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Efecto Antebacterial de La Muña PDF
Efecto Antebacterial de La Muña PDF
FACULTAD DE ODONTOLOGA
E.A.P. DE ODONTOLOGA
AUTOR
Huari Guerrero, Grace Medalith
Lima Per
2014
JURADO DE SUSTENTACIN
Dedicatoria
A Dios por darme salud y as concluir los seis aos de estudio de odontologa.
A mis padres, en especial a mi madre porque sin su apoyo no hubiese logrado
estudiar esta profesin y por brindarme su apoyo incondicional en todo momento.
A mi familia que se encuentra en el extranjero siempre los tengo presente, gracias
por el apoyo.
AGRADECIMIENTOS
I.-INTRODUCCIN
2.1.- ANTECEDENTES
2.2.2.-PLANTAS MEDICINALES
15
15
2.2.2.2.-DEFINICIN
15
2.2.2.3.-COMPOSICIN
15
2.2.2.4.-PROPIEDADES FSICAS
16
2.2.2.5.-COMPOSICIN QUMICA
17
17
DE
LOS
FACTORES
EXTERNOS
EN
LA
18
19
19
21
2.2.3.1.-Minthostachys mollis
21
21
23
5
2.2.3.1.4.-CARACTERSTICAS
FSICO-QUMICAS
DEL
ESENCIAL DE Minthostachys mollis (HBK) GRISEB MUA
ACEITE
24
2.2.3.1.5.-COMPOSICIN QUMICA
24
25
26
28
29
29
2.2.5. AMOXICILINA
32
32
2.4.- JUSTIFICACIN
32
2.5.- OBJETIVOS
33
2.6.- HIPTESIS
33
34
34
34
35
3.4.- MATERIALES
37
3.5.- MTODOS
38
38
38
3.5.1.2.-IDENTIFICACIN TAXONMICA
39
39
39
40
40
6
40
41
42
3.5.4.-PROCESAMIENTO DE RESULTADOS
42
42
IV.- RESULTADOS
43
V.- DISCUSIN
55
VI.- CONCLUSIONES
59
VII.- RECOMENDACIONES
60
RESUMEN
61
ABSTRACT
62
BIBLIOGRAFA
63
ANEXOS
68
NDICE DE CUADROS
43
mollis
44
CUADRO 04: Efecto antibacteriano del aceite esencial de Minthostachys mollis
en cepa de Streptococcus mutans
45
CUADRO 05: Halos de inhibicin en cepas de Streptococcus mutans despus de
aplicar aceite esencial de Minthostachys mollis al 100 %
46
47
48
49
53
NDICE DE FIGURAS
46
47
49
I.-INTRODUCCIN
La caries dental es una de las patologas orales ms comunes en nuestra
poblacin, segn MINSA1 el 90% de la poblacin padece esta patologa. Entre los
factores causales de esta enfermedad se encuentran husped, dieta, el tiempo y
los microorganismos. En cuanto al factor microbiolgico se encuentran entre las
principales: Streptococcus mutans, Lactobacillus acidophilus y Actinomyces
naeslundii.
El Streptococcus mutans se caracterizan por ser cocos gram positivos,
anaerobio facultativo forman parte de la flora residente en la cavidad bucal y vas
respiratorias altas; autores tales como Berkowitz, Kohler, col. y Van Houte han
sugerido al Streptococcus mutans como el principal agente de la formacin de
caries dental.2 Entre los factores de patogenicidad en el Streptococcus mutans
destaca: poder acidognico, acidfilo y acidrico; sntesis de polisacridos
extracelulares de tipo glucanos insoluble y solubles, fructanos; sntesis de
polisacridos intracelulares; capacidad adhesiva por la protenas salivales;
produccin de bacteriocinas con actividad sobre otros microorganismos.
Ante esta problemtica existen numerosos tratamientos para impedir que la
caries dental siga daando estructuras dentarias, que van desde aplicaciones de
sustancias tpicas como flor en forma preventiva, restauraciones, entre otros.
Actualmente se emplean plantas medicinales para combatir ciertas
enfermedades, como es el uso de la mua Minthostachys mollis, planta oriunda
de la sierra del Per, su uso ampliamente difundido en diversas regiones del pas,
se debe por poseer propiedades curativas, las cuales atribuyen a sus
componentes, entre los cuales destaca el aceite esencial, el cual acta
dependiendo del tipo de microorganismo y est principalmente relacionado con la
estructura de la pared celular y la membrana externa de los mismos,3 adems que
interferiran en la fase de metabolismo intermedio de los microorganismos
inactivan enzimas de reaccin.4
En el trabajo realizado se utiliz el aceite esencial de Minthostachys mollis
en cepas de Streptococcus mutans y se evalu su efecto antibacteriano
comparado con el control positivo (amoxicilina).
10
1-Tetradeceno,
2s-Transmentona,
pulegona
como
determin
actinomycetemcomitans,
Streptococcus
mutans,
inactivacin
trmica
sobre
cepas
de
Bacillus
cereus
Listeria
13
hidrodestilacin
trece componentes
100
present
una
efectividad
antibacteriana,
tanto
presentan
actividad
antibacteriana frente a
cepas de
15
20
de
bacteriocinas
con
actividad
sobre
otros
salivarius,
Streptococcus
parasanguis
Streptococcus
17
Autores
2.-Aciduricidad
El pH es un factor de estrs para las bacterias por lo cual desarrolla varios
mecanismos cidotolerantes. La aciduridad hace referencia a la capacidad que
posee el microorganismo de producir cido en un medio con pH cido.
Streptococcus mutans es ms acidrico que los dems tipos de Streptococcus.
3.-Resistencia al medio cido o acidofilicidad
18
19
20
(residuos 816 a 1213). A sta se le conoce como regin P, la cual se cree que es
la regin ms relacionada con la unin entre la superficie de la protena y los
componentes salivales.
En varios estudios efectuados en la dcada de los ochenta se sugiri que
por homologa de las secuencias (segmentos de cadenas de aminocidos iguales
entre dos protenas diferentes), se podra presentar reactividad cruzada entre
PAC y las protenas del msculo cardaco, lo cual podra llevar a enfermedades
autoinmunes. Se concluy que la capacidad del Streptococcus mutans para
inducir anticuerpos de reactividad cruzada no es causada por la protena PAC,
sino por otros antgenos de la pared celular de esa bacteria.
Como muestran diversos estudios realizados hasta el momento, varias
secuencias de la protena PAC han sido determinadas como inmunongenos y
se ha propuesto sus usos como antgenos vacunales, a pesar de haberse
comprobado su capacidad inmunognica en animales, no se ha comenzado la
experimentacin con esa protena en humanos.
8.-Glucosiltransferasas
21
encontrando que est constituido por 1689 bases con un pptido seal de 35
aminocidos. El peso molecular de la protena procesada se calcul en 59,039
KDa. Se encontr que las repeticiones son homologas a secuencias
hipotticamente involucradas en la unin de glucanos en la GTF-I DE
Streptococcus downei. Y tambin a secuencias de protenas codificadas por los
genes gtfB y gtfC de Streptococcus mutans. Proponen que estas secuencias
repetidas pueden representar segmentos peptdicos que son importantes en la
unin de glucanos y que pueden ser distintos entre las GBPs de otras bacterias
habitantes de placa o cavidad oral.
Actividad antimicrobiana de plantas sobre microorganismos cariognicos, Aricapa Paola, Bogot 2009, pg.
64.
23
2.2.2.-PLANTAS MEDICINALES:
2.2.2.1.- PRINCIPIO ACTIVO DE LAS PLANTAS MEDICINALES
Thompson24 refiere que el valor medicinal de las plantas curativas,
se debe a la presencia de una sustancia qumica principio activo que
produce un efecto fisiolgico. Mucho de los principios activos son
sumamente complejos, desconocindose an su naturaleza qumica; otros
23
sus
derivados
oxigenados
llamados
alcanfores. 31
La
terpenos
por
su
composicin,
pueden
derivar
de
la
2.2.2.5.-COMPOSICIN QUMICA
Estn constituidos por muchas clases de compuestos qumicos,
algunos por un solo componente en un alto porcentaje y otros por mezclas
complejas de compuestos cclicos aromticos, acclicos, heterocclicos y
derivados oxigenados.
25
26
DE
LOS
FACTORES
EXTERNOS
EN
LA
: Vegetal
Sub reino
: Embryophyta
Divisin
: Magnoliophyta
Clase
: Magnoliopsida
Subclase
: Methachlamydeae
Orden
Familia
: Tubiflorae
: lamiaceae (labiatae)
Gnero
Especie
Nombre vulgar
: Minthostachys
: Minthostachys mollis (Spach) Griseb
: Mua
30
Frmula floral
2.2.3.1.2.-
CARACTERSTICAS
BOTNICAS
DEL
GNERO
EN
ESTUDIO
Es una planta arbustiva, leosa, frondosa en la parte superior, de
aspecto general glauco, erecta y pubescente, su tallo es ramificado desde
la base. La hoja es el elemento vegetativo simple ligeramente aserrado,
carece de estpulas, cortamente pedunculares de filotaxia opuesta. Su
peciolo mide entre 4 y 6 mm de largo, pubescente acanalada en la parte
superior y convexo en la parte inferior, es aqu donde se deposita la mayor
cantidad de aceite, que al estrujarlos dejan sentir su aroma caracterstico.
Las flores son hermafroditas.
El limbo es aovadote 1.7 a 2.5 cm en su mayor ancho, y de 2 a 4 cm
de largo; su base es atenuada de bordes aservados, pice agudo de
nerviacin penninervia. El limbo es pubescente tanto en el haz como en el
envs, debido a lo cual la hoja presenta una coloracin verde plida; sus
nervaduras secundarias son muy desarrolladas y ligeramente reticuladas.
El cliz soldado con 13 venaciones terminado en 5 lbulos dentados
casi iguales entre s con pelos cerelosos en la base, la corola raramente es
de 6 mm de largo, dividida en 2 labios: 2 lbulos o labio superior y 3 lbulos
o labio inferior. Los pelos de las partes areas, o sea de las hojas y tallos,
parece que forman una especie de manto protector contra los cambios
bruscos de temperatura y al mismo tiempo son los lugares en donde se
deposita el aceite esencial, de aqu que al estrujarlos dejen sentir su aroma
o el sabor picante que da una impresin de fro que es caracterstico. Las
flores son pequeas, reunidas en verticilos falsos, situados en la parte
superior de las ramas con pednculos cortos, 2 en cada axila. 8
2.2.3.1.3.-TIPOS DE Minthostachys
Se indica un total de 12 especies, cuya distribucin abarca desde
Argentina hasta Venezuela42 y en el Per encontraron 6 especies
31
32
Color
Incoloro
Olor
caracterstico en menta
Sabor
picante
Densidad relativa
0.92
ndice de refraccin
1.4699
Solubilidad en alcohol al 70
ndice de mentona
33.88 %
ndice de menta
22 %
ndice de acidez
1.683
ndice de steres
5.819
Rotacin especfica
-2 45
ndice de ter
16.80 %
4.042 %
Solubilidad en etanol
95 %
2.2.3.1.5.-COMPOSICIN QUMICA
Con respecto a la composicin qumica del aceite esencial de
Minthostachys mollis (mua) existen pocos trabajos de investigacin por lo
que se tiene poca informacin; el aceite esencial de Minthostachys mollis
(mua), al igual que otros aceites esenciales, presenta una estructura
aldehdica, cetnica, alcohlica (mentol y mentona), steres, teres y
terpenos en mayor porcentaje.8
Gibaja46
realiz
la
desterpenacin
del
aceite
esencial
de
34
Mentol
Por lo general, mucho menos importante en Minthostachys mollis,
pero a veces, se encuentra como componente menor de la mezcla de
aceites. Se utiliza contra el dolor de garganta.
Linalol
Empleado como condimento y como insecticida, linalol es ms
conocido de cilantro (Coriandrum sativium) de la familia Apiaceae. A
menudo es uno de los componentes menores del aceite de Minthostachys
mollis.
Timol
Es un componente bien conocido de los aceites esenciales de
distintas especies de tomillo. Acta como antisptico y contra el dolor de
garganta y tos. A veces se encuentra como un componente menor en el
aceite de Minthostachys mollis.16
Agua
16 ug %
Protenas
3.20 ug %
Grasa
2.80 ug %
Carbohidratos
66.30 ug %
Fibras
9.40 ug %
Cenizas
11.70 ug %
35
Minerales
Calcio
2.24 ug %
Fsforo
269
Hierro
22.40 ug %
ug %
Vitaminas
Retinol
306
ug %
Tiamina
0.35 ug %
Riboflavina
1.81 ug %
Niacina
6.85 ug %
Ac. Ascrbico
21.10 ug %
Otros componentes
cidos dbiles
2.54 ug%
steres
14.02 ug %
Taninos
Positivos
Resinas
Positivos
Fenoles
Positivos
Alcoholes
Positivos
Aldehdos
Positivos
Cetonas
Positivos
Carbonilo
22.06 ug %
Mentol
40.42 ug %
36
antiasmtico,
expectorante,16,42
antiespasmdico,48
A manera de fumigante
el campo agropecuario
es utilizado
para
controlar los
37
incorporan
cantidades
graduadas
de
las
sustancias
38
39
Con una pinza estril de puntas finas se colocan sobre la superficie del
agar sembrado discos individuales o en estrella; estos llevan impresa la
abreviatura del antimicrobiano selectivo en el cual se encuentran
embebidos y la serie a la cual pertenecen.
Con respecto a los discos se debe tener en cuenta que para asegurar el
contacto adecuado y por lo tanto una difusin uniforme se los debe
presionar suavemente. Para permitir la lectura de los resultados se los
debe colocar con la inscripcin hacia arriba en el medio de cultivo. Para
impedir la superposicin de los halos de inhibicin deben estar a una
distancia no menor de 15 mm entre s y a 1.5 cm. del borde de la placa.
Se deja la placa no menos de media hora a temperatura ambiente para
que el disco absorba agua del medio de cultivo y as permita la difusin
radial del antimicrobiano selectivo, lo que produce un gradiente de
concentracin, es decir que cuanto ms nos alejamos del disco menor
ser la concentracin del antimicrobiano. Esta predifusin es necesaria
para reducir una posible causa de error.
Luego
se
incuba
de
acuerdo
las
caractersticas
de
cada
40
2.4.- JUSTIFICACIN
La caries dental segn reportes del MINSA
es considerada la patologa
bucal con ms alta prevalencia en la poblacin peruana, es por ello que con el
presente trabajo, busc investigar al principal agente microbiolgico causal de la
caries dental que es el Streptococcus mutans. El producto natural de esta
investigacin es la Mua, planta que cada vez es ms difundida y conocida, ya
que las poblaciones andinas la utilizan como planta curativa para problemas
gastrointestinales, adems se consume como bebidas e insumos para
preparacin de comidas.
41
2.6.- HIPTESIS
Hiptesis nula (HO)
El aceite esencial de Minthostachys mollis (Mua) NO tiene efecto antibacteriano
en Streptococcus mutans.
Hiptesis alterna (H1)
El aceite esencial de Minthostachys mollis (Mua) tiene efecto antibacteriano en
Streptococcus mutans.
42
43
3.3.-OPERACIONALIZACIN DE VARIABLES
Variable
Definicin conceptual
Dimensiones
Indicadores
escala
Concentracin al 100 %
aceite esencial de
Minthostachys mollis al
100 %
Concentracin
Se encuentra expresada
Concentracin al 50 %
del aceite
en el porcentaje en el cual
esencial
el aceite esencial de
de Minthostachys mollis
Minthostachys
en dimetilsulfxido en
mollis (Mua)
dimetilsulfxido
proporcin de 1:2
Concentracin
100 %
Concentracin
al 50 %
Concentracin al 25 %
100ul de aceite esencial
de Minthostachys mollis
en dimetilsulfxido en
Concentracin
proporcin de 1:4
al 25 %
44
cultivar la cepa de
bacteriano
Streptococcus mutans
Crecimiento de
Si hubo
Streptococcus mutans en
crecimiento
el medio de cultivo
(ATCC 25175) y le
No hubo
permite desarrollarse en
crecimiento
adecuadas condiciones.
Cuantitativamente
Cuantitativa
inhibicin en mm
Razn
Efecto
antibacteriano
del aceite
esencial de mua va a
esencial de
repercutir en el desarrollo
45
Minthostachys
mollis (Mua)
Cualitativa
inhibicin en mm y
Cualitativamente
Ordinal
pautas de Duraffourd25
46
3.4.- MATERIALES
a.- Materiales y equipos para extraer el aceite esencial:
Hojas de mua
Agua destilada
Sulfato de sodio anhidro
Vaso de precipitado
Baln de fondo plano
Balanza
Soporte
Refrigerante de bolas o serpentn
3.5.- MTODOS
3.5.1.- OBTENCIN DEL ACEITE ESENCIAL DE Minthostachys
mollis
3.5.1.1.- RECOLECCIN DE Minthostachys mollis (MUA)
La obtencin del aceite esencial se realiz a partir de plantas
frescas. Hasta como mximo 1 da de almacenamiento, estas plantas se
colectaron de la ciudad de Tarma del departamento de Junn (3080
m.s.n.m.), las cuales fueron conservadas en condiciones ptimas y
requerimientos adecuados hasta su utilizacin para la elaboracin del
aceite esencial de la mua. Aproximadamente se recolect entre 8-9 kg
de esta materia prima.
48
3.5.1.2.-IDENTIFICACIN TAXONMICA
Estas muestras recolectadas, fueron estudiadas y determinadas
segn el sistema de clasificacin de Cronquist (1988), en el Museo de
Historia Natural de UNMSM.8
3.5.1.3.- OBTENCIN DEL ACEITE ESENCIAL DE MUA
La obtencin del aceite esencial se efectu con el mtodo por
arrastre de vapor de agua, es el que ms se recomienda por no usar
ningn solvente. Y se sigui, segn las pautas indicadas por Morales
El mtodo consisti en colocar 8 kg 600 gramos de Mua a lo
largo del recipiente de metal del equipo extractor de aceite, de tal modo
que el material no est en contacto directo con el agua; luego se calent
hasta el desprendimiento de vapor de agua, a los pocos minutos se
observ el paso del vapor de agua conteniendo el aceite esencial a
travs de los refrigerantes de vidrio, fueron recolectados en una pera de
decantacin; se dej en reposo hasta observar la separacin del agua y
del aceite, procedi luego a su decantacin. El aceite obtenido fue
sometido a desecacin con sulfato de sodio anhidro; posteriormente fue
filtrado, con ayuda de una bomba de vaco, el aceite se deposit en un
frasco oscuro y se cerr hermticamente, luego se almacen en
refrigeracin para su uso.18
3.5.1.4.- DILUCIN DEL ACEITE ESENCIAL DE MUA
Una vez obtenida el aceite esencial de Minthostachys mollis
(mua), se utiliz aceite esencial de Mua puro y diluciones de este
aceite, para eso se procedi a realizar las diluciones utilizando como
solvente el dimetilsulfxido (DMSO).
Concentracin al 50 %, 100ul de aceite esencial de Minthostachys
mollis en dimetilsulfxido en proporcin de 1:2.
Concentracin al 25 %, 100ul de aceite esencial de Minthostachys
mollis en dimetilsulfxido en proporcin de 1:4.5
49
un
tubo
de
ensayo
estril
con
suero
fisiolgico
quince
placas
fueron
sometidas
anaerobiosis
bajo
51
52
IV.- RESULTADOS
4.1.-ACEITE ESENCIAL
Aproximadamente se obtuvo 48 mililitros de aceite esencial de 8 kilos
600 gramos de hojas de Minthostachys mollis (VER ANEXOS), mediante la
tcnica de arrastre de vapor de agua, el cual representa el 56 % de
rendimiento.
Se determin las propiedades fsicas y qumicas
CUADRO 01:
SOLVENTES
solubilidad
esencial
Ensayo
de
Agua
RESULTADOS
del
de
aceite
Metanol
+++
Etanol 96
+++
53
Acetato de etilo
+++
Diclorometano
+++
Cloroformo
Propiedad
+++
RESULTADO
n- hexano
Olor
Sui +++
generis
ter
Coloretlico
+++amarillento
Ligeramente
Sabor
Aspecto
Ardiente
Lquido denso
0.976
pH
5.5
54
4.2.-ACCIN ANTIBACTERIANA
El aceite esencial fue aplicado en la cepa de Streptococcus mutans
ATCC (25175), la cual fue adquirida de laboratorio Genlab , la cual fue
reactivada exitosamente en Agar TSA y posteriormente fue sometida a tincin
Gram donde se obtuvo como resultado coloracin Gram (+) (VER ANEXOS)
Halo de inhibicin
Presenta
No
presenta
15 (100 %)
0 (0 %)
15 (100 %)
0 (0 %)
al 100 %
Aceite esencial de mua
al 50 %
55
0 (0 %)
15 (100 %)
0 (0 %)
15 (100 %)
15 (100 %)
0 (0 %)
al 25 %
Control negativo
(Dimetilsulfxido)
Control positivo
(Amoxicilina)
Se evala por la presencia de halo de inhibicin
56
Media
10,7920 mm
Mediana
10,5200 mm
Desv. tp.
1,86806 mm
Varianza
3,490 mm2
Valor
7,75 mm
Mnimo
Valor
15,32 mm
Mximo
Los valores de halos de inhibicin incluyen tamao de discos 5 mm
mm
mm
valor
mximo
se
obtuvo
15,32
mm.
57
7.6007 mm
Mediana
7.4000 mm
Desv. tp.
0.81831 mm
Varianza
0,670 mm2
Valor Mnimo
6.44 mm
Valor
9.17 mm
Mximo
Los valores de halos de inhibicin incluyen tamao de discos 5 mm
mm
58
mm
valor
mximo
se
obtuvo
9,17
mm.
59
5,0000 mm
Mediana
5,0000 mm
Desv. tp.
0,0000 mm
Varianza
0,0000 mm2
Valor Mnimo
5,00 mm
Valor
5,00 mm
Mximo
60
49,3000 mm
Mediana
49,7800 mm
Desv. tp.
4,52317 mm
Varianza
20,459 mm2
Valor Mnimo
40,56 mm
Valor
54,65 mm
Mximo
Los valores de halos de inhibicin incluyen tamao de discos 5 mm
mm
61
SUSTANCIA
Aceite esencial al
Valor
Valor
Mnimo
Mximo
(mm)
(mm)
Media
Mediana
Desv. tp.
Varianza
(mm)
(mm)
(mm)
(mm2)
10,7920
10,5200
1,86806
3,490
7,75
15,32
7,6007
7,4000
0,81831
0,670
6,44
9,17
5,0000
5,0000
0,00000
0,000
5,00
5,00
5,0000
5,0000
0,00000
0,000
5,00
5,00
49,3000
49,7800
4,52317
20,459
40,56
54,65
100 %
Aceite esencial al
50 %
Aceite esencial al
25 %
Control negativo
(DMSO)
Control positivo
(AMOXICILINA)
62
63
aceite
esencial
al
25
%-DMSO
p(1.000)>
0.005
64
Muy
Sumamente
sensible
sensible
(++)
(+++)
Total
Nula
Sensible
(-)
(+)
1(6,67 %)
13(86.67 %)
1(6,67 %)
0(0 %)
15
10(66,67 %)
5(33,33 %)
0(0 %)
0(0 %)
15
15(100 %)
0(0 %)
0(0 %)
0(0 %)
15
15(100 %)
0(0 %)
0(0 %)
0(0 %)
15
0(0 %)
0(0 %)
0(0 %)
15(100 %)
15
41
18
15
75
Aceite
esencial de
mua al 100 %
Aceite
esencial de
mua al 50 %
Aceite
esencial de
mua al 25 %
Control
negativo
(DMSO)
Control
positivo
(Amoxicilina)
Total
65
66
V.- DISCUSIN
En el estudio realizado se recolect Minthostachys mollis mua del
distrito de Huagapo ubicado en la provincia de Tarma, se tom en cuenta
estudios de Fuertes-Mungua9 y Cano3 de Minthostachys mollis por poseer
mejores propiedades fsico-qumicas, lo que nos indicara que el aceite esencial
mejores presenta condiciones para este estudio.
El aceite esencial de mua se obtuvo fue una sustancia oleosa, color
ambar, producto de la destilacin de la planta (hojas) mediante el mtodo
arrastre vapor de agua, el efecto antibacteriano del aceite esencial de mua,
coincide con estudios de Gonzlez21 quien concluy que el aceite esencial de
Minthostachys mollis presenta efecto antibacteriano in vitro frente a
Streptococcus mutans, siendo la CMI de 0.31 L/mL y la CMB, de 0.62 L/mL a
0.75 L/mL; de Alcal20 concluy que el aceite esencial de las hojas de
Minthostachys mollis (al 100 %) tuvo mayor efecto contra la Candida albicans
que el Fluconazol; adems, el efecto antimictico del Fluconazol fue mayor que
la Minthostachys mollis al 25 %, y fue el mismo que la Minthostachys mollis al
50 %; Castillo19 concluy que el aceite esencial de Satureja brevicalyx Epling
Mua al 50 % y 100 % presentan actividad antibacteriana frente a cepas de
Fusobacterium nucleatum ATCC 255586 y Porphyromonas gingivalis ATCC
33277; Azaa18 el aceite esencial de Minthostachys mollis mua 100 %
present una efectividad antibacteriana, mayor en comparacin a las diluciones
del 50 % y 25 % frente a las cepas de Fusobacterium nucleatum, Prevotella
melaninognica, Enterococcus faecalis y muestras de conducto radicular;
Carhuapoma15 concluy que la actividad antibacteriana del aceite esencial de
Minthostachys mollis ruyaq mua frente a Helicobacter pylori, Shigella
dysenteriae, Salmonella typhi y Pseudomonas aeruginosa es mayor que el
ciprofloxacino y que se debera posiblemente a los componentes del aceite
esencial; Mora16 determin dos componentes principales son: pulegona
(55.2 %) y trans-mentona (31.5 %). El aceite esencial mostr efecto inhibidor
significativo contra bacterias Gram (+) y Gram (-), especialmente Bacillus
subtilis y Salmonella tiphy (4 ug/ml); Cano3 observ un alto efecto antimictico
67
sp.,
Fusobacterium
nucleatum,
Actinobacillus
fue
Fusobacterium
nucleatum,
seguida
del
Actinobacillus
de
conducto
radicular
hallando
una
relacin
directamente
70
VI.- CONCLUSIONES
El aceite
present
71
VII.- RECOMENDACIONES
Se recomienda comparar efecto antibacteriano del aceite esencial y
extracto hidroalcohlico de Minthostachys mollis en cepas de diferentes
bacterias de inters estomatolgico.
Realizar estudios de comparacin efecto antibacteriano del aceite
esencial con diferentes especies de Minthostachys.
Determinar la CMI (concentracin mnima inhibitoria) cepas de diferentes
bacterias de inters estomatolgico.
Realizar estudios de composicin qumica del aceite esencial de aceite
esencial de Minthostachys mollis de diferentes regiones del Per para
determinar el componente que produzca efecto antibacteriano en cepas
de inters estomatolgico.
La preparacin de productos de uso masivo tales como pastas dentales,
colutorios los cuales tenga como componentes la mua.
72
RESUMEN
El presente trabajo se evalu el efecto antibacteriano in vitro del aceite
esencial de Minthostachys mollis en Streptococcus mutans, la especie vegetal
se recolect de la ciudad de Tarma (Junn) aproximadamente 8 kilos de hojas
de mua, que fueron procesados para la obtencin del aceite esencial,
realizado en la Facultad de Farmacia y Bioqumica (UNMSM)
Se adquiri la cepa patrn de Streptococcus mutans, se reactiv y
sembr en placas con medio de cultivo Agar tripticase soya (TSA), se realiz
las pruebas de susceptibilidad. Para estas pruebas, se prepararon diluciones
del aceite esencial. Se utilizaron discos de papel de filtro estriles que fueron
embebidos con 10 microlitros del aceite esencial de mua al 100 %, otros
discos se prepararon con aceite esencial de mua al 50 % y 25 % utiliz como
solvente y control negativo DMSO (dimetilsulfxido), y como control positivo se
utiliz discos de amoxicilina. Cada disco se coloc de manera ordenada y
equidistante en el medio de cultivo; se incub en anaerobiosis mediante el
mtodo de la vela en extincin a 37 C por 48 horas. Transcurrido el tiempo se
realiz la observacin e interpretacin de los resultados. Se realiz las
mediciones de los halos de inhibicin utilizando vernier. En la muestras de
aceite esencial de Minthostachys mollis al 100% obtuvo promedio de
10.79 mm, aceite esencial de Minthostachys mollis al 50 %
promedio de
73
74
ABSTRACT
This paper antibacterial effect in vitro of the essential oil of Minthostachys
mollis in Streptococcus mutans was evaluated, the plant species was collected
from the city of Tarma (Junn) about 8 kilos of leaves mua, which were
processed to obtain the essential oil, held at the Faculty of Pharmacy and
Biochemistry (San Marcos)
The pattern of Streptococcus mutans strain was purchased, was revived
and plated in culture medium with trypticase soy agar (TSA), susceptibility
testing was performed. For these tests, essential oil dilutions were prepared.
Paper discs were soaked sterile filter with 10 microliters mua essential oil
100 %, other discs were prepared with essential oil mua 50 % and 25 % used
as a solvent and DMSO (dimethyl sulfoxide) negative control were used, and as
a positive control was used amoxicillin discs. Each disc was placed in an orderly
and equidistantly in the culture medium; incubated anaerobically by the method
of extinguishing the candle at 37 C for 48 hours. Allow time observation and
interpretation of the results was performed. Measurements of inhibition zones
were performed using vernier. In the samples of essential oil Minthostachys
mollis 100 % scored average of 10.79 mm, essential oil Minthostachys mollis
50 % average of 7.6 mm essential oil Minthostachys mollis 25 % average of
5 mm (size disks) as the negative control (DMSO), positive control (amoxicillin)
average of 49.3 mm. Data were processed in SPSS version 19 and ANOVA
analysis of numerical data of the inhibition halos was performed, was obtained
p (0.000) <0.005 (statistically significant). It was concluded that Minthostachys
mollis essential oil 100 % compared with the positive control (amoxicillin) had
lower antibacterial effect.
75
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78
L.
Variability
of
the
composition
of
terpenoids
for
79
80
ANEXOS
81
Placa
Aceite
Aceite
Aceite esencial
DMSO
esencial de
esencial de
de mua al
(dimetil
mua 100 %
mua al 50 %
25 %
sulfxido)
(mm)
(mm)
(mm)
(mm)
Amoxicilina
(mm)
82
9,53
6,45
52,93
11,52
8,6
54,32
10,22
8,37
54,65
10
7,29
40,7
9,09
6,44
45,71
12,53
9,17
53,51
7,75
7,13
40,56
13,12
7,34
52,49
15,32
8,43
50,64
10
9,12
7,01
47,16
11
10,52
7,44
46,14
12
10,87
6,89
49,78
13
10,88
7,4
48,64
14
11,65
8,41
49,63
15
9,76
7,64
52,64
83
FOTOGRAFAS
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
PRUEBAS FSICO-QUMICOS
FIGURA 22: DILUCIN DEL ACEITE ESENCIAL DE Minthostachys mollis
EN AGUA DESTILADA
95
96
97