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FACTOR REUMATOIDEO

INTRODUCCION.Es un examen sanguneo que mide la cantidad de anticuerpo del factor reumatoideo en la sangre. El factor reumatoideo es un auto anticuerpo del tipo IgM producido contra la porcin Fc (Fraccin constante) de la inmunoglobulina G (Ig G). Los ttulos se encuentran elevados en ciertas enfermedades reumticas y en algunas infecciones crnicas (tuberculosis, lepra, entre otras). Se detectan valores elevados de Factor Reumatoide en el 80% de los pacientes con artritis reumatoide y en menores concentraciones en los pacientes con infecciones crnicas, enfermedades autoinmunes (lupus eritematoso diseminado o sndrome de Sjgren); y enfermedades crnicas pulmonares, hepticas o renales. Entre otras situaciones, destaca la indicacin se solicitar una determinacin de FR cuando existen sospechas clnicas de artritis reumatoide, si bien es cierto que no es un test especfico para esta enfermedad, por lo que el positivo no puede confirmar la artritis reumatoide, su negatividad nos obligara a replantear el diagnstico. FUNDAMENTO.El factor reumatoideo de tipo IgM se detecta en presencia de gamma globulina o fraccin II de cohon (que en este caso es el antgeno) absorbida sobre un soporte inerte de latex-poliestireno. Este antgeno se una a los FR (Anti.IgG) produciendo una aglutinacin de latex-poliestireno. Visible macroscpicamente.

INTERPRETACION CLINICA La Artritis reumatoidea es un sndrome crnico de etiologa desconocida, caracterizado por una inflamacin inespecfica y generalmente simtrica de las articulaciones, que a veces evoluciona hacia la destruccin de las estructuras articulares y periarticulares. En la articulacin se observa un engrosamiento de la membrana sinovial con la formacin de pliegues y proliferacin de linfocitos. Estas clulas que forman folculos linfoides, son las responsables de la sntesis de factores reumatoideos (FR) y otras inmunoglobulinas. La presencia de FR indica que usted puede padecer artritis reumatoide (AR). En la mayora de casos de artritis reumatoide se encuentran valores elevados de FR. Adems, ms del 50% de pacientes con valores de FR elevados tienen el sndrome de Sjgren. Muchos pacientes con AR tambin padecen el sndrome de Sjgren. (Las mujeres tienen ms a menudo ambas enfermedades. Las mujeres tienen de dos a tres

veces ms AR que los hombres, y en un 90% de los casos, las mujeres tienen el sndrome de Sjgren.) Si usted tiene un valor positivo de FR pero no padece AR ni sndrome de Sjgren, puede ser debido a otras causas como endocarditis, lupus eritematoso sistmico (lupus), tuberculosis, sfilis, sarcoidosis, cncer, infeccin vrica, o enfermedades del hgado, pulmn o rin. Tambin puede tener un resultado positivo de FR si ha recibido un injerto de piel o un trasplante de rin de un donante que no tenga un perfil gentico idntico al suyo. Un resultado negativo de FR significa que usted no tiene AR, o que la enfermedad est todava en fase muy temprana para detectar FR, o que posiblemente est en fase de remisin. Si sus sntomas parecen ser los de AR o de sndrome de Sjgren, su mdico solicitar nuevas determinaciones de FR a medida que su enfermedad progrese. Valores normales Los resultados generalmente se reportan en una de dos formas:

Menos de 40-60 u/mL Menos del ttulo 1:80

Un nmero bajo (resultado normal) por lo regular significa que usted no tiene artritis reumatoidea o el sndrome de Sjogren. Sin embargo, algunas personas que en realidad padecen estas afecciones an tienen un factor reumatoideo (FR) bajo o "normal". Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios. Significado de los resultados anormales Un resultado anormal significa que el examen es positivo, lo cual quiere decir que se han detectado niveles ms altos del factor reumatoideo en su sangre.

La mayora de los pacientes con artritis reumatoidea y casi todos los pacientes con el sndrome de Sjogren tienen exmenes positivos del factor reumatoideo. Cuanto ms alto sea el nivel, mayor ser la probabilidad de que se presente una de estas afecciones. Tambin hay otras pruebas confirmatorias para estos trastornos. Sin embargo, no toda persona con niveles ms altos de factor reumatoideo tiene artritis reumatoidea o sndrome de Sjogren

. Las personas con las siguientes enfermedades tambin pueden tener niveles ms altos del factor reumatoideo.

Esclerodermia Lupus eritematoso sistmico Enfermedad de Still del adulto Dermatomiositis Sarcoidosis

Los niveles del factor reumatoideo superiores a los normales se pueden ver en personas con otros problemas mdicos. Sin embargo, dichos niveles ms altos del FR no se usan para diagnosticar estas otras afecciones:

SIDA, hepatitis, influenza, mononucleosis infecciosa y otras infecciones virales Ciertas enfermedades del rin Endocarditis, tuberculosis y otras infecciones bacterianas Infecciones parasitarias Leucemia, mieloma mltiple y otros cnceres Enfermedad pulmonar crnica Enfermedades crnicas del hgado

Algunas veces, las personas que son saludables y no tienen ningn otro problema mdico tendrn un nivel de FR superior a lo normal.

METODO: Aglutinacin en Ltex. MATERIALES: .- 01 Placa de Vidrio confondonegro .- Cronometro .- pipetas volumtricas .- fuente de luz REACTIVOS Y COMPOSICION: Reactivo FR latex.suspencion estabilizada y tamponada de particulas de latex recubiertas com gamma globulina humana. Contiene 0,95 g/l de acida sodica

PROCEDIMIENTO:

Llevar los reactivos y las muestra a temperatura ambiente antes de usar. I.- TECNICA CUALITATIVA En uno de los sectores delimitados de la placa de vidrio colocar: Muestra 01 gota (50 ul) Latex 01 gota (50 ul) Mezclar con un palillo o varilla de vidrio hasta obtener una suspensin uniforme en toda la superficie delimitada de la placa. Inmediatamente, disparar un cronometro, balancear suavemente la placa. Y observar macroscpicamente el resultado dentro de los dos minutos bajo un haz luminoso. II.- TITULACION Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas, en 08 tubos de Kahn. 01.- colocar 0.5 ml de solucin fisiolgica en cada uno de los tubos. 02.- Agregar 0.5 ml de suero al tubo N 1 y mezclar. Transferir 0.5 ml de esta dilucin al tubo N 2 y mezclar, continuando de esta forma las diluciones hasta el ultimo tubo. Las diluciones as obtenidas equivalen a: 1:2; 1:4; 1:8; 1:16, etc 03.- Ensayar cada dilucin segn la tcnica cualitativa. la interpretacin de resultados es de la siguiente forma: Negativo:Suspensin homognea Positivo:Aglutinacin.- que aparece dentro de los dos minutos. Se califica de 1 a 4 (+). Titulo.- inversa de la mxima dilucin a la que se produce aglutinacin visible macroscpicamente. La concentracin aproximada de factor reumatoidea es la muestra puede ser calculada por la formula siguiente: FR(UI/ml) = Titulo x sensibilidad de la reaccin (1 UI/ml) Ejemplo: la muestra presenta un ttulo de 1:32. Su concentracin en FR es de 32 x 1 = 32 UI/ml Dilucin - 1:2 - 1:4 - 1:8 - 1:16 - 1:32 concentracin = 02 UI/ml = 04 UI/ml = 08 UI/ml = 16 UI/ml = 32 UI/ml

HOJA DE PROCEDIMIENTO

ANTICUERPOS ANTINUCLEARES ( ANA): Los anticuerpos antinuclerares (ANA) son anticuerpos circulantes contra antigenos nucleares de las propias celulas del organismo .fueron descubiertos en la decada de los aos cuarenta atraves de la prueba de las celulas LE leucocitos polimorfonucleares que han fagocitado AND en la actualidad la mayoria de los laboratorios emplean un ensayo de inmunoflurescencia sobre tejidos para detectar los ANA

Emfermedades relacionadas : Los ANA son un componenteesencial en la definicion de algunas enfermedades autoinmunes sistemicas ,como el lupus eritomatoso sistemico (LES) En pacientes con enfermedades autoinmunes limitadas a organos especificos como la glandula tiroidea ,el higado o el pulmon tiroiditis

Test para ANA Dentro del ambiente clnico, la medicin de los ANA a nivel sanguneo se realiza por diferentes formas. En general, existen dos mtodos:

Inmunofluorescencia indirecta: Resulta ms sensible, permite determinar patrones de tincin asociados a diferentes enfermedades, pero es de mayor costo y requiere personal altamente capacitado para interpretar las imgenes obtenidas.

ELISA: Menos sensible, no resulta posible determinar en un solo ensayo diferentes perfiles, pero ha comenzado a ganar popularidad debido a su bajo costo y facilidad de implementacin.

Valores normales La ausencia de anticuerpos antinucleares (ANA) prueba NEGATIVA es lo NORMAL. Pueden ser considerados negativos los resultados positivos a dilucin mayor de 1:20 Adems nos pueden dar en el resultado los diferentes patrones de tincin que son ms especficos de ciertas enfermedades:

Patrn homogneo (LES, Enfermedad mixta del colgeno) Patrn perfilado (LES)

Patrn moteado (LES, Escleroderma, Artritis Reumatoide, Enfermedad mixta del colgeno, Sndrome de Sjogren, Polimiositis) Patrn nucleolar (Escleroderma, Polimiositis)

Valoracin de los resultados anormales La presencia de anticuerpos antinucleares (ANA) en la sangre puede indicar:

Artritis reumatoide Escleroderma Enfermedades tiroideas Lupus Eritematoso Sistmico (LES) Enfermedad mixta del colgeno Enfermedad de Raynaud Hepatitis crnica Miastenia gravis Polimiositis

INTERPREACION: Los patrones resultantes de la inmunofluiorescencia son variados y reflejan la contra uno o mas antigenos nucleares requieren por tanto de una amplia experiencia Para su correcta interpreacion ademas deben enmarcarse en un conexto clinico Adecuados para no emitir falsos diagnosticos cuando de emplean de manera Adecuada ,unn valor fiable del ANA Anticuerpos anticitoplasma de neutrfilos (ANCAs) son: un grupo de autoanticuerpos, principalmente de tipo IgG, dirigidos contra antgenos que se encuentran presentes en el citoplasma de los granulocitos neutrfilos (el tipo ms comn de leucocito) y contra el citoplasma de monocitos. Se pueden detectar por medio de un anlisis sanguneo en un gran nmero de enfermedades autoinmunes, pero se encuentran particularmente asociados a la vasculitis sistmica, tambin llamada vasculitis asociada a ANCA.

Tipos: Los ANCA fueron originalmente divididos en dos grandes clases, los c-ANCA
y los p-ANCA, basados en los patrones de tincin inmunofluorescenteque se observaba en neutrfilos fijados en etanol al ser enfrentados a los anticuerpos del paciente. Los ttulos de ANCAs generalmente se miden por medio de ELISA y por inmunofluorescencia indirecta (IFI).1

p-ANCA, o patrn de fluorescencia perinuclear (tincin protoplasmtica) los anticuerpos anticitoplasma de neutrfilos muestran un patrn de fluorescencia en

forma de anillo, rodeando al ncleo. El antgeno diana es generalmente la mieloperoxidasa (MPO).

c-ANCA, o patrn de fluorescencia citoplasmtico (clsico). En este caso los anticuerpos anticitoplasma de neutrfilos muestran un patrn de tincin citoplasmtico difuso y granular. El antgeno diana es ms frecuentemente la proteinasa 3 (PR3).

Algunos ANCA atpicos, dirigidos contra antgenos diferentes de la MPO o de la PR3, pueden ocasionalmente producir un patrn de fluorescencia en parches al ser visualizados por inmunofluorescencia, y se da ms frecuentemente en pacientes con enfermedades asociadas a la formacin de ANCA pero diferentes de la vasculitis. Este patrn de fluorescencia es comnmente llamado 'patrn nevado'.

En algunos procesos patolgicos, es posible observar un tercer tipo distintivo de ANCA, los x-ANCA. Estos son un hallazgo frecuente en las enfermedades inflamatorias crnicas de intestino. DESARROLLO

Todava se entiende muy pbremente cmo es que los ANCA se desarrollan, aunque se han sugerido varias hiptesis. Es posible que haya una contribucin gentica, sobre todo de parte de los genes que controlan el nivel de la respuesta inmune, aunque muy probablemente esta susceptibilidad gentica se encuentra relacionada con factores ambientales. Entre algunos de estos posibles factores se postula a la vacunacin o la exposicin a silicatos. Se han postulado dos posibles mecanismos de desarrollo de ANCAs, aunque ninguna de estas teoras responde a la pregunta de cmo es que se desarrollan las diferentes especificidades de estos anticuerpos, y todava queda mucho trabajo de investigacin por hacer en este campo. Hay tres enfermedades primarias que se encuentran consistentemente asociadas con ANCAs: granulomatosis de Wegener, poliangitis microscpica y glomerulonefritis. Se asume que estos anticuerpos estn involucrados en la generacin y/o progresin de las lesiones y signos clnicos Pacientes que padecen muchas otras enfermedades tales como la colitis ulcerativa y la espondilitis anquilosante, comnmente presentan ANCAs tambin. Sin embargo en estos casos no hay vasculitis asociada, y se cree que los ANCAs son un epifenmeno

incidental antes que una parte en si de la enfermedad. El sndrome de ChurgStrauss se encuentra asociado a p-ANCAs dirigidos contra la MPO. Todava resulta poco claro cul es el rol de los ANCAs en estas enfermedades, bien podran ser marcadores de la enfermedad o formar parte en el procesos patognico. Se ha demostrado que en la granulomatosis de Wegener hay una correlacin positiva entre el ttulo de ANCA y la actividad de la enfermedad; y en estudios in vitro se ha demostrado que los ANCA causan la activacin de los neutrfilos imprimados y reaccionan con las clulas epiteliales que expresan PR3. los ANCA podran actuar causando la liberacin de enzimas lticas de parte de los granulocitos y otros glbulos blancos, causando la inflamacin de las paredes de los vasos sanguneos (esto es vasculitis). Los ANCA asociados a vasculitis, usualmente se presentan con la caracterstica de que causan vasculitis de vasos pequeos. REACTIVOS Y MATERIALES: USO: todo el kit listo para usar CONSERVACION: 2 -10 C MATERIALES: Portaobjeto con sustrao de anca (laminas que contienen neutrofilos y limfocitos que son esabilizados y fijados en los pozos de laminas Disolvene para muestra anca- (para disolver muestras de pacientes Control positivo C-ANCA:listo para uso (suero control humano)muestra una tincion granular del citoplasma entre segmentos nucleares de los neurofilos fijados con etanol y formol Control positivo P-ANCA Control titulable C-ANCA RVO FLUORESENTE para AC especificos de la Ig listo para uso