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3. citometria hematica

3. citometria hematica

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Objetivo Aprender a realizar una Citometría Hemática manualmente, conociendo así el método poco utilizado y poniéndolo en práctica para

nuestro conocimiento. Fundamento La Citometría Hemática es el estudio de laboratorio mas solicitado, permite establecer sospechas diagnosticas definidas sobre la enfermedad que causa las alteraciones, sea cual sea. El estudio puede dividirse en tres grupos que son; seria blanca, serie roja y serie Trombocítica. Serie Roja Hemoglobina: La hemoglobina se mide en gramos por decilitro. Este parámetro debe se rel único que se emplee para definir si hay o no anemia. La hemoglobina se mide directamente por medio de los clitómetros de flujo y es necesario establecer los valores de referencia tomando en cuenta variables geográficas y de sexo masculino y femenino. Hematocrito: Se mide en porcentaje y representa la proporción de eritrocitos en el total de la sangre. Este parámetro está en deshuso y no debe usarse para establecer la existencia de anemia. Como este parámetro eritrocítico no se mide directamente por los citometros de flujo, sino que se calcula a partir de la medición del número de eritrocitos y del volumen globular medio, es un parámetro con menor precisión y exactitud que a Hb y el numero de eritrocitos. Glóbulos rojos: Se mide en millones por microlitro. El empleo actual de contadores de partículas por Citometría de flujo permite calcular con gfran exactitud este parámetro eritrocítico. Cuando no se cuenta con clitómetro de flujo para hacer la medición del número de GR, es preferible no proporcionar este dato, dado el margen de error tan grande de la cuantificación con métodos manuales. Volumen Globular Medio: Se mide en Femtolitros. Este índice eritrocitico, medido directamente por los clitómetros de flujo es de gran valor en el esclarecimiento de la casa de una anemia. Los valores de la VCM permiten saber si una anemia es macrocítica o microcítica. Hemoglobina Corpuscular Media: Se expresa en picogramos y presenta la cantidad promedio de hemoglobina en cada eritrocito. Este índice debe ser el único que se emplee para referirse a la cantidad de hemoglobina contenida en cada eritrocito: se hablara de hipocromía o normocromía cuando el valor de la HCM sea subnormal o normal respectivamente. Concentración Media de Hemoglobina Globular: Este índice eritrocítico, medido como porcentaje se determine por medio de formulas matemáticas. La CMHC es un dato de referencia poco útil y inexacto, no hace muchos años la determinación de CMHC se usaba para indicar la concentración de Hb en los

glóbulos rojos; esta costumbre o es aconsejable ya que es menos confiable de lo que se suponía. Serie Blanca Glóbulos blancos: Se mide en miles de millones por litro. El número de leucocitos depende de muchos factores como edad, peso, habito de tabaquismo, alimentación, etc. Cuando la GB se encuentra por arriba de 12 x109/L se habla de leucocitosis y cuando se encuentra por debajo de 4 x109/L de leucopenia. Serie Trombocítica Plaquetas: Las cifras de referencia de la cuenta plaquetaria se hallan entre 150 y 500 x109/L. las causas de trombocitopenia son: púrpura autoinmune, leucemia aguda, hipoplasia medular, etc. Cuando la cuenta plaquetaria se encuentra por encima de 500 x109/L se habla de trombocitosis, cuyas causas son también padecimientos malignos, síndromes mieloproliferativos, padecimientos autoinmunes, etc. Una Citometría Hemática siempre debe abarcar las tres series, debido a la información que puede proporcionar al médico en cuanto a la salud del paciente. Material

Jeringa con Cánula

Centrifuga Cámara de Neubauer

Pipetas para glóbulos rojos y blancos

Muestra sanguínea con EDTA

Liquido de Wright Liquido de Turk

Liquido de Hayem

Pipeta de Wintrobe

Muestra Biológica Sangre con EDTA Procedimiento Formula Roja Hematocrito  Con ayuda de la cánula llenamos nuestra pipeta de wintrobe con nuestra muestra sanguínea hasta la marca de 10.

 Centrifugamos nuestra pipeta de wintrobe por media hora 3000 RPM y después leemos el resultado de abajo hacia arriba el hematocrito.

Plaquetas

 Hacemos un frotis con nuestra muestra sanguínea y lo teñimos con el reactivo de Wright.

 Observamos 10 campos y contamos las plaquetas. Dividimos el número total de plaquetas entre 10 y lo multiplicamos por 18000 para obtener nuestro resultado. Eritrocitos  Aspirar sangre en una pipeta de mezcla para eritrocitos calibrada hasta la marca 0.5 y seguidamente aspirar sin formación de burbujas el reactivo de Hayem hasta la marca 101 y agitar la pipeta para lograr una mezcla homogénea.

 Desechar las 3 primeras gotas del líquido y llenar la cámara de recuento. Para la medición paralela llenar también el lado opuesto de la cámara de recuento, dejar pasar 3 minutos para que sedimenten los eritrocitos.

 Hacer el recuento con objetivo 40x en 80 de los cuadrados mínimos o básicos = 1/5 mm2 en el centro de la llamada red Thoma,y poner cuidado en que haya una distribución uniforme de los eritrocitos. En el recuento considerar solamente los eritrocitos que se encuentren claramente en el cuadrado agrupado (corresponde a 16 cuadrados básicos y 2 líneas de limitación en forma de L, p. ej. abajo y a la izquierda). La superficie total se compone de 5 cuadrados agrupados, que no deberían ser adyacentes.

 Otra práctica utilizada es sumar 3 al valor de el Hematocrito y multiplicarlo por 1millón. Hemoglobina  Ht.(.32) -> (40.3)(.32) = 12.8 Volumen Globular Medio (VGM)  (Ht. x 10 / Eri) -> (40.3)(10)/4.58 = 87.9 Hemoglobina Globular Media (HGM)  (Hb. x 10 / Eri.) -> (12.8)(10)/4.58 = 27.9 Concentración de Hemoglobina Globular Media (CHGM)  (Hb x 100 / Ht) -> (12.8)(100)/40.3 = 31.7 Formula Blanca Leucocitos  Aspiramos con nuestra pipeta para leucocitos hasta la marca de 0.5 nuestra muestra sanguínea y seguidamente aspiramos el Liquido de Turk hasta la marca de 101. Mezclamos bien nuestra pipeta.

 Desechar las 3 primeras gotas del líquido y llenar la cámara de recuento por capilaridad.

 Con objetivo de 10x leer los cuatro campos de las esquinas, sumar los cuatro resultados y multiplicarlos por 50.

Recuento diferencial de Leucocitos Realizamos un frotis y lo teñimos con Wright, diferenciamos y contamos todos los glóbulos blancos hasta llegar a 100.

Resultado Serie Roja Hemoglobina: Hematocrito: Eritrocitos: VCM HCM CHCM

12.8 g/dL 40.3 % 4.58 millones/uL 87.9 fL 27.9 pg 31.7 %

Serie Blanca Leucocitos 5.8 x109/L Recuento diferencial de Leucocitos: 68 neutrófilos

29 linfocitos 3 monocitos Serie Trombocítica Plaquetas: 248 x109/L El resultado que obtuvimos nos indica que nuestro paciente se encuentra estable y no presenta ninguna anomalía en el resultado de esta prueba. Conclusión La práctica es fácil pero compleja en cuanto a las series y las formulas que usamos. Es un método poco usado pero es importante aprenderlo.

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