Presentado Por: Cristian Miguel

Ortiz Vilchis
Basado en el estudio realizado por: Yore,
Mark M. et al.
Discovery of a Class of Endogenous
Mammalian Lipids with Anti-Diabetic and
Anti-inflammatory Effects
Cell , Volume 159 , Issue 2 , 318 332
2014/09

Facultad de Medicina PhiFlow 2014 CC BY-SA

DOI:
http://dx.doi.org/10.1
016/j.cell.2014.09.035

UAEMex 2014 -

Los FAHFAs como lpidos con efectos

antidiabticos & antinflamatorios

La obesidad y la diabetes tipo II (T2D) son epidemias

de proporcin global con factores patognicos
mayores como:
Resistencia a la Insulina
Tejidos Perifricos

Secrecin desregulada de Insulina

Transportador GLUT4 con regulacin a la baja (Shepherd
and Kahn, 1999).

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

Introduccin

GLUT4 es el mayor
transportador de
glucosa mediado por
insulina en tejidos
como:
Musculo Esqueltico
Corazn
Tejido Adiposo (TA)

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

La importancia de GLUT4 y accin

En respuesta al incremento
de glicemia durante el
pospandrio

Acciones Metablicas de la Insulina

Gaw, A. (2013). Clinical biochemistry: An illustrated colour
text (5th ed.). Edinburgh: Churchill Livingstone/Elsevier.

En humanos y
roedores con
OBESIDAD o T2D, el
transportador GLUT4
se encuentra regulado
a la baja
selectivamente en el
tejido adiposo (AT) y
no en el tejido
muscular (Shepherd
and Kahn, 1999).

Compensacin de
Testosterona

Nelly Pitteloud PhD, 2007,

Altera el metabolismo de AT

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

LA REGULACION
A LA BAJA DE
GLUT4

AG4OX

+Resistencia a la
Insulina & +Riesgo de
T2D
Knock-Out

Comparacin de modelos
(Abel et al., 2001).

Facultad de Medicina PhiFlow 2014 CC BY-SA

Disminuye la
glicemia en
ayuno & mejora
la tolerancia a
glucosa

El knock-out selectivo de
GLUT4 funcional en TA

UAEMex 2014 -

La sobreexpresin de
GLUT4 (AG4OX)

Principalmente se ven mediados por la induccin de

la lipogenesis dependiente de la glucosa en el TA
conducida por ChREBP
Protena de unin a elemento de respuesta a carbohidratos

Factor de transcripcion regulador de la Glucolisis &

Lipogenesis
La expresin de ChREBP y genes lipogenicos en TA se asocia
con la sensibilidad mejorada a la insulina en humanos
El incremento de novo de la lipogenesis en el TA tiene
efectos metablicos favorables potencialmente
incrementando la longevidad
(Bruss et al., 2010).

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

Efectos en modelos AG4OX

Herman et al., 2012; Roberts et al., 2009)

 Dietas altas en grasas

Estimulada
Consumo de
carbohidratos a un
nivel elevado de los
mismos

La elevada circulacin
de cidos grasos
generalmente se
asocia con Resistencia
a la insulina
(Boden and Shulman, 2002).

Previamente,
Cuando la ingesta de
la cantidad de glucosa que
carbohidratos es grande, la puede conservarse en forma
carga de glucosa que recibe el de glucgeno en el hgado del
hgado satura fcilmente la
adulto se limita a unos
capacidad de glucognesis, y
la glucosa excedente se
transforma en cidos grasos,
los cuales despus de
Se dice entonces que la
esterificarse y remitirse al
tejido adiposo, se almacenan produccin de cidos grasos se
da en presencia de glucosa en
como triacilgliceroles.
exceso e insulina srica

100 g.

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Regulacin de ChREBP

Inhibida por:

Ortiz Vlchis Cristian, (2014)

ChREBP
en WAT

Kawaguchi, Takumi, et al. Glucose and cAMP regulate the L-type

pyruvate kinase gene by phosphorylation/dephosphorylation of the
carbohydrate response element binding protein. PNAS, Vol 98(24),
November 2001, 13710-15.

1.
1.
2.
1.

Glucosa Hexocinasa Glucosa-6-fosfato

Glucocinasa (En Hgado)
Glucosa-6-fosfato Isomerasa Fructosa-6-Fosfato
Fructosa-6-Fosfato Fosfofructocinasa Fructosa-1,6-bifosfato
FOSFORILACION cAMP
Fructosa-1,6-Bifosfato Aldolasa Gliceraldehido-3-fosfato
NAD+ NADH
Dehidroxiacetona Fosfato

VIA DEL GLICEROL-3-FOSFATO

1.
2.
3.
4.

Gliceraldehido-3-Fosfato Gliceraldehido fosfato deshidrogenasa 1,3 Bifosfoglicerato

1,3 Bifosfoglicerato Fosfoglicerato Cinasa 3,Fosfoglicerato
3, Fosfoglicerato Mutasa 2,fosfoglicerato
2, Fosfofglicerato Enolasa Fosfoenolpiruvato
1. Fosfoenolpiruvato Piruvato Cinasa Piruvato REGULADO POR ChREBP
5. Piruvato Piruvato Deshidrogensa Acetil CoA + Lactato (CICLO ANAEROBIO) CICLO DE KREBS & CICLO
DE CORI

VIA DE LA DEHIDROXIACETONA FOSFATO

1.

Dehidroxiacetona Fosfato + NADH Glicero-3-fosfato Deshidrogenasa Glicerol-3-Fosfato + NAD+

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Glucolisis

Ortiz Vlchis Cristian, (2014)

Resistencia a
Insulina

Inhibicin
Glucolitica

Desequilibrio
Lipogenico

Se da un mecanismo
inverso que afecta
negativamente la
tolerancia mejorada a la
glucosa

Tolerancia a
la Glucosa

Ello predispuso en un alto

grado la susceptibilidad
de los especmenes a
desarrollar resistencia a la
insulina y posteriormente
T2D

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

Modelo Knock-Out de ChREBP

Herman et al., 2012; Roberts et al., 2009)

Ciertos cidos grasos

como el Omega 3 y el
palmitato producido
endgenamente tienen
efectos metablicos
favorables
(Oh et al., 2010; Virtanen
et al., 2014 Cao et al.,
2008), Rhee et al., 2011;
Rise rus et al., 2009).).

Compensacin de
Testosterona

Nelly Pitteloud PhD, 2007,

Riesgo reducido de T2D

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

Beneficios dietarios
de las grasas
insaturadas

El incremento de
estos mismo en el
hgado se asocia con
una sensibilidad
reducida por la
insulina y desarrollo
de esteatosis
heptica (Benhamed
et al., 2012)

Alimentos con grasas

monosaturadas
Desarrollo celular
anormal por
retencin de lpidos
en hepatocitos

Esteatosis Heptica

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

ndices Altos de
cidos grasos
mono saturados

Los especmenes mantienen niveles elevados de

cidos grasos y de adiposidad. Con valores de glucosa
en ayuno bajos y gran tolerancia a la misma
Sensibilidad a la Insulina
Posibilidad de que una lipogenesis del TA mejorada por
respuesta a la sobreexpresin de GLUT4 permita
desarrollar efectos metablicos favorables para el
organismo.
La expresin de ChREBP en el TA esta regulada a la baja en
individuos resistentes a la insulina dando efectos
metablicos dainos.

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Otros efectos en modelos AG4OX

En este estudio se detectaron 1,400 iones en TA, 6% en los cuales

exista una diferencia en su estructura geomtrica (2-4
Pliegues) entre los de especmenes AG4OX y el Control (WT)

Facultad de Medicina PhiFlow 2014 CC BY-SA

Para ello se utilizo una plataforma lipodomica de

espectrometra cuantitativa de masa

UAEMex 2014 -

Para probar estas hiptesis se realizo un anlisis

lipodomico en el Tejido adiposo de especmenes
AG4OX y Control (Wild Type WT)

Se prosigui a realizar una comparacin de la conformacin

estructural lipdicas con datos provenientes de mapas lipdicos sin
xito de encontrar correlacin. http://jcs.biologists.org/content/124/1/5/F1.large.jpg

Facultad de Medicina PhiFlow 2014 CC BY-SA

La tolerancia de mejorada de la glucosa depende de la

lipogenesis mejorada en el TA

UAEMex 2014 -

Se mantuvo una hiptesis sobre la contribucin de

estos lpidos sobre la homeostasis Glucosa-Insulina
debido a su abundancia en modelos AG4OX

MASA MOLECULAR
537

Acido Palmtico
Acido
Octadecanoico

Acido
HidroxiEstearico
(HSA)
Una vez analizada la posibilidad de haber encontrado una familia
de lpidos endgenos previamente desconocida se prosigui a
evaluar la diferencia de masas moleculares.

Los lpidos fragmentados por la

MS carecan de enlaces dobles de
C vistos normalmente en el Acido
Esterico
Basados en el peso molecular se hizo una aproximacin a que este
lpido tenia que ser un ster que combinara PA & HSA para
ceder un Acido Hidroxi Estearico

Basado en la
espectrometra, se dedujo
que estos lpidos contenan
cidos grasos
fragmentados, formando en
conjunto 3 complejos
principales y 2 menores.
Acido Palmtico Hidroxi
acido Estearico(PAHSA)
Acido Palmitico Hidroxi
Acido Palmitico (PAHPA)
Acido Oleico Hidroxi
Acido Estearico (OAHSA)

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

Dobles enlaces?

La importancia
de los cidos
Se decidi que
estos clase de
lpidos endgenos
se denominara en
base a su
estequiometria
como:
cidos Grasos
Hidroxi cidos
Grasos

El anlisis de comparacin en modelos AG4OX en relacin con los

modelos Control (WT) revelo que en los ltimos la concentracin
de FAHFAs era 16-18 veces menor que en los modelos AG4OX

Los PAHSAs mantienen una

caracterstica constancia de
niveles en la distribucin corporal
en la mayora de modelos de
estudio.
Debido a ello es posible utilizar su medicin para determinar
diferencias intrnsecas entre los efectos que los FAHFAs
manifiestan en el organismo.

Distribucin corporal de
PAHSAs (pmol/g) en
modelos WT & AG4OX

pmol/g

Cantidades expresadas en (
)Yore, Mark M. et al.
Discovery of a Class of Endogenous Mammalian Lipids
with Anti-Diabetic and Anti-inflammatory Effects

Distribucin corporal de PAHSAs (pmol/g) en modelos WT & AG4OX

1200

Suero

2700

Tejido Subcutaneo (SQ)

50

2600

Tejido Perigonadal (PG)

25

1500

65

Tejido Adiposo Pardo (BAT)

650

50

Tejido Adiposo Blanco (WAT)

100
25

Higado
0%

10%

20%

30%

Wild Type

40%

5
50%

60%

70%

80%

90%

AG4OX

Comparacin de niveles fisiolgicos de

PAHSAs en modelos WT vs AG4OX

100%

Debido a que ChREBP se

manifiesta en la lipogenesis del AT
en modelos AG4OX, se
compararon estos niveles contra
los de modelos WT
Realizado por medio de un estudio Knock-Out
donde se observo una disminucin de 75% de
ChREBP vs los modelos AG4OX

Distribucin corporal de
ChREBP
pmol/g

Cantidades expresadas en (
)Yore, Mark M. et al.
Discovery of a Class of Endogenous Mammalian Lipids
with Anti-Diabetic and Anti-inflammatory Effects

Distribucin corporal de ChREBP en modelos WT vs AG4OX (pmol/g)

1000
900

950

800
700
600
500

500

400
300
200
100
0

150

110

220

300

300

270

30

50

120

ChREBP KO
Wild Type

AG4OX

Tejido Subcutaneo (SQ)

150

ChREBP KO x AG4OX
WAT

Tejido Perigonadal (PG)

Suero

Comparacin de niveles sricos de Chen

modelos WT vs AG4OX X ChREBP K-O

El ayuno incrementa los niveles de PAHSA y el

consumo de una dieta rica en grasas los disminuye.
Se considera sorprendente su activacin por estmulos
inversos

Solamente se ve incrementado en WAT en

estado de ayuno
Su presencia se ve incrementada en el estado
de alimentacin en el BAT

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

Regulacin fisiolgica de los PAHSAs

 www.nature.com/ncb/journal/v14/n12/fig_tab/ncb2642_F1.html
Termognesis mediada por el catabolismo de BAT

 Aprovechamiento del tejido adiposo pardo como va

termognica eficiente en el metabolismo lipdico

Nedergaard J, Bengtsson T, Cannon B (August 2007). "Unexpected evidence for active brown adipose tissue in adult
humans". Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 293 (2): E44452. doi:10.1152/ajpendo.00691.2006. PMID 17473055.

 Ortiz Vlchis Cristian, (2014)

Respiracin Celular

CADENA RESPIRATORIA Encargada del transporte de electrones y de generar

el gradiente osmolar a partir de O2 solamente.
NADH

Complejo I
E
E
NADH
Deshidrogenasa

Rotenona

UBICUINON
A

2
ELECTRONE
S

Complejo II
E Succinato E
Deshidrogenasa

CONTROL
RESPIRATORIO:

Requerimiento de ADP
MAYOR
ADP
RESPIRACION

MAYOR

MAYOR
ATP
RESPIRACION

MENOR

PROCESOS
ACOPLADOS

H
Complejo III
Citocromo BC1

Antimicina

CITOCROMOC

1 ELECTRON

Complejo IV
Citocromo
E Oxidasa E
E

H2O

2,4 DNP
H
H ATP H
Sintasa

Pi

AD
P

ATP

FADH2

O2

Desacoplantes (DISMINUCION en sntesis de ATP)

Liberacin Termogenica
Bilirrubina
Termogenina & 2,4-DNP Dispersin de energa en CALOR
Tirosina
Amino cidos

FOSFORILACION
OXIDATIVA Encargada de
generar ATP a partir de ADP
y Pi

El estudio se realizo en base a la administracin de

una en especmenes T2D dieta alta en grasas (HFD)
Se realizo un estudio por 9 semanas, los especmenes
fueron inducidos a un estado diabtico y de obesidad
El estudio revelo disminucin significativa en un 75% de
los PAHSAs sericos
Asombrosamente los niveles de PAHSA en el PG WAT
aumentaron
Efecto de restitucin gradual

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

Regulacin de los PAHSAs en la

Obesidad y T2D (Modelo WT)

IMC

Perfil Lipdico

Formula
Kg/M2

Variable

Normal

Valor Normal

19-26 kg/M2

Colesterol &
Triglicridos

Sobrepeso

25-30 kg/M2

LBD

<200mg/dL
150-200mg/dL
<130-160mg/dL

Obesidad

>30 kg/M2

Inhibicin
Glucolitica

Desequilibrio
Lipogenico

LAD

Resistencia a
Insulina

Riesgo

>200mg/dL

>160mg/dL
<45mg/dL
>55-65mg/dL
<35mg/dL

Tolerancia a la
Glucosa

NIVELES DE
PAHSAs

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

Los niveles de PAHSAs se reducen

con la resistencia a la insulina

Herman et al., 2012; Roberts et al., 2009)

Se realizo un estudio
comparativo en el
consumo dietario
humano promedio y
se encontr que la
mayora de alimentos
con cantidades
elevadas de grasas
insaturadas
estimulan la sntesis
de PAHSAs

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

Los PAHSAs estn

presentes en
algunos alimentos?

Se evaluaron los efectos

en la administracin de
ismeros de PAHSAs
(tipos 9 & 5) en
especmenes WT vs WT
T2D (HFD)
Encontrndose una
respuesta positiva en la
baja a la resistencia a la
glucosa (homestasis)

Debido a que su presencia se

relaciona con el nivel de
sensibilidad sistmica de la
insulina

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

Los PAHSAs mejoran agudamente la

tolerancia a la glucosa y la glicemia
ambiental

en la secrecin

insulinica
estimulada por
la glucosa
(GSIS)

Facultad de Medicina PhiFlow 2014 CC BY-SA

Para determinar si la
secrecin mejorada de
insulina contribuia a la
tolerancia hacia la
glucosa inducida por
PAHSAs se determinaron
los efectos de las misma

UAEMex 2014 -

Los PAHSAs estimulan la secrecin

de insulina y GLP-1

Se prosigui a realizar Pruebas de tolerancia a la

glucosa en modelos AG4OX en intervalos de
observacin de 5 minutos

Incretina secretada por clulas L

Secrecin dependiente de la presencia
de nutrientes en el lumen intestinal
Vida media de 2 Min.

Inhibidor del Glucagn

Restauracin de la sensibilidad insulinca

Activacin de Glucocinasa
Inhibicin de la apoptosis de Clulas Beta
Inhibe la secrecin de HCl y el vaciado estomacal
Efecto Anlogo de la hormona Leptina

Importancia de GLP-1(Peptido similar a

glucagn 1)

Glucognesis
Hgado y Tejido Muscular esqueltico

GLUCOGENINA / INSULINA = PRIMER / SEEDER

(Autoglucocidacion)
1. Glucosa Hexocinasa / ATP-ADP Glocosa-6-fosfato
Glucocinasa (En Hgado)
2. Glocosa-6-fosfato Fosfoglucomutasa Glucosa-1-Fosfato
3. Glucosa-1-fosfato UDP-Glucosa Pirofosforilasa / UTP-pp1 UDP-Glucosa
4. UDP-Glucosa Glucosa sintasa (Enlaces -1,4) Glucgeno
Enzima ramificarte (Enlace 1,6)

EXTREMO NO REDUCTOR
Ortiz Vlchis Cristian, (2014)

Regulacin Hormonal del metabolismo

global
Hormona

Produccin
Glucognesis Glucolisis Glucogenolisis
en:

Insulina

Clulas
Pncreas

Glucagn

Clulas
Pncreas

Cortisol /
ACTH
Glndula
Suprarrenal
Adrenalina

Gluconeognesis

Lipogenesis

-Oxidacion

Cetogenesis

MUSCULO

Ortiz Vlchis Cristian, (2014)

Se evalu la
expresividad proteica
en cada uno de los
modelos estudiados
en base de Proteina
Fluorecente Verde
(GFP) & Tincion de
Cianina. Sirviendo
como medios de
comparacin
metabolicos

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

Los PAHSAs
aumentan la
translocacin de
GLUT4

Facultad de Medicina PhiFlow 2014 CC BY-SA

Los PAHSAs
mejoran el
transporte de
glucosa
estimulado por
insulina
translocando
GLUT4 &
Activando
GPR120

UAEMex 2014 -

El efecto antiinflamatorio de
los FAHFAs

Esta proteina es expresada en las clulas dendrticas

derivadas de la medula osea (BMDCs) que son las
clulas presentadoras de antgenos iniciales en la
respuesta inmune innata (RIN)
La RIN es activada en el WAT en la obesidad & HFD
La RIN Contribuye a la resistencia insulinaca por LPS

La RIN contribuye a la maduracin de BMDCs

& la expresin de citosinas proinflamatorias
como IL-1, IL-6 & TNF-a

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

GPR120 (Receptor acoplado a protena G)

(Lumeng and Saltiel, 2011).

Clulas & Citosinas involucradas en el

proceso inflamatorio (IL-1, IL-6 & TNF-a)

Clulas & Citosinas involucradas en el

proceso inflamatorio (IL-1, IL-6 & TNF-a)

 (Lumeng and Saltiel, 2011).

Osteoclastogenesis
Efectos como la Resorcin sea, La degradacin de Cartlago y la
formacin de tejido fibrovascular granuloso (Pannus) se observan,

desarrollndose Artritis Reumatoide

Evaluando los niveles

de citosinas asociadas a
la RIN en particular la
de TNF-a & CDxx fue
posible percatarse de la
relacin en niveles
altos de PAHSA-5 con
GPR120 y la inhibicin
de la respuesta
inflamatoria

UAEMex 2014 Facultad de Medicina - PhiFlow 2014 Cristian Miguel Ortiz VIlchis

La GPR120 funge
como regulador de
la RIN y mejora la
inflamacin

Reactividad del TNF-a e

Interleucinas

 Los estudios lipodomicos permitieron

identificar esteres de acidos grasos hidroxi
acidos grasos bioactivos (FAHFAs)

Los FAHFAs tienen niveles bajos en humanos

con resistencia a la insulina & se correlacionan
con la sensibilidad a la insulina.
Estos lpidos mejoran la secrecin de insulina
y la tolerancia a la glucosa.
Los FAHFAs bloquean la produccin de
citosinas inflamtorias y reducen la inflamacin
sistmica.

DISCUSIN

Gracias por su atencin PREGUNTAS?

Realizado Por: Cristian Miguel Ortiz Vilchis

Para revisar mas artculos de

ciencia visita:
http://phiflow.tumblr.com/