BIOSENSORES PTICOS

Ana Gonzlez Segura

Qu entendemos por biosensor?
Un biosensor, como su nombre indica, es simplemente un dispositivo electrnico
que se encarga de detectar sustancias biolgicas en una determinada muestra, o, de
forma algo ms rigurosa, podra definirse como una herramienta o sistema analtico
compuesto por un material biolgico inmovilizado (tal como una enzima, anticuerpo,
clula entera, orgnulo o combinaciones de los mismos), en ntimo contacto con un
sistema transductor adecuado que convierta la seal bioqumica en una seal elctrica
cuantificable (fig. 1).

Fig. 1. Esquema de Biosensor.

Quiz, el biosensor ms conocido y difundido comercialmente sea el utilizado
por los diabticos para medir la concentracin de glucosa en sangre. Su funcionamiento
se basa en el anclaje sobre un electrodo de una enzima seca (en estado hidrofilizado)
que, al entrar en contacto con la sangre, se regenera, originndose as una reaccin
qumica que lleva asociado un movimiento de electrones. El electrodo es capaz de
registrar dicho cambio y traducirlo en la informacin que aparecer en la pantalla del
medidor de forma casi inmediata.
Sin embargo, la cantidad y tipos de biosensores que actualmente estn en uso o
en periodo de investigacin es mucho ms amplia, ya que dentro de los mismos
podemos incluir desde sensores de hidrgeno hasta sensores de ADN, pasando por
dispositivos detectores de colesterol en sangre o de virus tales como el SIDA. Todos
ellos poseen una caracterstica comn: para poder detectar una determinada sustancia, a
la que denominaremos analito (por ejemplo, un antgeno), es necesario anclar a
nuestro sensor otra que acte como receptora (su correspondiente anticuerpo).
Otras aplicaciones de este tipo de tecnologa son las usadas en alimentacin para
el anlisis de alimentos susceptibles de contener sustancias nocivas tales como la
bacteria de la salmonella, por ejemplo. Tambin hay muchos grupos de investigacin
trabajando en la creacin de biosensores para la deteccin rpida de agentes
contaminantes en caso de guerra qumica y bacteriolgica. En realidad, el uso de
biosensores puede extenderse a una infinidad de campos, ya que, como veremos, si se
tiene el receptor biolgico adecuado, esta tecnologa es susceptible de detectar
prcticamente cualquier sustancia.

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Biosensores pticos
Algunas de las propiedades que posee la luz, ya sea la de ser guiada a travs de
ciertas estructuras o la de sufrir fenmenos de resonancia, pueden ser aprovechadas para
implementar un biosensor, que en este caso recibe el nombre de biosensor ptico. Su
funcionamiento es esencialmente el mismo que el sensor de glucosa, slo que ahora es
la luz la que se encarga de proporcionarnos la informacin. Los pasos a seguir para
desarrollar uno de estos dispositivos de forma completa seran, primero, decidir que
efecto ptico queremos que est involucrado en el funcionamiento del sensor; segundo,
conocer cmo inmovilizar el receptor biolgico en la superficie del sensor y cmo hacer
que ste sobreviva y, por ltimo, proponer un sistema de adquisicin y tratamiento de
datos (hardware y software) apropiado. Veamos con ms detalle los dos primeros.
Los efectos pticos que actualmente se proponen para el desarrollo de un
biosensor son tres: la fluorescencia, las configuraciones de campo evanescente y la
absorcin. La fluorescencia consiste en la emisin de luz por parte de los tomos
cuando, tras un proceso previo de excitacin, stos vuelven al estado fundamental. En
nuestro caso, cada analito genera unos parmetros caractersticos de excitacin-emisin,
con lo que es posible determinarlo unvocamente. El segundo efecto tiene que ver con
sensores que utilizan guas de onda. En una gua de ondas, la luz se transmite en
condiciones de reflexin total interna. Sin embargo, el campo electromagntico no
queda estrictamente confinado en el interior de la misma, sino que parte de l escapa al
exterior presentando un decaimiento exponencial. Es el campo evanescente, que ser el
encargado de detectar la sustancia de inters, ya que cualquier cambio que se produzca
en l influir en las caractersticas de la luz que se propaga por el interior de la gua.
Tambin puede ocurrir que la interaccin analito-receptor lleve asociado un fenmeno
de absorcin. De este modo, cuando ambas sustancias reaccionen, la cantidad de luz que
llega al detector se ver afectada.
Cuando pretendamos anclar el receptor sobre nuestro sensor, hay que tener en
cuenta que la inmovilizacin se realiza a escala nanomtrica y sobre soportes slidos.
La tcnica ms usada es recubrir la superficie de la gua con algn metal, de forma que
sta se consiga mediante enlaces covalentes (fig. 2). Sin embargo, tambin existen
muchas otras tcnicas como por ejemplo, el atrapamiento fsico del receptor sobre una
membrana o un polmero, o bien la adsorcin directa sobre el sensor. Por otro lado, para
que el receptor sobreviva, ste debe estar en disolucin acuosa, con lo que es necesario
disponer de celdas de flujo que contengan la parte adecuada del sensor y que permitan
que dicha disolucin se regenere.

Analito

Sustancia
receptora
En lace Cova lente

Capa de oro

Gu ia

Fig. 2. Metodo de anclaje por en lace covalente

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 El mtodo de anclaje por enlace covalente puede conseguirse depositando una
pelcula de oro sobre la superficie del sensor y consiste, a grandes rasgos, en provocar
modificaciones qumicas en la superficie de este metal que den lugar a un enlace
covalente entre los tomos de su superficie y una parte especfica de la sustancia
receptora (deben quedar libres las partes que reaccionarn con el analito). Para
conseguir el anclaje ptimo, se conectan a la placa de oro unas microcubetas con
distintas disoluciones que se hacen pasar en un determinado orden (segn sea su pH o
concentracin). Todos los pasos se monitorizan para comprobar que se estn
produciendo las reacciones qumicas buscadas, y una vez que se comprueba que la
protena est bien anclada, se conecta a un sistema de flujo automatizado que la
mantiene constantemente en contacto con una solucin salina. Una de las partes ms
delicadas en cuanto a la construccin de un biosensor es la de mantener vivo el receptor,
que no se degrade y que permanezca estable. Esto se subsana mantenindola en
disolucin constante con un pH y una temperatura adecuados.
Biosensores basados en dispositivos de ptica integrada
Los biosensores basados en dispositivos de ptica integrada estn adquiriendo
una gran importancia hoy en da debido a su alta sensibilidad, estabilidad mecnica,
posibilidad de miniaturizacin e integracin en microsistemas y fabricacin a gran
escala. Este tipo de biosensores se basa en el principio de modulacin del campo
evanescente que ya se defini anteriormente.
Antes de pasar a explicar su funcionamiento, merece la pena comentar que la
ptica integrada es una tecnologa capaz de construir a escala micromtrica cualquier
dispositivo ptico (como puede ser una gua de ondas o un espejo), de forma que un
microchip pueda contener un sistema ptico completo.
Debido a su alta sensibilidad, una de las configuraciones que se est estudiando
es la basada en un interfermetro Mach-Zender (fig.3). Un Mach-Zender es un
dispositivo en el que un haz de luz se divide en dos subhaces que luego se vuelven a
unir. Si por algn motivo, en alguno de los dos caminos aparece algn fenmeno que
genere un retardo de fase, cuando los haces vuelvan a juntarse, obtendremos un patrn
de interferencia que puede traducirse en un cambio en la intensidad del haz original.

Camino 1
Haz
Haz
final
original

Camino 2

Fig. 3: Interfero met ro Mach-Zender.

Los biosensores basados en interfermetros de esta clase se construyen haciendo

crecer con Silicio una gua de ondas con la estructura del Mach-Zender sobre un cierto
sustrato y anclando en uno de los brazos la sustancia receptora (fig. 4). Cuando, tras
hacer pasar luz por el interior de la gua, tiene lugar una reaccin de reconocimiento
molecular en la rama sensora del interfermetro se produce un cambio de fase entre las

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dos ramas, que se detecta como un cambio en el patrn de interferencia. La intensidad
de este patrn depender, entre otras cosas, del incremento de masa en la rama de
medida y ser funcin de la concentracin del analito en el medio. Obtenemos, as, un
sensor directo y rpido para determinar cualquier sustancia de la que se disponga su
molcula complementaria.

Sustrato

Gu ia

Zona sensora

Zona sensora
Gu ia

Sustrato

Fig. 4. Vista superior y lateral del biosensor interfero metrico.

Conclusiones
Las tcnicas de anlisis de laboratorio ms habituales, ya sean de contaminantes
qumicos o sustancias biolgicas, son generalmente tediosas e indirectas. Contar con
dispositivos de alta sensibilidad, porttiles y de medicin directa supondra un ahorro de
tiempo y costes. Combinando componentes pticos y microelectrnicos con materiales
biolgicos, es posible desarrollar biosensores basados en la tecnologas como la del
silicio. En ellos la vida y la microelectrnica se alan para servir de base a unos
dispositivos con mltiples aplicaciones, ya que cambiando la parte biolgica pueden
medir desde contaminantes ambientales hasta variaciones genticas o contaminaciones
en alimentos.
Anlisis directos e inmediatos sobre pequeas muestras son las principales
ventajas que ofrecen los ltimos biosensores desarrollados. De este modo, estamos ante
un dispositivo muy potente que permite la deteccin de manera selectiva, directa (sin
marcadores) y rpida (de segundos a minutos).

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