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Cromatografia Bidimensional
Cromatografia Bidimensional
SECCIN 1
FUNDAMENTO:
OBJETIVOS:
RESULTADOS:
1 fase mvil
Frente del
soluto
1.3
2.65
2.85
3.15
3.9
3.9
3.8
4.3
5.15
5.1
Frente del
disolvente
7.6
7.7
7.6
7.7
7.9
7.9
7.6
7.65
7.8
7.6
2 fase mvil
Rf
0.1711
0.3442
0.3750
0.4091
0.4937
0.4937
0.500
0.5621
0.6603
0.6711
Frente del
soluto
0.7
2.8
2.3
2.25
1
2.9
0.8
4.8
5.2
4.3
Frente del
disolvente
8.10
8.20
8.25
8.10
8.10
8.20
8.20
8.10
8.25
8.20
Rf
0.0864
0.3414
0.2787
0.2777
0.1234
0.3536
0.0975
0.5925
0.6303
0.5243
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
1 fase mvil
Frente
del
soluto
1.3
1.5
2.25
2.7
2.9
3.4
3.6
4.6
4.7
5.25
2 fase mvil
Aminocido
correspondient
e
Frente del
disolvente
Rf
Frente
del soluto
Frente del
disolvente
Rf
8.0
8.0
8.0
8.0
8.05
8.0
8.0
8.0
8.0
8.05
0.1625
0.1875
0.2813
0.3375
0.36025
0.4256
0.45
0.575
0.5875
0.6522
1.2
0.95
2.3
2.65
2.85
3.4
3.6
3.95
4.6
5
7.95
7.9
8
8
8.05
8
8
7.95
7.95
8
0.1203
0.1509
0.2875
0.3313
0.354
0.425
0.45
0.4969
0.5786
0.625
Lys
Arg
Pro
Glu
Gly
Thr
His
Tir
Phe
Met
1 fase mvil
Frente del
soluto
0.85
1.95
2.1
2.4
3.2
3.65
3.75
4.6
4.9
2 fase mvil
Frente del
disolvente
8.05
8.05
8.1
8.1
8.1
8.1
8.1
8.15
8.15
Rf
0.1056
0.2422
0.2593
0.2963
0.3951
0.4506
0.4630
0.5644
0.6012
Frente del
soluto
1.1
1.9
2.5
2.7
2.05
2.1
2.9
4.4
5.4
Frente del
disolvente
8.1
7.9
7.9
7.9
7.9
7.9
7.9
8.05
8.05
Rf
0.1358
0.2405
0.3164
0.3417
0.2594
0.2658
0.3670
0.5465
0.6708
Rf creciente en la 1a
fase mvil
Rf en la 2a fase
mvil
Aminocido
correspondiente
1
0.1056
0.13580
Lys
2
Arg
0.2422
0.24051
3
0.2593
0.31646
Pro
4
0.2963
0.34177
Glu
5
0.3951
0.25949
Thr
6
0.4506
0.26582
His
7
Tir
0.4630
0.36709
8
Phe
0.5644
0.54658
9
Met
0.6012
0.67081
En esta tabla mediante la relacin de Rf del cormatograma III en las dos fases mviles pudimos
establecer una serie de los posibles aminocidos presentes en el jugo de sanda.
Preguntas Extra:
1. Investigar en la literatura los aminocidos que contienen el jugo empleado
como problema: Jugo de sanda
A continuacin, se muestran la cantidad de aminocidos de la sanda, uno de
los alimentos pertenecientes a la categora de las frutas frescas:
Nutriente
Cantidad
cido asprtico
39 mg.
cido glutmico
Alanina
Arginina
Cistina
Nutriente
Leucina
18 mg.
63 mg.
Lisina
62 mg.
17 mg.
Metionina
59 mg.
Prolina
24 mg.
2 mg.
Fenilalanina
15 mg.
Glicina
10 mg.
6 mg.
Serina
16 mg.
Tirosina
12 mg.
Treonina
27 mg.
Hidroxiprolina
0 mg.
Triptofano
Histidina
6 mg.
Valina
Isoleucina
Cantidad
7 mg.
16 mg.
19 mg.
En la imagen se puede
observar algunos valores
estndar de Rf de los
aminocidos en varios
disolventes
No polar, hidrofbico
Polar sin carga (pH 7)
Cargado negativamente (pH 7)
Cargado positivamente (pH 7.0)
Esto significa que los aminocidos con grandes cadenas laterales no polares (Leu,
Ile, Fenala, Trp, Val, Met, Tir) migran ms que aquellos con cadenas laterales ms
cortas no polares (Pro, Ala, Gli) o con cadenas laterales polares (Thr, Glu, Ser,
Arg, Asp, His, Lis, Cis). Esto refleja la mayor solubilidad relativa de las molculas
polares en la fase estacionaria hidroflica, y de las molculas no polares en
solventes orgnicos.
Por otra parte se llev a cabo el revelado con ninhidrina ya que esta reacciona con
cualquier aminocido libre y que adems es un reactivo de color morado que
permite una mejor visualizacin de las manchas. Todo eso permiti observar
buenos resultados en nuestros cromatogramas unidimensionales (I y II) ya que
las manchas de los aminocidos se vean bien definidas y separadas, cada
aminocido tipo corri en el carril que le corresponda y lo mismo sucedi con el
cromatograma III, se separaron perfectamente porque se obtuvieron 10 manchas
el mismo nmero de aminocidos tipo, aunque en el cromatograma IV en donde
se encontraba nuestro jugo de sanda se obtuvieron 9 manchas de las cuales
algunas eran de mayor concentracin, esto debido a que no hubo una separacin
de todos los aminocidos, como ya se haba mencionado anteriormente el jugo de
sanda contena ms de 10 aminocidos y algunos aminocidos pudieron haber
corrido la misma distancia y es por eso que no se observaron ms manchas y no
hubo una perfecta separacin, aunque se tuvo una relacin de los aminocidos
que contena el jugo respecto a los aminocidos problema.
CONCLUSIN
Finalmente se alcanzan todos los objetivos ya que se pudo separar e identificar la
mayor parte aminocidos de nuestro jugo de sanda por cromatografa
bidimensional en capa fina y a los valores R f con las soluciones tipo de
aminocidos, se corrobora que esta tcnica tiene un mayor grado de resolucin a
comparacin con la tcnica de cromatografa unidimensional.
REFERENCIAS:
1. http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/11%20CROMATOGRAF%C3%8DA
%20DE%20CAPA%20FINA%20DE%20AAs.pdf
2. http://alimentos.org.es/aminoacidos-sandia
3. Anlisis qumico cuantitativo, Harris Daniel C., 3 edicin, editorial Revert. Pag 302
4. http://acemucsc.galeon.com/articulos/Bioquimica/aminoacidos.htm
5. https://books.google.com.mx/books?
id=htRP2dHJkXgC&pg=PA344&lpg=PA344&dq=tabla+de+rf+de+aminoacidos&source=bl&
ots=zoOn-851vU&sig=TXpFstspkkQV8sWgXkytlcfSg98&hl=es419&sa=X&ved=0ahUKEwiY1MCTpZ7LAhXktYMKHUAZBRwQ6AEIMzAG#v=onepage&q=
tabla%20de%20rf%20de%20aminoacidos&f=false