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Blanco Reactivo
Standard
Muestra
1ml
1ml
1ml
10 l 10 l
VALORES DE REFERENCIA:
70 105 mg/dl
LINEARIDAD:
0 500 mg/dl
Blanco Reactivo
Standard
Muestra
500
500 l
500 l
Incubar 5- 10 min. a 37 C
Agua Des. Standard Muestra
5 l 5 l 5 l
Blanco Reactivo
Standard
Muestra
500
500 l
500 l
Incubar 5- 10 min. a 37 C
Agua Des. Standard Muestra
5 l 5 l 5 l
(WIENER)
MTODO ENZIMTICO: (Uremia calorimtrico). MUESTRA: suero /plasma PROCEDIMIENTO:
Standard
Muestra
II gotas
II gotas 20 l
II gotas
1 ml 1ml
1ml 1ml
1ml 1ml
10ml
10ml
10ml
Mezclar por inversin y retirar del bao despus de 10 min. Leer frente a blanco de reactivo a 540 nm.
0 150 mg/dl
Stndar
Muestra
500 l
500 5 l
500 l 5 l
500 l
500 l
500 l
Mezclar por agitacin suave e incubar 5 min. a 37C. Leer a 600 nm.
suero 15 39 mg/dl
> Dil con H2O destil. (1+4)
0 300 mg/dl
1. Preparacin de reactivo 1: En un frasco medir 1 cc de OH Na + 4 cc de agua destilada mezclar en vortex . 2. Preparacin del reactivo de trabajo: Medir 500 l de reactivo 1 y 500 l de cido pcrico
PROCEDIMIENTO:
Rvo. de trabajo
1ml.
100 l
1ml. 100 l
VALORES DE REFERENCIA:
Mujeres Varones
LINEARIDAD:
0 13 mg/dl
1ml
1ml
1ml
Incubar 5- 10 min. a 37 C
Agua Des. Standard Muestra
25 l 25 l 25 l
VALORES DE REFERENCIA:
Suero o plasma:
LINEARIDAD:
0 20 mg/dl
Standard
Muestra
3.5 ml 50 l
3.5 ml 50 l
3.5 ml
50 l
Protenas totales:
(Wiener)
PROCEDIMIENTO:
Standard
Muestra
3.5 ml 10 l
3.5 ml
3.5 ml
10 l 10 l
Mezclar con varilla e incubar a T ambiente por 10 min. leer 625 nm.
VALORES DE REFERENCIA:
Albmina:
Rel. Alb/Glob:
(WIENER)
PREPARACIN DEL REACTIVO PRECIPITANTE: y En un frasco medir 2.5 ml de reactivo dextran y Aadir 2.5 ml de reactivo magnesio y Mezclar por inversin PROCEDIMIENTO: y En un tubo medir 500l de muestra y Agregar 50l de reactivo precipitante, homogeneizar por rotacin o con golpes suaves en la palma de la mano por 20 seg. y Dejar 30 a 40 min en refrigerador a 4 a 10 C y Centrifugar 15 minutos a 3000 r.p.m.
Estndar
Muestra
1 ml
1 ml
1 ml
Preincubar 5 10 min a 37 C
Standard de Col. Sobrenadante
10 l 50 l
40 60 mg/dl
(WIENER)
PROCEDIMIENTO: y En un tubo medir 100 l de muestra y Agregar 50l de reactivo precipitante, homogeneizar con movimientos suaves por 20 seg. y Dejar 15 min. en bao de agua de 20 25 C y Centrifugar 15 min. a 3000 r.p.m.
Standard
Muestra
1 ml
1 ml
1 ml
Incubar 5 10 min a 37 C
Standard de Col. Sobrenadante
10 l 50 l
(WIENER)
GPO /PAP
PROCEDIMIENTO:
PREPARACIN DEL REACTIVO DE TRABAJO: Disolver el vial con el buffer. (Segn inserto)
Blanco Reactivo
Standard
Muestra
1ml
1ml
1ml
10 l 10 l
0 - 1000 mg/dl
(WIENER)
PROCEDIMIENTO:
PREPARACIN DEL REACTIVO DE TRABAJO: Disolver el vial con el buffer. (Segn inserto)
Blanco Reactivo
Standard
Muestra
1ml
1ml
1ml
Preincubar 5 a 10 min. 37 C
Standard Muestra
10l 10l
VALORES DE REFERENCIA :
(WIENER)
PREPARACIN: Sustrato: Transferir el contenido del frasco de NaFF directamente en el frasco de Buffer, mezclndolo hasta su completa disolucin Rvo. De color: disolver el contenido del envase en 500ml de agua destilada y dejar a T ambiente en frasco ambarado y protegido de l a luz. PROCEDIMIENTO:
Blanco Sustrato
Standard
Muestra
0.5ml
0.5ml
0.5ml
50 l 50 l
2.5ml
2.5ml
2.5ml
VALORES DE REFERENCIA:
Adultos: Nios:
LINEARIDAD:
0 800 UI/L
(HUMAN)
MTODO CINTICO
PREPARACIN DEL REACTIVO DE TRABAJO: se mide 2cc de sustrato (GOT) y se transfiere al frasco de buffer (GOT) que contiene 8 cc. Mezclar y rotular PROCEDIMIENTO:
Rvo. de trabajo
1ml.
100 l
VALORES DE REFERENCIA:
Varones Mujeres
0 37 U/L 0 31 U/L
Reconstituir el reactivo.
Blanco Reactivo GOT Muestra
500
500 l
50 l
VALORES DE REFERENCIA:
LINEARIDAD:
0 500 UI/L
(HUMAN)
MTODO CINTICO
PREPARACIN DEL REACTIVO DE TRAJAJO: se mide 2cc de sustrato (GPT) y se transfiere al frasco de buffer (GPT) que contiene 8 cc. Mezclar y rotular PROCEDIMIENTO: Rvo. de trabajo
1ml.
100 l
Varones Mujeres
42 U/L 32 U/L
Reconstituir el reactivo.
Blanco Reactivo GPT Muestra
500
500 l
Incubar 5 min. a 37 C
Muestra
50 l
0 500 UI/L
(WIENER) BILIRRUBINA COLORIMETRICO: Muestra: Suero, plasma heparinizado no hemolizado o liquido amnitico (proteger de luz natural o artificial). INSTTRUCCIONES: Desarrollador listo para usar. Reactivo Sulfanilico listo para usar Ambos estables a temperatura ambiente hasta la fecha de vencimiento indicada. Diazoreactivo mezclar una parte de nitrito de sodio mas 21 partes de reactivo sulfanilico. Estable en frasco de vidrio color caramelo de 2 10 C 3 meses a partir de la fecha de su preparacin. SUEROS ICTERICOS:
De acuerdo a la severidad de la ictericia: Para una ictericia moderada se uso 50 l de suero y multiplicar el resultado obtenido por 3.79. Para una ictericia intensa se requiere solo 20 l de suero y multiplicar el resultado por 9.38.
Blanco Muestra (suero) Agua destilada Desarrollador R. sulfanilico Diazoreactivo 200 l 200 l 2.5 ml
Total 200 l
2.5 ml
200 l
200 l
Mezclar de inmediato cada tubo por inversin, antes de los 5 minutos se realiza la lectura del blanco a 530 nm. Las lecturas pueden efectuarse entre 5 15 min., EXCEPTO para la bilirrubina directa que deben leerse a los 5 min. Exactos. VALORES DE REFERENCIA Suero / plasma adultos: Total hasta 1.0 mg/dl Directa hasta 0.2 mg/dl Suero/ plasma recin nacidos a termino: Total hasta las 24 hrs = 6.0 mg/dl Hasta las 48 hrs. = 7.5 mg/dl Del 3 al 5 dia = 12.0 mg/dl Suero / plasma recin nacidos prematuros: Total hasta las 24 hrs = 8.0 mg/dl Hasta las 48 hrs = 12.0 mg/dl Del 3 al 5 dia = 24.0 mg/dl
Los valores comienzan luego a disminuir para alcanzar el nivel promedio del adulto al mes de nacimiento. En los prematuros, los niveles de bilirrubina tardan mas en alcanzar la normalidad, dependiendo del grado de inmadurez heptica.
500
500 l
12,5 l
0 1500 UI/L
Extender el suero sobre toda la superficie del crculo. Agitar el reactivo antes de usar para lograr una completa homogeneizacin. Dejar caer las primeras tres gotas para eliminar el aire de la aguja en un extremo de la cartilla Poner la gota del antigeno no mezclar, luego absorber las gotas eliminadas antes del procedimiento. Inmediatamente agitar durante 8 minutos lentamente en un rotador automtico a 100 r.p.m.
INTERPRETACION: No reactivo: suspensin homognea, sin floculacin Reactivo: floculacin gruesa en el centro y en la superficie del crculo, entonces realizar prueba cuantitativa. PRUEBA CUANTITATIVA:
Realizar diluciones de la muestra con solucin salina (0.9%) (1:2, 1:4, 1: 8, 1:16, 1:32, etc.) Muestras reactivas calificar por diluciones.
Nota: cuando la dilucin es mayor a 1/16 se recomienda preparar una dilucin en tubo. Que se realiza colocando 150 l de Soluc fisiolgica y 10l de suero del paciente
(HUMAN)
CRP:
Prueba rpida para determinacin de protena C reactiva en suero. El reactivo se conserva hasta su fecha de vencimiento cuando se mantiene entre 2 8 C. Proteger de la luz. Agitar el reactivo antes de usar para lograr una completa homogeneizacin.
MUESTRA: suero
Extender el fluido sobre toda la superficie, mezclar inmediatamente durante 2 minutos lentamente en un rotador automtico a 100 r.p.m o manual. INTERPRETACION: Negativo: suspensin homognea. Positivo: aglutinacin que aparece dentro los 2 minutos entonces realizar la prueba semi-cuantitativa.
PRUEBA SEMI CUANTITATIVA:
Realizar diluciones de la muestra con solucin salina (1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, etc.) Para la concentracin se multiplica la ltima dilucin positiva por el factor de conversin 6 y reportar el resultado en mg/dl.
VALORES DE REFERENCIA:
Menor a 6 mg/dl
ESTREPTOLISINA O:
y Disolver cada vial con el volumen de Buffer indicado en el rotulo mezclando por inversin hasta su disolucin completa
1:10 = 0.2 ml de suero + 1.8 ml Buffer 1:100 = 0.5 ml de dilucin (1:10) + 4.5 ml Buffer 1:500 = 1 ml de dilucin (1:100 )+ 4 ml Buffer Dilucin del suero Tubo n Suero diluido (ml) Buffer ml EstreptolisinaO (ml) 1:10 1 0.2 0.8 0.5 3 0.8 0.2 0.5 1:100 5 0.4 0.6 0.5 7 1 0.5 1:500 9 0.6 0.4 0.5 121.5 controles 13+ 1 0.5
Eritrocitos 3 5% (ml)
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
Mezclar agitando ligeramente y mantener en bao Maria a 37C durante 15 min. Agitar nuevamente y continuar en bao Maria 30 min. Posteriormente centrifugar 3 min. a 1500 rpm y leer
50
125
250
500
833
(-)
(+)
VALORES DE REFERENCIA:
Agitar el reactivo antes de usar para lograr una completa homogeneizacin. En la placa de fondo claro colocar :
40 l de muestra + I gota reactivo ltex
Extender el fluido sobre toda la superficie, mezclar inmediatamente durante 2 minutos lentamente en un rotador automtico a 100 r.p.m o manual.
INTERPRETACION:
Negativo: suspensin homognea. Positivo: aglutinacin que aparece dentro los dos minutos entonces realizar la prueba semi -cuantitativa.
PRUEBA SEMI CUANTITATIVA:
Realizar diluciones de la muestra con solucin salina (1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, etc.) Para la concentracin se multiplica la ltima dilucin positiva por 12.
VALORES DE REFERENCIA:
Menor a 12 mg/dl
1ml
1ml
1ml
Incubar 5 10 min. a 37 C
Standard Muestra
20 l 20 l
30-140 mg / 24hrs. 25 mg / dl
Nota.
Mujeres embarazadas
(WIENER)
MTODO CINTICO PROCEDIMIENTO: (STAR FAX) Preparacin del reactivo de trabajo: Se mide 200 ml de sustrato (Fosfatasa Alcalina) y se transfiere al frasco de buffer (Fosfatasa Alcalina) que contiene 800 ml mezclar y rotular. PROCEDIMIENTO: Reactivo de trabajo
1 ml
10 ul
Adultos: Nios:
LINEARIDAD:
0 1500 UI /L