CROMATOGRAFIA

GASEOSA
QUMICA ANALTICA III

Desarrollo del tema

Introduccin
Las muestras para cromatografa de gases
Principios bsicos
Esquema de un cromatgrafo de gases
Fase mvil
Sistema de inyeccin
Columnas y Fases estacionarias
Detectores
Aplicaciones analticas
Bibliografa

Introduccin: Desarrollo histrico

M. TSWEET (1903): Separacin de mezclas de

pigmentos vegetales en columnas rellenas con

adsorbentes slidos y solventes varios.
ter de
petrleo
mezcla de pigmentos

CaCO3

pigmentos
separados

1940

Introduccin:
Desarrollo
histrico

CGS rudimentaria
CGL propuesta por Martin y Synge)

Separacin de cidos orgnicos por CGL: primer cromatgrafo (Martin y James)

1950

Primer equipo comercial

(Griffin & George)
Detector por Densidad de
Gases (Martin y James)
Detector de Ionizacin de
llama (McWillian y Dewar)
Detector por Captura de
Eletrones (Lovelock y Lipsky)

1960

Columnas Capilares (Golay)

Modalidades y Clasificacin
Cromatografia
Lquida

FM = Lquido

Cromatografia
Gaseosa (CG)

FM = Gas

Slida

Cromatografa
Gas-Slido (CGS)

Lquida

Cromatografa
Gas-Lquido (CGL)

En CG la FE
puede ser:

Las muestras
para CG

Para que una sustancia pueda ser

arrastrada por um flujo de gas, debe poder
disolverse al menos parcialmente en dicho
gas

Qu mezclas pueden
ser separadas por
CG ?

Mezclas cuyos constituyentes sean

VOLTILES

DE FORMA GENERAL:
La CG es aplicable para la separacin y el
anlisis de mezclas cuyos componentes
tengan PUNTOS DE EBULLICIN de hasta
300oC y que sean trmicamente estables

Separacin de
mezclas por
interaccin
diferencial de
sus
componentes
entre una FASE
ESTACIONARIA
(lquido o
slido) y una
FASE MVIL
(lquido o gas).

Principios Bsicos

1 Depsito de
gases y controladores de presin
y caudal.

6
2

2 - Inyector.

3 - Columna
Cromatogrfica y
horno.
4 - Detector.
5

5 Amplificador
de la seal.
6 - Registrador.

Instrumentacin: el
cromatgrafo de gases

INFLUENCIA DE LA COMPRESIBILIDAD DE
LA FASE MVIL
Flujo volumtrico

F(cm 3 / min)

Debe existir una cada de presin a lo largo de la

columna para que la fase mvil fluya

p > po
i

El flujo msico (gramos de gas por unidad de

tiempo) es constante, por lo tanto

V <V o
i
El caudal volumtrico a lo largo de la columna

crece

F < Fo
i

INFLUENCIA DE LA COMPRESIBILIDAD DE
LA FASE MVIL
Se introduce el factor de correccin de

compresibilidad de James y Martin

3 ( )2 1
=
2 ( )3 1

se puede relacionar con parmetros

aerodinmicos de la columna

=
=
=

VOLMENES DE RETENCIN EN
CROMATOGRAFA GASEOSA

Volumen de retencin

Volumen de retencin ajustado

= ( ) =

Volumen de retencin corregido

= =

Volumen de retencin neto

= ( ) = ( )

Volumen de retencin especfico

K
V
K 273
273
273
Vg = N
= D S
= D
Tc Tc
w Tc
w
S
S
S
V

wS = masa de fase estacionaria

rS = densidad de la fase estacionaria
Tc = temperatura de la columna

Fase Mvil: Gas Portador

La Fase Mvil en CG NO interacta con la muestra
Slo la lleva a travs de la columna
Se la denomina GAS PORTADOR

Requisitos
INERTE No debe reaccionar com la muestra, la fase estacionaria ni
las superficies del instrumento.
PURO Debe estar exento de impurezas que puedan degradar la fase
estacionaria

Impurezas tpicas de los gases y sus efectos:

H2O, O2
hidrocarburos

Oxida/hidroliza algunas FE
Son incompatibles com un DCE
Ruido en la seal de un FID

Gas Portador
COMPATIBLE CON EL DETECTOR Cada detector demanda
un gas portador especfico para su mejor funcionamiento

Seleccin de Gases en Funcin del Detector:

DCT

He , H2

FID

N2 , H 2

DCE

N2, Ar + 5% CH4

Componentes
de una lnea
de gas
controladores
de presin y
caudal
dispositivos
para
purificacin
(trampas)

2
1
5

1 - Cilindro de Gas
2 - Regulador de Presin
3 - Trampa para eliminar impurezas
4 - Regulador de Lnea
5 - Regulador de Caudal
6 - Medidor de Caudal

Sistemas para introduccin de la muestra

Inyeccin instantnea

Los dispositivos para

inyeccin
(INYECTORES o
VAPORIZADORES)
deben permitir la
introduccin
INSTANTNEA de
la muestra en la
columna
cromatogrfica

t=0

t=x
Inyeccin lenta

t=0

t=x

1
2

1 - Septum
(silicona)
2 - Entrada de
gas portador

3 Bloque
metlico
calefaccionado
4 - Punta de la
columna
cromatogrfica

Inyector on-column
Convencional

Parmetros de inyeccin
TEMPERATURA DEL INYECTOR
Debe ser suficientemente elevada como para que la
muestra se vaporice inmediatamente, pero sin
descomponerse
Regla General
Tiny = 50oC por encima de la temperatura de
ebullicin del componente menos voltil
VOLUMEN INYECTADO
Depende del tipo de columna y del estado fsico de
la muestra

Parmetros de inyeccin
Muestras
Lquidas

Muestras
Gaseosas

empaquetada
= 3,2 mm (1/4)

0,2 L ... 20 L

0,1 ml ... 50 mL

capilar
= 0,25 mm

0,01 L ... 3 L

0,001 ml ... 0,1 mL

COLUMNA

Slidos:
comnmente se disuelven en un
solvente adecuado y se inyectan en
solucin

Inyeccin manual de muestras

COLUMNAS

RELLENAS
la fase estacionaria
lquida est
retenida en un
slido inerte
(soporte)

CAPILARES
la fase estacionaria
se fija sobre las
paredes interiores
del capilar

COLUMNAS

COLUMNAS RELLENAS
Dimetro interior entre 2 y 4 mm
Longitud de hasta 2 3 m
Eficiencia de 1000 2000 platos tericos/m
Para muestras poco complejas, 10 componentes.
La columna est rellena de un material slido (soporte), finamente
dividido y homogneo, recubierto por una capa de F. E. lquida.
Enrollada en forma helicoidal, para poder ser instalada en el horno
termostatizado.

COLUMNAS CAPILARES
Dimetro interior < 1 mm
Longitud de 5 50 m.
Eficiencia hasta 4.000 platos tericos/m
Para muestras complejas.
La fase estacionaria se depositada sobre las paredes
interiores del capilar

FASES ESTACIONARIAS
Conceptos Generales
FE
lquida
SUPORTE
Tubo capilar
Slido
de material
Para
inerteminimizar la prdida de FE lquida por
inerte
poroso
volatilizacin, se puede:

Entrecruzada: las
cadenas
polimricas son
qumicamente
ligadas entre s

Qumicamente
ligadas: las cadenas
polimricas se hacen
reaccionar sobre el
soporte

FASE ESTACIONARIA
Baja volatilidad.
Punto de ebullicin debe de ser por lo menos 100C
mayor que la temperatura mxima de la columna.
Estabilidad trmica.
Inercia qumica.
Los valores de factor de capacidad ( k ) y factor de
selectividad () de los analitos deben estar dentro
de los intervalos aconsejados.

FASE ESTACIONARIA
La separacin se debe a los diferentes
kdel analito entre la fase mvil y la
fase estacionaria.
Tiene que haber un cierto grado de
solubilidad de los compuestos con la
fase estacionaria.
Por ello, una caracterstica muy
importante de la fase estacionaria es la
POLARIDAD.
Los solutos se retienen ms en las
fases lquidas de polaridad parecida.

Familias de FE Lquidas
Cuatro grandes grupos estructurales:
PARAFINAS No polares; alta inercia qumica; son las menos
usadas. Principales: escualano (C30H62), Apiezon (grasas
para vaco).
POLISTERES steres de dialcoholes con dicidos. Polares;

altamente sensibles a la humedad y la oxidacin.

Principales: DEGS, EGA, EGS.

STERES METLICOS DE CIDOS

GRASOS
Columna:5%DEGS-PS s/ Supelcoport
100/120 mesh; 6 x 1/8
TCOL: 200oC (isotrmico)
Gas Portador: N2 @ 20 ml.min-1
Detector: FID
Muestra: 0,5 L de solucin en cloroformo
conteniendo 0,5 g de cada ster

Familias de FE Lquidas
SILICONAS (polisiloxanos) Las FE ms empleadas en CG. Cubren un amplio
rango de polaridades y tienen propriedades qumicas diversas.
R1

CH3
H3C

Si
CH3

Si
R2

CH3
O
n

Si

CH3

CH3

R1, R2 = cualquier
radical orgnico

- Enlaces Si-O altamente estables = elevada estabilidad trmica y qumica

de las FE.

- Siliconas se fabrican en gran escala para diversas aplicaciones =

minimizacin del costo del producto + tecnologa de produccin y
purificacin bien estudiada y conocida.

- Prcticamente cualquier radical orgnico o inorgnico puede ligarse

a la cadena polimrica = FE ajustables a separaciones especficas +
facilidad de inmovilizacin por entrecruzamiento y ligazn qumica a
soportes

Familias de FE Lquidas
FE derivadas de polidimetilsiloxano (PDMS) por sustitucin de
CH3 por radicales orgnicos, en orden creciente de polaridad:
Sustituyentes

Nombres comerciales

Observaciones

------

-----

SE-30, OV-1, OV-101, SP2100

Las ms apolares de la
serie. Poco selectivas

Carboranos

-----

Dexsil 300GC

Similares PDMS. Estables

hasta > 400C

Fenil 5%

-----

SE-52, OV-5, OV-73

Poco polar

Cianopropil
7%

Fenil 7%

OV-1701, SPB-7, CP-Sil

Moderadamente polar

Cianopropil
50%

Fenil 50%

OV-255, SP-2300, CP

Polar. Retiene dadores de

electrones.

Diferencias entre FE de composicin similar provenientes

de proveedores diferentes: pureza, viscosidad

Familias de FE Lquidas
Separacin de piridinas FE = 100 % cianopropilsilicona
1 - piridina
2 - 2-metilpiridina
3 - 2,6-dimetilpiridina
4 - 2-etilpiridina
5 - 3-metilpiridina
6 - 4-metilpiridina

Columna: CP-Sil 43CB (10 m x 0,10

mm x 0,2 m)
TCOL:110oC (isotrmico)
Gas Portador: N2 @ 16 cm.min-1

Detector: FID
Muestra: 0,1L de solucin 1-2% de
las piridinas en 3-metilpiridina

3 min

Familias de FE Lquidas
Separacin de fenoles - FE = fenilmetilsiliconas

50% Ph
50% Me

5% Ph
95% Me

FASE ESTACIONARIA: ORDEN DE

ELUCIN
En una fase
lquida
cualquiera, una
serie homloga
eluye segn
orden creciente
de NMERO DE
TOMOS DE
CARBONO.

En una fase
POLAR se
retendrn ms
los solutos
polares que
los no polares
a igualdad de
puntos de
ebullicin.

Si la fase es NO
POLAR, los solutos no
polares eluyen segn
orden creciente de
punto de ebullicin.

SOPORTE SLIDO
Carctersticas

Tipos de
soporte

Elevada
superficie
especfica
(m2/g)

Silceo
(tierras de
diatomeas)

Superficie
homognea

Sintticos
(vidrio,
tefln).

Estabilidad
trmica

Ladrillo
refractario

SOPORTE SLIDO: Tierra de diatomeas

secado

Esqueletos fsiles
de algas
microscpicas
(SiO2 + xidos
metlicos)

calcinacin
Fusin com
NaOH
Lavado cido
silanizacin

Chromosorb
Anachrom
Supelcoport
...

Etapas del anlisis cromatogrfico

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

Eleccin de la columna y fase estacionaria

Ajuste las temperaturas.
Ajuste del caudal de gas portador.
Se inyecta la muestra (1 l cuando son lquidas y 1
ml si son gaseosas).
Se vaporizan y son arrastradas hasta la columna.
Los componentes se fijan al inicio de la columna.
Se desplazan por la columna a velocidad diferente
Los solutos que salen de la columna, pasan al
detector y se obtiene el CROMATOGRAMA .

Parmetros
Tipo de gas
portador y
caudal

Columna y
dimensiones

Fase
estacionaria

Tipo de
detector

Temperaturas

Bloque de
inyeccin

Columna

Detector

TEMPERATURA DE LA COLUMNA
En muestras de puntos de ebullicin parecidos la
temperatura ptima es ligeramente superior al punto de
ebullicin medio de los componentes de la muestra.
Con puntos de ebullicin muy diferentes se emplea una
programacin de temperatura, que aumenta segn
avanza la separacin.
El aumento de la temperatura reduce los tiempos de
retencin.

TEMPERATURA DE LA COLUMNA

Los componentes ms
voltiles son separados
Los componentes menos
voltiles tardan en
eluir, saliendo como
picos mal definidos

Los componentes ms
voltiles no son
separados.
Los componentes menos
voltiles eluyen ms
rpidamente

Programacin de temperatura
Se consiguen buenas

separaciones de los
componentes de la
muestra en menor
tiempo

TFIN Temperatura Final

tINI Tiempo Isotrmico Inicial
tFIN Tiempo Final del

Programa
R Velocidad de calentamiento

Mide la variacin
de alguna
propiedad fsica
del gas portador
originada por la
elucin de los
compuestos.

DETECTOR

Conectado a un
registro grfico
de la seal.

Su temperatura
ha de ser mayor o
igual que la de
columna para
evitar la
condensacin de
algn compuesto.

Detectores
Respuesta
continua y
reproducible a
los cambios de
concentracin
del compuesto

Respuesta
adecuada al
mayor nmero
posible de
muestras

Buena
estabilidad.

Alta sensibilidad
(relacin entre
respuesta del
detector y la
magnitud fsica
detectada)

Tiempo de
respuesta corto

CARACTERSTICAS

Reactividad nula

Dispositivos
que generan
una seal
elctrica
proporcional
a la cantidad
de analito
eludo

4 utilizados en la mayor parte de las

aplicaciones
TCD
Detector de
Condutividad
Trmica

ECD
Detector de
Captura
Electrnica

DETECTORES:

FID
Detector de
Ionizacin
en Llama

MS
Detector Espectromtrico
de Masas

Definiciones Generales

DETECTORES: Clasificacin

UNIVERSALES
Generan seal para
cualquier sustancia
eluida

SELECTIVOS
Detectan
solamente
sustancias con
determinada
propiedad
fisicoqumica

ESPECFICOS
Detectan sustancias que
poseen determinado
elemento o grupo
funcional en sus
estructuras

DE TECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA

(TCD)
Se basa en los cambios en la conductividad trmica de la
corriente de gas portador debido a la presencia de molculas
del analito.
Responde a la concentracin del soluto en el gas portador

No es destructivo.
La conductividad trmica del gas portador ha de ser elevada
(He, H2) 6 a 10 veces mayor que la mayora de los compuestos
orgnicos.

DE TECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA

(TCD)

Sencillez
Amplio rango lineal
Respuesta a todo tipo de compuestos
No destructivo
Baja sensibilidad (10 10-8 g soluto/ml) que impide su empleo con
columnas capilares, debido al pequeo tamao de las muestras.

DE TECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA

(TCD)
PRINCIPIO
Variacin de la conductividad trmica del gas
cuando eluye un analito

La cantidad de transferencia de calor

entre un cuerpo caliente y un cuerpo frio
depende de la condutividad trmica del
gas en el espacio que separa los cuerpos
Si la condutividad trmica del gas
disminuye, la cantidad de calor
transferido tambin disminuye y el
cuerpo caliente se enfra.

DE TECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA

(TCD)
Celda del TCD:

1 Bloque metlico (acero)

2 Entrada de gas portador

3 Salida de gas portador
4 Filamento metlico (aleacin W-Re)

4
2

calefaccionado

5 Alimentacin de corriente elctrica

para calentar el filamento

DE TECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA

(TCD)
Los filamentos del TCD estn montados sobre un puente de
Wheatstone que transforma la diferencia de resistencia
cuando la elucin de la muestra produce una diferencia de
voltaje

TCD: Aplicaciones
Separacin y cuantificacin de compuestos que no generan
seal em otros detectores (gases nobles, gases fijos)

Separacin de Gases Fijos e

Hidrocarburos
Columna: CP Sil 5CB (50 m x 0.32 m
x 5 m)
Gas Portador: He @ 3 ml.min-1
TCOL: 40C
1 N2

2 CH4 3 CO2 4 n-C2

5 NH3 6 n-C3 7 i-C4 8 n-C4

DETECTOR DE IONIZACIN DE LLAMA

(FID)
Es uno de los ms empleados.
Forma una llama que quema y ioniza los
compuestos separados en la columna.
Insensible a grupos funcionales como C=O, OH,
NH que originan en la llama pocos iones.
Elevada sensibilidad (10-13 g soluto/mL)
Destructivo

FID: PRINCIPIO DE FUNCIONAMIENTO

Formacin de iones cuando un compuesto se
quema en una llama de hidrgeno y oxgeno
El efluente de la columna se
mezcla con H2 y O2 y se
quema. Como en una llama
de H2+ O2 no existen iones,
no circula corriente
elctrica.
Cuando un compuesto
orgnico eluye, l tambin
se quema. Como en su
combustin se forman
iones, la llama pasa a
conducir la corriente
elctrica

FID: SELECTIVIDAD

SELECTIVO
Para sustancias
que contienen
uniones C-H en
su estructura
qumica.

UNIVERSAL
Virtualmente
todas las
sustancias
analizables por
CG son orgnicas

Compuestos que
NO producen
respuesta
Gases nobles, H2,
O2, N2, CO, CO2,
CS2, CCl4,
perhalogenados,
NH3, H2O,
HCOOH, HCHO

DETECTOR DE CAPTURA ELECTRNICA

(ECD)
Se basa en la captura de los electrones libres
procedentes de la ionizacin del gas portador,
disminuyendo la intensidad de corriente.
El ms sensible (10-14 g soluto/mL).

No destructivo.
Su aplicacin principal es para compuestos
organoclorados (pesticidas, herbicidas)
herbicidas)

ECD: PRINCIPIO DE FUNCIONAMIENTO

Supresin de un flujo de electrones lentos causada

por la absorcin de stos por especies electroflicas

Un flujo continuo de
electrones lentos se establece
entre un nodo (fuente
radioactiva -emisora) y un
ctodo

Al pasar una sustancia

electroflica algunos
electrones son absorbidos,
disminuyendo la corriente
elctrica.

APLICACIONES DEL ECD

~250 fg de cada
analito

PESTICIDAS
1 tetracloro-m-xileno
2 - BHC
3 Lindano
4 Heptachlor
5 Endosulfan
6 Dieldrin
7 Endrin
8 DDD
9 DDT
10 Metoxychlor
10 decaclorobifenilo

EL DCE ES EL DETECTOR DE ELECCIN PARA ANLISIS DE

TRAZAS DE ORGANOHALOGENADOS Y SIMILARES

ACOPLAMIENTO CON OTRAS TCNICAS

Proporciona una herramienta muy potente en la
identificacin de los componentes de una mezcla
compleja
La tendencia actual es utilizar como detectores
selectivos, tcnicas instrumentales como
Espectrometra de Masas y Espectroscopa Infrarroja
Todo ello ayudado de una computadora para el
almacenamiento de los datos espectrales, y posterior
presentacin como espectros y cromatogramas

ANLISIS CUALITATIVO

Conceptos Generales
Aplicaciones
Cualitativas de
la
cromatografa

Identificacin individual de las especies

presentes en la muestra

Determinacin de la identidad de la
muestra como un todo

Fuentes de Informaciones Cualitativas

RETENCIN Uso de datos de retencin de un analito para su
identificacin

DETECCIN

Empleo de detectores que proveen informacin

estructural sobre las sustancias eluidas

ANLISIS CUALITATIVO
Datos de Retencin

Naturaleza de la fase estacionaria y su %

en el relleno

El tiempo de
retencin, tR es
funcin de:

Longitud de la columna
Naturaleza del gas portador y su caudal
Temperatura de la columna
Tamao de la muestra

A condiciones experimentales constantes,

el tR y el VR son caractersticos de cada
sustancia

ANLISIS CUALITATIVO
Tiempos de Retencin

Interacciones analito/FE

tR = f

Presin de vapor del analito

Condiciones de operacin (TCOL, FC ...)

La identificacin por tR es muy poco confiable, debido a:

Dependencia con FC y TCOL Variaciones en estas condiciones
afectan sensiblemente los tR
TCOL = 0,1%
VARIACIN DE
1% EN tR

FC = 1%
Sobrecarga de la columna Un aumento excesivo en la masa de
material eluido deforma el pico cromatogrfico y altera su tR
Una vez fijadas las condiciones operatorias, el tiempo de
retencin ajustado de un analito es una constante

ANLISIS CUALITATIVO
Datos de Retencin Relativa
Se comparan datos sobre la misma columna

Se miden datos de retencin relativa

D(i)
R(i) =
r
=
i, std t
R(std) K D(std)
i= sustancia incgnita
std= sustancia standard
ri,std slo depende de la temperatura de la columna y de la fase
estacionaria
Recopilacin de datos de retencin relativa Compilation of Gas
Chromatographic Data, ASTM Data Series Publication

ANLISIS CUALITATIVO
Tiempos de Retencin
Los datos de tR son adecuados para identificaciones simples, por ejemplo,
controles de calidad
En ese caso, ya se sabe qu componentes tiene la mezcla y generalmente
hay pocos componentes presentes

MUESTRA

PATRN

Comparacin de
los
cromatogramas de
la muestra y de
una solucin
patrn del analito
supuesto

OTRAS APROXIMACIONES AL ANLISIS

CUALITATIVO
Comparacin de tR usando dopaje de la muestra con el analito
supuesto: aumenta la confiabilidad de identificacin.

En una muestra compleja la

incerteza en la medida de los tR
puede llevar a una identificacin
errnea

La comparacin con el
cromatograma de la muestra
dopada permite una
identificacin ms confiable de
la sustancia desconocida

OTRAS APROXIMACIONES AL ANLISIS

CUALITATIVO: Grficos de Retencin
Las series homlogas presentan caractersticas retentivas que
facilitan la identificacin de las sustancias
Graficando log tR vs. nmero de tomos de C (sobre una dada
columna y a una temperatura dada) se obtiene una recta
7
6
log tR

5
4
3
2
1
0
4

6
7
8
N tomos de C

10

La ubicacin sobre una recta dada, permite determinar a qu

familia pertenece
La ubicacin sobre la recta permite decidir qu componente de la
serie es

ANLISIS CUALITATIVO
ndice de Retencin de Kovts
FUNDAMENTO Los tR (en condiciones isotrmicas) para una serie homloga de
compuestos dependen logartmicamente del nmero de tomos de carbono de la
cadena.

Separacin isotrmica de
una mezcla de n-alcanos (nC4, n-C5, ... n-C16)

Grfico de log(tR) en funcin

del nmero de tomos de
carbono del analito nC es
LINEAL

ANLISIS CUALITATIVO
ndice de Retencin de Kovts
El ndice de retencin de Kovts I para un analito viene definido por:
tR (A) Tiempo de retencin ajustado del
analito A
tR (N) Tiempo de retencin ajustado del
n-alcano con N carbonos
tR (n) Tiempo de retencin ajustado del
n-alcano con n carbonos (n = N + 1)

Puede calcularse con

la siguiente expresin

log () log ()

= 100 + 100
log () log ()

Ej.: un analito con I = 874 tendr un tiempo de retencin ajustado

equivalente al de un n-alcano hipottico con 8,74 tomos de carbono

ANLISIS CUALITATIVO
ndice de Retencin de Kovts
Para las n-parafinas, I es 100 veces el nmero de tomos de C en

tR, columna 1

tR, columna 2

pentano

hexano

tolueno

heptano

cualquier columna y a cualquier temperatura

Variacin del ndice al pasar de una fase

estacionaria no polar a una polar

Fijando 2 fases se pueden establecer incrementos individuales

correspondientes a ciertos grupos funcionales (Kovts)
Rohrschneider: I consta de contribuciones de 2 tipos:

Dependiente del soluto y que

no vara al cambiar de FE

Especfico de la FE y que
puede calcularse a partir
de un grupo bien
seleccionado de solutos

McReynolds: cambi las sustancias de prueba que empleaba

Rohrschneider

Variacin del ndice al pasar de una fase

estacionaria no polar a una polar
Experimentalmente se encuentra que I puede
expresarse como:

I j = I j I SQ =a x +b y +c z +d u +e s
i j i j i j i j i j
i i i
donde:
j = fase estacionaria
i = soluto
SQ = escualano (C30H62), fase estacionaria no polar, en base
a la cual se construye la escala
ai, bi, ci, di, ei = parmetros caractersticos del soluto i,
independientes de la fase estacionaria
xj, yj,zj, uj, sj = parmetros caractersticos de la fase
estacionaria j

ANLISIS CUALITATIVO
ndices de McReynolds
Sustancia
Smbolo
Grupo
Aromticos,
benceno
x
olefnicos
Alcoholes,
1-butanol
y
fenoles, cidos
Cetonas, teres, Metil-n-propilcetona
z
steres,
aldehdos
Nitrocompuestos,
nitropropano
u
nitrilos
Bases,
piridina
s
heterociclos
aromticos

Sobre la fase estacionaria j y sobre escualano se miden

los ndices de estos solutos

ANLISIS CUALITATIVO
ndices de McReynolds
Se definen las siguientes relaciones:

ANLISIS CUALITATIVO
ndices de McReynolds
Se usa para caracterizar fases estacionarias
Muy til con el fin de decidir si dos fases
estacionarias tendrn un comportamiento separativo
equivalente o
cul ser la mejor fase para un
determinado grupo funcional
Fase
estacionaria
Escualano
SE-30
OV-7
Carbowax
20M

Tmxima
150
350
350
250

0
0
0
0
0
15 53 44 64 41
69 113 111 171 128
322 536 368 572 59

ANLISIS CUALITATIVO
Mtodos de Deteccin Cualitativos
Mtodos de deteccin que proveen informaciones cualitativas
sobre los analitos eludos:
Cromatografa Gaseosa con Deteccin Espectromtrica de Masas (CGEM)
Cromatografa Gaseosa con Deteccin Espectromtrica por Emisin
Atmica (CG-EA)
Cromatografa Gaseosa con Deteccin Espectromtrica por Absorcin
Infra-Rojo (CG-IR)

ANLISIS CUALITATIVO
Mtodos de Deteccin Cualitativos
Combinacin de mtodos cromatogrficos y espectroscpicos

Tcnicas acopladas
El cromatgrafo separa la muestra
en sus componentes
El mtodo espectrocpico brinda
informacin cualitativa de cada uno
de los componentes

respuesta

ANLISIS CUALITATIVO
Mtodos de Deteccin Cualitativos

tiempo

La combinacin de los datos en tres dimensiones

brinda informacin cuali-cuantitativa

ANLISIS CUALITATIVO
Espectrometra de Masas
PRINCIPIO La muestra es fragmentada y ionizada segn un
patrn caracterstico de la especie qumica.
1 Molculas de la muestra

son
bombardeadas
por
electrones (electron impact
= EI) o iones (chemical
ionization = CI):

ABCDE + e- ABCDE.+ + 2 e-

ABCDE.+ AB. + CDE+

2 El in formado se fragmenta:

ABCDE.+ AB+ + CDE.

ABCDE.+ A+ + BCDE.

ANLISIS CUALITATIVO
Espectrometra de Masas
3 Los fragmentos inicos formados son separados magnticamente de

ABUNDANCIA

acuerdo con sus masas moleculares y contados:

El grfico del nmero de

iones formados en funcin
de la relacin Masa / Carga
de los iones es el
ESPECTRO DE MASAS del
analito
MASA / CARGA

ANLISIS CUALITATIVO
Espectro de Masas

20

40

60

m/Z

80

100

120

ACOPLAMIENTO GC-EM
Interfase cromatgrafo - espectrmetro:
EM

CG

Vaco
Cmara
de Ionizacin

Separador Molecular
El gas portador liviano (He)
difunde ms rpidamente
que el analito y tiende a ser
drenado por el vaco.

Interfase Capilar Directa

Con columnas capilares la
baja cantidad de gas portador
puede ser drenada por el
sistema de vaco.
Columna
Capilar

ANLISIS CUALITATIVO
Espectrmetro de Masas
1

Cmara de Ionizacin

Los electrones generados por un filamento

bombardean la muestra. Los fragmentos ionizados (carga +1) son repelidos por
el electrodo positivo y conducidos al separador magntico.

2 Salida de Vaco
3 Separador

Todo el interior del EM debe estar con alto vaco (natm).

Magntico

Por accin del campo magntico slo algunos

iones con determinada relacin Masa/Carga pueden atravesar esta zona del
equipo.
Detector Una vlvula fotomultiplicadora o un fotodiodo genera una seal
elctrica proporcional al nmero de iones que inciden sobre este elemento.

CG-EM: GENERACIN DEL

CROMATOGRAMA
Los espectros de masas completos son colectados y
archivados a intervalos regulares de tiempo
La generacin del cromatograma a partir de los espectros
puede hacerse segn:
CROMATOGRAMA DE IONES TOTALES (TIC = Total Ion
Chromatogram)

Para cada espectro, el nmero total de iones detectados en el rango

de masas barrido es sumado y graficado en funcin del tiempo,
generando el cromatograma.

MONITOREO DE UN ION SELECCIONADO (SIM = Single

Ion Monitoring)

Se selecciona un fragmento resultante de la especie de inters. Se

genera el cromatograma graficando el nmero de iones con la masa
de ese fragmento detectados en funcin del tiempo.
TIC

SIM

Universal

Selectivo
Mayor Sensibilidad

CG-EM: GENERACIN DEL

CROMATOGRAMA
Ejemplo de una muestra analizada por CG-EM

TIC
Aparecen los picos
correspondientes a todas
las sustancias eludas

SIM (m/z = 149)

Cromatograma construdo a
partir de los mismos datos
anteriores, pero usando slo
fragmentos con masa = 149

ANLISIS CUALITATIVO
Identificacin de Analitos
1 Se registra el espectro de masa que corresponde a un analito

CUENTAS

(usualmente se selecciona el mximo).

CUENTAS

MASA / CARGA

TIEMPO

Interpretacin manual del espectro y/o comparacin

automtica con la biblioteca de espectros del equipo.

ANLISIS CUALITATIVO
Identificacin de Analitos
Bsqueda automtica en la biblioteca de espectros: comparacin
estadstica ( Probability Based Matching )
ESPECTRO
DESCONOCIDO
BIBLIOTECA DE
ESPECTROS
PBM de un analito
desconocido (1dodeceno)

Lista com posibles

candidatos + porcentaje
de confiabilidad

PBM
#
1

NOMBRE
1-dodeceno

FRM. %
C 12H 24 99

1-dodecanol

C 12H 26O 91

ciclododecano

C 12H 24

91

2-dodeceno

C 12H 24

66

1-undeceno

C 11H 22

35

8-metil-3-undeceno

C 12H 24

32

ANLISIS CUALITATIVO
Identificacin de Analitos

La identificacin es poco confiable en el caso de

espectros muy simples

LIMITACIONES:

Est limitada por el tamao de la base de datos

(NIST = 66.000 espectros)

Existen diferencias entre los espectros generados por

diversos EM