REPORTE DE PRÁCTICAS

CENTRO DE ESTUDIOS TECNOLÓGICOS

Industriales y de Servicios #105
“IGNACIO PÉREZ”

“ANALIZA SANGRE CON BASE EN TÉCNICAS DE QUÍMICA

CLÍNICA”

Q.F.B SANDRA ANGÉLICA PEZA CRUZ

PRACTICA #6: “PERFIL DE LÍPIDOS”

EQUIPO #12

INTEGRANTES: JUÁREZ FLORES REYNA GABRIELA

MORA AMADOR LUIS EDUARDO

ROSAS DE SANTIAGO ALAN

6° SEMESTRE, GRUPO “AL”, TURNO VESPERTINO

24 DE ABRIL DEL 2018

EQUIPO N°12
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INTRODUCCIÓN
El perfil de lípidos consiste en la determinación y cuantificación de los diferentes
componentes grasos que existen en la sangre. En general, las pruebas son capaces de
determinar la cantidad de grasas totales, así como la cantidad de colesterol y triglicéridos.
Además, se reporta la cantidad de colesterol de baja densidad (LDL), la cantidad de
colesterol de alta densidad (HDL), la cantidad de colesterol de densidad intermedia (IDL),
la de muy baja densidad (VLDL). Finalmente, tomando en cuenta las proporciones de los
diversos lípidos de la sangre, se sugiere un índice aterogénico (índice o propensión que
tiene la persona de desarrollar arterioesclerosis en base a sus niveles de lípidos). El
perfil de lípidos tradicional no mide directamente las LDL; éstas son calculadas y cuando
los triglicéridos sobrepasan la cifra de 300 mg/dL, su resultado no es confiable, y el
cálculo de las LDL es progresivamente inexacto conforme aumentan los triglicéridos.
Además las lipoproteínas de densidad intermedia (IDL) y las de muy baja densidad
(VLDL), se incluían en la medida de los triglicéridos.

COLESTEROL TOTAL. El colesterol total representa la suma de todas las partículas que
transportan colesterol en la sangre, incluyendo las HDL, las LDL y las VLDL. Aunque en la
mayoría de los casos el nivel de colesterol total refleja los niveles de LDL, hay suficientes
explicaciones a esta regla como para que sea útil determinar por separado los niveles de
LDL, de HDL y de triglicéridos. Las directrices del NCEP indican que el nivel de colesterol
deseable es inferior a 200mg/dl, que entre 200-239mg/dl los niveles son medio altos y que
por encima de 240mg/dl son niveles elevados.
Altos niveles de colesterol se asocian a riesgo de padecer enfermedades
cardiovasculares, en especial aquel unido a las LDL (colesterol malo). El colesterol de las
HDL (colesterol bueno), puesto que representa aquella fracción de colesterol que se
transporta al hígado para su metabolización y excreción por vía biliar, no se asocia con
riesgo de enfermedad.

COLESTEROL HDL. El HDL que se produce en el hígado como en la pared del intestino
está formado básicamente por proteínas, fosfolípidos y colesterol esterificado. Las
principales apoproteinas HDL son Apo AI, Apo AII y Apo C. El colesterol HDL impide
la formación de ateroma en las arterias, por lo que cuanto más HDL se tenga, mejor. Las
directrices del NCEP consideran que los niveles a partir de 60mg/dl son lo suficientemente
elevados para proporcionar protección. Si están por debajo de 40 mg/dl se consideran
excesivamente bajos. Algunos médicos utilizan la proporción de colesterol. Cuanto más
colesterol HDL respecto al colesterol total para identificar a personas que necesitan seguir
un tratamiento para reducir el colesterol. Cuanto más colesterol HDL se tenga en relación
con el colesterol total, más saludable resulta la proporción.

Los resultados de “framingham heart stud” sugieren que, en lo que respecta a los
hombres, una proporción de colesterol total/colesterol HDL igual a 5 significa un riesgo
cardiovascular medio: si es igual a 3,4 se tiene la mitad del riesgo medio y si es de 9.6 se
tiene el doble del riesgo medio. En cuanto a las mujeres, 4,4 representa un riesgo medio,
3,3 es la mitad del riesgo medio y 7 es el doble de la media. Para mucha gente, no hay

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mucha diferencia entre utilizar los niveles de colesterol HDL o la proporción de colesterol
total y colesterol HDL. La mayoría de las personas con un nivel de colesterol elevado
también tienen una proporción desfavorable, por lo que se les prescribiría un tratamiento
independiente del método utilizado. Sin embargo, en algunas ocasiones, la proporción
ofrece una valoración extraordinariamente diferente del nivel de riesgo cardiovascular. El
sistema antiguo consideraría que una persona con un nivel de colesterol total saludable,
195mg/dl, tiene un riesgo cardiovascular bajo, pero si la proporción de colesterol total y
colesterol HDL fuera demasiado elevada, debido a niveles bajos de HDL , esta persona
tiene, de hecho muchas probabilidades de llegar a padecer una enfermedad
cardiovascular. Del mismo modo, alguien que tuviera un nivel de colesterol total de
250mg/dl, y que normalmente recibiría un tratamiento, podría necesitar poco más que
algunos cambios en el estilo de vida si tuviera un nivel de HDL elevado.

COLESTEROL LDL. A medida que las partículas de IDL donan sus lípidos y adquieren el
tamaño de LDL, las moléculas de Apo b-100 empacadas en las VLDL originales son
reconocidas por las regiones de fosos recubiertos de las membranas celulares. Los fosos
recubiertos son regiones en las membranas de los hepatocitos y las células de tejidos
periféricos que tienen alta afinidad por ciertas lipoproteínas. En estas regiones se efectúa
el enlace y la posterior pinocitosis y degradación de estas lipoproteínas. Así las células
engloban la LDL rica en colesterol, lo que da lugar a depósitos de colesterol en el
citoplasma de las células tisulares. El colesterol libre en las células inhibe la actividad de
la 3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA reductasa, enzima la velocidad y controla la síntesis de
colesterol endógeno. También se inhibe la formación de más sitios receptores de LDL con
fosos recubiertos en la membrana. En lo que respecta a los niveles de colesterol LDL, son
óptimos si se encuentran por debajo de 100mg/dl; casi óptimos o un poco por encima si
están entre 100-129mg/dl; se hallan en el límite superior si se encuentran entre 130-
159mg/dl; entres 160-189mg/dl son elevados y por encima de 190mg/dl son muy
elevados. La actualización de 2004 del NCEP establece que las personas con un riesgo
cardiovascular muy elevado deberían tener un nivel alrededor de 70. La comisión también
indica que las personas que deban medicarse para reducir el colesterol tendrían que
reducir sus niveles de colesterol LDL entre 30 y un 40%.

TRIGLICERIDOS VLDL. Sintetizadas en el hígado a partir de remanentes de

quilomicrones (lipoproteínas de mayor tamaño), las VLDL cargadas de triglicéridos
contienen principalmente apoproteinas Apo B-100, Apo E y Apo C. La VLDL Apo CII sirve
como el cofactor necesario para que la liproteinlipasa hidrolice triglicéridos. Esto da lugar
que el catabolismo de VLDL produzca lipoproteínas de densidad intermedia (IDL).
El nivel de colesterol VLDL normal está entre 5 y 40 mg/dL.

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FUNDAMENTO
COLESTEROL HDL.

Determinación directa del HDLc (colesterol de lipoproteínas de alta densidad) sin

necesidad de pre-tratamiento o centrifugado de la muestra.
La determinación se realiza en dos pasos:

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de HDLc presente en

la muestra ensayada.

TRIGLICÉRIDOS.

Los triglicéridos incubados con lipoproteinlipasa (LPL) liberan glicerol y ácidos grasos
libres. El glicerol es fosforilado por glicerolfosfato deshidrogenasa (GPO) y ATP en
presencia de glicerol quinasa (GK) para producir glicerol-3-fosfato (G3P) y adenosina-5-
difosfato (ADP). El G3P es entonces convertido a dihidroxiacetona fosfato (DAP) y
peróxido de hidrogeno (H2O2) por GPO.
Al final, el peróxido de hidrogeno (H2O2) reacciona con 4-aminofenazona (4-AF) y p-
clorofenol, reacción catalizada por la peroxidasa (POD) dando una coloración roja:

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de triglicéridos

presentes en la muestra ensayada.

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COLESTEROL TOTAL.

El colesterol presente en la muestra origina un compuesto coloreado según la reacción

siguiente:

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de colesterol presente

en la muestra ensayada.

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MATERIALES
Equipo de trabajo de laboratorio.

Material para toma de muestra (punción venosa).

Centrifuga.

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Tubos de ensayo.

Gradilla.

Pipetas automáticas.

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Puntillas para pipetas automáticas.

Reactivos de trabajo.

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Agua destilada.

Incubadora.

Cubetas de paso de luz.

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Espectrofotómetro.

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PROCEDIMIENTO
1.- limpiar el área de trabajo.
2.- Encender el espectrofotómetro con 20 minutos de antelación a la prueba.
3.- Encender la incubadora con 10 minutos de antelación a la prueba.
4.- Calibrar el espectrofotómetro después de los 20 minutos frente a agua destilada a una
longitud de onda de 520 nm.
5.- Realizar debidamente la toma de muestra por punción venosa en tubo rojo.
6.- centrifugar el tubo con muestra durante 5 minutos a 3000 revoluciones por minuto.
7.- Preparar los reactivos, todos los reactivos están listos para su uso.
8.- En tubos de ensayo, pipetear las siguientes cantidades:

PARA COLESTEROL TOTAL:

BLANCO PATRÓN MUESTRA

R (mL) 1,0 1,0 1,0
PATRÓN (µL) --- 10 ---
MUESTRA (µL) --- --- 10

PARA TRIGLICÉRIDOS:

BLANCO PATRÓN MUESTRA

R (mL) 1,0 1,0 1,0
PATRÓN (µL) --- 10 ---
MUESTRA (µL) --- --- 10

PARA COLESTEROL HDL:

BLANCO PATRÓN MUESTRA

R1 (µL) 600 600 600
PATRÓN (µL) --- 6 ---
MUESTRA (µL) --- --- 6

9.- Mezclar e incubar durante 5 minutos a 37°C o durante 10 minutos a 15-25°C.

10.- Vaciar el contenido del tubo en una cubeta de paso de luz, cubriendo un centímetro
de altura con la muestra a leer.
11.- Leer la absorbancia del patrón, blanco y de la muestra en el espectrofotómetro,
calibrado frente a agua destilada.
12.- Registrar los resultados y realizar los cálculos correspondientes, a excepción del
colesterol HDL.
13.- Después de registrar los resultados, vaciar el contenido de la cubeta de colesterol
HDL en el tubo que se utilizó para el mismo.
14.- En el tubo donde se analiza el colesterol HDL, pipetear las siguientes cantidades:

BLANCO PATRÓN MUESTRA

R2 (µL) 100 100 100

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15.- Mezclar e incubar durante 5 minutos a 37°C.

16.- Vaciar el contenido del tubo en una cubeta de paso de luz, cubriendo un centímetro
de altura con la muestra a leer.
17.- Leer la absorbancia del patrón, blanco y de la muestra en el espectrofotómetro,
calibrado frente a agua destilada.
18.- Registrar los resultados y realizar los cálculos correspondientes.

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CÁLCULOS
COLESTEROL TOTAL:

Absorbancia
Blanco 0.060
Patrón 0.440
Muestra 0.189

Concentración
Patrón 200

FORMULA:

TRIGLICÉRIDOS:

Absorbancia
Blanco 0.078
Patrón 0.296
Muestra 0.160

Concentración
Patrón 200

FORMULA:

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COLESTEROL HDL:

Absorbancia 1 Absorbancia 2
Blanco 0.031 0.035
Patrón 0.030 0.051
Muestra 0.020 0.035

Concentración
Patrón 39.1

COLESTEROL LDL:

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RESULTADOS
Nombre: Alan Rosas De Santiago.
Edad: 18.
Pruebas realizadas: Perfil de lípidos.

ANALITO RESULTADO VALORES DE

REFERENCIA
COLESTEROL TOTAL 99.47 mg/dL - Normal: Menos de 200
mg/dL
- Moderado: 200-239
mg/dL
- Alto: 240 o mas
TRIGLICÉRIDOS 75.22 mg/dL PACIENTES DIABÉTICOS,
FUMADORES, ET.
- >100mg/dL.
PACIENTES NORMALES.
- Normal:>150mg/dL.
- Riesgo: 150-199 mg/dL.
- Riesgo alto: 200-499
mg/dL.
- Riesgo muy alto: <500
mg/dL.
COLESTEROL HDL 25.3 mg/dL HOMBRES
- Riesgo menor: > 50
mg/dL
- Riesgo normal: 35-50
mg/dL
- Riesgo elevado: <35
mg/dL
MUJERES
- Riesgo menor: > 60
mg/dL
- Riesgo normal: 45-60
mg/dL
- Riesgo elevado: <45
mg/dL
COLESTEROL LDL 59.126 mg/dL - Optimo: >100 mg/dL.
- En riesgo: 130-159
mg/dL.
- Riesgo alto: <160 mg/dL.

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OBSERVACIONES
Para realizar este análisis se precisa estar en ayunas recomendablemente de 8 a 12
horas, pero al menos las 6 horas previas a la toma de muestra.
El aumento de la coloración del plasma o suero que adquiere un tono amarillento
(ictericia) por lo general indica una mayor concentración de bilirrubina. El hallazgo
laboratorial de plasma de color amarillo con un hematocrito normal sugiere
hiperbilirrubinemia secundaria a enfermedad hepática. Sin embargo, la hiperbilirrubinemia
asociada a una marcada disminución del hematocrito sugiere un aumento de la
destrucción de los eritrocitos. No obstante, la presencia simultánea de enfermedad
hepática y anemia hemolítica también puede producir un resultado similar. El plasma o
suero ictérico puede interferir en los resultados analíticos de albúmina, colesterol,
triglicéridos, glucosa y proteínas totales.
La lipemia se reconoce como un aspecto blanco opaco causado por los quilomicrones y
lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL). La presencia de lipemia es con frecuencia el
resultado de una comida reciente (lipemia postprandial), pero hay ciertas enfermedades
incluyendo la diabetes mellitus, hiperadrenocorticismo, hipotiroidismo, pancreatitis,
lipidosis hepática y colestasis, que pueden resultar en un importante incremento de la
lipemia en algunas especies.
Los sueros lipémicos pueden dar lugar también a incrementos en ciertos analitos
bioquímicos, principalmente en los determinados por métodos espectrofotómetros. La
lipemia provoca resultados elevados para aquellas sustancias cuyas determinaciones se
basan en la absorbancia, a las mismas longitudes de onda en que las partículas de lípido
también absorben luz.
Determinados anticoagulantes como el oxalato potásico provocan un aumento de la
presión osmótica del plasma, dando lugar a un transporte de agua desde las células
sanguíneas al plasma y a una dilución del mismo. Los quelantes del calcio (como el
EDTA) producen inhibición en la actividad de diferentes enzimas para las cuales este ión
es fundamental. Se produce inhibición en la actividad de la Amilasa, CK, LDH, Fosfatasa
alcalina y Fosfatasa ácida. Los tubos de recogida con trombina, los cuales acortan el
tiempo de coagulación, producen algunas interferencias en determinados parámetros
como los cloruros, el Calcio, el Potasio y la LDH.

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BIBLIOGRAFÍA
Determinación cuantitativa de colesterol HDL, visitado el día 17 de abril del 2018:
http://www.spinreact.com.mx/public/instructivo/QUIMICA%20CLINICA/LIQUIDOS/100109
6.97.98%20HDLc.pdf

Determinación cuantitativa de colesterol, visitado el día 17 de abril del 2018:

http://www.spinreact.com.mx/public/_pdf/41021.pdf

Determinación cuantitativa de triglicéridos, visitado el día 17 de abril del 2018:

http://www.spinreact.com.mx/public/instructivo/QUIMICA%20CLINICA/LIQUIDOS/41030.3
1.32.33%20TRIG%20LIQ%202011.pdf

Perfil de lípidos, visitado el día 22 de abril del 2018:

https://es.scribd.com/document/94045471/PERFIL-DE-LIPIDOS

Interferencias analíticas, visitado el día 22 de abril del 2018:

http://analisisclinicos.ccmiju.com/images/stories/catalogo-
pruebas/INTERFERENCIAS_ANAL%C3%8DTICAS.pdf

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