MEDICAMENTOS

BIOTECNOLGICOS Y SU
EVALUACIN
Dr. Francisco Javier Flores Murrieta.
Jefe de la Unidad de Investigacin en Farmacologa,
Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias y Profesor
Titular de la Seccin de Estudios de Posgrado e
Investigacin de la Escuela Superior de Medicina del IPN.
E-mail: fjfloresmurrieta@yahoo.com.mx
 Biotecnologa

Uso de organismos vivos para la

elaboracin de productos de utilidad
 MEDICAMENTOS
BIOTECNOLGICOS

Iniciativas teraputicas generadas a partir

de procesos biolgicos
Medicamentos basados en molculas
biolgicas incluyendo protenas y cidos
nucleicos
Diferentes a la sntesis qumica de
molculas
 MEDICAMENTOS
BIOTECNOLGICOS
I. Protenas recombinantes: Las protenas
producidas por cualquier ente biolgico
procariote o eucariote al que se le introduce, por
tcnicas de ingeniera gentica, una secuencia
de cido desoxirribonucleico que las codifica;
II. Anticuerpos monoclonales: Las
inmunoglobulinas intactas producidas por
hibridomas, inmunoconjugados, fragmentos de
inmunoglobulinas y protenas recombinantes
derivadas de inmunoglobulinas;
 MEDICAMENTOS
BIOTECNOLGICOS
III. Pptidos sintticos: Los pptidos constituidos
por menos de cuarenta aminocidos producidos
por tcnicas de biotecnologa molecular;
IV. cidos nucleicos sintticos o de plsmidos:
Los cidos nucleicos obtenidos de plsmidos
naturales o modificados por tcnicas de
ingeniera gentica, y
V. Los dems que, en su caso, determine
mediante acuerdo la Secretara, conforme a los
avances tcnicos y cientficos.
 Clasificacin

Anticuerpos.
Protenas.
Pptidos.
 Clasificacin

Anticuerpos Monoclonales.
Interleucinas.
Interferones.
Factores Estimulantes de Colonias.
Vacunas.
Terapias Gnicas.
 Que son los Mab?
Son anticuerpos producidos por un nico clon,
linfocitos B ( derivado de una misma clula), son
qumicamente puros y que pueden producirse a
voluntad.
Antisuero convencional formado por una mezcla
variada de inmunoglobulinas que nunca puede
ser reproducida: Policlonales.
 Caractersticas

Policlonales Monoclonales
1. Mezcla heterognea. 1. Qumicamente puros.
2. Variacin. 2. Invariables.
3. Irrepetibles. 3. Produccin ilimitada.
4. Se usan antigenos. 4. No se necesitan Ags.
5. Reconocen varios epitopos Purificados.
6. Fcil produccin 5. Muy especficos.
7. Baratos. 6. Un solo isotipo.
7. Produccin compleja.
8. Caros
 En 1975 George Kohler y Cesar Milstein
describieron la tcnica de produccin de
hibridomas para la obtencin de Mab.
Se les concedi el Premio Nobel en 1984.
Trabajo de gran impacto en la investigacin,
desarrollo e innovacin de todos las reas
que emplean la unin antigeno-anticuerpo.
Tecnologa anticuerpos
monoclonales
 Interleucinas

Protenas solubles de bajo peso molecular

Crecimiento celular, inmunidad, diferenciacin
tisular, inflamacin, entre otros
Son el principal medio de comunicacin intracelular
ante una invasin microbiana.
33 interleucinas, las cuales difieren entre si tanto
desde el punto de vista qumico como biolgico.
 Interferones
Protena la mayora de los animales como
respuesta a agentes externos.
En los seres humanos hay tres tipos principales
de Interfern:
El primer tipo est compuesto por 14
diferentes isoformas del Interfern. Alfa, y
otras individuales del beta, omega, epsilon y
kappa.
El segundo es el Interfern gamma.
Tercera clase el Interfern lambda.
 Interferones

Acciones bsicas:
Impide la replicacin en clulas infectadas
que an no han sido destrudas por la accin
vrica.
Activa linfocitos especficos, NK capaces de
reconocer clulas infectadas por el virus y
eliminarlas.
 Interferones

Conjuntamente con quimio y radioterapia

para tratamiento del cncer.
Hepatitis B y C.
Esclerosis Mltiple.
Shock Sptico.
 Factores Estimulantes de
Colonias
Estimulan las clulas madre de la mdula
sea para que se dividan y se conviertan
en leucocitos, plaquetas y glbulos rojos.
Tratamiento para cncer y otras patologas
daan este proceso.
 Factores Estimulantes de
Colonias
Los mas utilizados son:
El G-CSF ( Filgastrim) y el GM-CSF
(Sargramostim): aumenta el N de
leucocitos.
La Eritropoyetina (Epoiten)puede
aumentar el N de glbulos rojos y
reducir la necesidad de transfusiones.
La Interleucina-11(Oprelvekin) ayuda al
organismo a producir plaqueta y reduce
la necesidad de transfusiones.
Aspectos importantes de drogas
basadas en protenas

1) Antigenicidad.
2) Estabilidad.
3) Administracin.
 Antigenicidad
Protenas extraas pueden inducir reacciones
alrgicas

Administrar protenas humanas

Anticuerpos humanizados
i) Anticuerpos quimricos.
ii) Anticuerpos producidos por ratones
transgnicos.
 Vida de drogas proteina-
recombinantes
Physical
Protein Expiration Dating Period
Form
Humulin HI liquid 2 years (2-8 C)
Orthoclone
MuMAb liquid 1 year (2-8 C)
OKT3
Roferon-A IFN-a2a solid 3 years (2-8 C)

Intron A IFN-a2b solid 3 years (2-8 C)

Activase TPA solid 2.5 years (2-8 C)

Protropin hGH solid 2 years (2-8 C)

Estabilidad del TNF1 almacenado
(2-8C)

Time in Storage
Potency
(months)
0 100 %
3 100 %

6 70 %
9 60 %
12 50 %
 Administracin del
medicamento
Problemas
Desnaturalizacin / alteracin qumica.
Depuracin heptica.

Solucin: Mtodos alternativos

Parenteral.
Nasal.
Implantes.
Inhaladores: Insulina.
TERAPIA ANTI-IgE
 La prevalencia de asma se relaciona
con el nivel de IgE-srica *
Prevalencia de asma (%)
40 Edad 6 a <35aos
Edad 35 a <55 aos
30
Edad 55+ aos

20

10

0
<1.5 1.5 <0.5 0.5 <0.5 0.5 <1.5 1.5+
Rangos de IgE Z puntaje en suero
* Estandarizado para edad y sexo Burrows B et al. N Engl J Med 1989
 Terapias Anti-IgE: Omalizumab
anticuerpo monoclonal anti-IgE
Basado en esqueleto de IgG1
humano
5% de aminocidos de ratn
antibody complementarity-
determining regions (Mw~150kD)
Fija IgE libre en la circulacin
Evita que IgE se fije a receptores de
alta y baja afinidad (FceRI y II)
Riesgo mnimo de anafilaxia
Forma pequeos complejos
inactivos de omalizumab:IgE
El anticuerpo no fija complemento
 Omalizumab detiene la cascada
alrgica
Omalizumab forma complejos
con IgE libre
Linfo B estimulado
por alergeno
produce IgE

IgE
FcRI

Omalizumab
Clula cebada
Linfo B
 Pacientes que pudieron suspender
CE inhalados por completo
Pacientes (%) Omalizumab
60 Placebo **
50
***
***
40

30

20

10

0
Estudio 008 Estudio 009 Estudio 010
Asma adultos Asma adultos Asma nios
**p<0.01, ** p<0.001 vs placebo
Fuente: 008, 009 and 010 CTR
EVALUACIN DE LOS
BIOCOMPARABLES
Bioequivalencia de dos formulaciones, innovador y
genrico, de un medicamento convencional
(molcula pequea)
Concentracin plasmtica (mg/L)

Tiempo (horas)

Flores-Murrieta, Castaeda-Hernndez y Medina-Santillan, 2002

Determination of conventional
drugs in plasma

HPLC
Diclofenac

Diclofenac
 Peso molecular en kDa
Conventional Drugs Biotherapeutic Products
Aspirin 0.180 Insulin 5.8
Adrenaline 0.183 Filgrastim 18.8
Diclofenac 0.296 Interferon alpha 19.5
Paroxetine 0.329 Somatotropin 22
Ranitidine 0.351 Erythropoietin 30.4
Doxorubicin 0.580 Rituximab 145
Levofloxacin 0.740 Trastuzumab 146
Tacrolimus 0.804 Infliximab 149
Paclitaxel 0.854 Bevacizumab 149
Diclofenac

Eritropoyetina
 EVALUACIN DE LOS
BIOCOMPARABLES
ARTCULO 177 Bis 2. Para obtener el registro sanitario
de medicamentos biotecnolgicos biocomparables se
requiere presentar solicitud en el formato oficial, que
para tal efecto se publique en el Diario Oficial de la
Federacin, a la que se anexar la documentacin
contenida en las fracciones I a IX del artculo 177 y los
estudios preclnicos y clnicos que seale la Secretara
como estudios de biocomparabilidad, estudios de
inmunogenicidad y reportes de eventos adversos, y
otros que la Secretara determine, previa opinin del
Comit de Molculas Nuevas, previa consulta que ste
realice al Subcomit de Evaluacin de Productos
Biotecnolgicos
 EVALUACIN DE LOS
BIOCOMPARABLES
Los estudios in vitro. No se requerirn de
stos cuando la Secretara, con base en la
opinin del Comit de Molculas Nuevas,
previa consulta que ste realice al
Subcomit de Evaluacin de Productos
Biotecnolgicos, as lo determine
 EVALUACIN DE LOS
BIOCOMPARABLES
Estudios preclnicos:
a. Reporte comparativo del efecto
farmacodinmico y actividad relevante para la
aplicacin clnica;
b. Reporte comparativo de toxicologa
(llevando a cabo las pruebas que apliquen
incluyendo la toxicocintica).
 EVALUACIN DE LOS
BIOCOMPARABLES
Estudios clnicos:
Estudios comparativos de farmacocintica
(incluyendo parmetros de absorcin y
eliminacin).

Podrn realizarse en voluntarios sanos o

en pacientes.
 EVALUACIN DE LOS
BIOCOMPARABLES
Estudios de farmacodinamia con las siguientes
caractersticas:
Los marcadores acordes a la relevancia para
demostrar eficacia teraputica del producto;
b. El efecto farmacodinmico del medicamento
biotecnolgico biocomparable y del medicamento
biotecnolgico de referencia debe compararse en
una poblacin donde puedan observarse las
posibles diferencias y no se utilIzar la dosis que
alcanza el efecto mximo.
c. El diseo y duracin de los estudios deben
justificarse.
 EVALUACIN DE LOS
BIOCOMPARABLES
Los estudios combinados de farmacocintica
y farmacodinamia pueden proporcionar
informacin de utilidad sobre la relacin entre
la exposicin y el efecto, y segn lo determine
el subcomit de biotecnolgicos del Comit
de Molculas Nuevas de la COFEPRIS, con
estudios en los que se obtengan resultados
satisfactorios puede ser suficiente para el
registro.
 EVALUACIN DE LOS
BIOCOMPARABLES
Los estudios clnicos de eficacia y seguridad
comparativa
Se debern establecer los parmetros y
mrgenes de biocomparabilidad
Se deber cumplir con la normatividad
aplicable de buenas prcticas de
investigacin clnica que aseguren la validez
cientfica del estudio,
 EVALUACIN DE LOS
BIOCOMPARABLES
Para aquellos medicamentos en donde la
respuesta inmune pudiera afectar a la
protena endgena o a su funcin biolgica,
las pruebas de anticuerpos deben realizarse
en los ensayos clnicos de seguridad,
tomando en cuenta el papel que pudieran
tener la hipersensibilidad, reacciones de
infusin, la autogenicidad y prdida de la
eficacia.
 Posibles Problemas al Escalar
Posibilidad de diferencias
1. En el corte del gene.
2. En la introduccin del DNA a la clula.
3. En la unin al DNA del gene con el celular.
4. En el tipo de clula (cepa o clona).
5. En los eventos postransduccin.
6. En la conformacin de la protena.
7. En la purificacin de la protena.
8. En el vehculo de la formulacin.
EL PRODUCTO ES EL PROCESO
Una nueva estrategia para el tratamiento de
enfermedades crnico degenerativas: Los
anticuerpos monoclonales
Linfoma con linfocitos B con CD20
y terapia con anticuerpos antiCD20
Produccin de anticuerpos monoclonales
 Baja afinidad
Linfocitos Clona 1 Anticuerpo 1

Baja afinidad

Anticuerpo 2
Linfocitos Clona 2
Antgeno
CD20

Alta afinidad

Linfocitos Clona 3
Anticuerpo 3
Afinidades diferentes, dosis diferentes

Anticuerpo de alta afinidad

50% de unin
Unin del antgeno

Anticuerpo de baja
afinidad

Dosis elevada

Dosis baja

Concentracin de anticuerpo
Different clones: Different selectivities
 Importancia de la Formulacin en
la Biodisponibilidad

A pesar de ser inyectables, la biodisponibilidad

de biomolculas puede ser modificada por el
vehculo.
El ejemplo clsico es la insulina: Hay formas
de accin rpida, intermedia y lenta.
Por lo tanto, es crucial tener el vehculo
adecuado para lograr eficacia y evitar
toxicidad.
Eritropoyetina: Formulacin para
uso humano

Eritropoyetina Albmina
 El caso Eprex
En 1998, la EMEA ordena retirar componentes humanos
de medicamentos inyectables.

Propsito: evitar contaminacin con VIH y enfermedad

de Creutzfeld-Jakob.

Resultado, en las formulaciones de eritropoyetina se

sustituye el estabilizante habitual, la albmina humana,
por un polisacrido, el polisorbato 80, y glicina (Eprex),
excipientes comunes en formulaciones de molculas
pequeas.

Comenzaron a aparecer casos de anemia del tipo de

aplasia pura de clulas rojas en Europa.
Lut S. Lessons from Eprex for biogeneric firms. Nature Biotechnology 2003; 21: 956 957.
 Epoyetina y PRCA
Causas? Investigacin Accin
80
asociados con epoyetina alfa
Nmero de casos de PRCA

70 EPO SC
60 retirada
50
40
30
20
10
0
<1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003
Ao
EPO alfa (Eprex) fuera de EUA EPO alfa (Epogen /Procrit) en EUA

Johnson & Johnson Pharmaceutical Research & Development LLC. Summary of PRCA case reports
Available at: http://www.jnj.com/news/jnj_news/1021024_095632.htm. Accessed December 15, 2003
 FARMACOVIGILANCIA
ARTCULO 81 Bis. La farmacovigilancia de los
medicamentos biotecnolgicos deber
realizarse de conformidad con la norma
correspondiente. Dicha farmacovigilancia
deber permitir una clara identificacin del
medicamento biotecnolgico, refirindose
especficamente a su fabricante, a la
Denominacin Comn Internacional, a la
denominacin distintiva y al nmero de lote.
Asimismo, esta farmacovigilancia deber facilitar
la identificacin de las terapias biotecnolgicas
administradas en todas las etapas del
tratamiento.
Uso de biosimilares y originales
Original
Paciente A

Biosimilar
OK
Paciente B

Original Biosimilar
Paciente C

Biosimilar Original
NO
Paciente D

El uso teraputico debe permitir la farmacovigilancia con datos sin confusin.

 Resumen y Conclusiones (1)
1. En el caso de los frmacos tradicionales,
la bioequivalencia se puede determinar a
partir de las concentraciones plasmticas,
ya que la sustancia qumica y sus
propiedades estn perfectamente definidas.
2. Para las biomolculas, ste no es el caso.
Dadas las caractersticas de la preparacin de
estos medicamentos. El producto es el
proceso.
 Resumen y Conclusiones (2)
3. Solo aquellos biocomparables que cumplan
con los requisitos legales pueden ser
usados como sustituibles con respecto al
original.
4. Sustituible quiere decir que en una licitacin
se puede adquirir el biocomparable.
5. Nunca intercambiar en el mismo paciente.
Un mismo medicamento (original o
biocomparable) por paciente, para permitir
la farmacovigilancia.
 Resumen y Conclusiones (3)
6. Un biocomparable puede requerir de una
dosificacin diferente al original por
variaciones en afinidad. Por lo tanto, es
un producto diferente y debe ser
caracterizado.
MUCHAS GRACIAS
POR SU ATENCIN