Tincin de May-Grnwald Giemsa
La tincin de May Grnwald-Giemsa (MGG) es una
tcnica de tincin derivada del mtodo de Romanowsky
que se utiliza principalmente para el coloreo de muestras
de frotis sanguneos o extendidos de mdula sea. Como
el resto de las coloraciones basadas en la tcnica de Ro-
manowsky, la tcnica MGG permite diferenciar cualita-
tiva y cuantitativamente los principales elementos formes
de la sangre.
En los laboratorios clnicos de hematologa resulta espe-
cialmente til para la demostracin de alteraciones en el
nmero, proporcin y morfologa de las clulas sangu-
neas. Tambin puede ser adaptada para su utilizacin co-
mo una tcnica de tincin clsica para cortes histolgicos.
1 Principio de la coloracin
Como su nombre lo indica, la tcnica combina las tc-
nicas de coloracin desarrolladas por May-Grnwald y
Giemsa. Estas tcnicas a su vez se basan en el empleo de
dos soluciones colorantes:
La solucin de May-Grnwald, que contiene el co-
lorante ninico eosina y el colorante catinico azul
de metileno ambos disueltos en metanol
La solucin de Giemsa, que contiene eosina, azul de
metileno y una serie de productos de la oxidacin de
este ltimo tales como el azur A, el azur B, el violeta
de metilo y el azul de metilo.
Todos estos colorantes se encuentran en estado no ioniza- variar bastante, teniendo un aspecto mas verdoso cuando
do mientras se mantienen en solucin de alcohol metlico, el pH nal obtenido es cercano a 5 y un tono rojizo cuando
pero al aadir agua se ionizan y se unen selectivamente el pH nal es cercano a 9. Para evitar estos efectos se
a los constituyentes celulares precipitando como sales in- suelen utilizar soluciones amortiguadoras de pH neutro
solubles.
Los componentes celulares de naturaleza aninica (cida) lavado.
se unen selectivamente a los tintes catinicos tindose en
variados tonos de azul. Estos componentes son llamados
baslos: (ADN, mitocondrias, ribosomas y citoplasma
de clulas ricas en ARN).
Los componentes celulares de naturaleza catinica (bsi-
cos) se unen selectivamente al tinte cido eosina, tindo-
se en variados tonos de naranja y rojo. A estos elementos
se los denomina acidlos o eosinlos. Este es el caso
de la hemoglobina, y de las protenas contenidas en las
granulaciones de los granulocitos eosinlos.
Los componentes celulares que tienen anidad por ambos
tipos de colorantes se denominan neutrlos y se tien en
variados tonos de violeta.
Resultado:
Los ncleos aparecen en colores que van del color
azul al prpura-negro.
Los citoplasmas de las clulas maduras aparecen de
un color violeta muy plido o marrn muy plido.
Los glbulos rojos, ricos en hemoglobina aparecen
de colores entre rosados y beige.
Los grnulos de los neutrlos aparecen de colores
entre violeta y marrn.
Los grnulos de los eosinlos aparecen de color na-
ranja.
Los grnulos de los baslos de color entre azul y
negro.
Los grnulos de los linfocitos grandes aparecen de
color prpura.
Las clulas con gran produccin de ARN (como lin-
focitos productores de inmunoglobulinas y clulas
inmaduras) presentan un citoplasma de color azul
intenso.
Cabe destacar que las coloraciones nales obtenidas son
muy dependientes del pH de las soluciones de tincin y
de las soluciones de lavado, por lo que los tonos pueden
para preparar las soluciones de tincin y las soluciones de
2 Particularidades
Dos tipos de comportamiento tintorial coexisten en esta
coloracin: Por un lado est el comportamiento ortocro-
mtico, en este caso el tinte conserva el color cuando se
ja al componente celular. Este es el caso del eosinato de
metileno, aqu el color naranja de la eosina se conserva y
el color del azul de metileno se conserva.
1
2 5 ENLACES EXTERNOS

Por otro lado est el comportamiento metacromtico, en 3.4 Tincin con Giemsa
este caso el tinte cambia de color una vez unido al compo-
nente celular. Es lo que ocurre con los derivados del azulLa solucin de Giemsa es inestable una vez diluida en
de metileno. Los azure A y B originalmente de intenso agua, por lo que conviene prepararla inmediatamente an-
color azul se convierten en prpuras cuando se unen a los tes de su uso, usualmente se prepara haciendo una dilu-
componentes celulares azurlos. cin 1:10 de la solucin comercial en agua destilada tam-
ponada con fosfatos a pH 7,2. Se cubren los portaobjetos
Las diluciones de las soluciones de tincin y los lavados
con la solucin de Giemsa recin preparada y se dejan
deberan hacerse con una solucin tamponada a pH 7,2-
teir por espacio de 15 a 20 minutos, transcurridos los
7,3 (pH prximo al siolgico) para no perturbar las a-
cuales se retira el colorante se lavan los portaobjetos con
nidades de tincin de los constituyentes celulares.
la solucin tamponada y se dejan escurrir en posicin ver-
tical hasta que estn completamente secos.

3 Tcnica
3.5 Observacin
EL procedimiento descrito a continuacin es simplemen-
Se hace en microscopio ptico de gran aumento con ob-
te a ttulo informativo. Debe ser adaptado de acuerdo a
jetivo de inmersin en aceite, esto permite ver detalles de
las especicaciones del fabricante de los colorantes y a
la cromatina de los ncleos y dilucidar correctamente las
los resultados obtenidos.
estructuras observadas.

3.1 Fijacin
4 Bibliografa
El primer paso es jar las clulas sanguneas presentes en
el frotis. La jacin es un proceso sicoqumico que alte- ARP, ed. (1992). Mtodos Histotecnolgicos. Insti-
ra las propiedades qumicas de las protenas que forman tuto de patologa de las Fuerzas Armadas de los
las clulas, para que luego resistan el proceso de teido EEUU (AFIP).
preservando la estructura que tenan cuando estaban vi-
vas. En la tcnica de May-Grnwald/Giemsa la jacin
la hace el metanol de la solucin de May-Grnwald. Para 5 Enlaces externos
jar se colocan los vidrios con los frotis horizontalmente
en una parrilla o en una caja de coloracin y se vierten Mtodo de May Grnwald Giemsa
unas 20 gotas de solucin sobre cada uno hasta que los
frotis queden completamente cubiertos. Se mantienen as Tincin de las extensiones de sangre perifrica
durante 2 o 3 minutos para que el metanol je las clulas.
Imagen de una tincin de May Grnwald-Giemsa de
neutrlos
3.2 Tincin con May-Grnwald Imagen de una tincin de May Grnwald-Giemsa de
sangre perifrica
Simultneamente al proceso de jacin, tanto el azul de
metileno como la eosina habrn permeado todos los com-
partimientos celulares, pero los colorantes no se podrn
unir a sus respectivas estructuras anes hasta que la so-
lucin se convierta en polar, esto se consigue agregando
lentamente agua, permitiendo as que los colorantes pre-
cipiten selectivamente.

3.3 Lavado y rehidratacin

La solucin de Giemsa es mucho ms polar que la so-

lucin de May-Grnwald, y para permitir que acte co-
rrectamente es conveniente que el preparado se encuentre
convenientemente rehidratado, luego de haber aadido el
agua a la primera solucin se lavan los vidrios con un cho-
rro de agua tamponada y luego se cubren con la misma
solucin de lavado durante un minuto, para permitir una
correcta rehidratacin.
 3

6 Origen del texto y las imgenes, colaboradores y licencias

6.1 Texto
Tincin de May-Grnwald Giemsa Fuente: https://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_May-Gr%C3%BCnwald_Giemsa?oldid=
86738069 Colaboradores: CEM-bot, Rosarinagazo, Gonn, Pedro Felipe, J3D3, Poco a poco, Ppefelipe.prox08, Xqbot, EmausBot, KLBot2
y Annimos: 2

6.2 Imgenes
Archivo:Basophil.jpg Fuente: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/8/83/Basophil.jpg Licencia: CC-BY-SA-3.0 Colabora-
dores: ? Artista original: ?
Archivo:Eosinophil_and_polymorphonuclear_neutrophil.jpg Fuente: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/7/75/
Eosinophil_and_polymorphonuclear_neutrophil.jpg Licencia: Public domain Colaboradores: I made this picture. Artista original:
Davidcsaba Dr. David Csaba L.
Archivo:Lymphocyte_GL.jpg Fuente: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/8/87/Lymphocyte_GL.jpg Licencia: CC-BY-
SA-3.0 Colaboradores: Dr Glenn Littel Artista original: Dr Glenn Littel
Archivo:Monocyte_sanguin.jpg Fuente: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/7/7f/Monocyte_sanguin.jpg Licencia: CC
BY-SA 3.0 Colaboradores: Trabajo propio Artista original: Lacrp

6.3 Licencia del contenido

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