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El virus del enrollamiento (PLRV) Temas de Ciencia y Tecnologa | enero - abril 2008 39
en la trasmisin (Bourdin et al. 1998, en Guyader et al. V. Mtodos de diagnstico
2002). Para la deteccin del PLRV se han utilizado diferen-
A pesar de esa diversidad en las propiedades biol- tes tcnicas:
gicas, los estudios sugieren que el PLRV no presenta un a) Uso de plantas indicadoras y trasmisin por
alto grado de variacin en su secuencia nucleotdica a fidos.
nivel mundial (Guyader et al. 2002). b) Test de Igel Lange.
Actualmente se reportan tres razas: tobacco yellow c) Mtodos serolgicos.
top virus, tomato yellow top strain y capsicum yellows d) Inmunomicroscopa electrnica.
virus (Bchen-Osmond 2002). e) Otros mtodos.
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litado mucho el diagnstico del PLRV (Garg et al. 1990; tencia o inmunidad en especies de Solanum cultivadas
Khurana et al. 1995). o silvestres. La introduccin de materiales resistentes
es una de las vas ms eficaces para reducir las prdi-
e) Otros mtodos das que los virus ocasionan en ese cultivo (Swiezynski
El dot-ELISA puede utilizarse en el trabajo de diag- 1994; Daniels et al 2004); aunque desafortunadamente
nstico (Heide et al. 1988 y Khurana et al. 1995) el cual pocos genotipos son resistentes al PLRV, posiblemente
recuerda bsicamente el das-ELISA; pero como fase debido a que la incorporacin de resistencia mediante
slida se utiliza una membrana de nitrocelulosa y la in- el mejoramiento es difcil. La resistencia al PLRV est
munofluorescencia que emplea anticuerpos marcados controlada polignicamente, es relativa y se manifiesta
con productos excitables a la luz ultravioleta (Khurana como resistencia cuantitativa a la infeccin, siendo
et al. 1993; Cambra et al. 2000). sta difcil de medir (Barker 1990) y solo puede ser
La biologa molecular permite comparar regiones establecida despus de un ensayo de exposicin en el
de los cidos nucleicos (ADN y ARN) y a partir de este campo y de comparar el porcentaje de infeccin con
conocimiento se han ido desarrollando tcnicas anal- el de testigos susceptibles, lo que hace que el tiempo
ticas para el estudio de todos los grupos de patgenos requerido para conocer el comportamiento de distintos
(Torres et al. 2004). materiales frente a este virus se prolongue por algunos
Las tcnicas de hibridizacin molecular se utilizan aos (Hadidi et al. 1998).
en los tests de rutina para la deteccin de virus y viroi- Existen varios componentes que intervienen en la
des que involucran el uso de ADN o ARN complemen- resistencia al PLRV:
tario marcado preparado a partir del cido nucleico a) Resistencia a la infeccin.
purificado o un clon recombinante de dichos cidos b) Resistencia a la multiplicacin y tolerancia.
nucleicos como prueba. Mediante la incubacin con c) Hipersensibilidad.
extractos de plantas, estas pruebas pueden detectar d) Resistencia a la translocacin del virus.
la presencia de cidos nucleicos de virus o viroides al e) Antibiosis y antixenosis.
hibridizarse con ellos el ADN y ARN ya marcado.
Uno de los tipos de prueba ms comnmente a) Resistencia a la infeccin
utilizados en papa es el NASH (Nucleic Acid Spot Hy- Los genotipos de papa que tienen este componente
bridization) pero es utilizado fundamentalmente en de resistencia, no se infectan fcilmente cuando se
la deteccin del viroide ahusado de la papa (PSTV) inoculan con un nmero estndar de fidos virulferos y
(Owens et al. 1981) y no para el PLRV, debido a su grado normalmente para obtener esta informacin se realizan
de sofisticacin, la mayor parte de los laboratorios de ensayos de exposicin en el campo. En el Centro Inter-
patologa de plantas prefieren el uso de mtodos sero- nacional de la Papa (CIP) se ha desarrollado un mtodo
lgicos; aunque es ms sensible que el ELISA para la de invernadero que consiste en inocular dos grupos de
deteccin del PLRV en plantas asintomticas (Boulton cinco plantas, en el primer caso, a cada planta se le co-
et al. 1984; Centro Internacional de la Papa, 2002). locan 25 pulgones enfermos, y en el segundo cincuenta
Actualmente se estn utilizando tcnicas serolgico durante tres das. Dos o tres semanas despus se evala
moleculares. Las tcnicas PCR-ELISA o PCR colorimtri- en las plantas inoculadas la infeccin ocasionada por el
ca permiten detectar amplicones mediante hibridacin PLRV mediante el test ELISA.
con sondas marcadas con digoxigenina (DIG) y el uso
posterior de anticuerpos anti-DIG marcados con enzi- b) Resistencia a la multiplicacin y tolerancia
mas (Cambra et al. 2000). Los cultivares de papa que portan este componente
de resistencia no muestran sntomas de enrollamiento
VI. Bsqueda de resistencia de la hoja en condiciones de campo. En estos materia-
El mejoramiento para la bsqueda de resistencia les slo algunas clulas son infectadas y el virus est
frente al PLRV no es tan fcil como para PVX y PVY, el presente en cantidades pequeas en el floema.
mayor obstculo en la obtencin de variedades resisten-
tes al PLRV es la carencia de genes mayores de resis-
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Las plantaciones debern realizarse con tubrculos Bibliografa
semilla certificados para que estn libres de la Annimo
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Eliminacin de plantas indeseables que puedan ser nibilidad y competitividad de los sistemas de
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