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Para definir las distintas condiciones ambientales que los laboratorios de biotecnologa y de tipo
biolgico deben reunir conforme a lo establecido en las disposiciones legales vigentes. A este respecto,
se pueden considerar las siguientes actividades laborales:
Para que puedan darse unas buenas condiciones de orden y limpieza es necesario tambin respetar las
dimensiones mnimas de los espacios de trabajo, permitiendo a trabajadores realizar sus actividades sin
riesgos para su seguridad y salud y en condiciones ergonmicas aceptables. Las dimensiones mnimas
que deben reunir tales espacios son las siguientes:
La separacin entre los elementos materiales existentes en el laboratorio deber ser suficiente para que
los trabajadores puedan realizar su labor en condiciones de seguridad, salud y bienestar.
Cuando el espacio libre de que se disponga en el laboratorio no permita a los trabajadores la libertad de
movimientos requerida para el desarrollo de su actividad, deber disponerse de un espacio adicional
suficiente en las inmediaciones del puesto de trabajo.
Desinfeccin de plantas
Esterilizacin de material
Sala de lavado de material (potes, pinzas, botellones, etc.)
Sala de ingreso general
En la pre-cmara de ingreso al laboratorio (sala de ingreso general): los operarios dejan prendas
portadoras de caros como por ejemplo bufandas, ropa de lana en general y se procede a la colocacin
de cubre calzado.
Una vez dentro del laboratorio se coloca mascarilla, botas, y guantes de ltex (estas prendas son
indispensables para movilizarse dentro de las instalaciones).
Pre-cmara de ingreso a la cmara de cultivo: en dicho sector los operarios trabajan con mascarilla,
botas, guantes de ltex, en esta zona se tienen que evitar los movimientos bruscos para no generar flujo
turbulento de aire y eliminar la menor cantidad de partculas por parte del operador.
rea de cubculos
rea de Laboratorio
rea de Siembra
rea de incubacin de cultivos
Dado que ningn laboratorio puede ejercer un control absoluto sobre las muestras que recibe, el
personal puede verse expuesto a organismos de grupos de riesgo ms altos de lo previsto. Esa
posibilidad debe tenerse presente en la elaboracin de los planes y las polticas de seguridad.
Cada laboratorio debe adoptar un manual de seguridad o de trabajo en el que se identifiquen los riesgos
conocidos y potenciales y se especifiquen las prcticas y los procedimientos encaminados a eliminar o
reducir al mnimo esos riesgos. Las tcnicas microbiolgicas apropiadas son fundamentales para la
seguridad en el laboratorio y no pueden sustituirse por equipo de laboratorio especializado, que no pasa
de ser un complemento.
El laboratorio debe ser un lugar seguro para trabajar donde no se deben permitir descuidos o bromas.
Para ello se tendrn siempre presente los posibles peligros asociados al trabajo con materiales
peligrosos. Nunca hay excusa para los accidentes en un laboratorio bien equipado en el cual trabaja
personal bien informado. Normas que deben conocerse y seguirse en el laboratorio:
Examinar el estado de las piezas antes de utilizarlas y desechar las que estn defectuosas.
Desechar el material que haya sufrido golpes contundentes, aunque no se observen fisuras.
Efectuar el montaje de cada operacin con especial cuidado, evitando que los distintos
elementos que intervienen queden tensionados, empleando los soportes y abrazaderas
adecuadas y fijando todas las piezas segn la funcin a realizar.
No calentar directamente el vidrio con la llama. Para ello, se recomienda interponer un material
capaz de difundir el calor, como una rejilla metlica y utilizar preferentemente piezas de vidrio
PYREX.
Evitar que las piezas queden atascadas colocando una fina capa de grasa de silicona entre las
superficies de vidrio en contacto.
SEALIZACIN
En los laboratorios de biotecnologa la sealizacin contribuye a indicar aquellos riesgos que por su
naturaleza y caractersticas no han podido ser eliminados. Considerando los riesgos ms frecuentes en
estos lugares de trabajo, las seales a tener en cuenta son:
Seales de advertencia de un peligro
Tienen forma triangular y el pictograma negro sobre fondo amarillo. Las que con mayor frecuencia se
utilizan son:
Tienen forma triangular y el pictograma negro sobre fondo amarillo. Las que con mayor frecuencia se
utilizan son:
Seales de prohibicin
De forma redonda con pictograma negro sobre fondo blanco. Presentan el borde del contorno y una
banda transversal descendente de izquierda a derecha de color rojo, formando sta con la horizontal un
ngulo de 45.
Otras seales
Salidas de emergencia y elementos de primeros auxilios (botiqun, duchas de emergencia, lavaojos, etc.).
Identificar las tuberas por el color con que estn pintadas, en funcin del fluido por ellas transportado
1) Libre
2) Restringida
3) Transferencias
La circulacin libre, por un pasillo perifrico, permite a los visitantes ver el equipamiento y los
procedimientos del laboratorio a travs de ventanas que comunican con las salas, sin necesidad de
ingresar al rea asptica. Asimismo este pasillo perifrico de circulacin libre permite el ingreso de los
abastecimientos y la salida de los elementos utilizados para los procedimientos.
Entre la circulacin libre y la restringida hay areas de transferencia para personal y elementos. Toda la
unidad esta abastecida con aire filtrado, a presin positiva y a temperatura y humedad regulables. Se
han empleado para revestimiento de pisos y paredes materiales lisas, lavables y resistentes para
asegurar la higiene y antisepsia.
El rea de Circulacin Restringida en la que se encuentran las salas de cultivo de tejidos, la oficina de
registro de los procedimientos, forman una unidad funcional en la que rige la estricta disciplina de una
sala de operaciones
Materiales:
Equipos
Estufa
Autoclave
Camara de Flujo laminar
Malla trmica
Agitador magnetico
Medidor de Ph
Reactivos
Agar
Sacarosa
Agua
Alcohol 90%
Legia
Carbon Activado
Levadura
NH4NO3
KNO3
Mg SO4. 7H2O
Mn SO4. H2O
Zn SO4. 7H2O
Cu SO4. 5H2O
Ca Cl2. 2H2O
KI
Co Cl2. 6H20
K H2 PO4
H3 BO3
Na2MoO4. 2H2O
Fe SO4. 7H2O
Na2 EDTA
Acido Nicotinico
Piridoxina
Tiamina
Glicina
Mioinositol
El rea de lavado debe incluir por lo menos un lavadero grande con agua caliente y agua fra y una
fuente de agua de alto grado de pureza, preferiblemente agua doblemente destilada, y tambin debe
proveer basureros adecuados para el material vegetal, inorgnico y de vidrio que se deseche.
Materiales:
Probetas
Buretas
Erlemmeyer
Pipetas
Servilletas
Guantes
Fundas de basura
Mesones
Llaves de agua adecuadas
Equipos
Estufa
Autoclave
Reactivos
Legia
Hipoclorito de Sodio 5%
Alcohol 95%
Agua esteril
REA DE TRASFERENCIA
En esta rea del laboratorio se realiza el trabajo de escisin, inoculacin y trasferencia de los espantes a
los medios de cultivo. Dado que este trabajo demanda los mas alto nivel de limpieza ambiental, se
recomida la estalacin de gabinetes de flujo horizontal o vertical de aire filtrado bajo presin, o la
construccin de cuartos de trasferencia.
Sin embargo ciertas operaciones de inoculacin como la excision y el cultivo de pices y meristemas en
tubo de ensayo de boca angosta, se pueden realizar sobre una mesa limpia, ubicada en un lugar del
laboratorio libre de corrientes de aire y polvo. Los gabinetes de flujo laminar deben ubicarse, en lo
posible, en un lugar alejado de las puertas y con un mnimo de corriente de aire, con el fin de prolongar
la vida til de los filtros.
Materiales:
Placas petry
Probetas
Erlemmeyer
Pipetas
Servilletas
Guantes
Fundas de basura
Pipetas
Pinzas
Asas
Frascos esteriles
Equipos
Hipoclorito de Sodio 5%
Alcohol 95%
Agua esteril
REA DE INCUBACIN
Los cultivos se incuban en un cuarto apropiado o en gabinetes o cmaras de crecimiento; estas pueden
ser ms eficientes en cuanto al control ambiental, pero son ms costosas.
El rea de incubacin o crecimiento in vitro debe proporcionar un buen control de la temperatura (20-28
oC), de la iluminacin (variables segn las necesidades: 1000 a 5000 lux) y de la humedad relativa (70-
80%).
En el cuarto de incubacin se instalan estanteras metlica o de madera para colocar los cultivos. Estas
estanteras puede tener dimensiones variables: el ancho entre 0.30m y 1.00 m, el largo de acuerdo con
el tamao del cuarto, y la altura total de 1.80 a 2.20 m; la distancia entre entrpanos es de 0.20 a .50 m.
Esta rea debe incluir, adems uno espacio para cultivos en agitacin y para cultivos esttico en
oscuridad.
Es necesario propiciar una buena distribucin del aire en este cuarto para evitar zonas de
recalientamento por efecto de las luces. Cuando se utilizan tubos fluorescentes, es conveniente sacar los
balastros fuera de este cuarto. Las regulacin de la temperatura se puede lograr por medios de aparato
de aire acondicionado de pared o de sistema central. En cualquier caso, es necesario tomas
precauciones para evitar el calentamiento excesivo, instalando alarmas y controles para cortar la
iluminacin cuando falle el aire acondicionado.
Equipos:
Alcohol 95%
REA DE CRECIMIENTO
Durante el perodo de incubacin, los cultivos son expuestos a condiciones ambientales dismiles al
ambiente externo.
La atmsfera interna se caracteriza por presentar una considerable variacin diurna en la concentracin
de CO2, humedad relativa elevada, temperatura constante e intensidad lumnica baja. A su vez, el medio
de cultivo compuesto por concentraciones elevadas de azcares (en aquellos sistemas hetertrofos y
semiauttrofos de micropropagacin), sales y reguladores del crecimiento, sumado a la ausencia de
microorganismos, generan anormalidades morfolgicas, anatmicas y fisiolgicas que las plantas
debern corregir cuando son transferidas al ambiente externo. Este perodo de adaptacin al nuevo
hbitat es llamado fase o etapa de aclimatacin.
El retraso en el desarrollo de la cutcula y la escasa funcionalidad del aparato estomtico que presentan
las hojas de la mayora de las especies cultivadas in vitro, determinan una alta tasa de transpiracin que
puede ocasionar la muerte por deshidratacin.
Instalaciones:
Invernadero
Suministro de agua y electricidad
Luz natural
Materiales:
Macetas, bandejas
Camas de crecimiento
Sustratos
Fundas plsticas
Tamiz para sustratos
Pala, rastrillo
Basurero
Equipos:
Nebulizadores
Cmaras de alta humedad
Mobiliario:
REA DE CUARENTENA
Toda actividad destinada a prevenir la introduccin y/o propagacin de plagas de cuarentena o para
asegurar su control oficial
La produccin de materiales elites de sanidad certificada, se hace necesario contar con un rea para la
recepcin de las muestras o plantas destinadas a la limpieza clonal, generalmente protegida contra
insectos. Esta rea de cuarentena debe estar separada del resto del laboratorio pero cercana al rea de
control fitosanitario; donde se hacen pruebas necesarias para comprobar la sanidad del material
vegetal, especialmente enfermedades causadas por virus, bacterias y hongos.
Instalaciones:
Materiales:
Bandejas
Frascos
Basurero
Equipos:
Congelador - refrigerador
Mobiliario:
El objetivo de rea de observacin y examen es realizar observaciones peridicas de los cultivos, tanto
en medios semislidos como en lquidos. Generalmente los microscopios (estreo, compuesto, invertido
y otros) se encuentran en el rea de incubacin como en el de transferencia, pero opcionalmente
pueden estar en un rea separada.
Instalaciones:
Suministro electricidad.
Materiales:
Equipos:
Microscopio binocular
Estereoscopio
lupas estereoscpicas
Mobiliario:
BODEGA
La bodega es un rea disponible y adecuada para el almacenamiento de: reactivos, materiales, etc. La
operacin de bodegas es la organizacin que se le da a estas para que el material que se va a resguardar
se haga de una forma ordenada, con facilidad de movibilidad y un estricto control.
Reactivos
Materiales
PRESUPUESTO
Terreno
Valor
Descripcin Unidad Cantidad Unitario Valor Anual
Terreno m2 36 600 21,600.00
Subtotal 21,600.00
Imprevistos 432
Total 22,032.00
Maquinaria y Equipo
Descripcin Unidad Cantidad Valor Unitario Valor Anual
Agitador magntico Un. 3 2950 8,850.00
Balanza de precisin Un. 4 3000 12,000.00
Microondas Un. 1 600 600.00
Autoclave Un. 1 980 980.00
Dispensador automtico Un. 1 300 300.00
Microscopios Un. 5 4829 24,145.00
PH-metro Un. 1 800 800.00
Refrigerador Un. 1 2300 2,300.00
Destilador Un. 1 38000 38,000.00
Timer Un. 6 120 720.00
Cmara de Flujo Laminar Un. 2 40000 80,000.00
Sistema de filtracin Un. 1 2500 2,500.00
Esterilizador Un. 3 2390 7,170.00
Subtotal 178,365.00
Imprevistos 3,567.30
Total 181,932.30
Material de Vidrio
Valor Valor
Descripcin Unidad Cantidad Unitario Anual
probeta grad.b/vidrio 10 ml Un. 10 1.75 17.50
probeta grad.b/vidrio 50 ml Un. 10 2.67 26.70
probeta grad.b/vidrio 100 ml Un. 10 3.32 33.20
probeta grad.b/vidrio 250 ml Un. 10 7.00 70.00
probeta grad.b/vidrio 1000 m Un. 10 17.42 174.20
pipeta grad.ser.1/100 0,5 ml Un. 15 3.31 49.65
bureta grad.c/robin rect 50 ml Un. 6 43.01 258.06
vaso ppdo.graduado 100 ml Un. 20 1.67 33.40
vaso ppdo.graduado 250 ml Un. 20 1.97 39.40
matraz t.plastica 100 ml Un. 10 7.92 79.20
matraz t.plastica 500 ml Un. 10 14.42 144.20
matraz t.plastica 25 ml Un. 10 2.73 27.30
tubo ensayo 25 x 150 mm Un. 200 1.35 270.00
caja petri 150x30 mm Un. 200 4.27 854.00
Subtotal 2076.81
Imprevistos 41.5362
Total 2118.35
Reactivos
Cantida
Descripcin Unidad d Valor Unitario Valor Anual
Hipoclorito de calcio 35% lt. 1 0.74 0.74
Alcohol 96% lt. 1 3.29 3.29
Carbon activado p.a. 100g gr. 1 4.76 4.76
Acido flico 25g gr. 1 41.75 41.75
Acido ascrbico 500g gr. 1 29.75 29.75
Niacinamida 100g gr. 1 12.75 12.75
Acido nicotnico 500g gr. 1 30.75 30.75
Biotina 1g gr. 50 42.75 2137.5
sacarosa p.a. 500 gr gr. 5 7.19 35.95
agar-agar 500 gr gr. 10 124.83 1248.3
nutritivo agar 500 gr gr. 10 129.93 1299.3
M&S 10 lt lt. 1 6.75 6.75
Acido absicico 1g gr. 2 228.75 457.5
Subtotal 5309.09
Imprevistos 106.1818
Total 5415.2718
Equipo de Oficina
Valor
Descripcin Unidad Cantidad Unitario Valor Anual
Telefonos convenionales Un. 1 35.00 35.00
Fax Un. 1 109.00 109.00
Sumadora Un. 1 50.00 50.00
Subtotal 194.00
Imprevistos 3.88
Total 197.88
Equipo de Computacin
Valor
Descripcin Unidad Cantidad Unitario Valor Anual
Computadoras Un. 3 595.00 1,785.00
Impresora multifuncional Un. 1 109.00 109.00
Implementos de red Un. 1 150.00 150.00
Subtotal 2,044.00
Imprevistos 40.88
Total 2,084.88
Herramientas
Descripcin Unidad Cantidad Valor Unitario Valor Anual
Mesa de trabajo Un. 8 62 496.00
Taburetes Un. 8 60 480.00
Lavadero Un. 3 100 300.00
Vitrina de almacenamiento Un. 3 250 750.00
Subtotal 2,026.00
Imprevistos 40.52
Total 2,066.52
Muebles y enseres
Descripcin Unidad Cantidad Valor Unitario Valor Anual
Escritorio gerencia Un. 1 110 110.00
Escritorio secretaria Un. 1 145 145.00
Archivadores Un. 1 87 87.00
Sillas tipo gerente Un. 1 174 174.00
Sillas tipo secretaria Un. 7 87 609.00
Sistema de aire acondicionado Un. 1 870 870.00
Casilleros Un. 2 174 348.00
Alfombras Un. 1 40 40.00
Equipo de sonido Un. 1 203 203.00
Subtotal 2,586.00
Imprevistos 51.72
Total 2,637.72
Materiales Indirectos
Descripcin Unidad Cantidad Valor Unitario Valor Anual
Papeles Un. 12 4.00 48.00
Jabon Un. 15 0.60 9.00
Papel Higinico Rollos 5 3.00 15.00
Trapeador Un. 6 1.50 9.00
Escoba Un. 6 1.50 9.00
Desinfectante Un. 4 3.20 12.80
Manguera Un. 2 4.00 8.00
Guantes Doc. 1 4.00 4.00
Subtotal 114.80
Imprevistos 2.30
Total 117.10
Insumos
Descripcin Unidad Cantidad Valor Unitario Valor Anual
Material de limpieza Un. 3 10.50 31.50
Agua potable m3 150 0.15 22.50
Energa Elctrica Kwh. 950 0.08 76.00
Subtotal 130.00
Imprevistos 2.60
Total 132.60
Inversion Total
Concepto Total
Maquinaria y Equipo 181,932.30
Terreno 22,032.00
Equipo de Oficina 197.88
Equipo de Computacion 2,084.88
Herramientas 2,066.52
Muebles y Enseres 2,637.72
Mano de Obra Directa 1,393.08
Mano de Obra Indirecta 1,351.70
Insumos 132.60
Materiales Indirectos 117.10
Material de Vidrio 2118.35
Reactivos 5415.2718
Subtotal 221,479.39
Imprevistos 44295.879
Total 265,775.27
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