DISEÑO DEL SISTEMA DE CONTROL PARA UN BIORREACTOR
DE TANQUE AGITADO
Morgan G. Vásquez
Resumen
El presente trabajo muestra de forma general los
elementos que hacen parte del sistema de control de
un biorreactor de tanque agitado. Se presentan los
sensores y actuadores comúnmente utilizados y un
esquema de conexiones para el proceso.
Palabras Clave: Biorreactor de tanque agitado.
1 BIORREACTORES
El biorreactor, es sin duda, uno de los equipos
fundamentales de la microbiología industrial. Es el
recipiente donde se realiza el cultivo, y su diseño
debe ser tal que asegure un ambiente uniforme y
adecuado para los microorganismos [1].
Las "tareas" que realiza el biorreactor pueden
resumirse del siguiente modo:
a) Mantener las células uniformemente distribuidas
en todo el volumen de cultivo a fin de prevenir la
sedimentación o la flotación.
b) Mantener constante y homogénea la temperatura.
c) Minimizar los gradientes de concentración de
nutrientes.
d) Suministrar oxígeno a una velocidad tal que
satisfaga el consumo.
e) El diseño debe ser tal que permita mantener el
cultivo puro; una vez que todo el sistema ha sido
esterilizado y posteriormente sembrado con el
microorganismo deseado.
Para satisfacer los cuatro primeros puntos es
necesario que el biorreactor esté provisto de un
sistema de agitación, además para el punto d) se
requiere de un sistema que inyecte aire en el cultivo.
1.1 ELEMENTOS DEL BIORREACTOR
El biorreactor de tanque agitado es de uso muy
difundido. La agitación se realiza mecánicamente
mediante un eje provisto de turbinas accionado por
un motor, como muestra la figura 1.
El aire se inyecta por la parte inferior del tanque y es
distribuido por una corona que posee pequeños
orificios espaciados regularmente. El chorro de aire
que sale de cada orificio es "golpeado" por las paletas
de la turbina inferior generándose de este modo miles
de pequeñas burbujas de aire, desde las cuales
difunde el 02 hacia el seno del líquido. El sistema de
agitación se completa con cuatro o seis deflectores
que tienen por finalidad cortar o romper el
movimiento circular que imprimen las turbinas al
líquido, generando de este modo mayor turbulencia y
mejor mezclado.
El tanque está rodeado por una camisa por la que
circula agua, lo que permite controlar la temperatura.
Para tanques mayores que 1000 o 2000 litros este
sistema ya no es eficiente y es reemplazado por un
serpentín que circula adyacente a la pared interior del
tanque. Debe tenerse en cuenta que a medida que es
mayor el volumen de cultivo también lo es la
cantidad de calor generado, por lo que se hace
necesario una mayor área de refrigeración. Los
tanques son de acero inoxidable y están pulidos a fin
de facilitar la limpieza y posterior esterilización.
El aire que ingresa al biorreactor debe estar estéril, lo
que se consigue haciéndolo pasar por un filtro cuyo
diámetro de poro es de 0,45 micrones, que impide el
paso de microorganismos y esporos.

Figura 1: Biorreactor de tanque agitado.
1.2 ELEMENTOS BÁSICOS
Para lograr los objetivos, un biorreactor de tipo
tanque agitado debe contar con los siguientes
componentes [2]:
Cuerpo del biorreactor: recipiente o contenedor que
alberga al cultivo o microorganismo. El contenedor
es la frontera física entre el ambiente externo
contaminado y el ambiente interno controlado. Un
tanque contenedor o cuerpo del biorreactor se debe
construir en acero inoxidable austenítico, por sus
características químicas y físicas superiores;
usualmente se prefiere los aceros de las series 316.
Sistema de agitación: tiene la función de generar la
potencia necesaria para producir una mezcla perfecta
para el sistema de cultivo y producir un régimen de
agitación adecuado que, maximice la difusión de
gases en el líquido y minimice la producción de
esfuerzos cortantes y la presión hidrodinámica local y
global, para optimizar los fenómenos de transferencia
de momentum, calor y masa.
Un sistema de agitación consta de las siguientes
partes mecánicas:
Motor impulsor: Motor de Inducción (A.C): dado
que un biorreactor debe operar de forma continua
durante todo el proceso de cultivo; se requiere un
motor capaz de resistir largos periodos de operación
continua y trabajo duro; por eso, el motor debe ser de
inducción de corriente alterna (a.c) y debe ser
acorazado, preferiblemente en acero inoxidable.
Eje trasmisor de potencia: es una barra cilíndrica de
acero inoxidable 316L y por lo general se diseña en
diámetros estándar: ¾”, ½”, etcétera para mayor
facilidad de ajuste a los estándares de motores a.c. Su
longitud depende de la profundidad del contenedor
(tanque).
Puerto de entrada del biorreactor: se denomina
puerto a la superficie física sobre el cual se instala un
dispositivo de entrada o salida al biorreactor, un
anclaje o un aparato mecánico o de medición; el
puerto es el medio por el cual, se ajusta o fija, tal
dispositivo o artefacto a la pared o superficie del
tanque o del biorreactor.
Sello mecánico: su función es triple: evitar la
contaminación, mantener hermético el sistema, servir
de amortiguador de fricción. El sello mecánico
también debe permitir la esterilización in situ del
biorreactor, mediante una línea de vapor
sobrecalentado.
Eje transmisor de potencia: transmite la potencia
del motor al impulsor a través de las hojas de
agitación. Existen ejes en los cuales ya vienen
incorporadas hojas o aspas de agitación, se diseñan
para operar en uno de dos sistemas de flujo, según
sea, la orientación espacial de las hojas o aletas.
Turbinas: es un impulsor de flujo axial el cual opera
como una centrífuga que distribuye el flujo de
líquido a través de hojas planas, a todo el volumen de
fluido.
El impulsor axial ha demostrado ser la forma más
eficiente de diseño para reducir esfuerzos cortantes e
hidrodinámicos y disminuir la turbulencia y la
potencia requerida para homogenizar el mezclado;
objetivo que se persigue en una mezcla perfecta. Por
eso se recomienda impulsores de flujo axial para
cultivar células sensibles o de membrana plasmática.
Dentro de éstas, la turbina Rushton es el impulsor de
flujo axial más recomendado y más eficiente para
generar una mezcla perfecta de alto perfil
hidrodinámico, bajo en esfuerzos cortantes y altos en
distribución.
2 SISTEMAS DE CONTROL
2.1 CONTROL DE VELOCIDAD DEL
MOTOR
Los motores de inducción de corriente alterna (a.c)
tienen velocidades nominales de rotación de
1800rpm o 3600rpm. Estas velocidades son muy
altas para los sistemas biológicos causando la
destrucción de las células y microorganismos en
cultivo. La velocidad de rotación del motor debe
entonces reducirse a un máximo de 600rpm
(revoluciones por minuto) para que no cause daño
celular. Usualmente se acopla a la salida de eje del
rotor una caja de reducción de 1/3 o 1/6 para bajar la
velocidad de rotación a 600rpm. Adicionalmente se
coloca un control de velocidad que puede ser
analógico o digital al motor para un control más fino
y preciso de la velocidad de rotación.
2.2 CONTROL DE TEMPERATURA
Mantiene estable y dentro de un rango óptimo
requerido por el cultivo para su máximo crecimiento,
la temperatura interna del sistema.
Un sistema de control de temperatura consta de:
Un sistema de intercambio térmico:
Intercambiador de calor: dispositivo de
intercambio térmico que absorbe el calor excedente.
Se define por su área de transferencia de calor; a
mayor área de transferencia de calor, mayor
capacidad de absorber calor.
Un sistema de control:
Controlador de temperatura: sistema que ordena y
regula la acción del motor que controla las servo-
válvulas que regulan el flujo de líquido frío o
caliente.
Un sistema de medición:
Sensor de temperatura: sonda (termocopla) que
mide la temperatura.
Un servo control:
Servo controlador de temperatura: controla la
temperatura a la que debe abrir o cerrar la válvula
solenoide.
Un sistema regulador de paso de flujo:
Válvula solenoide: servo mecanismo actuador que
regula el flujo (paso) de líquido por la tubería o línea
de paso (abre o cierra el flujo del líquido).
Un sistema de conducción de fluido:
Tuberías de conducción de agua: el agua es fluido
térmico por excelencia para la transferencia de calor
por conducción a través de las paredes metálicas de
la tubería. Éstas deben ser de acero inoxidable.
Las tuberías deben anclarse al cuerpo del biorreactor
mediante un puerto de entrada que es soporte
hermético que la sujeta a la superficie plana.
2.3 CONTROL DE pH (potencial de
hidrógeno)
El sistema controla el pH del medio de cultivo; que
es generada por los productos de desecho y el
metabolismo propio del cultivo celular o
microorganismos. Un sistema de control de acidez
consta de:
Dos subsistemas mecánicos servo controlados
Sistema Dispensador de Ácido: que consta de:
• Dispensador aséptico de ácido (HCl)
• Filtro microporo en línea
• Manguera flexible resistente al ácido
• Bomba peristáltica
Sistema Dispensador de Álcali: que consta de:
• Dispensador aséptico de álcali (NaOH);
• Filtro microporo en línea
• Manguera flexible resistente al álcali
• Bomba peristáltica
Las mangueras flexibles se deben conectar al sistema
(biorreactor) mediante un tubo de adición de reactivo
para cada una de ellas.
Un sistema de control formado por:
• Controlador de pH: ordena y regula la
acción del motor que controla a las bombas
peristálticas que suministran el ácido y el
álcali.
Un sistema de medición: formado por:
• Sensor de pH: sonda o probeta
electroquímica que mide la acidez y “dice”
al controlador de pH, la situación del medio.
• pH Óptimo: toda célula y microorganismo
poseen un rango de acidez (pH) dentro del
cual, es posible su crecimiento con
normalidad; dentro de ese rango, existe un
pH óptimo en el cual el crecimiento es
máximo y muy bien definido.
2.4 SISTEMA DE DIFUSIÓN DE OXÍGENO
DISUELTO
Debe optimizar al máximo la transferencia de
oxígeno disuelto al medio líquido. El sistema consta
de dos partes mecánicas: boquilla y difusor de aire;
una parte de medición: sensor de oxígeno disuelto y
una de control: controlador de oxígeno disuelto.
Difusor de aire: los cultivos aeróbicos requieren que
la corriente de aire estéril se difunda en la forma de
miles de pequeñas burbujas, desde el difusor de aire,
hacia el volumen del líquido; esta acción se realiza
mediante un plato o domo cilíndrico de acero
inoxidable finamente perforado. Alternativamente y
si el sistema es pequeño o mediano en escala, se
puede utilizar un difusor de material cerámico poroso
el cual, tiene la ventaja de que, provee una cama más
fina de burbujas (de menor diámetro) y mayor área
de transferencia (volumen de burbujas).
Control y regulación del flujo de aire: las
membranas que filtran el aire tienen un punto de
burbuja y un flujo máximo por encima del cual, se
rompen; por eso, se debe regular el flujo de aire y
controlar la presión en la línea de aire. La forma más
económica de hacerlo es manualmente, con un
manómetro para presión. Existe también la versión
digital, más costosa, pero que, controla de forma
automática el flujo de aire y la presión, según se
escoja.
Control y medición del oxígeno disuelto (OD):
además de regular el flujo y la presión del aire en la
línea o tubería, se debe controlar el valor y la
concentración del oxígeno disuelto (OD) dentro del
medio líquido; variable que puede medirse en dos
formas (parámetros):
a) Oxígeno disuelto (OD): es la concentración de
oxígeno disuelto requerido para la reducción química
de un equivalente en iones sulfito (de sodio) a la
cantidad de materia orgánica presente en el medio
líquido que se debe oxidar.
b) Demanda bioquímica oxígeno (DBO): es la taza
de oxidación biológica o demanda bioquímica de
oxígeno disuelto requerida por el microorganismo o
célula en cultivo para oxidar la materia orgánica
presente en el medio líquido.
Una probeta o electrodo OD es un sensor que mide la
concentración de oxígeno disuelto en el medio
líquido. Similarmente, una probeta o electrodo BOD
mide la concentración de oxígeno disuelto en el
medio líquido en equilibrio con el gas. ) En ambos
casos, el material de su construcción debe ser acero
inoxidable y su especificación es por la longitud de
inmersión (H) y diámetro (D) de la probeta.
3 SENSORES Y ACTUADORES
Para la realización de este trabajo se han planteado
unos rangos de operación para la selección de los
elementos del proceso.
Capacidad del biorreactor: 10 Litros.
Velocidad de agitación: 100-1500 rpm, potencia
1kw.
Rango de temperatura: 20 a 40ºC.
Enfriamiento/calentamiento 700w.
pH: 2 a 10.
Oxígeno disuelto: 0-100%.
Motor de agitación
El rendimiento del par del motor para un recipiente
de 10 litros es de 1.32W/N.m y la velocidad de
agitación está comprendida entre los 20 y 800 r.p.m.
El acoplamiento del eje del motor es directo y el
sellado es mediante un sello mecánico simple,
además el impulsor es de paletas y para el sistema de
aireación se usa un anillo de aspersión. En la figura
2, podemos ver el montaje de un motor de agitación
sobre un recipiente.
Motor
Figura 2. Motor de agitación.
Sistema de control de temperatura para el
recipiente de cultivo con camisa
Se utiliza un conector amphenol ECO|MATE para la
calefacción por medio de la camisa y una válvula
solenoide para la refrigeración con agua. La potencia
del calentador eléctrico es de 1000W y la potencia de
calefacción en la camisa es de 780W. Para las
conexiones del recipiente de cultivo y la salida de
refrigeración se utilizan acoplamientos rápidos. Para
la medición de la temperatura se emplea una
termocupla PT-100 con conector M12, como se ve en
la figura 3. El rango de temperaturas está entre 0 y
150 ºC.
Figura 3. Termocupla con conector M12.
Sensor de pH
Para la medición del pH se utiliza un sensor del tipo
Gel-filled con un conector VP, como podemos ver en
la figura 4. Su rango está comprendido entre 2 y 12.
Esta descripción para la torre de control se debe
tomar como un ejemplo, ya que en el mercado
existen muchos modelos que incluyen estas
características o inclusive son más sofisticados y
cuentan con muchas más opciones que permiten un
mejor control y monitorización del proceso. En la
figura 7 podemos ver la apariencia de este elemento.

Figura 4. Sensor de pH con conector VP.

Bombas peristálticas

Las bombas peristálticas permitirán agregar el ácido

o álcali al proceso, según sea necesario. Las bombas
son del tipo Watson Marlow 102R para tubos con un
espesor de 1.6 mm y una velocidad de rotación de 20
r.p.m. El rango del flujo por el tubo depende del
diámetro y el grosor del tubo. El sistema de control Figura 7. Torre de control.
aplicado a estas bombas, es del tipo on/off mediante
el control de la modulación del ancho de pulso. En la Un ejemplo de la información que podríamos
figura 5 podemos ver la bomba peristáltica. encontrar en una torre de control por medio de su
pantalla, sería lo que vemos en la figura 8.

Figura 5. Bomba peristáltica.

Sensor de oxígeno disuelto

Para el oxígeno disuelto se utiliza un sensor de tipo

polarográfico con conector VP, como se ve en la
figura 6. Su rango de medida está comprendido entre
0 y 250 %.
Figura 8. Captura de pantalla.

En la figura 9 podemos ver el esquema de conexiones

entre los elementos sensores y actuadores y la torre
de control que hemos descrito anteriormente.

Figura 6. Sensor de oxígeno disuelto.

Torre de control

Este elemento se encarga de monitorizar y controlar

todas las variables del proceso del biorreactor, como
agitación, temperatura, pH, oxígeno disuelto y otras
posibles variables del proceso. Está hecho de acero
inoxidable, cuenta con una pantalla táctil y su control
se hace mediante comunicación Ethernet. La Figura 9: Esquema de montaje.
alimentación eléctrica es de 110-230V|6A y su
consumo máximo es de 2000W. Además posee una
rutina guiada para la calibración de los sensores.
En la figura 10 se muestra un sistema de control de
temperatura más detallado para el proceso.

Figura 10. Sistema de temperatura.

Agradecimientos

A los profesores de la asignatura de Dispositivos de

control por sus conocimientos brindados.

Referencias

[1] Ertola Rodolfo, Yantorno Osvaldo y Mignone

Carlos. “Microbiología Industrial”, Sistemas de
cultivo y aspectos generales de biorreactores,
Capítulo 7.

[2] Koshkin N. I., Shirkévich M. G. «págs 36, 74-

75, 85-86», “Manual de Física Elemental”. Editorial
Mir 1975.