UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIRIQUÍ

DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA ALFA AMILASA SALIVAL

Resumen

Se evaluaron los factores que influyen en la actividad enzimática de la alfa amilasa salival, con la
ayuda del almidón y lugol como sistema de reacción. Primeramente, se preparó la muestra de
la alfa amilasa salival. Seguidamente se prepararon cuatro tubos cada uno con 2 mL de almidón,
diferentes volúmenes de agua y enzima. Se tomaba una gota de las muestras y se les agregó una
gota de lugol, se realizó en cada minuto después de haber agregado el almidón y continuó hasta
que la muestra diera negativo con el lugol; así se observó el efecto de la concentración de la
enzima. Después, se tomaron cuatro tubos más, nuevamente cada uno con una cantidad
diferente de almidón, y agua; manteniendo constante la cantidad de enzima (0,5 mL); también
se realizó la prueba con el lugol y en esta parte se observó el efecto de concentración del
sustrato. Luego, se tomaron cuatro tubos de ensayo a los que se les agregó 1 mL enzima y 4 mL
de almidón y se dejaron incubar por tres minutos a temperatura ambiente y se realizó la misma
prueba con el lugol y se determinó el efecto de la temperatura en la enzima. Finalmente, se
tomaron tres tubos de ensayo y a cada uno se le agregó 2 mL de amortiguador a tres niveles, 1
mL de almidón y 1 mL de enzima, nuevamente se realizó la prueba de lugol y se determinó el
efecto del pH en la enzima. Se logró comprobar que al aumentar la concentración de la amilasa
se incrementó la velocidad de hidrólisis del almidón. El pH óptimo para la actividad enzimática
de la amilasa es próximo a la neutralidad (pH=7) y la temperatura óptima para la actividad de la
amilasa se encuentra próxima a 40°C.