Cuantificacin de protenas por el Mtodo del cido bicinconnico

(Smith P., 1985)

El cido bicinconnico, sal sdica, es un reactivo cromognico especfico para Cu 1+ y en el segundo

paso de la reaccin dos molculas de BCA reaccionan con una de in Cu 1+. La cantidad de
Cu2+reducido es una funcin de la concentracin de protenas y ser determinada
espectrofotomtricamente por un cambio en el color de la solucin a prpura, el cual absorbe a 562
nm. La absorbancia es directamente proporcional a la cantidad de protena presente en la solucin
y puede ser estimada por comparacin con un estndar de protena conocido, tal como la albmina
srica bovina (ASB). 1

Cuantificacin de protenas por el Mtodo de Bradford

(Bradford, M., 1976)

Basado en el cambio de color del colorante Coomassie brilliant blue G-250 en respuesta a
diferentes concentraciones de protenas. Este compuesto interacciona con aminocidos bsicos
(especialmente arginina) y aromticos. Esta unin del colorante con las protenas provoca un
cambio en el mximo de absorcin del colorante desde 465 a 595 nm. Por lo tanto, este mtodo se
basa en la propiedad del Azul Brillante de Coomasie G-250 de presentarse en dos formas con
colores diferentes, rojo y azul. La forma roja se convierte en azul cuando el colorante se une a la
protena.2

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Bradley J, Markwell J. Assays for determination of protein concentration.

Current Protocols in Protein Science. 2007; 48: 341-360.
2. Kruger N. The Bradford method for protein quantitation. Methods Mol
Biol. 1994;32: 9-15.