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CATEDRÁTICO : MSc. Norma Gamarra Mendoza

SEMESTRE : Decimo

AUTOR : FLORES MAMANI, Eduardo


1. Introducción

Los diversos tipos de biosensores, como los basados en enzimas, los tejidos, los
inmunosensores, los biosensores de ADN, los biosensores térmicos y piezoeléctricos, se
han deliberado aquí para resaltar sus aplicaciones indispensables en campos
multitudinarios.
Algunos de los campos populares que implementan el uso de biosensores son la industria
alimentaria para mantener un control de su calidad y seguridad, para ayudar a distinguir
entre lo natural y lo artificial; en la industria de la fermentación y en el proceso de
sacarificación para detectar concentraciones precisas de glucosa; en ingeniería metabólica
para permitir el monitoreo in vivo del metabolismo celular. Los biosensores y su papel
en la ciencia médica, incluida la detección temprana de la interleucina-10 humana que
causa enfermedades cardíacas, la detección rápida del virus del papiloma humano, etc.
son aspectos importantes. Los biosensores fluorescentes desempeñan un papel vital en el
descubrimiento de fármacos y en el cáncer. Las aplicaciones de biosensores prevalecen
en el sector de biología de plantas para descubrir los enlaces faltantes requeridos en los
procesos metabólicos. Otras aplicaciones están involucradas en defensa, sector clínico y
para aplicaciones marinas
2. Definición:

Los biosensores son dispositivos analíticos que convierten una respuesta biológica en una señal
eléctrica. Por excelencia, los biosensores deben ser altamente específicos, independientes de
parámetros físicos como el pH y la temperatura, y deben ser reutilizables. El término "biosensor"
fue acuñado por Cammann, y su definición fue introducida por IUPAC.(Mehrotra, 2016)

La fabricación de biosensores, sus materiales, dispositivos de transducción y métodos de


inmovilización requiere investigación multidisciplinaria en química, biología e ingeniería. Los
materiales utilizados en los biosensores se clasifican en tres grupos según sus mecanismos: grupo
biocatalítico que comprende enzimas, grupo de bioafinidad que incluye anticuerpos y ácidos
nucleicos, y microorganismos que contienen microbios.(Mehrotra, 2016)

3. Fundamento de acción

Los biosensores son dispositivos que utilizan un elemento de reconocimiento biológico retenido
en contacto espacial directo con el sistema de transducción (definición IUPAC). Los biosensores
se pueden representar directamente como dispositivos que convierten un evento físico o biológico
en una señal medible; se componen de un elemento biosensorial (es decir, enzima, tejido, célula
viva) que proporciona selectividad y un transductor que convierte las respuestas químicas en
señales procesables. Específicamente, el biosensor consta de tres partes: el primer elemento es el
biomediador (un material biomímico o derivado biológicamente, por ejemplo, tejido,
microorganismos, orgánulos, receptores celulares, enzimas , anticuerpos , ácidos nucleicos)., y
los elementos biológicos sensibles creados con ingeniería genética ), el segundo elemento es el
transductor (físicoquímico, óptico, piezoeléctrico, electroquímico, etc.) que transforma la señal
resultante de la interacción del analito con el elemento biológico en una señal que se puede medir
y cuantificado el tercer elemento es la electrónica asociada o el procesador de señales, responsable
de una visualización fácil de los resultados para la visualización de los resultados. Algunos
biosensores requieren un proceso de inmovilización de biomediadores en la superficie del sensor
(metal, polímero o vidrio y otros materiales) utilizando física o Técnicas químicas.(Ali, Najeeb,
Asim Ali, Farhan Aslam, & Raza, 2017)
Figura1. Componentes principales de un biosensor

El diagrama de bloques del biosensor incluye tres segmentos, a saber, sensor, transductor y electrones
asociados. En el primer segmento, el sensor es una parte biológica sensible, el segundo segmento es la parte
del detector que cambia la señal resultante del contacto del analito y para los resultados se muestra de una
manera accesible. La sección final comprende un amplificador que se conoce como circuito de
acondicionamiento de señales, una unidad de visualización y el procesad.(Ali et al., 2017)

Figura2. Principio de funcionamiento de los biosensores

4. Diseño de biosensores

Los factores cruciales que deben considerarse durante la ingeniería de biosensores de alto
rendimiento se resumen a continuación:

a) inmovilización / fabricación de bioanalito en su configuración nativa

b) alta accesibilidad de los sitios de recepción a las especies de interés

c) adsorción efectiva del analito al soporte empleado. Estas demandas deben abordarse
activamente al desarrollar el diseño de biosensores.

(Ali et al., 2017)

4.1. Acoplamiento de bioelemento y elemento sensor:


Para la incorporación efectiva del elemento de reconocimiento biológico / orgánico en el
sensor, se han propuesto varios fenómenos. Aquí, se ha arrojado luz sobre solo cuatro
mecanismos de acoplamiento principales que han optado ampliamente por adquirir el
propósito requerido:

a) encapsulación por adsorción física

b) inmovilización de membrana

c) amalgamación covalente

d) atrapamiento de la matriz.

En el atrapamiento de la membrana, el elemento orgánico está incrustado en la membrana


semipermeable que se coloca directamente sobre el elemento sensor. En este tipo, la
membrana actúa como una fase de separación entre el elemento orgánico y el del analito. Si
el mecanismo de acoplamiento involucra el uso de fuerzas físicas intermoleculares (fuerzas
hidrófilas / hidrófobas, fuerzas de Van Der Waals, fuerzas iónicas, etc.) para la unión del
bioelemento al sensor, este tipo de acoplamiento se denomina inmovilización por adsorción
física. De manera similar, si se emplean sustancias porosas como sol o matrices de gel como
medio de restricción para el elemento biológico y esta encapsulación de la matriz forma un
enlace directo con el elemento sensor, entonces se denomina inmovilización de la matriz. Si
el bioelemento está unido directamente al sensor mediante interacciones covalentes, este tipo
se etiqueta como acoplamiento covalente. figura 3 representa la idea básica detrás de este
tipo diferente de tipos de acoplamiento.(“What is a Biosensor - Principle, Types of
Biosensors and their Applications,” n.d.)

Figura3. Varios mecanismos de acoplamiento: A) Fabricación covalente, B) Inmovilización


de matriz, C) Encapsulación de membrana, D) Fabricación por adsorción física.

5. Tipos de biosensores
Los biosensores comenzaron en la década de 1960 por los pioneros Clark y Lyons. Los diversos
tipos de biosensores que se utilizan son los basados en enzimas, los tejidos, los inmunosensores,
los biosensores de ADN y los biosensores térmicos y piezoeléctricos.(“What is a Biosensor -
Principle, Types of Biosensors and their Applications,” n.d.)

 El primer sensor basado en enzimas fue hecho por Updike y Hicks en 1967. Los
biosensores de enzimas se han ideado en métodos de inmovilización, es decir, adsorción de
enzimas por las fuerzas de van der Waals, enlace iónico o enlace covalente. Las enzimas
comúnmente utilizadas para este propósito son las oxidorreductasas, polifenol oxidasas,
peroxidasas y aminooxidasas.
 El primer sensor basado en células o en microbios fue actualizado por Diviès. Los tejidos
para sensores basados en tejidos provienen de fuentes vegetales y animales. El analito de
interés puede ser un inhibidor o un sustrato de estos procesos. Rechnitz desarrolló el primer
sensor basado en tejido para la determinación del aminoácido arginina. Los sensores a base
de orgánulos se hicieron utilizando membranas, cloroplastos, mitocondrias y microsomas.
Sin embargo, para este tipo de biosensor, la estabilidad fue alta, pero el tiempo de detección
fue más largo y la especificidad se redujo. Los inmunosensores se establecieron en el hecho
de que los anticuerpos tienen una alta afinidad hacia sus antígenos respectivos, es decir, los
anticuerpos se unen específicamente a patógenos o toxinas, o interactúan con componentes
del sistema inmunitario del huésped.
 Los biosensores de ADN se diseñaron sobre la propiedad de que una molécula de ácido
nucleico monocatenario puede reconocer y unirse a su cadena complementaria en una
muestra. La interacción se debe a la formación de enlaces de hidrógeno estables entre las dos
cadenas de ácido nucleico.
 Biosensores magnéticos: los biosensores miniaturizados que detectan micro y
nanopartículas magnéticas en canales microfluídicos que utilizan el efecto de
magnetorresistencia tienen un gran potencial en términos de sensibilidad y tamaño.
 Los biosensores térmicos o los biosensores calorimétricos se desarrollan al asimilar los
materiales del biosensor como se mencionó anteriormente en un transductor físico.
 Los biosensores piezoeléctricos son de dos tipos: la microbalanza de cristal de cuarzo y el
dispositivo de onda acústica de superficie. Se basan en la medición de los cambios en la
frecuencia de resonancia de un cristal piezoeléctrico debido a cambios de masa en la
estructura del cristal.
 Los biosensores ópticos consisten en una fuente de luz, así como numerosos componentes
ópticos para generar un haz de luz con características específicas y para adaptar esta luz a un
agente modulador, un cabezal sensor modificado junto con un fotodetector.
 La proteína fluorescente verde y las posteriores variantes de proteína autofluorescente (AFP)
y los informadores de fusión genética han ayudado al desarrollo de biosensores codificados
genéticamente. Este tipo de biosensor es fácil de usar, fácil de diseñar, manipular y transferir
a las células. Un biosensor FRET de cadena única es otro ejemplo. Consisten en un par de
AFP, que son capaces de transferir energía de resonancia de fluorescencia entre ellos cuando
se juntan. Se pueden utilizar diferentes métodos para regular los cambios en las señales de
transferencia de energía de resonancia de Förster (FRET) en función de la intensidad, la
relación o la vida útil de las AFP. Los biosensores de péptidos y proteínas se fabrican
fácilmente a través de la química sintética, seguido de un marcaje enzimático con fluoróforos
sintéticos. Debido a su independencia de las AFP codificadas genéticamente,

6. Aplicaciones en la industria de alimentos sectores microbiológicos, pesticidas,

industria pesquera y del vino

Un dilema arduo en la industria de procesamiento de alimentos es de calidad e inocuidad,


mantenimiento de productos alimenticios y procesamiento. Las alternativas para la autenticación
y el control de los alimentos con una medición objetiva y consistente de los productos
alimenticios, de manera rentable, son deseables para la industria alimentaria. Por lo tanto, el
desarrollo de biosensores en respuesta a la demanda de técnicas simples, en tiempo real, selectivas
y económicas es aparentemente propicio(Bhalla, Jolly, Formisano, & Estrela, 2016)

De 1.5 a 2% de los gastos totales son requeridos por cada industria de alimentos para gastar en
la evaluación de la calidad de los productos alimenticios. (Bhalla et al., 2016)

Los alimentos contaminados conducen a las implicaciones para la salud, cuyas causas podrían ser
agentes o actividades biológicas o bioquímicas, para este propósito los biosensores de alimentos
pueden ser muy útiles en ese sentido. Los microbios (principalmente bacterias y hongos) imponen
implicaciones para la salud que conducen a la propagación de peligros graves para la salud (Bhalla
et al., 2016)

Monitoreo bacteriano:

Entre las bacterias, el deterioro común de los alimentos relacionado con los peligros para la salud
incluye, la cepa 0157: H7 de E. coli , Listeria monocytogenes, campylobacter y salmonella. Estas
bacterias son problemas comunes que enfrentan las industrias alimentarias, ya que reducen las
demandas de los consumidores de los alimentos si los alimentos proporcionados por la compañía
se contaminan con estas entidades biológicas que dañan los alimentos.
La salmonela, una bacteria con forma de bastón, es la principal causa de intoxicación alimentaria,
lo que lleva a una pérdida excesiva de agua y sales del cuerpo. Si las condiciones no se verifican
adecuadamente, pueden ser fatales en casos graves. Las industrias alimentarias se habían
esforzado por eliminar la causa de la intoxicación alimentaria mediante la detección y eliminación
oportunas de esta bacteria.

Para la supervisión de Salmonella , los biosensores piezoeléctricos se utilizan comúnmente para


detectar el complejo de antígeno-anticuerpo monoclonal de manera rápida y sencilla, pero son
detectores deficientes de los complejos de anticuerpos policlonales, que es su principal
inconveniente y deben abordarse para mejorarlos.

La bacteria Listeria monocytogenes se encuentra comúnmente en la carne procesada y puede


crecer en las industrias de procesamiento de alimentos desde donde se introduce en los alimentos
recién procesados. También se puede encontrar leche cruda o sus productos. Son la causa de una
enfermedad común en los humanos llamada listeriosis. La listeriosis es como la gripe común y
también conduce a un aborto espontáneo. Según Geng, Morgan,

Para L. monocytogenes. Los biosensores de fibra óptica se han usado comúnmente para
monitorear su presencia. Los biosensores de Resonancia de Plasmón de Superficie (SPR) junto
con biosensores de fibra óptica han demostrado ser los mejores para la detección de L.
monocytogenes.

Campylobacter jejuni es también la causa común de intoxicación alimentaria en todo el


mundo. El SPR óptico también se puede usar para la detección rápida de campylobacter.

La cepa 0157: H7 de E. coli conduce a la causa de diarrea sanguinolenta ya veces puede causar
insuficiencia renal. Está presente principalmente en alimentos mal cocinados, queso, leche cruda,
jugos y también en fuentes de agua contaminada, etc. Los biosensores amperométricos basados
en un sistema bienzimático se han utilizado con éxito para la detección deE. coli 0157: H7. Antes
de eso, los sensores ópticos también habían mostrado un monitoreo preciso de 0157: H7.

Detección de patógenos fúngicos: además de las bacterias, los hongos también son la causa
común del deterioro de los alimentos y causan graves problemas relacionados con la salud que
pueden resultar peligrosos para la vida en la mayoría de los casos. Los hongos que causan la
contaminación de los alimentos son comúnmente Botrytis sp., Aspergillus , Colletotrichum y
muchas otras especies de hongos como ese. Debido a la notable especificidad, los costos
reducidos y el monitoreo fácil y rápido a través de biosensores, las toxinas fúngicas también
pueden detectarse utilizando biosensores SPR ópticos. Después de su detección, se pueden tomar
medidas para eliminarlos de los productos alimenticios dentro del tiempo.

Metales pesados:
Los metales pesados representan la mayor amenaza para la salud de los seres humanos y su
hiperacumulación conduce a diversas condiciones de salud inadecuadas, ya que no se pueden
biodegradar fácilmente. Varios tipos de biosensores han brindado un gran éxito en la detección y
monitoreo de los niveles tóxicos de metales pesados que conducirían a condiciones de salud
perjudiciales. Los biosensores celulares basados en bacterias requieren el uso de genes que
resisten ciertos tipos de metales pesados como el cobre, el mercurio, el cobalto de estaño, etc. Sin
embargo, pueden actuar cuando los metales pesados interactúan con su citoplasma, la
dependencia de estos sensores se basa en la conjugación de algunas proteínas luminiscentes como
la luciferina, con aquellos genes que resisten los metales pesados. Los biosensores basados en
enzimas también han proporcionado resultados prometedores a este respecto, al igual que los
biosensores de fibra óptica se han utilizado para la detección de los niveles tóxicos de varios
metales pesados como plomo, cadmio, mercurio, cobre, níquel, cobalto, etc. Estos biosensores
funcionan por En la inhibición de estos metales pesados por los iones metálicos en diversos tipos
de enzimas, estas inhibiciones se controlan mediante el uso de diferentes tipos de biosensores con
alta especificidad. Los biosensores amperométricos se utilizaron para la detección exitosa de la
inhibición de los iones de mercurio (Hg +2) por la acción de la enzima ureasa. La inhibición de
cobalto, níquel, mercurio, oro y plomo con la misma enzima ureasa condujo al monitoreo de los
niveles tóxicos utilizando sensores de fibra óptica.

Bifenilos policlorados (PCB): Los bifenilos policlorados son agentes no biodegradables


utilizados en varios tipos de herbicidas e insecticidas que, aunque resultan ser buenos para el
control de plagas, también conducen a la acumulación de estos PCB en el suelo, que luego son
absorbidos por los cultivos. y, a su vez, entran en el cuerpo humano y causan serios problemas de
salud, la mayoría de los casos relacionados con el cáncer. Los biosensores han sido los más
prometedores en los últimos años en la detección precisa de estos compuestos orgánicos en
alimentos y suelos, utilizando biosensores inmunológicos que controlan la interacción antígeno-
antibacteriano utilizando transductores piezoeléctricos.

DBO: los microorganismos que viven en alcantarillas y aguas residuales generalmente


descomponen los compuestos orgánicos para producir sustancias tóxicas. La demanda bioquímica
de oxígeno (DBO) es la cantidad de oxígeno molecular (O 2 ) requerida por los microorganismos
para prosperar en las aguas residuales y se requiere principalmente durante la descomposición de
los compuestos orgánicos [ 94 , 101 - 103 ]. Esto conduce a una mayor contaminación ambiental
en las fuentes de agua. Un biosensor fue desarrollado por Nisshin Denki Electric Co. Ltd. en 1983
y fue el primer biosensor comercial creado para el monitoreo del nivel de DBO.

Pesticidas: los organofosforados que se usan comúnmente como insecticidas (pesticidas)


plantean cambios en la fertilidad del suelo, dañando así a muchos insectos y microbios
beneficiosos en el suelo y conducen a la pérdida de biodiversidad, para su detección, otro tipo de
sensores nanotecnológicos se han utilizado recientemente para medir Niveles tóxicos de estos
pesticidas en suelos y en agua. Sobre la base de la nanotecnología, los biosensores enzimáticos se
han modificado al permitir que se inmovilicen. El ejemplo común es el de los sensores de
acetilcolinesterasa (enzima) que funcionan inhibiendo la actividad de la acetilcolinesterasa para
detectar organofosfatos, donde la actividad de la acetilcolinesterasa se monitorea constantemente

Compuestos de nitrógeno y detección de microbios: también se han introducido biosensores


comerciales y se han utilizado con éxito para controlar dioxinas, nitratos y E. coli y compuestos
similares a las dioxinas. Los biosensores basados en microbios también pueden emplearse para
monitorear contaminantes en el aire y también patógenos. Los sensores de fagos pueden usarse
para detectar microbios patógenos transmitidos por el aire.

En la industria del pescado

La histamina, cuyos contenidos máximos vienen regulados mediante legislación comunitaria, se


ha convertido en el parámetro clave para la determinación de frescura y calidad del pescado,
siendo esta amina la causante de intoxicaciones alimentarias similares a las producidas por
alérgenos alimentarios.

El método de determinación de histamina desarrollado por Biolan y ahora mundialmente


reconocido, se realiza mediante un biosensor enzimático integrado en el dispositivo analítico
Biofish-300, equipo compacto para la cuantificación de histamina en pescado o derivados de una
manera precisa, sencilla y rápida. Los biosensores de Biolan combinan la alta especificidad y
selectividad de enzimas específicos con una transducción amperométrica de la señal, fácilmente
detectable y cuantificable.

En procesos de fermentación

En las industrias de fermentación, la seguridad del proceso y la calidad del producto son cruciales.
Por lo tanto, el monitoreo efectivo del proceso de fermentación es imperativo para desarrollar,
optimizar y mantener los reactores biológicos con la máxima eficacia. Los biosensores se pueden
utilizar para controlar la presencia de productos, biomasa, enzimas, anticuerpos o subproductos
del proceso para medir indirectamente las condiciones del proceso. Los biosensores controlan con
precisión la industria de la fermentación y producen resultados reproducibles debido a su
instrumentación simple, selectividad formidable, precios bajos y fácil automatización. Hoy en
día, varios tipos de biosensores comerciales son accesibles; capaz de detectar parámetros
bioquímicos (glucosa, lactato, lisina, etanol, etc.) y se usa ampliamente en China, ocupando
aproximadamente el 90% de su mercado.
En el proceso de fermentación, la sacarificación se controló mediante el método tradicional de
Fehiing. Dado que este método implica la titulación de la reducción de azúcar, sus resultados
fueron inexactos. Sin embargo, desde el lanzamiento comercial del biosensor de glucosa en 1975,
las industrias de fermentación se han beneficiado. Ahora las fábricas utilizan con éxito los
biosensores de glucosa para controlar la producción en el taller de sacarificación y fermentación
y utilizan el método bioenzimático para producir glucosa.

Los biosensores también se emplean en la recuperación del intercambio iónico, donde se lleva a
cabo la detección del cambio de la composición bioquímica. Por ejemplo, el biosensor de
glutamato se ha utilizado para llevar a cabo experimentos de recuperación por intercambio iónico
de un sobrenadante de glutamato en un licor isoeléctrico. El proceso de fermentación es un
proceso bizantino con múltiples variables fundamentales, la mayoría de las cuales son difíciles de
medir en tiempo real. El monitoreo en línea de los metabolitos críticos es esencial para facilitar
la optimización rápida y controlar los procesos biológicos. En los últimos años, los biosensores
han atraído mucha atención en el monitoreo en línea en el proceso de fermentación debido a su
simplicidad y rápida respuesta.

7. Aplicaciones en el sector médico, ejemplos específicos.

En la disciplina de la ciencia médica, las aplicaciones de los biosensores están creciendo


rápidamente. Los biosensores de glucosa se usan ampliamente en aplicaciones clínicas para el
diagnóstico de diabetes mellitus, que requiere un control preciso sobre los niveles de glucosa en
sangre. El uso de biosensores de glucosa en sangre en el hogar representa el 85% del gigantesco
mercado mundial.(Ali et al., 2017)

Los biosensores se utilizan de forma generalizada en el campo médico para diagnosticar


enfermedades infecciosas. Se está estudiando una tecnología de biosensores prometedora para el
diagnóstico de infección del tracto urinario (ITU) junto con la identificación de patógenos y la
susceptibilidad antimicrobiana.(Mehrotra, 2016)

Es importante identificar a los pacientes con insuficiencia cardíaca en etapa terminal, propensos
a resultados adversos durante la fase temprana de implantación del dispositivo asistido por el
ventrículo izquierdo. Se ha utilizado un nuevo biosensor, basado en óxido de hafnio (HfO 2), para
la detección temprana de la interleucina humana (IL) -10. La interacción entre la IL-10 humana
recombinante con el correspondiente anticuerpo monoclonal se estudia para la detección
temprana de citoquinas después de la implantación del dispositivo. Los patrones de fluorescencia
y la espectroscopia de impedancia electromecánica caracterizan la interacción entre el anticuerpo-
antígeno y el reconocimiento biológico de la proteína se logra mediante el patrón de fluorescencia.
Chen et al. aplicó HfO 2 como un transistor de efecto de campo biológico muy sensible. HfO 2
El biosensor se ha funcionalizado para la deposición de anticuerpos con la detección de un
antígeno humano mediante espectroscopia de impedancia electroquímica.

El mayor dilema al que nos enfrentamos hoy es la insuficiencia cardíaca con aproximadamente
un millón de personas que la padecen. Las técnicas para la detección de enfermedades
cardiovasculares incluyen análisis de columna de inmunoafinidad, fluorometría e
inmunoabsorción ligada a enzimas. Estos son laboriosos, requieren personal calificado y
requieren mucho tiempo. Los biosensores establecidos en la medición eléctrica emplean el
reconocimiento molecular bioquímico de la selectividad deseada con un biomarcador particular
de interés.

Las otras aplicaciones de biosensores incluyen: medición cuantitativa de marcadores cardíacos en


suero no diluido, ensayo de impedancia microfluídica para controlar la hipertrofia cardíaca
inducida por endotelina, matriz de inmunosensores para inmunofenotipificación clínica de
leucemias agudas, efecto de las oxazaborolidinas sobre la fructosiltransferasa inmovilizada en
enfermedades dentales; Ensayo del inhibidor de la histona deacilasa (HDAC) de la transferencia
de energía de resonancia, biochip para una detección rápida y precisa de múltiples marcadores de
cáncer y detección neuroquímica mediante electrodos de microaguja de diamante.

Biosensores fluorescentes

Los biosensores fluorescentes son agentes de imagen, para uso en el descubrimiento de cáncer y
fármacos. Han permitido conocer el papel y la regulación de las enzimas a nivel celular. Los
biosensores FRET basados en GFP y codificados genéticamente desempeñan un papel vital.

Los biosensores fluorescentes son pequeños andamios sobre los cuales se montan una o varias
sondas fluorescentes (enzimáticamente, químicamente o genéticamente) a través de un
receptor. El receptor identifica un analito u objetivo específico, transduciendo así una señal
fluorescente que puede detectarse y medirse fácilmente. Los biosensores fluorescentes pueden
detectar iones, metabolitos y biomarcadores de proteínas con gran sensibilidad y también pueden
informar la presencia, actividad o estado del objetivo (suero, extractos celulares) en una solución
compleja. Se emplean para sondear la expresión de genes, la localización de proteínas y la
conformación en campos como la transducción de señales, la transcripción, el ciclo celular y la
apoptosis. La indicación de artritis, enfermedades inflamatorias, enfermedades cardiovasculares
y neurodegenerativas, infecciones virales, cáncer y metástasis se realiza utilizando estos sensores.

Los biosensores fluorescentes se utilizan en programas de descubrimiento de fármacos para la


identificación de fármacos por medio de un alto rendimiento, enfoques de detección de alto
contenido, para el análisis de detección posterior de detonaciones y optimización de clientes
potenciales. Se consideran herramientas potentes para la evaluación preclínica y la validación
clínica del potencial terapéutico, la biodistribución y la farmacocinética de los fármacos
candidatos. Los biosensores fluorescentes se emplean eficazmente para la detección temprana de
biomarcadores en diagnósticos moleculares y clínicos, para monitorear la progresión de la
enfermedad y la respuesta al tratamiento / terapéutica, para la imagenología intravital y la cirugía
guiada por imágenes.

Se usó un biosensor FRET codificado genéticamente para la detección de la actividad quinasa


Bcr-Abl en células de pacientes con cáncer para evaluar la actividad de la quinasa Bcr-Abl y
establecer una interrelación con el estado de la enfermedad en la leucemia mieloide crónica. Esta
sonda se empleó además para regular la respuesta al tratamiento y para observar la aparición de
células resistentes a los medicamentos, lo que permite la predicción de terapias alternativas

8. Otras aplicaciones

Los biosensores se pueden utilizar para fines militares en tiempos de ataques biológicos. El
principal motivo de estos biosensores es identificar de manera sensible y selectiva a los
organismos que representan una amenaza en el tiempo virtualmente real, llamados agentes de
guerra biológica (BWA, por sus siglas en inglés), a saber, bacterias (vegetativas y esporas),
toxinas y virus. Se han realizado varios intentos para instalar estos biosensores utilizando técnicas
moleculares que son capaces de reconocer los marcadores químicos de los BWA.

Los sistemas de detección basados en ácido nucleico son más sensibles que los métodos de
detección basados en anticuerpos, ya que proporcionan especificidad basada en genes, sin utilizar
pasos de amplificación para lograr la sensibilidad de detección a los niveles requeridos.

El virus del papiloma humano HPV (virus de ADN de doble cadena) se ha clasificado en dos
tipos: HPV 16 y 18; y está relacionado con el cáncer cervical invasivo. Los VPH pueden
detectarse rápidamente utilizando un nuevo biosensor de ácido nucleico peptídico de onda
acústica de superficie permeable con resonadores dobles de dos puertos. Esta sonda detecta
directamente el ADN genómico del VPH sin la amplificación de la reacción en cadena de la
polimerasa, y también puede unirse a las secuencias de ADN objetivo con mucha eficacia y
precisión.

En ingeniería metabólica

Las preocupaciones ambientales y la falta de sostenibilidad de los productos derivados del


petróleo están exhortando gradualmente la necesidad de desarrollar fábricas de células
microbianas para la síntesis de sustancias químicas. Los investigadores ven la ingeniería
metabólica como la tecnología habilitadora para una bioeconomía sostenible. También han
previsto que una fracción sustancial de los combustibles, productos químicos básicos y productos
farmacéuticos se produzcan a partir de materias primas renovables mediante la explotación de
microorganismos en lugar de depender de la refinación del petróleo o la extracción de plantas. La
alta capacidad para la generación de diversidad también requiere métodos de detección eficientes
para seleccionar a los individuos que llevan el fenotipo deseado. Los métodos anteriores eran
analíticos de ensayos enzimáticos basados en espectroscopia, sin embargo tenían un rendimiento
limitado. Para sortear este obstáculo, se desarrollaron biosensores codificados genéticamente que
permiten la monitorización in vivo del metabolismo celular, lo que ofrece un potencial de
detección y selección de alto rendimiento utilizando clasificación celular activada por
fluorescencia (FACS) y supervivencia celular, respectivamente.

Los sensores FRET comprendían un par de fluoróforos donantes y aceptores, y se emparedó un


péptido de unión a ligando entre los dos. Cuando estaba ligado por un ligando de interés, el
péptido experimentó un cambio conformacional, por lo tanto un cambio de FRET. Aunque tenían
una alta ortogonalidad, resolución temporal y facilidad de construcción, los sensores FRET solo
podían informar la cantidad de metabolitos en cuestión y no podían ejercer la regulación corriente
abajo de la señal.

Los factores de transcripción son proteínas sensoriales naturales evolucionadas para regular la
expresión génica en respuesta a los cambios en el entorno para la detección de alto
rendimiento. 61 Se logra hackeando el sistema de transcripción del host y empleando un promotor
específico de condición sintética para dirigir la expresión de un gen reportero. Estos exhiben mala
ortogonalidad y ruido de fondo.

La tercera clase de biosensores comprende riboswitches; El dominio regulador de un ARNm que


puede unirse selectivamente a un ligando y cambiar su propia estructura, regulando en
consecuencia la transcripción de su proteína codificada. A diferencia de los biosensores basados
en TF, son comparativamente más rápidos, ya que el ARN ya se ha transcrito, y tampoco
dependen de las interacciones proteína-proteína o proteína-metabolito. En las últimas décadas,
los ribosomas han sido ampliamente diseñados en sistemas bacterianos

Biosensores en biología vegetal.


Las nuevas tecnologías revolucionarias en las áreas de secuenciación de ADN e imágenes
moleculares han llevado a avances en la ciencia de las plantas. Los métodos tradicionales de
espectroscopia de masas para medir el conocimiento de la localización celular y subcelular, y la
medición de los niveles de iones y metabolitos tenían una precisión sin precedentes, pero carecían
de la información clave sobre la ubicación y la dinámica de los sustratos, receptores y
transportadores de enzimas. Sin embargo, esta información se puede aprovechar fácilmente
mediante biosensores. Para medir un proceso dinámico en condiciones fisiológicas, necesitamos
dispositivos tácticos para visualizar el proceso real, por ejemplo, la conversión de un metabolito
en otro o la activación de eventos de señalización. Esta visualización se puede hacer mediante
sensores que responden dinámicamente.

El laboratorio de Roger Tsien fue el primero en desarrollar prototipos de proteínas para medir la
actividad de la caspasa y controlar los niveles de calcio en las células vivas. Estos sensores se
basaron en FRET (FRET) entre dos variantes espectrales de GFP. Aplicación in vivo de
biosensores involucra imágenes de alta resolución temporal de oscilaciones de calcio utilizando
sensores de cameleón.

Los biosensores se pueden utilizar para identificar los componentes faltantes pertinentes al
metabolismo, la regulación o el transporte del analito. El sensor FRET para sacarosa, responsable
de la identificación de proteínas, realiza un paso de transporte en la carga de floema-flujo de
sacarosa desde la mesofila. Los ensayos basados en fluorímetro con sensores de azúcar FRET
reconocen con éxito los transportadores de azúcar que pueden funcionar inmediatamente después
de la exposición de las células de levadura hambrientas a la glucosa. Ensayos similares identifican
genes que afectan el pH citosólico o vacuolar en levaduras y justifican que los biosensores se
puedan aplicar en pantallas genéticas siempre que se disponga de tecnologías de imagen de
rendimiento adecuado

9. Ventajas y desventajas frente a métodos convencionales.

9.1. Ventajas

 Las técnicas tradicionales que realizan experimentos químicos y la espectroscopia tienen


deficiencias debido a la fatiga humana, son costosas y requieren mucho tiempo. Las
alternativas para la autenticación y el control de los alimentos con una medición objetiva
y consistente de los productos alimenticios, de manera rentable, son deseables para la
industria alimentaria.
 Por lo tanto, el desarrollo de biosensores en respuesta a la demanda de:
Técnicas simples,
En tiempo real,
Selectivas
Económicas es aparentemente propicio.
 Los biosensores controlan con precisión la industria de la fermentación y producen
resultados reproducibles debido a su instrumentación simple, selectividad formidable,
precios bajos y fácil automatización.
 Se trata de dispositivos miniaturizables y automatizables.
 No requiere de personal cualificado para su utilización, ya que su manejo es simple
 No son necesarios los pretratamientos de las muestras
 Amenicidad ambiental, no se usan reactivos contaminantes para evaluar un alimento.

9.2. Desventajas

 Su calibración resulta técnicamente demandante y debido a ello, la incursión de la gran


mayoría de los biosensores ha sido lenta
 La conveniencia de aumentar el alcance de la tecnología crea un dilema político crea
conflictos sociales a través de la creciente brecha de riqueza Pérdida de empleo

10. Nuevos avances y perspectivas.

Los biosensores basados en células y tejidos consisten en proteínas modificadas genéticamente


que se infunden en las células ex vivo o in vivo. Permiten al investigador percibir niveles de
hormonas, medicamentos o toxinas, de forma continua y no invasiva, utilizando biofotónicos u
otros principios físicos. El alcance en este sentido podría ser valioso en la investigación sobre el
envejecimiento.

Los biosensores se utilizan para aplicaciones marinas para la detección de eutrofización mediante
sensores de nitrito y nitrato. Se han desarrollado varios sensores basados en la detección de
hibridación de ácidos nucleicos para la detección de organismos; El "Procesador Ambiental de
Muestras" está en proceso en el Instituto de Investigación del Acuario de la Bahía de Monterey,
cuyo objetivo es la detección automática de algas tóxicas in situ a partir de amarres que utilizan
sondas de ARN ribosomal es un desarrollo prometedor en este campo. También uno de los
objetivos principales es la detección de contaminantes, metales pesados y pesticidas a través de
biosensores.

Las aplicaciones de los nanomateriales en biosensores brindan oportunidades para desarrollar una
nueva generación de tecnologías de biosensores. Los nanomateriales mejoran las propiedades
mecánicas, electroquímicas, ópticas y magnéticas de los biosensores y se están desarrollando
hacia biosensores de molécula única con matrices de biosensores de alto rendimiento. Las
moléculas biológicas poseen estructuras y funciones especiales, y determinar cómo utilizar
completamente la estructura y la función de los nanomateriales y biomoléculas para fabricar
nanocompuestos multifuncionales, nanofilms y nanoelectrodos de una sola molécula sigue siendo
un gran desafío. El procesamiento, la caracterización, los problemas de interfaz, la disponibilidad
de nanomateriales de alta calidad, la adaptación de los nanomateriales, y los mecanismos que
gobiernan el comportamiento de estos compuestos a nanoescala en la superficie de los electrodos
también son grandes desafíos para las técnicas actuales. Las formas de mejorar la señal de relación
de ruido 116, cómo mejorar la transducción y la amplificación de las señales, también son
impedimentos importantes.
El trabajo futuro debería centrarse en aclarar el mecanismo de interacción entre los nanomateriales
y biomoléculas en la superficie de los electrodos o nanofilms y utilizar nuevas propiedades para
fabricar una nueva generación de biosensores. Sin embargo, los biosensores basados en
nanomateriales muestran grandes perspectivas atractivas, que se aplicarán ampliamente en el
diagnóstico clínico, el análisis de alimentos, el control de procesos y el monitoreo ambiental en
un futuro cercano.

11. Países que lideran en la producción y comercialización de biosensores.

Geográficamente, América del Norte domina el mercado de biosensores y se proyecta que


experimentará una tasa compuesta compuesta de 7,2% durante el período de pronóstico de 2014
a 2020. Sin embargo, se estima que Asia Pacífico tendrá una tasa de crecimiento más fuerte debido
a factores como un número creciente de productos farmacéuticos.

El mercado global para biosensores está altamente consolidado con cinco empresas que
representan el 75.2% del mercado a partir de 2013. Las cinco compañías son F. Hoffmann-La
Roche Ltd., Abbott Point of Care, Inc., LifeScan, Inc., Siemens Healthcare y Medtronic, Inc. La
mayoría de estas empresas innovan y desarrollan constantemente programas y software
tecnológicamente avanzados y / o mejorados para mantener su posición en el mercado global.

12. Conclusiones

Para concluir el tema tratado se puede decir que muchos biosensores ofrecen también las ventajas
de su pequeño tamaño y gran portabilidad, lo que permite pequeñas cantidades de muestra para
hacer el análisis relativamente baja, lo que es muy importante si se trata de análisis de sangre o
de ADN, o si la muestra es cara o difícil de conseguir.

A todo esto hay que unir que son baratos de producir, tienen un tiempo de vida larga y cuentan
con una gran versatilidad que permite el diseño de dispositivos a la carta.

Por lo que resulta muy útiles para constituirse en la base de proyectos de Bioingenieria que nos
permitirán así mejora la calidad de la salud y la calidad de vida de los diferentes tipos de pacientes
poniendo de esta manera la tecnología al servicio de la comunidad que son los que más lo
necesitan.

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