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III) La informacin celular 5) Replicacin del ADN

5) LA REPLICACIN DEL ADN

)CMO ES EL PROCESO DE REPLICACIN DEL ADN?

El ADN es una molcula formada por dos


hebras complementarias y antiparalelas. Una
de las primeras dudas que se plantearon fue Replicacin

la de cmo se replicaba el ADN. A este


respecto haba dos hiptesis:
ADN original ADN original ADN copia
10) El ADN se replica de manera conserva-
tiva. Esto es, cada hebra de ADN forma una Fig. 1 Replicacin conservativa.
copia y una clula hija recibe la molcula
original y la otra clula recibe la copia.
20) El ADN se replica de manera semiconser-
vativa. Cada hebra de ADN forma una hebra Replicacin

complementaria y cada clula hija recibe una


molcula de ADN que consta de una hebra
original y de su complementaria sintetizada
de nuevo. ADN original ADN copia
y original
ADN original
y copia

Esta controversia fue resuelta por Fig. 2 Replicacin semiconservativa.


MESELSON y STAHL con una serie de
elegantes experiencias.

EXPERIENCIAS DE MESELSON Y STAHL.

3
3

2 2

1
1

15 N- 15N

15 N- 15N 14 N- 14N

Se cultivan bacterias E. coli en un medio con 15


N (nitrgeno A continuacin, se cultivan las bacterias en nitrgeno 14 (14N)
pesado) durante cierto tiempo para que todo el ADN est ms ligero durante 30 minutos, lo que dura un ciclo de replica-
formado por dos hebras de 15
N (15 N-15 N) ms pesadas. Si se cin. Si la hiptesis de la sntesis conservativa fuese la co-
centrifu ga, este ADN ms pesado migra hacia el fondo del tubo rrecta, se debera obtener lo que se ve en la figura, una banda
y se obtiene el resultado que se observa en la figura. de ADN pesado (15 N-15 N) y otra con ADN ligero (14 N-14 N) pero...

3 3

2 2

1 1

14N -15N 15N -14N 14N -15N


14N- 14N 14N- 14N 15N -14N

.. lo que se obtiene en realidad es lo que se observa en la Adems, si se da otro ciclo de replicacin en 14


N, se obtiene
figura: una sola banda en posicin intermedia, pues est una banda de ADN mixto ( N- N) y otra de ADN (14 N-14 N), lo
14 15

formada por ADN mixto (15 N-14 N). Esto es, todas las clulas hijas que tambin est de acuerdo con la hiptesis de la sntesis
tienen un ADN con una hebra con 15
N y otra con 14
N. La semiconservativa.
hiptesis de la sntesis semiconservativa es la correcta.

J. L. Snchez Guilln Pgina III-5-1


III) La informacin celular 5) Replicacin del ADN

LA REPLICACIN SEMICONSERVATIVA DEL


ADN EN EUCARIOTAS

Cuando una clula se divide, o cuando se


originan los gametos, las nuevas clulas que Cromosoma: arriba, en procariotas, abajo, en eucariotas.

se forman deben contener la informacin


gentica que les permita sintetizar todas las
enzimas y el resto de las prote nas
necesarias para realizar sus funciones vitales.
sta es la principal razn por la que el ADN
debe replicarse. Fig. 3 Replicacin del ADN en procariotas
y en eucariotas. En procariotas slo hay un
ojo de replicacin, mientras que en eucariotas
La replicacin del ADN es el proceso segn hay varios.
el cual una molcula de ADN de doble hlice
da lugar a otras dos molculas de ADN con
la misma secuencia de bases.

En la clula procaritica la replicacin parte


de un nico punto y progresa en ambas
direcciones hasta completarse. En la clula
eucaritica el proceso de replicacin del Fig. 4 Microfotografa al MET de un
ADN no empieza por los extremos de la fragmento de la doble hlice de un cromosoma
de eucariota replicndose.
molcula sino que parte de varios puntos a
la vez y progresa en ambas direcciones
formando los llamados ojos de replicacin.
Primero se separan las dos hebras y, una Ojos de replicacin

vez separadas, van entrando los


nucletidostrifosfato complementarios de
cada uno de los de las hebras originales del Cromosoma
(doble hlice de ADN)
ADN. Las enzimas ADN polimerasas los replisomas

unen entre s formando una hebra de ADN


complementaria de cada una de las hebras Fig. 5 Cromosoma de eucariota
replicndose. El replisoma es un complejo
del ADN original. Se dice que la sntesis de formado por todas las enzimas que intervienen
ADN es semiconservativa porque cada una en el proceso de replicacin.
de las molculas de ADN " hijas" est forma-
da por una hebra de ADN original y otra
complementaria sintetizada de nuevo. Hebra de ADN
A
C ATP asa
T

Es de destacar que la direccin en la que Helicasa

progresa la replicacin es la misma en


ambas hebras. Ahora bien, las enzimas que
unen los nucletidos slo pueden efectuar la
unin en direccin 5' 3'. Esto nos indica
que ambas hebras, al ser antiparalelas, A Protenas
Topoisomerasa

deben de sintetizarse de diferente manera. G estabilizadoras


T ADN polimerasas

a) Sntesis continua de la hebra en direccin Fig. 6 Enzimas y otras protenas que


5' 3'. La sntesis de esta hebra no plantea forman el replisoma. Se muestra en este
ningn problema. As, una vez separadas esquema un detalle del recuadro de la figura
anterior.
ambas hebras, la ADN pol. III (una de las

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III) La informacin celular 5) Replicacin del ADN

enzimas que unen los nucletidos) va a


elongar la cadena en direccin 5' 3' a partir
de un primer o fragmento de ARN que
despus ser eliminado. A

U
T

A
C

G
G

C
A

T
A

T
C

G
C

G
G

C
T

A
T

A
G

C
C
G
A
T
C
G
C G T T G C A C

b) Sntesis discontinua. La hebra comple-


mentaria no se va a replicar en sentido
3' 5' sino que se replica discontinuamente Fig. 7 Sntesis continua.
en direccin 5' 3'. Los diferentes fragmen-
tos sintetizados, llamados fragmentos de
Okazaki, son posteriormente unidos entre s.

El proceso es complejo y consiste en lo si-


guiente: En primer lugar se sintetiza un pe-
queo fragmento de ARN, fragmento deno-
minado primer. Partiendo de este primer se A T C G A A C C G T T G C A C C G T T G C

sintetiza un fragmento de ADN en direccin T A G C T U G G C C G T G G C A A

5' 3'. Al llegar al primer del fragmento 1er fragmento sintetizado 2 fragmento sintetizado

A A
anteriormente sintetizado, ste es degradado
y se rellena el hueco con ADN. Se dice que
Fig. 8 Sntesis discontinua.
la replicacin es discontinua porque el ADN
se va a ir sintetizando en fragmentos que,
posteriormente, son soldados uno al otro.

A T C G A T C G G G C

T A G C T A G C C C G

A T C G A T C G G
T A G C T A G C C

A U C G A T C G G G

T A G C T A G C C C

Fig. 9 Replicacin del ADN. Acontecimientos que se dan en un replisoma.

J. L. Snchez Guilln Pgina III-5-3

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