Tinciones

Tincin o coloracin de bacterias

Los procedimientos que ponen de manifiesto diferencias entre las clulas bacterianas o
en partes una clula se conoce como tcnica de coloracin diferencial. Son algo mas
que elaboradas que la tcnica simple en la que las clulas se someten a una sola
solucin colorante o reactivo colorante.
Las tinciones se combinan qumicamente con el protoplasma bacteriano; si la clula no
ha muerto el proceso termina de hacerlo. El mtodo, por consiguiente, es bastante
drstico y puede producir artificios.
Las tinciones ms frecuente son sales. Las tinciones bsicas consiste en un catin
coloreado unido a un anin incoloro, mientras las cidas constituyen exactamente lo
contrario, unido a dos cationes. Las clulas bacterianas son abundantes en cidos
nucleicos, los cuales portan cargas negativas en formas de fosfatos.
Los colorantes cidos no tien a las clulas bacterias, y por tanto, pueden utilizarse
para teir al fondo con un color de contraste.
Las tinciones bsicas tien uniformemente en las clulas bacterianas, a menos que
antes de destruyan el ARN del citoplasma. Tambin se pueden usar tcnicas de tincin
especiales para flagelos, membranas celulares, paredes celulares, grnulos,
nucletidos y esporas.
Tincin acidorresistente
Las bacterias acidorresistentes son las que retiene la carbolficsina, aun cuando intente
descolorarlas con un mezcla de alcohol y cido clorhdrico. Las bacterias
acidorresistentes se tien de color rojo; el resto adquiere el color del colorante de
contraste en este caso el verde o azul.
Tincin negativa
Este procedimiento consiste en la tincin de fondo con un colorante cidos para dejar
las clulas incoloras en contraste. Comnmente se utiliza el colorante negro llamado

nigrusna. El mtodo sirve para observar bacterias o estructuras que difcilmente se

tien con las tcnicas directas.
Tincin de los flagelos
Los flagelos son estructuras demasiado finas para poder ser visibles en el microscopio
de luz. Sin embargo si se tratan con una suspensin coloidal inestable de sales de
cidos tnico para formar un precipitado denso en la pared celular y en los flagelos, se
pueden poner de manifiesto su presencia y disposicin en las clulas. De esta manera
el dimetro aparenta que la estructura aumento de tamao con fuscina bsica los hace
visibles en el microscopio ptico.
Tincin de la cpsula
La cpsula se pone de manifiesto mediante una coloracin negativa o una modificacin
de esta. Uno de los mtodos de tincin de la cpsula incluye el tratamiento de las
bacterias con un solucin caliente de cristal violeta seguido por un lavado con una
solucin de sulfato de cobre. El sulfato de cobre tambin imparte color al fondo y esto
resulta en que la clula y el fondo aparezcan teido en color azul oscuro mientras la
cpsula aparece de color azul plido.
Tincin del ncleo
Los ncleos se pueden teir por la tincin de Feulgen la cual es especifica para el ADN.
Tincin de la Esporas
Las esporas se observan de la manera mas simple como cuerpos refringentes
intracelulares en suspensiones de bacterias sin teir, la parte de las esporas
relativamente impermeable, las esporas comnmente se tien con verde de malaquita
y carbolfucsina o carbolfucsina
Tincin Gram.
Una caracterstica taxonmica importante de las bacteria es su respuesta a la tincin a
de Gram esta caracterstica parece ser fundamental, reaccin a la tincin se
correlaciona a con muchas otras propiedades morfolgicas en maneras relacionadas
filogenticamente. Microorganismo potencialmente grampositivo puede verse como tal
cuando concurren un conjunto de particular de condiciones ambientales en un cultivo
joven. El procedimiento para tincin de Gram se inicia con la aplicacin de un colorante

bsico el cristal de violeta. Luego se aplica una solucin de yodo en este momento
todas las bacterias de tien de azul. Continuacin las clulas se tratan con alcohol las
clulas grampsitiva contienen el cristal violeta-yodo y permanecen de color azul; en
cambio las gramnegativa se descoloran completamente por el alcohol. Por ultimo se
aplican un colorante de contraste safranina, que es un colorante rojo. De esta manera,
las clulas gramnegativas, previamente descoloradas, toman el colorante de contraste
y las clulas grampositivas ahora aparecen prpura.
La base de la reaccin diferencial de Gram es la estructura de la pared celular. Esta
tcnica diferencial es una de las de uso mas comn en microbiologa. El frote
bacteriano teido se somete a las soluciones siguientes en el orden en que se indica:
cristal violeta, alcohol y safranina o alguna otra solucin de contraste conveniente.
Las bacterias gramnegativas contienen un gran porcentaje mas alto de lpidos que de
las bacterias grampositivas. Las paredes celulares de la bacterias gramnegativas son
tambin mas delgadas que las grampositivas con alcohol extrae lpidos con lo cual se
aumenta la porosidad o permeabilidad de la pared celular gramnegativa. As el
complejo cristal violeta-yodo (CV-I) puede extraerse en los organismos gramnegativos y
de esta manera se destien las paredes celulares de las bacterias grampositivas, por
su composicin diferente (bajo contenido lpido) se deshidratan alcohol y se logra
extraer el complejo (CV-I).
En las bacterias (CV-I) queda retenido en la pared despus del tratamiento con etanol,
la cual se supone se supone causa una disminucin de en el dimetro de los poros
glucopptido o pptidoglicano de la pared celular. Las bacterias gramnegativas tienen
una cantidad mucho menor de ppidoglicano con ligaduras cruzadas menos extensas
que en las paredes de las bacterias grampositivas.

Colorantes

Introduccin
La finalidad de las coloraciones es, entre otras, hacer visibles los grmenes y revelar su
estructura. El estudio microscpico de un germen puede ser realizado de diversas
maneras, incluidas los preparados en fresco. Pueden adems utilizarse tcnicas
especiales como contraste de fases, el campo oscuro, la fluorescencia, etc.
Los colorantes son

sustancias que pueden conferir color a otros cuerpos.

La Coloracin es el proceso mediante el cual un cuerpo es teido por una sustancia

colorante, sin perder el color cuando es lavado con el disolvente utilizado al preparar la
solucin

colorante.

Los colorantes se comportan como compuestos cidos o bsicos y tiene la tendencia

de formar uniones electrostticas con los radicales ionizables de los tejidos.
Colorantes

Coloraciones

Clasificacion de los colorantes

Segn su origen:

Naturales: como la hematoxilina, el carmn y la orcena.

Sinteticos o artificiales: como el azul de metileno, la safranina, azul de anilina,

el naranja G, etc..

Segun sus propiedades qumicas

La mayora de los colorantes empleados en histologa actan como cidos o bases y
tienden a formar uniones salinas con radicales ionizables presentes en los tejidos.
Colorantes cidos: como por ejemplo la eosina, colorante cargado en forma negativa,
se une a componentes celulares cargados positivamente. Estos componentes cargados
positivamente se denominan acidfilos, porque tienen afinidad por los colorantes
cidos. Por ejemplo, estos colorantes se unen a grupos aminos de las protenas. Estas

protenas pueden pertenecer al citoesqueleto de la clula o hallarse en la matriz

extracelular. Debido al elevado contenido de protenas del citoplasma la eosina es un
excelente colorante citoplasmtico. La eosina se une tambin a las membranas
plasmticas, sin embargo, se desconoce la naturaleza qumica de esta unin. Las
clulas que presentan un gran desarrollo de membranas (muchas mitocondrias, mucho
retculo endoplasmtico liso, etc.) son sumamente acidfilas, o sea, se tien
intensamente con la eosina.
Colorantes bsicos: como por ejemplo el azul de metileno, colorante cargado
positivamente, se une a componentes celulares cargados negativamente. Estos
componentes cargados negativamente se denominan basfilos, porque tienen afinidad
por los colorantes bsicos. Por ejemplo, estos colorantes se unen al ncleo y ciertas
regiones

del

citoplasma.

Como caso particular, la hematoxilina no tiene carga, para teir un tejido se la une a un
mordiente que junto a la hematoxilina forman una laca. La laca es bsica y por lo tanto
se une a cargas negativas de la clula o matriz extracelular.
Colorantes neutros: son colorantes en los que la porcin cida y la bsica colorean.
Tien las partes bsicas de una clula de un color y las partes cidas de otro. Tien el
ncleo de un color y el citoplasma de otro. Ej. el eosinato de azul de metileno.
Colorantes indiferentes: tien aquellas estructuras o sustancias que los disuelven
ms fcilmente que el lquido en que estn preparados. Un ejemplo es el colorante
sudan, un colorante de lpidos.

ANAE

Las esterasas son un grupo de enzimas que hidrolizan esteres de cidos

carboxlicos, localizndose fundamentalmente en los lisosomas. Hay muchos tipos

de esterasas distintas que actan sobre diversos sustratos, pero cuyas actividades
se solapan, ya que muchas de ellas son capaces de hidrolizar el mismo sustrato.
Por ello, la subdivisin de las esterasas se basa en el tipo particular de ester que
hidrolizan ms eficientemente y en el efecto de diversos inhibidores enzimticos.
La tcnica utilizada en este caso revela todos los tipos de actividad esterasa ya
que se emplea como sustrato un ester simple, el alpha-naftil acetato, por ello se
denomina esterasa no especfica. Los enzimas liberan el alpha-naftol que se
revela con la sal diazoica pararrosanilina con nitrito sdico. Como en la mayor
parte de las tcnicas histoenzimticas, se emplean tejidos congelados y cortes
obtenidos en criostato, ya que el proceso de deshidratacin e inclusin inactivara
los enzimas cuya presencia se quiere demostrar.

RESULTADOS:

los

puntos

con

actividad esterasa aparecen de color

marrn rojizo.
Imagen: ganglio linftico de rata.

AZUL DE TOLUIDINA

Colorante que tie estructura basfilas, tales como la cromatina. Se puede

comportar como colorante ortocromtico (tie de color azul) o metacromtico
(tie de color violeta-rojo), dependiendo del pH y de la naturaleza qumica de la
sustancia teida.
Como colorante ortocromtico, se usa frecuentemente para teir tejido nervioso,
donde tie la heterocromatina y los grnulos de Nissl (acmulos de cisternas de
retculo endoplsmico rugoso de los somas neuronales, as como las fibras

nerviosas amielnicas y clulas de gla. Tambin se utiliza para la tincin de cortes

semifinos.
El azul de toluidina tie metacromticamente las estructuras ricas en
proteoglucanos sulfatados, como el heparn sulfato, presente - por ejemplo - en el
cartlago joven (condroblastos y matriz inmadura) y en los grnulos de las clulas
cebadas.

RESULTADOS:
Ortocromasia:

las

estructuras

basfilas

aparecen teidas de color azul.

Imagen: Soma neuronal del asta ventral de
la mdula espinal de rata.

RESULTADOS:
Metacromasia.

las

estructuras

metacromticas aparecen teidas de color

violeta.
Imagen:

CSF

de

filamento

primario

branquial de trucha arco iris.

CORTES SEMIFINOS

La inclusin de las muestras en resinas plsticas (como el Epon o la Araldita y

similares) permite la obtencin de cortes de grosor mucho ms delgado que en el
caso de la parafina. Aunque inicialmente esta tcnica de inclusin se us como un
mtodo para seleccionar regiones para la obtencin de cortes ultrafinos para la
microscopa electrnica de transmisin, hoy en da se utiliza frecuentemente para

la microscopa la ptica, ya que se obtiene una resolucin mucho mayor.

El grosor de los cortes semifinos vara entre 0,5 y 5 mm y se tien con diversas
tcnicas como el azul de toluidina o la hematoxilina-eosina. Usando resinas de
bajo punto de solidificacin es posible realizar tambin tcnicas histoqumicas y de
inmunomarcaje.

RESULTADOS: se puede apreciar la

mayor resolucin de la imagen.
Imagen: CSF de filamento branquial
de trucha arco iris (Az. toluidina).

FOSFATASAS
Son un grupo de enzimas hidrolticos que actan sobre los steres del
cido fosfrico. Algunas fosfatasas actan especficamente sobre un
sustrato determinado, por ejemplo la adenosina trifosfatasa, pero la
mayora actan sobre diversos sustratos y su clasificacin se basa en el pH
al cual presentan una actividad ptima, diferencindose dos grupos:

Fosfatasas alcalinas que exhiben actividad ptima a pH elevado (8,3 9,4)

Fosfatasas cidas que presentan actividad ptima a pH bajo (4,7 5,5)
Las fosfatasas cidas se localizan fundamentalmente en los lisosomas, mientras
que la localizacin subcelular de las fosfatasas alcalinas no est clara.
Para la demostracin histoqumica de ambos grupos de fosfatasas, se utiliza como
sustrato el naftol-AS-BI-fosfato al pH correspondiente. A continuacin, el naftol
liberado se demuestra con una sal de diazonio (Fast Red TR para la fosfatasa
alcalina y pararrosanilina con nitrito sdico para la fosfatasa cida). Tras la

reaccin, los ncleos se contrastan con hematoxilina. En el caso de la fosfatasa

cida, los cortes se deshidratan, se aclaran y se montan con Entelln o DPX. Sin
embargo, en el caso de la fosfatasa alcalina no es posible la deshidratacin, por lo
que las preparaciones se montan con glicerina gelatina.
Como en la mayor parte de las tcnicas histoenzimticas, se emplean tejidos
congelados y cortes obtenidos en criostato, ya que el proceso de deshidratacin e
inclusin inactivara los enzimas cuya presencia queremos demostrar.

RESULTADOS:
Fosfatasa alcalina: las clulas con
actividad fosfatasa alcalina aparecen en
rojo.
Imagen: pronefros de trucha arco iris.

Fosfatasa cida: las clulas con

actividad fosfatasa cida aparecen en
rojo-anaranjado.
Imagen: pronefros de pez gato.

GOMORI: PLATA

Tcnica que utiliza la reduccin de nitrato de plata, que se deposita sobre

estructuras argirfilas. Puede usarse sola o en combinacin con otras tinciones
nucleares o citoplasmticas.

RESULTADOS: las estructuras argirfilas,

como las fibras de reticulina (o reticulares)
se tien de negro.
Imagen: ganglio linftico de rata.

HEMATOXILINA EOSINA

Esta tcnica utiliza dos colorantes: en primer lugar los cortes se someten a la
accin de la hematoxilina, colorante bsico, que se une a cualquier sustancia que
tenga grupos cidos, tales como los grupos fosfato del ADN y a las protenas
nucleares que poseen carga negativa. A continuacin, los cortes se someten a la
accin de la eosina, colorante dbilmente cido, que colorea a las estructuras
bsicas.
RESULTADOS: las estructuras basfilas,
como los ncleos, se tien de color azul con
la hematoxilina, mientras que la eosina tie
de rosa ms o menos intenso estructuras
acidfilas, como las fibras de colgeno.
Imagen: conducto de Wolff de trucha arco
iris.

INMUNOPEROXIDASA INDIRECTA

Las tcnicas inmunohistoqumicas se basan en la especificidad de la reaccin

antgeno-anticuerpo, que permite la identificacin de una protena (el antgeno),

cuya presencia queremos demostrar, mediante su unin a un anticuerpo
especfico (anticuerpo primario) contra ella.
En este caso se ha utilizado el mtodo de inmunodeteccin indirecta en dos
etapas. En un primer paso, lo cortes se incuban con el anticuerpo primario, que se
une a su antgeno especfico all donde est presente. En un segundo paso, se
aplica otro anticuerpo (anticuerpo secundario) contra el anticuerpo primario. El
anticuerpo secundario est unido covalentemente (se dice que est marcado), en
este caso, al enzima peroxidasa (un enzima que cataliza la formacin de perxido
de hidrgeno, altamente oxidante). Finalmente, el producto de reaccin de este
enzima es revelado utilizando como sustrato 3,3diaminobencidina (DAB) que al
oxidarse forma un producto marrn insoluble. El segundo paso permite amplificar
el resultado de la reaccin, ya que varias molculas del anticuerpo secundario
marcado pueden unirse a cada molcula del anticuerpo primario. Como
consecuencia, el sitio donde est localizado el antgeno presenta ms molculas
del enzima y as resulta una mayor sensibilidad a la deteccin.
Se suelen emplear tejidos congelados y cortes obtenidos en criostato o
fijaciones suaves con formol e inclusin en parafinas de bajo punto de fusin, para
no desnaturalizar el antgeno. Tras la reaccin enzimtica los ncleos se
contrastan con hematoxilina.

RESULTADOS: los puntos o clulas donde se

localiza el antgeno aparecen de color marrn.
Imagen: ganglio linftico de rata.

NADP - DIAFORASA

Este enzima pertenece al grupo de las deshidrogenasas, enzimas capaces de

eliminar hidrgeno de los sustratos y transferirlo a otra sustancia aceptora. Las
diaforasas son los enzimas que catalizan la deshidrogenacin del NADH o del
NADPH. La tcnica histoenzimtica utilizada demuestra la presencia de la NADP
diaforasa en las mitocondrias de las fibras de msculo esqueltico. Se ha utilizado
tejido congelado de rata, a partir del cual se han obtenido cortes de 8 micras en
criostato. El sustrato utilizado ha sido NADPH y el NADP liberado se ha revelado
con la sal de tetrazolio NBT. Los cortes se montan con glicerina gelatina.

RESULTADOS:

mitocondrias

en

azul.
Imagen: msculo de rata.

PAS (REACCIN DEL CIDO PERYDICO- REACTIVO DE SCHIFF)

La reaccin de PAS nos revela todo tipo de carbohidratos (polisacridos, como el

glucgeno, mucopolisacridos, glucolpidos, glucoprotenas etc.). Se basa en la
reaccin con el reactivo de Schiff de los grupos aldehdo liberados de los grupos
vic-glicol presentes en los carbohidratos tras su oxidacin con cido perydico. El
reactivo de Schiff contiene fucsina bsica (o pararrosanilina), que en solucin
cida y en presencia de SO2 da lugar a una forma no coloreada (cido Nsulfnico). Este reactivo reacciona con los grupos aldehdo libres formando un
compuesto insoluble de color prpura. Esta tcnica se utiliza sobre cortes
obtenidos de tejido incluido en parafina o de tejido congelado.

RESULTADOS: carbohidratos en color

prpura.
Imagen: epidermis de trucha, Salmo
trutta fario.

PERLS

Esta tcnica sirve para detectar el hierro que se localiza en las clulas en forma
de grnulos de hemosiderina que es insoluble, pero no detecta el hierro contenido
en la ferritina que es hidrosoluble. Se utiliza sobre cortes obtenidos de tejido
incluido en parafina o de tejido congelado.
La reaccin de Perls se basa en la liberacin de los iones frricos asociados a
protenas mediante la accin del cido clorhdrico, a su vez, los iones frricos
liberados reaccionan con el ferrocianuro potsico formando un precipitado azul
verdoso de ferrocianuro frrico o azul de Prusia. Tras la reaccin, los ncleos se
contrastan con hematoxilina.

RESULTADOS: precipitados azul turquesa

en los puntos donde se han liberado los
iones frricos.
Imagen: bazo de rata.

ROJO-O AL ACEITE

El rojo-O al aceite sirve para visualizar los lpidos en preparaciones histolgicas.

Bajo el nombre de lpidos se rene un grupo heterogneo de sustancias que
agrupa a lpidos no conjugados, como los cidos grasos y el colesterol, y a lpidos
conjugados como fosfoglicridos, esfingolpidos o glucolpidos. Debido a que los
lpidos son disueltos rpidamente por el alcohol durante el proceso de
deshidratacin, para su visualizacin histolgica se utilizan cortes obtenidos por
congelacin.
El rojo-O al aceite pertenece al grupo de los lisocromos, sustancias capaces de
disolverse en los lpidos y colorearlos. Los lisocromos no son colorantes en
sentido estricto, sino que se trata de sustancias coloreadas, muy solubles en
lpidos, solubles tambin en sustancias no liposolubles, como alcoholes de baja
concentracin, y que no se unen a otras estructuras tisulares. Para su utilizacin
en la tcnica histolgica, se disuelven a saturacin en alcohol al 50% o al 70%.
Los ncleos pueden contrastarse con hematoxilina. Finalmente, el montaje de la
preparacin debe hacerse con glicerina-gelatina.

RESULTADOS:
lipdicas

las

aparecen

en

gotas
rojo.

Ncleos en azul.
Imagen: cultivo celular de bazo
de trucha arco iris.

Las

TRICRMICO DE GOLDNER (Masson-Goldner)

coloraciones

tricrmicas

usan

dos

ms

colorantes

para

teir

diferencialmente las diversas estructuras histolgicas, segn su basofilia /

acidofilia o por su apetencia por un colorante especfico. El mtodo del tricrmico
de Goldner (tambin conocido como Masson-Goldner) usa hematoxilina de Groat,
y los colorantes rojo fucsina Poneau (xilidina Poneau, o Poneau 2R), naranja G

(en solucin de cido fosfomolbdico) y verde luz (solucin actica). Fue diseado
por Masson y modificado por Goldner para distinguir las clulas de la matriz
conjuntiva.
RESULTADOS: estructuras basfilas (como
las cromatina) de color pardo-marrn a
negro, las estructuras dbilmente acidfilas
de rojo a naranja y las fuertemente
acidfilas (como las fibras de colgeno) de
azul a verde.
Imagen: glndula salival de rata.

El Microscopio
Microscopio, del griego: "mikro" = pequeo y "scope" = mirar (para mirar cosas
pequeas)
Un microscopio es un instrumento ptico compuesto de varias lentes que sirve para
observar objetos muy pequeos. En el microscopio electrnico, los rayos luminosos del
microscopio convencional son reemplazados por un haz de electrones (el aumento
puede alcanzar en este caso hasta 100 veces el del microscopio convencional).
Aunque la existencia de criaturas demasiado pequeas para ser vistas con el ojo haba
sido sospechada desde tiempo atrs, su descubrimiento real est ligado a la invencin
del microscopio.
La primera persona que vio los microorganismos con algn detalle fue el constructor de
microscopios aficionado Antoni van Leeuwenhoek (1632-1723); este holands us
microscopios simples construidos por l mismo (se dedicaba a pulir lentes para fabricar
sus microscopios que, como mucho, alcanzaran unos 300 aumentos). En 1677 escribe
una carta a la Philosophical Transactions of the Royal Society of London en la que
comunicaba sus recientes observaciones con los microscopios de su fabricacin.

MICROSCOPIO OPTICO

TIPOS,

CLASIFICACION

PARTES

BASICAS

MICROSCOPIO
El microscopio ptico es el primero que se invent Se emplea para aumentar o ampliar
las imgenes de objetos y organismos no visibles a simple vista.. Se trata de un
instrumento ptico que contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen
aumentada del objeto y que funciona por refraccin. El microscopio ptico puede ser
monocular, y consta de un solo tubo. La observacin en estos casos se hace con un
solo ojo. Es binocular cuando posee dos tubos. La observacin se hace con los dos
ojos. Esto presenta ventajas tales como mejor percepcin de la imagen, ms cmoda la
observacin

se

perciben

con

mayor

nitidez

los

detalles.

Est conformado por tres sistemas:

El sistema mecnico est constituido por una serie de piezas en las que van
instaladas

las

lentes

que

permiten

el

movimiento

para

el

enfoque.

El sistema ptico comprende un conjunto de lentes dispuestas de tal manera que

produce el aumento de las imgenes que se observan a travs de ellas

El sistema de iluminacin comprende las partes del microscopio que reflejan,

transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observacin a travs
del
El

microscopio.

sistema mecnico:

Brazo.- Es la parte de donde se debe sujetar, las pinzas el carro el tubo del
microscopio y el revlver. Adems sirve para trasladar el microscopio de un lugar a
otro.
Base o pie.- Es una pieza que proporciona estabilidad y sirve de soporte a todas las
partes del

microscopio.

Platina.- Es una pieza metlica, cuadrada, que tiene en su centro una abertura circular
por la que pasar la luz del sistema de iluminacin. Aqu se coloca el portaobjetos con
la muestra a

observar

Pinsas de sujecion.- Parte mecnica que sirve para sujetar la preparacin. La mayora
de los microscopios modernos tienen las pinzas adosadas a un carro con dos tornillos,
que

permiten

un

avance

longitudinal

transversal

de

la

preparacin.

Tornillo macrometrico: Permite hacer un movimiento rpido hacia arriba o hacia abajo
del tubo o la platina, y se utiliza para localizar la imagen a observar.
Tornillo micrometrico o de enfoque suaverevolver.- Parte mecnica de movimiento
giratorio que nos permite colocar en posicin cualquiera de los objetivos que se
encuentran en

l.

Tubo.- Parte mecnica que proporciona sostn a los oculares y objetivos.

Cremallera.- Permite que el movimiento de los tornillos macro y micromtrico sea de
mayor o

de

menor amplitud.

El

sistema ptico-.

Ocular.- Se localiza en la parte superior del tubo ocular y son las lentes que Capta y
ampla la imagen formada en los objetivos. Los primeros microscopios eran
monoculares, es decir, posean una sola lente. Los microscopios actuales poseen dos
oculares, uno para cada

ojo

se

les

llama binoculares.

Objetivos: Se encuentran incrustados en el revolver Son unos pequeos cilindros

colocados en el revolver que proporciona el poder de resolucin del microscopio y
determinan la

Existen

cantidad

tipos

total

entre los

de

aumento.

que

se

encuentran:

1.- La lupa (4 X) que sirve para hacer observaciones a bajo aumento.

2.- El objetivo seco dbil (10 X) que se utiliza para localizar la imagen que se va a
observar.
3.- El objetivo seco fuerte (40 X) aumenta la imagen anterior, para poder observar se
necesita primero acercar el objetivo al portaobjetos y posteriormente, enfocar el
objetivo hasta

que

aparezca

la

imagen.

4.- El objetivo de inmersin (100 X) es un lente especial para observar imgenes tan
pequeas como las bacterias. Y se requiere del aceite de inmersin para lograr una
buena

observacin.

La parte ptica del microscopio es la que determina el nmero de aumentos que

presenta la imagen observada .El aumento total que permite un microscopio ptico se
calcula multiplicando la magnificacin que producen el objetivo por la que producen los
oculares.
Num.

del

objetivo

nm.

de

ocular

nm.

de

aumentos

Ejemplo, si estamos usando un objetivo de 40x (aumenta 40 veces) y un ocular de 10x

(aumenta 10 veces), el resultado final ser de 400x, es decir, vemos la muestra
aumentada 400
Seco

fuerte

veces.
(40

x)

ocular

(10

x)

400

aumentos

Usando microscopios pticos avanzados se consiguen unos 1000-1500 aumentos

(objetivo de 100x ms oculares de 10x o 15x). Algunos microscopios pticos tienen
lentes internas que producen aumentos adicionales que tendremos que tener en
cuenta
El

para

calcular

la

magnificacin

de

la

imagen

que

se

observa.

sistema iluminacin:

La fuente luminosa consiste en un espejo o una fuente de luz elctrica que dirige un
haz de luz

hacia

el

condensador.

Condensador.- Es una lente de gran abertura que permite dirigir o condensar la mayor
parte de los rayos luminosos en la preparacin. En nuestro microscopio est integrado
en

la

platina

tiene

un

diafragma

unido

en

la

parte

inferior.

Diafragma: Existe un diafragma en el condensador, que elimina el exceso de

luminosidad

para

tener

una

buena

iluminacin

del

objeto

observar

Fuente de luz.- Para observar la muestra microscpica es necesario que sta se

ilumine con algn tipo de luz y nuestros microscopios cuentan con un foco que da
energa elctrica que dirige sus rayos luminosos hacia el sistema condensador.