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biosource europe BECKMAN COULTER COMPANY Linco Research
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cargas negativas de la Hematena y del cido los colores verde-azul o rosa de los Cuando se usa alcohol absoluto debe ser
Fosfrico de las cadenas de DNA nuclear. citoplasmas. Puede reemplazarse por el Bis- cambiado semanalmente y se puede
- cido Actico Glacial: diferenciador. marck Brown. mantener libre de agua con el agregado de
Incrementa la precisin de la tincin nuclear - cido Fosfotngstico: mordiente. Une el slica gel.
y estabiliza el colorante; previene la Light Green con las protenas de la clula.
oxidacin. - Carbonato de Litio: diferenciador. Se utiliza Montaje (2-3-4-5-7-8)
- Alcohol Etlico: evita la contaminacin con en solucin acuosa saturada.
hongos. Una placa coloreada sin medio de
- Agua destilada. Caractersticas del colorante citoplasmtico. montaje no permite detallar las estructuras
- Permitir la neta diferenciacin entre celulares, debido a la diferencia que hay
Caractersticas del colorante nuclear clulas eosinfilas y cianfilas, sin dar entre los ndices de refraccin de las clulas
- Dar coloracin perfecta al ncleo. matices intermedios. y el portaobjeto.
- Colorear al mnimo el citoplasma. - Dar una coloracin homognea, estable y
- No cambiar en el transcurso de la colora- transparente. Para obtener mejores efectos
cin citoplasmtica. - No disminuir la coloracin del ncleo a visuales, se debe impregnar la placa con un
- No modificar las reacciones tintoriales de causa de una excesiva acidez. medio de montaje transparente con ndice
las clulas o la coloracin citoplasmtica de refraccin semejante al vidrio (1.518) y al
en general. Alcoholes (2-3-4-5-7-8) ndice de refraccin promedio del
extendido.
Coloracin del Citoplasma (2-3-4-5-7-8) El alcohol usado previo al EA debe
ser chequeado y reemplazado de acuerdo a El grosor del cubreobjeto debe
Se realiza con: EA 50 o EA 36 (eosina la necesidad, ya que la hidratacin del tener entre 0,130 a 0,170 mm, y debe ser de
alcohol). Se pueden preparar diferentes mismo impide una correcta coloracin un tamao suficientemente grande para
tipos de EA: 25, 31, 36, 50, 65, se clasifica citoplasmtica. que cubra toda la superficie con material
segn sea la concentracin del Light Green. celular (24x48 -24x50 24x60mm). Debe
Este colorante est compuesto por: Despus de que los extendidos han tener una superficie plana sin irregulari-
sido coloreados deben sufrir la deshi- dades y debe resistir el almacenamiento.
- Eosina cida: es el colorante de fondo o dratacin. Los pasajes por el alcohol son
contraste, en unin con el colorante nuclear conocidos tambin como aclaramiento. La El medio de montaje, protege el
da tono rosa al citoplasma. Colorea el finalidad de los pasajes por alcohol es deterioro del colorante y evita la oxidacin;
citoplasma de clulas escamosas, nuclolos devolver al citoplasma su transparencia. debe ser qumicamente inerte, no debe
y eritrocitos. cambiar el pH, el color, deformar las clulas,
- Light Green: cido. Da tono verde-azul a los Los alcoholes usados despus de la ni agrietarse. Ser soluble en solventes
citoplasmas de: clulas intermedias, capa coloracin citoplasmtica son usualmente orgnicos como: Xilol, Tolueno, Acetato de
profunda, columnares, histiocitos y leu- cambiados con una rotacin bsica. El Butilo.
cocitos. alcohol usado inmediatamente despus de
La competencia entre la Eosina y el Light la coloracin es descartado y los restantes se Los ms utilizados son:
Green en las clulas, es la base de la van traspasando y en el ltimo se usa
coloracin diferencial del citoplasma. alcohol nuevo. - Blsamo del Canad. ndice de refraccin:
- Vesuvina: bsico. Determina o contrasta 1.53, es una oleorresina natural, se obtiene
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agua en ellos puede hacer la solucin de por los alcoholes. Sistema Bethesda 2001
apariencia lechosa. El proceso de - Decoloracin citoplasmtica por excesivo
aclaramiento puede ser alterado con tiempo en los alcoholes de enjuague. Tipo de muestra: indicar si se trata
pequeas gotas de agua que pueden ser - Tonalidad gris o prpura por excesivo tiem- de un extendido convencional (Papani-
vistas microscpicamente por encima de las po en el colorante nuclear. colaou, citologa lquida u otro tipo de
clulas en los frotis. El agregado de gel slica - Medio de Montaje: muestra)
en el alcohol absoluto puede minimizar la > Placas hidratadas: no permiten
posibilidad de contaminacin del aclarante, una ntida visualizacin al microscopio. Calidad de la muestra
donde tambin puede agregarse para > Interferencia del medio de - Satisfactoria para evaluacin (consignar la
absorber la cantidad de agua presente. montaje: el extendido toma una tonalidad presencia o ausencia de clulas endo-
- El Xilol es potencialmente explosivo. amarilla. cervicales y clulas de la zona de
Algunos ismeros del Xilol pueden oxidarse transformacin o cualquier otro indicador
si se mezclan con cido Actico y formar un 4.c. Fase Post-analtica de calidad, por ejemplo: hemates,
compuesto explosivo, que puede detonar inflamacin, etc.)
inmediatamente en contacto con cido Lectura de la Citologa - Insatisfactoria para evaluacin (espe-
Ntrico concentrado. cificar el motivo)
- Las modificaciones de la coloracin de El citlogo debe empezar por ~ muestra rechazada o no proce-
Papanicolaou, se basan principalmente en: revisar la Historia Clnica de la paciente, sada (especificar el motivo)
la reduccin en el nmero de alcoholes, la datos necesarios e indispensables que ~ muestra procesada y examina-
preparacin de las soluciones y los tiempos orientan hacia una buena interpretacin, da, pero insatisfactoria para la evaluacin
utilizados. Esto se ajusta en cada laboratorio como tambin observar coloracin y de anomalas epiteliales debido a
hasta obtener la coloracin deseada. espesor del material de los extendidos. (3) (especificar el motivo)
Indicadores de No-Calidad en la coloracin Los citlogos realizarn los Clasificacin general (opcional)
de Papanicolaou Modificada. (2-3-4-5-8) screening de todos los extendidos y - Negativo para lesin intraepitelial o malig-
marcarn los que tengan anomalas. Para nidad
- No presentar buen detalle en las controlar los que as lo requieran - Otras categoras
estructuras celulares. (antecedentes de lesiones precursoras, - Anomalas de clulas epiteliales (especifi-
- Precipitacin del colorante por falta de Imunosupresin, etc.) y por lo menos el 10% car si se trata de clulas escamosas o
filtracin. de los negativos, como Control de Calidad, glandulares segn corresponda)
- Fijacin: se remitirn al Citlogo Jefe. (3)
~ Secado al aire: produce oxidacin Interpretacin/ Resultado:
celular con aumento de la eosinofilia y lisis Sistema de informe (12)
celular. - Negativo para lesin intraepitelial o
~ Algunos alcoholes en combina- Binario, Sistema Bethesda que malignidad (Cuando no hay signos de
cin con ter o cido Actico producen permite una exacta correlacin con los neoplasia, consignarlo en Clasificacin
acidez excesiva con aumento de la diagnsticos histopatolgicos. general o en interpretacin/resultado
eosinofilia y lisis de glbulos rojos. independientemente de la presencia de
- Coloracin del ncleo: En 1988 en Bethesda (USA.) un microorganismos u otros hallazgos no
~ Ncleos plidos: pueden obser- grupo de expertos consensu un nuevo neoplsicos)
varse por: secado al aire; prdida de la sistema de reporte estandarizado y en 1991
capacidad tintorial por agotamiento del se hicieron algunas modificaciones. Microorganismos
colorante, del mordiente o del diferen-
ciador. Este sistema permite que la - Trichomonas vaginales.
~ Ncleos sobrecoloreados: por comunicacin entre el mdico y el - Elementos micticos de caractersticas
extendidos hemorrgicos, exceso de laboratorio sea ms clara, en vez de utilizar morfolgicas compatibles con Cndida.
tiempo en el colorante nuclear. la escala de nmeros romanos del I al V, - Cambios de la flora vaginal sugerentes de
- Coloracin del Citoplasma: propuesta por Papanicolaou, se utilizan vaginosis bacteriana.
~ Falta de contraste entre las clulas trminos descriptivos especficos e incluye - Bacterias de caractersticas morfolgicas
eosinfilas y cianfilas. valoracin del frotis mismo: los resultados compatibles con Actinomyces.
~ Presencia de matices intermedios incluyen informacin sobre la calidad de la - Cambios celulares compatibles con
(anfofilia). muestra, su clasificacin general y un Herpes simple.
~ Coloracin irregular en grupos diagnstico descriptivo.
celulares por falta de agitacin en el paso
Otros hallazgos
ALERGIA ELISA
Otras neoplasias malignas: (especificar)
IgE total. Radim
IgE especfica. Radim
- PRUEBAS AUXILIARES Ms de 400 alergenos biotinilados. Radim
Realizar una breve descripcin de los mtodos utilizados e
informar el resultado con un vocabulario que el mdico
solicitante comprenda con facilidad.
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- EVALUACIN AUTOMATIZADA citolgicas de las clulas escamosas: Bethesda Los mismos sern entregados con la
Si la evaluacin fue automatizada, especi- 2001- Nomenclatura CIN (Richart), Nomen- prudencia y la tica que corresponden a un
ficar cul fue el equipo utilizado y el clatura de la Displasia (Reagan) y Clasificacin de anlisis clnico.
Papanicolaou. (Las categoras no estn a escala).
resultado.
Las regiones estn representadas en distintos
tonos de colores para enfatizar la secuencia
- Cuando el material es de derivacin, ser
- SUGERENCIAS Y NOTAS DIDCTICAS morfolgica de los hallazgos citolgicos y las entregado al derivador.
(opcional) transiciones imprecisas que separan a las - Cuando el paciente concurre al laboratorio
Las sugerencias deben ser concisas distintas categoras; Azul= negativo; Verde= para la toma de la muestra, el informe le
y respetar las pautas de seguimiento clnico ambiguo; Amarillo= anomalas epiteliales de bajo ser entregado con la indicacin verbal de
publicadas por las asociaciones profe- grado (generalmente, infeccin por HPV); que debe ser ledo por el mdico solicitante,
sionales (cabe incluir referencias de publi- Naranja= anomalas intraepiteliales de alto grado o de ser iniciativa personal por un mdico
(generalmente, neoplasias intraepiteliales
caciones relevantes). especialista.
vinculadas al HPV); y Rojo= a carcinoma. La
clasificacin de Papanicolaou se basa en el riesgo
Valoracin Hormonal (Slo se aplica que tiene una paciente de padecer cncer y est Control de Calidad
al frotis vaginal) (7) representada en el esquema como una cua de
riesgo de menor a mayor desde la clase I a la V. - Indicador de calidad de las muestras
- Patrn hormonal compatible con edad y citolgicas:
antecedentes. ASC-US
Porcentaje de muestras insatis-
SIL
- Patrn hormonal incompatible con edad y Bothesda 2001 NILM
LSIL HSIL
CA
factorias no mayor del 10%
antecedentes: especificar. ASC-H