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6 Inmunocromatografc3ada
6 Inmunocromatografc3ada
Inmunocromatografía
Práctica 6
1. Introducción
La inmunocromatografía es una de las técnicas de inmunodiagnóstico
más modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez de la
prueba. Actualmente se utiliza como prueba rápida de tamizaje para la
detección de antígenos o anticuerpos presentes en el suero del paciente.
2. Objetivos
- Explicar el fundamento inmunológico de la prueba de
inmunocromatografía
- Conocer las aplicaciones de la prueba
- Conocer los diferentes tipos de pruebas que existen en el mercado
basados en esta técnica-
3. Antecedentes
La inmunocromatografía se basa en la migración de una muestra a
través de una membrana de nitrocelulosa. La muestra es añadida en la
zona del conjugado, el cual está formado por un anticuerpo específico
contra uno de los epítopos del antígeno a detectar y un reactivo de
detección. Si la muestra contiene el antígeno a problema, éste se unirá
al conjugado formando un complejo inmune y migrará a través de la
membrana de nitrocelulosa. De lo contrario, migrarán el conjugado y la
muestra sin unirse.
La zona de captura está formada por un segundo anticuerpo específico
contra otro epítopo del antígeno. Al llegar la muestra a esta zona, los
complejos formados por la unión del antígeno y conjugado quedarán
retenidos y la línea se coloreará (muestras positivas). En el caso
contrario las muestras son negativas.
La zona control está formada por un tercer anticuerpo que reconoce al
reactivo de detección. Cuando el resto de muestra alcanza esta zona, el
anticuerpo se unirá al conjugado libre que no ha quedado retenido en la
zona de captura. Esta línea es un control de que el ensayo ha funcionado
bien, porque se colorea siempre, con muestras positivas y negativas.
UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACIA
DEPARTAMENTO DE CITOHISTOLOGÍA
INMUNOLOGÍA E INMUNOPATOLOGÍA
4. Materiales
- Pipetas pasteur
- Pruebas rápidas de inmunocromatografía
- Papel mayordomo
- Descartador de punzocortantes
- Muestras de suero
- Beaker con cloro
5. Procedimiento
- Anotar cada una de las pruebas a realizar
- Colocar una gota de muestra de suero de paciente en cada una de
las pruebas rápidas que se le proporcionan.
- Dejar que la muestra fluja a lo largo de la prueba de
inmunocromatografía
- Anotar los resultados positivos y negativos
- Interpretación:
o Positivo: dos líneas en el casete
o Negativo: una línea en el casete
NOTA: Si no aparece la línea de control, la prueba debe de
repetirse.
8. Cuestionario
- ¿Cuál es el fundamento de la prueba?
- Defina que es conjugado
- Escriba tres ventajas y tres desventajas de estas pruebas
- Mencione cinco aplicaciones en el diagnóstico de enfermedades
que se pueden realizar por inmunocromatografía
- ¿De qué está compuesto el control interno de la prueba de
inmunocromatografía?
9. Bibliografía
- Inmunocromatografía. Disponible en
http://es.scribd.com/doc/36487446/ INMUNOCROMATOGRAFIA-pba-
rapida.
http://www.socpemi.org/Doc/pruebasrapidas.pdf
http://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/mariamc/lacteos/practica
8.htm
UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACIA
DEPARTAMENTO DE CITOHISTOLOGÍA
INMUNOLOGÍA E INMUNOPATOLOGÍA
10. Anexo
Figura 1
Figura 2