Daniel E.

Pleguezuelo
MIR Inmunologa
Servicio de Inmunologa Clnica
El Proteinograma es el resultado de la aplicacin de la tcnica de electroforesis a una solucin con protenas. Electroforesis es un mtodo para
separar sustancias al aplicar un campo elctrico dependiendo de su tamao, forma, carga y punto isoelctrico
 V INTENSIDAD CAMPO ELCTRICO
E
L
O
C
I
D
A
D FUENTE DE ALIMENTACIN

D
E MOVILIDAD ELECTROFORTICA

M
I
G
R
A
C
I
CARGA INICA
Las protenas se separan en funcin de las caractersticas enumeradas anteriormente, y lo hacen as porque stas
N
definen una diferente velocidad de migracin, que depende de la intensidad del campo elctrico y de la movilidad
Vs
FRICCIN (TAMAO y
electrofortica. Esta ltima es directamente proporcional a la carga inica que presente la protena e inversamente VISCOSIDAD)
proporcional a las fuerzas de friccin: tamao y viscosidad.
Para realizar la tcnica se necesita un aparato que conste de un gel (medio en el que se movern las protenas), tampn o buffer (que
proporciona los iones y el pH para la separacn de las protenas), fuente de alimentacin con dos electrodos, uno positivo y otro negativo, un
peine para fabricar los pocillos y estos pocillos, donde se depositarn las muestras.
En la electroforesis nativa se aplica un campo elctrico sobre un medio con un pH definido (bsico). Las protenas, depositadas en los pocillos, se
desplazarn en funcin de sus caractersticas fsicas anteriormente enumeradas y podrn ser diferenciadas gracias a una tcnica de tincin.
 http://www.youtube.com/watch?v=IWZN_G_pC8U

SDS es un compuesto qumico que destruye la estructura terciaria y cuaternaria de las protenas, otorgando a las protenas una carga negativa
proporcional al tamao de las mismas. Al aplicar el campo elctrico, las protenas se separarn por tamao.
En la electroforesis capilar el medio en el que se separan las protenas no es un gel sino un capilar artificial. A l llega la muestra mediante
fuerzas hidrostticas y se separarn tambin en funcin de sus caractersticas fsicas, a lo largo del capilar.
 H+ pH
del medio
H+

H+
H+

H+
H+
H+
Las protenas pueden tener carga global positiva, negativa o cero. En el Isoelectroenfoque las protenas se separan en funcin de su capacidad
para adquirir protones, que sern incorporados a los residuos aminoacdicos. Esta capacidad para ganar protones en un medio con un gradiente
de pH, har que las protenas se desplacen hasta un punto en el que la carga neta de cada protena sea cero, lugar en el que detendr su
movimiento por haber alcanzado su punto de equilibrio elctrico.
 H+ pH
del medio
H+

H+
H+

H+
H+
H+
Hacia dnde se mueven las protenas? Si el pH en el que se encuentra la protena es inferior a su punto isoelctrico, la protena estar cargada
positivamente y se desplazar perdiendo protones hasta equilibrar sus cargas y quedar fija en el punto isoelctrico.
Si el pH del medio es mayor que el que define el punto isoelctrico, la protena se cargar negativamente.
Bandas del espectroelectrofortico (abajo) y representacin grfica (arriba). La primera banda por la izquierda corresponde a la fraccin de
albminas. La segunda a la de Alfa1, la tercera a Alfa2, la cuarta y quinta a Beta1 y Beta2 y la ltima por la izquierda a la fraccin gamma.
 Albmina
Pre-Albmina

Enfermedades Hepticas
Sndrome Nefrtico
Embarazo
Malnutricin
Deshidratacin Hemorragias
Enteropatas
Malabsorcion
LES
Quemaduras
 Alfa-1 Antitripsina
Alfa-1 Glicoprotena cida
Alfa-1 Fetoprotena
Alfa-1 Lipoprotena (HDL)
Transcortina
Protena Fijadora de Tiroxina

Reaccin de Fase Aguda

Infeccin, Inflamacin, Fiebre, Neoplasias Dficit de Alfa-1 Antitripsina
Embarazo Enfermedades Hepticas
 Haptoglobina
Alfa-2 Macroglobulina
Ceruloplasmina
Alfa-2 Lipoprotena (VLDL)
PCR*

Reaccin de Fase Aguda

Infeccin, Inflamacin, Fiebre, Neoplsicas
Insuficiencia adrenal
Tratamiento con esteroides
DM avanzada
Sndrome Nefrtico
EII
Malnutricin
Anemia Megaloblstica
Enteropatas pierde-protenas
Enfermedades Hepticas
Enfermedad de Wilson
 Hipotiroidismo
CBP
Ictericia Obstructiva
Diabetes Mellitus
Enfermedad de Cushing Hipocolesterolemia
PAN Enfermedades Renales
Transferrina: Anemia Ferropnica (malnutricin proteica)
Transferrina: Embarazo (3T)
GAMMA-1: GAMMA-2:
IgA IgM
IgA s IgG
IgD IgE

Amiloidosis
Infecciones crnicas granulomatosas
LLC
Cirrosis
Agammaglobulinemia
Enfermedad de Hodgkin
Hipogammaglobulinemia
Linfomas
Mieloma Mltiple
Conectivopatas
Macroglobulinemia de Waldenstrom
Monoclonal Policlonal
Normal Enf. Wilson
OCONNELL T et Al. Understanding and Interpreting Serum Protein Electrophoresis.
American Family Physician. January 1, 2005. Volume 71, Number 1.
http://www.aafp.org/afp/2005/0101/p105.html

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Cdiz-Lajanda. http://www.dscadizlajanda.com/images/archivos/proteinas.pdf

David E. Grafin. Gel electrophoresis of proteins. Essential cell biology. Volume 1. Oxford
University Press 2000.