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REACCIONES DE CARACTERIZACION DE
AMINOACIDOS Y PROTEÍNAS
RESUMEN
Se realizó la caracterización de aminoácidos y proteínas tales como glicina, prolina,
fenilalanina, tirosina, triptófano, arginina, metionina, cisteína, cistina, caseína, muestra
problema y biológica (frijol rojo) mediante las reacciones: de nihidrina, biuret, xantoproteíca,
Millon, reconocimiento de arginina y la determinación de aminóacidos azufrados. Se
obtuvieron resultados positivos y negativos para cada reacción dependiendo de la estructura
de los anteriores aminoácidos. Xxxxxx y xxxxx
http://books.google.com/books?
id=Pm7lNZzKlaoC&pg=PA908&dq=caracterizacion+de+aminoacidos+y+proteinas+ninhi
drina&hl=es&ei=CFueTIPNNsKBlAfHidXsAg&sa=X&oi=book_result&ct=result&resnum=
2&ved=0CDQQ6AEwAQ#v=onepage&q&f=false
INTRODUCCION
Basándose en las diferentes estructuras que poseen los aminoácidos, incluyendo los grupos
característicos que algunos de ellos poseen, se puede plantear que existen diferentes tipos de
reacciones que permiten determinarlos. Entre ellas están:
MATERIALES Y METODOS
Reacción de Ninhidrina
Se tomo una muestra de glicina, metionina, prolina, muestra biológica (frijol rojo) y muestra
problema, en distintos tubos de ensayo. Se adicionó 1 mL de ninhidrina a cada tubo y se
calentó a ebullición en baño maría durante 10 minutos.
Reacción de Biuret
Se tomo 1mL de glicina, muestra biologica y problema, en distintos tubos de ensayo. Se les
adicionó 2 mL de hidróxido de sodio al 30% y posteriormente se adicionó 3 gotas de sulfato
cúprico al 1%. La ecuación que identifica esta reacción es:
Proteína + NaOH →
Reacción Xantoproteica
Se adiciono 1ml de glicina, fenilalanina, tirosina, triptófano, muestra biologica y problema en
distintos tubos de ensayo, posteriormente se les agregó 1 mL de acido nítrico concentrado y
se calentó a baño maría durante 10 minutos.
Reacción de Millón
Se adiciono 2mL glicina, tirosina, triptófano, muestra biologica y problema, en distintos tubos
de ensayo. Se añadió 0.5 mL de reactivo de millón al 0.5%, posteriormente se les agregó 1
mL de nitrito sódico al 0.5%y se calentó en baño maría durante 10 minutos.
Reacción de Arginina
En cuatro tubos de ensayo se adiciono 1mL de glicina, arginina, muestra biologica y problema
respectivamente. Posteriormente a cada tubo se adicionó 1mL de hidróxido de sodio al 30% y
0.05mL de α-naftol al 0.05%. Se agito y se dejó enfriar 10 minutos en baño de hielo.
Seguidamente se añadió 5 gotas de hipobromito sódico a 1N y urea al 40%.
RESULTADOS
Tabla No. 1: Caracterización de aminoácidos y proteínas.
Prueba muestra Ninhidrina Biuret Xantoproteica Millón Arginina azufrados
Biologica
Muestra (frijol rojo) + + + + + +
problema + - + - + -
Glicina + - - + - -
Prolina +
Fenillalanina -
Tirosina + +
Triptófano + -
Arginina +
Metionina + -
Cisteína +
Cistina -
DISCUSION DE RESULTADOS
Reacción de la Ninhidrina: la prueba fue positiva para todas las pruebas: glicina, metionina,
prolina, y muestra biologica (frijol rojo) debido a que estas presentan un grupo amino libre, el
cual reacciona con la ninhidrina, el cual es un agente oxidante fuerte que efectúa la
descarboxilación oxidativa de los aminoácidos, y forman dióxido de carbono, amoníaco y un
aldehído que contiene un átomo de carbono menos que el compuesto original. El amoníaco y
la hidridantina así formadas reaccionan con una segunda molécula de ninhidrina que da lugar
a la formación de un pigmento color azul o violeta, del que solamente el átomo de nitrógeno
pertenece al aminoácido (Lehninger, 1979). Se debe tener en cuenta que la coloración
azulada o violeta de las reaaciones es proporcional a la concentración del aminoácido. En el
caso de la prolina y muestra problema, que estructuralmente no poseen el grupo amino libre,
sino un grupo imino, la coloración final es amarilla.
Reacción Xantoproteica: esta prueba fue positiva para la tirosina, triptófano, muestra
problema y biologica. Este comportamiento se debe a la presencia de anillos bencénicos en la
estructura de las anteriores proteínas y aminoácidos. Los anillos aromáticos presentes
reaccionaron con ácido nítrico concentrado formando nitroderivados de color amarillo.
En el caso de la muestra biologica (frijol amarillo), se obtuvo un resultado positivo debido a
que de “100g de proteína ésta se encuentra conformada por un 5.2g de fenílalanina, 4.7g de
tirosina y 1.6g de triptófano”3.
Reacción de Millón: esta prueba fue positiva para la muestra biologica, glicina y tirosina
debido a que estos poseen en su estructura un grupo hidroxifenilo, el cual reacciona frente a
las sales de Mercurio a pH ácido, formando en un principio nitrotirosina y mas adelante una
sal mercúrica de color rojo. En el caso del triptófano y la muestra problema xxxxxx
Reacción de Arginina: la prueba fue positiva para la arginina y la muestra biologica (frijol
rojo) debido a que el grupo guanidinio presente en la cadena lateral de la arginina reacciona
con soluciones de α-naftol y se oxida en presencia de hipobromito perdiendo un grupo imino.
La arginina oxidada reaccionó con otra molécula de α-naftol en medio alcalina formando un
complejo coloreado rojo, tal como se muestra en la siguiente reacción:
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
H. Beyer, W. Walter; 1986; Manual de química orgánica, Editorial Reverte, Madrid, pág.
908
C. Mathews ; V. Holde; 2002 K.E.; 2ª Edición. Editorial Mc Graw Hill. Páginas 143-148 [3]
J. Rivera; C. López; 2001; Bioquímica estructural: conceptos y tests, Editor Tebar, pág. 93