UNIVERSIDAD VERACRUZANA FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS ORIZABA, VERACRUZ
PROGRAMA EDUCATIVO QUMICO FARMACUTICO BILOGO
EXPERIENCIA EDUCATIVA BIOQUMICA LABORATORIO
DOCENTE Dra. Rosalba Ortega
TRABAJO PRCTICA 4 RECONOCIMIENTO DEL GLICOGENO EN LOS TEJIDOS ANIMALES
INTEGRANTES: VENANCIO SNCHEZ ESCOBAR ELVIRA DE JESUS GONZALEZ OLGUIN NAYELI DANIELA GARCIA DIAZ BLOQUE Y SECCIN: 402
Practica 4. Reconocimiento del glicgeno en tejidos animales. INTRODUCCION.
El glucgeno es el principal polisacrido de reserva de las clulas animales al igual que la amilipectina es un polisacrido ramificado de la D-glucosa con enlaces alfa-1,4 yalfa1,[Link] glucgeno es abundante en el hgado, puede alcanzar hasta el 7% del peso hmedo, se le haya en musculo esqueltico; en las clulas hepticas el glucgeno se encuentra almacenado en grnulos grandes contiene enzimas responsables de su sntesis y degradacin. Puede hidrolizarse por la accin de alfa-amilasa se encuentra en la saliva y jugo pancrtico, rompen los enlaces alfa-1,4 en las ramas exteriores del glucgeno para dar glucosa, maltosa y un ncleo resistente llamado dextrina limite. El glucgeno es la forma principal de almacenamiento de carbohidratos en los animales y corresponde el almidn de a las [Link] encuentra ene l hgado (hasta 6%) en el musculo excede de 1% al igual que el almidn, es un polmero Ramificado de glucosa. La funcin del glucgeno muscular es actuar como una fuente de fcil disponibilidad de unidades de hexosa para la glucolisis dentro del propio musculo. El glucgeno heptico sirve de gran parte `para exportar unidades de hexosa para la conservacin de la glucosa sangunea, entre comidas. Despus de 12 a 16 hrs de ayuno, el hgado casi agota su reserva de glucgeno. El glucgeno muscular solo disminuye de manera significativa despus de ejercicio vigoroso prolongado. Puede inducirse en almacenaje mayor de glucgeno muscular con dietas ricas en carbohidratos despus de la deplecin por el ejercicio. Las enfermedades son un grupo de trastornos hereditarios se caracterizan por movilizacin deficiente del glucgeno deposito de formas anormales del mismo.
MATERIALES Y METODOS.
En un tubo de ensaye se colocaron 1,5 g. de hgado de pollo, despus se adicionaron 2ml de disolucin de hidrxido potsico al 60%. El tubo se coloco en bao mara en agua hirviendo, el contenido del tubo se remova constantemente con una varilla de vidrio, se saco del bao y se dejo enfriar y se aadieron 4ml de etanol. Se dejo enfriar nuevamente durante 20 min. Se sedimento el precipitado del glicgeno. Este se separo mediante centrifugacin durante 5 a 10 min a 300 r.p.m. S e extrajo el liquido que se encontraba encima del precipitado, el precipitado se disolvi en 2ml de hidrxido potsico al 15%, se aadieron 4 ml de etanol y la mezcal obtenida se dejo enfriar. El precipitado formado del glicgeno se separo mediante la centrifugacin. Luego el precipitado del glicgeno se hidrolizo y se demostr la presencia de la glucosa en su composicin. Para ello se aadi al precipitado 3 ml de disolucin de acido clorhdrico y se hirvi durante 15 min en el bao mara, inmediatamente el contenido se dejo enfriar y se neutraliza con la disolucin de hidrxido sdico, se le aadi igual volumen de licor de fehling y la mezcla se hirvi.
RESULTADOS Y DISCUSION.
El glucgeno se libera de los tejidos que lo contienen por calentamiento con una base fuerte (KOH) hasta la destruccin total del tejido. La separacin del glucgeno del tejido se consigue mediante la adicin de etanol (precipita polisacridos y elimina los monosacridos solubles) As, se produce un precipitado que contiene una mezcla de glucgeno, protenas y cidos nucleicos, que han resistido el calentamiento anterior. El tratamiento posterior con cido clorhdrico hace que precipiten las protenas y cidos nucleicos de la mezcla. El glucgeno aislado se vuelve a precipitar con etanol, obtenindose una preparacin con un alto grado de pureza. Mediante este mtodo, el glucgeno es hidrolizado por un cido (HCl) hasta sus unidades elementales (monosacridos). La identificacin de estos monosacridos se hace mediante el mtodo de Fehling, el cual consta de dos soluciones Fehling A y Fehling B (Sulfato cprico y Sal de Seignette, respectivamente), El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de un aldehdo. ste se oxida a cido y reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino a xido de cobre(I), que forma un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta reaccin es que la forma aldehdo puede detectarse fcilmente aunque exista en muy pequea cantidad. Si un azcar reduce el licor de Fehling a xido de cobre (I) rojo, se dice que es un azcar reductor.
CONCLUSIONES.
se logr determinar la presencia del glucgeno en hgado y comprender as su importancia fisiolgica en el organismo animal, para esto se usaron diferentes sustancias para solubilizarlo, ya que el glucgeno se encuentra formado por cadenas ramificadas de glucosa su identificacin se basa en el rompimiento de esta cadena y formando as monosacridos de glucosa, despus usando el efecto reductor de la glucosa hacia el reactivo de Fehling, tornando un color azul a rojizo, de este modo se comprueba la presencia de glucgeno en el hgado del pollo y su conformacin de glucosa. As como tambin que esta sustancia es de suma importancia pues es una reserva importante de glucosa que en casos de ayuno o ausencia de absorcin directa de sta, esta molcula es capaz de convertirse en glucosa por medio de la Glucogenolisis.
BIBLIOGRAFIA.
Bohinski. Bioqumica ( quinta edicin ed. ). Editorial Person Educacin S.A. Mathew ( 2002 ) Bioqumica ( Tercera edicin Ed ) Editorial educacin S.A.
