70

VI. BIODEGRADACION DE HIDROCARBUROS Y DERIVADOS

6.1 Definicin y clasificacin
Los hidrocarburos son compuestos orgnicos binarios formados por tomos de carbono e
hidrgeno.
a. Hidrocarburos acclicos o alifticos o de cadena abierta
Parafnicos (de cadena larga)
Saturados:

Alcanos
Gaseosos

No saturados:

(de cadena corta)

Alquenos y alquinos
(oleofinas) (acetilenos)

b. Hidrocarburos Cclicos donde los tomos de carbono se unen formando anillos.

Pueden ser isocclicos ( carbono e hidrgeno) y heterocclicos ( adems de carbono e
hidrgeno existen otros elementos)
ISOCICLICOS
ALICICLICOS
(Cicloalifticos)
SATURADOS
Enlaces simples
Ciclopropano
Ciclobutano
Ciclopentano
Ciclohexano

AROMATICOS
(Cicloaromticos)
NO SATURADOS
Uno o ms dobles o triples enlaces
Ciclobuteno
Ciclopenteno
Ciclohexeno
1 metil 2 etil ciclohexeno

CH2

CH2

H2C

CH2

HC

CH2

H2C

CH2

HC

CH2

CH2
CICLOHEXANO

CH2
CICLOHEXENO

71

CH
HC

CH

HC

CH
CH

Aromticos

Serie del Benceno

Un anillo bencnico
CH3

Serie Polifenilos

Serie Polinucleares

Dos o ms anillosDos o ms anillos

bencnicos
estnfusionados uno de los
unidos de modo que nocuales por lo menos es
tiene tomos comunes aun anillo bencnico.
ms de un anillo.

TOLUENO
(metil benceno)
COOH
NAFTALENO
BIFENILO
CIDO BENZOICO
OH
ANTRACENO
TRIFENILO
FENOL
BENZOANTRACEN0O

72

6.2 Biodegradacin de compuestos alifticos

Ataque primario de alcanos y alquenos.

Bacterias que asimilan el O2 molecular.

Pseudomonas, Mycobacterium, Nocardia.

Oxidacin monoterminal, subterminal, biterminal.

6.2.1 Oxidacin monoterminal

Es el tipo ms comn de oxidacin de los parafnicos o de cadena larga
a) La enzima monooxigenasa o de funcin mixta cataliza la
transferencia de uno de los tomos del O2 como un grupo hidroxilo
hacia el extremo terminal metilo del alcano y se forma un hiperxido
intermediario ( hiperoxidacin).
b) A continuacin el NADH dona sus electrones y reduce el tomo de
oxgeno que qued libre formndose H2O ms un alcohol primario.

+2H

R CH2 CH3 + O2

CH2 CH2
O

Alcano

R CH2 CH2OH +H2O+NAD

OH

Hiperxido

Alcohol primario

c) Los alcoholes primarios formados inducen la sntesis de una alcohol

deshidrogenasa (independiente de NAD+ y NADP+, unida a la
estructura celular) que cataliza la oxidacin hasta acetaldehido.

NAD

NADH

CH2 CHO
Acetaldehido

73

d) El acetaldehido es oxidado en una reaccin catalizada por un aldehido

deshidrogenasa y en presencia de H2O se origina un cido graso.
NAD

NADH

R
H2O

CH2 COOH
cido graso

6.2.2 Oxidacin subterminal

Forma de oxidacin de los alcanos gaseosos (cadena corta)

Se oxidan a nivel del carbono subterminal, originando un
hiperxido, posteriormente un alcohol secundario y ste a su vez
una metilcetona..

R CH2

Brevibacterium oxida el propano hasta acetona

CH3 +O2

+2H

CH CH3

H2O
O OH
Alcano

-2H

CH CH3

OH
Alcohol
secundario

CH3

Alcohol
primario

O
Metilcetona

Hiperxido

6.2.3 Oxidacin biterminal

La cadena de hidrocarburo es atacada por los dos extremos . De esta
manera Pseudomonas aeruginosa oxida al 2 metilhexano y produce
una mezcla de cidos.
2 Metilhexano

Acido 5- metilhexanoico+ Acido 2 metilhexanoico

74

CH3 + NADH + O2
C7H15
n octano
monooxigenasa
CH2OH + NAD + H2O

C7H15

n octanol (alcohol primario)

NAD

NADH

H
O
C7H15
C
n octanal (acetaldehdo)
NAD

H2O

NADH

OH
O
C7H15
C
cido n octanoico (cido graso)

Activacin

Oxidacin

Figura 6. Ataque primario en la biodegradacin de un hidrocarburo aliftico

75

6.2 Lpidos, aceites, grasas y cidos grasos

Hidrocarburos
(Alquenos, alquinos, aromticos, cicloalcanos)
Derivados

Alcoholes

Carbamlicos
(aldehidos y acetonas)

Aminas

cidos
Carboxlicos

Halogenuros de
Alquilo

O
R

C
OH

CH3

CH2

CH2

CH2

Neutralizacin:
cido + hidrxido = Sal

COOH (Valrico)

Esterificacin:
cido + alcohol = ester
En la naturaleza: (grasas y/o aceites)
Por hidrlisis cida: cido y alcohol.
Por hidrlisis bsica: Saponificacin.

O
CH3

C + CH2OH

OH
cido carboxlico + alcohol

Reduccin = alcohol

O
CH3

CH3

CH2

Acetato de etilo (ster)

CH3

76

6.3 Biodegradacin de lpidos, grasas, aceites, cidos grasos y glicerol

6.4.1 Biodegradacin de lpidos, grasas y aceites.
Los lpidos abundan en la naturaleza. Las membranas citoplasmticas de todas las clulas
contienen lpidos y muchos microorganismos, as como organismos superiores, producen
materiales lipdicos de reserva. Estas molculas son biodegradables y pueden ser excelentes
sustratos para el metabolismo microbiano productor de energa.
El enlace ster de los lpidos, grasas o triglicridos es hidrolizado por las enzimas
denominadas lipasas, originndose glicerol y cidos grasos libres. Las lipasas no son muy
especficas y atacan triglicridos con cidos grasos de longitud de cadena variable. Se
encuentran en mohos (Rhizopus, Aspergillus, Geotrichum), levaduras (Candida) y bacterias
(Serratia, Bacillus, Clostridium).
El resultado de la accin de las lipasas es la liberacin de cidos grasos y glicerol, los
cuales a su vez pueden ser atacados aerobia o anaerobiamente por diferentes microorganismos
quimioorgantrofos.
El glicerol entra en la va de la gliclisis a nivel del fosfato de dihidroxicetona. Los cidos
grasos son activados por el ATP en presencia de la coenzima A para formar Acil CoA y
H
posteriormente entran a una beta oxidacin.
O
C

O
C
O
C
Acidos grasos
Lipasa
Figura

7 . Accin de una lipasa sobre un triglicrido

H
Glicerol

77

Las grasas y aceites son triglicridos slidos o lquidos a temperatura normal segn el
tamao de los cidos grasos. Los aceites estn en estado lquido y tienen los cidos grasos de
cadena corta y las grasas estn en estado slido y tienen cidos grasos de cadena larga.
Las grasas y aceites pueden ser de origen animal o vegetal. En grasas de procedencia
animal predominan cidos grasos saturados como el cido palmtico (C 15H31COOH) y el
cido esterico (C17H35COOH), mientras que en aceites vegetales predominan cidos grasos
insaturados como el cido oleico (C17H33COOH), linoleico (C17H31COOH) y el cido
linolnico (C17H29COOH).
Los aceites y grasas vegetales que se usan para la alimentacin humana se obtienen
generalmente por presin o extraccin de materias primas ricas en grasas. Contienen adems
de triglicridos, pequeas cantidades de otras sustancias orgnicas como cidos grasos libres,
vitaminas liposolubles, pigmentos carotenoides, clorofila, fosftidos, protenas y otras
sustancias nitrogenadas.
Del total de produccin de grasas y aceites, el 75% deriva de los vegetales y el 25% de
los animales. Un 80% se utiliza en la industria de alimentos, ya sea en la manufactura de
margarinas, chocolates o productos de consumo directo como aceites de cocina y ensaladas. El
20% restante se utiliza en la industria oleoqumica para la manufactura de detergentes,
plsticos y jabones. Para ste propsito, los aceites y grasas son convertidos en cidos grasos
los cuales a su vez son utilizados para producir alcoholes, aminas, steres, etc.
En la industria alimentaria los compuestos no triglicridos de los aceites y grasas
(carotenoides, esteroides, fsforo) son extraidos durante los procesos de refinamiento y
posteriormente son vendidos. En realidad, de la industria alimentaria muy poco material
puede ser considerado como residuo. Las principales fuentes de desechos grasos en el
ambiente derivan de los usos no comestibles de aceites y grasas. Los cidos grasos son el
componente de la mayora de jabones y detergentes y son eliminados despus de su uso en las
aguas de lavado a partir de las fuentes domsticas e industriales.

78

6.4.2

Biodegradacin de cidos grasos

Los cidos grasos son los constituyentes mayoritarios de los lpidos. Contienen tanto
regiones muy hidrofbicas (repelentes del agua) como muy hidroflicas (solubles en agua).
Ejemplo: El palmitato es un cido graso de 16 carbonos compuesto de una cadena de 15
tomos de carbono saturados (completamente hidrogenados) y un solo grupo carboxlico.

O
H 3C CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 C OH
16

15

14

13

12

11

10

H3C

OH

Los cidos grasos son excelentes donadores de electrones (fuentes de energa) para
muchos microorganismos quimioorgantrofos y pueden ser degradados a travs de oxidacin, - oxidacin y - oxidacin.
a. Beta oxidacin de cidos grasos
En primer lugar el cido graso se activa con una coenzima A y despus como resultado
de la oxidacin del cido graso activado se libera Acetil Co A y un cido graso con dos
carbonos menos. El proceso de - oxidacin se repite y se libera otra molcula de Acetil Co
A y un cido graso con dos carbonos menos. . La mayor parte de cidos grasos tiene un
nmero par de tomos de carbono y la oxidacin completa produce slo Acetil Co A, el cual
posteriormente es oxidado mediante el ciclo de Krebs o es convertido en hexosas y otros
constituyentes celulares a travs del ciclo del glioxilato. Resumen:

A nivel de carbono 3.

En cada ciclo se origina un ster de coenzima A con dos tomos de

carbono menos que el original.

Producto final: Acetil Coa

CO2, H2O, ATP

79

Activacin
CH 3 (CH 2 )12 CH 2 CH 2 COOH

ATP

cido palmtico (16)

CoASH

AMP + Pi

CH 3 (CH 2 )12 CH 2 CH 2 C S CoA

Tioster de cido graso

Beta Oxidacin
FAD

Acil CoA deshidrogenasa

FADH2

CH 3 (CH 2 )12 CH C C S CoA

H2O

Acil CoA insaturado

Crotonasa
OH H O

CH 3 (CH 2 )12 C C C S CoA

NAD

1.3 hidroxiacil CoA

3 hidroacil CoA deshidrogenada

NADH + H

cetoacil CoA

CH 3 (CH 2 )12 C CH 2 C S CoA

Reaccin de la tiolasa

CoASH
O

CH 3 (CH 2 )12 C S CoA CH 3 C SCoA

Ciclo de Krebs
Acetil CoA
Acetil CoA graso acortado en dos carbonos

Figura

8 . Beta oxidacin de cidos grasos

Desviacin glioxlica

80

b. Alfa oxidacin de cidos grasos

En la alfa oxidacin se da una hidroxilacin a nivel del carbono 2 , formndose un
hidrxido. Luego se da una descarboxilacin oxidativa originndose un aldehdo y
posteriormente un cido graso de un carbono menos.

R CH 2 COO R CHOH COO R CHO CO 2 R COO

hidroxicido

c. Omega oxidacin de los cidos grasos

La omega oxidacin se da a nivel del grupo metilo terminal originndose un cido
dicarboxlico., que pasa a

oxidacin con liberacin final de acetil CoA. Ejemplo

Pseudomonas sp oxida los cidos grasos provenientes de los hidrocarburos , simultneamente

por y oxidacin

cido Graso

oxidacin

Acetil CoA

oxidacin
cido dicarboxlico

81

6.4.3

Oxidacin del glicerol procedente de la hidrlisis de los desechos grasos

3 H2O
Tripalmitina

Glicerol + cido palmtico

lipasa
fosforilado

Oxidado a dihidroxiacetona fosfato

Gliclisis

Ciclo de Krebs y desviacin glicoxlica

6.5 Agentes tensoactivos

Los agentes tensoactivos son molculas orgnicas que al disolverse en agua o en otro
disolvente, se orientan a la interfase entre lquido y una fase slida, lquida o gaseosa,
modificando las propiedades de la interfase. Las modificaciones pueden estar acompaadas
por formacin de espuma, coloides, emulsiones o suspensiones y dispersiones.
Los agentes tensoactivos pueden ser biolgicos y sintticos. Los tensoactivos biolgicos o
biosurfactantes son sintetizados por algunos microorganismos y segn su naturaleza pueden
ser: Glicolpidos ( ramnolpidos, celobiolpidos, glucosalpidos), lipopptidos, acilpolioles,
cidos grasos, fosfolpidos, lpidos neutros.

82

Los agentes tensoactivos sintticos tienen una estructura molecular comn que consiste en
una larga cadena no polar, casi siempre una cadena de hidrocarburos, que es soluble en aceite
pero insoluble en agua ( parte hidrofbica) y otro grupo insoluble en aceite pero soluble en
agua ( parte hidroflica). El extremo hidroflico es suficientemente afin al agua para conferir
solubilidad en agua a todo el compuesto.

Extremo hidroflico

Extremo hidrofbico

6.5.1

Usos de agentes tensoactivos

Los tensoactivos no slo son importantes como constituyentes activos de los

agentes limpiadores (jabones, detergentes) , sino tambin son vitales en la estabilizacin de

emulsiones (alimentos, cosmticos), como agentes de desprendimiento de moldes en la
industria de los plsticos, en la suavizacin de textiles, en las pastas anticonceptivas, en la
perforacin de pozos petroleros y muchas otras aplicaciones; sin embargo, los agentes
tensoactivos solubles en agua causan espumas en las plantas de tratamiento de aguas (se
acumulan en la interfase aire, agua y durante la aireacin del agua residual sobre la superficie
de las burbujas).
6.5.2

Clasificacin de agentes tensoactivos

Los tensoactivos se clasifican de acuerdo a sus grupos hidroflicos en

aninicos, catinicos, no inicos y anfotricos.

Cuando los tensoactivos se utilizan como agentes de limpieza, se mezclan con
diversos aditivos y tales formulaciones se conocen como detergentes.
a. Tensoactivos catinicos

83

Los tensoactivos donde el catin

es el que tiene la cadena alqulica

hidrofbica larga (catinicos).son de poca utilidad en limpieza porque la mayora de las

superficies tienen una carga negativa y los cationes se adsorven sobre ellos en lugar

de

solubilizar la suciedad adherida; sin embargo, tienen otras aplicaciones, como inhibir el
crecimiento de bacterias y algas. Por ejemplo, las aminas y los compuestos cuaternarios se
orientan en la interfase entre la membrana bacteriana y el agua o el aire formando una pelcula
que interfiere con la respiracin microbiana.
b. Tensoactivos aninicos
Los tensoactivos donde

el anin es

el que tiene la cadena alqulica

hidrofbica larga (aninicos), pueden ser obtenidos por sulfonacin, sulfatacin, o por
sulfoxidacin de las cadenas alqulicas hidrofbicas largas.
Sulfonacin :

Sulfonatos de alfa oleofinas (AOS)

Alquilbencilsulfonatos lineales (LAS)

Sulfatacin :

Sulfatos de alcoholes lineales ( AS)

Etoxisulfatos de alcoholes lineales (AES)

Sulfoxidacin :

Alcansulfonatos secundarios (SAS)

b.1 Alquilbencilsulfonatos lineales (LAS)
Se forman por sulfonacin, para lo cual previamente se alquila el

benceno con un tetrmero de propileno para formar dodecilbenceno que despus se sulfona,
ya sea con leum en fase lquida o con trixido de azufre en fase gaseosa, para obtener
dodecilbencensulfnico. Este posteriormente se neutraliza con hidrxido de sodio.
El dodecilbencensulfonato de sodio a base del tetrmero de
propileno (conocido como ABS) se utiliz en la dcada de los cincuenta y principios de los
sesenta; sin embargo, no era biodegradable debido al grupo alquilo muy ramificado. Entonces
se estableci el desparafinado con rea. Cuando la rea cristaliza en presencia de parafinas u
oleofinas de cadena lineal y ramificada forma complejos con los materiales de cadena lineal,
pero los ismeros de cadenas ramificadas no se ajustan en los largos y delgados espacios de
los cristales de rea. Entonces, los

complejos cristalinos se separan de los materiales de

cadena ramificada y posteriormente se disuelven en agua, los hidrocarburos de cadena lineal

se recuperan y la rea se recircula. De esta manera los alquibencensulfonatos lineales
sustituyeron a los materiales de cadena ramificada.

84

SO3 Na +

Dodecilbencensulfonato de sodio

HF o AlCl3

C12H24 +
Tetrmetro de
propileno

C12H25
Alquilato
detergente
(dodecilbenceno)

Alquilacin

SO3 u
oleum

C12H25

SO3H
Dodecilbencensulfnico

NaOH

C12H25

SO3 Na +

Dodecilbencensulfonato de Sodio

85

Figura 9

. Reacciones para la obtencin de un alquilbencilsulfonato

b.2 Sulfatos de alcoholes lineales (AS)

Se obtienen por sulfatacin de un alcohol primario con trixido de azufre o cido
clorosulfnico, seguida de neutralizacin con hidrxido de sodio.
Los sulfatos de alcoholes lineales son tensoactivos de elevada formacin de espuma
pero sensibles a la dureza del agua y, por tanto se utilizan mas en formulaciones que tienen
altos niveles de fosfato o de otros agentes secuestrantes. Debido a su propiedad de alta
formacin de espuma son constituyentes de muchos cosmticos
C14 H 29 OH SO
3 o ClSO
3H C14 H 29OSO 3 Na
NaOH

O SO3 Na +

b.3 Alcansulfonatos secundarios (SAS)

Se obtienen por accin del dixido de azufre y aire sobre parafinas C

14

C18 , una reaccin

muy distinta de la sulfatacin y sulfonacin que se conoce como sulfoxidacin. El grupo

sulfonato puede aparecer en la mayora de las posiciones de la cadena.
C8H17

C16 H 34 SO 2 O 2 CH SO 3 H

C7H15

C8H17

NaOH

CH SO 3 Na

C7H15

O SO3 Na +

86

Tienen propiedades de detergente y formacin de espuma similares a los LAS y AOS. Son
solubles en agua y se usan en formulaciones lquidas.

c. Tensoactivos no inicos
En los tensoactivos no inicos la parte hidroflica de la molcula no es un in sino una
cadena de polioxietileno. Son excelentes humectantes, compatibles tanto con los aninicos
como con los catinicos y no son afectados por los iones calcio-magnesio del agua dura.
Desafortunadamente tienden a ser ceras de bajo punto de fusin o lquidos y

por

consiguiente, es difcil formularlos en forma de polvo.

d. Tensoactivos anfotricos
Los tensoactivos anfotricos son un grupo de productos especializados que tienen tanto
una carga positiva como una negativa en la misma molcula por lo que pueden comportarse
como aninicos o catinicos, dependiendo del pH de la solucin en la que se utilizen.
A pH cercanos a 7 son menos irritantes que los detergentes catinicos y se utilizan en
shampoo suaves y como son estables y funcionales en un gran intervalo de pH pueden
utilizarse en limpiadores alcalinos para superficies grasosas y en limpiadores cidos para
superficies oxidadas.
6.6 Biodegradacin de agentes tensoactivos
Los agentes tensoactivos representan una fuente potencial de energa y carbono para el
crecimiento de los microorganismos. En una biodegradacin primaria de los agentes
tensoactivos se elimina la propiedad surfactante y en la biodegradacin final los compuestos
resultantes son oxidados hasta CO2, agua y sales minerales. Los agentes tensoactivos pueden
ser biodegradados de dos maneras:
a)

Por oxidacin del grupo hidrfobo mientras est adherido al grupo hidrfilo

b) Por separacin del grupo hidrfilo y posterior oxidacin del grupo hidrfobo

87

a) Oxidacin del grupo hidrfobo mientras est adherido al grupo hidrfilo

Este es el caso de los agentes tensoactivos donde se ha llevado a cabo la sulfonacin.
La molcula hidrfoba es sometida a una - oxidacin que origina cidos carboxlicos
los cuales a su vez son activados para sufrir - oxidacin.
b) Separacin del grupo hidrfilo y posterior oxidacin del grupo hidrfobo
-

Agentes tensoactivos en donde se ha llevado a cabo la sulfatacin: Los enlaces ster

entre las molculas hidrfilas son rpidamente hidrolizados y las molculas hidrfobas
son convertidas en alcoholes, aldehdos y cidos grasos que posteriormente sufren oxidacin originando Acetil CoA.

Agentes tensoactivos en donde se ha llevado a cabo la sulfooxidacin: Los enlaces C

S son resistentes a la hidrlisis y para romperlos se requiere de una oxidacin
catalizada por una enzima monooxigenasa. Por su parte las molculas hidrfobas son
convertidas en alcoholes, aldehdos y cidos grasos que posteriormente sufren oxidacin originando Acetil CoA.

88

1.

Acortamiento de la cadena

2.

Desulfonacin

3.

Apertura del anillo

LAS

SO-3

Acortamiento de la cadena
Alquilada por / oxidacin.
HOOC

2
4

NASO NaSO
sulfato

sulfito

2
3

desulfonacin

SO-3 Na
dioxigenasa

HOOC

Meta ruptura del anillo

OH
OH

carboxyl alcanol + piruvato

(acetaldehdo + piruvato)

Vas metablicas centrales

Figura 10. Biodegradacin de agentes tensoactivos sulfonados (LAS)

89

Primarios

Secundarios

Remocin de sulfato o desulfatacin:

hidrlisis del enlace ster originando un
alcohol + sulfato inorgnico.

Desulfatacin: alcohol+sulfato
Oxidacin de alcohol origina una
cetona.

Oxidacin de alcohol origina un

aldehido.

Hidroxilacin de la cetona.

Oxidacin de aldehido hasta cido

graso.

Oxidacin rompe el enlace y origina

aldehido y cido carboxlico.
OSO-3

OSO

CH2OH
alcohol
CHO
aldehido

H++SO2-4Na
Desulfatacin

alcohol cetona
O
OH

TCA

COOH
HOOC
cido graso
CHO aldehido

OH
O acetona hidroxilada

COOH cido graso

Componentes celulares.
CO2
70-80% para la produccin de energa.
Surfactante
30-20% para su incorporacin al material celular.
Figura 11. Biodegradacin de agentes tensoactivos sulfatados (AS)

90

SO3 Na+

monooxigenasa
Sulfitoaldehdo
Sulfito de sodio

Sulfato de sodio

Aldehdo
Oxidacin

cido graso
Activacin

- oxidacin

Figura 12. Biodegradacin de agentes tensoactivos sulfooxidados (SAS)

91

6.7 Detergentes
Los detergentes son compuestos cuya disolucin acta como agente limpiador de la
suciedad de un sustrato y a la vez la suspende o dispersa para que sta no se deposite
nuevamente sobre el sustrato.
6.7.1

Jabones o detergentes jabonosos

El jabn es la sal de sodio de los cidos grasos (C 12 C18). Los cidos grasos se obtienen
por hidrlisis de grasas y aceites naturales.. El sebo no comestible de las empacadoras de
carne y el aceite de coco hidrolizado o saponificado con hidrxido de sodio son las materias
primas que se prefieren.
Para jabones blandos, que son sales de potasio se utiliza hidrxido de potasio. A gran escala, la
hidrlisis continua de grasas a cidos grasos por medio de vapor es mas convincente y los
cidos se neutralizan posteriormente con hidrxido de sodio.

CH2_OOC_C15H31
CH_OOC_ C15H31 + 3 NaOH

CH2OH
3 C15H31COONa++ CHOH

CH2_OOC_ C15H31
Palmitina
(glicerina + cido palmtico)

CH2OH
Palmitato de sodio

glicerina

(jabn)

Si bien es cierto el jabn es biodegradable, tiene buenas propiedades detergentes y se

disuelve rpidamente, presenta como desventaja el que se deteriora durante el
almacenamiento, no es estable en solucin cida y las sales de calcio y magnesio de los cidos
grasos son insolubles.

92

6.7.2

Detergentes no jabonosos

Despus de la segunda guerra mundial, la rpida disponibilidad de hidrocarburos

procedentes de la industria petroqumica en desarrollo, hizo atractiva la idea de que existiese
un sistema de detergentes baratos y eficientes. La sal de sodio de un cido graso de cadena
larga es un buen tensoactivo, pero tiene ciertas propiedades indeseables por lo que una ligera
modificacin producira el artculo deseado. Es as como se reemplaz el
O
grupo sulfonato R S O- Na+ por el grupo carboxilato R C O Na+ ; debido a
O
O
O
que el cido sulfrico es barato y fcilmente asequible.
El compuesto seleccionado fue dodecilbencensulfonato de sodio que posteriormente se mezcla
con fortificadores y se seca por aspersin, formando un polvo de flujo libre al cual pueden
agregarse blanqueadores y enzimas.
6.7.3

Detergentes sintticos

En el mercado existen cuatro tipos de detergentes sintticos:

1.

Aninicos, que contienen grupos solubles sulfatos y sulfonatos de sodio.

Los que ms se utilizan son los sulfonatos debido a que cuestan poco y son estables
en aguas duras.

2.

Catinicos, que son principalmente compuestos cuaternarios de amonio.

Son caros y se utilizan en industrias de salud para limpieza de utensilios. Poseen las
mejores propiedades bactericidas y bacteriostticas.

3.

No inicos, como los productos de condensacin del xido de etileno con

materiales fenolicos cidos grasos. Tienen aplicacin en la industria.

4.

Biolgicos, con enzimas para eliminar algunos tipos especficos de

manchas de ropa.

6.7.4

Composicin qumica de los detergentes

La formulacin qumica de un detergente comprende numerosos compuestos:

tensoactivos,

fortificadores,

blanqueadores,

cargas

auxiliares

de

procesamiento,

93

blanqueadores pticos, estabilizadores de espuma, agentes suspensores de la suciedad y

enzimas.
a) Agentes tensoactivos
El agente tensoactivo o surfactante de un detergente funciona como agente humectador.
Disminuye la tensin superficial del agua, lo que permite que sta penetre ms en el tejido
textil. Adems, las molculas de surfactante forman puentes entre las partculas de suciedad y
agua gracias a la naturaleza bipolar de las molculas del surfactante. Uno de los extremos
es no polar y se disuelve en la suciedad, mientras que el otro est cargado y es atrado por el
agua, en la que se disuelve.
Los surfactantes ms comunmente utilizados son los compuestos conocidos como
sulfonatos de alquilo lineales (SAL). Un ejemplo es el dodecilbencenosulfonato de sodio:

CH3

CH2

CH2

CH2

CH2

CH2

CH2

CH2

CH2

CH2

CH

CH3

O=S=O
O

Na+

b) Fortificadores
Son qumicos que secuestran los iones como el calcio y el magnesio, que en solucin
interfieren con las llamadas repulsiones de la doble capa elctrica que ayudan a los
tensoactivos a desprender la suciedad de los sustratos. El cido etilendiaminotetractico
(EDTA) es un quelante muy efectivo en el laboratorio pero el fortificador de mayor
importancia es el tripolifosfato de sodio que cristaliza de una mezcla de fosfato disdico y
fosfato monosdico.

94

Tripolifosfato de sodio:
O
2Na2HPO4 + NaH2PO4

O
P

O
P

5O

5Na + + 2H2O

Antes de secuestrar los iones mecnicos polivalentes el tripolifosfato de sodio evita la

redeposicin de la suciedad sobre la superficie por un mecanismo relacionado con la
quelacin y la distribucin de cargas y regula el medio acuoso a un pH de 9 10,
favoreciendo as la disolucin de cidos grasos libres. Tambin elimina y mata ciertas
bacterias.
A los detergentes se les agrega un segundo fortificador, silicato de sodio que brinda
resistencia a los grnulos individuales, estabiliza la mezcla y mejora su velocidad de
solubilizacin. Tambin inhibe la accin corrosiva de los tensoactivos sulfatados y sulfonados
sobre los metales de las mquinas lavadoras.
c) Blanqueadores
La suciedad que no se elimina por los mecanismos usuales es modificada mediante
blanqueadores que se descomponen formando perxido de hidrgeno y el ms usado es el
perborato de sodio que a diferencia de los blanqueadores de cloro no se descompone, no
tiene un olor desagradable y no daa las telas y colorantes.
d) Cargas y auxiliares del procesamiento
El sulfato de sodio se encuentra en las formulaciones de los detergentes en parte como
subproducto del proceso de fabricacin y algunas veces por adicin para dar al polvo soltura
y mejor flujo.

e) Blanqueadores pticos

95

Llamados tambin agentes fluorescentes, son tintes incoloros que producen una
fluorescencia azul al adsorberse sobre las telas. stos enmascaran cualquier tono amarillo
debido al envejecimiento de la tela y son responsables del ms blanco que el blanco. Los
ms comunes son los derivados del triazinilestilbeno sulfonado.
f) Estabilizadores de espuma
Generalmente se utiliza la n hidroxietil lauramida formada por condensacin del
laurato de metilo con etanolamina.
g) Agentes suspensores de suciedad
El principal agente suspensor de suciedad o fortificador orgnico es la
carboximetilcelulosa sdica cuya funcin es evitar la redeposicin de suciedad e incrementar
cargas negativas sobre la superficie de las telas, que a su vez repelen las partculas de
suciedad, las cuales tienen cargas negativas.
h) Enzimas
Son biocatalizadores que se utilizan para eliminar manchas producidas por protenas
como huevo, leche y sangre. Al agregar una enzima proteoltica, sta cataliza la hidrlisis de
protenas formndose pptidos solubles en agua y aminocidos o cuando menos las hace
permeables al agua, por lo cual la mancha puede eliminarse junto con la mugre grasosa.
6.7.5 Detergentes como contaminantes
Los detergentes de tipo comercial deben contener ciertos aditivos que se pueden convertir
en graves contaminantes del agua. Los ms importantes son los surfactantes y aditivos
tripolifosfatos.
Los compuestos tensoactivos reducen la solubilidad del oxgeno disuelto en el agua y
dificultan la vida acutica. Adems eliminan la grasa de las plumas de las aves acuticas
ocasionando el escape el aire aislante (entre las plumas). Como consecuencia, las aves se
mojan lo cual puede ocasionar su muerte por fro o porque se ahogan de manera semejante
como les ocurre con lo derrames de petrleo en el mar. En los vegetales acuticos inhiben la
fotosntesis originando la muerte de la flora y fauna acutica. En los peces producen lesiones
en las branquias dificultando la respiracin y provocando la muerte.

96

Adems de los agentes surfactantes, el principal aditivo de los detergentes son los
tripolifosfatos denominados genricamente fosfatos.En aguas relativamente tranquilas como
lagos y lagunas, la presencia de elementos nutritivos como nitratos y fosfatos conlleva a la
proliferacin de vegetales acuticos. Las principales fuentes de nutrientes son las aguas negras
y los escurrimientos agrcolas (fertilizantes de los cultivos agrcolas, materia orgnica de la
basura, detergentes hechos a base de fosfatos) que ocasionan el crecimiento masivo de algas,
cianobacterias, lirios acuticos y lenteja de agua generando grandes cantidades de masas
vegetales sobre las aguas y su acumulacin en las riberas. Cuando las plantas mueren, su
descomposicin por bacterias aerobias consume el oxgeno disuelto generando condiciones
anaerobias que eliminan peces, flora y fauna tiles para el hombre, predominando formas de
vida menos tiles como sanguijuelas y gusanos que se alimentan de basura. Igualmente
predominan las bacterias anaerobias con produccin de cido sulfhdrico y metano debido a
la descomposicin de la materia orgnica.
La eutrofizacin o eutroficacin es un proceso de envejecimiento del agua estancada o
de corriente lenta con exceso de nutrientes que acumula en el fondo material vegetal en
descomposicin. Las plantas se apoderan del lago hasta convertirlo en pantano y luego se
seca.
En la actualidad se comercializan los llamados detergentes antibacterianos que contienen
agentes bactericidas y reducen los microorganismos presentes en el agua disminuyendo la
capacidad natural de biodegradacin.

6.12 Compuestos Aromticos

97

En los compuestos aromticos, cualquier hidrgeno puede ser sustituido por:

Grupo monovalente, CH3 (tolueno).

Oxidrilo, OH (fenol).

Aldehido, CHO (benzaldehido).

cido, COOH (cido Benzoico).

Radicales monovalentes como el cloro (xileno).

X

X
X

Orto

Meta

X
X

Ismeros

(1,4)

Benceno
COOH

Para

Orto

CH3

OH

Tolueno

Fenol

Cl

(1,2)

Meta

Para

(1,3)

CHO

Benzaldehido
Cl

Cl
Cl

Cl
Cl

cido Benzoico

Orto dicloro

Meta dicloro

Benceno

Benceno

Paradicloro
Benceno

98

6.13 Biodegradacin de los compuestos aromticos

La biodegradacin de los compuestos aromticos se puede realizar en aerobiosis y en
anaerobiosis.
a.

Degradacin aerobia de compuestos aromticos

(Figura 15)
Oxidacin: Monoxigenasas y dioxigenasas los transforman a fenoles dihdricos:
catecol, protocatecuato, gentisato (intermediarios de la oxidacin).
Los intermediarios son el sustrato de dioxigenasas que provocan la ruptura del
anillo aromtico a travs de meta y orto rupturas.
Catecol: Meta ruptura = Piruvato + Acetaldehdo
Catecol y Protocatecuato: Orto ruptura= Acetil CoA + Succinil CoA
Protocatecuato: Meta ruptura= Piruvato
Malato

Gentisato

Fumarato + Piruvato

b.

Degradacin anaerobia de compuestos aromticos

(Figura 16)
Tres etapas:

Primera etapa: Activacin del sustrato

carboxilacin,

hidroxilacin

anaerobia,

a travs de reacciones de

formacin

de

tiosteres

del

correspondiente cido aromtico con el acetil CoA. En esta etapa se originan

los intermediarios activados: Benzoil CoA, Resorcinol, Floroglucinol.

Segunda etapa: Ataque de los intermediarios activados con reductasas

resultando componentes alicclicos.

Tercera etapa: Hidrlisis de los compuestos alicclicos

hasta

compuestos no cclicos que son convertidos en metabolitos centrales y

probablemente generan Acetil CoA y CO2.

99

Benceno

D Mandelato

Toluato

p Hidroxibenzoato

Ac. Benzoico

Ac. Antranlico

Quinato

Siquimato

Tolueno

Fenol

Vanilato

2,4 Xilenol

Alquil benceno

Naftaleno

Hidroxibenzoato

MONOOXIGENASAS DIOXIGENASAS
CATECOL

Metaruptura

PROTOCATECUATO

Ortoruptura

GENTISATO

Metaruptura

Oxidacin

Cis Cis Muconato

Semialdehido

Piruvato+Acetaldehido

B cetoadipato

Semialdehido

Acetil CoA+ Succinato

CAT

CAT

Piruvato
CAT

Maleil piruvato

Malato

Fumarato +
piruvato

CAT

CAT

COOH
OH

HOOC

OH
Catecol

OH

OH

OH
Protocatecuato

OH
Gentisato

100

Figura 15. Degradacin aerobia de compuestos aromticos

101

Fenol

cido 2,4 hidroxibenzoico

ACTIVACIN

Acido3,4,5 hidroxibenzoico

DEL

Benzoil CoA

Resorcinol

REDUCCION
COMPUESTOS ALICICLICOS
HIDRLISIS
COMPUESTOS NO CICLICOS
ACETIL CoA Y CO2
Bacterias fototrficas
Bacterias desnitrificantes
Bacterias reductoras de sulfato
Bacterias fermentadoras
Cultivos mixtos de bacterias metanognicas

Figura 16. Degradacin anaerobia de compuestos aromticos

SUSTRATO
Floroglucinol

102

Cuadro 5. Comparacin de las estrategias microbianas aerobias

y anaerobias para la

degradacin del anillo aromtico (Pars y Jurez, 1997)

CARACTERISTICAS

DEGRADACIN

DEGRADACIN

Intermediarios

AEROBIA
Catecol

ANAEROBIA
Benzoil CoA

caractersticos en la

Protocatecuato

Resorcinol

degradacin
Reacciones que

Gentisato

Floroglucinol
Carboxilacin

transforman el sustrato
en uno de

Oxidacin

tales intermediarios
Propiedades de los
intermediarios
caractersticos
Ataque del anillo
aromtico

Hidroxilacin anaerobia
Formacin de tiosteres
con CoA

Fciles de oxidar
(rompindose

Fciles de reducir

concomitantemente

(hidratar)

el anillo)
O2

2 4 [H]{+H2O}
Hidrlisis del derivado 3

Rotura del anillo

Ataque oxigensico

ceto del correspondiente

directamente sobre

anillo alicclico que se

el ncleo aromtico

forma despus del ataque

reductor al anillo aromtico

6.14 Petrleo

103

a. Definicin
El petrleo es el material naturalmente derivado de sustancias orgnicas atrapadas en
las capas geolgicas y sometidas a alta presin y temperatura. Se define como una mezcla de
compuestos ricos en carbono e hidrgeno y pequeas cantidades de azufre, oxgeno y
nitrgeno. En el contexto ambiental petrleo significa el crudo del mismo o cualquiera de los
productos refinados del petrleo.
b. Composicin
Qumicamente el petrleo es una mezcla compleja de compuestos orgnicos, la
mayora hidrocarburos

alifticos, cicloalifticos y

cicloaromticos. Tambin contiene

elementos minoritarios de compuestos NSO (nitrgeno, azufre, oxgeno) y trazas de metales.

c. Hidrocarburos alifticos
Serie parafnica o saturada (CnH2n+2): Tambin llamados alcanos, pueden ser
cadenas lineales o ramificadas de longitud varable entre 1 a 40 carbonos, aunque tambin se
han detectado cadenas de hasta 60 carbonos.
Serie oleofnica o etilnica (CnH2n): Presentan un doble enlace y se denominan
alquenos u oleofinas.
Serie dioleofnica (CnH2n-2): Presentan dos dobles enlaces.
d. Hidrocarburos cicloalifticos
Pertenecen a la serie naftnica o naftenos (CnH2n) e incluyen compuestos cclicos
saturados donde varios carbonos se unen entre si por medio de enlaces sencillos. Tambin se
les conoce como ciclosaturados, cicloalcanos, cicloparafinas y son un componente minoritario
del petrleo crudo. Los cicloalifticos tambin pueden ser alquilsustituidos.
e. Hidrocarburos cicloaromticos
Pertenecen a la serie del Benceno (CnH2n-6), donde algunos carbonos del ciclo estn
unidos por enlaces dobles. Los dos grupos principales de hidrocarburos aromticos son los
monocclicos: benceno, tolueno, etilbenceno y xileno (BTEX) y los hidrocarburos policclicos
(PAHs) o hidrocarburos aromticos polinucleares como el naftaleno, antraceno y fenantreno.
f. Compuestos NSO
Adems de los hidrocarburos, los crudos contienen 0,05 3,0 % de compuestos
heterocclicos que contienen azufre, nitrgeno, oxgeno y algunos metales pesados.

104

g. Usos del petrleo

Cada ao se extraen cerca de un milln de toneladas de petrleo de yacimientos
subterrneos, algunos de ellos en mar abierto. La mayor parte se utiliza como combustible en
forma de gasolina Diesel, turbosina y junto con algunas fracciones voltiles (metano, butano y
propano) son la principal fuente de energa tanto industrial como domstica.
Alrededor del 15 % del petrleo es utilizado como insumo para la sntesis de otros
compuestos, principalmente plsticos (polialquenos como el polietileno, polibutileno,
polipropileno; poliestirenos y cloruro de polivinilo PVC). El resto del petrleo, las
fracciones ms pesadas y menos valiosas llamadas asfaltenos se utilizan como pavimento.
h. Petrleo como contaminante
La utilizacin masiva de combustibles fsiles genera anualmente 2 800 millones de
toneladas de dixido de carbono., que junto a otros gases como dixido nitroso, metano,
clorofluorocarbonados y compuestos halogenados constituyen el grupo de gases invernadero
que absorven la radiacin reflejada provocando el calentamiento global de la atmsfera y
cambiando dramticamente el clima del planeta.
Adicionalmente a los cambios climticos globales, el uso masivo del petrleo como
materia prima (plsticos) genera contaminacin, que ocasiona deterioro progresivo de la
calidad del ambiente y constituye una amenaza real para los humanos as como para las
especies animales y vegetales.
Las principales fuentes de crudo y productos de petrleo (BTEX y PAHs), liberados
al ambiente son las prdidas de los tanques de almacenamiento, los vertidos y accidentes
durante su transporte. Las prdidas de gasolina son de particular inters ya que contiene hasta
20 % de BTEX que aunque no miscibles con agua son mviles y pueden contaminar aguas
subterrneas.
i. Derrames de petrleo en el suelo
Cuando se produce un vertido de petrleo o producto petrolfero en la superficie del
suelo, los compuestos voltiles (aquellos de 12 carbonos o menos) pueden perderse en la
atmsfera, pero si el derrame es bajo el nivel del suelo los componentes mviles pueden
migrar hacia el nivel fretico y aguas subterrneas.
Los compuestos de mayor peso molecular, en su mayora insolubles e inmiscibles,
se pueden desplazar lentamente a travs del suelo o permanecer sobre l o cerca de la
superficie, dependiendo de la estructura del suelo. Los compuestos insolubles pueden ser
fuertemente absorbidos por las partculas del suelo.

105

j. Vertidos de crudo en el mar

Cuando se vierte crudo en el mar, ste no se mezcla con el agua marina y flota en la
superficie, permitiendo la evaporacin de los compuestos voltiles. El crudo flotante se
dispersar debido a la accin de las olas. Los compuestos ms complejos y menos insolubles
del crudo son los de alto peso molecular y persisten en la arena y las rocas si el vertido
alcanza la costa.
k. Biorremediacin
La eliminacin biolgica de los contaminantes en las reas afectadas se conoce como
biorremediacin. Puede definirse como la degradacin natural o biolgica dirigida de la
contaminacin ambiental. La biorremediacin
microorganismos autctonos

se lleva a cabo normalmente por

y su actividad puede ser favorecida por el suministro de

nutrientes (bioestimulacin) o incrementando la poblacin microbiana en procesos como

bioaumentacin y

bioinoculacin.

Bioaumentacin es el incremento drstico de la masa microbiana del suelo mediante

la adicin de microorganismos similares a los presentes en el suelo pero incrementados
mediante cultivo en biorreactores. Previamente estos microorganismos son seleccionados
segn la tolerancia a sales, sustancias inhibidoras y capacidad de degradacin.
Bioinoculacin es la incorporacin de microorganismos comerciales en un lugar,
para realizar la degradacin de un contaminante. Se lleva a cabo cuando los microorganismos
autctonos no pueden degradar el contaminante presente, se produce inhibicin por sales o
metales pesados o cuando no alcanzan la concentracin celular requerida.
l. Biorremediacin de petrleo en suelos
Los suelos contienen un gran nmero de microorganismos que incluyen bacterias y
hongos capaces de utilizar hidrocarburos y representan el 1 % de la poblacin total de
microorganismos por gramo de suelo. Adems se han encontrado cianobacterias y algas
capaces de degradar hidrocarburos. Los suelos contaminados con hidrocarburos contienen ms
microorganismos que los suelos no contaminados, pero la diversidad de los microorganismos
est reducida.
La evolucin de los compuestos orgnicos en el ambiente es afectada por numerosos
factores, que se pueden agrupar en aquellos que afectan al metabolismo y crecimiento de los
microorganismos y aquellos que afectan al compuesto en s mismo.
Los factores que afectan el crecimiento de los microorganismos son los siguientes:
- presencia de otro material orgnico biodegradable
- presencia de compuestos inorgnicos que contienen nitrgeno y fsforo

106

- niveles de oxgeno
- temperatura
- pH
- presencia de agua, humedad del suelo
- nmero y tipos de microorganismos presentes
- presencia de metales pesados
La biodegradacin de los hidrocarburos est asociada con el

metabolismo y

crecimiento microbiano; por lo tanto cualquier factor que afecte el crecimiento microbiano
puede influenciar la

degradacin. Si los microorganismos no pueden utilizar los

hidrocarburos como nica fuente de energa y de esqueletos carbonados se precisar otro

sustrato de crecimiento (cometabolismo). En algunos casos, si se encuentra presente otro
sustrato, el microorganismo puede utilizar ste de forma preferencial a los hidrocarburos. Los
microorganismos pueden tambin requerir como suplementos compuestos que contengan
nitrgeno y fsforo, como se ha demostrado en las condiciones marinas.
La degradacin aerobia de los hidrocarburos es considerablemente ms rpida que la
anaerobia, de modo que un suministro de oxgeno ser favorable

para mantener las

condiciones aerobias si se requiere una degradacin rpida. Un suelo con una estructura
abierta favorecer la transferencia de oxgeno y un suelo anegado de agua tendr el efecto
contrario.
La temperatura afecta el crecimiento microbiano, as

a bajas temperaturas, la

velocidad de degradacin ser lenta. Se ha demostrado que la adicin de nutrientes a los

suelos a temperaturas de 4 a 10 C tiene poco efecto ya que bajas temperaturas reducen el
crecimiento de los microorganismos. El pH del suelo

tambin afecta el crecimiento

microbiano y la solubilidad del compuesto a ser degradadado.

La presencia de gran nmero de microorganismos que degradan los hidrocarburos en
el suelo ser

claramente una ventaja al principio, pero como la mayora de los suelos

contienen este tipo de organismos, el crecimiento pronto incrementar el nmero, de modo

que la adicin especfica de organismos que degradan los hidrocarburos probablemente no
ser necesaria. La contaminacin por hidrocarburos tambin puede estar asociada con altos
niveles de metales pesados que pueden inhibir el crecimiento microbiano segn su
concentracin y tipo de metales.

107

Los factores que afectan la degradacin de los hidrocarburos son los siguientes:
- metabolismo y crecimiento microbiano
- estructura qumica de los compuestos orgnicos
- disponiblidad y/ o solubilidad
- fotoqumica
La velocidad de degradacin de los hidrocarburos depender de la estructura de los
compuestos. Los compuestos ms simples, alifticos y aromticos monocclicos, se degradan
rpidamente, pero estructuras ms complejas, como los PAHs, no se degradan tan fcilmente
y pueden persistir durante un tiempo. La persistencia se incrementar si el compuesto o sus
productos de degradacin son txicos. Otro factor crucial es la accesibilidad del compuesto
para su degradacin en el interior del suelo. Esta caracterstica se ver afectada por la
estructura del suelo, porosidad, composicin y solubilidad del compuesto mismo. Algunos
componentes pueden ser adsorbidos en las arcillas y por lo tanto son invulnerables a la
degradacin. Para solucionar este problema aaden surfactantes a suelos contaminados para
mejorar la accesibilidad de los hidrocarburos.
m.Biorremediacin de crudo en el mar
La dispersin del petrleo permitir que organismos presentes de forma natural
(capaces de degradar los hidrocarburos), puedan degradar el crudo vertido. La descomposicin
ocurrir en la interfase entre l mismo y el agua y por lo tanto cuanto mayor sea la dispersin
del crudo y mayor el rea ms rpida ser la degradacin.
Existen mtodos fsicos y qumicos eficientes para eliminar el crudo; sin embargo,
los compuestos de alto peso molecular remanentes deben ser eliminados por algn tipo de
biorremediacin. El crudo puede ser degradado por la poblacin microbiana indgena en el
mar y en la costa, ya que los microorganismos capaces de utilizar hidrocarburos como fuente
de carbono y energa se encuentran ampliamente distribuidos; no obstante, el suministro de
compuestos utilizables de fsforo y nitrgeno es limitante en la mayora de los ambientes
marinos, as que para favorecer la degradacin es necesario aadir fertilizantes con una razn
de nitrgeno a petrleo de 1 : 100.
En el caso del derrame del Exxon Valdez, ( en marzo de 1989, el petrolero Valdez de
la empresa Exxon derram 42 millones de litros al embarrancar cerca del estrecho de Prince
William Sound en Alaska) la costa era tan carente de nitrgeno y fosfato que la adicin de
fertilizantes fue particularmente efectiva. Se utiliz un fertilizante oleoflico que limpi las
rocas despus de 10 das de tratamiento.

108

n. Rutas de degradacin
Los hidrocarburos son compuestos reducidos estables y por lo tanto la degradacin
ocurre principalmente en condiciones de aerobiosis y muy poco en anaerobiosis.
Los hidrocarburos alifticos se convierten en alcoholes y despus son oxidados
secuencialmente a cidos carboxlicos que son beta oxidados. Los alcanos con cadenas de
longitud intermedia, con 10 a 24 carbonos, (sin enlaces dobles y sin ramificaciones) son los
que mas rpidamente se metabolizan. Los alcanos de cadenas cortas son txicos para muchos
microorganismos pero tambin son voltiles. La ramificacin reduce la velocidad de
descomposicin. Los alcanos de cadenas largas son cada vez ms resistentes al metabolismo
y los que superan el peso molecular de 500 o 600 dejan de constituir una fuente de carbono.
Los compuestos aromticos monocclicos como

el

benceno son inicialmente

hidroxilados por la enzima dioxigenasa a cis-1,2 dihidroxi-1,2-dihidrobenceno y despus

convertidos en catecol. El metabolismo subsecuente del catecol puede seguir dos rutas,
escisin en orto o escisin en meta. En la escisin orto la oxigenasa rompe el anillo aromtico
entre dos hidroxilos adyacentes. En la escisin meta, la oxigenasa rompe el anillo aromtico
adyacente a uno de los grupos hidroxilo. La escisin en orto, da lugar a cis, cis-muconato,
mientras que la escisin en meta origina semialdehido 2-hidroximucnico. Ambas rutas
generan compuestos que pueden entrar al ciclo de Krebs (succinato, acido pirvico y
acetaldehdo respectivamente).
Los compuestos aromticos policclicos (HAPs) son los de mayor toxicidad y al
mismo tiempo los mas recalcitrantes a los mtodos convencionales de remediacin. Los HAPs
contienen dos o ms anillos bencnicos fusionados con arreglos angulares, lineales o
agrupados. Los de bajo peso molecular son susceptibles a la biodegradacin; sin embargo los
de alto peso molecular requieren cometabolismo.
En la biodegradacin de los HAPs de bajo peso molecular se lleva a cabo una
hidroxilacin del anillo aromtico seguida de una escisin del anillo y ambas reacciones son
llevadas a cabo por oxigenasas.

109

Ataque via citocromo P450 monooxigenasa (algas y hongos)

Epxido hidroxilado
Naftaleno

Transdiol

Catecol

Epxido
Reorganizacin no enzimtica

Fenol

Catecol

Ataque por una dioxigensa (algas y bacterias)

Orto ruptura
Naftaleno

Dihidrodiol

Ac. Saliclico

Catecol
Meta ruptura

Antraceno

Dihidrodiol

Fenantreno

Dihidrodiol

Ac. Saliclico
Protocatecuato

Catecol

Metaruptura

Metaruptura

En la biodegradacin de los HAPs de alto peso molecular se requiere cometabolismo.

El cometabolismo, cooxidacin o cotransformacin tiene lugar cuando los microorganismos
son incapaces de metabolizar un compuesto como nica fuente de carbono y energa pero si lo
pueden transformar cuando se les aporta un sustrato de crecimiento alternativo llamado
cosustrato. Ejemplo cuando Beijerinckia sp crece sobre bifenilo, xileno o salicilicato puede
cometabolizar el benzoanthraceno que de ser un compuesto formado por cuatro anillos,
carcinognico, pasa a ser compuesto con tres anillos no carcinognico.

110

6.15 Compuestos aromticos halogenados

Los compuestos aromticos halogenados son hidrocarburos que contienen por lo menos
una estructura del benceno donde uno o ms tomos de hidrgeno han sido sustituidos por
halgenos. Se clasifican en derivados de:
a)

Serie del benceno

b)

Serie de los compuestos polifenlicos

c)

Serie de los compuestos polinucleares

Segn el halgeno sustituyente , los compuestos aromticos se clasifican en:
Hidrocarburos aromticos fluorados
Tienen como nico sustituyente al flor y se caracterizan por su extrema inactividad

qumica a temperaturas ordinarias. La mayora son insolubles, tanto en disolventes polares

como no polares y carecen de importancia como contaminantes ambientales.
Hidrocarburos aromticos bromados
Tienen caractersticas muy semejantes a sus anlogos del cloro pero son de mayor
densidad y sus presiones de vapor son ms bajas. Con los lcalis y los metales tienen mayor
reactividad que los compuestos clorados. Un tomo de bromo por molcula disminuye la
inflamabilidad de una sustancia en la misma medida que dos tomos de cloro por esto se usan
como pirorretardantes.
Hidrocarburos aromticos iodados
Tienen mayor densidad y menor presin de vapor y son qumicamente menos estables.
Se utilizan poco en la industria y no se tiene informacin de que causen daos ambientales.
Hidrocarburos Aromticos Clorados
Tienen numerosas aplicaciones en la industria:

como aditivos para polietileno,

dieltricos, disolventes industriales, disolventes para limpieza en seco y plaguicidas. Los de

mayor

importancia

como

policlorobifenilos (PCBs).

contaminantes

ambientales

son

los

plaguicidas

los

111

6.16 Contaminantes orgnicos persistentes (COPs)

Los contaminantes orgnicos persistentes son mezclas y compuestos qumicos a base de
carbono que incluyen compuestos qumicos industriales como los PCBs, plaguicidas (DDT) y
residuos no deseados como las dioxinas. Los COPs son principalmente productos y
subproductos de la actividad industrial, de origen relativamente reciente. Son persistentes en
el ambiente, resisten los procesos de degradacin fotoltica, qumica y biolgica.
Los COPs son generalmente semi-voltiles; es decir se evaporan a una velocidad
relativamente lenta. Las sustancias persistentes con esa propiedad tienden a entrar al aire y
viajar largas distancias transportadas por las corrientes y luego regresar al suelo. Cuanto ms
fro es el clima, menor es la tendencia de los COPs a evaporarse en regiones como el Artico, a
miles de kilmetros de sus fuentes originales. Los COPs tienen generalmente baja solubilidad
en agua (no se disuelven fcilmente en agua) y alta solubilidad en lpidos (se disuelven
fcilmente en grasas y aceites). Las sustancias persistentes con esas propiedades se
bioacumulan en los tejidos grasos de los organismos vivos. En el ambiente, sus
concentraciones pueden aumentar en factores de varios miles o millones de veces, a medida
que se mueven niveles superiores de las cadenas alimentarias.
Los COPs se encuentran actualmente en el ambiente, en la vida silvestre y en los
humanos. Algunos COPs, en concentraciones extraordinariamente bajas, pueden alterar
funciones biolgicas normales, incluyendo la actividad natural de las hormonas y otros
mensajeros qumicos, y disparar una serie de efectos potencialmente dainos. Los problemas
generados por los COPs han motivado su prohibicin y restriccin severa en muchos pases.
EL programa de las Naciones Unidas para el Medio Ambiente (PNUMA), est propiciando
un convenio internacional obligatorio sobre el uso de doce COPs de manera prioritaria y que
adems defina los criterios para aadir nuevas sustancias as como establezca mecanismos de
apoyo a los pases en desarrollo.

112

Los doce COPs designados para Accin Internacional son:

Plaguicidas:

Hexaclorobenceno

(HCB),

Endrn,

Mirex,

Toxfeno,

Clordano, Heptacloro, DDT, Aldrn y Dieldrn.

Sustancias

qumicas

industriales:

Bifenilos

Policlorados

(PCBs),

Hexaclorobenceno (HCB).

Productos secundarios no intencionales: Dioxinas, Furano.

6.17 Plaguicidas
Un plaguicida es cualquier sustancia o mezcla de sustancias destinadas a prevenir,
destruir o controlar cualquier plaga (incluyendo vectores de enfermedades humanas o de
animales, almacenamiento, transporte o comercializacin de alimentos, productos agrcolas,
madera y productos de madera o alimentos para animales). Tambin aquellos que pueden
administrarse a los animales para eliminar insectos arcnidos u otras plagas en o sobre sus
cuerpos.El trmino plaguicida incluye tambin las sustancias reguladoras del crecimiento de
las plantas, defoliantes, desecantes, agentes para reducir la densidad de la fruta, agentes para
evitar la cada prematura de la fruta y ustancias aplicadas a los cultivos antes o despus de la
cosecha, para proteger el producto contra el deterioro, durante el almacenamiento y transporte.
Se estima que aproximadamente 85 % de los plaguicidas empleados en el mundo se
dedican al sector agropecuario, en cultivos de algodn, arroz, frutas y hortalizas. Asimismo, la
existencia de gran nmero de ecto y endoparsitos de impacto saniotario y econmico ha
motivado el uso de plaguicidas en el campo pecuario, como antiparasitarios internos y
externos, garrapaticidas, antisrnicos y piojicidas. Por su parte, cerca del 10 % de los
plaguicidas utilizados a nivel mundial, se dedican al control de vectores y huspedes
intermediarios relacionados con enfermedades como malaria, dengue, oncocercosis, filariasis,
esquistosomiasis, leishmaniasis, verruga peruana, fiebre amarilla y enfermedad de chagas. En
Amrica Latina los plagucidas que ms se han utilizado para salud pblica son los
organoclorados, particularmente DDT, sin embargo, han sido reemplazados port piretrinas,
piretroides y organofosforados.

113

Los plagucidas se pueden clasificar segn el tipo de organismo que se desea controlar,
segn la toxicidad que presenten y segn el grupo qumico al que pertenecen,

Cuadro 6. Clasificacin de los plaguicidas segn el organismo que interesa controlar

Nombre del Plaguicida
Larvicida
Insecticida

Organismo que interesa controlar

Larvas

Formicida

Hormigas

Pulguicida

Pulgas

Piojicida

Piojos

Aficida

Pulgones
Acaricida
Garrapatas y otros caros
Nematicida
Nemodos
Molusquicida
Moluscos
Rodenticida
Ratas
Ovicida
Columbicida Palomas
Bacteriostticos y bactericidas
Bacterias
Fungicida
Hongos
Defoliante
Herbicida
Malas Hierbas y Hojas
Arbusticida
b. Clasificacin de plaguicidas segn el grupo qumico
- Bipiridilos
- Carbamatos
- Compuestos rgano estnicos
- Compuestos organoclorados
- Compuestos organofosforados
- Compuestos organomercuriales
- Triazinas
- Derivados del cido fenoxiactico
- Derivados del cloronitrofenol
- Piretrinas y Piretroides
- Tiocarbamatos
- Derivados Cumarnicos

114

Cuadro 7. Clasificacin de plaguicidas segn vas de ingreso y toxicidad aguda expresada en

DL50 para rata (mg/kg peso corporal)

Oral
Drmica
Slidos*
Lquidos*
Slidos*
Lquidos*
Ia Extremadamente peligroso 5 menos 20 menos 10 menos 40 menos
Ib Altamente peligroso
5 50
20 200
10 100
40 400
II Moderadamente peligroso
50 500
200 2000
100 1000
400 4000
III Ligeramente peligroso
Ms de 500 Ms de 2000 Ms de 1000 Ms de 4000
Clase toxicidad

*Estado fsico del ingrediente o formulacin que se clasifica

Cuadro 8. Grado de toxicidad de los plaguicidas expresado en las etiquetas segn grados,
colores, smbolos e indicacin de peligro*

Grado
Color
Smbolo
Indicacin
Ia
Rojo
Calavera con huesos cruzados Extremadamente txico
Ib
Amarillo Calavera con huesos cruzados
Altamente txico
II
Azul
Moderadamente txico
III
Verde
Ligeramente txico
*Segn clasificacin OMS

6.18 Policlorobifenilos (PCBs)

115

Los policlorobifenilos o bifenilos policlorados ( PCBs) son compuestos de la categora

de hidrocarburos clorados (carbono, hidrgeno, cloro) cuya frmula general es C12 H10-n Cln.
Su estructura qumica comprende dos anillos bencnicos y uno a diez tomos de cloro.
El nmero y posicin de los tomos de cloro determina las propiedades biolgicas y el
comportamiento ambiental de cada uno de los bifenilos policlorados.

Los PCBs tienen 209 ismeros posibles en teora, pero existen cerca de 100
formulaciones comerciales (difieren en el nmero y distribucin del cloro en el ncleo
bifenilo). Las mezclas de PCB comercializadas son lquidos inodoros producidas por
cloracin de bifenilo con cloruro anhdrido. El resultado es una mezcla de diferentes
congneres que se purifican por neutralizacin y destilacin. Su viscosidad, densidad y
solubilidad en lpidos se incrementan segn la sustitucin del cloro a la vez que disminuyen su
solubilidad en agua y tensin de vapor.
Algunos nombres comerciales y generadores de PCBs son Aroclor, Askarel, Pyrenol
(EEUU),

Clophen

(Alemania),

Kanechlor

(Japn),

Phenoclor

(Francia),

Delor

(Checoslovaquia).

a. Propiedades de policlobifenilos ( PCBs)

Elevada constante dielctrica*.
Viscosidad baja que permite una alta capacidad de sobrecarga y efecto refrigerante.

116

Inercia qumica, estabilidad qumica, trmica y biolgica.

Muy baja inflamabilidad o no presentan inflamabilidad (no combustibles).
Alta capacidad calorfica.
Baja conductividad elctrica o no la conducen.
Muy baja solubilidad en agua pero si tienen solubilidad en aceite mineral, grasas y en
la mayora de solventes orgnicos.
Alta resistencia al calor.
Baja volatilidad.
Buena absorcin en suelos, sedimentos y acuferos.
* Los transformadores estn compuestos por una parte metlica (cuba) y una parte
activada formada por un ncleo (lminas de hierro, silicio, bobinas de alambre de cobre). Los
aceites dielctricos aislan el ncleo de la parte metlica y adems constituyen un medio
refrigerante transfiriendo el calor desde el ncleo del transformador hacia la cuba, calor que
luego es evacuado por el aire que circula en el transformador.
b. Usos de policlorobifenilos (PCBs)
Lubricantes de turbinas de gas y vapor, compresoras de gases y de aire.
Fluidos aislantes y refrigerantes para transformadores y grandes condensadores.
Solventes clorados de pinturas, tintas de imprenta y lacas.
Plastificantes en adhesivos, selladores, cauchos clorados, materiales plsticos.
Lubricantes en equipos de minas y barcos.
Materiales de construccin: asfaltos, fieltros aislantes de ruido, paneles aislantes de
techo.
Plaguicidas.
Masillas.
Agentes desempolvantes.
Medios de montaje de microscopio y aceites de inmersin.
Revestimientos de papeles.
Sellos de cierre de bombas de vaco.

c. Efectos nocivos de policlobifenilos (PCBs) en la salud

Los peligros de los PCBs para la salud estn asociados a la exposicin crnica an en
concentraciones bajas debido a que este compuesto imita el comportamiento de algunas

117

hormonas como los estrgenos y puede alterar el sistema endocrino provocando defectos de
nacimiento y esterilidad. Cuando la contaminacin se da a travs de la madre hacia el hijo por
la placenta y la leche, los bebs puede ser prematuros, con menos peso y crecimiento mas
lento, con cabezas pequeas y atraso neurolgico.Tambin ocasiona daos al hgado, a la piel
y provoca cncer a la mama y cerebro, melanomas malignos, linfomas y sarcomas en tejidos
blandos.
d. Policlobifenilos (PCBs) como contaminantes ambientales
Se conoce que aproximadamente el 40 % de la produccin de PCBs ha entrado al
ambiente, encontrndose niveles altos de ellos en las cadenas alimenticias. Este proceso
ecolgico se inicia con el transporte de los PCBs por aire, suelo y agua que a su vez es
generado por el mal manejo de los mismos, llega a los mares y entra en contacto con el
plancton, peces, pjaros y llega a los humanos. Debido a su alta estabilidad y lipoficidad,
existe bioacumulacin de PCB en muchas especies de animales y biomagnificacin a medida
que se asciende en la cadena trfica, en la tierra y sobre todo en el mar.
La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) considera a los PCBs como
contaminantes peligrosos y probables cancergenos. Fueron descritos como contaminantes
ambientales 30 aos despus que se introdujeron, cuando un cientfico sueco observ que el
adelgazamiento de las cscaras del huevo de las aves marinas, relacionado con la
bioacumulacin de PCB haca disminuir la capacidad reproductiva. En 1976, el Acta de
Control de Substancias Txicas en EEUU prohibi la produccin, manipulacin, distribucin
y comercializacin de los PCBs. Actualmente todos los pases tratan los problemas
relacionados a los PCBs y otros contaminantes orgnicos persistentes (COPs) a travs del
convenio de Estocolmo, suscrito el 23 de Mayo del 2001, cuyo objetivo es proteger la salud
humana y el medio ambiente frente a los COPs que incluyen a los PCBs.

Con respecto a la eliminacin del uso de los PCBs en equipos elctricos, se fij como
plazo el 2005. No obstante, en el Per, an se encuentran transformadores de baja y media
tensin que contienen aceite refrigerante de PCB y que en muchos casos por falta de
mantenimiento liberan este lubricante, contaminando el suelo, las napas y el agua, no slo en
un determinado foco sino de toda la zona porque una de sus caractersticas es su fcil
diseminacin; sin embargo, el principal riesgo ocurre si los transformadores explotan o se

118

incendian. En ese caso, el PCB se transforma en un producto qumico denominado dioxina

que es la sustancia ms daina que se conoce. Es cinco millones de veces ms txica que el
cianuro y se ha comprobado que es cancergena.
6.19 Biodegradacin de compuestos aromticos halogenados
Los compuestos aromticos halogenados son ms difcilmente degradables que los no
halogenados. El primer paso para la biodegradacin es la Deshalogenacin, para lo que
existen tres vas:

a. Deshalogenacin oxidativa: El halgeno se pierde fortuitamente durante la

oxigenacin del anillo y se forma catecol o protocatecuato. Intervienen enzimas mono y
dioxigenasas.

COOH

OH
OH

Deshalogenacin de 2 clorobenzoato hasta catecol

b. Deshalogenacin hidroltica: El halgeno es reemplazado por un grupo hidroxilo.

La fuente del tomo de oxgeno es el grupo hidroxilo del agua. y las condiciones requeridas
son de aerobiosis o de desnitrificacin.

119

COOH

COOH

Cl

OH

Deshalogenacin del 4 clorobenzoato hasta 4 hidroxibenzoato

c. Deshalogenacin reductiva: El halgeno es reemplazado por un hidrgeno. Ocurre

bajo condiciones metanognicas y de reduccin de sulfatos.
Las bacterias usan los compuestos aromticos halogenados como aceptores
terminales de electrones.
COOH

COOH

Cl
Deshalogenacin del 3 clorobenzoato hasta benzoato

Recientemente se han descubierto microorganismos que utilizan compuestos clorados

como nica fuente de carbono y energa no necesitando otra fuente secundaria de carbono y
energa a diferencia de lo que ocurre en los procesos cometablicos Asimismo, se han aislado
microorganismos anaerobios facultativos y aerobios capaces de degradar el PCB utilizndolo
como fuente de carbono y energa. Se incluyen Alcalgenes, Acinetobacter, Corynebacterium,
Pseudomonas, Rhodococcus y Phanerochaete chrysosporium.

120

Cuando han finalizado los pasos de deshalogenacin en anaerobiosis, la degradacin

de la estructura principal de muchos pesticidas se realiza a menudo en una siguiente etapa
aerobia. Asimismo, la biodegradacin de

los PCBs se inicia con el proceso de

deshalogenacin que tiene lugar con mayor rapidez en anaerobiosis. Los microorganismos del
ro Hudson del estado de New York han desarrollado la capacidad de deshalogenar
parcialmente los PCBs en anaerobiosis. A continuacin se airean los cienos para promover la
degradacin completa de los residuos menos clorados producidos por este proceso. Estudios
de investigacin sobre la deshalogenacin de los PCBs muestran que este proceso puede
utilizar los electrones procedentes del agua como tambin podra utilizar el hidrgeno como
fuente reductora para la deshalogenacin (deshalogenacin hidroltica y deshalogenacin
reductiva respectivamente).
6.20

Alternativa al uso de plaguicidas: Bacterias entomopatgenas en un manejo

integrado de plagas y vectores de enfermedades
El manejo integrado es un sistema de actividades

que utiliza conocimientos,

monitoreo, criterios de accin y materiales y mtodos concertadamente con los factores de

mortalidad natural para el manejo de las poblaciones de las plagas y vectores de
enfermedades. Bajo el control integrado, los enemigos naturales, prcticas culturales,
variedades de plantas y animales resistentes, inclusive los pesticidas se hacen mutuamente
aumentativos en lugar de operar individualmente y an en forma antagnica como ocurre a
menudo bajo la prctica prevaleciente (ejemplo insecticidas contra enemigos naturales). A
continuacin se describen algunos de los diferentes tipos de control utilizados en un manejo
integrado:

Control cultural: Consiste en la manipulacin directa del agroecosistema con el objeto de

obstaculizar el desarrollo de las plagas. Algunas de estas medidas son el barbecho, aporque
alto, asociacin y rotacin de cultivos, destruccin de hospederos alternativos y residuos
de la cosecha.

Control fsico y mecnico: Incluye mtodos orientados a la destruccin de las plagas en

forma directa causndoles algn trastorno fisiolgico o creando ambientes desfavorables
que impiden su desarrollo normal. Por ejemplo, coleccin y destruccin mecnica, control
de la temperatura, uso de arena, ceniza o aceites en granos almacenados.

121

Control etolgico: Se realiza mediante el uso de atrayentes, repelentes y otras formas de

control que aprovechan el comportamiento de las plagas para repelerlas o matarlas.
Ejemplo trampas amarillas para mosca minadora y feromonas sexuales para capturar
machos de gusano rosado.

Control legal: Se basa en la aplicacin de normas

dictadas por el Ministerio de

Agricultura en coordinacin con los agricultores y sus organismos representativos. Evita el

ingreso de una plaga a un sector libre de ella, regula la fecha de siembra, se destruye
algn cultivo sospechoso y otras operaciones culturales.

Control con extractos de plantas: Muchas plantas contienen compuestos qumicos con
efectos repelentes (cardo santo, ajo, mua) o insecticidas (barbasco, piretro,tabaco)

Control Qumico : Son todas aquellas actividades en donde se aplica un producto de tipo
qumico que puede ser larvicida, adulticida, hormonas, inhibidores, etc.

Control Biolgico: Es el uso de enemigos naturales que se puede dar en forma natural o
por accin del hombre a travs de las crianzas y liberaciones. Los enemigos naturales son
los individuos que se alimentan de los insectos plaga controlando su nmero y
manteniendo el equilibrio. Pueden ser parasitoides, depredadores y patgenos.
Parasitoides: Son organismos que atacan a una sola presa llamada hospedero. Viven a

expensas de su presa slo en su fase larval siendo el adulto de vida libre. Ejemplo:
Romanomvermis culicivorax cuyos adultos depositan huevos en el lodo o en el detrito de los
hbitats de mosquitos. Despus de salir del huevo, los nemtodos preparasticos buscan e
invaden larvas de mosquitos, donde crecen durante 7 das, luego el nemtodo sale y mata a la
larva al atravesar la cutcula. Cuando sale el nemtodo cae al fondo del hbitat, muda, se
aparea y las hembras comienzan a poner huevos.
Depredadores o predadores: Los depredadores difieren de los parasitoides en que
atacan varias especies durante su vida. Tanto las larvas de los depredadores como su estado
adulto buscan (son mviles) activamente presas de las que se alimentan. Ejemplo: peces
larvboros como Gambusca affinis y Poecilia reticulata.
Patgenos: Los patgenos de insectos o entomopatgenos son organismos que
producen enfermedades de insectos y generalmente no afectan a los organismos superiores.
Pueden ser bacterias, hongos, virus y otros.

a. Bacterias Entomopatgenas

122

Se agrupan en dos categoras: esporulantes y no esporulantes. Estas ltimas debido

a que tienen la capacidad de ser persistentes, lo cual es un requisito para su produccin en
escala comercial son las ms ampliamente estudiadas. Bacillus popillae, Bacillus
thuringiensis y Bacillus sphaericus son las bacterias entomopatgenas ms abundantes. De las
tres, Bacillus thuringiensis es la que mayormente se produce a nivel comercial bajo diferentes
formulaciones.
a.1 Bacillus thuringiensis
Fue descrito por primera vez en 1904 en Japn como organismo causante de
una enfermedad a larvas de gusano de seda y fue denominado Bacillus sotto. El
descubrimiento real de Bacillus thuringiensis lo hizo Berliner en Alemania en 1910. Lo aisl a
partir de Ephestia kiihniella que obtuvo en un molino de harina del distrito de Thringen.
Morfologa
Es un bacilo Gram positivo, aerobio, ciliado que forma una endospora oval
subterminal as como una inclusin parasporal proteica denominada comnmente cristal,
que contiene la delta- endotoxina responsable en parte de la patogenecidad.
Principales toxinas
B. thuringiensis produce hasta siete toxinas diferentes de las cuales la
delta- endotoxina es la de mayor importancia. Esta toxina se sintetiza en forma de protoxina
dentro de un cristal, inclusin proteica o cuerpo parasporal de forma bipiramidal, el cual es
termolbil y se forma durante el proceso de esporulacin.
Sntomas de infeccin
El primer sntoma de infeccin en las larvas es una actividad reducida y
prdida de apetito, seguida por la descarga de fluidos por la boca y el ano. Despus de la
muerte, el cuerpo se oscurece tomando una coloracin parda o negra con una consistencia
blanda. A continuacin, los tejidos internos pueden desintegrarse o tomar una consistencia
viscosa desprendiendo olor desagradable pero normalmente no se lican como sucede con los
insectos muertos por ciertas infecciones virosas. La larva generalmente se seca y se encoge
permaneciendo intacto el integumento.
Modo de accin de la delta- endotoxina
Los cristales del Bacillus thuringiensis tienen que ser ingeridos por los
insectos, para luego disolverse en las condiciones extremas del pH del intestino medio,
alcalino en el caso de los lepidpteros y cido en el caso de los colepteros liberando as las
protoxinas. Estas carecen de actividad biolgica y para su activacin necesitan ser

123

hidrolizadas por las proteasas del jugo intestinal. Los polipptidos resultantes se unen a
receptores especficos en las microvellosidades de las membranas de las clulas epiteliales del
intestino. La delta- endotoxina no pasa a travs de la membrana celular al interior de las
clulas blanco, sino

que permanece en la membrana, formando poros que alteran

la

regulacin de las propiedades de permeabilidad de la membrana celular.

La accin de la delta- endotoxina es rpida. El cese de la alimentacin puede
observarse a los pocos minutos de la ingestin de los cristales. Existe parlisis del intestino y
tracto alimenticio, vmito, diarrea, parlisis total y finalmente la muerte. Los primeros
cambios histopatolgicos se observan en las microvellosidades, los cuales se incrementan en
tamao, pierden su estructura interna y aparecen vacuolas dentro de las clulas epiteliales del
intestino. El tamao de las clulas se incrementa hasta reventar. La falta de control en la
permeabilidad lleva a un intercambio libre entre la hemolinfa y el contenido del intestino, lo
cual es letal para la larva. El modo de accin de las diferentes delta- endotoxinas de B.
thuringiensis pareciera que se basa en el mismo principio. Los cristales deben solubilizarse en
el jugo intestinal. Las proteasas del jugo intestinal tienen que generar el polipptido activo
correcto y finalmente, los receptores apropiados tienen que estar presentes en las clulas de la
membrana del intestino.
Espora de B. thuringiensis
En el proceso patolgico las esporas juegan un papel pasivo ya que slo
cuando el pH intestinal ha disminuido, producto de la destruccin del epitelio intestinal por la
delta- endotoxina, las clulas vegetativas son capaces de proliferar colonizando el hemocele y
causando una septicemia letal.
Serovariedades de B. thuringiensis
Se tienen registradas ms de 30 serovariedades de B. thuringiensis, de las
cuales algunas de ellas son usadas en control microbiano de insectos. Se conocen actualmente
ms de 200 especies de insectos que son controlados con productos a base de Bacillus
thuringiensis, la mayora son larvas de lepidpteros, otras variedades son activas contra larvas
de mosquitos culcidos y simlidos y ms recientemente colepteros.
Algunas variedades de Bacillus thuringiensis que han sido probadas como
larvicidas para dpteros son: Bacillus thuringiensis variedades tolworthi, kyushehuensis,
kenyae, aizawai, fukutokaensi, morrisoni, thuringiensis, israelensis, de las cuales slo algunas
presentan actividad pero por ser tan pequea es despreciable y la mayora son completamente
inactivas.

124

Bacillus thuringiensis var. israelensis o serotipo H- 14 de Barjac (1978); es

altamente txica para larvas de culcidos y su efecto ha sido comprobado para 72 especies de
mosquitos culcidos y 22 especies de simlidos. Hasta la fecha no ha sido aislada otra
variedad diferente de Bacillus thuringiensis israelensis y la encontrada se comercializa en
diferentes presentaciones. Bacillus

thuringiensis var. israelensis (cepa BTI H-14) ha

conseguido controlar muy bien al Aedes aegypti y otras especies aunque se tropieza con un
efecto residual de muy corta duracin.
El producto comercial est basado nicamente en la forma asporgena y la
endotoxina de la bacteria BTI- H14, para evitar el empleo de organismos vivos en el aguas
para consumo humano, resultando un producto bastante seguro que puede ser colocado en el
agua de bebida y que no causa dao a los predadores de los mosquitos y en general ningn
vertebrado.

El BTI H- 14 se obtiene por fermentacin del

Bacillus thuringiensis var.

israelensis y se emplea en forma de suspensiones acuosa, de color marrn claro. El

ingrediente activo est presente en forma de cristales proteicos, slidos de fermentacin y por
lo menos 10 millones de esporas viables por gramo presentando una potencia nominal de
1200 Unidades Txicas Internaciones (UTI)/ miligramo = 1280 millones UTI por litro.
La muerte se produce 24 horas despus de la ingestin. El producto muestra
actividad muy rpida y buena toxicidad para las larvas entre el primer y tercer estado y en el
cuarto necesitan una mayor concentracin del ingrediente activo. No tiene efecto sobre las
larvas al final del cuarto estado, ni en pupas. El producto se dispersa fcilmente en el agua,
presentando excelente suspensibilidad. No presenta toxicidad hacia las plantas y se conserva
invariable cuando se le almacena a temperatura ambiente hasta por 2 aos. No se ha registrado
resistencia de las larvas al producto. Cuando se aplica el BTI H- 14 en un medio acutico las
endosporas y la endotoxina quedan algunos das en suspensin en el agua, en los niveles
cercanos a la superficie, pero paulatinamente van asentndose al fondo de los recipientes
dando como resultado una disminucin de la actividad larvicida. Los fabricantes recomiendan
que se repita la aplicacin cada 7 das.

Forma de aplicacin de B. thuringiensis var. Israelensis cepa BTIH-14

125

El uso de BIT H- 14 se basa en que la reduccin vectorial es ms efectiva si se

hace en su fase acutica, siendo su actividad especficamente larvicida. Los sitios escogidos
como criaderos de las larvas son cuerpos de agua con vegetacin emergente (arrozales,
riachuelos, drenes), para el caso de Anopheles y criaderos artificiales tipo cilindros o tanques
de agua de almacenamiento para el caso de Aedes. La efectividad en el control de larvas se
debe principalmente a las caractersticas alimenticias en la superficie del agua donde ingieren
las esporas de entomopatgenos que debido a su baja densidad pueden flotar.
Aplicacin de B. thuringiensis var. Israelensis cepa BTIH-14
Durante aos la microbiloga peruana Palmira Ventosilla, se ha esforzado por
controlar la malaria, especficamente al vector Anopheles sp. En 1991, sus trabajos
adquirieron una urgencia mayor cuando se detect

Plasmodium falciparum el parsito

causante de malaria ms mortfero que se conoce al Per. Ventosilla y sus colegas en el

Instituto de Medicina Tropical Alexander Von Humboldt en Lima han creado una alternativa
econmica e inocua para el ambiente que podr ser usada como plaguicida contra mosquitos
en la lucha contra la malaria. En Salitral, pueblo ubicado en la costa hmeda y semitropical
del Per, el equipo de Ventosilla ha enseado a la poblacin como usar los cocos como
incubadores naturales de Bacillus thuringiensis var. israelensis (Bti), cepa H- 14, bacteria de
generacin espontnea que es inofensiva para humanos y animales, pero que aniquila el
mosquito Anopheles en la etapa larval, antes de que deje las charcas de agua y otros criaderos.
El proceso de incubacin consiste en insertar en el coco una torunda de
algodn empapada con las bacterias, despus de lo cual se sella con cera. Transcurridos unos
das de fermentacin, se abre el coco y se vierte el agua en las charcas donde los mosquitos
depositan los huevos. Este simple procedimiento requiere poco adiestramiento. Excepto por
las torundas de algodn, todo el equipo necesario- incluida la cera de velas, el cuchillo filoso y
los cocos se puede obtener localmente.
Adicionalmente a la generacin de tecnologa, un programa de control debe
impartir a la poblacin suficiente conocimientos y recursos para que pueda controlar por s
misma los brotes de enfermedad. En el caso de la malaria los residentes deben conocer el
ciclo de vida de Anopheles y las condiciones ambientales que favorecen la difusin de la
enfermedad. Con tal informacin la poblacin controlar los mosquitos aplicando
B. thuringiensis a los criaderos, pavimentando los canales de irrigacin y eliminando las aguas

126

albaales. Adems se protegern

de las picaduras del mosquito mediante el uso de

mosquiteros de cama y ventana, sembrando limoneros y eucaliptos (que actan como barreras
naturales contra el mosquito) y fumigando sus hogares con la quema de ramas y hojas de
eucalipto.
a.2 Bacillus sphaericus
Bacillus sphaericus cepa 2362 se comercializa como Griselesf, biolarvicida
que tiene como ingredientes activos esporas, cristales txicos y otros elementos esenciales,
siendo efectivo para el control de larvas de mosquitos de los gneros Culex y Anopheles, y
menos activo contra Aedes, Mansonia y Psorophora. Adems, tiene ventajas sobre
Bacillus thuringiensis debido a que se mantiene viable en medios acuticos poludos y tiene
alta capacidad de reciclaje en cadveres de larvas mosquistos.
Bacillus sphaericus produce al menos dos toxinas durante la esporulacin, y
las evidencias demuestran que ambas protenas actan juntas como una toxina binaria, siendo
la presencia de ambas requeridas para desarrollar la actividad insecticida de larvas de
mosquitos susceptibles. La toxina binaria est conformada por protenas de 51,4 a 41,9 kDa,
ambas expresadas como protena nica, 3,5- kb Hind III que, al ser ingeridas en forma de
cristales, se solubilizan en el intestino medio, debido al pH alcalino del intestino de la larva.
Luego ocurre un procesamiento proteoltico de la protoxina 51 y 42 kDa a protenas de 49
kDa, que se ligan a las clulas epiteliales del ciego gstrico y parte posterior del intestino
medio, internalizndose ambas toxinas por un mecanismo mediado por proteasas,
involucrando la aparicin de reas de baja densidad electrnica, vacuolizacin e hinchamiento
de las mitocondrias y, finalmente, lisis de las clulas intestinales, provocando se desencadene
la muerte de larvas.

Aplicaciones
Se evalu la efectividad de B. sphaericus cepa 2362 en larvas de Anopheles
en localidades de la ciudad de Iquitos, Loreto. Se seleccionaron seis criaderos, de los cuales
tres eran lagunas permanentes, un pozo y dos charcos temporales y previa determinacin de la
densidad poblacional de larvas (# de larvas de mosquitos de los estados I al IV) se aplic el
biolarvicida Bacillus sphaericus cepa 2362 de formulacin lquida con ttulos de 8-9 x 10 9
esporas/ ml conocido comercialmente como Griselesf 2362 (LABIOFAM de la Habana.

127

Cuba).La dosis de aplicacin empleada fue de 10 mL de la solucin diluida en 90 mL de agua

previamente filtrada, por cada m2. La aplicacin se llev a cabo con expansores manuales de
10 L de capacidad con 55 libras de presin, aplicndose en forma horizontal sobre la
superficie acutica con la finalidad de obtener una cobertura total, determinndose el
porcentaje de reduccin larvaria y la permanencia de B. sphaericus a los 7 y 30 das despus
de la aplicacin.
El efecto larvicida se inici 48 horas despus de la aplicacin del producto
mantenindose la efectividad hasta las 72 horas con un porcentaje de mortalidad de 100%
para larvas del I al IV estado. Se verific el incremento de densidad larval a las 96 horas de la
aplicacin obtenindose un 90% de reduccin larval debido al efecto residual de
B. sphaericus. Las aplicaciones demostraron alta efectividad de la formulacin aplicada en la
dosis recomendada de 10 ml/m2 entre las 48 horas y 96 horas de aplicacin. La permanencia
de Bacillus sphaericus se comprob a los 30 das despus de la aplicacin en muestras de
barro obtenidas del fondo del criadero, lo que sugiere que la bacteria posee capacidad de
reciclamiento y persistencia en el ambiente por largos perodos.

128