2017-5-30 Perl de avonoides e ndices de oxidacin de algunos propleos colombianos

ZootecniaTropical ServiciosPersonalizados
versinimpresaISSN07987269
Articulo
Zootecnia Trop.v.25n.2Maracayjun.2007
ArticuloenXML

Referenciasdelartculo
Perfildeflavonoidesendicesdeoxidacindealgunos
propleoscolombianos Comocitaresteartculo

GuillermoSalamancaGrosso1*,IvonneL.CorreaCarvajal1yJudith Traduccinautomtica
Principal2 Enviararticuloporemail
1 GrupodeInvestigacionesMellitopalinolgicasyPropiedadesFisicoqumicas Indicadores
de Alimentos, Departamento de Qumica, Facultad de Ciencias. Universidad
delTolima,Colombia.*Correoelectrnico:gsalaman@ut.edu.co CitadoporSciELO

2 Estacin de Apicultura Hctor Ochoa Zuleta Decanato de Ciencias Accesos

Veterinarias, Universidad Centroccidental Lisandro Alvarado. Tarabana,
estadoLara.Venezuela Linksrelacionados

RESUMEN Compartir

Los flavonoides son compuestos qumicos de origen botnico con marcada Otros
actividad biolgica y han sido usados como marcadores de la calidad del
propleo. En este trabajo se presenta la metodologa necesaria en la Otros
determinacin cuantitativa de flavonoides totales usando dos mtodos
espectrofotomtricos complementarios, basados en la reactividad diferencial
del tricloruro de aluminio y 24 dinitrofenilhidrazina. Frente a flavonas, Permalink
flavonoles y flavanonas las determinaciones se hicieron mediante
espectrofotometra ultravioleta visible. Adicionalmente se evaluaron los
ndicesdeoxidacinenungrupodemuestrasdepropleoscolombiano.Las
determinacionesserealizaronsobreextractosalcohlicosusandoetanoldel96%v/v(EEP).Lasmuestrasfueron
colectadas en los Departamentos de Arauca y Boyac, en las zonas de vida de bosque hmedo tropical y seco
montanobajo.Losndicesdeoxidacinsedeterminaronsiguiendoeltestdelpermanganatodepotasioenmedio
cido. Las determinaciones para el contenido total de flavonoides variaron entre 7,500,01 y 22,30,17% los
valores observados en el test de tricloruro de aluminio (flavonas y flavonoles) estuvieron entre 0,520,03 y
3,250,04%ypara2,4D(Flavanonas)entre9,900,21y11,780,26%respectivamente.Losndicesdeoxidacin
observadosenmuestrasconaltoscontenidosdeflavonoidestotalesestuvieronporelordende2a10segundos,
demostrndose as la actividad antioxidante de las muestras analizadas y la calidad de los EEP de las zonas
estudiada.
Palabras clave: propleo, flavonoides, flavonas, flavonoles, flavanonas, determinacin cuantitativa, mtodos
espectrofotomtricos.
FlavonoidprofileandoxidationindexesforsomeColombianpropolis

ABSTRACT
Flavonoidsarechemicalcompoundsofbotanicaloriginwithnoticeablebiologicalactivityandhavebeenusedlike
markersoftheirqualityproperties.Inthisworkweshowthemethodologyforquantitativedeterminationoftotal
flavonoids,usingtwocomplementaryspectrofotometricmethods,basedonthereactivitydifferentialofaluminum
trichloride and 24 dinitrofenilhidrazine. For flavonas, flavonoles and flavanonas the determinations were
performed by ultraviolet visible methods. Additionally, oxidation indexes for Colombian samples were evaluated.
Thedeterminationsweremadeonalcoholicextractsusingethanolof96%v/v(EEP).Thesampleswerecollected
at the Arauca and Boyac Departments, in the tropical humid forest and dry mountain forest, respectively. The
oxidation indexes were determined following the test of the permanganate of in acid media. Total content for
flavonoids were 7.500.01 to 22.3 0.17% and using the tricloride test for flavones and flavanols, between
0.520.03 and 3.250.04%. For 2,4D (Flavanones) results were 9.900,21 and 11.780.26% respectively. The
oxidationindexobservedwere2a10seconds,demonstratingtheiractivityandquality.

Key words: propolis, flavonoids, flavones, flavonols, flavanones, flavanonols, quantitative determination,
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Key words: propolis, flavonoids, flavones, flavonols, flavanones, flavanonols, quantitative determination,
spectrophotometricmethod.
Recibido:16/01/2006Aceptado:28/03/2007
INTRODUCCIN

Elpropleoesunproductodenaturalezacomplejaelaboradoporlasabejasapartirderesinas,aceitesesenciales
y polen que colectan en las zonas de vida donde realizan su actividad de pecoreo. En el proceso de recoleccin,
transporteyalmacenamientoalacolmena,adicionansustanciasenzimticasycera,desecrecionesglandularesde
la hipofaringe y glndulas cereras presentes en los esternitos del abdomen. Adicionalmente, puede aadir
microelementosdelentorno,dondeelproductofinalesdeconsistenciaviscosa,contonalidadesdecolorcastao,
marrn, pardo, rojizo y verde, en algunos casos negro, segn sea el origen botnico y geogrfico (El Hady y
Hegazi,2002Mohammadzadehetal.,2007).
El producto presenta propiedades anti inflamatorias, inmunoestimulantes, hepatoprotectoras, carcino estticas,
antimicrobianas,antivirales,antifngicos,antiprotozoarios,anestsicosyderegeneracintisular.Diversostrabajos
handemostradoqueelpropleoesunafuentenaturaldeantioxidantes,queprotegenalosaceitesylipoprotenas
sricas de la oxidacin. Sus propiedades antioxidantes se deben a su actividad anti radicalaria particularmente,
frentearadicalesalcoxiyenmenorgrado,asuperxidoyalefectoinhibidorsobreelincuproso,iniciadordela
oxidacindelaslipoprotenasdebajadensidad(Farretal.,2004Principal,2005).
Los propleos estn constituidos fundamentalmente por flavonoides, derivados de esteres y cidos fenlicos.
WalkeryCrane(1987)reportaronlapresenciade38flavonas,12derivadosdelcidobenzoico,14derivadosdel
alcohol cinamlico y el cido cinmico, 12 componentes entre alcoholes, cetonas y fenoles, 7 terpenos, 11
esteroides, 7 azcares y 2 aminocidos. Los mtodos instrumentales de anlisis actualmente han permitido
identificar entre 150 y 180 compuestos distintos en un mismo producto, demostrndose la variabilidad y
complejidaddelproducto,quehandadovalidezyversatilidaddeusoteraputico(HegaziyElHady,2001Parket
al.,2002Salamanca,2002Muratetal.,2002).
Por su consistencia y estructura, los propleos pueden clasificarse en dos grupos, los de naturaleza fluida y los
balsmicosoleorresinosos.Lasprimerospresentanunafraccinimportantedeagentesvoltiles,mientrasqueen
losbalsmicospredominalaconsistenciadensa,conbajocontenidodevoltiles,susceptiblesdepolimerizaciny
con frecuencia se percibe el aroma de las plantas en forma concentrada en general son sustancias viscosas,
semislidasycauchosas.Engeneral,elpropleopresentaunaconsistenciavariable,dependiendodesuorigeny
condiciones trmicas se presenta como un material duro a los 15C y se torna ms maleable a medida que
aumenta la temperatura. Su punto de fusin vara entre 60 a 70C, llegando en algunos casos hasta 100C
(Salamancaetal.,2004).
En principio se podra establecer una clasificacin para los propleos en funcin de su origen biogeogrfico,
tomandocomoreferencialoscontenidosdeflavonoidesysteresfenlicosobservadosenlasmuestraseuropeasy
americanas, pero aun la informacin es incompleta. Las muestras asociadas al gnero Populus spp, contienen
mezclas de agliconas flavnicas, cidos hidroxicinmicos y sus steres. En muestras rusas se han detectado
agliconasdeflavonasyenmuestrasbrasilerassehanencontradoprincipalmentederivadosdelcidopcumrico
(Souzaetal.,2002Muratetal.,2002).Elaromaenalgunoscasosesparecidoaldesuorigenbotnico,siendo
amargo,picanteyhastaastringente(Burdock,1998Salamanca,2005).

La cuantificacin de flavonoides en productos naturales y en particular en muestras de propleo, usualmente se

hace mediante cromatografa de capa fina (Didry et al., 1990), anlisis calorimtrico (Nagy y Grancai, 1996),
cromatografadegases(ChristovyBankova,1992),cromatografadegasesacopladaamasasGC/MS(Bankovaet
al.,1987)ycromatografalquidadealtaeficiencia(Vennatetal.,1995).Losmtodosporcromatografadegases
y de alta eficiencia aportan informacin definitiva en la caracterizacin de las muestras, pero presentan
limitaciones importantes debido a los costos del equipamiento y la participacin de personal con formacin
especfica en el rea instrumental. En cambio, los mtodos espectrofotomtricos permiten cuantificar flavonoides
con estructuras similares y son convenientes y apropiados en las determinaciones de rutina, aunque presenten
limitacionesenlasensibilidadyespecificidad.Lasflavonasyflavonoles,desdeelpuntodevistareactivo,forman
complejos estables con el tricloruro de aluminio y son susceptibles de analizar mediante espectrofotometra
ultravioletavisible (Mabry et al., 1970) entre tanto, las flavanonas y flavanonoles reaccionan mejor con el 2,4
Dinitrofenilhidrazina(NagyyGrancai,1996),situacinquehasidoevaluadaporChangetal.(2002)yKosalecet
al.(2004),enlaestimacindeflavonoidestotalesenpropleosdeTaiwnyCroacia.
Los flavonoides, desde el punto de vista estructural, corresponden a un sistema de 3 anillos fusionados en una
secuencia de carbonos que presenta un heterociclo central en una estructura C6C3C6, que ha sido discutida
ampliamente por su estabilidad y reactividad (Ami et al., 2003 Asres et al., 2006). Estos compuestos suelen
presentaralmenostreshidroxilosfenlicos,condicinquefacilitasuclasificacinyreactividadfrenterespectodel
triclorurodealuminioy2,4D.Elusodeestoscompuestosenladeterminacindeflavonas,flavonoles,flavanonase
isoflavonasseencuentrabiendocumentado.Enelprimercasosegenerauncomplejoestableconunmximode
absorcina415nm(Jurd,1962),queessensiblefrenteaapigenina,crisinayluteonina,ascomoenlosflavonoles
rutina, morina, quercetina, miricetina, kaempferol, quercitina y galangina. Las flavonas naringenina, naringina y
hesperidina no presentan absorcin importante con el tricloruro de aluminio, pero son activas con 2,4D con
mximosdeabsorcina495nm.Lasisoflavonasnopresentanabsorcina415y495nm(Changetal.,2002).La
necesidad de cuantificar estos compuestos en propleos comerciales es cada vez ms frecuente, debido al
incrementoydesarrollodepreparadoscomercialesabasedepropleos.Enconsecuenciahasidonecesarioacudir
alasdirectricesestablecidasenlosmanualesdebuenasprcticasdemanufactura,quepermitanelaseguramiento
inicialenlacomprademateriasprimasparalaelaboracindenuevosproductos.Considerandolasnecesidadesde
los comercializadores de propleos, se ha planteado el uso de dos tcnicas complementarias: una de ellas con
tricloruro de aluminio y 2,4 Dinitrofenilhidracina (2,4D), como mtodo de rutina para la cuantificacin de
flavonoidestotales,flavonasflavonoidesyflavanonas.
MATERIALESYMTODOS
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flavonoidestotales,flavonasflavonoidesyflavanonas.
MATERIALESYMTODOS

Reactivosysolventes
Todos los reactivos usados en este trabajo fueron de grado analtico. Etanol, metanol, acetato e hidrxido de
potasio, acido sulfrico, cloruro de aluminio y 2,4 dinitrofenilhidrazina se compraron en la compaa Merck
(Alemania),estndaresdeNaringeniayQuercetinaseadquirierondeSigmaAldrich(St.Louis,MO).

Equipos

Se uso una centrifuga universal 04000 rpm, para la remocin de material insoluble luego de las operaciones de
extraccinenlaobtencindeEEP.AgitadormecnicoyunidadSpectronicGnesis5MiltonRoy,enceldasde10
mmdecuarzoyprogramasSoftCarddecontrol.

Muestrasdepropleo
Secolectaron8muestrasdepropleocrudoenelDepartamentodeBoyacconunazonadevidadebosqueseco
montanobajo,conpredominiodeclimafro(13a14C)aunaaltitudentre2.400y2.800msnm,enlassiguientes
localidades:Beln:055931Ny725500E.,1.310mm/ao,SantaRosadeViterbo055720Ny725701E.764
mm/ao, Cerinza: 055728 N y 725700 E. 1.055 mm/ao, Cucaita: 053245 N y 732726 E. 760 mm/ao,
Nobsa:054624Ny725654Ey760mm/aoPaipa:054704Ny730647E.944mm/aoCombita:053748
Ny731948E.920mm/ao.SeincorporademsunamuestracolectadaenelDepartamentodeArauca(Tame:
062744Ny714420E.2.100mm/ao),enunazonadevidadebosquehmedotropicalcon28C.Finalmentese
usarondosmuestrasdereferenciaremitidasalaUniversidaddelTolima,desdelaregindeMendoza(Argentina),
para un total de 10 que se analizaron por triplicado. stas se acondicionaron convenientemente en recipientes
estrilesyhermticosdevidriombar,quesemantuvierondemaneraindividualenrefrigeradora5C,hastael
momentodelaextraccin.

Extractosetanlicos(EEP)

Los extractos de propleos, fueron preparados como se indica a continuacin: 20 g de muestra cruda, se
extrajeron con 30 mL de etanol del 96% (v/v), por 48 h a 25C empleando un sistema mecnico de agitacin
continuaserealizcentrifugacina2500rpmpor5minutospararemoverelmaterialsuspendidonosoluble.Los
extractosfinales,seconservaronenfrascosmbara5C.

Determinacionescon2,4D
Unpatrnde()Naringeninafueusadocomoestndardereferencia.20mgdelpatrn,fuedisueltoenmetanol,
las concentraciones finales fueron 500, 1.000 y 2.000 /mL. Un mililitro de cada disolucin estndar se hizo
reaccionarcon2mLde2,4Dal1%y2mLdemetanola50Cpor50minutos.Despusdeenfriaratemperatura
ambiente, la mezcla fue disuelta con 5 mL de hidrxido de potasio al 1% en metanol del 70%, incubada a
temperatura ambiente por 2 minutos. Posteriormente, 1 mL de la mezcla fue tomado, mezclado con 5 mL de
metanol y centrifugado a 1.000 rpm., durante 10 minutos para remover el precipitado. El sobrenadante fue
colectadoyajustadoa25mL.Lasdeterminacionesanalticasserealizarona495nm.UnmililitrodelEEPsehizo
reaccionarcon2,4D,conelpropsitodeestimarelcontenidodeflavanonas.
DeterminacionesconAlCl3

Un patrn de Quercetina fue usado para realizar la curva de calibracin. 10 mg del reactivo, fueron disueltos en
etanol al 80% y posteriormente, diluidos a 25, 50, 100 /mL. Las disoluciones de los estndares 0,5 mL, fueron
mezcladoscon1,5mLdeetanoldel95%,0,1mLdeclorurodealuminiodel10%,0,1mLdeacetatodepotasio1
My2,8mLdeaguadestilada.Despusfueronincubadosatemperaturaambientepor30minutos,laabsorbancia
de la mezcla de reaccin fue medida a 415 nm. Para el blanco la cantidad de cloruro de aluminio del 10% fue
sustituido por agua destilada. Anlogamente, 0,5 mL de EEP en 100 ppm, se hicieron reaccionar con cloruro de
aluminioparaladeterminacindelcontenidodeflavonasyflavonoles.
Oxidacin

Enladeterminacindelaspropiedadesantioxidantes,setomaron2mLdeEEP,loscualessemezclaroncon48mL
deaguadestilada.Enuntubodeensayolimpioysecopreviamenteenjuagadoconmezclasulfocrmica,semidi
0,5 mL del diluido de EEP, 0,5 mL de agua destilada y 1 mL de cido sulfrico al 20%. Todos los tubos se
sometieron a refrigeracin en bao de hielo a 18 a 20C. Haciendo uso de una micropipeta de 50200 L, se
adicionaron 50 L de solucin de permanganato de potasio (0,1 N), estandarizada frente a oxalato de sodio, a
continuacin, se puso en marcha un cronmetro, que permiti estimar el tiempo en cual la solucin cida de
permanganatoesreducida,condicinquesefijaconlaevolucinaionesmanganeso(Mn2+),conelregistrodel
tiempodeladesaparicindelcolor.Todaslaspruebasserealizaronportriplicado.

Anlisisestadstico

Las determinaciones de flavanonas y flavonasflavonoles, as como los ndices de oxidacin, se midieron por
triplicado siguiendo la metodologa descrita en cada caso como se indic las comparaciones entre los valores
mediosobservadossehicieronempleandolapruebatdeStudent,conunniveldeconfianzadel95%.Lascurvas
de calibracin para los patrones de ()Naringenina y Quercetina se ajustaron siguiendo la metodologa de
mnimos cuadrados previa optimizacin y verificacin de los coeficientes de correlacin. Se realizaron anlisis de
varianzayseapliceltestdeKruskalWallis,comopruebadehiptesisnuladeigualdadentrelospromediosdelas
determinacionesanalticas.Finalmenteserealizunanlisisdeconglomeradosparalasobservacionesatravsde

estructura Euclidia, usando el mtodo de Prez (2002), para establecer las caractersticas de las muestras por
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estructura Euclidia, usando el mtodo de Prez (2002), para establecer las caractersticas de las muestras por
similitud.SeusoelpaqueteestadsticoStatgraphicsPlus5.1.

RESULTADOSYDISCUSIN

Los contenidos de flavonas, flavonoles, flavanonas y flavonoides totales presentes en las muestras de propleo
crudo colectado en las zonas mencionadas, as como las muestras de referencia argentinas, se muestran en el
Cuadro 1, donde igualmente se han incluido los ndices de oxidacin tpicos observados. En la estimacin de la
curva de calibracin para flavanonas, se observ un coeficiente de correlacin apropiado (r2 = 0,998, ()
Naringenina)yparaflavonasyflavonoles(r2=0,999sobreQuercetina).

Cuadro1.EquivalentesdeQuercetina(flavonasyflavonoles),Naringenina(flavononas)yflavonoides
totalesenmuestrasdepropleocolombiano.

Origen Localidad Flavonasy Flavanonas Flavonoides ndicede

Flavonoles Totales oxidacin

% S

Boyac Combita 0,630,02ab 11,80,26fg 12,40,08jk 4,98

Cerinza 0,790,01cd 6,700,05 7,500,01 117

SantaRosa 0,520,03ba 4,900,06 5,300,01 19,2

Paipa 2,820,06 9,900,21 12,70,03kj 3,28

Cucaita 3,250,04 19,10.40 22,30.17 2,12

Beln 0,900,03dc 5,400,17 6,300,03 27,2

Nobsa 1,970,20 8,800.08 10,80,03 3,98

Arauca Tame 1,420,03e 18,80,40hi 20,20,17lm 112

Argentina Argentina1 3,940,08 11,50.17gf 15,40,06 1,60

Argentina2 2,600,01 17,50,25ih 20,10,06ml 1,60

El anlisis de varianza para el contenido de flavonas y flavonoles entre grupos y para el total de muestras
analizadas indica diferencias significativas (P<0,05) entre los valores medios observados. El test de rangos
mltiples indica que existe similitud entre las muestras de propleos colectadas en las localidades de Combita y
SantaRosa,BelnyCerinza.Elcontenidomsaltoparaestoscompuestosdeterminadosatravsdelcomplejocon
triclorurodealuminiocorrespondialasmuestrasdePaipa(2,82%)yCucaitacon(3,25%)ylosmsbajosenlas
muestrasdeSantaRosa(0,52%)yCombita(0,63%).Lospropleosdemayorsimilitudalosargentinoshansido
los de Paipa y Cucaita. Los valores individuales para estos flavonoides en todos los casos son inferiores a los
reportadosporKosalecetal.(2004),perocomparablesalosbrasilerosytaiwaneses,ymenoresqueloschinos.

EltestdeKruskalWallispruebalahiptesisnuladeigualdaddemediasentrelasmuestrasanalizadas(P<0,0007).
Enelcasodelasflavanonasdeterminadasconelreactivo2,4D,sehaencontradosimilitudentrelospropleosde
Combitayunadelasmuestrasargentinas,con11,8y11,5%,respectivamente,Tameyelsegundoargentinocon
prevalencia ligeramente mayor para el total de flavanonas en el propleo colombiano. No se presentaron
diferenciassignificativasentrelosvaloresmediosdelasdeterminaciones(P<0,05),respectodesteparmetrola
muestradeCucaitarevelserlamayordelgrupo.EltestdeKruskalWallisindicaquenohayigualdaddemedias
observadasparaelcontenidodeflavanonas.Lasmuestrastaiwanesascontienenentre17,6a21,8%deflavanonas
yenlosbrasilerossolo7,12%,mientrasquelasdeDakova(Croacia)muestranpromediosdesigualessegnseala
zona de origen, con 16,2 y 12,1% para las muestras del oeste y este, respectivamente, aunque se observan
rangosrelativamenteamplios.
El contenido de flavones de los propleos colombianos en algunos casos es comparable con los reportados por
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El contenido de flavones de los propleos colombianos en algunos casos es comparable con los reportados por
Chang et al. (2002) y Kosalec et al. (2004). Respecto de flavonoides totales, por los dos mtodos empleados de
maneracomplementaria,seobservunrangoentre5,30%(SantaRosa)y22,3%(Cucaita).Losresultadosindican
quehayunmayorcontenidodeflavonas,flavonolesyflavanonasenlosEEPdeCucaitayTame.Lasmuestrasde
EEP Argentinas (Mendoza) resultaron comparables con las colombianas. Como en las determinaciones globales
paraflavonasyflavonolesconAlCl3yflavanonascon2,4Dhaydiferenciassignificativas(P<0,05).
En cuanto a los ndices de oxidacin de los EEP, se observ que algunas muestras presentan tiempos reducidos
frente al permanganato de potasio en medio cido, cuyos valores se recogen en el Cuadro 1. Estas variaciones
pueden asociarse con el tipo de compuestos presentes en los extractos analizados, que no necesariamente
contienen flavonoides. En este sentido, Souza et al. (2002) han encontrado cido canfico y steres que le
confieren propiedades diferentes a los propleos. Igualmente, Graas et al. (2002) y Evandro et al. (2002)
identificaron sesquiterpenoides, nerodiol y cinamato de metilo en muestras brasileras, los cuales modificaran la
respuestaesperadadelndicedeoxidacinyquebienvaldraestudiarenlasmuestrascontiemposdeoxidacin
atpicos observadas. Como referencia se suelen considerar valores hasta de 22 segundos como criterio comercial
decalidad(Salamanca,2002).

Losvaloresobservadosenlacaracterizacindepropleoscolombianosmuestranalgunosndicesdesimilitudentre
losEPP,permitiendoencontrarcaractersticasanlogasentres.ElanlisisdeconglomeradosrevelagruposdeEEP
similares para las muestras de Combita, Santa Rosa y Beln, un segundo grupo conformado por muestras de
Paipa, Nobsa y Argentina1, y adicionalmente otro grupo compuesto por los extractos de Cucaita, Tame y
Argentina2,comoseilustraenlaFigura1.

Figura1.Estructuradelanlisisdeconglomeradosparalosextractosetanlicosdepropleos
colombianosenvirtudalcontenidodeflavonas,flavonoles,flavanonasytiemposdeoxidacin.
Los resultados globales observados en las muestras analizadas, deriva de las diferencias en la y diversidad de la
florapredominanteencadaunadelaszonasbiogeogrficasdondesehacolectadolasmuestras.Enelsectorde
Santa Rosa, la flora predominante es Eucalipto (Eucalyptus ssp), Tunacn (Miconia squamulosa Smith Triana),
Encenillo(WeinmaniatomentosaD.)yAcacia(AcaciadecurrensWilld),mientrasqueenBelnyCerinzapredomina
elbosquenativodondesedestacanelEncenilloyelTunacon.EnPaipa,laFeijoa(FeijoasellowianaD)yEucalipto
son las principales especies establecidas en la proximidad de los apiarios, a diferencia de Nobsa donde solo
predominanEucaliptos.RlRetamo(Cytissusmonspessulanus),Ayuelo,RaqueyEucaliptoeslaofertadeexudados
yresinasparalasabejasdeCombita,queesanlogaalaexistenteenCucaitadondeadicionalmenteseobservan
rbolesdepino(Pinusspp),Retamo,RaqueyHayuelo(DodoneaviscosaL.Jacq)queespropiadelaconsociacin
debosquesecomontanobajo.

Es importante sealar que las muestras colectadas en Argentina corresponden al centro oeste de la repblica,
cerca de la cordillera de los Andes, a 600 msnm, donde predominio son suelos ridos y clima continental, pero
abundante riego artificial o deshielo de cordillera, inviernos rigurosos y verano clido, donde hay presencia de
lamos(Populussp.)ysauces(Salixsp.)consideradoscomofuentesderesinasparalaelaboracindepropleos
porpartedeApismellifera.LaofertafloraldesectordeTmeesmsampliaydiversa,pueslosapiariossehan
establecido en la consociacin de bosque hmedo tropical, se distingue el Bototo (Cochlospermum vitifolium),
Chaparro(CuratellaamericanaL.),Ceiba(CeibapentadraL.),Caucho(FicuselasticaRoxburg),Guayabo(Psidium
sp),Mango(MangiferaindicaL.),Ocobo(Tabebuiarosea)yTotumo(CrescentiacujeteL.),entreotros.

CONCLUSIONES
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CONCLUSIONES
Elpotencialyactividadbiolgicadelosflavonoidespresentesenmuestrasdepropleosusadosenlapreparacin
deproductosdeintersfarmacutico,losdejaenposibilidadparaserdeterminadoscuantitativamente.Eltrabajo
permiti la evaluacin e implementacin de un mtodo espectrofotomtrico para la determinacin de flavonas,
flavanonas y flavonoles, presentes en propleos colombianos y estimar sus ndices de oxidacin. Los resultados
observados, muestran diferencias significativas entre las muestras, variaciones que estn en funcin del origen
biogeogrficoyqueseexpresanatravsdelcontenidodeflavonoidestotalescondiferentestiemposdeoxidacin.
La tcnica evaluada es simple y el tiempo necesario no supera los 40 minutos, siempre y cuando se hayan
realizadolosEPPconsuficienteanterioridad.LosmtodosespectrofotomtricoscomplementariosconTriclorurode
aluminio y 2,4 Dinitrofenilhidrazina exhiben sensibilidad, especificidad y selectividad en este tipo de
cuantificaciones. En el primer caso se forman complejos de color amarillo formados especficos para flavonas y
flavanoles (3,5hidroxiflavonas y 3,5hidroxiflavonoles) y en el segundo complejos de flavanonas con grupos
hidroxiloenlaposicinC5comoeselcasodegenisteina,hesperetinay()naringenina.
AGRADECIMIENTOS

Los autores expresan su gratitud a los evaluadores del artculo por sus aportes y sugerencias. De igual manera
agradecemosalComitCentraldeInvestigacionesdelaUniversidaddelTolima.

LITERATURACITADA

1.D.Ami,D.DavidoviAmi,D.BeloyN.Trinajsti.2003.Structureradicalcavengingactivityrelationshipsof
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