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Alvarado Gallardo Ana Isabel MEDIOS DE CULTIVO Grupo 1651

Nombre del medio de Clasificacin de acuerdo a su Fundamento del medio Utilidad Interpretacin Utilidad de los componentes
cultivo composicin qumica
Selectivo moderado pues La diferenciacin entre Es utilizado para el Escherichia coli: Verdosas Peptona 10.0 g/L
asla bacilos Gram negativos organismos capaces de utilizar aislamiento selectivo de con brillo metlico y centro Lactosa 5.0 g/L
de rpido desarrollo y escasas la lactosa y/o sacarosa, y bacilos Gram negativos de negro azulado. Klebsiella Sacarosa 5.0 g/L
exigencias nutricionales y aquellos que son incapaces de rpido desarrollo y escasas pneumoniae: Mucosas, rosa Fosfato dipotsico 2.0 g/L
diferencial : porque diferencia hacerlo, est dada por los exigencias nutricionales. prpura, confluentes Proteus Agar 13.5 g/L
organismos capaces de utilizar indicadores eosina y azul de Permite el desarrollo de todas mirabilis: Incoloras. Eosina 0.4 g/L
la lactosa y/o sacarosa, y metileno; stos ejercen un las especies de la familia Enterococcus faecalis: Azul de metileno 0.065 g/L
aquellos que son incapaces de efecto inhibitorio sobre Enterobacteriaceae. Incoloras, pequeas, pH final: 7.2 2
hacerlo muchas bacterias Gram puntiformes. Shigella Las peptonas proveen la fuente de
positivas. flexneri: Incoloras. nitrgeno, la eosina y el azul de
Salmonella typhimurium: metileno son colorantes que se
Agar Eosina y Azul de Incoloras. Las colonias de combinan para formar un
metileno Salmonella y Shigella son precipitado a pH cido. Los
translcidas, de color mbar colorantes actan como inhibidores
o incoloras. Los coliformes e indicadores. Las carbohidratos
que utilizan la lactosa y/o proporcionan la fuente de energa,
sacarosa producen colonias las fosfatos actan como buffer y el
de color azul a negro con agar como agente solidificante.
centros obscuros y brillo
metlico.

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selectivo La frmula del Medio lquido Es recomendado para usar en Streptococcus pyogenes Peptona de Casena 15.0
de Tioglicolato sin Dextrosa y ensayos de control de Bueno Cloruro de Sodio 2.5
sin Indicador es una esterilidad, en diversos Clostridium perfringens Extracto de Levadura 5.0
modificacin de la frmula productos biolgicos. Bueno L-Cistina 0.25
original del Medio de En microbiologa clnica S. aureus Tioglicolato de Sodio 0.5
Tioglicolato, en la cual se tambin se usa por su Bueno pH 7.0 0.2
elimina la dextrosa y se capacidad de favorecer el Bacteroides fragilis
incorpora una peptona libre desarrollo de una gran Bueno Para volver el medio liquido a medio
de carbohidratos variedad de microorganismos solido se le puede agregar agar agar
fermentables, lo cual lo hace aerobios y anaerobios. poner en un porcentaje del 1.5 al 2 %.
Medio tioglicolato til para estudios de de manifiesto la presencia de En este medio el tioglicolato de
fermentacin. En este medio microorganismos en sodio y la L-cistina favorecen un
el indicador materiales normalmente atmsfera con baja tensin de
de azul de metilito ha sido estriles que contienen oxgeno, permitiendo el desarrollo
eliminado para evitar preservativos derivados del de microorganismos anaerobios y
cualquier grado de toxicidad mercurio. otros. La peptona de casena
que pueda interferir en la proporciona la fuente de nitrgeno.
recuperacin de El extracto de levadura proporciona
microorganismos. la fuente de vitaminas. El cloruro de
sodio se
emplea para mantener la presin
osmtica.
enriquecido Este medio es bsicamente Cultivos de especies de Haemophilus influenzae Mezcla de Peptonas 15.0
que el agar sangre pero con la Haemophilus y especies Colonias pequeas, hmedas, Fosfato Dipotsico 4.0
adicin de la sangre a la base patgenas de Neisseria perladas con caracterstico Almidn de Maz 1.0
mientras esta ultima est an olor hmedo Fosfato Monopotsico 1.0
a 80C, las protenas Neisseria gonorrhoeae Cloruro de Sodio 5.0
precipitarn, los glbulos se Colonias pequeas grisceas Agar 10.0
lisarn y la hemoglobina se o incoloras, mucoides pH 7.2 0.2
Agar chocolate convertir en hematina, Neisseria meningitidis La Base de Agar GC es utilizada para
hacindolo con ellos a estos Colonias medianas a grandes, preparar Agar Gelosa Chocolate
nutrientes ms fcilmente de color azul grisceo, cuando es suplementada con
accesibles para el crecimiento mucoides. hemoglobina al 2% que provee la
de los organismos exigentes Streptococcus pneumoniae hemina (Factor X) que
Colonias pequeas, planas, proveen glutamina, cocarboxilasa,
pueden aparecer verdes por levadura, glutamina, coenzimas,
la decoloracin del hemina, vitaminas, aminocidos,
medio dextrosa y otros factores de
crecimiento.

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Selectivo y diferencial Recomend su uso en forma Este medio de cultivo ha sido


rutinaria para la realizacin recomendado universalmente Infusin de carne 300.0
del antibiograma en medio para la prueba de sensibilidad Peptona cida de casena 17.5
slido, debido a una serie de a los antimicrobianos. Adems Almidn 1.5
factores que se detallan a es til con el agregado de Agar 15.0
continuacin: presenta buena sangre para el cultivo y pH final: 7.3 0.1
reproducibilidad lote a lote en aislamiento de
las pruebas de sensibilidad, su microorganismos
contenido en inhibidores de nutricionalmente exigentes En este medio la infusin de carne y
Agar Mueller Hinton sulfonamidas, trimetoprima y la peptona de casena proveen la
tetraciclina es bajo, la mayora fuente de nitrgeno, vitaminas,
de los patgenos crece carbn y aminocidos. El almidn es
satisfactoriamente y una gran agregado para absorber cualquier
cantidad de datos han sido metabolito txico y el agar es
evaluados y avalados usando adicionado como agente
este medio de cultivo. solidificante.
Cuando se suplementa con
sangre de carnero al 5%, es
til para realizar las pruebas
de sensibilidad a los
antimicrobianos en especies
de estreptococos.
Enriquecido selectivo y El verde brillante Medio de enriquecimiento Las colonias tpicas de Pluripeptona 10.0
diferencial acta como inhibidor de altamente selectivo para el Salmonella aparecen como Extracto de levadura 3.0
bacterias Gram positivas y de aislamiento de Salmonella colonias de color rosa a Cloruro de sodio 5.0
la mayora de bacterias Gram spp., excepto S. typhi y S. blanco, opacas rodeadas por Lactosa 10.0
negativas diferentes a paratyphi, a partir de el rojo brillante del medio. Sacarosa 10.0
Salmonella. muestras clnicas, alimentos, y Los pocos microorganismos Rojo fenol 0.08
El rojo de fenol es un otros materiales de que crecen en este medio Verde brillante 0.0125
indicador de importancia sanitaria. No se que son fermentadores Agar 20.0
Agar verde brillante las variaciones de pH y cambia recomienda para el de lactosa o sacarosa, son pH final: 6.9 0.2
el color del medio a amarillo aislamiento de Shigella spp. fcilmente identificables
en presencia del cido Es de un valor excepcional debido a la formacin de En este medio las peptonas y el
derivado de la cuando se investiga un gran colonias amarillas- verdes extracto de levadura proporcionan la
fermentacin de los nmero de muestras de heces rodeadas de una intensa zona fuente de nitrgeno, vitaminas y
carbohidratos. o alimentos, por su alta de color amarilla-verdosa. minerales. La lactosa y la sacarosa
capacidad de diferenciacin Este medio no es adecuado son los carbohidratos fermentables.
de las colonias sospechosas. para el aislamiento El rojo de fenol es un indicador de
de S. Typhi ni de Shigella, sin las variaciones de pH. El cloruro de

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embargo algunas cepas de S. sodio mantiene el balance osmtico.


Typhi pueden desarrollar El verde brillante
dando colonias acta como agente selectivo. El agar
rojas. es adicionado como agente
Escherichia coli Amarillo- solidificante.
verdosas sobre fondo
amarillento Salmonella
enteritidis Rosas, blancas o
transparentes sobre fondo
rojo Salmonella typhi
Crecimiento inhibido
Salmonella typhimurium
Rosas, blancas o
transparentes sobre fondo
rojo Shigella flexneri.
Crecimiento inhibido
Staphylococcus aureus
Crecimiento inhibido

selectivo La frmula de este medio est Medio utilizado para el Se observa conforma al
desarrollada para favorecer la aislamiento selectivo de crecimiento: Peptona de gelatina 20.0 g/L
seleccin de P. aeruginosa y Pseudomonas aeruginosa y de Pseudomonas aeruginosa Cloruro de magnesio 1.4 g/L
estimular la formacin de otras especies del gnero. A Bueno - excelente Sulfato de potasio 10.0 g/L
pigmentos. Es ste un medio partir de muestras clnicas y Escherichia coli Agar 13.6 g/L
muy semejante al King A, en el otros materiales. Inhibido Cetrimida 0.3 g/L
cual el cloruro de magnesio y Staphylococcus aureus pH final: 7.2 0.2
el sulfato de potasio Inhibido
promueven la formacin de La peptona sirve como fuente de
Agar cetrimida piocianina, pioverdina y nitrgeno. La produccin de
piomelanina de P. aeruginosa. piocianina se estimula mediante el
La cetrimida es un detergente cloruro de magnesio y el sulfato
catinico que acta como potsico en el medio. La cetrimida
agente inhibidor, libera el (bromuro de cetil trimetil amonio) es
nitrgeno y el fsforo de las un compuesto de amonio
clulas de casi toda la flora cuaternario que inhibe una amplia
acompaante, aunque inhibe variedad de otros organismos,
tambin algunas especies de incluidos otras determinadas
Pseudomonas. especies de Pseudomonas y
organismos relacionados.

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Medio basico Por las caractersticas de sus Medio de cultivo utilizado Crecimiento:
componentes es un medio para propsitos generales, P. mirabilis Bueno- Pluripeptona 5.0 g/L
usado para el cultivo de para el aislamiento de excelente Extracto de carne 3.0 g/L
microorganismos poco microorganismos poco E. coli Bueno-excelente Cloruro de sodio 8.0 g/L
exigentes en sus exigentes en lo que se refiere S. aureus Bueno- Agar 15.0 g/L
requerimientos nutricionales. a requerimientos nutritivos. excelente pH final: 7.3 0.2
Su uso est descripto en B. cereus Bueno-
muchos procedimientos para excelente No contiene inhibidores del
Agar nutritivo el anlisis de alimentos, aguas E. faecalis Bueno- desarrollo bacteriano. La
y otros materiales de excelente pluripeptona es la fuente de carbono
importancia sanitaria. P. aeruginosa Bueno- y nitrgeno para el desarrollo
excelente bacteriano. El agregado de cloruro
de sodio permite el enriquecimiento
con sangre de carnero u otras
sustancias para facilitar el cultivo de
microorganismos exigentes.

Diferencial y enriquecido El medio es til tanto para el Medio para propsitos Los estreptococos Infusin de msculo de corazn 375
aislamiento y cultivo de generales, para el aislamiento hemolticos presentan g/L
microorganismos aerobios y y cultivo de numerosos colonias translcidas u Peptona 10 g/L
anaerobios nutricionalmente microorganismos. opacas, grises, pequeas y Cloruro de sodio 5 g/L
exigentes a partir de una gran mucoides con Agar 15 g/L
variedad de muestras, como una zona de hemlisis. Otros pH final: 7.3 0.2
para la observacin de organismos que pueden
reacciones de hemlisis. producir hemlisis incluyen a
Listeria, varias La infusin de msculo de corazn y
onirebacterias,estafilococcos la peptona de casena proporcionan
Agar sangre de carnero hemolticos, E. coli y la fuente de nitrgeno, carbono,
al 5% Pseudomonas. Las colonias aminocidos y protenas. El extracto
de neumococcos aparecen de levadura provee vitaminas y
planas, lisas, translcidas, aminocidos esenciales. El cloruro
grisceas y algunas veces de
mucoides rodeadas por una sodio mantiene el balance osmtico
pequea zona verdosa de alfa y el agar es usado como agente
hemlisis, Las colonias de solidificante. Este medio est
estafilococcos tienen una relativamente libre de azcares
apariencia opaca, de color reductores los cuales interfieren en
blanco a amarillo y rodeadas las reacciones hemolticas de

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de una zona clara por la beta estreptococos. El patrn de las


hemlisis. E. coli Abundante reacciones hemolticas puede variar
sin hemolisis. S. aureus dependiendo del tipo de sangre
Abundante hemolisis Beta S. utilizada
pyogenes Abundante
hemolisis Beta S. pneumoniae
Abundante hemolisis Alfa S.
pneumoniae Abundante
hemolisis Alfa

Selectivo y diferencial La selectividad, est dada por Medio de cultivo utilizado Las enterobacterias pueden Pluripeptona 5 g/L
la sales biliares y el verde para el aislamiento de ser diferenciadas en base a su Extracto de carne 5 g/L
brillante, que inhiben el Salmonella spp. y de algunas capacidad de fermentar la Lactosa 10 g/L
desarrollo de bacterias Gram especies de Shigella spp. a lactosa . Las especies de Mezcla de sales biliares 8.5 g/L
positivas, de la mayora de los partir de heces, alimentos y Salmonella y Shigella son no Citrato de sodio 8.5 g/L
coliformes y el desarrollo otros materiales en los cuales fermentadoras de la lactosa y Tiosulfato de sodio 8.5 g/L
invasor del Proteus spp. se sospeche su presencia. forman colonias incoloras en Citrato frrico 1 g/L
Es diferencial debido a la el Agar SS. Las especies de Agar 13.5 g/L
fermentacin de la lactosa, y a Salmonella que son Verde brillante 0.00033 g/L
Agar salmonella la formacin de cido productoras de sulfuro de Rojo neutro 0.025 g/L
shigella sulfhdrico a partir del hidrgeno desarrollan pH final: 7.0 0.2
tiosulfato de sodio. colonias con centro obscuro. En este medio las sales biliares No. 3
Los coloformes son y el verde brillante actan como
parcialmente inhibidos. E. inhibidores de bacilos Gram
Coli produce colonias de positivos, de la mayora de bacilos
color rosa a rojo y pueden coliformesdel swarming en Proteus
presentar una zona de spp.,mientras que permiten
precipitado. Las colonias de elcrecimiento de Salmonella spp. El
Enterobacter aerogenes son tiosulfato de sodio y el citrato frico
cremosas de color rosa. permiten la deteccin de
Citrobacter y Proteus spp. laproduccin de H2S. La lactosa
Pueden crecer produciendo proporciona la fuente de

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colonias con centros de color carbohidratos, el rojo neutro y el


gris o negro debido a la verde brillanteactan como
produccin de H2 S. indicadores de pH y el agar es
Enterobacter faecalis es agregado como agente solidificante.
parcialmente inhibido
presentando colonias
incoloras. Klebsiella
pneumoniae Rosadas
cremosas y mucosas

selectivo y diferencial Las ventajas de este medio Es un medio selectivo para el 1-Fermentacin de manitol: Extracto de levadura 2.5 g/L
por sobre los otros aislamiento y diferenciacin agregar unas gotas de Triptena 10 g/L
mencionados anteriormente, presuntiva de estafilococos, prpura de bromocresol a las Gelatina 30 g/L
es que permite, en la misma en base a la produccin zonas donde se encuentran Lactosa 2 g/L
placa, de pigmentos, la las colonias sospechosas y en D-Manitol 10 g/L
obtener pruebas de fermentacin de manitol y la una zona de la placa donde Cloruro de sodio 75 g/L
identificacin presuntiva de hidrlisis de gelatina, a partir no hay desarrollo bacteriano. Fosfato dipotsico 5 g/L
Agar Estafilococos 110 especie como ser: desarrollo de alimentos y otras Comparar el color Agar 15 g/L
de pigmentos, fermentacin muestras. desarrollado entre estas dos pH final: 7.0 0.2
de manitol e hidrlisis de la zonas.
gelatina. En 1942 Koch Prueba positiva: cambio de En el medio de cultivo, el extracto de
report que los estafilococos color del indicador del medio levadura y la triptena aportan los
crecan selectivamente en en la zona de crecimiento nutrientes para el desarrollo de
medios con una bacteriano. El medio sin microorganismos. La gelatina es el
concentracin alta de cloruro desarrollo de sustrato de la enzima gelatinasa. La
de microorganismos permanece lactosa y el manitol son los hidratos
sodio. Posteriormente sin cambio. de carbono fermentables. El cloruro
Chapman, Lieb y Curcio Prueba negativa: no hay de sodio, se encuentra en alta
reportaron que las cepas diferencias de color entre las concentracin, para inhibir el
tpicas de estafilococos zonas de crecimiento desarrollo de la flora acompaante
patgenos fermentan el bacteriano y la zona sin excepto Staphylococcus spp.,
manitol, producen pigmento y inocular. logrndose as un medio selectivo

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licuan la gelatina. Chapman 2-Hidrlisis de la gelatina: para el desarrollo de estos


utiliz estas propiedades para cubrir la placa 5 ml de una microorganismos.
desarrollar un medio selectivo solucin saturada de sulfato
y de amonio y colocar en
diferencial llamado Agar estufa, a 35-37 C, en
Estafilococos 110. aerobiosis durante 10
minutos.
Positiva: halo transparente
alrededor de las colonias.
Negativa: ausencia de halo
transparente alrededor de las
colonias.

Altamente selectivo : por su Se trata de un medio Es recomendado para el Las bacterias que crecen en Extracto de carne 1 g/L
alto contenido de sal y altamente selectivo debido a aislamiento de estafilococos un medio con alta Pluripeptona 10 g/L
diferencial: porque diferencia su alta concentracin salina. patognicos a partir de concentracin de sal y d-Manitol 10 g/L
los estafilococos Los estafilococos coagulasa muestras clnicas, alimentos, fermentan el manitol, Cloruro de sodio 75 g/L
fermentadores de manitol. positiva hidrolizan el manitol productos cosmticos y otros producen cidos, con lo que Agar 15 g/L
acidificando el medio; las materiales de importancia se modifica el pH del medio y Rojo de fenol 0.025 g/L
colonias aparecen rodeadas sanitaria. vira el indicador de pH del pH final: 7.4 0.2
de una zona amarilla brillante. Tambin, este medio puede color rojo al amarillo.
Los estafilococos coagulasa utilizarse para el cultivo de Los estafilococos crecen en En el medio de cultivo, el extracto de
negativos, presentan colonias especies halfilas de Vibrio, si altas concentraciones de sal, carne y la pluripeptona, constituyen
rodeadas de una zona roja o no se dispone de medios y pueden o no fermentar el la fuente de carbono, nitrgeno,
Agar sal y manitol prpura. Las colonias apropiados (TCBS Medio, manitol. vitaminas y minerales, el manitol es
sospechosas, se repicarn en Medio Marino, etc.), aunque Los estafilococos coagulasa el hidrato de carbono fermentable,
un medio sin exceso de algunas especies pueden no positiva fermentan el manitol el cloruro de sodio (que se
cloruro de sodio para desarrollar. y se visualizan como colonias encuentra en alta concentracin) es
efectuarles, posteriormente, amarillas rodeadas de una el agente selectivo que inhibe el
la prueba de la coagulasa. zona del mismo color. desarrollo de la flora acompaante,
Los estafilococos que no y el rojo fenol es el indicador de pH.
fermentan el manitol, se El agar es adicionado como agente
visualizan como colonias solidificante.
rojas, rodeadas de una zona
del mismo color o prpura. S.

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aureus Colonias pequeas a


medianas con zonas amarillas
alrededor Micrococos
Colonias grandes de color
naranja a blanco Otros
estafilococos Colonias
pequeas de color rojo sin
cambio en el color del medio
Bacterias Gram
negativas Inhibidas o muy
pocodesarrollo Estreptococos
Sin crecimiento

Ligeramente selectivo: Para el aislamiento y la Los coliformes fermentan la Digerido pptico de 10 g/L
debido a la combinacin del diferenciacin de la familia lactosa, produciendo colonias tejido animal
sulfito de sodio con fucsina Enterobacteriaceae y diversos color rosa oscuro a rojizo con Lactosa 10 g/L
bsica, lo cual ocasiona la bacilos gram-negativos en un brillo metlico verdoso Fosfato dipotsico de 3.5 g/L
supresin parcial de los muestras clnicas y no clnicas. iridiscente y una coloracin hidrgeno
Agar ENDO microorganismos gram- similar en el medio. Las Sulfito sdico 2.5 g/L
positivos y diferencial: colonias de microorganismos Fucsina bsica 0.5 g/L
porque diferencia los que que no fermentan la lactosa Agar 15 g/L
fermentan lactosa de los que son incoloras o de color rosa pH final: 7,4 0,2
no. plido en contraste con el Las peptonas proveen la fuente de
fondo rosa claro del medio. nitrgeno. El sulfito de sodio y la
fucsina bsica actan como
inhibidores . La lactosa proporciona
la fuente de energa, las fosfatos
actan como buffer y el agar como
agente solidificante.

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medio selectivo pues se la mezcla de sales biliares y el Recomendado para el cultivo Los microorganismos lactosa
utiliza para el aislamiento de cristal violeta son los agentes y aislamiento de positiva dan colonias de color Peptona 17 g/L
bacilos Gram negativos de selectivos que inhiben el microorganismos Gram rosa con o sin zona de Pluripeptona 3 g/L
fcil desarrollo, aerobios y desarrollo de gran parte de la negativos a partir de muestras precipitado alrededor. Lactosa 10 g/L
anaerobios facultativos. y flora Gram positiva. clnicas, de alimentos, agua, Los microorganismos lactosa Mezcla de sales biliares 1.5 g/L
diferencial porque Permite Por fermentacin de la productos lcteos y negativos dan colonias Cloruro de sodio 5 g/L
diferenciar bacterias que lactosa, disminuye el pH productos farmacuticos. En incoloras o de color muy Agar 13.5 g/L
utilizan o no, lactosa en alrededor de la colonia. Esto este medio se aislan y claro. Rojo neutro 0.03 g/L
muestras clnicas, de agua y produce un viraje del color del diferencan bacilos entricos Escherichia coli: Rojas con Cristal violeta 0.001 g/L
alimentos. indicador de pH (rojo neutro), Gram negativos halo turbio. Klebsiella pH final : 7.1 0.2
la absorcin en las colonias, y fermentadores y no pneumoniae: Rosadas
la precipitacin de las sales fermentadores de la lactosa mucosas. Salmonella Las peptonas, aportan los nutrientes
biliares. typhimurium, Shigella flexneri necesarios para el desarrollo
y Proteus mirabilis: Incoloras, bacteriano, la lactosa es el hidrato
transparentes. Enterococcus de carbono fermentable, y la mezcla
faecali: Diminutas, incoloras, de sales biliares y el cristal violeta
opacas son los agentes selectivos que
inhiben el desarrollo de gran parte
Agar Mac Conkey de la flora Gram positiva, el
indicador de pH es rojo neutro.
Siembra: Inocular las placas por
estra o con hisopo, asegurndose de
que con cualquiera de los dos
mtodos se tengan colonias aisladas.
Incubar las placas a 35 0.2C
durante 18 a 24 hrs. Si no hay
desarrollo a las
24 hrs, reincubar las placas por 24
horas ms.

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