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INMUNOCROMATOGRAFIA_pba rapida

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INMUNOCROMATOGRAFIA

:
PRUEBAS RAPIDAS
INTEGRANTES:
-OCTAVÌO LUCANA
- VERA BECERRA ROSA
- MONTOYA MONTANO WÌLLÌAM
CONCEPTO
· La inmunocromatografía es una de las
técnicas de inmunodiagnóstico más
modernas cuyas principales ventajas son
la sencillez y rapidez del test.
· No es necesario reactivos ni
instrumentación adicional, como en el
campo clínico. El ejemplo más conocido
son los test de embarazo de las
farmacias.
· Sobre una membrana de nitrocelulosa o 343 se
encuentran absorbidos en la línea de reacción
anticuerpos contra el antígeno que buscamos y sobre la
línea control anticuerpos anti-conjugado, de forma que
cuando la muestra contiene antígeno, este fluye por la
membrana quedando retenido en la línea de reacción. El
conjugado, que también es un anticuerpo específico
frente al antígeno que buscamos, está marcado con una
molécula de oro coloidal, que también fluye por la
membrana, es retenido por el antígeno en la línea de
reacción y por el anticuerpo en la línea control. En el
caso de muestras negativas que no contienen antígeno,
el conjugado es retenido únicamente en la línea control.
Estás técnicas son rápidas, obteniéndose resultados en
15-30 minutos.
TÉCNÌCA DE ÌNMUNOCROMATOGRAFÍA
C C TT SS
FUNDAMENTO DE ÌNMUNOCROMATOGRAFÍA
PARA DETECCÌÓN DE ANTÍGENOS
TÌRA NÌTROCELULOSA
Antígeno en muestra Antígeno en muestra
Anticuerpo de Captura Anticuerpo de Captura
contra antígeno contra antígeno
específico específico
Anticuerpos de detección Anticuerpos de detección
marcados con marcados con
Oro CoIoidaI Oro CoIoidaI
Anticuerpo de Captura Anticuerpo de Captura
contra anticuerpo contra anticuerpo
de detección de detección
PROCEDÌMÌENTO
RESULTADOS
POSITIVO POSITIVO
NEGATIVO NEGATIVO
· El método basado en el oro coloidal como marcador ha tenido un gran desarrollo en los últimos
años y ésto por diversas razones:
· En primer lugar las partículas de oro se pueden fabricar en diferentes tamaños, de entre 2-3 nm a
100-150 nm, con todas las posibles medidas intermedias.
· Estas partículas pueden fabricarse en el laboratorio aunque actualmente existe una amplia
disponibilidad comercial.
· Las partículas de oro absorven todo tipo de proteínas formando complejos muy estables.
· Muchas de las proteínas acomplejadas con oro mantienen sus propiedades y actividad biológica.
· Los tamaños de 2 a 3 nm son los menores disponibles para un marcador y por ello el oro es el
marcador que permite la máxima resolución.
· La utilización del oro como marcador unido a proteína A, anticuerpos u otras proteínas, se ha
limitado tradicionalmente a la microscopía electrónica, pero recientemente el desarrollo de
métodos de amplificación de la señal mediante precipitación de plata metálica ha permitido su
aplicación en microscopía óptica.
· Los métodos de amplificación de señal se basan en la propiedad del oro de catalizar la reducción
de iones plata a plata metálica en presencia de un agente reductor. Durante este proceso las
partículas de oro son rodeadas por plata metálica haciendose visibles al microscopio óptico con
una coloración marrón oscuro. Se utiliza el lactato de plata como donador de iones y la
hidroquinona como reductor a un pH de aproximadamente 3.5.
· Actualmente el oro coloidal unido a anticuerpos o a proteína A es el marcador más empleado en
microscopía electrónica.

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