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RECOMENDACIONES
PARA LA CLASIFICACIN
SANGUNEA ABO
14 de enero de 2013
RECOMENDACIONES PARA
LA CLASIFICACIN SANGUNEA ABO
AUTOR
TM. Andrs Aburto Almonacid.
Encargado de Inmunohematologa.
Seccin de Hematologa y Banco de Sangre.
Departamento Laboratorio Biomdico Nacional y de Referencia.
Instituto de Salud Pblica.
REVISORES EXTERNOS
Dra. Vernica Soto Arellano.
Director Tcnico.
Centro Metropolitano de Sangre y Tejidos.
RESUMEN
INTRODUCCIN
ALCANCE
Estas recomendaciones aplican a los Centros de
Sangre, Unidades de Medicina Transfusional, Bancos de
Sangre y Laboratorios Clnicos que realizan clasificacin
sangunea ABO a donantes, pacientes y embarazadas segn corresponda.
RECOMENDACIONES PARA
LA CLASIFICACIN SANGUNEA ABO
DEFINICIONES, Y ABREVIACIONES
a) El sistema sanguneo ABO consta de 4 fenotipos principales:
GRUPO
ANTGENOS EN EL GR
ANTICUERPOS EN EL SUERO O
PLASMA
anti-A y anti-B
anti-B
anti-A
AB
A, B
- se debe evitar la similitud cero positivo con el trmino seropositivo, donde se llama seropositivo al individuo que sometido a una prueba serolgica diagnstica, presenta anticuerpos contra un agente infeccioso (Ej.
VIH).
c) No se debe utilizar la nomenclatura numrica antigua (AB-I, A-II, B-III, O-IV) debido a que:
- su utilizacin confunde cuando debemos designar algn subgrupo ABO (Ej. A2, A3, B3).
d) Abreviaciones:
RECOMENDACIONES PARA
LA CLASIFICACIN SANGUNEA ABO
DESARROLLO
MUESTRA
La muestra adecuada para realizar la clasificacin
ABO es sangre completa con o sin anticoagulante (EDTA,
ACD). Los glbulos rojos deben ser suspendidos en
suero o plasma autlogo, o en PBS.
REACTIVOS
Sueros clasificadores o tarjetas de geles que contengan anti-A, anti-B y anti-AB (opcional). Debido
a la gran potencia de estos reactivos para aglutinar
directamente a sus antgenos respectivos, no es
necesaria la utilizacin del suero anti-AB, el cual
tiene su utilidad en la clasificacin ABO para recin
nacidos, el control de calidad y la resolucin de
discrepancias para el sistema ABO.
GR testigos A1 y B en la concentracin adecuada
para cada tcnica. Ej. Tubo: 2-4%, Gel: 0,8-1%,
Microplaca: 1-3%. Pueden ser de procedencia comercial o de fabricacin propia en el laboratorio. Si
la opcin es la ltima, los GR testigos A1 y B deben
ser controlados en su aspecto (libre de hemlisis,
coloracin alterada y cogulos) y evidenciar reacciones claras e inequvocas (especificidad) para los
antgenos que fueron fabricados. Debe existir un
procedimiento que asegure la calidad de los reactivos de fabricacin propia, avalado por el ISP.
Suero fisiolgico, PBS o solucin diluyente recomendada para la tcnica utilizada.
TCNICAS
Se recomienda la utilizacin de tcnicas manuales,
semiautomatizadas y automatizadas de tubo, sistema de
geles y sistema de microplaca. La utilizacin de tcnica
en lmina para la clasificacin ABO no constituye una
metodologa reconocida por el Instituto de Salud Pblica
de Chile, debido a lo siguiente:
PROCEDIMIENTO
Para lograr resultados confiables, seguros y de la
calidad esperada, debe realizar una lectura acuciosa
del inserto del reactivo o tcnica, para su cabal comprensin, debiendo seguir rigurosamente todas las
indicaciones establecidas en l. Tambin debe hacerse
cada vez que se cambia un reactivo o procedimiento.
Con lo anterior, el laboratorio debe definir el procedimiento a realizar, para la correcta aplicacin de la
tcnica. A partir del inserto debe elaborarse el Procedimiento Operativo Estndar, de acuerdo a la tcnica y
equipos a usar, describiendo al menos el sistema de
identificacin de muestras, los protocolos a usar, la
tcnica de lectura, la validacin del mtodo y el informe de resultados.
A modo de ejemplo se entrega el siguiente procedimiento tipo:
1. Numerar las muestras a clasificar y centrifugarlas
de acuerdo al tiempo estandarizado en la centrfuga
para obtener suero o plasma.
2. Preparar en un tubo una suspensin de los glbulos rojos a tipificar en su propio suero o plasma,
o en PBS. Esta suspensin se debe preparar de
acuerdo al inserto de la tcnica a utilizar: Ej: Tubo:
2-4%, Gel: 0,8-1%, Microplaca: 1-3%.
3. Para cada muestra a clasificar, se deben efectuar las
siguientes reacciones:
RECOMENDACIONES PARA
LA CLASIFICACIN SANGUNEA ABO
TUBO
SUERO O PLASMA
GLBULOS ROJOS
UTILIDAD
anti-A (comercial)
Muestra en concentracin
adecuada a la tcnica usada
anti-B (comercial)
Muestra en concentracin
adecuada a la tcnica usada
AB
anti-AB (comercial)
Muestra en concentracin
adecuada a la tcnica usada
GRA
Muestra
Testigos A1
GRB
Muestra
Testigos B
PA
Muestra
Muestra en concentracin
adecuada a la tcnica usada
* En la clasificacin para recin nacidos slo se debe realizar la clasificacin globular que incluye los 3 primeros
reactivos (anti-A, anti-B, anti-AB) agregando a esta clasificacin una prueba de antiglobulina directa.
1. Mezclar y centrifugar de acuerdo a la calibracin de la centrfuga para lectura, o a los tiempos y revoluciones
establecidas por el proveedor.
2. Observar en busca de aglutinacin y hemlisis, de acuerdo a la tcnica de lectura automatizada o manual que
recomiende el fabricante. En caso de no existir usar aquella tcnica que permita una mayor sensibilidad del
mtodo.
3. Registrar los resultados obtenidos de acuerdo a la siguiente tabla de intensidad de reaccin:
INTENSIDAD
DE REACCIN
SCORE O
PUNTAJE
4+
12
3+
10
2+
1+
+/-
Ausencia de aglutinacin
AGLUTINACIN
TUBO/MICROPLACA
AGLUTINACIN
GEL
RECOMENDACIONES PARA
LA CLASIFICACIN SANGUNEA ABO
INTERPRETACIN
La asignacin del grupo sanguneo debe realizarse de acuerdo a los resultados de la siguiente tabla:
REACCIN DE CLULAS CON
GRUPO ABO
ANTI-A
ANTI-B
GR A1
GR B
AB
Cualquier otra combinacin de resultados constituye una discrepancia, la que deber ser estudiada y aclarada
antes de informar el grupo sanguneo.
INFORME DE RESULTADOS
Actualmente existen mltiples terminologas que se utilizan para informar los resultados de la clasificacin ABO,
no necesariamente todas de base correcta, pero que se han instaurado y se utilizan masivamente. Ej: Grupo, grupo
sanguneo, clasificacin ABO.
Dado que la clasificacin de grupo sanguneo de utilidad clnica incluye el sistema ABO y el antgeno D del sistema Rh, la denominacin recomendada es:
CLASIFICACIN ABO Y RhD: A RhD positivo; A RhD negativo; O RhD positivosegn corresponda
al individuo clasificado.
CONTROL DE CALIDAD INTERNO
Se deben seguir los procedimientos de control de calidad recomendados por los fabricantes de reactivos y equipos. Cada laboratorio debe realizar control de calidad en las siguientes situaciones:
a) Con cada serie de clasificacin: los reactivos que se utilicen (sueros y GR testigos) deben dar reacciones
apropiadas e inequvocas, segn la siguiente tabla:
REACCIN POSITIVA
REACCIN NEGATIVA
Anti-A
Glbulos rojos A1
Glbulos rojos B y O
Anti-B
Glbulos rojos B
Glbulos rojos A1 y O
RECOMENDACIONES PARA
LA CLASIFICACIN SANGUNEA ABO
b) Con cada nuevo lote de reactivos: corresponde a la verificacin para asegurar la conformidad con los
criterios utilizados. Cualquier reactivo que no cumpla con las especificacin requeridas para los test, no se debe
utilizar.
c) Con cada nueva tcnica o tecnologa: adems de probar los reactivos como se describen anteriormente,
es conveniente realizar junto a este nuevo mtodo, si es posible, en paralelo con el mtodo que se estaba
usando, en el equivalente al trabajo de una semana. Esto deber asegurar que el mtodo es apto para su uso
rutinario.
d) Inspeccin visual
- Etiqueta debe contener informacin sobre: el nombre del producto, el nmero de lote (serie), la fecha de
vencimiento, las condiciones de almacenamiento y nombre del fabricante o su logo.
- Inserto del producto debe aportar los mismos detalles que los sealados en la etiqueta, pero explicitando
el mtodo recomendado para su uso, los controles de calidad a aplicar, los diluyentes recomendados etc., que
pueden ser necesarios, adems de cualquier limitacin o advertencias en el uso de ese reactivo. Debe incluir
tambin detalles de la composicin del reactivo, advertencias de bioseguridad, y aportar detalles para su uso
seguro.
Todos los reactivos no-celulares deben estar libres de hemlisis, precipitados, partculas o formacin de gel.
Especificidad: los reactivos deben dar reacciones positivas y negativas claras cuando es probado con el siguiente
nmero de muestras:
GLBULOS ROJOS
ANTI-A
ANTI-B
ANTI-AB
AB
Potencia: se debe evaluar el lmite de deteccin de reacciones especficas para cada suero en estudio (sensibilidad).
Se debe usar el siguiente nmero de muestras y ttulos mnimos aceptables:
GLBULOS ROJOS
ANTI-A
2 (128)
B
AB
2 (64)
ANTI-B
ANTI-AB
2 (128)
1 (128)
2 (128)
3 (64)
2 (64)
RECOMENDACIONES PARA
LA CLASIFICACIN SANGUNEA ABO
Avidez: se deben producir las reacciones observables en un tiempo dado. Es de utilidad para reactivos que sean
utilizados en lmina para reclasificar.
Se debe usar el siguiente nmero de muestras, las cuales deben aglutinar dentro de los primeros 2 minutos.
GLBULOS ROJOS
ANTI-A
B
AB
ANTI-B
2
1
ANTI-AB
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Roback JD, editor. AABB Technical Manual, 17th ed., Bethesda, Maryland, 2011.
American Association of Blood Banks. AABB Standards for Blood Bank and Transfusion Services, 25th
ed., Bethesda, Maryland, 2008.
Ministerio de Salud de Chile. Orientaciones para Centros de Sangre y Unidades de Medicina Transfusional, MINSAL, 2007.