descartaron otras causas sintomáticas asociadas a dicha
patología.
Secuenciación mediante New Generation Sequencing (NGS) los genes relacionados hasta la fecha
con el OS: ARX, CACNA2D2, KCNQ2, PLCB1, SCN2A, SCN8A, SLC25A22, SPTAN1 y STXBP1.
3 Resultados
Se detectó en heterocigosis una variante de significado incierto en el exón 26 del gen SCN2A:
c.4633A>G p.(Met1545Val). Esta variante no sinónima se encuentra en una zona altamente
conservada desde el punto de vista evolutivo entre vertebrados. Así mismo, aparece en las bases de
datos de variantes (ClinVar), aunque se desconoce su frecuencia y su significación clínica. Mediante
predictores bioinformáticos (Sift, Polyphen y MutationTasting) se describió como deletérea.
Se realizó un análisis de segregación familiar en ambos progenitores para confirmar/descartar el origen

hereditario de dicha variante, no encontrándose en ninguno de ellos.
4 Conclusiones
Ante un paciente con el diagnóstico clínico de OS y, una vez se descartaron las causas sintomáticas,
debemos estudiar el posible origen genético.
La variante encontrada en nuestro paciente está localizada en el gen SCN2A, incluido en la familia de
genes de la subunidad alfa del canal de sodio y que se expresa de forma heterogénea en el cerebro.
Mutaciones en este gen pueden dar lugar a encefalopatía epiléptica infantil temprana y a convulsiones
infantiles benignas, ambas con patrón de herencia autosómico dominante. La alteración detectada en
el paciente no se encuentra descrita en las bases de datos actualizadas.
C0136 EXPRESIÓN EN LA RETINA DE MAMÍFEROS DE DOS GENES CAUSANTES DE
DISTROFIAS NEUROMUSCULARES CONGÉNITAS (DISTROGLICANOPATÍAS): FKTN
(FUKUTINA) Y FKRP
1 1 1 2 1
Mary Luz Uribe , Carmen Haro , Cristina Quereda , Jesús Cruces , José Martín Nieto
1
Departamento de Fisiología, Genética y Microbiología, Facultad de Ciencias, Universidad de Alicante (Alicante)
España
2
Departamento de Bioquímica, Facultad de Medicina, Universidad Autónoma de Madrid, Instituto de Investigaciones
Biomédicas UAM-CSIC, Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
El distroglicano (DG) es una glicoproteína responsable de anclar las células musculares y nerviosas a
la matriz extracelular, compuesta por dos subunidades: alfa (extracelular) y beta (transmembranal). Las
distroglicanopatías (DGPs) son distrofias neuromusculares congénitas recesivas que afectan al
músculo, cerebro y retina, y están originadas por deficiencias en la O-glicosilación del alfa-DG. Entre
los genes asociados a DGPs se encuentran FKTN (fukutina) y FKRP, cuyos productos proteicos
participan en la síntesis de los O-manosilglicanos del alfa-DG.
RT-PCR: RNA aislado de la retina neural humana, de mono, vaca, rata y ratón se retrotranscribió a
cDNA y se amplificó mediante PCR utilizando cebadores específicos. Los fragmentos obtenidos se
sometieron a electroforesis y secuenciación de DNA.
Western blotting: Proteínas solubilizadas de la retina neural de dichas especies se sometieron a SDS-
PAGE y electrotransferencia a membranas. Estas se incubaron con anticuerpos primarios específicos y
secundarios conjugados con peroxidasa.
Inmunofluorescencia: Secciones verticales de retina de ratón se inmunotiñeron con anticuerpos
primarios específicos y secundarios conjugados a Alexa Fluor, y se visualizaron mediante microscopía
confocal de fluorescencia.
3 Resultados
Los genes FKTN y FKRP se expresan a nivel de mRNA y proteína en la retina neural de todas las
especies de mamíferos estudiadas. La fukutina se localiza en el retículo endoplásmico y FKRP en el
aparato de Golgi en los distintos tipos celulares de la retina de ratón, incluidos los fotorreceptores
(segmentos internos). Además, ambas proteínas se acumulan en la capa plexiforme externa (CPE),
donde FKRP se colocaliza con el beta-DG.
4 Conclusiones
Nuestros resultados sugieren que la fukutina y FKRP desempeñan un papel relevante en la O-
glicosilación del alfa-DG en la retina neural de mamíferos adultos. Dicho proceso es necesario para la
formación y función de las sinapsis establecidas por los fotorreceptores en la CPE.
Financiación: Instituto de Salud Carlos III (proyecto ref. PI15/00073).
C0137 INMUNOLOCALIZACIÓN DE LAS PROTEÍNAS FUKUTINA Y FKRP, ASOCIADAS A
DISTROGLICANOPATÍAS, EN LA LÍNEA CELULAR DE FOTORRECEPTORES 661W
1 1 1 2 1
Carmen Haro , Mary Luz Uribe , Cristina Quereda , Jesús Cruces , José Martín Nieto
1
Departamento de Fisiología, Genética y Microbiología, Facultad de Ciencias, Universidad de Alicante (Alicante)
España
2
Departamento de Bioquímica, Facultad de Medicina, Universidad Autónoma de Madrid, Instituto de Investigaciones
Biomédicas UAM-CSIC, Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
Las distrofias neuromusculares hereditarias denominadas distroglicanopatías (DGPs) afectan al
músculo, cerebro y retina. Dos de los genes causantes codifican las glicosiltransferasas fukutina y
FKRP (proteína relacionada con fukutina), las cuales participan en la síntesis del núcleo estructural de
O-manosilglicanos tipo M3 del alfa-DG y están asociadas a DGPs graves, como son la distrofia
muscular congénita de Fukuyama, el síndrome de Walker-Warburg y la enfermedad de músculo-ojo-
cerebro. En este trabajo hemos analizado la expresión de estas proteínas y los genes que las codifican
en la línea celular establecida de fotorreceptores (conos) de ratón denominada 661W.
RT-PCR: RNA aislado a partir de la línea celular 661W, se retrotranscribió a cDNA y se amplificó
mediante PCR utilizando cebadores específicos. Los fragmentos obtenidos se analizaron mediante
electroforesis y secuenciación de DNA.
Western blotting: Proteínas solubilizadas de células 661W se sometieron a SDS-PAGE y
electrotransferencia a PVDF, y se incubaron con anticuerpos primarios específicos y secundarios
conjugados con peroxidasa.
Inmunofluorescencia: Células 661W en cultivo se fijaron y se sometieron a inmunotinciones simples y
dobles con anticuerpos primarios específicos y secundarios conjugados a Alexa Fluor. Posteriormente,
se visualizaron mediante microscopía confocal de fluorescencia.
3 Resultados
Los genes que codifican la fukutina y FKRP se expresan a nivel de mRNA y proteína en la línea celular
de fotorreceptores 661W. En el citoplasma, la fukutina se localiza en el retículo endoplásmico y FKRP
en el aparato de Golgi de células 661W. Adicionalmente, ambas proteínas se acumulan en el núcleo en
esta línea celular.
4 Conclusiones
Nuestros resultados sugieren que la fukutina y FKRP desempeñan un papel relevante en la O-
glicosilación del alfa-DG en fotorreceptores. Por otra parte, postulamos que estas proteínas podrían
actuar como glicosiltransferasas de proteínas nucleares aún no identificadas en la línea celular 661W.
Financiación: Instituto de Salud Carlos III (proyecto ref. PI15/00073).
C0139 ETIOLOGÍA DE MOVIMIENTOS INVOLUNTARIOS Y CUADRO DE ANSIEDAD EN
VARÓN DE 46 AÑOS SIN ANTECEDENTES FAMILIARES: EXPANSIÓN DEL TRIPLETE
CAG EN EL RANGO GRIS/INTERMEDIO.
1 2 3 3
Silvia Izquierdo Alvarez , Raquel Alarcia Alejos , Ana Rodríguez Valle , Maria Dolores Miramar Gallart , Maria Jose
3 3 2 4
Alcaine Villarroya , Ana Belén Lasierra Monclus , Jose Antonio Crespo Burillo , Eva Barrio Ollero , Jose Ignacio
3 5
González Hevia , Jose Puzo Foncillas
1
Hospital Universitario Miguel Servet Zaragoza, Sección De Genética Clínica Y Reproducción Asistida Zaragoza
(Zaragoza) España
2
Servicio De Neurología Del Hospital Universitario Miguel Servet De Zaragoza (Zaragoza) España
3
Sección De Genética Clínica Y Reproducción Asistida Del Hospital Universitario Miguel Servet De Zaragoza
(Zaragoza) España
4
Facultad De Medicina.Universidad De Zaragoza (Zaragoza) España
5
Servicio De Bioquímica Clínica Del Hospital Universitario Miguel Servet De Zaragoza (Zaragoza) España
1 Objetivos
Realizar la filiación genética del cuadro clínico de movimientos involuntarios y ansiedad de inicio a los
41 años en un varón sin ningún antecedente familiar de interés.
Paciente de 46 años de edad, diabetes insulinodependiente, hemangioma hepático, sin historia familiar
de interés. Desde hace 4 años presenta movimientos coreicos múltiples en cabeza tronco y
extremidades, de carácter continuo e incapacitante. Se analizó en ADN de sangre periférica la
mutación dinámica (CAG)n del gen IT15, situado en el locus 4p 16.3, mediante el kit Adellgene
Huntington Disease CAG (Blackhills Diagnostic Resources), amplificando la región dónde se encuentra
la secuencia de repetición de trinucleótidos CAG y con detección fluorescente en secuenciador ABI
3130xl y software GeneMapper 4.0.
3 Resultados
El paciente presentaba un alelo expandido de 43 ± 3 repeticiones CAGs por lo que se confirmaba que
el cuadro de movimientos anormales no filiados era debido a la presencia de la expansión del triplete
CAG. Se ofreció asesoramiento y estudio genético al paciente divorciado sin descendencia, a sus
progenitores y hermanos. Se realizó el estudio genético hallándose que el progenitor varón presentaba
un alelo de unas 33 ± 1 repeticiones CAGs situado en zona gris/intermedia. Los pacientes que
presentan un alelo en rango intermedio, zona gris, [27-35] CAGs no desarrollan la enfermedad pero su
descendencia podría estar afectada por la inestabilidad del triplete CAG especialmente si el progenitor
trasmisor es varón, como ocurre en el caso expuesto. Hermana de 40 años (con dos hijos) y hermano
de 45 años (sin descendencia) presentaban el alelo heredado de su padre en el rango gris de unas 33
± 1 CAGs.
4 Conclusiones
Se debe considerar la presencia de alelos del triplete CAG en zona gris/intermedia, especialmente en
progenitor varón, ante un paciente con movimientos coreicos aunque no existan antecedentes
familiares de Enfermedad de Huntington.
C0144 SOSPECHA DE DISTROFINOPATÍA EN DOS MUJERES CON HIPERCKEMIA E
HIPERTROFIA DE PANTORRILLAS
1 1 2 3
Clara Gómez-González , Carmen Prior de Castro , Isabel Esteban , Cristina Domínguez González , Francisco Javier
4 5 1 1 1
Rodríguez de Rivera , Elena Vallespín , Ruben de Sancho , Amparo García Cardenal , Jesús Molano , Pablo
6
Lapunzina
1
Genética Molecular. INGEMM. IdiPaz. Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid) España
2
Anatomía Patológica. Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
3
Servicio de Neurología. Hospital Universitario 12 de Octubre (Madrid) España
4
Servicio de Neurología. Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
5
Genómica Estructural y Funcional. INGEMM. Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
6
INGEMM. Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
1 Objetivos
Las distrofinopatías están causadas por mutaciones en el gen DMD y presentan una herencia recesiva
ligada al X. La mayoría de los casos de mujeres portadoras se manifiestan como hiperCKemia
asintomática y un 17% presentan síntomas. Su diagnóstico, sobre todo en mujeres en edad fértil, es
fundamental para adecuar el consejo genético.
Presentamos dos casos de mujeres con CK sérica >10X e hipertrofia de pantorrillas con sospecha
diagnóstica de portadorasde distrofinopatía.
Paciente-1: 31 años, debilidad muscular, EMG con signos de miopatía crónica y biopsia muscular (BM)
con patrón distrófico. El estudio inmunohistoquímico reveló expresión en mosaico de la distrofina.
Paciente-2: 54 años, asintomática con BM e inmunohistoquímica para distrofina normal. Su hermana
tiene la misma historia clínica.
Se realizó la técnica de MLPA del gen DMD (SALSA-MLPA-P034/P035-DMD-mix-probemix.
MRCHolland®).
La secuenciación masiva (NGS) se realizó con un panel de diseño propio con tecnología SeqCapEZ
(Roche-NimbleGen) en plataforma MiSeq (Illumina) y se llevó a cabo el análisis bioinformático del gen
DMD y 22 genes asociados a miopatías: POMGNT1-LMNA-DYSF-TTN-DES-CAV3-DAG1-SGCB-
MYOT-SGCD-DNAJB6-PLEC-FKTN-TRIM32-POMT1-ANO5-SGCG-POMT2-CAPN3-TCAP-SGCA-
FKRP.
3 Resultados
El MLPA detectó en la paciente-1 una deleción en heterocigosis de los exones 31 a 43 (out-of-frame)
del gen DMD.
En la paciente-2 el resultado del MLPA fue normal. La NGS descartó la existencia de una mutación
puntual en el gen DMD e identificó una variante, posiblemente patogénica (clasificación ACMG), en
homocigosis en el gen ANO5 (NM_213599.2): c.696G>T; p.Gly231Val.
4 Conclusiones
La deleción de los exones 31 a 43 del gen DMD confirmó el diagnóstico de distrofinopatía en la
paciente-1 correlacionándose con los hallazgos observados en el estudio inmunohistoquímico.
En la paciente-2 se descartó la distrofinopatía. La variante p.Gly231Val en el gen ANO5 es una
variante previamente descrita asociada a distrofia muscular de herencia autosómica recesiva. Un 10%
de las anoctaminopatías se manifiestan como hiperCKemia asintomática, siendo uno de los
diagnósticos a descartar en estos casos.
C0150 DRD3 Y ADICCIONES CONDUCTUALES EN PACIENTES CON PARKINSON
JUVENIL.
1 2 3 4
Xochitl Helga Castro Martinez , Xochitl Helga Castro Martinez , Pedro Jose García Ruiz , Lydia Vela , Carlos Martinez
5 6 7 8 2
García , Irene Martínez Torres , Juan Carlos Martínez Castrillo , Marina Mata , Francesc Palau Martinez , Janet
2
Hoenicka Blanco
1
Institut De Recerca Hospital Sant Joan De Déu Esplugues De Llobregat (Barcelona) España
2
Institut De Recerca Hospital Sant Joan De Déu (Barcelona) España
3
Departamento De Neurología, Fundación Jiménez Díaz (Madrid) España
4
Departamento De Neurología, Hospital Universitario De Alcorcón (Madrid) España
5
Centro De Investigación Príncipe Felipe (Valencia) España
6
Departamento De Neurología, Hospital Universitario La Fe (Valencia) España
7
Irycis, Hospital Universitario Ramón Y Cajal (Madrid) España
8
Departamento De Neurología, Hospital Universitario Infanta Sofía (Madrid) España
1 Objetivos
El Trastorno del Control de Impulsos (TCI) puede aparecer en pacientes con enfermedad de Parkinson
(EP) como efecto adverso al tratamiento farmacológico. El TCI incluye un espectro amplio de
adicciones conductuales (TCIA), así como también conductas compulsivas como el punding. En este
trabajo proponemos que el gen para el receptor de dopamina D3 (DRD3, se expresa en estriado
ventral) se asociará a la expresión de TCI en EP juvenil y no en EP clásica.
Es un estudio multicéntrico de 5 hospitales españoles. 204 pacientes con EP fueron reclutados y
evaluados con el cuestionario autoaplicado QUIP. Esta prueba ha sido validada para cada TCIA en EP
(juego patológico, compras compulsivas, hipersexualidad y atracones de alimentos) así como para el
punding. El SNP rs6280-Ser9Gly de DRD3 fue genotipado en pacientes y población control española
(292 individuos).
3 Resultados
En nuestra muestra la edad de inicio de EP se asoció con TCIA (P=0.021) y no con punding (P=0.78).
Las muestras de EP juvenil (<45 años, n=75) y EP clásico (>45 años, n=129) fueron similares respecto
al TCI, aunque la aparición de TCIA fue mayor en la muestra de inicio temprano (P=0.087). El estudio
de cada rasgo TCI reveló una mayor frecuencia de juego patológico (P=0.013) y compras compulsivas
(P=0.051) en EP juvenil.
DRD3 se asoció en la muestra de EP juvenil al TCI (P=0.023), TCIA (P=0.043) y no a punding
(P=0.169). Ninguna asociación fue encontrada en EP clásica. Además, en EP juvenil el genotipo C+ de
rs6280 estuvo sobrerrepresentado en juego patológico (OR=5.98; P=0.077) y atracones de alimentos
(OR=5.98; P=0.077).
4 Conclusiones
El genotipo C+ del rs6280 de DRD3 se asocia a adicciones conductuales específicas en pacientes con
EP juvenil. La mayor actividad de C+ y la estimulación excesiva del receptor de dopamina D3 en el
estriado ventral de los pacientes juveniles podría explicar nuestros resultados.
C0180 ATAXIA DE FRIEDREICH EN LOS SISTEMAS DE INFORMACIÓN SANITARIOS:
SENSIBILIDAD, VALOR PREDICTIVO POSITIVO Y PREVALENCIA
1 2 1 2
Esther Vicente Cemborain , Amaya Bengoa-Alonso , Eva Ardanaz , María Antonia Ramos-Arroyo
1
Instituto de Salud Pública y Laboral de Navarra Pamplona (Navarra) España
2
Complejo Hospitalario de Navarra (Navarra) España
1 Objetivos
La Ataxia de Friedreich (FRDA) es una enfermedad rara neurodegenerativa heredada de forma
autosómica recesiva, causada por una expansión GAA inestable situada en el intrón 1 del gen FXN
(9q21.11) que codifica la frataxina. El registro de enfermedades raras (RER) de nuestra Comunidad
Autónoma (CA) recoge los casos identificados por: diagnósticos al alta hospitalaria (CMBD), Atención
Primaria (AP), Registro de Mortalidad (RM) y Servicio de Genética.
El objetivo es estimar la prevalencia de FRDA en la CA validando los sistemas de información (SI)
disponibles.
Se seleccionaron los casos prevalentes en 2000-2014 diagnosticados como FRDA: código 334.0 de
CIE9MC en CMBD, G11.1 de CIE10 en RM (inespecífico) y descriptor “ataxia de Friedreich” en AP y
Genética. Se revisaron sus historias clínicas (HC), se calculó el valor predictivo positivo (VPP) y la
sensibilidad máxima de los SI, y se estimó la prevalencia de FRDA en la CA a 1/1/2015.
3 Resultados
El RER identificó 37 posibles casos de FRDA en 2000-2014: 11 fueron descartados y 23 se pudieron
confirmar (información insuficiente para 3). El 22% de los casos se detectaron en un único SI (1 AP, 2
RM y 2 Genética), estimándose los VPP en: 55-67% CMBD, 67-75% AP, 100% Genética y 55-77%
RM. Su sensibilidad máxima, respectivamente, fue: 46%, 69%, 74% y 100% (de los fallecidos en el
período).
A 1/1/2015, la prevalencia estimada de FRDA en la CA fue de 28 casos por millón de habitantes.
4 Conclusiones
La prevalencia de FRDA es semejante a la descrita en otras poblaciones. El VPP y la sensibilidad
calculadas para los SI denotan la importancia del análisis, cruce y validación de datos para maximizar
la capacidad de detección de casos y descartar falsos positivos.
Los RER, basados en múltiples fuentes de información, son fundamentales para el estudio y
cuantificación de este tipo de enfermedades.
C0182 DOS NUEVAS MUTACIONES EN EL GEN KLHL41 CAUSAN MIOPATIA
NEMALINICA
1 1 1 2 2
Carmen Prior De Castro , Elena Mansilla Aparicio , Clara Gómez-González , Rita Mª Regojo , Isabel de Esteban , Fe
1 1 1 1 3
García Santiago , Rubén de Sancho , Amparo García Cardenal , Elena Vallespin , Jose Luis Bartha , Roberto
3 4 1
Rodríguez , Jesús Molano , Pablo Lapunzina
1
INGEMM. Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid) España
2
Anatomía Patológica. Hospital La Paz (Madrid) España
3
Servicio de Obstetricia y Ginecología. Hospital La Paz (Madrid) España
4
Hospital La Paz (Madrid) España
1 Objetivos
La miopatía nemalínica es un trastorno raro congénito que se caracteriza por debilidad muscular,
hipotonía y problemas respiratorios. Los cuerpos nemalínicos o bastones son característicos de esta
patología.
Presentamos el estudio de una interrupción de la gestación tras el hallazgo de secuencia de
hipocinesia fetal.
Primigesta de 30 años que se le realizó una ecografía a las 34 semanas de gestación.
Para los estudios genéticos se analizó el ADN extraído del hígado fetal.
Se utilizó un Array-CGH: plataforma KayoArrayÒv3.0 (8x60K, Agilent).
El análisis de secuenciación masiva (NGS) se realizó con un panel de diseño propio con 220 genes
asociados a enfermedades neuromusculares (Captura SeqCapEZ (Roche NimbleGen); plataforma
NextSeq500 (Ilumina)). Análisis bioinformática de 10 genes asociados a miopatía nemalínica:
NEB,TPM3,ACTA1,TPM2,TNNT1,KBTBD13,CFL2,LMOD3,KLHL40,KLHL41.
3 Resultados
En la ecografía del tercer trimestre se detectó secuencia de hipocinesia fetal. La pareja decidió
interrumpir el embarazo.
El resultado de la QF-PCR y array-CGH fue normal.
El estudio de anatomía patológica de la necropsia informó de feto de sexo masculino con
inexpresividad facial, paladar hendido, hipoplasia pulmonar, contracturas articulares y pies zambos.
Con la tinción tricrómico de Gomori modificada en músculo se observaron abundantes acúmulos
rojizos con forma de bastones.
El estudio de NGS detectó dos variantes en el gen KLHL41 en heterocigosis: c.1027C>T; p.Gln343Ter
y c.1319A>G; p.His440Arg. Estas variantes no han sido previamente descritas y son clasificadas como
patogénicas por los predictores de patogenicidad. Ambos padres son portadores.
4 Conclusiones
El diagnóstico de las miopatías nemalínicas se basa en una estrecha colaboración entre distintos
servicios asistenciales: genética molecular, fisiopatología fetal, anatomía patológica y citogenética.
La NGS posibilita y agiliza el diagnóstico molecular de patologías en las que están implicados un
elevado número de genes.
Hemos descrito dos nuevas variantes en el gen KLHL41 asociadas a miopatía nemalínica.
Consideramos estas variantes probablemente patogénicas (clasificación ACMG).
C0186 IMPLEMENTACIÓN DE LA SECUENCIACIÓN MASIVA EN EL ESTUDIO DE LAS
MIOPATÍAS CONGÉNITAS Y LOS SÍNDROMES MIASTÉNICOS CONGÉNITOS: UN
MODELO DE INVESTIGACIÓN TRASLACIONAL EN ENFERMEDADES RARAS
1 2 2 3
Lidia Gonzalez-Quereda , Aida Pariente Cano , Maria Jose Rodriguez Fernandez , Laura Alías Andreu , Andres
4 4 4 5
Nascimento Osorio , Carlos Ortez Gonzalez , Cristina Jou Muñoz , Jose Milisenda Gonzalez , Aurora Sanchez
6 5 2 7 8
Gonzalez , Josep Maria Grau Junyent , Manel Baena Gimeno , Francesc Palau Gonzalez , Jordi Surralles Calonge ,
3
Pia Gallano Petit
1
CIBERER U705 . (Barcelona) España
2
Servicio de Genética, Hospital de Sant Pau (Barcelona) España
3
CIBERER U705 Servicio de Genética ,Hospital de Sant Pau (Barcelona) España
4
Servicio de Neuropediatría, Hospital Sant Joan de Deu (Barcelona) Barcelona
5
Servicio de Medicina Interna, Sección Muscular, Hospital Clínic (Barcelona) España
6
Secció de Citogenètica i Genètica Clínica Servei de Bioquímica i Genètica Molecular Hospital Clínic (Barcelona)
España
7
Servicio de Medicina Genética y Molecular, Instituto Pediátrico de Enfermedades Raras – IPER, Hospital Sant Joan de
Deu (Barcelona) España
8
CIBERER. Servicio de Genética, Hospital de Sant Pau (Barcelona) España
1 Objetivos
Las Miopatías Congénitas (MC) y los síndromes miasténicos congénitos (SMC) constituyen un amplio
grupo heterogéneo de enfermedades neuromusculares de causa genética. Debido a su complejidad, a
menudo es difícil establecer un diagnóstico preciso basado en la presentación clínica y/o
anatomopatológica.
El objetivo de este trabajo es desarrollar y validar una nueva estrategia para el estudio clínico y
genético de las miopatías congénitas y los síndromes miasténicos congénitos utilizando la tecnología
Next Generation Sequencing que pueda finalmente ser incorporado al Servicio Nacional de Salud en
un futuro próximo.
Se han estudiado muestras de gDNA de 77 pacientes con sospecha clínica de MC y/o SMC mediante
Next Generation Sequencing. Pare ello, se diseñó un panel que incluye 116 genes todos asociados a
patología neuromuscular congénita, utilizando la tecnología Nextera Rapid Capture (Illumina). Los
datos de secuenciación se analizaron mediante Variant Studio y DNA Nexus. Los cambios patogénicos
se confirmaron mediante secuenciación Sanger y fueron contrastados con la base LOVD (www.dmd.nl)
y el software Alamut (Interactive Biosoftwares).
En todos aquellos casos en los que fue posible se analizó la segregación de las variantes identificadas
en las familias estudiadas.
3 Resultados
En 34 de los 77 pacientes estudiados se identificó la causa genética definitiva de la patología (44%).
Adicionalmente, en 4 pacientes se identificaron variantes presuntamente patogénicas que deben ser
valoradas en profundidad.
Las mutaciones en RYR1 fueron las más prevalentes en nuestra cohorte.
En 9 familias se identificaron mutaciones en genes relacionados con SMC, lo cual fue fundamental
para la elección del tratamiento adecuado.
4 Conclusiones
La secuenciación masiva dirigida representa una herramienta coste-efectiva que permite ofrecer un
diagnóstico molecular rápido y fiable a pacientes con patología neuromuscular congénita. No obstante,
quedan un cierto número de pacientes sin diagnóstico genético debido a la existencia de genes
causativos aún no identificados o a las limitaciones de la técnica.
C0196 APLICACIÓN DE LA SECUENCIACIÓN MASIVA PARA EL DIAGNÓSTICO
GENÉTICO DE LAS DISTONÍAS
Irene Madrigal, María José Martí, Dolores Jiménez, Maria Isabel Alvarez-Mora, Yaroslau Compta, Montserrat Milà
Hospital Clinic BCN (Barcelona) Spain
1 Objetivos
Las distonías son trastornos neurológicos del movimiento caracterizados por contracciones musculares
involuntarias sostenidas, que causan movimientos repetitivos de torsión o posturas anormales. Se trata
de una entidad clínica y genética muy heterogénea. Aunque se conocen más de 30 genes
responsables, todavía hay pacientes clínicamente diagnosticados en los que se desconoce la etiología.
Para evaluar la aplicación de la secuenciación masiva en el diagnóstico genético de esta enfermedad,
hemos realizado un exoma clínico en muestras de pacientes con sospecha clínica de distonía.
Se han estudiado mediante exoma clínico (kit Trusigh One, Illumina) 15 pacientes con sospecha clínica
de distonía pero sin alteración genética identificada.
3 Resultados
Se han identificado 7 variantes genéticas responsables de la clínica en 5 de los pacientes. En concreto
se han identificados cambios en los genes GCH1, PANK2, PARK2, SGCE y THAP1. De los 7 cambios
identificados, los cambios detectados en SGCE y THAP1 no habían sido previamente descritos. Los
análisis de confirmación en bases de datos, programas in silico, estudios familiares y estudios
funcionales han permitido determinar la patogenicidad de las variantes detectadas.
4 Conclusiones
La aplicación de técnicas de secuenciación masiva ha permitido la identificación de variantes
responsables del fenotipo en aproximadamente el 35% de los pacientes. Los resultados apoyan la
utilidad de la secuenciación masiva para el diagnóstico genético de las distonías a la vez que en la
mayoría de enfermedades clínica y genéticamente heterogéneas.
C0209 IDENTIFICACIÓN DE UNA MUTACIÓN NULA EN EL GEN BSCL2, QUE NO
SEGREGA CON LA ENFERMEDAD, EN UN PACIENTE CON PARAPARESIA ESPÁSTICA.
1 2 3 4 4
Pilar Carrasco Salas , Praxedes Carreto , Mercedes Salas García-Neble , Irina Royo , Jaime Torrents , Angustias
2 5 3
Pérez , Antonio León , Ignacio Vázquez
1
2
Servicio de Ginecología y Obstreticia. Hospital Juan Ramón Jiménez (Huelva) España
3
Servicio de Análisis Clínicos. Hospital Juan Ramón Jiménez (Huelva) España
4
Reference Laboratory (Barcelona) España
5
1 Objetivos
Determinar si la mutación c.325dupA (p.T109fs*5) en el gen BSCL2 (secuencia de referencia
NM_032667.6) identificada en heterocigosis mediante secuenciación masiva en un paciente con
paraparesia espástica, segrega con la enfermedad. Esta mutación está descrita en la base de datos de
mutaciones Human Gene Mutation Database con número de acceso CI014678 asociada a lipodistrofia
congénita, de herencia autosómica recesiva.
Se realizó el estudio de la mutación en la tía materna del paciente, también con diagnóstico clínico de
paraparesia espástica. El estudio se llevó a cabo mediante amplificación por PCR con cebadores
específicos de esa región, y posterior secuenciación del fragmento amplificado.
3 Resultados
No se detectó la presencia de dicha mutación
4 Conclusiones
Este resultado confirma las observaciones realizadas por otros autores, que aseguran que sólo las
mutaciones missense que afectan a la glicosilación de la proteína seipina son responsables del
síndrome de Silver, una forma rara de paraparesia espástica. Además, pone de manifiesto la gran
utilidad que presentan los estudios de segregación para establecer la patogenicidad de las variantes
identificadas en los estudios de secuenciación masiva.
C0252 IDENTIFICACIÓN DE LA PRIMERA FAMILIA CON SPG76 EN ESPAÑA A TRAVÉS
DEL ANÁLISIS RETROSPECTIVO DE EXOMAS COMPLETOS.
1 2 3 4 5
Beatriz Quintans , Andrés Ordóñez Ugalde , Diego Barragán , Andrés Soto-Varela , Jose Manuel Pumar , Tania
6 6 6 4 7
García-Sobrino , Julio Pardo , Jose María Domínguez , Sofía Santos-Pérez , Francisco Javier Rodríguez de Rivera ,
8 7 9 1
Irene Sánz-Gallego , Javier Arpa , Stephan Züchner , María Jesús Sobrido
1
Grupo de Neurogenética, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago-IDIS; 2) Grupo de Medicina Xenómica
CIBERER-U711 Santiago de Compostela (La Coruña) España
2
Grupo de Neurogenética, Instituto de Investigación Sanitaria de Santiago-IDIS; 3) Laboratorio biomolecular;
Universidad de Cuenca (Cuenca) Ecuador
3
Servicio de Neurología, Hospital Universitario "12 de Octubre" (Madrid) España
4
Servicio de Otorrinolaringología, Complejo Hospitalario Universitario de Santiago (La Coruña) España
5
Servicio de Radiología, Complejo Hospitalario Universitario de Santigo (La Coruña) España
6
Servicio de Neurología, Complejo Hospitalario Universitario de Santiago (La Coruña) España
7
Servicio de Neurología, Hospital Universitario La Paz-Carlos III (Madrid) España
8
Servicio de Neurología, Hospital Nuestra Señora de Sonsoles (Ávila) España
9
University of Miami Miller School of Medicina (Miami) USA
1 Objetivos
INTRODUCCIÓN: La paraparesia espástica familiar (PEF) comprende numerosas entidades
neurológicas caracterizadas por disfunción de la vía piramidal. Se han descrito hasta el momento 77
loci (63 genes). Uno de los más recientes es CAPN1 (SPG76), de herencia autosómica recesiva,
descrito por equipos independientes en siete familias con ataxia espástica de diversa procedencia. El
reanálisis de los datos de secuenciación de exoma completo (WES) gana creciente interés.
OBJETIVOS: Búsqueda retrospectiva de variantes patogénicas de CAPN1 en datos de WES de
pacientes con PEF y caracterización clínica de los casos positivos.
Reanalizamos los WES de 42 pacientes con PEF sin diagnóstico definitivo previo (24 con historia
familiar positiva), secuenciados con SureSelect All Exon® v5 en la plataforma Illumina HiSeq 2500®.
Con la aplicación Genesis 2.0 se filtraron las variantes de CAPN1 con criterios de frecuencia
poblacional y en la base de datos local, tipo de variante y patrón de herencia. El estudio de
cosegregación familiar se llevó a cabo por secuenciación Sanger. Se realizaron exploraciones
detalladas, estudios otoneurológicos, neurofisiólogicos y de neuroimagen.
3 Resultados
Hallamos una variante probablemente patogénica, (NM_001198868:c.618_619del;p.G208QfsX7) en
homocigosis en dos hermanas con paraparesia y ataxia de inicio juvenil. La resonancia magnética
cerebral mostró atrofia cerebelosa y lesiones de sustancia blanca. Presentan un déficit vestibular
central, sin daño laberíntico y sin neuropatía periférica. En nuestra serie, SPG76 representó el 2.4%
de los pacientes con PEF a quienes se había descartado otros genes conocidos.
4 Conclusiones
Presentamos la primera familia con SPG76 tras las recientes descripciones originales. SPG76 es una
forma rara de PEF que debe considerarse en pacientes con paraparesia y/o ataxia espástica. El
análisis retrospectivo de WES permite un diagnóstico rápido de entidades recientemente descritas, si
bien es necesaria prudencia en la interpretación de las variantes y en el asesoramiento genético.
Financiación: ISCIII (PS09/01830), Fondos FEDER.
C0273 FACTORES PRECIPITANTES DE CRISIS EN PACIENTES EPILÉPTICOS
FARMACORRESISTENTES Y SU ASOCIACIÓN CON LOS POLIMORFISMOS GENÉTICOS
DE LA APOE.
1 1 1 1 1
Adil Mrini , Desirée Nava-Cedeño , Lorena Vega-Zelana , Jesus Pastor , Catalina Delgado Tortajada , Lorena Vega-
1 1 1 1 2
Piris , Cristina Torres Diaz , Rafael G.Sola , Maria Toledo , Concepcion Alonso-Cerezo
1
Hospital Universitario de la Princesa (Madrid) España
2
Concepcion Alonso Cerezo Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
La apolipoproteína E (ApoE) es una glicoproteína que actúa como transportadora de lípidos y juega un
papel fundamental en el mantenimiento y reparación neuronal. El gen codificante de la ApoE se
encuentra en el cromosoma 19 y es polimórfico. Dos polimorfismos de nucleótido único resultan en
respectivos cambios de aminoácidos en las posiciones 112 y 158, dando lugar a tres variantes de la
proteína: E2, E3 y E4.
Se plantea como objetivo si algún factor precipitante de crisis epiléptica en pacientes
farmacorresistentes se asocia al alelo E4 de la ApoE.
Para realizar este estudioseleccionamos 163 pacientes (80 mujeres y 83 hombres) diagnosticados de
epilepsia farmacorresistente según criterios de ILAE. Se realizó un cuestionario sobre factores
precipitantes de las crisis epilépticas que incluían: distimia, privación del sueño, ejercicio físico, ingesta
de alcohol, bebidas gaseosas, café, chocolate, menstruación y fiebre. Para el análisis de asociación los
alelos E2, E3 y E4 vs factor precipitante se ha utilizado el test exacto de Fisher. Se considera
estadísticamente significativo p<0.05.
El genotipado se hizo mediante el sistema Light Cycler PCR en tiempo real de Roche.
3 Resultados
Los resultados obtenidos se representan en la siguiente tabla.
Factores Precipitantes de Crisis Epilépticas Test exacto de Fisher
Distimia 0.525
Privación del Sueño 0.108
Ejercicio Físico 0.174
Alcohol 0.270
Café 1. 000
Chocolate 1.000
Bebidas gaseosas 0.457
Menstruación 0.049
Convulsiones febriles 0.429
Resaltamos que el valor de la p asociado al test exacto de Fisher asociado la menstruación como
factor precipitante es menor de 0.05.
4 Conclusiones
Los resultados indican que la menstruación como factor precipitante de crisis está asociada al alelo E4
de la Apo E en los pacientes epilépticos fármacorresistentes, lo cual se podría confirmar aumentando
el tamaño muestral.
Financiado por el Instituto de Salud Carlos III, PI12/02839, parcialmente apoyado por FEDER
C0306 EL ANÁLISIS COLABORATIVO DE EXOMAS COMPLETOS PERMITE LA
CARACTERIZACIÓN GENÉTICA DE FORMAS COMPLICADAS DE PARAPARESIA
ESPÁSTICA HEREDITARIA
1 2 3 4
Andres Esteban Ordonez Ugalde , Beatriz Quintáns Castro , Michael Gonzalez , Ignacio Pascual , Maria Garcia
2 5 2 6 7 8 9
Murias , Francisco Grandas , Ana Quelle , Irene Sanz , Javier Arpa , Julio Pardo , Angel Carracedo , Stephan
3 2
Züchner , Maria Jesus Sobrido Gomez
1
Laboratorio Biomolecular Cuenca (Azuay) Ecuador
2
Grupo de Neurogenética, Instituto de Investigación Sanitaria (IDIS) (A Coruña) España
3
Universidad de Miami-Miller School of Medicine (Florida) USA
4
Departamento de Neurología Pediátrica, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
5
Unidad de trastornos del movimiento, Instituto de Investigación Sanitaria Gregorio Marañón (Madrid) España
6
Servicio de Neurología. Hospital Nuestra Señora de Sonsoles (Avila) España
7
Servicio de Neurología, Hospital Universitario, La Paz-Carlos III (Madrid) España
8
Servicio de Neurología. Complejo Hospitalario Universitario de Santiago (A Coruña) España
9
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica, Santiago de Compostela (A Coruña) España
1 Objetivos
Diagnóstico genético de pacientes con PEH empleando WES y una plataforma de uso compartido de
datos genómicos.
Se realizó WES en 47 casos índice con PEH (23 sin historia familiar), reclutados a través de un
proyecto coordinado multicéntrico en España. Para la secuenciación se empleó SureSelect AllExon®
v5 en la plataforma Illumina HiSeq2500®. Con la aplicación Genesis2.0 se filtraron las variantes con
criterios de frecuencia poblacional y en la base de datos local, tipo de variante y patrón de herencia. El
estudio de cosegregación familiar se llevó a cabo por secuenciación Sanger.
3 Resultados
Se identificaron variantes probablemente patogénicas en 6 entidades de herencia autosómica recesiva
(IAHSP/ALS2, NBIA2A/PLA2G6, SPG76/CAPN1, SPG15/ZFYVE26, SPG7, SPG11) y una dominante
ligada a X (ALS15/UBQLN2). SPG7, SPG11, SPG15 y SPG76 se asociaron a espasticidad y signos
cerebelosos. El paciente con SPG15 presentaba, además, deterioro cognitivo. La familia con ALS15
manifestaba una combinación de paraparesia espástica, afectación de motoneurona inferior y
demencia.
4 Conclusiones
La utilidad del WES para el análisis de enfermedades neurodegenerativas raras se incrementa en
conjunción con bases de datos y herramientas colaborativas de análisis. Incluso con la secuenciación
de casos índice únicamente y un análisis dirigido a variantes altamente sospechosas en genes
candidatos, se llegó al diagnóstico en 7 casos (15%). El rendimiento diagnóstico probablemente se
incrementaría con la secuenciación simultanea de otros familiares. El WES permite detectar variantes
causales en genes no incluidos en un panel típico de PEH, especialmente en casos complicados,
cuyos síntomas se solapan con otras entidades.
C0319 DOS NUEVAS DELECIONES INTRAGÉNICAS EN EL GEN UBE3A EN DOS
PACIENTES CON SÍNDROME DE ANGELMAN
1 1 1 1 1
Cinthia Aguilera Roman , Marina Viñas Jornet , Neus Baena Diez , Elisabeth Gabau Vila , Conchita Fernández Zurita ,
2 1 3
Sanja Cirkovic , Anna Ruiz Nel-lo , Miriam Guitart Feliubadalo
1
Corporacio Sanitaria Parc Tauli (Barcelona) España
2
Mother and Child Health Care Institute of Serbia "Dr Vukan Cupic" (Belgrado) Serbia
3
Sabadell (Barcelona) Spain
1 Objetivos
El síndrome de Angelman (SA) es un trastorno del neurodesarrollo caracterizado por una discapacidad
intelectual grave, con ausencia de habla, ataxia y un fenotipo conductual característico. El SA está
causado por la ausencia de expresión en el cerebro del gen UBE3A, que se encuentra en la región
improntada 15q11-q13. Diferentes mecanismos genéticos son responsables del SA como la deleción
de la región 15q11-q13 (70-75%), las mutaciones en el gen UBE3A (10%), la disomía uniparental
paterna (2-5%) y los defectos de la impronta (2-5%). La causa genética sigue siendo desconocida en
aproximadamente el 10% de los pacientes que presentan el fenotipo clínico característico del SA. Las
deleciones intragénicas en el gen UBE3A han sido raramente descritas. Describimos aquí dos
pacientes con SA que presentan dos nuevas deleciones intragénicas en el gen UBE3A.
Se describe el fenotipo dismorfico y neuroconductual completo en los dos pacientes. Se ha realizado el
análisis de metilación de la región 15q11-q13 y de dosis mediante MS-MLPA (SALSAMLPAME028-B1
PraderWilli/Angelmanprobemix, MRC-Holland) y la MLPA del gen UBE3A (SALSA MLPA P336-A2
UBE3A probemix, MRC-Holland). Se han revisado las características clínicas de los pacientes
reportados con deleciones parciales del gen UBE3A.
3 Resultados
Se han identificado en dos pacientes una deleción del exón 6 y una deleción de los exones 13 y 14 del
gen UBE3A.
4 Conclusiones
Las deleciones intragénicas en el gen UBE3A, aunque raras, pueden representar una pequeña fracción
de los pacientes con SA sin un diagnóstico genético. Proponemos incluir la detección de
deleciones/duplicaciones de exones en el gen UBE3A en los pacientes con SA con un patrón de
metilación normal y sin mutaciones en el gen UBE3A. Según nuestras observaciones el fenotipo clínico
de los pacientes con deleciones intragénicas no difiere del de pacientes con mutaciones puntuales en
el gen UBE3A.
C0346 ALELOS INTERMEDIOS DEL GEN DE LA ENFERMEDAD DE HUNTINGTON (HTT)
EN POBLACIÓN ESPAÑOLA
1 2 3 2 1
Edurne Urrutia , Asun Martinez Descal , Maria Isabel Alvarez , Jesús Gallego Merlo , Fermin Garcia Amigot , Maria
4 5 6 7 8 2
Victoria Alvarez4 , Jose Lopez Sendon , Carmen Peiro , Koldo Berganzo , Maria Maria Fenolar , Maria Jose Trujillo ,
3 1
Montse Mila , María Antonia Ramos Arroyo
1
Complejo Hospitalario de Navarra (Navarra) España
2
Fundacion Jimenez Diaz, Madrid (Madrid) España
3
Hospital Clinic, Barcelona (Barcelona) España
4
H. Universitario Central de Asturias, Oviedo (Asturias) España
5
H. Ramón y Cajal, Madrid (Madrid) España
6
H. La Fe, Valencia (Valencia) España
7
H. Cruces, Baracaldo (Vizcaya) España
8
H. Clínico San Carlos (Navarra) España
1 Objetivos
La enfermedad de Huntington (EH) es una enfermedad neurodegenerativa caracterizada por
movimientos involuntarios, afectación cognitiva y/o psiquiátrica, asociada a una expansión del triplete
CAG (n>36) del gen HTT. Su prevalencia en la población depende de la frecuencia y grado de
inestabilidad de los alelos de rango intermedio (AIs, 27-35 CAG). Estudios recientes sugieren que los
AIspodrían también tener consecuencias clínicas en sus portadores. Presentamos los resultados del
análisis de AIs en sujetos con síntomas neurocognitivos compatibles con una EH y en la población
general, como parte de un estudio más amplio para caracterizar el fenotipo y genotipo de los AIs en
nuestra población
Se analizó la secuencia CAG del gen HTT en sujetos con síntomas compatibles con una EH,
estudiados en cinco grandes centros sanitarios, y en la población general. Se analizaron y compararon
las distribuciones y frecuencias alélicas de los AIs entre grupos.
3 Resultados
Se identificaron 113 AIs entre 1623 casos sintomáticos NO-EH (alelo mayor CAG<36), 71 (3,3%) entre
2045 alelos menores de portadores de la EH (alelo mayor >35 CAG) y 18 (1,9%) entre 469 controles.
Las frecuencias de AIs en personas sintomáticas en las que se descartó una EH [3.4 5 (2,86-4.15)] y
2
entre los alelos menores de los casos EH [3,47 (2,74-4,38)] fueron superiores (X =5,17, p=0,02;
2
X =4,83, p=0,03, respectivamente)al de la población general [1,92 (1,18-3,08)]. Entre los casos
sintomáticos NO-EH, el RR para el grupo de AIs con 30-35 CAG fue superior que para el grupo con 27-
29 CAG (2,4 vs 1,8)
4 Conclusiones
1. Los AIs, especialmente los de rango intermedio alto, podrían condicionar un cierto riesgo a
desarrollar síntomas neurocognitivos.
2. El uso del alelo menor del gen HTT de casos con EH como representativo de la población
general podría dar lugar a sesgos en los estudios de investigación de esta enfermedad
C0366 VARIABILIDAD EN LAS LEUCODISTROFIAS RELACIONADAS CON POLIII: A
PROPOSITO DE DOS CASOS
1 1 1 1
Maria Montserrat Rodriguez Pedreira , Alejandro Mosquera Rey , Berta Rodríguez Sánchez , Isidoro Lopez Baltar , Iria
2 1 1
Gonzalez Vasconcellos , Susana García Mayo , Jose Luis Fernández García
1
Hospital Teresa Herrera, Complexo Hospitalario Universitario A Coruña (A Coruña) España
2
INIBIC, Fundación Profesor Novoa Santos (A Coruña) España
1 Objetivos
Las mutaciones en el gen POLR3B se asocian a leucodistrofias relacionadas con POLIII.

Recientemente Wolf et al. (2014) estudiando 105 pacientes con sindrome 4H, encontraron que la mitad
presentaba retraso del desarrollo con debut antes de los 10 años, con déficit de GH en algunos de
ellos. Todos mostraban signos cerebelosos y posteriormente deterioro del lenguaje, con gran
variabilidad en la afectación cognitiva. También refieren anomalías dentales y miopía severa y
progresiva. En las pruebas de imagen se detectó hipomielinización en todos ellos y atrofia cerebelosa
en la mayoría. El estudio genético evidenció mutaciones en el gen POLR3B en la mayor parte de los
pacientes.
Recibimos en consulta a dos hermanos que presentaban ataxia cerebelosa con dismetría y disartría,
nistagmus horizontal, ptosis palpebral bilateral, hipotonía, retraso del aprendizaje, hipogonadismo
hipogonadotrópico y talla baja. Llamativamente, la RNM evidenció únicamente atrofia del vermix
cerebeloso en ambos hermanos, sin otras alteraciones.
Se realizó estudio NGS de un panel de genes relacionados con defectos en el metabolismo de las
moléculas complejas, incluyendo los genes HEXB y HGSNAT. Posteriormente se extendió a un panel
de leucodistrofias, ataxias y distonías, que incluye el gen POLR3B.
3 Resultados
Se detectaron variantes de significado incierto en el gen HEXB y una mutación descrita previamente en
el gen HGSNAT, en relación a mucopolisacridosis tipo IIIC o enfermedad de San Filippo (
p.Ala615Thr). Además se evidenciaron dos variantes no descritas previamente en el gen POLR3B,
presentes en ambos hermanos, heredándose una de cada progenitor.
4 Conclusiones
Presentamos dos pacientes portadores de dos variantes candidatas en el gen POLR3B y clínica
compatible con leucodistrofia, pero sin hipomielinización. Este resultado debe de ser tomado con
cautela pues ambas variantes son de significado incierto, por lo que su posible papel patogénico no ha
sido establecido por el momento.
C0383 EL ANÁLISIS COLABORATIVO DE EXOMAS COMPLETOS PERMITE LA
CARACTERIZACIÓN GENÉTICA DE FORMAS COMPLICADAS DE PARAPARESIA
ESPÁSTICA HEREDITARIA
1 2 3 4 5
Andres Esteban Ordonez Ugalde , Beatriz Quintáns , Michael Gonzalez , Ignacio Pascual , Maria Garcia Murias ,
6 7 5 8 9 10 3
Francisco Grandas , Irene Sanz , Ana Quelle , Javier Arpa , Julio Pardo , Angel Carracedo , Stephan Züchner , Maria
2
Jesus Sobrido Gomez
1
Laboratorio Biomolecular Cuenca (Azuay) Ecuador
2
Grupo de Neurogenética, Instituto de Investigación Sanitaria (IDIS) | CIBERER-U711 (A Coruña) España
3
Universidad de Miami-Miller School of Medicine (Florida) USA
4
Departamento de Neurología Pediátrica, Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
5
Grupo de Neurogenética, Instituto de Investigación Sanitaria (IDIS) (A Coruña) España
6
Unidad de trastornos del movimiento, Instituto de Investigación Sanitaria Gregorio Marañón (Madrid) España
7
Servicio de Neurología. Hospital Nuestra Señora de Sonsoles (Avila) España
8
Servicio de Neurología, Hospital Universitario, La Paz-Carlos III (A Coruña) España
9
Servicio de Neurología. Complejo Hospitalario Universitario de Santiago (A Coruña) España
10
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica, Santiago de Compostela | CIBERER-U711 (A Coruña) España
1 Objetivos
INTRODUCCIÓN: Las paraparesias espásticas hereditarias (PEH) son trastornos neurodegenerativos
de la vía piramidal, con gran heterogeneidad genética y fenotípica. La secuenciación de paneles de
genes versus exoma completo (WES) para este tipo de enfermedades es motivo de debate, en
especial para las formas complicadas de inicio temprano, frecuentemente recesivas y con un amplio
diagnóstico diferencial.
OBJETIVOS: Diagnóstico genético de pacientes con PEH empleando WES y una plataforma de uso
compartido de datos genómicos.
Se realizó WES en 47 casos índice con PEH (23 sin historia familiar), reclutados a través de un
proyecto coordinado multicéntrico en España. Para la secuenciación se empleó SureSelect AllExon®v5
en la plataforma Illumina HiSeq2500®. Con la aplicación Genesis2.0 se filtraron las variantes con
criterios de frecuencia poblacional y en la base de datos local, tipo de variante y patrón de herencia. El
estudio de cosegregación familiar se llevó a cabo por secuenciación Sanger.
3 Resultados
Se identificaron variantes probablemente patogénicas en 6 entidades de herencia autosómica recesiva
(IAHSP/ALS2, NBIA2A/PLA2G6, SPG76/CAPN1, SPG15/ZFYVE26, SPG7, SPG11) y una dominante
ligada a X (ALS15/UBQLN2). SPG7, SPG11, SPG15 y SPG76 se asociaron a espasticidad y signos
cerebelosos. El paciente con SPG15 presentaba, además, deterioro cognitivo. La familia con ALS15
manifestaba paraparesia espástica con afectación de motoneurona inferior y demencia.
4 Conclusiones
La utilidad del WES para el análisis de enfermedades neurodegenerativas raras se incrementa en
conjunción con bases de datos y herramientas colaborativas de análisis. Incluso con la secuenciación
de casos índice únicamente y un análisis dirigido a variantes altamente sospechosas en genes
candidatos, se llegó al diagnóstico en 7 casos (15%). El rendimiento diagnóstico probablemente se
incrementaría con la secuenciación simultanea de otros familiares. El WES permite detectar variantes
causales en genes no incluidos en un panel típico de PEH, especialmente en casos complicados,
cuyos síntomas se solapan con otras entidades. Financiación: ISCIII (PS09/01830).
C0433 APLICACIÓN DE WES EN EL DIAGNÓSTICO DE PARAPARESIAS ESPÁSTICAS
COMPLICADAS
1 2 3 3 4 4
Rita Quintas Rey , Alejando Brea Fernández , David Dacruz , Jesús Eiris , Ángel Carracedo , Francisco Barros
1
Fundacion Publica Galega de Medicina Xenomica (FRGMX)-SERGAS, Grupo de Medicina Xenómica-USC, IDIS
Santiago de Compostela (A Coruña) España
2
Grupo de Medicina Xenómica-USC, Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER)
(Santiago de Compostela) España
3
Servicio Neuropediatría, Hospital Clínico Universitario, Santiago de Compostela (Santiago de Compostela) España
4
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica (FPGMX)-SERGAS, Grupo Medicina Xenómica-USC, IDIS, Centro
de investigación Biomédica en Red de Enfermedades Raras (CIBERER) (Santiago de Compostela) España
1 Objetivos
Diagnóstico genético de un paciente de 10 años con retraso global del desarrollo, espasticidad
generalizada con predominio en miembros inferiores, microcefalia adquirida y rasgos dismórficos
menores: pabellones auriculares con anteversión en zona inferior, hendiduras palpebrales
antimongoloides, sindactilia parcial del segundo y tercer dedos de los pies, uña del pulgar ancha, labios
gruesos y ptosis palpebral derecha. En la RM cerebral se observa hipoplasia de cuerpo calloso,
displasia cerebelosa y disminución de sustancia blanca occipital bilateral.
El ADN genómico del paciente ha sido sometido a un enriquecimiento de los exones y zonas
flanqueantes con SureSelect Focused Exome. Posteriormente, las regiones enriquecidas han sido
secuenciadas en la plataforma Ion Proton System, alcanzando una profundidad de cobertura media de
219X y un 81,8% de las bases cubiertas a >30X. Tras el mapeo y anotación de las secuencias, se han
filtrado los resultados en busca de variantes potencialmente deletéreas.
3 Resultados
De entre las variantes identificadas tras el análisis de exomas, cabe destacar 2 presentes en el gen
AP4M1 con frecuencia en población general inferior al 0.005% y que no han sido anteriormente
reportadas como causales. La primera, una missense, ha sido definida como potencialmente
patogénica por los algoritmos predictores de patogenicidad in silico. La segunda, es una frameshift que
origina la aparición de un codón de terminación prematuro y, por lo tanto, da lugar a la síntesis de una
proteína truncada.
4 Conclusiones
El gen AP4M1 codifica una proteína que forma parte del complejo de transporte intracelular en
neuronas. Variantes deletéreas en este gen han sido asociadas a Paraplejia espástica de herencia
autosómica recesiva (OMIM#612936). Finalmente, el análisis del fenotipo del paciente y la
identificación de 2 variantes potencialmente deletéreas en el gen AP4M1 permiten encuadrar el
presente caso en un diagnóstico de Paraplejia espástica.
C0457 DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE UNA MIOPATÍA CENTRAL CORE FAMILIAR
MEDIANTE SECUENCIACION MASIVA
1 2 3 3 4
Clara Gómez-González , Carmen Prior de Castro , Ruben de Sancho , Amparo García Cardenal , Elena Vallespín ,
5 5 1 6
Mar García Romero , Ignacio Samuel Pascual , Jesús Molano , Pablo Lapunzina
1
Genética Molecular. INGEMM. IdiPaz. Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid) España
2
Genómica Estructural y Funcional. INGEMM. Hospital Universitario La Paz (Paseo de la Castellana 261.28046-
Madrid(Madrid) España
3
Genética Molecular. INGEMM. IdiPaz. Hospital Universitario La Paz (Paseo de la Castellana 261.28046-
4
Genómica Estructural y Funcional. INGEMM. IdiPaz, CIBERER. Hospital Universitario La Paz (Paseo de la Castellana
261.28046-Madrid(Madrid) España
5
Servicio de Neuropediatría, Hospital Universitario La Paz-IdIPAZ (Paseo de la Castellana 261.28046-Madrid(Madrid)
España
6
Genética Molecular. INGEMM. IdiPaz. CIBERER. Hospital Universitario La Paz (Paseo de la Castellana 261.28046-
1 Objetivos
La miopatía central core se caracteriza por debilidad muscular, generalmente proximal y frecuente
afectación de músculos extraoculares. En la biopsia muscular es característico la presencia de cores
en fibras tipo 1.
Presentamos el caso de dos hermanos con miopatía congénita con cores, con mayor afectación de
musculatura proximal y ocular.
Paciente y métodos
Varón y mujer que debutan a los 3 y 6 años con debilidad muscular y parálisis de la mirada vertical.
Son remitidos a nuestro centro a los 14 y 16 años presentando facies miopáticas, oftalmoparesia
bilateral, atrofia de cinturas escapular y pélvica bilateral, hipotonía y arreflexia.
Se realizó el estudio de biopsia muscular en ambos hermanos.
Los estudios genéticos se realizaron con ADN extraído de linfocitos de sangre periférica.
El análisis de secuenciación masiva (NGS) se realizó con un panel de diseño propio NMFQv2 con 220
genes asociados a enfermedades neuromusculares (Captura SeqCapEZ (Roche NimbleGen);
plataforma NextSeq500 (Ilumina)). Análisis bioinformático del gen RYR1 asociado a miopatía central
core.
3 Resultados
En las biopsias musculares se observaron descenso de actividad ATPasa y de enzimas oxidativas con
acúmulo de desmina y ausencia de mitocondrias con elementos tipo core.
El estudio de NGS detectó en ambos hermanos dos variantes en el gen RYR1 en heterocigosis:
c.10471C>T; p.Gln3491Ter y c.325C>T; p.Arg109Trp (NM_000540). Estas variantes están clasificadas
como patogénicas por los predictores de patogenicidad y afectan a un aminoácido conservado.
4 Conclusiones
La variante p.Gln3491Ter en el gen RYR1 no ha sido previamente descrita y la variante p.Arg109Trp
está clasificada como patogénica en CLINVAR.
Consideramos las variantes probablemente patogénicas (clasificación ACMG).
Hemos descrito una nueva variante, p.Gln3491Ter, en el gen RYR1 asociada a miopatía congénita con
cores.
Es importante la recomendación de no exponer a anestésicos tipo sevofluorano, halotano y
succinilcolina a estos pacientes con variantes en RYR1 por riesgo de hipertermia maligna.
C0465 C.7259-17C>T EN NF1: VARIANTE PROBABLEMENTE BENIGNA. A PROPÓSITO
DE UN CASO.
1 2 1 1
Carmen Palma Milla , Sara Franco Freire , José Miguel Lezana Rosales , Sandra Carmona Tamajón , Carmen Torres
1 1 1 1 1
Fernández , Javier López Montiel , Julio Torres González , Carmen Benito López , Juan López Siles
1
C.G.M GENETAQ Malaga (Málaga) España
2
UGC Laboratorio H.R.U Málaga (Málaga) España
1 Objetivos
Diagnóstico genético de varios miembros de una familia afecta de neurofibromatosis tipo 1. Estudio de
segregación una variante de significado clínico incierto: c.7259-17C>T en el gen NF1.
Secuenciación paired-end de 2x151pb de la región codificante y zonas flanqueantes del gen NF1
(NM_000267) mediante el secuenciador MiSeq (Illumina), empleando el kit Nextera XT (Illumina).
Estudio de segregación.
3 Resultados
El estudio comienza por un miembro familiar que sin criterios clínicos actualmente (asintomática, con
pequeña mancha café con leche), consulta por planificación familiar. Detectada la variante c.7259-
17C>T, es clasificada probablemente patogénica en Human Gene Mutation Database (HGMD), según
Fahsold et al (2000). Sin embargo, en la publicación referida no se estudia el posible efecto a nivel de
splicing y además la frecuencia del cambio es mayor de la esperada para una variante patogénica
(ExAc: 0.0026). Se recomienda el estudio de segregación en otros miembros de la familia poniéndose
de manifiesto que la variante no segrega con la enfermedad.
Ante estos resultados, se decide estudiar a hermana del probando que sí cumple criterios clínicos
(manchas café con leche, angiomas y neurofibromas) detectándose la variante patogénica c.3986C>G;
p.S1329X. Esta variante se encuentra descrita en HGMD asociada a neurofibromatosis tipo 1 según
Pasmant et al (2015). El posterior estudio familiar demuestra que existe cosegregación con la
enfermedad y que el caso índice de esta familia (asintomática) no es portadora de esta variante.
4 Conclusiones
Se refuta la patogenicidad de la variante c.7259-17C>T. Se trata de una variante de relativa elevada
frecuencia y no cumple segregación en la familia.
Este caso pone de manifiesto la importancia de comenzar los estudios familiares en aquellos individuos
con clínica y sintomatología clara de la enfermedad: en este caso, familiares que sí cumplen criterios
clínicos de neurofibromatosis.
C0474 VARIANTE EN EL GEN ACTA1 ASOCIADA A DIFERENTES FENOTIPOS
1 1 2 1 1
Carmen Prior De Castro , Clara Gómez-González , Isabel de Esteban , Ruben de Sancho , Amparo García Cardenal ,
3 4 3 1 4
Mar García Romero , Elena Vallespín , Ignacio Samuel Pascual , Jesús Molano , Pablo Lapunzina
1
INGEMM. Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid) España
2
Anatomía Patológica. Hospital Universitario La Paz (Paseo de la Castellana 261.28046-Madrid(Madrid) España
3
Servicio de Neuropediatría, Hospital Universitario La Paz-IdIPAZ (Paseo de la Castellana 261.28046-Madrid(Madrid)
España
4
INGEMM. CIBERER. Hospital Universitario La Paz (Paseo de la Castellana 261.28046-Madrid(Madrid) España
1 Objetivos
El gen alfa actina 1 (ACTA-1) codifica la actina de músculo esquelético que interviene en la contracción
muscular. Mutaciones en este gen son responsables de diversas miopatías: miopatía con agregados
de actina, nemalínica, con cores, entre otras.
Presentamos el caso de una niña con sospecha inicial de distrofia facioescapulohumeral (FSHD). El
diagnóstico definitivo se alcanza mediante secuenciación masiva (NGS).
Paciente y métodos
Niña de 7 años con estancamiento ponderal en la infancia, paresia facial bilateral y escoliosis
dorsolumbar. Se cansa al andar y presenta problemas para saltar.
Se obtuvo biopsia muscular para estudio en anatomía patológica.
Los estudios genéticos se realizaron con ADN extraído de linfocitos de sangre periférica.
La secuenciación masiva (NGS) se realizó con un panel de diseño propio ATXDTRv1 con 326 genes
asociados a enfermedades neuromusculares (Captura SeqCapEZ (Roche NimbleGen)); plataforma
NextSeq500 (Ilumina)). Análisis bioinformático de 7 genes asociados a miopatía nemalínica:
NEB,TPM3,ACTA1,TPM2,TNNT1,KBTBD13,CFL2.
3 Resultados
En la biopsia muscular se observaron intensas alteraciones miopáticas y sospecha de miopatía
nemalínica.
Se descartó la FSHD mediante estudio genético.
El estudio de NGS detectó una variante en el gen ACTA1 en heterocigosis: C.49G>C; p.Gly17Arg
(NM_001100). Esta variante está clasificada como patogénica por 5 predictores de patogenicidad.
4 Conclusiones
La actina es una proteina muy conservada en el músculo esquelético. La posición Gly17 se localiza en
una región de la proteina de unión al ATP, lo que apoya su implicación funcional.
Una misma variante en el gen ACTA1 puede causar distintos fenotipos. La variante p.Gly17Arg en el
gen ACTA1 ha sido previamente descrita en un paciente con miopatía con agregados de actina y
fenotipo más severo (hipotonía al nacimiento, requiere ventilación asistida y fallece a los 3 meses).
El fenotipo de distrofia facioescapuloperoneal ha sido previamente descrito en otra variante
(p.Glu197Asp) del gen ACTA1.
Consideramos la variante p.Gly17Arg posiblemente patogénica (clasificación ACMG).
C0476 ESTUDIO FAMILIAR DE ATAXIA ESPINOCEREBELOSA. DETECCIÓN DE UNA
NUEVA MUTACIÓN EN EL GEN SYNE1.
1 2 1 2
Carmen Palma Milla , Loida García Cruz , José Miguel Lezana Rosales , Ramón Gine Benaiges , Sandra Carmona
1 1 1 1 1
Tamajón , Carmen Torres Fernández , Javier López Montiel , Julio Torres González , Carlos Sánchez Linares , Juan
1 2
López Siles , Alfredo Santana Rodríguez
1
C.G.M GENETAQ malaga (Málaga) España
2
Hospital Materno Infantil, (Las Palmas de Gran Canaria) España
1 Objetivos
Las ataxias hereditarias son un grupo de enfermedades caracterizadas por trastornos de la
coordinación del movimiento. La ataxia hereditaria puede tener un modo de herencia autosómico
dominante, autosómico recesivo o ligado al X. Presentamos el caso de una familia afecta de ataxia
cerebolosa (AC) autosómica recesiva en la que se detecta una mutación no descrita en el gen SYNE1.
Realización de panel de secuenciación NGS para AC. Secuenciación paired-end de 2x151pb mediante
el secuenciador masivo MiSeq (Illumina), empleando el kit TruSight One (Illumina).
Estudio familiar de la variante de interés detectada.
3 Resultados
Se identifica la presencia de la variante probablemente patogénica c.14796delA (p.Ala4933Glnfs*20)
en homocigosis en el gen SYNE1. Esta deleción provoca una modificación en el marco de lectura
dando lugar a un codón de parada prematuro.
Esta variante no se encuentra descrita en la bibliografía ni en las bases de datos consultadas, aunque
para este gen sí están descritas en la base de datos Human Gene Mutation Database (HGMD) otras
mutaciones frameshift asociadas a AC autosómica recesiva.
Se estudian cuatro hermanos del caso índice: dos de ellos con clínica franca de AC portan la variante
en homocigosis, otros dos hermanos son asintomáticos siendo uno de ellos homocigoto para el alelo
salvaje y otro heterocigoto.
4 Conclusiones
Se describe por primera vez la variante c.1476delA en el gen SYNE1 asociada a AC. Debido a la
naturaleza de la variante (deleción frameshift), el hecho de que no haya sido descrita en población
control y la segregación que se observa en la familia, se concluye que se trata de una variante
probablemente patogénica.
C0478 QUINTO CASO DE SÍNDROME DE AICARDI-GOUTIERES AUTOSÓMICO
DOMINANTE POR MUTACIONES EN ADAR, DIAGNOSTICADO MEDIANTE EXOMA
CLÍNICO
1 1 1 1
Miriam León Otegui , Elena Van der Vorst Roncero , Evangelina Pestaña Molinero , Luis Izquierdo Lopez , Alberta
2 1
Belinchon Martinez , José Antonio García López-Asenjo
1
2
1 Objetivos
El síndrome de Aicardi-Goutierres es una patología autosómica recesiva o dominante causada por
variantes patogénicas en los genes RNASEH2B, TREX1, SAMHD1, RNASEH2C, ADAR, RANSEH2A y
TREX1 o en IFIH1, TREX1 y excepcionalmente en ADAR, respectivamente.
Se inicia después del año de edad con una evolución progresiva, caracteriza por calcificaciones de los
ganglios basales, leucodistrofia, cambios en materia blanca, atrofia cerebral, linfocitosis de líquido
cefalorraquídeo, discapacidad intelectual, episodios febriles asépticos, epilepsia, distonía, espasticidad
y pérdida del habla.
Debido a la heterogeneidad de la patología y sus diagnósticos diferenciales, el abordaje molecular
indicado es la secuenciación masiva.
Paciente femenina de 17 años. Padres y dos hermanos sanos.
El cuadro clínico se inicia a los 16 meses, con dificultad para la bipedestación y caídas.
Posteriormente, evoluciona de forma paulatina y continua con discapacidad intelectual, talla baja,
marcha paraparética, hipertonía espástica en las cuatro extremidades, déficit de fuerza en miembros
inferiores, déficit de lenguaje con palilalia y jergafasia y edad ósea retrasada.
El estudio de imagen cerebral muestra lesiones en la sustancia blanca, calcificación en ganglios de
forma bilateral y núcleo dentado.
Se realizó secuenciación masiva mediante plataforma de Illumina y kit TruSight One (Illumina), filtrado
mediante Variant Studio, GeneGrid y el fenotipo de la paciente.
3 Resultados
Se identifica la variante c.3019G>A, p.Gly1007Arg en el exón 11 del gen ADAR en heterocigosis. Se
confirma mediante secuenciación sanger y se evalúa en los padres, donde está ausente.
4 Conclusiones
Hasta hoy, solo se han identificado 4 casos de la forma dominante del síndrome de Aicardi-Goutierres
causado por la mutación en heterocigosis c.Gly1007Arg en ADAR (1,2).
La paciente descrita en este caso presenta talla baja y edad ósea retrasada, rasgos no descritos en los
otros casos.
El exoma clínico posibilita abordar este tipo de patologías genéticamente heterogéneas, permitiendo
además, descartar otras posibles patologías genéticas.
C0488 ESTUDIO DE LAS VARIANTES G.27134G>T Y G.27706_27707DELAT EN EL GEN
SMN1: MEJORA EN EL DIAGNÓSTICO DE PORTADORES DE ATROFIA MUSCULAR
ESPINAL.
Laura Alias Andreu, Elisabeth Martínez Sánchez, Sara Bernal Noguera, Francesca March, Adoración Venceslá, Jordi
Surrallés, MªPía Gallano Petit
Hospital de Sant Pau Barcelona (Barcelona) España
1 Objetivos
Atrofia muscular espinal (AME) es una enfermedad de moto neurona, autosómica recesiva, causada
por deleción/mutación del gen SMN1. La frecuencia de portadores es 1/40 en la población general.
Una pequeña proporción de individuos portadores presentan la deleción de SMN1 en uno de sus
cromosomas y dos copias del gen en el otro. Los análisis cuantitativos no permiten diferenciar estos
portadores 2/0 de individuos no portadores (1/1). En población Ashkenazi se ha asociado un par de
variantes del gen SMN1 con la presencia de dos copias del gen en cis: g.27134G>T en el intrón 7 y
g.27706_27707delAT en el exón 8.
Detección de dos variantes, g.27134G>T y g.27706_27707delAT, mediante secuenciación Sanger del
exón 7 al exón 8 del gen SMN1. El estudio incluye 270 individuos españoles: 93 individuos con más de
una copia del gen SMN1 en cis; 42 portadores 1/0; 99 controles 1/1 y 36 pacientes AME (16 con
deleción en homocigosis del gen SMN1 y 20 con genes híbridos SMN2-SMN1).
3 Resultados
Ambas variantes se detectan más frecuentemente en cromosomas con 2 SMN1 en cis respecto a
cromosomas con 1 SMN1 (17.9% vs 0.7%; p<0.001). Además, g.27706_27707delAT es más frecuente
en el exón 8 de genes híbridos SMN2-SMN1 que en el exón 8 de genes SMN1 intactos (20% versus
0.83%, p<0.001).
4 Conclusiones
En población española, la detección de estas variantes aumenta el riesgo residual en el diagnóstico de
portadores de AME en individuos con dos copias del gen SMN1. Sin embargo, su ausencia no permite
descartar la presencia de estas copias en el mismo cromosoma. La elevada frecuencia de la variante
g.27706_27707delAT en el exón 8 de genes híbridos sugiere que la conversión génica u otros
reordenamientos cromosómicos son más propensos en presencia de esta variante.
C0509 PARAPARESIA ESPÁSTICA ASOCIADA A MUTACIONES EN EL GEN GJA1
ASTROCITARIO: MECANISMO PATOGÉNICO
1 2 2 3 4
Adela Escudero López , Paloma Martínez Montero , Jesús Molano , Carlos Paíno , Daniel Gonnzález-Nieto , Justo
5 6 7 3
García de Yébenes , María Jesús Sobrido , Beatriz Quintáns , Luis C Barrio
1
Ingemm-Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid) España
2
INGEMM-Hospital Universitario La Paz (Madrid) España
3
IRYCIS-Hospital Ramón y Cajal (Madrid) España
4
Centro de Tecnología Biomédica-UPM (Madrid) España
5
6
Fundación Pública Galega de Medicina Xenómica, IDIS-SERGA (Galicia) España
7
Instituto de Biología Molecular e Celular (Porto) Portugal
1 Objetivos
Las paraparesias espásticas hereditarias (HSP) constituyen un amplio grupo de enfermedades
genéticas que afectan predominantemente a las extremidades inferiores, causando debilidad muscular,
espasticidad progresiva y alteración de la marcha por degeneración de los axones motores y
sensoriales corticoespinales. La mayoría de los genes implicados en HSP son neuronales sugiriendo
que la degeneración axonal es la causa primaria, sin embargo en el caso de mutaciones en los genes
de la proteína proteolípidica y la conexina47, el efecto primario reside en los oligodendrocitos. En este
estudio investigamos si las mutaciones en el gen GJA1 de la conexina43 astrocitaria causan también
paraparesia espástica (SPG) y cuál es el mecanismo patogénico.
Estudios genéticos de secuenciación de la región codificante del gen GJA1 de los pacientes con el
síndrome de displasia oculodentodigital (ODDD) y que cursan con SPG. Ensayo funcional de las
mutaciones identificadas en varios sistemas de expresión in vitro, con la finalidad de valorar su
expresión y la capacidad para formar canales intercelulares por sí solas y en combinación con la
proteína silvestre.
3 Resultados
Se identificaron dos mutaciones en heterocigosis en el gen GJA1, la mutación p.R148Q en un caso
esporádico y la mutación p.V85M en una familia de tres generaciones que segrega con la SPG. El
ensayo funcional muestra que ambas mutaciones son capaces de formar uniones en hendidura pero
no canales intercelulares funcionales. En los experimentos de co-expresión con la conexina43
silvestre, que simulan las condiciones de heterocigosis de los pacientes, ambas mutaciones ejercieron
un potente efecto de inhibición dominante sobre el acoplamiento intercelular mediado por los canales
homotípicos de Cx43 y los heterotipicos de Cx43-Cx47
4 Conclusiones
La causa primaria de la SPG en los pacientes de ODDD reside en los astrocitos y su mecanismo
patogénico es la supresión de la comunicación intercelular astrocito-astrocito y astrocito-
oligodendrocito.
C0519 TRANSMISIÓN VERTICAL DE LA INFECCIÓN POR ZIKA Y ASOCIACIÓN CON
VENTRICULOMEGALIA AISLADA: REPORTE DE CASO CON HIBRIDACIÓN GENÓMICA
COMPARATIVA Y SECUENCIACIÓN DE EXOMA NORMAL
1 2 3 4 4
Estephania Candelo Gomez , Gabriela Caicedo , Maria Paula Hormaza , Julian Nevado , Pablo Lapunzina , Mari
4 1
angeles Mori Alvarez , Harry Pachajoa
1
2
Universidad Icesi (Valle) Colombia
3
Fundacion Valle del Lili (Valle) Colombia
4
INGEMM - Instituto de Genética Médica y Molecular (IdiPAZ) (Madrid) Espana
1 Objetivos
El virus del Zika (VZ) es una infección transmitida por vector poco conocida. Este Flavivirus se ha
asociado con infección perinatal y defectos de nacimiento durante la epidemia en brasil. Mostrando un
aumento del riesgo microcefalia asociado a la transmisión intrauterina del VZ.
Fueron evaluadas muestras obtenidas de la madre y el recién nacido. Se realizó aislamiento
cuantitativo del virus por el método TaqMan RT-PCR y RT-PCR. Adicionalmente, hibridación genómica
comparada (array-CGH) y secuenciación exómica completa para descartar las causas genéticas
conocidas de malformaciones cerebrales.
3 Resultados
Reportamos el caso de una mujer embarazada de 24 años de edad que durante la semana 17
semanas de gestación presenta infección aguda por VZ durante la epidemia de este virus en Colombia.
Por consiguiente, el virus se detectó a las 31 semanas en el líquido amniótico. El virus no se detectó en
orina o suero. A las 37 semanas de gestación, se obtiene recién nacido por parto vaginal sin
complicaciones, sexo masculino, peso 2629 g (p10), altura 48 (p50-10), perímetro cefálico 32cm (p10)
(medición según la edad gestacional). La tomografía cerebral mostró ventriculomegalia cerebral.
Además, las pruebas moleculares, infecciosas y genómicas fueron negativas.
4 Conclusiones
Estos hallazgos refuerzan la asociación entre Zika y los casos de ventriculomegalia aislada en un
recién nacido colombiano y añade defecto ventricular como parte del posible espectro de anomalías
cerebrales. Es el primer informe que descarta las deleciones y las mutaciones que causan
malformaciones cerebrales.
C0525 MEJORA DEL DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE LA DEMENCIA
FRONTOTEMPORAL (DFT) MEDIANTE UN PANEL DE GENES JUNTO CON EL ESTUDIO
DE LA EXPANSIÓN DEL GEN C9ORF72.
1 2 2 3
Ana Belén de la Hoz Rastrollo , Nekane Ibarluzea Guenaga , Olatz Villate Bajarano , Manuel Fernández Martínez ,
4 5 6
Elisa Blanco Martín , Esther Sarasola Díez , Mª Isabel Tejada Mínguez
1
IIS Biocruces_Hospital Universitario Cruces, Plataforma de Genética Genómica Barakaldo (Bizkaia) España
2
IIS BioCruces_Hospital Universitario Cruces (Bizkaia) España
3
Servicio de Neurología. Hospital Universitario Cruces. IIS BioCruces. (Bizkaia) España
4
Hospital Universitario Cruces (Bizkaia) España
5
Hospital Universitario Basurto (Bizkaia) España
6
Servicio de Genética.Hospital Universitario Cruces_IIS BioCruces. (Bizkaia) España
1 Objetivos
El objetivo es validar un panel de genes para secuenciación masiva de nueva generación –Next
Generation Sequencing (NGS)- que junto al análisis de las repeticiones del hexanucleótido GGGGCC
del gen C9orf72, permita un diagnóstico molecular más rápido y exacto de la demencia frontotemporal
(DFT).
La DFT, tras el Alzheimer, es la segunda forma de demencia de aparición temprana más común. Entre
el 30% y el 50% de los casos son hereditarios. Aunque mutaciones en tres genes han sido
comunménte asociadas a la DFT (MAPT, PGRN y C9orf72), recientes estudios han identificado nuevas
mutaciones en otros genes como: FUS, VCP, TARDBP y CHMP2B.
Un total de 67 pacientes han sido estudiados mediante un panel de 6 genes para NGS (MAPT, PGRN,
TM
FUS, VCP, TARDBP y CHMP2B). La tecnología usada ha sido Ampliseq (con una cobertura total del
TM
98,5%) y Ion Torrent PGM . El análisis y filtrado de las variantes se llevó a cabo con las herramientas
TM TM
de análisis Torrent Suite y Ion Reporter . Las variantes se validaron mediante secuenciación
Sanger. A todos los pacientes se les estudió además la expansión del hexanucleótido GGGGCC en el
gen C9orf72.
El efecto funcional de algunas de las variantes se ha estudiado a nivel de expresión de mRNA y a nivel
proteico.
3 Resultados
o En C9orf72: 5 casos de expansiones patológicas (7,5%).
o En PGRN: 2 mutaciones descritas (c.709-1G>A; c.359C>A).
o En FUS: 1 mutación no descrita (c.917T>C) que disminuye la expresión de la proteína y, en 3
pacientes, 1 variante rara (MAF= 0.005) en 3’UTR (c.*41G>A), (F.A. de 2,23).
o Variantes de significado incierto en VCP (c.2406T>C), TARDBP (c.1199G>A) y MAPT (c.817T>C y
c.1639A>G).
4 Conclusiones
Dado que nuestros resultados confirman que la mutación más frecuente en DFT es la expansión del
gen C9orf72, nuestra recomendación diagnóstica es analizar primero el hexanucleótido de este gen y
posteriormente estudiar mediante el panel de genes (NGS) los casos negativos.
C0526 LA APLICACIÓN DE NGS (EXOMA CLÍNICO) PERMITE EL DIAGNÓSTICO
DEFINITIVO DE UNA PACIENTE CON SÍNDROME DE EAST SECUNDARIO A
MUTACIONES EN KCNJ10
1 2 2 3
Eva García Galloway , Verónica Barca Tierno , Matías Morín Rodríguez , José Luis López-Sendón Moreno , Adriano
3 2
Jiménez Scrig , Miguel Ángel Moreno Pelayo
1
Hospital Ramon y Cajal Madrid (Madrid) España
2
Servicio de Genética, hospital Ramón y Cajal (Madrid) España
3
Servicio de Neurología, Hospital Ramón y Cajal (Madrid) España
1 Objetivos
Estudio mediante exoma clínico de una mujer de 62 años con sospecha clínica de ataxia
espinocerebelosa pura en seguimiento en consulta de neurología
exónica de 4813 genes clínicamente relevantes y plataforma Illumina (MiSeq) en el ADN del probando.
La clasificación y el estudio de las variantes encontradas se realizó empleando la herramienta Variant
Studio (Illumina) acotando el análisis bioinformático a 136 genes implicados en ataxia. La validación de
las variantes y el estudio de segregación se realizó mediante secuenciación Sanger.
3 Conclusiones
Análisis moleculares por técnicas clásicas en la paciente (FRDA, SCA1-2-3-6-8 y DRPLA) no habían
detectado mutaciones patogénicas. El estudio mediante exoma clínico reveló que la paciente
presentaba dos cambios en heterocigosis no descritos en el gen KCNJ10, c.512G>A p.Arg171Gln y
c.488G>A p.Glu163Asp. KCNJ10 codifica un canal rectificador de potasio que se expresa en las
células del epitelio renal, células del oído interno y células de la glia del sistema nervioso central.
Mutaciones en este gen han sido recientemente asociadas a un trastorno específico consistente en
epilepsia, ataxia, sordera neurosensorial y tubulopatía denominado síndrome de EAST (MIM 612780).
La reevaluación clínica permitió detectar en la paciente y en sus dos hermanas afectas un cuadro
clínico más complejo que incluía migrañas, ataxia, sordera neurosensorial y afectación piramidal con
paraparesia espástica de curso lentamente progresivo e inicio en la segunda década de la vida,
consistente con síndrome de EAST.
C0527 TRANSMISIÓN VERTICAL TEMPRANA DE LA INFECCIÓN POR EL VIRUS ZIKA Y
SU ASOCIACIÓN CON MICROCEFALIA, LISENCEFALIA Y AGENESIA COMPLETA DEL
CUERPO CALLOSO CON CON HIBRIDACIÓN GENÓMICA COMPARATIVA Y
SECUENCIACIÓN DE EXOMA NORMAL
1 1 2 3 3
Estephania Candelo Gomez , Gabriela Caicedo , Maria Hormaza , Julian Nevado , Pablo Lapunzina , Mari Angeles
3 1
Mori Alvarez , Harry Pachajoa
1
2
Fundacion Valle del Lili (Cali) Colombia
3
INGEMM - Instituto de Genética Médica y Molecular (IdiPAZ) (Madrid) España
1 Objetivos
El virus Zika (VZ) es un virus naciente de la familia Flaviviridae transmitido por artrópodos. Inicialmente
no era una indicación de que el virus causara enfermedades humanas, el primer caso humano fue
reportado en Nigeria en 1952. Hasta hace poco se consideraba que causaba infecciones benignas
humanas esporádicas en África y Asia. Después de que el virus llegó a las Américas y surgió en Brasil,
se observó un aumento de casos de microcefalia y luego se convirtió en una enfermedad infecciosa
ligada a defectos congénitos.
Hemos evaluado muestras obtenidas de la madre y el recién nacido. Se realizó aislamiento cuantitativo
del virus por el método TaqMan RT-PCR, RT-PCR y autopsia fetal. Adicionalmente, hibridación
genómica comparada (array-CGH) y secuenciación exomica completa.
3 Resultados
Reportamos un caso de una mujer embarazada de 25 añosde edad, Colombiana, quien presentó
durante la décima semana de gestación, enfermedad aguda con síntomas generales seguido de
picazón generalizada severa y erupción maculopapular durante alrededor de 5 días cuando la infección
por VZ era epidémica en Colombia. A las 23.3 semanas de gestación, la ecografía mostró anatomía
intracraneal anormal con ventriculomegalia cerebral, microcefalia y calcificaciones parenquimatosa.
Dado al grave pronóstico del producto fetal, la paciente optó por terminar el embarazo a las 25
semanas de gestación. Las diferentes muestras obtenidas de la placenta, líquido amniótico y líquido
cefalorraquídeo fueron positivas para el aislamiento viral de VZ. La autopsia mostró microcefalia,
lisencefalia, ventriculomegalia y agenesia completa del cuerpo calloso.
4 Conclusiones
Este caso muestra una transmisión vertical temprana por el VZ en Colombia y asociación con
anomalías congénitas cerebrales. Se llevaron a cabo pruebas moleculares, infecciosas y genómicas
con resultados negativos, apoyando el posible mecanismo teratogénico y secuencia disruptiva fetal por
el VZ.
C0534 LA APLICACIÓN DE NGS (EXOMA CLÍNICO) PERMITE EL DIAGNÓSTICO
DEFINITIVO DE UNA PACIENTE CON SÍNDROME DE EAST SECUNDARIO A
MUTACIONES EN KCNJ10
1 2 2 3
Eva García Galloway , Verónica Barca Tierno , Matías Morín Rodríguez , José Luis López-Sendón Moreno , Adriano
3 2
Jiménez Scrig , Miguel Ángel Moreno Pelayo
1
Hospital Ramon y Cajal Madrid (Madrid) España
2
Servicio de Genética, hospital Ramón y Cajal (Madrid) España
3
Servicio de Neurología, Hospital Ramón y Cajal (Madrid) España
1 Objetivos
Estudio mediante exoma clínico de una mujer de 62 años con sospecha clínica de ataxia
espinocerebelosa pura en seguimiento en consulta de neurología.
exónica de 4813 genes clínicamente relevantes y plataforma Illumina (MiSeq) en el ADN del probando.
La clasificación y el estudio de las variantes encontradas se realizó empleando la herramienta Variant
Studio (Illumina) acotando el análisis bioinformático a 136 genes implicados en ataxia. La validación de
las variantes y el estudio de segregación se realizó mediante secuenciación Sanger.
3 Resultados
Análisis moleculares por técnicas clásicas en la paciente (FRDA, SCA1-2-3-6-8 y DRPLA) no habían
detectado mutaciones patogénicas. El estudio mediante exoma clínico reveló que la paciente
presentaba dos cambios en heterocigosis no descritos en el gen KCNJ10, c.512G>A p.Arg171Gln y
c.488G>A p.Glu163Asp. KCNJ10 codifica un canal rectificador de potasio que se expresa en las
células del epitelio renal, células del oído interno y células de la glia del sistema nervioso central.
Mutaciones en este gen han sido recientemente asociadas a un trastorno específico consistente en
epilepsia, ataxia, sordera neurosensorial y tubulopatía denominado síndrome de EAST (MIM 612780).
La reevaluación clínica permitió detectar en la paciente y en sus dos hermanas afectas un cuadro
clínico más complejo que incluía migrañas, ataxia, sordera neurosensorial y afectación piramidal con
paraparesia espástica de curso lentamente progresivo e inicio en la segunda década de la vida,
consistente con síndrome de EAST.
4 Conclusiones
La aplicación de la secuenciación masiva es de gran utilidad en el diagnóstico de enfermedades de
elevada heterogeneidad clínica y genética como es el caso de la ataxias, pudiendo en base a los datos
de secuencia obtenidos reorientar el estudio clínico para llegar a un diagnóstico definitivo de la
patología.
Tecnologías genómicas y Bioinformática
C0099 NUEVA APROXIMACIÓN DE SECUENCIACIÓN MASIVA BASADA EN LA

TECNOLOGÍA MIPS EN EL ESTUDIO MOLECULAR DE PACIENTES ESPAÑOLES CON
DISTROFIAS DE RETINA NO SINDRÓMICAS
Raquel Perez-Carro, Inmaculada Martin-Mérida, Domingo Aguilera, Iker Sanchez-Navarro, Olga Zurita, Noelia
Sanchez-Bolivar, Rocio Sanchez-Alcudia, Carlos Lombardia, Paula Diaz-Fernandez, European Retinal disease
Consortium (ERDC), Rosa Riveiro-Alvarez, Aurora Salamanca, Marta Corton, Almudena Avila-Fernandez, Carmen
Ayuso
Fundación Jimenez Diaz (Madrid) España
1 Objetivos
Las distrofias hereditarias de la retina (DR) son un conjunto de enfermedades degenerativas y
generalmente progresivas, causadas por la afectación primaria de los fotorreceptores. Debido a su
gran heterogeneidad clínica y genética, el diagnóstico molecular de las DR es complejo.
El objetivo de este trabajo fue la aplicación de nuevas técnicas de secuenciación masiva coste-
efectivas para mejorar el diagnóstico de los pacientes afectados y sus familias.
Estudio de una cohorte de 658 pacientes españoles afectados con distintas distrofias de retina no
sindrómicas, entre las que se incluyen las patologías más prevalentes como son la retinosis
pigmentaria, distrofia de conos-bastones o amaurosis congénita de Leber, entre otras. El 95,6% de los
casos (629/658) fueron previamente estudiados mediante técnicas moleculares convencionales. Se
diseñó un panel de 108 genes previamente asociados a DR no sindrómica basado en la tecnología
MIPs (Molecular Inversion Probes) en colaboración con el European Retinal Disease Consortium
(ERDC). Todas las variantes patogénicas se validaron mediante secuenciación Sanger y en aquellas
familias en las que se disponía de muestras de familiares se realizaron estudios de co-segregación.
3 Resultados
Se han caracterizado 256 casos (39%). Han sido identificadas un total de 313 mutaciones patogénicas
distintas, siendo 154 nuevas (49%). Se han identificado además 5 casos con mutaciones de novo en
los genes BBS2, IMPDH1, PRPF31 (2) y RHO. En 61 casos solo se observó un alelo patogénico en
genes recesivos (9,3%), en ellos se están realizando estudios para detección de variaciones en el
número de copia (CNVs).
4 Conclusiones
La validación de esta nueva aproximación permite establecer un diagnóstico más preciso en pacientes
con DR no sindrómica. Se ha comprobado que esta nueva estrategia es más coste-efectiva además de
proporcionarnos una validez clínica superior a la obtenida mediante técnicas moleculares
convencionales.
C0109 NUEVOS REORDENAMIENTOS GENÓMICOS EN PRPF31: UNA DUPLICACIÓN Y
UNA DELECIÓN SEGREGANDO EN UNA MISMA FAMILIA CON RETINOSIS
PIGMENTARIA AUTOSÓMICA DOMINANTE
Inmaculada Martín-Mérida, Patricia Fernandez-San Jose, Luciana Rodrigues Jacy da Silva, Rocio Sanchez-Alcudia,
Ascensión Gimenez, Cristina Villaverde, Raquel Perez-Carro, Clara I. Gomez-Sanchez, Olga Zurita, Almudena Avila-
Fernández, Fiona Blanco-Kelly, Marta Corton, Carmen Ayuso
Fundación Jiménez Díaz Madrid (Madrid) España
1 Objetivos
La retinosis pigmentaria (RP) se caracteriza por la degeneración primaria y progresiva de los bastones.
Presenta elevada heterogeneidad genética. En la RP autosómica dominante (adRP), el gen PRPF31
(pre-mRNA processing factor 31) es uno de los más prevalentes. Este gen interviene en la formación
de U4/U6*U5tri-snRNP, molécula clave del espliceosoma. Las mutaciones más frecuentes son de
pérdida de función, como las deleciones. El objetivo del estudio fue identificar reordenamientos en este
gen en familias adRP no caracterizadas previamente.
54 familias adRP con resultado negativo en NGS (panel de 73 genes asociados a RP), se cribaron
mediante MLPA (P235). En los casos positivos, el estudio se completó mediante aCGH 400k y PCR
larga, en el caso de la duplicación. Se estudió la expresión del gen en controles (N=9), pacientes con
duplicación (N=2) y deleción (N=1), mediante qPCR, usando SYBR Green.
3 Resultados
Se identificaron dos reordenamientos distintos, una duplicación (5.1 kb) y una deleción (29.7 kb) en
PRPF31, segregando en dos ramas familiares distintas. El aCGH permitió definir los puntos de corte, y
ver que la deleción incluía otros genes upstream. Mediante PCR larga se observó que la duplicación
estaba en tándem. Los niveles de expresión tanto en los pacientes con la duplicación como del
paciente con la deleción eran significativamente menores (p<0.001) que en controles.
4 Conclusiones
Se describe por primera vez una gran duplicación de PRPF31 asociada a RP y dos tipos de
reordenamientos segregando en la misma familia.
El estudio de expresión, especialmente para el caso de la duplicación, apoya la haploinsuficiencia
como mecanismo patogénico.
Debido a la frecuencia de deleciones en PRPF31 y la limitación de detectarlas por NGS, es
imprescindible utilizar alguna técnica adicional para detectar CNVs (como MLPA o aCGH).
C0157 AVANCES EN EL DIAGNÓSTICO GENÉTICO DE LAS DISTROFIAS HEREDITARIAS
DE RETINA
1 2 3 4 5
Ana Rodríguez Muñoz , Carla Fuster García , Elena Aller Mañas , Inma Hernán Sendra , Rosa Riveiro Álvarez ,
5 4 5 6 6
Almudena Ávila Fernández , Miguel Carballo , Carmen Ayuso García , Honorio Barranco , Roberto Gallego Pinazo ,
2 2 3
José María Millán Salvador , Gema García* García , Teresa Jaijo* Sanchís
1
Hospital Clínico Universitario, Hospital Clínico Universitario Valencia (Valencia) España
2
Instituto de Investigación Sanitaria la Fe (Valencia) España
3
Unidad de Genética, Hospital la Fe (Valencia) España
4
Unidad de Genética Molecular, Hospital de Terrassa (Barcelona) España
5
Departamento de Genética, Instituto de Investigación Sanitaria-Fundación Jiménez Díaz (Madrid) España
6
Servicio de Oftalmología, Hospital la Fe (Valencia) España
1 Objetivos
Las distrofias hereditarias de retina (DHR) son un grupo de trastornos caracterizado por la muerte
progresiva de fotorreceptores que da lugar a ceguera legal. Debido a la gran heterogeneidad genética
y elevada variabilidad clínica de las DHR el abordaje del diagnóstico genético por los métodos
tradicionales es inviable. Por ello, el objetivo de este estudio es el diagnóstico genético en pacientes
con DHR mediante secuenciación de nueva generación (NGS).
Se ha diseñado un panel de 117 genes y 5 mutaciones intrónicas profundas previamente descritas
para este grupo de patologías. Hemos utilizado el protocolo SureSelect QXT (Agilent) para la
construcción de la librería y la plataforma MiSeq (Illumina) para la secuenciación de las muestras. El
análisis de datos se ha realizado mediante los programas informáticos SureCall (Agilent) y
wANNOVAR (WGLab). Para la validación del panel se han empleado 8 casos con mutaciones de
distinta naturaleza localizadas en 8 genes distintos responsables de DHR.
3 Resultados
El panel diseñado tiene un tamaño final de 490 kbp. El 67% de lecturas totales se encuentran
cubriendo nuestras regiones de interés. La profundidad media de las regiones de interés es de
228x. El 98% de las bases tienen una profundidad de cobertura >50x. Se han detectado el 100% de
las mutaciones de los casos control: una mutación de splicing, 2 missenses, 5 frameshifts y una
deleción de 5 exones; localizadas es los genes: NR2E3, ABCA4, RPGR, RHO, PRPF8, CHM, PRPH2
y USH2A.
4 Conclusiones
Los resultados obtenidos en la secuenciación de los casos control (cobertura de las regiones,
profundidad de las lecturas así como la detección de las mutaciones control) valida esta estrategia de
análisis para el diagnóstico molecular de las DHR. Una vez validado el panel, hemos empezado a
secuenciar una cohorte de 100 pacientes clasificados clínicamente de algún tipo de DHR pero sin
diagnóstico molecular.
C0248 APLICACIÓN DE LAS NUEVAS TECNOLOGÍAS DE SECUENCIACIÓN MASIVA AL
DIAGNÓSTICO DE RETINOPATÍAS
1 2 2 2 2 2
Imma Hernan , Emma Borràs , María José Gamundi , Beatriz Pascual , Begoña Mañé , Bàrbara Delàs , Miguel
2
Carballo
1
Hospital De Terrassa, Unidad De Genética Molecular Terrassa (Barcelona) España
2
Hospital De Terrassa (Barcelona) España
1 Objetivos
Diseñar un panel de secuenciación de genes y validarlo como herramienta diagnóstica con el objetivo
de poder caracterizar, desde el punto de vista molecular, pacientes con diagnóstico clínico de
retinopatía no sindrómica.
Se utilizó el sistema de enriquecimiento SureSelect (Agilent) para la captura de 112 genes asociados a
retinopatía que fueron después secuenciados con la plataforma MiSeq de Illumina. Para validar el
panel se utilizaron DNAs de pacientes con retinosis pigmentaria y pacientes con enfermedad de
Stargardt a los que previamente, mediante secuenciación directa, ya se había detectado la mutación
causante de la enfermedad. Una vez validado el panel, se han analizado tanto muestras donde
anteriormente no se había encontrado mutación en los genes comúnmente estudiados como muestras
nuevas sin análisis genético previo.
3 Resultados
La cobertura de las secuencias diana fue en todos los análisis superior al 98,5%. Se detectaron el
100% de las mutaciones utilizadas para validar el panel diseñado. De las muestras analizadas sin
mutación previa conocida se pudieron resolver cerca del 75% de los casos.
4 Conclusiones
El panel diseñado permite analizar de manera rápida y costo-efectiva el DNA de cualquier paciente
diagnosticado de una retinopatía no sindrómica.
C0318 EVALUACIÓN SISTEMÁTICA DE LA VALIDACIÓN SANGER DE 477 VARIANTES
IDENTIFICADAS MEDIANTE SECUENCIACIÓN EXÓMICA.
1 2 2 2 2 2 2
R Sanchez-Alcudia , M Martinez-Garcia , N Sanchez , C Rodriguez , D Rodriguez , I Díez , M Peña-Vilabelda , G
2 2 2 2 2
Benito , M Carcajona , P Maietta , J Botet , S Alvarez
1
Nimgenetics Madrid (Madrid) España
2
Unidad de Secuenciación, NIMGenetics S.L. (Madrid) España
1 Objetivos
Evaluar la utilidad de la validación rutinaria mediante secuenciación Sanger de los datos de
secuenciación masiva. Esta tecnología que ha revolucionado en los últimos años el diagnóstico
genético es esperable que sea implementada de un modo general en la práctica clínica.
En este estudio se han analizado, mediante secuenciación Sanger, un total de 477 variantes (302
únicas), identificadas en el análisis exómico (Ion AmpliSeqTM Exome RDY, Ion ProtonTM/Ion S5TM)
de pacientes con sospecha clínica de enfermedades de origen genético. Todas las variantes
clasificadas como patogénicas o probablemente patogénicas fueron estudiadas por secuenciación
Sanger bidireccionalemnte. Además, se analizaron variantes localizadas en regiones homopoliméricas,
regiones repetitivas y/o variantes localizadas en regiones de baja profundidad.
3 Resultados
De un total de 477 variantes (48 indels y 429 missense), el 97% fueron validadas mediante
secuenciación Sanger. El 100% de las SNVs, no localizados en regiones homopoliméricas o regiones
repetitivas con una profundidad de lectura superior a 20X y con un porcentaje de heterocigosidad
superior al 40% fueron validadas. Las variantes no confirmadas presentaban: (i) baja profundidad de
lectura(<20X) (n=8), (ii) un porcentaje de heterocigosidad inferior al 20% (n=3), y/o (iii) localización en
región homopolimérica o repetitiva (n=4).
4 Conclusiones
Los resultados presentados indican que la validación Sanger debe ser considerada en todas aquellas
variantes con baja profundidad de lectura (<20X), que presenten un porcentaje de heterocigosidad
inferior al 20%, y/o localizadas en regiones homopoliméricas o repetitivas. Su realización sistemática
en la rutina clínica está en discusión en base a estos resultados y en concordancia a los recientemente
publicados con diferentes aplicaciones de secuenciación masiva [1,2]
Referencias:
1.- Beck TF, et al. Clin Chem. 2016 Apr;62(4):647-54.
2.- Mu W, et al. J Mol Diagn. 2016 Nov;18(6):923-932.
C0338 8000 ESTUDIOS DE NGS: LA SECUENCIACIÓN MASIVA EN LA PRÁCTICA
CLÍNICA DEL INGEMM (INSTITUTO DE GENÉTICA MÉDICA Y MOLECULAR DEL
HOSPITAL LA PAZ)
1 2 1 1
Elena Vallespín , Grupo de Diagnóstico en NGS INGEMM , Victoria Eugenia F. Montaño , Rubén Martín-Arenas , Juan
3 2 3 3
Carlos Silla , Pablo Lapunzina , Kristina Ibáñez , Ángela del Pozo
1
Sección de Genómica Estructural y Funcional. Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM) - Hospital La Paz -
IdiPaz - CIBERER Madrid (Madrid) España
2
Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM) - Hospital La Paz - IdiPaz – CIBERER (Madrid) España
3
Sección de Bioinformática. Instituto de Genética Médica y Molecular (INGEMM) - Hospital La Paz - IdiPaz - CIBERER
(Madrid) España
1 Objetivos
El INGEMM emplea la secuenciación masiva en su rutina clínica en el marco de la sanidad pública.
De las 8000 muestras estudiadas, las 1000 primeras sirvieron para probar, establecer y estabilizar los
protocolos de wet-lab y dry-lab que mejor se adaptaban a las necesidades del INGEMM. En paralelo se
han diseñado 44 paneles personalizados que están establecidos en la rutina diagnóstica.
3 Resultados
Se procesan diferentes tipos de muestras: sangre periférica, saliva, parafina, líquido amniótico,
vellosidad corial y tejidos de diferente origen. Se estudian tanto por paneles personalizados como por
exoma según el fin diagnóstico. Los protocolos de wet-lab que se usan principalmente son: KAPA-
v1.13, NEXTflex-96™-DNA-Bioo-Scientific y NimbleGen-SeqCap-EZ-Library-SR-v4.2. En el área de la
bioinformática (dry-lab) se ha desarrollado una herramienta de análisis específica para cada tipo de
estudiopanel/secuenciador (MiSeq o NextSeq500) abordado en el INGEMM. De esta forma, es posible
realizar estudios de: panel personalizado de genes, tríos de exoma y/o mosaicismo somático y
germinal. A su vez, se ha establecido una operativa de control de calidad de cada estudio que permite
la identificación y traza de cada una de las muestras secuenciadas.
4 Conclusiones
La validación de las diferentes tecnologías y plataformas de análisis ha sido fundamental para
implementar la NGS en la rutina clínica. A su vez, el diseño de los paneles personalizados para
patologías concretas ha mejorado considerablemente el diagnóstico en rendimiento, coste y tiempo.
La NGS requiere de la combinación de muchos aspectos que atiendan a las características de cada
muestra o tipo de estudio.
Por tanto, para la implementación de la NGS en la rutina diagnóstica, es fundamental disponer de un
equipo especializado que trabaje de forma coordinada en todos los pasos del proceso (diagnóstico
clínico, asesoramiento genético, wet-lab, dry-lab e interpretación de los resultados) para que quede
garantizada la seguridad y utilidad en el diagnóstico del paciente.
C0393 ANÁLISIS DE EXOMA EN DOS HERMANOS CON MIOPATÍA MINICORE Y
MULTIMINICORE
1 1 1 2
José Miguel Lezana Rosales , Carlos Sánchez Linares , Sandra Carmona Tamajón , Sara Franco Freire , Carmen
1 1 1 1 2
Palma Milla , Carmen Torres Fernández , Javier López Montiel , Julio Torres González , Carmen Benito López , Juan
1
López Siles
1
C.G.M. Genetaq Malaga (Malaga) España
3
1 Objetivos
Estudio molecular de miopatía minicore (MM) en varón de 10 años (paciente1), y de miopatía
multiminicore (MMM) en hermano de 2 años (paciente2), diagnosticados clínica e histológicamente.
Padres clínicamente asintomáticos.
Ambos casos con resultados previos no concluyentes en secuenciación de RYR1 y SEPN1, se realiza
exoma familiar mediante pipeline propio. Priorización del estudio en variantes en genes candidatos
(GC), seleccionados empleando Human Phenotype Ontology, DisGeNet, HGMD e interactomas.
Variantes filtradas con ExAC MAF<0.03. Posteriormente, se identifican variantes potencialmente
patogénicas en genes no candidatos (GNC).
3 Resultados
Número de GC: 170.
Variantes en GC (filtradas por frecuencia y calidad): Paciente1:37. Paciente2:54.
Variantes de interés (heterocigosis) en GC según tránscrito HGMD:
-Paciente1: TTN: c.59866_59869del:p.Ser19956Leufs*28.
-Paciente2: RYR1:c.6721C>T:p.Arg2241Ter; c.2122G>A:p.Asp708Asn.
TTN:c.59866_59869del:p.Ser19956Leufs*28; c.15983-1G>A.
-Padre: RYR1:c.6721C>T:p.Arg2241Ter; c.2122G>A:p.Asp708Asn.
TTN:c.59866_59869del:p.Ser19956Leufs*28.
-Madre: TTN:c.15983-1G>A.
Variantes RYR1: patogénicas según HGMD.
Variantes en GNC:
-De novo: compartidas: No; paciente1: CA4: c.585G>T:p.Met195Ile; Paciente2:
C17orf103:c.229G>T:p.Ala77Ser.
-Ligadas al X: No.
-Herencia recesiva: No.
4 Conclusiones
Ante las variantes detectadas en el primer estudio, se plantea la necesidad de realizar un exoma
familiar. La disposición cis de variantes de RYR1 en el paciente2, heredadas del padre y no presentes
en el hermano, descarta su causalidad.
Las variantes en TTN en el paciente2, podrían explicar el fenotipo, ya que algunas variantes están
relacionadas con casos de MMM. Sin embargo, el fenotipo en el paciente1 no queda explicado, al
portar solo una variante.
Las variantes de novo encontradas no explican el caso al no estar compartidas en los hermanos y
tratarse de genes conocidos no asociados al fenotipo.
Las posibles explicaciones genéticas del caso no se establecen con precisión tras este análisis,
pudiendo estar la clave en: combinatoria de determinadas variantes, regiones no analizadas, eventos
no detectables mediante NGS o regiones exónicas de baja cobertura. Por esto, el estudio del genoma
es el siguiente paso para filiar molecularmente a esta familia.
C0403 ESTUDIO DE LA CALIDAD EN EL ANÁLISIS DE MUESTRAS DIAGNOSTICADAS
CON NGS
1 1 1 2 3 1
Kristina Ibañez , Juan Carlos Silla-Castro , Mario Solís , Pablo Lapunzina , Elena Vallespín , Angela del Pozo Maté
1
Sección de Bioinformática. INGEMM - Hospital La Paz - IdIPaz - CIBERER (Madrid) España
2
INGEMM - Hospital La Paz - IdIPaz - CIBERER (Madrid) España
3
Sección de Genómica Estructural y Funcional. INGEMM - Hospital La Paz - IdIPaz - CIBERER (Madrid) España
1 Objetivos
El análisis bionformático de la secuenciación masiva (NGS) requiere de la combinación de muchos
procesos especializados (alineamiento, llamada de variantes, anotación etc...). En la rutina diagnóstica,
la caracterización de las alteraciones que presenta cada muestra, necesita además de controles de
calidad que monitoricen el análisis y que garanticen unos datos robustos y fiables. No existe una
metodología estándar que controle el proceso de análisis en NGS y por tanto se plantea como objetivo
el desarrollo de un método de trabajo que permita chequear la idoneidad de las muestras para el
diagnóstico.
Se ha diseñado un estudio que permite el análisis retrospectivo de la calidad en un conjunto de 8,000
muestras de NGS. Para ello se ha planeado establecer un conjunto de marcadores bioinformáticos que
puedan medir la calidad de cada estudio de NGS en cada una de las fases del análisis. Los datos se
han correlacionado a su vez, con los parámetros experimentales con el fin de tener una visión global
de la técnica.
3 Resultados
Se ha definido un conjunto de marcadores de calidad y se han calculado los rangos de normalidad
(valor medio y límites de control) para dicho conjunto. Se ha establecido una operativa de control de
análisis que permite explorar los resultados de las secuenciación y análisis bioinformático de los datos.
Finalmente, se ha emitido un documento con indicaciones de buenas prácticas que pueda servir como
documento guía en el laboratorio.
4 Conclusiones
La metodología presentada en este trabajo permite medir la calidad de la técnica de secuenciación
masiva dentro de un contexto clínico. A su vez, permite medir la eficacia de la NGS en cada muestra
en términos del rendimiento de la técnica y sus posibilidades diagnósticas, anticipando si una muestra
va a ser apta o no para su estudio.
C0407 ANÁLISIS BIOINFORMÁTICO DE ESTUDIOS FAMILIARES BASADOS EN TRÍOS DE
EXOMA
1 1 1 1 2
Angela del Pozo Maté , Kristina Ibañez , Juan Carlos Silla-Castro , Mario Solís , Pablo Lapunzina
1
Sección de Bioinformática. INGEMM - Hospital La Paz - IdIPaz - CIBERER (Madrid) España
2
INGEMM - Hospital La Paz - IdIPaz - CIBERER (Madrid) España
1 Objetivos
En la práctica clínica el uso del exoma para abordar el estudio diagnóstico de los pacientes es aún
escaso y queda circunscrito a casos específicos. La dificultad para interpretar los datos, el manejo de
ficheros voluminosos así como un aumento en costes de secuenciación son algunos de los factores
limitantes. En un plano más metodológico existen también algunas cuestiones que se deben abordar
para poder incluir este tipo de estudios en la rutina diagnóstica. Se plantea como objetivo el desarrollo
de una herramienta de análisis de tríos de exoma (probando/padre/madre) para el diagnóstico clínico.
Se ha diseñado una herramienta que incluye varios módulos: uno propio de análisis bioinformático
específico para estudio familiar que genera una tabla de variantes, un módulo de calidad que establece
la idoneidad del estudio en función de algunos marcadores como la proporción de los cambios
mendelianos obtenidos frente a los esperados, calidad de las variantes etc.. y finalmente, un módulo de
estudio de cobertura de las regiones de interés que indica regiones con déficit de calidad y que
potencialmente pueden estar asociadas a falsos negativos. La herramienta permite la inclusión de
individuos adicionales con relación familiar como hermanos o tíos. Dicha herramienta ha sido validada
in-silico mediante un trío de referencia emitido por el NIST.
3 Resultados
Se ha realizado el estudio de 47 tríos de exomas secuenciados en plataformas de Illumina y con
diseños de captura de Roche NimbleGene, Illumina TrueSeq y Agilent SureSelect dentro de varios
proyectos de investigación y/o de diagnóstico.
4 Conclusiones
La herramienta presentada en este trabajo permite el estudio de tríos de exoma de un forma completa
y estándar. Los avances metodológicos ayudan a la integración de estudios complejos de
secuenciación masiva en entornos clínicos contribuyendo al desarrollo de la medicina personalizada.
C0432 CARACTERIZACIÓN FUNCIONAL DE VARIANTES CANDIDATAS DE SPLICING EN
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD MEDIANTE MINIGENES HÍBRIDOS: PALB2
1 1 1 2
Alberto Valenzuela Palomo , Eugenia Fraile Bethencourt , Beatriz Díez Gómez , Carmen Entrala , Beatriz Martínez
3 4 4 5 1
Delgado , Olatz Villate , María Isabel Tejada Mínguez , Alberto Acedo , Eladio A. Velasco
1
IBGM Valladolid (Valladolid) España
2
Lorgen GP (Granada) España
3
Instituto de Salud Carlos III, (Madrid) España
4
Instituto de Investigación Sanitaria BioCruces (Vizcaya) España
5
AC GEN, Reading Life, SL (Valladolid) España
1 Objetivos
Los minigenes son herramientas biotecnológicas avanzadas que permiten el análisis de variantes de
splicing sin necesidad de una muestra de ARN del paciente. El rastreo de genes de susceptibilidad
genera una gran cantidad de variantes de significado clínico incierto que requieren una interpretación
clínica. PALB2 es un gen supresor de tumores que participa en el mantenimiento de la integridad del
genoma, estando implicado en la susceptibilidad hereditaria a cáncer de mama. Con el objetivo de
analizar funcionalmente PALB2 desde la perspectiva del splicing, se construyó un minigen (MGPB2_5-
7) dentro del proyecto europeo BRIDGES.
El MGPB2_5-7 fue construido en el vector de splicing pMAD® mediante enzimas de restricción en dos
pasos: exones 5-6 + exón 7. Éste se transfectó en células MCF7, se extrajo el RNA y se realizó RT-
PCR específica del minigen. Los resultados fueron analizados mediante gel de agarosa, electroforesis
capilar y secuenciación SANGER.
3 Resultados
El minigen PB2_5-7, de 6705pb esta constituido por el vector pMAD9 (4500pb) +[ivs4(274pb)-
ex5(830pb)-ivs5(364pb)-ex6(72pb)-ivs6(232pb)//ivs6(191pb)-ex7(162pb)-ivs7(114pb)]. MGPB2_5-6 dio
lugar al transcrito canónico (1083nt) y 2 alternativos no caracterizados, mientras que MGPB2_5-7
indujo un transcrito estable (1245nt), estando por tanto preparado para el estudio de mutaciones de
splicing. Por otro lado, a través del servicio externo del CSIC
(http://www.ibgm.med.uva.es/servicios/servicio-de-splicing-minigenes/) construimos minigenes para el
estudio funcional de mutaciones de splicing de los genes MLH1(Síndrome de Lynch,
LorgenGP),SERPINA1(Déficit en α1-antitripsina, ISCIII), COL1A1 (Osteogénesis Imperfecta) y CHD7
(Discapacidad Intelectual Hospital Universitario Cruces). Todos ellos generaron el transcrito canónico,
y se caracterizó el impacto de mutaciones de los sitios naturales de splicing.
4 Conclusiones
EL minigen PB2ex5-7 y las futuras ampliaciones de Este, nos permitiran realizar el análisis funcional de
mutaciones de splicing, recogidas en la base de datos UMD como VUS. Los minigenes son una
herramienta robusta que nos permite analizar funcionalmente el efecto en el procesamiento del ARNm
que pueden causar ciertas mutaciones.
C0436 ESTUDIO GENÉTICO COMPLETO DEL SÍNDROME DE BARDET-BIEDL: DESDE EL
MICROARRAY-CGH 60K HASTA LA SECUENCIACIÓN DE EXOMA COMPLETO
1 1 2 2 2
Sara Franco Freire , Carmen Benito lópez , Vanessa Penacho Martín , Diego Amorós Cerdán , Irene Manchón Trives ,
2
Luis A. Alcaráz Mas
1
Hospital Materno Infantil de Málaga (Málaga) España
2
Bioarray S.L. Elche (Alicante) España
1 Objetivos
Se presenta el caso clínico de un varón de cuatro años con retraso mental, hipogenitalismo, obesidad,
escasa agudeza visual, enfermedad poliquística renal, retinitis pigmentaria e hipospadias. No se ha
reportado historia familiar previa. Estas manifestaciones clínicas sugirieron un caso del síndrome de
Bardet-Biedl (SBB), con patrón de herencia autosómico recesivo, en el Hospital Materno Infantil de
Málaga. El estudio genético se llevó a cabo mediante microarrays CGH+SNP y la secuenciación del
exoma completo del paciente con el objetivo de identificar variantes patogénicas relacionadas con la
indicación.
Tanto las muestras del paciente como de sus progenitores fueron estudiadas en Bioarray. En primer
lugar, se estudiaron las 129 mutaciones más prevalentes en SBB mediante la tecnología de
microarrays Agilent CGH-SNP. Los array-CGH Agilent 60K y 400K se emplearon para detectar
deleciones y duplicaciones. Por último, se llevó a cabo una secuenciación de exoma completo
mediante la plataforma Illumina HiSeq 2000.
3 Resultados
Un total de 115, de las 129 mutaciones relacionadas con el SBB que se analizaron, fueron excluidas;
14 de ellas, en el gen BBS1, no obtuvieron señal. El estudio de array-CGH 60K detectó una
microdeleción que contemplaba sólo una sonda en el gen BBS1, lo que imposibilitó la determinación de
su tamaño debido a la baja densidad. No se observó pérdida de heterocigosidad en el array
CGH+SNP. Los resultados del array-CGH 400K determinaron una microdeleción homocigota en la
región cromosómica 11q13.2 del paciente que afectaba al gen BBS1, con un tamaño de 0,011 Mb; así
como deleciones heterocigotas en ambos progenitores, portadores asintomáticos. La secuenciación del
exoma completo del paciente confirmó la deleción en BBS1 y su tamaño.
4 Conclusiones
Nuestros datos confirman que la combinación de la plataforma de array-CGH Agilent 400K y la
secuenciación del exoma completo mediante Illumina HiSeq 2000 pueden detectar, de manera más
precisa, variantes patogénicas responsables del SBB.
C0455 EL EPITELIO NASAL ES UN BUEN TEJIDO PARA EL DESARROLLO DE TERAPIAS
FRENTE A LA HIPOACUSIA HEREDITARIA DFNA50
1 2 3 4 3 2
Matias Morin Rodriguez , Morag Lewis , F Garcia , Veronica Barca Tierno , Javier Dopazo , Karen P Steel , Miguel
4
Angel Moreno Pelayo
1
Servicio de Genetica. Hospital Ramon y Cajal Madrid (Madrid) España
2
Wolfson Centre for Age-Related Diseases, London (-) United Kingdom
3
Departamento de Genómica Computacional, Centro de Investigación Príncipe Felipe, CIBERER, Valencia (Valencia)
España
4
Servicio de Genética, Hospital Ramón y Cajal-IRYCIS-CIBERER, (Madrid) España
1 Objetivos
Mutaciones en la “seed región” del microRNA miR-96 causan pérdida auditiva DFNA50 en humanos y
ratones. En el ratón diminuendo (Dmdo) las células ciliadas, cruciales para la audición, no se
desarrollan completamente. Esto sugiere que miR-96 es importante para la coordinación de la
maduración de las células ciliadas. Recientemente, las redes de genes potenciales controladas por
miR-96 han sido descubiertas y se han sido identificados varios genes candidatos que median algunos
de los cambios de expresión causados por la mutación diminuendo. Estos genes son excelentes
candidatos como potenciales dianas terapéuticas para el tratamiento de la pérdida auditiva en ratón y
probablemente en pacientes portadores de mutaciones en MIR96.
En este estudio hemos llevado a cabo RNA-seq empleando la plataforma HiSeq Illumina y RNA de
muestras de epitelio nasal de ratones diminuendo (3 homocigotos y 3 heterocigotos) y en 3 de tipo
silvestre con el fin de: 1) evaluar si se expresan los mismos genes que en las muestras de cóclea y 2)
determinar si la mutación afecta el perfil de expresión génica en ratones heterocigotos y homocigotos
para la mutación.
3 Resultados
El análisis primario confirmó que más de 28.000 genes se expresan en el epitelio nasal de los tres
genotipos y se detectaron diferencias en los niveles de expresión de numerosos genes, entre los
ratones tipo silvestres y heterocigotos y homocigotos (p <0,05). Hemos confirmado la expresión de
genes desregulados en cóclea como Myo3A, Meig1 y Odf3b y de los reguladores intermedios, como
Zic2, Mitf y Nr3c1 (Lewis et al 2016).
4 Conclusiones
Hemos sido capaces de reproducir redes génicas simples en el epitelio nasal similares a las obtenidas
de la cóclea. En conjunto, estos datos hacen posible el uso del epitelio nasal como un tejido de fácil
acceso para explorar enfoques terapéuticos en pacientes con DFNA50.
C0486 ANÁLISIS SIMULTÁNEO DE VARIANTES PUNTUALES Y ESTRUCTURALES
MEDIANTE SECUENCIACIÓN MASIVA UTILIZANDO UN PANEL DE GENES IMPLICADOS
EN MALFORMACIONES OCULARES CONGÉNITAS
1 1 1 1 1
Domingo Aguilera-García , Luciana Rodrigues Jacy da Silva , Ana Gómez , María Tarilonte , Patricia Ramos , Cristina
1 2 3 3 3 1
Villaverde , Jordi Rosell , Vanessa López , María J. Ballesta , Encarna Guillén , María J. Trujillo-Tiebas , Fiona Blanco-
1 1 1
Kelly , Carmen Ayuso , Marta Cortón
1
Departamento de Genética. IIS-Hospital Universitario Fundación Jiménez Díaz Madrid (Madrid) España
2
Departamento de Genética. Hospital Universitario Son Espases. (Islas Baleares) España
3
Departamento de Genética Médica. Hospital Universitario Virgen de la Arrixaca (Murcia) España
1 Objetivos
Implementar la detección de CNVs utilizando datos de NGS procedentes de un panel de genes
asociados a distintas malformaciones oculares congénitas (MOC).
Se analizaron 88 pacientes con MOC, incluyendo 6 controles con mutaciones o CNVs previamente
conocidas y 82 individuos sin caracterización genética: 31 con anoftalmia-microftalmia (A/M), 22
colobomas, 17 con anomalías del nervio óptico y 12 condisgenesias del segmento anterior. Se utilizó
un panel para la captura (Haloplex) y posterior secuenciación NGS (Illumina) de 150 genes
previamente asociados a estas patologías. Se implementó un pipeline bioinformático para analizar
variantes puntuales y estructurales. La identificación de CNVs se llevó a cabo mediante algoritmos
específicos priorizando regiones que presentaran diferencias estadísticamente significativas en la
profundidad de lectura. Se está utilizando un diseño personalizado de aCGH (180K, Agilent) para la
validación y determinación del tamaño y puntos de corte de las CNVs detectadas.
3 Resultados
Se identificaron 19 variantes patogénicas en 14 genes diferentes y 13 variantes adicionales con
significado incierto, todas ellas verificadas y segregadas por secuenciación Sanger. La secuenciación
NGS a alta cobertura (>400x) del panel en combinación con un análisis específicamente dirigido a la
identificación de CNVs permitió identificar de forma fiable 7 variantes estructurales distintas. Entre
ellas, se detectaron 4 nuevas deleciones completas de los genes FOXC1, GJA8, HPS5 y OTX2- SIX6,
y una posible duplicación del gen GDF3. Asimismo, se pudieron detectar correctamente dos deleciones
parciales de PAX6, previamente conocidas y caracterizadas por aCGH.
4 Conclusiones
Este trabajo permitió caracterizar el 24% del total de los pacientes analizados, lo que representa el
40% de los pacientes con A/M. El uso de un panel de NGS, en combinación con aCGH, constituye una
buena estrategia para el análisis genético de pacientes con MOC, permitiendo identificar no solo
mutaciones puntuales sino también de variantes estructurales en diseños que aseguren una cobertura
homogénea entre muestras.
C0491 DOCK6: NUEVO GEN IMPLICADO EN CILIOPATÍAS
1 2 2
Sheila Castro Sánchez , María Álvarez Satta , Diana Valverde
1
Universidad de Vigo Vigo (Pontevedra) España
2
Dpto. Bioquímica, Genética e Inmunología (Facultad de Biología), Campus As Lagoas-Marcosende s/n, 36310 - Vigo
(Pontevedra) España
1 Objetivos
El diagnóstico molecular en ciliopatías resulta muy complejo debido a la gran heterogeneidad clínica y
genética que presentan estos síndromes, por lo tanto es necesario recurrir a la diversidad de técnicas
genéticas disponibles actualmente. El objetivo de este estudio fue identificar el defecto genético
responsable de la patología presentada por una familia consanguínea con fenotipo BBS-like, tras
descartar mutaciones en los genes BBS predominantes.
Se realizó secuenciación de exoma completo y posterior filtrado de datos, confirmando los resultados
positivos mediante Sanger. Dada la consanguinidad de la familia, también se llevó a cabo un mapeo de
homocigosidad. Tras analizar los resultados de ambas técnicas, se seleccionó un gen candidato cuya
expresión fue silenciada mediante transfección de células hTERT-RPE con siRNA, con el fin de realizar
ensayos de inmunofluorescencia para comprobar una posible afectación ciliar.
3 Resultados
El chip de homocigosidad reveló diversas regiones LOH, una de ellas conteniendo el gen DOCK6. La
estrategia de filtrado de los datos de secuenciación de exoma nos condujo a la variante c.1289G>A
(p.(Arg430His)) detectada en homocigosis en el mismo gen, clasificada como potencialmente
patogénica por diversos programas de predicción. Dicha mutación, confirmada por Sanger, segrega en
la familia, confirmando la herencia autosómica recesiva. Dada su posible relación con el cilio primario a
través del citoesqueleto de actina, se bloqueó la expresión del gen y se validó mediante RT-qPCR. Los
ensayos de inmunofluorescencia permitieron confirmar la desestabilización de las fibras de F-actina y,
sorprendentemente, detectar en torno a un 40-50% de cilios primarios con estructuras anómalas.
4 Conclusiones
La combinación de WES y mapeo de homocigosidad resultó útil para el diagnóstico molecular de la
familia y la identificación de un nuevo gen candidato que parece estar asociado a defectos en la
estructura del cilio primario. La ampliación de estudios funcionales permitirá evaluar su papel en el
correcto funcionamiento del cilio.
C0492 SÍNTESIS ENZIMÁTICA DE MOLÉCULAS DE ADN MODIFICADAS CAPACES DE
FORMAR NANOCABLES AG(I)-ADN
1 2 3 3
Ana M. Pérez Gutiérrez , Maica Palencia Carrilero , Antonio Gómez Martín , Belén Martínez García , Luis Javier
4 5
Martínez González , Miguel A. Galindo
1
Centro Pfizer Universidad de Granada Junta de Andalucía de Genómica e Investigación Oncológica (Genyo) Granada
(Granada) España
2
Estudiante TFG, Grado en Química (UGR) (Granada) España
3
Unidad de Genómica, Genyo (Granada) España
4
Responsable técnico de la Unidad de Genómica de Genyo (Granada) España
5
Departamento de Química Inorgánica UGR (Granada) España
1 Objetivos
El ADN carece de propiedades físico-químicas como conductividad o fluorescencia, necesarias para su
empleo en aplicaciones nanotecnológicas. Sin embargo, la substitución de las nucleobases púricas por
análogos 7-deazapúricos, permite la incorporación de iones metálicos en el ADN, dando lugar a
nanocables metal-ADN.
Aunque ya se ha descrito la síntesis química de pequeños oligonucleótidos con 7-deazapurinas y su
1
transformación a híbridos metal-ADN, no se ha conseguido la síntesis enzimática (PCR) de ADN
2
donde todas las purinas sean substituidas por 7-deazapurinas.
El objetivo de este trabajo es la obtención y caracterización de fragmentos de ADN de mayor longitud
donde las bases púricas sean sustituidas por 7-deazapurinas mediante PCR.
Se seleccionó una región perteneciente al gen HPRT, de copia única.
Para la realización de la PCR se usaron: cebadores purificados por HPLC; dNTPs, 7-deazapurinas; T4
DNA Polimerasa, AmpliTaq Gold 360, Herculase II DNA Polimerasa; aditivos (BSA, DMSO); agua libre
de nucleasas y ADNg.
La polimerización se optimizó a través de un gradiente de concentraciones de aditivos y cambio de
tiempos, temperaturas y número de ciclos en los pasos de termociclado.
El producto se caracterizó mediante cuantificación y cualificación por absorbancia y espectrofotometría,
electroforesis en gel y capilar, curvas de desnaturalización y secuenciación.
3 Resultados
Determinación de las condiciones óptimas de amplificación de fragmentos de 75 y 150 pb y
comparativa de los parámetros medidos entre los diferentes amplicones. Se observa que la reacción
de polimerización pierde rendimiento al incorporar 7-deazapurinas, lo que supone una ligera
disminución del peso molecular y de la temperatura de desnaturalización.
4 Conclusiones
La incorporación de 7-deazapurinas se ha llevado con éxito, mostrando una mayor dificultad en las
reacciones de polimerización y un ligero aumento de la inestabilidad del ADN. Las cadenas resultantes
poseen un alto valor nano- y bio-tecnológico del que se podrían constituir sistemas longevos mediante
ligación de las mismas para aplicaciones en biomedicina.
C0537 DISEÑO Y VALIDACIÓN DE UN ARRAY CGH APLICADO AL DIAGNÓSTICO DE
PACIENTES CON PATOLOGÍA DEL SEGMENTO ANTERIOR OCULAR
1 1 2 1
Manuela Villamar Lopez , Matías Morín Rodriguez , Fco Jose Muñoz Negrete , Miguel Ángel Moreno Pelayo , Gema
3
Rebolleda Fernández
1
Servicio de Genética-Hospital Ramón y Cajal MADRID (MADRID) España
2
Servicio de Oftalmología-Hospital Ramón y Cjal (Madrid) España
1 Objetivos
Validación de un array CGH en el que se han enriquecido 160 regiones con una alta concentración de
sondas, donde se incluyen genes y determinadas regiones reguladoras implicadas en patologías del
segmento anterior ocular como: galucomas primarios, distrofias corneales, cataratas congénitas,
anoftalmia-microftalmia, aniridia y Sindrome Axenfeld-Rieger.
El array CGH se ha diseñado para ña plataforma Agilent Technologies, en un formato 4 X 180K. Las
regiones enriquecidas comprenden tanto exones como intrones que se extienden 25pb en las regiones
3' y 5' terminal. El número de sondas específicas para estas regiones son 39169, espaciadas una
media de 98pb. El tipo de marcaje ha sido el de dos colores o fluorocromos, uno para la muestra
experimental y el otro para la de referencia, hibridándose ambas muestras juntas en el mismo array.
Para su validación se han incluido 4 individuos control con mutaciones previamente identificadas y 12
pacientes de los que no se tenía ninguna información previa.
3 Resultados
El array diseñado nos ha permitido no solo detectar la alteración previamente descrita en los 4
individuos control, sino, que las hemos podido tallar con mayor precisión. Además, en uno de ellos
vimos otros reordenamientos inesperados.
En las 12 muestras analizadas no se detectó ninguna pérdida o ganancia de material genético que
pudiéramos asignar como patogénicas.
4 Conclusiones
El array CGH diseñado para patologías del polo anterior ocular ha quedado suficientemente validado.
Hemos sido capaces de detectar los 4 casos control además, hemos podido tallar dichos
reordenamientos que han resultado ser mucho mayores y complejos de lo que nos mostraban las
técnicas utizadas hasta ahora (MLPA, haplotipado, etc).
Esta herramienta nos permitirá avanzar en el conocimiento de estas entidades clínicas al ponerse de
manifiestos reordenamientos que podrían estar implicados en su alta variabilidad fenotípica.
C0546 AISLAMIENTO DE CÉLULAS TUMORALES PURAS A PARTIR DE TUMORES
SÓLIDOS EMBEBIDOS EN PARAFINA MEDIANTE LA TECNOLOGÍA DEPARRAY PARA
SU CARACTERIZACIÓN GENÓMICA.
1 2 3 1 1
Beatriz Sobrino Rey , Susana Mata Noya , Narenkha Franjo Perez , Jorge Amigo Lechuga , Xabier Bello Paderne ,
1
Angel Carracedo Alvarez
1
Fundacion Publica Galega de Medicina Xenomica Santiago de Compostela (A Coruña) España
2
Instituto de Investigacion Sanitaria de Santiago de Compostela (A Coruña) España
3
Universidade de Santiago de Compostela (A Coruña) España
1 Objetivos
La caracterización de los tumores a nivel genómico tiene una gran relevancia clínica. En el estudio de
los tumores sólidos la contaminación del tumor con células normales y la propia heterogeneidad
tumoral impiden en muchos casos la detección de las mutaciones somáticas que caracterizan a las
células tumorales al quedar enmascaradas cuando el tumor es analizado en bloque. La utilización de la
TM
tecnología DEPArray (Menarini Silicon Biosystems) para la obtención de poblaciones celulares 100%
puras permite analizar el perfil genético del tumor sin contaminación de otros tipos celulares. El
principal objetivo del presente trabajo fue validar la tecnología de detección y aislamiento de las células
tumorales partiendo de muestras de tejido tumoral parafinado para su posterior caracterización a nivel
genómico.
Partiendo de cortes 40 µm de grosor de tejido tumoral embebido en parafina se procedió a la
resuspensión de las células, marcaje con anticuerpos de citoqueratina y vimentina para identificar y
aislar de forma independiente las células tumorales y del estroma en el DEPArray System. Una vez
recuperadas de forma independiente los distintos tipos celulares se caracterizaron con las plataformas
de secuenciación masiva Ion Torrent.
3 Resultados
Recuperación de poblaciones de células tumorales 100% puras. Identificación del perfil genómico de
las células tumorales y normales aisladas a partir de los cortes de tejido parafinado.
4 Conclusiones
La posibilidad de identificar y aislar los distintos tipos celulares presentes en los tumores permite
mediante la tecnología DEPArray facilita la detección de mutaciones somáticas que de otro modo
quedarían enmascaradas por la presencia de células normales. La importancia clínica de la correcta
identificación de las mutaciones somáticas hace necesario la validación de este tipo de tecnologías
para su incorporación al ámbito.
C0553 JVIZ WEBCOMPONENTS: BIBLIOTECA JAVASCRIPT PARA BIOINFORMÁTICA
CLÍNICA AS-A-SERVICE
1 1 1 1 1 1
Jose M Juanes , Azhara Fuentes , Daniel Pérez , Victoria Adam , Cristina Pérez , Ana Barbara García García , Vicente
2 1 3
Arnau , Javier Chaves , Pablo Marin Garcia
1
Incliva (Valencia) España
2
ETSE (Valencia) España
3
Agustin Escardino 9 Paterna (Valencia) Spain
1 Objetivos
Los laboratorios de genética clínica de NGS precisan de robustos estándares y controles de calidad.
Como parte del Medical Genomics Visualization toolset (MGviz), hemos desarrollado un software
interactivo para la creación de informes automáticos y control de calidad que cubre los procesos de
análisis de NGS y que ayude al análisis, filtrado y priorización de variantes para el diagnóstico
genético.
El objetivo principal es crear un sistema de módulos de rápida integración como webservices de

genómica clínica que permita la creación de plataformas flexibles, dinámicas e intuitivas.
Bibliotecas JavaScript con el mínimo número de dependencias de paquetes externos. Estos módulos
se pueden integrar en plataformas web mediante la conexión de eventos descritos en su API, accesible
desde la organización en GitHub (enlace: https://github.com/jviz ) o desde la web de Jviz.
Estos componentes adquieren sus datos desde un RESTful service asociado, y los visualizan mediante
canvas, dotándolos de una gran interactividad.
3 Resultados
Se han desarrollado una suite de webcomponents independientes, intercomunicados mediante eventos
que les dota de gran modularidad y robustez, permitiendo su integración en plataformas web como si
fueran un solo módulo.
Este software permite a los laboratorios de genómica clínica disponer de una herramienta potente y
fiable para su gestión del día a día del control de calidad de los análisis de NGS y su análisis.
Como ejemplo mostramos la creación de una plataforma para control de calidad de secuenciación
NGS y la priorización de variantes para el diagnóstico genético.
4 Conclusiones
Este webservice permite comparación de experimentos actuales contra datos históricos para
determinar el buen funcionamiento del secuenciador o la muestra. La exploración interactiva de las
coberturas y los genotipos permite validar variaciones y coberturas de las muestras de forma rápida y
eficaz y mejorar los procesos de filtrado y priorización para buscar variantes de interés clínico con la
patología.

Libro de Abstarcts GENETICS

Cargado por

Información del documento

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Libro de Abstarcts GENETICS

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

PRESENTACIONES ORALES

Sesión: Diagnóstico Prenatal

C0083 VALORACIÓN DEL CRIBADO PRENATAL NO INVASIVO EN UNA MUESTRA DE

Departamento Biología Celular. Facultad de Medicina. Universidad Complutense (Madrid) España

Se identificó el defecto molecular en 19/29 (65,5%) de los casos.

Geniality Diagnostico Genetico Madrid (Madrid) España

C0123 SECUENCIACIÓN MASIVA COMBINADA CON ESTUDIOS BIOQUÍMICOS Y

C0146 ABORDAJE MULTIDISCIPLINAR DE LA MUERTE SÚBITA CARDIACA:

Centro de Genética Cardiovascular (Girona) España

C0021 DESCUBRIMIENTO DE UN NUEVO GEN INVOLUCRADO EN SUSCEPTIBILIDAD A

C0449 ANEMIA DE FANCONI: EVALUACIÓN DEL SEGUIMIENTO MÉDICO Y EL ROL DEL

Universitat Pompeu Fabra (BARCELONA) España

C0395 IDENTIFICACIÓN DEL DEFECTO MOLECULAR EN PACIENTES CON SÍNDROME

C0487 DETECCIÓN TEMPRANA DE CÁNCER COLORECTAL CON UN TEST DE SANGRE

Servicio de Genética, Synlab Diagnósticos Globales (Madrid) España

C0484 LA SECUENCIACIÓN DEL EXOMA EN TRÍOS ES UNA HERRAMIENTA DE

Asesoramiento Genético y aspectos éticos y emocionales

C0211 ASESORAMIENTO GENÉTICO FAMILIAR EN LA DETECCIÓN DE MUTACIONES

Parc Taulí, Hospìtal Universitari Sabadell (Barcelona) España

Hospital de Poniente (Almería) España

Grupo de anomalías genéticamente heterogéneo. Resultan de las mutaciones en la producción de

• Recopilar y evaluar los protocolos internos y externos.

En la segunda etapa se elabora el consenso incluyendo directrices de interpretación y clasificación de los

• La evaluación los diferentes estudios, consensos y protocolos de interpretación publicados hasta

Unidad de Genética, Universitat Pompeu Fabra, CIBERER (U735) (Barcelona) España

Hospital de Poniente (Almería) España

Hospital Universitari Germans Trias i Pujol Badalona (Barcelona) España

Hospital de Poniente (Almería) España

C0046 DISEÑO, VALIDACIÓN Y APLICACIÓN DE UNA NUEVA PLATAFORMA DE

Hospital Universitari Germans Trias i Pujol Badalona (Barcelona) España

Hospital Ramon y Cajal Madrid (MADRID) España

C0039 UN NUEVO FENOTIPO CLÍNICO PRODUCIDO POR MUTACIÓN EN EL GEN BCOR.

Hospital Universitario y Politécnico La Fe Valencia (Valencia) España

Hospital Universitario y Politécnico de La Fe Valencia (Valencia) España

Hospital Universitario y Politecnico La Fe Valencia (Valencia) España

Hospital Universitario Donostia San Sebastián (Guipúzcoa) España

Parc Taulí. Hospital Universitari Sabadell (Barcelona) España

Instituto de Medicina Genómica Paterna (Valencia) España

Hospital Universitari Germans Trias i Pujol Badalona (Barcelona) España

Fundación de Medicina Genómica Santiago de Compostela (A Coruña) España

• La tasa de detección de variantes causales en nuestra serie utilizando el array qChip CM

Hospital Universitari Germans Trias i Pujol Badalona (Barcelona) España

C0011 EFECTO DEL GTF2IRD2 EN EL COMPORTAMIENTO INUSUAL Y AGRESIVO EN

Evaluar y caracterizar molecularmente las CNVs detectadas en 6 regiones genómicas previamente

El diagnóstico se basa en el cariotipo, identificándose incongruencia entre el sexo

Hospital Universitario Miguel Servet Zaragoza (Zaragoza) España

Unidad Genetica Vistahermosa Alicante (Alicante) España

INGEMM, Hospital Universitario La Paz Madrid (Madrid) España

Hospital Alvaro Cunqueiro, Vigo (Pontevedra) España

1. Revisión de la historia prenatal, perinatal, postnatal y motivo de consulta de 41 pacientes

Universidad San Jorge. Campus Universitario Villanueva de Gállego (Zaragoza) España

Servicio de Inmunología Clínica, Hospital Clínico San Carlos (madrid) España

Servicio de Inmunología Clínica, Hospital Clínico San Carlos (madrid) España

Hospital Universitario y Politécnico La Fe, (VALENCIA) Valencia

Hospital de Poniente (Almería) España

Hospital Mútua de Terrassa - Pediatría

Unidad de Neonatología, Servicio de Pediatría, Hospital del Mar (Barcelona) España

C0024 PSEUDOACONDROPLASIA. DESCRIPCIÓN DE TRES CASOS Y UNA NUEVA

Hospital Sant Joan de Déu Esplugues de Llobregat (Barcelona) España

Hospital Universitario Dr Peset (Valencia) España

Centro de Diagnóstico de Enfermedades Moleculares, Centro de Biología Molecular-SO UAM-CSIC, Universidad

Complejo Hospitalario Universitario de Huelva Huelva (Huelva) España

C0009 EPIDEMIOLOGÍA CLÍNICA Y GENÉTICA DE LA ENFERMEDAD DE WILSON

C0041 DETERMINACIÓN MOLECULAR DE LA ZIGOSIDAD DEL GEN RHD: PREDICCIÓN