Puncin folicular transvaginal y recuperacin de ovocitos

La tcnica de OPU en bovinos se desarroll con el objetivo de obtener ovocitos de

vaquillonas vivas por sus caractersticas genticas, as permitiendo lograr un mayor
nmero de terneras y terneros de alto valor gentico por medio de la mayor produccin
de embriones y preeces por vacas donante que por programas de transferencia de
embriones.
Aspectos tcnicos
Para realizar la tcnica de OPU necesitaremos de 3 partes principales: ecgrafo con
transductor sectorial, bomba de aspiracin y un sistema de gua de aguja, que se
encuentra conectado a lo que ser el recipiente recolector de ovocitos.
Mtodos
Para realizar el proceso de puncin folicular las vacas pueden ser sedadas ya sea con
uso de xilazina o detomidina. Tambin podemos utilizar una relajacin adicional que
ser beneficioso en animales de carcter menos tranquilo, posterior a esto procedemos
a la remocin de heces del recto mientras se realiza la palpacin y procedemos a lo
que es la anestesia epidural con lidocana al 2% para que el recto no tenga movimiento
durante el proceso a realizarse. Tambin tendremos que lavar y desinfectar lo que es
vulva y perin para mayor asepsia del sistema de OPU. Se procede a la introduccin
del sistema gua en vagina y mediante el mango que este posee se lo manipula con
una mano fuera de la vaca. La cabeza del transductor se fija crneo dorsalmente, ya
sea a la izquierda o derecha de la abertura exterior del crvix, esto depender del
ovario que ser puncionado (Palma, 2001).
Se posiciona a los ovarios por va rectal delante de la sonda, para proceder a la
puncin primero drenamos el sistema con la aspiracin de una cantidad pequea de
medio, despus de aspirar de 3-4 folculos se recomienda lavar la aguja de aspiracin y
el sistema de medio con lo que es PBS suplementado con heparina sdica (22 UI/ml)
y suero fetal bovino (1%). El fluido que se obtendr de cada animal recogido en tubo de
50 ml ser filtrado inmediatamente, la sangre ser eliminada por lavados continuos que

se realizan en medio fresco PBS, luego se los pasa a una placa de Petri para continuar
con su evaluacin luego de ser estos localizados por medio del estereomicroscopio
(Ruiz Lopez, 2006).
Ventajas de OPU
Nos permite optimizar la utilizacin del semen, en un da podemos fecundar ovocitos
recogidos de donantes diferentes con una sola dosis de semen. Ovocitos de una
donante pueden ser fecundados por diferentes toros en una sola sesin de aspiracin,
permitindonos as una variabilidad en cuanto a gentica. Nos permite incrementar
tasas de fecundacin mediante el uso de semen Sexado debido a que se reduce el
nmero de espermatozoides que ser necesario para fecundar ovocitos. Adems que
nos permite trabajar en hembras con problemas reproductivos como infertilidad,
repetidoras, afecciones tracto reproductivo o con respuesta negativa a lo que son
tratamientos hormonales.
Utilizar vacas donantes a intervalos ms cortos comparando con lo que es la tcnica de
superovulacion y ovarios de matadero. Se pueden realizar hasta 2 punciones por
semana lo que nos permitir obtener en promedio de 4,1 ovocitos/vaca/sesin,
pudiendo alcanzar un promedio de 10,4 ovocitos/vaca/sesin en caso de previa
utilizacin de FSH y BST, lo que nos permitir obtener entre 50 (sin estimulacin
hormonal) y 100 (con estimulacin hormonal) cras al ano por vaca donante. Lo que
representa 3 a 4 veces ms los valores logrados mediante transferencia de embriones.
Es de alta importancia recalcar que la tcnica de OPU no solamente est restringida a
bovinos ya que a sido aplicada en otras especies como lo son: equinos, rumiantes
silvestres y bfalos, y nos permite recuperar especies en peligro de extincin. (Nava
Trujillo & Hernandez Fonseca)

Ovocitos obtenidos por OPU para FIV

Mediante la tcnica de OPU se recogen los ovocitos, posterior a esto deben ser
identificados, aislados y clasificados para la FIV.

Para la clasificacin se toma en cuenta el aspecto del citoplasma y el nmero de capas

que constituyen el cumulus. Un citoplasma homogneo y oscuro es un indicativo de un
desarrollo ptimo y un cumulus formado por varias capas de clulas compactas nos
presenta un mayor porcentaje de vialidad en cuanto a maduracin, fecundacin y
desarrollo hasta blastocistos, siendo de otra manera en aquellos que carecen de
cumulus.
Morfolgicamente se clasifican: A, B, C Y D.
Tipo A: cumulus intacto, capas mltiples >4 y compactas.
Tipo B: capas mltiples de clulas de cumulus (1-3).
Tipo C: ovocitos desnudados.
Tipo D: capas celulares del cumulus expandidas.

Los ovocitos tipo A y B que llegan a ser fertilizados mediante FIV consiguen dividirse
(80% los A y 77 % los B), llegando a blastocistos (40% de los A y 20% de los B). En
cuanto a los tipos C y D consiguen dividirse (40% los C y 34% los D), no pudiendo
alcanzar su desarrollo hasta blastocisto. (Gonzalez Gonzalez, 2013)

Bibliografa
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