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Mol-Sieve Trampa
Restrictor
Regulador
Puerto de inyeccin
Detector
Electrometro
PC
Columna
Gas de Arrastre
Hidrogeno
Aire
Definiciones
Gases
Gas de arrastre Gas presurizado que se usa para transportar la muestra a travs del sistema. Gases del detector Gases de soporte de ciertos detectores, ejm. FID. Introduccin de muestra Introduce la muestra a la corriente del gas de arrastre Columna Permite la separacin de los componentes. Detector Reconoce y responde a los componentes de la muestra tal como eluyan de la columna
Adquisicin de data
Convierte la seal del detector en un cromatograma y provee la determinacin manual y automtica de la identidad y cantidad de los componentes de la muestra.
Rol de la muestra
La muestra determina la configuracin del instrumento: Tipo de gas de arrastre Tipo de puerto de inyeccin Tipo de columna Tipo de detector Tipo de adquisicin de data
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Cromatograma Tpico
Tiempo de retencin
Parmetro usado para identificar los componentes de una muestra. Area de pico Parmetro usado para medir la cantidad de los componentes de una muestra.
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TIPOS DE COLUMNAS
EMPACADA = 3 a 6 mm L = 0,5 m a 5 m Rellena con slido pulverizado (FE slida o FE lquida depositada sobre las partculas de relleno)
CAPILAR = 0,1 a 0,5 mm L = 5 m a 100 m Paredes internas recubiertas con una capa fina (fraccin de m) de FE lquida slida
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Escogidos considerando el tipo de detector que ser usado Inerte Seco Puro
Tipos de Inyeccin
Inyeccin con jeringa Manual Automtica
Inyeccin con vlvula Vlvulas de muestreo de gases Vlvulas de muestreo de lquidos Dispositivos auxiliares de muestreo Purga y trampa Headspace Concentradores
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Septa
Liner G lass Insert
Septum
Carrier G as
G raphite Ferrule
Se evitan problemas: - Cambiandolos con regularidad - Apretndolos a mano - Usando purga de septum
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Autoinyector
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Purga y Trampa
Son inyectores diseados para anlisis ambiental de componentes voltiles. El sistema usa una combinacin de un headspace dinmico, una trampa adsorbente y un proceso de desorcin trmica. Consideraciones ms importantes: Influencia del agua en la forma del pico y la retencin. Ensanchamiento del pico debido a la lenta desorcin (minimizada con tcnicas de fase estacionaria y de enfriamiento criognico) Generalmente se usa con columna del tipo megabore en puerto de inyeccin empacado. Puede ser usado con columna capilares
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Puertos de Inyeccin
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El puerto de inyeccin es un dispositivo usado para introducir la muestra dentro de la columna. Tipos de puertos de inyeccin:
Empacado Empacado con purga de septum Capilar split/splitless Capilar split Cool on colum (COOC)
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Carrier Gas
Graphite Ferrule
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El modo split fue el primer sistema de introduccin de muestra desarrollado para GC capilar
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Empaque Absorbente (GSC) - Molecular Sieve, Porous Polymer Poros con gran rea superficial
Columnas Capilares
Gas de Arastre
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Gas de Arrastre
Fase Lquida
Soporte Slido Muy poroso con gran rea de superficie
Columnas Capilares
Fase Lquida
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Similar disuelve similar " o Polar interacciona con polar Ejemplo: Los alcoholes son polares
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Pico Frontal debido a la saturacin de la columna - Diluir la muestra (Split) - Incrementar el espesor de la pelcula (Capacidad de la columna)
Pico Coleado interaccin anormal de la muestra con la columna o en el puerto de inyeccin. - Usar liners y columnas desactivados - Eliminar volumen muerto en el puerto de inyeccin.
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GOOD POOR
GOOD POOR
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+C
HETP
MOLECULAR B{ DIFFUSION
} A EDDY DIFFUSION
opt
La eficiencia es una funcin de la velocidad lineal del gas de arrastre o flujo. El mnimo de la curva representa el menor valor de HTEP, esto
equivale a una mejor eficiencia.
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Cg 1e 7 C a t 1 7 5 d
H E T P 0 . 8 ( m m )
0 . 6 0 . 4
H e l i u m
H y d r o g e n 0 . 2
9 0 10 0 2 3 0 5 4 0 6 0 0 7 0 8 0 0 . 00 . 1. 3 5 00 . 2. 4 68 0 . 0 .
Aa ( c v ey e rim rnt/ a Vs ge e e l c Lc ) i o Fm l ai ol ) wn R t/ e ( s m
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Flujo ptimo
Generalmente la siguiente gua puede ser usadas para encontrar los valores ptimos de flujo para una columna:
Packed Column Columna empacada
Optimum Carrier Column Diameter 1/4" 1/8" Flow rate 50-60 ml/min 20-30 ml/min Optimum Carrier
Linear Velocity
2.6 - 3.2 cm/sec 4.2 - 6.3 cm/sec
Columna capilar
Series 530 (megabore) 3-5 ml/min 1-3 ml/min .5-1 ml/min 0.2-0.5 ml/min 22 - 38 cm/sec 20 - 41 cm/sec 21 - 32 cm/sec 42 - 106 cm/sec
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Usar diametros internos de columna menores. Usar menor % de la fase estacionaria. Usar menos muestra. Usar una columna ms larga. Usar programacin de temperatura.
NOTA: La eficiencia de la columna es dependiente de una buena introduccin de la muestra, esta debe ser rpida para evitar ensanchamiento de bandas.
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Son 10 veces ms efectivas que las columnas empacadas. Son 10 veces ms largas que las columnas empacadas Exhiben 100 veces ms platos que las columnas empacadas. Tienen menos capacidad que las columnas empacadas. Exhiben la misma selectividad que las columnas empacadas. Proveen una mejora significativa de la resolucin, incrementado el nmero de platos tericos disponibles.
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Tubera de slica fundida con capa interna de material absorbente. Alumina/KCI Molecular Sieve Polmero poroso (Similar a Porapak)
Ventajas Anlisis de sustancias inertes o de bajo peso molecular a temperatura ambiente. Desventajas Baja eficiencia No muy inerte Problemas de estabilidad y reproducibilidad con el tiempo.
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Cuidado de la columna
Columnas capilares: Preacondicionamiento de columnas nuevas para remover trazas de solvente residual. Escoger el acondicionamiento considerando la temperatura: Verificar la temperatura mxima de la columna indicada por el fabricante. Suficientemente alta para remover voltiles. Suficientemente baja para mantener bajo sangrado y larga vida. Baja temperatura requiere mayor tiempo de acondicionamiento. Desconectar la columna del detector y verificar flujo a travs de ella. Se puede acondicionar: Exponiendo toda la noche la columna a una temperatura por debajo de la mxima permitida. Programacin repetida a altas temperaturas hasta mejorar la eficiencia de la columna.
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Columna Empacadas:
Se acondicionan: Desconectando la columna del detector y verificando flujo a travs de la columna. Ajustar la temperatura del horno a 10 C por arriba de la mxima temperatura del horno, pero por debajo de la mxima permitida por la fase. Acondicionar toda la noche.
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Inyecciones Splitless y on-column pueden desplazar la fase lquida de los primeros uno o dos metros de la columna. Contaminacin de matrz debida a gas de arrastre de mala calidad o inadecuada preparacin de la muestra. Fases de silicona son resistentes al agua pero se afectan con muestras cidas. Fase de polietilenglicol es fcilmente oxidada por oxgeno presente en el gas de arrastre y pueden tener vida corta con muestras acuosas.
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Almacenamiento de la columna
La columna debera ser cuidada cuando no esta en uso. Hay dos consideraciones importantes :
Almacenar la columna de modo que no se fuerce. Si se fuerza, la tensin de la columna despus de calentarla puede ser suficiente para romperla. Sellar los terminales de la columna para proteger la fase lquida de la difusin de oxgeno y contaminantes.
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La paciencia del operador (Tiempo de retencin de los ltimos picos). Ensanchamiento de los ltimos picos. La temperatura ms baja de la fase lquida. Sola pocas fases tienen lmite.
La temperatura isotrmica ms alta es determinada por: La temperatura lmite de la fase lquida. Estabilidad de la muestra. El tiempo de retencin del primer componente.
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Se usa cuando los componentes tienen un gran rango de puntos de ebullicin (> 100 C). Reduce el tiempo de anlisis. Produce picos ms angostos. Produce mejor exactitud cuantitativa, especialmente en los componentes que tardan en eluir. Incrementa el sangrado de la columna produciendo una linea base distorcionada. Disminuye la velocidad lineal con el incremento de la temperatura en sistemas con columnas capilares.
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DETECTORES
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Detector Un detector cromatogrfico es un dispositivo que determina la presencia de un componente diferente al gas de arrastre y convierte esa informacin en una seal elctrica.
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Tipos de detectores
Breve Descripcin
TCD
La temperatura del filamento se incrementa o disminuye con la presencia del analito en el gas de arrastre, variando la resistencia del mismo.
Los componentes se queman en una llama produciendo iones los cuales son colectados y convertidos en coriente. Una especie electronegativa pasa a travs del detector capturando electrones de baja energa produciendo un descenso en la corriente de la celda. Compuesto con nitrgeno y fsforo producen incrementos en la corriente de una llama enriquecida con vapores de sales alcalinas. Compuestos de azufre y fsforo se queman en una llama produciendo especies quimiluminiscentes que son monitoreadas a longitudes de onda selectivas. Las molcula son bombardeadas con electrones produciendo fragmentos de iones que pasan a travs de un filtro de masas. Los iones son filtrados basados en la relacin masa/carga.
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FID
ECD
NPD
FPD
MSD
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Limite de deteccin
Parmetro estadstico que se define como la concentracin ms pequea del analito que produce una seal significativamente diferente a la seal del ruido de fondo. Segn la IUPAC: LD= 3sb/m cal (bajas concentraciones)
sb= desviacin estndar de los blancos m cal= pendiente de la curva de calibracin del sistema a muy bajas concentraciones
SEAL
S N
(S)
=3
RUIDO (N)
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40
5 3
4 2 1
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Unheated filament is cooled by por el flujo A filamento caliente es enfriado del gas de arrastre.
the flow of carrier gas.
FLOW
Cuando el gas de arrastresample, the es contaminado contaminated by por la muestra, la cantidad de amount of cooling changes. enfriamiento cambia.
The difference in cooling is usada La diferencia de enfriamiento es used to generate del detector. para generar la sealthe detector signal.
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Flujos en el TCD
TIPO DE GAS
GAS DE ARRASTRE
RANGO DE FLUJO
10 60 ml/min 1 5 ml/min
(H2, He)
GAS DEL DETECTOR
REFERENCIA
EMPACADA MUG CAPILAR MUG
15 60 ml/min
2 3 ml/min 5 15ml/min
(H2,He)
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ESPECTROMETRO DE MASA
1 Cmara de Ionizacin: Electrones generados por un filamento bombardean la muestra. Los fragmentos ionizados (carga +1) son repelidos por el eletrodo positivo y conducidos a un separador magntico. 2 Interfase: Todo el interior de EM debe estar en alto vacio.( 10-5 torr), para transferir los compuestos desde el GC al MS sin comportamientos anmalos.
3 Filtro de masa: la aplicacin de un campo magntico hace que los iones con determinada relacin Masa / Carga atraviesen esta rea del instrumento.
4 Detector: Una vlvula fotomultiplicadora con un fotodiodo genera una seal elctrica proporcional al nmero de iones que inciden sobre el elemento.
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