REPBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA

UNIVERSIDAD PEDAGGICA EXPERIMENTAL LIBERTADOR

INSTITUTO PEDAGGICO DE BARQUISIMETO
LUIS BELTRN PRIETO FIGUEROA
PROGRAMA DE EDUCACIN INTEGRAL

CIENCIAS NATURALES II

PRCTICA DE LABORATORIO N 1

MICROSCOPIO Y LUPA ESTEREOSCPICA. USO Y MANTENIMIENTO

Nombres y ______________________________________________ Cdula: _____________

Apellidos:
Seccin: 5IN0___ Grupo de Prctica: ___ Equipo N: ___ N: ___ Fecha de entrega: ___/___/2017

INTRODUCCIN

El microscopio es un instrumento ptico que aumenta la imagen de los objetos. En los ltimos tres
siglos ha permitido ampliar el campo de las investigaciones biolgicas y se ha convertido en el
instrumento bsico para abrir nuevas fronteras en la biologa. La lupa puede considerarse como el
microscopio ms simple y fue usada inicialmente por algunos investigadores para adquirir los primeros
conocimientos del mundo microscpico. Posteriormente se perfeccion y en la actualidad existen varios
tipos de microscopios, algunos de ellos altamente especializados para una gran variedad de usos. Entre los
diferentes tipos podemos citar: microscopio simple, compuesto y electrnico.
El microscopio, al aumentar la imagen de los objetos, nos permite analizar la estructura, forma y
tamao de diferente tipo de muestras. En esta prctica se utilizar el microscopio compuesto en el cual se
combinan dos lentes, el ocular y el objetivo, para aumentar la imagen.
Tipos de Microscopios
Microscopio Simple: con esta denominacin se design a la lupa hasta el comienzo del siglo pasado. Est
constituido fundamentalmente por una lente convergente y su fuente de luz es la visible.
Microscopio Compuesto: es un instrumento ptico que se emplea para aumentar o ampliar las imgenes
de objetos y organismos no visibles a simple vista. El microscopio ptico comn est formado por tres sistemas:
a. Sistema Mecnico. La parte mecnica del microscopio comprende: el pie, el tubo, el revlver, el asa, la
platina, el carro, el tornillo macromtrico y el tornillo micromtrico. A continuacin se describe cada uno.
El pie: constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de Y o
bien es rectangular.
 Tubo: tiene forma cilndrica y esta ennegrecido internamente para evitar las molestias que ocasionan
los reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los oculares.
Revlver: es una pieza giratoria prevista de orificios en los cuales se enroscan los objetivos. Al girar
el revlver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posicin de trabajo la cual se nota
por el ruido de un pin que lo fija.
Platina: es una pieza metlica plana donde se coloca la preparacin u objeto que se va a observar.
Presenta un orificio en el eje ptico del tubo que permite el paso de los rayos luminosos a la preparacin.
Carro: es un dispositivo colocado sobre la platina que permite deslizar la preparacin con
movimiento ortogonal de adelante hacia atrs y de derecha a izquierda.
Tornillo macromtrico: girando este tornillo asciende o desciende el tubo del microscopio,
deslizndose en sentido vertical gracias a una cremallera. Estos movimientos largos permiten el
enfoque de la preparacin.
Tornillo micromtrico: mediante el movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o
la platina, se logra el enfoque exacto y ntido de la preparacin. Lleva acoplado un tambor graduado en
divisiones de 0,01 mm que se utiliza para precisar sus movimientos y puede ser el espesor de los objetos.
b. Sistema ptico. Es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de lentes
que lo componen. Esta formado por los oculares y los objetivos.
Oculares: estn constituidos generalmente por dos lentes, dispuestas sobre un tubo corto. Los
oculares ms utilizados son los 5X, 8X, 10X, 12X, 15X. La X se utiliza para expresar en forma
abreviada los aumentos.
Objetivos: producen el aumento de las preparaciones observadas y, por lo tanto, se hallan cerca de la
preparacin que se examina. Los objetivos utilizados son de dos tipos objetivos secos y objetivos de inmersin.
Objetivos secos: se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la preparacin.
La cara externa lleva una serie de ndices que indican el aumento que producen, la abertura
numrica y otros datos. El nmero de objetivos vara con el tipo de microscopio y el uso para el cual
se destina. El aumento de los objetivos secos ms frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 45X y 60X.
Objetivos de inmersin: est compuesto por un complicado sistema de lentes. Para observar a
travs de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el objetivo y la
preparacin, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro. Generalmente,
estos objetivos son de 100X y se distinguen por uno o dos crculos o anillos de color negro que
rodea su extremo inferior.
c. Sistema de Iluminacin. Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal
manera que ilumine la preparacin u objeto a observar en el microscopio. Est formado por el espejo, el
condensador y el diafragma.

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 Espejo: tiene dos caras una cncava u la otra plana. La cncava se emplea de preferencia con
iluminacin artificial, y la plana para iluminacin natural.
Condensador: est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos
luminosos sobre el plano de preparacin. El condensador se halla debajo de la platina.
Diafragma: generalmente, el condensador est provisto de un diafragma-iris, que regula su
abertura y controla la calidad de luz a travs del condensador.
Trayectoria del Rayo de Luz a travs del Microscopio. El haz luminoso procedente de la lmpara pasa
directamente a travs del diafragma al condensador. Gracias al sistema de lentes que posee el
condensador, la luz es concentrada sobre la preparacin a observar. El haz de luz penetra en el objetivo y
sigue por el tubo hasta llegar el ocular, donde es captado por el ojo del observador.

Propiedades del Microscopio

a. Poder de resolucin. Tambin llamado a veces poder de separador, es una cualidad del microscopio,
y se define como la distancia mnima entre dos puntos prximos que pueden verse separados. El ojo
normal no puede ver separados dos puntos cuando su distancia es menor a una dcima de milmetro.
El poder de resolucin de un microscopio depende del poder de resolucin del objetivo empleado. El
poder de resolucin de un objetivo es el valor de la mnima distancia que puede haber entre dos puntos
para poder identificarlos (resolverlos) como independientes. Es decir un poder de resolucin de 0,2 micras
quiere decir que si dos puntos estn separados por una distancia de 0,19 micras se vern como un punto nico.
Un objetivo con un gran poder de resolucin, tienen un valor numrico de poder de resolucin lo ms
bajo posible. El poder de resolucin (R) se calcula de la siguiente forma:

R = 0,61 x L /AN

donde 0,61 es una constante; L es la longitud de onda de la luz

empleada (566 nm); y AN es la apertura numrica del objetivo.
En el microscopio ptico, el poder separador mximo conseguido
es de 0,2 dcimas de micra, y en el microscopio electrnico, el poder
separador llega hasta 10 Angstrm.
Apertura Numrica. La apertura numrica de un objetivo se obtiene multiplicando el ndice de refraccin
del medio (n) por el valor del Seno del semingulo (a) del cono de luz incidente en el objetivo.

AN = n x Sen a

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b. Poder de ampliacin. Es el aumento de la muestra u objeto que se logra con el microscopio. En
trminos generales se define como la relacin entre el dimetro aparente de la imagen y el dimetro o
longitud del objeto. Esto quiere decir que si el microscopio aumenta el dimetro de un objeto 100 veces, la
imagen que estamos viendo es 100 veces mayor que el tamao real del objeto. Para calcular el aumento de
un microscopio, basta multiplicar el aumento del ocular por el aumento del objetivo. Por ejemplo, si
estamos utilizando un ocular de 10X y un objetivo de 45X, el aumento a que estamos viendo la
preparacin ser: 1OX x 45X = 450X, lo cual quiere decir que la imagen del objeto est ampliada 450
veces.
c. Poder de penetracin. Consiste en la capacidad que tiene el microscopio de permitir la observacin de
diversos planos del objeto estudiado de manera simultnea.
d. Poder de definicin. Se refiere a la nitidez de las imgenes obtenidas, sobre todo respecto a sus
contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la correccin de las aberraciones de las lentes
utilizadas.
En el aire, el valor de n = 1. El aceite de inmersin tiene un valor n = 1,515. Por esta razn el mximo
valor que puede alcanzar la apertura numrica ser prximo a 1,5.
Manejo del Microscopio ptico
1. Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente. Si el
microscopio se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera estar en esas condiciones.
2. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas.
3. Comenzar la observacin con el objetivo de 4X (ya est en posicin) o colocar el de 10 aumentos (10X)
si la preparacin es de bacterias.
Para realizar el enfoque:
a. Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Esto
debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el
objetivo en la preparacin pudindose daar alguno de ellos o ambos.
b. Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparacin con
el macromtrico y, cuando se observe algo ntido la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un
enfoque fino.
Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un
poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la
imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operacin desde el paso 3. El
objetivo de 40X enfoca a muy poca distancia de la preparacin y por ello es fcil que ocurran dos tipos de

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percances: incrustarlo en la preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite
de inmersin si se observa una preparacin que ya se enfoc con el objetivo de inmersin.
Empleo del objetivo de inmersin:
a. Bajar totalmente la platina.
b. Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos indica la zona que se
va a visualizar y donde habr que agregar el aceite.
c. Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino entre ste y el de 40X.
d. Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz.
e. Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de inmersin.
f. Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite.
En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente.
g. Enfocar cuidadosamente con el micromtrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersin
y la preparacin es mnima, aun menor que con el de 40X por lo que el riesgo de accidente es muy
grande.
h. Una vez se haya puesto aceite de inmersin sobre la preparacin, ya no se puede volver a usar el
objetivo 40X sobre esa zona, pues se manchara de aceite. Por lo tanto, si desea enfocar otro campo,
hay que bajar la platina y repetir la operacin desde el paso 3.
i. Una vez finalizada la observacin de la preparacin se baja la platina y se coloca el objetivo de
menor aumento girando el revlver. En este momento ya se puede retirar la preparacin de la platina.
Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersin en posicin de observacin.
j. Limpiar el objetivo de inmersin con cuidado empleando un papel especial para ptica. Comprobar
tambin que el objetivo 40X est perfectamente limpio.
Mantenimiento y precauciones

1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posicin de observacin,
asegurarse de que la parte mecnica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto
con su funda.
2. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que
se ensucien y daen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro
de un armario para protegerlo del polvo.
3. Nunca hay que tocar los lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel
de filtro o, mejor, con un papel de ptica.
4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el microscopio.

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5. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con
pauelos especiales para ptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasar el
papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el
objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este
tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden daar las lentes y su sujecin.
6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macromtrico, micromtrico, platina, revlver
y condensador).
7. El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a la preparacin para
prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del
mismo ni hacerlo mientras se est observando a travs del ocular.
8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn lquido, secarlo con
un pao. Si se mancha de aceite, limpiarla con un pao humedecido en xilol.
9. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesin prctica y, al acabar el
curso, encargar a un tcnico un ajuste y revisin general de los mismos.
PRE-LABORATORIO:
Pre-laboratorio ser evaluado oralmente la primera semana de la prctica
Realice una investigacin documental sobre los siguientes tpicos:

Microscopio (Tipos, uso, manejo y cuidado). Lupa estereoscpica (uso, manejo

Manejo de muestras orgnicas (animales y vegetales). y cuidado).
Cul es la importancia que tiene el uso del Tcnica de elaboracin de frotis
microscopio y de la lupa estereoscpica para las ciencias de tejido sanguneo.
naturales? Clulas, tipos y componentes

Materiales:

Cada equipo de trabajo llevar al laboratorio:

Agua de florero o estancada Equipo de diseccin Muestra de sangre
Aguja estril (inyectadora) Flores de cayena Pao de limpieza
Almidn Gotero Papel secante
Azcar Hebras de lana Portaobjetos y Cubreobjetos
Azul de metileno Hielo Recorte de peridico
Bistur Insectos pequeos Revista
Cebolla Lpiz de cera Textos de consulta

Donde pueden consultar:

De Robertis, E. y Otros (1977). Biologa Celular. Ateneo: Argentina.
Prez, V. y Guerrero, M. (1991). Microscopio ptico. Material multigrafiado. UCLA: Venezuela.
Martnez, J. y Rabago, J. (2001). El microscopio ptico. Folleto educativo. UPEL-IPB: Venezuela.

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 En Internet:
http://www.google.co.ve. Ejemplo:
Evolucin histrica del microscopio

LABORATORIO:
ACTIVIDAD N 1:
En las siguientes ilustraciones identifica las partes de cada uno de los instrumentos.

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 Calcula el aumento y el poder de resolucin del microscopio asignado._________________________
__________________________________________________________________________________

ACTIVIDAD N 2:
Toma dos lminas de portaobjeto. Coloca en la primera granos de azcar y en la otra lmina granos
de sal.
Observa en el microscopio y dibuja o fotografa lo observado.

Azcar Sal

ACTIVIDAD N 3:
Toma dos lminas de portaobjeto. Coloca en la primera un trozo de hielo y en la otra traza una
lnea con el lpiz graso (lpiz de cera).
Observa al microscopio y dibuja o fotografa lo observado.

Hielo Lpiz de cera

ACTIVIDAD N 4:
Recorta una letra e muy pequea y colcala sobre la lmina portaobjeto.
Cubre la muestra con una gota de agua y tpala con el cubreobjetos.
Coloca el objetivo de menor aumento. Regula la cantidad de luz con el diafragma observando por el ocular.
Coloca la preparacin en la platina.
Con el tornillo macromtrico acerca la platina al objetivo hasta que observes el objeto a estudiar.

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 Finalmente gira el tornillo micromtrico hasta enfocar la muestra con nitidez. Examinen el material a
menor aumento, mediano aumento y a mayor aumento.
Prepara y observa de la misma manera una hebra de lana y un cabello. Dibuja o fotografa lo observado.

Letra e Hebra de lana Cabello

Qu ventajas ofrece la observacin en el microscopio?. __________________________________

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________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________

ACTIVIDAD N 5:
Divide longitudinalmente un bulbo de cebolla.
Separa cuidadosamente la epidermis interna de una de las hojas.
Coloca la epidermis transparente sobre un portaobjeto. Extindela bien para facilitar la observacin.
Hidrata la muestra con una gota de solucin fisiolgica.
Cubre la muestra con un cubreobjetos.
Coloca la preparacin en el microscopio y examina el material a menor aumento, despus a mediano
aumento y a mayor aumento. Dibuja o fotografa lo observado.

Menor aumento Mediano aumento Mayor aumento

Ahora agrega a la lmina una gota de colorante (azul de metileno) en un borde del cubreobjetos y en el
otro extremo coloca un trozo de papel secante, de modo que el lquido fluya debajo del cubreobjetos.

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 Coloca la preparacin en el microscopio y examina el material a menor aumento, despus a mediano
aumento y a mayor aumento. Dibuja o fotografa lo observado.
Menor aumento Mediano aumento Mayor aumento

Existe alguna diferencia entre las clulas coloreadas y no coloreadas?. ______________________

Cmo es el citoplasma en las clulas coloreadas?.______________________________________
Difieren en apariencia, de las no coloreadas?__________________________________________

ACTIVIDAD N 6:
Toma un portaobjeto y coloca una gota de sangre.
Realiza el frotis y observa al microscopio.
Dibuja o fotografa lo observado. Con ayuda de tus textos identifica y describe lo observado.
Menor aumento Mediano aumento Mayor aumento

Cules son los componentes de la sangre que pudiste observar?_________________________

__________________________________________________________________________________
Qu formas tienen las clulas observadas?._________________________________________
__________________________________________________________________________________
Cules clulas son ms numerosas?_______________________________________________
__________________________________________________________________________________
En cuanto a su tamao. Todas son iguales?_________________________________________
__________________________________________________________________________________

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ACTIVIDAD N 7:
Toma un portaobjeto y coloca una gota del cultivo de organismos unicelulares (protozoarios).
Observa al microscopio. Dibuja o fotografa lo observado. Con ayuda de tus textos identifica y
describe lo observado.
Toma otro portaobjeto y agrega una gota del cultivo. Observa al microscopio para verificar si hay
protozoarios presentes.
Agrega a la muestra una gota de solucin salina (cloruro de sodio) al tiempo que observas al
microscopio y describes lo observado.
Sin solucin salina Con solucin salina

Qu formas tienen los organismos observados?._____________________________________

_______________________________________________________________________________
En cuanto a su tamao. Todas son iguales?_________________________________________

ACTIVIDAD N 8:
Saca el microscopio estereoscpico de la caja y colcalo sobre el mesn de trabajo, a unos doce
centmetros del borde de ste.
Toma dos portaobjetos y coloca muestras de arena y sal.
Observa al microscopio ptico y estereoscpico.
Dibuja o fotografa lo observado.
Arena
Microscopio ptico Microscopio Estereoscpico

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 Sal
Microscopio ptico Microscopio Estereoscpico

Repite la observacin con los granos de polen y los insectos pequeos.

Granos de polen
Microscopio ptico Microscopio Estereoscpico

Insectos
Microscopio ptico Microscopio Estereoscpico

POST- LABORATORIO:

Elabora con tu equipo un informe escrito con los resultados de las actividades realizadas siguiendo las
instrucciones dadas en el instructivo para elaborar Informes de Prctica y entrgalo al docente en la
prxima semana de clases.
Prctica elaborada por:

PROF. OMAR DE JESS GARRIDO ROMERO/YELITZA MARA TORRES

BERNAL /YELIBETH PASTORA ALVARADO/UPEL-IPB
ODEJGR/YMTB/MEF/YPA/Dpto Ciencias Naturales/Programa de Educacin Integral/UPEL-IPB/LBPF/2017

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