DESARROLLO

Y VALIDACIN
DE UN MTODO
La validacin
de un
mtodo analtico
provoca ESPECTROFOTOMTRICO
una mayor fiabilidad y
PARA
CUANTIFICACIN
CIDO
KJICO
aceptacin de los datos
generados
estando DE
estas
en proporcin
con la calidad
del proceso de obtencin de los mismos. La cuantificacin del cido Kjico por
espectrofotometra ultravioleta es posible debido a la presencia de dobles
enlaces alternados y pares de electrones no covalentes es su estructura.

MATERIAL Y METODOS

Medidas espectrofotomtricas: La absorbancia de soluciones (ac)

de cido kojico 25 ug / ml, fue determinada en espectrofotometra
shimadzuUV-1061 PC entre 200-400 nm

 pH

LINEALIDAD E
INTERVALO

Fueron preparados en
triplicadas soluciones
conteniendo 5, 10, 15,
20,25 ug /ml.
La absorbancia fuera
determinada
en
triplicada
en
la
longitud de onda de
269 nm.
La curva de calibracin
se conseguir de estas
medidas fue analizada
por este mtodo de
regresin lineal.

EXACTITUD

Se incorpora cantidades
conocidas de cido Kjico
a una fuente de Emulsin
O/A no inica sin
conservante
metilparaben
Se obtiene muestras
conteniendo 0,5%, 1%, y
2% de principio activo
Una cantidad apropiada
se diluye con agua hasta
un volumen final de
100mL
La solucin resultante se
filtra en papel filtro
cualitativo
Las soluciones filtradas
se diluyeron, para
obtenerse soluciones con
concentracin de
20g/mL de cido Kjico
Como referencia para las
lecturas se utiliza agua y
solucin de Acido Kjico
patrn 20 g/mL como
control
El contenido se determina
a partir de la ecuacin de
la recta y se calcula el
porcentaje de
recuperacin del metodo

PRECISION

Se verifica
evalundose las
condiciones de
repetibilidad y
precisin
intermediaria

Se preparan
soluciones de cido
Kjico patrn a las
condiciones de 5, 10,
15, 20, y 25 g/mL
Se mide la
Absorbancia de las
soluciones en un
mismo da y tambin
en dos das diferentes
Se calcula la
desviacin estndar
relativa (DER) con los
resultados obtenidos

Preparar 6
soluciones de
ROBUSTEZ
cido kjico 20 ug/ml con
soluciones tampn de
diferentes valores de pH (110).
Realizar lecturas de la
absorbancia a 269 nm,
20C.
Tiempo de lectura
Preparar 6 soluciones
acuosas 20 ug/ml de cido
kjico
Realizar lecturas de 1 a 8
horas de la absorbancia 269
nm, 20C
Temperatura
Preparar 6 soluciones
acuosas 20 ug/ml de cido
kjico
Realizar lecturas de la
absorbancia a 269 nm a
temperaturas de 5C, 20C,
35C.

Al evaluar la robustez del

mtodo, se comprob que
los retrasos en el tiempo de
lectura (de 1 a 8 horas)y las
variaciones de temperatura
(de 5C a 35C ) NO
interfieren en los resultados
obtenidos, obtenindose
constantes los valores
absorbancia en 269 nm
Se observan alteraciones en
la absorbancia a pH > 7 .