UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

FACULTAD DE CIENCIAS

CURSO: LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

INFORME N 5

IDENTIFICACIN DE HONGOS
MEDIO AMBIENTALES Y CULTIVO
EN CAMARA PURA
Integrantes:
20101473 Cisneros Yupanqui, Miluska
20100037 Len Gonzales, Fiorella
20061009 Regalado Prez, Magaly
20090958 Villavicencio Huaman, Jennifer

Profesor: Ramos

Mesa : 4
INTRODUCCION
Tradicionalmente los hongos fueron considerados ms prximos a las plantas
que a los seres vivos, debido a su similitud en la composicin qumica y
estructura ultramacroscopica.
Los hongos se encuentran ampliamente distribuidos en la naturaleza (suelo,
vegetacin, en la materia existente en el agua, y en general en cualquier
ambiente hmedo). Las esporas fngicas son componentes normales de
ambientes externos. El aire de muchos ambientes internos tambin contiene
esporas.
La mayora de los hongos presentes en los ambientes internos son saprofticos,
porque ellos obtienen lo que necesitan para su metabolismo de materiales
muertos, materia orgnica o sustratos como madera, papel, pintura, suelo,
polvo, piel y alimentos. Son beneficiosos para el hombre ya que se encargan
de degradar la materia orgnica y la hacen pasar a formar parte del suelo,
donde se convierten en nutrientes de las plantas.

De la observacin macroscpica, es posible identificar si la colonia corresponde

a un hongo filamentoso o a una levadura. Esto, principalmente, por el aspecto
que presenta la colonia, ya que se tratar de hongos filamentosos si la colonia
posee aspecto agamuzado, aterciopelado o algodonoso, y se tratar de
levaduras si su aspecto es mucoso y de brillo metlico.

La observacin microscpica ser la que nos permitir identificar el gnero al

que pertenece el hongo en cuestin. Esto, identificando la morfologa y
estructuras caractersticas (tipo de hifa y cuerpo fructfero).
En el caso de no lograrse la identificacin de un hongo por este medio, se
recurre al cultivo de cmara hmeda, que permitir observar
microscpicamente el desarrollo del hongo sembrado.

OBJETIVOS
Demostrar a travs de la tcnica de tincin diferencial de Gram la existencia
de dos grupos principales de bacterias.

Comprender la importancia que tienen estas tinciones para la caracterizacin

e identificacin de las bacterias.

MARCO TEORICO
El moho (hongos) se reproduce por medio de pequeas esporas. Estas
esporas se transportan continuamente en el aire libre as como en interiores.
Cuando las esporas se depositan en una superficie hmeda comienzan a
crecer y a alimentarse de la superficie a la cual estn adheridas. Hay hongos
que crecen en madera, papel, alfombras y comida. Estos crecen cuando se
acumula la humedad o exceso de agua dentro de las casas y edificios. No hay
una forma especfica para eliminar todo el moho y las esporas que los
ocasionan. No obstante, la clave en evitar su propagacin es eliminar la fuente
de humedad en dicha superficie.

El moho es un hongo que se encuentra tanto al aire libre como en interiores. El

moho crece mejor en condiciones clidas, mojadas y hmedas, y se propaga y
reproduce mediante esporas. Las esporas del moho pueden sobrevivir en
condiciones ambientales, como la resequedad, que no favorecen el crecimiento
normal del moho.

Tipos ms comunes de mohos de interiores

-Cladosporium
-Penicillium
-Alternaria
-Aspergillus

Los mohos se encuentran virtualmente en cada ambiente y pueden ser

detectados, tanto en interiores como al aire libre, durante todo el ao. Las
condiciones hmedas y clidas favorecen el crecimiento del moho.

Al aire libre pueden encontrarse en reas o lugares hmedos sombreados

donde hay descomposicin de hojas o de otro tipo de vegetacin.

En los interiores pueden encontrarse en lugares donde los niveles de humedad

son altos como los stanos o las duchas.

Cladosporium sp. ocurre en muchos substratos incluyendo textiles, lana y

cornisas de ventanas. Puede crecer en comidas refrigeradas. Es el hongo que
se encuentra con ms frecuencia en el aire exterior.

Cladosporium es una causa comn de efectos alergnicos, como alergias de

tipo I y pneumonitis hipersensitiva de tipo III. Generalmente no es patognico,
pero puede causar cromoblastosis en climas tropicales y sub tropicales.

Se ha encontrado que Cladosporium poduce algunas txinas, sin embargo los

efectos de estas txinas en la salud humana no han sido bien estudiados.

Clasificacin taxonmica
Reino:Hongos
Phylum:Ascomycota
Suborden:Ascomycotina
Gnero: Cladosporium

Descripcin y habitat naturales

El cladosporium es un molde (pigmentado) distribuido extensamente en aire y

material orgnico putrefacto y aisl con frecuencia como contaminante en los
alimentos. Ciertas especies son predominantes en las regiones tropicales y
subtropicales.

Especie

El gnero cladosporium incluye sobre 30 especies. Los ms comunes incluyen

elatum del cladosporium, herbarum del cladosporium, sphaerospermum del
cladosporium, y cladosporioides del cladosporium.

Agente patgeno

El cladosporium spp. es agente causativo de las lesiones de piel, de la

queratitis, del onychomycosis, de la sinusitis y de las infecciones pulmonares.

Caractersticas Macroscpicas

El ndice de crecimiento de las colonias del cladosporium es moderado en agar

de la dextrosa de la patata en 25C y la textura es aterciopelada a polvoriento.
Muestra tonalidades que van de un color verde olivceo a negro. La mayora
del cladosporium spp. no crece a temperaturas superiores a 35C

Figura 1: Cladosporium Figura 2: Cladosporium en el

microscopio

Gnero Penicillium:
Las especies son muy numerosas, saprofitos y cosmopolitas. Las colonias son
compactas, de color plido a brillante, a menudo gris verdoso o verde azulado,
conidiforos solitarios o agrupados en fascculos o compactados en forma de
coremios, septados, hialinos, terminados en ramas con forma de pincel,
ramificados, las ramas terminales son fialides de forma alargada, unidas a una
cadena de conidios secas, pequeas, verde plido y de forma globosa,
ligeramente esquinadas o corrugadas. Los conidiforos crecen de un micelio
simple y cenoctico.

Gnero Aspergillus

Colonias efusas de varios colores: amarillo, verde, marrn o negro. Micelio

inmerso o superficial, sin estromas, ni setas.

Presenta conidiforos creciendo hacia arriba, que se van ensanchando hasta

tomar una forma globosa (vescula) conformada por el esterigma, rodeado de
unos filides que crecen alrededor de la parte inflada, sobre las cuales se
forman los conidios catenulados, secos, semiendgenos o acrgenos,
esfricos, lisos, rugosos, verrucosos o equinados, a veces con espinas
arregladas espiralmente, unicelular, a menudo aparecen en masa, hialinas o
coloreadas.

Figura 3: Aspergillus
CULTIVOS:
Son ambientes artificiales que contienen los elementos nutritivos y las
condiciones fsico- qumicas que permiten el desarrollo, crecimiento,
conservacin y estudio de los microorganismos. Existen diferentes medios de
cultivo (tipos):

a.- Cultivos Comunes: Son los que contienen un medio base (Agar Agar)
para el desarrollo de microorganismos.

b.- Cultivos Enriquecidos: Son aquellos medios destinados a lograr un

crecimiento ms rpido o a lograr el desarrollo de ciertos grmenes; por Ej. Agar
Sangre; Agar Chocolate; Agar Cerebro Corazn ; Caldo de Selenito; etc.

c.- Cultivos Selectivos: Son aquellos medios que permiten el desarrollo de un

determinado microorganismo, impidiendo el desarrollo de otros, por Ej.
Lowestein Jensen; TCBS; Medios SS; Levine; Tayer Martn (con bilis o con
taurocolato); etc.

d.- Cultivos Diferenciales : Son aquellos medios, como la urea, el citrato, el

indol, SIM, etc., que contienen una sustancia que al combinarse con algn
producto del metabolismo bacteriano producen una reaccin caracterstica (por
Ej. Un cambio de color) que permitir su identificacin.

e.- Cultivo virolgico: (evidencia indirecta de crecimiento en cultivos

celulares). Los virus no tienen la capacidad de crecer en cultivos slidos para
bacterias u hongos; y como son considerados como parsitos intracelulares
obligados, se necesitan para su desarrollo de clulas vivas. Para realizar el
aislamiento de virus podemos utilizar:

-Cultivos Celulares

-Huevos Embrionados

-Animales de Experimentacin

Debido al elevado costo, la necesidad de personal experimentado e

infraestructura especial, no son utilizados en el diagnstico clnico de los
laboratorios. Por ello en la actualidad han cobrado importancia los Mtodos
rpidos de Diagnstico (microscopa Electrnica, Tcnicas Inmunolgicas y
Moleculares.

PROCEDIMIENTO PARTE EXPERIMENTAL

Identificacin de hongos ambientales
Materiales:

Una placa Petri en la cual estn presentes los hongos cultivados del
medio ambiente.

Procedimiento:

Observacin macroscpica

Observaremos el tipo de desarrollo de los hongos en el medio de cultivo,

y procederemos a contar el nmero de colonias que se formaron en el
cultivo.
Ya identificadas las colonias presentes, procederemos a describir las
caractersticas fsicas que observemos en ellas, como el color, tamao,
forma, etc.
Procederemos luego a identificar el nmero de colonias que presenta un
determinado hongo en el cultivo.

Observacin microscpica

Identificada cada colonia diferente, observaremos cada una al

microscopio observando sus caractersticas morfolgicas de cada una.
Determinaremos los tipos de hifas presentas en los diferentes hongos al
igual que sus estructuras de reproduccin, vegetativa, resistencia.
Y con ayuda de un manual y conociendo las caractersticas presentes en
los hongos podemos determinar aproximadamente los gneros de este.
Estas observaciones sern elaborados en los esquemas de trabajo.

Cultivo en cmara hmeda

Materiales:

1 placa Petri
Colonias de hongos aislados del medio ambiente, que no hayan formado
estructuras reproductivas.
Portaobjeto, cubre objeto
Agua destilada
Mechero de alcohol
Dispositivo para cultivo en cmara hmeda
Pinza

Procedimiento:
 Colocamos en la placa Petri,un porta objeto, en la cual va a estar
contenida sobre ella una pequea porcin de agar.
Utilizando una aguja de Klle, vamos a tomar una pequea muestra de
la colonia que no podemos identificar. Luego colocamos esta fraccin de
colonia en la porcin de agar que est dispuesta en el portaobjeto de la
cmara hmeda.
Con ayuda de una pinza estril, cubrimos la preparacin con un cubre
objeto
Humedecemos el papel filtro que se encuentra en la placa con agua
destilada.
Cerramos la placa Petri y lo llevamos a incubar a un temperatura
ambiente de 20-25 C.
Luego de 4 das observamos la muestra y con ayuda de un manual
procederemos a identificar el gnero del hongo presente.

RESULTADOS
Cmara en hmedo

Luego de 4 das fuimos a ver el cultivo, y este presentaba una colonia de color
blanquecina como si fueran ramificaciones esto apareca en el borde en el
centro se presentaba colores de color rosceo en el centro y verdusco en el
borde de este.

La forma del cultivo, es invasiva, un tanto circular. De una textura algodonosa.

Al observar al microscopio, la parte de color blanco de la colonia del cultivo lo

que se puede observar es, la estructura vegetativa del hongo, que es las hifas.

Las hifas presentes aqu estn formadas por clulas alargadas, y las hifas son
septadas. Presentan un color traslucido ligeramente crema. Las clulas son en
forma tubular y cada hifa se va ramificando en dos. Aqu no pudimos ver las
estructuras reproductivas.

Al tomar una pequea muestra de la parte de color celeste rosceo, pudimos

observar las conidiosporas y el conidiforo de la forma tan particular que
presenta aspergillus, el conidiforo alargado y sin septas y las esporas
distribuidas de forma radial en el conidiforo.

Descripcin macroscpica:

Gnero: Cladosporiumsp.
Color de la colonia: verde petrleo

Forma de la colonia: circular invasiva

Aspecto de la colonia: algodonoso filamentoso

Numero de colonias presentes: 2 colonias

Gnero: Aspergillus sp.

Color de la colonia: verde, con rosa y celeste

Forma de la colonia: circular invasiva

Aspecto de la colonia: aterciopelado

Numero de colonias presentes: 1 colonia

Gnero: Penicillium sp.

Color de la colonia: verde centro, amarillo rodea

Forma de la colonia: circular invasiva

Aspecto de la colonia: algodonoso, filamentoso.

Nmero de colonias presentes: 1 colonia

DISCUSIONES:

El primer hongo observado pertenece al gnero Cladosporium. Este gnero se

caracteriza por tener conidios bicelulares oscuros. Dentro del gnero se
pueden encontrar especies saprobias que se encuentran sobre tejidos
vegetales muertos. Sin embargo, unas pocas especies parasitan vegetales. Se
podra inferir que en el lugar donde se aisl, pudo encontrarse la presencia de
esporas provenientes del jardn de la casa por ejemplo, para as tener rastros
de Cladosporium. Este gnero causa gran problemas en tomates, donde un
mnimo golpe en la piel, exponiendo el interior, resultar en un rpido
crecimiento fngico. Este crecimiento afecta la calidad de los productos del
tomate, incluyendo los zumos de tomate y los ktchups.

El segundo hongo observado pertenece al gnero Aspergillus sp. , esta clase d

hongo, con un poco de humedad crece sobre cualquier cosa, incluso sobre
cuero de zapatos. As que ste pudo haber sido un buen sustrato, ya que la
muestra se tom en una habitacin. Por otro lado, el aire en todos lados parece
contener conidios de estos organismos. El suelo tambin contiene esporas de
Aspergillus pero no se ha determinado si estos organismos desempean un
papel importante en la economa del suelo.
Pueden causar varios inconvenientes contaminando cultivos en los laboratorios
bacteriolgicos y micolgicos. La inhalacin de conidiosporas puede causar
varios tipos de aspergilosis pulmonar.

El tercer hongo que observamos fue Penicillium sp. . Son tan comunes y
cosmopolitas como los Aspergillus ya que sus conidios estn por todas partes,
por eso no es tan sorprendente hallarlo en la muestra. Es frecuente hallarlos
sobre las frutas ctricas y otras, sobre jaleas y conservas, tambin sobre
sustancias alimenticias que han sido contaminadas con sus esporas.
En la destruccin del cuero y telas, los Penicillium sp. no son menos efectivos
que los Aspergillus . Algunos se asocian a enfermedades humanas y animales
pero en este aspecto el gnero probablemente no es tan importante como
Aspergillus .

CONCLUSIONES:
Como se puede ver, es imposible vivir sin hongos o sin sus esporas ya que por
ejemplo, resulta difcil encontrar sustrato que conteniendo alguna sustancia
orgnica y un poco de humedad no deje crecer Aspergillus.
Esto no es del todo malo ya que muchos de los hongos no son patgenos y los
que s lo son, atacarn con mayor frecuencia a personas que se encuentran
con las defensas bajas.
Las enfermedades fngicas pueden dividirse en cinco grupos en funcin del
nivel y el modo de entrada en el husped. La mayora de micosis que se
producen en seres humanos se adquieren al inhalar las esporas del suelo,
donde se encuentran los hongos de vida libre.
La identificacin de estos hongos resulta importante porque ayuda a saber qu
clase de hongos estn presentes en determinados ambientes y tambin nos
ayudan a saber qu tipo de enfermedades podran causar tales hongos.

CUESTIONARIO
Cuestionario 1:

1. Haga una descripcin morfolgica de 5 gneros de hongos del

medio ambiente considerando las caractersticas de desarrollo en
medio de cultivo y las caractersticas observadas al microscopio.

Alternaria:

La Alternaria es un hongo. Las diferentes especies de este gnero son uno de

los mayores patgenos de plantas.

Hongo de exteriores por excelencia se registra en las

muestras de aire sobretodo en primavera-verano y
especialmente a principios de otoo.

Prefiere sitios hmedos y con material orgnico por lo que hojas cadas,
pastizales, regados etc son los lugares donde hay mayores concentraciones.

Produce rinitis y asma en una proporcin significativa de pacientes.

Los conidios de Alternaria tienen septos transversales y longitudinales y se los

conoce como dictiosporas, adems son pardos y picudos. Nacen por la
brotacin apical de una clula conidigena o de la espora anterior, dando lugar
en este ltimo caso a una cadena que suele ramificarse si una espora produce
ms de un brote. La especie A. infectoria tiene un estado perfecto que
pertenece al gnero Pleospora. ste forma pseudotecios sobre el tallo de
cereales o hierbas con ascas bitunicadas cilndricas en los lculos del estroma,
dentro de las cuales hay 8 ascosporas provistas de septos transversales y
longitudinales

Cladosporium:
Se observ una colonia de color verde petrleo, es el hongo
ms comn en el ambiente. Su poder de sensibilizacin es
menor que la alternaria, sin embargo de producirse alergia a
ste los sntomas son los mismos pudiendo prolongarse la
duracin de ellos durante todo el ao, con una leve disminucin en invierno.

Penicillium:

Hongo saprofito se alimenta de desechos, encontrado de

preferencia en interiores. Su nutricin comprende
comidas descompuestas, quesos, etc
Se le asocia a asma, rinitis, y en forma ocasional y rara a
neumonitis de hipersensibilidad. La alergia a este hongo
no se relaciona con la alergia a la penicilina.

Las especies de Penicillium son reconocidas por su denso cepillar como las
estructuras del espora-cojinete. Los conidiforos son simples o ramificados y
son terminados por los racimos de filides en forma de botella. Las esporas
(conidios) se producen en cadenas secas de las extremidades de los filides,
con la espora ms joven en la base de la cadena, y son casi siempre verdes.
La ramificacin es una caracterstica importante para identificar especie del
Penicillium. Algunos no son ramificados y llevan simplemente un racimo de
filides en la tapa del estpite. Otros pueden tener un racimo de ramas, cada
cojinete un racimo de filides. Un tercer tipo tiene ramas el llevar de una
segunda pedido de ramas, llevando alternadamente un racimo de filides.
Estos tres tipos de sistemas del cojinete de la espora (penicillium) se llaman
monoverticillate, biverticillate y terverticillate respectivamente.

El Penicillium es un gnero grande y encontrado casi por todas partes, y siendo

comnmente el gnero de hongos ms abundante en suelos.

Aspergillus:

Hongo encontrado preferentemente en interiores, se

nutre de material orgnico en descomposicin como
comida, basura, plantas de interior, etc.
Las enfermedades ms comunes que produce son
asma bronquial y rinitis alrgica, sin embargo en
algunas ocasiones el asma por alergia a este hongo se
vuelve ms intensa y produce una serie de
complicaciones como neumonas y dilataciones bronquiales pasando a
configurar un cuadro clnico llamado aspergilosis bronco-pulmonar alrgica.
Tambin se ha visto asociado a cuadros de neumonitis por hipersensibilidad y
sinusitis mictica alrgica.
La identificacin de las diferentes especies se basa en las caractersticas
macro y microscpicas que sealamos a continuacin, utilizando para su
cultivo, en condiciones estndar, el medio de Czapek con un 3% de sacarosa,
en el que las colonias crecen perfectamente en dos o tres das. Para un estudio
detallado de las cabezas conidiales, se recomienda la utilizacin del sistema de
laminocultivo en este mismo medio. En el medio de Sabouraud, la mayora de
las especies de Aspergillus crecen de forma exhuberante, pero no siempre
desarrollan sus caractersticas distintivas

Morfologa macroscpica: Puede servir de orientacin para una identificacin

presuntiva previa, pero, dada la gran variabilidad de las caractersticas
morfolgicas macroscpicas especficas del gnero, nunca debe confiarse en
ella para una identificacin a nivel de especie.

En medios de cultivo forman colonias de crecimiento rpido, de textura variable

(aterciopelada, granular, algodonosa) y con muy variadas coloraciones: blanco
o verde-azulado (A. Fumigatus), verde-amarillento (A. Flavus), negro (A. Niger),
marrn (A. Terreus) Esta coloracin aparece casi siempre en todas las
estructuras areas, tanto en el micelio como en las cabezas conidiales.

Morfologa microscpica: El estudio de la morfologa microscpica sobre

laminocultivo en medio de Czapek es el sistema indicado para identificacin de
las diversas especies de Aspergillus. Para ello nos basaremos en las
caractersticas morfolgicas descritas por Rapper y Fennell en su clasificacin
(tamao y forma de las cabezas conidiales, morfologa de los conidiforos y
filides y mtulas, y en la presencia de clulas de Hlle y de cleistotecios).

2. Los nombres genricos de muchos hongos son derivados de

caractersticas morfolgicas. De cules derivarn los nombres
Penicillium, Aspergillus, y Rhizopus?

Penicillium:

Gnero de hongos conocidos como mohos verdes o azules; de algunas

especies se obtiene la penicilina. El micelio del hongo, conjunto de filamentos
tubulares llamados hifas, crece en la superficie de frutas, pan, quesos y otros
alimentos. La reproduccin asexual se produce en Penicillium mediante unas
clulas, los conidios, que se forman en el extremo de hifas especializadas, los
conidiforos. stos son ramificados y en forma de abanico. Los rganos
sexuales son gametangios arrollados en hlice. La penicilina fue descubierta
por Alexander Fleming en Penicillium notatum, pero en la actualidad se obtiene
de cepas de Penicillium chrysogenicum que dan mayor rendimiento. En los
quesos azules, Penicillium roqueforti da sabor, y el color se debe a sus
conidios.
Aspergillus:

El gnero Aspergillus fue descrito por primera vez por P. A. Micheli (1729), que
lo denomin con este nombre por el parecido de la cabeza conidial con un
"aspergillum" (instrumento religioso utilizado para dispersar el agua bendita).

Las especies de Aspergillus crecen con facilidad y rapidez en casi todos los
medios de uso habitual (aunque son sensibles al actidione). La mayora de las
cepas patgenas son termoflicas y crecen a 37C, pero hay excepciones como
A. Glaucus, que es mesoflica, y requiere temperaturas de 25C para
desarrollarse.

Rhizopus:

Hongo filamentoso que presenta esporangiforos sin ramificar (de hasta 2 mm

x 20 m), de color pardo oscuro que nacen de un nudo de rizoides bien
desarrollados. Esporangios esfricos negros (de hasta 275 m de dimetro)

con columela. Esporangiosporas negras de 8 a 15 m. Abundantes rizoides y

zigosporas esfricas de pared gruesa, desnuda (de hasta 200 m de dimetro).

Clamidosporas ausentes. Colonias de crecimiento rpido (cubren

prcticamente toda la superficie de la placa en tres das a 25 C) de aspecto
consistente, con denso micelio areo, algodonosas, al principio blancas,
despus gris oscuras (micelio rojizo, grisceo o marrn). Se reconoce
fcilmente por sus espolones hialinos o parduzcos, sus rizoides numerosos y
pardos y sus esporangios negros y lustrosos (brillantes).

3. Por qu razones algunas colonias aisladas del medio ambiente no

desarrollan esporas en el medio de cultivo utilizado?

Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos

es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en
el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es
el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se
han preparado ms de 10.000 medios de cultivo diferentes.

Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial

debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de
humedad y presin de oxgeno adecuado, as como un grado correcto de
acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y
factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante.
La mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes complejos similares
en composicin a los lquidos orgnicos del cuerpo humano. Por eso, la base
de muchos medios de cultivo es una infusin de extractos de carne y Peptona a
la que se aadirn otros ingredientes.

El agar es un elemento solidificante muy empleado para la

preparacin de medios de cultivo. Se lica completamente a la
temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40
grados. Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre el
crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que
crecen en l.

En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos

materiales de enriquecimiento como hidratos de carbono, suero,
sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por dos
motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y para
detectar reacciones de fermentacin de los microorganismos que ayuden a
identificarlos. El suero y la sangre completa se aaden para promover el
crecimiento de los microorganismos menos resistentes.

Tambin se aaden colorantes que actan como indicadores para detectar, por
ejemplo, la formacin de cido o como inhibidores del crecimiento de unas
bacterias y no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en
pH bsico y amarillo en pH cido. La Violeta de Genciana se usa como
inhibidor ya que impide el crecimiento de la mayoria de las bacterias Gram-
positivas).

Condiciones generales para el cultivo de microorganismos

El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve

afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos
casos, son ajenos por completo al propio medio.

1- Disponibilidad de nutrientes adecuados

Un medio de cultivo adecuado para la investigacin microbiolgica ha de

contener, como mnimo, carbono, nitrgeno, azufre, fsforo y sales inorgnicas.
En muchos casos sern necesarias ciertas vitaminas y otras sustancias
inductoras del crecimiento. Siempre han de estar presentes las sustancias
adecuadas para ejercer de donantes o captadores de electrones para las
reacciones qumicas que tengan lugar.
Todas estas sustancias se suministraban originalmente en forma de infusiones
de carne, extractos de carne o extractos de levadura. Sin embargo, la
preparacin de estas sustancias para su aplicacin a los medios de cultivo
provocaba la prdida de los factores nutritivos lbiles.

Ciertas bacterias tienen necesidades nutritivas especficas por lo que se aade

a muchos medios sustancias como suero, sangre, lquido asctico, etc.
Igualmente pueden ser necesarios ciertos carbohidratos y sales minerales
como las de calcio, magnesio, manganeso, sodio o potasio y sustancias
promotoras del crecimiento, generalmente de naturaleza vitamnica.

2- Consistencia adecuada del medio

Partiendo de un medio lquido podemos modificar su consistencia aadiendo

productos como albmina, gelatina o agar, con lo que obtendramos medios en
estado semislido o slido.

Los medios solidificados con gelatina tienen el gran inconveniente de que

muchos microorganismos no se desarrollan adecuadamente a temperaturas
inferiores al punto de fusin de este solidificante y de que otros tienen la
capacidad de licuarla.

Actualmente los medios slidos son de uso universal, por su versatilidad y

comodidad, pero hay tambin gran cantidad de medios lquidos cuyo uso est
ampliamente extendido en el laboratorio.

3- Presencia (o ausencia) de oxgeno y otros gases

Gran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmsfera con tensin de

oxgeno normal. Algunas pueden obtener el oxgeno directamente de variados
sustratos. Pero los microorganismos anaerobios estrictos slo se desarrollarn
adecuadamente en una atmsfera sin oxgeno ambiental. En un punto
intermedio, los microorganismos microaerfilos crecen mejor en condiciones
atmosfricas parcialmente anaerobias (tensin de oxgeno muy reducida),
mientras los anaerobios facultativos tienen un metabolismo capaz de adaptarse
a cualquiera de las citadas condiciones.

4- Condiciones adecuadas de humedad

Un nivel mnimo de humedad, tanto en el medio como en la atmsfera, es

imprescindible para un buen desarrollo de las clulas vegetativas microbianas
en los cultivos. Hay que prever el mantenimiento de estas condiciones mnimas
en las estufas de cultivo a 35-37C proporcionando una fuente adecuada de
agua que mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y
evitar as que se deseque el medio.

5- Luz ambiental

La mayora de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que

en presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes como sera el caso de los
microorganismos fotosintticos.

6- pH

La concentracin de iones hidrgeno es muy importante para el crecimiento de

los microorganismos. La mayora de ellos se desarrollan mejor en medios con
un pH neutro, aunque los hay que requieren medios ms o menos cidos. No
se debe olvidar que la presencia de cidos o bases en cantidades que no
impiden el crecimiento bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o incluso alterar
sus procesos metablicos normales.

7- Temperatura

Los microorganismos mesfilos crecen de forma ptima a temperaturas entre

15 y 43C. Otros como los psicrfilos crecen a 0C y los temfilos a 80C o
incluso a temperaturas superiores (hipertemfilos). En lneas generales, los
patgenos humanos crecen en rangos de temperatura mucho ms cortos,
alrededor de 37C, y los saproftos tienen rangos ms amplios.

8- Esterilidad del medio

Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estriles para evitar la
aparicin de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir
el crecimiento microbiano normal del o de los especimenes inoculados en
dichos medios. El sistema clsico para esterilizar los medios de cultivo es el
autoclave (que utiliza vapor de agua a presin como agente esterilizante)

Cuestionario 2:
 1. Cul es la ventaja del empleo de la cmara hmeda en el estudio
de hongos?

Este sistema se utiliza para identificar hongos filamentosos. A veces resulta

dificultoso identificar el gnero de un determinado hongo; por ello se realiza un
cultivo en cmara hmeda ya que as se podr identificar el gnero del hongo
durante el crecimiento de sus estructuras.

2. Existen diferencias entre los hongos a nivel del crecimiento y

diferenciacin del micelio. Explique

Se les llama hongos tanto a las levaduras como a los mohos, pero existen
diferencias importantes, las ms destacadas:

Los mohos son filamentosos, es decir, poseen un micelio vegetativo "areo" y

otro "profundo". (Son los hongos que aparecen comunmente en los alimentos,
sobre todo limones o naranjas). El micelio posee estructuras llamadas "hifas"
las cuales pueden o no ser septadas (divididas). Ejemplos de hongos
filamentosos: Penicillium sp., Aspergillus flavus, etc.

Las levaduras son menos complejas y no poseen micelios, sus colonias tpicas
son como las de las bacterias y se usan mucho en la fermentacin de bebidas
alcohlicas, por ejemplo, Saccharomyces cerevisiae.

Ambos crecen en ambientes cidos y son organismos psicrtrofos, es decir,

crecen a temperaturas bajas (-5 a 5 C), aun cuando su temperatura ptima de
crecimiento sea alrededor de los 18 C.

De otro lado en los hongos macroscpicos, la diferencia principal radica en

que stos son precisamente grandes, (setas por ejemplo), adems de que son
hetertrofos (su energa la obtienen a partir de otros organismos porque no son
capaces de sintetizar sus propios alimentos), existen algunos comestibles, el
principal componente de su pared celular es quitina y son organismos
eucariotes (con clula y ncleos definidos) a diferencia de las levaduras.

BIBLIOGRAFIA
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universitria de Buenos Aires, 1961

DEACON, J.W. 1990. Introduccin a la Micologa Moderna. Editorial Limusa.

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