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Práctica #6 Diagnostico de Paludismo
Práctica #6 Diagnostico de Paludismo
El mtodo de gota gruesa favorece el hallazgo del Plasmodium y permite analizar una mayor cantidad de sangre, facilitando la deteccin de parasitemias bajas y un ahorro de tiempo en el examen, aunque al romperse los eritrocitos resulta difcil la identificacin de la especie. El examen de gota gruesa es recomendable para detectar la presencia de los parsitos de malaria, mientras que el Frotis sirve como herramienta auxiliar para determinar la especie de Plasmodium, en caso de que no sea posible hacerlo en la gota gruesa PROCEDIMIENTO DE LA GOTA GRUESA Realizar una puncin con una lanceta estril, en la yema del dedo. Se recoge una gota de sangre en un portaobjetos, y con otro se realiza la extensin en capa fina. Para la gota gruesa se recogen 3 4 gotas sobre un portaobjetos y con la esquina de otro se unen en movimientos rpidos, extendindose en una capa gruesa y uniforme, hasta formar una gota gruesa de 1 cm de lado o de dimetro. La sangre no debe ser excesivamente revuelta, es suficiente con 3 6 movimientos. Realizar el homogenizado de la muestra en una sola direccin, en forma concntrica (de adentro hacia afuera o viceversa). Secar la lamina y la gota gruesa en una superficie plana y protegida del polvo, calor e insectos. COLORACIN DE LA MUESTRA Antes de proceder a la coloracin fijar el Frotis sumergiendo en metanol, por tres segundos y dejarlo secar. La gota gruesa no se fija en metanol. Secas ambas preparaciones se procede a colorear. Cubrir con colorante de Giemsa al 10% sobre ambas preparaciones (gota gruesa y Frotis delgado) por 30 minutos.
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Lavar la lamina con agua corriente hasta que el agua no desprenda colorante (se recomienda utilizar agua tamponada con pH 7.2, tanto en la dilucin del colorante como en los lavados) para facilitar la coloracin de los grnulos de schuffner, tan importantes para la diferenciacin de especies. Dejar secar las lminas inclinadas con la gota gruesa hacia abajo.
http://www.google.com/imgres?q=gota+gruesa
En la gota gruesa se requiere observar 100 campos microscpicos, con lente de inmersin a un aumento de 1000x, esto asegura la posibilidad de detectar la infeccin mixta (ms de una especie presente en una muestra de sangre). En el Frotis de sangre examinar por lo menos 300 campos microscpicos para determinar si la muestra es positiva o negativa para malaria, Si el diagnostico es dudoso deber examinar de 400 a 500 campos microscpicos
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