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Comparacin Entre Los Mtodos Kjeldahl y Dumas para El Anlisis de Proteina PDF
Comparacin Entre Los Mtodos Kjeldahl y Dumas para El Anlisis de Proteina PDF
KJELDAHL DUMAS
Fundamento del Mtodo El mtodo se basa en la destruccin de El mtodo se basa en la destruccin
la materia orgnica con cido sulfrico de la materia orgnica a travs de una
concentrado, formndose sulfato de combustin en una atmsfera rica en
amonio que en exceso de hidrxido de Oxgeno. Todo el producto de la
sodio libera amonaco, el que se destila combustin pasa a travs de un tamiz
recibindolo en: molecular conformado por perclorato
a) Acido sulfrico donde se forma sulfato de magnesio anhidro e hidrxido de
de amonio y el exceso de cido es sodio en base de tierras raras. Una
valorado con hidrxido de sodio en vez que el tamiz molecular retiene los
presencia de rojo de metilo, o b) Acido gases no deseados, el nitrgeno es
brico formndose borato de amonio el arrastrado hacia la celda de deteccin
que se valora con cido clorhdrico. con gas Helio o Argn y es
cuantificado por conductividad trmica
Reactivos Necesarios cido sulfrico concentrado p.a., Sulfato Perclorato de Magnesio Anhidro,
de Potasio o Sodio p.a, Sulfato Cprico Hidrxido de Sodio en base de Tierras
p.a, Solucin de Hidrxido de Sodio al Raras, Virutas de Cobre e Hierro,
15%, Solucin de cido Sulfrico 0.1N, Oxgeno pureza 99,99, Helio pureza
Solucin de Hidrxido de Sodio al 30%, 99,99 y Aire Comprimido.
Solucin de rojo de metilo al 1% en
Metanol, Solucin de Hidrxido de Sodio
al 0.1N, cido Brico al 3%, Indicador de
Tashiro, Solucin de cido Clorhdrico
0.1N
Procedimiento 1.- Realizar la muestra en duplicado. 1.- Pesar 1 g de nuestra
2.- Efectuar un ensayo en blanco usando homogeneizada sobre un papel de
una sustancia orgnica sin nitrgeno estao (tin foil) o cpsula de gel.
(sacarosa) que sea capaz de provocar la 2.- Doblar el papel de estao con el
reduccin de los derivados ntricos y objeto de contener la muestra
nitrosos eventualmente 3.- Identificar la muestra en la
presentes en los reactivos. computadora e ingresar tambin el
3.- Pesar al 0.1 mg. alrededor de 1 g de peso.
muestra homogeneizada (m) en un 4.- Colocar la muestra dentro del
matraz de digestin Kjeldahl. horno de combustin y presionar el
4.- Agregar 3 perlas de vidrio, 10 g de botn ANALISIS.
sulfato de potasio o sulfato de sodio, 0.5 5.- El resultado de Protena se
g de sulfato cprico y 20 mL de cido mostrar automticamente en el
sulfrico conc. software del equipo.
5.- Conectar el matraz a la trampa de
absorcin que contiene 250 mL de
hidrxido de sodio al 15 %. El disco
poroso produce la divisin de los humos
en finas burbujas con el fin de
facilitar la absorcin y para que tenga
una duracin prolongada debe ser
limpiado con regularidad antes del uso.
Los depsitos de sulfito sdico se
eliminan con cido clorhdrico. Cuando
la solucin de hidrxido de sodio al 15 %
adicionada de fenolftalena contenida en
la trampa de absorcin permanece
incolora debe ser cambiada (aprox. 3
anlisis ).
6.- Calentar en manta calefactora y una
vez que la solucin est transparente,
dejar en ebullicin
15 a 20 min. ms. Si la muestra tiende a
formar espuma agregar cido esterico
o gotas de silicona antiespumante y
comenzar el calentamiento lentamente.
7.- Enfriar y agregar 200 mL de agua.
8.- Conectar el matraz al aparato de
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CALCULO Y EXPRESIN DE
RESULTADOS