agrupa diferentes compuestos, dentro de los cuales se incluyen
los tocoferoles (T) y tocotrienoles (T3). Estructuralmente consta de dos partes principales: un anillo complejo cromano (un fenol sustituido con un ter cclico) y una cadena larga lateral compuesta por 16 tomos de carbono. De acuerdo al nmero y posicin del grupo metil (R 1, R2, R3), sustituyente en el anillo del fenol, se diferencian cuatro tocoferoles (-, -, - y -T) y cuatro tocotrienoles (-, -, - y -T3) (70; 71), asignndoles su nomenclatura segn la figura 10. Por ejemplo el -Tocoferol tambin recibe el nombre de 5,7,8trimetiltocoferol.Otra diferencia entre ellos es la cadena isoprenoide de los tocotrienoles, que contienen tres carbonos insaturados, mientras que la cadena de los tocoferoles se encuentra totalmente saturada, (ver figura 10)(72). Los diferentes ismeros de la vitamina E se encuentran en las figuras 11 (A y B) respectivamente. El -tocoferol es el compuesto natural que revela mayor actividad de vitamina E. Esta sustancia tiene tres centros quirales en 2, 4 y 8, (ver figura 10) en los cuales los grupos metilo se presentan con la configuracin R. En consecuencia y de acuerdo con la IUPAC, el nombre correcto es 2R,4R,8R--tocoferol, o en forma reducida R,R,R--tocoferol. Todos los tocoferoles y tocotrienoles naturales exhiben menos del 50% de la actividad del R,R,R--tocoferol (correspondiente al 100%) (73)
La vitamina E se presenta en forma de aceites viscoso, inodoros, ligeramente
amarillentos, que son insolubles en agua, pero solubles en disolventes orgnicos y en las grasas. Estos aceites son una mezcla de -tocoferol (principalmente el ismero (+) y sus acetatos o succinatos. Los tocoferoles se oxidan rpidamente al aire pero sus acetatos y benzoatos, que presentan la misma actividad, son ms resistentes a la oxidacin (73). Son altamente estables a cidos calientes e inestables en presencia de sustancias alcalinas, luz ultravioleta y oxigeno, perdiendo su actividad antioxidante, se degradan en contacto con lpidos rancios, Plomo y Hierro (74). Los tocoferoles y tocotrienoles en su forma pura, tienen un pH alcalino y ciertas trazas de minerales como hierro (Fe3+) y cobre (Cu2+).
2.2.4.3 Funciones de la vitamina E
La principal funcin de la vitamina E es su accin antioxidante, impide la propagacin de la oxidacin de los cidos grasos insaturados al atrapar radicales libres. Los radicales libres son tomos o molculas inestables con uno o ms electrones desapareados; la vitamina E dona un electrn a estos radicales, los atrapa y forma compuestos intermedios estables (75), al combatir las reacciones de los radicales libres frena posibles mutaciones en el ADN (76). Al reducir el estrs oxidativo, estimula el sistema inmunolgico y frena el deasarrollo de la enfermedad de Alzheimer. Asimismo, ayuda a reducir los niveles de colesterol (77). 2.2.4.4 Fuentes La vitamina E se encuentra principalmente en el aceite de los vegetales (Soja, Maz, algodn y girasol), granos, plantas y en el tejido adiposo de los animales. Se localiza principalmente en las hojas y partes verdes de las plantas, las cuales contienen ms -tocoferol que las partes amarillas. Tambin se encuentran en algas marrones, verdes y rojas, en algunas levaduras y hongos, pero no en las bacterias. Cada aceite tiene diferentes cantidades y proporciones de tocoferoles y tocotrienoles que pueden variar demasiado (78), los tocotrienoles son abundantes
en el aceite de la semilla de palma (75). Las concentraciones de vitamina E en
frutas y vegetales se ven afectada por las especies, variedades, madurez, condiciones del suelo (Clima, intensidad de luz solar) tiempo y forma de cosecha (71). 2.2.5 Mtodos de extraccin de las vitaminas liposolubles. La determinacin y extraccin de vitaminas en alimentos, que normalmente son muestras solidas o semislidas, se lleva a cabo mediante el uso de solventes orgnicos, por tcnicas de extraccin lquido-lquido o solido-lquido. Otras tcnicas usadas son la extraccin con fluido supercrtico y extraccin en fase slida. 2.2.5.1 Extraccin Lquido-Lquido Consiste en la separacin de los componentes de una solucin lquida por contacto con otro lquido parcialmente insoluble. Si las sustancias que componen la solucin original se distribuyen de manera distinta entre las dos fases lquidas, 47
se puede lograr cierto grado de separacin, que puede incrementarse mediante
el uso de contactos mltiples. La extraccin liquido-liquido es una herramienta muy comn para la extraccin de vitaminas liposolubles gracias a una gran variedad de solventes puros o mezclados, con un amplio rango de solubilidad y selectividad. Un gran nmero de solventes orgnicos como hexano, xileno y dietileter son los solventes ms usados para la extraccin de vitamina E, (79). La vitamina A es usualmente extrada simultneamente con la vitamina E, usando hexano, cloroformo y mezcla de acetato de etilo- butanol. 2.2.5.2 Extraccin Slido-Lquido Es una operacin bsica que busca la separacin de uno o ms componentes contenidos en la fase slida, mediante la utilizacin de una fase lquida o disolvente. El componente que pasa de la fase slida a la lquida se denomina Soluto, mientras que el slido insoluble se denomina inerte. La finalidad de esta operacin puede ser diversa, pues en algunos casos es necesario eliminar algn componente no deseable de un slido mediante disolucin de un lquido, denominndose lavado a este proceso de extraccin. Sin embargo, en otros casos se desea obtener un componente valioso que est contenido en el slido, disolvindolo en un lquido, denominndose a esta operacin lixiviacin (80). La determinacin de vitaminas liposolubles en matrices alimenticias o farmacuticas, involucran un paso previo de lixiviacin. Este paso consiste en una simple extraccin manual con solventes orgnicos (79). 2.2.6 Mtodos de anlisis de vitaminas liposolubles. Actualmente se han venido desarrollado diferentes mtodos de anlisis de vitaminas liposolubles mediante tcnicas de separacin como cromatografa liquida de alta eficiencia (CLAE). En la tabla 7 se resumen algunos de los mtodos ms usados para la identificacin y cuantificacin de estos analtos.