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Leonor Carrillo. 2003. Microbiología Agrícola. Capítulo 2.vida - y - Muerte - Microbiana
Leonor Carrillo. 2003. Microbiología Agrícola. Capítulo 2.vida - y - Muerte - Microbiana
Captulo 2
y dX/dt = X
En el curso de la fase exponencial la velocidad especfica de crecimiento alcanza su
valor ms elevado (mx).
Funcin (1)
precursor de piridn-nucletidos (NAD y NADP)
coenzima A
-descarboxilaciones
2. 4. Transporte de solutos
El transporte de nutrientes a travs de la membrana citoplasmtica es especfico
porque son captados por la clula solamente aqullos para los cuales existe un sistema
transportador. Existen dos tipos principales de transporte. El primario comprende los
procesos que conducen a la transferencia de iones (H +, Na+, K +) produciendo
alteraciones en el potencial electroqumico. Las fuerzas que intervienen son el
transporte de electrones respiratorio o fotosinttico, o las bombas inicas dependientes
del ATP o de la descarboxilacin de metabolitos. El transporte secundario est guiado
por gradientes en el potencial electroqumico (9).
La difusin pasiva o simple est gobernada por el tamao molecular y las
propiedades lipoflicas del material, permitiendo la entrada de agua, toxinas no-polares
y ciertos inhibidores. La difusin facilitada se lleva cabo debido a la presencia de una
actividad del agua (aw), la que se define como la razn entre la presin de vapor de
agua del substrato o solucin (p ) y la presin de vapor del agua pura (po) a la misma
temperatura, es decir, aw = p/p o
Este concepto se asocia al de humedad relativa de la atmsfera en equilibrio con el
sistema, de la siguiente manera HRE = aw . 100
La mayor parte de las bacterias no crecen a una a w por debajo de 0,91 mientras que los
mohos pueden desarrollarse con cifras de 0,80. Los valores ms bajos obtenidos para
arqueobacterias halfilas son del orden de 0,75 mientras que los mohos xerfilos
(amantes de la sequedad) y las levaduras osmfilas (que prefieren presiones osmticas
elevadas) se multiplican muy lentamente an con valores de 0,65 y 0,60
respectivamente. Los lmites de aw dentro de los cuales hay crecimiento, son ms
amplios a la temperatura ptima de multiplicacin. La capacidad de los organismos
para crecer a una temperatura dada, disminuye a medida que se reduce al aw . La
presencia de ciertos elementos nutritivos ampla los lmites de aw dentro de los cuales
los organismos pueden sobrevivir (3).
La presin osmtica () est relacionada con la actividad del agua a travs una
expresin
2.5.3. pH
antiportes y simportes, para aumentar la velocidad a la cual los protones son expelidos
del citoplasma. El mecanismo homeosttico es constitutivo y funciona en presencia de
inhibidores de la sntesis proteica.
La respuesta de tolerancia al cido es iniciada por un pH externo de 5,5 a 6,0. Este
mecanismo es sensible a los inhibidores de la sntesis proteica y puede mantener el pH
interno por sobre 5,0 teniendo el pH externo valores tan bajos como 4,0. La prdida de
la actividad ATPasa, causada por las mutaciones que desorganizan genes o los
inhibidores metablicos, anula la respuesta de tolerancia al cido pero no el mecanismo
homeosttico. Esta respuesta tambin puede conferir proteccin cruzada frente a otros
agentes ambientales de estrs.
La sntesis de protenas de shock acdico es la tercera va por la que la clula regula
el pH interno. Esta sntesis es generada por un pH ambiental de 3,0 a 5,0 proveyendo
un conjunto de protenas reguladoras distintas de las protenas de la respuesta de
tolerancia al cido.
Bacterias
Thiobacillus thiooxidans
Azotobacter sp.
Erwinia carotovora
Clorobium limicola
Thermus aquaticus
Nitrobacter spp.
Hongos
Aspergillus oryzae
Fusarium oxysporum
Penicillium italicum
Rhizoctonia solani
Botrytis cinerea
Aspergillus niger
lmite superior
6,0
8,5
9,3
7,0
9,5
10,0
9,3
11,1
9,3
8,5
7,4
8,8
2.5.4. Oxgeno
2.5.6. Temperatura
En muestras de agua recogidas en las proximidades inmediatas a las surgencias
termales se han hallado hasta 108 - 109 clulas bacterianas por mL. Las bacterias
adaptadas a elevadas presiones hidrostticas (250260 bares o sea 25-26 MPa) muestran
adems una notable adaptacin a las altas temperaturas, por ejemplo unas bacterias
metanognicas tenan tiempos de duplicacin entre 37 y 65 minutos a 100C bajo tales
presiones (16).
Temperaturas cardinales en C para microorganismos procariticos (17)
grupo
mnima
ptima
mxima
termfilos
40-45
55-75
60-90
mesfilos
5-15
30-45
35-47
psicrotrofos
-5-+5
25-30
30-35
psicrfilos
-5-+5
12-15
15-20
Los valores de las temperaturas cardinales (mnima, ptima, mxima) varan
ampliamente entre las bacterias como se muestra en el cuadro siguiente, pero algunas
tienen una amplitud mayor, como por ejemplo Clostridium perfringens que crece entre 12
y 50C. Los organismos aislados de ambientes fros crecen a temperaturas por debajo
de 0C si las altas concentraciones de solutos impiden la congelacin del medio (1).
Temperaturas en C para el crecimiento de bacterias (1)
especie
mnima
ptima
mxima
Listeria monocytogenes
1
30-37
Pseudomonas maltophila
4
35
Escherichia coli
10
37
Clostridium kluyveri
19
35
Bacillus flavothermus
30
60
Thermus aquaticus
40
70-72
Sulfolobus acidocaldarius
70
75-85
Pyrobacterium brockii
80
102-105
45
41
45
37
72
79
90
115
mxima
45
55
30
35
35
35
10
11
2. 7 Esterilizacin
2.7.1. Accin del calor
Con el fin de evitar el crecimiento de microorganismos extraos introducidos por la
contaminacin, se esterilizan con vapor de agua a presin todos los materiales que
integran el medio de cultivo. El vapor tambin se suele emplear para esterilizar
recipientes y otras superficies con las que el medio est en contacto (20).
Tiempo de destruccin de algunos endosporos bacterianos (2)
calor hmedo
minutos a
organismo
100
105
110
bact. termfilas
...
400 100-300
Bacillus anthracis
2-15
5-10
...
B. subtilis
horas ...
C. perfringens
5-45
5-27
10-15
C. botulinum
300-530 40-120 32-90
C.sporogenes
150
45
12
calor seco
minutos a
organismo
120
130
bacilos termfilos
...
...
B. anthracis
...
...
C. botulinum
120
60
C.pefringens
50
15-35
C. tetani
20-40
115
40-110
...
40
4
10-40
...
120
11-35
...
1
4-20
...
125
4-8
...
...
...
130
3,5
...
...
...
1340 C
1
...
...
...
...
140
...
>180
15-60
5
5-15
150
180
60-120
25
30
160
30-90
9-90
20-25
12
170
15-60
1800 C
15
3
5-10
10-15
12
k y T est relacionada
con la energa de activacin Ea mediante la
ecuacin de Arrhenius k=s -Ea/RT donde s es
la constante de frecuencia, R la constante de
los gases ideales, T temperatura en grados
La interrelacin entre
Kelvin.
13
2. 8. Desinfeccin
Los desinfectantes son substancias qumicas que matan a las clulas somticas
adheridas a las superficies inanimadas, pero no necesariamente a las formas
14
2. 9. Interacciones microbianas
2.9.1. Antibiosis
Un microorganismo puede producir metabolitos que hagan el ambiente desfavorable
para el desarrollo de otros o que perturben su metabolismo hasta el punto de que
mueran o sean incapaces de reproducirse. El fenmero recibe el nombre de antibiosis o
antagonismo.
Los antibiticos constituyen un grupo heterogneo de molculas orgnicas
relativamente pequeas, producidas por unos microorganismos para inhibir a otros a
una concentracin muy baja. La mayora de los microorganismos notoriamente
productores de antibiticos se alojan en el suelo (8).
Otro grupo se molculas antagonistas son las bacteriocinas. Constituyen un grupo
relativamente heterogneo de pequeas protenas sintetizadas en los ribosomas
15
cefalosporinas
Acremonium cephalosporium inhiben sntesis de pared celular
cloranfenicol
Streptomyces venezuelae
eritromicina
Saccharopolyspora erythraea interfiere con sntesis de protenas
lincomicina
Streptomyces lincolnensis
penicilinas
Penicillium chrysogenum
inhiben sntesis de pared celular
polipptidos
polimixinas
BaciIIus polymyxa
deterioro de membrana celular
bacitracina
BaciIIus subtilis
inhibe formacin de pared celular
rifamicinas
Amycolatopsis mediterranei
interfiere con sntesis de protenas
tetraciclinas
Streptomyces spp.
vancomicina
Arnycolatopsis orientalis
viomicina
Streptomyces griseus
antifngicos
anfotericina B
Streptomyces nodosus
interfiere con funcin de membrana
griseofulvina
PeniciIIium griseofulvum
daa la membrana celular
lipopptidos
iturina A
BaciIIus subtilis
interfiere con funcin de membrana
surfactina
BaciIIus subtilis
nistatina
Streptomyces noursei
daa la membrana celular
16
17
Las simbiosis entre rizobios y leguminosas son muy especficas, por ejemplo R.
leguminosarum induce la nodulacin en el poroto pero no en la alfalfa (30). Las bacterias
no se mezclan con los orgnulos citoplasmticos, sino que se mantienen confinadas en
los simbiosomas que son vesculas protegidas por membranas. Los simbiosomas del
lupino tienen una sola bacteria, los de la soja varias. La figura 4 muestra el corte de un
ndulo.
La membrana del simbiosoma acta a modo de
barrera que controla el flujo de cidos carboxlicos
(malato, succinato, fumarato). stos constituyen la
fuente de carbono para los bacteroides. Tales cidos
proceden de la oxidacin de azcares sintetizados en
las hojas por la fotosntesis. Durante el proceso de
formacin de los simbiosoma s, las bacterias se van
transformando en bacteroides que expresan diversas
protenas especficas como la enzima nitrogenasa y
algunos citocromos. Las clulas intersticiales sin
infectar intervienen en las ltimas etapas de la sntesis
de ureidos, asparagina o glutamina, por incorporacin
del nitrgeno fijado. stos se exportan hacia la parte
area a travs de los vasos del xilema.
Para que los ndulos de las leguminosas fijen
nitrgeno
es
imprescindible
que
contengan
leghemoglobina cuyo grupo hemo es sintetizado por el
vegetal (32). La fijacin de nitrgeno requiere gran
cantidad de energa que se produce en los bacteroides
durante la oxidacin de los cidos dicarboxlicos y la
leghemoglobina transporta el O2 a una concentracin
baja pero estable que permite mantener una elevada
actividad respiratoria sin afectar la nitrogenasa, pues
esta enzima se inactiva en presencia de oxgeno (30).
La rizsfera de algunas plantas contienen acumulaciones de bacterias fijadoras, tal
como Azotobacter paspali sobre la superficie de la raz de Paspalum notatum y
Azospirillum brasilense en la de caa de azcar. Las bacterias se hallan en el espacio
intercelular del crtex radical, en una simbiosis donde se benefician los dos
participantes de la asociacin. Por otra parte, el helecho de agua Azolla contiene a la
cianobacteria Anabaena azollae en las cavidades de las hojas. Nostoc vive
simbiticamente en el lquen Peltigera y sobre las races areas de Cycas y Gunnera (29).
Varias dicotiledneas que no pertenecen a las leguminosas, tambin contiene ndulos
en las races capaces de fijar N2 . En la mayora de los casos se trata de actinomicetos del
gnero Frankia. En la figura 5 se esquematiza la forma en que los filamentos penetran a
las clulas de la raz y produce ndulos donde tambin se encuentra una hemoglobina
que facilita la provisin de O2 al endfito (32).
Un inoculante para enriquecer el suelo con la bacteria simbitica deseada, contiene
altas concentraciones celulares en un substrato que favorece largos perodos de
supervivencia sin prdidas de las caractersticas fisiolgicas del microorganismo. Los
pasos a seguir comprenden:
a) seleccin de las cepas convenientes por su mayor eficiencia;
b) cultivo del microorganismo en un medio lquido;
c) eleccin, preparacin y esterilizacin del material de soporte;
d) impregnacin del soporte con el cultivo lquido que posee un alto nmero de clulas,
e) control del nmero de bacterias vivas en el producto terminado (34).
18
19
2.9.3. Predacin
Referencias
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