Biotecnologa

:
Uso de microorganismos vivos o de
sus productos en procesos
industriales o ambientales a gran
escala

Fases de la
biotecnologa
microbiana:

Tecnologa
microbiana
tradicional:
Fermentaciones
alcohlicas
Produccin de
productos
farmacuticos ,
aditivos
alimentarios,
enzimas y
sustancias qumicas
industriales
Biorremediacin

Tecnologa
microbiana con
organismos
alterados mediante
procesos de
ingeniera gentica:
Fabricacin de hormonas
Moduladores del sistema
inmune
Vacunas

Microorganismos
industriales
No todos los
microorganismos tienen
un uso industrial

Microorganismos
industriales producen uno
o ms productos
especficos

 Microorganismos
industriales son
especialistas
metablicos capaces
de producir
especficamente y con
un alto rendimiento,
metabolitos
particulares

El microorganismo
es modificado
antes de ingresar a
la industria: se
altera
genticamente por
mutacin o por
recombinacin

 La fuente de todas
las cepas
industriales es el
ambiente natural
Las cepas
industriales se
depositan en
colecciones de
cultivos que sirven
como almacn

Requisitos de un microorganismo industrial:

Producir la sustancia de inters
Crecer rpidamente en un medio de cultivo
barato
Fabricar el producto en un perodo corto
Desarrollarse en cultivo puro y en gran escala
Ser estable genticamente pero susceptible
de manipulacin gentica
Cultivos que se mantengan durante perodos
largos en laboratorio y en planta industrial
Facilidad para inocular en grandes
fermentadores
No debe ser peligroso para el hombre o las
plantas y animales de inters econmico
Posibilidad de retirar fcilmente las clulas
del cultivo

Clases de productos
industriales
Metabolitos Enzimas
microbianosDigestin de

Alcohol
almidones,
cido acticolpidos y
cido lctico protenas
Aminocidos Sntesis de
antibiticos
Vitaminas
semisintticos
Antibiticos
Esteroides
Alcaloides

Clulas
microbianas

Protena unicelular:
levaduras, algas,
bacterias y hongos
Clulas para la
inoculacin:bacteri
as fijadoras de
nitrgeno,
micorrizas, inculos
para la
fermentacin de
lcteos y
embutidos

Clasificacin de los productos

industriales segn su uso:
Productos farmacuticos
de origen microbiano
Biotecnologa microbiana
en agricultura
Sustancias qumicas y
aditivos alimentarios
Productos qumicos
comerciales y produccin
de energa
Biorremediacin

Productos farmacuticos de origen

microbiano
Antibiticos
Hormonas esteroides
Insulina
Hormona del crecimiento
Linfocinas
Pptidos neuroactivos
Factores de coagulacin sangunea
Activador del plasmingeno tisular
Vacunas
Anticuerpos monoclonales para diagnstico
y terapia

Biotecnologa microbiana en
agricultura
Productos
farmacuticos
veterinarios de origen
microbiano
Inculos radiculares
Ingeniera gentica de
plantas mediada por
microorganismos como
portadores genticos

Sustancias qumicas y aditivos

alimentarios
Sustancias especiales y aditivos
alimentarios:
Aminocidos:
Glutamato: potenciar el sabor
Aspartato+alanina: modular el sabor de
jugos de frutas
glicina: mejorar el sabor de alimentos dulces
Aspartame: endulzar
Lisina y metionina: aditivos nutrivos
Cistena antioxidante de jugos de frurtas
Triptofano + histidina: evita la rancidez de
los alimentos

Vitaminas: rivoflavina, vitamina B12,

vitamina C

Productos qumicos comerciales y

produccin de energa
Productos qumicos
comerciales de
estructura sencilla y
bajo valor
monetarios
Etanol (combustible
para motores)
cido actico
cido lctico
Glicerol

Crecimiento y formacin de
productos industriales
Sustrato para el
crecimiento
Clulas
Sustrato para el
crecimiento
Clulas

Metabolito
primario
Metabolito
Secundario

Metabolito
primario
Sustrato para el
crecimiento
Clulas
Metabolito
secundario

Metabolito
primario

Fermentaciones

Para procesos industriales, se

usan fermentadores de hasta
de 400.000 litros de
capacidad
Los fermentadores son
construidos de acero
inoxidable y tienen una
camisa externa la cual puede
ser esterilizada inicialmente y
enfriadada durante la
fermentacin.

Spargers e impellers en el
vessel son usados para la
aireacin y revolver el
contenido.
The vessel may contain
various devices for
monitoring the environmental
conditions within the culture,
so that these factors can be
controlled to obtain high
product yields.

 El proceso puede
ser aerbico o
anaerbico.

En general, mayor
dificultas en
procesos aerbicos
que necesitan una
adecuada
airreacin del
tanque que
contiene altas
concentraciones de
biomasa

Produccin de productos
de mamferos por microorganismos
modificados por ingeniera gentica
Desarrollo de un proceso
biotecnolgico:
Si el gen o los genes que codifican
para la produccin de una protena de
mamfero se pueden clonar dentro de
un microorganismo
Si se obtiene una buena expresin de
este gen

Productos biotecnolgicos fabricados

por DNA recombinante
Protenas de sangre para:
Disolver cogulos
Promover la coagulacin
sangunea
Desarrollar glbulos rojos

Hormonas para:
Tratamiento de diabetes
Regulacin del calcio
Alivio del dolor
Osteoporosis
Diurticos y antihipertensivos

Moduladores inmunes:
Estimulantes de las clulas T
Activador de clulas B
Agentes antivirales,
anticancergenos, antitumorales,
antiinflamatorios
Tratamiento de infecciones

Vacunas:
Prevencin de infeccin
Hepatitis B
Sarampin
Clera
Rabia
Sida (no en el mercado, slo en
experimentacin)

 Antcuerpos monoclonales:
Protenas especficas que reconocen y se
fijan a un solo antgeno
Tratamiento de cncer, deshacerse de
sustancias qumicas txicas de las clulas
tumorales
Tratamiento de enfermedades cardacas:
destruir cogulos de sangre catalizados por
plaquetas
Diagnstico clnico: embarazo y enfermedades
humanas y animales

No todos los productos estn en el mercado

El biofilm

Se forma cuando en
medio acusoso las
bacterias se adhieren a
las superficies en
ambientes acuosos y
empiezan a excretar un
limo:
Una sustacia pegajosa
que puede sujetarse a
toda clase de material
(metales, plstico,
partculas de suelo,
materiales de implemento
mdicos y tejidos.

 Un biofilm puede estar

formado por una sola especie
de bacteria
Ms a menudo consiste de
muchas especies de
bacterias, hongos, algas,
protozoos, de residuos y
productos de la corrosin.

 Aunque pegados a
una superficie, los
microorganismos
del biofilm llevan a
cabo una variedad
de reacciones
benficas o
perjudiciales, desde
el punto de vista
humano

modifican las
condiciones
ambientales que lo
rodean.

 Esquematizacin de la formacin del

biofilm P.Dirckx

Qu importancia tiene el
biofilm para la industria?

Biofilm en una
membrana de
smosis inversa

Los biofilms
microbianos sobre las
superficies cuestan
billones de pesos al
ao en equipo daado,
productos
contaminantes,
prdida de energa e
infecciones mdicas.

 Los mtodos convencionales para

matar bacterias (antibiticos y
desinfeccin)
son
a
menudo
inefectivos contra las bacterias del
biofilm.

Las enormes dosis de agentes

antimicrobianos requeridas para
liberar los sistemas del biofilm:
Son ambientalmente indeseables
( y quizs no permitidas por las
regulaciones ambientales)
Mdicamente impracticables
(aunque matan las bacterias del
biofilm, tambin matan el paciente).

 As nuevas
estrategias
basadas en un
mejor
conocimiento de
cmo las bacterias
se sujetan, crecen
y se desprenden
son una urgente
necesidad para
muchas industrias
y para la
bioremediacin.

 Los procesos microbianos sobre superficies tambin

ofrecen oportunidades por sus efectos industriales y
ambientales positivos:

Bioremediacin en sitios con

residuos peligrosos
Biofiltracin industrial del
agua
Biobarreras para proteger el
suelo y las aguas
subterrneas de
contaminacin.

 La ubicuidad y el
significado del
fenmeno biofilm es
confirmado por el
inters de industrias:

Petrleo
Especialidades qumicas
Minas
Agua para bebida
Productos de limpieza
Empresas de servicios pblicos

Se necesitan investigacin
interdisciplinaria y educacin para crear
mtodos de uso industrial en desarrollo de
productos y ayuda a quienes la necesiten.

Areas de Investigacin
Fundamental sobre biofilms:
Entendimiento de porqu los
microorganismos del biofilm son ms
dificultosos de matar en comparacin con
microorganismos suspendidos.
Caractersticas moleculares y genticas de
los microorganismos del biofilm.
Estructura y funcin de un biofilm.
Fenmenos de sujetamiento de los
microorganismos del biofilm.
Mtodos analticos del biofilm.
Modelacin de la actividad del biofilm.

Ejemplo de necesidades de
investigacin en relacin al biofilm:
Investigacin y campos de aplicacin de
tecnologas para el control de
microorganismos fermentadores en
campos petroleros.
Investigacin y evaluacin de productos
potenciales para control del biofilm en
drenajes de fregaderos, inodoros,
piscinas y otros ambientes domsticos.
Evaluacin de coberturas anti-infectivas
sobre vendas para heridas, catteres,
vlvulas cardacas y otras superficies
relacionadas con la prctica mdica.

Desarrollo de tecnologas de
biobarreras y bioremediacin.
Investigacin sobre el impacto
del crecimiento renovado del
biofilm en los sistemas de
distribucin de agua potable
Desarrollo de tecnologas para
el control del biofilm asociado
a la corrosin

Investigacin del impacto y el control

de biofilm en membranas de
tratamiento y desalinizacin del agua.
Evaluacin de la penetracin de
biocidas dentro del biofilm.
Determinacin del papel del biofilm en
el origen del "agua azul" en sistemas
de distribucin de agua potable que
usan tuberas de cobre.
Desarrollo de tecnologas
bioelctricas para el control o
incremento del biofilm en aplicaciones
mdicas.

Biorremediacin:

Aplicacin industrial de la
biotecnologa ambiental:
Biodegradacin: Microorganismos
para la degradacin de sustancias
qumicas de desecho txicas o
indeseables, xenobiticas no
recalcitrantes
Futuro: microorganismos
modificados genticamente para
degradar recalcitrantes

Mtodos de
tratamiento de
aguas
residuales
antes de su
eliminacin o
reutilizacin

Tratamientos anaerobios
Se utilizan para:
Estabilizacin de lodos
Desperdicios slidos en vertederos
Tratamiento de agua industriales y domsticas
con alta DBO

Proceso:
Requiere de interacciones sinrgicas
entre cuatro grupos microbianos:
I. Bacterias hidrolticas
II. Bacterias fermentadoras
III. Bacterias acetognicas
IV. Bacterias metanognicas

COMPUESTOS ORGNICOS COMPLEJOS

Protenas, carbohidratos y lpidos
Hidlisis por exoenzimas de:
bacterias fermentativas, Protozoos,
levaduras y mohos
COMPUESTOS ORGNICOS SIMPLES

Azcares, aminocidos, pptidos

Acidognesis por exoenzimas de:
bacterias fermentativas
ACIDOS GRASOS DE CADENA LARGA
Propinico, butrico .(voltiles); alcoholes, compuestos aromticos (benzoato)

Acetognesis:bacterias acetognicas

H2, CO2
Metanognicas:
Bacterias
metanognicas
reductoras (auttrofos)

cido actico
(Acetato)

CO

CO

CH

Metanognicas:
Bacterias
metanognicas
acetognicas

Digestores anaerobios

Lquido
Lquido

CH4, CO2
Gas
Efluente
Filtro

Influente

Factores que controlan

digestin anaerobia
1. Temperatura
2. Tiempo de retencin hidroltica

(TRH o

HRT, hydrolic retention time)

3. pH
4. Composicin del desperdicio
5. Competencia con bacterias
productoras de sulfuro (respiradoras de
azufre).

6. Txicos

(oxgeno, amonaco, solventes clorinados,

benceno, formaldehdo, cidos voltiles, etc.)

Ventajas:
1. No requiere oxgeno.
2. Menos energa invertida en el
proceso.
3. Produce metano.
4. Produce de 3-20 veces menos lodos
que tratamiento aerobio (20-150 vs.
400-600 kg biomasa/m3 DQO).
5. Eficiente a elevadas cargas de DBO.
6. Preservacin de actividad aun
cuando el sistema no operare por
largos perodos de tiempo.
7. Remocin de hidrocarburos
clorinados, co-metabolismo, etc.

Desventajas:

1. Ms lento que tratamiento aerobio

(requiere > tiempos de contacto o sea
> tiempos de retencin hidrulica).
2. Ms sensitivo a choques txicos.
3. Requiere mayor tiempo de
aclimatacin.

Procesos de tratamiento combinado

en pequea escala tipo Jokaso

Contact
anaerobic room

Restaurantes y hoteles (50 personas)

La calidad del efluente puede llegar a
tener 20 mg/l omenos de DBO.

 Mtodo del filtro anaerobio y contacto

aerobio
http://www.apec-vc.or.jp/co-op/s_pollution/index.htm

Pozo sptico

Pozo sptico

Conductos de
distribucin

Lnea de
drenaje
Trampa de
grasas

Campo de absorcin

Trampa de grasas
Remueve entre:
80 - 70% de materiales hidrofbicos
40 - 50% de grasa emulsionadas

Tratamientos Biolgicos
Aerobios
Gran parte de la materia orgnica disuelta se
mineraliza a CO2, H2O y biomasa (slidos
que pueden ser removidos)

Tratamiento de aguas residuales:

Trata. 1rio + Trata. 2rio = Remocin 80-90% DBO

Posterior a un tratamiento de sedimentacin

primaria

los desperdicios que contienen materia

orgnica disuelta son transferidos a un
tanque aireado mecnicamente

Durante este proceso, las poblaciones

heterotrficas se desarrollan vigorosamente
y predominan en el tanque.

Tipos de tratamientos aerobios:

1. Crecimiento suspendido

Lagunas de
oxidacin
(disperso)
Lodos activados
(agregados)

2. Biopelculas

Filtros de goteo
(Zooglea ramigera)
Biodiscos (Filtros RBC):
(Sphaerotilus,
Beggiatoa, Nocardia,
Oscillatoria,
Desulfovibrio)
Filtros aerobios
sumergidos
Reactores de lecho
fluidizado

Tratamiento
aerbico
secundario
de aguas
residuales:

Agua residual
Cribado
Sedimentacin
Lodo insoluble

Lodo soluble

Digestin
anaerbica

Oxidacin

Lodo digerido:

Desinfeccin

Incineracin
Procesos no
biolgicos

Procesos
biolgicos

Efluente
tratado al ro

Lodos
activados

Filtros de
flujo lento

Lodos activados:
Tanque de

Criba aclimatacin
Efluente

Tanque de Clarificador
aireacin
Descarga
de agua
Exceso de lodo
Tortas

Tanque de concentracin

Deshidratador

Mtodo de tratamiento continuo

Tratamiento con
lodos activados

Se forman flocs de microbios en los cuales la

materia orgnica es a la vez adsorbida y oxidada.
Los flocs sedimentan en un tanque agujereado, y
son incorporados a un digestor de lodos
anaerobios, donde el material orgnico restante
es es convertido en productos gaseosos.

 Filtros de
flujo lento

Diversidad Microbiana de los

lodos activados:
Bacterias

Escherichia coli
Enterobacter
Pseudomonas
Achromobacter
Flavobacterium
Zooglea
Desulfovibrio
Sphaerotilus
Filamentosas:
Beggiatoa,
Nocardia,
Oscillatoria

Protozoarios
ciliados
(Vorticella)
Hongos y
levaduras
( Menor
densidad)

Parmetros fsico-qumicos que afectan

los lodos activados:

pH
Temperatura
Nutrientes
Viscosidad
Potencial redox
Habitabilidad del ambiente

Relacin alimento/ microorganismos

A/M: importante parmetro de diseo
A/M:
[DBO (kg/m3) x Flujo (m3/d)]
[Slidos Reactor (kg/m3) x Vol (m3)

 Remocin en diferentes tipos

de aireacin:
Aireacin extendida:
(0.03 < A/M < 0.8): > 90% remocin
DBO
Convencional:
(0.8 < A/M < 2): 80-90% remocin DBO
Alta rata:
(A/M > 2): <80% remocin DBO

Sedimentacin secundaria

Tiempo medio de residencia celular

(MCRT :Mean Cell Residence Time)

Floculacin
biolgica:

Crecimiento
disperso:

Proceso natural
que ocurre bajo
condiciones
fsico/qumica
especficas.

No ocurre
floculacin
La sedimentacin
sera imposible.

El tiempo medio Usualmente el

de residencia de
tiempo de
los lodos es un
residencia es de
importante
al menos 3 das,
determinante de
pero menor de
la floculacin de
15 das
la biomasa por
Por fuera de
gravedad
este rango

disminuye la
(separacin de
capacidad de
microorganismos compactacin
del efluente
del lodo.
tratado).

Capacidad de
Clarificacin:

Un mayor
crecimiento
disperso influye
en la calidad del
efluente, pues
determina mayor
concentracin de
slidos
suspendidos y
ms dificultad
para la
clarificacin.

Capacidad de Compactacin:

Es la taza de
sedimentacin de los
lodos concentrados
Determina la
efectividad del
clarificador
Grado de
compactacin =
[volumen ocupado por
1 g de lodo despus
de 30 min]

 " BULKING" o
entumecimiento
del lodo:

Formain de
espuma en los
decantadores de
lodos activados.
Los flculos
formados poseen
poca densidad y
suben a la
superficie en vez
de sedimentar.

Problemas en la sedimentacin (Bulking )

1.
2.
3.
4.

MCRT (tiempo de residencia)

C:N & C:P
Niveles de oxgeno disuelto
Biolgico: sobrecrecimiento de
bacterias filamentosas como
Sphaerotilus, Beggiatoa, Thiotrix,
Bacillus, hongos filamentosos como
Geotrichum, Cephalosporium,
Cladosporium & Penicillum

Filtros de goteo

Para efluentes con DBO baja y muy variable.

 Los filtros por goteo han sido adoptados

por la industria alimentaria y tintorera

Efecto del tratamiento: se

espera entre un 75 - 80% de

remocin de DNO y 60 - 70% de
DQO

Los costos de equipamiento y

operacin menos caros que los de

lodos activados

Flujos bajos para concentrar

materia orgnica del efluente y

permitir la formacin del biofilm
sobre el lecho filtrante.

Biodiscos

Rotating Biological Contactor (RBC)

Consultar:
http://www.state.sd.us/denr/DES/P&S/designcriteria/design-10.html
http://www.apec-vc.or.jp/co-op/s_pollution/docs/s3_9_1.htm

 Se espera que los biodiscos

remuevan entre el:
75 - 90 % de de DBO
60 - 70 % de DQO.

Costos: El equipo es ms caro que el

de los lodos activados. El costo de

operacin es bajo, slo el que se
necesita para la rotacin de los discos

Se necesita tiempo de aclimatacin

para que se forme el biofilm grueso y
anaerobico

Malos olores debido al H2S y otros